JP4721340B2 - 蛍光性シリコン粒子の製造方法、蛍光性シリコン粒子およびそれを用いて生体物質を観察する方法 - Google Patents
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Description
前記シリコン基体からポーラスシリコンを分離する工程を含むことを特徴とする蛍光性シリコン粒子の製造方法が提供される。
<ステップ1> まず、シリコンウエハ等のシリコン基体を用意し、適度な大きさ(例えば、約5cm×5cm)にカットする。次に、図1に示すように、容器20中で、カットしたシリコン基体10の端15を2〜3mm程、濃フッ酸(HF)と濃硝酸(HNO3)の混合溶液30に浸ける。
上記で得られたポーラスシリコンの表面のシラン化は、シランカップリング剤を作用させることにより行うことができる。シラン化によって、ポーラスシリコンの表面にシランカップリング剤の有する官能基を導入することができる。シランカップリング剤の有する官能基としては、アミノ基、メルカプト基、ハロゲン基、ビニル基、グリシジル基、メタクリロキシ基、カルボキシル基、カルボニル基、などがあり、中でもアミノ基、メルカプト基が好ましい。例えば、シリコン基体をメタノール等で洗浄し、3−アミノプロピルジメチルエトキシシラン(3-aminopropyldimethylethoxysilane)、3−メルカプトプロピルトリメトキシシラン(3-mercaptopropyltrimethoxysilane)等のシランカップラング剤の酸性メタノール溶液に浸す。
シラン化したシリコン基体の表面からシリコン粒子を分離する方法としては、カッターナイフのような鋭敏なエッジを持つ装置で、シリコン基体を擦り、ポーラスシリコンをそぎ落とす方法や、超音波洗浄装置によって、シリコン基体からシリコン粒子を分離する方法等を用いることができる。
シラン化されたシリコン粒子への生体分子の結合は、公知の方法により実現することができる。例えば、シラン化されたシリコン粒子の有する官能基と生体分子の官能基とを、必要に応じて他の化合物の存在下または他の化合物を介して結合させる。より具体的には、アミノ基を持つシリコン粒子をカルボキシル基を持つ蛋白質を結合剤 1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミドHCl(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide, hydrochloride)を用いて結合させる。
シリコンウエハ(面方位(100)、p-type、ホウ素ドープ、比抵抗1〜10Ω・cm)を、約5cm×5cmの大きさにカットした。図1に示したように、カットしたシリコンウエハの端を2〜3mm程HFとHNO3の混合溶液(体積比1:1)に2秒間浸けた。次に、シリコンウエハの全体を、HFとHNO3とH2Oの混合溶液(体積比2:7:8)に3分間浸けた。その後エタノールで洗い、乾燥させた。図3に、本方法によって作成したポーラスシリコンを蛍光分光光度計によって275nm励起で取得した蛍光スペクトルを示す。
シリコンウエハ(面方位(100)、p-type、ホウ素ドープ、比抵抗1〜10Ω・cm)を、約5cm×5cmの大きさにカットした。図1に示したように、カットしたシリコンウエハの端を2〜3mm程度HFとHNO3の混合溶液(体積比1:1)に2秒間浸けた。次に、シリコンウエハの全体を、HFとHNO3とH2O溶液(体積比2:7:8)に3分間浸けた。さらに、シリコンウエハの全体を、HFとHNO3とH2Oの混合溶液(体積比2:5:8)に3分間浸けた。その後エタノールで洗い、乾燥させた。図4に、本方法によって作成したポーラスシリコンを蛍光分光光度計によって275nm励起で取得した蛍光スペクトルを示す。
シリコンウエハ(面方位(100)、p-type、ホウ素ドープ、比抵抗1〜10Ω・cm)を、約5cm×5cmの大きさにカットした。カットしたシリコンウエハの端を2〜3mm程度HFとHNO3の混合溶液(体積比1:1)に2秒間浸けた。次に、シリコンウエハの全体を、HFとHNO3とH2Oの混合溶液(体積比2:5:8)に7分間浸けた。その後エタノールで洗い、乾燥させた。図5に、本方法によって作成したポーラスシリコンを蛍光分光光度計によって275nm励起で取得した蛍光スペクトルを示す。
実施例1−1で得られたシリコンウエハをメタノールで洗浄した。そして、体積比0.8%の3-aminopropyldimethylethoxysilane酸性メタノール液(500m1のメタノールに4mlの氷酢酸を混入したもの)10mlに1時間浸けた。さらに12.5mlの純水(18Ωcm以上)を加え、さらに1時間浸けた。シリコンウエハを取り出して十分にメタノールで洗った後、真空中で24時間乾燥させた。
実施例1−1で得られたシリコンウエハをメタノールで洗浄した。そして、体積比1.2%の3-mercaptopropyltrimethoxysilane酸性メタノール液(500mlのメタノールに4mlの氷酢酸を混入したもの)10mlに1時間浸けた。さらに12.5mlの純水(18Ωcm以上)を加え、さらに1時間浸けた。シリコンウエハを取り出して十分にメタノールで洗った後、真空中で24時間乾燥させた。
実施例2−1でシラン化したシリコンウエハを、カッターナイフのような鋭敏なエッジを持つ装置で擦り、ポーラスシリコンをそぎ落とした。
実施例3で得られたシリコン粒子を、0.6mM 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropy1)-carbodiimide, hydrochlorideに混入させ、15分後に、ターゲットとなる分子を混入させた。この操作によって、シリコン粒子上のアミノ基とタンパク質中のカルボキシル基が縮合し、シリコン粒子とタンパク質の複合体が形成された。
20…容器、25…シャーレ
30…混合溶液
Claims (7)
- シリコン基体にHFとHNO3の混合溶液を作用させる工程と、
前記シリコン基体にHFとHNO3とH2Oとの混合溶液を作用させる工程と
を含むことを特徴とする蛍光性シリコン粒子の製造方法。 - シリコン基体をHFとHNO3の混合溶液の蒸気にさらす工程と、
前記シリコン基体をHFとHNO3とH2Oとの混合溶液に浸す工程とを含む
ことを特徴とする蛍光性シリコン粒子の製造方法。 - 請求項1または2において、
前記シリコン基体にシランカップリング剤を作用させる工程を含む
ことを特徴とする蛍光性シリコン粒子の製造方法。 - 請求項1〜3のいずれか一項において、
前記シリコン基体からポーラスシリコンを分離する工程を含む
ことを特徴とする蛍光性シリコン粒子の製造方法。 - 請求項4において、
前記シリコン基体から分離された蛍光性シリコン粒子を液体クロマトグラフィーにより精製する工程を含む
ことを特徴とする蛍光性シリコン粒子の製造方法。 - 請求項4または5に記載の蛍光性シリコン粒子の製造方法で製造された蛍光性シリコン粒子。
- 請求項6に記載の蛍光性シリコン粒子を用いて生体細胞内もしくは細胞膜上の分子の運動を観察する方法。
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JP2005331172A JP4721340B2 (ja) | 2005-11-16 | 2005-11-16 | 蛍光性シリコン粒子の製造方法、蛍光性シリコン粒子およびそれを用いて生体物質を観察する方法 |
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