JP4717009B2 - ネコ免疫不全ウイルスの検出のための方法と装置 - Google Patents
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Description
本出願は、2004年6月30日に出願された米国特許仮出願番号60/584,694および2003年12月18日に出願された米国特許仮出願番号60/530,564に基づく優先権を主張する。
本発明はネコ免疫不全ウイルスに対する抗体の検出に関するものである。
従来ネコTリンパ球レンチウイルスと呼ばれていたネコ免疫不全ウイルス(FIV)は、1986年にカリフォルニア州ペタルマ(Petaluma)の大きな飼いネコ集団から初めて発見された(Pederson et al., Science (1987) 235: 790)。ネコがFIVに感染するとエイズ様症候群を呈する。FIVは形態的および病理学的にヒト免疫不全ウイルス(HIV)と似ているが、抗原性ではHIVと明確に区別される。HIVと同様、ネコが一旦FIVに感染すると初期感染期(ウイルス血症、発熱、一般的なリンパ節炎)から長期の無症候期を経てCD4リンパ球の減少による極めて難治性の免疫機能障害が出現し、二次感染を併発して遂には死に至る。
1つの面では、本発明は新規のFIVポリペプチドに関する。1つの面として、本発明はFIV envポリペプチドのようなFIVポリペプチドに対するネコの免疫反応を調べることにより、ネコがFIVのワクチン接種を受けたことがあるか、またはFIVに自然感染しているかを判定する方法を提供する。
ここに記載する発明を詳細に説明する前に、いくつかの用語の定義を記す。本明細書において使用する場合、単数形の“a”、“an”、および“the”は文脈が明らかに示しているのでない限り複数形の関係項も含めるものとする。
CVVPEEVMEYKPRRKRAAIH [配列番号1]
配列番号1は表面エンベローブ・タンパク質(SU3)由来の元来のenv配列(アミノ酸597〜615)であり、ここに元来のものではないN末端システイン残基とともに示す。
SNAP(登録商標) FeLV Ag/FIV Ab 試験キットでFIVが陰性結果となった8匹のネコに、Fel-O-Vax(登録商標)FIVワクチン(Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge Iowa)でワクチン接種した。このワクチンは多数のFIVウイルス株の死滅物全体から生成されている。製造元の使用法に従って、ネコに試験0日、14日、および28日にワクチンを接種した。FIV試験で陰性結果が出た2匹のネコにはワクチン接種を行わず、本試験の対照群に含めた。
FIVが陰性と確認された感染ネコおよびFEL-O-VAX(登録商標) FIVワクチンを接種されたネコから採取した血清サンプルに対して、固相上の個々の動物のFIVポリペプチドと抗ネコIgG-ペルオキシダーゼ抱合体を用いた間接測定法によりマイクロプレートELISA解析を実施した。env FIVタンパク質に対する抗体は、以下のペプチドを抗原試薬として用いて検出した。
CVVPEEVMEYKPRRKRAAIH [配列番号1]
CLVPEEVMEYKPSQKRAAIH [配列番号2]
実施例2のように、FIVが陰性と確認された感染ネコおよびFEL-O-VAX(登録商標) FIVワクチンを接種されたネコから採取した血清サンプルについてマイクロプレートELISA解析を実施した。FIV envに対する抗体は、以下のペプチドを抗原試薬として用いて検出した。
CVVPEEVMEYKPRRKRAAIH [配列番号1]
CLVPEEVMEYKPSQKRAAIH [配列番号2]
CVVPGEVMDYKPRRKSKRAAIH [配列番号3]
CVVPEEVMEYKPRRKR...AIH [配列番号4]
Claims (21)
- 配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドを含む、FIVに感染した動物とFIV未感染動物および死滅物全体FIVワクチンを接種された動物を鑑別するためのキット。
- FIVに自然感染した動物とFIV未感染動物および死滅物全体FIVワクチンを接種された動物を鑑別する方法であって、
動物からの生体サンプルを配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドと接触させ、
サンプル中のFIV抗体が特異的にポリペプチドに結合するかを検出し、
サンプル中の抗体がFIVポリペプチドに特異的に結合していることを検出することによりその動物が自然感染していると判定し、サンプル中の抗体がFIVポリペプチドに特異的に結合していないことを検出することによりその動物がワクチンを接種されているかまたは未感染であると判定する、
ことを含む方法。 - 生体サンプルが過去約12週間以内に死滅物全体FIVワクチンを接種されていない動物から得られたものである、請求項2記載の方法。
- ネコが死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあるのか、またはFIVに自然感染しているのかを判定する方法であって、
(a) ワクチン接種後、12週間以内、または死滅物全体FIVワクチンに対する動物の免疫反応の重要な要素ではない抗体がネコから排除されるのに十分な期間が過ぎる前に、ネコが配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドに対する抗体を持っているかを検出し、
(b) ワクチン接種後、12週間後、または死滅物全体FIVワクチンに対する動物の免疫反応の重要な要素ではない抗体がネコから排除されるのに十分な期間が過ぎた後に、ネコがFIVポリペプチドに対する抗体を持っているかを検出し、
(c) ステップaで抗体が検出されるが、ステップbでは検出されないことにより、ネコが成功裏にワクチン接種されていると判定し、
(d) ステップaおよびステップbで抗体が検出されることにより、ネコが自然感染していると判定する、
ことを含む方法。 - ネコがFIVに感染したことがないか、または死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあるかを判定する方法であって、
ネコの生体サンプルを分析して、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドに対する抗体が存在するかしないかを検出し、
そのような抗体が存在していないと判定することにより動物が感染したことがないか、または死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあると判定する、
ことを含む方法。 - ネコが死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあるか否か、またはFIVに自然感染しているか否かを判定する方法であって、
配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドを含む試験装置を提供し、
ネコから生体サンプルを取得し、
サンプルがポリペプチドと接触するように試験装置上に生体サンプルを流し、
試験装置の結果を読み取り、ここで、陽性の結果はネコがFIVに自然感染したことがあるかまたは12週間以内に死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあることを示し、陰性の結果はネコがFIVに自然感染したことがないかまたは12週間以内に死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがないことを示す、
ことを含む方法。 - 自然にFIV感染しているか、または死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあることが疑われる動物から得られた生体サンプル中のFIVポリペプチドの由来を判定する方法であって、
過去約12週間以内に死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがない動物から生体サンプルを取得し、
動物から得た生体サンプルを以下のものと接触させ、
(a) 死滅物全体FIVワクチンに対する動物の抗体反応の重要な要素に特異的に結合する第1のポリペプチド、
(b) 配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドサンプル中の抗体が一方または両方に特異的に結合するかを検出し、
抗体が特異的に(a) および (b) の両方のペプチドに結合した場合に動物が自然感染していると判定し、抗体が (a) のペプチドのみに結合した場合に動物が死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあると判定する、
ことを含む方法。 - 第1のポリペプチドはFIV p15を含む、請求項7記載の方法。
- 第1のポリペプチドはFIV p24を含む、請求項7記載の方法。
- 乾燥した有孔キャリアー;
有孔キャリアー上に固定化された第1の検出試薬であって、ここで、前記第1の検出試薬はFIVの自然感染または死滅物全体FIVワクチン接種に反応して動物が産生したFIV抗体を捕捉するタンパク質を含み、
有孔キャリアー上に固定化された第2の検出試薬であって、ここで前記第2の検出試薬は配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドを含む、
を含む、FIVに感染した動物とFIV 未感染動物および死滅物全体FIVワクチンを接種された動物を鑑別するための診断装置。 - 第1の検出試薬はFIV p15を含む、請求項10記載の診断装置。
- 第1の検出試薬はFIV p24を含む、請求項10記載の診断装置。
- ネコが死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあるか、FIVに自然感染しているかを判定する方法であって、
生体サンプルを請求項10記載の診断装置と接触させ、
サンプル中の抗体が第1の検出試薬と第2の検出試薬の一方または両方と特異的に結合するかを検出する、
ことを含む方法。 - 第1の検出試薬が固定化された第1の有孔キャリアーであって、ここで前記第1の検出試薬はFIVの自然感染または死滅物全体FIVワクチン接種に反応して動物が産生したFIV抗体を捕捉するポリペプチドを含み、
第2の検出試薬が固定化された第2の有孔キャリアーであって、ここで第2の検出試薬は配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドを含む、
を含む、FIVに感染した動物とFIV未感染動物および死滅物全体FIVワクチンを接種された動物を鑑別するための診断装置。 - 第1の検出試薬はFIV p15を含む、請求項14記載の診断装置。
- 第1の検出試薬はFIV p24を含む、請求項14記載の診断装置。
- FIVに感染したネコとFIV未感染ネコおよび死滅物全体FIVワクチンを接種されたネコを鑑別する方法であって、
配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドを提供し、
ネコの生体サンプルをポリペプチドを接触させて、ポリペプチド/抗体複合体を形成させ、
ポリペプチド/抗体複合体の有無を判定し、ここで、複合体が存在することは自然感染を表わし、複合体が存在しないことは死滅物全体FIVワクチンを接種されているか未感染のいずれかを表わす、
ことを含む方法。 - 生体サンプルは過去約12週間以内に死滅物全体FIVワクチンを接種されていない動物から取得したものである、請求項17記載の方法。
- 配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択されるポリペプチドに対するネコの免疫反応を決定することにより、ネコが死滅物全体FIVワクチンを接種されたことがあるか、FIVに自然感染したかを判定する方法。
- FIVに感染したネコとFIV未感染ネコおよび死滅物全体FIVワクチンを接種されたネコを鑑別するためのキットの製造におけるFIV envに由来するポリペプチドの使用であって、ポリペプチドは配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4からなる群から選択される、該使用。
- さらにネコがFIVに感染したことがあるかを判定することを含む、請求項20記載の使用。
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