JP4710005B2 - 生体液中のイオン濃度測定装置 - Google Patents
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還流液留中の等張液又は低張液を流通させるための無脈流微量定量ポンプ、透析膜を付したリザーバーチューブ、及び還流液留とこれらを連結した流通用パイプによる還流路並びに該液流通用パイプには、リザーバ―チューブを出た後の透析液を取り出すための切り替え弁を介して、イオン濃度測定装置を直列に連結した液流通用パイプを備え、生体液中のイオンを経時的に測定可能とする生体液中のイオン測定装置である。
透析膜は、生体内の赤血球などの夾雑物を防ぐために、大分子量を透過しない2mm伸長セルロース膜(エイコム社製)の透析膜を用いる。透析膜の留置は雄性wistarラットを麻酔下にて頭皮切開後、前頭葉皮質上部頭骨に直径0.9mmの透析膜留置用ガイドカニューレを挿入し医療用アロンアルファ(三共社製)並びに急速硬化常温重合レジン(SHOFU社製)を使用し頭骨に固定する。このとき、組織侵襲を最小限にするため、可能な限り最小限の侵襲とし、消毒滅菌等の処置を行う。処置1週間後に無麻酔無拘束下、前頭葉皮質先端に透析膜を装着する。
透析膜への等張液の還流
生体組織と等張であるリンゲル液(塩化ナトリウム147mM、塩化カリウム4.0mM、塩化カルシウム2.3mM)を還流液とし、透析膜内に無脈流微量定量ポンプ(エイコム社製)を使用し等速かつ低速(2μl/min)で、等速還流する。還流後に得られた透析液体は、夾雑物が無い状態であり、直接テフロン(登録商標)製リザーバチューブ(エイコム社製)に導入し60分間隔でイオンクロマトグラフィー分析を行う。
還流液のイオンクロマトグラフィーによる分析
環流後のサンプルをダイオネックス社製イオンクロマトグラフィーDX−320システム(オートサプレッサSRS−ULTRA付属)、陽イオン交換カラムCS-16(250×4mm)、ガードカラムCG−16(50×4mm)、溶離液にメタンスルホン酸2.0mM(1.0ml/min)、検出器に電気伝導計を使用し、オートインジェクターを使用し25μlを分取し分析に用いる。データ処理は、ピークネット6.3クロマトグラフィーワークステーションを使用する。
アンモニウムイオンの解析
アンモニウムイオンは、図8に示すように、ナトリウムイオンのピーク下にBMBピークを示す。また、表1に示すようにピークはナトリウムイオン、アンモニウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオンの順である。
実測値として健常状態の動物で14.6μM、急性肝炎モデル(チオアセトアミド投与3日後)で27.5μMのアンモニウムイオンが検出された。
Claims (3)
- 還流液留中の等張液又は低張液を流通させるための無脈流微量定量ポンプ、透析膜を付したリザーバーチューブ、及び還流液留とこれらを連結した流通用パイプによる還流路並びに該液流通用パイプには、リザーバ―チューブを出た後の透析液を取り出すための切り替え弁を介して、イオン濃度測定装置を直列に連結した液流通用パイプを備え、生体液中のイオンを経時的に測定可能とする生体液中のイオン測定装置。
- 還流液留中の等張液又は低張液を流通させるための無脈流微量定量ポンプ、透析膜を付したリザーバーチューブ、及び還流液留とこれらを連結した流通用パイプによる還流路並びに該液流通用パイプには、リザーバ―チューブを出た後の透析液を取り出すための切り替え弁を介して、透析液をイオンクロマトグライフィーに供給するための自動注入装置及びイオンクロマトグラフィーを直列に連結した液流通用パイプを備え、生体液中のイオンを経時的に測定可能とする請求項1記載の生体液中のイオン測定装置。
- 測定される前記イオンがアンモニウムイオンである請求項1又は2記載のイオン測定装置。
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