JP4615018B2 - Rtbv植物プロモーター及びそのプロセス - Google Patents
Rtbv植物プロモーター及びそのプロセス Download PDFInfo
- Publication number
- JP4615018B2 JP4615018B2 JP2007529143A JP2007529143A JP4615018B2 JP 4615018 B2 JP4615018 B2 JP 4615018B2 JP 2007529143 A JP2007529143 A JP 2007529143A JP 2007529143 A JP2007529143 A JP 2007529143A JP 4615018 B2 JP4615018 B2 JP 4615018B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- promoter
- plant
- sequence number
- rice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
- C12N15/8222—Developmentally regulated expression systems, tissue, organ specific, temporal or spatial regulation
- C12N15/8223—Vegetative tissue-specific promoters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
- C12N2730/00011—Details
- C12N2730/00022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
(a)対象の非相同核酸配列に動作可能に結合した、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14又は配列番号15のいずれかに示したプロモーター配列を含むキメラプラスミドDNA構築体(植物形質転換ベクター)を生成するステップ
(b)ステップ(a)からのプラスミドを適当な宿主細胞に導入するステップ
(c)ステップ(b)の細胞を用いて植物細胞又は組織を形質転換させて、前記非相同核酸配列を発現している遺伝子導入植物を生成するステップ
を含む、RTBV(FL、UD1、UD2、UD3、UD4、UD5、UD6、DD1、DD2、DD3、DD4、DD5、DD6、DD7及びDD8)プロモーターを含む1種又は複数の対象の非相同核酸配列の発現の方法を提供することに関する。
DNA抽出及びプロモーターの同定
ウイルス感染物質をBidhan Chandra Krishi Viswavidyalaya、Kalyani、西ベンガル、インドの試験農場から捕集した。Jonesら(1991)の方法に基づいて粗製ウイルス製剤を用いてRTBV DNAを単離した。
プロモーター分析
RTBV完全長プロモーターの完全配列(配列番号1)を図1に示し、PCRによって様々なプロモーター変異体を生成するのに使用したプライマー番号を5’末端(フォワードプライマー)又は3’末端(リバースプライマー)の上に示す。
FP1(配列番号16)5’−CGGAATTCTGTCCTGCACCACCTCAATG−3’
RPI(配列番号23)5’−AACTGCAGTCAATATTTGAGAAAGTAAGATCCCTC−3’。
RP2(配列番号24)5’−AACTGCAGTAAGATCCCTCTTCAGAACATATGT−3’。
RP3(配列番号25)5’−AACTGCAGAACATCGCTCTGATACCAGATG−3’
RP4(配列番号26)5’−AACTGCAGCGTGATGAGGAAGAGCTACTTG−3’
RP5(配列番号27)5’−AACTGCAGCTTGTTCCCTTGGCATCAC−3’
RP6(配列番号28)5’−AACTGCAGCAGCGGATAAGTTCTTGATG−3’
RP7(配列番号29)5’−AACTGCAGCAGCTAATCCTTCTTTGAAGAGG−3’
RP8(配列番号30)5’−AACTGCAGCTCTTCTCTTGCTCTTGTGGAAG−3’
RP9(配列番号31)5’−AACTGCAGCTCTGGGTGTGTGGATTTCG−3’
FP2(配列番号17)5’−CGGAATTCTGATCCAAAGATAAAGGAACAAAG−3’
FP3(配列番号18)5’−CGGAATTCAAGCATCAATAAAAGAAGACTGAAG−3’
FP4(配列番号19)5’−CGGAATTCGGAATCCACTTTAAATTATTGTACCTC−3’
FP5(配列番号20)
5’−CGGAATTCTGTAAGAGTGTGTAAAATCTAGCCTACC−3’
FP6(配列番号21)5’−CGGAATTCCTATATAAGGAGAAGTAGTCTGCATG−3’
FP7(配列番号22)5’−CGGAATTCGGAGAAGTAGTCTGCATGTAATAGGC−3’
アグロバクテリウム中へのバイナリーベクター/構築体の形質転換
凍結融解法(Anら1988)によってこれらのキメラ植物形質転換ベクターをアグロバクテリウム株EHA105中に動員した。約1μgプラスミドDNAをコンピテントアグロバクテリウム細胞と混合し、次いで液体窒素中で凍結し、これに続いて37℃で5分間のインキュベーションを行った。これらの形質転換細胞にルリアベルターニ(LB)ブロス1mlを加え、内容物を28℃で4〜5時間インキュベートした。続いて細菌懸濁液をペレットにし、適切な抗生物質を含むLB寒天プレート上に伸ばした。プレートを28℃で2日間保持し、標準的なプロトコルによって正しい構築体が存在するかどうか単一コロニーを分析した。
イネ中での形質転換
28℃の暗所で1カ月半、カルス誘導培地、CIM[2mg/l 2,4−D(2,4−ジクロロフェノキシ酢酸)を含み、0.8%寒天によって固めたN6B5培地(Chu、1978;Gamborgら、1968)]上で二次培養したイネ品種PB1からの胚盤由来カルスを、Wangら(1997)のプロトコルに基づいてアグロバクテリウム媒介形質転換にかけた。イネカルスを、最終細胞密度2×108細胞/mlの、100μMアセトシリンゴン及び2mg/l 2,4−Dを含む液体N6B5培地のアグロバクテリウム細胞懸濁液に20分間感染させた。次いでカルスを、28℃の暗所で2日半、共培養培地(100μMアセトシリンゴンを含むCIM)に置いた。静菌薬、オーグメンチンを150mg/lで用いて洗浄し、カルスを暗所で1〜1カ月半、選択培地(30mg/lハイグロマイシン及び150mg/lオーグメンチンを含むCIM)上に置いた。クリーム色の推定上形質転換したカルスをさらに5〜6日間選択プレート上に置いたままにしてから、再生前培地(0.5mg/lベンジルアミノプリン[BAP]、10μMアブシジン酸、30mg/lハイグロマイシン及び150mg/lオーグメンチンを含むN6B5培地)に1週間移し、インキュベーションは暗所で3日間及び明所で4日間であった。次いで小植物が現れ始めるまでカルスを再生培地(1mg/l BAP、30mg/lハイグロマイシン及び150mg/lオーグメンチンを含むN6B5培地)に移した。続いてこれらを、再生培地を含む培養試験管に移した。よく発達した根系(硬化)を確実にするために、推定上の遺伝子組換え体を液体MS(Murashige及びScoog、1962)培地に移し、soilriteと土を1:1の割合で含む鉢に最終的に植え、成熟するまで温室に移動した。
タバコ中での形質転換
リーフディスク法をタバコ形質転換用に使用した(Savda及びBinns、2000)。大きさ約1cm2のリーフディスクを、無菌条件下でジャム瓶中のMS培地上で育てた3〜4週齢のタバコの上部2〜3葉から切り取り、アグロバクテリウム媒介形質転換用の外植片として使用した。これらのリーフディスクを、液体MS培地中のOD600約0.6でプロモーター構築体を含むアグロバクテリウム細菌懸濁液中で20分間共培養した。続いてリーフディスクを無菌の3MM Whatmanシートピース上にブロットし、散光中28℃で2日半、0.1mg/lナフタレン酢酸(NAA)及び1mg/l BAPを含む0.8%寒天上に固めたMS培地上に置いた。500mg/lの静菌薬、セフォタキシム(cephotaxime)でリーフディスクを徹底的に洗浄し、ディスクを明所で1カ月半、選択培地(0.1mg/l NAA及び1mg/l BAP、500mg/l セフォタキシム及び50mg/lカナマイシンを含む0.8%寒天で固めたMS培地)上に置いた。推定上の遺伝子組換え苗条芽を切除し、発根のために50mg/lカナマイシンを含む0.8%寒天で固めたMS培地上に置いた。発根した植物を切除し、少なくとも1節を有する茎の切片をさらに発根培地上で2回目の選択にかけた。次いで再度発根した植物を、成熟するまで温室中の鉢に移した。
形質転換体の分析
遺伝子又はプロモーター特異的プライマーを用いてPCRを行うことにより、T−DNA領域が存在するかどうか推定上の遺伝子導入植物をチェックした。次いでDellaportaら(1983)のプロトコルを用いてゲノムDNAを単離した。異なる組織中のレポーター遺伝子の活性を検出するために、手で切った葉身/根の切片をX−Gluc(5−ブロモ−4−クロロ−3−インドリルβ−D−グルクロニド)溶液中37℃で終夜染色し、続いてクロロフィルが完全に除去されるまで1:3のアセトン:エタノール中で脱染し、複式顕微鏡下で撮影した(図4)。GUS蛍光光度分析には、Jefferson(1987)によって記載されているように葉組織約100mgを使用した。
1.単子葉植物と双子葉植物の両方で活性なプロモーターの同定
2.イネ中での構成的発現に関して強いプロモーターの同定
3.組織特異的発現を示しているプロモーターの同定
4.同じプロモーターが2つの異なる遺伝子を動かしている場合に遺伝子サイレンシングを妨げるために遺伝子ピラミィディングを達成すべき場合の遺伝子の発現を動かすためのプロモーターの同定
出典
米国特許文献
1. An,G.,Ebert,P.R.,Mitra,A.及びHa,S.B.(1988).「バイナリーベクター(Binary Vectors)」.Plant Mol Biol Manual A3: 1〜19.
2. Bhattacharyya−Pakrasi,M.,Peng,J.,Elmer,J.S.,Laco,G.,Shen,P.,Kaniewska,M.B.,Kononowizc,H.,Wen,F.,Hodges,T.K.及びBeachy,R.N.(1993).「篩部組織で発現させるためのイネツングロ杆菌状ウイルス由来のプロモーターの特異性(Specificity of a promoter from the rice tungro bacilliform virus for expression in phloem tissues)」.Plant J.4(1): 71〜79.
3. Chu,C.−C.(1978).「N6培地及びその禾穀類の葯培養への応用(The N6 medium and its applications to anther culture of cereal crops)」.In:「植物組織培養に関するシンポジウムのプロシーディング(Proceedings of Symposium on Plant Tissue Culture)」.Science Press,pp 43〜50.
4. Cornejo,M.J.,Luth、D.,Blankenship,K.M.,Anderson,O.D.及びBlechl,A.E.(1993).「遺伝子組換えイネ中のトウモロコシユビキチンプロモーターの活性(Activity of a maize ubiquitin promoter in transgenic rice)」.Plant Mol.Biol.23: 567〜581.
5. Dellaporta,S.L.,Wood,J.及びHicks,J.B.(1983).「植物DNAミニプレパレーション(A plant DNA minipreparation)」,Ver.II.Plant Mol.Biol.Rep1 19〜21.
6. Gamborg,O.L.,Miller,R.A.,及びOjima,K.(1968).「ダイズ根細胞の懸濁培養の栄養素要求量(Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells)」.Exp Cell Res 50,151〜158.
7. Goto,F.,Yoshihara,T.,Shigemoto,N.,Toki,S.及びTakaiwa,F.(1999).「ダイズフェリチン遺伝子によるイネ種子の鉄添加(Iron fortification of rice seeds by the soybean ferritin gene)」.Nat.Biotechnol.17:282〜286.
8. Jang,I.C.,Choi,W.B.,Lee、K.H.,Song,S.I.,Nahm,B.H.及びKim,J.K.(2002).「遺伝子導入植物中のイネシトクロムc遺伝子OsCc1の高レベル及び遍在発現並びにそのプロモーター活性は、単子葉植物の遺伝子導入に有用なプロモーターを提供する(High−level and ubiquitous expression of the rice cytochrome c gene OsCc1 and its promoter activity in transgenic plants provides a useful promoter for transgenesis of monocots)」.Plant Physiol.129: 1473〜1481.
9. Jefferson,R.A.(1987).「植物中のキメラ遺伝子の分析:GUS遺伝子融合システム(Assaying chimeric genes in plants: The GUS gene fusion system)」.Plant Mol.Rep.5: 387〜405.
10. Jones,M.C.,Gough、K.,Dasgupta,I.、Subba Rao,S.L.,Cliffe,J.,Qu,R.,Shen,P.,Kaniewska,M.,Blakebrough,M.,Davies,J.W.,Beachy,R.N.及びHull,R.(1991).「イネツングロ疾患はRNA及びDNAウイルスが原因である(Rice tungro disease is caused by an RNA and a DNA virus)」.J Gen Virol 72:757〜761.
11. Kloti,A.,Henrich,C.,Bieri,S.,He,X.,Chen,G.,Burkhardt,P.K.,Winn、J.,Lucca,P.,Hahn,T.,Potrykus,I.及びFutterer,J.(1999).「上流及び下流配列エレメントは、イネツングロ杆菌状ウイルスプロモーターの特異性を決定し、転写開始後のRNA生成に影響を及ぼす(Upstream and downstream sequence elements determine the specificity of the rice tungro bacilliform virus promoter and influence RNA production after transcription initiation)」.Plant Mol.Biol.40: 249〜266.
12. Kyozuka,J.,Fujmoto,H.,Izawa,T.及びShimamato,K.(1991).「遺伝子組換え稲及びそれらの子孫中のトウモロコシAdh1プロモーターの嫌気導入並びに組織特異的発現(Anaerobic induction and tissue−specific expression of maize Adh1 promoter in transgenic rice plants and their progeny)」.Mol.Gen.Genet.228: 40〜48.
13. Kyozuka,J.,McElroy,D.,Hayakawa,T.,Xie Y.,Wu,R.及びShimamato,K.(1993).「遺伝子組換えイネ中のトマトrbcS−gusA及びイネrbcS−gusA融合遺伝子の光制御及び細胞特異的発現(Light−regulated and cell−specific expression of tomato rbcS−gusA and rice rbcS−gusA fusion gene in transgenic rice)」.Plant Physiol.102: 991〜1000.
14. Matsuoka,M.,Kyozuka,J.,Shimamoto,K.及びKano−Murakami,Y.(1994).「C3植物(イネ)中のC4植物(トウモロコシ)直接的細胞特異的、光制御発現の2つのカルボキシラーゼのプロモーター(The promoters of two carboxylases in a C4 plant (maize) direct cell−specific,light−regulated expression in a C3 plant (rice))」.Plant J.6(3): 311〜319.
15. McElroy,D.,Blowers,A.D.,Jenes,B.及びWu,R.(1991).「単子葉植物形質転換に使用するイネアクチン1(Act1)5’領域に基づく発現ベクターの構築(Construction of expression vectors based on the rice actin1 (Act1) 5’ region for use in monocot transformation)」.Mol.Gen.Genet.231: 150〜160.
16. Murashige,T.及びScoog,F.(1962).「迅速発育のために変更した培地及びタバコ組織培養によるバイオアッセイ(A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue culture)」.Planta 157,385〜391.
17. Nath,N.,Mathur,S.及びDasgupta,I.(2002).「インドからの2つの完全イネツングロ杆菌状ウイルス配列の分子分析(Molecular analysis of two complete rice tungro bacilliform virus sequences from India)」.Arch.Virol.147: 1173〜1187.
18. Savda,M.及びBinns,A.N.(2000).「遺伝子導入法における植物へのDNAの導入(Introduction of DNA into Plants in Gene Transfer Methods)」pg.159〜192,edited by Norton,P.A.及びSteel,L.F.Eaton publishing,Natick,MA,USA.
19. Terada,R.及びShimamato,K.(1990).「遺伝子組換え稲中のCaMV 35S−GUS遺伝子の発現(Expression of CaMV 35S−GUS gene in transgenic rice plants)」.Mol.Gen.Genet.220: 389〜392.
20. Toki,S.,Takamatsu,S.,Nojiri,C.,Ooba,S.,Anzai,H.,Iwata,M.,Christensen,A.H.,Quail,P.H.及びUchimiya,H.(1992).「遺伝子組換え稲中のトウモロコシユビキチン遺伝子プロモーター−barキメラ遺伝子の発現(Expression of a maize ubiquitin gene promoter−bar chimeric gene in transgenic rice plants)」.Plant Physiol.100: 1503〜1507.
21. Wang,M.B.,Upadhyaya,N.M.,Brettell,R.I.S.及びWaterhouse,P.M.(1997).「アグロバクテリウム ツメファシエンスを用いた植物形質転換用の選択マーカー遺伝子のイントロン媒介改良(Intron−mediated improvement of a selectable marker gene for plant transformation using Agrobacterium tumefaciens)」.J.Genet.Breed.51: 325〜334.
22. Wilmink、A.,van de Ven,B.C.及びDons,J.J.(1995).「ユリ科由来の様々な種における構成的プロモーターの活性(Activity of constitutive promoters in various species from the Liliaceae)」.Plant Mol.Biol.28: 949〜955.
23. Xu,D.,McElroy,D.,Thornburg,R.W.及びWu,R.(1993).「損傷、ジャスモン酸メチル、及びアブシジン酸によるジャガイモpin2プロモーターの遺伝子組換え稲中への体系的誘導(Systemic induction of a potato pin2 promoter by wounding,methyl jasmonate,and abscisic acid in transgenic rice plants)」.Plant Mol.Biol.22: 573〜588.
24. Ye,X.,Al−Babiii,S.,Kloti,A.,Zhang,J.,Lucca,P.,Beyer,P.及びPotrykus,I.(2000).「(カロテノイドを含まない)イネ内乳中へのプロビタミンA(β−カロチン)生合成経路のエンジニアリング(Engineering the provitamin A (beta−carotene) biosynthetic pathway into (carotenoid−free) rice endosperm)」.Science 287: 303〜305.21.
25. Yin,Y.及びBeachy,R.N.(1995).「イネ中のイネツングロ杆菌状ウイルスプロモーターの調節領域及び相互作用する核因子(The regulatory regions of the rice tungro bacilliform virus promoter and interacting nuclear factors in rice (Oryza sativa L.))」.Plant J.7(6): 969〜980.
26. Yin,Y.,Chen,L.及びBeachy,R.N.(1997).「イネ中のRTBVプロモーター由来の篩部特異的遺伝子発現に必要とされるプロモーターエレメント(Promoter elements required for phloem−specific gene expression from the RTBV promoter in rice)」.Plant J.12(5): 1179〜1188.
表1
表2
イネにおけるFLタイプ:若齢期には構成的発現を示し、成熟期では導管特異的である。
タバコにおけるFLタイプ:導管特異的発現だけを示す。
タバコにおけるFLタイプ+:子葉だけが構成的発現を示すが、栄養組織の残りは導管特異的発現を示す。
「−」:特異的構築体によって形質転換しなかった植物を示す。
Claims (21)
- 少なくとも配列番号1の塩基1〜254を含む、イネツングロ杆菌状ウイルス由来の単離したプロモーター(RTBVプロモーター)。
- 配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14及び配列番号15からなる群から選択される、イネツングロ杆菌状ウイルス由来の単離したプロモーター(RTBVプロモーター)に基づく単離したプロモーター。
- 請求項1又は2に記載のプロモーターが、対象の非相同核酸配列に動作可能に結合した、キメラプラスミドDNA構築体。
- 請求項2に記載のプロモーターが、対象の非相同核酸配列に動作可能に結合した、キメラプラスミドDNA構築体。
- 前記非相同核酸配列が、改良された農業形質を植物に付与することが可能なポリペプチドをコードする、請求項3に記載のキメラプラスミドDNA構築体。
- 前記非相同核酸配列が、改良された農業形質を植物に付与することが可能なポリペプチドをコードする、請求項4に記載のキメラプラスミドDNA構築体。
- 前記プラスミドが植物形質転換ベクターである、請求項3に記載のキメラプラスミドDNA構築体。
- 前記プラスミドが植物形質転換ベクターである、請求項4に記載のキメラプラスミドDNA構築体。
- 請求項3に記載のキメラプラスミドDNA構築体を含む組換え細胞。
- 請求項4に記載のキメラプラスミドDNA構築体を含む組換え細胞。
- 大腸菌(E.coli)又はアグロバクテリウム(Agrobacterium)から選択される、請求項9に記載の組換え細胞。
- 大腸菌(E.coli)又はアグロバクテリウム(Agrobacterium)から選択される、請求項10に記載の組換え細胞。
- 請求項1又は2に記載のプロモーターに動作可能に結合した非相同核酸配列を含む形質転換植物又は細胞。
- 請求項2に記載のプロモーターに動作可能に結合した非相同核酸配列を含む形質転換植物又は細胞。
- 請求項13又は14に記載の遺伝子導入植物由来の子孫。
- 請求項13又は14に記載の遺伝子導入植物由来の種。
- 単子葉植物又は双子葉植物である、請求項13又は14に記載の遺伝子導入植物。
- 前記単子葉植物種が、イネ、トウモロコシ、コムギ、オオムギ及びモロコシからなる群から選択される、請求項13又は14に記載の遺伝子導入植物。
- 前記双子葉植物種が、タバコ、トマト、エンドウマメ、ダイズ、アブラナ類、ヒヨコマメ、綿及びキマメからなる群から選択される、請求項13又は14に記載の遺伝子導入植物。
- a)請求項8に記載のキメラプラスミドDNA構築体を構築するステップ、
b)ステップ(a)の構築体をアグロバクテリウム(Agrobacterium)株に動員して、組換えアグロバクテリウム株を生成するステップ、
c)植物形質転換用の植物から適当な外植片を得るステップ、
d)ステップ(c)の外植片とステップ(b)の組換えアグロバクテリウム株を共培養して、形質転換植物細胞を生成するステップ、
e)ステップ(d)の形質転換植物細胞を選択するステップ、
f)ステップ(e)の形質転換植物細胞から苗条を得るステップ、
g)ステップ(f)の苗条から発根した小植物を得るステップ、
h)ステップ(g)の発根した小植物を育てて、形質転換植物を生成するステップ
を含む、植物中のRTBVプロモーターに動作可能に結合した非相同核酸を発現させるための方法。 - 前記RTBVプロモーターが、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14及び配列番号15からなる群から選択される、請求項20に記載の発現の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IN1422DE2004 | 2004-08-30 | ||
PCT/IN2005/000285 WO2007010545A1 (en) | 2004-08-30 | 2005-08-19 | Rtbv plant promoter and process thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008511307A JP2008511307A (ja) | 2008-04-17 |
JP4615018B2 true JP4615018B2 (ja) | 2011-01-19 |
Family
ID=37668473
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007529143A Expired - Fee Related JP4615018B2 (ja) | 2004-08-30 | 2005-08-19 | Rtbv植物プロモーター及びそのプロセス |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7728122B2 (ja) |
EP (1) | EP1794301A4 (ja) |
JP (1) | JP4615018B2 (ja) |
CN (1) | CN101061226A (ja) |
EA (1) | EA013229B1 (ja) |
WO (1) | WO2007010545A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20100297722A1 (en) * | 2009-05-20 | 2010-11-25 | Board Of Trustees Of Southern Illinois University | Transgenic moss producing terpenoids |
BR112014030017A2 (pt) | 2012-05-30 | 2017-09-12 | Board Of Trustees Of Southern Illinois Univ | soja resistente aos nematódeos de cisto |
US9243261B2 (en) | 2012-06-15 | 2016-01-26 | Washington University | Plants having increased desiccation tolerance, increased drought tolerance or increased water use efficiency |
CN103088027B (zh) * | 2013-02-05 | 2014-08-20 | 中南大学 | 一种调控人参皂苷积累的pdr转运蛋白基因启动子及其应用 |
CN103103194B (zh) * | 2013-02-05 | 2014-07-23 | 中南大学 | 茉莉酸甲酯应答的人参PgPDR3基因启动子及其应用 |
US10294489B2 (en) | 2013-03-15 | 2019-05-21 | Board Of Trustees Of Southern Illinois University | Soybean resistant to cyst nematodes |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5824857A (en) * | 1991-11-08 | 1998-10-20 | Washington University | Plant promoter |
AU742461B2 (en) * | 1997-04-09 | 2002-01-03 | Minister Of Agriculture Fisheries And Food In Her Britannic Majesty's Government Of The United Kingdom Of Great Britain And Northern Ireland, The | Inducible plant promoters |
US6528701B1 (en) * | 1999-03-02 | 2003-03-04 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Rice ubiquitin-derived promoters |
US6504084B1 (en) * | 1999-04-23 | 2003-01-07 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Maize NPR1 polynucleotides and methods of use |
WO2002046366A2 (en) | 2000-10-24 | 2002-06-13 | Donald Danforth Plant Science Center | Rf2a and rf2b transcription factors |
US6664387B2 (en) * | 2001-01-17 | 2003-12-16 | Korea Kumho Petrochemical Co., Ltd. | Expression cassette and plasmid for strong constitutive gene expression and the use thereof |
-
2005
- 2005-08-19 JP JP2007529143A patent/JP4615018B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2005-08-19 EP EP05786176A patent/EP1794301A4/en not_active Withdrawn
- 2005-08-19 WO PCT/IN2005/000285 patent/WO2007010545A1/en active Application Filing
- 2005-08-19 EA EA200700379A patent/EA013229B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2005-08-19 US US11/661,452 patent/US7728122B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2005-08-19 CN CNA2005800339749A patent/CN101061226A/zh active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EA200700379A1 (ru) | 2007-10-26 |
EA013229B1 (ru) | 2010-04-30 |
US20080282431A1 (en) | 2008-11-13 |
CN101061226A (zh) | 2007-10-24 |
EP1794301A4 (en) | 2012-04-11 |
JP2008511307A (ja) | 2008-04-17 |
EP1794301A1 (en) | 2007-06-13 |
US7728122B2 (en) | 2010-06-01 |
WO2007010545A1 (en) | 2007-01-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4739634B2 (ja) | ケストルムイエローリーフカーリングウイルスプロモーター | |
Sunilkumar et al. | Cotton α-globulin promoter: isolation and functional characterization in transgenic cotton, Arabidopsis, and tobacco | |
US8916377B2 (en) | Root-preferred promoter and methods of use | |
JP4615018B2 (ja) | Rtbv植物プロモーター及びそのプロセス | |
CN107459565B (zh) | 大豆抗旱相关蛋白在调控大豆抗旱性中的应用 | |
WO2000056895A1 (fr) | Promoteur de la virose (cotton leaf curl virus clcuv) d'un cotonnier | |
ZA200505067B (en) | Arificial promoter for the expression of DNA sequences in vegetal cells | |
US7169967B2 (en) | Globulin-1 promoter from maize and method of using same | |
KR20110019199A (ko) | 벼의 화분에서 발현하는 pLim3 프로모터, 이 프로모터를 포함하는 발현벡터, 이 발현벡터로 형질전환된 형질전환체 및 이 형질전환체의 제조방법 | |
CN107058317B (zh) | 一种花粉特异性启动子及其应用 | |
WO2005113771A1 (en) | An embryo preferred promoter and method of using same | |
US8338662B2 (en) | Viral promoter, truncations thereof, and methods of use | |
KR101054891B1 (ko) | 벼의 잎과 뿌리의 분열조직에서 발현하는 pDME1 프로모터, 이 프로모터를 포함하는 발현벡터, 이 발현벡터로 형질전환된 형질전환체 및 이 형질전환체의 제조방법 | |
US8350121B2 (en) | Viral promoter, truncations thereof, and methods of use | |
US20060026717A1 (en) | Globulin 2 regulatory region and method of using same | |
US20110113511A1 (en) | Viral promoter, truncations thereof, and methods of use | |
CN108424911B (zh) | 种子特异性双向启动子及其应用 | |
CN108118054B (zh) | 拟南芥丝氨酸羧肽酶类蛋白基因AtSCPL30的启动子和其缺失突变体及其应用 | |
US6930182B1 (en) | Composition and methods of using the Mirabilis mosaic caulimovirus sub-genomic transcript (Sgt) promoter for plant genetic engineering | |
JP4331335B2 (ja) | ワタ繊維特性が改良されたワタ植物、その作出方法および該ワタ植物体からのワタ繊維の製造方法 | |
US8642749B2 (en) | Regulatory region preferentially expressing to seed embryo and method of using same | |
US8344206B2 (en) | Viral promoter, truncations thereof, and methods of use | |
KR20230175077A (ko) | 벼 Os05g20150 유전자 유래 화분 특이적 발현 프로모터 및 이의 용도 | |
KR101825960B1 (ko) | 벼 유래 뿌리 특이적 프로모터 및 이의 용도 | |
US20110055977A1 (en) | Enhancement of Reproductive Heat Tolerance in Plants |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100528 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100825 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20101005 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20101019 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131029 Year of fee payment: 3 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |