JP4579563B2 - 対物光学系の固定装置 - Google Patents

Description

この発明は、対物光学系の固定装置に関するものである。

従来、生体等の試料にその表面から励起光を照射して、試料の所定の深さ位置から発せられる蛍光を選択的に検出することにより、細胞の機能等を観察する装置として、レーザ走査型共焦点顕微鏡が知られている（例えば、特許文献１、２参照）。
このレーザ走査型共焦点蛍光顕微鏡は、顕微鏡の一般的な観察に加えて試料の微小スポット領域に集光させたレーザ光をガルバノミラーなどの走査手段によって走査し、試料から発せられる蛍光を検出し画像を得るものである。
このレーザ走査型共焦点顕微鏡は、解像力に優れ、観察する微小スポット以外の光を除去できるので、高いＳ／Ｎ比で鮮明な観察画像を得ることができるという利点を備えている。
特開平３−８７８０４号公報（第２頁等） 特開平５−７２４８１号公報（図１等）

しかしながら、従来のレーザ走査型共焦点顕微鏡を始めとする顕微鏡は、ラットやマウス等の実験小動物の各種臓器を生きたままの状態（in vivo）で観察することについては想定していない。したがって、血管等の脈動によって振動する場合には、観察対象部位に対して近接状態に配置される対物光学系と、観察対象部位との相対位置が変動して観察対象部位の画像がブレたり、焦点がボケたりする等の不都合が考えられる。

特に、経時的な観察を行うために、観察期間中に実験小動物等に平常時と同様の活動をさせる場合には、観察時に観察対象部位に位置決めされていた対物光学系の位置決め状態を一旦解除しなければならず、その場合には、再度同じ観察対象部位に位置決めすることが極めて困難となる。また、観察対象部位に対する対物光学系の接触や取り外しを繰り返すと、観察対象部位にダメージを与えることにもなり、観察対象部位を健全な状態に維持しつつ観察を行うことができないという不都合がある。

この発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、実験小動物を始めとする哺乳類の細胞、筋肉等の生体組織、あるいは、心臓、肝臓等の各種臓器を生きたままの状態で、比較的長期間にわたって観察することを可能とする対物光学系の固定装置を提供することを目的としている。

上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、外筒内に対物光学系を収容してなる対物光学系ユニットを、生体組織に形成した孔に挿入状態に支持する支持部材と、該支持部材の先端部を観察対象部位近傍の生体組織に位置決め固定する固定機構とを備え、前記支持部材に、前記外筒の外面に挿脱可能に嵌合させられる嵌合孔が設けられている対物光学系の固定装置を提供する。

この発明によれば、観察対象部位を有する動物の生体組織に形成した孔内に支持部材を配置して、固定機構の作動により支持部材を生体組織に対して位置決め固定した状態で、支持部材に対物光学系ユニットを支持させることにより、対物光学系ユニットが生体組織の孔内に挿入状態に配置され、観察対象部位に対して動かないように固定されることになる。これにより、動物が動いても、対物光学系ユニットにより、観察対象部位をブレることなく観察することが可能となる。

また、このようにすることで、対物光学系ユニットが支持部材に対して光軸に直交する方向に簡易に位置決めされることになる。

また、上記発明においては、前記支持部材に、前記外筒を光軸方向に突き当てる突当て面が設けられていることが好ましい。
このようにすることで、対物光学系ユニットが支持部材に対して光軸方向に簡易に位置決めされることになる。

また、上記発明において、前記観察対象部位近傍の骨格に前記支持部材を固定可能に構成された第２の固定機構を備えることとしてもよい。
骨格は硬く、変形が少ないとともに、動物の体内において、他の生体組織との相対位置関係がある程度安定しているので、支持部材を骨格に固定することにより、対物光学系ユニットを生体組織に対して安定して位置決め固定することができる。

また、上記発明においては、前記固定機構が、前記支持部材の前記対物光学系ユニットを露出させた先端に設けられ、観察対象部位近傍の生体組織に突き刺す尖端部を備えることとしてもよい。
観察対象部位近傍の生体組織に尖端部を突き刺すことで、支持部材を生体組織に固定することができる。光学ユニットは先端部の設けられている尖端に露出させられているので、観察対象部位に対して固定された状態で観察を行うことが可能となる。

また、上記発明においては、前記支持部材が生体組織に形成した孔に挿入される筒状に形成されるとともに、その先端に光学的に透明な窓部材を備えることが好ましい。
このように構成することで、対物光学系ユニットを支持部材から取り外した状態においても、生体組織の孔や観察対象部位などの内部組織を外気に対して露出させずにすむので、生体組織の健全性を長期にわたり維持することができる。

また、上記発明においては、前記支持部材の尖端部近傍に、生体組織に引っかかる返し部が設けられていることとしてもよい。
生体組織に突き刺した先端部近傍の返し部が生体組織に引っかかることにより、支持部材が生体組織から外れて孔から抜け落ちてしまうことを防止できる。したがって、対物光学系ユニットを観察対象部位に対して固定した状態に維持することができる。

また、上記発明においては、前記固定機構が、前記支持部材の前記対物光学系ユニットを露出させた先端に塗布され、該先端と観察対象部位近傍の生体組織とを接着する接着剤を備えることとしてもよい。
このようにすることで、支持部材の尖端と生体組織とが接着剤によって固定されるので、対物光学系ユニットが観察対象部位に対して、より安定して移動しないように支持されることになる。

また、上記発明においては、観察部位を有する動物の体表に固定可能なベース部材と、該ベース部材と前記支持部材または、前記ベース部材と対物光学系ユニットとを連結固定する連結部材とを有する第３の固定機構を備えることとしてもよい。
このようにすることで、ベース部材を動物の体表に固定し、ベース部材と支持部材またはベース部材と対物光学系ユニットとを連結部材によって連結固定することにより、対物光学系ユニットを動物の体表に対して固定することが可能となる。生体組織や骨への固定を十分に行うことができない場合に、観察対象部位に対して対物光学系ユニットを安定して固定することができる。

また、上記発明においては、前記ベース部材が、体表に巻き付けるベルトを備えることとしてもよく、また、前記ベース部材が、動物に着用させるジャケットを備えることとしてもよい。
このようにすることで、対物光学系ユニットを取り付けた状態の動物の運動を可能にし、長期にわたる生きたままの観察を行うことが可能となる。

また、本発明の参考例は、動物を位置決め状態に固定する動物固定台と、対物光学系を備える対物光学系ユニットを動物固定台に位置決め状態に固定する固定機構とを備える対物光学系の固定装置を提供する。
この発明によれば、動物が動物固定台に固定され、固定機構により対物光学系ユニットが動物固定台に位置決め状態に固定されるので、対物光学系ユニットの対物光学系が動物に対して位置決めされる。これにより、対物光学系ユニットによって、観察対象部位をブレることなく観察することが可能となる。

本発明によれば、対物光学系ユニットを観察対象部位に対して安定して位置決めした状態に維持することができるので、生体組織の生きたままの観察を容易に行うことができるという効果を奏する。

本発明の一実施形態に係る対物光学系の固定装置について、図１および図２を参照して、以下に説明する。
本実施形態に係る対物光学系の固定装置１は、対物光学系ユニット２を動物の体内に配置されている臓器等の観察対象部位Ａに位置決め状態に固定する装置であって、図１および図２に示されるように、対物光学系ユニット２を支持する支持部材３と、該支持部材３を動物の腕または足Ｘ等に対して位置決め固定した状態に維持する固定機構４とを備えている。

図１および図２に示す例では、支持部材３は、例えば、動物の腕や足Ｘ等を挿入配置する貫通孔５を有する筒状部材であって、その長さ方向の略中央位置に、側壁を貫通して設けられ、対物光学系ユニット２を挿入する挿入孔６と、その長さ方向の両側に配置されたネジ孔７とを備えている。また、ネジ孔７には前記貫通孔５の内部に先端を突出可能に締結されたボルト８が配置されている。貫通孔５、ネジ孔７およびボルト８により、支持部材３を生体組織Ｘに位置決め状態に固定する固定機構４が構成されている。

前記対物光学系ユニット２は、複数のレンズ９からなる対物光学系１０を略円筒状の外筒１１内に収容して構成されている。外筒１１は、その長さ方向の途中位置に段部１２を備えるとともに、該段部１２よりも先端側に一段外径寸法が細くなる小径部１３、後端側に小径部１３よりも外径寸法の大きな大径部１４を備えている。
前記挿入孔６は、前記対物光学系ユニット２の外筒１１の小径部１３および大径部１４を嵌合させる嵌合面１５ａ，１５ｂを備えているとともに、外筒１１に設けられた段部１２を突き当てる突当て面１６を備えている。

図中符号１７は、顕微鏡本体である。顕微鏡本体１７には、図示しない光源からの光を伝達する光ファイバ１７ａと、光ファイバ１７ａから出射される光を略平行光にするコリメートレンズ１７ｂと、該コリメートレンズ１７ｂから発せられた平行光を、観察対象部位Ａにおいて走査させるガルバノミラーのような光走査部１７ｃとが備えられている。

このように構成された本実施形態に係る固定装置１の作用について、以下に説明する。
図１は、観察対象部位Ａとしての骨髄を観察する場合を示している。本実施形態に係る固定装置１を用いて対物光学系ユニット２を固定するには、動物の生体組織、例えば、腕や足Ｘの表皮組織および筋肉組織を切開し、骨Ｂに骨髄Ａに達する孔を開ける。この状態で、腕や足Ｘを支持部材３の貫通孔５に挿入し、切開した部位に挿入孔６を位置合わせする。

そして、対物光学系ユニット２を挿入孔６を介して、生体組織Ｘに開けた孔Ｙに挿入し、対物光学系ユニット２の先端を骨髄Ａに接触状態に配置する。そして、この状態で、支持部材３のネジ孔７に締結されていたボルト８を絞め込むことにより、支持部材３が動物の腕や足Ｘに対して固定される。
すなわち、支持部材３が動物の腕や足Ｘ等に固定され、その支持部材３に対物光学系ユニット２が位置決め状態に配されるので、動物の腕や足Ｘの内部に配置されている観察対象部位である骨髄Ａに対して、対物光学系ユニット２の先端を位置決め状態に固定することができる。

本実施形態に係る固定装置１によれば、支持部材３に、対物光学系ユニット２の段部１２を突き当てる突当て面１６が設けられているので、対物光学ユニット２を支持部材３に対してその光軸方向に位置決めすることができる。また、支持部材３に、対物光学系ユニット２の小径部１３および大径部１４に嵌合する嵌合面１５ａ，１５ｂが設けられているので、対物光学系ユニット２を支持部材３に対してその半径方向にも位置決め状態に配することができる。

そして、このようにして、対物光学系ユニット２を支持部材３に対して、光軸方向およびそれに直交する方向に位置決め可能なので、対物光学系ユニット２を挿入孔６に抜き差ししても、先端を骨髄Ａ内の同じ位置に、高い再現性で位置決めすることができる。

次に、本発明の第２の実施形態に係る対物光学系の固定装置２０について、図３〜図５を参照して説明する。なお、本実施形態の説明において、上述した第１実施形態の説明と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を簡略にする。
本実施形態に係る固定装置２０は、上記実施形態に係る固定装置１の挿入孔６と同様の挿入孔６を有する支持部材２１と、該支持部材２１に設けられた固定機構２２とを備えている。
挿入孔６には、図示しない嵌合面１５ａ，１５ｂと突当て面１６とが備えられている。
また、固定機構２２は、例えば、図３に示されるように、バネ２３により閉じた状態に付勢された把持部材２４により構成されている。

本実施形態に係る固定装置２０は、図４および図５に示されるように、実験小動物Ｘの体内に埋め込まれ、前記固定機構２２によって体内に固定されている。固定機構２２の把持部材２４が、実験小動物Ｘの肋骨２５を把持することにより、支持部材２１が骨格２５に固定されるようになっている。
肋骨等の骨格２５は、比較的硬質で変形が少なく、また、臓器等の生体組織との相対位置関係がある程度安定しているので、この骨格２５に支持部材２１を固定することで、支持部材２１に位置決め固定される対物光学系ユニット２を臓器等の観察対象部位Ａに対して安定して位置決め状態に維持することができる。

なお、本実施形態に係る固定装置２０は、図３〜図５に示されるような肋骨２５に固定される方式のものに限定されるものではない。例えば、観察対象部位Ａが、頭蓋骨２６内に配置されている脳組織である場合には、図６に示されるように、実験小動物の頭部Ｘに被せられるアーチ状部材２７の先端に設けたボルト２８によって頭蓋骨２６を半径方向に挟むことにより、アーチ状部材２７に固定した支持部材２１を生体組織Ｘに対して位置決め固定することにしてもよい。

次に、本発明の第３の実施形態に係る対物光学系の固定装置について、図７および図８を参照して以下に説明する。
この実施形態の説明においても、上述した第１実施形態の説明と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を簡略にする。
本実施形態に係る固定装置３０は、支持部材３１の先端に、該支持部材３１を生体組織Ａ′に対して固定する固定機構３２を備えている。この固定機構３２は、図８に示されるように、略円筒状の支持部材３１の先端を鋭利な形状に形成してなる円環状の尖端部（以下、先端部３２ともいう。）により構成されている。対物光学系ユニット２を半径方向および光軸方向に位置決めする嵌合面１５ａ，１５ｂおよび突当て面１６を有している点は、上記各実施形態に係る固定装置１，２０と同様である。

本実施形態に係る固定装置３０により対物光学系ユニット２の先端を実験小動物Ｘ等の体内に配置されている臓器等の観察対象部位Ａに位置決め固定するには、実験小動物Ｘ等の表皮組織、筋肉組織等を貫通して形成した孔Ｃ内に支持部材３１を挿入する。支持部材３１の先端には尖端部３２が設けられているので、その尖端部３２により体内の臓器Ａ′を突き刺すことにより、支持部材３１がその半径方向に臓器Ａ′に対して固定されることになる。
支持部材３１の挿入孔６は、円環状の尖端部３２の内側に開口し、その開口部６ａに対物光学系ユニット２の先端が露出しているので、対物光学系ユニット２を通して、尖端部３２の内側に配されている観察対象部位Ａを観察することが可能となる。

なお、本実施形態に係る固定装置３０においては、円環状の尖端部３２を固定機構として採用したが、これに代えて、図９に示されるように、支持部材３１の先端面に多数のマイクロニードル３２を設けることにしてもよい。このようにすることで、マイクロニードル３２を突き刺す臓器Ａ′等の生体組織に与えるダメージを少なくして、支持部材３１を観察対象部位Ａの周囲に配されている生体組織Ａ′に安定して位置決め状態に維持することが可能となる。

また、図１０に示されるように、尖端部３２の周囲に、半径方向に突出する複数の突起からなる返し部３３を設けることにしてもよい。このようにすることにより、支持部材３１の尖端部３２を一旦臓器Ａ′に突き刺すと、尖端部３２の周囲に設けられている返し部３３が臓器Ａ′内に差し込まれ、支持部材３１が臓器Ａ′から外れることを防止するように機能する。その結果、支持部材３１が、臓器Ａ′に対して、その半径方向のみならず、軸方向にも固定されるので、観察対象部位Ａに対して、対物光学系ユニット２を半径方向および光軸方向に安定して位置決め状態に固定することができる。

さらに、図１１に示されるように、図８の支持部材３１の尖端部３２の内側に配置されている開口部６ａを閉塞する、光学的に透明な材質からなる窓部材３４を設けることにしてもよい。このように構成された支持部材３１が、生体組織Ｘに設けた孔Ｃに挿入され、観察対象部位Ａ近傍の臓器Ａ′等に突き刺されると、支持部材３１が生体組織Ｘに設けた孔Ｃの内面を覆い、窓部材３４が観察対象部位Ａに密着させられて観察対象部位Ａを覆うように配されることになる。その結果、対物光学系ユニット２を支持部材３１の挿入孔６内から引き抜いても、生体組織Ｘの内部が外気に対して露出しないように覆われていることになり、生体組織Ｘを健全な状態に維持することができる。

また、上記各実施形態においては、支持部材３１の先端に、臓器Ａ′等の生体組織に突き刺すための尖端部３２を設け、これによって支持部材３１を生体組織に位置決め状態に固定することとしたが、これに代えて、図１２に示されるように、支持部材３１の先端面に生体適合性の接着剤３５を塗布することにしてもよい。このようにすることで、支持部材３１を臓器等の生体組織Ａ′に突き刺すことなく、観察対象部位Ａ近傍の生体組織Ａ′に位置決め状態に固定することができる。したがって、生体組織Ａ′に大きなダメージを与えることなく位置決め固定できるので好ましい。接着剤３５としては、例えば、シランカップリング剤、温度応答性ポリマーその他の生体適合性の接着剤を挙げることができる。

次に、本発明の第４の実施形態に係る対物光学系の固定装置について、図１３および図１４を参照して以下に説明する。この実施形態の説明においても、上述した第１実施形態の説明と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を簡略にする。
本実施形態に係る固定装置４０は、実験小動物Ｘ等の胴体に形成した孔Ｃ内に挿入される支持部材４１と、該支持部材４１を実験小動物Ｘ等の胴体（体表）に固定する固定器具４２とを備えている。

支持部材４１は、第３の実施形態における支持部材３１と同様に、先端に尖端部３２あるいは接着剤３５を備えていてもよいが、図１３に示されるように、平坦な先端面４１ａを備えていてもよい。
固定器具４２は、図１３および図１４に示されるように、図示しないバネ等によって閉じる方向に付勢された２つの金属製の円弧板状の把持部４３（ベース部材）と、該把持部４３と支持部材４１とを連結固定する連結部材４４とから構成されている。

固定器具４２を構成する円弧板状の把持部４３を、バネの弾発力に抗して押し広げた間に実験小動物Ｘの胴体を挿入して、バネの弾発力によって胴体を挟み込むことで、把持部４３を実験小動物Ｘの胴体に対して固定することができるようになっている。

このように構成された本実施形態に係る固定装置４０によれば、固定器具４２を実験小動物Ｘの胴体に固定することで、支持部材４１および該支持部材４１に挿入された対物光学系ユニット２を観察対象部位Ａに対して位置決め状態に固定することができる。特に、骨格や臓器Ａ′自体を支持部材４１の固定に利用できない場合等に有効である。また、骨格や臓器Ａ′自体に支持部材４１を固定した場合においても、本実施形態の固定器具４２を併用することにより、さらに安定して対物光学系ユニット２を観察対象部位Ａに位置決め状態に維持することができる。

なお、本実施形態においては、金属製の円弧板状の把持部４３により実験小動物Ｘ等の胴体を挟み込む構造のものをベース部材として例に挙げて説明したが、これに代えて、図１５に示されるように、胴体に巻き付けられるベルト４５や、図１６に示されるように、実験小動物等に着用させるジャケット４６によりベース部材を構成することにしてもよい。これらのベース部材４５．４６によれば、いずれも実験小動物Ｘ等に大きなダメージを与えることなく、対物光学系ユニット２を観察対象部位Ａに対して固定することができる。また、実験小動物Ｘに平常時と同様の活動をさせることも可能となり、経時的に観察対象部位Ａを観察する長期的な観察を行うことも可能である。
円弧板状の把持部４３や、ベルト４５からなるベース部材によれば、実験小動物Ｘの大きさに合わせて調節することが可能であるため、汎用的に使用することもできる。

なお、本実施形態においては、ベース部材４３と支持部材４１とを連結部材４４により連結固定することとしたが、これに代えて、図１５および図１６に示されるように、ベース部材４５，４６と顕微鏡本体１７とを連結部材４４によって連結固定することにしてもよい。また、図１７および図１８に示されるように、支持部材に挿入された対物光学系ユニット２の外筒１１とベース部材４３とを連結部材４４により連結固定することにしてもよい。このようにすることで、支持部材４１と連結部材４４の２箇所において対物光学系ユニット２を支持するので、より安定して観察対象部位Ａの観察を行うことができる。

次に、本発明の一参考実施形態に係る対物光学系の固定装置について、図１９および図２０を参照して以下に説明する。この実施形態の説明においても、上述した第１実施形態の説明と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を簡略にする。
本実施形態に係る固定装置５０は、図１９に示されるように、実験小動物Ｘを固定する動物固定台５１と、該動物固定台５１に固定されたアーム５２と、該アーム５２上を水平方向および鉛直方向に移動可能なスライダ５３とを備えている。各スライダ５３には対物光学系ユニット２を有する顕微鏡本体１７が固定されている。
また、図２０に示されるように、実験小動物Ｘを乗せる載置部５４には、貫通孔５５が設けられ、他の対物光学系ユニット２が該貫通孔５５を通して載置部５４上面に突出するように動物固定台５１に位置決め状態に固定されている。

図１９および図２０に示す例では、動物固定台５１の載置部５４に腹部を向けて固定された実験小動物Ｘの頭部および背部に開けた穴に、スライダ５３を作動させることにより水平方向および垂直方向に位置合わせした対物光学系ユニット２の先端を挿入状態に配置している。また、腹部に設けた穴には載置部５４の下方から突出させた対物光学系ユニット２の先端を挿入状態に配置している。

本実施形態に係る固定装置５０によれば、実験小動物Ｘを固定した動物固定台５１にアーム５０およびスライダ５３を介してあるいは直接的に位置決め固定した対物光学系ユニット２を用いて実験小動物Ｘの体内に配されている観察対象部位の観察を行うので、対物光学系ユニット２と観察対象部位との相対的な移動が極力抑制されて、ブレのない鮮明な観察画像を取得することができるという効果がある。

なお、上記各実施形態においては、対物光学系ユニット２として、外筒１１内に収容された少なくとも１つの対物レンズ９を備えるものを例に挙げて説明したが、これに代えて、プローブ型の顕微鏡の先端を対物光学系ユニット２として、支持部材３，２１，３１，４１に位置決め固定することとしてもよい。

本発明の第１の実施形態に係る対物光学系の固定装置を示す縦断面図である。 図１の固定装置を示す斜視図である。 本発明の第２の実施形態に係る対物光学系の固定装置を示す斜視図である。 図３の固定装置を実験小動物に取り付けた観察状態を示す側面図である。 図４の観察状態を示す平面図である。 図３の固定装置の変形例を示す一部を破断した正面図である。 本発明の第３の実施形態に係る対物光学系の固定装置を示す一部を破断した側面図である。 図７の固定装置の支持部材を示す縦断面図である。 図８の支持部材の変形例を示す縦断面図である。 図８の支持部材の他の変形例を示す縦断面図である。 図８の支持部材の他の変形例を示す縦断面図である。 図８の支持部材のさらに他の変形例を示す縦断面図である。 本発明の第４の実施形態に係る対物光学系の固定装置を示す一部を破断した側面図である。 図１３の固定装置を示す斜視図である。 図１３の固定装置の変形例を示す一部を破断した側面図である。 図１３の固定装置の他の変形例を示す一部を破断した側面図である。 図１３の固定装置のさらに他の変形例を示す一部を破断した側面図である。 図１７の固定装置を示す斜視図である。 本発明の一参考実施形態に係る対物光学系の固定装置を示す斜視図である。 図１９の動物固定台に直接固定した顕微鏡本体を示す一部を破断した側面図である。

符号の説明

Ａ′，Ｘ 生体組織
Ｂ 骨格
Ｃ 孔
１，２０，３０，４０ 固定装置
２ 対物光学系ユニット
３，２１，３１，４１ 支持部材
４，２２，３２，４２ 固定機構
６ 挿入孔（嵌合孔）
１０ 対物光学系
１１ 外筒
１６ 突当て面
３２ 尖端部（固定機構）
３３ 返し部
３４ 窓部材
３５ 接着剤
４３ 把持部（ベース部材）
４４ 連結部材
４５ ベルト（ベース部材）
４６ ジャケット（ベース部材）

Claims (10)

1. 外筒内に対物光学系を収容してなる対物光学系ユニットを、生体組織に形成した孔に挿入状態に支持する支持部材と、
   該支持部材の先端部を観察対象部位近傍の生体組織に位置決め固定する固定機構とを備え、
   前記支持部材に、前記外筒の外面に挿脱可能に嵌合させられる嵌合孔が設けられている対物光学系の固定装置。
2. 前記支持部材に、前記外筒を光軸方向に突き当てる突当て面が設けられている請求項１に記載の対物光学系の固定装置。
3. 前記観察対象部位近傍の骨格に前記支持部材を固定可能に構成された第２の固定機構を備える請求項１または請求項２に記載の対物光学系の固定装置。
4. 前記固定機構が、前記支持部材の前記対物光学系ユニットを露出させた先端に設けられ、観察対象部位近傍の生体組織に突き刺す尖端部を備える請求項１から請求項３のいずれかに記載の対物光学系の固定装置。
5. 前記支持部材が生体組織に形成した孔に挿入される筒状に形成されるとともに、その先端に光学的に透明な窓部材を備える請求項４に記載の対物光学系の固定装置。
6. 前記支持部材の尖端部近傍に、生体組織に引っかかる返し部が設けられている請求項４または請求項５に記載の対物光学系の固定装置。
7. 前記固定機構が、前記支持部材の前記対物光学系ユニットを露出させた先端に塗布され、該先端と観察対象部位近傍の生体組織とを接着する接着剤を備える請求項１から請求項３のいずれかに記載の対物光学系の固定装置。
8. 観察部位を有する動物の体表に固定可能なベース部材と、該ベース部材と前記支持部材または、前記ベース部材と対物光学系ユニットとを連結固定する連結部材とを有する第３の固定機構を備える請求項１から請求項７のいずれかに記載の対物光学系の固定装置。
9. 前記ベース部材が、体表に巻き付けるベルトを備える請求項８に記載の対物光学系の固定装置。
10. 前記ベース部材が、動物に着用させるジャケットを備える請求項８に記載の対物光学系の固定装置。

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