JP4447789B2 - 食物誘導される卵黄中の抗分泌タンパク質 - Google Patents
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Description
発明の分野
本発明は、一般に、異常に高レベルの体液流出によって引き起こされる異常な生理状態の治療および予防のための、天然抗分泌タンパク質(natural antisecretory proteins(NASP))富化機能性食物製品および薬剤製品の調製における天然抗分泌タンパク質の使用に関する。特に、本発明はそのような製品の調製におけるNASP富化卵黄の使用に関する。本発明はそのように調製された食物製品および薬剤製品、およびそれらの調製方法にも関する。
【0002】
以下、用語「NASP」は「天然抗分泌タンパク質」に代わって用いられ、一方、用語「ASP」は天然抗分泌タンパク質に含まれる「抗分泌タンパク質」に代わって用いられる。
【0003】
先行技術
スウェーデン特許SE9000028−2(発行番号466,331号)によって、抗分泌因子または抗分泌タンパク質(antisecretory protein(ASP:FILとも呼ばれる))の生成は、動物の飼料にある種の糖、アミノ酸、およびアミドを加えることによって刺激され得ることが知られている。興味深い量のASPの生成に用いられるこれらの物質の種類および量は、その特許において開示される方法によって決定される。要するに、この方法はラットの小腸における標準化された分泌反応の測定を包含する。その特許から、誘導され生成されたASPは、体液の腸への分泌を指揮することは明白である。このため、下痢状態は予防または治療されることができ、これはより安全な動物性製品の生産を意味する。前記特許において、天然抗分泌タンパク質含有率または量は、その、コレラ毒で刺激されている実験用ラットの小腸への流体分泌に対する効果によって定義されている。1ASP単位(FIL単位)は、腸における流体流のASPの無い対照と比較して50%の減少に相当する。抗分泌タンパク質は非常に少ない量で活性があり、したがって、それはそれらの量で測定するよりもそれらの効果で測定するほうが容易である。
【0004】
PCT出願PCT/SE96/01049により、ある抗分泌タンパク質の構造、およびそれらの活性部位は同定されたことが知られている。組換遺伝工学または固相技術によって作られ、一定の構造を有する合成ASPは、生細胞膜を介する体液流に対して全般的な調節の影響を与えることが示されている。
【0005】
PCT出願PCT/SE97/01918(WO98/21978)により、ASPの生成は、酵素活性を有するある種の食物の体内摂取によって体内で誘導され得ることが知られている。その誘導の効果およびそれによるASPの生成は、個体およびその症状に従って変化し、従来予測できない強度と誘導期間で起こる。しかしながら、それらは後で測定でき、必要な修正が前記測定方法の手引きに従ってされ得る。
発明の簡単な説明
発明者が続けていた、スウェーデン特許SE9000028−2に従って抗分泌タンパク質の生成を刺激する飼料を調製する研究の間に、驚くことに、形成された天然抗分泌タンパク質の合成能と濃縮が体内で非常に非均等に分布されることが発見された。非常に高レベルのNASPが一定の器官、体部または体液、および特に鳥の卵の卵黄中に存在することが発見された。本発明はこの驚くべき事実に基づき、したがって、極度の体液流出によって引き起こされる異常な生理状態を治療および予防するためのNASP富化食物製品および薬剤製品の調製における、NASPが富化された卵黄の使用に関する。したがって本発明は、卵黄をそのまままたは食物製品の形態で摂取することによって食物または飼料中のNASPを直接投与するという、これまで知られていない可能性を切り開く。
【0006】
発明の詳細な説明
本発明は、一般に、極度の体液流出によって引き起こされる異常な生理状態を治療および予防するための、NASP富化機能性食物製品および薬剤製品の調製における天然抗分泌タンパク質の使用に関し、一つの側面に従うと、高レベルのNASPを有する食物製品の調製における、NASPが富化された卵黄の使用に関する。他の側面に従うと本発明は、NASPを含む、特有の栄養目的のための食糧および薬剤製品の調製におけるそのような使用に関する。
【0007】
本明細書において「機能性食物製品」は、健康に良い機能を有する、すなわち人または動物の健康に対する有益な効果を有する食物製品を意味する。
【0008】
本明細書において、語句「食物製品」は、人用の食物はもちろん動物用の飼料も包含することが意図される。その食物は、その調理品に卵黄を含むパンケーキ、オムレツ、アイスクリーム、および様々な種類のパンのような生産物の形態の製品であり得る。その卵黄はエッグノックまたは固ゆでもしくは半熟卵の形でも食べることができる。その食物は、以下に記述された本発明の態様に従って多かれ少なかれ精製された状態のNASPが食物製品に混合されてNASPが富化された、パン、ビスケット、パスタ、穀物およびフレーク、ポリッジまたはかゆの状態であるか、あるいは電解質を含むもしくは含まない多様な飲料混合物、または肉および肉製品、脂肪および脂肪製品、もしくは牛乳および乳製品を含む食物調理品に混合することもできる。食物調理品は、味の良さと食事の多様性についての要求を満たすために、当業者に既知の知識を用いて非常に自由に作られ得る。
【0009】
卵黄は、人および動物の食用に用いられることができ、NASPが富化された鳥の卵に由来する。その卵は好ましくは産卵鶏から生産されるが、例えばウズラおよびダチョウから得ることもできる。
【0010】
「NASP富化食物製品」または「高レベルのNASPを有する食物製品」は、食物製品を食べるときに、健康に所望の有益な効果を提供するような濃度でNASPが含まれている食物製品を意味する。実施例1より明らかなように、特に高いレベルのNASPが卵中で測定され得る。NASP富化製品を食べているときに血中のASPレベルが血液1mlあたり0.5FIL単位を超えるように気を付ける。健康な人々は血液1mlあたり0から0.5FIL単位の間の血中ASPレベルを有するようである。
【0011】
SE9000028−2にしたがってNASP生産を刺激するとき、意外で予想外に、極度に高レベルのNASPが鳥の卵中に誘導され得ることがわかった。そのような誘導により、血中のNASPレベルは血液1mlあたり通常0.5〜2FIL単位である(1FIL単位=ラットにおける腸ループ試験(intestine loop test)と呼ばれる試験において流体流出の50%の阻害を提供するNASPの量;SE9000028−2およびそこに引用された参考文献3および4を参照)。SE9000028−2に従ってアミノ酸、糖、およびアミドの異なる(distinct)組合わせを飼料を介して鳥に与えることによって、好ましくは卵黄中に、非常に高レベルのNASPが蓄積され得る。約1,000から約10,000FIL単位/ml程度の高いレベルがそれによって提供される。ここで、予め誘導をしない卵黄中のNASPレベルは、通常、約1FIL単位/mlであることに言及されるべきである(S.ラング(Lange)ら著、ブリティッシュ・ポウルトリ・サイエンス(British Poultry Science(1994)35:615−620)。
【0012】
本発明に従った使用の一つの態様によれば、NASP富化食物製品は、食物にNASPそのものを混合することによって調理されることができ、NASPはNASP富化卵黄から多かれ少なかれ精製された状態で得られたものである。
【0013】
したがって、SE9000028−2に開示されているように、鳥中でNASPの生成を刺激することは可能であり、それから、前記スウェーデン特許に開示されているように、卵黄の消化物をアガロースカラムにのせ、次にこれを生理食塩水、好ましくはリン酸緩衝溶液中のアルファ−メチルグリコシド(alpha−methylglycoside)の溶液で溶出し、NASPを取り出すかまたは濃縮する。次に、その溶出液を投与前に、例えば溶液(ゾル)の状態でさらに精製および製剤され得る。
【0014】
この場合、取り出されたまたは濃縮されたNASPは次に、多かれ少なかれ単離された製品としてそれぞれ飼料または食物に混合され、または、薬剤または他の健康提供製品として調製および製剤されて動物または人に投与され得る。そのような薬剤製品は担体および希釈剤を含む許容された付形剤を用いて当業者に既知の方法で調製され、意図される投与経路に従って固体または液体の状態で製剤される。
【0015】
NASP富化食物製品の調製における本発明に従った使用の他の態様によれば、食物または飼料に混合するために卵黄そのものまたは卵全体が場合により処理した形態で使用される。どの処理も、食物または飼料に混合するための実際的な目的に好適なNASP富化卵黄製品を得るために、磨砕、浸出、抽出、蒸発、限外ろ過、乾燥および他の標準的な操作を含み得る。
【0016】
本発明によれば、NASP摂取量に関する好ましい効果を達成するための新規のルートが開かれる。NASPの効果は、以前知られていたNASPの誘導によって引き起こされる遅延時間を待つことなく誘導され得る卵黄中の高濃度のNASP故に、使用できる。
【0017】
したがって、さらなる側面によれば、本発明は、NASPが富化された鳥の卵の卵黄を提供するための方法であって、卵を得ようとする鳥にSE9000028−2に従ったNASP誘導性飼料を与えることにより、NASPの生成を刺激することを特徴とする方法に関する。特に、本発明の方法は、上述したように、意外で予想外に、極度に高レベルのNASPがキジ類の鳥の卵中に誘導され得るので、前記鳥に飼料を与えるときに適用できる。めんどりに飼料を介して異なる(distinct)組合わせのアミノ酸、糖、およびアミドを与えることにより、非常に高レベル(約100−1,000FIL単位)にNASPが、これも上述したように好ましくは卵黄中において蓄積され得る。これによって、前記特許において開示された発明に従って極度に高レベルのNASPを有する卵黄を調製するという特有の可能性が開かれる。そのような卵黄またはそれらの製品を食物または飼料に混合することによって、NASPは便利で、安全、費用効果的な方法で人または動物に添加され得る。このように、そのような高レベルのNASPが食糧に獲得され得ることは非常に驚くことであり、以前には知られていなかった。これによって、NASPの効果は、上記に言及したように、以前知られていたNASPの誘導によって引き起こされる遅延時間を待つことなく用いられることができる。NASPは口から投与されたときでもその効果を維持することも驚くべきことである。
【0018】
ある状態のためには、高投与量のNASPが必要とされ得る。そのような場合において、卵から取り出されたNASPが食物製品に添加されるか、またはNASPが錠剤または懸濁液の状態で摂取されるように調製されることができる。
【0019】
特に好ましい態様は噴霧乾燥による卵黄粉末の調製を含む。当該食物製品の摂取におけるNASPの有益な効果を得ることが望まれる場合に、そのような生産物は特に様々な食物製品の工業用の処理において好適である。卵黄粉末はソーセージとアイスクリームのように非常に異なる製品にうまく混合され、これによって広範にわたる多様な食事の種類を得ることが可能であろう。
【0020】
卵黄粉末は、たとえば後に薬を調製するために浸出または抽出によりNASP富化、または濃縮されたNASP製品を調製することが望まれる場合に、中間生成物としても最も好適である
NASPの分子量が割合に小さいので、NASPは比較的熱安定性であり、したがって食べるために予め調理する前に食物に含まれることができる。
【0021】
NASPは生細胞膜を介する体液流に対して全般的な調節効果を有することは示したが、このため、下痢状態だけでなく、炎症、浮腫、関節炎、緑内障および、体内および体上の偏頭痛、やけど、および外傷のような体におけるその他の変化のような極度の体液流出によって引き起こされる生理的不均衡または病気様状態による不快感も緩和、治療または予防され得る。本発明による食物製品および薬剤製品は上述のようにそのような目的に使用され得る。
【0022】
本発明は次に示す限定されない実施例によって以下に例証される。
【0023】
実施例1
産卵鶏(約32週齢のホワイトレグホン)に、SE9000028−2に従って構成された産卵鶏用飼料および、飼料1kgで11.4MJであり、飼料1kgに対して170gの未加工タンパク質である伝統的な型の対照飼料を与えた。2週間の誘導期間後、卵が採集された。
【0024】
それぞれのラインから10個の卵が採集され、それら卵の卵黄と卵白は手で分離された。卵黄は等しく大体積のPBS(リン酸緩衝生理食塩水)での希釈に続いて、以前に記述された方法(I.レンロス(Loennroth)、S.ランゲ(Lange)著、Biochimica Biophysica Acta(1986)883:138−144)に従ってアフィニティー・クロマトグラフィーにかけられた。簡単には、PBSで希釈された卵黄は予めPBSで平衡化された「セファロース6B」(スウェーデン、ソレンツナ(Sollentuna)所在のファルマシア・LKB・バイオテクノロジー・AB)が充填された小さなカラムに添加された。PBSで洗浄後、NASPはPBS中で1.0Mのメチル−アルファ−D−グリコシド(methyl−alpha−D−glucoside)で溶出された。PBSに対して透析後、試料はNASPに関してランゲ(Lange)によって記述されたラットにおける腸ループモデル(S.ランゲ著、FEMS Microbiology Letters(1982)15:239、242)に従って試験されるまで−20℃で保存された。
【0025】
実施例2
オストミー手術を受けて約0.5mの残留物(remain)を有する42歳の女性が重症の下痢をひどく患った。平均して、約1.5リットルの腸内容物が1日に4回分泌された。砂糖、クリーム、および1日に4g摂取の乾燥卵黄物質に相当する実施例1の卵黄から作られたアイスクリームを1週間毎日摂取後、排便頻度は1日に1回に減少し、量は約350mlに減少した。3週間の治療の間に、女性の体重は3.5kg増加した。さらに1週間後、彼女は同じ量の通常の卵から同じレシピに従って作られたアイスクリームを食べた。3日以内に、排便頻度および量は試験の前と同じとなった。さらに1週間後、試験は再開され、2日以内に排便は以前の試験中と同じ値まで減少した。
【0026】
実施例3
体重50kgの4頭の子牛が2頭ずつ2つの群に分けられた。対照群の子牛は市販牛乳代用品の形態の子牛栄養剤が配給された。試験ラインにおいては、1日の摂取量が卵黄2個に相当する実施例1の卵黄が混合された。飼料は7日間続けて与えられた。血中のASPレベルが実験の前後に測定された。
【0027】
実施例4
下痢は犬において、特に彼らが摂取する食物を田舎を散歩中に自分で選択する可能性があるような犬において珍しい病気ではない。そのような、1.5歳で体重約40kgのオスのドイツ種シェパード犬は時々重症の下痢および、水を多く含み、周期的に血を含む排便を患った。その犬は断続的に嘔吐もした。獣医が呼ばれ、口径用に錠剤の抗生物質を1週間分処方した。この期間にその犬は少量の市販の犬用乾燥飼料を食べた。下痢の減少は観察されなかった。この抗生物質治療後、犬は実施例6の卵黄粉末が1日に1個の卵黄に相当する量だけ染み込んだ乾燥飼料を4日分与えられた。1昼夜後、犬は固体を排便し、3日後、彼は完全に健康と思われた。その時まで、その犬の飼い主はそのような早い回復を見たことが無かった。
【0028】
実施例5
実施例1の試験ラインより得られた卵は割られ、卵分離器具中で分離された。卵黄と卵白はそれぞれ別々に採集された。卵黄は「アンヒドロ」(Anhydro)噴霧乾燥機中で、入口温度150℃および出口温度約75℃で噴霧乾燥された。
【0029】
卵黄粉末は採集され、完全に乾燥した後、噴霧乾燥機の壁面に付着した粉末が採集された。これらの壁面堆積物の乾燥チャンバーにおける平均滞留時間は4時間であった。卵粉末は水に溶解され、ASPが既知のアガロースカラムを用いた方法で採集された。溶出液は希釈され、ASP含量が測定された。
【0030】
1:100に希釈したときのFIL単位
卵粉末、平均試料 X
乾燥チャンバー壁面より得られた卵粉末 Y
したがって、食品技術の視点から見ると、NASPは十分に熱安定性である。
【0031】
技術的効果
本発明により、完全に新規で以前に知られていない可能性が、NASPを完全に新規で以前に知られていない程度の独立性をもって投与するために開かれる。規定食は単調に感じられやすいという事実のために、PCT出願PCT/SE97/01918(WO98/21978)に開示されたNASPの誘導が長時間維持されることは難しいであろう。本発見によって、非常に味が良く、良く賛同される食物製品が適度の処理費用で調理され得る。病気の経過が長い場合またはNASP誘導性食物に対する反応が弱い場合、NASPは予め決定される、生活の質または生理的反応効果に対する所望の効果に合った、より多いまたはより少ない服用量を有する食糧の形態で投与され得る。長期永続的な投与の場合に、異なる味や食事の特徴を有する非常に多くの製品が用意され得るので、食物に対する強い嫌悪感(むかつき)を避けることができる。食物製品は、半既製食物または完成した食事として、または薬の調製またはNASP濃縮物の製造において未加工製品として好適な商品として工業的に調製され得る。濃縮物は卵黄または好ましくは卵黄粉末から抽出または浸出によって取り出すことができる。
Claims (24)
- 100〜10,000FIL単位/mlに相当するレベルの天然抗分泌タンパク質(NASP)を有する卵黄。
- 1,000〜10,000FIL単位/mlに相当するNASP含量を有する請求項1に記載の卵黄。
- キジ類の鳥の卵に由来する請求項1または2に記載の卵黄。
- NASP富化機能性食物製品の調理における請求項1ないし3の何れか1項に記載の卵黄の使用。
- 極度の体液流出によって引き起こされる病気様状態の治療および予防のための薬剤製品の調製における請求項1ないし3の何れか1項に記載の卵黄の使用。
- 純粋なまたは濃縮した状態でNASP富化卵黄から取り出されたNASPそのものの請求項4または5に記載の使用。
- 該卵黄がそのまま、または磨砕、浸出、抽出、蒸発、膜ろ過、乾燥および同様の標準的な操作のような処理により得られる形態で用いられることを特徴とする請求項4または5に記載の使用。
- 該卵黄が、産卵する鳥にNASP誘導性飼料を与えることにより提供されることを特徴とする請求項4ないし7の何れか1項に記載の使用。
- NASP誘導が、アミノ酸、糖、およびアミドをNASPの生成が刺激されるような量および割合で飼料に混合することによって行われることを特徴とする請求項8に記載の使用。
- NASP誘導が、NASPの生成を刺激する酵素活性を有する生産物を飼料に混合することによって行われることを特徴とする請求項8に記載の使用。
- 該酵素活性を有する生産物が麦芽配合穀物であることを特徴とする請求項10に記載の使用。
- 天然抗分泌タンパク質(NASP)が富化された卵黄を産卵する鳥から提供するための方法であって、該鳥にNASP誘導性飼料を与えることを特徴とする方法。
- 該鳥がキジ類の鳥であることを特徴とする請求項12に記載の方法。
- 該NASP誘導性飼料が、NASPの生成が刺激されるような量でアミノ酸、糖、およびアミドを含有することを特徴とする請求項12または13に記載の方法。
- 該飼料がNASPの生成を刺激する酵素活性を有する生産物を含むことを特徴とする請求項12または13に記載の方法。
- 該酵素活性を有する生産物が麦芽配合穀物であることを特徴とする請求項15に記載の方法。
- 請求項1ないし3の何れか1項に記載の卵黄または、卵黄から多かれ少なかれ精製した状態の天然抗分泌タンパク質(NASP)を含むことを特徴とする、高レベルのNASPを有する食物製品。
- 該食物製品を調製するとき、NASPの源として請求項1ないし3の何れか1項に記載のNASP富化卵黄またはそれらを処理したものを食物製品に混合することによって、高レベルのNASPが得られていることを特徴とする請求項17に記載の食物製品。
- 該食物製品を調製するとき、請求項1ないし3の何れか1項に記載のNASP富化卵黄より得られる純粋なまたは濃縮したNASPそのものを食物製品に添加することによって、高レベルのNASPが得られていることを特徴とする請求項17に記載の食物製品。
- 卵黄そのものより成ることを特徴とする請求項17に記載の食物製品。
- パンケーキ、オムレツ、アイスクリーム、固ゆでまたは半熟卵より成ることを特徴とする請求項17ないし19の何れか1項に記載の食物製品。
- 慣用の付形剤および補助剤に加えて、請求項1ないし3の何れか1項に記載のNASP富化卵黄由来の天然抗分泌タンパク質(NASP)を含むことを特徴とする、極度の体液流出によって引き起こされる病気様状態の治療および予防のための薬剤製品。
- 請求項1ないし3の何れか1項に記載のNASP富化卵黄またはそれらを処理したもの、または卵黄より得られる多かれ少なかれ精製されたNASPを食物または飼料に配合することを特徴とする、請求項17ないし21の何れか1項に記載の高レベルの天然抗分泌タンパク質(NASP)を有する食物製品を調理する方法。
- 卵黄の処理された状態が磨砕、浸出、抽出、蒸発、膜ろ過、乾燥および同様の標準的な操作によって得られることを特徴とする請求項23に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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