JP4338970B2 - ２−置換複素環式化合物および多剤耐性を治療することにおけるそれらの使用 - Google Patents

Description

【０００１】
（発明の分野）
本発明は多剤耐性を治療するための化合物、並びにその調製方法および使用方法に関する。より詳細には、本発明は、癌患者が多剤耐性を生じる大きな原因と考えられている、細胞輸送タンパク質であるＰ−糖タンパク質若しくはＭＲＰ１、またはその両方を制御する化合物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
「薬剤耐性」とは、疾患（例えば、癌）が治療薬に応答しなくなるときの状況を意味する。薬剤耐性は、疾患が治療薬に対してもともと全く応答しないような内因性か、または以前は応答性であった疾患が、一種若しくは複数種の治療薬に対して応答しなくなるような後天性であることもある。「多剤耐性」は、疾患が機能的に関連しないか、構造的に関連しないか、またはその両方であり得るような種々の薬剤に対して耐性がある薬剤耐性の一種である。多剤耐性は、癌、並びに細菌性疾患、ウィルス性疾患、原生動物性（protozoal）疾患、およびカビ性疾患などの他の病気にも付随する問題である。
癌患者に多剤耐性が生じる原因は、多くの癌細胞が、高濃度の膜貫通輸送タンパク質、例えば、多面性糖タンパク質（Pleiotropic-glycoprotein）（Ｐｇｐとしても知られるＰ−糖タンパク質、ｇｐ−１７０、またはＭＤＲ１）、および高濃度のＭＲＰ１を発現することにある（ボースト（Borst,P.）の「多剤耐性：解決可能な問題（Multidrug resistance : A solvable problem?）」、癌研究年報（Annals of Oncology）、１０、補完４、Ｓ１６２−Ｓ１６４、（１９９９年）を参照のこと）。アデノシン−トリホスフェート駆動プロセスにおいて、この輸送タンパク質は、害悪から細胞を保護するために疎水性化合物（例えば、癌の治療に有用な細胞毒性薬剤である、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、ビンクリスチン、およびＴＡＸＯＬ（タキソール）（登録商標））を細胞から排出する。輸送タンパク質は、化合物が細胞に致死的な影響をもたらす前に、化合物を細胞から取り除く（リグランド（Legrand）ら、「ＭＲＰ１およびＰｇｐの同時活性は、ダウノルビシンに対する生体外耐性および成人急性骨髄性白血病における生体内耐性に関連する（Simultaneous Activity of MRP１ and Pgp Is Correlated With In Vitro Resistance to Daunorubicin and With In Vivo Resistance in Adult Acute Myeloid Leukemia）」、ブラッド（Blood）、第４９巻、第３号、１０４６〜１０５６頁、（１９９９年）；および；ズー（Zhu,B.T.）；「多剤輸送体としてのＰ−糖タンパク質の作用機構に対する新規な仮説（A Novel Hypothesis for the Mechanism of Action of P-glycoprotein as a Multidrug Transporter）」、発癌分子（Molecular Carcinogenesis）、２５巻、１〜１４頁、（１９９９年）を参照のこと）。これら二種のタンパク質のどちらが多剤耐性にとってより重要であるかは現在知られておらず、実際に重要なタンパク質の種類（一種または複数種）は癌の種類および癌を治療するために使用される特定の一種または複数種の薬剤に依存している可能性があるが、Ｐｇｐは薬剤治療を必要とするヒトの癌のほぼ５０％において高度に発現していることが知られている。従って、Ｐｇｐは多剤耐性の主な原因であると考えられている。
【０００３】
別の種類の多剤耐性、例えば、抗菌物質、抗ウィルス物質、および抗カビ物質に対する多剤耐性も、Ｐｇｐなどと同様の輸送タンパク質の作用によって生じる場合がある（「薬化学における年報（Annual Reports on Medicinal Chemistry）−３３；第ＩＩＩ項、癌および感染疾患（Cancer and Infectious Diseases）」、プラトナー（Plattner,J.）編、アカデミックプレス（Academic Press）、第１２章、１２１〜１３０頁、（１９９８年）を参照のこと）。
さらにＰｇｐはまた、消化管、肝臓、腎臓、および脳に高濃度で発現し、それによってＰｇｐは多くの薬剤の生物学的利用度に対して重大な薬学的関門を表す（アムダカー（Amudkar）ら、「多剤輸送体の生化学、細胞学、および薬理学的側面（Biochemical,Cellular,and Pharmacological Aspects of the Multidrug Transporter）」、薬理毒物学の年報（Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.）、第３９巻、３６１〜３９８頁、（１９９９年）を参照のこと）。例えば、多くの滋養剤および薬剤の経口投与における生物学的利用度は、消化管に存在するＰｇｐの作用によって負の影響を受ける。「経口投与における生物学的利用度」とは、経口投与され、消化管を通って輸送され、血流に入る薬剤または滋養剤の能力を意味する。さらに、Ｐｇｐは、多くの薬剤の血液脳関門を通る浸透に負の影響を与える。
【０００４】
（発明の概要）
本発明は、多剤耐性（「ＭＤＲ」）の治療または予防に有用な新規化合物に関する。より詳細には、これらの化合物はＰ−糖タンパク質を媒介とするＭＤＲおよびＭＲＰ１を媒介とするＭＤＲの治療または予防に有用である。本発明は、さらにこれらの化合物を含む組成物に関する。本発明は、さらに化合物および組成物の調製方法および使用方法に関する。本発明の化合物および組成物は、多剤耐性細胞の治療、多剤耐性の発症の予防、および多剤耐性の化学治療法における使用に非常に好適である。
【０００５】
（詳細な説明）
本開示全般にわたり、出版物および特許を参照する。本明細書において引用した米国特許は、すべて参照として本明細書に組み込まれている。
本明細書において用いられる全ての百分率、比率、割合は、特に明記しない限り重量に基づく。
【０００６】
用語の定義および用法
次のリストは本明細書において使用する定義である。
「芳香族基」とは、単環式または多環式環状構造を有する基を意味する。単環式芳香族基は、環に４個から１０個、好ましくは４個から７個、さらに好ましくは４個から６個の炭素原子を含有する。好ましい多環式環状構造は、２個または３個の環を有する。２個の環を有する多環式構造は、通常、環に８個から１２個の炭素原子、好ましくは８個から１０個の炭素原子を有する。多環式芳香族基には、環の全てではないが少なくとも一つは芳香族である基が含まれる。
「炭素環式基」とは、飽和または不飽和炭化水素環を意味する。炭素環式基は芳香族ではない。炭素環式基は、単環式または多環式である。多環式炭素環式基は、融合、スピロ、または架橋環系であり得る。単環式炭素環式基は、環に４個から１０個、好ましくは４個から７個、さらに好ましくは５個から６個の炭素原子を有する。二環式炭素環式基は、環に８個から１２個、好ましくは９個から１０個の炭素原子を含有する。
【０００７】
「担体」とは、被験者（すなわち、哺乳動物）に投与するのに好適であり、本発明に従う活性化合物との組み合わせが可能である一つまたは複数の物質を意味する。担体には、固体および液体の希釈剤、屈水性誘発物質、表面活性剤、およびカプセル化物質が含まれる。
「化学感受性増強剤」とは、薬剤耐性細胞を細胞毒性薬剤の作用に対して高感度化する非細胞毒性化合物を意味する。本願で使用するとき、「化学感受性増強剤」という用語は、本発明の活性化合物を排除する。
「ハロゲン原子」とは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩを意味する。
「複素芳香族基」とは、環に炭素原子および１個から４個のへテロ原子を含有する芳香族基を意味する。単環式複素芳香族基は、環に４個から１０個、好ましくは４個から７個、さらに好ましくは４個から６個の構成原子を含有する。好ましい多環式環状構造は、２個または３個の環を有する。２個の環を有する多環式構造は、通常、環に８個から１２個の構成原子、好ましくは８個から１０個の構成原子を有する。多環式複素芳香族基には、環の全てではないが少なくとも一つが複素芳香族である基が含まれる。
【０００８】
「へテロ原子」とは、例えば、複素環式基の環または複素基の鎖に存在する炭素原子以外の原子を意味する。へテロ原子は、イオウ、リン、窒素、および酸素原子から成る群から選択されることが好ましい。一つ超過のヘテロ原子を含有する基は、異なるヘテロ原子を含有してもよい。
「複素環式基」とは、環に炭素原子および一つまたは複数のへテロ原子を含有する飽和または不飽和環状構造を意味する。複素環式基は芳香族ではない。複素環式基は、単環式または多環式である。多環式複素芳香族基は、融合、スピロ、または架橋環系であることが可能である。単環式複素環式基は、環に４個から１０個、好ましくは４個から７個、さらに好ましくは５個から６個の構成原子（つまり、炭素原子および少なくとも１個のへテロ原子の両方を含む）を含有する。二環式複素環式基は、環に８個から１８個、好ましくは９個または１０個の構成原子を含有する。
【０００９】
「複素基」とは、炭素原子および少なくとも１個のへテロ原子を含む非水素構成原子の飽和または不飽和鎖を意味する。複素基は、通常、１個から２５個の構成原子を有する。鎖は、好ましくは１個から１２個、さらに好ましくは１個から１０個、最も好ましくは１個から６個の構成原子を含有する。鎖は直鎖状または分枝状であってよい。好ましい分枝複素基は、一つまたは二つの分枝を有し、好ましくは一つの分枝を有する。好ましい複素基は飽和している。不飽和複素基は、一つ若しくは複数の二重結合、または一つ若しくは複数の三重結合、またはその両方を有する。好ましい不飽和複素基は、一つ若しくは二つの二重結合、または一つの三重結合を有する。さらに好ましくは、不飽和複素基は一つの二重結合を有する。
「炭化水素基」は、１個から２５個の炭素原子、好ましくは１個から１２個の炭素原子、より好ましくは１個から１０個の炭素原子、最も好ましくは１個から８個の炭素原子の鎖を意味する。炭化水素基は、直鎖または分枝鎖構造を有してもよい。好ましい炭化水素基は、一つまたは二つの分枝を有し、好ましくは一つの分枝を有する。好ましい炭化水素基は飽和している。不飽和炭化水素基は、一つ若しくは複数の二重結合、一つ若しくは複数の三重結合、またはこれらの組み合わせを有する。好ましい不飽和炭化水素基は、一つ若しくは二つの二重結合、または一つの三重結合を有し、さらに好ましい不飽和炭化水素基は、一つの二重結合を有する。
【００１０】
「ＩＣ₅₀」とは、癌細胞の成長を５０％阻害するか、または活性を５０％阻害するのに必要な薬剤の濃度を意味する。
「ＭＤＲ」とは多剤耐性を意味する。
本明細書で使用するとき「非経口」には、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、骨液内、胸骨内、髄膜下、肝臓内、病巣内、および頭蓋内の注射または注入技術が含まれる。
「Ｐｇｐ」はＰ−糖タンパク質を意味する。
「製薬上許容可能な」とは、ヒトまたはヒト以外の哺乳動物に使用するのに好適であることを意味する。
「保護基」とは、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、または−ＮＨ₂部分の活性水素を置換することにより、この部分における望ましくない副反応を防ぐ基である。有機合成において保護基を使用することは、当該技術分野において周知である。保護基の例は、「有機合成における保護基（Protecting Groups in Organic Synthesis）」（グリーン（Greene,T.W.）およびワッツ（Wuts,P.G.M.）、第２版、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ（John Wiley & Sons,Inc.）、１９９１年）に記載されている。ヒドロキシル部分の好ましい保護基には、シリルエーテル類、アルコキシメチルエーテル類、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、エステル類、および置換または非置換ベンジルエーテル類が含まれる。他の好ましい保護基としては、カルバメート類が挙げられる。
【００１１】
「被験者」とは、哺乳動物（ヒトが好ましい）などの生きた脊椎動物を意味する。
「置換芳香族基」とは、環内の炭素原子に結合した水素原子の一つまたは複数が別の置換基で置換されている芳香族基を意味する。好ましい置換基としては、メチル基などの炭化水素基、メトキシ基などのアルコキシ基を含む複素基が挙げられる。置換基は、環のオルト、メタ、若しくはパラの位置、またはこれらのいずれかの組み合わせで置換することが可能である。
「置換炭素環式基」は、環の炭素原子に結合した一つまたは複数の水素原子が別の置換基で置換されている炭素環式基を意味する。好ましい置換基としては、アルキル基（例えば、メチル基）などの炭化水素基およびアルコキシ基（例えば、メトキシ基）などの複素基が挙げられる。
【００１２】
「置換複素芳香族基」とは、環内の炭素原子に結合した一つまたは複数の水素原子が別の置換基で置換されている複素芳香族基を意味する。好ましい置換基としては、メチル基などのアルキル基を含む一価の炭化水素基、およびメトキシ基などのアルコキシ基を含む一価の複素基が挙げられる。
「置換複素環式基」とは、環内の炭素原子に結合した一つまたは複数の水素原子が別の置換基で置換されている複素環式基を意味する。好ましい置換基としては、メチル基などのアルキル基を含む一価の炭化水素基、およびメトキシ基などのアルコキシ基を含む一価の複素基が挙げられる。置換複素環式基は芳香族ではない。
「置換複素基」とは、鎖内の炭素原子に結合した一つまたは複数の水素原子が別の置換基で置換されている複素基を意味する。好ましい置換基としては、メチル基などのアルキル基を含む一価の炭化水素基、およびメトキシ基などのアルコキシ基を含む一価の複素基が挙げられる。
【００１３】
「置換炭化水素基」とは、鎖内の炭素原子に結合した一つまたは複数の水素原子が別の置換基で置換されている炭化水素基を意味する。好ましい置換基としては、一価の芳香族基、一価の置換芳香族基、メチル基などのアルキル基を含む一価の炭化水素基、ベンジルなどの一価の置換炭化水素基、およびメトキシ基などのアルコキシ基を含む一価の複素基が挙げられる。
「基質ポテンシャル」とは、多剤耐性を治療する際に使用される化合物が、多剤耐性を効果的に予防または修復する前に、細胞輸送タンパク質によって細胞の外に輸送される確度を意味する。
「輸送タンパク質」とは、細胞から細胞膜を通って細胞毒性物質を取り除く作用をするタンパク質を意味する。輸送タンパク質としては、Ｐ−糖タンパク質、ＭＲＰ１などが挙げられる。
【００１４】
「多剤耐性の治療」とは、非耐性細胞において多剤耐性が発症するのを予防すること、多剤耐性細胞の治療薬、予防薬、またはその両方に対する感受性を増加若しくは修復することを意味する。
「治療」とは、１）疾患を予防すること（すなわち、疾患の臨床症状が発症しないようにすること）、２）疾患を抑制すること（すなわち、疾患の臨床症状が発症するのを抑えること）、３）疾患を緩和すること（すなわち、臨床症状を弱めること）、およびこれらの組み合わせを意味する。
「ろう」とは、低温で融解する高分子量の有機混合物または化合物を意味し、室温では固体であって、グリセリドを含有しないこと以外は一般に油脂と類似の組成である。
【００１５】
本発明に使用される活性化合物
活性化合物は以下の構造を有することが可能である：
【００１６】
【化３】

【００１７】
式中、ｗは０から約６であり、ｘは０から約１０であり、ｔは０から約６である。好ましくはｘは０である。好ましくはｔは０から約３である。
Ｒ¹は水素原子、ヒドロキシル基、炭化水素基、置換炭化水素基、複素基、置換複素基、炭素環式基、置換炭素環式基、複素環式基、置換複素環式基、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される。好ましくは、Ｒ¹は水素原子およびヒドロキシル基から成る群から選択される。
Ｒ²およびＲ³は共に結合して、環に約４個から約９個の構成原子、好ましくは約５個から約６個の構成原子を有する置換複素環式基を形成する。本発明の好ましい実施形態において、置換複素環式基は、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、置換複素芳香族基、置換炭化水素基（該置換炭化水素基は、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される基で置換される）、および置換複素基（該置換複素基は、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される基で置換される）から成る群から選択される基で置換される。
【００１８】
置換複素環式基は任意選択的に、ＯおよびＮＲ¹⁰から成る群から選択される一つまたは複数の構成部分を含有し、ここで、Ｒ¹⁰は、水素原子、炭化水素基、置換炭化水素基、複素基、置換複素基、炭素環式基、置換炭素環式基、複素環式基、置換複素環式基、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基および置換複素芳香族基から成る群から選択される。Ｒ¹⁰の好適な置換炭化水素基としては、メチレニル−ジフェニルが挙げられる。Ｒ¹⁰の好適な置換芳香族基としては、フェニルメチルおよびフェニルメトキシが挙げられる。Ｒ¹⁰の好適な複素芳香族基としては、ピリジルが挙げられる。
Ｒ¹⁰の好適な置換複素基は、式−（ＣＲ¹ ₂）_w−Ｄ¹−Ｏ_y−Ｄ² _z−Ｒ¹⁵を有し、ここで、ｗは０から約６であり、ｙは０または１であり、ｚは０または１である。好ましくはｗおよびｙは両方０である。
【００１９】
Ｒ¹⁵は、炭化水素基、置換炭化水素基、複素基、置換複素基、炭素環式基、置換炭素環式基、複素環式基、置換複素環式基、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される。Ｒ¹⁵は、好ましくは以下から成る群から選択される。
【００２０】
【化４】

【００２１】
ここで、ａは少なくとも約２であり、ｂは少なくとも約２であり、ｃは約１から約３であり、ｄは約１から約３である。好ましくは、ａおよびｂは各々約３から約１０である。より好ましくは、ａおよびｂは各々約３である。
Ｒ¹²およびＲ¹³は、炭化水素基および置換炭化水素基から成る群から各々独立して選択される。好ましくは、Ｒ¹²およびＲ¹³は、アルコキシ基などの置換炭化水素基である。好ましいアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、およびブトキシが挙げられる。
各々のＲ¹⁴は、ＣＨおよびヘテロ原子から成る群から独立して選択される。好ましくは、ヘテロ原子は窒素である。より好ましくは、各々のＲ¹⁴はＣＨである。
【００２２】
Ｄ¹およびＤ²は、−Ｃ（Ｏ）−および−ＮＲ¹⁶−から成る群から各々独立選択され、ここで、Ｒ¹⁶は水素原子およびＲ¹⁵から成る群から選択される。
Ｒ²およびＲ³によって形成される置換複素環式基は、好ましくは置換ピペリジルまたは置換ピペラジニルである。
Ｒ⁴は、−Ｓ（Ｏ）₂−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ（Ｏ）−、および−ＣＨ（Ｒ¹）−から成る群から選択される。
Ｒ⁵は、−ＮＲ⁶（Ｒ⁷）−および−Ｏ_rＲ⁶−から成る群から選択され、ここで、ｒは０または１である。好ましくは、Ｒ⁵は−Ｏ_rＲ⁶である。
Ｒ⁶は、炭化水素基、置換炭化水素基、複素基、置換複素基、炭素環式基、置換炭素環式基、複素環式基、置換複素環式基、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される。好ましくは、Ｒ⁶は芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される。
本発明の好ましい実施形態において、Ｒ⁶は以下の式の複素芳香族基である：
【００２３】
【化５】

【００２４】
ここで、各々のＸは、ＣＨおよびへテロ原子から成る群から独立して選択され、ただし、少なくとも一つのＸはヘテロ原子である。好ましくは、ヘテロ原子は窒素である。好ましくは、一つのＸはヘテロ原子である。Ｒ⁶の複素芳香族基の例としては、キノリルおよびイソキノリル基が挙げられる。Ｒ⁶の好ましいキノリル基としては、４−キノリル、５−キノリル、６−キノリル、７−キノリル、および８−キノリルが挙げられる。より好ましくは、Ｒ⁶は５−キノリルである。
Ｒ⁷は、水素原子およびＲ⁶から成る群から選択される。
Ｒ⁴が−Ｓ（Ｏ）₂−であり、Ｒ⁵が−Ｏ_rＲ⁶である好ましい化合物を以下の表１に示す。
【００２５】
【表１】

【００２６】
Ｒ⁴が−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｒ⁵が−Ｏ_rＲ⁶である好ましい化合物を以下の表２に示す。
【００２７】
【表２】

【００２８】
Ｒ⁴が−Ｃ（Ｏ）−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｒ⁵が−Ｏ_rＲ⁶である好ましい化合物を以下の表３に示す。
【００２９】
【表３】

【００３０】
Ｒ⁴が−ＣＨ（Ｒ¹）−であり、Ｒ⁵が−Ｏ_rＲ⁶である好ましい化合物を以下の表４に示す。
【００３１】
【表４】

【００３２】
Ｒ⁸は、炭化水素基、置換炭化水素基、複素基、置換複素基、炭素環式基、置換炭素環式基、複素環式基、置換複素環式基、芳香族基、置換芳香族基、複素芳香族基、および置換複素芳香族基から成る群から選択される。
Ｒ⁹は水素原子および炭化水素基から成る群から選択される。
Ａは約４個から約９個の構成原子を有する置換複素環式基である。好ましくは、Ａは約４個から約７個の構成原子を有する。より好ましくは、Ａは約５個から約６個の構成原子を有する。Ａは、ＯおよびＳ、好ましくはＯから成る群から選択される一つまたは複数の追加のへテロ原子を含有してよい。Ａは１個の窒素原子のみを含有する。
【００３３】
本発明の別の実施形態において、化合物は、前記構造の光学異性体、ジアステレオマー、エナンチオマー、製薬上許容可能な塩、生加水分解性アミド、生加水分解性エステル、または生加水分解性イミド、またはこれらの組み合わせであり得る。
本発明の活性化合物は、少なくとも一つの輸送タンパク質を阻害する。活性化合物は、好ましくはＰｇｐまたはＭＲＰ１を阻害する。より好ましくは、活性化合物はＰｇｐおよびＭＲＰ１の両方を阻害する。本発明の好ましい実施形態において、活性化合物はＰｇｐを阻害し、Ｐｇｐに対して低い基質ポテンシャルを有する。本発明の好ましい別の実施形態において、活性化合物はＭＲＰ１を阻害し、ＭＲＰ１に対して低い基質ポテンシャルを有する。本発明の最も好ましい実施形態において、活性化合物はＰｇｐおよびＭＲＰ１の両方を阻害し、活性化合物はＰｇｐおよびＭＲＰ１の両方に対して低い基質ポテンシャルを有する。
【００３４】
化合物が輸送タンパク質を阻害する程度は、化合物が、多剤耐性細胞に対する薬剤の感受性を修復する効力を数量化することによって測定可能である。活性化合物が薬剤の感受性を修復する効力を数量化する方法は、当業者にとっては過度の実験をすることなく容易に利用可能である（米国特許第５，９３５，９５４号および同第５，２７２，１５９号（この方法を開示する目的で本明細書に参考として組み入れる）を参照のこと）。薬剤の抗増殖作用の修復を測定するための既知のいずれの定量法も、本発明の化合物を試験するのに用いることが可能である。これらの定量法は、特定の薬剤に耐性があり、ＰｇｐおよびＭＲＰ１のいずれか一つまたは両方が存在することを特徴とする細胞系を使用する。これらの細胞系には、Ｌ１２１０、ＨＬ６０、Ｐ３８８、ＣＨＯ、およびＭＣＦ７が挙げられる。あるいは、耐性細胞系は、当業者にとっては過度の実験をすることなく容易に利用可能な方法によって増殖可能である（チャウダリー（Chaudhary）ら、「異なる化学療法剤への過渡曝露によるヒト細胞における多剤耐性の誘導（Induction of Multidrug Resistance in Human Cells by Transient Exposure to Different Chemotherapeutic Agents）」、国際癌研究所誌（Journal of the National Cancer Institute）、第８５巻、第８号、６３２〜６３９頁、（１９９３年）を参照のこと）。その細胞系は、次いで耐性を示す薬剤（例えば、ＴＡＸＯＬ（タキソール）（登録商標））の存在下または非存在下で本発明の化合物に晒される。活性化合物および薬剤の両方で処理された細胞の生存率を、薬剤のみで処理された細胞の生存率と比較可能である。
【００３５】
活性化合物はまた、好ましくはＰｇｐまたはＭＲＰ１に対して低い基質ポテンシャルを有する。より好ましくは、活性化合物はＰｇｐおよびＭＲＰ１の両方に対して低い基質ポテンシャルを有する。輸送タンパク質に対する基質ポテンシャルは、ＰｇｐおよびＭＲＰ１ポンプにおけるＡＴＰアーゼの活性度を測定する定量法を用いて測定可能である（例えば、下記の参照例４を参照のこと）。
活性化合物の蓄積量を数量化する方法は、当業者にとっては過度の実験をすることなく容易に利用可能である（米国特許第５，２７２，１５９号（蓄積量を数量化する方法を開示する目的で本明細書に参考として組み入れる）を参照のこと）。これらの定量法は、特定の化学療法剤に耐性があり、ＰｇｐおよびＭＲＰ１のいずれか一つまたは両方が存在することを特徴とする細胞系を使用する。細胞系を、標識された活性化合物（例えば、放射能または蛍光標識されたもの）に晒し、活性化合物の蓄積量を経時的に測定する。細胞に蓄積された活性化合物の量を、これらのタンパク質によって容易に輸送される化合物、例えば、標識されたタキソールと比較する。
【００３６】
本発明の組成物
本発明はさらに組成物に関する。組成物は種々の症状または疾患状態を治療するのに使用可能である。組成物は、好ましくは多剤耐性を治療または予防するために投与される薬学的組成物である。これには基本的な医薬品製剤の技術を使用するが、この技術には、例えば、「レミントンの製薬科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」（マック出版社（Mack Publishing Company）、ペンシルベニア州イーストン、１９９０年）および米国特許第５，０９１，１８７号に開示されているものがあり、これらの文献は本明細書に参考として組み入れる。
組成物は、成分（Ａ）の上述した活性化合物、および成分（Ｂ）の担体を含む。組成物は、治療薬などの成分（Ｃ）の任意成分をさらに含んでいてもよい。
【００３７】
成分（Ｂ）は担体である。「担体」とは、哺乳動物に投与するのに好適な、一つまたは複数の適合性物質である。「適合性」とは、通常の使用状態において、組成物の効力を実質的に減らすと考えられる相互作用を起こさず、組成物の成分が成分（Ａ）および他の各々の成分と混合可能であることを意味する。担体は、治療する哺乳動物に処方するのに好適となるように、十分に純度の高いもの、および十分に毒性の低いものでなくてはならない。担体は、本明細書に記述したように、意図した使用に応じて不活性であってもよいし、または医薬品としての有用性、化粧品としての有用性、若しくはその両方を有していてもよい。
成分（Ｂ）の担体の選択は、成分（Ａ）が投与されると考えられる経路および組成物の形態に基づく。組成物は、例えば、全身投与（経口、直腸、鼻腔、舌下、口腔、若しくは非経口など）または局所投与（部分的経皮投与、点眼、リポソームデリバリーシステム、若しくはイオン導入など）に好適な多様な形態を取ることが可能である。
【００３８】
全身用組成物
全身投与用の担体は、通常（ａ）希釈剤、（ｂ）潤滑剤、（ｃ）結合剤、（ｄ）崩壊剤、（ｅ）着色剤、（ｆ）香料、（ｇ）甘味剤、（ｈ）酸化防止剤、（ｊ）防腐剤、（ｋ）流動促進剤、（ｍ）溶剤、（ｎ）懸濁剤、（ｏ）界面活性剤、これらの組み合わせ、およびその他の成分から成る群から選択される一つまたは複数の成分を含有する。
成分（ａ）は希釈剤である。好適な希釈剤には、糖類（グルコース、ラクトース、ブドウ糖、スクロースなど）、多価アルコール類（プロピレングリコールなど）、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、およびマルトデキストリンが挙げられる。組成物中の成分（ａ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００３９】
成分（ｂ）は潤滑剤である。好適な潤滑剤の例には、固体の潤滑剤（シリカ、タルク、ステアリン酸並びにそのマグネシウム塩およびカルシウム塩、硫酸カルシウムなど）および液体の潤滑剤（ポリエチレングリコール、植物油など）が挙げられる。植物油には、ピーナッツオイル、綿実油、ゴマ油、オリーブオイル、コーン油、およびカカオ油などがある。組成物中の成分（ｂ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｃ）は結合剤である。好適な結合剤には、ポリビニルピロリドン、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプン類（コーンスターチ、ポテトスターチなど）、ゼラチン、トラガカント、セルロースおよびその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなど）、カルボマー、プロビドン、アカシア、グアーゴム、キサンタンゴムが挙げられる。組成物中の成分（ｃ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００４０】
成分（ｄ）は崩壊剤である。好適な崩壊剤には、寒天、アルギン酸およびそのナトリウム塩、発泡性混合物、クロスカルメロース、クロスポビドン、カルボキシメチルデンプンナトリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン、粘土、およびイオン交換樹脂が挙げられる。組成物中の成分（ｄ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｅ）は、ＦＤ＆Ｃ色素のような着色剤である。組成物中の成分（ｅ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｆ）は、メンソール、ペパーミント、および果実フレーバのような香料である。組成物中の成分（ｆ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００４１】
成分（ｇ）は、サッカリンおよびアスパルテームのような甘味剤である。組成物中の成分（ｇ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｈ）は、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、およびビタミンＥなどの酸化防止剤である。組成物中の成分（ｈ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｊ）は、例えば、フェノール、パラヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル類、安息香酸およびその塩、ホウ酸およびその塩、ソルビン酸およびその塩、クロロブタノール、ベンジルアルコール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、および硝酸フェニル水銀、ニトロメルソール、塩化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジニウム、メチルパラベン、エチルパラベン、およびプロピルパラベンなどの防腐剤である。特に好ましい防腐剤は、安息香酸の塩、塩化セチルピリジニウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、および安息香酸ナトリウムである。組成物中の成分（ｊ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００４２】
成分（ｋ）は、シリコーンジオキシドのような流動促進剤である。組成物中の成分（ｋ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｍ）は溶剤（例えば、水、等張食塩水、オレイン酸エチル、アルコール類（エタノールなど）、グリセリン、クリマホー（cremaphor）、グリコール類（ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、および緩衝液（リン酸塩、酢酸カリウム、ホウ酸、炭酸、リン酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、酢酸、安息香酸、乳酸、グリセリン酸、グルコン酸、グルタル酸、グルタミン酸など））である。組成物中の成分（ｍ）の量は、通常約１％から約９９％である。
成分（ｎ）は懸濁剤である。好適な懸濁剤には、ＦＭＣコーポレーション（FMC Corporation）（ペンシルベニア州フィラデルフィア）から市販されているアビセル（Avicel）（登録商標）ＲＣ−５９１およびアルギン酸ナトリウムが挙げられる。組成物中の成分（ｎ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００４３】
成分（ｏ）は界面活性剤（例えば、レシチン、ポリソルベート８０、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンモノアルキルエーテル類、スクロースモノエステル類、ラノリンエステル類、およびラノリンエーテル類）である。好適な界面活性剤は、当該技術分野において既知であり、例えば、アトラス・パウダー社（Atlas Powder Company）（デラウェア州ウィルミントン）からトゥイーン（TWEENS）（登録商標）として市販されている。好適な界面活性剤は、「米国化粧品工業会化粧品成分ハンドブック（C.T.F.A.Cosmetic Ingredient Handbook）」（５８７〜５９２頁、１９９２年）、「レミントンの製薬科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」（第１５版、３３５〜３３７頁、１９７５年）、および「マカッチャン第１巻、乳化剤および洗剤（Emulsifiers & Detergents）」（北米版、２３６〜２３９頁、１９９４年）に開示されている。組成物中の成分（ｏ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００４４】
上述した担体成分は代表的なものであり、限定するものではない。当業者は、異なる担体成分を加えてもよいし、または上記担体成分の代わりに用いてもよいことを認識するであろう。当業者は、過度の実験を行わなくても、全身用組成物の適切な担体成分を選択可能である。
非経口的投与用組成物は、通常、（Ａ）約０．１％から約１０％の活性化合物、並びに（ａ）希釈剤および（ｍ）溶剤を含む（Ｂ）約９０％から約９９．９％の担体を含む。好ましくは、成分（ａ）はプロピレングリコールであり、（ｍ）はエタノール、オレイン酸エチル、水、等張食塩水、およびこれらの組み合わせから成る群から選択される。
経口投与用の組成物は、多様な剤形を有することが可能である。例えば、固体の形態には、錠剤、カプセル剤、粒剤、および混合散剤が含まれる。このような経口剤形は、安全および有効な量である、成分（Ａ）を通常少なくとも約１％、好ましくは約５％から約５０％含む。経口投与組成物は、（Ｂ）約５０％から約９９％、好ましくは約５０％から約９５％の担体をさらに含む。
【００４５】
錠剤は、圧縮錠、湿製錠剤、腸溶錠、糖衣錠、フィルムコート錠、または多重圧縮錠であり得る。錠剤は、通常（Ａ）活性化合物および（Ｂ）担体を含み、担体には（ａ）希釈剤、（ｂ）潤滑剤、（ｃ）結合剤、（ｄ）崩壊剤、（ｅ）着色剤、（ｆ）香料、（ｇ）甘味剤、（ｋ）流動促進剤、およびこれらの組み合わせから成る群から選択される成分が含まれる。好ましい希釈剤には、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、マンニトール、ラクトース、およびスクロースが挙げられる。好ましい結合剤には、デンプンおよびゼラチンが挙げられる。好ましい崩壊剤には、アルギン酸およびクロスカルメロースが挙げられる。好ましい潤滑剤には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、およびタルクが挙げられる。好ましい着色剤はＦＤ＆Ｃ色素であり、外観のために添加することが可能である。咀しゃく錠は、（ｇ）甘味剤（アスパルテーム、サッカリンなど）、（ｆ）香料（メンソール、ペパーミント、果実フレーバなど）、またはその両方を含有することが好ましい。
【００４６】
カプセル剤（時間放出性および持続放出性組成物を含む）は、通常、ゼラチンから構成されるカプセル中に（Ａ）活性化合物および（Ｂ）担体を含み、担体は、一つまたは複数の前記した（ａ）希釈剤を含む。粒剤は、通常（Ａ）活性化合物を含み、流動特性を向上させるために、（ｋ）流動促進剤（シリコーンジオキシドなど）をさらに含むことが好ましい。
経口組成物の担体成分の選択は、第二に、味、費用、貯蔵性などを考慮するが、これらは本発明の目的にとって重要ではない。当業者は、過度の実験を行わなくても、適切な成分を選択して最適化することが可能である。
【００４７】
固体の組成物は、従来の方法、通常、ｐＨまたは時間に依存するコーティングでコーティングすることもでき、望ましい作用を拡大させるために、成分（Ａ）を多様な時間で消化管内に放出する。コーティングは、通常、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、エチルセルロース、アクリル樹脂（例えば、ローム・アンド・ハース社（Rohm & Haas G.M.B.H.）（ドイツ、ダルムシュタット）から市販されているオイドラギット（ＥＵＤＲＡＧＩＴ）（登録商標）コーティングなど）、ろう、セラック、ポリビニルピロリドン、およびその他の市販されているフィルムコーティング調製品（例えば、クロンプトン・アンド・クノール社（Crompton & Knowles Corp.）（ニュージャージー州マーワ−）が製造しているドライ・クリア（Ｄｒｉ−Ｋｌｅａｒ）またはカラコン社（Ｃｏｌｏｒｃｏｎ，Ｉｎｃ．）（ペンシルベニア州ウエストポイント）が製造しているオパドライ（ＯＰＡＤＲＹ）（登録商標）など）から成る群から選択される一つまたは複数の成分を含有する。
【００４８】
経口投与用の組成物は、液体の形態を取ることも可能である。例えば、好適な液体の形態には、水溶液、乳濁液、懸濁液、非発泡性の粒剤から再調製する溶液、非発泡性の粒剤から再調製する懸濁液、発泡性の粒剤から再調製する発泡性製剤、エリキシル剤、チンキ剤、シロップ剤などが挙げられる。液状経口投与組成物は、通常（Ａ）活性化合物および（Ｂ）担体を含み、担体には、ａ）希釈剤、ｅ）着色剤、ｆ）香料、ｇ）甘味剤、ｊ）防腐剤、ｍ）溶剤、ｎ）懸濁剤、およびｏ）界面活性剤から成る群から選択される成分が含まれる。経口液状組成物は、ｅ）着色剤、ｆ）香料、およびｇ）甘味剤から成る群から選択される一つまたは複数の成分を含むことが好ましい。
活性化合物を全身に送達するのに有用な、その他の組成物としては、舌下、口腔、および鼻腔用の剤形が挙げられる。このような組成物は、通常一つまたは複数の可溶性充填物質を含み、この充填物質には、ａ）希釈剤（スクロース、ソルビトール、マンニトールなど）およびｃ）結合剤（アカシア、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースなど）が挙げられる。このような組成物は、ｂ）潤滑剤、ｅ）着色剤、ｆ）香料、ｇ）甘味剤、ｈ）酸化防止剤、およびｋ）流動促進剤をさらに含むことが可能である。
【００４９】
組成物は、成分（Ｃ）一つまたは複数の任意成分をさらに含んでもよい。成分（Ｃ）は、被験者が患う基礎疾患を治療するのに使用される治療薬であり得る。例えば、成分（Ｃ）は、（ｉ）癌治療薬（例えば、化学療法剤、化学感受性増強剤、またはこれらの組み合わせなど）、（ｉｉ）抗菌剤、（ｉｉｉ）抗ウィルス剤、（ｉｖ）抗カビ剤、およびこれらの組み合わせが可能である。成分（Ｃ）は、被験者内の多剤耐性細胞の治療薬に対する感受性を増加させるために成分（Ａ）と共に投与可能である。
【００５０】
好適な（ｉ）癌治療薬は当該技術分野において既知である。癌治療薬としては、化学療法剤、化学感受性増強剤、およびこれらの組み合わせが挙げられる。好適な化学療法剤は、米国特許第５，４１６，０９１号に開示されているが、化学療法剤を開示する目的で本明細書に参考として組み入れる。好適な化学療法剤としては、アクチノマイシンＤ、アドリアマイシン（adriyamycin）、アムサクリン、コルヒチン、ダウノルビシン、ドセタキセル（これはタキソティア（TAXOTERE）（登録商標）としてアベンティス薬品（Aventis Pharmaceuticals Products,Inc.）から市販されている）、ドキソルビシン、エトポシド、ミトキサントロン、マイトマイシンＣ、パクリタキセル（これはタキソール（TAXOL）（登録商標）としてブリストールマイヤーズ・スクイブ社（Bristol-Myers Squibb Company）（ニューヨーク州ニューヨーク）から市販されている）、テニパシド（tenipaside）、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【００５１】
好適な化学感受性増強剤としては、カルシウムチャンネル阻害剤、カルモジュリン拮抗物質、環状ペプチド、シクロスポリンおよびその類縁体、フェノチアジン、キニジン、レセルピン、ステロイド、チオキサンテン、トランスフルペンチキソール（transflupentixol）、トリフロペラジン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。好適な化学感受性増強剤は、アムダカー（Amudkar）らの「多剤輸送体の生化学、細胞学および薬理学的側面（Biochemical,Cellular,and Pharmacological Aspects of the Multidrug Transporter）」、薬理毒物学の年報（Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.）、第３９巻、３６１〜３９８頁、（１９９９年）に開示されている。
好適な（ｉｉ）抗菌剤、（ｉｉｉ）抗ウィルス剤、および（ｉｖ）抗カビ剤は、当該技術分野において既知である（薬化学における年報（Annual Reports on Medicinal Chemistry）−３３；第ＩＩＩ項、癌および感染疾患（Cancer and Infectious Diseases）、プラター（Plattner,J.）編、アカデミックプレス（Academic Press）、第１２章、１２１〜１３０頁、（１９９８年）を参照のこと）。好適な抗菌剤としては、キノロン（quinolones）、フルオロキノロン（fluoroquinolones）、β−ラクタム抗生物質、アミノグリコシド、マクロライド、グリコペプチド、テトラサイクリン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【００５２】
好適な（ｉｉｉ）抗ウィルス剤としては、タンパク質分解酵素抑制剤、ＤＮＡシンターゼ抑制剤、逆転写抑制剤、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
好適な（ｉｖ）抗カビ剤としては、ケトコナゾール、フルコナゾール、イトラコナゾール、およびこれらの組み合わせなどのアゾール類が挙げられる。
当業者は、これらの治療薬が例示であって、限定するものではなく、これらの一部を種々の多剤耐性条件および疾患の治療に使用してもよいことを認識するであろう。当業者は過度の実験をせずに治療薬を選択し得るであろう。
成分（Ａ）と組み合わせて使用される成分（Ｃ）の量は、同一の組成物中に含まれる場合、または別々に投与される場合のいずれであっても、単独治療で使用される量未満であるか、等量である。好ましくは、成分（Ｃ）の量は、単独治療において使用される用量の８０％未満である。このような試薬の単独治療の用量は当該技術分野において既知である。
【００５３】
成分（Ｃ）は、単一の薬学的組成物の一部であってもよいし、または成分（Ａ）の投与前、投与中、若しくは投与後に別々に投与されてもよいし、これらの組み合わせであってもよい。
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、成分（Ａ）、成分（Ｂ）、および成分（Ｃ）の化学療法剤を含む。別の好ましい実施形態において、本発明の組成物は、成分（Ａ）、成分（Ｂ）、および成分（Ｃ）の化学感受性増強剤を含む。さらに別の好ましい実施形態において、本発明の組成物は、成分（Ａ）、成分（Ｂ）、および成分（Ｃ）の化学療法剤および化学感受性増強剤の両方を含む。
全身用組成物中の各々の成分の正確な量は、様々な要因によって決まる。これらの要因としては、成分（Ａ）として選択される特定の化合物、および組成物が投与される様式が挙げられる。全身用組成物中の成分（Ａ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００５４】
全身用組成物は、０％から９９％の成分（Ｃ）、並びに成分（Ａ）、（Ｂ）、および（Ｃ）を合わせて１００％の量となるような充分な量の成分（Ｂ）をさらに含むことが好ましい。成分（Ａ）と共に使用する（Ｂ）担体の量は、化合物の１回投与量につき、組成物の投与量が実用的な量となるような十分な量である。本発明の方法において有用な剤形を製造するための技術および組成物は、以下の参考文献：「近代薬学（Modern Pharmaceutics）」第９および１０章（バンカー(Banker)およびロドス（Rhodes）著、１９７９年）；「薬学的剤形：錠剤（Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets）」（リバーマン（Lieberman）ら、１９８１年）；および「薬学的剤形概論（Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms）」第２版（アンセル（Ansel）、１９７６年）に記載されている。
【００５５】
局所用組成物
局所用組成物は、成分（Ａ）の上述したものおよび成分（Ｂ）の担体を含む。局所用組成物の担体は、好ましくは成分（Ａ）が皮膚に浸透するのを助ける。局所用組成物は、好ましくはさらに上述の任意成分（Ｃ）を含む。
成分（Ｂ）の担体は、単一成分のみを含んでも、二つ以上の成分の組み合わせを含んでもよい。局所用組成物中の成分（Ｂ）は、局所用の担体である。好ましい局所用担体は、水、アルコール類、アロエベラゲル、アラントイン、グリセリン、ビタミンＡおよびＥ油、鉱油、プロピレングリコール、ポリプロピレングリコール−２ミリスチルプロピオネート、ジメチルイソソルビド、およびこれらの組み合わせなどから成る群から選択される一つまたは複数の成分を含む。さらに好ましい担体には、プロピレングリコール、ジメチルイソソルビド、および水が挙げられる。
【００５６】
局所用担体は、上記に示した好ましい局所用担体成分に加えて、またはこれらの成分の代わりに、ｑ）皮膚軟化剤、ｒ）噴射剤、ｓ）溶剤、ｔ）保湿剤、ｕ）増粘剤、ｖ）粉剤、およびｗ）香料から成る群から選択される一つまたは複数の成分を含むことが可能である。当業者は、過度の実験を行わなくても、局所用組成物の担体成分を最適化することが可能である。
【００５７】
成分ｑ）は皮膚軟化剤である。局所用組成物中の成分ｑ）の量は、通常約５％から約９５％である。好適な皮膚軟化剤には、ステアリルアルコール、グリセリルモノリシノレエート、グリセリルモノステアレート、プロパン−１，２−ジオール、ブタン−１，３−ジオール、ミンク油、セチルアルコール、イソステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸、パルミチン酸イソブチル、ステアリン酸イソセチル、オレイルアルコール、ラウリン酸イソプロピル、ラウリン酸ヘキシル、オレイン酸デシル、オクタデカン−２−オル、イソセチルアルコール、パルミチン酸セチル、セバシン酸ジ−ｎ−ブチル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ポリエチレングリコール、トリエチレングリコール、ラノリン、ゴマ油、ココヤシ油、落花生油、ヒマシ油、アセチル化ラノリンアルコール、ワセリン、鉱油、ミリスチン酸ブチル、イソステアリン酸、パルミチン酸、リノール酸イソプロピル、乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル、ポリジメチルシロキサン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。好ましい皮膚軟化剤には、ステアリルアルコールおよびポリジメチルシロキサンが挙げられる。
【００５８】
成分ｒ）は噴射剤である。局所用組成物中の成分ｒ）の量は、通常約５％から約９５％である。好適な噴射剤には、プロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル、二酸化炭素、笑気、窒素、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
成分ｓ）は溶剤である。局所用組成物中の成分ｓ）の量は、通常約５％から約９５％である。好適な溶剤には、水、エチルアルコール、メチレンクロライド、イソプロパノール、ヒマシ油、エチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。好ましい溶剤にはエチルアルコールが挙げられる。
【００５９】
成分ｔ）は保湿剤である。局所用組成物中の成分ｔ）の量は、通常約５％から約９５％である。好適な保湿剤には、グリセリン、ソルビトール、２−ピロリドン−５−カルボン酸塩、可溶性コラーゲン、フタル酸ジブチル、ゼラチン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。好ましい保湿剤にはグリセリンが挙げられる。
成分ｕ）は増粘剤である。局所用組成物中の成分ｕ）の量は、通常０％から約９５％である。
成分ｖ）は粉剤である。局所用組成物中の成分ｖ）の量は、通常０％から約９５％である。好適な粉剤には、チョーク、タルク、フラー土、カオリン、デンプン、ゴム類、コロイド状シリコーンジオキシド、ポリアクリル酸ナトリウム、テトラアルキルアンモニウムスメクタイト、トリアキルアリールアンモニウムスメクタイト、化学修飾ケイ酸アルミニウムマグネシウム、有機修飾モンモリロナイト質粘土、水和ケイ酸アルミニウム、燻蒸シリカ、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチレングリコールモノステアレート、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【００６０】
成分ｗ）は香料である。局所用組成物中の成分ｗ）の量は、通常約０．００１％から約０．５％、好ましくは約０．００１％から約０．１％である。
成分ｘ）はろうである。本発明において有用なろうは、動物ろう、植物ろう、地ろう、多様な天然ろうの分留物、合成ワックス、石油ワックス、エチレンポリマー、炭化水素類（フィッシャートロプシュ（Fischer−Tropsch）ワックスなど）、シリコーンワックス、およびこれらの混合物から成る群から選択され、４０℃から１００℃の融点を有する。局所用組成物中の成分ｘ）の量は、通常約１％から約９９％である。
【００６１】
本発明の別の実施形態において、活性化合物はまた、小型単層膜小胞、大型単層膜小胞、および多層膜小胞等の、リポソームデリバリーシステムの形態で投与されてもよい。リポソーム類は、コレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリン類等の、多様なリン脂質から形成可能である。本発明の化合物を局所送達するための好ましい組成物は、ダウトン（Dowton）らの「カプセル化シクロスポリンの局所送達におけるリポソーム組成物の影響：第Ｉ章、無毛マウス皮膚を用いた生体外研究（Influence of Liposomal Composition on Topical Delivery of Encapsulated Cyclosporin A:I An in vitro Study Using Hairless Mouse Skin）」、製薬科学（S.T.P.Pharma Sciences）、第３巻、４０４〜４０７頁、（１９９３年）；ワラチ（Wallach）およびフィリッポ（Philippot）の「新種の脂質小胞：ノバソーム（登録商標）（New Type of Lipid Vesicle:Novasome（Registered Trademark））」、リポソームテクノロジー（Liposome Technology）、第１巻、１４１〜１５６頁、（１９９３年）、米国特許第４，９１１，９２８号および米国特許第５，８３４，０１４号に記載されているようにリポソームを使用する。
【００６２】
局所用組成物中の各々の成分の正確な量は、様々な要因によって決まる。これらの要因としては、成分（Ａ）として選択される特定の化合物、および組成物が投与される様式が挙げられる。しかし、局所用組成物中に通常添加される成分（Ａ）の量は、約０．１％から約９９％、好ましくは約１％から約１０％である。
【００６３】
局所用組成物は、０％から約９９％、より好ましくは０％から約１０％の成分（Ｃ）、並びに成分（Ａ）、（Ｂ）、および（Ｃ）を合わせて１００％の量となるような十分な量の成分（Ｂ）をさらに含むことが好ましい。成分（Ａ）と共に使用する（Ｂ）担体の量は、化合物の１回投与量につき、組成物の投与量が実用的な量となるような十分な量である。本発明の方法において有用な剤形を製造するための技術および組成物は、以下の参考文献：「近代薬学（Modern Pharmaceutics）」第９および１０章（バンカー（Banker）およびロドス（Rhodes）著、１９７９年）；「薬学的剤形：錠剤（Pharmaceutical Dosage Forms:Tablets）」（リバーマン（Lieberman）ら、１９８１年）；および「薬学的剤形概論（Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms）」、第２版、（アンセル（Ansel）、１９７６年）に記載されている。
【００６４】
皮膚に部分的に適用可能である局所用組成物は、溶液、オイル、クリーム、軟膏、ジェル、ローション、シャンプー、リーブオン型およびリンスアウト型ヘアコンディショナー、乳液、洗浄剤、加湿剤、スプレー、皮膚貼付剤などを含むいずれの形態であってもよい。
成分（Ａ）はキット内に含まれていてもよく、このキットは、成分（Ａ）、前述の全身用組成物、局所用組成物、またはその両方、およびこのキットを使用することにより（特にヒトにおける）多剤耐性の治療が提供されるという情報、説明、またはその両方を含む。この情報および説明は、文章の形態、絵の形態、またはその両方の形態などであってもよい。これに加えてまたはこれとは別に、キットは、成分（Ａ）、組成物、またはその両方、および成分（Ａ）若しくは組成物の投与方法に関する情報、説明、またはその両方を含むことができ、それらには哺乳動物における多剤耐性を治療するという利点が含まれていることが好ましい。
【００６５】
本発明の別の実施形態において、成分（Ａ）および（Ｃ）はキットに含まれていてもよく、そのキットは、成分（Ａ）および（Ｃ）、上述の全身用組成物、局所用組成物、またはその両方、並びにキットを使用することにより（特にヒトの）多剤耐性を治療可能であるという情報、説明、またはその両方を含む。この情報および説明は、文章の形態、絵の形態、またはその両方の形態などであってもよい。これに加えてまたはこれとは別に、キットは、成分（Ａ）および（Ｃ）、組成物またはその両方、並びに成分（Ａ）および（Ｃ）若しくは組成物の投与方法に関する情報、説明、またはその両方を含むことができ、それらには哺乳動物における多剤耐性を治療可能であるという利点が含まれていることが好ましい。
【００６６】
本発明の使用方法
本発明は輸送タンパク質を阻害する方法に関する。方法は、治療の必要な哺乳動物に上述の（Ａ）活性化合物を投与することを含む。
本発明はさらに、多剤耐性の治療方法に関する。この方法には、多剤耐性を患う哺乳動物（ヒトが好ましい）に前述の（Ａ）活性化合物を投与することが含まれる。例えば、多剤耐性癌と診断された哺乳動物を本発明の方法によって治療可能である。（Ａ）活性化合物および（Ｂ）担体を含有する全身用組成物または局所用組成物を、哺乳動物に投与することが好ましい。より好ましくは、組成物は（Ａ）活性化合物、（Ｂ）担体、および（Ｃ）治療薬などの任意成分を含む全身用組成物である。成分（Ａ）は、成分（Ｃ）の投与前、投与中、または投与後に投与してもよい。好ましい投与計画では、２４時間かけて連続的に注入し、その間に成分（Ｃ）も投与する。
【００６７】
投与される成分（Ａ）の用量は、投与方法、被験者の身体的属性（例えば、年齢、体重、性別）および被験者が患う疾患を含む種々の要因に依存する。ＭＤＲを治療または予防するのに有効な本発明の化合物（Ａ）の用量は、１日あたり体重１ｋｇに対して約０．０１ｍｇから約１００ｍｇ、好ましくは約０．５ｍｇから約５０ｍｇの範囲である。これらの用量範囲は単に代表的なものであり、１日投与量は様々な要因により調整可能である。投与される活性化合物の具体的な投与量、並びに治療期間および治療が局所的または全身的のいずれであるかということは、相互に依存している。また、用量および治療の投与計画も、使用する具体的な活性化合物、治療の適用、活性化合物の有効性、被験者の個人的属性（例えば、被験者の体重、年齢、性別、症状など）、治療投与計画の順守状況、並びに治療の何らかの副作用の存在および過酷さなどの要因によって決まる。
【００６８】
癌を患う被験者において多剤耐性を治療する利点に加えて、組成物中および本発明の方法における活性化合物はまた別の症状を治療するのにも使用可能である。この別の症状としては、細菌性、ウィルス性、およびカビ性の多剤耐性などの別の種類（すなわち、癌多剤耐性に加えて）の多剤耐性が挙げられる。例えば、ＨＩＶウィルスを患うＡＩＤＳ患者を治療するのに使用される連邦食品薬品局に認可されたＨＩＶタンパク質分解酵素抑制剤の多くはＰｇｐの基質である。そのため、本発明の別の実施形態において、本発明の活性化合物は、ＨＩＶタンパク質分解酵素抑制剤などの治療薬とともに投与される。
本発明の活性化合物および組成物はまた、経口投与薬剤などの他の治療薬とともに投与可能である。活性化合物および組成物は、経口投与薬剤の吸収を高め、種々の薬剤の生物学的利用度を増加させるのに使用可能である。
【００６９】
活性化合物および組成物はまた、例えば、アルツハイマー病を治療するための薬剤の有効性を高めるため、記憶障害を治療するため、記憶能を向上させるため、または薬剤送達がこの輸送ポンプ機構によって妨害されるような他の中枢神経系の疾患のいずれかを治療するために、血液脳関門を通って薬剤を送達するのを助けるのに使用可能である。
活性化合物および組成物はまた、脊髄損傷、糖尿病神経障害、および黄斑変性症などの神経疾患を患う被験者を治療するために投与され得る。
活性化合物および組成物はまた、視覚障害を患う被験者を治療し、視覚を改善するために投与され得る。
【００７０】
活性化合物および組成物はまた、脱毛症を治療するために投与され得る。「脱毛症の治療」には、脱毛を抑制すること、脱毛を改善すること、発毛を促進することが挙げられる。
活性化合物および組成物はまた、炎症性疾患を治療するために投与され得る。炎症性疾患としては、過敏性腸疾患、関節炎、および喘息が挙げられる。
【００７１】
（実施例）
これらの実施例は、本発明を当業者に説明することを意図しており、請求項に規定した本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本発明の活性化合物は、従来の有機合成を用いて製造でき、これは当業者が過度の実験を行うことなく容易に利用可能である。このような合成は、Ｊ．マーチ（March）の最新有機化学（Advanced Organic Chemistry）、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ（John Wiley & Sons）、１９９２年などの標準的なテキストに記載されている。当業者は、化合物中の他の官能基がマスキングまたは保護されている場合、ある反応が最も良く実施され、従って反応収率が向上するか、または望ましくない副反応が避けられることを理解するであろう。収率の増加を成し遂げるため、または望ましくない反応を避けるために、当時者が保護基を利用してもよい。これらの反応は、例えば「有機合成における保護基（Protecting Groups in Organic Synthesis）」グリーン（Greene,T.W.）およびワッツ（Wuts,P.G.M.）、第２版、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ（John Wiley & Sons,）、１９９１年）に記載されている。
【００７２】
本発明の化合物を調製するための出発原料は、既知であるか、既知の方法で作られるか、または市販されている。本発明の化合物を調製するための出発物質としては、以下のものが挙げられる。
以下の試薬は、アルドリッチ・ケミカル社（Aldrich Chemical Company）（ウィスコンシン州ミルウォーキー）から入手可能である：１−ブロモ−３−フェニルプロパン、５−ヒドロキシキノリン、（Ｒ）−（−）−グリシジルトシラート、３，４−ピリジンジカルボン酸、４−フェニルブチルアミン、３−ピリジンプロピオン酸、第三級−ブチル［Ｓ−（Ｒ＊，Ｒ＊）］−（−）−（１−オキシラニル）−２−フェニルエチル）カルバメート、エピクロロヒドリン、３，４，５−トリメトキシベンゾイルクロリド、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、４−トランス−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸、３，４，５−トリメトキシベンジルアミン、および２，２，４−トリメチル−２−オキサゾリン。
【００７３】
以下の試薬は、ランカスター・シンセシス社（Lancaster Synthesis Inc.）（ニューハンプシャー州ウィンダム）から入手可能である：４−フェニルブチロニトリル、１−第三級−ブトキシカルボニル−ピペリジン−３−カルボン酸、１−ベンジル−４−アミノピペリジン、３，４−ジメトキシベンゼンスルホニルクロリド、および１−ベンジル−４−ホモピペラジン。
以下の試薬はフルカ・ケミＡＧ（Fluka Chemie AG）（ウィスコンシン州ミルウォーキー）から入手可能である：１−第三級−ブトキシカルボニル−ピペリジン−４−カルボン酸、および（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（「ＰｙＢＯＰ」）、Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−イミノ二酢酸、および１−（ジフェニルメチル）ピペラジン。
【００７４】
以下の試薬は、アクロス・オーガニック（Acros Organics）（ペンシルベニア州ピッツバーグ）から入手可能である：キノリン−６−カルボン酸およびキノリン−５−カルボン酸。
以下の試薬はバケム・バイオサイエンス（Bachem Bioscience）（ペンシルベニア州キングオブプルージア）から入手可能である：第三級−ブトキシカルボニル−β−（３−ピリジル）−アラニン。
以下の試薬は、シグマ・ケミカル社（Sigma Chemical Company）（ウィスコンシン州ミルウォーキー）から入手可能である：Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩。
種々の略語を本明細書で用いる。使用し得る略語およびその定義を以下の表５に示す。
【００７５】
【表５】

【００７６】
実施例１ −１，７−ジフェニル−４−アミノヘプタン塩酸塩（１）の調製
【００７７】
【化６】

【００７８】
マグネシウム（４０．２ｇ、１．６５モル）および無水エーテル（３．２Ｌ）を攪拌しながら反応容器中で混合する。１−ブロモ−３−フェニルプロパンの１．６Ｌの無水エーテル溶液を添加漏斗に入れる。臭化物溶液を１時間かけて攪拌下の反応容器に滴下する。添加終了後、混合物を１時間から２時間攪拌する。４−フェニルブチロニトリル（１６０ｇ、１．１モル）の無水エーテル（２．４Ｌ）溶液を添加漏斗に入れる。この溶液を１時間かけて反応容器に滴下する。滴下終了後、溶液を還流下に１０時間加熱した後、室温で６時間攪拌する。添加漏斗を用いて反応混合物をメタノール（３．２Ｌ）で希釈する。水素化ホウ素ナトリウム（８３．４ｇ、２．２モル）を数回に分けて加える。添加終了後、反応液を室温で６時間攪拌する。反応混合物に水（３．２Ｌ）をゆっくり加えて反応を停止させる。混合物をエーテル（３．２Ｌ）および水（１．６Ｌ）で希釈する。エーテル層を分離し、水層をエーテルで二回（３．２Ｌ×２）抽出する。一緒にしたエーテル抽出物を、塩化ナトリウム溶液で一回洗浄し、乾燥、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得る。この生成物をエーテル（１．２Ｌ）で希釈し、１Ｍ塩酸（１．２Ｌ）をゆっくり加えて酸性とする。混合物を１時間攪拌し、減圧下で濃縮する。得られた沈殿をアセトニトリルで希釈し、１６時間攪拌する。濾過により、所望の１，７−ジフェニル−４−アミノヘプタン塩酸塩を回収する。
【００７９】
実施例２ −（Ｒ）−５−オキシラニルメトキシ−キノリン（２）の調製
【００８０】
【化７】

【００８１】
水素化ナトリウム（６０重量％、１．７９ｇ、４４．８ｍモル）をアルゴンブランケット下でヘキサン（１０ｍＬを３回）で洗浄する。次いでＤＭＦ（１７ｍＬ）を室温下で添加し、攪拌下のスラリーを５℃まで冷却する。５−ヒドロキシキノリン（５．００ｇ、３４．４ｍモル）のＤＭＦ（６５ｍＬ）溶液を３０分間かけて滴下する。得られた混合物を１時間かけて室温まで加温して、透明な赤褐色溶液を得る。（Ｒ）−（−）−グリシジルトシラート（１０．２２ｇ、４４．８ｍモル）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を２０分間かけて滴下する。得られた混合物を室温で４時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液（２５ｍＬ）を添加することによって反応を停止させ、水（７５０ｍＬ）を注ぎ、エーテル（３７５ｍＬを３回）で抽出する。一緒にしたエーテル層を、飽和重炭酸ナトリム水溶液（３７５ｍＬで２回）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過して減圧下で濃縮する。残基を勾配溶離（ヘキサン中、３３％→５０％エチルアセテート）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物（４．９５ｇ）を黄褐色固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺２０２．２（基準）。
【００８２】
実施例３ −４−［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチルカルバモイル］−ピペリジン−１−カルボン酸第三級−ブチルエステル（３）の調製
【００８３】
【化８】

【００８４】
１−第三級−ブトキシカルボニル−ピペリジン−４−カルボン酸（１ｇ、４．３６ｍモル）を室温で塩化メチレン（２５ｍＬ）中に溶解する。１，７−ジフェニル−４−アミノヘプタン塩酸塩（１）（１．３３ｇ、４．３８ｍモル）、トリエチルアミン（１．２２ｍＬ、８．７５ｍモル）、およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（０．９２ｇ、４．８ｍモル）を連続的に添加する。混合物を室温で１８時間攪拌し、次いで４０℃にて減圧下で濃縮する。残基をエチルアセテート（１５０ｍＬ）で希釈し、水（１５０ｍＬ）、０．１ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）、および飽和食塩水（５０ｍＬ）で連続的に洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過して減圧下で濃縮する。残基を勾配溶離（ヘキサン中、５％→４０％エチルアセテート）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物（０．７７ｇ）を固形物として得る。
【００８５】
実施例４ −ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニルプロピル）−ブチル］−アミド（４）の調製
【００８６】
【化９】

【００８７】
４−［４−フェニル−１−（３−フェニルプロピル）−ブチルカルバモイル］−ピペリジン−１−カルボン酸第三級−ブチルエステル（３）（０．７７ｇ、１．６１ｍモル）を、室温で塩化メチレン（２０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）をゆっくりと添加し、この溶液を室温下で９０分間攪拌する。溶液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基を塩化メチレン（１０ｍＬ）および水（１００ｍＬ）の混合物中でスラリーとし、炭酸カリウムをスラリーがアルカリ性になるまで添加する。スラリーを水（２００ｍＬ）で希釈し、塩化メチレン（１００ｍＬで３回）で抽出する。有機抽出物をＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物（０．５８ｇ）をオイルとして得る。
【００８８】
実施例５ −１−（１−第三級−ブトキシカルボニルピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（５）の調製
【００８９】
【化１０】

【００９０】
ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（４）（１．００ｇ、２．６４ｍモル）を、室温で塩化メチレン（２５ｍＬ）中に溶解する。１−第三級−ブトキシカルボニル−ピペリジン−４−カルボン酸（０．７３ｇ、３．１７ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．７５ｇ、５．８１ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（１．６５ｇ、３．１７ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で２０時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、５０％→７０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物（５）を固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺５９０．６。
【００９１】
実施例６ −１−（ピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（６）の調製
【００９２】
【化１１】

【００９３】
１−（１−第三級−ブトキシカルボニルピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（５）（１．４１ｇ、２．３９ｍモル）を、室温で塩化メチレン（４０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で１．５時間攪拌する。溶液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基を塩化メチレン（２００ｍＬ）中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぐ。飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調整する。混合物を振とうして、層に分離する。水層を塩化メチレン（５０ｍＬで３回）で抽出する。一緒にした有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物（１．１０ｇ）を白色固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺４９０．２。
【００９４】
実施例７ −Ｎ−｛１−［２−（Ｒ）−ヒドロキシ−３−（キノリン−５−イルオキシ）−プロピル］−ピペリジン−２−カルボニル｝−ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（７）の調製
【００９５】
【化１２】

【００９６】
１−（ピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（６）（２４３．４ｍｇ、０．４９７ｍモル）を、室温でエタノール（１２ｍＬ）中に溶解する。（Ｒ）−５−オキシラニルメトキシ−キノリン（２）（１００．０ｍｇ、０．４９７ｍモル）を添加し、次いで混合物を１７時間還流する。室温まで冷却後、溶液を減圧下４０℃で濃縮する。残基を、勾配溶離（ヘキサン中、５０％→１００％アセトン、次いでアセトン中、５％→２０％エタノール）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物（２４０ｍｇ）を白色固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺６９１．４。
【００９７】
実施例８ −Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−ピロリジンカルボン酸］メチルエステル（８）の調製
【００９８】
【化１３】

【００９９】
［（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−ピロリジンカルボン酸］メチルエステル（３．００ｇ、２０．７ｍモル）を塩化メチレン（１２０ｍＬ）中に溶解する。トリエチルアミン（５．２３ｇ、５１．７ｍモル）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（０．２５ｇ、２．１ｍモル）を添加し、溶液を氷浴中で冷却する。３，４−ジメトキシベンゼンスルホニルクロリド（６．３６ｇ、２６．９ｍモル）を添加する。１５分後、冷却浴を取り除き、反応物を室温まで加温する。１時間後、反応混合物を氷冷した０．１ＮのＨＣｌ（１５０ｍＬ）中に注ぎ、塩化メチレン（１５０ｍＬで１回、７５ｍＬで２回）で抽出する。一緒にした有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、２０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺３４６。
【０１００】
実施例９ −Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｓ）−４−フェノキシ−２−ピロリジンカルボン酸］メチルエステル（９）の調製
【０１０１】
【化１４】

【０１０２】
Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−ピロリジンカルボン酸］メチルエステル（８）（１．００ｇ、２．９０ｍモル）、フェノール（０．４１ｇ、４．３４ｍモル）、およびトリフェニルホスフィン（１．１４ｇ、４．３４）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中で混合する。混合物を氷浴中で冷却し、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．７６ｇ、４．３４ｍモル）を３０分間かけて滴下する。反応物を、一晩攪拌しながら室温まで加温する。反応混合物を減圧下で濃縮し、エーテルで処理する。混合物の上澄みを他の容器に移し、有機抽出物を濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、４０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺４２２。
【０１０３】
実施例１０ −Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｓ）−４−フェノキシ−２−ピロリジンカルボン酸］（１０）の調製
【０１０４】
【化１５】

【０１０５】
Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｓ）−４−フェノキシ−２−ピロリジンカルボン酸］メチルエステル（９）（０．９５ｇ、２．２５ｍモル）を１１ｍＬの２：２：１のテトラヒドロフラン：水：メタノール中に溶解する。水酸化リチウム（０．５４ｇ、２２．５ｍモル）を添加し、溶液を室温で６時間攪拌する。反応混合物を飽和クエン酸溶液（２０ｍＬ）に注ぎ、エチルアセテート（４０ｍＬ）で抽出する。有機層を単離し、水（２０ｍＬで２回）および食塩水（２０ｍＬ）で連続的に洗浄する。次いで溶液を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を白色固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺４０８。
【０１０６】
実施例１１ −Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｓ）−４−フェノキシ−２−ピロリジンカルボン酸］（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１１）の調製
【０１０７】
【化１６】

【０１０８】
Ｎ−（３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル）−［（２Ｓ，４Ｓ）−４−フェノキシ−２−ピロリジンカルボン酸］（１０）（０．６４ｇ、１．５７ｍモル）を、室温で塩化メチレン（１５ｍＬ）中に溶解させる。１−（ジフェニルメチル）ピペラジン（０．４８ｇ、１．８９ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．４５ｇ、３．４６ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（０．９８ｇ、１．８９ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１６時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、４０％→５０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を固形発泡体として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺６４２。
【０１０９】
実施例１２ −５−フェニル−３−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）−オキサゾリジン−４−カルボン酸（１２）の調製
【０１１０】
【化１７】

【０１１１】
ＤＬ−トレオ−３−フェニルセリン水和物（５．００g、２７．６ｍモル）および２ＮのＮａＯＨ（１３．８ｍＬ、２７．６ｍモル）を合わせて、氷浴中で冷却する。ホルムアルデヒド（３７％の水溶液２．２４ｇ）を添加し、反応混合物を０℃で２１時間攪拌する。３，４，５−トリメトキシベンゾイルクロリド（６．３６ｇ、２７．６ｍモル）のアセトン（２０ｍＬ）溶液を除々に添加し、固体の重炭酸ナトリウムを用いてｐＨを＞７に維持する。１時間攪拌後、反応混合物を水に注ぎ、エチルアセテート（５０ｍＬで３回）で抽出する。水溶液を氷浴中で冷却し、１ＮのＨＣｌを用いてｐＨを１に調整し、混合物を塩化メチレン（１００ｍＬで３回）で抽出する。一緒にした塩化メチレン抽出物を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を白色固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺３８８。
【０１１２】
実施例１３ −５−フェニル−３−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）−オキサゾリジン−４−カルボン酸（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１３）の調製
【０１１３】
【化１８】

【０１１４】
５−フェニル−３−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）−オキサゾリジン−４−カルボン酸（１２）（１２０ｍｇ、０．３１０ｍモル）を室温で塩化メチレン（３ｍＬ）中に溶解する。１−（ジフェニルメチル）ピペラジン（９４ｍｇ、０．３７２ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２８ｍｇ、０．９９ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（１９３ｍｇ、０．３７２ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、３０％→６０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を白色固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺６２２。
【０１１５】
実施例１４ −Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１５）の調製
【０１１６】
【化１９】

【０１１７】
チャン（Chung,J.Y.）らのジャーナル・オブ・オーガニックケミストリー（J.Org Chem.）第５５巻：２７０〜５頁（１９９０年）に従って調製された、Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（１４）（１．５０ｇ、５．１ｍモル）を、室温で塩化メチレン（５５ ｍＬ）中に溶解する。１−（ジフェニルメチル）ピペラジン（１．６２ｇ、６．４ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．５０ｇ、２．２５ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（３．３５ｇ、６．４ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１８時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、３３％→５０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を白色固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺５２６。
【０１１８】
実施例１５ −３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１６）の調製
【０１１９】
【化２０】

【０１２０】
Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１５）（２．７０ｇ、５．１４ｍモル）を、室温で塩化メチレン（３０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で２時間攪拌する。反応混合物を氷浴中で冷却し、飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調製する。混合物を水（３０ｍＬ）に注ぎ、塩化メチレン（６０ｍＬで１回、２０ｍＬで２回）で抽出する。混合した有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺４２６。
【０１２１】
実施例１６ −３，４，５−トリメトキシフェニルグリオキシル酸（１７）の調製
【０１２２】
【化２１】

【０１２３】
３，４，５−トリメトキシフェニルアセトフェノン（２０．００ｇ、０．０９５ mol）を、室温でピリジン（７６ｍＬ）中に溶解する。二酸化セレン（１３．８ｇ、０．１２４モル）を添加し、混合物を２４時間慎重に加熱還流する。混合物を室温まで冷却し、次いで珪藻土のパッドを通して濾過する。濾液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基をエチルアセテート（２５０ｍＬ）に溶解し、次いで連続的に１ＮのＨＣｌ（２５０ｍＬ）、および飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬで２回）で抽出する。混合した重炭酸塩の水性抽出物を濃ＨＣｌで酸性化し、次いでエーテル（２５０ｍＬで２回）で抽出する。エーテル抽出物を合わせ、次いで食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下４０℃にて濃縮して所望の生成物（１２．００ｇ）を黄色固形物として得る。
【０１２４】
実施例１７ −Ｎ−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）グリオキシリル］−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１８）の調製
【０１２５】
【化２２】

【０１２６】
３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（４−ベンズヒドリルピペラジン−１−イル）アミド（１６）（０．５０ｇ、１．２ｍモル）を、室温で塩化メチレン（１５ｍＬ）中に溶解する。３，４，５−トリメトキシフェニルグリオキシル酸（１７）（０．３４ｇ、１．４０ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３３ｇ、２．６０ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（０．７３ｇ、１．４０ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１６．５時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、３３％→５０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺６４８。
【０１２７】
実施例１８ −Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］１−［（ o −トリル）ピペラジン−１−イル）］アミド（１９）の調製
【０１２８】
【化２３】

【０１２９】
Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（１４）（３．００ｇ、１０．３ｍモル）を、室温で塩化メチレン（１００ｍＬ）中に溶解する。１−（o−トリル）ピペラジン塩酸塩（２．７４ｇ、１２．９ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイロプロピルエチルアミン（４．３３ｇ、３３．５ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（６．７０ｇ、１２．９ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１８時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、３３％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を白色固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺４５０。
【０１３０】
実施例１９ −３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］１−［（ o −トリル）ピペラジン−１−イル）］アミド（２０）の調製
【０１３１】
【化２４】

【０１３２】
Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］［（o−トリル）ピペラジン−１−イル］アミド（１９）（４．４６ｇ、９．９２ｍモル）を、室温で塩化メチレン（６０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で１時間攪する。反応混合物を氷浴中で冷却し、飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調製する。混合物を水（６０ｍＬ）に注ぎ、塩化メチレン（１２０ｍＬで１回、４０ｍＬで２回）で抽出する。混合した有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺３５０。
【０１３３】
実施例２０ −Ｎ−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）グリオキシリル］−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］１−［（ o −トリル）ピペラジン−１−イル）］アミド（２１）の調製
【０１３４】
【化２５】

【０１３５】
３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］［（o−トリル）ピペラジン−１−イル）アミド（２０）（１．００ｇ、２．８６ｍモル）を、室温で塩化メチレン（４０ｍＬ）中に溶解する。３，４，５−トリメトキシフェニルグリオキシル酸（１７）（０．８２ｇ、３．４３ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．８１ｇ、６．３０ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（１．７９ｇ、３．４９ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１７．５時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、３３％→４０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺５７２。
【０１３６】
実施例２１ −Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］１−［（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル）］アミド（２２）の調製
【０１３７】
【化２６】

【０１３８】
Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］（１４）（１．００ｇ、３．４３ｍモル）を、室温で塩化メチレン（４０ｍＬ）中に溶解する。１−（２−ピリジル）ピペラジン（０．７０ｇ、４．２９ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイロプロピルエチルアミン（１．００ｇ、７．７０ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（２．２３ｇ、４．２９ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１９時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、５０％→７０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を白色固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺４３７。
【０１３９】
実施例２２ −３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］１−［（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル）］アミド（２３）の調製
【０１４０】
【化２７】

【０１４１】
Ｎ−（第三級−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］［（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル］アミド（２２）（１．１２ｇ、２．５７ｍモル）を、室温で塩化メチレン（６０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（３５ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で１時間攪拌する。反応混合物を氷浴中で冷却し、飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調製する。混合物を水（６０ｍＬ）に注ぎ、塩化メチレン（１２０ｍＬで１回、４０ｍＬで２回）で抽出する。混合した有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺３３７。
【０１４２】
実施例２３ −Ｎ−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）グリオキシリル］−３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］１−［（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル）］アミド（２４）の調製
【０１４３】
【化２８】

【０１４４】
３−フェニル−［（２Ｓ）−２−ピロリジンカルボン酸］［（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル）アミド（２３）（０．９７ｇ、２．８６ｍモル）を、室温で塩化メチレン（４０ｍＬ）中に溶解する。３，４，５−トリメトキシフェニルグリオキシル酸（１７）（０．８３ｇ、３．４６ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．８２ｇ、６．３４ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（１．８０ｇ、３．４６ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１９時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、５０％→７０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物を固形物として得る。ＣＩＭＳ：ＭＨ⁺５５９。
【０１４５】
実施例２４ −１−（第三級−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２５）の調製
【０１４６】
【化２９】

【０１４７】
１−（第三級−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−３−カルボン酸（３．００ｇ、１３．１ｍモル）を室温で塩化メチレン（１００ｍＬ）中に溶解する。１，７−ジフェニル−４−アミノヘプタン塩酸塩（１）（４．７７ｇ、１５．７ｍモル）、ジイソプロピルエチルアミン（７．３ｍＬ、４１．９ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（８．１７ｇ、１５．７ｍモル）を連続的に添加する。混合物を室温で１５時間攪拌し、次いで４０℃にて減圧下で濃縮する。残基を勾配溶離（ヘキサン中、２０％→４０％エチルアセテート）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物をオイルとして得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺４７９．４。
【０１４８】
実施例２５ −ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニルプロピル）−ブチル］−アミド（２６）の調製
【０１４９】
【化３０】

【０１５０】
１−（第三級−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］アミド（２５）（６．３０ｇ、１３．２ｍモル）を、室温で塩化メチレン（６０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で１．２５時間攪拌する。溶液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基を塩化メチレン（３００ｍＬ）中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぐ。飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調整する。混合物を振とうして、層に分離する。水層を塩化メチレン（１００ｍＬで３回）で抽出する。混合した有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺３７９．０。
【０１５１】
実施例２６ −１−［１−（第三級−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボニル］−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２７）の調製
【０１５２】
【化３１】

【０１５３】
ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２６）（１．００ｇ、２．６４ｍモル）を、室温で塩化メチレン（２５ｍＬ）中に溶解する。１−第三級−ブトキシカルボニル−ピペリジン−２−カルボン酸（０．７３ｇ、３．１７ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．７５ｇ、５．８１ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（１．６５ｇ、３．１７ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１７．５時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、４０％→６０％エチルアセテート）で精製して、所望の生成物（７６）を固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺５９０．６。
【０１５４】
実施例２７ −１−（ピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２８）の調製
【０１５５】
【化３２】

【０１５６】
１−［１−（第三級−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボニル］−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２７）（１．３５ｇ、２．２９ｍモル）を、室温で塩化メチレン（４０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で４時間攪拌する。溶液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基を塩化メチレン（２００ｍＬ）中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぐ。飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調整する。混合物を振とうして、層に分離する。水層を塩化メチレン（５０ｍＬで３回）で抽出する。混合した有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を固形発泡体として得る。
【０１５７】
実施例２８ −１−｛１−［２−（Ｒ）−ヒドロキシ−３−（キノリン−５−イルオキシ）−プロピル］−ピペリジン−２−カルボニル｝−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２９）の調製
【０１５８】
【化３３】

【０１５９】
１−（ピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（２８）（２３４．４ｍｇ、０．４９７ｍモル）を、室温でエタノール（１２ｍＬ）中に溶解する。（Ｒ）−５−オキシラニルメトキシ−キノリン（２）（１００．０ｍｇ、０．４９７ｍモル）を添加し、次いで混合物を１５時間還流する。室温まで冷却後、溶液を減圧下４０℃で濃縮する。残基を、勾配溶離（ヘキサン中、９０％エチルアセテート、ヘキサン中、５０％→１００％アセトン、次いでアセトン中、５％エタノール）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物（２５０ｍｇ）を白色固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺６９１．４。
【０１６０】
実施例２９ −１−（第三級−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（ ３０）の調製
【０１６１】
【化３４】

【０１６２】
１−（第三級−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−２−カルボン酸（３．００ｇ、１３．１ｍモル）を室温で塩化メチレン（１００ｍＬ）中に溶解する。１，７−ジフェニル−４−アミノヘプタン塩酸塩（１）（４．７７ｇ、１５．７ｍモル）、ジイソプロピルエチルアミン（７．３ｍＬ、４１．９ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（８．１７ｇ、１５．７ｍモル）を連続的に添加する。混合物を室温で１５時間攪拌し、次いで４０℃にて減圧下で濃縮する。残基を勾配溶離（ヘキサン中、１０％→３０％エチルアセテート）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物をオイルとして得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺４７９．４。
【０１６３】
実施例３０ −ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３１）の調製
【０１６４】
【化３５】

【０１６５】
１−（第三級−ブトキシカルボニル）−ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］アミド（３０）（６．７７ｇ、１４．１ｍモル）を、室温で塩化メチレン（６０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で１．２５時間攪拌する。溶液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基を塩化メチレン（３００ｍＬ）中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぐ。飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調整する。混合物を振とうして、層に分離する。水層を塩化メチレン（１００ｍＬで３回）で抽出する。一緒にした有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物を固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺３７９．２。
【０１６６】
実施例３１ −１−［１−（第三級−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３２）の調製
【０１６７】
【化３６】

【０１６８】
ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３１）（１．００ｇ、２．６４ｍモル）を、室温で塩化メチレン（２５ｍＬ）中に溶解する。１−第三級−ブトキシカルボニル−ピペリジン−２−カルボン酸（０．７３ｇ、３．１７ｍモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．７５ｇ、５．８１ｍモル）、およびＰｙＢＯＰ（１．６５ｇ、３．１７ｍモル）を連続的に添加する。反応物を室温で１８．５時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮する。残基をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中、２０％→４０％エチルアセテート）によって精製し、所望の生成物（３２）をオイルとして得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺５９０．６。
【０１６９】
実施例３２ −１−（ピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３３）の調製
【０１７０】
【化３７】

【０１７１】
１−［（１−第三級−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボニル］−ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３２）（１．０５ｇ、１．７８ｍモル）を、室温で塩化メチレン（４０ｍＬ）中に溶解する。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）をゆっくり添加し、この溶液を室温で４時間攪拌する。溶液を減圧下、４０℃にて濃縮する。残基を塩化メチレン（２００ｍＬ）中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぐ。飽和炭酸カリウム溶液を用いてｐＨを９に調整する。混合物を振とうして、層を分離する。水層を塩化メチレン（５０ｍＬで３回）で抽出する。混合した有機抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して所望の生成物をオイルとして得る。
【０１７２】
実施例３３ −１−｛１−［２−（Ｒ）−ヒドロキシ−３−（キノリン−５−イルオキシ）−プロピル］−ピペリジン−２−カルボニル｝−ピペリジン−２−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３４）の調製
【０１７３】
【化３８】

【０１７４】
１−（ピペリジン−２−カルボニル）−ピペリジン−３−カルボン酸［４−フェニル−１−（３−フェニル−プロピル）−ブチル］−アミド（３３）（２３４．４ｍｇ、０．４９７ｍモル）を、室温でエタノール（１２ｍＬ）中に溶解する。（Ｒ）−５−オキシラニルメトキシ−キノリン（２）（１００．０ｍｇ、０．４９７ｍモル）を添加し、次いで混合物を２４．５時間還流する。室温まで冷却後、溶液を減圧下４０℃で濃縮する。残基を、勾配溶離（ヘキサン中、８０％→９０％エチルアセテート、ヘキサン中、５０％→１００％アセトン、次いでアセトン中、５％エタノール）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物（２５０ｍｇ）を白色固形物として得る。ＥＳＭＳ：ＭＨ⁺６９１．２。
【０１７５】
参照例１ −Ｐｇｐを阻害する活性度を測定する方法（逆転定量法）
（ゴッテスマン（M.Gottesman）（国立衛生研究所）から得られる）ＮＩＨ−ＭＤＲ１−Ｇ１８５細胞を回収し、Ｌ−グルタミン、１０％ウシ血清（Cosmic calf serum）、およびペニシリン−ストレプトマイシンを含有するＲＰＭＩ１６４０中に６×１０４細胞／ｍｌで再懸濁させた。細胞懸濁液のアリコート１００マイクロリットルを９６穴マイクロタイタープレートの各々のウェルに添加し、３７℃で一晩インキュベートして細胞を付着させた。抗癌剤の存在下での細胞の生存率を、ＭＤＲ改変剤の存在下と非存在下においてＭＴＴ定量法（ネルソン（P.A.Nelson）ら、免疫学誌（J.Immunol）、１５０：２１３９〜２１４７頁（１９９３年））を用いて測定した。
【０１７６】
簡単には、細胞を、３７℃にて１５分間ＭＤＲモジュレータ（最終濃度５マイクロモル）でプレインキュベートし、次いで抗癌剤の濃度を変えて３７℃で７２時間処理した。ＭＴＴ色素（２０マイクロリットルの５ｍｇ／ｍｌＰＢＳ溶液）を各々のウェルに添加し、３７℃で４時間インキュベートした。培地を注意深く取り除き、色素を１００マイクロリットルの酸性化イソプロピルアルコールを用いて可溶化した。吸光度を分光光度プレートリーダーにて５７０ｎｍで測定し、６３０ｎｍにおいて差し引いてバックグランド修正した。逆転指数を各々のＭＤＲモジュレータについて計算し、次のようにベンチマークモジュレータＶＸ−７１０の逆転指数について標準化した。
逆転指数＝モジュレータの非存在下でのＩＣ₅₀／モジュレータの存在下でのＩＣ₅₀
標準化された逆転指数＝モジュレータの逆転指数／ＶＸ−７１０の逆転指数
ＶＸ−７１０は、（Ｓ）−Ｎ−［２−オキソ−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）アセチル］ピペリジン−２−カルボン酸１，７−ビス（３−ピリジル）−４−ヘプチルエステルである。
【０１７７】
参照例２ −ＰｇｐおよびＭＲＰ１を阻害する活性度を測定する方法（カルセインＡＭ放出定量法）
Ｐｇｐ−依存性のカルセインＡＭの放出を、ＮＩＨ−ＭＤＲ１−Ｇ１８５細胞またはＨＬ６０−ＭＤＲ１細胞において測定した。ＭＲＰ１−依存性のカルセインＡＭの放出をＨＬ６０／ＡＤＲ細胞において測定した。３７℃、０．２５ｍＭのカルセインＡＭを含有する細胞培養培地において、０．５〜１×１０６細胞／ｍｌをインキュベートすることにより、励起波長４９３ｎｍおよび発光波長５１５ｎｍにて色素の取り込み量を測定した。ＭＤＲモジュレータの濃度を変化させた場合のカルセインＡＭ輸送の阻害率を、遊離のカルセインの蛍光が増加する速度を５分間隔で測定することによって測定した。ＩＣ５０値は、５０％の最大輸送阻害が得られるモジュレータ濃度を測定することによって得た。最大輸送阻害率は、５０マイクロモルから６０マイクロモルのベラパミルの存在下で得られる％阻害率であった。
【０１７８】
参照例３ −蛍光基質蓄積量定量
（ゴッテスマン（M.Gottesman）（国立衛生研究所）から得られる）ＮＩＨ−ＭＤＲ１−Ｇ１８５細胞を回収し、Ｌ−グルタミン、１０％ウシ血清（Cosmic calf serum）、およびペニシリン−ストレプトマイシンを含有するＲＰＭＩ−１６４０中に再懸濁した。細胞懸濁液のアリコート１７５マイクロリットル（１×１０５細胞）を９６穴マイクロタイタープレートの各々のウェルに添加し、細胞培養培地に希釈された２０マイクロリットルのＭＤＲモジュレータで３７℃にて１５分間プレインキュベートし、最終濃度を１０マイクロモルにした。コントロールウェルは、モジュレータを使用しなかった。ＢＯＤＩＰＹ−ＦＬタキソール（モレキュラ・プローブス（Molecular Probes）、オレゴン州ユージーン）を各々のウェルに１０マイクロリットルアリコートで添加し、最終濃度を５００ｎＭにし、細胞を３７℃で４０分間インキュベートした。細胞を４℃で５分間１００×ｇで遠心分離し、細胞ペレットを２００マイクロリットルの冷ＰＢＳで洗浄して、蛍光培地をウェルから取り除いた。細胞をもう一度遠心分離して、培地を取り除き、２００マイクロリットルの冷ＰＢＳで再懸濁した。蛍光蓄積量を、４８５ｎｍでの励起フィルターおよび５３８ｎｍの発光フィルターにあわせて蛍光プレートリーダーで測定した。細胞中のＢＯＤＩＰＹ−ＦＬタキソール蓄積量を以下のように計算した。
蓄積指数＝（モジュレータの存在下でのＮＩＨ−ＭＤＲ−Ｇ１８５細胞における蛍光）／（モジュレータの非存在下でのＮＩＨ−ＭＤＲ１−Ｇ１８５細胞における蛍光）
【０１７９】
参照例４ −ＭＤＲ１についての基質ポテンシャルを測定する方法（ＭＤＲ１ＡＴＰアーゼ定量法）
ヒトＭＤＲ１遺伝子を有する組換えバキュロウィルスを発生させ、Ｓｆ９細胞をウィルスで感染させた。ウィルス感染した細胞を回収し、その膜を単離した。単離しＳｆ９細胞膜のＭＤＲ１−ＡＴＰアーゼ活性を、以前に記載されるように無機リン酸塩の遊離を測定することによって評価した（サルカディ（B.Sarkadi）、生化学誌（J.Biol.Chem.）、１９９２年、２６７：４８５４〜４８５８頁）。１００マイクロモルのバナデートの非存在下および存在下で測定したＡＴＰアーゼ活性度の差をＭＤＲ１に対する比活性度として測定した。最大半減活性を生じるＭＤＲモジュレータ濃度（Ｋａ）、または３０マイクロモルから４０マイクロモルのベラパミルによって刺激されたＭＤＲ１−ＡＴＰアーゼの最大半減阻害を生じるＭＤＲモジュレータ濃度（Ｋｉ）を測定した。
【０１８０】
実施例Ａ −化合物の活性
上記のように調製した種々の化合物の蓄積指数を参照例３の方法に従って試験した。結果を表６に示す。
【０１８１】
【表６】

【０１８２】
【表７】

【０１８３】
実施例Ｂ −本発明の活性化合物の経口投与組成物 本発明に従う活性化合物を６０番の粉末にすることによって、経口投与用組成物を調製する。デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを６０番のふるい絹を通して粉末にする。一緒にした成分を１０分間混合し、好適な大きさの硬質シェルカプセルに充填し、充填量を１カプセルあたり１００ｍｇにする。カプセルは、以下の組成物を含有する。
【０１８４】
【表８】

【０１８５】
実施例Ｃ −化学治療薬を有する本発明の活性化合物の経口投与組成物
ビンブラスチンおよび本発明の活性化合物の混合物を、６０番の粉末にする。ラクトースおよびステアリン酸マグネシウムを６０番のふるい絹を通して粉末にする。一緒にした成分を１０分間混合し、次いで１番の乾燥ゼラチンカプセルに充填する。各々のカプセルは、以下の組成物を含有する。
【０１８６】
【表９】

【０１８７】
実施例Ｄ −本発明の活性化合物の非経口投与組成物
本発明の活性化合物（１ｍｇ）を１０％のクリマホー（cremaphor）、１０％のエタノール、および８０％の水の溶液１ｍＬ中に溶解する。溶液を濾過により滅菌する。
【０１８８】
実施例Ｅ −本発明の活性化合物の非経口投与組成物
本発明に従う活性化合物の充分な量およびＴＡＸＯＬ（タキソール）（登録商標）を、０．９％の塩化ナトリウム溶液中に溶解し、得られる混合物が０．９ｍｇ／ｍＬの本発明の活性化合物および１．２ｍｇ／ｍＬのＴＡＸＯＬ（タキソール）（登録商標）を含有するようにする。
１３５ｍｇ／ｍ²のＴＡＸＯＬ（タキソール）（登録商標）を送達するのに充分な量の溶液を、２４時間かけて卵巣癌を患う患者に静脈投与する。

Claims (5)

1. 下記式：
   

   

   から成る群から選択されることを特徴とする化合物。
2. 請求項１に記載の化合物および製薬上許容可能な担体を含むことを特徴とする組成物。
3. ＭＲＰ１−およびＰｇｐ−介在性の多剤耐性を治療するのに好適な薬剤を製造するための、請求項１に記載の化合物の使用。
4. 請求項１に記載の化合物および治療薬を含む医薬組成物。
5. 前記治療薬が、（ｉ）癌治療薬、（ii）抗菌剤、（iii）抗ウイルス剤、（iv）抗カビ剤、および（ｖ）これらの組み合わせからなる群から選ばれることを特徴とする請求項４に記載の医薬組成物。