JP4299837B2

JP4299837B2 - 呼気凝縮液の採取のための使い捨てハンドヘルド装置

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Publication number: JP4299837B2
Application number: JP2005510061A
Authority: JP
Inventors: ジェフリーエー．クライン，
Original assignee: ザシャーロット‐メクレンバーグホスピタルオーソリティ
Priority date: 2002-12-20
Filing date: 2003-12-19
Publication date: 2009-07-22
Anticipated expiration: 2023-12-19
Also published as: HK1083733A1; US20070203424A1; ATE427068T1; US20130197388A1; EP1571985A4; CA2511218A1; AU2003300356A1; EP1571985A2; AU2003300356A8; EP1571985B1; JP2006511824A; US8491494B2; BR0316872A; WO2004058125A2; DE60326988D1; WO2004058125A3; CA2511218C; BR0316872B1; US20040138577A1

Description

本願は、「ＤＩＳＰＯＳＡＢＬＥＨＡＮＤ−ＨＥＬＤＤＥＶＩＣＥＦＯＲＣＯＬＬＥＣＴＩＯＮＯＦＥＸＨＡＬＥＤＢＲＥＡＴＨＣＯＮＤＥＮＳＡＴＥＦＯＲＡＳＳＡＹＯＦＢＩＯＭＡＲＫＥＲＳＦＯＲＴＨＥＤＥＴＥＣＴＩＯＮＡＮＤＰＲＯＧＮＯＳＩＳＯＦＬＵＮＧＩＳＣＨＥＭＥＭＩＡ」と称する２００２年１２月２０日に出願した米国特許仮出願第６０／４３４９１６号、および「ＤＥＶＩＣＥＡＮＤＭＥＴＨＯＤＦＯＲＣＯＬＬＥＣＴＩＯＮＯＦＥＸＨＡＬＥＤＡＬＶＥＯＬＡＲＢＲＥＡＴＨＣＯＮＤＥＮＳＡＴＥ」と称する２００３年２月１４日に出願した米国特許仮出願第６０／４４７５８１号の優先権の利益を享有し、優先権を主張する。これらの各々を丸ごと参照によって本書に組み込む。

本発明は、呼気凝縮液の採取医療検査および診断に関し、特に、内壁と外壁との間に埋め込まれた冷却材と、側面装着呼気入力アセンブリと、凝縮液をそこから採取することのできる出口と、凝縮液を出口から絞り出すためのプランジャとを有する二重壁チャンバに関する。採取された試料は次いで、肺虚血および関連する肺血管狭窄の存在および重症度を示すバイオマーカーについて検査することができる。

呼気の約６％は水蒸気および水滴である。呼気の水分の一つの源は、肺の肺胞の内側を覆う流体である。言い換えると、呼吸から吐き出される水蒸気は、気管支および肺胞内の流体と平衡化し、したがって呼気凝縮液の採取は、これらの流体の試料採取の非侵襲性手段を提供する。

呼気凝縮液は、溶解ガス、有機溶質、イオン、およびタンパク質をはじめとする、水溶性および非水溶性分子を含む。特定の疾患を持つ患者からの呼気凝縮液試料は、炎症性分子の含有率が上昇することが示されてきた。例えば、以前の研究で、喫煙、喘息、および嚢胞性線維症はプロスタグランジン誘導体、トロンボキサン、ロイコトリエン、およびサイトカインの存在を増加させることが実証された。（ＳＡＫｈａｒｉｔｏｎｏｖおよびＰＪＢａｒｎｅｓ、Ｅｘｈａｌｅｄｍａｒｋｅｒｓｏｆｐｕｌｍｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅ、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ１６３：１６９３−１７２２、２００１）。しかし、最近まで、肺虚血の存在および重症度の決定に役立つ、呼気水蒸気中のバイオマーカーを同定する研究は、ほとんど行なわれてこなかった。

しかし、最近の研究は、比較的少量の呼気凝縮液試料に一連の検査を実行することによって、肺虚血を検知することができることを示している。肺虚血について提案された一連の検査は、繊維素ペプチド、トロンボキサンＢ_２、血小板活性化因子、ロイコトリエンＣ、Ｄ、およびＥ、一酸化炭素対酸化窒素比、ならびにケモカインおよび他のタンパク質を含むことができる。呼気凝縮液中の繊維素ペプチドの測定は、肺脈管構造における血餅の存在のより局所的な測定を可能にする潜在的可能性を持つと思われる。トロンビンが、繊維素ゲル化の必須条件として、繊維素原から繊維素原Ａペプチドを開裂することは、公知である。その小さいサイズのため、繊維素ペプチドは肺胞膜を横断して肺胞液中で平衡化し、それにより呼気凝縮液中に見られることが仮説として立てられる。

また、肺血管狭窄は、ＰＧＦ２α、トロンボキサンＢ２、ＰＡＦ、ロイコトリエンＣ、Ｄ、およびＥ、ならびに凝縮液中のＣＯ対ＮＯの比を測定することによって検知することができ、肺血管拡張剤治療またはＣＯＸ１，２抑制を開始するための基礎がもたらされると思われる。我々の研究室は、ラットへのポリスチレン小球体の静脈注入によって誘導した実験的な肺血管閉塞（ＰＶＯ）を使用して、呼気凝縮液分析に関連する三つの主要な研究結果を決定した。我々およびその他は、我々のラットモデルにおける肺洗浄液中のＰＧＦ２ａ、トロンボキサンＢ２、血小板活性化因子（ＰＡＦ）、および血管収縮性ロイコトリエンＣ、Ｄ、およびＥの含有量の増加を発見した（Ｎａｋｏｓ、ＡｍＪＲｅｓｐＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ１９９８、１５８：１５０４）。これらの血管収縮剤の濃度の大きさは、低酸素血症および肺高血圧症の重症度と相関した。我々はまた、ヘムオキシゲナーゼ１をコード化する遺伝子の極端に増加する発現、および誘導酵素、酸化窒素合成酵素をコード化する遺伝子の発現に関するほぼ完全な欠如を発見した。ヘムオキシゲナーゼはヘム基質から一酸化炭素（ＣＯ）を産生する一方、酸化窒素合成酵素は酸化窒素（ＮＯ）を産生する。両方とも血管拡張物質である。ＰＶＯにさらされたラットにおいて、我々はまた、サイトカイン誘導好中球誘引物質１および２（ＣＩＮＣ１＆２）、ならびに単球／マクロファージ遊走因子（ＭＣＰ）１および２、ならびに単球／マクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ）１αおよび１βの遺伝子発現の肺における早期増加と共に、肺気道および肺胞からの洗浄液中の各タンパク質の同時増加が、ＰＥの誘導から早くも２時間後に得られ、ＰＥ誘導から１８時間後まで続くことを発見した。化学遊走分子はロイコサイトの患部への移動を引き起こすことがあり、このメカニズムを通して、治療再灌流中に傷害を増大させるおそれがある。

さらに、呼気凝縮液中の特定のケモカインの存在は、再灌流傷害の素因になると考えられる。ラットで発見されたケモカインには、ＣＩＮＣ１、ＣＩＮＣ２、ＭＩＰｌα、ＭＩＰ１β、ならびにＭＣＰ１および２が含まれた。我々の装置で検査されるヒト相同体は、ＺｌｏｔｎｉｃｋおよびＹｏｓｈｉｅ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、２０００、１２：１２１‐１２７によって概説された命名法による、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、およびＣＸＣＬ３、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、およびＣＣＬ８を含むであろう。ケモカインは肺高血圧症の炎症性モデルで発見された。（Ｋｉｍｕｒａ、ＬａｂＩｎｖｅｓｔ１９９８７８：５７１‐８１；Ｉｋｅｄａ、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏｌ、２００２、２８３（５）：Ｈ２０２１‐８）。主に血流障害を引き起こす生体内ＰＶＯモデルとは異なり、後者の研究のモデルは炎症および組織修復を刺激し、それは数週間にわたって血管閉塞を導く。同様に、研究者らは、灌流および換気の両方を妨げる、肺門結紮またはクランプを受けた肺におけるケモカインの発現の増加をも発見した。肺胞換気は生体内ＰＶＯでは続行されるので、後者のモデルは生体内ＰＶＯとは著しく異なる。したがって、虚血性傷害は、生体内ＰＶＯと肺門結紮とでは異なる。

呼気凝縮液を含む呼気を分析し、あるいは別の方法で呼気の特定の成分を測定する試みが行なわれてきた。例えば、ＧａｓｔｏｎＩＶらの米国特許第６４１９６３４号および第６０３３３６８号は、呼気凝縮液を十分に冷却して内管の壁に凝縮させるために、冷却剤が管を同軸的に包囲する、使い捨て装置を開示している。残念ながら、該装置は、酸化窒素の測定用に設計されており、呼気凝縮液におけるタンパク質またはエイコサノイドの決定を容易にするように意図されたものではない。その結果、それは多数の欠点を免れない。第一に、Ｇａｓｔｏｎの装置は、分析機器に直接取り付けられ、したがって、救急治療部または他の外来患者の少量の凝縮液の採取のために、ベッドサイドで使用するには大きすぎ、かつ扱いが煩雑すぎる。Ｇａｓｔｏｎの装置はまた、試料を一つのチャンバに集め、次いで分析のために、液滴融合および重力の複合作用によって別個の第二チャンバに移送しなければならないので、非効率な試料採取を免れない。おそらくもっと悪いことに、Ｇａｓｔｏｎの装置は、装置が酸化窒素の分光光度分析用に特に設計されたチャンバで凝縮液を採取し、したがって、上記パネルの成分を測定するために、凝縮液をそこから吸引し、分注し、あるいは別の方法で回収して、その後に別個のアッセイウェルに移送するためのポートまたは他のアクセス可能な貯蔵所を持たないので、分析機器から分離して使用することができない。

さらに、Ｇａｓｔｏｎはその内管で凝縮液を下方に絞り出すのに、注射器のプランジャと同様の装置を使用することに言及しているが、Ｇａｓｔｏｎは、そのようなプランジャを導入管とどのように統合させるかの問題を解決していない。また、Ｇａｓｔｏｎの装置の内管で液を下方に絞り出すためにプランジャを含めても、前述した追加的問題は解決されない。つまり、Ｇａｓｔｏｎは、採取された液を分析チャンバの外で検査するために取り出して移送するための簡単な方法を依然として開示していない。最後に、Ｇａｓｔｏｎの冷却剤は、限られた呼吸数から較正された量の凝縮液の凝縮を可能にするように、較正されていない。それどころか、Ｇａｓｔｏｎの装置は、十分な量の凝縮液を採取するために、長時間の呼吸を持続する必要であり、問題は装置から凝縮液をより効率的に取り出すプランジャの欠如によって悪化する。これは、主に、Ｇａｓｔｏｎ装置では、意図された種類の検査をそこで実行するために、かなりの量の凝縮液が必要なためである。前述の通り、本発明の主な目的は、上述した種類の検査を実行するために必要な、比較的少量の凝縮液を採取することである。そのような検査はＧａｓｔｏｎによって予想されていなかったので、Ｇａｓｔｏｎの装置はそのような検査を可能にするために開発されたものではなかった。したがって、上述したような検査を実行するために、要望通りの分注を可能にするやり方で、少量の呼気凝縮液を採取するための高速かつ簡便な装置および方法の必要性が存在する。

上述したような呼気水蒸気中の特定のバイオマーカーを測定する能力は、肺虚血の存在および重症度を決定する上で役立つという仮説が立てられる。肺虚血は、血栓塞栓症、鎌状赤血球病、脂肪および空気塞栓症をはじめ、多くの過程によって引き起こされ得る。ポイントオブケア装置で迅速かつ容易に呼気凝縮液を採取する能力は、特に救急治療部または臨床環境において、これを目的とする呼気に基づく診断の臨床的有用性を改善するであろう。本書に記載する装置は、患者がハンドヘルド型使い捨てチャンバ内に息を吹き込むことができ、約１００〜１０００マイクロリットルのエアロゾル化および気化した水および溶質の採取を促進するように設計され、それらは次いで、酵素結合免疫測定法を使用して特定のタンパク質および他の有機化合物の有無について、かつレーザ分光光度測定法を使用して酸化窒素に対する一酸化炭素の割合の測定のために、分析することができる。

本発明の目的は、携帯可能な装置で呼気中水蒸気のコールドトラップを可能にする方法を提供することである。

本発明の別の目的は、既知回数の呼息の吹込み後に氷が融解して、凝縮した呼気中の水のエアロゾルおよび蒸気の採取ができるように、既知量の凍結水の使用を可能にするメカニズムを提供することである。

本発明のさらに別の目的は、水蒸気および周囲空気による汚染を防止する一連の弁を有する、呼気凝縮液採取装置を提供することである。

本発明のさらに別の目的は、プランジャ型のメカニズムを使用して、採取された凝縮液を小さい貯蔵所内に絞り出して液の採取を促進する、呼気凝縮液採取装置を提供することである。

本発明のさらに別の目的は、呼気凝縮液採取装置を、それが装置のコストを最小化する使い捨てユニットとなるように、装置の最小限のコストを可能にする材料を使用して作成することである。

本発明のさらに別の目的は、血管収縮剤分子についての検査、ＣＯ対ＮＯ比の測定、およびケモカインタンパク質の測定を促進するために、呼気凝縮液試料を迅速に採取し、分注するための方法を提供することである。

本発明は、検査のために患者から呼気凝縮液を非侵襲的に採取するための装置および方法を含む。広義には、一態様に係る本発明は、二重側壁ならびに第一および第二の対向端を有する中央チャンバであって、二重側壁が相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む中央チャンバと、中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材と、中央チャンバの外側壁の外側に配置され、呼気入力アセンブリの内部が中央チャンバの内部と流体連通するように内側壁および外側壁の両方を貫通する呼吸入力アセンブリと、ピストンおよびハンドルを有するプランジャアセンブリであって、ピストンが内側壁とぴったり接触する状態で中央チャンバの内部に摺動可能に配置され、ハンドルが中央チャンバの第一端から、ピストンを中央チャンバ内で移動させることができるように伸長して成るプランジャアセンブリと、中央チャンバの内部と流体連通するように中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポートと、を含む呼気凝縮液採取装置である。

この態様の特徴では、プランジャアセンブリは、完全に後退した位置と、完全に押し込まれた位置との間で調整可能であり、プランジャがその完全に後退した位置にあるときに、呼気入力アセンブリと中央チャンバとの間の流体接続はピストンと中央チャンバの第二端との間に存し、中央チャンバの外側壁の外側の呼気入力アセンブリの位置は中央チャンバの第一端に隣接し、中央チャンバはその第二端に端壁を含み、呼気凝縮液採取ポートは中央チャンバの端壁に配置され、ピストンは中央チャンバの第二端の方向を向いた表面を含み、ピストンの該表面に突起が配置され、該突起は、プランジャアセンブリが中央チャンバ内に完全に押し込まれたときに、呼気凝縮液採取ポート内に嵌合されるように適応され、呼気凝縮液採取ポートおよび突起は各々半円錐形であり、突起の側面には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の溝が配置され、突起の内部には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の内部通路が配置され、呼気凝縮液採取ポートは中央チャンバの外側壁の外側にその第二端に隣接して配置され、呼気凝縮液採取ポートは中央チャンバの底部に配置され、呼気凝縮液採取装置はまた、中央チャンバの外側壁の頂部にその第二端に隣接して配置された出口および出口弁をも含み、呼気凝縮液採取装置はまた呼気凝縮液採取ポートを一時的に密封するためのキャップをも含み、呼気凝縮液採取装置は主軸心を画定し、呼気入力アセンブリはマウスピースと、マウスピースを中央チャンバの側面に接続する管構造とを有し、マウスピースは一般的に呼気凝縮液採取装置の主軸心と平行に方向付けられ、呼気凝縮液採取装置はまた、呼気凝縮液採取装置の移動または取扱いを容易にするように、その中に採取された呼気凝縮液が取り出されるときまで、プランジャアセンブリのハンドルを完全に押し込まれた位置でロックするために、中央チャンバの第一端に取り付けられた少なくとも一つのクリップをも含む。

本発明の別の態様では、本発明は、二重側壁と、第一および第二の対向端と、中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内部側壁と外部側壁との間に密封された冷却材と、中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポートとを有する中央チャンバを提供すること、冷却材の温度を下げて中央チャンバの少なくとも内壁を冷却すること、中央チャンバの外側壁の外側に配置された呼気入力アセンブリを介して、内側壁および外側壁を通して送り出された患者からの呼気を、中央チャンバの内部に受容すること、中央チャンバの内壁の内部表面に呼気の一部分を凝縮させること、プランジャアセンブリを中央チャンバ内で押し下げることによって、凝縮ステップ中に生成された凝縮液を中央チャンバから絞り出し、それによって凝縮液を呼気凝縮液採取ポート内に押し込むこと、および絞り出された凝縮液をその分析のために呼気凝縮液採取ポートから吸引することを含む呼気凝縮液を採取する方法である。

この態様の特徴では、吸引ステップは絞り出された凝縮液をピペットに吸引することを含み、該方法はまた凝縮液をピペットからその分析用の別個のアッセイウェルに移すことをも含み、提供ステップは、中央チャンバの外側壁の頂部にその第二端に隣接して配置された出口および出口弁を有し、かつ中央チャンバの底部に配置された呼気凝縮液採取ポートを有する中央チャンバを提供することを含み、該方法はまた受容および凝縮ステップ中に呼気凝縮液採取ポートを一時的に密封することをも含み、提供ステップは、中央チャンバの第一端に取り付けられた少なくとも一つのクリップを有する中央チャンバを提供することを含み、該方法はまた、プランジャアセンブリを押し込むことによって凝縮液を絞り出した後で、呼気凝縮液採取装置の移動または取扱いを容易にするように、その中に採取された呼気凝縮液が取り出されるときまで、少なくとも一つのクリップを介して、プランジャアセンブリのハンドルを完全に押し込まれた位置でロックするステップを含む。

本発明の別の態様では、本発明は、相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む二重側壁を有する中央チャンバと、中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材と、内部が中央チャンバの内部と流体連通する呼気入力アセンブリと、凝縮液を形成することのできる表面積を増大するために中央チャンバの内部に配設された一つまたはそれ以上の障害構造物と、中央チャンバの内部と流体連通する呼気凝縮液採取ポートとを含む呼気凝縮液採取装置である。

この態様の特徴では、障害構造物は格子状構造物を含み、障害構造物は離散的幾何学構造物を含み、離散的幾何学構造物は球体を含み、離散的幾何学構造物は金属から形成され、離散的幾何学構造物はガラスから形成され、障害構造物は中央チャンバの内部の所定の位置に固定され、障害構造物は中央チャンバの内部で自由浮動し、障害構造物の運動は中央チャンバの特定部分に制限される。

本発明の別の態様では、本発明は、内部に配設された一つまたはそれ以上の障害構造物と、中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材とを有する二重壁中央チャンバを提供すること、冷却材の温度を下げて中央チャンバの少なくとも内壁および障害構造物を冷却すること、患者からの呼気を中央チャンバの内部に受容すること、中央チャンバの内壁の内部表面および障害構造物に呼気の一部分を凝縮させること、および凝縮ステップ中に生成された凝縮液を中央チャンバから取り出すことを含む呼気凝縮液を採取する方法である。

この態様の特徴では、取出しステップは障害構造物から凝縮液を洗い流すことを含み、洗浄ステップは中央チャンバにある量の液体を加えることを含み、該量は中央チャンバに存在する凝縮液の量に対応するように選択され、洗浄ステップは中央チャンバにある量の液体を加えることを含み、該量は、患者が予め定められた期間中央チャンバ内に息を吹き込んだ後に中央チャンバ内に存在する見込みのある凝縮液の量に対応するように選択され、洗浄ステップは中央チャンバにある量の液体を加えることを含み、該量は、患者が予め定められた回数の呼気の吹込みを終了した後、中央チャンバ内に存在する見込みのある凝縮液の量に対応するように選択され、該方法は、洗浄ステップを実行する前に、中央チャンバから障害構造物を取り外すことをさらに含む。

本発明の別の態様では、本発明は、着脱自在の出口アセンブリと中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材とを有する二重壁中央チャンバを提供すること、冷却材の温度を下げて中央チャンバの少なくとも内壁を冷却すること、患者からの呼気を中央チャンバの内部に受容すること、中央チャンバの内壁の内部表面に呼気の一部分を凝縮させること、出口アセンブリを取り外してそれを試料採取ウェルと交換すること、および凝縮ステップ中に生成された凝縮液を中央チャンバから試料採取ウェルへ移動させることを含む呼気凝縮液を採取する方法である。

この態様の特徴では、凝縮液を移動させるステップは、中央チャンバから試料採取ウェルへ既知の液体で凝縮液を洗い流すことを含み、凝縮液を洗い流すステップは、予め定められた量の既知の液体を中央チャンバ内に導入すること、予め定められた量の既知の液体を凝縮液と混合すること、および既知の液体および凝縮液を中央チャンバから試料採取ウェルへ排出させることを含み、出口アセンブリを取り外すステップは中央チャンバに開口を形成することを含み、導入のステップは該開口を介して既知の液体を導入することを含み、該方法は、出口アセンブリを試料採取ウェルと交換する前に試料採取ウェルに既知の液体を貯蔵することをさらに含み、既知の液体は緩衝溶液である。

本発明の別の態様では、本発明は、内部に配設された一つまたはそれ以上の障害構造物と、中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材とを有する二重壁中央チャンバを提供すること、予め定められた温度で開始するときに、典型的な患者から受け取る選択された回数の呼気が、十分な量の呼気凝縮液を生成して中央チャンバの内壁の内部表面上に採取されるように、二重壁中央チャンバの壁および冷却材を較正すること、冷却材の温度を予め定められた温度に下げて中央チャンバの少なくとも内壁を冷却すること、選択された回数の呼気に基づいて確立された予め定められた範囲内の呼気回数である複数の呼気を特定の患者から中央チャンバの内部に受容すること、中央チャンバの内壁の内部表面に患者から受容した呼気の一部分を凝縮させること、および凝縮ステップ中に生成された凝縮液を中央チャンバから取り出すことを含む呼気凝縮液を採取する方法である。

この態様特徴では、予め定められた範囲は１０回から２５回までの呼気である。予め定められた温度は標準フリーザの温度であり、予め定められた温度は０°Ｆである。

図面の簡単な記述
本発明のさらなる特徴、実施形態、および利点は、図面に関連する以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
図１は、本発明の第一の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。
図２は、二重壁構造を示す図１の装置の、線２−２に沿って切った右端面断面図である。
図３は、図１の装置の右端面図である。
図４は、プランジャアセンブリが完全に押し込まれた位置にある、図１の呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。
図５は、本発明の第二の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。
図６Ａは、一つの型の突起を示す、図５のプランジャアセンブリの部分側面図である。
図６Ｂは、図６Ａのプランジャアセンブリの右端面図である。
図７Ａは、別の型の突起を示す、図５のプランジャアセンブリの部分側面図である。
図７Ｂは、図７Ａのプランジャアセンブリの右端面図である。
図７Ｃは、図７Ａのプランジャアセンブリの部分側面断面図である。
図８は、本発明の第三の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。
図９は、反転した配向で示される図１の呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。
図１０は、本発明の第四の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。
図１１は、図１０の装置用の着脱自在の出口キャップの断面略図である。
図１２は、図１０の装置用の着脱自在の試料採取ウェルの断面略図である。
図１３は、試料採取ウェルが設置された状態の図１０の呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。

今、図面を参照すると、幾つかの図を通して類似の数字は類似の構成部品を表わしており、本発明の好適な実施形態に係る様々な呼気凝縮液採取装置１０、１１０、２１０、３１０について次に示し、説明する。

図１は、本発明の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置１０の側面断面略図である。呼気凝縮液採取装置１０は二重壁シリンジ２０および呼気入力アセンブリ５０を含む。シリンジ２０の内壁２２は、ピストン２６と、ゴムガスケット２８と、シリンジ２０の一端から延びるハンドル３０とを含むプランジャアセンブリ２５が中に嵌合される、中央シリンダ２４を画定する。外壁３２は、内および外壁２２、３２の間に狭い空間が形成されるように、内壁２２の周囲に配設される。図２は、二重壁構造を示す図１の装置１０の、線２‐２に沿って切った右端面断面図であり、図３は、図１の装置の右端面図である。製造中に、内および外壁２２、３２の間の空間は冷却材３４のジャケットで埋めることができ、次いで漏れを防止するように外壁３２を内壁２２に封着することができる。好適な実施形態では、冷却材３４として水を使用することができるが、ポリエチレングリコール（「ＰＥＧ」）および類似物のような、他の材料を同様に使用することができることは明らかである。

シリンジ２０はさらに、入口３６、出口３８、採取ポート３９、および一対の一方向弁４０、４２を含む。吹き込まれた呼気の中央シリンダ２４内の一方向のみの通過を容易にするために、第一弁４０は、入口３６にまたはそれに隣接して配置することのできる吸込み弁であり、第二弁４２は、出口３８にまたはそれに隣接して配置することのできる出口弁である。出口弁４２は、以下で明らかになる目的のために、中央シリンダ２４と採取ポート３９との間に配置することが好ましい。出口３８は、中央シリンダ２４内に採取された物質をピストン２６によって出口３８から絞り出すことを可能にするために、プランジャハンドル３０の反対側の端に配置することが好ましい。弁４０、４２は様々な図面に概略的にしか示されていないが、それらは例えば、プラスチックまたは別の変形可能なポリマから形成された二つまたは三つの自己密封弁葉を含むことができる。そのような弁の設計は、通常の当業熟練者には明白であろう。

さらに、ピストン２６はシリンジ２０の一端を塞ぎ、かつ出口３８は反対側の端に配置されるので、入口３６は、シリンジ２０の側面に内および外壁２２、３２の両方を貫通するように配設することが好ましい。中央シリンダ２４内を通過する吹き込まれた呼気と内壁２２の内部表面４４との間の最大の相互作用を引き起こすために、入口３６はピストン２６にできるだけ近くに配置することが好ましいが、本発明の範囲から逸脱することなく、これらの構成部品の他の配設が同様に可能であることは明らかであろう。

呼気入力アセンブリ５０は、マウスピース５２と、フィルタ５４と、吹き込まれた呼気をマウスピース５２からシリング２０の入口３６に誘導するために必要な任意の配管５６とを含む。マウスピース５２は、患者の口部と快適に接触することができるような適切なサイズおよび形状である。穿孔または連続貫入を有するポリマ材を含むことのできるフィルタ５４は、唾液および他の液体または最小サイズの固形物がそこを通過してシリンジ２０内に入るのを防止するために、マウスピース５２とシリンジ入口３６との間で配管５６内に配設することができる。唾液はさらに、呼気入力アセンブリ５０を通過した呼気が上方に移動するように、呼気入力アセンブリ５０をシリンジ２０の下に配設することによって、中央シリンダ２４に到達するのを防止することができる。この構成では、唾液および他の液体または固形物に対する重力の作用が、そのような物質の中央チャンバ２４内への上昇移動を防止するのに役立ち、代わりにそれは配管５６内で採取され易くなる。

配管５６は、マウスピース５２または配管５６の他の部分と、本書で記述するようなプランジャアセンブリ２５の動作との間の干渉を防止するように構成することが好ましい。さらに好ましくは、マウスピース５２は、シリンジ２０およびその中のプランジャアセンブリ２５と略平行に方向付けられ、言い換えると、マウスピース５２は、シリンジ２０によって画定される主軸心と平行に方向付けられる。この配向により、呼気は患者から、プランジャアセンブリ２５の動作に干渉を引き起こすことなく受容することができ、患者が装置１０を使用するときにシリンジ２０の内部に形成される凝縮液は、出口３８に向かって下方に排出され易くなる。

装置１０の寸法は、患者または付添い人によって容易に保持されるように十分に小型かつ軽量である装置１０であって、患者がその呼吸パターンを変える必要のない装置１０を使用して、十分な量の凝縮液を比較的短時間で採取することができるように選択される。壁２２、３２および装置１０の他の構造は、白金硬化シリコンのような、タンパク質に結合する傾向のない材料から構成することが好ましいが、他の適切な材料として、ガラス、プラスチック、ポリエチレン、ポリカーボネート、またはポリビニルもしくは他の合成ポリマを挙げることができ、それらに限らない。プランジャアセンブリ２５は同様に非タンパク質結合材料から構成することが好ましいが、プラスチック、ビニル、ポリエチレン、ゴム、白金硬化シリコン、またはテフロン（商標）をはじめ、それらに限らず、任意の適切な不活性材料から構成することができる。好適な実施形態では、シリンジ２０は、長さが１０ｃｍから２０ｃｍの間、直径が２ｃｍから５ｃｍの間であり、採取ポート３９は長さが５ｍｍから２０ｍｍの間、内径が３ｍｍから１０ｍｍの間である。冷却材ジャケット３４の厚さは１ｍｍから１０ｍｍの間とすることができ、一回の使用から絞り出される試料の量は、１００μＬから１０００μＬの間であることが好ましいが、わずか２５μＬの試料からでも有用な結果を得ることが可能であるかもしれない。

動作の際には、最初に、温度を約０°Ｆに低下させることのできる、従来の家庭用または商業用フリーザのような冷凍装置に、一つまたはそれ以上のシリンジ２０を貯蔵し、こうしてシリンジ２０の内および外壁２２、３２の間に含まれる冷却材３４のジャケットを冷凍させる。患者を検査するときに、単一のシリンジ２０が最初にフリーザから取り出される。呼気入力アセンブリ５０またはマウスピース５２を装置１０の残部とは別個に貯蔵している場合には、様々な構成部品を一つに結合することによって、装置１０を使用するように組み立てる。次に、患者はマウスピース５２を、彼の口部を密封するように配置し、マウスピース５２に呼気を吹き込む。呼気は入口３６を介して配管５６を通って中央シリンダ２４内に誘導される。吸込み弁４０は正圧によって押し開かれるが、そのような圧力が無い状態では、中央シリンダ２４内の空気が入口３６から逸出するのを防止する。次いで呼気は、シリンダ２４の吸込み端とは反対側の端の出口３８から出る。出口弁４２は、弁４２のシリンダ側に正圧が存在するときにだけ、空気を中央シリンダ２４から外に通過させ、そのような圧力が無い状態では、弁４２は周囲空気が出口３８を介して中央シリンダ２４内に入るのを防止する。

患者が装置１０に呼気を吹き込むと、呼気中の水分が中央シリンダ２４の内部表面４４上に凝縮し始める。冷却剤３４およびシリンジ２０の温度の低下のため、凝縮液はすぐに内部表面４４で凍結することができる。採取ポート３９は好ましくはニップル形であり、長さが約１ｃｍ、直径は患者の吹込みに対する抵抗を最小限にするのに十分な小さい直径を有する。直径は、各吹込みが終了するのに約５秒かかるように、呼吸速度を低下させるように選択することが好ましい。これは、呼気が中央シリンダ２４の内部表面４４と平衡化するまでの時間の量を増加させる。

患者が装置１０内に呼気を吹き込み続けると、凍結した冷却材３４は融解し始める。内部シリンダ２４を包囲する冷却材ジャケット３４の組成、容積、および厚さは、患者による約１０〜１５回の吹込み後に冷却材３４が融解し始めるように、較正することが好ましい。所望の回数の吹込み後に冷却材３４が溶融または解凍すると、凝縮液は同様に融解し始めることができる。凝縮液が融解すると、プランジャアセンブリ２５を押し込んで、採取された凝縮液試料を出口３８を通して補修ポート３９内へ絞り出すことができる。図４は、プランジャアセンブリ２５が完全に押し込まれた位置にある、図１の呼気凝縮液採取装置１０の側面断面略図である。中央シリンダ２４と採取ポート３９との間の出口３８の出口弁４２の位置は次いで、採取された凝縮液を、従来のピペット（図示せず）を使用して、採取ポート３９から吸引することを可能にする。次いで凝縮液は、希望するその分析のために、ピペットから別個のアッセイウェルへ移すことができる。最後に、凝縮液が採取され、かつ採取ポート３９から抜き取られると、従来の廃棄物処分手順に従って装置１０全体を廃棄することができる。

必須ではないが、呼気凝縮液採取装置１０のプランジャアセンブリ２５はさらに、シリンジ２０の採取ポート３９とは反対側の端の周囲に配置された一つまたはそれ以上のクリップ３１を含むことができる。これらのクリップ３１は弾性材料から形成し、プランジャハンドル３０がそれらの間に押し込まれたときに、シリンジ２０から離れるように変形するように設計することが好ましい。ハンドル３０が図４に示すようにシリンジ２０内に完全に押し込まれると、クリップ３１は次いでその自然な弾力性によって偏倚して所定の位置に戻る。ひとたびこの位置に着くと、プランジャアセンブリ２５はクリップ３１によって所定の位置に効果的かつ便利にロックされ、それによってシリンジ２０をずっと安全かつ確実に移送したり、取り扱ったりすることが可能になる。しかし、本発明の様々な実施形態を実施することができるために、そのようなクリップ３１は必要ないことは理解されるであろう。

図５は、本発明の第二の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置１１０の側面断面略図である。この装置１１０は、出口３８に対面するピストン２６の表面に半円錐形突起１２７（図５に概略的に示す）が配置されること、採取ポート１３９が突起１２７をその中に嵌合状態に受容するような大きさおよび形状であること、および出口弁４２が採取ポート１３９の遠端に配置されることを除いては、第一の好適な実施形態の装置１０と同一とすることができる。次いで採取ポート１３９は、凝縮液の被分析物を検知するように設計された測色装置に接続することができる。

特に、出口弁４２および突起１２７は図面には概略的にしか示されていないが、出口弁４２は採取ポート１３９の端にできるだけ近く配置することが好ましく、突起１２７は、プランジャアセンブリ２５が中央シリンダ２４内に完全に押し込まれたときに、弁４２に当接するような大きさおよび形状であることが好ましい。この設計は、プランジャアセンブリ２５が完全に押し込まれたときにシリンジ２０内に残る液の量を最小にし、したがって、その後の検査に利用可能な凝縮液の量を最小にする。

図６Ａおよび６Ｂは、一つの型の突起１２７を示す、図５のプランジャアセンブリ２５のそれぞれ部分側面図および右端面図である。この型の突起１２７は、その表面に配設され、突起１２７の基部から先端まで延びる一連の溝１２９を含む。ピストン２６が中央シリンダ２４の端ぎりぎりまで押し込まれるときに、溝１２９はシリンジ２０内に残っている凝縮液のための導管として働き、したがって少量の追加凝縮液が中央シリンダ２４の端にトラップされずに、採取ポート１３９を介して採取されることが可能になる。凝縮液を突起１２７の溝１２９内に誘導するために使用できる追加的溝構造（図示せず）をピストン２６の平坦な表面に含めることによって、この効果をさらに増強することができる。

図７Ａ、７Ｂ、および７Ｃは、別の型の突起１２７を示す、図５のプランジャアセンブリ２５のそれぞれ部分側面図、右端面図、および部分側面断面図である。この型の突起１２７は、突起１２７の基部の周囲に配設され、突起１２７の先端を通り抜ける中空軸２３３に接続される複数の開口２３１を含む。開口２３１および中心軸２３３は、１ｍｍから２ｍｍの間の直径とすることができる。再び、ピストン２６が中央シリンダ２４の端ぎりぎりまで押し込まれるときに、開口２３１および中空軸２３３は、シリンジ２０内に残っている凝縮液のための導管として働き、したがって少量の追加凝縮液が中央シリンダ２４の端にトラップされずに、採取ポート１３９を介して採取されることが可能になる。凝縮液を突起１２７の開口２３１に誘導するために使用できる追加的溝構造（図示せず）をピストン２６の平坦な表面に含めることによって、この効果もまたさらに増強することができる。液試料をそこを通して方向付けかつ押し出すことのできる針状延長部分を設けるために、１ｍｍから２ｍｍ（外径）の剛性であるが中空の管構造（図示せず）を中心軸２３３に装着することもできる。

図８は、本発明の第三の好適な実施形態に係る、呼気凝縮液採取装置２１０の側面断面略図である。第一および第二の実施形態の装置１０、１１０と同様に、この呼気凝縮液採取装置２１０は、内および外壁２２２、２３２を有するシリンジ２２と、呼気入力アセンブリ５０とを含む。シリンジ２２０および呼気入力アセンブリ５０は、第一実施形態の場合と一般的に同様である。しかし、第一実施形態とは異なり、出口２３８および出口弁４２は、プランジャハンドル３０とは反対側の端付近でシリンジ２２０の頂部に配置され、シリンジ２２０は、中央チャンバ２２４の端ぎりぎりでシリンジ２２０の底部に配置された採取ポート２３９と、採取ポート２３９を被覆するためのキャップ３７とをさらに含む。採取ポート２３９を一時的に閉鎖するために、キャップは螺刻するか、または別の方法で採取ポート２３９にキャップ３７を確実に接続するように適応させることができる。この装置２１０は、呼気はシリンジ２２０の頂部にある出口２３８から出るが、凝縮液はシリンジ２２０の底部にある採取ポート２３９を介して中央シリンダ２２４から採取して絞り出すことができることを除いては、第一の装置の実施形態１０と同様に機能する。キャップ３７は呼気が採取ポート２３９を通過することを防止するが、凝縮液を中央シリンダ２２４から採取することを希望する場合、螺脱するかまたは別の方法で取り外すことができる。これは、２００３年２月１４日に出願の同一人に譲渡された同時係属米国特許仮出願第６０／４４７５８１号に記載されているように、例えば一時的にまたは永久的にシリンジ２２０上にまたはそれに隣接して装着された分析機器に凝縮液を直接絞り出す際に、特に有用である。

前述の通り、唾液および他の物質が中央シリンダまたはチャンバ２４、２２４に到達するのを防止するのを助けるために、これまで論じた三つの実施形態１０、１１０、２１０の各々の呼気入力アセンブリ５０は、それぞれのシリンジ２０、２２０の下に配設することが有利である。しかし、呼気入力アセンブリ５０は、むしろ呼気入力アセンブリ５０がシリンジ２０、２２０の頂部に配置されるように方向付けることができることは理解されるであろう。図９は、呼気入力アセンブリ５０がシリンジ２０の頂部に配置された、逆転した配向で示される、図１の呼気凝縮液採取装置１０の側面断面略図である。唾液はシリンジ２０内に入り易くなるかもしれないが、本発明の他の特徴はこの構成によって影響されないことは理解されたい。図示しないが、第二および第三実施形態の装置１１０、２１０は同様に再構成することができるが、第三装置２１０の呼気入力アセンブリ５０は、その適切な動作を促進するために、採取ポート２３９の反対側に配置しなければならないことに留意する必要がある。

図１０は、本発明の第四の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置３１０の側面断面略図である。第一実施形態の装置１０と同様に、この呼気凝縮液採取装置３１０は二重壁シリンジ３２０および呼気入力アセンブリ３５０を含む。シリンジ３２０の内壁３２２は中央チャンバ３２４を画定するが、第一実施形態の中央シリンダ２４とは異なり、代替実施形態の中央チャンバ３２４は円筒形である必要はない。外壁３３２は、内および外壁３２２、３３２の間に狭い空間が形成されるような仕方で、内壁３２２の周囲に配設される。しかし、第一実施形態の装置１０と同様に、内および外壁３２２、３３２の間の空間は、製造中に冷却材３４のジャケットで埋めることができ、次いで漏れを防止するように外壁３３２は内壁３２２に封着される。

シリンジ３２０は、入口３６と、出口キャップ６０と、第一の一方向弁４０とをさらに含む。第一弁４０は、入口３６にまたはそれに隣接して配置することのできる吸込み弁である。図１１は、図１０の装置用の着脱自在の出口キャップ６０の断面略図である。出口キャップ６０は出口３３８と、中央チャンバ３２４内の呼気の一方向のみの通過を容易にするために出口３３８にまたはそれに隣接して配置された出口弁である、第二弁３４２とを含む。出口キャップ６０は、中央チャンバ３２４の入口３６とは反対側の端に配置することが好ましい。

呼気入力アセンブリ３５０は、マウスピース５２と、フィルタ５４と、マウスピース５２からシリンジ３２０の入口３６へ呼気を誘導するために必要な任意の配管３５６とを含む。第一実施形態の装置１０と同様に、マウスピース５２は患者の口部と快適に接触することができるような適切なサイズおよび形状であり、フィルタ５４は、唾液および他の液体または最小サイズの固形物がそこを通過してシリンジ３２０内に入るのを防止するために、マウスピース５２とシリンジ入口３６との間で配管３５６内に配設することができる。

前述した実施形態とは異なり、第四実施形態の装置３１０はプランジャアセンブリを含まない。代わりに、図１０に示すように、中央チャンバ３２４内を通過する呼気が接触することのできる表面積を増大するために、一つまたはそれ以上の障害内部構造物６２を中央チャンバ３２４の内部に配設することができる。適切な障害構造物６２として、金属、ガラス、または他の適切な材料から形成された、格子状構造物および他のバフル、図１０に示すような球体、または他の幾何学的形状を挙げることができる。これらの構造体６２は、適切な網、ボス、または類似物（図示せず）を使用して、シリンジ３２０内に適正位置に保持することができる。第一実施形態のシリンジ２０と同様に仕方で冷却されると、その後中央チャンバ３２４の内部でより効率的に呼気凝縮液を生成することができる。

しかし、障害構造物６２は中央チャンバ３２４の内部を占有するので、そこに採取された凝縮液の除去は、既知の量および組成の適切な緩衝溶液７２による中央チャンバ３２４の内部のフラッシュ洗浄を必要とするかもしれない。例えば溶液は、視覚比色法または分光測色法を使用して溶液のｐＨを示すために、有機染料を含む水、または蒸留水から構成することができる。図１０に示す代替実施形態の好適な使用方法では、装置３１０は水平に向き付けられ（図示せず）、呼気凝縮液は、第一実施形態について述べたのと同様に、中央チャンバ３２４の内部表面４４および障害構造物６２に採取される。次いで装置３１０は、図１０に示すように垂直の向きに回転することができる。装置３１０は図示した向きの状態で、シリンジ３２０の内部の凝縮液が逸出するおそれなく、出口キャップ６０を取り外すことができる。そのような取外しを容易にするために、対応するねじ山または類似物のような適切な接続手段をシリンジ３２０および出口キャップ６０に設けることが好ましい。

ひとたび出口キャップ６０を取り外すと、採取された凝縮液をそこから洗い流すために、緩衝溶液７２を中央チャンバ３２４に加えることができる。適切な緩衝溶液および量は、通常の当業熟練者には明白であろう。図１２は、図１０の装置に使用される着脱自在の試料採取ウェル７０の断面略図である。出口キャップ６０を取り外し、装置を図１０に示すように方向付けた状態で、図１２に示すような試料採取ウェル７０をシリンジ３２０の開端に固定して、該端を閉じることができる。図１３は、試料採取ウェル７０が設置された状態の図１０の呼気凝縮液採取装置３１０の側面断面略図である。ひとたび試料採取ウェル７０が所定の位置に着くと、装置３１０全体を図１３に示す向きになるように反転することができ、こうして緩衝溶液７２が採取された呼気凝縮液をシリンジ３２０の底部から試料採取ウェル７０内へ洗い流す。ひとたび試料採取ウェル７０内に採取されると、試料採取ウェル７０を再び取り外すことができ、緩衝された凝縮液７４を希望する検査用に分注することができる。

本書に記載した様々な実施形態の変形で、シリンジ１０、１１０、２１０、３１０はいずれも、代替的に、ＮＨ４ＮＯ３が１：４のモル比で水で水和される場合に発生するような吸熱反応を介して冷却し、０℃未満の温度を約１０分間生じることができる。これは、シリンジ１０、１１０、２１０、３１０の壁の間の空間で乾燥ＮＨ４ＮＯ３で囲まれた壊れやすいアンプルに水を貯蔵することによって、または同じ空間にＮＨ４ＮＯ３だけを密封し、針ポートを介して水で水和させるか水を注入させることによって、促進することができる。ＮＨ４ＮＯ３が用意されるのは、看護師が静脈路に「フラッシュ」する方法と同様に、ＮＨ４ＮＯ３材に針ポートを介して予め定められた量の水道水または生理食塩水を注入することによって、反応をトリガすることができるからであるが、適切な吸熱反応を生成するために他の材料を同様に使用することができることを理解されたい。例えばシリンジの外壁のわずかな圧縮によって活性化することのできる市販のゲル冷却剤を同様に使用することができる。そのような物質の一つとして、カリフォルニア州オークランドのコールド・アイス・インコーポレイテッドによって製造されたコールド・アイスがある。

本書に記載した様々な装置１０、１１０、２１０、３１０のいずれかを使用して、または何らかの代替的手段によって、ひとたび試料が得られると、肺虚血を検知するために、試料に一連の検査を実行することができる。一連の検査は、繊維素ペプチド、トロンボキサンＢ_２、血小板活性化因子、ロイコトリエンＣ、Ｄ、およびＥ、一酸化炭素対酸化窒素比、ならびにケモカインおよび他のタンパク質の測定または検査を含むことができる。これらは各々、下述するように特定の目的を有する。様々な検査は全て、通常の当業熟練者に周知の方法で実行することができる。

呼気凝縮液中の繊維素ペプチドの測定は、肺脈管構造における血餅の存在のより局所的な測定を可能にする潜在的可能性を持つと思われる。前述の通り、トロンビンは、繊維素ゲル化の必須条件として、繊維素原から繊維素原Ａペプチドを開裂する。その小さいサイズのため、繊維素ペプチドは肺胞膜を横断して肺胞液中で平衡化し、こうして呼気凝縮液中に見られることが仮説として立てられる。したがって、呼気凝縮液試料中の繊維素ペプチドの存在は、血餅の存在を示す。

また、肺血管狭窄は、ＰＧＦ２α、トロンボキサンＢ２、ＰＡＦ、ロイコトリエンＣ、ＤおよびＥ、ならびに凝縮液中のＣＯ対ＮＯの比を測定することによって検知することができ、肺血管拡張剤治療またはＣＯＸ１，２抑制を開始するための基礎がもたらされる。我々の研究室は、ラットへのポリスチレン小球体の静脈注入によって誘導した実験的な肺血管閉塞（ＰＶＯ）を使用して、呼気凝縮液分析に関連する三つの主要な研究結果を決定した。我々およびその他は、我々のラットモデルにおける肺洗浄液中のＰＧＦ２α、トロンボキサンＢ２、血小板活性化因子（ＰＡＦ）、および血管収縮性ロイコトリエンＣ、Ｄ、およびＥの含有量の増加を発見した。（Ｎａｋｏｓ、ＡｍＪＲｅｓｐＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ１９９８、１５８：１５０４）。これらの血管収縮剤の濃度の大きさは、低酸素血症および肺高血圧症の重症度と相関した。我々はまた、ヘムオキシゲナーゼ１をコード化する遺伝子の極端に増加する発現、および誘導酵素、酸化窒素合成酵素をコード化する遺伝子の発現のほぼ完全な欠如を発見した。ヘムオキシゲナーゼはヘム基質から一酸化炭素（ＣＯ）を産生する一方、酸化窒素合成酵素は酸化窒素（ＮＯ）を産生する。両方とも血管拡張物質である。ＰＶＯにさらされたラットにおいて、我々はまた、サイトカイン誘導好中球誘引物質１および２（ＣＩＮＣ１＆２）、ならびに単球／マクロファージ遊走因子（ＭＣＰ）１および２、ならびに単球／マクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ）１αおよび１βの遺伝子発現の肺における早期増加と共に、肺気道および肺胞からの洗浄液中の各タンパク質の同時増加が、ＰＥの誘導から早くも２時間後に得られ、ＰＥ誘導から１８時間後まで続くことを発見した。化学遊走分子はロイコサイトの患部への移動を引き起こすことがあり、このメカニズムを通して、治療再灌流中に傷害を増大させるおそれがある。

さらに、呼気凝縮液中の特定のケモカインの存在は、再灌流傷害の素因になると考えられる。ラットで発見されたケモカインには、ＣＩＮＣ１、ＣＩＮＣ２、ＭＩＰｌα、ＭＩＰ１β、ならびにＭＣＰ１および２が含まれた。我々の装置で検査されるヒト相同体は、ＺｌｏｔｎｉｃｋおよびＹｏｓｈｉｅ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、２０００、１２：１２１‐１２７によって概説された命名法による、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、およびＣＸＣＬ３、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、およびＣＣＬ８を含むであろう。研究者らは肺高血圧症の炎症性モデルでケモカインを発見した。（Ｋｉｍｕｒａ、ＬａｂＩｎｖｅｓｔ１９９８７８：５７１‐８１；Ｉｋｅｄａ、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏｌ、２００２、２８３（５）：Ｈ２０２１‐８）。主に血流障害を引き起こす生体内ＰＶＯモデルとは異なり、後者の研究のモデルは炎症および組織修復を刺激し、それは数週間にわたって血管閉塞を導く。同様に、研究者らは、灌流および換気の両方を妨げる、肺門結紮またはクランプを受けた肺におけるケモカインの発現の増加をも発見した。肺胞換気は生体内ＰＶＯでは続行されるので、後者のモデルは生体内ＰＶＯとは著しく異なる。したがって、虚血性傷害は、生体内ＰＶＯと肺門結紮とでは異なる。

上述した情報に基づいて、本発明が幅広く利用しかつ適用され得ることを当業熟練者は容易に理解する。本書に特に記載した以外の本発明の多くの実施形態および適応と同様に、多くの変形、変化、および同等の配列も、本発明の実体または範囲から逸脱することなく、本発明およびその上記説明から明白であり、あるいはそれによって合理的に示唆される。したがって、本書では、本発明をその好適な実施形態に関連して詳述したが、この開示は単なる本発明の例証であり典型であって、単に発明の完全かつ実施を可能にする開示を提供することを目的に行なったものであることを理解されたい。上記の開示は、本発明を限定したり、あるいは他の実施形態、適応、変形、変化、または同等の配列のいずれについても排除したりするよう解釈されることを意図したものではない。本発明は、添付する請求の範囲およびその等価物によってのみ限定される。本書では特定の用語が使用されているが、それらは限定のためではなく、単に一般的かつ説明的な意味で使用されているにすぎない。

本発明の第一の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。二重壁構造を示す図１の装置の、線２−２に沿って切った右端面断面図である。図１の装置の右端面図である。プランジャアセンブリが完全に押し込まれた位置にある、図１の呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。本発明の第二の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。図６Ａは、一つの型の突起を示す、図５のプランジャアセンブリの部分側面図である。図６Ｂは、図６Ａのプランジャアセンブリの右端面図である。図７Ａは、別の型の突起を示す、図５のプランジャアセンブリの部分側面図である。図７Ｂは、図７Ａのプランジャアセンブリの右端面図である。図７Ｃは、図７Ａのプランジャアセンブリの部分側面断面図である。本発明の第三の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。反転した配向で示される図１の呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。本発明の第四の好適な実施形態に係る呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。図１０の装置用の着脱自在の出口キャップの断面略図である。図１０の装置用の着脱自在の試料採取ウェルの断面略図である。試料採取ウェルが設置された状態の図１０の呼気凝縮液採取装置の側面断面略図である。

Claims

以下のものを含む呼気凝縮液採取装置：
二重側壁ならびに第一および第二の対向端を有する中央チャンバであって、二重側壁が相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む中央チャンバ；
中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材；
中央チャンバの外側壁の外側に配置され、呼気入力アセンブリの内部が中央チャンバの内部と流体連通するように内側壁および外側壁の両方を貫通する呼吸入力アセンブリ；
ピストンおよびハンドルを有するプランジャアセンブリであって、ピストンが内側壁とぴったり接触する状態で中央チャンバの内部に摺動可能に配置され、ハンドルが中央チャンバの第一端から、ピストンを中央チャンバ内で移動させることができるように伸長して成るプランジャアセンブリ；および
中央チャンバの内部と流体連通するように中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポートであって、ピストンは突起を有し、突起の側面には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の溝が配置される呼気凝縮液採取ポート。
プランジャアセンブリが、完全に後退した位置と、完全に押し込まれた位置との間で調整可能であり、プランジャがその完全に後退した位置にあるときに、呼気入力アセンブリと中央チャンバとの間の流体接続はピストンと中央チャンバの第二端との間にあることを特徴とする請求項１に記載の呼気凝縮液採取装置。
中央チャンバの外側壁の外側の呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの第一端に隣接することを特徴とする請求項２に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの下側であることを特徴とする請求項３に記載の呼気凝縮液採取装置。
中央チャンバがその第二端に端壁を含み、呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの端壁に配置されることを特徴とする請求項３に記載の呼気凝縮液採取装置。
ピストンが中央チャンバの第二端の方向を向いた表面を含み、ピストンの該表面に突起が配置され、該突起が、プランジャアセンブリが中央チャンバ内に完全に押し込まれたときに、呼気凝縮液採取ポート内に嵌合されるように適応されることを特徴とする請求項５に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートおよび突起が各々半円錐形であることを特徴とする請求項６に記載の呼気凝縮液採取装置。
以下のものを含む呼気凝縮液採取装置：
二重側壁ならびに第一および第二の対向端を有する中央チャンバであって、二重側壁が相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む中央チャンバ；
中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材；
中央チャンバの外側壁の外側に配置され、呼気入力アセンブリの内部が中央チャンバの内部と流体連通するように内側壁および外側壁の両方を貫通する呼吸入力アセンブリ；
ピストンおよびハンドルを有するプランジャアセンブリであって、ピストンが内側壁とぴったり接触する状態で中央チャンバの内部に摺動可能に配置され、ハンドルが中央チャンバの第一端から、ピストンを中央チャンバ内で移動させることができるように伸長して成るプランジャアセンブリ；
中央チャンバの内部と流体連通するように中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポートであって、ピストンの表面に配置された突起の内部には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の内部通路が配置される呼気凝縮液採取ポート；および
内部通路の一つから延びる剛性でかつ中空の管構造であって、管構造を通して突起の内部からの流体が方向付けられることができる管構造。
呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの外側壁の外側にその第二端に隣接して配置されることを特徴とする請求項２に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの底部に配置され、呼気凝縮液採取装置が中央チャンバの外側壁の頂部にその第二端に隣接して配置された出口および出口弁をさらに含むことを特徴とする請求項９に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートを一時的に密封するためのキャップをさらに含むことを特徴とする請求項１０に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取装置が主軸心を画定し、呼気入力アセンブリがマウスピースと、マウスピースを中央チャンバの側面に接続する管構造とを含み、マウスピースが一般的に呼気凝縮液採取装置の主軸心と平行に方向付けられることを特徴とする請求項２に記載の呼気凝縮液採取装置。
以下のものを含む呼気凝縮液採取装置：
二重側壁ならびに第一および第二の対向端を有する中央チャンバであって、二重側壁が相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む中央チャンバ；
中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材；
中央チャンバの外側壁の外側に配置され、呼気入力アセンブリの内部が中央チャンバの内部と流体連通するように内側壁および外側壁の両方を貫通する呼吸入力アセンブリ；
ピストンおよびハンドルを有するプランジャアセンブリであって、ピストンが内側壁とぴったり接触する状態で中央チャンバの内部に摺動可能に配置され、ハンドルが中央チャンバの第一端から、ピストンを中央チャンバ内で移動させることができるように伸長して成るプランジャアセンブリ；および
中央チャンバの内部と流体連通するように中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポートであって、ピストンの表面に配置された突起の内部には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の内部通路が配置される呼気凝縮液採取ポート。
プランジャアセンブリが、完全に後退した位置と、完全に押し込まれた位置との間で調整可能であり、プランジャがその完全に後退した位置にあるときに、呼気入力アセンブリと中央チャンバとの間の流体接続はピストンと中央チャンバの第二端との間にあることを特徴とする請求項１３に記載の呼気凝縮液採取装置。
中央チャンバの外側壁の外側の呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの第一端に隣接することを特徴とする請求項１４に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの下側であることを特徴とする請求項１５に記載の呼気凝縮液採取装置。
中央チャンバがその第二端に端壁を含み、呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの端壁に配置されることを特徴とする請求項１５に記載の呼気凝縮液採取装置。
ピストンが中央チャンバの第二端の方向を向いた表面を含み、ピストンの該表面に突起が配置され、該突起が、プランジャアセンブリが中央チャンバ内に完全に押し込まれたときに、呼気凝縮液採取ポート内に嵌合されるように適応されることを特徴とする請求項１７に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートおよび突起が各々半円錐形であることを特徴とする請求項１８に記載の呼気凝縮液採取装置。
突起の内部には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の内部通路が配置されることを特徴とする請求項１４に記載の呼気凝縮液採取装置。
内部通路の一つから延びる剛性でかつ中空の管構造をさらに含み、管構造を通して突起の内部からの流体が方向付けられることができることを特徴とする請求項２０に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの外側壁の外側にその第二端に隣接して配置されることを特徴とする請求項２１に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの底部に配置され、呼気凝縮液採取装置が中央チャンバの外側壁の頂部にその第二端に隣接して配置された出口および出口弁をさらに含むことを特徴とする請求項１４に記載の呼気凝縮液採取装置。
以下のものを含む呼気凝縮液採取装置：
二重側壁ならびに第一および第二の対向端を有する中央チャンバであって、二重側壁が相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む中央チャンバ；
中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材；
中央チャンバの外側壁の外側に配置され、呼気入力アセンブリの内部が中央チャンバの内部と流体連通するように内側壁および外側壁の両方を貫通する呼吸入力アセンブリ；
ピストンおよびハンドルを有するプランジャアセンブリであって、ピストンが内側壁とぴったり接触する状態で中央チャンバの内部に摺動可能に配置され、ハンドルが中央チャンバの第一端から、ピストンを中央チャンバ内で移動させることができるように伸長して成り、プランジャアセンブリが、完全に後退した位置と、完全に押し込まれた位置との間で調整可能であるプランジャアセンブリ；
中央チャンバの内部と流体連通するように中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポート；および
呼気凝縮液採取装置の移動または取扱いを容易にするように、その中に採取された呼気凝縮液が取り出されるときまで、プランジャアセンブリのハンドルを完全に押し込まれた位置でロックするために、中央チャンバの第一端に取り付けられた少なくとも一つのクリップ。
プランジャがその完全に後退した位置にあるときに、呼気入力アセンブリと中央チャンバとの間の流体接続はピストンと中央チャンバの第二端との間にあることを特徴とする請求項２４に記載の呼気凝縮液採取装置。
中央チャンバの外側壁の外側の呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの第一端に隣接することを特徴とする請求項２５に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの下側であることを特徴とする請求項２６に記載の呼気凝縮液採取装置。
中央チャンバがその第二端に端壁を含み、呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの端壁に配置されることを特徴とする請求項２６に記載の呼気凝縮液採取装置。
ピストンが中央チャンバの第二端の方向を向いた表面を含み、ピストンの該表面に突起が配置され、該突起が、プランジャアセンブリが中央チャンバ内に完全に押し込まれたときに、呼気凝縮液採取ポート内に嵌合されるように適応されることを特徴とする請求項２８に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートおよび突起が各々半円錐形であることを特徴とする請求項２９に記載の呼気凝縮液採取装置。
突起の側面には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の溝が配置されることを特徴とする請求項２９に記載の呼気凝縮液採取装置。
突起の内部には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の内部通路が配置されることを特徴とする請求項２９に記載の呼気凝縮液採取装置。
以下のものを含む呼気凝縮液採取装置：
二重側壁ならびに第一および第二の対向端を有する中央チャンバであって、二重側壁が相互に相隔たる関係の内側壁および外側壁を含む中央チャンバ；
中央チャンバの少なくとも内壁を冷却するために内側壁と外側壁との間に密封された冷却材；
中央チャンバの外側壁の外側に配置され、呼気入力アセンブリの内部が中央チャンバの内部と流体連通するように内側壁および外側壁の両方を貫通する呼吸入力アセンブリであって、中央チャンバの外側壁の外側の呼気入力アセンブリの位置が中央チャンバの第一端に隣接する呼吸入力アセンブリ；
ピストンおよびハンドルを有するプランジャアセンブリであって、ピストンが内側壁とぴったり接触する状態で中央チャンバの内部に摺動可能に配置され、ハンドルが中央チャンバの第一端から、ピストンを中央チャンバ内で移動させることができるように伸長して成り、プランジャアセンブリが、完全に後退した位置と、完全に押し込まれた位置との間で調整可能であり、プランジャがその完全に後退した位置にあるときに、呼気入力アセンブリと中央チャンバとの間の流体接続はピストンと中央チャンバの第二端との間にあり、ピストンが中央チャンバの第二端の方向を向いた表面を含み、ピストンの該表面に突起が配置され、該突起が、プランジャアセンブリが中央チャンバ内に完全に押し込まれたときに、呼気凝縮液採取ポート内に嵌合されるように適応されるプランジャアセンブリ；
中央チャンバの内部と流体連通するように中央チャンバの第二端に配置された呼気凝縮液採取ポートであって、中央チャンバがその第二端に端壁を含み、呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの端壁に配置され、突起の内部には、呼気凝縮液を呼気凝縮液採取ポートに向かって誘導するのを容易にするために、一つまたはそれ以上の内部通路が配置される呼気凝縮液採取ポート；
呼気凝縮液採取装置の移動または取扱いを容易にするように、その中に採取された呼気凝縮液が取り出されるときまで、プランジャアセンブリのハンドルを完全に押し込まれた位置でロックするために、中央チャンバの第一端に取り付けられた少なくとも一つのクリップ；および
内部通路の一つから延びる剛性でかつ中空の管構造であって、管構造を通して突起の内部からの流体が方向付けられることができる管構造。
呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの外側壁の外側にその第二端に隣接して配置されることを特徴とする請求項２５に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートが中央チャンバの底部に配置され、呼気凝縮液採取装置が中央チャンバの外側壁の頂部にその第二端に隣接して配置された出口および出口弁をさらに含むことを特徴とする請求項３４に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取ポートを一時的に密封するためのキャップをさらに含むことを特徴とする請求項３５に記載の呼気凝縮液採取装置。
呼気凝縮液採取装置が主軸心を画定し、呼気入力アセンブリがマウスピースと、マウスピースを中央チャンバの側面に接続する管構造とを含み、マウスピースが一般的に呼気凝縮液採取装置の主軸心と平行に方向付けられることを特徴とする請求項２５に記載の呼気凝縮液採取装置。