JP4282483B2 - ジスフェリノパシーのための血液ベースアッセイ - Google Patents
ジスフェリノパシーのための血液ベースアッセイ Download PDFInfo
- Publication number
- JP4282483B2 JP4282483B2 JP2003547654A JP2003547654A JP4282483B2 JP 4282483 B2 JP4282483 B2 JP 4282483B2 JP 2003547654 A JP2003547654 A JP 2003547654A JP 2003547654 A JP2003547654 A JP 2003547654A JP 4282483 B2 JP4282483 B2 JP 4282483B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dysferlin
- expression
- mammal
- level
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6881—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for tissue or cell typing, e.g. human leukocyte antigen [HLA] probes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
- G01N2800/2878—Muscular dystrophy
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、筋ジストロフィー、より詳細には筋ジストロフィーの診断試験に関する。
肢帯筋ジストロフィー 2B(LGMD)およびミヨシミオパシー(MM)はどちらも、常染色体性の劣性遺伝、成人期発症、および筋酵素クレアチンキナーゼの著しい上昇を特徴とする(Bushby, 1999, Brain 122: 1403-1420)。これらはどちらもジスフェリンをコードする遺伝子の欠損により起こることが示されている(Bashirら, 1998, Nat. Genet. 20:37-42;Liuら, 1998, Nat. Genet. 20:31-36)。ジスフェリン遺伝子における同様の突然変異は、同じファミリーのメンバーの中でさえ異なる臨床的提示を起こし得る(Illarioshkinら, 2000, Neurology 55:1931-1933;Weilerら, 1999, Hum. Mol.Genet. 8:871-877;Weilerら, 1996, Am. J. Hum. Genet. 59: 872-878)。さらに、前方遠位ミオパシーはジスフェリン突然変異に関連している(Illaら, 2001, Ann. Neurol. 49: 130-134)。従って、ジスフェリノパシー(dysferlinopathy)には多くの臨床的異質性が存在する。
本発明は部分的に、ジスフェリンが末梢白血球(単球またはCD14(+)細胞)の部分母集団において発現され、筋肉においてジスフェリンを欠損する個体ではまたCD14(+)細胞においてもジスフェリンを欠損するという発見に基づく。これらの発見により、ジスフェリンの異常発現に対する血液ベースの試験の本発明に至った。このような試験は、例えば、ジスフェリノパシーの試験として用いられ得、ジスフェリノパシーを治療するために施されるモニタリング治療の方法を提供する。
免疫ブロット分析による欠損タンパク質発現のスクリーニングは、筋ジストロフィーにおける鑑別診断のために確実で迅速な手段であることが判明している(AndersonおよびDavison, 1999, Am. J.Pathol. 154:1017-1022)。しかしながら、現在の方法は筋肉生検試料を必要とする。本発明は、ジスフェリノパシーを診断するのに有用な方法を提供する。特に、この方法は非筋肉組織および侵襲性の少ないサンプリング技術を用いる。ジスフェリンは、心臓、胎盤、および腎臓を含む特定の非筋肉組織で発現することが見出されているが(Liuら, 1998, 前出;Matsudaら, 1999, 前出)、末梢血球で発現することはこれまでに知られていなかった。単球においてジスフェリンが発現すること、および単球におけるジスフェリンの発現が、骨格筋におけるジスフェリンの発現と相互に関連することが発見されている(表1)。従って、単球におけるジスフェリン発現の検出は、ジスフェリノパシー(例えばLGMD 2BおよびMM)のための血液ベース診断アッセイとして使用され得る。
本発明のいくつかの態様において、試験血液試料はRNAを検出することにより、ジスフェリン発現についてアッセイされる。従って、本発明の様々な方法は、ジスフェリン、例えば、全長ジスフェリンタンパク質またはその断片、例えば、ジスフェリンタンパクの抗原性断片をコードする、単離または精製した核酸分子(またはその相補体)、ならびに、例えば極めてストリンジェントな条件下で、ジスフェリンをコードする核酸分子およびジスフェリンをコードする核酸分子(例えば、Genbankアクセッション番号 XM 034329(ヒトmRNA)、XM 010780(ヒトmRNA)、NM 003494(ヒトmRNA)、AF 075575(ヒトmRNA)、AJ 007973(ヒトゲノムDNA)、およびAF 188290(musmusculus mRNA)に対して特定の度合いの配列同一性(例えば、少なくともおよそ60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%の同一性)をもつ核酸分子にハイブリダイズする核酸分子を用いる。ジスフェリンcDNA配列は、WO 00/11157およびWO 00/11016に開示されており、参考として本明細書中に援用される。
単離されたジスフェリンタンパク質またはその断片(例えば、生物学的活性部分)は、診断上のアッセイにおいておよび治療組成物の調製において有用な抗ジスフェリン抗体を惹起する、または試験する(またはより一般的には、結合する)ために、例えば免疫原または抗原として使用され得る。ジスフェリンタンパク質は、標準的なタンパク質精製技術を用いて、細胞または組織供給源より単離され得る。ジスフェリンタンパク質またはその断片は、組換えDNA技術により生成されるか、または化学合成され得る。このポリペプチドは、ポリペプチドがシステム天然の細胞において発現される場合に存在するのと実質的に同じ翻訳後修飾を生る系(例えば培養細胞)において、または、天然の細胞で発現される場合に存在する翻訳後修飾(例えばグリコシル化または切断)の変化もしくは省略を生じる系内において、発現され得る。
ジスフェリンポリペプチドに対して惹起された抗体は、本発明の特定の態様において有用である。このような抗体は市販されているか、または、当該分野で公知である方法を用いて生成され得る。
本発明の特定の態様は、診断アッセイ、予後アッセイおよび臨床試験のモニタリングが、予後(予測)目的のために使用され、それにより個々を治療する、予測医学の分野に関する。例えば、被験体が障害、ジスフェリノパシーの危険がある(すなわち、かかりやすい)かどうかを決定し得る。一般に、このような障害は、ジスフェリンポリペプチドをコードする遺伝子における損傷、または誤発現と関連がある。しかしながら、本発明の方法は、(例えば、ジスフェリン遺伝子以外の遺伝子における欠損による)血液中のジスフェリン発現の量が二次的効果となる、障害においてジスフェリンをモニターするためにもまた有用である。
血液試料(例えば、単球)におけるジスフェリンタンパク質または核酸の存在、レベル、または非存在は、試験被験体(例えば、LGMDまたはMMといったジスフェリノパシーと推測される個体)由来の血液サンプルを得、その血液試料を、ジスフェリンタンパク質または、ジスフェリンタンパク質もしくはその断片(例えば、ジスフェリンの分解産物)をコードする核酸(例えばmRNA)を検出し得る化合物または薬剤と接触させ、その結果、ジスフェリンタンパク質または核酸の存在が血液試料において検出されることにより評価され得る。ジスフェリン遺伝子の発現のレベルは、多くの方法(血液試料中のジスフェリンmRNAを測定すること、または、血液試料中のジスフェリン遺伝子によりコードされたタンパク質の量を測定することが挙げられるが、これらに限定されない)で測定され得る。このような方法は、例えば核酸またはタンパク質の絶対的なレベルまたは相対的なレベルを測定し得る。細胞内のジスフェリンmRNAのレベルは、インサイチュおよびインビトロの形式の両方によって決定され得る。
ジスフェリン遺伝子発現の検出
Qiagen製QIAampblood mini kitを用いて、製品使用説明書に従い、総RNAを全血より単離した。およそ10igの総RNAを1% ホルムアルデヒドゲルにおいて分画し、HybondTM N+メンブレン(Amersham)に転写した。Genbankアクセッション番号AF 075575におけるジスフェリンcDNA配列のヌクレオチド5364-5732に対応する標識プローブを用いて、標準のプロトコルに従い、ハイブリダイゼーションを65℃で実行した。メンブレンを65℃で2×SSC、0.1% SDS中で15分間洗浄し、次いで1×SSC、0.1% SDSおよび0.2×SSC、0.1% SDS中で15分間、それぞれ洗浄した。
製品使用説明書(Amersham)に従い、FicollTM-Paque勾配遠心分離により、末梢血単核細胞(PBMC;単球)を、患者および健常対照の全血より単離した。PBMCをリン酸緩衝生理食塩水(PBS)中で2回洗浄し、10倍容量のタンパク質抽出バッファー、M-PER(Pierce, Rockford, IL)中で溶解した。この試料を遠心(約18,000×gで10分間)し、細胞残屑をペレット化し、上清をジスフェリンのSDS-PAGE分析のために使用した。およそ20μgのタンパク質を、4〜15%の勾配SDS-PAGEゲルにおいて分離した。免疫ブロッティングを、1次抗ジスフェリンモノクローナル抗体(NCL-Hamlet, Novacastra, UKから得た)を1:300希釈で用いて、標準的な方法に従って実行した。免疫反応性結合を、ECL chemiluminescence system(Amersham)を用いて検出した。
どの血球型がジスフェリンを発現するかを決定する実験のため、CD14(+)およびCD14(-)血球を分離した。PBMC(およそ107細胞)を20μlのCD14抗体コーティングマイクロビーズと混合し、6〜12℃で30分間、インキュベートした。非結合細胞を、過剰のPBSバッファー中で細胞を洗浄し、次いで300×gで10分間遠心することにより取り除いた。この細胞ペレットを、製品使用説明書に従ったMACS(磁性細胞選別/分離)装置 Milteny Biotec, Germany)における分離前に、2×108 細胞/mlの濃度になるようにPBS中に再懸濁した。
免疫細胞化学を使用し、血球中のジスフェリンタンパク質発現をアッセイした。PBMCを、Cytospintm(Shandon,UK)遠心分離機を用いて顕微鏡スライド上にかけた。この細胞を次いで、氷上において10分間、アセトン中で固定した。免疫細胞化学のために、このスライドを0.5% BSAおよび5%正常ヤギ血清を含むPBS(リン酸緩衝生理食塩水)中でプレインキュベートした。この切片を次いで室温で一時間、5%正常血清を含むPBSに1:20に希釈したNCL-Hamlet(Novacastra, UK)とインキュベートした。このスライドを次いでPBS中で2回(各5分)洗浄した。抗体の検出を、標準技術を用いて行なった。洗浄したスライドを、製品使用説明書に従って、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識二次抗体(Jackson Immunoresearch, PA)中でインキュベートし、スライドをジアミノベンジジン(diaminobenzidine)使用およびABC染色キット(Vector labs, CA)中でインキュベートすることにより可視化した。
ジスフェリノパシーのための非筋肉診断アッセイを展開するための最初の工程として、健常個体の血球におけるジスフェリン遺伝子発現をノーザンブロット分析により試験した。ジスフェリン転写産物に対応する、弱いが明確な約7.5 kbのバンドを、末梢血球および骨格筋から単離した総RNAにおいて検出した(図1A)。1レーンあたりおよそ10μgのRNAを積載した。およそ4.5 kbおよび2.0 kb、より小さい転写産物をもまた、末梢血球において検出し、組織特異的なスプライスバリアントの存在を示唆する。これらのデータは、血球中にジスフェリン遺伝子発現があることを実証する。従ってジスフェリン発現をアッセイする方法として、例えば個体がジスフェリノパシーを有するかどうかを決定するため、ノーザンブロット分析を使用し得る。
ジスフェリンを発現する細胞型を更に規定するために、PBMCをCD14抗体でコーティングした磁性ビーズを用いてCD14-ポジティブおよび-ネガティブ細胞に分離した。CD14は単球の特異的マーカーであるので、このアプローチはPBMCにおける二つの主要な細胞型を識別する。図1CおよびDに示される通り、免疫細胞化学分析はCD14(+)細胞におけるジスフェリン染色を示したが、CD(-)細胞においては示さなかった。この結果を、ウエスタンブロット分析によりにより確認した(図1E)。まとめると、これらの知見は、血液におけるジスフェリン発現は主に単球においてであることを示す。単球は総WBCの3〜7%のみを構成し、その結果ジスフェリンはWBCにおける総タンパク質の比較的少量を構成するので、WBCにおける検出可能なジスフェリンタンパク質発現の欠如がおこりやすい。
ジスフェリノパシーのための血液ベース診断アッセイの正確性を評価するために、LGMD 2BまたはMMと診断されていた12人の患者におけるPBMCおよび骨格筋におけるジスフェリン発現の比較を行った。患者についてのウエスタンブロッティングにより、骨格筋におけるジスフェリン欠損を確認した。PBMCの免疫ブロット分析は、対照においてジスフェリン反応性を示した(試験した6人中6人)が、患者から得られた12の血液試料のいずれにおいても、ジスフェリンを検出せず(図2、表1)、PBMCおよび骨格筋におけるジスフェリン発現間に優れた相関があることを示唆している。これらのデータは、ジスフェリノパシーを診断するために血液ベースアッセイを使用し得ることを実証する。
Claims (32)
- (a) 哺乳動物由来の血液試料を提供する工程、
(b) 該血液試料から末梢血単核細胞を単離する工程、および
(c) 該末梢血単核細胞をジスフェリン発現の存在に関してアッセイする工程、ここでアッセイが、PCR増幅工程を含まない
を含む、哺乳動物においてジスフェリンが発現されているかどうかを決定する方法。 - 工程 (b) がジスフェリン核酸発現を検出する工程を含む、請求項1記載の方法。
- 工程 (b) がジスフェリンタンパク質発現を検出する工程を含む、請求項1記載の方法。
- 工程 (b) が免疫学的アッセイを含む、請求項3記載の方法。
- 哺乳動物がジスフェリノパシーを有すると推測される、請求項1記載の方法。
- ジスフェリノパシーが肢体筋ジストロフィー 2B (LGMD) またはミヨシミオパシー (MM) である、請求項5記載の方法。
- 更に血液試料においてジスフェリンタンパク質またはジスフェリンmRNAのレベルを決定する工程を含む、請求項1記載の方法。
- 更に血液試料中のジスフェリンタンパク質またはジスフェリンmRNAのレベルを対照と比較する工程を含む、請求項1記載の方法。
- 対照と比較した際の血液試料における低いレベルのジスフェリン発現が哺乳動物におけるジスフェリノパシーの存在を示す、請求項8記載の方法。
- 哺乳動物がヒトである、請求項1〜9いずれか記載の方法。
- (a) 哺乳動物由来の血液試料を提供する工程;
(b) 該血液試料から末梢血単核細胞を単離する工程;および
(c) アッセイによって該末梢血単核細胞におけるジスフェリン発現のレベルを決定する工程であって、ここで、アッセイは、PCR増幅工程を含まず、前もって決定されたジスフェリン発現の値よりも低いジスフェリン発現のレベルが、該哺乳動物が、ジスフェリノパシーを有している、ジスフェリノパシーを有しやすい、またはジスフェリノパシーの遺伝的キャリアであることの指標である、工程
を含む、哺乳動物がジスフェリノパシーを有するかどうか、ジスフェリノパシーを有しやすいかどうか、またはジスフェリノパシーの遺伝的キャリアであるかどうかを検出する方法。 - (a) 治療の処置後の哺乳動物由来の血液試料を提供する工程、
(b) 該血液試料から末梢血単核細胞を単離する工程、および
(c) アッセイによって該末梢血単核細胞におけるジスフェリン発現のレベルを決定する工程であって、ここで、アッセイは、PCR増幅工程を含まず、治療開始前の該哺乳動物から得られた血液試料におけるジスフェリン発現のレベルよりも高いレベルのジスフェリン発現が、該治療が有効であることの指標である、工程
を含む、哺乳動物においてジスフェリノパシーの治療が有効であるかどうかを検出する方法。 - ジスフェリン発現のレベルを決定する工程が、ストリンジェントな条件下でジスフェリンmRNAにハイブリダイズする核酸分子へ血液試料を曝露する工程を含む、請求項11〜12いずれか記載の方法。
- ジスフェリン発現のレベルを決定する工程が、ジスフェリンポリペプチドの存在を検出する工程を含む、請求項11〜12いずれか記載の方法。
- ジスフェリン発現のレベルを決定する工程がジスフェリンに選択的に結合する抗体へ血液試料を曝露する工程を含む、請求項14記載の方法。
- 哺乳動物がヒトである、請求項11〜12いずれか記載の方法。
- ジスフェリノパシーが肢体筋ジストロフィーまたはミヨシミオパシーである、請求項11〜12いずれか記載の方法。
- 末梢血単核細胞がCD14ポジティブ単球である、請求項1、11または12記載の方法。
- (a) 哺乳動物から得られた血液試料から末梢血単核細胞を単離する工程;および
(b) 該末梢血単核細胞をジスフェリンタンパク質またはジスフェリンポリぺプチドの存在または非存在について分析する工程、ここで分析は、ジスフェリン特異的抗体を使用し、末梢血単核細胞中のジスフェリンタンパク質またはジスフェリンポリぺプチドの存在が、哺乳動物におけるジスフェリンの発現を示す
を含む、哺乳動物におけるジスフェリンタンパク質の発現の存在または非存在を検出する方法。 - 分析がウエスタンブロット分析である、請求項19記載の方法。
- 哺乳動物がヒトである、請求項19記載の方法。
- 試料中のジスフェリンタンパク質またはポリぺプチドのレベルを決定する工程をさらに含む、請求項20記載の方法。
- 試料中のジスフェリンタンパク質またはポリぺプチドのレベルを対照と比較する工程をさらに含む、請求項22記載の方法。
- 対照に比較してより低いレベルの試料中のジスフェリン発現が、哺乳動物におけるジスフェリノパシーの存在を示す、請求項23記載の方法。
- 末梢血単核細胞がCD14ポジティブ細胞である、請求項19記載の方法。
- (a) 哺乳動物から得られた血液試料から末梢血単核細胞を単離する工程;および
(b) 該末梢血単核細胞をジスフェリンをコードする核酸の存在または非存在について分析する工程、ここで分析はPCR増幅工程を含まず、末梢血単核細胞中のジスフェリンをコードする核酸の存在が哺乳動物におけるジスフェリンの発現を示す、
を含み、ジスフェリンの発現がジスフェリンをコードする核酸の存在または非存在を検出することによって決定される、哺乳動物におけるジスフェリンの発現の存在または非存在を検出する方法。 - 核酸がmRNAであり、分析が、ジスフェリンをコードする核酸の全てまたは一部に特異的にハイブリダイズする核酸プローブを使用するノーザンブロット分析による、請求項26記載の方法。
- 哺乳動物がヒトである、請求項27記載の方法。
- 試料中のジスフェリンmRNAのレベルを決定する工程をさらに含む、請求項27記載の方法。
- 試料中のジスフェリンmRNAのレベルを対照と比較する工程をさらに含む、請求項29記載の方法。
- 対照に比較してより低いレベルの試料中のジスフェリンmRNA発現が、哺乳動物におけるジスフェリノパシーの存在を示す、請求項30記載の方法。
- 末梢血単核細胞がCD14ポジティブ細胞である、請求項26記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US33389501P | 2001-11-28 | 2001-11-28 | |
PCT/US2002/038010 WO2003046224A1 (en) | 2001-11-28 | 2002-11-27 | A blood-based assay for dysferlinopathies |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005510248A JP2005510248A (ja) | 2005-04-21 |
JP4282483B2 true JP4282483B2 (ja) | 2009-06-24 |
Family
ID=23304693
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003547654A Expired - Fee Related JP4282483B2 (ja) | 2001-11-28 | 2002-11-27 | ジスフェリノパシーのための血液ベースアッセイ |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7172858B2 (ja) |
JP (1) | JP4282483B2 (ja) |
AU (1) | AU2002346552A1 (ja) |
CA (1) | CA2468431C (ja) |
WO (1) | WO2003046224A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9458465B2 (en) | 2007-12-04 | 2016-10-04 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Compositions and methods to modulate cell membrane resealing |
EP2635908B1 (en) | 2010-11-05 | 2015-08-19 | University of Medicine and Dentistry of New Jersey | Serum mg53 as a diagnostic marker for tissue injury |
WO2016205753A1 (en) * | 2015-06-17 | 2016-12-22 | The Translational Genomics Research Institute | Systems and methods for obtaining biological molecules from a sample |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6534631B1 (en) | 1998-07-15 | 2003-03-18 | Human Genome Sciences, Inc. | Secreted protein HT5GJ57 |
US6300092B1 (en) | 1999-01-27 | 2001-10-09 | Millennium Pharmaceuticals Inc. | Methods of use of a novel lysyl oxidase-related protein |
DE19818620A1 (de) | 1998-04-21 | 1999-10-28 | Metagen Gesellschaft Fuer Genomforschung Mbh | Menschliche Nukleinsäuresequenzen aus Blase-Normal |
JP2003528564A (ja) | 1998-06-06 | 2003-09-30 | ジェノスティック ファーマ リミテッド | 遺伝的プロファイリングに使用するプローブ |
WO2000011157A1 (en) | 1998-08-25 | 2000-03-02 | The General Hospital Corporation | Dysferlin, a gene mutated in distal myopathy and limb girdle muscular dystrophy |
WO2000011016A1 (en) | 1998-08-25 | 2000-03-02 | The General Hospital Corporation | Dysferlin mutations |
AU3395900A (en) | 1999-03-12 | 2000-10-04 | Human Genome Sciences, Inc. | Human lung cancer associated gene sequences and polypeptides |
EP1130094A3 (en) | 1999-07-08 | 2001-11-21 | Helix Research Institute | Primers for synthesizing full length cDNA clones and their use |
CA2738796C (en) | 1999-11-18 | 2017-10-31 | Brown University Research Foundation | Biglycan and uses thereof in stabilizing dystrophin associated protein complexes |
AU2001236589A1 (en) | 2000-02-04 | 2001-08-14 | Aeomica, Inc. | Methods and apparatus for high-throughput detection and characterization of alternatively spliced genes |
WO2001070972A2 (en) | 2000-03-24 | 2001-09-27 | Yasunaga, Shin'ichiro | Multiple human and mouse otoferlin isoforms |
-
2002
- 2002-11-27 WO PCT/US2002/038010 patent/WO2003046224A1/en active Application Filing
- 2002-11-27 JP JP2003547654A patent/JP4282483B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-11-27 CA CA2468431A patent/CA2468431C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-11-27 US US10/306,662 patent/US7172858B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-11-27 AU AU2002346552A patent/AU2002346552A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2468431A1 (en) | 2003-06-05 |
CA2468431C (en) | 2011-06-28 |
US7172858B2 (en) | 2007-02-06 |
WO2003046224A1 (en) | 2003-06-05 |
US20030165937A1 (en) | 2003-09-04 |
JP2005510248A (ja) | 2005-04-21 |
AU2002346552A1 (en) | 2003-06-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP2341344B1 (en) | Method for diagnosing polycystic kidney disease | |
KR20110020853A (ko) | 유전자 또는 단백질 발현 프로파일을 이용한 신장 동종이식 거부반응 진단방법 | |
US20080038365A1 (en) | TRPC6 involved in glomerulonephritis | |
JP2000513098A (ja) | がんの診断法および予後予測法 | |
CA2814029C (en) | Moesin fragments associated with immune thrombocytopenia | |
CA2814026C (en) | Moesin fragments associated with aplastic anemia | |
JP5924502B2 (ja) | リンパ球性漏斗下垂体後葉炎のバイオマーカー及びその用途 | |
JP2013213774A (ja) | 結核検査用バイオマーカー | |
JP4282483B2 (ja) | ジスフェリノパシーのための血液ベースアッセイ | |
KR101289134B1 (ko) | 유전성 샤르코-마리-투스 말초신경병증의 cmt4b3 아형에 대한 원인 유전자로서의 sbf1(mtmr5) 돌연변이 유전자 및 이를 이용한 상기 질병의 진단방법 및 진단용 조성물 | |
US20090053723A1 (en) | Peripherin and Neurofilament Light Protein Splice Variants in Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS) | |
EP2703814B1 (en) | Method for detecting neurological disease associated with cognitive dysfunction by measuring epha4 extracellular domain | |
JP2009535033A (ja) | Cripto−3の検出のための組成物および方法 | |
KR102387354B1 (ko) | 샤르코-마리-투스병 진단용 마커 및 그의 용도 | |
JP6306124B2 (ja) | 結核検査用バイオマーカー | |
US20040180385A1 (en) | Method of diagnosing systemic lupus erythematosus | |
JP6565099B2 (ja) | 家族性地中海熱のバイオマーカー | |
JP6618107B2 (ja) | リンパ球性漏斗下垂体後葉炎検査試薬及びその用途 | |
KR101289114B1 (ko) | 조기발병하는 상염색체 열성 축삭형 샤르코-마리-투스병의 원인 유전자로서 hadhb 돌연변이 유전자, 이를 이용한 상기 질병의 진단방법 및 진단용 조성물 | |
van Oosterhout et al. | Short Telomere Length in IPF Lung Associates with Fibrotic Lesions and Predicts Survival | |
WO2002036826A2 (en) | Del-1 and benign prostatic hyperplasia |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050720 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080926 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20081224 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090107 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090126 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20090225 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20090317 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4282483 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120327 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130327 Year of fee payment: 4 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140327 Year of fee payment: 5 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |