JP4085092B2 - アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 - Google Patents
アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4085092B2 JP4085092B2 JP2005015427A JP2005015427A JP4085092B2 JP 4085092 B2 JP4085092 B2 JP 4085092B2 JP 2005015427 A JP2005015427 A JP 2005015427A JP 2005015427 A JP2005015427 A JP 2005015427A JP 4085092 B2 JP4085092 B2 JP 4085092B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- cell
- cry
- epitope
- cell epitope
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Description
18名のスギ花粉症患者末梢血リンパ球を、スギ花粉アレルゲンであるCry j 1またはCry j 2で刺激して、各アレルゲンを特異的に認識するT細胞ラインを患者別に樹立した。
18名のスギ花粉症患者の中でCry j 1において高い重要度指数を示すペプチド番号43番と22番を認識する患者2 名[患者B(以下PBと略す)、患者J(PJ)]とCry j 2において高い重要度指数を示すペプチド番号14番、38番、48番、69番を認識する患者3名[PB、患者C(PC)、患者R(PR)]を選定しこれらのスギ花粉症患者の末梢血リンパ球をCry j 1またはCry j 2で刺激してCry j 1またはCry j 2を認識するT細胞クローンを樹立した。4名の患者のHLA-クラスIとクラスIIタイプを以下に示す。
PB:A2/24 - B39/55 - Cw7/w3 - DRB1*1501/0901 - DRB4*0101 - DRB5*0101、DQA1*0102/0301 - DQB1*0602/0303 - DPA1*0101/0101 - DPB1*0501/0201、
PJ:A24/- - B61/51 - Cw3/- - DRB1*1501/0802 - DRB5*0101、DQA1*0102/0401 - DQB1*0602/0402 - DPA1*-/- - DPB1*0501/0402、
PC:A-2/2 - B54/51 - Cw1/-、DRB1*0405/1501 - DRB4*0101 - DRB5*0101 - DQA1*0301/0102 - DQB1*0401/0602 - DPA1*0202/0202 - DPB1*0201/0501、
PR:A-11/- - B60/35 - Cw7/w3 - DRB1*0901/1501 - DRB4*0101 - DRB5*0101 - DQA1*0301/0102 - DQB1*0303/0602 - DPA1*01/0202 - DPB1*0201/0201)。
実施例2で樹立したT細胞クローンの増殖応答系に、HLA-クラスIIの DR、DQ、またはDPに対して特異的に反応する単クローン抗体を添加して、T細胞の増殖応答を阻止することにより、遺伝子座レベルでのHLAクラスII拘束分子を同定した。
HLAクラスII遺伝子座レベルでの拘束分子が同定できたT細胞クローンを、DRに関しては、個々のタイプを遺伝子導入したマウスL-細胞、DQまたはDPに関しては、タイプに関してハプロタイプの一致するB細胞株を抗原提示細胞として用いることにより個々のタイプにおける拘束分子の同定が可能である。
アレルギーの発症にはTh2細胞の関与が想定されている。現在の研究レベルでは、抗原刺激後、T細胞のTh1またはTh2細胞への分化が、特定のエピトープペプチドまたはHLA-クラスII遺伝子座レベルで規定されているのかはまだ、未解決な部分が多い。しかし、ペプチドで刺激後、Th2細胞が優位に誘導される場合には、ペプチド投与によりスギ花粉症が悪化する可能性が高い。実施例2で作製したT細胞クローンをT細胞が認識するエピトープペプチドで刺激し、IL-2、IL-4、IFNγの産生量を測定することによってThタイプを決定した。
Cry j 1及びCry j 2分子中に存在するIgE抗体エピトープ部位を同定した結果、Cry j 1にはこの一次構造を認識するIgEエピトープは存在しないこと、Cry j 2にはIgE抗体エピトープが少なくとも4ヶ所存在することが明らかとなったが、これらのIgE抗体エピトープ部位は、T細胞エピトープ部位とは異なる部位であった。この知見をもとに、Cry j 1及びCry j 2のT細胞エピトープ部位のうち、図7に示すペプチドを選択した。
C.A.#1.a-Arg-Arg-b-Arg-Arg-c-Arg-Arg-d-Arg-Arg-e
C.A.#2.a-Arg-Arg-b-Arg-Arg-c-Arg-Arg-e-Arg-Arg-d
C.A.#3.a-Arg-Arg-b-Arg-Arg-d-Arg-Arg-c-Arg-Arg-e
C.A.#4.a-Arg-Arg-b-Arg-Arg-d-Arg-Arg-e-Arg-Arg-c
C.A.#5.a-Arg-Arg-b-Arg-Arg-e-Arg-Arg-c-Arg-Arg-d
C.A.#6.a-Arg-Arg-b-Arg-Arg-e-Arg-Arg-d-Arg-Arg-c
実施例6で得た6種の多重エピトープペプチド(C.A.#1〜#6)を0.2M酢酸緩衝液(pH4.5)に溶解させ、0.1ml/ウェルでブラックプレート(大日本製薬社製)に加えて4℃で一晩放置した。抗原溶液を除去した後、洗浄液で3回洗浄し、29名のスギ花粉患者及び健常人血清(4倍希釈)を加えて、37℃で4時間反応させた。血清を除去後、洗浄液で3回洗浄し、β-D-ガラクトシダーゼ標識抗ヒトIgE抗体(Pharmacia社製)を室温で一晩反応させた。洗浄液で3回洗浄後、0.1mM 4-メチルウンベリフェリル-β-D-ガラクトピラノシド/0.01M リン酸緩衝液(pH 7.0)、0.1M NaCl、1mM MgCl2、0.1% NaN3、0.1%BSAの基質溶液を加え、37℃で2時間反応させた。0.1M グリシン/NaOH、pH10.3溶液をこれに加えて反応を停止させ、蛍光分光光度計(Labsystems)で蛍光強度を測定した。なお、各多重エピトープペプチドに対する陽性コントロールとしてビオチン標識ウサギ抗dエピトープIgGとガラクトシダーゼ標識ストレプトアビジン(ピアス社製)を反応させた。
実施例6で得た多重エピトープペプチドのうちC.A.#4を構成する抗原ペプチドが実際にT細胞エピトープとして機能しているかどうかについて検討した。
多重エピトープペプチドはT細胞エピトープ部位を含むため、ペプチド免疫療法を試みる場合には、末梢血リンパ球に増殖応答を惹起させることが必要である。多重エピトープペプチドで末梢血リンパ球を刺激し、増殖応答が観察されるかについて調査した。
スギアレルゲンを投与して治療を行なう、いわゆる減感作治療のメカニズムについて、詳細はわかっていない。そこでマウスを用いた動物実験を行なった。スギ花粉アレルゲン、Cry j 1 を1匹当たり300μg, CB6F1マウス(雌、5匹)の皮下に5日間隔で2回投与した。コントロールとして同容量の PBS を皮下投与(雌、5匹)した。さらに5日後に Cry j 1 100μg を Alum アジュバンドと共に皮下に投与して免疫を行ない、さらに10日後にリンパ節細胞を単離し、コントロール群マウスのリンパ節細胞、Cry j 1 投与マウスのリンパ節細胞をそれぞれの群単位でプールした。プールしたリンパ球に Cry j 1 を 0, 50, 150 μg/ml 加え、さらに3日間培養を行ない、培養上清を採取して含まれる IL-2 を測定した(Endogen 社製)。その結果を図12に示す。コントロール群である PBS 投与マウスは Cry j 1 濃度が 0, 50, 150 μg/ml と増加すると共に IL-2 の産生量が増加した。一方、Cry j 1 投与マウスはこれらのコントロールマウスに比べ明かに IL-2 の産生量が減少し、スギ花粉アレルゲン投与によって免疫寛容が生じた。この結果は現在用いられているスギ花粉アレルゲンによる減感作療法の有効例を再現している。
8週齢の雄CB6F1マウスをアジュバント(Imject Alum: ピアス社製)と共に組み換えCry j 2(rCry j 2)10μgで2週間おきに3回免疫した(ip)。最終免疫から1週間後にマウス3匹から脾細胞を調製し一つにまとめた。96ウエルプレ−ト(ファルコン社製)1ウエルに対し脾細胞(5×106)を15残基からなる74種類のCry j 2のオ−バ−ラッピングペプチド(0.115μM)のそれぞれと共に0.2mlのRPMI培地(10% FCS、2mM L-グルタミン、50U/ml ペニシリン、50μg/ml ストレプトマイシン)で培養した。対照としてPBS、50μg/ml Cry j 1、0.3μg/ml rCry j 2のそれぞれに対する反応も検討した。各々の試験試薬に対し3ウエル播種し、37℃、5% CO2条件下で3日間培養した。最後の6時間0.5μCi/ウエルの[3H]-チミジンでパルスラベルを行いセルハ−ベスタ−(Inoteck、ベルト−ルドジャパン社製)で細胞をガラスフィルタ−上に補集し、乾燥した後、液体シンチレ−ションカウンタ−(TRI-CARB 4530、パッカ−ドジャパン社製)で[3H]-チミジンの細胞内取り込みを測定した。
1群8匹の雄CB6F1(8週令、雄)マウス1匹当り生理食塩水に溶解した3mg No.14ペプチドを、5日間隔で2回皮下投与した。対照群としては等容量(200μl)の生理食塩水を同様に投与した。2回目のペプチド投与後5日目にインジェクトアルム(Imject Alum)と混合したrCry j 2(50μg/匹)で全てのマウスを皮下免疫した。免疫1週間後に各々のマウスから脾細胞を調製した。96ウエルプレ−ト(ファルコン)1ウエルに対し脾細胞(5×106)をrCry j 2(3μg/ml)と共に0.2mlのRPMI培地(10% FCS、2mM L-グルタミン、50U/ml ペニシリン、50μg/ml ストレプトマイシン)で培養した。対照としてrCry j 2を含まない条件下で培養した。3H-チミジンによるT細胞増殖の測定は、実施例1に記載された方法に準じて行った。サイトカイン測定は、対照を含めた3種類のペプチド投与群(0.3, 1.3, 10μg/ml)について、in vitroで0.3μg/mlのCry j 2で刺激したときの培養上清を用いた。
6週齢の雄CB6F1マウス1匹当り生理食塩水に溶解した3mg No.48ペプチドを、5日間隔で2回皮下投与した。対照群 としては等容量(200μl)の生理食塩水を同様に投与した。ペプチド投与群及び対照群の動物数は各々8匹とし、2回目のペプチド投与から5日目にアジュバント(Imject Alum)と混合したrCry j 2(50μg)で全てのマウスを皮下免疫した。免疫1週間後に各々のマウスから脾細胞を調製した。96ウエルプレ−ト(ファルコン)1ウエルに対し脾細胞(5×106)をrCry j 2(3μg/ml)と共に0.2mlのRPMI培地(10% FCS、2mM L-グルタミン、50U/mlペニシリン、50μg/mlストレプトマイシン)で培養した。対照としてrCry j 2を含まない条件下で培養した。3H-チミジンによるT細胞増殖の測定は実施例10に記載された方法に準じて行った。
Cry j 1 ペプチド番号22番(p106-120)のT細胞ラインおよびT細胞クローン増殖応答に必要なアミノ酸配列(core)を決定するために、図15に示すようにこのペプチドのN末端およびC末端から1残基づつのアミノ酸を削除してp107-120 (p22-2), p108-120 (p22-3), p109-120(p22-4), p110-120(p22-5), p111-120(p22-6), p106-119(p22-7), p106-118(p22-8), p106-117(p22-9), p106-116(p22-10), p106-115(p22-11)の11種類のペプチドをペプチド合成機(PSSM-8, 島津製作所製)により合成した。Cry j 1ペプチド番号22番のp106-120 と反応する3名のスギ花粉症患者のT細胞ライン(PJ, PR, PB )、および患者1名のT細胞クローン(PB 8-3, PB 8-2, PB 9-39) を実施例1及び2の方法を用いてこれら11種類のペプチドに対する反応性を検討した。2種類のT細胞ライン(PJ, PB)と2種類のT細胞クローン(PB 8-2, PB 9-39)はp106-120 (p22-1)を認識して増殖したが、1種類のT細胞ラインとT細胞クローンは増殖応答を示さなかった(図15)。この結果、p106-120コア配列は「FIKRVSNVI」(配列番号:4)の9残基であることが判明した(この9残基をCry j 1 #22 core と表示する)。
ヒノキ花粉アレルゲンCha o 1 のT細胞エピトープ(特願平8-153527号)であるペプチド番号8(p71-90; IFSKNLNIKLNMPLYIAGNK), あるいはペプチド番号32(P311-330; SSGKNEGTNIYNNNEAFKVE)と実施例14で得られたCry j 1#22コア配列「FIKRVSNVI」をつないだペプチド2種類(Cha o 1#8-Cry j i #22 core, Cha o 1 #32-Cry j 1 #22 core )をペプチド合成機(PSSM-8; 島津製作所製)で合成した。Cha o 1#8とCry j 1#22 core, Cha o 1#32とCry j 1#22 coreとの間には RR 配列を挿入した。即ち Cha o 1 #8-Cry j 1 #22 core(配列番号:5)と Cha o 1#32-Cry j 1 #22 core(配列番号:6)である。
Cry j 1#22 coreのT細胞エピトープペプチドのアミノ酸を置換することによってT細胞の活性を調節することが可能か否かを、2つのクローンPJ7-9及びPB10-18を用いて検討した。Cry j 1ペプチド番号22番p106-120 に反応するT細胞クローンPJ 7-9及びPB10-12は、DRB5*0101を拘束分子とし、Cry j 1#22coreの9残基を認識する。この9残基を含む13残基のペプチドp108-120 (VFIKRVSNVIIHG) 中の9残基の各アミノ酸を、類似アミノ酸、非類似アミノ酸の2種類のアミノ酸によって置換したアナログペプチドを合成した(図17、18)。そして、これらのアナログペプチドに対するT細胞クローンPJ7-9及びPB10-18の反応性を[3H]チミジンの取込み量で調べた。反応溶液中のサイトカイン濃度は、R&D Systems 社製のサイトカイン測定キットで測定した。その結果を、図17及び図18に示した。ここで、アミノ酸置換していない13残基のペプチドを反応させた上清の IFN γ、IL-4、IL-2、IL-5の産生量及び細胞の[3H]チミジンの取込み量をそれぞれ100%とした。PJ7-9クローンの場合、Cry j 1#22core「FIKRVSNVI」の3、4、6番目の各アミノ酸部分「K」「R」「S」は類似アミノ酸置換と非類似アミノ酸置換の両者、あるいは非類似アミノ酸置換により[3H]チミジンの取り込みおよびサイトカインの産生量がそれぞれ著しく抑制された(図17)。従って、これらの部分のアミノ酸はペプチドを介したHLA 分子とT細胞レセプター分子の複合体形成に重要な部分と考えられる。1番目のアミノ酸 (F) を類似アミノ酸である Y に置換しても[3H]チミジンの取り込み量とIL-4, IL-5 の産生量に変化は認められないが、非類似アミノ酸である「S」に置換すると[3H]チミジンの取り込み量に変化は認められないにもかかわらず、IFN γと IL-2の産生量は著しく増大した。PB10-18クローンの場合は、Cry j 1#22coreの1、2、3、4、6、7、8番目のアミノ酸置換によって[3H]チミジンの取り込みが抑制され、これらの部分のアミノ酸はペプチドを介したHLA 分子とT細胞レセプター分子の複合体形成に重要な部分と考えられる。さらに6、7、8番目のアミノ酸置換によってIL-5の産生量に比較して IL-2 の産生抑制が認められた(図18)。これらの結果から、Cry j 1#22coreの1番目のアミノ酸FをSに置換した「SIKRVSNVI」が IFN-γの産生量を増大させたことにより、アレルギーの治療剤として有用であることが明らかとなった。
Claims (11)
- スギ花粉アレルゲンから単離された少なくとも1つのT細胞エピトープペプチド、ならびに、アミノ酸配列IFSKNLNIKLNMPLYIAGNKで示されるペプチド、及びアミノ酸配列SSGKNEGTNIYNNNEAFKVEで示されるペプチドからなる群から選ばれるヒノキ花粉アレルゲンから単離された少なくとも1つのT細胞エピトープペプチドを、ペプチド結合を介して連結した単一のポリペプチドであって、以下の性質を有する多重T細胞エピトープポリペプチド:
(a)スギ花粉アレルゲンがCry j 1及び/又はCry j 2である。
(b)スギ花粉症患者及びヒノキ花粉症患者由来のT細胞クローンであって、上記ポリペプチドを構成する各T細胞エピトープポリペプチドに特異的なT細胞クローンを増殖させることができる。
(c)スギ花粉症患者及びヒノキ花粉症患者のアレルゲン特異的IgE抗体と結合しない。 - スギ花粉アレルゲンがCry j 1である、請求項1に記載の多重T細胞エピトープポリペプチド。
- T細胞エピトープペプチドの間に抗原提示細胞内でプロセッシングを受ける部位を介在させた、請求項1に記載の多重T細胞エピトープポリペプチド。
- プロセッシングを受ける部位がアルギニンダイマー(-Arg-Arg-)、又はリジンダイマー(-Lys-Lys-)である、請求項3に記載の多重T細胞エピトープポリペプチド。
- システイン(Cys)残基を含まない、請求項1〜4のいずれか一項に記載の多重T細胞エピトープポリペプチド。
- 配列番号:5、又は配列番号:6のアミノ酸配列のいずれかのアミノ酸配列からなる、請求項1に記載の多重T細胞エピトープポリペプチド。
- 配列番号:5、又は配列番号:6のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドにおいて、各アミノ酸配列において23番目のフェニルアラニンがセリンに置換されている、請求項1に記載の多重T細胞エピトープポリペプチド。
- 請求項6又は7のいずれか一項に記載されたポリペプチドにおいて、アミノ酸が置換、欠失及び/又は挿入されたポリペプチドであって、以下の性質を有する多重T細胞エピトープポリペプチド:
(a)スギ花粉症患者及びヒノキ花粉症患者由来のT細胞クローンであって、上記ポリペプチドを構成する各T細胞エピトープペプチドに特異的なT細胞クローンを増殖させることができる。
(b)上記T細胞エピトープペプチドの間に、抗原提示細胞内でプロセッシングを受ける部位が介在する。
(c)システイン残基を含まない。
(d)スギ花粉症患者及びヒノキ花粉症患者のアレルゲン特異的IgE抗体と結合しない。 - 請求項1〜8のいずれか一項に記載の多重T細胞エピトープポリペプチドを有効成分として含有するスギ花粉症及び/又はヒノキ花粉症の予防、又は治療剤。
- さらに薬学的に許容できる担体、又は希釈剤を含む、請求項9に記載の予防、又は治療剤。
- スギ花粉症及び/又はヒノキ花粉症の予防、又は治療のために用いられる薬剤の調製における、請求項1〜8のいずれか一項に記載の多重T細胞エピトープポリペプチドの使用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005015427A JP4085092B2 (ja) | 1996-03-10 | 2005-01-24 | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP8070296 | 1996-03-10 | ||
JP2005015427A JP4085092B2 (ja) | 1996-03-10 | 2005-01-24 | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP53167497A Division JP3732231B2 (ja) | 1996-03-10 | 1997-03-10 | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005126447A JP2005126447A (ja) | 2005-05-19 |
JP4085092B2 true JP4085092B2 (ja) | 2008-04-30 |
Family
ID=34655291
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005015427A Expired - Fee Related JP4085092B2 (ja) | 1996-03-10 | 2005-01-24 | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4085092B2 (ja) |
-
2005
- 2005-01-24 JP JP2005015427A patent/JP4085092B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2005126447A (ja) | 2005-05-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3732231B2 (ja) | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 | |
Mohapatra et al. | Immunotherapy for allergies and asthma: present and future | |
US5859207A (en) | Superantigen agonist and antagonist peptides | |
Jahn-Schmid et al. | Antigen presentation of the immunodominant T-cell epitope of the major mugwort pollen allergen, Art v 1, is associated with the expression of HLA-DRB1∗ 01 | |
EP1267921B1 (en) | Composition and method for the prevention and/or the treatment of der pii allergy | |
JPH07506563A (ja) | 特異的t細胞群による病原応答に起因する疾患に対してのワクチン接種および方法 | |
JP4218987B2 (ja) | ペプチド免疫療法治療剤 | |
JP5824452B2 (ja) | アレルギー治療用低アレルゲン性ハイブリッドポリペプチド | |
EP0667908B1 (en) | Soluble t-cell receptor alpha chain and derivatives used as prophylactic and therapeutic agents for autoimmune diseases | |
JP4085105B2 (ja) | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 | |
Rossi et al. | Intravenous or Intranasal Administration of Gliadin is Able to Down‐Regulate the Specific Immune Response in Mice | |
JP4085092B2 (ja) | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 | |
JP2007176953A (ja) | アレルギー疾患に対するペプチド免疫療法剤 | |
JP3474898B2 (ja) | スギ花粉アレルゲンのt細胞エピトープペプチド及びそのアナログペプチド | |
AU2020392512A1 (en) | Methods for stratifying diabetes patients | |
US20030185847A1 (en) | Peptide-based immunotherapeutic agent for treating allergic diseases | |
EP1430904A1 (en) | Desensitizers | |
Mohapatra et al. | Novel immunotherapeutic approaches for the treatment of allergic diseases | |
JP2018524301A (ja) | マルチペプチド組成物 | |
JPH08503697A (ja) | T細胞を寛容化するペプチドおよびその組成物 | |
de Weck | Conventional and new approaches to hyposensitization |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050221 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050221 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050525 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050713 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20051005 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20051129 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070124 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070322 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20070907 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20080208 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20080218 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110222 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120222 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120222 Year of fee payment: 4 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120222 Year of fee payment: 4 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130222 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130222 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140222 Year of fee payment: 6 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |