JP4038665B2 - Phosphonic acid diester derivatives - Google Patents

Description

【０００７】
〔式中、2つのRはそれぞれ低級アルキル基を示す。
-A-は-Ph-CH₂-基(-Ph-はp-フェニレン基を示す)または単結合を示す。
Bは-A-が単結合の時、8H-インデノ[1,2-d]チアゾール-2イル基を示し、-A-が-Ph-CH₂-基の時、下記基(1)-(3)のいずれかを示す。
【０００８】
【化４】

【０００９】
基(1)中、R¹は水素原子、低級アルキル基または低級アルコキシカルボニル基を示し、X¹はCH、CR²(R²は低級アルキル基)またはNを示し、Y¹はS、OまたはNR³(R³は水素原子、フェニル基またはベンゾイル基)を示し、且つ-Z¹-は-CH₂CH₂-、-CH=CH-または-CH₂CR⁴R⁵-基(R⁴およびR⁵はそれぞれ低級アルキル基)を示す。
基(2)中、-X²-Y²-Z²-は-N=C(R⁴)-S-(R⁴は水素原子、低級アルキル基、低級アルキルチオ基またはフェニル基)、-N=CH-CH=CH-または-CH=N-NH-を示す。
また基(3)中、-X³-Y³-Z³-は-O-CH₂-O-、-CH₂CH₂CH₂-または-O-CH₂CH₂-O-を示す。〕
特に、本発明は、一般式(1)中、Bが基(1)で示される基であるホスホン酸ジエステル誘導体、一般式(1)中、Bが基(2)で示される基であるホスホン酸ジエステル誘導体、一般式(1)中、Bが基(3)で示される基であるホスホン酸ジエステル誘導体および一般式(1)中、-A-が単結合であるホスホン酸ジエステル誘導体を提供する。
【００１０】
また、本発明は、一般式(1)で表されるホスホン酸ジエステル誘導体を有効成分として含有するACAT-1阻害剤を提供する。
【００１１】
更に、本発明のホスホン酸ジエステル誘導体は、動脈硬化症予防剤、動脈硬化症治療剤、コレステロール吸収阻害剤、LDL-コレステロール低下剤などとして有用である。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明誘導体を表す前記一般式(1)およびその他の本明細書中に用いられている各基は、それらが各式に示される基として用いられる場合および該基の置換基として用いられる場合のいずれの場合も、具体的にはそれぞれ次の通りである。本明細書において炭素を含む各基につき用いられる「低級」なる語は、「炭素数1-6の」なる意味で用いられるものとする。
【００１３】
低級アルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシル基などの炭素数1-6の直鎖または分枝鎖状のアルキル基を例示することができる。
【００１４】
低級アルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、tert-ブトキシカルボニル、ペンチルオキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニル基などの炭素数1-6の直鎖または分枝鎖状のアルコキシ基が結合したカルボニル基を例示することができる。
【００１５】
低級アルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、tert-ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ基などの炭素数1-6の直鎖状または分岐鎖状のアルコキシ基を例示することができる。
【００１６】
低級アルキルチオ基としては、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオ、tert-ブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオ基などの炭素数1-6の直鎖または分枝鎖状のアルキル基を有するアルキルチオ基を例示することができる。
【００１７】
ハロゲン原子としては、弗素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子を例示することができる。
【００１８】
一般式(1)で表される本発明誘導体は、優れたACAT-1阻害活性を有しており、ACAT-1阻害剤として有用である。また、この活性に基づいて、動脈硬化症予防剤、動脈硬化症治療剤、コレステロール吸収阻害剤、LDL-コレステロール低下剤などとして、医薬品分野で有用である。
【００１９】
特に、医薬品分野で好適な本発明誘導体としては、以下の各化合物を挙げることができる。
(a)：一般式(1)中、Bが基(1)を示し且つ該基中、Y¹がNR³である化合物、
(b)：一般式(1)中、Bが基(1)を示し且つ該基中、Y¹がSである化合物、および
(c)：一般式(1)中、Bが基(3)を示す化合物。
【００２０】
以下、本発明誘導体の製造法を詳述する。
【００２１】
本発明誘導体は、例えば下記反応工程式-1および-2に示す方法に従って製造することができる。
【００２２】
【化５】

【００２３】
〔各式中、Rは一般式(1)に同じ。B¹は前記基(1)-(3)のいずれかの基を示す。但し、B¹が前記基(1)であって且つ該基(1)中のY¹がNHである場合を除く。Xはハロゲン原子を示す。〕
反応工程式-1に示す方法によれば、公知のカルボン酸ハロゲン化物(2)とアミン類(3a)とを反応させることにより、本発明化合物(1a)を得ることができる。
【００２４】
上記反応は、脱酸剤の存在下に適当な溶媒中で実施することができる。脱酸剤としては、反応に悪影響を与えない公知の各種のものをいずれも使用できる。好ましい脱酸剤の具体例としては、トリエチルアミン、N,N-ジエチルアニリン、N-メチルモルホリン、ピリジン、4-ジメチルアミノピリジンなどの第三級アミン類を挙げることができる。溶媒としては、一般によく知られている各種のもの、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、石油エーテルなどの芳香族ないし脂肪族炭化水素類；ジエチルエーテル、1,2-ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン(THF)、1,4-ジオキサンなどの鎖状ないし環状エーテル類；アセトン、メチルエチルケトン、アセトフェノンなどのケトン類；ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、1,2-ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類およびこれらの混合溶媒などを使用することができる。上記反応におけるカルボン酸ハロゲン化物(2)とアミン類(3a)との使用割合は、特に限定されず適宜決定することができる。通常好ましくは後者に対して前者を等モル量〜過剰量用いる。また、脱酸剤は、通常カルボン酸ハロゲン化物(2)に対して、等モル量〜過剰量用いるのが好適である。反応は、冷却下、室温下および加熱下のいずれでも進行する。一般には、室温付近〜溶媒の還流温度範囲の温度条件を採用するのがよく、約0.5-24時間程度で反応は終了する。
【００２５】
B¹が前記基(1)であって且つ該基(1)中のY¹がNHである化合物は、上記で得られるY¹基としてNR³(R³=ベンゾイル基)基を有する対応化合物を脱ベンゾイル化することにより収得できる。この脱ベンゾイル化反応は、常法に従って実施することができる。
【００２６】
【化６】

【００２７】
〔各式中、Rは一般式(1)に同じ。B²は8H-インデノ[1,2-d]チアゾール-2-イル基を示す。尚、各R(3つ)は、同一であっても、異なっていてもよい。〕
反応工程式-2に示す方法によれば、公知のホスホノギ酸トリエステル(4)とアミン類(3b)とを反応させることにより、本発明化合物(1b)を得ることができる。
【００２８】
上記反応は、適当な非プロトン性溶媒中で、ホスホノギ酸トリエステル(4)に対して等モル量〜過剰量のアミン類(3b)と、該アミン類に対して等モル量〜過剰量の水素化ナトリウムを用いて実施することができる。特に好ましい上記溶媒としては、例えばN,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、THFなどを挙げることができる。また、反応条件としては、一般に0℃から室温付近の温度条件を採用することができる。反応は一般に約12-24時間で終了する。
【００２９】
尚、前記反応工程式-1および-2において原料として利用されるアミン類(3a)および(3b)は、その有する基Bの種類に応じて、例えば下記反応工程式-3から-5に示す方法に従いそれぞれ製造することができる。
【００３０】
【化７】

【００３１】
〔各式中、R¹、X¹およびXは前記に同じ。Y¹'はS、O、NR³(R³はフェニル基またはベンゾイル基)または-CH=CH-基を示し、-Z¹'-は-CH₂CH₂-または-CH₂-基を示す。〕
反応工程式-3に示す方法によれば、公知の化合物(5)のハロゲン化反応およびこれに引き続き得られる化合物(6)とチオ尿素との反応によって、前記基(1)として示される基または8H-インデノ[1,2-d]チアゾール-2-イル基を有する所望のアミン類(3c)を得ることができる。
【００３２】
上記化合物(5)のハロゲン化反応は、適当なハロゲン化剤を用いて不活性溶媒中で実施できる。ハロゲン化剤としては、通常用いられる各種のもの、例えばフェニルトリメチルアンモニウム トリブロミドや、臭素、沃素などのハロゲン単体を利用できる。これらの内で、臭素、沃素などのハロゲン単体を用いる場合は、反応系内に更に塩化アルミニウム、三弗化硼素などのルイス酸を共存させるのが好ましい。不活性溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、1,2-ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジエチルエーテル、1,2-ジメトキシエタン、THF、1,4-ジオキサンなどの鎖状ないし環状エーテル類；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類などおよびこれらの混合溶媒を例示できる。上記反応におけるハロゲン化剤の使用量は、化合物(5)に対してほぼ等モル量〜少過剰量とするのがよい。反応は、氷冷下〜室温付近の温度条件で、約2-5時間程度で終了する。
【００３３】
上記反応により得られるハロゲン化物(6)とチオ尿素との反応は、チオ尿素をハロゲン化物(6)に対してほぼ等モル量用いて、メタノール、エタノール、エチレングリコールなどの不活性溶媒中、溶媒の還流温度またはその付近の温度条件下に約1-12時間を要して行われる。
【００３４】
【化８】

【００３５】
〔各式中、X¹、Y¹'およびR¹は前記に同じ。〕
反応工程式-4によれば、前記反応工程式-3で得られる化合物中、-Z¹'-が-CH₂CH₂-である化合物(3c')を公知のキノン類と反応させることにより、化合物(3d)を得ることができる。
【００３６】
該反応は、適当な溶媒中、化合物(3c')に対して等モル量〜過剰量のキノン類を用いて実施することができる。溶媒としては、ベンゼン、トルエン、キシレン、石油エーテルなどの芳香族乃至脂肪族炭化水素類；ジエチルエーテル、1,2-ジメトキシエタン、THF、1,4-ジオキサンなどの鎖状乃環状エーテル類などを例示することができる。キノン類としては、2,3,5,6-テトラクロロ-1,4-ベンゾキノン(クロラニル)、2,3-ジクロロ-5,6-ジシアノ-1,4-ベンゾキノン(DDQ)を好ましいものとして例示することができる。反応は室温から溶媒の還流温度付近の温度条件下に実施され、通常約3-12時間で終了する。
【００３７】
【化９】

【００３８】
〔各式中、X²、Y²、Z²、X³、Y³およびZ³は前記に同じ。Mはアルカリ金属またはNH₄を示す。
【００３９】
反応工程式-5に示す方法によれば、公知のアミン類(7)または(8)に、チオシアン酸塩と臭素とを反応させ、次いで常法に従いアルカリ処理により臭化水素塩を除くことにより、所望のチアゾールアミン類(3e)または(3f)を得ることができる。チオシアン酸塩としては、例えばチオシアン酸カリウム、チオシアン酸ナトリウム、チオシアン酸アンモニウムなどを使用できる。上記反応は、適当な溶媒中で実施される。溶媒としては、酢酸、プロピオン酸、ブタン酸などの脂肪族カルボン酸を例示できる。上記反応におけるアミン類(7)または(8)に対するチオシアン酸塩(M-SCN)の使用割合は、特に限定されないが、通常約2倍モル量〜4倍モル量程度の範囲から選ばれるのがよい。また臭素は、アミン類(7)または(8)に対して、等モル量〜2倍モル量程度用いるのが望ましい。反応温度としては、氷冷下〜室温付近の温度条件を採用できる。反応は、通常約12-24時間程度で終了する。
【００４０】
【化１０】

【００４１】
〔各式中、X¹、R¹およびRは前記に同じ。但し、R¹は低級アルコキシカルボニル基であってはならない。R²はフェニル基を示す。〕
反応工程式-6に示す方法によれば、反応工程式-1に示す方法により得られる本発明化合物(1c)(Bが基(1)に示される基であり且つ該基中Y¹がNR³(R³=ベンゾイル基)およびZ¹が-CH₂CH₂-である化合物)をアルカリ加水分解することにより、対応するY¹基がNHおよびZ¹が-CH=CH-である本発明化合物(1d)を得ることができる。
【００４２】
上記アルカリ加水分解反応は、一般に塩基の存在下に適当な溶媒中で実施される。塩基としては、例えば水酸化カリウム、水酸化ナトリウムなどのアルカリ金属水酸化物を好ましく使用できる。溶媒としては、水、ジエチルエーテル、1,2-ジメトキシエタン、THF、1,4-ジオキサンなどの鎖状乃至環状エーテル類；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類を使用できる。上記反応における化合物(1c)に対する塩基の使用割合は、特に限定されないが、通常1-3倍モル量程度の範囲から選ばれる。反応は、冷却下、室温下および加熱下のいずれでも進行するが、通常は氷冷下から室温付近の温度条件下に実施され、一般に約1-12時間程度で終了する。
【００４３】
本発明化合物は、通常の分離、精製手段により容易に単離、精製できる。該手段としては、一般に用いられる各種の手段、例えば、吸着クロマトグラフィー、プレパラティブ薄層クロマトグラフィー、再結晶、溶媒抽出などが挙げられる。
【００４４】
本発明は、一般式(1)で表される本発明化合物を有効成分として含有する医薬組成物をも提供する。該医薬組成物は、本発明化合物と製剤学的に許容される担体とを用いて、一般的な医薬製剤の形態に調整されて実用される。
【００４５】
本発明医薬組成物に利用される製剤学的に許容される担体としては、製剤の使用形態に応じて通常使用される希釈剤または賦形剤、例えば充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤などを例示できる。これらは調整される医薬製剤の投与単位形態に応じて適宜選択使用される。
【００４６】
医薬製剤の投与単位形態としては、各種の形態が治療目的に応じて適宜選択できる。その代表的なものとしては、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤(液剤、懸濁剤など)、軟膏剤などが挙げられる。
【００４７】
錠剤の形態に成形するに際しては、製剤学的に許容される担体として、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウムなどの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ナミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなどの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドなどの界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベンナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などを使用できる。更に、錠剤は、必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠または二重錠、多層錠とすることができる。
【００４８】
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤学的に許容される担体として、例えば、ブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン、カンテンなどの崩壊剤などを使用できる。
【００４９】
坐剤の形態に形成するに際しては、製剤学的に許容される担体として、例えば、ポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライドなどを使用できる。
【００５０】
カプセル剤は、常法に従い、通常本発明化合物を上記で例示した各種の製剤学的に許容される担体と混合して、硬質ゼラチンカプセル、軟質ゼラチンカプセルなどの充填して調製される。
【００５１】
液剤、乳剤、懸濁剤などの注射剤として調製される場合、これらは殺菌され且つ血液と等張であるのが好ましい。これらの形態にするに際しては、希釈剤として、例えば、水、エタノール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルなどを使用できる。尚、この場合、等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖またはグリセリンを医薬製剤中に含有させてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤などを添加してもよい。
【００５２】
ペースト、クリーム、ゲルなどの軟膏剤の形態に調製するに際しては、希釈剤として、例えば、白色ワセリン、パラフィン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベンナイトなどを使用できる。
【００５３】
更に、本発明医薬組成物中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を含有させることもできる。
【００５４】
本発明医薬組成物中に配合される本発明化合物(有効成分化合物)の量は、特に限定されず広範囲より適宜選択される。通常医薬組成物中に、約0.5-90重量％、好ましくは約1-85重量％程度配合されるのがよい。
【００５５】
本発明医薬製剤の投与方法は特に制限がなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などに応じて決定される。例えば、錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤およびカプセル剤は経口投与され、注射剤は単独でまたはブドウ糖、アミノ酸などの通常の補液と混合して静脈内に、或いは筋肉内、皮内、皮下または腹腔内に投与され、坐剤は直腸内投与される。
【００５６】
本発明医薬製剤の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などにより適宜選択される。通常有効成分である本発明化合物の量が1日成人1人当たり体重1kg当たり約0.5-20mg程度、好ましくは1-10mg程度とするのがよい。該製剤は1日に1回または2-4回に分けて投与することができる。
【００５７】
【実施例】
以下、本発明を更に詳しく説明するため、本発明化合物の製造のための原料化合物の製造例を参考例として挙げ、次いで本発明化合物の製造例を実施例として挙げる。また、本発明化合物につき行われた薬理試験例および本発明化合物を有効成分とする医薬の製剤例を挙げる。
【００５８】
尚、参考例1における¹H-NMRはCDCl₃中で、参考例3におけるそれはCDCl₃-CD₃OD(10:1)中で、その他の各例におけるそれらはDMSO-d₆中で、それぞれ内部標準としてテトラメチルシラン(TMS)を用いて測定した。
【００５９】
【参考例１】
4,5-ジヒドロチエノ[3',2':3,4]ベンゾ[2,1-d]チアゾール-2-イルアミンの製造
4-ケト-4,5,6,7-テトラヒドロチアナフセン7.8gをクロロホルム100mLおよびメタノール10mLの混合溶媒に溶解し、これにフェニルトリメチルアンモニウム トリブロミド20.4gを加えて室温で12時間撹拌した。混合物に水500mLを加えてクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。
【００６０】
得られた5-ブロモ-4-ケト-4,5,6,7-テトラヒドロチアナフセンを精製することなく、これにエタノール200mLとチオ尿素3.9gとを加えて70℃で2時間撹拌した。溶媒を減圧留去し、得られた粗結晶をエタノール-n-ヘキサンより再結晶して、標記化合物の臭化水素塩9.7gを得た。得られた化合物の構造および物性を表1に示す。
【００６１】
【参考例２−５】
参考例1と同様にして表1に示す各原料化合物(アミン類)を合成した。得られた各化合物の構造および物性を表1に示す。
【００６２】
【参考例６】
チエノ[3',2',:3,4]ベンゾ[2,1-d]チアゾール-2-イルアミンの製造
4,5-ジヒドロチエノ[3',2',:3,4]ベンゾ[2,1-d]チアゾール-2-イルアミンの臭化水素塩3.35gをジオキサン20mL中に懸濁させ、これに2,3-ジクロロ-5,6-ジシアノパラベンゾキノン(DDQ)5.1gを加えて室温で3時間撹拌した。析出した結晶を濾取し、得られた粗結晶をエタノール-n-ヘキサンより再結晶して、標記化合物の臭化水素塩2.9gを得た。得られた化合物の構造および物性を表1に示す。
【００６３】
尚、表1における各基の略号による表示は、次のものを示す。以下の表においても同様とする。
【００６４】
Et:エチル基、Me:メチル基、Ph:フェニル基、Pr:n-プロピル基
【００６５】
【表１】

【００６６】
1) ¹H-NMR(δ: ppm, CDCl₃, 内部標準: TMS):
2.9-3.0(m, 2H), 3.0-3.1(m, 2H), 7.32(d, J=5.2Hz, 1H), 7.46(d, J=5.2Hz, 1H)
2) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
1.18(t, J=7.6Hz, 3H), 2.05(s, 3H), 2.7-2.8(m, 6H), 7.4-7.5(m, 2H), 7.6-7.7(m, 2H)
3) ¹H-NMR(δ: ppm, CDCl₃-CD₃OD=10:1, 内部標準: TMS):
2.9-3.1(m, 4H), 6.74(d, J=2.0Hz, 1H), 7.35(d, J=2.0Hz, 1H)
4) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
1.21(s, 6H), 1.39(t, J=7.1Hz, 3H), 2.28(s, 3H), 2.38(s, 2H), 4.38(q, J=7.1Hz, 2H), 7.1-7.2(m, 2H), 7.4-7.5(m, 2H)
5) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
1.20(s, 6H), 3.37(s, 2H), 6.94(s, 2H), 7.4-7.6(m, 5H), 7.69(s, 1H)
6) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
7.7-7.9(m, 4H)
【００６７】
【参考例７】
ベンゾ[1,2-d;4,3-d']ビスチアゾール-2-イルアミンの製造
6-アミノベンゾチアゾール2.3gとチオシアン酸カリウム5.7gの酢酸70mL懸濁液を氷冷撹拌し、これに臭素4.5gの酢酸6mL溶液をゆっくりと滴下した。滴下終了後、反応温度を徐々に室温に戻し12時間撹拌した。反応混合物を2N水酸化ナトリウム水溶液に注ぎ込み、アルカリ性とした後、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層の不溶物を濾去し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた粗結晶をエーテル洗浄して、標記化合物の結晶1.3gを得た。得られた化合物の構造および物性を表2に示す。
【００６８】
【参考例８】
7-エチルベンゾ[1,2-d; 4,3-d']ビスチアゾール-2-イルアミンの製造
(1) 2-エチルベンゾチアゾールの合成
氷冷撹拌した2-アミノチオフェノール17.0gに塩化プロピオニル12.6gをゆっくりと滴下した。滴下終了後、反応温度を徐々に150℃まで上昇させ、24時間撹拌した。その後、室温まで冷却し、2N水酸化ナトリウム水溶液を加えてアルカリ性とし、反応混合物をクロロホルムで抽出した。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥後、減圧下に濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出液：n-ヘキサン:酢酸エチル=50:1)で精製して、2-エチルベンゾチアゾール15.3gを得た。
(2) 2-エチル-6-ニトロベンゾチアゾールの合成
氷冷撹拌した濃硫酸10mL中に2-エチルベンゾチアゾール9.8gをゆっくりと滴下し、続いて濃硝酸8.1gをゆっくりと滴下した。反応温度を0℃から徐々に室温まで戻し、更に6時間撹拌した。反応混合物を氷中に注ぎ込み、析出した結晶を濾取した。得られた粗結晶をクロロホルム-n-ヘキサンから再結晶して、2-エチル-6-ニトロベンゾチアゾール7.5gを得た。
(3) 6-アミノ-2-エチルベンゾチアゾールの合成
上記(2)で得られた化合物7.0gのエタノール300mL溶液に、塩化錫(II)二水和物38.0gを加え、80℃で24時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、飽和重曹水400mL中に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥後、減圧下に濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出液：n-ヘキサン:酢酸エチル=3:1)で精製して、6-アミノ-2-エチルベンゾチアゾール5.0gを得た。
(4) 7-エチルベンゾ[1,2-d; 4,3-d']ビスチアゾール-2-イルアミンの合成
6-アミノ-2-エチルベンゾチアゾール5.0gとチオシアン酸カリウム10.6gとの酢酸50mL懸濁液を氷冷撹拌し、該液に臭素8.1gの酢酸10mL溶液をゆっくりと滴下した。滴下終了後、反応温度を徐々に室温に戻し、更に12時間撹拌した。反応混合物を2N水酸化ナトリウム水溶液中に注ぎ込んでアルカリ性とした後、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層の不溶物を濾去し、濾液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた粗結晶をジエチルエーテルで洗浄して、標記化合物の結晶3.0gを得た。得られた化合物の構造および物性を表2に示す。
【００６９】
【参考例９】
7-フェニルベンゾ[1,2-d; 4,3-d']ビスチアゾール-2-イルアミンの製造
(1) 6-ニトロ-2-フェニルベンゾチアゾールの合成
氷冷撹拌した濃硫酸11mL中に2-フェニルベンゾチアゾール7.6gのクロロホルム30mL溶液をゆっくりと滴下し、続いて濃硝酸4.8gをゆっくりと滴下した。反応温度を0℃から徐々に室温まで戻し、更に4時間撹拌した。反応混合物を氷中に注ぎ込み、2N水酸化ナトリウム水溶液中を加えてアルカリ性とした後、クロロホルムで抽出した。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧したに濃縮した。得られた残渣にn-ヘキサンを加えて析出した結晶を濾取して、6-ニトロ-2-フェニルベンゾチアゾール4.2gを得た。
(2) 6-アミノ-2-フェニルベンゾチアゾールの合成
上記(1)で得られた化合物4.2gのエタノール150mL溶液に、塩化錫(II)二水和物18.0gを加え、80℃で18時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、飽和重曹水を加えて中性とした後、酢酸エチルで抽出した。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥後、減圧下に濃縮した。得られた粗結晶を酢酸エチル-n-ヘキサンより再結晶して、6-アミノ-2-フェニルベンゾチアゾール2.6gを得た。
(3) 7-フェニルベンゾ[1,2-d; 4,3-d']ビスチアゾール-2-イルアミンの合成
6-アミノ-2-フェニルベンゾチアゾール2.4gとチオシアン酸カリウム3.4gとの酢酸18mL懸濁液を氷冷撹拌し、該液に臭素2.6gの酢酸4mL溶液をゆっくりと滴下した。滴下終了後、反応温度を徐々に室温に戻し、更に12時間撹拌した。反応混合物を2N水酸化ナトリウム水溶液中に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層の不溶物を濾去し、濾液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた粗結晶をジエチルエーテルで洗浄して、標記化合物の結晶1.2gを得た。得られた化合物の構造および物性を表2に示す。
【００７０】
【参考例１０および１１】
適当な原料化合物を用いて参考例8と同様にして、表2に示す各化合物(アミン類)を合成した。得られた化合物の構造および物性を表2に示す。
【００７１】
【参考例１２】
適当な原料化合物を用いて参考例9と同様にして、表2に示す化合物(アミン類)を合成した。得られた化合物の構造および物性を表2に示す。
【００７２】
【参考例１３−１７】
適当な原料化合物を用いて参考例7と同様にして、表2および表3に示す各化合物(アミン類)を合成した。得られた化合物の構造および物性を表2および表3に示す。
【００７３】
尚、表2における各基の略号による表示は前記表1に同じである。また、表中、Prはプロピル基を示す。
【００７４】
【表２】

【００７５】
【表３】

【００７６】
7) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
7.57(d, J=8.7Hz, 1H), 7.72(brs, 2H), 7.93(d, J=8.7Hz, 1H), 9.23(s, 1H)
8) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
1.37(t, J=7.6Hz, 3H), 3.11(q, J=7.6Hz, 2H), 7.47(d, J=8.6Hz, 1H), 7.66(brs, 2H), 7.77(d, J=8.6Hz, 1H)
9) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
7.5-7.6(m, 4H), 7.81(brs, 2H), 7.92(d, J=8.7Hz, 1H), 8.0-8.1(m, 2H)
10) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
2.89(s, 3H), 7.54(d, J=8.7Hz, 1H), 7.75(brs, 2H), 7.83(d, J=8.7Hz, 1H)
11) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
0.99(t, J=7.4Hz, 3H), 1.82(m, 2H), 3.06(t, J=7.4Hz, 2H), 7.47(d, J=8.6Hz, 1H), 7.66(brs, 2H), 7.78(d, J=8.6Hz, 1H)
12) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
2.79(s, 3H), 7.45(d, J=8.6Hz, 1H), 7.69(brs, 2H), 7.75(d, J=8.6Hz, 1H)
13) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
7.51(dd, J=4.3, 8.2Hz, 1H), 7.74(brs, 2H), 7.8-7.9(m, 2H), 8.23(d, J=8.2Hz, 1H), 8.8(m, 1H)
14) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
7.21(d, J=8.6Hz, 1H), 7.46(brs, 2H), 7.57(d, J=8.6Hz, 1H), 8.04(brs, 1H), 13.25(brs, 1H)
15) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
5.97(s, 2H), 6.93(s, 1H), 7.21(brs, 2H), 7.25(s, 1H)
16) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
2.0-2.1(m, 2H), 2.9-3.0(m,4H), 7.26(s, 1H), 7.35(brs, 2H), 7.53(s, 1H)
17) ¹H-NMR(δ: ppm, DMSO-d6, 内部標準: TMS):
4.2(m, 4H), 6.81(s, 1H), 7.15(s, 1H), 7.23(brs, 2H)
【００７７】
【実施例１】
ジイソプロピル 4-[(4,5-ジヒドロチエノ[3',2':3,4]ベンゾ[2,1-d]チアゾール-2-イル)カルバモイル]ベンジルホスホナートの製造
4,5-ジヒドロチエノ[3',2':3,4]ベンゾ[2,1-d]チアゾール-2-イルアミンのピリジン20mL懸濁液を氷冷撹拌下、これに4-[(ジイソプロポキシホスホリル)メチル]ベンゾイル クロリド3.8gの塩化メチレン20mL溶液をゆっくりと滴下した。室温で12時間撹拌後、水50mLを加え、塩化メチレンで抽出した。塩化メチレン層を10%塩酸水溶液50mLで洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた粗結晶をエタノール-n-ヘキサンより再結晶して、標記化合物の無色結晶1.3gを得た。得られた化合物の構造および物性を表4に示す。
【００７８】
【実施例２−１１】
参考例1-6で得た各化合物を一方の原料化合物として用いて、実施例1と同様にして、表4に示す各化合物を合成した。各表には得られた化合物の構造および物性を並記する。
【００７９】
【実施例１２】
ジイソプロピル 4-[(8-エチル-7-メチル-6H-チアゾロ[4,5-e]インドール-2-イル)カルバモイル]ベンジルホスホナートの製造
ジイソプロピル 4-[(6-ベンゾイル-8-エチル-7-メチル-5,6-ジヒドロ-4H-チアゾロ[4,5-e]インドール-2-イル)カルバモイル]ベンジルホスホナート(実施例9で得られた化合物)1.8gのエタノール20mL溶液に2N水酸化ナトリウム水溶液1.6mLを加えて室温で3時間撹拌した。反応混合液中に10%塩酸水を加えてpHを2に調整し、塩化メチレンで抽出した。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去して、標記化合物0.2gを得た。得られた化合物の構造および物性を表4に示す。
【００８０】
尚、表4における各基の略号による表示は前記各表に同じである。また、表中、i-Prはイソプロピル基を示す。
【００８１】
【表４】

【００８２】
【実施例１３−２４】
参考例7-17で得た各化合物を一方の原料化合物として用いて、実施例1と同様にして、表5および表6に示す各化合物を合成した。各表には得られた化合物の構造および物性を並記する。
【００８３】
尚、表5および6における各基の略号による表示は前記各表に同じである。
【００８４】
【表５】

【００８５】
【表６】

【００８６】
【実施例２５】
ジエチル N-(8H-インデノ[1,2-d]チアゾール-2-イル)カルバモイルホスホナートの製造
2-アミノ-8H-インデノ[1,2-d]チアゾール1.50gとトリエチル ホスホノホルマート3.20gを乾燥DMF20mlに溶解させ、氷冷撹拌下にこの混合物中に60%水素化ナトリウム0.44gを少量ずつ加えた。室温で12時間撹拌した後、反応混合物に10%塩酸50mlを加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で2回洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出液；クロロホルム：酢酸エチル=1:1)に付し、得られた粗結晶を酢酸エチル-n-ヘキサンより再結晶して、目的化合物の淡褐色結晶0.15gを得た。得られた化合物の構造および融点を下記表7に示す。
【００８７】
【表７】

【００８８】
【薬理試験例１】
ACAT-1阻害作用試験1
実施例で得た本発明化合物のACAT-1阻害活性を以下の通り試験した。ACAT-1酵素活性の測定は、再構成法(reconstituted vesicle assay) [J. Lipid Res., 29, 1683-1692 (1988)、Biochem. Biophys. Acta, 982, 187-195 (1989)、J. Biol. Chem., 270, 29532-29540 (1995)]に従った。
【００８９】
I. Broken Homoginate の作製
SW-13細胞(ヒト副腎皮質癌由来細胞)を、10%ウシ胎児血清(FBS)含有L-15培地中、炭酸ガスインキュベーター内で、培養プレートにコンフレントになるまで培養した。
【００９０】
文献記載の方法[hypotonic shock and scrapping method, Anal. Biochem., 116, 298-302 (1981)]に従い、Broken Homoginateを採取した。蛋白定量(Bradford 法)を行い、使用するまで、-80℃で保存した。
【００９１】
II. Cholesterol/Phosphatidylcholine(Chol/PC)vesicle の作製
チャンらの方法[Chang, T.Y., et al., Anal. Biochem., 157, 323-330 (1986)]に従い、Chol/PC vesicle (Chol/PC=3.9 mM/12.8mM)を作製した。
【００９２】
III. 5 × DOC/PC の作製
ホスファチジルコリン(phosphatidylcholine)50mgを50mg/mL sodium deoxycholate-Buffer A (50mM Tris-HCl, 5mM EDTA, 0.05mM PMSF(phenylmethylsulfonyl fluoride, 和光純薬株式会社、pH 7.8)5 mLに溶解した。
【００９３】
IV. 酵素液の作製
蛋白濃度2.5mg/mLのBroken Homoginate 2.6mLに、5×DOC/PC 0.65 mLを加え、攪拌後、氷中で20分放置した。これに、Chol/PC vesicle 22 mLを加え、攪拌し、さらに氷中で20分放置した。遠心後、浮遊物を除去し、これを酵素液とした。
【００９４】
V. アッセイ
被験物質は、1×10^-2mol/Lの濃度となるようにDMSOに溶解した。
【００９５】
ネジ口ガラス試験管に、被験物質あるいはDMSO(コントロールとして)2.5μL、酵素液200μL、基質溶液(150 mMリン酸カリウム緩衝液(pH7.0)、15mg/mL BSA (FFA free)、2mM DTTおよび0.1mM [1-¹⁴C]oleoyl coenzyme A (8.0Ci/mol))50μLを加えた。37℃で30分間反応させた。ヘキサン4mL、2M NaCl 1 mLおよび[³H]-cholesteryl oleate添加エタノール1mL(約10000 dpm)を加え、反応を停止させた。5分間振盪後、遠心し、上層のhexane相のうち2mLをガラス試験管に移し、また1mLをシンチレションバイアルに移した。
【００９６】
ガラス試験管中のヘキサン相は、窒素ガス気流下で溶媒を除去し、得られた脂質抽出物をクロロホルム／メタノール(2:1)混合液100μLに再溶解後、TLCプレートへスポットした。TLCプレートを、ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸(73:25:2)で展開し、バイオイメージアナライザーBSA2000II(富士フィルム株式会社製)で、コレステロールエステル画分の¹⁴Cを定量した。
【００９７】
また、シンチレーションバイアル中のヘキサン相は、シンチレーションカクテルを加え、³Hをカウントし、加えた[³H]-cholesteryl oleate添加エタノールの³H量より抽出効率を計算した。抽出効率より生成した全コレステロールエステル量を計算した。コントロールの場合と比べ、被験物質添加時に減少する生成全コレステロールエステル量を、パーセント表示したものを、ACAT-1酵素阻害率とした。
【００９８】
VI. 結果
被験物質として前記各実施例で得た本発明化合物を用いて得られた上記試験の結果を下記表8に示す。
【００９９】
【表８】

【０１００】
VII. 考察
表8に示される結果より、本発明化合物は優れたACAT-1阻害活性を有することが明らかである。
【０１０１】
このようなACAT-1阻害活性を有する化合物が、動脈硬化予防剤およびコレステロール吸収阻害剤として有効であることは、例えばThe Journal of Biological Chemistry, Vol.276, No.28, July 14, pp.21324-21330, 2000およびThe Journal of Biological Chemistry, Vol.275, No.36, September 8, pp.28083-28092, 2000の記載から明らかである。
【０１０２】
また、ACAT-1阻害活性を有する化合物が、動脈硬化症の治療およびLDL-コレステロールの低下に有効であることは、「日本臨床」59巻増刊号3 (2001)、第675-680頁の記載から明らかである。
【０１０３】
【薬理試験例２】
ACAT-1阻害作用試験2(THP-1細胞泡沫化抑制作用試験)
実施例で得た化合物を被験物質として、これらのTHP-1細胞泡沫化抑制作用(ACAT-1阻害作用)を以下のとおり試験した。
【０１０４】
I. 試験方法
24ウェルプレートに、1ウェルあたり7.5×10⁵細胞となるように200 nM フォルボール 12-ミリステート 13-アセテート(phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA)添加10% FBS-RPMI1640培養液で調整したTHP-1細胞を播種し、炭酸ガスインキュベーター内で3日間培養して、マクロファージ様細胞へと分化させた。RPMI1640培養液で1回洗浄した後、培養液を5% Lipoprotein Deficient Serum (LPDS; R. J. Mayer, et al., J. Biol. Chem., 266, 20070 (1991): D. E. Vance, et al., Biochem. Biophys. Acta, 792, 39 (1984))-RPMI1640 1mL/ウェルに変更して、更に8時間培養した。8時間後、蛋白濃度50μg/mLのアセチルLDL (Ac LDL; 袴田秀樹ら、「動脈硬化＋高脂血症研究ストラテジー」、pp36-41(1996)秀潤社)、BSA-[¹⁴C] oleate complex(J. L. Goldstein, et al, Method. Enzymol., 98, 241 (1983))2.5μLおよび被験物質(最終濃度：1×10^-5mol/L)を加えた5% LPDS-RPMI1640培養液500μLに培養液を交換した。16時間培養した後、細胞を0.3% BSA-PBS(-)で1回、PBS(-)で2回洗浄した。細胞内の脂質成分を抽出するために、1ウェルあたりヘキサン/2-プロパノール(3:2) 0.5mLを加えて静置した。30分後、抽出液をガラス試験管にプールした。同じ抽出操作をもう一度繰り返し、先の抽出液と合わせ、窒素ガス気流下で溶媒を除去した。得られた脂質抽出物をクロロホルム/メタノール(2:1)100μLで再溶解し、TLCプレートにスポットした。TLCプレートは、ヘキサン/ジエチルエーテル/酢酸(73:25:2)で展開し、オートラジオグラフィーにより、コレステロールエステル画分の¹⁴Cを定量した。定量には、バイオイメージアナライザーBAS2000II(富士フィルム株式会社製) を用いた。また、脂質抽出の終わった各ウェルに0.1N NaOH-0.1% SDS 0.3mLを加え、ラバーポリスマンでプレートに付着している細胞を剥がし回収した。この細胞可溶化液中の蛋白量をBCA Protein Assayキット(PIERCE社)にて定量した。
【０１０５】
定量したコレステロールエステル量(pmol)を蛋白量(mg)で割った値と、被験物質を加えなかった場合のそれとを比較して減少率(%)を算出し、これを被験物質のTHP-1細胞泡沫化抑制率(%)として、被験物質のACAT-1活性の指標とした。
【０１０６】
II. 結果
試験の結果を、下記表9に示す。
【０１０７】
【表９】

【０１０８】
III. 考察
表9に示される結果からも、表7に示される結果からと同様に、一般式(1)に示される本発明化合物が優れたACAT-1阻害活性を有することが判る。
【０１０９】
このようなACAT-1阻害活性を有する化合物が、動脈硬化予防剤およびコレステロール吸収阻害剤として有効であることは、例えばThe Journal of Biological Chemistry, Vol.276, No.28, July 14, pp.21324-21330, 2000およびThe Journal of Biological Chemistry, Vol.275, No.36, September 8, pp.28083-28092, 2000の記載から明らかである。
【０１１０】
また、ACAT-1阻害活性を有する化合物が、動脈硬化症の治療およびLDL-コレステロールの低下に有効であることは、「日本臨床」59巻増刊号3 (2001)、第675-680頁の記載から明らかである。
【０１１１】
【製剤例１】
有効成分として、実施例1で得た本発明化合物を用いて、1錠当りその300mgを含有する錠剤(2000錠)を、次の処方により調製した。
実施例1で得た本発明化合物 600g
乳糖(日本薬局方品) 67g
コーンスターチ(日本薬局方品) 33g
カルボキシメチルセルロースカルシウム(日本薬局方品) 25g
メチルセルロース(日本薬局方品) 12g
ステアリン酸マグネシウム(日本薬局方品) 3g
即ち、上記処方に従い、実施例1で得た本発明化合物、乳糖、コーンスターチおよびカルボキシメチルセルロースカルシウムを充分混合し、メチルセルロース水溶液を用いて混合物を顆粒化し、24メッシュの篩を通し、これをステアリン酸マグネシウムと混合して、錠剤にプレスして、目的の錠剤を得た。
【０１１２】
【製剤例２】
有効成分として、実施例1で得た本発明化合物を用いて、1カプセル当りその200mgを含有する硬質ゼラチンカプセル剤(2000カプセル)を、次の処方により調製した。
実施例1で得た本発明化合物 400g
結晶セルロース(日本薬局方品) 60g
コーンスターチ(日本薬局方品) 34g
タルク(日本薬局方品) 4g
ステアリン酸マグネシウム(日本薬局方品) 2g
即ち、上記処方に従い、各成分を細かく粉末にし、均一な混合物となるように混和した後、所望の寸法を有する経口投与用ゼラチンカプセルに充填して、目的のカプセル剤を得た。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel phosphonic acid diester derivative and a medicament such as an ACAT-1 (acyl-coenzyme A: cholesterol acyltransferase-1) inhibitor containing the same.
[0002]
[Prior art]
The derivative of the present invention is a novel compound not described in any literature.
[0003]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a compound useful as a pharmaceutical and a pharmaceutical using the same.
[0004]
In the process of continuing research and development of active ingredient compounds that can be used in the pharmaceutical field, the present inventors have a series of novel compounds represented by the following general formula (1), have ACAT-1 inhibitory activity, For example, the present invention was found to be effective for the prevention and treatment of arteriosclerosis, and the present invention was completed here.
[0005]
[Means for Solving the Problems]
The present invention provides a phosphonic acid diester derivative represented by the following general formula (1).
General formula (1):
[0006]
[Chemical Formula 3]

[0007]
[Wherein, two R's each represent a lower alkyl group.
-A- is -Ph-CH₂-A group (-Ph- represents a p-phenylene group) or a single bond.
B represents an 8H-indeno [1,2-d] thiazol-2-yl group when -A- is a single bond, and -A- is -Ph-CH₂In the case of -group, any one of the following groups (1)-(3) is shown.
[0008]
[Formula 4]

[0009]
In group (1), R¹Represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a lower alkoxycarbonyl group, and X¹Is CH, CR²(R²Represents a lower alkyl group) or N, Y¹Is S, O or NR^Three(R^ThreeRepresents a hydrogen atom, a phenyl group or a benzoyl group), and -Z¹-Ha-CH₂CH₂-, -CH = CH- or -CH₂CR^FourR^Five-R (R^FourAnd R^FiveEach represents a lower alkyl group).
In the group (2), -X²-Y²-Z²-Is -N = C (R^Four) -S- (R^FourRepresents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a lower alkylthio group or a phenyl group), —N═CH—CH═CH— or —CH═N—NH—.
In the group (3), -X^Three-Y^Three-Z^Three-Ha-O-CH₂-O-, -CH₂CH₂CH₂-Or-O-CH₂CH₂Indicates -O-. ]
In particular, the present invention relates to a phosphonic acid diester derivative in which B is a group represented by the group (1) in the general formula (1), and a phosphonic acid in which B is a group represented by the group (2) in the general formula (1). Provided are acid diester derivatives, phosphonic acid diester derivatives in which B is a group represented by group (3) in general formula (1), and phosphonic acid diester derivatives in which -A- is a single bond in general formula (1) .
[0010]
The present invention also provides an ACAT-1 inhibitor containing a phosphonic acid diester derivative represented by the general formula (1) as an active ingredient.
[0011]
Furthermore, the phosphonic acid diester derivatives of the present invention are useful as arteriosclerosis preventive agents, arteriosclerosis therapeutic agents, cholesterol absorption inhibitors, LDL-cholesterol lowering agents and the like.
[0012]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The general formula (1) representing the derivative of the present invention and other groups used in the present specification are the case where they are used as a group shown in each formula and as a substituent of the group. In either case, the details are as follows. In the present specification, the term “lower” used for each group containing carbon shall be used to mean “having 1-6 carbon atoms”.
[0013]
Examples of the lower alkyl group include linear or branched alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, pentyl, and hexyl groups. .
[0014]
The lower alkoxycarbonyl group is a straight chain having 1-6 carbon atoms such as methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl, butoxycarbonyl, isobutoxycarbonyl, tert-butoxycarbonyl, pentyloxycarbonyl, hexyloxycarbonyl group, etc. Alternatively, a carbonyl group to which a branched alkoxy group is bonded can be exemplified.
[0015]
Examples of the lower alkoxy group include linear or branched alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms such as methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy, tert-butoxy, pentyloxy and hexyloxy groups. be able to.
[0016]
As the lower alkylthio group, an alkylthio group having a linear or branched alkyl group having 1 to 6 carbon atoms such as methylthio, ethylthio, propylthio, isopropylthio, butylthio, isobutylthio, tert-butylthio, pentylthio, hexylthio group, etc. Can be illustrated.
[0017]
Examples of the halogen atom include a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, and an iodine atom.
[0018]
The derivative of the present invention represented by the general formula (1) has an excellent ACAT-1 inhibitory activity and is useful as an ACAT-1 inhibitor. Further, based on this activity, it is useful in the pharmaceutical field as an arteriosclerosis preventive agent, arteriosclerosis therapeutic agent, cholesterol absorption inhibitor, LDL-cholesterol lowering agent and the like.
[0019]
In particular, examples of the derivative of the present invention suitable for the pharmaceutical field include the following compounds.
(a): In general formula (1), B represents group (1) and¹Is NR^ThreeA compound,
(b): In the general formula (1), B represents the group (1) and¹A compound wherein S is S, and
(c): A compound in which B represents the group (3) in the general formula (1).
[0020]
Hereafter, the manufacturing method of this invention derivative is explained in full detail.
[0021]
The derivative of the present invention can be produced, for example, according to the method shown in the following reaction process formulas-1 and -2.
[0022]
[Chemical formula 5]

[0023]
[In each formula, R is the same as in general formula (1). B¹Represents one of the groups (1) to (3). However, B¹Is the group (1) and Y in the group (1)¹Except when is NH. X represents a halogen atom. ]
According to the method shown in Reaction Scheme-1, the compound (1a) of the present invention can be obtained by reacting a known carboxylic acid halide (2) with amines (3a).
[0024]
The above reaction can be carried out in a suitable solvent in the presence of a deoxidizing agent. As the deoxidizer, any known various agents that do not adversely affect the reaction can be used. Specific examples of preferable deoxidizers include tertiary amines such as triethylamine, N, N-diethylaniline, N-methylmorpholine, pyridine and 4-dimethylaminopyridine. As the solvent, various commonly known solvents, for example, aromatic or aliphatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, petroleum ether; diethyl ether, 1,2-dimethoxyethane, tetrahydrofuran (THF), 1 Chain or cyclic ethers such as 1,4-dioxane; ketones such as acetone, methyl ethyl ketone, acetophenone; halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, carbon tetrachloride, 1,2-dichloroethane, and mixed solvents thereof Can be used. The ratio of the carboxylic acid halide (2) and the amines (3a) used in the above reaction is not particularly limited and can be appropriately determined. Usually, the former is preferably used in an equimolar amount to an excess amount relative to the latter. The deoxidizer is preferably used in an equimolar amount to an excess amount with respect to the carboxylic acid halide (2). The reaction proceeds under cooling, at room temperature, or under heating. In general, it is preferable to employ a temperature condition ranging from around room temperature to the reflux temperature of the solvent, and the reaction is completed in about 0.5-24 hours.
[0025]
B¹Is the group (1) and Y in the group (1)¹The compound in which NH is NH is obtained as above.¹NR as the basis^Three(R^Three= Benzoyl group) can be obtained by debenzoylating a corresponding compound having a group. This debenzoylation reaction can be carried out according to a conventional method.
[0026]
[Chemical 6]

[0027]
[In each formula, R is the same as in general formula (1). B²Represents an 8H-indeno [1,2-d] thiazol-2-yl group. Each R (three) may be the same or different. ]
According to the method shown in Reaction Scheme-2, the compound (1b) of the present invention can be obtained by reacting a known phosphonoformic acid triester (4) with amines (3b).
[0028]
The above reaction is carried out in an appropriate aprotic solvent in an equimolar amount to an excess amount of amines (3b) with respect to the phosphonoformate triester (4) and an equimolar amount to an excess amount of the amines. It can be carried out using sodium hydride. Particularly preferable examples of the solvent include N, N-dimethylformamide (DMF) and THF. As reaction conditions, generally, temperature conditions from 0 ° C. to around room temperature can be employed. The reaction is generally complete in about 12-24 hours.
[0029]
Incidentally, the amines (3a) and (3b) used as raw materials in the reaction process formulas -1 and -2 are represented by, for example, the following reaction process formulas -3 to -5 depending on the type of the group B possessed by the amines Each can be produced according to a method.
[0030]
[Chemical 7]

[0031]
[In each formula, R¹, X¹And X are the same as above. Y¹'Is S, O, NR^Three(R^ThreeRepresents a phenyl group or a benzoyl group) or -CH = CH- group, -Z¹'-Ha-CH₂CH₂-Or-CH₂-Indicates a group. ]
According to the method shown in Reaction Scheme-3, the group represented by the above-mentioned group (1) by the halogenation reaction of a known compound (5) and the subsequent reaction of compound (6) with thiourea Desired amines (3c) having an 8H-indeno [1,2-d] thiazol-2-yl group can be obtained.
[0032]
The halogenation reaction of the compound (5) can be carried out in an inert solvent using an appropriate halogenating agent. As the halogenating agent, various commonly used substances such as phenyltrimethylammonium tribromide, or a simple halogen such as bromine or iodine can be used. Of these, when a halogen simple substance such as bromine or iodine is used, it is preferable that a Lewis acid such as aluminum chloride or boron trifluoride coexist in the reaction system. As inert solvents, halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, carbon tetrachloride, 1,2-dichloroethane; chain or cyclic such as diethyl ether, 1,2-dimethoxyethane, THF, 1,4-dioxane Examples include ethers; alcohols such as methanol, ethanol, propanol, and butanol; and mixed solvents thereof. The amount of the halogenating agent used in the above reaction is preferably about an equimolar amount to a small excess amount relative to the compound (5). The reaction is completed in about 2-5 hours under ice-cooling to about room temperature.
[0033]
The reaction between the halide (6) obtained by the above reaction and thiourea is carried out using an approximately equimolar amount of thiourea with respect to the halide (6), in an inert solvent such as methanol, ethanol, or ethylene glycol. And about 1-12 hours under the temperature conditions at or near the reflux temperature.
[0034]
[Chemical 8]

[0035]
(In each formula, X¹, Y¹'And R¹Is the same as above. ]
According to Reaction Scheme-4, in the compound obtained by Reaction Scheme-3, -Z¹'-Is -CH₂CH₂The compound (3d) can be obtained by reacting the compound (3c ′) which is − with a known quinone.
[0036]
The reaction can be carried out using an equimolar amount to an excess amount of quinones with respect to compound (3c ′) in a suitable solvent. Solvents include aromatic or aliphatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, petroleum ether; chain-like cyclic ethers such as diethyl ether, 1,2-dimethoxyethane, THF, 1,4-dioxane, etc. It can be illustrated. Examples of preferable quinones include 2,3,5,6-tetrachloro-1,4-benzoquinone (chloranil) and 2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquinone (DDQ). can do. The reaction is carried out under the temperature condition from room temperature to the reflux temperature of the solvent and is usually completed in about 3-12 hours.
[0037]
[Chemical 9]

[0038]
(In each formula, X², Y², Z², X^Three, Y^ThreeAnd Z^ThreeIs the same as above. M is alkali metal or NH_FourIndicates.
[0039]
According to the method shown in Reaction Scheme-5, a known amine (7) or (8) is reacted with thiocyanate and bromine, and then hydrobromide is removed by alkali treatment according to a conventional method. The desired thiazoleamines (3e) or (3f) can be obtained. Examples of the thiocyanate include potassium thiocyanate, sodium thiocyanate, and ammonium thiocyanate. The above reaction is carried out in a suitable solvent. Examples of the solvent include aliphatic carboxylic acids such as acetic acid, propionic acid, and butanoic acid. The use ratio of thiocyanate (M-SCN) to amines (7) or (8) in the above reaction is not particularly limited, but is usually selected from the range of about 2 to 4 times the molar amount. Good. Bromine is preferably used in an equimolar amount to about 2 times the molar amount with respect to the amines (7) or (8). As the reaction temperature, a temperature condition from under ice cooling to around room temperature can be employed. The reaction is usually completed in about 12-24 hours.
[0040]
Embedded image

[0041]
(In each formula, X¹, R¹And R are the same as above. However, R¹Must not be a lower alkoxycarbonyl group. R²Represents a phenyl group. ]
According to the method shown in the reaction scheme-6, the compound (1c) of the present invention obtained by the method shown in the reaction scheme-1 (B is a group represented by the group (1) and Y in the group¹Is NR^Three(R^Three= Benzoyl group) and Z¹-CH₂CH₂The compound Y) is alkali-hydrolyzed to give the corresponding Y¹The groups are NH and Z¹The compound (1d) of the present invention in which is —CH═CH— can be obtained.
[0042]
The alkaline hydrolysis reaction is generally carried out in a suitable solvent in the presence of a base. As the base, for example, alkali metal hydroxides such as potassium hydroxide and sodium hydroxide can be preferably used. As the solvent, chain or cyclic ethers such as water, diethyl ether, 1,2-dimethoxyethane, THF and 1,4-dioxane; alcohols such as methanol, ethanol, propanol and butanol can be used. The use ratio of the base to the compound (1c) in the above reaction is not particularly limited, but is usually selected from the range of about 1 to 3 times the molar amount. The reaction proceeds under cooling, at room temperature, or under heating, but is usually carried out under ice-cooled to room temperature conditions, and is generally completed in about 1-12 hours.
[0043]
The compound of the present invention can be easily isolated and purified by ordinary separation and purification means. Examples of the means include various commonly used means such as adsorption chromatography, preparative thin layer chromatography, recrystallization, and solvent extraction.
[0044]
The present invention also provides a pharmaceutical composition containing the compound of the present invention represented by the general formula (1) as an active ingredient. The pharmaceutical composition is put into practical use after adjusting to the form of a general pharmaceutical preparation using the compound of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0045]
Examples of the pharmaceutically acceptable carrier used in the pharmaceutical composition of the present invention include diluents or excipients that are usually used depending on the form of use of the preparation, such as fillers, extenders, binders, and humidifiers. Examples include agents, disintegrants, surfactants, lubricants and the like. These are appropriately selected and used depending on the dosage unit form of the pharmaceutical preparation to be adjusted.
[0046]
As a dosage unit form of the pharmaceutical preparation, various forms can be appropriately selected depending on the purpose of treatment. Typical examples thereof include tablets, pills, powders, solutions, suspensions, emulsions, granules, capsules, suppositories, injections (solutions, suspensions, etc.), ointments and the like.
[0047]
When formed into a tablet form, pharmaceutically acceptable carriers include, for example, lactose, sucrose, sodium chloride, glucose, urea, starch, calcium carbonate, kaolin, crystalline cellulose, silicic acid, potassium phosphate and the like. Excipients; binders such as water, ethanol, propanol, simple syrup, glucose solution, starch solution, gelatin solution, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylcellulose, polyvinylpyrrolidone; sodium carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, low substituted hydroxy Disintegrants such as propylcellulose, dried starch, sodium alginate, agar powder, naminaran powder, sodium bicarbonate, calcium carbonate; polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, Surfactants such as sodium rylsulfate and monoglyceride stearate; decay inhibitors such as sucrose, stearin, cocoa butter and hydrogenated oil; absorption promoters such as quaternary ammonium base and sodium lauryl sulfate; moisturizing glycerin and starch Agents: Adsorbents such as starch, lactose, kaolin, bennite, colloidal silicic acid; lubricants such as purified talc, stearate, boric acid powder, polyethylene glycol, etc. can be used. Furthermore, the tablet can be made into a tablet coated with a normal coating as necessary, for example, sugar-coated tablet, gelatin-encapsulated tablet, enteric-coated tablet, film-coated tablet or double tablet, and multilayer tablet.
[0048]
In shaping into a pill form, as a pharmaceutically acceptable carrier, for example, excipients such as glucose, lactose, starch, cocoa butter, hydrogenated vegetable oil, kaolin, talc; gum arabic powder, tragacanth powder, Binders such as gelatin and ethanol; disintegrants such as laminaran and agar can be used.
[0049]
When forming into a suppository form, for example, polyethylene glycol, cacao butter, higher alcohol, higher alcohol esters, gelatin, semi-synthetic glyceride and the like can be used as a pharmaceutically acceptable carrier.
[0050]
Capsules are usually prepared by mixing the compound of the present invention with various pharmaceutically acceptable carriers exemplified above and filling hard gelatin capsules, soft gelatin capsules and the like according to a conventional method.
[0051]
When prepared as injections such as solutions, emulsions, suspensions, etc., these are preferably sterilized and isotonic with blood. In making these forms, for example, water, ethanol, macrogol, propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester and the like can be used as a diluent. In this case, a sufficient amount of sodium chloride, glucose or glycerin may be included in the pharmaceutical preparation to prepare an isotonic solution, and usual solubilizing agents, buffers, soothing agents, etc. are added. May be.
[0052]
When preparing into the form of an ointment such as a paste, cream, or gel, for example, white petrolatum, paraffin, glycerin, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicone, bennite, or the like can be used as a diluent.
[0053]
Furthermore, the pharmaceutical composition of the present invention may contain a coloring agent, a preservative, a fragrance, a flavoring agent, a sweetening agent, and other pharmaceuticals as necessary.
[0054]
The amount of the compound of the present invention (active ingredient compound) blended in the pharmaceutical composition of the present invention is not particularly limited and is appropriately selected from a wide range. Usually, about 0.5 to 90% by weight, preferably about 1 to 85% by weight, is added to the pharmaceutical composition.
[0055]
The administration method of the pharmaceutical preparation of the present invention is not particularly limited, and is determined according to various preparation forms, patient age, sex and other conditions, the degree of disease, and the like. For example, tablets, pills, solutions, suspensions, emulsions, granules and capsules are administered orally, and injections are administered alone or mixed with normal fluids such as glucose and amino acids intravenously or intramuscularly. Administered intradermally, subcutaneously or intraperitoneally, and suppositories administered intrarectally.
[0056]
The dosage of the pharmaceutical preparation of the present invention is appropriately selected depending on its usage, patient age, sex and other conditions, disease severity, and the like. The amount of the compound of the present invention, which is usually an active ingredient, is about 0.5-20 mg / kg body weight per adult per day, preferably about 1-10 mg. The preparation can be administered once or divided into 2-4 times a day.
[0057]
【Example】
Hereinafter, in order to describe the present invention in more detail, production examples of raw material compounds for the production of the compound of the present invention are given as reference examples, and then production examples of the compound of the present invention are given as examples. Examples of pharmacological tests conducted on the compounds of the present invention and pharmaceutical preparations containing the compounds of the present invention as active ingredients are listed.
[0058]
In Reference Example 1,¹H-NMR is CDCl_ThreeAmong them, it is CDCl in Reference Example 3._Three-CD_ThreeIn OD (10: 1), in the other examples they are DMSO-d₆Among them, each was measured using tetramethylsilane (TMS) as an internal standard.
[0059]
[Reference Example 1]
Preparation of 4,5-dihydrothieno [3 ', 2': 3,4] benzo [2,1-d] thiazol-2-ylamine
7.8 g of 4-keto-4,5,6,7-tetrahydrothianaphthene was dissolved in a mixed solvent of 100 mL of chloroform and 10 mL of methanol, and 20.4 g of phenyltrimethylammonium tribromide was added thereto, followed by stirring at room temperature for 12 hours. To the mixture was added 500 mL of water, and the mixture was extracted with chloroform. The chloroform layer was dried over magnesium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure.
[0060]
Without purifying the resulting 5-bromo-4-keto-4,5,6,7-tetrahydrothianaphthene, 200 mL of ethanol and 3.9 g of thiourea were added thereto and stirred at 70 ° C. for 2 hours. The solvent was distilled off under reduced pressure, and the resulting crude crystals were recrystallized from ethanol-n-hexane to obtain 9.7 g of the hydrobromide salt of the title compound. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 1.
[0061]
[Reference Example 2-5]
In the same manner as in Reference Example 1, the raw material compounds (amines) shown in Table 1 were synthesized. Table 1 shows the structure and physical properties of each compound obtained.
[0062]
[Reference Example 6]
Preparation of thieno [3 ', 2',: 3,4] benzo [2,1-d] thiazol-2-ylamine
4.35 g of 4,5-dihydrothieno [3 ′, 2 ′,: 3,4] benzo [2,1-d] thiazol-2-ylamine hydrobromide is suspended in 20 mL of dioxane. 5.1 g of 3-dichloro-5,6-dicyanoparabenzoquinone (DDQ) was added and stirred at room temperature for 3 hours. The precipitated crystals were collected by filtration, and the resulting crude crystals were recrystallized from ethanol-n-hexane to obtain 2.9 g of the hydrogen bromide salt of the title compound. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 1.
[0063]
In addition, the display by the symbol of each group in Table 1 shows the following. The same applies to the following tables.
[0064]
Et: ethyl group, Me: methyl group, Ph: phenyl group, Pr: n-propyl group
[0065]
[Table 1]

[0066]
1)¹H-NMR (δ: ppm, CDCl_Three, Internal standard: TMS):
2.9-3.0 (m, 2H), 3.0-3.1 (m, 2H), 7.32 (d, J = 5.2Hz, 1H), 7.46 (d, J = 5.2Hz, 1H)
2)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
1.18 (t, J = 7.6Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.7-2.8 (m, 6H), 7.4-7.5 (m, 2H), 7.6-7.7 (m, 2H)
3)¹H-NMR (δ: ppm, CDCl_Three-CD_Three(OD = 10: 1, internal standard: TMS):
2.9-3.1 (m, 4H), 6.74 (d, J = 2.0Hz, 1H), 7.35 (d, J = 2.0Hz, 1H)
Four)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
1.21 (s, 6H), 1.39 (t, J = 7.1Hz, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.38 (s, 2H), 4.38 (q, J = 7.1Hz, 2H), 7.1-7.2 (m , 2H), 7.4-7.5 (m, 2H)
Five)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
1.20 (s, 6H), 3.37 (s, 2H), 6.94 (s, 2H), 7.4-7.6 (m, 5H), 7.69 (s, 1H)
6)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
7.7-7.9 (m, 4H)
[0067]
[Reference Example 7]
Preparation of benzo [1,2-d; 4,3-d '] bisthiazol-2-ylamine
A suspension of 2.3 g of 6-aminobenzothiazole and 5.7 g of potassium thiocyanate in 70 mL of acetic acid was stirred with ice cooling, and a solution of 4.5 g of bromine in 6 mL of acetic acid was slowly added dropwise thereto. After completion of the dropwise addition, the reaction temperature was gradually returned to room temperature and stirred for 12 hours. The reaction mixture was poured into 2N aqueous sodium hydroxide solution to make it alkaline, and then extracted with ethyl acetate. Insoluble matter in the ethyl acetate layer was removed by filtration, dried over magnesium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure. The obtained crude crystals were washed with ether to obtain 1.3 g of the title compound crystals. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 2.
[0068]
[Reference Example 8]
Preparation of 7-ethylbenzo [1,2-d; 4,3-d '] bisthiazol-2-ylamine
(1) Synthesis of 2-ethylbenzothiazole
To 17.0 g of 2-aminothiophenol stirred with ice cooling, 12.6 g of propionyl chloride was slowly added dropwise. After completion of the dropwise addition, the reaction temperature was gradually raised to 150 ° C. and stirred for 24 hours. After cooling to room temperature, 2N aqueous sodium hydroxide solution was added to make it alkaline, and the reaction mixture was extracted with chloroform. The extract was dried over magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluent: n-hexane: ethyl acetate = 50: 1) to obtain 15.3 g of 2-ethylbenzothiazole.
(2) Synthesis of 2-ethyl-6-nitrobenzothiazole
9.8 g of 2-ethylbenzothiazole was slowly added dropwise to 10 mL of concentrated sulfuric acid stirred with ice cooling, and then 8.1 g of concentrated nitric acid was slowly added dropwise. The reaction temperature was gradually returned from 0 ° C. to room temperature, and further stirred for 6 hours. The reaction mixture was poured into ice, and the precipitated crystals were collected by filtration. The obtained crude crystals were recrystallized from chloroform-n-hexane to obtain 7.5 g of 2-ethyl-6-nitrobenzothiazole.
(3) Synthesis of 6-amino-2-ethylbenzothiazole
To a solution of 7.0 g of the compound obtained in (2) above in 300 mL of ethanol, 38.0 g of tin (II) chloride dihydrate was added and stirred at 80 ° C. for 24 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature, poured into 400 mL of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, and extracted with ethyl acetate. The extract was dried over magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluent: n-hexane: ethyl acetate = 3: 1) to obtain 5.0 g of 6-amino-2-ethylbenzothiazole.
(4) Synthesis of 7-ethylbenzo [1,2-d; 4,3-d '] bisthiazol-2-ylamine
A suspension of acetic acid in 50 mL of 5.0 g of 6-amino-2-ethylbenzothiazole and 10.6 g of potassium thiocyanate was stirred with ice cooling, and 10 mL of acetic acid in 8.1 g of bromine was slowly added dropwise to the solution. After completion of the dropwise addition, the reaction temperature was gradually returned to room temperature and further stirred for 12 hours. The reaction mixture was poured into 2N aqueous sodium hydroxide solution to make it alkaline, and then extracted with ethyl acetate. Insoluble matter in the ethyl acetate layer was removed by filtration, the filtrate was dried over magnesium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure. The obtained crude crystals were washed with diethyl ether to obtain 3.0 g of the title compound. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 2.
[0069]
[Reference Example 9]
Preparation of 7-phenylbenzo [1,2-d; 4,3-d '] bisthiazol-2-ylamine
(1) Synthesis of 6-nitro-2-phenylbenzothiazole
A solution of 7.6 g of 2-phenylbenzothiazole in 30 mL of chloroform was slowly added dropwise to 11 mL of concentrated sulfuric acid stirred with ice cooling, followed by 4.8 g of concentrated nitric acid. The reaction temperature was gradually returned from 0 ° C. to room temperature, and further stirred for 4 hours. The reaction mixture was poured into ice, made alkaline with 2N aqueous sodium hydroxide solution, and extracted with chloroform. The extract was dried over magnesium sulfate and concentrated to reduced pressure. N-Hexane was added to the obtained residue and the precipitated crystals were collected by filtration to obtain 4.2 g of 6-nitro-2-phenylbenzothiazole.
(2) Synthesis of 6-amino-2-phenylbenzothiazole
To a solution of 4.2 g of the compound obtained in (1) above in 150 mL of ethanol, 18.0 g of tin (II) chloride dihydrate was added and stirred at 80 ° C. for 18 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature, neutralized with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, and extracted with ethyl acetate. The extract was dried over magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained crude crystals were recrystallized from ethyl acetate-n-hexane to obtain 2.6 g of 6-amino-2-phenylbenzothiazole.
(3) Synthesis of 7-phenylbenzo [1,2-d; 4,3-d '] bisthiazol-2-ylamine
An 18 mL suspension of acetic acid in 2.4 g of 6-amino-2-phenylbenzothiazole and 3.4 g of potassium thiocyanate was stirred on ice, and a solution of 2.6 g of bromine in 4 mL of acetic acid was slowly added dropwise to the solution. After completion of the dropwise addition, the reaction temperature was gradually returned to room temperature and further stirred for 12 hours. The reaction mixture was poured into 2N aqueous sodium hydroxide solution and extracted with ethyl acetate. Insoluble matter in the ethyl acetate layer was removed by filtration, the filtrate was dried over magnesium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure. The obtained crude crystals were washed with diethyl ether to obtain 1.2 g of the title compound crystals. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 2.
[0070]
[Reference Examples 10 and 11]
Each compound (amines) shown in Table 2 was synthesized in the same manner as in Reference Example 8 using appropriate raw material compounds. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 2.
[0071]
[Reference Example 12]
The compounds (amines) shown in Table 2 were synthesized in the same manner as in Reference Example 9 using appropriate raw material compounds. The structure and physical properties of the obtained compound are shown in Table 2.
[0072]
[Reference Examples 13-17]
The respective compounds (amines) shown in Table 2 and Table 3 were synthesized in the same manner as in Reference Example 7 using appropriate raw material compounds. The structures and physical properties of the obtained compounds are shown in Table 2 and Table 3.
[0073]
In Table 2, the abbreviations of the groups are the same as those in Table 1. In the table, Pr represents a propyl group.
[0074]
[Table 2]

[0075]
[Table 3]

[0076]
7)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
7.57 (d, J = 8.7Hz, 1H), 7.72 (brs, 2H), 7.93 (d, J = 8.7Hz, 1H), 9.23 (s, 1H)
8)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
1.37 (t, J = 7.6Hz, 3H), 3.11 (q, J = 7.6Hz, 2H), 7.47 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.66 (brs, 2H), 7.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H)
9)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
7.5-7.6 (m, 4H), 7.81 (brs, 2H), 7.92 (d, J = 8.7Hz, 1H), 8.0-8.1 (m, 2H)
Ten)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
2.89 (s, 3H), 7.54 (d, J = 8.7Hz, 1H), 7.75 (brs, 2H), 7.83 (d, J = 8.7Hz, 1H)
11)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
0.99 (t, J = 7.4Hz, 3H), 1.82 (m, 2H), 3.06 (t, J = 7.4Hz, 2H), 7.47 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.66 (brs, 2H), 7.78 (d, J = 8.6Hz, 1H)
12)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
2.79 (s, 3H), 7.45 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.69 (brs, 2H), 7.75 (d, J = 8.6Hz, 1H)
13)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
7.51 (dd, J = 4.3, 8.2Hz, 1H), 7.74 (brs, 2H), 7.8-7.9 (m, 2H), 8.23 (d, J = 8.2Hz, 1H), 8.8 (m, 1H)
14)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
7.21 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.46 (brs, 2H), 7.57 (d, J = 8.6Hz, 1H), 8.04 (brs, 1H), 13.25 (brs, 1H)
15)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
5.97 (s, 2H), 6.93 (s, 1H), 7.21 (brs, 2H), 7.25 (s, 1H)
16)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
2.0-2.1 (m, 2H), 2.9-3.0 (m, 4H), 7.26 (s, 1H), 7.35 (brs, 2H), 7.53 (s, 1H)
17)¹H-NMR (δ: ppm, DMSO-d6, internal standard: TMS):
4.2 (m, 4H), 6.81 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.23 (brs, 2H)
[0077]
[Example 1]
Preparation of diisopropyl 4-[(4,5-dihydrothieno [3 ', 2': 3,4] benzo [2,1-d] thiazol-2-yl) carbamoyl] benzylphosphonate
A suspension of 4,5-dihydrothieno [3 ′, 2 ′: 3,4] benzo [2,1-d] thiazol-2-ylamine in 20 mL of pyridine was stirred with ice-cooling, and 4-[(diisopropoxy Phosphoryl) methyl] benzoyl chloride (3.8 g) in methylene chloride (20 mL) was slowly added dropwise. After stirring at room temperature for 12 hours, 50 mL of water was added, and the mixture was extracted with methylene chloride. The methylene chloride layer was washed with 50 mL of 10% aqueous hydrochloric acid solution and then dried over magnesium sulfate. The solvent was distilled off under reduced pressure, and the resulting crude crystals were recrystallized from ethanol-n-hexane to obtain 1.3 g of colorless crystals of the title compound. Table 4 shows the structure and physical properties of the resulting compound.
[0078]
Example 2-11
Using each compound obtained in Reference Example 1-6 as one raw material compound, each compound shown in Table 4 was synthesized in the same manner as Example 1. Each table shows the structure and physical properties of the compound obtained.
[0079]
Example 12
Preparation of diisopropyl 4-[(8-ethyl-7-methyl-6H-thiazolo [4,5-e] indol-2-yl) carbamoyl] benzylphosphonate
Diisopropyl 4-[(6-benzoyl-8-ethyl-7-methyl-5,6-dihydro-4H-thiazolo [4,5-e] indol-2-yl) carbamoyl] benzylphosphonate (obtained in Example 9) The compound obtained) 1.6 g of 2N aqueous sodium hydroxide solution was added to 1.8 g of ethanol in 20 mL, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was adjusted to pH 2 by adding 10% aqueous hydrochloric acid and extracted with methylene chloride. The extract was dried over magnesium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure to obtain 0.2 g of the title compound. Table 4 shows the structure and physical properties of the resulting compound.
[0080]
In addition, the display by the symbol of each group in Table 4 is the same as each said table. In the table, i-Pr represents an isopropyl group.
[0081]
[Table 4]

[0082]
Examples 13-24
Using each compound obtained in Reference Example 7-17 as one raw material compound, each compound shown in Table 5 and Table 6 was synthesized in the same manner as Example 1. Each table shows the structure and physical properties of the compound obtained.
[0083]
In Tables 5 and 6, the abbreviations of the groups are the same as those in the tables.
[0084]
[Table 5]

[0085]
[Table 6]

[0086]
Example 25
Preparation of diethyl N- (8H-indeno [1,2-d] thiazol-2-yl) carbamoylphosphonate
2-amino-8H-indeno [1,2-d] thiazole (1.50 g) and triethyl phosphonoformate (3.20 g) are dissolved in dry DMF (20 ml). Added one by one. After stirring at room temperature for 12 hours, 50 ml of 10% hydrochloric acid was added to the reaction mixture, and the mixture was extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed twice with water and dried over anhydrous sodium sulfate. After evaporating the solvent under reduced pressure, the residue was subjected to silica gel column chromatography (eluent; chloroform: ethyl acetate = 1: 1), and the resulting crude crystals were recrystallized from ethyl acetate-n-hexane to obtain the target compound. 0.15 g of a light brown crystal was obtained. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 7 below.
[0087]
[Table 7]

[0088]
[Pharmacological Test Example 1]
ACAT-1 inhibitory test 1
The ACAT-1 inhibitory activity of the compounds of the present invention obtained in the examples was tested as follows. ACAT-1 enzyme activity was measured using a reconstituted vesicle assay [J. Lipid Res.,29, 1683-1692 (1988), Biochem. Biophys. Acta,982, 187-195 (1989), J. Biol. Chem.,270, 29532-29540 (1995)].
[0089]
I. Broken Homoginate Making
SW-13 cells (human adrenocortical carcinoma-derived cells) were cultured in L-15 medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) in a carbon dioxide incubator until they became confluent on the culture plate.
[0090]
The method described in the literature [hypotonic shock and scrapping method, Anal. Biochem.,116, 298-302 (1981)], Broken Homoginate was collected. Protein quantification (Bradford method) was performed and stored at −80 ° C. until use.
[0091]
II. Cholesterol / Phosphatidylcholine (Chol / PC) vesicle Making
Chang et al. [Chang, T.Y., et al., Anal. Biochem.,157, 323-330 (1986)], Chol / PC vesicle (Chol / PC = 3.9 mM / 12.8 mM) was prepared.
[0092]
III. 5 × DOC / PC Making
50 mg of phosphatidylcholine was dissolved in 5 mL of 50 mg / mL sodium deoxycholate-Buffer A (50 mM Tris-HCl, 5 mM EDTA, 0.05 mM PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride, Wako Pure Chemical Industries, Ltd., pH 7.8)).
[0093]
IV. Preparation of enzyme solution
To 2.6 mL of Broken Homoginate with a protein concentration of 2.5 mg / mL, 5 × DOC / PC 0.65 mL was added, and after stirring, left in ice for 20 minutes. To this, 22 mL of Chol / PC vesicle was added, stirred, and allowed to stand in ice for 20 minutes. After centrifugation, the suspended matter was removed, and this was used as an enzyme solution.
[0094]
V. Assay
Test substance is 1 x 10^-2Dissolved in DMSO to a concentration of mol / L.
[0095]
In a screw mouth glass test tube, test substance or DMSO (as a control) 2.5 μL, enzyme solution 200 μL, substrate solution (150 mM potassium phosphate buffer (pH 7.0), 15 mg / mL BSA (FFA free), 2 mM DTT and 0.1mM [1-¹⁴C] oleoyl coenzyme A (8.0 Ci / mol)) 50 μL was added. The reaction was allowed to proceed for 30 minutes at 37 ° C. Hexane 4mL, 2M NaCl 1mL and [^ThreeThe reaction was stopped by adding 1 mL (about 10000 dpm) of ethanol with H] -cholesteryl oleate. After shaking for 5 minutes, the mixture was centrifuged, 2 mL of the upper hexane phase was transferred to a glass test tube, and 1 mL was transferred to a scintillation vial.
[0096]
In the hexane phase in the glass test tube, the solvent was removed under a nitrogen gas stream, and the obtained lipid extract was redissolved in 100 μL of a chloroform / methanol (2: 1) mixed solution and then spotted on a TLC plate. The TLC plate was developed with hexane / diethyl ether / acetic acid (73: 25: 2), and the cholesterol ester fraction was separated with Bio Image Analyzer BSA2000II (Fuji Film Co., Ltd.).¹⁴C was quantified.
[0097]
In addition, the hexane phase in the scintillation vial is added with a scintillation cocktail,^ThreeCount H and add [^ThreeH] -cholesteryl oleate added ethanol^ThreeThe extraction efficiency was calculated from the amount of H. The total cholesterol ester produced was calculated from the extraction efficiency. The ACAT-1 enzyme inhibition rate was expressed as a percentage of the total amount of cholesterol ester produced when the test substance was added compared to the control.
[0098]
VI. result
The results of the above test obtained using the compounds of the present invention obtained in the above Examples as test substances are shown in Table 8 below.
[0099]
[Table 8]

[0100]
VII. Consideration
From the results shown in Table 8, it is clear that the compound of the present invention has excellent ACAT-1 inhibitory activity.
[0101]
Such a compound having ACAT-1 inhibitory activity is effective as an arteriosclerosis preventive agent and a cholesterol absorption inhibitor, for example, The Journal of Biological Chemistry, Vol. 276, No. 28, July 14, pp. 21324. -21330, 2000 and The Journal of Biological Chemistry, Vol. 275, No. 36, September 8, pp. 28083-28092, 2000.
[0102]
Further, the fact that a compound having ACAT-1 inhibitory activity is effective in treating arteriosclerosis and lowering LDL-cholesterol is described in “Nippon Clinical” Vol. 59, No. 3 (2001), pages 675-680. It is clear from
[0103]
[Pharmacological test example 2]
ACAT-1 inhibitory action test 2 (THP-1 cell foaming inhibitory action test)
Using the compounds obtained in the examples as test substances, these THP-1 cell foaming inhibitory actions (ACAT-1 inhibitory actions) were tested as follows.
[0104]
I. Test method
7.5 x 10 per well in a 24-well plate^FiveCells were seeded with THP-1 cells prepared with 10% FBS-RPMI1640 culture medium supplemented with 200 nM phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), and placed in a carbon dioxide incubator. For 3 days to differentiate into macrophage-like cells. After washing once with RPMI 1640 culture medium, the culture medium was washed with 5% Lipoprotein Deficient Serum (LPDS; R. J. Mayer, et al., J. Biol. Chem.,266, 20070 (1991): D. E. Vance, et al., Biochem. Biophys. Acta,792, 39 (1984))-RPMI1640 1 mL / well, and further cultured for 8 hours. 8 hours later, acetyl LDL (Ac LDL; Hideki Hamada et al., “Arteriosclerosis + Hyperlipidemia Research Strategy”, pp36-41 (1996) Shujunsha), BSA- [¹⁴C] oleate complex (J. L. Goldstein, et al, Method. Enzymol.,98, 241 (1983)) 2.5 μL and test substance (final concentration: 1 × 10^-FiveThe culture solution was replaced with 500 μL of 5% LPDS-RPMI1640 culture solution added with mol / L). After culturing for 16 hours, the cells were washed once with 0.3% BSA-PBS (−) and twice with PBS (−). In order to extract intracellular lipid components, 0.5 mL of hexane / 2-propanol (3: 2) was added per well and allowed to stand. After 30 minutes, the extract was pooled in a glass test tube. The same extraction operation was repeated once again, combined with the previous extract, and the solvent was removed under a nitrogen gas stream. The obtained lipid extract was redissolved with 100 μL of chloroform / methanol (2: 1) and spotted on a TLC plate. The TLC plate is developed with hexane / diethyl ether / acetic acid (73: 25: 2), and the cholesterol ester fraction is analyzed by autoradiography.¹⁴C was quantified. Bioimage analyzer BAS2000II (Fuji Film Co., Ltd.) was used for quantification. Moreover, 0.3N of 0.1N NaOH-0.1% SDS was added to each well after lipid extraction, and the cells adhering to the plate were peeled off and collected with a rubber policeman. The amount of protein in the cell lysate was quantified using a BCA Protein Assay kit (PIERCE).
[0105]
The amount of cholesterol ester (pmol) quantified divided by the amount of protein (mg) is compared with that when no test substance is added to calculate the reduction rate (%), and this is calculated as THP-1 of the test substance. The cell foaming inhibition rate (%) was used as an index of ACAT-1 activity of the test substance.
[0106]
II. result
The results of the test are shown in Table 9 below.
[0107]
[Table 9]

[0108]
III. Consideration
From the results shown in Table 9, it can be seen that, similarly to the results shown in Table 7, the compound of the present invention represented by the general formula (1) has an excellent ACAT-1 inhibitory activity.
[0109]
Such a compound having ACAT-1 inhibitory activity is effective as an arteriosclerosis preventive agent and a cholesterol absorption inhibitor, for example, The Journal of Biological Chemistry, Vol. 276, No. 28, July 14, pp. 21324. -21330, 2000 and The Journal of Biological Chemistry, Vol. 275, No. 36, September 8, pp. 28083-28092, 2000.
[0110]
Further, the fact that a compound having ACAT-1 inhibitory activity is effective in treating arteriosclerosis and lowering LDL-cholesterol is described in “Nippon Clinical” Vol. 59, No. 3 (2001), pages 675-680. It is clear from
[0111]
[Formulation Example 1]
Using the compound of the present invention obtained in Example 1 as an active ingredient, tablets (2000 tablets) containing 300 mg per tablet were prepared according to the following formulation.
600 g of the compound of the present invention obtained in Example 1
Lactose (Japanese Pharmacopoeia) 67g
Corn starch (Japanese Pharmacopoeia) 33g
Carboxymethylcellulose calcium (Japanese Pharmacopoeia) 25g
Methylcellulose (Japanese Pharmacopoeia) 12g
Magnesium stearate (Japanese Pharmacopoeia) 3g
That is, according to the above formulation, the compound of the present invention obtained in Example 1, lactose, corn starch and carboxymethylcellulose calcium were mixed thoroughly, the mixture was granulated using an aqueous solution of methylcellulose, passed through a 24-mesh sieve, and this was passed through magnesium stearate. And pressed into tablets to obtain the desired tablets.
[0112]
[Formulation Example 2]
Using the compound of the present invention obtained in Example 1 as an active ingredient, hard gelatin capsules (2000 capsules) containing 200 mg per capsule were prepared according to the following formulation.
400 g of the compound of the present invention obtained in Example 1
Crystalline cellulose (Japanese Pharmacopoeia) 60g
Corn starch (Japanese Pharmacopoeia) 34g
Talc (Japanese Pharmacopoeia) 4g
Magnesium stearate (Japanese Pharmacopoeia) 2g
That is, according to the above formulation, each component was finely powdered and mixed to form a uniform mixture, which was then filled into a gelatin capsule for oral administration having a desired size to obtain the desired capsule.

Claims (7)

General formula

[Wherein, two R's each represent a lower alkyl group.
-A- represents a -Ph-CH ₂ -group (-Ph- represents a p-phenylene group) or a single bond.
B represents an 8H-indeno [1,2-d] thiazol-2-yl group when -A- is a single bond, and when -A- is a -Ph-CH ₂ -group, the following group (1)- Indicates one of (3).

In the group (1), R ¹ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a lower alkoxycarbonyl group, X ¹ represents CH, CR ² (R ² is a lower alkyl group) or N, and Y ¹ represents S, O or NR ³ (R ³ is a hydrogen atom, a phenyl group or a benzoyl group) and -Z ¹ -is a -CH ₂ CH _2- , -CH = CH- or -CH ₂ CR ⁴ R ⁵ -group (R ⁴ and R ⁵ represents a lower alkyl group.
In the group (2), -X ² -Y ² -Z ² -is -N = C (R ⁴ ) -S- (R ⁴ is a hydrogen atom, a lower alkyl group, a lower alkylthio group or a phenyl group), -N = CH-CH = CH- or -CH = N-NH- is shown.
In the group (3), —X ³ —Y ³ —Z ³ — represents —O—CH ₂ —O—, —CH ₂ CH ₂ CH ₂ — or —O—CH ₂ CH ₂ —O—. ]
A phosphonic acid diester derivative represented by: 2. The phosphonic acid diester derivative according to claim 1, wherein B in the general formula (1) is a group represented by the group (1). 2. The phosphonic acid diester derivative according to claim 1, wherein B in the general formula (1) is a group represented by the group (2). 2. The phosphonic acid diester derivative according to claim 1, wherein B in the general formula (1) is a group represented by the group (3). 2. The phosphonic acid diester derivative according to claim 1, wherein —A— in the general formula (1) is a single bond. (a) In the general formula (1), B represents a group (1) and in which Y ¹ is NR ³ ; (b) In the general formula (1), B represents a group (1) 2. The phosphonic acid diester derivative according to claim 1, selected from the group consisting of a compound in which Y ¹ is S in the group and (c) a compound in which B represents the group (3) in the general formula (1). An ACAT-1 inhibitor comprising the phosphonic acid diester derivative according to claim 1 as an active ingredient.