JP3957552B2 - Thiourea derivatives and medicines - Google Patents

Description

［式中、Ｒ^１は低級アルキル基、または低級アルコキシ基で置換されることのある低級アルコキシ基を、Ｒ^２はハロゲン原子を、Ｒ^３ は置換基として低級アルコキシ基およびハロゲン原子から選ばれる基を有することのあるベンゾイル基をそれぞれ示し、Ｒ ^２ の置換位置が４位であり、Ｒ ^３ の置換位置が３位である。］で表されるチオ尿素誘導体、
（２） Ｎ−エトキシカルボニル−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−ブロモフェニル）チオ尿素、Ｎ−エトキシカルボニル−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−クロロフェニル）チオ尿素、Ｎ−エトキシカルボニル−Ｎ’−［４−クロロ−３−（４−メトキシベンゾイル）フェニル）］チオ尿素、Ｎ−（２−メトキシエトキシカルボニル）−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−ブロモフェニル）チオ尿素、Ｎ−（２−メトキシエトキシカルボニル）−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−クロロフェニル）チオ尿素およびＮ−（２−メトキシエトキシカルボニル）−Ｎ’−［４−クロロ−３−（４−クロロベンゾイル）フェニル］チオ尿素からなる化合物群より選ばれる前記（１）に記載のチオ尿素誘導体、
（３） Ｎ−エトキシカルボニル−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−ブロモフェニル）チオ尿素またはＮ−エトキシカルボニル−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−クロロフェニル）チオ尿素である前記（２）に記載のチオ尿素誘導体、
（４） 前記（１）から（３）のいずれかに記載のチオ尿素誘導体から選ばれる化合物および製剤学的に許容される担体を含有する医薬組成物、
（５） 前記（１）から（３）のいずれかに記載のチオ尿素誘導体から選ばれる化合物を有効成分として含有する脱共役蛋白質−３発現促進剤、
（６） 前記（１）から（３）のいずれかに記載のチオ尿素誘導体から選ばれる化合物を有効成分として含有する抗肥満剤、
（７） 前記（１）から（３）のいずれかに記載のチオ尿素誘導体から選ばれる化合物を有効成分として含有する糖尿病の予防・治療剤、
に関する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
〔置換基の定義〕
低級アルキル基としては、炭素数１〜６のものが好ましく、具体的には例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル基などの直鎖又は分枝鎖状アルキル基が好ましい。
【０００９】
低級アルコキシ基としては、炭素数１〜６のものが好ましく、具体的には例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ基などが挙げられる。
【００１０】
低級アルコキシ基で置換されることのある低級アルコキシ基としては、炭素数１〜６のものが好ましく、具体的には例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ基などの低級アルコキシ基に加え、メトキシメチル、エトキシメチル、プロポキシメチル、ブトキシメチル、ペンチルオキシメチル、ヘキシルオキシメチル、１−メトキシエチル、２−メトキシエチル、３−メトキシプロピル、４−メトキシブチル、５−メトキシペンチル、６−メトキシヘキシル、２−エトキシエチル、６−ヘキシルオキシヘキシル基などが挙げられる。
【００１１】
ハロゲン原子としては、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素原子などが挙げられる。
【００１２】
ハロゲン置換低級アルキル基としては、炭素数１〜６のものが好ましく、具体的には例えば、トリフルオロメチル、テトラフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ノナフルオロブチル、ウンデカフルオロペンチル、トリデカフルオロヘキシル基などの、フッ素で置換されている低級アルキル基が好ましい。
【００１３】
本発明に係わる前記一般式〔１〕で表されるチオ尿素誘導体は、脱共役蛋白質−３のｍＲＮＡの発現を増加させる作用を有しており、脱共役蛋白質−３発現促進剤として、特に抗肥満剤、糖尿病の予防・治療剤として有用である。
本発明化合物は、自体公知の方法を含む種々の方法により製造することができる。その例を以下に反応工程式を挙げて説明する。
【００１４】
【化３】

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２及びＲ^３は前記に同じ。]
本発明化合物〔１〕は、上記反応工程式において、アニリン誘導体〔２〕とイソチオシアナート誘導体〔３〕とを反応させることにより製造することができる。なお、原料化合物であるアニリン誘導体〔２〕とイソチオシアナート誘導体〔３〕は、公知方法または自体公知の方法によって容易に製造できる。
【００１５】
すなわち、上記反応は、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、石油エーテルなどの芳香族ないし脂肪族炭化水素類、ジエチルエーテル、１，２−ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，４−ジオキサンなどの鎖状ないし環状エーテル類、アセトン、エチルメチルケトン、アセトフェノンなどのケトン類、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、１，２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類などの不活性溶媒中、約０℃〜室温の温度条件にて、約１０分〜約２時間程度処理することにより行うことができる。アニリン誘導体〔２〕とイソチオシアナート誘導体〔３〕との使用割合は、前者に対し後者を少過剰〜約５倍モル量程度とするのが好ましい。
【００１６】
上記反応工程に示した目的化合物は、通常の分離手段により容易に単離精製できる。該手段としては、例えば吸着クロマトグラフィー、プレパラィブ薄層クロマトグラフィー、再結晶、溶媒抽出などが挙げられる。
【００１７】
本発明化合物〔１〕は、これを適当な無毒性製剤担体と共に用いて、一般的な医薬製剤の形態として使用できる。上記製剤担体としては、製剤の使用形態に応じて通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤などの希釈剤あるいは賦形剤などが挙げられ、これは得られる製剤の投与単位形態に応じて適宜選択される。
本発明化合物〔１〕が使用される医薬製剤の投与単位形態としては、各種の形態が利用目的に応じて選択でき、その代表的なものとしては、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤）、軟膏剤などが挙げられる。また、これらの各種製剤は自体公知の手段に従って徐放性製剤としてもよい。
【００１８】
錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ぶどう糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、燐酸カリウムなどの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ぶどう糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン糖などの結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなどの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドなどの界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩基；ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などが使用可能である。
さらに錠剤は必要に応じて通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包剤、腸溶被錠、フィルムコーティング錠剤あるいは二重錠、二重錠とすることができる。
【００１９】
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばぶどう糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン、カンテンなどの崩壊剤などが使用可能である。
【００２０】
坐剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライドなどが使用可能である。
カプセル剤は常法に従って、通常、本発明化合物〔１〕を上記で例示した各種の製剤担体と混合して硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセルなどに充填して調整することができる。
【００２１】
液剤、乳剤、懸濁剤などの注射剤として調整する場合、これらは殺菌されかつ血液と等張であるのが好ましい。注射剤の調整に際しては、希釈剤として例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類などが使用可能である。なお、この場合、等張性の溶液を調整するのに十分な量の食塩、ぶどう糖、グリセリンなどを含有させてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝材、無痛化剤などを添加してもよい。
【００２２】
さらに、上記医薬製剤中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を含有させることができる。
ペースト、クリーム、ゲルなどの軟膏剤の形態に調整するに際しては、希釈剤として例えば白色ワセリン、パラフィン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイトなどが使用可能である。
上記医薬製剤中に含有されるべき本発明化合物〔１〕の量は、特に制限されず、広範囲より適宜選択されるが、通常、医薬製剤中に約１〜約８５重量％程度含有させるのがよい。
【００２３】
上記医薬製剤の投与方法は特に制限がなく、製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などに応じて適宜決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤は経口投与され、注射は単独またはぶどう糖、アミノ酸などの通常の補液と混合して静脈内投与され、さらに必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与され、坐剤は直腸内投与される。
【００２４】
上記医薬製剤の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などに応じて適宜決定されるが、通常、本発明化合物〔１〕の１日当たりの投与量が体重１ｋｇあたり約０．５〜約２０ｍｇ、好ましくは約１〜約１０ｍｇ程度とするのがよい。また、上記医薬製剤は１日１〜４回に分けて投与することができる。
なお、本発明化合物〔１〕は所望により他の医薬成分、例えば他の抗肥満剤、糖尿病の予防・治療剤と併用することもできる。
【００２５】
【実施例】
以下に本発明化合物の製造例を実施例として挙げる。
また、本発明化合物を用いた脱共役蛋白質−３のｍＲＮＡの発現増加量の測定及び製剤例を挙げる。各実施例で得られた化合物は、その構造、融点及び^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータを下記表として記載する。
さらに、下記実施例における^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、内部基準としてＴＭＳ（テトラメチルシラン）を用いて測定し、測定溶媒は、ＣＤＣｌ_３を用いた。
【００２６】
〔実施例１〕 Ｎ−エトキシカルボニル−Ｎ’−（３−ベンゾイル−４−ブロモフェニル）チオ尿素の合成
１．０ｇ（３．６ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−５−アミノベンゾフェノンをアセトン５ｍｌに溶かし、室温下、この溶液に０．６２ｇ（４．７ｍｍｏｌ）のエトキシカルボニルイソチオシアナートを滴下した。さらに室温で３０分間撹拌した後、析出した結晶を濾取し、水およびメタノールで順次洗浄して、目的物の結晶１．４０ｇを得た（収率９５％）。
得られた化合物の融点及び^１Ｈ−ＮＭＲデータを下記表に示す。
【００２７】
〔実施例２〜８、１０、１４、１７、１８、および参考例９、１１〜１３、１５、１６、１９〕
適当な出発原料を用い、実施例１と同様にして目的化合物を合成した。
【００２８】
実施例２〜８、１０、１４、１７、１８、および参考例９、１１〜１３、１５、１６、１９で得られた化合物の融点及び^１Ｈ−ＮＭＲデータを下記表に示す。
【化４】

【表１】

【表２】

【表３】

【表４】

【表５】

【表６】

【表７】

【００２９】
〔試験例〕 脱共役蛋白質−３のｍＲＮＡの発現増加量の測定
ＡＴＣＣ（American Type Culture Collection）から購入したマウス骨格筋細胞であるC2C12細胞を、２４ウェルプレート（Falcon社製）に１〜２×１０^４個／ウェルの割合で細胞播種し、２日毎に培地を換えた。細胞がコンフルエント状態になってから分化培地に切り替え、さらに２日毎に培地を換えた。培地を分化培地に切り替えてから４日目に、本発明化合物の溶解液（濃度１０^−５Ｍ又は３×１０^−６Ｍ；０．１％ジメチルスルホキシド−分化培地）を加え、２４時間薬物暴露を行った。
次に、被検細胞より、RNeasy96 kit （QIAGEN社製） もしくはMFX-9600 （東洋紡社製）を用いて全ＲＮＡを単離精製した。
得られた全ＲＮＡより、TaqMan One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit （Applied Biosystems社製）を用い、ＰＣＲ装置としてPRISM7700（Applied Biosystems社製）を用いてTaqMan RT-PCRを行って、脱共役蛋白質−３ｍＲＮＡの定量を行った。
尚、本発明化合物の溶解液の代わりに０．１％ジメチルスルホキシドのみを加えたものをコントロールとし、コントロール細胞における脱共役蛋白質−３のｍＲＮＡの発現量を１として、被検細胞における発現量の比率を求めた。
結果を下記表に示す。
【００３０】
下記表より、本発明化合物は、脱共役蛋白質−３のｍＲＮＡの発現量を大きく増加させた。
【表８】

【００３１】
〔製剤例１〕 錠剤の製造
有効成分として実施例１で得た化合物を、１錠当たり３００ｍｇ含有する錠剤（２０００錠）を、次の処方により製造した。
実施例１で得た本発明化合物 ６００ｇ
乳糖（日本薬局方品） ６７ｇ
コーンスターチ（日本薬局方品） ３３ｇ
カルボキシメチルセルロースカルシウム（日本薬局方品） ２５ｇ
メチルセルロース（日本薬局方品） １２ｇ
ステアリン酸マグネシウム（日本薬局方品） ３ｇ
即ち、上記処方に従い、実施例１で得た本発明化合物、乳糖、コーンスターチ及びカルボキシメチルセルロースカルシウムを充分に混合し、メチルセルロース水溶液を用いて混合物を顆粒化し、２４メッシュの篩を通し、これをステアリン酸マグネシウムと混合して、錠剤にプレス成型した。
【００３２】
〔製剤例２〕 カプセル剤の製造
有効成分として実施例４で得た化合物を、１カプセル当たり２００ｍｇ含有する硬質ゼラチンカプセル（２０００カプセル）を、次の処方により調整した。
実施例４で得た本発明化合物 ４００ｇ
結晶セルロース（日本薬局方品） ６０ｇ
コーンスターチ（日本薬局方品） ３４ｇ
タルク（日本薬局方品） ４ｇ
ステアリン酸マグネシウム（日本薬局方品） ２ｇ
即ち、上記処方に従い、各成分を細かく粉末にし、均一な混合物となるように混合した後、所望の寸法を有する経口投与用ゼラチンカプセルに充填した。
【００３３】
【発明の効果】
本発明が提供する上記一般式〔１〕で示されるチオ尿素誘導体は、余剰エネルギーを消費し、熱産生することによって、肥満を防ぐ働きを持つ脱共役蛋白質−３のｍＲＮＡの発現を増加させる作用を有し、脱共役蛋白質−３の発現促進により、肥満の予防・治療剤及び糖尿病の予防・治療剤として有用である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to novel thiourea derivatives having pharmaceutical use. More specifically, the present invention effectively uses a thiourea derivative that has the effect of increasing the expression of uncoupling protein-3 (UCP3) mRNA that acts to prevent obesity by consuming surplus energy and producing heat. The present invention relates to an uncoupling protein-3 expression promoter and a medicine as components.
[0002]
[Prior art]
In recent years, the number of obese patients is increasing in Japan and is becoming a major social problem. When you become obese due to factors such as increased food intake (overeating), decreased exercise (insufficient exercise), fluctuations in body heat generation, body fat accumulates, causing arteriosclerosis, hypertension, diabetes, heart disease, Complications such as vascular disorders, neurological disorders, and reduced resistance may occur. From the viewpoint of prevention of adult diseases, various researches have been conducted on the means for eliminating obesity.
[0003]
On the other hand, uncoupling refers to inhibiting the energy obtained by electron transfer from coupling to the ATP synthesis reaction in oxidative phosphorylation in vivo, and chemical energy coupled to ATP synthesis is converted into thermal energy. This is one of the vital biological functions in terms of conversion. Because of the importance of such uncoupling function, many uncoupling agents have been found, and for example, uncoupling proteins existing in mitochondria are known as uncoupling proteins existing in vivo. The uncoupling protein includes uncoupling protein-1 (UCP1) present in brown adipose tissue, uncoupling protein-2 (UCP2) widely distributed in many tissues such as white adipose tissue, and uncoupling protein mainly present in skeletal muscle. -3 (UCP3).
[0004]
If the expression of such uncoupling protein can be induced, the conversion efficiency of chemical energy conjugated to ATP synthesis to thermal energy is considered to be improved. However, little is known about uncoupling protein expression promoters so far. The development was sought after.
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
The present invention provides a novel compound useful as a pharmaceutical agent, particularly a pharmaceutical agent that has the effect of increasing the expression of uncoupling protein-3 mRNA that acts to prevent obesity by consuming excess energy and producing heat. For the purpose.
[0006]
[Means for Solving the Problems]
As a result of intensive studies on the expression induction effect of the uncoupling protein, the present inventors succeeded in synthesizing a series of novel thiourea derivatives, and these novel derivatives are excellent in uncoupling protein-3 mRNA. Has been found to have the effect of increasing the expression of, and further studies have been made to complete the present invention.
[0007]
That is, the present invention
(1) General formula [1]
[Chemical 2]

[In the formula, R ¹ is a lower alkyl group, a lower alkoxy group or is which may be substituted with a lower alkoxy group, a R ² represents a halogen atom, R ³ is a lower alkoxy group and a halogen atom as a location substituent a benzoyl group which may have a group selected indicates respectively, the substitution position of R ² is 4-position, the substitution position of R ³ is 3-position. A thiourea derivative represented by
(2) N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea, N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-chlorophenyl) thiourea, N-ethoxycarbonyl-N '-[4-Chloro-3- (4-methoxybenzoyl) phenyl)] thiourea, N- (2-methoxyethoxycarbonyl) -N'-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea, N- ( 2-methoxyethoxycarbonyl) -N ′-(3-benzoyl-4-chlorophenyl) thiourea and N- (2-methoxyethoxycarbonyl) -N ′-[4-chloro-3- (4-chlorobenzoyl) phenyl] The thiourea derivative according to the above (1) selected from the group of compounds consisting of thiourea,
(3) In the above (2) , which is N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea or N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-chlorophenyl) thiourea The described thiourea derivatives,
(4) A pharmaceutical composition comprising a compound selected from the thiourea derivatives according to any one of (1) to (3) above and a pharmaceutically acceptable carrier,
(5) An uncoupling protein-3 expression promoter containing a compound selected from the thiourea derivatives according to any one of (1) to (3) as an active ingredient,
(6) An anti-obesity agent containing a compound selected from the thiourea derivatives according to any one of (1) to (3) as an active ingredient,
(7) A prophylactic / therapeutic agent for diabetes containing a compound selected from the thiourea derivatives according to any one of (1) to (3) as an active ingredient,
About.
[0008]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
(Definition of substituents)
As the lower alkyl group, those having 1 to 6 carbon atoms are preferable. Specific examples include linear or branched alkyl groups such as methyl, ethyl, propyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, pentyl, and hexyl groups. Groups are preferred.
[0009]
As the lower alkoxy group, those having 1 to 6 carbon atoms are preferable, and specific examples include methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, pentyloxy, hexyloxy groups and the like.
[0010]
The lower alkoxy group which may be substituted with a lower alkoxy group is preferably one having 1 to 6 carbon atoms, specifically, for example, a lower alkoxy group such as a methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, pentyloxy, hexyloxy group or the like. In addition to the groups, methoxymethyl, ethoxymethyl, propoxymethyl, butoxymethyl, pentyloxymethyl, hexyloxymethyl, 1-methoxyethyl, 2-methoxyethyl, 3-methoxypropyl, 4-methoxybutyl, 5-methoxypentyl, 6 -Methoxyhexyl, 2-ethoxyethyl, 6-hexyloxyhexyl group, etc. are mentioned.
[0011]
Examples of the halogen atom include fluorine, chlorine, bromine and iodine atoms.
[0012]
As the halogen-substituted lower alkyl group, those having 1 to 6 carbon atoms are preferable. Specifically, for example, trifluoromethyl, tetrafluoroethyl, heptafluoropropyl, nonafluorobutyl, undecafluoropentyl, tridecafluorohexyl group Preferred are lower alkyl groups substituted with fluorine, such as
[0013]
The thiourea derivative represented by the general formula [1] according to the present invention has an action of increasing the expression of uncoupling protein-3 mRNA, and is particularly effective as an anti-uncoupling protein-3 expression promoter. It is useful as an obesity agent and a prophylactic / therapeutic agent for diabetes.
The compound of the present invention can be produced by various methods including a method known per se. Examples thereof will be described below with reference to reaction process formulas.
[0014]
[Chemical 3]

[Wherein, R ¹ , R ² and R ³ are the same as above. ]
The compound [1] of the present invention can be produced by reacting the aniline derivative [2] and the isothiocyanate derivative [3] in the above reaction process formula. The aniline derivative [2] and the isothiocyanate derivative [3], which are raw material compounds, can be easily produced by a known method or a method known per se.
[0015]
That is, the reaction is a chain of aromatic or aliphatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, petroleum ether, diethyl ether, 1,2-dimethoxyethane, tetrahydrofuran (THF), 1,4-dioxane, and the like. Or in an inert solvent such as cyclic ethers, ketones such as acetone, ethyl methyl ketone, acetophenone, and halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, carbon tetrachloride, and 1,2-dichloroethane at about 0 ° C. to room temperature. The treatment can be carried out at a temperature condition for about 10 minutes to about 2 hours. The use ratio of the aniline derivative [2] and the isothiocyanate derivative [3] is preferably such that the latter is a small excess to about 5 times molar amount relative to the former.
[0016]
The target compound shown in the above reaction step can be easily isolated and purified by ordinary separation means. Examples of the means include adsorption chromatography, preparative thin layer chromatography, recrystallization, and solvent extraction.
[0017]
The compound [1] of the present invention can be used in the form of a general pharmaceutical preparation by using it together with a suitable non-toxic preparation carrier. Examples of the preparation carrier include fillers, extenders, binders, moistening agents, disintegrating agents, surfactants, lubricants and other diluents or excipients that are usually used depending on the form of use of the preparation. This is appropriately selected depending on the dosage unit form of the resulting preparation.
As the dosage unit form of the pharmaceutical preparation in which the compound [1] of the present invention is used, various forms can be selected according to the purpose of use, and representative examples thereof include tablets, pills, powders, liquids, suspensions. Agents, emulsions, granules, capsules, suppositories, injections (solutions, suspensions), ointments and the like. These various preparations may be sustained-release preparations according to a method known per se.
[0018]
In the case of forming into a tablet form, as the above-mentioned preparation carrier, for example, excipients such as lactose, sucrose, sodium chloride, glucose, urea, starch, calcium carbonate, kaolin, crystalline cellulose, silicic acid, potassium phosphate; water, ethanol, Binders such as propanol, simple syrup, glucose solution, starch solution, gelatin solution, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylcellulose, polyvinylpyrrolidone sugar; sodium carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, low substituted hydroxypropylcellulose, dried starch, alginic acid Disintegrating agents such as sodium, agar powder, laminaran powder, sodium bicarbonate, calcium carbonate; polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, sodium lauryl sulfate Detergents such as sucrose, stearin, cocoa butter, hydrogenated oil; quaternary ammonium bases; absorption promoters such as sodium lauryl sulfate; humectants such as glycerin and starch; Adsorbents such as starch, lactose, kaolin, bentonite and colloidal silicic acid; lubricants such as purified talc, stearate, boric acid powder and polyethylene glycol can be used.
Furthermore, the tablets can be made into tablets with ordinary coatings as necessary, for example, sugar-coated tablets, gelatin encapsulating agents, enteric-coated tablets, film-coated tablets, double tablets, double tablets.
[0019]
In the case of forming into a pill form, excipients such as glucose, lactose, starch, cacao butter, hydrogenated vegetable oil, kaolin, talc and the like as a formulation carrier; binders such as gum arabic powder, tragacanth powder, gelatin, ethanol; Disintegrants such as laminaran and agar can be used.
[0020]
In the case of forming into a suppository, for example, polyethylene glycol, cacao butter, higher alcohol, higher alcohol esters, gelatin, semi-synthetic glyceride and the like can be used as a pharmaceutical carrier.
Capsules can be usually prepared by mixing the compound [1] of the present invention with various preparation carriers exemplified above and filling them into hard gelatin capsules, soft capsules and the like according to a conventional method.
[0021]
When prepared as injections such as solutions, emulsions, suspensions, etc., these are preferably sterilized and isotonic with blood. In adjusting the injection, for example, water, ethyl alcohol, macrogol, propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters and the like can be used as diluents. In this case, a sufficient amount of sodium chloride, glucose, glycerin, etc. may be added to adjust the isotonic solution, and a normal solubilizing agent, buffer material, soothing agent, etc. may be added. Also good.
[0022]
Furthermore, in the above-mentioned pharmaceutical preparation, coloring agents, preservatives, fragrances, flavoring agents, sweetening agents, and other pharmaceuticals can be contained as necessary.
When adjusting to the form of an ointment such as paste, cream, gel, etc., white petrolatum, paraffin, glycerin, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicon, bentonite and the like can be used as a diluent.
The amount of the compound [1] of the present invention to be contained in the pharmaceutical preparation is not particularly limited and is appropriately selected from a wide range, but it is usually about 1 to about 85% by weight in the pharmaceutical preparation. Good.
[0023]
The administration method of the above pharmaceutical preparation is not particularly limited, and is appropriately determined according to the preparation form, patient age, sex and other conditions, the degree of disease, and the like. For example, tablets, pills, solutions, suspensions, emulsions, granules, capsules are administered orally, and injections are administered alone or mixed with normal fluids such as glucose and amino acids, and administered intravenously. It is administered alone intramuscularly, intradermally, subcutaneously or intraperitoneally, and suppositories are administered rectal.
[0024]
The dosage of the above pharmaceutical preparation is appropriately determined according to its usage, patient age, sex and other conditions, degree of disease, etc. Usually, the daily dosage of the compound [1] of the present invention is 1 kg body weight. About 0.5 to about 20 mg per unit, preferably about 1 to about 10 mg. Moreover, the said pharmaceutical formulation can be administered in 1 to 4 times a day.
The compound [1] of the present invention can be used in combination with other pharmaceutical ingredients such as other anti-obesity agents and diabetes preventive / therapeutic agents as desired.
[0025]
【Example】
Examples of production of the compounds of the present invention will be given below as examples.
In addition, measurement of the amount of increased expression of mRNA of uncoupling protein-3 using the compound of the present invention and formulation examples are given. For the compounds obtained in each Example, the structure, melting point and ¹ H-NMR spectrum data are described in the following table.
Furthermore, ¹ H-NMR spectra in the following examples were measured using TMS (tetramethylsilane) as an internal reference, and CDCl ₃ was used as a measurement solvent.
[0026]
Example 1 Synthesis of N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea 1.0 g (3.6 mmol) of 2-bromo-5-aminobenzophenone was dissolved in 5 ml of acetone, At room temperature, 0.62 g (4.7 mmol) of ethoxycarbonyl isothiocyanate was added dropwise to this solution. After further stirring at room temperature for 30 minutes, the precipitated crystals were collected by filtration and washed successively with water and methanol to obtain 1.40 g of the target crystals (yield 95%).
The melting point and ¹ H-NMR data of the obtained compound are shown in the following table.
[0027]
[Examples 2-8, 10, 14, 17, 18, and Reference Examples 9, 11-13, 15, 16, 19 ]
The target compound was synthesized in the same manner as in Example 1 using appropriate starting materials.
[0028]
The melting points and ¹ H-NMR data of the compounds obtained in Examples 2 to 8, 10, 14, 17, 18 and Reference Examples 9 , 11 to 13, 15, 16, and 19 are shown in the following table.
[Formula 4]

[Table 1]

[Table 2]

[Table 3]

[Table 4]

[Table 5]

[Table 6]

[Table 7]

[0029]
[Test Example] Measurement of increased expression level of uncoupling protein-3 mRNA C2C12 cells, which are mouse skeletal muscle cells purchased from ATCC (American Type Culture Collection), were placed in a 24-well plate (Falcon) by 1-2 ×. Cells were seeded at a rate of 10 ⁴ cells / well, and the medium was changed every 2 days. After the cells became confluent, the medium was changed to a differentiation medium, and the medium was changed every two days. On the 4th day after the medium was changed to the differentiation medium, a solution of the compound of the present invention (concentration 10 ⁻⁵ M or 3 × 10 ⁻⁶ M; 0.1% dimethyl sulfoxide-differentiation medium) was added, and the drug was exposed for 24 hours. Went.
Next, total RNA was isolated and purified from the test cells using RNeasy96 kit (QIAGEN) or MFX-9600 (Toyobo).
From the total RNA obtained, TaqMan One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit (Applied Biosystems) was used, TaqMan RT-PCR was performed using PRISM7700 (Applied Biosystems) as a PCR device, and uncoupled Protein-3 mRNA was quantified.
In this connection, instead of the solution of the compound of the present invention, only 0.1% dimethyl sulfoxide was used as a control, and the expression level of uncoupling protein-3 mRNA in the control cells was 1, and the expression level in the test cells was The ratio was determined.
The results are shown in the table below.
[0030]
From the table below, the compound of the present invention greatly increased the expression level of uncoupling protein-3 mRNA.
[Table 8]

[0031]
[Preparation Example 1] Production of Tablets Tablets (2000 tablets) containing 300 mg of the compound obtained in Example 1 as an active ingredient per tablet were produced according to the following formulation.
600 g of the compound of the present invention obtained in Example 1
Lactose (Japanese Pharmacopoeia) 67g
Corn starch (Japanese Pharmacopoeia) 33g
Carboxymethylcellulose calcium (Japanese Pharmacopoeia) 25g
Methylcellulose (Japanese Pharmacopoeia) 12g
Magnesium stearate (Japanese Pharmacopoeia) 3g
That is, according to the above formulation, the compound of the present invention obtained in Example 1, lactose, corn starch and carboxymethylcellulose calcium were mixed thoroughly, the mixture was granulated using an aqueous solution of methylcellulose, passed through a 24-mesh sieve, and this was treated with stearic acid. Mixed with magnesium and pressed into tablets.
[0032]
[Formulation Example 2] Capsules A hard gelatin capsule (2000 capsules) containing 200 mg of the compound obtained in Example 4 as an active ingredient per capsule was prepared according to the following formulation.
400 g of the compound of the present invention obtained in Example 4
Crystalline cellulose (Japanese Pharmacopoeia) 60g
Corn starch (Japanese Pharmacopoeia) 34g
Talc (Japanese Pharmacopoeia) 4g
Magnesium stearate (Japanese Pharmacopoeia) 2g
That is, according to the above formulation, each component was finely powdered, mixed to form a uniform mixture, and then filled into a gelatin capsule for oral administration having a desired size.
[0033]
【The invention's effect】
The thiourea derivative represented by the above general formula [1] provided by the present invention has the effect of increasing the expression of mRNA of uncoupling protein-3 having a function of preventing obesity by consuming surplus energy and producing heat. And is useful as a prophylactic / therapeutic agent for obesity and a prophylactic / therapeutic agent for diabetes by promoting the expression of uncoupling protein-3.

Claims (7)

General formula [1]

[In the formula, R ¹ is a lower alkyl group, a lower alkoxy group or is which may be substituted with a lower alkoxy group, a R ² represents a halogen atom, R ³ is a lower alkoxy group and a halogen atom as a location substituent a benzoyl group which may have a group selected indicates respectively, the substitution position of R ² is 4-position, the substitution position of R ³ is 3-position. ] The thiourea derivative represented by this. N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea, N-ethoxycarbonyl-N ′-(3-benzoyl-4-chlorophenyl) thiourea, N-ethoxycarbonyl-N ′-[ 4-chloro-3- (4-methoxybenzoyl) phenyl)] thiourea, N- (2-methoxyethoxycarbonyl) -N ′-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea, N- (2-methoxy From ethoxycarbonyl) -N ′-(3-benzoyl-4-chlorophenyl) thiourea and N- (2-methoxyethoxycarbonyl) -N ′-[4-chloro-3- (4-chlorobenzoyl) phenyl] thiourea The thiourea derivative according to claim 1, which is selected from the group consisting of: The thiourea according to claim 2 , which is N-ethoxycarbonyl-N '-(3-benzoyl-4-bromophenyl) thiourea or N-ethoxycarbonyl-N'-(3-benzoyl-4-chlorophenyl) thiourea. Derivative. A pharmaceutical composition comprising a compound selected from the thiourea derivatives according to any one of claims 1 to 3 and a pharmaceutically acceptable carrier. The uncoupling protein-3 expression promoter which contains the compound chosen from the thiourea derivative in any one of Claim 1 to 3 as an active ingredient. The antiobesity agent which contains the compound chosen from the thiourea derivative in any one of Claim 1 to 3 as an active ingredient. A prophylactic / therapeutic agent for diabetes comprising a compound selected from the thiourea derivatives according to any one of claims 1 to 3 as an active ingredient.