JP4017697B2

JP4017697B2 - 新規抗菌活性物質及びこれを含有する植物病害防除剤

Info

Publication number: JP4017697B2
Application number: JP35744196A
Authority: JP
Inventors: 雅文井上; 民夫上野; 秀行竹中; 鉄鶴嶋; 恒宮川
Original assignee: Dainihon Jochugiku Co Ltd
Current assignee: Dainihon Jochugiku Co Ltd
Priority date: 1996-12-06
Filing date: 1996-12-06
Publication date: 2007-12-05
Anticipated expiration: 2016-12-06
Also published as: JPH10167910A

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は新規抗菌活性物質ならびに該物質を有効成分として含有することを特徴とする植物病害防除剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
現在用いられている植物病害防除剤としては、合成化合物が主流を占めており一部抗生物質などが用いられているが少なく、天然由来のものを求める要望も高い。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
いくつかの糸状菌類においては、胞子が水中で低密度で存在するときには容易に発芽を行うが、高密度になるに従って発芽率が低下するという、自己発芽抑制現象が観察されている。この現象は、高密度による酸素、養分等の枯渇が原因ではなく、何らかの化学物質が、胞子自体から放出され、自己の発芽を制御していると考えられている。本発明は、このような自己発芽抑制現象の原因となる化学物質を探索解明し、植物病害防除剤等に利用可能な新規抗菌活性物質を提供することを目的とするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、自己発芽抑制現象を示す糸状菌のスクリーニングを行った。その結果、イチゴ炭疸病菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒａｇａｒｉａｅ）の胞子が顕著な自己発芽抑制現象を示すことを見いだし、この菌の培養抽出物から新規胞子発芽阻害活性物質を単離することに成功し、本発明を完成した。
【０００５】
本発明が開示する抗菌活性物質は次式（Ｉ）
【化２】

で表される化合物である。これに含まれる化合物としては、以下に示すような理化学的性質を有するものを例示できる。
［抗菌活性物質１］
【化３】

（１）性状：黄白色粉末
（２）分子式：３８６
（３）分子量：Ｃ_２２Ｈ_２６Ｏ_６
（４） ^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ、重クロロホルム／重メタノール中）δ：ｄ１．４０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．４５（１Ｈ，Ｊ＝９．１，１４．０），１．８５（３Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．０，７．０Ｈｚ），１．８１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，１２．０，１４．２Ｈｚ），２．０３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．９，３．２，１４．２Ｈｚ），２．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，１４．０Ｈｚ），２．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．３，９．９Ｈｚ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，９．９Ｈｚ），３．９３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３．２，８．９，９．６Ｈｚ），４．３２（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３，９．１Ｈｚ），４．７０（１Ｈ，ｄｄｔ，１．９，１２．０，６．０Ｈｚ），５．５４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝０．９，３．４，９．１Ｈｚ），５．８９（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１４．０，７．０Ｈｚ），５．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．４，１１．９Ｈｚ），６．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．０，１．４Ｈｚ），６．２１（１Ｈ，ｄｄ，０．９，１０．１Ｈｚ），６．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），６．５９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．０，１０．０，１４．０Ｈｚ），６．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１０．１Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．９，１５．３Ｈｚ）
（５） ^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ、重クロロホルム／重メタノール中）δ：２０２．７，１６５．２，１６１．１，１４０．４，１３９．１，１３７．８，１３３．９，１３１．７，１３１．７，１２９．０，１１６．２，１０５．０，７７．５，７１．２，７０．０，６９．５，５２．１，４４．６，４４．５，４２．９，２１．７，１８．５
【０００６】
［抗菌活性物質２］
【化４】

（１）性状：黄白色粉末
（２）分子式：３８６
（３）分子量：Ｃ_２２Ｈ_２６Ｏ_６
（４）紫外線吸収スペクトル（クロロホルム／メタノール中）λｍａｘｎｍ（ｌｏｇε）：２４７（３．８０），３３６（４．４７）
（５）赤外吸収スペクトル（クロロホルム液膜法）：３４７０、１７０４、１６８１、１６１８
（６） ^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ、重クロロホルム／重メタノール中）δ：１．４０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．４５（１Ｈ，Ｊ＝９．０，１４．０），１．８１（３Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．０，７．０Ｈｚ），１．８１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，１２．０，１４．３Ｈｚ），２．０３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．９，３．２，１４．３Ｈｚ），２．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．９，１４．０Ｈｚ），２．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．３，９．９Ｈｚ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，９．９Ｈｚ），３．９３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３．２，８．９，９．６Ｈｚ），４．３１（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３，９．１Ｈｚ），４．７０（１Ｈ，ｄｄｔ，１．９，１２．０，６．０Ｈｚ），５．５０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝０．９，３．５，９．１Ｈｚ），５．８６（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１４．０，７．０Ｈｚ），６．１３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．０，１０．７，１４．０Ｈｚ），６．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，１４．８Ｈｚ），６．１９（１Ｈ，ｄｄ，０．９，１０．１Ｈｚ），６．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７，１４．８Ｈｚ），６．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），６．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１０．１Ｈｚ），６．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，１５．３Ｈｚ）．
（７） ^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ、重クロロホルム／重メタノール中）δ：２０２．８，１６５．２，１６１．３，１４０．４，１３９．１，１３７．８，１３４．０，１３１．７，１３１．７，１２９．０，１１６．３，１０５．０，７７．５，７１．１，７０．０，６９．５，５２．２，４４．７，４４．５，４２．９，２１．７，１８．５．
（８）マススペクトル（ＥＩ−ＭＳ）：３８６、３６８、２３９、２１３、１８７、１６１、１３１、１２１、９１、７７
【０００７】
以上の性質を検討の結果、本物質は、特異的な理化学的性質を示し、既知の物質中に該物質と同定し得る物質を見いだし得ず、新規化合物と認定された。なお、本発明化合物はシス体とトランス体の幾何異性体並びに光学異性体等の立体異性体が存在し得るが、本発明ではすべて単独の異性体並びに各異性体の任意の比率での混合物をも包含するものである。したがって、本発明に係る薬剤はこれら異性体の単独または混合物を活性成分として含有するものを包含すると理解すべきである。
【０００８】
以下に本発明の抗菌活性物質製造法について製造例で具体的に説明する。
【０００９】
【製造例】
本発明抗菌活性物質はイチゴ炭疸病菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒａｇａｒｉａｅ）の菌体培養物をもしくは胞子懸濁液を溶媒で抽出し、精製することにより製造される。なお生産菌は本発明物質生産能力を有するものであればいずれの菌でもよい。
イチゴ炭疸病菌をジャガイモ−しょ糖寒天培地にて２週間培養した４００枚分のシャーレを培地ごとアセトンに浸し一昼夜放置した。このアセトン抽出を２回繰り返した。アセトン抽出液をガーゼで濾過し、濾液を濃縮しアセトンを留去した。得られた残査水溶液を等量の酢酸エチルで２回抽出を行ない、有機層部分を濃縮し抽出物である褐色油状物を得た。この抽出物についてシリカゲルオープンカラムクロマトグラフィーを行ない、ヘキサン：クロロホルム（５０：５０），１００％クロロホルム、クロロホルム：メタノール（９９：１）、クロロホルム：メタノール（９８：２）、クロロホルム：メタノール（９７：３）、クロロホルム：メタノール（９５：５）、１００％メタノールの溶媒系各５００ｍｌで溶出し２５０ｍｌずつ集めた。クロロホルム：メタノール（９７：３）、クロロホルム：メタノール（９５：５）、１００％メタノールにおいて溶出される画分をまとめて高速液体クロマトグラフィー（カラム：１φｘ２５ｃｍ、Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＡＲ、メタノール：水＝７０：３０、流速２ｍｌ／分）に付し、保持時間３１分、３５分のピークを分取、濃縮を行って抗菌活性物質１および抗菌活性物質２をそれぞれ約２０ｍｇずつ得た。
【００１０】
本発明の抗菌活性物質は種々の用途に適用可能であるが、特に植物病害防除剤分野で有用である。
【００１１】
本物質を植物病害防除剤の有効成分として使用する場合には単独で適用してもよいし、あるいは、通常、当該技術分野において知られている農薬製剤と同様に適当な固体担体、乳化分散剤等を用いて粒剤、粉剤、乳剤、水和剤、錠剤、油剤、噴霧剤、噴煙剤等の任意の剤型に製剤化して適用してもよい。これらの固体担体としては、クレー、カオリン、ベントナイト、酸性白土、珪藻土、炭酸カルシウム、ニトロセルロース、デンプン、アラビアゴム等々が、また液体担体としては、水、メタノール、エタノール、アセトン、ジメチルホルムアミド、エチレングリコール等が挙げられる。また、製剤上、一般に使用される補助剤、例えば高級アルコールの硫酸エステル、ポリオキシエチレンアルキル・アリルエーテル、アルキル・アリル・ポリエチレン・グリコールエーテル、アルキル・アリル・ソルビタン・モノラウレート、アルキル・アリル・スルホネート、アルキルスルホン酸塩、アルキル・アリル・スルホン酸塩、第４級アンモニウム塩、ポリアルキレンオキサイド等の乳化剤、分散剤等を適宜配合することができる。
【００１２】
本発明の抗菌活性物質の製剤中配合割合は０．１〜９０％の範囲で任意に選択することができる。例えば乳剤、水和剤等に１〜９０％程度が適当であるが、使用目的によってこれらの濃度を適宜増減してもよい。
【００１３】
更に本発明の植物病害防除剤は、他の殺菌剤や除草剤、殺虫剤、肥料物質、土壌改良剤等と適宜混合して使用することも可能である。
【００１４】
次に、本発明の植物病害防除剤の実施例を示す。（部は重量部を示す。）
【００１５】
【実施例１】
（水和剤）
本発明の抗菌活性物質１０部、ラウリル硫酸ナトリウム５部、ジナフチルメタンジスルホン酸ソーダホルマリン縮合物２部およびクレー８３部を混合粉砕して水和剤１００部を得る。
（粉剤）
本発明化合物０．２部、ステアリン酸カルシウム０．５部、タルク５０部およびクレー４９．３部を混合粉砕して粉剤１００部を得る。
（乳剤）
本発明の抗菌活性物質８部、エチレングリコール１０部、ジメチルホルムアミド２０部、アルキル・ジメチルベンジル・アンモニウムクロライド１０部およびメタノール５２部を混合溶解して乳剤１００部を得る。
（粒剤）
本発明の抗菌活性物質１０部、デンプン１５部、ベントナイト７２部およびラウリルアルコール硫酸エステルのナトリウム塩３部を混合粉砕して粒剤１００部を得る。
【００１６】
次に本発明抗菌活性物質の抗植物病原菌活性について試験例により具体的に説明する。
【００１７】
【試験例１】
ペーパーディスク法による抗菌性試験
ＴＬＣバイオオートグラフィー法を用いて２種の植物病原菌に対する抗菌活性を調べた。抗菌活性物質１と２を等量に混合した１００ｐｐｍの濃度サンプルのうち１０ｕｌをシリカゲル薄層クロマト板にスポットした後ヘキサン：酢酸エチル：メタノールが４：２：１の溶媒系にて展開した。風乾したシリカゲル薄層クロマト板にウリ類炭疸病菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌａｇｅｎａｒｉｕｍ）および、すす病菌（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍｈｅｒｂａｒｕｍ）のそれぞれの胞子懸濁液を噴霧器で均一に噴霧し、２４℃の加湿条件にて培養した。２、３日後に薄層クロマト上に現れる抗菌スポットの有無を観察し、抗菌活性を調べた。その結果を表１に示した。
【００１８】
【表１】

【００１９】
試験の結果、本発明の抗菌活性物質はウリ類炭疸病菌および、すす病菌の何れに対しても明瞭な抗菌スポットを示し、高い抗菌活性を有することが確認された。
【００２０】
【試験例２】
胞子発芽阻害試験
イチゴ炭疸病菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｆｒａｇａｒｉａｅ）の胞子懸濁液に、抗菌活性物質１と２を等量に混合したサンプルのアセトン溶液を所定濃度になるように調製したものを加え、ホール・スライドグラス上に５０ｕｌ滴下して２４℃湿室にて培養した。培養２４時間後に検鏡して胞子の発芽数を測定し発芽率を求めた。この結果を第２表に示す。
【００２０】
【表２】

【００２１】
この結果、本発明の抗菌活性物質は２００ｐｐｍ以上の濃度で完全な発芽阻害活性を発揮し、すぐれた抗菌活性を示した。
【００２２】
【発明の効果】
本発明により、新規抗菌活性物質及びこれを含有する有用な植物病害防除剤が提供される。
【００２３】
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明抗菌活性物質１および２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２】本発明抗菌活性物質１および２の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。

Claims

次式（Ｉ）

で表される新規抗菌活性物質。
請求項１記載の新規抗菌活性物質を有効成分として含有することを特徴とする植物病害防除剤。