JP3981770B2 - 抗ロタウイルス剤、及びその用途 - Google Patents
抗ロタウイルス剤、及びその用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3981770B2 JP3981770B2 JP08666296A JP8666296A JP3981770B2 JP 3981770 B2 JP3981770 B2 JP 3981770B2 JP 08666296 A JP08666296 A JP 08666296A JP 8666296 A JP8666296 A JP 8666296A JP 3981770 B2 JP3981770 B2 JP 3981770B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- food
- rotavirus
- sulfate
- acetylneuraminic
- homopolymer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Dairy Products (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ロタウイルス感染症の予防または治療に有用な剤、衛生品、食品組成物及び餌料添加物に関する。具体的には、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗ロタウイルス剤、ロタウイルス感染症予防または治療剤、ならびにＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルを表面に有してなる衛生品及び該化合物を配合してなる食品組成物、餌料添加物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
厚生省の感染症サーベイランス調査によると、乳幼児嘔吐下痢症の患者として毎年１０万人以上が報告されている。乳幼児嘔吐下痢症のうち、約半数はロタウイルスの感染によるものである。その主たる罹患年齢は２歳以下で、激しい水様性の下痢と発熱、嘔吐にみまわれる。開発途上国では栄養不良と医療不備もあいまって、年間数百万人もの乳幼児がロタウイルス性下痢症によって死亡しているのが現状である。また、ある種のロタウイルスは乳幼児から成人まで幅広く感染することが知られており、動物間の感染、さらには動物からヒトへの感染が懸念されている。
【０００３】
通常ウイルス性感染症に対してはワクチンによる対処がなされるが、ロタウイルスが腸管上皮細胞という局所部位に感染することと感染対象が免疫学的に未熟な乳幼児であることから十分な分泌型ＩｇＡを誘導することができず、効果的なワクチンの開発には至っていない。
【０００４】
また、ロタウイルスによる感染は特に糞口経路（fecal oral route)によるものであり、排泄物中に含まれるロタウイルスは接触者への感染を容易に成立させる。このことから、ロタウイルス感染は一旦発生すると広く蔓延する傾向にあり、集団発生例も多く報告されている。
【０００５】
従って、ロタウイルス感染症の治療剤の勿論のこと、感染の予防剤の開発が望まれている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、優れた抗ロタウイルス作用を有し且つ副作用のない抗ロタウイルス剤、ロタウイルス感染症予防・治療剤を提供することを目的とする。また、本発明は、抗ロタウイルス作用を有し且つ安全な衛生品、食品組成物及び餌料添加物を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記問題点に鑑み鋭意検討を重ねた結果、Ｎ−アセチルノイラミン酸の硫酸エステル体およびＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステル体が、抗ロタウイルス作用を有することを見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００８】
即ち、本発明は、下記式（Ｉ）：
【０００９】
【化２】
【００１０】
〔式中、Ｒは、同一または異なって水素原子またはＳＯ3 Ｈを示し、ｎは、１〜１０００の整数を示す。但し、Ｎ−アセチルノイラミン酸残基１分子当たりのＳＯ3 Ｈ残基の数は、０．１〜３である。〕
で表されるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗ロタウイルス剤、及びロタウイルス感染症予防または治療剤を提供するものである。
【００１１】
また、本発明は、上記一般式（Ｉ）で表されるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬学的に許容される塩を表面に有してなる衛生品を提供するものである。
【００１２】
さらに本発明は、上記Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有することを特徴とする食品組成物及び餌料添加物を提供するものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルは、一般式（Ｉ）中、Ｒで表されるＳＯ3 Ｈ残基の数が、Ｎ−アセチルノイラミン酸残基１モルに対し０．１〜３個、好ましくは０．３〜１．５個、最も好ましくは０．５〜１個で示されるものである。また、ｎは１〜１０００の整数、好ましくは６〜２００の整数、より好ましくは６〜１００の整数を示す。
【００１４】
本発明で用いられるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルは、ｎが１種のみである単一化合物であっても良く、また、１〜１０００の範囲内でｎの値が異なる複数のＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルの混合物であってもよい。
【００１５】
Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体は、以下の方法に従って製造することができる。
即ち、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマー１重量部に対し、溶媒の存在下又は不存在下に触媒０．５〜２００重量部、硫酸化剤０．２〜３０重量部を反応させる。反応時間は０．１〜４８時間程度であり、反応温度は−２０〜９０℃程度である。
【００１６】
触媒としては、ピリジン、ジメチルアミノピリジン、トリメチルアミンなどが挙げられ、硫酸化剤としては、クロロスルホン酸、ピペリジン硫酸、サルファトリオキシド・トリメチルアミン錯体、サルファトリオキシド・ピリジン錯体などが挙げられる。触媒としてピリジンなどを過剰量使用する場合には、溶媒を使用する必要はない。溶媒は、必ずしも使用する必要はないが、使用する場合には、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ホルムアミドなどが挙げられる。
【００１７】
なお、原料のＮ−アセチルノイラミン酸及びＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーは特に限定されるものではく、Ｎ−アセチルノイラミン酸または重合度（ｎ）が一定の数であるそのホモポリマーを用いても良く、例えばコロミン酸のような天然のアセチルノイラミン酸ホモポリマーの混合物を用いても良い。また、取得の由来も特に限定されず、天然から抽出、精製したものでも、化学的手法などにより合成したものであってもよい。
【００１８】
以下に、製造原料であるＮ−アセチルノイラミン酸、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの構造式を示す。
【００１９】
【化３】
【００２０】
〔式中、ｎは前記に同じ〕
硫酸化反応の終了後は、公知の方法、例えば濃縮、ゲル濾過、イオン交換などの各種クロマトグラフィー、再沈殿、透析などの処理を行うことができる。
【００２１】
本発明において、薬学的にないし食品衛生上許容される塩とは、ナトリウム、カリウム、リチウムなどのアルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウムなどのアルカリ土類金属塩などが挙げられる。これらの塩は、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸化反応液を水酸化ナトリウム、炭酸カリウムなどの塩で中和することで製造することもでき、また、いったん硫酸化糖の遊離の酸として得た後、それを用いて塩の形態としてもよい。
【００２２】
Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、それ単独でもしくは薬理学的に許容される種々の添加剤とともに、抗ロタウイルス剤またはロタウイルス感染症予防剤及び/または治療剤として用いることができる。
【００２３】
本発明の抗ロタウイルス剤は、ロタウイルス感染症の予防及び/または治療等の医薬用途のほか、ロタウイルスによる感染を遮断もしくは予防することを目的として、処理剤、添加剤などとして広く用いられるものである。
【００２４】
本発明の抗ロタウイルス剤は、体内投与による副作用のみならず、皮膚に対して優しく安全性に優れているため、使い捨ておむつ、おしり拭き、ウエットティッシュ、マスク、手袋、入浴用洗剤、シャンプー、ベビーパウダー等の衛生品、玩具、ほ乳瓶、ベッド、衣服、皮革製品、カーペット、枕、布団などを処理して、これらの物品に抗ロタウイルス性を付与するための剤として用いることができる。さらには鼻粘膜または口腔粘膜に適用するスプレー剤、または上記物品などを処理して抗ロタウイルス性を付与するのに有用なスプレー剤、コーティング剤として、また食品添加剤、餌料・飼料添加物として使用されてもよい。
【００２５】
本発明の抗ロタウイルス剤の組成は特に制限されることなく、目的に応じて調製することができる。界面活性剤、分散剤等の各種添加剤を含有していてもよい。また、その形態も特に限定されず、例えば固形、顆粒状、粉末状、懸濁液状、液状、エアゾール状、乳液状等、使用目的や使用対象に応じて適宜選択される。
【００２６】
当該抗ロタウイルス剤中に含まれるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体の量は、使用目的、処理対象などによって異なり、通常１処理あたり０．１〜１００００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇとなるような範囲で適宜選択することができる。
【００２７】
本発明のロタウイルス感染症予防または治療剤の形態も特に限定されるものでなく、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、乳剤、シロップ剤などの経口剤、注射剤、坐剤などの種々の形態が例示される。好ましくは、ロタウイルスの感染部位である腸内で有効に作用する経口剤（例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤等）または坐剤などである。
【００２８】
本発明のロタウイルス感染症予防または治療剤を経口剤として調製する場合、添加剤を適当量配合してもよく、添加剤としては賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、矯臭剤、矯味剤、甘味剤などが挙げられる。また、坐剤として調製する場合も同様であり、その添加剤としては基剤、界面活性剤などが、注射剤として調製する場合の添加剤としてはｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤などが例示される。該注射剤は静脈内、筋肉内、皮下または腹腔内に投与される。
上記添加剤としては、各々の製剤を調製する際に通常用いられる添加剤がすべて挙げられ、これらの適当な量が用いられる。
【００２９】
なお、本発明のロタウイルス感染症予防または治療剤は、ヒトは勿論、動物のロタウイルス感染症の予防または治療に用いられる。適用される動物としては、例えば牛、豚、鶏、家兎等で代表される家畜、犬、猫、猿、鳥、ネズミ等で代表されるペット、その他の飼育動物が挙げられる。
【００３０】
本発明の予防・治療剤中に配合される有効成分であるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体の量は、投与すべき患者または動物の年齢、性別、体重、症状などに応じて適宜選択することができる。
【００３１】
例えばヒトの場合は、乳幼児を例にとると、１投与単位当たり、経口剤では０.０１〜５００ｍｇ程度、注射剤では０．０５〜５００ｍｇ程度、坐剤では０．１〜５００ｍｇ程度であるのが好ましく、一日当たりの投与量としては、剤型によって異なるが、０．１〜１００００ｍｇ程度、好ましくは１〜１０００ｍｇ程度である。
また動物の場合は、体重１ｋｇあたり、経口剤では０．０１〜１００ｍｇ程度、注射剤では０．０１〜１００ｍｇ程度、坐剤では０．１〜５０ｍｇ程度であるのが好ましく、一日当たりの投与量としては、剤型によって異なるが、体重１ｋｇあたり０．０１〜１０００ｍｇ程度、好ましくは１〜１００ｍｇ程度である。
【００３２】
また、本発明に示すＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、衛生品に適用することができる。すなわち、当該化合物を衛生品に付着含有させることにより、抗ロタウイルス作用を有する衛生品を提供することができる。
【００３３】
本発明でいう衛生品としては、一般にサニタリー製品などといわれるもの、具体的にはおむつ、おしり拭き、ウエットティッシュ、マスク、手袋、ベビーパウダー、入浴用洗剤等が挙げられる。
ロタウイルス感染は、前述したように糞口経路によって容易に成立する。本発明の衛生品は、かかる糞口経路による感染を有効に予防することができるものである。
【００３４】
なお、本発明で「表面に有してなる」とは、少なくとも衛生品の使用時に外部と接触する衛生品の表面にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩が抗ウイルス作用を奏する態様で存在していれば良い意味であり、衛生品等製品の調製時等における該化合物の存在態様（担持、付着、吸着等）、存在場所は問わない趣旨である。
【００３５】
本発明の衛生品の製造は、該製品にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬理学的に許容される塩を付与（担持、付着、吸着等）させる方法であれば特に制限されることなく、通常の方法を用いて行うことができる。たとえば、浸漬法、バッド法、スプレー法、コーティング法などが例示される。
【００３６】
本発明の衛生品のＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬理学的に許容される塩の含有量は、使用目的および製品の種類等により異なるが、おしり拭きやウエットティッシュ等の場合は、０．１〜１００００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇ程度であり、マスク等は０．１〜１０００ｍｇ程度、好ましくは１〜１００ｍｇ程度である。
【００３７】
さらに、本発明に示すＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩は飲食物に適用することができる。
即ち、本発明はＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を食品添加物として提供する。この場合、食品の種類や飲食者の年齢、体重等により相違するが、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を、通常一食あたり１〜１００００ｍｇ、好ましくは１０〜１０００ｍｇの範囲で、０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含まれるように適宜選択して、添加するのが望ましい。
【００３８】
また別の局面において、本発明は、飲食物にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を配合してなる食品組成物を提供するものである。
【００３９】
本発明が対象とする飲食物は、通常の食品、飲料品及び食品加工品であれば特に制限されるものではないが、好ましくは乳幼児が口にする食品、飲料品およびその食品加工品である。具体的には、粉ミルク、離乳食、乳製品、清涼飲料水等が挙げられる。
【００４０】
なお、本発明で「乳幼児」とは、乳児、幼児のみならず新生児をも含む概念であり、通常０歳〜１０歳、好ましくは０歳〜４歳の子供を意味する。
【００４１】
本発明の食品組成物は、前記のような食品、飲料品およびその食品加工品にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を通常の方法で配合することにより製造される。
【００４２】
本発明の食品組成物は、食品の種類、飲食者の対象によっても相違するが、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を、通常一食あたり１〜１００００ｍｇ、好ましくは１０〜１０００ｍｇの範囲で、０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含有する。
【００４３】
また、本発明に示すＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩は餌料に適用することができる。
従って、本発明は、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有する餌料添加物を提供するものである。かかる餌料添加物の中には、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩のほか、ビタミン類などのミネラル、成長促進剤等各種栄養剤が含まれていても良い。
【００４４】
本発明において餌料とは、動物を成長させ、また飼育するための食物、飲料物をいう。ここで動物とは、動物の種類によって制限されるものではないが、具体的には牛、豚、鶏、家兎等で代表される家畜、犬、猫、猿、鳥、ネズミ等で代表されるペット、動物園などにいる飼育動物等が例示される。
【００４５】
本発明の餌料添加物の餌料・飼料（天然餌料・飼料、人工餌料・飼料等の別を問わない。）に対する配合量は、動物の種類、年齢、体重等に応じて異なり適宜変更することができる。通常、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその食品衛生上許容される塩の量として、一食あたり体重１ｋｇに対して０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜１００ｍｇの範囲で、０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含まれるように配合される。
【００４６】
別の局面において、本発明はＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその食品衛生上許容される塩を含有する餌料組成物を提供するものである。当該餌料組成物は、対象とする動物の種類によっても異なるが、通常Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含有する。かかる餌料組成物によれば、各種動物に嘔吐下痢症をもたらすロタウイルスの感染を予防し、またロタウイルス感染症の症状を軽減もしくは治癒することも可能である。
【００４７】
【実施例】
以下、本発明を参考例、実施例及び薬理試験例を用いてより詳細に説明するが、本発明はこれら実施例等に限定されない。
【００４８】
【参考例１】
Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの製造
コロミン酸（購入先：ナカライテスク株式会社製）９０ｍｇをジメチルホルムアミド２０ｍｌに入れ、ここに４７７ｍｇのサルファトリオキシド・ピリジン錯体および３７ｍｇのジメチルアミノピリジンを加え、３０℃にて２４時間攪拌した。その後、氷冷し、これを１Ｍ炭酸水素ナトリウム５０ｍｌに滴下した。ろ過により固形物を分離し、透析チューブ（ＶＩＳＫＡＳＥ ＳＡＬＥＳ ＣＯＲＰ.製、孔の直径：２４オングストローム）を用いて透析を行った。透析後、ナトリウムイオン型のイオン交換樹脂（アンバーライトＩＲ−１２０Ｂ、オルガノ株式会社製）カラムに通した。カラム流出液を減圧下で５ｍｌにまで濃縮した。濃縮液を凍結乾燥させ、１２６ｍｇの目的物を得た。
【００４９】
得られた硫酸エステルの硫酸基の含量をロジゾン酸法（rhodizonic acid method）〔アナリティカル バイオケミストリー（Anal. Biochem.）41,471 (1971)〕で測定した結果、その含有率は２８重量％であった。
【００５０】
−実施例１−
抗ロタウイルス剤
上記配合割合で、常法に従い１本１００ｍｌ入りのスプレー剤を調製した。
【００５１】
−実施例２−
ロタウイルス感染症予防治療剤
処方例１ 錠剤
上記配合割合で、常法に従い、１錠当たり３００ｍｇの錠剤を調製した。
【００５２】
処方例２ 顆粒剤
上記配合割合で、常法に従い、顆粒剤を調製した。
【００５３】
処方例３ 注射剤
上記配合割合で、常法に従い、注射剤を作成した。
【００５４】
処方例４ 坐剤
上記配合割合で、常法に従い、坐剤を作成した。
【００５５】
−実施例３−
衛生品
（１）マスク
エマルジョン状の抗ロタウイルス剤を用いて、綿メリヤス生地にコーティング加工を施した。コロミン酸硫酸エステルのＮａ塩（平均ｎ＝８０）１００重量部にアクリル樹脂エマルジョン２０部を添加混合して、得られた混合液中をリバースコーティング法により綿メリヤス生地原布の塗布した。その後乾燥して、抗ロタウイルス作用を有する加工生地を得た。
この加工生地をインナー層として有するマスクを作製した。
【００５６】
（２）ウエットティッシュ
エマルジョン状の抗ロタウイルス剤を用いて、不織布の積層シートにパディング加工を施した。コロミン酸硫酸エステルのＮａ塩（平均ｎ＝８０）１００重量部にアクリル樹脂エマルジョン２０部を添加混合して得られた混合液中に不織布を浸漬し、ロールで均一に絞って、パディング加工を行った。その後乾燥して、抗ロタウイルス作用を有する不織布シートを得た。
このシートをアルコール、界面活性剤等を含有する液に浸漬して、処理後、密封容器中に詰めてウエットティッシュを作成した。
【００５７】
−実施例４−
食品組成物
上記の配合割合で乳児用粉ミルク（コロミン酸硫酸エステル０.５重量％含有）を調製した。
【００５８】
−実施例５−
（１）下記の割合でコロミン酸硫酸エステルのＮａ塩を餌料添加物として配合して、コロミン酸硫酸エステルを１重量％含有するペットフードを調製した。
【００５９】
（２）下記の割合で、配合飼料にコロミン酸硫酸エステルのＮａ塩を餌料添加物として配合して、コロミン酸硫酸エステルを０．５重量％含有する豚用飼料を調製した。
【００６０】
【００６１】
【薬理試験例】
−薬理試験例１−
抗ロタウイルス活性−直接プラーク法−
Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの抗ロタウイルス活性を直接プラーク法［レターズ イン アプライド マイクロバイオロジー(Letters in Applied Microbiology) 19, 386 (1994)］を用いて測定した。Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルとして参考例で調製したコロミン酸硫酸エステルを使用した。
【００６２】
具体的には、図１に示す手順に従って行った。コロミン酸硫酸エステルまたはコロミン酸（比較化合物）を用いた薬剤処理を前処理(i)、混合処理(ii)および後処理(iii)の系についてそれぞれ実施して、コロミン酸硫酸エステルの抗ロタウイルス活性を評価した。
(i)前処理：図１中、(i)の時点で薬剤を培地に添加して、ウイルス接種前に細胞と接触させる。
(ii)混合処理：ロタウイルスＳＡ−１１と２時間反応させた後、図１中(ii)の時点で培養液に薬剤を加える。
(iii)後処理：ウイルスが細胞に吸着した後の図１中(iii)の時点で、薬剤をアガロース培地に添加する。
なお、薬剤の濃度は培地で希釈して調製した。また、コントロールとして薬剤の代わりに培地を同量添加して同様の実験を行った。
【００６３】
薬剤としてコロミン酸硫酸エステルを用いた結果を表１に示す。
【００６４】
【表１】
【００６５】
数値は、薬剤無添加（コントロール）の場合のプラーク数を１００％としてプラーク数を％に換算して示した。
原料であるコロミン酸を用いた場合は、前処理、後処理及び混合処理ともに全く抗ウイルス活性が認められなかった（データは示さない。）。それに対し、コロミン酸硫酸エステルを用いた場合は、全ての処理方法で活性が認められ、中でも後処理での効果は著しく優れていた。
このことから、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルはロタウイルス感染症に対して優れた治療剤として有効であり、また感染予防剤としても有用であることが示唆された。
【００６６】
−薬理試験例２−
抗ロタウイルス活性−マルチプルステップ増殖法−
薬理試験例１において特に効果の高かった後処理に関して、更にマルチプルステップ増殖法［レターズ イン アプライド マイクロバイオロジー(Letters in Applied Microbiology) 19, 386 (1994)］により、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの抗ロタウイルス活性を評価した。
具体的には、図２に示す手順に従って行った。
比較化合物としてコロミン酸を用いて同様の実験を行った。
コロミン酸硫酸エステルの結果を表２に示す。数値はウイルスの感染価(log pfu/0.2ml)を示す。
【００６７】
【表２】
【００６８】
原料のコロミン酸には抗ウイルス活性は認められなかった（データは示さない。）。それに対し、コロミン酸硫酸エステルの場合、感染した細胞に対する増殖抑制効果が有意に認められ、ロタウイルス感染症の治療に有用であることが示された。
【００６９】
−比較薬理試験例−
ロタウイルスと同様にエンテリックウイルスに属するポリオウイルスを用いて、コロミン酸硫酸エステルのポリオウイルスに対する抗ウイルス活性を調べた。測定は、薬理試験例１に記載する直接プラーク法に準じて行った（アガロース培地として、アセチルトリプシン無添加のアガロース培地を使用。）。結果を表３に示す。
【００７０】
【表３】
【００７１】
このことから、コロミン酸硫酸エステルには抗ポリオウイルス活性は認められず、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの抗ウイルス作用はロタウイルスに特異的なものであることが示唆された。
【００７２】
−薬理試験例３−
細胞毒性
ＭＥＭ培地（イーグル最小培地）に０．１５％重炭酸塩及び１０％ＦＢＳを配合した培地で３６℃にて培養したＭＡ１０４細胞にコロミン酸または参考例で得られたコロミン酸硫酸エステルを加え、３６℃にて６日間培養した。培養後、ＰＢＳにより１回洗浄し、生細胞数を血球計算盤にて数えた。結果を表４に示す。
【００７３】
【表４】
【００７４】
このことから、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーおよびＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルには、上記濃度範囲において顕著な細胞毒性が認められず、本発明の抗ロタウイルス剤、ロタウイルス感染症予防または治療剤、衛生品、食品組成物及び餌料添加物の安全性が確認された。
【００７５】
なお、本発明には下記の実施態様も含まれる。
【００７６】
（１）Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有することを特徴とする食品添加物。
（２）飲食物中に、０．０１〜２０重量％の割合で含まれるように用いられるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩が含有することを特徴とする食品添加物。
（３）粉ミルク、離乳食、乳製品及び清涼飲料水の中から選択されるいずれかの飲食物に配合される、（１）又は（２）記載の食品添加物。
（４）Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を配合してなる餌料組成物。
（５）Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を、０．０１〜２０重量％の割合で含有する餌料組成物。
【図面の簡単な説明】
【図１】コロミン酸硫酸エステル等の抗ロタウイルス活性を直接プラーク法で測定する手順を示す（薬理試験例１）。
【図２】コロミン酸硫酸エステル等の抗ロタウイルス活性をマルチプルステップ法で測定する手順を示す（薬理試験例２）。
【発明の属する技術分野】
本発明は、ロタウイルス感染症の予防または治療に有用な剤、衛生品、食品組成物及び餌料添加物に関する。具体的には、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗ロタウイルス剤、ロタウイルス感染症予防または治療剤、ならびにＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルを表面に有してなる衛生品及び該化合物を配合してなる食品組成物、餌料添加物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
厚生省の感染症サーベイランス調査によると、乳幼児嘔吐下痢症の患者として毎年１０万人以上が報告されている。乳幼児嘔吐下痢症のうち、約半数はロタウイルスの感染によるものである。その主たる罹患年齢は２歳以下で、激しい水様性の下痢と発熱、嘔吐にみまわれる。開発途上国では栄養不良と医療不備もあいまって、年間数百万人もの乳幼児がロタウイルス性下痢症によって死亡しているのが現状である。また、ある種のロタウイルスは乳幼児から成人まで幅広く感染することが知られており、動物間の感染、さらには動物からヒトへの感染が懸念されている。
【０００３】
通常ウイルス性感染症に対してはワクチンによる対処がなされるが、ロタウイルスが腸管上皮細胞という局所部位に感染することと感染対象が免疫学的に未熟な乳幼児であることから十分な分泌型ＩｇＡを誘導することができず、効果的なワクチンの開発には至っていない。
【０００４】
また、ロタウイルスによる感染は特に糞口経路（fecal oral route)によるものであり、排泄物中に含まれるロタウイルスは接触者への感染を容易に成立させる。このことから、ロタウイルス感染は一旦発生すると広く蔓延する傾向にあり、集団発生例も多く報告されている。
【０００５】
従って、ロタウイルス感染症の治療剤の勿論のこと、感染の予防剤の開発が望まれている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、優れた抗ロタウイルス作用を有し且つ副作用のない抗ロタウイルス剤、ロタウイルス感染症予防・治療剤を提供することを目的とする。また、本発明は、抗ロタウイルス作用を有し且つ安全な衛生品、食品組成物及び餌料添加物を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記問題点に鑑み鋭意検討を重ねた結果、Ｎ−アセチルノイラミン酸の硫酸エステル体およびＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステル体が、抗ロタウイルス作用を有することを見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００８】
即ち、本発明は、下記式（Ｉ）：
【０００９】
【化２】
〔式中、Ｒは、同一または異なって水素原子またはＳＯ3 Ｈを示し、ｎは、１〜１０００の整数を示す。但し、Ｎ−アセチルノイラミン酸残基１分子当たりのＳＯ3 Ｈ残基の数は、０．１〜３である。〕
で表されるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗ロタウイルス剤、及びロタウイルス感染症予防または治療剤を提供するものである。
【００１１】
また、本発明は、上記一般式（Ｉ）で表されるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬学的に許容される塩を表面に有してなる衛生品を提供するものである。
【００１２】
さらに本発明は、上記Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有することを特徴とする食品組成物及び餌料添加物を提供するものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルは、一般式（Ｉ）中、Ｒで表されるＳＯ3 Ｈ残基の数が、Ｎ−アセチルノイラミン酸残基１モルに対し０．１〜３個、好ましくは０．３〜１．５個、最も好ましくは０．５〜１個で示されるものである。また、ｎは１〜１０００の整数、好ましくは６〜２００の整数、より好ましくは６〜１００の整数を示す。
【００１４】
本発明で用いられるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルは、ｎが１種のみである単一化合物であっても良く、また、１〜１０００の範囲内でｎの値が異なる複数のＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルの混合物であってもよい。
【００１５】
Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体は、以下の方法に従って製造することができる。
即ち、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマー１重量部に対し、溶媒の存在下又は不存在下に触媒０．５〜２００重量部、硫酸化剤０．２〜３０重量部を反応させる。反応時間は０．１〜４８時間程度であり、反応温度は−２０〜９０℃程度である。
【００１６】
触媒としては、ピリジン、ジメチルアミノピリジン、トリメチルアミンなどが挙げられ、硫酸化剤としては、クロロスルホン酸、ピペリジン硫酸、サルファトリオキシド・トリメチルアミン錯体、サルファトリオキシド・ピリジン錯体などが挙げられる。触媒としてピリジンなどを過剰量使用する場合には、溶媒を使用する必要はない。溶媒は、必ずしも使用する必要はないが、使用する場合には、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ホルムアミドなどが挙げられる。
【００１７】
なお、原料のＮ−アセチルノイラミン酸及びＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーは特に限定されるものではく、Ｎ−アセチルノイラミン酸または重合度（ｎ）が一定の数であるそのホモポリマーを用いても良く、例えばコロミン酸のような天然のアセチルノイラミン酸ホモポリマーの混合物を用いても良い。また、取得の由来も特に限定されず、天然から抽出、精製したものでも、化学的手法などにより合成したものであってもよい。
【００１８】
以下に、製造原料であるＮ−アセチルノイラミン酸、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの構造式を示す。
【００１９】
【化３】
〔式中、ｎは前記に同じ〕
硫酸化反応の終了後は、公知の方法、例えば濃縮、ゲル濾過、イオン交換などの各種クロマトグラフィー、再沈殿、透析などの処理を行うことができる。
【００２１】
本発明において、薬学的にないし食品衛生上許容される塩とは、ナトリウム、カリウム、リチウムなどのアルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウムなどのアルカリ土類金属塩などが挙げられる。これらの塩は、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸化反応液を水酸化ナトリウム、炭酸カリウムなどの塩で中和することで製造することもでき、また、いったん硫酸化糖の遊離の酸として得た後、それを用いて塩の形態としてもよい。
【００２２】
Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、それ単独でもしくは薬理学的に許容される種々の添加剤とともに、抗ロタウイルス剤またはロタウイルス感染症予防剤及び/または治療剤として用いることができる。
【００２３】
本発明の抗ロタウイルス剤は、ロタウイルス感染症の予防及び/または治療等の医薬用途のほか、ロタウイルスによる感染を遮断もしくは予防することを目的として、処理剤、添加剤などとして広く用いられるものである。
【００２４】
本発明の抗ロタウイルス剤は、体内投与による副作用のみならず、皮膚に対して優しく安全性に優れているため、使い捨ておむつ、おしり拭き、ウエットティッシュ、マスク、手袋、入浴用洗剤、シャンプー、ベビーパウダー等の衛生品、玩具、ほ乳瓶、ベッド、衣服、皮革製品、カーペット、枕、布団などを処理して、これらの物品に抗ロタウイルス性を付与するための剤として用いることができる。さらには鼻粘膜または口腔粘膜に適用するスプレー剤、または上記物品などを処理して抗ロタウイルス性を付与するのに有用なスプレー剤、コーティング剤として、また食品添加剤、餌料・飼料添加物として使用されてもよい。
【００２５】
本発明の抗ロタウイルス剤の組成は特に制限されることなく、目的に応じて調製することができる。界面活性剤、分散剤等の各種添加剤を含有していてもよい。また、その形態も特に限定されず、例えば固形、顆粒状、粉末状、懸濁液状、液状、エアゾール状、乳液状等、使用目的や使用対象に応じて適宜選択される。
【００２６】
当該抗ロタウイルス剤中に含まれるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体の量は、使用目的、処理対象などによって異なり、通常１処理あたり０．１〜１００００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇとなるような範囲で適宜選択することができる。
【００２７】
本発明のロタウイルス感染症予防または治療剤の形態も特に限定されるものでなく、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、乳剤、シロップ剤などの経口剤、注射剤、坐剤などの種々の形態が例示される。好ましくは、ロタウイルスの感染部位である腸内で有効に作用する経口剤（例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤等）または坐剤などである。
【００２８】
本発明のロタウイルス感染症予防または治療剤を経口剤として調製する場合、添加剤を適当量配合してもよく、添加剤としては賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、矯臭剤、矯味剤、甘味剤などが挙げられる。また、坐剤として調製する場合も同様であり、その添加剤としては基剤、界面活性剤などが、注射剤として調製する場合の添加剤としてはｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤などが例示される。該注射剤は静脈内、筋肉内、皮下または腹腔内に投与される。
上記添加剤としては、各々の製剤を調製する際に通常用いられる添加剤がすべて挙げられ、これらの適当な量が用いられる。
【００２９】
なお、本発明のロタウイルス感染症予防または治療剤は、ヒトは勿論、動物のロタウイルス感染症の予防または治療に用いられる。適用される動物としては、例えば牛、豚、鶏、家兎等で代表される家畜、犬、猫、猿、鳥、ネズミ等で代表されるペット、その他の飼育動物が挙げられる。
【００３０】
本発明の予防・治療剤中に配合される有効成分であるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体の量は、投与すべき患者または動物の年齢、性別、体重、症状などに応じて適宜選択することができる。
【００３１】
例えばヒトの場合は、乳幼児を例にとると、１投与単位当たり、経口剤では０.０１〜５００ｍｇ程度、注射剤では０．０５〜５００ｍｇ程度、坐剤では０．１〜５００ｍｇ程度であるのが好ましく、一日当たりの投与量としては、剤型によって異なるが、０．１〜１００００ｍｇ程度、好ましくは１〜１０００ｍｇ程度である。
また動物の場合は、体重１ｋｇあたり、経口剤では０．０１〜１００ｍｇ程度、注射剤では０．０１〜１００ｍｇ程度、坐剤では０．１〜５０ｍｇ程度であるのが好ましく、一日当たりの投与量としては、剤型によって異なるが、体重１ｋｇあたり０．０１〜１０００ｍｇ程度、好ましくは１〜１００ｍｇ程度である。
【００３２】
また、本発明に示すＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、衛生品に適用することができる。すなわち、当該化合物を衛生品に付着含有させることにより、抗ロタウイルス作用を有する衛生品を提供することができる。
【００３３】
本発明でいう衛生品としては、一般にサニタリー製品などといわれるもの、具体的にはおむつ、おしり拭き、ウエットティッシュ、マスク、手袋、ベビーパウダー、入浴用洗剤等が挙げられる。
ロタウイルス感染は、前述したように糞口経路によって容易に成立する。本発明の衛生品は、かかる糞口経路による感染を有効に予防することができるものである。
【００３４】
なお、本発明で「表面に有してなる」とは、少なくとも衛生品の使用時に外部と接触する衛生品の表面にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩が抗ウイルス作用を奏する態様で存在していれば良い意味であり、衛生品等製品の調製時等における該化合物の存在態様（担持、付着、吸着等）、存在場所は問わない趣旨である。
【００３５】
本発明の衛生品の製造は、該製品にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬理学的に許容される塩を付与（担持、付着、吸着等）させる方法であれば特に制限されることなく、通常の方法を用いて行うことができる。たとえば、浸漬法、バッド法、スプレー法、コーティング法などが例示される。
【００３６】
本発明の衛生品のＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその薬理学的に許容される塩の含有量は、使用目的および製品の種類等により異なるが、おしり拭きやウエットティッシュ等の場合は、０．１〜１００００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇ程度であり、マスク等は０．１〜１０００ｍｇ程度、好ましくは１〜１００ｍｇ程度である。
【００３７】
さらに、本発明に示すＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩は飲食物に適用することができる。
即ち、本発明はＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を食品添加物として提供する。この場合、食品の種類や飲食者の年齢、体重等により相違するが、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を、通常一食あたり１〜１００００ｍｇ、好ましくは１０〜１０００ｍｇの範囲で、０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含まれるように適宜選択して、添加するのが望ましい。
【００３８】
また別の局面において、本発明は、飲食物にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を配合してなる食品組成物を提供するものである。
【００３９】
本発明が対象とする飲食物は、通常の食品、飲料品及び食品加工品であれば特に制限されるものではないが、好ましくは乳幼児が口にする食品、飲料品およびその食品加工品である。具体的には、粉ミルク、離乳食、乳製品、清涼飲料水等が挙げられる。
【００４０】
なお、本発明で「乳幼児」とは、乳児、幼児のみならず新生児をも含む概念であり、通常０歳〜１０歳、好ましくは０歳〜４歳の子供を意味する。
【００４１】
本発明の食品組成物は、前記のような食品、飲料品およびその食品加工品にＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を通常の方法で配合することにより製造される。
【００４２】
本発明の食品組成物は、食品の種類、飲食者の対象によっても相違するが、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を、通常一食あたり１〜１００００ｍｇ、好ましくは１０〜１０００ｍｇの範囲で、０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含有する。
【００４３】
また、本発明に示すＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩は餌料に適用することができる。
従って、本発明は、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有する餌料添加物を提供するものである。かかる餌料添加物の中には、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩のほか、ビタミン類などのミネラル、成長促進剤等各種栄養剤が含まれていても良い。
【００４４】
本発明において餌料とは、動物を成長させ、また飼育するための食物、飲料物をいう。ここで動物とは、動物の種類によって制限されるものではないが、具体的には牛、豚、鶏、家兎等で代表される家畜、犬、猫、猿、鳥、ネズミ等で代表されるペット、動物園などにいる飼育動物等が例示される。
【００４５】
本発明の餌料添加物の餌料・飼料（天然餌料・飼料、人工餌料・飼料等の別を問わない。）に対する配合量は、動物の種類、年齢、体重等に応じて異なり適宜変更することができる。通常、Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその食品衛生上許容される塩の量として、一食あたり体重１ｋｇに対して０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜１００ｍｇの範囲で、０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含まれるように配合される。
【００４６】
別の局面において、本発明はＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルまたはその食品衛生上許容される塩を含有する餌料組成物を提供するものである。当該餌料組成物は、対象とする動物の種類によっても異なるが、通常Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル体（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を０．０１〜２０重量％、好ましくは０．０３〜１０重量％、より好ましくは０．０５〜５重量％含有する。かかる餌料組成物によれば、各種動物に嘔吐下痢症をもたらすロタウイルスの感染を予防し、またロタウイルス感染症の症状を軽減もしくは治癒することも可能である。
【００４７】
【実施例】
以下、本発明を参考例、実施例及び薬理試験例を用いてより詳細に説明するが、本発明はこれら実施例等に限定されない。
【００４８】
【参考例１】
Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの製造
コロミン酸（購入先：ナカライテスク株式会社製）９０ｍｇをジメチルホルムアミド２０ｍｌに入れ、ここに４７７ｍｇのサルファトリオキシド・ピリジン錯体および３７ｍｇのジメチルアミノピリジンを加え、３０℃にて２４時間攪拌した。その後、氷冷し、これを１Ｍ炭酸水素ナトリウム５０ｍｌに滴下した。ろ過により固形物を分離し、透析チューブ（ＶＩＳＫＡＳＥ ＳＡＬＥＳ ＣＯＲＰ.製、孔の直径：２４オングストローム）を用いて透析を行った。透析後、ナトリウムイオン型のイオン交換樹脂（アンバーライトＩＲ−１２０Ｂ、オルガノ株式会社製）カラムに通した。カラム流出液を減圧下で５ｍｌにまで濃縮した。濃縮液を凍結乾燥させ、１２６ｍｇの目的物を得た。
【００４９】
得られた硫酸エステルの硫酸基の含量をロジゾン酸法（rhodizonic acid method）〔アナリティカル バイオケミストリー（Anal. Biochem.）41,471 (1971)〕で測定した結果、その含有率は２８重量％であった。
【００５０】
−実施例１−
抗ロタウイルス剤
【００５１】
−実施例２−
ロタウイルス感染症予防治療剤
処方例１ 錠剤
【００５２】
処方例２ 顆粒剤
【００５３】
処方例３ 注射剤
【００５４】
処方例４ 坐剤
【００５５】
−実施例３−
衛生品
（１）マスク
エマルジョン状の抗ロタウイルス剤を用いて、綿メリヤス生地にコーティング加工を施した。コロミン酸硫酸エステルのＮａ塩（平均ｎ＝８０）１００重量部にアクリル樹脂エマルジョン２０部を添加混合して、得られた混合液中をリバースコーティング法により綿メリヤス生地原布の塗布した。その後乾燥して、抗ロタウイルス作用を有する加工生地を得た。
この加工生地をインナー層として有するマスクを作製した。
【００５６】
（２）ウエットティッシュ
エマルジョン状の抗ロタウイルス剤を用いて、不織布の積層シートにパディング加工を施した。コロミン酸硫酸エステルのＮａ塩（平均ｎ＝８０）１００重量部にアクリル樹脂エマルジョン２０部を添加混合して得られた混合液中に不織布を浸漬し、ロールで均一に絞って、パディング加工を行った。その後乾燥して、抗ロタウイルス作用を有する不織布シートを得た。
このシートをアルコール、界面活性剤等を含有する液に浸漬して、処理後、密封容器中に詰めてウエットティッシュを作成した。
【００５７】
−実施例４−
食品組成物
【００５８】
−実施例５−
（１）下記の割合でコロミン酸硫酸エステルのＮａ塩を餌料添加物として配合して、コロミン酸硫酸エステルを１重量％含有するペットフードを調製した。
【００５９】
【００６０】
【薬理試験例】
−薬理試験例１−
抗ロタウイルス活性−直接プラーク法−
Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの抗ロタウイルス活性を直接プラーク法［レターズ イン アプライド マイクロバイオロジー(Letters in Applied Microbiology) 19, 386 (1994)］を用いて測定した。Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルとして参考例で調製したコロミン酸硫酸エステルを使用した。
【００６２】
具体的には、図１に示す手順に従って行った。コロミン酸硫酸エステルまたはコロミン酸（比較化合物）を用いた薬剤処理を前処理(i)、混合処理(ii)および後処理(iii)の系についてそれぞれ実施して、コロミン酸硫酸エステルの抗ロタウイルス活性を評価した。
(i)前処理：図１中、(i)の時点で薬剤を培地に添加して、ウイルス接種前に細胞と接触させる。
(ii)混合処理：ロタウイルスＳＡ−１１と２時間反応させた後、図１中(ii)の時点で培養液に薬剤を加える。
(iii)後処理：ウイルスが細胞に吸着した後の図１中(iii)の時点で、薬剤をアガロース培地に添加する。
なお、薬剤の濃度は培地で希釈して調製した。また、コントロールとして薬剤の代わりに培地を同量添加して同様の実験を行った。
【００６３】
薬剤としてコロミン酸硫酸エステルを用いた結果を表１に示す。
【００６４】
【表１】
数値は、薬剤無添加（コントロール）の場合のプラーク数を１００％としてプラーク数を％に換算して示した。
原料であるコロミン酸を用いた場合は、前処理、後処理及び混合処理ともに全く抗ウイルス活性が認められなかった（データは示さない。）。それに対し、コロミン酸硫酸エステルを用いた場合は、全ての処理方法で活性が認められ、中でも後処理での効果は著しく優れていた。
このことから、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルはロタウイルス感染症に対して優れた治療剤として有効であり、また感染予防剤としても有用であることが示唆された。
【００６６】
−薬理試験例２−
抗ロタウイルス活性−マルチプルステップ増殖法−
薬理試験例１において特に効果の高かった後処理に関して、更にマルチプルステップ増殖法［レターズ イン アプライド マイクロバイオロジー(Letters in Applied Microbiology) 19, 386 (1994)］により、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの抗ロタウイルス活性を評価した。
具体的には、図２に示す手順に従って行った。
比較化合物としてコロミン酸を用いて同様の実験を行った。
コロミン酸硫酸エステルの結果を表２に示す。数値はウイルスの感染価(log pfu/0.2ml)を示す。
【００６７】
【表２】
原料のコロミン酸には抗ウイルス活性は認められなかった（データは示さない。）。それに対し、コロミン酸硫酸エステルの場合、感染した細胞に対する増殖抑制効果が有意に認められ、ロタウイルス感染症の治療に有用であることが示された。
【００６９】
−比較薬理試験例−
ロタウイルスと同様にエンテリックウイルスに属するポリオウイルスを用いて、コロミン酸硫酸エステルのポリオウイルスに対する抗ウイルス活性を調べた。測定は、薬理試験例１に記載する直接プラーク法に準じて行った（アガロース培地として、アセチルトリプシン無添加のアガロース培地を使用。）。結果を表３に示す。
【００７０】
【表３】
このことから、コロミン酸硫酸エステルには抗ポリオウイルス活性は認められず、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステルの抗ウイルス作用はロタウイルスに特異的なものであることが示唆された。
【００７２】
−薬理試験例３−
細胞毒性
ＭＥＭ培地（イーグル最小培地）に０．１５％重炭酸塩及び１０％ＦＢＳを配合した培地で３６℃にて培養したＭＡ１０４細胞にコロミン酸または参考例で得られたコロミン酸硫酸エステルを加え、３６℃にて６日間培養した。培養後、ＰＢＳにより１回洗浄し、生細胞数を血球計算盤にて数えた。結果を表４に示す。
【００７３】
【表４】
このことから、Ｎ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーおよびＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステルには、上記濃度範囲において顕著な細胞毒性が認められず、本発明の抗ロタウイルス剤、ロタウイルス感染症予防または治療剤、衛生品、食品組成物及び餌料添加物の安全性が確認された。
【００７５】
なお、本発明には下記の実施態様も含まれる。
【００７６】
（１）Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有することを特徴とする食品添加物。
（２）飲食物中に、０．０１〜２０重量％の割合で含まれるように用いられるＮ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩が含有することを特徴とする食品添加物。
（３）粉ミルク、離乳食、乳製品及び清涼飲料水の中から選択されるいずれかの飲食物に配合される、（１）又は（２）記載の食品添加物。
（４）Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を配合してなる餌料組成物。
（５）Ｎ−アセチルノイラミン酸もしくはそのホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を、０．０１〜２０重量％の割合で含有する餌料組成物。
【図面の簡単な説明】
【図１】コロミン酸硫酸エステル等の抗ロタウイルス活性を直接プラーク法で測定する手順を示す（薬理試験例１）。
【図２】コロミン酸硫酸エステル等の抗ロタウイルス活性をマルチプルステップ法で測定する手順を示す（薬理試験例２）。
Claims (6)
- 下記式（Ｉ）：
- 請求項１記載のＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を有効成分とするロタウイルス感染症予防または治療剤。
- 請求項１記載のＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を表面に有してなるロタウイルス感染症予防用衛生品。
- 飲食物に、請求項１記載のＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を配合してなるロタウイルス感染症予防用食品組成物。
- 飲食物が粉ミルク、離乳食、乳製品及び清涼飲料水の中から選択されるいずれかである請求項４記載のロタウイルス感染症予防用食品組成物。
- 請求項１記載のＮ−アセチルノイラミン酸ホモポリマーの硫酸エステル（Ｉ）またはその食品衛生上許容される塩を含有することを特徴とするロタウイルス感染症予防用餌料添加物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP08666296A JP3981770B2 (ja) | 1996-04-09 | 1996-04-09 | 抗ロタウイルス剤、及びその用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP08666296A JP3981770B2 (ja) | 1996-04-09 | 1996-04-09 | 抗ロタウイルス剤、及びその用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09278660A JPH09278660A (ja) | 1997-10-28 |
| JP3981770B2 true JP3981770B2 (ja) | 2007-09-26 |
Family
ID=13893254
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP08666296A Expired - Fee Related JP3981770B2 (ja) | 1996-04-09 | 1996-04-09 | 抗ロタウイルス剤、及びその用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3981770B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2116140A1 (en) * | 2008-05-08 | 2009-11-11 | Nestec S.A. | Sialic acid to support the immune system in the elderly |
| TW201111457A (en) * | 2009-06-10 | 2011-04-01 | Glaxosmithkline Llc | Novel article |
-
1996
- 1996-04-09 JP JP08666296A patent/JP3981770B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH09278660A (ja) | 1997-10-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1181044B1 (en) | IMMOBILIZED LACTOFERRIN ( i Im /i -LF) ANTIMICROBIAL AGENTS AND USES THEREOF | |
| Uruakpa et al. | Colostrum and its benefits: a review | |
| AU759388B2 (en) | Pharmaceutical compositions containing lipase inhibitors and chitosan | |
| US7858595B2 (en) | Anti-infectious carbohydrates | |
| WO2017027742A1 (en) | Biofilm inhibiting compositions enhancing weight gain in livestock | |
| WO1994021284A1 (en) | Therapeutic formulation and method | |
| JP6637725B2 (ja) | ウイルス感染症の予防及び／又は治療剤 | |
| TW200918552A (en) | Composition and method for immunization | |
| PL191391B1 (pl) | Doustny produkt do zapobiegania i leczenia infekcji żołądka i jelit u świń i sposób wytwarzania przeciwciał czynników chorobotwórczych infekcji żołądka i jelit u świń | |
| JP3981770B2 (ja) | 抗ロタウイルス剤、及びその用途 | |
| JP7233043B2 (ja) | 抗インフルエンザ剤 | |
| EP0914831B1 (en) | Biological product for preventive or therapeutic oral administration against canine parvovirosis | |
| Hamilton | Viral enteritis | |
| Husseini et al. | Role of maternal immunity in the protection of newborn ferrets against infection with a virulent influenza virus. | |
| EP0930316B1 (en) | Oral product for the prevention and treatment of infectious gastroenteritides in calves | |
| Glencross | Pancreatin as a source of hospital-acquired salmonellosis | |
| JPH04335885A (ja) | 抗ヘルペスウイルスならびに抗病性製剤及び食品添加剤 | |
| Crowe | A localized outbreak of Salmonella food poisoning apparently transmitted by a hen's egg | |
| US20200296998A1 (en) | Feed compositions enhancing zootechnical performance in livestock | |
| JP6942350B2 (ja) | 抗ウイルス剤及び抗ウイルス用組成物 | |
| JP2001048804A (ja) | ＴＮＦ−α産生抑制剤 | |
| JPS6115841A (ja) | 恒温動物用抗ウイルス剤 | |
| Channa et al. | Effects of ciprofloxacin and zinc chloride in adult albino rat and pre-natal conceptus | |
| AU673589B2 (en) | Therapeutic formulation and method | |
| Moseley | The place of oral penicillin in paediatrics |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070221 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070418 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20070530 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20070619 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100713 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 4 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 4 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 4 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 4 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120713 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120713 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130713 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |