JP3957745B2 - 毛の成長抑制 - Google Patents
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Description
哺乳動物の毛の主な機能は、動物を環境から守ることである。しかしながら、そのような機能は、人間に於いて殆ど失われてしまっている。人間の身体の様々な部分の毛は、実質的には美容上の理由により、生やしたままにしたり、除去したりする。例えば、一般的には頭皮上に毛があるのが好ましく、顔にあるのは好ましくない。
不要な毛を除去する為に、シェービング、電気分解法、脱毛クリームやローション、ワックス塗布、引き抜き、及びその他の美容的処置、並びに抗男性ホルモン療法を含む、様々な方法が用いられてきた。これらの従来からの方法には、通常、欠点が伴う。例えばシェービングの場合には、剃り跡が付いたり切り傷ができたりすることがあり、また毛の再成長速度が増すような感じを与えることがある。シェービングでは、望ましくない剃り残しができることもある。一方、電気分解法の場合、処理した部分は長期にわたり毛のない状態に保たれるが、高価であり、痛みを伴い、また時には傷跡が生じることがある。脱毛クリームは非常に効果的ではあるが、刺激性が強いので、一般的には頻繁に使用することは勧められない。ワックス塗布や引き抜きは痛みや不快感や内部への毛の成長を生じ、また短い毛は余り良く除去できないことがある。最後に、女性の多毛症の治療に用いられている抗男性ホルモンには、望ましくない副作用のあることがある。
或る種の酵素の阻害物質を皮膚に塗布することで、毛の成長速度や成長の特性を変えられることが既に開示されている。これらの阻害物質には、5−アルファレダクターゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ、S−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ、ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼ、及びトランスグルタミナーゼの阻害物質が含まれる。例えば、Breuer等の米国特許第4,885,289号、Shanderの米国特許第4,720,489号、Ahluwaliaの米国特許第5,095,007号、Ahluwalia等の米国特許第5,096,911号、Shander等の米国特許第5,132,293号、及びShander等の米国特許第5,143,925号各明細書を参照のこと。
酸化窒素シンテターゼは、L−アルギニン中の二つの末端グアニド窒素のうちの一つを酸化させて、酸化窒素を形成する。この酵素の作用により形成される酸化窒素は、平滑筋の弛緩、免疫系の調節、及び神経伝達を含む様々な生理学的な機能と関係する。
今般、哺乳類(ヒトを含む)の不要な毛の成長、特に男性ホルモンにより刺激された毛の成長が、酸化窒素シンテターゼの阻害物質を皮膚に局所的に塗布することによって抑制可能なことを見出した。低下させる不要な毛の成長は、美容上低下させようとする正常な毛の成長であってもよいし、異常な、もしくは疾患のある状態による毛の成長であってもよい。
酸化窒素シンテターゼの好ましい阻害物質には、NG−メチル−L−アルギニン、NG−ニトロ−L−アルギニン、NG−ニトロ−L−アルギニンメチルエステル、NG−ニトロ−L−アルギニンベンジルエステル、N−アセチル−L−アルギニン、NG−アミノ−L−アルギニン、N−ベンゾイル−L−アルギニンアミド、N−ベンゾイル−L−アルギニンエステル、N−ベンゾイル−L−アルギニンエチルエステル、NG−アリル−L−アルギニン、NG−シクロプロピル−L−アルギニン、N−イミノエチル−L−オルニチン、L−ホモアルギニン、L−アルギニンアミド、ジフェニレンヨードニウム、ヨードニウム−ジフェニル、及びジ−2−チエニルヨードニウムが含まれる。可逆的な阻害物質(競合性、及び非競合性)も使用できるが、酸化窒素シンテターゼの非可逆的な阻害物質が好ましい。
酸化窒素シンテターゼの阻害物質は、皮膚に塗るのに適した、皮膚科学的に許容される毒性のない賦形剤もしくはキャリアを含む、局所用組成物もしくは化粧用組成物に配合するのが好ましい。適当な賦形剤の例は、アセトン、アルコール、又は有効な化合物を効果的に導出させることのできるクリーム、ローション、もしくはジェルである。このような賦形剤の一つは、同時係属中のPCT/US出願第93/05068号明細書に開示されている。また、製剤の効果を更に高める為に、賦形剤に浸透増進剤を添加してもよい。
組成物中の酸化窒素シンテターゼ阻害物質の濃度は、飽和溶液となる迄、広い範囲で変えることができるが、好ましくは0.1〜30重量%、もしくはそれ以上である。毛の成長は、皮膚の単位面積当たりの阻害物質の塗布量が増すに連れて低下する。効果的な最大塗布量は、阻害物質が皮膚に浸透する率によってのみ決まる。通常、効果的な量は、皮膚1平方センチメートル当たり100〜3,000マイクログラム、もしくはそれ以上である。
組成物は、毛の成長を抑制しようとする身体の選ばれた部分に、局所的に塗布すべきである。例えば、組成物を顔、特に顔の髭の生える部分、すなわち頬、首、上唇、及び下顎に塗布することができる。組成物を足、腕、胴、もしくは腋の下に塗布することも可能である。組成物は、多毛症の、もしくはその他の状態の女性に於ける不要な毛の成長を抑制するのに特に適している、ヒトの場合、毛の成長をはっきりと分かるように低下させる為には、組成物を一日に一回もしくは二回、又はそれ以上の頻度で、少なくとも三ヶ月間塗布すべきである。毛の成長の低下は、毛を除去する頻度が減少するか、もしくは被験者が処理した部位の毛が少ないと感じるか、もしくは定量的には、シェービングにより除去した毛の重量(すなわち毛の質量)が減少することにより明らかになる。
雄の無傷のゴールデンシリアハムスターは、それぞれが長径約8mmの卵形の側腹部器官を両側にそれぞれ一個づつ有していて、それがヒトの顎髭の毛に似た、太くて黒く、粗い毛を生やすので、ヒトの顎髭の毛の成長のモデルにすることができると考えられている。この器官は、ハムスターの男性ホルモンに反応して毛を生やす。特定の酸化窒素シンテターゼ抑制物質の効果を評価する為に、それぞれのハムスター群の側腹部器官を、チオグリコレートをベースとした化学的な脱毛剤(サージェックス)を塗布して脱毛する。それぞれの動物の一方の器官に、賦形剤のみを一日に一回10μl塗布し、それぞれの動物のもう一方の器官に、酸化窒素シンテターゼ抑制物質を含む賦形剤を同量塗布する。13回塗布した後(一日に一回、一週間に五日塗布)、側腹部器官の毛を剃り、それぞれの器官から回収した毛の量(毛の質量)を測る。毛の成長の%低下を、賦形剤で処理した側の毛の質量(mg)の値から、テスト化合物で処理した側の毛の質量の値を引き、得られたデルタ値を賦形剤で処理した側の毛の質量の値で割り、得られた数に100を掛けることにより求める。
上記の評価法を、以下、「ゴールデンシリアハムスター」評価法という。好ましい組成物は、ゴールデンシリアハムスター評価法でテストした場合、毛の成長を少なくとも約35%、より好ましくは少なくとも約50%、最も好ましくは少なくとも約70%、抑制する。
幾つかの酸化窒素シンテターゼ抑制物質を、ゴールデンシリアハムスター評価法によりテストした。その結果を表Iに示す。
毛包中の酸化窒素シンテターゼの活性を、以下の評価法により測定する。この評価法は、酸化窒素シンテターゼ抑制物質の酸化窒素シンテターゼの活性を低下させる効果を評価するのに用いることができる。
ハムスターの側腹部器官から毛包を切り取り、pH7.4に緩衝化したスクロース溶液中で、音波粉砕器を用いて酵素抽出物を調製した。この音波粉砕抽出物を12,000xgで遠心分離器にかけ、得られた清澄な上澄み液を、酸化窒素シンテターゼの活性について分析した。具体的には、毛包の上澄み液50μlを、トリス緩衝液(pH7.5)を100mM、冷アルギニンを50μM、
〔3H〕−アルギニンを1μCi/ml、CaCl2を3mM、及びNADPHを1mM含む37℃に温めた評価用混合物150μlに添加し、37℃で30分間培養した。酵素の活性の尺度として用いることのできる、酸化窒素シンテターゼ作用の共生成物である放射線同位元素で標識付けされたシトルリンの形成を、アルギニンからシトルリンを分離することのできるHPLC法を用いて定量化した。
より詳しくは、95℃で5分間加熱して酵素反応を終了させた後、反応混合物を12,000xgで2分間、遠心分離器にかけた。反応生成物を含む清澄な上澄み液のアリコート100μlを、カチオン交換カラム(10μパルティシル10−SAX 25cmx4.6mm)注入し、その後0.02Mの第一燐酸カリウム緩衝液(pH4.5)で溶離した。このような条件下でのシトルリンとアルギニンの溶離時間は、それぞれ6分と7分である。HPLCの流出液を1.0mlの画分毎に集め、評価中に形成された放射線同位元素で標識付けされたシトルリンの量を、シンチレーション計測により求めた。酵素の活性は、添加した毛包抽出物(すなわち、蛋白質濃度)、及び培養時間に関してリニアであった。
酸化窒素シンテターゼの抑制物質を以下のようにして評価した。最終濃度が1.0mMの抑制物質を、毛包酵素抽出物(上澄み液)と共に予め培養した。抑制物質に曝した後の酵素の活性を、上記のようにして評価した。この評価法を、以下「毛包酸化窒素シンテターゼ抑制評価法」という。この結果を、表2に示す。
組成物及び条件の同等のパラメータの広い範囲内で、本発明の精神もしくは範囲、又は本発明のいずれの態様からも逸脱しない限りにおいて、本発明を実施することができるということが、当業者に分かるであろう。
Claims (6)
- 哺乳類の毛の成長抑制するための組成物であって、毛の成長を低下させるのに効果的な量として1〜30重量%の、NG−メチル−L−アルギニン、NG−ニトロ−L−アルギニンメチルエステル、NG−ニトロ−L−アルギニンベンジルエステル、Nα−アセチル−L−アルギニン、Nα−ベンゾイル−L−アルギニン、Nα−ベンゾイル−L−アルギニンアミド、Nα−ベンゾイル−L−アルギニンメチルエステル、L−ホモアルギニン、及びL−アルギニンアミドから選ばれる酸化窒素シンテターゼの抑制物質と、皮膚科学的に許容される毒性のない賦形剤もしくはキャリアとを含む上記組成物。
- ゴールデンシリアハムスター評価法でテストした場合、組成物が毛の成長を少なくとも30%低下させる、請求項1に記載の組成物。
- 組成物が毛の成長を少なくとも50%低下させる、請求項2に記載の組成物。
- 組成物が毛の成長を少なくとも70%低下させる、請求項2に記載の組成物。
- 該賦形剤もしくはキャリアが、哺乳類の皮膚に塗布するのに適している、請求項1に記載の組成物。
- 化粧用組成物である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
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