JP3709409B2 - グラジエント送液用ポンプシステム及び液体クロマトグラフ - Google Patents
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Description
本発明は、グラジエント送液を行うためのポンプに関し、特に高圧グラジエントを行う液体クロマトグラフで用いられるポンプに関する。
背景技術
分離カラムに供給される溶離液の混合比を変えながら分析を行う高圧グラジエント液体クロマトグラフでは、複数の溶離液を別々のポンプで送液する。このポンプにチェック弁を備え、ピストンの往復運動により送液を行うプランジャポンプを用いた場合、その構成から分離カラム側(吐出側)に圧力低下が発生する時期がある。この圧力低下が他方のポンプの送液にも伝わり、所謂ポンプ相互間の圧力干渉が発生し、その結果としてプログラム通りの流量の送液が妨げられ、溶離液の混合比が変化するという問題がある。
この圧力干渉の対策については、例えば特開平8−15245号公報,特開平11−50967号公報,特開平7−72130号公報等で述べられている。
発明の開示
従来のプランジャポンプを用いたシステムにおいては、ポンプが吐出区間になり、圧力低下が始まると、プランジャの往復運動をカムを介して制御するモータの回転速度を上げ、この圧力低下区間を短縮しようとしているが、いつまでモータの回転速度を上げているのか、ということについては、様々なやり方が試みられている。
例えば、上記特開平8−15245号公報では、ポンプの吐出側の圧力値を検出し、圧力低下が始まるとモータの回転速度を上げ、同様にポンプの吐出側の圧力値が所定の圧力に戻ればモータを定常の回転速度に戻すようにしている。また、上記特開平11−50967号公報では、カムの位置でモータの回転速度を上げる時期を決め、所定の時間が経過した時点でモータを定常の回転速度に戻すようにしている。
プランジャポンプを用いたシステムにおいて、圧力干渉の原因となる圧力低下は、チェック弁を有するポンプの吸引区間から吐出区間に移行する期間に発生する。この圧力低下が発生する時期は、各々のポンプの流量が刻々と変化する場合には、各ポンプで異なっており、圧力干渉が発生する時間帯を正しく予測することは困難である。
圧力干渉を低減するためには、各ポンプが吐出する流量の変動を減らす必要がある。そのためには、各ポンプが吐出しようとする流量(圧力)が吐出側流路の圧力に対して、どの程度違いが有るのかを把握する必要がある。圧力が変動するときは、上述したようにモータを高速運転する場合であるが、従来の例においては、モータの高速運転を終了するタイミングは、吐出側流路の圧力のみを判断材料とするか、予め定められた時間で行うかであり、自らのポンプ内の吐出圧力は判断材料に加えられていない。このため、モータの高速運転を終了させるタイミングによって、吐出圧力が強すぎたり、または弱すぎたりすることがあり、安定した圧力で送液を行うことが出来ていなかった。
本発明の目的は、各々のポンプの流量が刻々と変化するような場合でも、圧力干渉の影響を低減し、正しい混合比で送液可能なグラジエント送液用ポンプシステム及びこれを用いた液体クロマトグラフを提供することにある。
上記目的を達成するための本発明の特徴は、複数の溶離液を複数のポンプによって混合比を変更しながら送液するグラジエント送液用ポンプシステムであって、前記ポンプのそれぞれは、溶離液を吸引吐出する第1のプランジャポンプと、当該第1のプランジャポンプからの送液を受けて吸引吐出を行う第2のプランジャポンプと、前記第1及び第2のプランジャポンプをカムを介して駆動するモータと、前記第2のプランジャポンプの流路内圧力を測定する第1の圧力センサと、前記第1のプランジャポンプ内の圧力を測定する第2の圧力センサと、前記カムの位置を検出するカム位置検出センサを有し、前記カムの位置が吐出区間となった際に前記モータの回転速度を上昇させ、更に、前記第1の圧力センサから得られる圧力値と前記第2の圧力センサから得られる圧力値との差分を基に前記モータの回転速度を低下させる時期を決定することである。
これにより、溶離液混合比の安定した送液を行うことが出来る。
【図面の簡単な説明】
第1図は、本発明の実施例の概略構成図である。
第2図は、モータを一定速度で回転させた場合の各圧力センサの出力の変化、モータ回転速度、及びカムの位置信号を示す図である。
第3図は、本発明の演算アルゴリズムを示すフローチャートである。
第4図は、本発明を実施した際の各圧力センサの出力の変化、モータ回転速度、及びカムの位置信号を示す図である。
第5図は、本発明のポンプシステムを適用した液体クロマトグラフの概略構成図である。
第6図は、第5図の装置で得られたクロマトグラムの一例を示す図である。
第7図(A)は、本発明を用いて10回繰り返し測定を行った結果を示す図である。
第7図(B)は、従来の装置を用いて、第7図(A)と同じ試料を10回繰り返し測定を行った結果を示す図である。
第8図は、本発明の他の実施例を示す概略構成図である。
発明を実施するための最良の形態
以下、本発明の実施例を説明する。
第1図は、2台のポンプで構成される高圧グラジエント溶出ポンプシステムの概略構成図である。各ポンプは、2個のポンプ室を備え、各ポンプ室のピストンをカム18,19を介して1個のモータ20,21(好ましくは、パルスモータ)で駆動する。各ポンプの溶離液100,101側(吸引側)のポンプ室は、吐出側および吸引側に逆流防止用のチェック弁を備え、第一のピストン10,12によって送液され、分離カラム側(吐出側)のポンプ室は、チェック弁を備えておらず、第二のピストン11,13によって送液される。
第二のピストン11,13は、第一のピストン10,12が吸引区間にある区間に吐出する。この間、吸引側のチェック弁14,16は開き、吐出側のチェック弁15,17は閉まっている。また、第二のピストン11,13の吸引区間では、第一のピストン10,12が第二のピストン11,13の吸引流量よりも多量に吐出することにより、ポンプからの総吐出流量を一定量確保する。この間は、吸引側のチェック弁14,16は閉じ、吐出側のチェック弁15,17は開放されている。
本実施例では、各ポンプ1台に対し、それぞれチェック弁のついた吸引側のポンプ室内の圧力を測定する圧力センサ3,4、および吐出側流路内の圧力を測定する圧力センサ1,2という2種類の圧力センサを具備する。第1図のシステム例では圧力センサの数は合計4個である。基本的な状態としては、前者の圧力センサ3,4は、吸引区間では圧力値はほぼ0になり、吐出区間では後者の圧力センサ1,2とほぼ等しい圧力値を示すものである。また、図示はしていないが、カム18,19の回転角を検出するカム位置検出センサを備え、カム位置を常に把握するようになっている。
第2図にモータ20,21を一定速度で回転させた場合の各圧力センサの出力を示したグラフを示す(本例では160pps(pulse per second)、但し、0.075deg/1pulseで回転させた)。本グラフには、圧力に加え、モータ20,21の回転速度とカム18,19の位置信号も合わせて表示している。カム位置信号は、立ち上がりの位置が吸引区間の開始点を示すものであり、1周期でカムが1回転することを示す。一般的に、カム位置の0°〜120°が吸引区間、120°〜360°が吐出区間となる。第2図の例では、モータ20,21を一定速度で回転させているため、圧力センサ1,2の圧力は、吐出区間の開始時点で激しい圧力低下が発生する。各ポンプでこのような圧力低下が発生するため、これが他のポンプへも影響してしまう。
本実施例においては、各ポンプ毎に吸引側のポンプ室内の圧力と吐出側の流路の圧力を検出し、CPUにおいて、それぞれの圧力値を基に演算し、モータへ制御命令を発する。演算アルゴリズムを第3図に示す。
まず、カム位置を検出し、吐出区間開始点にカムが到達したかどうかを判断する(S1)。カム位置が吐出区間開始点に到達しない間は、モータは定常速度の運転を継続する。カム位置が吐出区間開始点時に到達すると、モータの高速運転を開始し(S2)、圧力センサ3或いは4の圧力Pinが、圧力センサ1或いは2の圧力Poutに到達したかどうかを判断する(S3)。Pin<Poutの状態である限り、モータの高速運転を継続する。好ましくは、通常回転速度の2倍の速度で高速運転する。PinとPoutの差がなくなると、モータを定常速度の運転に戻す(S4)。この後は再びS1のステップから繰り返す。
即ち、本実施例の制御は、吐出側の流路の圧力値を目標値として、吸引側のポンプ室内の圧力がこの目標値に到達するまで高速回転させるものである。本実施例の制御によって得られた圧力センサの結果を第4図に示す。第4図に示されるように、モータの回転速度は吐出区間に入ると通常の倍の速度となっている(第4図の例では320ppsまで速度を上げた)。圧力センサ1,2の圧力低下はほとんど見られない。
本実施例のポンプシステムを高圧グラジエント液体クロマトグラフに用いた例を第5図に示す。溶離液100,101は、各ポンプ102,103によって、その混合組成を時間と共に変えながら送液される。その後、ミキサー104で攪拌された後、オートサンプラー105内のインジェクターにより、分析すべきサンプルが溶離液中に添加される。サンプルが添加された溶離液は、分離カラム106に導入される。多成分の分離を再現良く行うために、分離カラム106は、一定温度に保たれたカラムオーブン107内に設置される。分離カラム106で分離された各成分は、検出器108により検知され、そのデータはデータ処理装置109にて処理,保存される。また、データ処理装置109は、通常、各部の制御を行う。本実施例では分離カラム106にODSカラムを用い、検出器108はUV検出器を用いた。このような装置において、MPB,EPB,PPBの3成分の標準試料を注入して得られたクロマトグラムを第6図に示す。第6図のクロマトグラムにおいては、保持時間2.626(分)のピークがMPB、保持時間4.040(分)のピークがEPB、保持時間5.980(分)のピークがPPBのものである。このようなクロマトグラムを10回繰り返し測定した際の各成分の保持時間を第7図(A)の表に示す。各成分ごとに平均保持時間,SD(標準偏差),RSD(相対標準偏差)を求め、ばらつきの程度を確認した。これに対し、従来の装置のように、吸引側のポンプ室内の圧力センサ3,4の出力を用いずに、吐出側流路の圧力センサ1,2の出力のみをトリガにしてモータの高速運転を行った場合(即ち、圧力センサ1,2の圧力が下がった時にモータの高速運転を開始し、圧力センサ1,2の圧力が回復した時に定常運転に戻すように制御する。)に、上記と同様にMPB,EPB,PPBの3成分の標準試料を10回測定した結果を第7図(B)に示す。
RSDで比較すると、第7図(A)では、PPBでは約0.063%が得られているのに対し、第7図(B)では約0.129%となっており、従来の装置に比べ、本実施例の方が保持時間のばらつきが小さくなり、安定したグラジエント溶出を実行していることがわかる。第7図(B)の保持時間のばらつきが大きくなった原因は、従来の装置ではモータの高速運転の開始、終了のタイミングを吐出側の流路の圧力のみに頼っているために、他方のポンプの圧力低下による干渉の影響により、吐出流量が変化したためである。
対して本実施例は、モータ高速運転の開始点はカム位置で判断し、終了点は吐出側流路の圧力と吸引側ポンプ室内の圧力の差分を見ることで行っているため、片方のポンプは、他方のポンプの吸引吐出に伴う圧力変動に干渉されることなく、安定した吐出流量で送液することが出来る。これにより、ひいては他方のポンプへの圧力干渉を低減することが出来、ポンプ装置全体で安定したグラジエント溶出を行うことが可能となる。
本発明の他の実施例を第8図に示す。
第1図と同様に2台のポンプで構成される高圧グラジエント溶出ポンプシステムであるが、圧力センサを3個用いている点が異なる。各ポンプには、それぞれの吸引側のポンプ室内の圧力を測定する圧力センサ3,4を具備する。さらに、吐出側流路内圧力測定用として、圧力センサ5を装備する。第1図のシステムでは各ポンプにそれぞれ吐出側流路内圧力測定用センサを具備していたが、第8図のシステムではこれを共通の圧力センサとして集約したものである。
また、第8図の例ではシステムに1台のCPUを有する。圧力センサ3を有するポンプを制御する場合、一般に圧力センサ3および5の圧力値を演算し、ポンプのモータ20へ制御命令を発する。本実施例における演算アルゴリズムは、基本的には第1図の実施例と同様であり、違いは、モータの高速運転の終了を判断する際に用いる吐出側流量圧力Poutに、圧力センサ5の出力を、何れのポンプにおいても用いることである。即ち、圧力センサ3の出力が圧力センサ5の出力となるまで、モータ20を高速運転する。好ましくは、通常回転速度の2倍の速度で高速運転する。圧力センサ4を有するポンプの場合も同様にセンサ4および5の圧力値を演算し、ポンプのモータ21へ制御命令を発する。
上記各実施例では、2台のポンプを用いた例を示すが、3台以上のシステムでも同様のグラジエント制御が可能である。
本発明においては、吸引側のポンプ室のピストンの吸引区間から吐出区間に転ずる過渡的区間に圧力を低下させないため、当該吸引側のポンプ室内に圧力センサを設け、吐出区間に到達したことをカム位置によって確認して各ピストンを駆動するモータを高速運転させ、更に、当該ポンプ室内圧力が吐出側の流路内センサ圧力値にまで高速に上昇するまで、モータの高速運転を継続することにより、他のポンプからの圧力干渉を受けにくくなり、安定した流量を送液することが可能になる。
以上に説明した本発明によれば、溶離液混合比の安定した送液が可能となる。ひいては液体クロマトグラフに適用した場合、検出ベースライン信号が安定し、検出ノイズを低減させることができ、検出限界を向上させることが出来る。また、分離カラムに保持される分析成分の保持時間の安定化にも寄与することとなる。
Claims (7)
- 複数の溶離液を複数のポンプによって混合比を変更しながら送液するグラジエント送液用ポンプシステムであって、
前記ポンプのそれぞれは、溶離液を吸引吐出する第1のプランジャポンプと、当該第1のプランジャポンプからの送液を受けて吸引吐出を行う第2のプランジャポンプと、前記第1及び第2のプランジャポンプをカムを介して駆動するモータと、前記第2のプランジャポンプの流路内圧力を測定する第1の圧力センサと、前記第1のプランジャポンプ内の圧力を測定する第2の圧力センサと、前記カムの位置を検出するカム位置検出センサを有し、
前記カムの位置が吐出区間となった際に前記モータの回転速度を上昇させ、更に、前記第1の圧力センサから得られる圧力値と前記第2の圧力センサから得られる圧力値との差分を基に前記モータの回転速度を低下させる時期を決定することを特徴としたグラジエント送液用ポンプシステム。 - 請求項1において、
前記第1及び第2のプランジャポンプは、ピストンの往復運動によって吸引吐出を行うものであって、
且つ前記第1のプランジャポンプは、前記ピストンの前後に逆流防止用のチェック弁を備え、前記第2の圧力センサは、当該チェック弁間の圧力を測定することを特徴とするグラジエント送液用ポンプシステム。 - 請求項1において、
前記モータの回転速度を上昇させる際は、吸引区間でのモータの回転速度の2倍まで上昇させることを特徴としたグラジエント送液用ポンプシステム。 - 複数の溶離液を各ポンプによって吸引吐出を行い、混合した後に送液するグラジエント送液用ポンプシステムであって、
各ポンプからの吐出溶液が連通する流路に、当該流路内圧力を測定する第1の圧力センサを備え、
前記ポンプのそれぞれは、溶離液を吸引吐出する第1のプランジャポンプと、当該第1のプランジャポンプからの送液を受けて吸引吐出を行う第2のプランジャポンプと、前記第1及び第2のプランジャポンプをカムを介して駆動するモータと、前記第1のプランジャポンプ内の圧力を測定する第2の圧力センサと、前記カムの位置を検出するカム位置検出センサを有し、
前記各ポンプは、前記カムの位置が吐出区間となった際に前記モータの回転速度を上昇させ、更に、前記第1の圧力センサから得られる圧力値と前記第2の圧力センサから得られる圧力値との差分を基に前記モータの回転速度を低下させる時期を決定することを特徴としたグラジエント送液用ポンプシステム。 - 請求項4において、
前記第1及び第2のプランジャポンプは、ピストンの往復運動によって吸引吐出を行うものであって、
且つ前記第1のプランジャポンプは、前記ピストンの前後に逆流防止用のチェック弁を備え、前記第2の圧力センサは、当該チェック弁間の圧力を測定することを特徴とするグラジエント送液用ポンプシステム。 - 請求項4において、
前記モータの回転速度を上昇させる際は、吸引区間でのモータの回転速度の2倍まで上昇させることを特徴としたグラジエント送液用ポンプシステム。 - 複数の溶離液を複数のポンプによって混合比を変更しながら送液するポンプシステム,溶離液中に試料を導入する試料導入部,試料を分離する分離カラム,当該分離カラムから溶出された溶液を検出する検出器を備えた液体クロマトグラフにおいて、
前記ポンプシステムは、前記試料導入部側の流路内圧力を測定する第1の圧力センサを有し、且つポンプシステム内の各ポンプは、逆流防止用のチェック弁を備え溶離液を吸引吐出する第1のプランジャポンプと、当該第1のプランジャポンプからの送液を受けて吸引吐出を行う第2のプランジャポンプと、前記第1及び第2のプランジャポンプをカムを介して駆動するモータと、前記第1のプランジャポンプ内の圧力を測定する第2の圧力センサと、前記カムの位置を検出するカム位置検出センサを有し、
前記カムの位置が吐出区間となった際に前記モータの回転速度を上昇させ、更に、前記第1の圧力センサから得られる圧力値と前記第2の圧力センサから得られる圧力値との差分を基に前記モータの回転速度を低下させる時期を決定することを特徴とした液体クロマトグラフ。
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