JP3642073B2 - Testosterone-5α-reductase inhibitor - Google Patents

Testosterone-5α-reductase inhibitor Download PDF

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Description

【0001】
【産業上の利用分野】
本発明は、セイモッコウの抽出物を有効成分とするテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤に関する。
【0002】
【従来の技術】
血中に分泌されたテストステロンは、毛包、皮脂腺、前立腺等の組織においてテストステロン−5α−リダクターゼの作用を受け,ジヒドロテストステロン(DHT)に変換されることが明らかになっている。さらに、先天的なテストステロン−5α−リダクターゼ欠損症においては前立腺は肥大せず、男性型脱毛は発症せず、ニキビはできても軽度であることが知られている。これらの事実から、実際に毛包、皮脂腺、前立腺等で生理作用をあらわすのはこのDHTであることが明らかになりつつある。 そのため、現在このテストステロン−5α−リダクターゼの作用を阻害し組織中でのDHTの生成を弱めることにより、男性型脱毛、ニキビ、前立腺肥大症の治療または予防が可能と考えられ、いくつかの阻害剤が知られるようになってきた。たとえば、それらの阻害剤としてプロゲステロン、その他が知られている。
【0003】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、従来知られている阻害剤は、テストステロン−5α−リダクターゼの阻害活性が十分でなかったり、全身的な副作用を有していたりする問題点があった。たとえば、プロゲステロンは強力なテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤であるが、主にその黄体ホルモン作用のために性欲減退、インポテンツ、女性型乳房などが引き起こされる。また、その他の阻害剤でも多くはステロイドまたはそれに類似した構造のものが多く、ホルモン様作用やその他好ましくない作用を有しているなどの問題点があった。
【0004】
本発明の目的は、優れたテストステロン−5α−リダクターゼ阻害作用を有し、他のホルモン様作用など好ましくない作用を有さない阻害剤を提供することである。
【0005】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的に鑑み鋭意検討を重ねた結果、セイモッコウの抽出物にその作用があることを見いだし、本発明を完成した。
【0006】
すなわち、本発明は、セイモッコウの抽出物を有効成分とするテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤である。
【0007】
セイモッコウはウマノスズクサ科のウマノスズクサ(Aristolochia debilis Sieb. et Zucc)またはその同属植物(例えばマルバウマノスズクサ(A. contorta Bung)、マンシュウウマノスズクサ(A. manshurica Kom.)、オオバウマノスズクサ(A. kaempferi Willd.)、アリストロキア ヘテロフィラ(A. heterophylla Hemsl))の根を通常は適当な大きさに切断し、乾燥させたものである。本発明でいうセイモッコウの抽出物は、下記の方法にて得られる。
【0008】
セイモッコウを好ましくは乾燥、粉砕した後、常温または加温下において水溶性溶剤中で浸漬する。ここで、水溶性溶剤とはたとえばイソプロピルアルコール、エタノールやメタノールなどのアルコール類、精製水、アルコールと精製水の混液である。このうち、アルコール類やアルコール類と精製水の混合液が最も望ましい。必要に応じて、抽出溶媒を留去してその残分を使用することもできる。抽出溶媒の量はそれぞれの生薬の乾燥重量に対して2〜5倍が望ましい。
【0009】
本発明のテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤を男性型脱毛やニキビの治療および予防に用いるためには、通常皮膚に塗布する外用剤、例えば、ローション剤、トニック剤、クリーム剤、軟膏剤、エアゾール剤に配合して用いる。配合量は、製剤全量に対し0.5〜20重量%、好ましくは1〜10重量%である。
【0010】
前記外用剤は、通常用いる基剤を使用して常法に従って製造することができる。
【0011】
これらの製剤の使用目的によっては、血管拡張剤(塩化カルプロニウム、ニコチン酸ベンジル、センブリ抽出物、ミノキシジル、オタネニンジンエキス、ビタミンEアセテート、トウガラシチンキなど)、副腎皮質ホルモン(酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾンなど)、抗ヒスタミン剤(塩酸ジフェンヒドラミン、塩酸イソチペンジルなど)、抗炎症剤(グリチルレチン酸、グアイアズレンなど)、角質溶解剤(尿素、サリチル酸など)、殺菌剤(グルコン酸クロルヘキシジン、イソプロピルメチルフェノール、第4級アンモニウム塩、ヒノキチオールなど)保湿剤(ヒアルロン酸ナトリウム、グリセリン、コンドロイチン硫酸、冬虫夏草抽出物、サフラン抽出物など)、油分(ミリスチン酸イソプロピル、レシチン、スクワランなど)、界面活性剤(ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステルなど)、多価アルコール(プロピレングリコール、グリセリン、マクロゴールなど)、抗酸化剤(ジブチルヒドロキシトルエン、イソプロピルガレートなど)、金属イオン封鎖剤(エチレンジアミンテトラアセテートまたはその塩など)、清涼化剤(メントール、カンフルなど)、色素、香料を本発明をそこなわない限り配合することができる。
【0012】
【発明の効果】
本発明により、効力が強く副作用の少ないテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤が提供された。従って、本発明のセイモッコウの抽出物を有効成分とする製剤は、男性型脱毛、ニキビおよび前立腺肥大症の治療または予防に有効である。
【0013】
【実施例】
以下、実施例および比較例に基づいて本発明をさらに詳細に説明する。
【0014】
実施例1〜5
乾燥生薬(セイモッコウ)に溶媒を加え、ときどき振り混ぜながら室温で7日間抽出し、得られた液を濾紙で濾過して生薬抽出液を得た。
【0015】
使用したセイモッコウの量、使用した溶媒の種類およびその量を表1に示した。
【0016】
【表1】

Figure 0003642073
【0017】
実施例6
実施例1で得た生薬抽出液を20重量部、プロピレングリコール5重量部、エタノール60重量部および精製水15重量部を混合してローション剤を調製した。
【0018】
実施例7
実施例1で得た生薬抽出液を5重量部、プロピレングリコール5重量部、エタノール75重量部および精製水15重量部を混合してローション剤を調製した。
【0019】
実施例8
実施例1で得た生薬抽出液を1重量部、プロピレングリコール5重量部、エタノール89重量部、精製水5重量部を混合してローション剤を調製した。
【0020】
実施例9
実施例5で得た生薬抽出液を20重量部、グリセリン5重量部およびエタノール75重量部を混合してローション剤を調製した。
【0021】
試験例[ラット前立腺ホモジネート系でのin vitro試験]
特開平2−221215号公報に記載の方法を参考にして行った。
【0022】
SD系ラット(雄、10〜12週令)をエーテル麻酔で致死せしめ、直ちに開腹して前立腺を摘出した。これに3倍量のpH7.2の0.1Mトリス・塩酸緩衝液(0.25Mのショ糖を含む)を加え、氷冷下でテフロンポッター型ホモジナイザーでホモジナイズした。得られたホモジネートをガーゼで濾過し、濾液を3000rpmで5分間分離し、上清を除去した。沈澱物に上記緩衝液を加え、同様に遠心分離を行い、沈澱物を得、これを摘出した前立腺重量と同量の上記緩衝液に懸濁して酵素液とした。なお、酵素液は−80℃で保存した。
【0023】
テストステロン−5α−リダクターゼ阻害試験は、酵素液50μl、上記緩衝液40μl、NADPH(還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸)1μg、4−14C−テストステロン1.5nmolに各試料溶液10μlを加え、37℃で90分間インキュベートした。直ちにジクロロメタン100μlを加え、振り混ぜた。ジクロロメタン層10μlを薄層クロマトグラフ用シリカゲルガラスプレートにスポットし、展開溶媒としてクロロホルム/メタノール/酢酸(99.2/0.6/0.2)を用いて室温で約15cm展開した。展開終了後、イメージングプレートを密着させ、暗所で2時間放置した後、イメージングプレートをバイオイメージングアナライザーにかけ、基質であるテストステロンの残存量と酵素反応により生成したDHTとアンドロスタンジオールの量を測定し、テストステロン−5α−リダクターゼ活性(%)を算出し、さらに阻害率(%)を求めた。
【0024】
【数1】
Figure 0003642073
【0025】
【数2】
Figure 0003642073
【0026】
なお、生薬未添加時の活性を算出するため、比較例として抽出に使用した溶媒、すなわち精製水、70%エタノールまたは無水エタノールをそれぞれ試料として試験した。また、イソプロピルアルコールを抽出溶媒として使用した場合には、抽出液からイソプロピルアルコールを完全に留去し、元のイソプロピルアルコールと同量の無水エタノールを加えたものを試料として用いた。
【0027】
表2に試験結果を示した。セイモッコウの抽出物は、明らかなテストステロン−5α−リダクターゼ阻害作用を示した(結果はいずれも3検体の平均である)。
【0028】
【表2】
Figure 0003642073
[0001]
[Industrial application fields]
The present invention relates to a testosterone-5α-reductase inhibitor comprising a citrus extract as an active ingredient.
[0002]
[Prior art]
It has been clarified that testosterone secreted into the blood is converted to dihydrotestosterone (DHT) under the action of testosterone-5α-reductase in tissues such as hair follicles, sebaceous glands, and prostate. Furthermore, it is known that in the congenital testosterone-5α-reductase deficiency, the prostate does not enlarge, male pattern hair loss does not develop, and acne can be mild. From these facts, it is becoming clear that it is this DHT that actually shows physiological actions in hair follicles, sebaceous glands, prostate, and the like. Therefore, it is considered that male pattern hair loss, acne and prostatic hypertrophy can be treated or prevented by inhibiting the action of testosterone-5α-reductase and weakening the production of DHT in tissues. Has come to be known. For example, progesterone and others are known as their inhibitors.
[0003]
[Problems to be solved by the invention]
However, the conventionally known inhibitors have problems that testosterone-5α-reductase has insufficient inhibitory activity or systemic side effects. For example, progesterone is a potent testosterone-5α-reductase inhibitor, but due to its progesterone action, it causes decreased libido, impotence, female breasts and the like. In addition, many other inhibitors have steroids or similar structures, and have problems such as hormone-like effects and other undesirable effects.
[0004]
The object of the present invention is to provide an inhibitor having an excellent testosterone-5α-reductase inhibitory action and not having an undesirable action such as other hormone-like action.
[0005]
[Means for Solving the Problems]
As a result of intensive studies in view of the above-mentioned object, the present inventors have found that an extract of Seimukko has its action and completed the present invention.
[0006]
That is, the present invention is a testosterone-5α-reductase inhibitor containing a citrus extract as an active ingredient.
[0007]
The primrose is Aristolochia debilis Sieb. Et Zucc or its genus (for example, A. contorta Bung, A. manshurica Kom., Will. Heterophila (A. heterophylla Hemsl) roots are usually cut to a suitable size and dried. The citrus extract referred to in the present invention is obtained by the following method.
[0008]
The cereal is preferably dried and pulverized and then immersed in a water-soluble solvent at room temperature or under heating. Here, the water-soluble solvent is, for example, isopropyl alcohol, alcohols such as ethanol and methanol, purified water, and a mixture of alcohol and purified water. Of these, alcohols or a mixture of alcohols and purified water are most desirable. If necessary, the extraction solvent can be distilled off and the residue can be used. The amount of the extraction solvent is preferably 2 to 5 times the dry weight of each herbal medicine.
[0009]
In order to use the testosterone-5α-reductase inhibitor of the present invention for the treatment and prevention of male pattern hair loss and acne, external preparations usually applied to the skin, such as lotions, tonics, creams, ointments, aerosols Used in combination. A compounding quantity is 0.5 to 20 weight% with respect to the formulation whole quantity, Preferably it is 1 to 10 weight%.
[0010]
The said external preparation can be manufactured in accordance with a conventional method using the base used normally.
[0011]
Depending on the intended use of these preparations, vasodilators (carpronium chloride, benzyl nicotinate, assembly extract, minoxidil, ginseng extract, vitamin E acetate, chili tincture, etc.), corticosteroids (hydrocortisone acetate, hydrocortisone butyrate propionate, etc.) ), Antihistamines (such as diphenhydramine hydrochloride, isothipentyl hydrochloride), anti-inflammatory agents (such as glycyrrhetinic acid, guaiazulene), keratolytic agents (such as urea, salicylic acid), fungicides (chlorhexidine gluconate, isopropylmethylphenol, quaternary ammonium salts, Hinokitiol, etc.) moisturizer (sodium hyaluronate, glycerin, chondroitin sulfate, cordyceps extract, saffron extract, etc.), oil (isopropyl myristate, lecithin) Squalane etc.), surfactant (polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene fatty acid ester, glycerin fatty acid ester etc.), polyhydric alcohol (propylene glycol, glycerin, macrogol etc.), antioxidant (dibutyl) Hydroxytoluene, isopropyl gallate, etc.), sequestering agents (ethylenediamine tetraacetate or salts thereof, etc.), cooling agents (menthol, camphor, etc.), dyes, and fragrances can be blended unless the present invention is impaired.
[0012]
【The invention's effect】
According to the present invention, a testosterone-5α-reductase inhibitor having high efficacy and few side effects was provided. Therefore, the preparation comprising the citrus extract of the present invention as an active ingredient is effective for treating or preventing male pattern hair loss, acne and benign prostatic hyperplasia.
[0013]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on examples and comparative examples.
[0014]
Examples 1-5
The solvent dry crude drug (Seimokkou) was added, and extracted at room temperature for 7 days with occasional shaking, the resulting solution in spent filtration with a filter paper to obtain a crude drug extract.
[0015]
Table 1 shows the amount of potato used, the type of solvent used and the amount thereof.
[0016]
[Table 1]
Figure 0003642073
[0017]
Example 6
A lotion preparation was prepared by mixing 20 parts by weight of the herbal extract obtained in Example 1, 5 parts by weight of propylene glycol, 60 parts by weight of ethanol and 15 parts by weight of purified water.
[0018]
Example 7
A lotion preparation was prepared by mixing 5 parts by weight of the herbal extract obtained in Example 1, 5 parts by weight of propylene glycol, 75 parts by weight of ethanol and 15 parts by weight of purified water.
[0019]
Example 8
A lotion preparation was prepared by mixing 1 part by weight of the herbal extract obtained in Example 1, 5 parts by weight of propylene glycol, 89 parts by weight of ethanol, and 5 parts by weight of purified water.
[0020]
Example 9
A lotion preparation was prepared by mixing 20 parts by weight of the herbal extract obtained in Example 5, 5 parts by weight of glycerin and 75 parts by weight of ethanol.
[0021]
Test example [In vitro test using rat prostate homogenate system]
This was carried out with reference to the method described in JP-A-2-221215.
[0022]
SD rats (male, 10-12 weeks old) were killed by ether anesthesia and immediately laparotomized to remove the prostate. Three times the amount of 0.1M Tris / HCl buffer (containing 0.25M sucrose) having a pH of 7.2 was added, and the mixture was homogenized with a Teflon potter type homogenizer under ice-cooling. The obtained homogenate was filtered through gauze, the filtrate was separated at 3000 rpm for 5 minutes, and the supernatant was removed. The above buffer solution was added to the precipitate, followed by centrifugation in the same manner to obtain a precipitate, which was suspended in the same amount of the buffer solution as the weight of the extracted prostate and used as an enzyme solution. The enzyme solution was stored at -80 ° C.
[0023]
Testosterone -5α- reductase inhibitors tested, the enzyme solution 50 [mu] l, the buffer 40 [mu] l, NADPH (reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate) 1 [mu] g, of each sample solution 10μl to 4-14 C-testosterone 1.5nmol addition, 37 Incubated for 90 minutes at 0C. Immediately 100 μl of dichloromethane was added and shaken. 10 μl of the dichloromethane layer was spotted on a silica gel glass plate for thin layer chromatography and developed at room temperature for about 15 cm using chloroform / methanol / acetic acid (99.2 / 0.6 / 0.2) as a developing solvent. After completion of the development, the imaging plate is brought into close contact and allowed to stand in the dark for 2 hours. The imaging plate is then subjected to a bioimaging analyzer to measure the residual amount of testosterone as a substrate and the amounts of DHT and androstanediol produced by the enzymatic reaction. Testosterone-5α-reductase activity (%) was calculated and the inhibition rate (%) was further determined.
[0024]
[Expression 1]
Figure 0003642073
[0025]
[Expression 2]
Figure 0003642073
[0026]
In addition, in order to calculate the activity when no crude drug was added, a solvent used for extraction as a comparative example, that is, purified water, 70% ethanol, or absolute ethanol was tested as a sample. When isopropyl alcohol was used as an extraction solvent, isopropyl alcohol was completely distilled off from the extract, and the same amount of absolute ethanol as the original isopropyl alcohol was added as a sample.
[0027]
Table 2 shows the test results. The citrus extract showed a clear testosterone-5α-reductase inhibitory effect (all results are the average of 3 samples).
[0028]
[Table 2]
Figure 0003642073

Claims (5)

セイモッコウの抽出物を有効成分とするテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤。A testosterone-5α-reductase inhibitor comprising, as an active ingredient, an extract of cedar moth. セイモッコウの抽出物の配合量が0.5〜20重量%である請求項1記載のテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤。2. The testosterone-5α-reductase inhibitor according to claim 1, wherein the blending amount of the extract of cereal is 0.5 to 20% by weight. 外用剤である請求項1記載のテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤。The testosterone-5α-reductase inhibitor according to claim 1, which is an external preparation. 抽出物が水溶性溶媒で抽出された抽出物である請求項1記載のテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤。The testosterone-5α-reductase inhibitor according to claim 1, wherein the extract is an extract extracted with a water-soluble solvent. 水溶性溶媒がアルコール類またはアルコール類と水の混合液である請求項4記載のテストステロン−5α−リダクターゼ阻害剤。The testosterone-5α-reductase inhibitor according to claim 4, wherein the water-soluble solvent is an alcohol or a mixture of alcohol and water.
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