【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、プロアントシアニジンを含有する食品組成物に関し、さらに詳細には、優れた肌質の改善効果を有する食品組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
プロアントシアニジンは、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４ジオールを構成単位とする重合度が２以上の縮重合体からなる縮合型タンニンであり、古くから肌の収斂性を高め、整肌効果を目的として使用されていた。近年、プロアントシアニジンは、抗酸化作用や美白効果などの種々の活性を有することから、食品や化粧品への応用が図られている（特許文献１および２）。例えば、タンパク質を配合した化粧料にも応用されている（特許文献３〜６）。また、特に溶液中におけるタンニンとタンパク質の安定性を高める種々の改良もなされている（特許文献７）。
【０００３】
一方、プロアントシアニジンは、タンパク質との結合能力が高い性質を持つため、ゼラチン高融点ゲルの製造やコラーゲンの架橋剤としても用いられてきている（特許文献８および９）。
【０００４】
しかし、プロアントシアニジンはタンパク質との結合能力が極めて高いため、プロアントシアニジンの抽出方法や植物種などによっては、タンパク質と結合して凝集沈殿や懸濁を生じる。そのため、製剤化が困難なだけでなく、コラーゲンやプロアントシアニジンが沈殿し、飲食物の製造工程における損失などが起こり、それぞれの有する生体への効果が非常に低下するという問題から、食品への応用範囲が限られていた。
【０００５】
【特許文献１】
特開昭６１−１６９８２号公報
【特許文献２】
特開平２−１３４３０９号公報
【特許文献３】
特開平１１−７５７０８号公報
【特許文献４】
特開２０００−６０４８２号公報
【特許文献５】
特開平６−３３６４２３号公報
【特許文献６】
特開２００２−２３８４９７号公報
【特許文献７】
特開２００２−５１７３４号公報
【特許文献８】
特開平２−１６３０４６号公報
【特許文献９】
特開２００１−８６３４号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、プロアントシアニジンによる生体への効果が損なわれず、さらにプロアントシアニジンが有するタンパク質の収斂性に関する問題を解決した食品組成物を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、驚くべきことに、２〜４量体のプロアントシアニジンと一定の分子量のペプチドとを組み合わせることによって、タンパク質の凝集沈殿が起こらず、その結果、それぞれの効果が相殺されずに得られることを見出して、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、プロアントシアニジンおよび平均分子量７，０００以下のタンパク質分解ペプチドを含有する、食品組成物を提供し、該プロアントシアニジンは、２〜４量体のプロアントシアニジンを含有する。
【０００９】
好ましい実施態様において、上記プロアントシアニジンは、５量体以上のプロアントシアニジン１重量部に対し、２〜４量体のプロアントシアニジンを１重量部以上の割合で含有する。
【００１０】
さらに好ましい実施態様では、上記ペプチドは、コラーゲン由来のペプチドである。
【００１１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の食品組成物について説明する。なお、以下に説明する構成は、本発明を限定するものでなく、本発明の趣旨の範囲内で種々改変することができることは当業者に明らかである。
【００１２】
本発明の食品組成物に用いられるプロアントシアニジンとは、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２以上の縮重合体からなる化合物群をいう。
【００１３】
このプロアントシアニジンとしては、重合度の低い縮重合体が多く含まれるものが好ましく用いられる。重合度の低い縮重合体としては、重合度が２〜３０の縮重合体（２〜３０量体）が好ましく、重合度が２〜１０の縮重合体（２〜１０量体）がより好ましく、重合度が２〜４の縮重合体（２〜４量体）が特に好ましい。この重合度が２〜４の縮重合体を、本明細書ではＯＰＣ（オリゴメリック・プロアントシアニジン；ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ）という。プロアントシアニジンは、ポリフェノール類の一種で、植物が作り出す強力な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果物の皮もしくは種の部分に集中的に含まれている。プロアントシアニジン、特にＯＰＣは、具体的には、松、樫、山桃などの樹皮、ブドウ、ブルーベリー、イチゴ、アボガド、ニセアカシア、コケモモの果実もしくは種子、大麦、小麦、大豆、黒大豆、カカオ、小豆、トチの実の殻、ピーナッツの薄皮、イチョウ葉などに含まれている。また、西アフリカのコーラナッツ、ペルーのラタニアの根、日本の緑茶にも、ＯＰＣが含まれることが知られている。ＯＰＣは、ヒトの体内では、生成することのできない物質である。
【００１４】
本発明の食品組成物に含有されるプロアントシアニジンとしては、上記の樹皮、果実もしくは種子の抽出物のような食品原料を使用することができる。特に、松樹皮の抽出物を用いることが好ましい。松樹皮は、プロアントシアニジンの中でもＯＰＣに富むため、プロアントシアニジンの原料として好ましく用いられる。
【００１５】
以下、ＯＰＣを豊富に含む松樹皮の抽出物を例に挙げて、プロアントシアニジンの調製方法を説明する。
【００１６】
松樹皮抽出物としては、フランス海岸松（Ｐｉｎｕｓ Ｍａｒｔｉｍａ）、カラマツ、クロマツ、アカマツ、ヒメコマツ、ゴヨウマツ、チョウセンマツ、ハイマツ、リュウキュウマツ、ウツクシマツ、ダイオウマツ、シロマツ、カナダのケベック地方のアネダなどのマツ目に属する植物の樹皮抽出物が好ましく用いられる。中でも、フランス海岸松（Ｐｉｎｕｓ Ｍａｒｔｉｍａ）の樹皮抽出物が好ましい。
【００１７】
フランス海岸松は、南仏の大西洋沿岸の一部に生育している海洋性松をいう。このフランス海岸松の樹皮は、プロアントシアニジン、有機酸、ならびにその他の生理活性成分などを含有し、その主要成分であるプロアントシアニジンに、活性酸素を除去する強い抗酸化作用があることが知られている。
【００１８】
松樹皮抽出物は、上記の松樹皮を水または有機溶媒で抽出して得られる。水を用いる場合には、温水または熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒としては、食品あるいは薬剤の製造に許容される有機溶媒が用いられ、例えば、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、および１，１，２−トリクロロエテンが挙げられる。これらの水および有機溶媒は単独で用いてもよいし、組合わせて用いてもよい。特に、熱水、含水エタノール、および含水プロピレングリコールが好ましく用いられる。
【００１９】
松樹皮からプロアントシアニジンを抽出する方法は、特に限定されないが、例えば、加温抽出法、超臨界流体抽出法などが用いられる。
【００２０】
超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素（笑気ガス）などが用いられ、二酸化炭素が好ましく用いられる。
【００２１】
超臨界流体抽出法では、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程と、目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程からなる。分離工程では、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤・吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。
【００２２】
また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、超臨界流体に、例えば、エタノール、プロパノール、ｎ−ヘキサン、アセトン、トルエン、その他の脂肪族低級アルコール類、脂肪族炭化水素類、芳香族炭化水素類、またはケトン類を２〜２０Ｗ／Ｖ％程度添加し、得られた抽出流体で超臨界流体抽出を行うことによって、ＯＰＣ、カテキン類（後述）などの目的とする被抽出物の抽出溶媒に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させる方法であり、効率的に松樹皮抽出物を得る方法である。
【００２３】
超臨界流体抽出法は、比較的低い温度で操作できるため、高温で変質・分解する物質にも適用できるという利点；抽出流体が残留しないという利点；および溶媒の循環利用が可能であり、脱溶媒工程などが省略でき、工程がシンプルになるという利点がある。
【００２４】
また、松樹皮からの抽出は、上記の方法以外に、液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、超臨界二酸化炭素還流法などにより行ってもよい。
【００２５】
松樹皮からの抽出は、複数の抽出方法を組み合わせてもよい。複数の抽出方法を組み合わせることにより、種々の組成の松樹皮抽出物を得ることが可能となる。
【００２６】
本発明の食品組成物に用いられる松樹皮抽出物は、具体的には、以下のような方法により調製されるが、これは例示であり、この方法に限定されない。
【００２７】
フランス海岸松の樹皮１ｋｇを、塩化ナトリウムの飽和水溶液３Ｌに入れ、１００℃にて３０分間抽出し、抽出液を得る（抽出工程）。その後、抽出液を濾過し、得られる不溶物を塩化ナトリウムの飽和溶液５００ｍｌで洗浄し、洗浄液を得る（洗浄工程）。この抽出液と洗浄液を合わせて、松樹皮の粗抽出液を得る。
【００２８】
次いで、この粗抽出液に酢酸エチル２５０ｍｌを添加して分液し、酢酸エチル層を回収する工程を５回行う。回収した酢酸エチル溶液を合わせて、無水硫酸ナトリウム２００ｇに直接添加して脱水する。その後、この酢酸エチル溶液を濾過し、濾液を元の５分の１量になるまで減圧濃縮する。濃縮された酢酸エチル溶液を２Ｌのクロロホルムに注ぎ、攪拌して得られる沈殿物を濾過により回収する。その後、この沈殿物を酢酸エチル１００ｍｌに溶解した後、再度１Ｌのクロロホルムに添加して沈殿させる操作を２回繰り返す洗浄工程を行う。この方法により、例えば、２〜４量体のＯＰＣを２０重量％以上含み、かつカテキン類を５重量％以上含有する、約５ｇの松樹皮抽出物が得られる。
【００２９】
上記松樹皮のような原料植物に由来する抽出物は、ＯＰＣを乾燥重量換算で好ましくは２０重量％以上、より好ましくは３０重量％以上含有する。このようにＯＰＣを高い割合で含有する原料として、松樹皮抽出物が好ましく用いられる。
【００３０】
なお、上記のように水やエタノールを用いて植物体から抽出した抽出物中には、５量体以上のプロアントシアニジンも含有するが、プロアントシアニジンの極性溶媒への溶解度から、そのほとんどは１０〜２０量体以下である。
【００３１】
上記松樹皮抽出物のようにＯＰＣを含有するプロアントシアニジンは、コラーゲンペプチドと凝集沈殿や懸濁を生じにくい。ＯＰＣを多く含有するほど沈殿は生じにくく、通常は２０重量％以上、好ましくは３０重量％以上、より好ましくは５０重量％以上含有するプロアントシアニジンが用いられる。特に、５量体以上のプロアントシアニジン１重量部に対し、ＯＰＣを１重量部以上の割合で含有するプロアントシアニジンが好ましい。５量体以上のプロアントシアニジンが含有されているにもかかわらず、凝集沈殿が起こらない理由は明らかではないが、上記所定の比率以上でＯＰＣを含有する場合は、プロアントシアニジンとタンパク質との凝集沈殿や懸濁を防止することができる。
【００３２】
上記植物抽出物には、プロアントシアニジン、特にＯＰＣとともにカテキン（ｃａｔｅｃｈｉｎ）類が上記原料植物抽出物中に５重量％以上含まれていることが好ましい。カテキン類とは、ポリヒドロキシフラバン−３−オールの総称である。カテキン類としては、（＋）−カテキン、（−）−エピカテキン、（＋）−ガロカテキン、（−）−エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレートなどが知られている。上記松樹皮のような原料植物由来の抽出物からは、狭義のカテキンといわれている（＋）−カテキンの他、ガロカテキン、アフゼレキン、ならびに（＋）−カテキンまたはガロカテキンの３−ガロイル誘導体が単離されている。カテキン類には、発癌抑制作用、動脈硬化予防作用、脂肪代謝異常の抑制作用、血圧上昇抑制作用、血小板凝集抑制作用、抗アレルギー作用、抗ウイルス作用、抗菌作用、虫歯予防作用、口臭防止作用、腸内細菌叢正常化作用、活性酸素やフリーラジカルの消去作用、抗酸化作用などがあることが知られている。カテキン類には、血糖の上昇を抑制する抗糖尿病効果があることが知られている。カテキン類は、ＯＰＣの存在下で水溶性が増すと同時に、ＯＰＣを活性化する性質があり、ＯＰＣとともに摂取することによって、ＯＰＣの作用を増強する。
【００３３】
カテキン類は、上記原料植物抽出物に含まれていても、タンパク質と反応せず、そしてＯＰＣの溶解性や機能を向上させるため、プロアントシアニジン１重量部に対し、０．１重量部以上含有されていることが好ましい。より好ましくは、ＯＰＣを２０重量％以上含有する原料植物抽出物に、カテキン類が５重量％以上含有されるように調製される。例えば、松樹皮抽出物のカテキン類含量が５重量％未満の場合、５重量％以上となるようにカテキン類を添加してもよい。カテキン類を５重量％以上含有し、かつＯＰＣを２０重量％以上含有する松樹皮抽出物を用いることが最も好ましい。
【００３４】
プロアントシアニジン、特にＯＰＣは、上述のように抗酸化物質であるため、ガン・心臓病・脳血栓などの成人病の危険率を低下する効果、関節炎・アトピー性皮膚炎・花粉症などのアレルギー体質の改善効果などを有することが知られている。
【００３５】
さらにＯＰＣは、抗酸化作用のほか、口腔内のバクテリア増殖を抑制してプラーク（歯こう）を減少させる効果、血管の弾力性を回復させる効果、肌質を改善させる効果、コラーゲンの増強効果、高脂血症改善効果、血液中でのリポたんぱくが活性酸素によりダメージを受けるのを防止して、損傷した脂肪が血管の内壁に凝集し、コレステロールが付着することを防止する効果、活性酸素によって分解されたビタミンＥを再生させる効果、ビタミンＥの増強剤としての効果などを有することが知られている。この中でも、血管の弾力性を回復させる効果により血流が改善され得る。さらにコラーゲンの増強効果との相乗作用によって、肌質も改善され得る。
【００３６】
本発明の食品組成物は、プロアントシアニジンを、好ましくは組成物中に乾燥重量換算で０．００００１重量％〜５０重量％、より好ましくは０．００１重量％〜４０重量％、さらに好ましくは０．０１重量％〜２０重量％含有する。
【００３７】
本発明の食品組成物のもう一つの必須成分は、タンパク質を分解して得られる平均分子量が７，０００以下のペプチド（本明細書において、タンパク質分解ペプチドという）である。タンパク質分解ペプチドは、有機合成によって得られたペプチドであってもよい。タンパク質分解ペプチドとしては、各種の動植物性タンパク質を酸、アルカリ、または酵素を用いて分解したものであれば特に限定されるものではない。原料となるタンパク質としては、例えば、牛、豚、鶏などの畜肉類、魚類、獣乳、卵などに由来する動物性タンパク質；例えば、大豆、小麦、トウモロコシ、えんどう豆などに由来する植物性タンパク質が挙げられる。特に、原料タンパク質としてはコラーゲンが好ましく、そしてタンパク質分解ペプチドとしては、その分解物であるコラーゲンペプチドが最も好ましい。
【００３８】
コラーゲンは、動物の結合組織を構成する主要タンパク質であり、骨、腱、皮膚、血管壁などに多く含まれる。分子内に１または複数の３重らせん構造を有し、構成するポリペプチド鎖のアミノ酸配列が異なる種々のタイプが存在する。コラーゲンの変性物であるゼラチンは、コラーゲンを含む原料を温（熱）水抽出することにより得られる分子量３０万から数万程度の水溶性タンパク質であり、アルカリ処理ゼラチン（等電点４．８〜５．３）と酸処理ゼラチン（等電点７〜９）とがある。
【００３９】
コラーゲンまたはゼラチンからのコラーゲンペプチドの具体的な調製方法を、以下に説明する。まず、牛、豚などの皮または骨を、アルカリ溶液に２〜３ヶ月浸漬するアルカリ処理または希塩酸などに短期間浸漬する酸処理を施して、原料に含まれる不純物を除去し、かつ抽出を容易にするための前処理を行う。例えば、原料が牛骨である場合は、骨の中にリン酸カルシウムなどの無機質が含まれているため、予め希塩酸に漬けて無機質を除去し、これを温（熱）水抽出することによりゼラチンを得る。温（熱）水抽出は、一般には、最初の抽出温度は５０〜６０℃で、２回目以降は抽出温度を徐々に上げ、最終的には煮沸させる。次いで、得られたゼラチンを、通常用いられる酸あるいは酵素で加水分解することにより、コラーゲンペプチドを得ることができる。
【００４０】
こうして得られたコラーゲンペプチドは、平均分子量が約７，０００以下、好ましくは約６，０００以下である。このような分子量を有するコラーゲンペプチドのうち、ＯＰＣとともに溶液中で安定に溶解し、そしてタンパク質の沈殿を防止するという効果を得るためには、分子量が約２００以上、好ましくは約３，０００以上、より好ましくは約５，０００以上のペプチドを用いる。平均分子量が７，０００より大きくなると、高分子のプロアントシアニジン（１０〜３０量体）が結合し、沈殿や懸濁を生じやすくなる。
【００４１】
このような分子量のコラーゲンペプチドは、市販のものを容易に入手することができる。例えば、動物性コラーゲン由来のコラーゲンペプチドとしては、ニッピペプタイドＰＢＦ、ニッピペプタイドＰＲＡ（いずれも（株）ニッピ製）、ＳＣＰ−５０００、ＳＣＰ−３１００（いずれも新田ゼラチン（株）製）、コラーゲンペプチドＤＳ（協和ハイフーズ株式会社製）、ファルコニックスＣＴＰ（一丸ファルコス株式会社製）などが挙げられる。このような動物由来のコラーゲンペプチド以外では、動物性コラーゲンとアミノ酸組成が類似しているものが好ましく、例えば、コラーゲン類似ペプチドとして、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ．）由来ペプチドが挙げられる。
【００４２】
本発明の食品組成物は、タンパク質分解ペプチド、好ましくはコラーゲンペプチドを、組成物中に乾燥重量換算で好ましくは０．００００１重量％〜９０重量％、より好ましくは０．０００１重量％〜５０重量％含有する。
【００４３】
本発明の食品組成物には、上記プロアントシアニジンおよびタンパク質分解ペプチド以外に、医薬部外品、化粧料などに通常使用される他の成分を、該組成物の効果を損なわない範囲で含有してもよい。このような成分としては、例えば、水、他の薬効成分、他の油剤、保湿剤、界面活性剤、紫外線吸収剤、吸収促進剤、香料、色素、保存剤、増粘剤、キレート剤、防腐防黴剤などを挙げることができる。ここで、他の薬効成分としては、活性酸素除去剤、抗酸化剤、消炎鎮痛剤、抗ヒスタミン剤、止痒剤、殺菌剤、ビタミン剤、ホルモン剤などが挙げられる。
【００４４】
また、プロアントシアニジンの安定性を高める目的で、酸化防止剤を添加しても良い。これにより、体内のタンパク質や脂質の酸化を防止し、肌質を改善および保護する効果を得ることができる。
【００４５】
酸化防止剤としては、ビタミンＡなどのカロテノイド類、ビタミンＢ類、アスコルビン酸、ビタミンＥ、これらの誘導体またはこれらの塩、Ｌ−システインおよびこれらの誘導体やその塩、リボフラビン、ＳＯＤ、マンニトール、トリプトファン、ヒスチジン、ケルセチン、没食子酸およびその誘導体、茶抽出物、およびグルタチオン酵母抽出物などの抽出物が挙げられる。
【００４６】
この中でも、アスコルビン酸は、プロアントシアニジンの安定性を高めるだけでなく、肌へ相乗的に効果を発揮し、肌質の改善効果（例えば、ハリやツヤが良くなる効果）および血管保護効果も高める。アスコルビン酸を添加する場合は、プロアントシアニジンに対して、重量比で、好ましくは１：０．１〜５０、より好ましくは１：０．２〜２０となるように、本発明の食品組成物に含有され得る。なお、アスコルビン酸の量は、上記比より多くてもかまわない。
【００４７】
本発明の食品組成物は、通常用いられる方法により、プロアントシアニジンおよびタンパク質分解ペプチドと他の成分とを混合して調製することができ、錠剤、粉末、液体の形態で、飲料などの食品として使用できる。
【００４８】
例えば、本発明の食品組成物は、、必要に応じて、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料などの添加剤と混合され得る。例えば、ローヤルゼリー、ビタミン、プロテイン、卵殻カルシウムなどのカルシウム、キトサン、レシチン、クロレラ末、アシタバ末、モロヘイヤ末などの栄養成分としての食品添加物；ステビア末、抹茶パウダー、レモンパウダー、はちみつ、還元麦芽糖、乳糖、糖液などの調味料が混合され得る。そしてこれらは、ハードカプセル、ソフトカプセルなどのカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤などに、あるいは粉末状、顆粒状、茶状、ティーバッグ状、飴状、液体、ペースト状などの形態に成形され得る。これらは、形状または好みに応じて、そのまま飲食してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて飲んでも良い。
【００４９】
本発明の食品組成物の一日の摂取量は、特に限定されず、好ましくは、プロアントシアニジンとして０．０２ｇ〜１ｇの範囲内である。この範囲内のプロアントシアニジンに対して適切なタンパク質分解ペプチドの量は、好ましくは０．０４ｇ〜０．５ｇである。
【００５０】
本発明の食品組成物は、適切な量を摂取した場合、肌質の改善効果および血流改善効果を有する。特に、ＯＰＣが乾燥重量換算で２０重量％以上含有される抽出物をプロアントシアニジンとして用いた場合、特に優れた効果が得られる。このように、本発明の食品組成物は、健康食品として利用され得る。
【００５１】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明がこの実施例により制限されないことはいうまでもない。
【００５２】
（プロアントシアニジンの調製）
松樹皮抽出物（２〜４量体：４０重量％、５量体以上：８．７重量％、カテキン：５．１重量％、商標名：フラバンジェノール、株式会社東洋新薬）２０ｇを、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０（ファルマシアバイオテク株式会社製）に供して分離し、乾燥粉末重量で７．６ｇの２〜４量体および１．６ｇの５量体以上のプロアントシアニジンを回収した。得られた５量体以上のプロアントシアニジン１ｇを、上記の松樹皮抽出物の粉末２ｇと混合し、５量体以上のプロアントシアニジンを多く含む松樹皮抽出物（２〜４量体：２７重量％、５量体以上：３９重量％、カテキン１．７重量％）を調製した。これらの松樹皮抽出物を、最終濃度が０．２重量％となるように水溶液へ溶解した。
【００５３】
なお、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０による分離は、以下の条件で２回行った。まず、水で膨潤させたＳｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０をカラム体積で５００ｍＬとなるように５０×５００ｍｍのカラムに充填し、５００ｍＬのエタノールで洗浄した。上記松樹皮抽出物１０ｇを２００ｍＬのエタノールに溶解し、これをカラムに通液して吸着させた後、１００〜８０％（ｖ／ｖ）エタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、１００ｍＬずつ分取した。各画分について、シリカゲルクロマトグラフィー（ＴＬＣ）により、２〜４量体のＯＰＣの各標品（２量体：プロアントシアニジンＢ−２（Ｒｆ値：０．６）、３量体：プロアントシアニジンＣ−１（Ｒｆ値：０．４）、４量体：シンナムタンニンＡ２（Ｒｆ値：０．２））を指標として、ＯＰＣの溶出を検出した。ＴＬＣの条件は、以下のとおりである：
ＴＬＣ：シリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．， Ｉｎｃ．製）
展開溶媒：ベンゼン／ギ酸エチル／ギ酸（２／７／１）
検出試薬：硫酸およびアニスアルデヒド硫酸
サンプル量：各１０μＬ
【００５４】
ＯＰＣが検出された画分を集め、凍結乾燥して粉末を得た。次いで、ＯＰＣが検出されなくなったカラムに、５０％（ｖ／ｖ）水−アセトン混合溶媒１０００ｍＬを通液し、５量体以上のプロアントシアニジンを溶出させ、回収した画分を凍結乾燥させて粉末を得た。
【００５５】
（コラーゲンおよびコラーゲンペプチドの調製）
コラーゲン（平均分子量３０万：株式会社高研製）、ニッピペプタイドＰＡ−１００（平均分子量１０，０００：株式会社ニッピ製）、コラーゲンペプチドＤＳ（平均分子量７，０００：協和ハイフーズ社製）、ＳＣＰ−５０００（平均分子量５，０００：新田ゼラチン株式会社製）、ファルコニックスＣＴＰ（平均分子量３，０００：一丸ファルコス株式会社製）、ニッピペプタイドＰＡ−１０（平均分子量１，０００：株式会社ニッピ製）、およびグリシン（分子量７５：和光純薬工業株式会社製）を用いて、これらのコラーゲン、コラーゲンペプチド、またはアミノ酸が１０．０重量％となるように水溶液を各１０ｍＬずつ調製した。
【００５６】
（実施例１：凝集沈殿評価）
上記のように調製したコラーゲン、コラーゲンペプチド、またはアミノ酸溶液各１ｍＬに、上記プロアントシアニジン溶液１ｍＬを混合し、１週間室温で放置し、１週間後に沈殿および懸濁の有無を目視により観察した。結果を表１に示す。
【００５７】
【表１】
【００５８】
表１からわかるように、５量体以上のプロアントシアニジンと分子量のコラーゲンペプチドまたはコラーゲンとの混合液では、いずれも懸濁または沈殿が観察された。これに対して、２〜４量体のプロアントシアニジンと分子量７，０００以下のコラーゲンペプチドまたはアミノ酸との混合液では、ほとんど懸濁が見られなかった。２〜４量体の割合が多いプロアントシアニジンを含む松樹皮抽出物では沈殿が見られなかった。また、平均分子量３００，０００のコラーゲンを用いた場合は、ゲル化した固形分が析出した。このように、２〜４量体のプロアントシアニジン（ＯＰＣ）またはプロアントシアニジンとしてＯＰＣを多く含む松樹脂抽出物は、分子量７，０００以下のコラーゲンペプチドと懸濁または沈殿を生じず、混合物溶液として安定であることがわかった。
【００５９】
（実施例２：皮膚改善効果）
上記松樹皮抽出物の最終濃度が０．２重量％およびコラーゲンペプチドの最終濃度が５重量％となるように、表２に記載の組み合わせで水溶液を調製し、滅菌のために０．４５μｍフィルターで濾過して、飲料１〜３を得た。なお、濾過前の飲料３は、やや懸濁が見られた。
【００６０】
【表２】
【００６１】
３週齢のモルモット（日本エスエルシー株式会社）に、一般の固形飼料（ＲＣ４；オリエンタル酵母株式会社）を与えて１週間馴化させた後、総無作為化法により１群５匹ずつ４群に割り振った。各群のモルモットに、上記のように調製した飲料１〜３を、１日当たり１ｍＬ、ゾンデを用いて２８日間強制経口投与した。対照として、精製水を投与した群を設けた。試験期間中、飼料および水は自由摂取させた。最終投与終了後に、被験動物の背部皮膚中央部を剥離摘出し（３ｃｍ×３ｃｍ）、６０℃にて一晩乾燥させた。乾燥させた皮膚を破砕し、その５０ｍｇを５ｍＬの６Ｍ塩酸に添加し、ヒーティングブロックを用いて１１０℃にて２４時間加熱して加水分解した。次いで、この加水分解物について、クロラミンＴ法により、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）含量を測定した。Ｈｙｐは、コラーゲンに多く含まれており、Ｈｙｐ含量が高ければ、コラーゲンが生成されていることを示す指標となる。結果を図１に示す。
【００６２】
図１からわかるように、飲料１〜３を投与した群の方が、わずかではあるがＨｙｐ量が多かった。このことは、投与群の方が、皮膚中のコラーゲン量が多く、皮膚に新陳代謝が促進されたと思われる。
【００６３】
（実施例３：血流改善効果）
２０〜５０歳の健常人を１群２０人の４群にランダムに割り振った。まず、摂取前に血流量を測定し、次いで、被験者に上記飲料１〜３または水を２００ｍＬ摂取させ、摂取後１時間後に再度血流量を測定した。血流量は、血流計（レーザー血流画像化装置ＰＩＭ ＩＩ；Ｓｗｅｄｅｎ Ｐｅｒｍｉｅｄ社）を用いて右前腕部の皮下の血流量を測定した。結果を表３に示す。表の値は、平均値±標準誤差であり、数値が大きいほど、血流量が多いことを示す。
【００６４】
【表３】
【００６５】
表３に示すように、飲料１〜３はいずれも、血流量が増加しており、血流改善効果が見られた。また、飲料１および２の方が、飲料３よりも血流量が多くなっていることから、凝集沈殿や懸濁によってプロアントシアニジンの効果が相殺されることなく十分に発揮されていることがわかる。
【００６６】
【発明の効果】
本発明の食品組成物は、プロアントシアニジンとタンパク質分解ペプチドとの凝集沈殿が生じにくいため、それぞれの有する作用・効果が損なわれることなく発揮され得る。そのため、例えば、プロアントシアニジンおよびコラーゲンに由来する肌質の改善効果や血流改善効果が、従来のものよりも優れている。
【図面の簡単な説明】
【図１】各飲料を投与した群のモルモットにおける、皮膚のＨｙｐ量を示すグラフである。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to a food composition containing proanthocyanidins, and more particularly, to a food composition having an excellent skin quality improving effect.
[0002]
[Prior art]
Proanthocyanidin is a condensed tannin composed of a condensation polymer having a degree of polymerization of 2 or more and having flavan-3-ol and / or flavan-3,4 diol as a constitutional unit. It was used for skin effects. In recent years, proanthocyanidins have various activities such as an antioxidant effect and a whitening effect, and thus have been applied to foods and cosmetics (Patent Documents 1 and 2). For example, it is applied to cosmetics containing a protein (Patent Documents 3 to 6). In addition, various improvements have been made particularly to enhance the stability of tannin and protein in a solution (Patent Document 7).
[0003]
On the other hand, since proanthocyanidins have a property of high binding ability to proteins, they have been used also for producing gelatin high melting point gels and as a crosslinking agent for collagen (Patent Documents 8 and 9).
[0004]
However, since proanthocyanidin has an extremely high binding ability to a protein, it binds to the protein and causes coagulation and precipitation or suspension depending on the proanthocyanidin extraction method or plant species. Therefore, not only is it difficult to formulate, but also collagen and proanthocyanidin precipitate, causing losses in the manufacturing process of foods and drinks, and their effects on living organisms are greatly reduced. The range was limited.
[0005]
[Patent Document 1]
JP-A-61-16982
[Patent Document 2]
JP-A-2-134309
[Patent Document 3]
JP-A-11-75708
[Patent Document 4]
JP 2000-60482 A
[Patent Document 5]
JP-A-6-336423
[Patent Document 6]
JP-A-2002-238497
[Patent Document 7]
JP-A-2002-51734
[Patent Document 8]
JP-A-2-163046
[Patent Document 9]
JP 2001-8634 A
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a food composition which does not impair the effect of proanthocyanidin on a living body and further solves the problem related to the astringency of a protein possessed by proanthocyanidin.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors surprisingly found that by combining 2 to tetramer proanthocyanidins with a peptide of a constant molecular weight, protein aggregation and precipitation did not occur, and as a result, their effects were not offset. The inventors have found that the present invention can be obtained and completed the present invention.
[0008]
That is, the present invention provides a food composition containing proanthocyanidin and a proteolytic peptide having an average molecular weight of 7,000 or less, wherein the proanthocyanidin contains a dimeric to tetrameric proanthocyanidin.
[0009]
In a preferred embodiment, the proanthocyanidins contain 2 to 4 mer proanthocyanidins in a proportion of 1 part by weight or more based on 1 part by weight of proanthocyanidins of 5 or more mers.
[0010]
In a further preferred embodiment, the peptide is a collagen-derived peptide.
[0011]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Hereinafter, the food composition of the present invention will be described. It is apparent to those skilled in the art that the configuration described below does not limit the present invention and can be variously modified within the scope of the present invention.
[0012]
The proanthocyanidin used in the food composition of the present invention refers to a group of compounds composed of a polycondensate having flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol as a structural unit and having a degree of polymerization of 2 or more.
[0013]
As this proanthocyanidin, one containing a large amount of a condensation polymer having a low degree of polymerization is preferably used. As the condensation polymer having a low degree of polymerization, a condensation polymer having a degree of polymerization of 2 to 30 (2 to 30 mer) is preferable, and a condensation polymer having a degree of polymerization of 2 to 10 (2 to 10 mer) is more preferable. Polycondensates having a degree of polymerization of 2 to 4 (2 to 4 mer) are particularly preferred. This polycondensate having a degree of polymerization of 2 to 4 is referred to herein as OPC (oligomeric proanthocyanidin). Proanthocyanidins, a type of polyphenol, are potent antioxidants produced by plants and are concentrated in plant leaves, bark, fruit bark or seed parts. Proanthocyanidins, particularly OPCs, specifically, pine, oak, bark such as mountain peach, grape, blueberry, strawberry, avocado, pseudocacia, lingonberry fruit or seed, barley, wheat, soybean, black soybean, cacao, red bean, It is found in conker shells, peanut skins and ginkgo leaves. It is also known that cola nuts in West Africa, roots of Ratania in Peru, and green tea in Japan also contain OPC. OPC is a substance that cannot be produced in the human body.
[0014]
As the proanthocyanidins contained in the food composition of the present invention, food raw materials such as the above bark, fruit or seed extracts can be used. In particular, it is preferable to use an extract of pine bark. Pine bark is preferably used as a raw material for proanthocyanidins because it is rich in OPC among proanthocyanidins.
[0015]
Hereinafter, a method for preparing proanthocyanidins will be described with reference to an example of a pine bark extract rich in OPC.
[0016]
Pine bark extracts include Pinus Martina, Larch, Japanese black pine, Japanese red pine, Himekomatsu, Japanese pine, Korean pine, Himatsu, Ryukyu pine, Utsukushimatsu, Daiomatsu, Shiromatsu, and Aneda in Quebec, Canada. Is preferably used. Above all, bark extracts of French pine (Pinus Martina) are preferred.
[0017]
French pine is a marine pine that grows on part of the Atlantic coast of southern France. The bark of this French shore pine contains proanthocyanidins, organic acids, and other physiologically active ingredients.It is known that proanthocyanidins, the main component, have a strong antioxidant action to remove active oxygen. I have.
[0018]
The pine bark extract is obtained by extracting the pine bark with water or an organic solvent. When using water, warm water or hot water is used. As the organic solvent used for the extraction, an organic solvent acceptable for the production of foods or drugs is used. For example, methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, acetone, hexane, cyclohexane , Propylene glycol, aqueous ethanol, aqueous propylene glycol, ethyl methyl ketone, glycerin, methyl acetate, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, edible fat, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, and 1,1,2- Trichloroethene. These water and organic solvent may be used alone or in combination. In particular, hot water, aqueous ethanol, and aqueous propylene glycol are preferably used.
[0019]
The method of extracting proanthocyanidins from pine bark is not particularly limited, and for example, a warm extraction method, a supercritical fluid extraction method, or the like is used.
[0020]
The supercritical fluid extraction method is a method of performing extraction using a supercritical fluid which is a fluid in a state exceeding a critical point (critical temperature, critical pressure) of a gas-liquid of a substance. As the supercritical fluid, carbon dioxide, ethylene, propane, nitrous oxide (laughing gas) and the like are used, and carbon dioxide is preferably used.
[0021]
The supercritical fluid extraction method includes an extraction step of extracting a target component with a supercritical fluid, and a separation step of separating the target component from the supercritical fluid. In the separation step, any of extraction separation by pressure change, extraction separation by temperature change, and extraction separation using an adsorbent / absorbent may be performed.
[0022]
Further, supercritical fluid extraction by an entrainer addition method may be performed. This method uses, for example, ethanol, propanol, n-hexane, acetone, toluene, other aliphatic lower alcohols, aliphatic hydrocarbons, aromatic hydrocarbons, or ketones in a supercritical fluid at 2 to 20 W. / V%, and supercritical fluid extraction is performed with the obtained extraction fluid, thereby dramatically increasing the solubility of the target extract such as OPC and catechins (described below) in the extraction solvent, or This is a method for enhancing the selectivity of separation and a method for efficiently obtaining a pine bark extract.
[0023]
The supercritical fluid extraction method can be operated at a relatively low temperature, so that it can be applied to a substance that is degraded or decomposed at a high temperature; an advantage that no extracted fluid remains; and a solvent can be recycled and a solvent can be removed. There is an advantage that the steps can be omitted and the steps are simplified.
[0024]
Extraction from pine bark may be performed by a liquid carbon dioxide batch method, a liquid carbon dioxide reflux method, a supercritical carbon dioxide reflux method, or the like, in addition to the above method.
[0025]
Extraction from pine bark may be a combination of multiple extraction methods. By combining a plurality of extraction methods, pine bark extracts having various compositions can be obtained.
[0026]
The pine bark extract used in the food composition of the present invention is specifically prepared by the following method, but this is merely an example and the present invention is not limited to this method.
[0027]
1 kg of bark of French pine is added to 3 L of a saturated aqueous solution of sodium chloride and extracted at 100 ° C. for 30 minutes to obtain an extract (extraction step). Thereafter, the extract is filtered and the resulting insolubles are washed with 500 ml of a saturated solution of sodium chloride to obtain a washing solution (washing step). The extract and the washing solution are combined to obtain a crude extract of pine bark.
[0028]
Next, 250 ml of ethyl acetate is added to the crude extract, liquid separation is performed, and the step of collecting the ethyl acetate layer is performed five times. The collected ethyl acetate solutions are combined, directly added to 200 g of anhydrous sodium sulfate, and dehydrated. Thereafter, the ethyl acetate solution is filtered, and the filtrate is concentrated under reduced pressure to 1/5 of the original amount. The concentrated ethyl acetate solution is poured into 2 L of chloroform, and the precipitate obtained by stirring is collected by filtration. Thereafter, a washing step of repeating twice the operation of dissolving the precipitate in 100 ml of ethyl acetate and adding the precipitate to 1 L of chloroform again for precipitation is performed. According to this method, for example, about 5 g of a pine bark extract containing 20% by weight or more of OPC of 2 to 4 mer and 5% by weight or more of catechins is obtained.
[0029]
The extract derived from a raw material plant such as the pine bark contains OPC in an amount of preferably 20% by weight or more, more preferably 30% by weight or more in terms of dry weight. A pine bark extract is preferably used as a raw material containing a high proportion of OPC.
[0030]
In addition, the extract extracted from the plant using water or ethanol as described above also contains pentamer or more proanthocyanidins, but most of them are 10 to 10 from the solubility of proanthocyanidins in polar solvents. Not more than 20 mer.
[0031]
Proanthocyanidins containing OPC like the above-mentioned pine bark extract hardly cause aggregation precipitation and suspension with collagen peptide. As the OPC content increases, precipitation hardly occurs. Usually, proanthocyanidins containing 20% by weight or more, preferably 30% by weight or more, more preferably 50% by weight or more are used. In particular, a proanthocyanidin containing OPC in an amount of 1 part by weight or more per 1 part by weight of a proanthocyanidin of pentamer or more is preferable. It is not clear why coagulation and sedimentation do not occur in spite of containing pentamer or more of proanthocyanidin, but when OPC is contained at the above-mentioned predetermined ratio or more, coagulation and sedimentation of proanthocyanidin and protein And suspension can be prevented.
[0032]
The plant extract preferably contains 5% by weight or more of catechins together with proanthocyanidins, particularly OPC, in the raw material plant extract. Catechins are a general term for polyhydroxyflavan-3-ols. As catechins, (+)-catechin, (−)-epicatechin, (+)-gallocatechin, (−)-epigallocatechin, epigallocatechin gallate, epicatechin gallate, and the like are known. From an extract derived from a raw material plant such as the pine bark, in addition to (+)-catechin, which is said to be catechin in a narrow sense, gallocatechin, afzelequin, and a 3-galloyl derivative of (+)-catechin or gallocatechin are isolated. Have been. Catechins have a carcinogenesis-suppressing action, an arteriosclerosis-preventing action, a fat-metabolism-suppressing action, a blood-pressure-inhibiting action, a platelet-aggregation-inhibiting action, an antiallergic action, an antiviral action, an antibacterial action, a caries preventive action, a bad breath preventing action, It is known that it has an intestinal flora normalizing action, a scavenging action of active oxygen and free radicals, an antioxidant action, and the like. It is known that catechins have an antidiabetic effect of suppressing an increase in blood sugar. Catechin has the property of activating OPC at the same time as increasing water solubility in the presence of OPC, and when taken together with OPC, enhances the action of OPC.
[0033]
Catechins, even if contained in the above-mentioned raw material plant extract, do not react with proteins and, in order to improve the solubility and function of OPC, are contained in an amount of 0.1 part by weight or more based on 1 part by weight of proanthocyanidin. Is preferred. More preferably, it is prepared so that the catechins are contained at 5% by weight or more in the raw plant extract containing 20% by weight or more of OPC. For example, when the catechin content of the pine bark extract is less than 5% by weight, the catechins may be added so as to be 5% by weight or more. It is most preferable to use a pine bark extract containing 5% by weight or more of catechins and 20% by weight or more of OPC.
[0034]
As described above, proanthocyanidins, particularly OPCs, are antioxidants, and therefore have an effect of reducing the risk of adult diseases such as cancer, heart disease and cerebral thrombosis, and have an allergic constitution such as arthritis, atopic dermatitis and hay fever. It is known to have an improvement effect and the like.
[0035]
Furthermore, OPC has an antioxidant effect, an effect of suppressing bacterial growth in the oral cavity to reduce plaque (gum), an effect of restoring elasticity of blood vessels, an effect of improving skin quality, an effect of enhancing collagen, The effect of improving hyperlipidemia, preventing lipoproteins in the blood from being damaged by active oxygen, preventing the damaged fat from aggregating on the inner wall of blood vessels, and preventing cholesterol from adhering. It is known to have an effect of regenerating decomposed vitamin E, an effect as a vitamin E enhancer, and the like. Among them, blood flow can be improved by the effect of restoring elasticity of blood vessels. Furthermore, the skin quality can be improved by synergistic action with the enhancing effect of collagen.
[0036]
The food composition of the present invention contains proanthocyanidin, preferably 0.00001% to 50% by weight in terms of dry weight, more preferably 0.001% to 40% by weight, even more preferably 0.1% by weight in terms of dry weight. It contains from 01% by weight to 20% by weight.
[0037]
Another essential component of the food composition of the present invention is a peptide having an average molecular weight of 7,000 or less (hereinafter referred to as a proteolytic peptide) obtained by decomposing a protein. The proteolytic peptide may be a peptide obtained by organic synthesis. The proteolytic peptide is not particularly limited as long as various animal and plant proteins are decomposed using an acid, an alkali, or an enzyme. Examples of the protein used as a raw material include animal proteins derived from livestock meat, fish, animal milk, eggs, etc. such as cows, pigs, and chickens; and vegetable proteins derived from soybeans, wheat, corn, peas, and the like. Proteins. In particular, collagen is preferable as a raw material protein, and a collagen peptide, which is a degradation product thereof, is most preferable as a proteolytic peptide.
[0038]
Collagen is a major protein constituting animal connective tissue, and is abundantly contained in bones, tendons, skin, blood vessel walls, and the like. There are various types that have one or more triple helix structures in the molecule and differ in the amino acid sequence of the constituent polypeptide chains. Gelatin, which is a denatured form of collagen, is a water-soluble protein having a molecular weight of about 300,000 to tens of thousands obtained by extracting a raw material containing collagen with warm (hot) water, and alkali-treated gelatin (having an isoelectric point of 4.8 to 5.3) and acid-treated gelatin (isoelectric point 7 to 9).
[0039]
A specific method for preparing a collagen peptide from collagen or gelatin is described below. First, the skin or bones of cows and pigs are subjected to an alkali treatment of dipping in an alkaline solution for 2 to 3 months or an acid treatment of dipping in dilute hydrochloric acid for a short period of time to remove impurities contained in the raw materials and facilitate extraction. Pre-processing is performed. For example, when the raw material is beef bone, since bones contain minerals such as calcium phosphate, the bones are immersed in dilute hydrochloric acid in advance to remove the minerals, and gelatin is obtained by extracting the minerals with warm (hot) water. . In the warm (hot) water extraction, generally, the first extraction temperature is 50 to 60 ° C., and the extraction temperature is gradually increased from the second time onward, and finally the mixture is boiled. Next, the obtained gelatin is hydrolyzed with a commonly used acid or enzyme to obtain a collagen peptide.
[0040]
The collagen peptide thus obtained has an average molecular weight of about 7,000 or less, preferably about 6,000 or less. Among collagen peptides having such a molecular weight, in order to stably dissolve in a solution together with OPC and to obtain the effect of preventing protein precipitation, the molecular weight is about 200 or more, preferably about 3,000 or more. More preferably, about 5,000 or more peptides are used. When the average molecular weight is larger than 7,000, high molecular weight proanthocyanidins (10 to 30 mer) are bound, and precipitation or suspension is easily caused.
[0041]
A commercially available collagen peptide having such a molecular weight can be easily obtained. For example, collagen peptides derived from animal collagen include nippipeptide PBF, nippipeptide PRA (all manufactured by Nippi Co., Ltd.), SCP-5000, SCP-3100 (all manufactured by Nitta Gelatin Co., Ltd.), collagen peptide DS (manufactured by Kyowa High Foods Co., Ltd.) and Falconix CTP (manufactured by Ichimaru Falcos Corporation). Other than such animal-derived collagen peptides, those having similar amino acid compositions to animal collagen are preferable. For example, a peptide derived from carrot (Daucus carota L.) is exemplified as a collagen-like peptide.
[0042]
The food composition of the present invention contains a proteolytic peptide, preferably a collagen peptide, in the composition in an amount of preferably 0.00001% to 90% by weight, more preferably 0.0001% to 50% by weight in terms of dry weight. contains.
[0043]
The food composition of the present invention contains, in addition to the proanthocyanidins and the proteolytic peptides, other components commonly used in quasi-drugs, cosmetics, and the like, as long as the effects of the composition are not impaired. Is also good. Such components include, for example, water, other medicinal ingredients, other oils, humectants, surfactants, ultraviolet absorbers, absorption enhancers, fragrances, pigments, preservatives, thickeners, chelating agents, preservatives Antifungal agents and the like can be mentioned. Here, as other medicinal ingredients, active oxygen scavengers, antioxidants, anti-inflammatory analgesics, antihistamines, antipruritics, bactericides, vitamins, hormones and the like can be mentioned.
[0044]
Further, an antioxidant may be added for the purpose of enhancing the stability of proanthocyanidins. Thereby, the effect of preventing oxidation of proteins and lipids in the body, improving and protecting skin quality can be obtained.
[0045]
Examples of antioxidants include carotenoids such as vitamin A, vitamins B, ascorbic acid, vitamin E, derivatives or salts thereof, L-cysteine and derivatives or salts thereof, riboflavin, SOD, mannitol, tryptophan, Extracts such as histidine, quercetin, gallic acid and its derivatives, tea extracts, and glutathione yeast extracts.
[0046]
Among them, ascorbic acid not only enhances the stability of proanthocyanidins, but also synergistically exerts its effects on the skin, and also improves the skin quality (eg, the effect of improving firmness and luster) and the blood vessel protection effect. . When ascorbic acid is added, the food composition of the present invention is added to the proanthocyanidin in a weight ratio of preferably 1: 0.1 to 50, more preferably 1: 0.2 to 20. May be included. In addition, the amount of ascorbic acid may be larger than the above ratio.
[0047]
The food composition of the present invention can be prepared by mixing a proanthocyanidin and a proteolytic peptide with other components by a commonly used method, and is used as a food such as a drink in the form of a tablet, powder, or liquid. it can.
[0048]
For example, the food composition of the present invention is optionally mixed with additives such as excipients, extenders, binders, thickeners, emulsifiers, coloring agents, flavors, food additives, and seasonings. obtain. For example, royal jelly, vitamins, proteins, food additives as nutritional components such as calcium such as eggshell calcium, chitosan, lecithin, chlorella powder, ashitaba powder, moloheiya powder; stevia powder, matcha powder, lemon powder, honey, reduced maltose, Seasonings such as lactose, sugar solutions and the like can be mixed. These can be formed into capsules such as hard capsules and soft capsules, tablets, or pills, or into the form of powder, granules, tea, tea bags, candy, liquid, paste, and the like. These may be eaten or consumed as they are, or may be dissolved in water, hot water, milk, or the like, depending on the shape or preference.
[0049]
The daily intake of the food composition of the present invention is not particularly limited, and is preferably in the range of 0.02 g to 1 g as proanthocyanidins. Suitable amounts of proteolytic peptides for proanthocyanidins within this range are preferably between 0.04 g and 0.5 g.
[0050]
When the food composition of the present invention is taken in an appropriate amount, it has an effect of improving skin quality and an effect of improving blood flow. In particular, when an extract containing 20% by weight or more of OPC in terms of dry weight is used as proanthocyanidin, particularly excellent effects are obtained. Thus, the food composition of the present invention can be used as a health food.
[0051]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described with reference to examples. However, it is needless to say that the present invention is not limited by the examples.
[0052]
(Preparation of proanthocyanidins)
20 g of a pine bark extract (2 to 4 mer: 40% by weight, pentamer or more: 8.7% by weight, catechin: 5.1% by weight, trade name: Flavangenol, Toyo Shinyaku Co., Ltd.), Sephadex The resultant was subjected to LH-20 (manufactured by Pharmacia Biotech Co., Ltd.) to separate, and 7.6 g of dimer and tetramer and 1.6 g of pentamer and more proanthocyanidins were recovered by dry powder weight. The obtained pentamer or more proanthocyanidin (1 g) is mixed with the pine bark extract powder (2 g), and a pentamer or more proanthocyanidin-rich pine bark extract (2 to tetramer: 27% by weight) Pentamer or more: 39% by weight, catechin 1.7% by weight). These pine bark extracts were dissolved in an aqueous solution to a final concentration of 0.2% by weight.
[0053]
Separation by Sephadex LH-20 was performed twice under the following conditions. First, Sephadex LH-20 swollen with water was packed in a 50 × 500 mm column so as to have a column volume of 500 mL, and washed with 500 mL of ethanol. 10 g of the above pine bark extract was dissolved in 200 mL of ethanol, passed through a column and adsorbed, and then eluted with a 100-80% (v / v) ethanol-water mixed solvent in a gradient to collect 100 mL each. did. For each fraction, by silica gel chromatography (TLC), each sample of OPC of dimer to tetramer (dimer: proanthocyanidin B-2 (Rf value: 0.6), trimer: proanthocyanidin C -1 (Rf value: 0.4), tetramer: cinnamtannin A 2 (Rf value: 0.2)) as an index, elution of OPC was detected. The TLC conditions are as follows:
TLC: silica gel plate (Merck & Co., Inc.)
Developing solvent: benzene / ethyl formate / formic acid (2/7/1)
Detection reagents: sulfuric acid and anisaldehyde sulfuric acid
Sample volume: 10 μL each
[0054]
The fractions in which OPC was detected were collected and freeze-dried to obtain a powder. Then, 1000 mL of a 50% (v / v) water-acetone mixed solvent was passed through the column in which OPC was no longer detected to elute pentamer or more proanthocyanidins, and the collected fraction was lyophilized to obtain a powder. Got.
[0055]
(Preparation of collagen and collagen peptide)
Collagen (average molecular weight: 300,000: manufactured by Koken Co., Ltd.), Nippi Peptide PA-100 (average molecular weight: 10,000: manufactured by Nippi Co., Ltd.), collagen peptide DS (average molecular weight: 7,000: manufactured by Kyowa High Foods), SCP-5000 (Average molecular weight: 5,000: manufactured by Nitta Gelatin Co., Ltd.), Falconix CTP (average molecular weight: 3,000: manufactured by Ichimaru Falcos Co., Ltd.), Nippi Peptide PA-10 (average molecular weight: 1,000: manufactured by Nippi Corporation), Using glycine (molecular weight: 75, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 10 mL of each aqueous solution was prepared so that these collagen, collagen peptide, or amino acid was 10.0% by weight.
[0056]
(Example 1: Aggregation sedimentation evaluation)
1 mL of the proanthocyanidin solution was mixed with each 1 mL of the collagen, collagen peptide, or amino acid solution prepared as described above, allowed to stand at room temperature for one week, and visually observed for precipitation and suspension after one week. Table 1 shows the results.
[0057]
[Table 1]
[0058]
As can be seen from Table 1, suspensions or precipitates were observed in any of the mixed solutions of pentamer or more proanthocyanidins and collagen peptides or collagen having a molecular weight. On the other hand, in the case of a mixed solution of 2 to 4 mer proanthocyanidins and a collagen peptide or amino acid having a molecular weight of 7,000 or less, almost no suspension was observed. No precipitation was observed in the pine bark extract containing proanthocyanidins having a high proportion of the dimer to tetramer. When collagen having an average molecular weight of 300,000 was used, a gelled solid was precipitated. Thus, the proanthocyanidin (OPC) of dimer or tetramer or the pine resin extract containing a large amount of OPC as proanthocyanidin does not cause suspension or precipitation with the collagen peptide having a molecular weight of 7,000 or less and is stable as a mixture solution. It turned out to be.
[0059]
(Example 2: Skin improvement effect)
An aqueous solution was prepared using the combinations described in Table 2 so that the final concentration of the pine bark extract was 0.2% by weight and the final concentration of the collagen peptide was 5% by weight, and the solution was filtered with a 0.45 μm filter for sterilization. After filtration, beverages 1 to 3 were obtained. In addition, in the beverage 3 before filtration, a slight suspension was observed.
[0060]
[Table 2]
[0061]
Three weeks old guinea pigs (Japan SLC Co., Ltd.) were fed with a general solid feed (RC4; Oriental Yeast Co., Ltd.) and acclimated for one week, and then divided into four groups of five per group by a total randomization method. Allocated. The drinks 1 to 3 prepared as described above were orally administered to the guinea pigs of each group by gavage at a rate of 1 mL per day using a sonde for 28 days. As a control, a group to which purified water was administered was provided. Food and water were available ad libitum during the study. After the final administration, the central part of the back skin of the test animal was peeled and removed (3 cm × 3 cm) and dried at 60 ° C. overnight. The dried skin was crushed, 50 mg thereof was added to 5 mL of 6 M hydrochloric acid, and heated at 110 ° C. for 24 hours using a heating block to hydrolyze. Next, the hydroxyproline (Hyp) content of this hydrolyzate was measured by the chloramine T method. Hyp is contained in a large amount in collagen, and a high Hyp content is an index indicating that collagen is generated. The results are shown in FIG.
[0062]
As can be seen from FIG. 1, the group to which beverages 1 to 3 were administered had a small but large amount of Hyp. This suggests that in the administration group, the amount of collagen in the skin was larger, and the metabolism of the skin was promoted.
[0063]
(Example 3: Blood flow improving effect)
Healthy individuals aged 20 to 50 years were randomly assigned to four groups of 20 per group. First, the blood flow was measured before ingestion, and then the subject was ingested with 200 mL of the above beverages 1 to 3 or water, and the blood flow was measured again 1 hour after ingestion. The blood flow was measured by using a blood flow meter (laser blood flow imaging apparatus PIM II; Sweden Denperied) to measure the blood flow under the right forearm. Table 3 shows the results. The values in the table are the mean ± standard error, and the larger the value, the greater the blood flow.
[0064]
[Table 3]
[0065]
As shown in Table 3, all of beverages 1 to 3 had an increased blood flow, and a blood flow improving effect was observed. In addition, since the blood flows of beverages 1 and 2 are larger than that of beverage 3, it can be seen that the effects of proanthocyanidins are sufficiently exhibited without being offset by coagulation sedimentation or suspension.
[0066]
【The invention's effect】
The food composition of the present invention is less likely to cause aggregation and precipitation of proanthocyanidins and proteolytic peptides, and thus can be exerted without impairing the functions and effects of each. Therefore, for example, the effect of improving skin quality and the effect of improving blood flow derived from proanthocyanidin and collagen are superior to conventional ones.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a graph showing the amount of Hyp on the skin in a guinea pig of a group to which each beverage was administered.
