JP3487242B2 - マイクロチップ電気泳動装置 - Google Patents

マイクロチップ電気泳動装置

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Description

【発明の詳細な説明】 【0001】 【発明の属する技術分野】本発明は、ツェルニ・ターナ
型分光器を含む紫外可視光分光光度計等の分光光度計を
利用したマイクロチップ電気泳動装置に関し、更に詳し
くは、該分光器における光学系の構成に関する。 【0002】 【従来の技術】キャピラリ電気泳動法(CE)は、ペプ
チド、タンパク質、核酸、糖等の生体成分の分析の他、
光学分割、同位体の分離等、極めて近い成分を高速で分
離するに適した方法であり、臨床診断や医薬品、環境物
質のモニタリング等に広く利用される。 【0003】このようなキャピラリ電気泳動法による分
析を安定して再現性良く行うために、マイクロチップ電
気泳動装置が開発されている。図5は、マイクロチップ
電気泳動装置に用いられる電気泳動チップの斜視図であ
る。電気泳動チップ10は、重ねて貼り合わされた一対
の透明平板11、12(ガラス板、石英板等)から成
り、下側の透明平板11の上表面に試料延伸溝13と泳
動溝14とを交差するように形成し、上側の透明平板1
2にはその両溝13、14の各端部に対応する位置にそ
れぞれリザーバR1〜R4を設けたものである。溝1
3、14はエッチング等の方法により形成されており、
溝部分の幅は10〜100μm程度、深さは5〜50μ
m程度が一般的である。 【0004】その使用法は次の通りである。まず、何れ
かのリザーバR1〜R4から泳動液を溝13、14の中
に注入する。そして、試料延伸溝13の一方の端のリザ
ーバR1(R2でもよい)に試料液を注入し、その溝1
3の両端のリザーバR1、R2に電極を差し込んで所定
時間だけ高電圧を印加する。これにより、試料液は溝1
3の延伸方向に沿って長く分散される。次に、泳動溝1
4の両端のリザーバR3、R4に電極を差し込み、泳動
電圧を印加する。これにより、両溝13、14の交差部
分に存在する試料液が泳動溝14内を電気泳動する。 【0005】図6は、このマイクロチップ電気泳動装置
を図5中の泳動溝14の延伸方向に沿って切断した断面
図である。検出器として、紫外可視光分光光度計を構成
する分光器30と光検出器31とを泳動溝14を挟んで
配置する。図示しない光源から発した光を分光器30に
導入し、特定の波長のみを含む単色光を取り出して、こ
の光を泳動溝14内を電気泳動する試料に照射する。そ
して、その透過光(又は反射光)を光検出器31で検出
し、その光強度を測定することにより吸光度を求め、そ
れにより成分を検出する。 【0006】分光器30としては、ツェルニ・ターナ型
として知られる構成の分光器が利用されることが多い。
ツェルニ・ターナ型分光器は、平面回折格子と、入口ス
リットを通して導入された光を平面回折格子に送る第1
の凹面鏡(コリメータ鏡)と、平面回折格子で波長分散
された光を出口スリットに送る第2の凹面鏡(テレメー
タ鏡)とを含んで構成される。平面回折格子の表面中心
を通る軸を中心にして平面回折格子を回転させると、出
口スリットを通過する光の波長が変化するから、これに
より波長走査を行うことができる。なお、上述したよう
なマイクロチップ電気泳動装置に用いられる場合には、
実質的に泳動溝14自体が出口スリットとして作用する
ので、分光器30には出口スリットを備える必要はな
い。 【0007】 【発明が解決しようとする課題】従来のツェルニ・ター
ナ型分光器では、コリメータ鏡及びテレメータ鏡に球面
鏡を利用している。ところが、このような光学系の構成
をとると、分光器から取り出された単色光のスペクトル
は直線状にならず、大きく湾曲した形状となる。する
と、図7に示すように、直線状に延びた泳動溝14と単
色光のスペクトルPとが部分的にしか重ならず、泳動溝
14上の位置によっては所望の波長からのズレが大きく
なり、測定の精度を損なうという問題があった。 【0008】 本発明はこのような課題を解決するため
に成されたものであり、その目的とするところは、分光
器における単色光のスペクトルの曲がりを改善すること
により、波長ズレを軽減することができるようなマイク
ロチップ電気泳動装置を提供することにある。 【0009】 【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
に、本発明における分光器では、コリメータ鏡とテレメ
ータ鏡とに非球面鏡を用いている。本発明者は、種々の
非球面鏡の組合せを含む光学系部品の空間的配置につい
て実験と解析とを繰り返し、その結果、分光器の出口に
おいてスペクトルの曲がりが改善されるような光学系の
構成を見い出した。即ち、本発明は、試料を成分分離す
る泳動溝を有する電気泳動チップと、ツェルニ・ターナ
型分光器を含む分光光度計である検出器と、を具備する
マイクロチップ電気泳動装置において、前記ツェルニ・
ターナ型分光器は、入口スリットと、平面回折格子と、
前記入口スリットを通して導入された光を該平面回折格
子に送るコリメータ鏡と、該平面回折格子で波長分散さ
れた光を集光するテレメータ鏡とを含み、該テレメータ
鏡で集光した光を前記泳動溝に照射するように構成さ
れ、前記コリメータ鏡をトロイダル鏡とすると共に、前
記テレメータ鏡を、軸(母線)が前記泳動溝の延伸方向
と略平行となるように配置されたシリンドリカル鏡とし
たことを特徴とするものである。 【0010】 【0011】なお、ここでいうツェルニ・ターナ型分光
器とは広義のツェルニ・ターナ型であって、平面回折格
子への入射光と出射光とが交差するクロスド・ツェルニ
・ターナ型と、交差しない狭義のツェルニ・ターナ型と
の両方を含むものとする。 【0012】 【発明の実施の形態】以下、本発明の一実施形態である
マイクロチップ電気泳動装置に使用されるクロスド・ツ
ェルニ・ターナ型分光器を、図面を参照して説明する。
図1はこの分光器の光学系部品の空間的配置を示す略斜
視図である。 【0013】光源1から発した光は凹面鏡2で集光され
て入口スリット3に投影され、入口スリット3を通過し
た光はコリメータ鏡4で平行光にされて平面回折格子5
に送られる。平面回折格子5で波長分散された光はテレ
メータ鏡6で集光され、投影面7に照射される。この投
影面7上での垂直方向をx軸、水平方向をy軸とする
と、入口スリット3のスリット開口はx軸と平行な方向
に延伸している。 【0014】ここで、凹面鏡2及びコリメータ鏡4はト
ロイダル鏡であり、テレメータ鏡6はシリンドリカル鏡
である。トロイダル鏡は垂直方向(つまりx軸に平行な
方向)、水平方向(x軸に直交する方向)にそれぞれ異
なる曲率半径を有する凹面鏡であり、シリンドリカル鏡
は水平面内で所定の曲率半径を有する曲線が垂直方向に
平行移動して形成される曲面を有する凹面鏡である。 【0015】 上記分光器を含む紫外可視光分光光度計
を検出器としたマイクロチップ電気泳動装置では、x軸
に平行な方向に泳動溝14が延伸するように分光器と電
気泳動チップとの位置関係を決める。この場合、投影面
7は光検出器31の検出面である。 【0016】図2はこの分光器の光学系配置の具体例で
あり、図1を上面から見たときの配置を示している。各
光学部品は図2に示すような離間間隔及び角度を持って
配置される。また、各光学部品の仕様は次の通りであ
る。 (1)光源1 0.5φ (2)凹面鏡2 トロイダル 30×60mm 水平方向曲率半径:70.8mm 垂直方向曲率半径:66.1mm (3)コリメータ鏡4 トロイダル 20×40mm 水平方向曲率半径:107.0mm 垂直方向曲率半径:54.9mm (4)テレメータ鏡6 シリンドリカル 20×20mm 水平方向曲率半径:111.739mm 垂直方向曲率半径:∞ (5)平面回折格子5 水平:20mm×垂直:30mm N=900本/mm ブレーズ波長:250nm 【0017】図2に示した光学系構成で、投影面7上で
のスポットダイヤグラムを計算機シミュレーションによ
り算出した結果を図3に示す。また、比較対象として、
コリメータ鏡及びテレメータ鏡に球面鏡を用いた従来の
分光器についての同様の計算によるスポットダイヤグラ
ムを図4に示す。図3及び図4の(a)、(b)、
(c)はそれぞれ波長190nm、250nm、370
nmの単色光を得るように平面回折格子5の角度を調整
したときの結果である。また、図3、図4では縦がx
軸、横がy軸である。 【0018】図4でわかるように、従来の分光器では、
全ての波長範囲においてスペクトルは大きく湾曲してい
る。例えば、取り出す波長を190nmからずらしてゆ
くと、図4(a)に示した湾曲したスペクトルはほぼそ
のままの形状でy軸方向に移動することになる。従っ
て、上述したように電気泳動チップ10の泳動溝14が
x軸に平行に延伸している場合、その泳動溝14の或る
位置では波長は190nmとなるものの、その溝14の
他の位置では波長は190nmからずれることになる。
この従来の分光器の場合、このような流路方向の波長ズ
レは10nm以上になる。 【0019】これに対し、図3に示すように本実施例に
よる分光器ではスペクトルの湾曲が大幅に改善されてお
り、x軸方向に直線に近い形状になっていることがわか
る。この場合、先の波長ズレと同一範囲でみた流路方向
の波長ズレは最大でも2nm以下になり、少なく見積も
っても従来の分光器よりも1/5以下のズレに抑えるこ
とができる。 【0020】 なお、上記実施例では凹面鏡2もトロイ
ダル鏡としたが、他の形状の凹面鏡とすることもでき
る。また、上記実施例はクロスド・ツェルニ・ターナ型
分光器について説明したが、本発明は、回折格子への入
射光と出射光とが交差しないツェルニ・ターナ型分光器
にも適用できることは明らかである。更に、上述したよ
うな分光器は、マイクロチップ電気泳動装置の検出器と
して使用される紫外可視光分光光度計において有用であ
るのみならず、一般に波長精度を要求される分光光度計
において有用であることは当然である。 【0021】 【発明の効果】以上のように、本発明に係るマイクロチ
ップ電気泳動装置によれば、検出器の分光光度計に含ま
れるツェルニ・ターナ型分光器において所望の波長を有
する単色光のスペクトルの湾曲が従来よりも大幅に改善
されるので、高い波長精度(分解能)をもって分析が行
える。
【図面の簡単な説明】 【図1】 本発明の一実施形態によるマイクロチップ電
気泳動装置に利用されるクロスド・ツェルニ・ターナ型
分光器における光学系部品の空間的配置を示す略斜視
図。 【図2】 この分光器の光学系配置の具体例を示す図。 【図3】 この分光器によるスポットダイヤグラム。 【図4】 従来のツェルニ・ターナ型分光器によるスポ
ットダイヤグラム。 【図5】 一般的なマイクロチップ電気泳動装置の電気
泳動チップの斜視図。 【図6】 マイクロチップ電気泳動装置を図5中の泳動
溝に沿って切断した断面図。 【図7】 スペクトル曲がりと泳動溝との関係を示す
図。 【符号の説明】 1…光源 2…凹面鏡(トロイダル鏡) 3…入口スリット 4…コリメータ鏡(トロイダル鏡) 5…平面回折格子 6…テレメータ鏡(シリンドリカル鏡) 7…投影面
フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭57−54826(JP,A) 特開 昭57−54824(JP,A) 特公 昭44−14037(JP,B1) (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) G01J 3/00 - 3/51 G01N 21/00 - 21/01 G01N 21/17 - 21/74 G02B 5/18

Claims (1)

  1. (57)【特許請求の範囲】 【請求項1】 試料を成分分離する泳動溝を有する電気
    泳動チップと、ツェルニ・ターナ型分光器を含む分光光
    度計である検出器と、を具備するマイクロチップ電気泳
    動装置において、 前記ツェルニ・ターナ型分光器は、入口スリットと、平
    面回折格子と、前記入口スリットを通して導入された光
    を該平面回折格子に送るコリメータ鏡と、該平面回折格
    子で波長分散された光を集光するテレメータ鏡とを含
    み、該テレメータ鏡で集光した光を前記泳動溝に照射す
    るように構成され、 前記コリメータ鏡をトロイダル鏡とすると共に、前記テ
    レメータ鏡を、軸(母線)が前記泳動溝の延伸方向と略
    平行となるように配置されたシリンドリカル鏡としたこ
    とを特徴とするマイクロチップ電気泳動装置。
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