JP3306182B2 - カテコールアミン検査用採血管 - Google Patents
カテコールアミン検査用採血管Info
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- Measurement Of The Respiration, Hearing Ability, Form, And Blood Characteristics Of Living Organisms (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血清及び血漿中のカテ
コールアミンを精密に検査するための採血管に関する。
コールアミンを精密に検査するための採血管に関する。
【０００２】
【従来の技術】生体内の成分であって生理学上重要なカ
テコールアミンとして、アドレナリン、ノルアドレナリ
ン及びドーパミンが知られている。アドレナリンは副腎
髄質ホルモンとして、ノルアドレナリンは交感神経刺激
伝達物質として、またドーパミンはノルアドレナリンの
前駆物質であってそれ自体中枢神経作用物質等として、
生体内で重要な役割を演じている。
テコールアミンとして、アドレナリン、ノルアドレナリ
ン及びドーパミンが知られている。アドレナリンは副腎
髄質ホルモンとして、ノルアドレナリンは交感神経刺激
伝達物質として、またドーパミンはノルアドレナリンの
前駆物質であってそれ自体中枢神経作用物質等として、
生体内で重要な役割を演じている。
【０００３】上記カテコールアミンは、通常血液中を循
環することにより生体各部位において生理活性を発現す
ることなり、また一定の量的範囲を超えて生体内に発生
することと機能的変化とが相関していることから、これ
らの血液中の量を測定することにより病気の診断予防が
可能であり、例えば、褐色細胞腫、交感神経芽細胞腫、
高血圧等の診断に臨床の場で活用されている。
環することにより生体各部位において生理活性を発現す
ることなり、また一定の量的範囲を超えて生体内に発生
することと機能的変化とが相関していることから、これ
らの血液中の量を測定することにより病気の診断予防が
可能であり、例えば、褐色細胞腫、交感神経芽細胞腫、
高血圧等の診断に臨床の場で活用されている。
【０００４】カテコールアミンの血液中の存在量を測定
する方法としては、血液を血管から直接採取した後所定
の方法によって分析定量する方法が一般的である。また
血液の採取法としては、今日では採血管による方法が一
般化している。
する方法としては、血液を血管から直接採取した後所定
の方法によって分析定量する方法が一般的である。また
血液の採取法としては、今日では採血管による方法が一
般化している。
【０００５】カテコールアミンは血中に存在するもの
の、その機能的性質上、存在量は数ｐｇ〜数１００ｐｇ
／１ｍｌと極めて微量であり、僅かの測定誤差がそのま
ま診断結果に影響を与えることとなる。更にカテコール
アミンは、血中から採取した瞬間から中性又はアルカリ
性溶液中で容易に酸化され崩壊を開始するため（熊原雄
一ほか「生体ホルモン」医学書院４８１〜５０１（１９
７７））、採血後に何らかの崩壊阻止措置を採らなけれ
ば正確な測定が困難となる。
の、その機能的性質上、存在量は数ｐｇ〜数１００ｐｇ
／１ｍｌと極めて微量であり、僅かの測定誤差がそのま
ま診断結果に影響を与えることとなる。更にカテコール
アミンは、血中から採取した瞬間から中性又はアルカリ
性溶液中で容易に酸化され崩壊を開始するため（熊原雄
一ほか「生体ホルモン」医学書院４８１〜５０１（１９
７７））、採血後に何らかの崩壊阻止措置を採らなけれ
ば正確な測定が困難となる。
【０００６】この問題を解決する目的で、現在、血中の
カテコールアミン濃度を測定する場合に、採血後血液に
カテコールアミンの安定化剤としてアスコルビン酸やグ
ルタチオンを添加する方法が考えられている（Ｃｌｉ
ｎ．Ｃｈｅｍ．，２７，１９８３，（１９８１））。し
かしながら、この方法では事前の試薬調製に非常な手間
を要するので、数多くの検査を効率的に行うときには極
めて煩雑な操作を伴うこととなるうえ、採血から安定化
剤添加措置までの僅かな時間にもカテコールアミンの崩
壊が生じてしまうのを阻止できないため、測定誤差を払
拭することができず、検査結果への信頼性に劣る欠点が
あった。
カテコールアミン濃度を測定する場合に、採血後血液に
カテコールアミンの安定化剤としてアスコルビン酸やグ
ルタチオンを添加する方法が考えられている（Ｃｌｉ
ｎ．Ｃｈｅｍ．，２７，１９８３，（１９８１））。し
かしながら、この方法では事前の試薬調製に非常な手間
を要するので、数多くの検査を効率的に行うときには極
めて煩雑な操作を伴うこととなるうえ、採血から安定化
剤添加措置までの僅かな時間にもカテコールアミンの崩
壊が生じてしまうのを阻止できないため、測定誤差を払
拭することができず、検査結果への信頼性に劣る欠点が
あった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記に鑑
み、多数検体同時検査に対応しうる簡便な操作で、しか
も測定誤差が生じるのを原因から阻止するカテコールア
ミン検査用の採血管を提供することを目的とするもので
ある。
み、多数検体同時検査に対応しうる簡便な操作で、しか
も測定誤差が生じるのを原因から阻止するカテコールア
ミン検査用の採血管を提供することを目的とするもので
ある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記を目
的として研究を進めるうち、カテコールアミンが重金属
の触媒下に酸化的に崩壊してゆくことに着目し、採血管
による採血の瞬間にこの酸化的崩壊を阻止することがで
きれば目的に適うことを見いだし、またこの崩壊阻止が
採血されたその採血管内において行われれば良いことに
想到し本発明を完成した。
的として研究を進めるうち、カテコールアミンが重金属
の触媒下に酸化的に崩壊してゆくことに着目し、採血管
による採血の瞬間にこの酸化的崩壊を阻止することがで
きれば目的に適うことを見いだし、またこの崩壊阻止が
採血されたその採血管内において行われれば良いことに
想到し本発明を完成した。
【０００９】本発明の要旨は、真空採血管の管内に、採
血の前に予めカテコールアミンを安定化する目的で還元
剤を封入しておくところにある。本発明に使用する還元
剤としては、例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫
酸ナトリウム、アスコルビン酸、グルタチオン、ジチオ
トレイトール等が挙げられる。これらは、いずれも生化
学及び臨床化学の分野で広く用いられている試薬であ
る。本発明においては、これらの還元剤を、単独又は併
用して用いることができる。
血の前に予めカテコールアミンを安定化する目的で還元
剤を封入しておくところにある。本発明に使用する還元
剤としては、例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫
酸ナトリウム、アスコルビン酸、グルタチオン、ジチオ
トレイトール等が挙げられる。これらは、いずれも生化
学及び臨床化学の分野で広く用いられている試薬であ
る。本発明においては、これらの還元剤を、単独又は併
用して用いることができる。
【００１０】本発明においてメタ重亜硫酸ナトリウムを
使用する場合には、採血１ｍｌ当たり０．１〜５００ｍ
ｇを採血管内に封入する。また、チオ硫酸ナトリウムの
場合には同じく１〜５００ｍｇを、アスコルビン酸の場
合には同じく０．１〜５００ｍｇを、グルタチオンの場
合には同じく０．１〜５００ｍｇを、グルタチオンの場
合には同じく０．５〜５００ｍｇを、ジチオトレイトー
ルの場合には同じく１〜５００ｍｇを、それぞれ採血管
内に封入する。封入量を上記より少なくするとカテコー
ルアミンの安定化効果が低下し、また上記より多くして
もより多くの安定化効果が期待できるわけではなく無駄
となるほかカテコールアミンの測定結果に影響を与える
可能性もあるので、封入量は上記範囲に限定される。本
発明において、上記還元剤の複数を併用するときには、
上記封入量の総量を適宜増減して用いることができる。
使用する場合には、採血１ｍｌ当たり０．１〜５００ｍ
ｇを採血管内に封入する。また、チオ硫酸ナトリウムの
場合には同じく１〜５００ｍｇを、アスコルビン酸の場
合には同じく０．１〜５００ｍｇを、グルタチオンの場
合には同じく０．１〜５００ｍｇを、グルタチオンの場
合には同じく０．５〜５００ｍｇを、ジチオトレイトー
ルの場合には同じく１〜５００ｍｇを、それぞれ採血管
内に封入する。封入量を上記より少なくするとカテコー
ルアミンの安定化効果が低下し、また上記より多くして
もより多くの安定化効果が期待できるわけではなく無駄
となるほかカテコールアミンの測定結果に影響を与える
可能性もあるので、封入量は上記範囲に限定される。本
発明において、上記還元剤の複数を併用するときには、
上記封入量の総量を適宜増減して用いることができる。
【００１１】次に本発明２を説明する。本発明の真空採
血管を血漿用として適用する場合には、上記還元剤のほ
か、血液抗凝固剤を同時に封入しておくことができる。
このような血液抗凝固剤としては、例えば、ヘパリン、
クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、ふっ化ナトリウム等が
挙げられる。これらの血液抗凝固剤は、単独で使用して
もよいし、併用することもできる。
血管を血漿用として適用する場合には、上記還元剤のほ
か、血液抗凝固剤を同時に封入しておくことができる。
このような血液抗凝固剤としては、例えば、ヘパリン、
クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、ふっ化ナトリウム等が
挙げられる。これらの血液抗凝固剤は、単独で使用して
もよいし、併用することもできる。
【００１２】本発明及び本発明２においては、本発明に
係る還元剤のほか又は本発明２に係る還元剤と血液抗凝
固剤のほか、カテコールアミンの酸化を触媒する重金属
をマスキングする目的で、エチレンジアミン四酢酸（Ｅ
ＤＴＡ）、エチレングリコール四酢酸（ＥＧＴＡ）等の
キレート剤を、同時に管内に封入しておくことができ
る。このようにキレート剤を同時に封入しておくことに
より、本発明及び本発明２の効果を更に確実なものとす
ることができる。
係る還元剤のほか又は本発明２に係る還元剤と血液抗凝
固剤のほか、カテコールアミンの酸化を触媒する重金属
をマスキングする目的で、エチレンジアミン四酢酸（Ｅ
ＤＴＡ）、エチレングリコール四酢酸（ＥＧＴＡ）等の
キレート剤を、同時に管内に封入しておくことができ
る。このようにキレート剤を同時に封入しておくことに
より、本発明及び本発明２の効果を更に確実なものとす
ることができる。
【００１３】このようにＥＤＴＡを使用する場合には採
血１ｍｌ当たりＥＤＴＡ・２Ｎａとして０．０１〜１０
０ｍｇを、またＥＧＴＡを使用する場合には採血１ｍｌ
当たり０．０１〜２００ｍｇを、上記還元剤とともに採
血管内に封入する。封入量を上記より少なくすると重金
属をマスキングする効果がなくなり、また上記より多く
すると検体の凝固に影響を与えるので、上記範囲に限定
される。
血１ｍｌ当たりＥＤＴＡ・２Ｎａとして０．０１〜１０
０ｍｇを、またＥＧＴＡを使用する場合には採血１ｍｌ
当たり０．０１〜２００ｍｇを、上記還元剤とともに採
血管内に封入する。封入量を上記より少なくすると重金
属をマスキングする効果がなくなり、また上記より多く
すると検体の凝固に影響を与えるので、上記範囲に限定
される。
【００１４】通常、採血管として真空採血管を使用する
ときには、血管内にあった血液は注射針を通して真空状
態にある採血管内に瞬間的に吸い込まれる。本発明及び
本発明２では採血管として真空採血管を使用するので、
その採血管内に還元剤が存在するため、血管から吸い込
まれた血液は瞬間的に還元剤と混合されることとなり、
カテコールアミンの酸化崩壊を完全に阻止することがで
きる。
ときには、血管内にあった血液は注射針を通して真空状
態にある採血管内に瞬間的に吸い込まれる。本発明及び
本発明２では採血管として真空採血管を使用するので、
その採血管内に還元剤が存在するため、血管から吸い込
まれた血液は瞬間的に還元剤と混合されることとなり、
カテコールアミンの酸化崩壊を完全に阻止することがで
きる。
【００１５】本発明及び本発明２の真空採血管は、通常
使用されている真空採血管であればどのような構造のも
のであってもよく、通常はガラス管又はプラスチック管
をゴム栓で封止して構成することができる。
使用されている真空採血管であればどのような構造のも
のであってもよく、通常はガラス管又はプラスチック管
をゴム栓で封止して構成することができる。
【００１６】本発明及び本発明２に係る還元剤、血液抗
凝固剤及びキレート剤は、採血管内に溶液又は粉末の状
態で封入しておくことができる。また、上記還元剤、血
液抗凝固剤及びキレート剤のほか、必要に応じて血清分
離剤等を同時に封入しておくことができる。
凝固剤及びキレート剤は、採血管内に溶液又は粉末の状
態で封入しておくことができる。また、上記還元剤、血
液抗凝固剤及びキレート剤のほか、必要に応じて血清分
離剤等を同時に封入しておくことができる。
【００１７】
【実施例】以下に試験例及び実施例を示して、更に詳し
く説明する。
く説明する。
【００１８】試験例 予め採取したプール血漿（室温で７２時間放置により内
因性ドーパミンを除去した）５ｍｌに、０〜５００ｍｇ
／ｍｌの濃度になるようにカテコールアミン安定化剤と
して、メタ重硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ア
スコルビン酸、グルタチオン、ジチオトレイトールをそ
れぞれ添加混合した。このカテコールアミン安定化剤添
加プール血漿５ｍｌに塩酸ドーパミン溶液（１５ｎｇ／
ｍｌ、１／１０００規定塩酸溶液中）０．１ｍｌを添加
することにより、３００ｐｇ／ｍｌ濃度のドーパミン添
加血漿を調製した。このドーパミン添加血漿１ｍｌを調
製後６０分室温で放置した後、分解せずに残ったドーパ
ミン濃度（ＤＡ）をカテコールアミン測定システムＳＳ
ＬＣ−２０（積水化学工業社製）を用いて測定し、既知
濃度の試料に対する各試薬の安定化効果を調べた。表１
にドーパミン濃度の測定結果を示した。表中３００ｍｇ
／ｍｌを超える数値は、ドーパミン添加血漿の調製及び
測定誤差による。
因性ドーパミンを除去した）５ｍｌに、０〜５００ｍｇ
／ｍｌの濃度になるようにカテコールアミン安定化剤と
して、メタ重硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ア
スコルビン酸、グルタチオン、ジチオトレイトールをそ
れぞれ添加混合した。このカテコールアミン安定化剤添
加プール血漿５ｍｌに塩酸ドーパミン溶液（１５ｎｇ／
ｍｌ、１／１０００規定塩酸溶液中）０．１ｍｌを添加
することにより、３００ｐｇ／ｍｌ濃度のドーパミン添
加血漿を調製した。このドーパミン添加血漿１ｍｌを調
製後６０分室温で放置した後、分解せずに残ったドーパ
ミン濃度（ＤＡ）をカテコールアミン測定システムＳＳ
ＬＣ−２０（積水化学工業社製）を用いて測定し、既知
濃度の試料に対する各試薬の安定化効果を調べた。表１
にドーパミン濃度の測定結果を示した。表中３００ｍｇ
／ｍｌを超える数値は、ドーパミン添加血漿の調製及び
測定誤差による。
【００１９】
【表１】
【００２０】上の結果からわかるように、使用した試薬
にはそれぞれカテコールアミン安定化効果があり、その
有効濃度範囲は血液１ｍｌに対してメタ重亜硫酸ナトリ
ウム０．１ｍｇ〜５００ｍｇ、チオ硫酸ナトリウム１ｍ
ｇ〜５００ｍｇ、アスコルビン酸０．１ｍｇ〜５００ｍ
ｇ、グルタチオン０．５ｍｇ〜５００ｍｇ、ジチオトレ
イトール１ｍｇ〜５００ｍｇであった。
にはそれぞれカテコールアミン安定化効果があり、その
有効濃度範囲は血液１ｍｌに対してメタ重亜硫酸ナトリ
ウム０．１ｍｇ〜５００ｍｇ、チオ硫酸ナトリウム１ｍ
ｇ〜５００ｍｇ、アスコルビン酸０．１ｍｇ〜５００ｍ
ｇ、グルタチオン０．５ｍｇ〜５００ｍｇ、ジチオトレ
イトール１ｍｇ〜５００ｍｇであった。
【００２１】実施例１ ７ｍｌ容ガラス製採血管にアスコルビン酸５ｍｇを添加
し、閉塞材料としてゴム栓を用い、真空下で真空打栓す
ることによりアスコルビン酸入り真空採血管を作製し
た。本採血管を用いて健常人男子から血液３ｍｌを同一
人について３回採血し、それぞれ６０分間、１２０分
間、２４０分間室温にて静置後、遠心分離によって血清
１ｍｌを採取した。この血清１ｍｌ中のノルアドレナリ
ン濃度（ＮＡ）をカテコールアミン測定システムＳＳＬ
Ｃ−２０（積水化学工業社製）を用いて測定した。結果
を表２に示した。
し、閉塞材料としてゴム栓を用い、真空下で真空打栓す
ることによりアスコルビン酸入り真空採血管を作製し
た。本採血管を用いて健常人男子から血液３ｍｌを同一
人について３回採血し、それぞれ６０分間、１２０分
間、２４０分間室温にて静置後、遠心分離によって血清
１ｍｌを採取した。この血清１ｍｌ中のノルアドレナリ
ン濃度（ＮＡ）をカテコールアミン測定システムＳＳＬ
Ｃ−２０（積水化学工業社製）を用いて測定した。結果
を表２に示した。
【００２２】比較例１ アスコルビン酸を添加しないこと以外は実施例１と同様
に行った。結果を表２に示した。
に行った。結果を表２に示した。
【００２３】
【表２】
【００２４】通常、血清分離の際には、血清層に血球成
分が混入しないように、放置時間を十分長くとって強固
な血餅を形成させる必要がある。表２からわかるように
アスコルビン酸は室温放置２４０分でもノルアドレナリ
ンを安定化する効果を有していた。本発明は血清中のカ
テコールアミン濃度測定に極めて有用である。
分が混入しないように、放置時間を十分長くとって強固
な血餅を形成させる必要がある。表２からわかるように
アスコルビン酸は室温放置２４０分でもノルアドレナリ
ンを安定化する効果を有していた。本発明は血清中のカ
テコールアミン濃度測定に極めて有用である。
【００２５】実施例２ ７ｍｌ容プラスチック製採血管にメタ重亜硫酸ナトリウ
ム３ｍｇ、ＥＤＴＡ０．１ｍｇ及びヘパリン５単位を添
加し、真空打栓閉塞材料としてゴム栓を用い、真空打栓
することにより、メタ重亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及
びヘパリン入り真空採血管を作製した。本採血管を用い
て健常人男子から血液５ｍｌを採血し、直ちに遠心分離
によって血漿２ｍｌを採取した。この血漿１ｍｌ中のノ
ルアドレナリン（ＮＡ）、アドレナリン（ＡＤ）、ドー
パミン（ＤＡ）濃度を全自動カテコールアミン分析計Ｈ
ＬＣ−８０３０（東ソー社製）を用いて測定した。測定
結果を表３に示した。
ム３ｍｇ、ＥＤＴＡ０．１ｍｇ及びヘパリン５単位を添
加し、真空打栓閉塞材料としてゴム栓を用い、真空打栓
することにより、メタ重亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及
びヘパリン入り真空採血管を作製した。本採血管を用い
て健常人男子から血液５ｍｌを採血し、直ちに遠心分離
によって血漿２ｍｌを採取した。この血漿１ｍｌ中のノ
ルアドレナリン（ＮＡ）、アドレナリン（ＡＤ）、ドー
パミン（ＤＡ）濃度を全自動カテコールアミン分析計Ｈ
ＬＣ−８０３０（東ソー社製）を用いて測定した。測定
結果を表３に示した。
【００２６】比較例２ メタ重亜硫酸ナトリウム及びＥＤＴＡを添加しないこと
以外は実施例２と同様に行った。測定結果を表３に示し
た。
以外は実施例２と同様に行った。測定結果を表３に示し
た。
【００２７】
【表３】
【００２８】比較例２においては採血後直ちに測定に供
したものであるが、既にドーパミンは分解により検出不
能になっていた。また、他の２成分においても安定化剤
を添加した系と比較するとそれぞれ測定値の低下が確認
された。本発明は検査値の感度向上に極めて有用であ
る。
したものであるが、既にドーパミンは分解により検出不
能になっていた。また、他の２成分においても安定化剤
を添加した系と比較するとそれぞれ測定値の低下が確認
された。本発明は検査値の感度向上に極めて有用であ
る。
【００２９】
【発明の効果】本発明の真空採血管を使用すると、採血
と同時にカテコールアミンの安定化がなされるためカテ
コールアミンの崩壊が生じないので、カテコールアミン
の測定感度を上げ測定再現生を高めることができる。ま
た従来から行われていた採血後に安定化試薬を添加する
という手間が省けるため、検査効率を向上させることが
できる。
と同時にカテコールアミンの安定化がなされるためカテ
コールアミンの崩壊が生じないので、カテコールアミン
の測定感度を上げ測定再現生を高めることができる。ま
た従来から行われていた採血後に安定化試薬を添加する
という手間が省けるため、検査効率を向上させることが
できる。
Claims (2)
- 【請求項１】 管内に還元剤を封入してなることを特徴
とする血清用カテコールアミン検査用真空採血管。 - 【請求項２】 管内に還元剤及び血液抗凝固剤を封入し
てなることを特徴とする血漿用カテコールアミン検査用
真空採血管。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22877993A JP3306182B2 (ja) | 1993-09-14 | 1993-09-14 | カテコールアミン検査用採血管 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22877993A JP3306182B2 (ja) | 1993-09-14 | 1993-09-14 | カテコールアミン検査用採血管 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0783920A JPH0783920A (ja) | 1995-03-31 |
| JP3306182B2 true JP3306182B2 (ja) | 2002-07-24 |
Family
ID=16881721
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22877993A Expired - Fee Related JP3306182B2 (ja) | 1993-09-14 | 1993-09-14 | カテコールアミン検査用採血管 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3306182B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000014532A1 (fr) * | 1998-09-02 | 2000-03-16 | Arkray, Inc. | Procede de prevention de la denaturation sanguine et dispositif d'analyse sanguine utile a cette fin |
| WO2019204427A1 (en) * | 2018-04-19 | 2019-10-24 | Tweardy David J | Methods for measuring and stabilizing stat3 inhibitors |
| CN112782328A (zh) * | 2019-11-11 | 2021-05-11 | 深圳华大临床检验中心 | 检测尿液中儿茶酚胺及其代谢物的方法、试剂盒及其应用 |
-
1993
- 1993-09-14 JP JP22877993A patent/JP3306182B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0783920A (ja) | 1995-03-31 |
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