JP3277372B2

JP3277372B2 - クロレラ培養方法

Info

Publication number: JP3277372B2
Application number: JP36769499A
Authority: JP
Inventors: 勝巳石垣; 正重当銘; 安正志喜屋
Original assignee: 八重山殖産株式会社
Priority date: 1999-11-19
Filing date: 1999-11-19
Publication date: 2002-04-22
Anticipated expiration: 2019-11-19
Also published as: JP2001145481A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、日光照射下で酢酸
を炭素源およびエネルギー源とした混合栄養的培養にお
いて、一年を通じて、培養状態が悪化せず、生産性を一
定水準に維持し、クロロフィル含有量を一定水準に維持
できる工業的なクロレラ培養方法を提供することを目的
としたものである。

【０００２】

【従来の技術】クロレラは、単細胞緑藻であり、蛋白
質、クロロフィル、食物繊維、豊富なビタミン・ミネラ
ル類を有する食品として知られ、また生産性が高いとい
う利点もあり、工業的な規模で大量に培養され、健康食
品または食品の着色剤、食品素材として利用されてい
る。クロレラは、クロロフィル含有量が多いほど高品質
とされており、クロロフィル含有量が高いことは重要で
ある。クロロフィルには、ダイオキシン等の変異原吸着
活性作用のあることが報告されている。クロレラ培養方
法の形式は、独立栄養、従属栄養、混合栄養に分けられ
る。

【０００３】独立栄養は、屋外培養池での炭酸ガスと日
光照射による培養方法であるが、炭酸ガスの利用効率や
生産性に問題があり、現在ほとんど実施されていない。
生産性は８〜１３ｇ／ｍ^２／日とされている。

【０００４】従属栄養は、密閉タンクで炭素源およびエ
ネルギー源として有機物を用い、日光照射しない培養方
法である。タンク培養は工業化されているが、密閉タン
クで光照射するのは実用的でないため工業化されていな
い。従属栄養は、細菌感染がないことと価格が安いこと
が特徴である。クロロフィル含有量が１．０〜２．５％
と低く、乾燥藻体の色素が劣化しやすい欠点を有してい
る。

【０００５】混合栄養は、屋外培養池での日光照射下で
酢酸を炭素源およびエネルギー源とした培養方法であ
る。工業的には、解放攪拌式培養池が用いられる。従来
の混合栄養では、培養に種苗培養と本培養の区別がな
い。培養状態の良くない培養池からは全量収穫し、培養
状態の良い培養池からは一部の培養液を残して収穫し、
残した培養液を種苗にして次の培養を開始する。一番最
初の種苗を確保するための方法は（本発明においても同
様であるが）、室内培養から始めて小面積培養池へと進
んでスケールアップする方法がとられるが、その後の工
業的培養の生産の主な種苗は上記方法で確保される。工
業的な培養においては屋外培養池に広大な面積を必要と
するため（例えば直径３０ｍ）、藻体の生産性は濃度
（ｇ／Ｌ）よりも面積あたりの収穫量（ｇ／ｍ^２）が重
要である。したがって、混合栄養の培養条件に関する記
述は、主にｇ／ｍ^２を用いる。例えば培養基質や藻体量
は、主に一定面積あたりの量で示される。

【０００６】以下、従来の混合栄養によるクロレラ培養
方法を具体的に述べる。

【０００７】培養で与えられる炭素：窒素比は３．５：
１〜４．５：１であり、窒素源が豊富な培地となってい
る。酢酸を補給するための補給培地の炭素：窒素比は
８．０：１〜８．６：１である。培養で与えられる炭
素：窒素比は、基礎培地と補給培地の混合の割合で決
る。

【０００８】酢酸補給量の最多設定値は、例えば高水温
期で１５０ｇ／ｍ^２／日，低水温期で１００ｇ／ｍ^２／
日となる。従来は、季節ごとに水温が変るにつれて、酢
酸補給量を変化させていた。酢酸補給量は、経験的に予
測される一日のクロレラの増殖量から最多補給量を設定
し、細菌感染度によって酢酸補給量を経験的に少なめに
する方法である。培養途中で酢酸補給を停止することも
ある。通常の一日の酢酸補給量は、高水温期は７０〜１
５０ｇ／ｍ^２／日とバラツキが大きく、低水温期は６０
〜１００ｇ／ｍ^２／日とバラツキがある。年間平均で約
９５ｇ／ｍ^２／日，高水温期の平均で約１１０ｇ／ｍ^２
／日，低水温期の平均で約７０ｇ／ｍ^２／日である。

【０００９】種苗量の設定値は、４０〜７０ｇ／ｍ^２／
日である。これは、クロレラの増殖倍率や稼動条件にお
いては種苗量が少ない方が有利であるが、これ以上に少
ないと細菌感染度が高くなりやすいことによる設定値で
ある。

【００１０】培養日数は１０〜１２日に設定されてい
る。

【００１１】培養池の水深は１０〜３０ｃｍで、クロレ
ラの増殖を高めるためには１０〜２０ｃｍと低めに設定
され、培養の安定化のためには２０〜３０ｃｍと深めに
設定される（細菌が沈降性となる）。

【００１２】収穫の前に、酢酸を全て消費させる目的
で、収穫の前日に酢酸補給を完全停止する方法がとられ
ている。

【００１３】

【発明が解決しようとする課題】上記従来のクロレラ培
養方法には、以下に述べるような問題点があった。

【００１４】１つは、生産の計画性が低いことである。
その原因は、種苗培養から収穫まで同じ培養法で連続的
に培養するため、多くの培養池で細菌感染が進行すれ
ば、全量が収穫されることとなり、次回の培養へ回す種
苗がたちまち不足する事態となった。基準の種苗量が確
保されなければ、計画した生産量の達成は困難となる。

【００１５】１つは、細菌感染度が高いことである。細
菌感染度（藻体ＰＣＶにたいする細菌ＰＣＶの割合）
は、しばしば５０％から１５０％に達する。培養が正常
であれば２０％以下であるが、細菌感染度が５０％以上
になると、培養途中で酢酸補給を停止することで、細菌
を沈降性細菌とし、培養への悪影響を少なくする。細菌
感染度が１００％以上になると、全量が収穫されて、次
回の種苗は確保できない。細菌感染度が高い原因は、基
礎培地にすでに窒素源が豊富であるため、早い段階から
細菌感染が進行しやすい。また、培養で与えられる炭
素：窒素比は、基礎培地と補給培地の混合の割合で決ま
るため、事実上炭素：窒素比の管理はなされておらず、
窒素源が豊富であるため、細菌感染度が高くなり、酢酸
収率を低下させ、培養状態を悪化させていた。また、種
苗量が酢酸補給量に対して少ないため、培養の前半です
でに細菌感染度が高くなり、収穫時点までの間にはさら
に培養状態が悪化していた。また、酢酸補給量が、高水
温期は溶存酸素不足となるため、また、低水温期は種苗
量が少ないため、クロレラの酢酸消費速度よりも多いた
め、酢酸の過剰分は夜間にかけて消費され、夜間の酢酸
がゼロになる時間が短くなるため、生育環境を悪化させ
ていた。

【００１６】１つは、生産性が安定していないことであ
る。その原因は、低水温期で約２１ｇ／ｍ^２／日、高水
温期で約３２ｇ／ｍ^２／日、季節による生産性のバラツ
キが大きいため、収穫量が安定せず、計画通りに次の種
苗が確保できない場合が多い。冬場（低温水期）は生産
性が低いため、種苗量の確保が難しく、しばしば種苗量
が設定値以下になる。低水温期においては、酢酸や酸素
が豊富でも、細胞の生理活性が低くなるため、酢酸消費
速度が遅く、増殖速度が遅くなるためである。

【００１７】１つは、クロロフィルや蛋白質の含有量が
一定していないことである。その原因は、細菌感染度が
高くて培養が悪化することが多く、細胞の劣化や死細胞
の増加などにより藻体成分の含有量が低くなる。細菌感
染度が高い場合は悪化を最少限にとどめるために、培養
途中での酢酸補給停止や早期収穫（設定培養日数より短
くなる）などの対策をおこなうが、充分な対策ではな
く、培養状態が良好な時と悪化した時で、含有量に大き
なバラツキが生じる。また培養の途中での酢酸補給を停
止（通常４０時間）する方法は、酢酸を消費し尽くした
クロレラは完全な飢餓状態となるため、クロレラの生育
に悪影響を与え、藻体成分の品質を悪化させてしまいや
すく、安定してクロロフィル含有量を高めることはでき
なかった。それらの対策や培養の失敗が、酢酸補給量や
種苗量等を不安定にし、加えて水温変化に大きく左右さ
れるため、クロロフィルの含有量は最少で２．０％、条
件が良い場合で５．０％と大きなバラツキがあって安定
せず、また、平均含有量が２．５〜３．５％と少なかっ
た。

【００１８】本発明は、上記した従来の混合栄養による
工業的なクロレラ培養方法の有する課題を解決して、培
養状態が悪化せず、細菌感染率が低く、一年を通じて生
産性が安定し、クロロフィル等の藻体成分が多くてしか
も安定した、クロレラ培養方法を提供することを目的と
したものである。

【００１９】

【課題を解決するための手段】本発明の第１は、日光照
射下で酢酸を炭素源およびエネルギー源とした混合栄養
的培養によりクロレラを工業的に培養する方法におい
て、種苗から収穫にいたる培養を前半の種苗培養と後半
の本培養に分けて培養し、種苗培養を始める基礎培地に
は尿素を含んでおらず、種苗培養において基礎培地に補
給する補給培地には窒素源としての尿素が含まれていて
炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１の範囲であり、
種苗培養を終了した藻体を種として培養する本培養にお
いて基礎培地に補給する補給培地には窒素源としての尿
素が含まれていて炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：
１の範囲であることを特徴とするクロレラ培養方法に関
するものである。

【００２０】本発明の第２は、日光照射下で酢酸を炭素
源およびエネルギー源とした混合栄養的培養によりクロ
レラを工業的に培養する方法において、培養池の水深を
１５〜２５ｃｍの範囲とし、種苗から収穫にいたる培養
を前半の種苗培養と後半の本培養に分けて培養し、種苗
培養を始める基礎培地には尿素を含んでおらず、種苗培
養において基礎培地に補給する補給培地には窒素源とし
ての尿素が含まれていて炭素：窒素比が７．０：１〜
７．５：１の範囲であり、種苗培養終了後の本培養にお
いて基礎培地に補給する補給培地には窒素源としての尿
素が含まれていて炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：
１の範囲であり、種苗培養並びに本培養における１日分
の補給培地に含まれる酢酸量を培養池１ｍ２当たり１０
３ｇ±４ｇとし、補給培地の補給終了から２時間後のｐ
Ｈ上昇値が０．５以上であり、培養池の日中最高水温が
約１７〜２２℃の低水温期においては、培養池１ｍ２当
たりの最初の種苗量を１７５〜２００ｇ乾燥藻体、種苗
培養日数を基礎培地での初日を数えず種苗培養用の補給
培地を補給する６日間と酢酸を補給しない最終日の計７
日間、本培養日数を本培養用の補給培地を補給する６日
間と収穫する最終日の計７日間、培養池１ｍ２当たりの
収穫量の上限を３３０ｇ乾燥藻体以下とし、培養池の日
中最高水温が約２２〜２８℃の中水温期においては、培
養池１ｍ２当たりの最初の種苗量を１５０〜１７５ｇ乾
燥藻体、種苗培養日数を基礎培地での初日を数えず種苗
培養用の補給培地を補給する５日間と酢酸を補給しない
最終日の計６日間、本培養日数を本培養用の補給培地を
補給する５日間と収穫する最終日の計６日間、培養池１
ｍ２当たりの収穫量の上限を３８５ｇ乾燥藻体以下と
し、培養池の日中最高水温が約２８〜３８℃の高水温期
においては、培養池１ｍ２当たりの最初の種苗量を１２
５〜１５０ｇ乾燥藻体、種苗培養日数を基礎培地での初
日を数えず種苗培養用の補給培地を補給する４日間と酢
酸を補給しない最終日の計５日間、本培養日数を本培養
用の補給培地を補給する４日間と収穫する最終日の計５
日間、培養池１ｍ２当たりの収穫量の上限を４４５ｇ乾
燥藻体以下とすることを特徴とするクロレラ培養方法に
関するものである。

【００２１】本発明の第３は、日光照射下で酢酸を炭素
源およびエネルギー源とした混合栄養的培養によりクロ
レラを工業的に培養する方法において、培養池の水深を
１５〜２５ｃｍの範囲とし、種苗から収穫にいたる培養
を前半の種苗培養と後半の本培養に分けて培養し、種苗
培養を始める基礎培地には尿素を含んでおらず、種苗培
養において基礎培地に補給する補給培地には窒素源とし
ての尿素が含まれていて炭素：窒素比が７．０：１〜
７．５：１の範囲であり、種苗培養終了後の本培養にお
いて基礎培地に補給する補給培地には窒素源としての尿
素が含まれていて炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：
１の範囲であり、種苗培養並びに本培養における１日分
の補給培地に含まれる酢酸量を培養池１ｍ２当たり１０
３ｇ±４ｇとし、補給培地の補給終了から２時間後のｐ
Ｈ上昇値が０．５以上であり、本培養の補給最終日にお
ける１日分の補給培地に含まれる培養池１ｍ２当たりの
酢酸補給量を前日までの５０〜６０％として午前中に補
給を完了させ、培養池の日中最高水温が約１７〜２２℃
の低水温期においては、培養池１ｍ２当たりの最初の種
苗量を１７５〜２００ｇ乾燥藻体、種苗培養日数を基礎
培地での初日を数えず種苗培養用の補給培地を補給する
６日間と酢酸を補給しない最終日の計７日間、本培養日
数を本培養用の補給培地を補給する６日間と収穫する最
終日の計７日間、培養池１ｍ２当たりの収穫量の上限を
３３０ｇ乾燥藻体以下とし、培養池の日中最高水温が約
２２〜２８℃の中水温期においては、培養池１ｍ２当た
りの最初の種苗量を１５０〜１７５ｇ乾燥藻体、種苗培
養日数を基礎培地での初日を数えず種苗培養用の補給培
地を補給する５日間と酢酸を補給しない最終日の計６日
間、本培養日数を本培養用の補給培地を補給する５日間
と収穫する最終日の計６日間、培養池１ｍ２当たりの収
穫量の上限を３８５ｇ乾燥藻体以下とし、培養池の日中
最高水温が約２８〜３８℃の高水温期においては、培養
池１ｍ２当たりの最初の種苗量を１２５〜１５０ｇ乾燥
藻体、種苗培養日数を基礎培地での初日を数えず種苗培
養用の補給培地を補給する４日間と酢酸を補給しない最
終日の計５日間、本培養日数を本培養用の補給培地を補
給する４日間と収穫する最終日の計５日間、培養池１ｍ
２当たりの収穫量の上限を４４５ｇ乾燥藻体以下とし、
本培養最終日における収穫を午後に実施することを特徴
とするクロレラ培養方法に関するものである。

【００２２】本発明の第４は、上記の第１、第２又は第
３の発明に記載されたクロレラ培養方法において、種苗
培養を終了した段階の培養液を二分し、一方を種苗培養
用の種苗に使用して新たな種苗培養を実施し、もう一方
を本培養用の種苗に使用して本培養を実施して全量を収
穫し、この工程を繰り返すことを特徴とするクロレラ培
養方法に関するものである。

【００２３】上記した第１の発明によれば、クロレラの
培養を種苗培養と本培養に分け、培養の前半において
は、培養を始める種苗培養用の基礎培地には窒素源であ
る尿素が含まれていないのでスタート時点の培養種苗の
細菌感染度がきわめて低く、種苗培養で与えられる補給
培地の炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１で、窒素
源が少ないため、種苗培養中の蛋白質含有量は４０〜５
５％と少ないが、細菌感染度が低い種苗培養をすること
ができ、培養の後半においては、本培養で与えられる補
給培地の炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１で、窒
素源が適度に豊富であるため、本培養中に蛋白質含有量
は６０％以上に増加し、窒素源が豊富な期間が短いため
細菌感染度が正常な範囲で培養を終了し、次回の種苗を
計画通りに確保して、正常なクロレラを収穫することが
できる。この方法によれば、基本的には、培養で与えら
れる炭素：窒素比は、補給培地の炭素：窒素比と同じで
あるため、培養の炭素：窒素比の管理が容易にできる。

【００２４】上記した第２の発明によれば、クロレラの
培養を種苗培養と本培養に分け、培養の前半において
は、培養を始める種苗培養用の基礎培地には窒素源であ
る尿素が含まれていないのでスタート時点の培養種苗の
細菌感染度がきわめて低く、種苗培養で与えられる補給
培地の炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１で、窒素
源が少ないため、種苗培養中の蛋白質含有量は４０〜５
５％と少ないが、細菌感染度が２．０〜１０．０％と低
く、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の培養をするこ
とができ、培養の後半においては、本培養で与えられる
補給培地の炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１で、
窒素源が適度に豊富であるため、本培養中に蛋白質含有
量は６０％以上に増加し、窒素源が豊富な期間が短いた
め細菌感染度が１０．０〜２５．０％と正常な範囲で培
養を終了し、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の培養
をすることができ、次回の種苗を計画通りに確保して、
正常なクロレラを収穫することができる。この方法によ
れば、基本的には、培養で与えられる炭素：窒素比は、
補給培地の炭素：窒素比と同じであるため、培養の炭
素：窒素比の管理が容易にできる。１日分の補給培地に
含まれた酢酸の補給量は、種苗培養も本培養も同じで、
培養池１ｍ２当り１０３ｇ±４ｇで一定であり、種苗量
と培養日数を調整することにより酢酸を消費する藻体量
を調節することで、酢酸の消費速度をコントロールし、
クロロフィル含有量を３．５〜４．３％に安定して維持
することができる。１日の酢酸補給終了後２時間のｐＨ
上昇値を０．５以上とするのは、１日分の酢酸補給終了
後の早い時間のうちに酢酸濃度をゼロとして、クロロフ
ィル含有量を増すためである。従来よりも種苗量を多く
設定することで、特に培養の前半において、従来よりも
酢酸の消費量を多く、単位面積あたりの酢酸消費速度を
早くすることができる。また、細胞の増殖速度が遅い低
水温期においても、生産性を高くすることができる。低
水温期の培養であっても、高水温期と同じ酢酸量を補給
し、藻体量を多くし、酢酸の消費量を多く、単位面積あ
たりの酢酸消費速度を早くすることにより、高水温期と
同等の単位面積あたりの生産量を維持することができ
る。また、１日分の酢酸補給終了後の早い時間のうちに
酢酸濃度がゼロとなることと、細胞１個あたりに与えら
れる１日の酢酸量を少なくしたことにより、クロロフィ
ルを安定して高めることができた。これは、細菌感染度
を低くする技術があって初めて実現したことである。本
発明の補給培地による酢酸補給方法、設定された種苗
量、培養日数は、酢酸補給の過不足のない方法であり、
適切な藻体量を収穫して、計画通りに次回の種苗を確保
することができるのである。酢酸が過剰供給にならない
設定値なので、細菌感染度が低い理由の１つにもなって
いる。種苗量が従来よりも多く設定されていることも、
細菌感染度が低い理由である。本発明は、培養期間にお
ける日中の最高水温が約１７〜３８℃の年間を通して実
施できる。年間を高水温期（約２８〜３８℃）、中水温
期（約２２〜２８℃）、低水温期（約１７〜２２℃）の
３つの時期に分けて、それぞれの条件を設定して培養が
行なわれる。水温は一応の目安であり、培養期間中の水
温が全てこの範囲でなければいけないということではな
い。培養日数を長くするほど、藻体量は増加し、藻体量
が多いほどクロロフィル含有量が高く酢酸収率が低くな
る傾向にある。培養藻体量の上限を設定し調整すること
で、クロレラの生産性と収穫されたクロロフィル含有量
を良好に維持することができる。また、培養池の水深は
１５〜２５ｃｍで、この範囲は藻の高い増殖率と低い細
菌感染度を両立することができる。

【００２５】上記した第３の発明によれば、クロレラの
培養を種苗培養と本培養に分け、培養の前半において
は、培養を始める種苗培養用の基礎培地には窒素源であ
る尿素が含まれていないのでスタート時点の培養種苗の
細菌感染度がきわめて低く、種苗培養で与えられる補給
培地の炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１で、窒素
源が少ないため、種苗培養中の蛋白質含有量は４０〜５
５％と少ないが、細菌感染度が２．０〜１０．０％と低
く、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の培養をするこ
とができ、培養の後半においては、本培養で与えられる
補給培地の炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１で、
窒素源が適度に豊富であるため、本培養中に蛋白質含有
量は６０％以上に増加し、窒素源が豊富な期間が短いた
め細菌感染度が１０．０〜２５．０％と正常な範囲で培
養を終了し、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の培養
をすることができ、次回の種苗を計画通りに確保して、
正常なクロレラを収穫することができる。この方法によ
れば、基本的には、培養で与えられる炭素：窒素比は、
補給培地の炭素：窒素比と同じであるため、培養の炭
素：窒素比の管理が容易にできる。１日分の補給培地に
含まれた酢酸の補給量は、種苗培養も本培養も同じで、
培養池１ｍ２当り１０３ｇ±４ｇで一定であり、種苗量
と培養日数を調整することにより酢酸を消費する藻体量
を調節することで、酢酸の消費速度をコントロールし、
クロロフィル含有量を４．０〜５．０％に安定して維持
することができる。１日の酢酸補給終了後２時間のｐＨ
上昇値を０．５以上とするのは、１日分の酢酸補給終了
後の早い時間のうちに酢酸濃度をゼロとして、クロロフ
ィル含有量を増すためである。従来よりも種苗量を多く
設定することで、特に培養の前半において、従来よりも
酢酸の消費量を多く、単位面積あたりの酢酸消費速度を
早くすることができる。また、細胞の増殖速度が遅い低
水温期においても、生産性を高くすることができる。低
水温期の培養であっても、高水温期と同じ酢酸量を補給
し、藻体量を多くし、酢酸の消費量を多く、単位面積あ
たりの酢酸消費速度を早くすることにより、高水温期と
同等の単位面積あたりの生産量を維持することができ
る。また、１日分の酢酸補給終了後の早い時間のうちに
酢酸濃度がゼロとなることと、細胞１個あたりに与えら
れる１日の酢酸量を少なくしたことと、補給最終日の酢
酸補給量を前日までの５０〜６０％としたことにより、
クロロフィルを安定して高めることができた。これは、
細菌感染度を低くする技術があって初めて実現したこと
である。本発明の補給培地による酢酸補給方法、設定さ
れた種苗量、培養日数は、酢酸補給の過不足のない方法
であり、適切な藻体量を収穫して、計画通りに次回の種
苗を確保することができる。酢酸が過剰供給にならない
設定値なので、細菌感染度が低い理由の１つにもなって
いる。種苗量が従来よりも多く設定されていることも、
細菌感染度が低い理由である。本発明は、培養期間にお
ける日中の最高水温が約１７〜３８℃の年間を通して実
施できる。年間を高水温期（約２８〜３８℃）、中水温
期（約２２〜２８℃）、低水温期（約１７〜２２℃）の
３つの時期に分けて、それぞれの条件を設定して培養が
行なわれる。水温は一応の目安であり、培養期間中の水
温が全てこの範囲でなければいけないということではな
い。培養日数を長くするほど、藻体量は増加し、藻体量
が多いほどクロロフィル含有量が高く酢酸収率が低くな
る傾向にある。培養藻体量の上限を設定し調整すること
で、クロレラの生産性と収穫されたクロロフィル含有量
を良好に維持することができる。また、培養池の水深は
１５〜２５ｃｍで、この範囲では藻の高い増殖率と低い
細菌感染度を両立することができる。

【００２６】上記した第４の発明によれば、上記第１〜
第３の発明が種苗培養と本培養に分かれているので、種
苗培養を完了した培養液の一部をもとに別のプール（培
養池）で新たな種苗培養を行ない、残った培養液を種に
本培養を行なって全量を収穫することが可能であり、非
常に能率的で、計画的な培養ができる。

【００２７】上記した第２〜第３の発明で、水温の違い
によって本培養収穫時の藻体量（ｇ／ｍ^２）の上限を設
定しているのは、生産性を維持するための数値である。

【００２８】上記した第２〜第３の発明で、酢酸補給後
２時間におけるｐＨ上昇値を計測することにより、種苗
量を多めに設定して酢酸の消費速度が溶存酸素によって
制限されている培養において、溶存酸素濃度と酢酸濃度
を計測しなくとも、酢酸補給量が過剰でないことを確認
できる。なお、１日の培養池１ｍ^２あたりの酢酸補給量
が１０３ｇ±４ｇ以上では、溶存酸素不足により１日の
酢酸補給終了後２時間のｐＨ上昇値が０．５以下とな
り、夜間の酢酸ゼロの時間が短くなるため、クロロフィ
ル含有量が高まらない。逆に、１０３ｇ±４ｇ以下で
は、酢酸が少ない分だけ生産性も低下する。最良の値が
１０３ｇである。

【００２９】

【発明の実施の形態】本発明の実施の形態を実施例にも
とづき説明するが、下記実施例にのみ限定されるもので
ないことはいうまでもない。

【００３０】本発明を適用できるクロレラについては、
特に制限はなく、日光照射下で酢酸を炭素源とした混合
栄養的培養で増殖可能な、通常の株を用いることができ
る。

【００３１】培養池は、屋外に設置された、直径３０ｍ
で面積７０６．５ｍ^２の開放攪拌式培養池を用いた。培
養時期は７月、種苗培養期間中の降雨量１０．３ｍｍで
日中の最高水温は３２．４〜３６．９℃、本培養期間中
の降雨量１２．６ｍｍで日中の最高水温は３１．２〜３
６．５℃の高水温期であった。

【００３２】種苗から収穫にいたる培養を前半の種苗培
養と後半の本培養に分けて培養する。種苗培養培養日数
には数えない初日は、培養池の水深が１５ｃｍ、培養液
量が１０６ｍ^３、１ｍ^２当りの酢酸０ｇ、尿素０ｇ、リ
ン酸−カリ９．９１ｇ、硫酸マグネシュウム・７水塩１
４．１５ｇ、微量金属溶液（Ａ_５）０．２８Ｌ、硫酸第
一鉄・７水塩０．６ｇが含まれた基礎培地に、種苗の藻
体量が１４１．５ｇ乾燥藻体／ｍ^２である。種苗培養の
１日目から４日間目までは、地下水１Ｌ当り、酢酸５６
ｇ、尿素６．８ｇ、リン酸−カリ１．６０ｇ、硫酸マグ
ネシュウム・７水塩１．６０ｇ、硫酸第一鉄・７水塩
０．９６ｇが含まれた１３００Ｌの補給培地を６時間か
けて補給する。１ｍ^２当りの１日の酢酸補給量は１０３
ｇであり、補給培地の炭素：窒素比は７．０６：１であ
る。酢酸補給終了後２時間のｐＨ上昇値は０．５以上で
あった。補給培地を補給する初日、すなわち種苗培養１
日目は、種苗の藻体量が１４２ｇ乾燥藻体／ｍ^２、藻体
ＰＣＶが５．９ｍｌ／Ｌ、総藻体量が１００ｋｇであ
り、細菌類ＰＣＶが０．３ｍｌ／Ｌ、細菌感染度が５．
１％であった。種苗培養２日目の培養は、培養池の水深
が１６ｃｍ、培養液量が１１３ｍ^３、藻体量が１７７ｇ
／ｍ^２、藻体ＰＣＶが７．０ｍｌ／Ｌ、総藻体量が１２
５ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが０．４ｍｌ／Ｌ、細菌感
染度が５．７％であった。種苗培養３日目の培養は、培
養池の水深が１６．５ｃｍ、培養液量が１１７ｍ^３、藻
体量が２１２ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが８．０ｍｌ／Ｌ、
総藻体量が１５０ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが０．５ｍ
ｌ／Ｌ、細菌感染度が６．３％であった。種苗培養４日
間目の培養は、培養池の水深が１８．０ｃｍ、培養液量
が１２７ｍ^３、藻体量が２４８ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが
８．６ｍｌ／Ｌ、総藻体量が１７５ｋｇであり、細菌類
ＰＣＶが０．５ｍｌ／Ｌ、細菌感染度が５．８％であっ
た。種苗培養５日間目最終日の培養は、培養池の水深が
２０．０ｃｍ、培養液量が１４１ｍ^３、藻体量が２８３
ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが８．９ｍｌ／Ｌ、総藻体量が２
００ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが０．５ｍｌ／Ｌ、細菌
感染度が５．６％であった。１日目〜４日間目の酢酸補
給後２時間のｐＨ上昇値は０．５以上であった。１Ｌ当
りの乾燥藻体は種苗培養で０．９４ｇから１．４２ｇに
なった。藻体成分は、培養初日でクロロフィル２．８
％、蛋白質４８％であり、培養５日間目はクロロフィル
２．７％、蛋白質４６％であった。生産性は平均で２
８．３ｇ／ｍ^２であった。細菌感染度測定は、顕微鏡観
察とＰＣＶ（細胞容量）測定によった。細菌はクロレラ
より比重が軽いので、遠心分離を使用して観測できる。
種苗培養終了後、培養液の半分を別のプール（培養池）
に移して新たに種苗培養工程を繰り返し、残る半分を種
として次の本培養工程に移行する。

【００３３】本培養開始の前日、すなわち種苗培養最終
日に、前記種苗培養で残った、水深が１０ｃｍ、種苗の
藻体量が１４１．５ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが８．９ｍｌ
／Ｌ、総藻体量が１００ｋｇ、細菌類ＰＣＶが０．５ｍ
ｌ／Ｌ、細菌感染度が５．６％、クロロフィル含有量
２．７％、蛋白質含有量４６％の培養液に、１ｍ^２当り
の酢酸０ｇ、尿素２１．２３ｇ、リン酸−カリ９．９１
ｇ、硫酸マグネシュウム・７水塩１４．１５ｇ、微量金
属溶液（Ａ_５）０．２８Ｌ、硫酸第一鉄・７水塩０．６
ｇが含まれた基礎培地を投与して、水深を１５ｃｍとし
た。本培養の１日目から４日間目までは、地下水１Ｌ当
り、酢酸５６ｇ、尿素６．８ｇ、リン酸−カリ１．６０
ｇ、硫酸マグネシュウム・７水塩１．６０ｇ、硫酸第一
鉄・７水塩０．９６ｇが含まれた補給培地を補給する。
補給培地の炭素：窒素比は７．０６：１である。１日目
〜３日目は１３００Ｌの補給培地を６時間かけて補給
し、１ｍ^２当りの１日の酢酸補給量は１０３ｇである。
４日間目は７００Ｌの補給培地を３時間かけて補給し、
１ｍ^２当りの１日の酢酸補給量は前日までの約５４％の
５５．６ｇである。酢酸補給終了後２時間のｐＨ上昇値
は０．５以上であった。１日目の培養は、培養池の水深
が１５ｃｍ、培養液量が１０６ｍ^３、藻体量が１００ｇ
／ｍ^２、藻体ＰＣＶが５．９ｍｌ／Ｌ、総藻体量が１４
２ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが０．３ｍｌ／Ｌ、細菌感
染度が５．１％であり、含有蛋白質が５７％、含有クロ
ロフィルが３．２％であった。２日目の培養は、培養池
の水深が１５．５ｃｍ、培養液量が１１０ｍ^３、藻体量
が１７７ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが７．１ｍｌ／Ｌ、総藻
体量が１２５ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが０．４ｍｌ／
Ｌ、細菌感染度が５．６％であり、含有蛋白質が６２
％、含有クロロフィルが３．４％であった。３日目の培
養は、培養池の水深が１７．０ｃｍ、培養液量が１２０
ｍ^３、藻体量が２１７ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが８．０ｍ
ｌ／Ｌ、総藻体量が１５３ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが
０．６ｍｌ／Ｌ、細菌感染度が７．５％であり、含有蛋
白質が６６％、含有クロロフィルが３．７％であった。
酢酸補給最終日である４日間目の培養は、培養池の水深
が１８．５ｃｍ、培養液量が１３１ｍ^３、藻体量が２５
２ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが８．５ｍｌ／Ｌ、総藻体量が
１７８ｋｇであり、細菌類ＰＣＶが１．０ｍｌ／Ｌ、細
菌感染度が１１．８％であり、含有蛋白質が６７％、含
有クロロフィルが４．０％であった。収穫日の５日間目
の培養は、培養池の水深が２０．０ｃｍ、培養液量が１
４１ｍ^３、藻体量が２６９ｇ／ｍ^２、藻体ＰＣＶが８．
４ｍｌ／Ｌ、総藻体量が１９０ｋｇであり、細菌類ＰＣ
Ｖが１．２ｍｌ／Ｌ、細菌感染度が１４．３％であり、
含有蛋白質が６６％、含有クロロフィルが４．７％であ
った。生産性は平均で２５．５ｇ／ｍ^２であった。収穫
前日の酢酸補給を午前中に完了させ、本培養最終日にお
ける収穫を、前日の酢酸補給終了から３０時間経過した
午後に実施し、全量を収穫した。

【００３４】なお、培養池の水深１５ｃｍ〜２５ｃｍの
範囲内で培養し、種苗培養も本培養も、好ましくは１５
ｃｍで培養を開始して、培養終了時で２０ｃｍとするの
が望ましい。

【００３５】なお、上記実施例は高水温期における培養
例を示したが、低水温期や中水温期においても、第１の
発明と第２の発明に示した培養条件に設定すれば、高水
温期とほぼ同じ各種の結果が得られ、一年を通して安定
したクロレラ培養ができる。一年を通して種苗培養段階
では、蛋白質含有量４０〜５５％、クロロフィル含有量
２．４〜３．０％、細菌感染度２〜１０％、クロレラは
正常で、生産性２５〜２８ｇ／ｍ^２／日である。一年を
通して本培養段階で、蛋白質含有量６０％以上、クロロ
フィル含有量４．０〜５．０％、細菌感染度１０〜２５
％、クロレラは正常で、生産性２５〜２８ｇ／ｍ^２／日
である。

【００３６】

【発明の効果】上記した請求項１の発明によれば、クロ
レラの培養を種苗培養と本培養に分け、培養の前半にお
いては、培養を始める種苗培養用の基礎培地には窒素源
である尿素が含まれていないのでスタート時点の培養種
苗の細菌感染度がきわめて低く、種苗培養で与えられる
補給培地の炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１で、
窒素源が少ないため、種苗培養中の蛋白質含有量は４０
〜５５％と少ないが、細菌感染度が低い種苗培養をする
ことができ、培養の後半においては、本培養で与えられ
る補給培地の炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１
で、窒素源が適度に豊富であるため、本培養中に蛋白質
含有量は６０％以上に増加し、窒素源が豊富な期間が短
いため細菌感染度が正常な範囲で培養を終了し、次回の
種苗を計画通りに確保して、正常なクロレラを収穫する
ことができる。この方法によれば、基本的には、培養で
与えられる炭素：窒素比は、補給培地の炭素：窒素比と
同じであるため、培養の炭素：窒素比の管理が容易にで
きる。

【００３７】上記した請求項２の発明によれば、クロレ
ラの培養を種苗培養と本培養に分け、培養の前半におい
ては、培養を始める種苗培養用の基礎培地には窒素源で
ある尿素が含まれていないのでスタート時点の培養種苗
の細菌感染度がきわめて低く、種苗培養で与えられる補
給培地の炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１で、窒
素源が少ないため、種苗培養中の蛋白質含有量は４０〜
５５％と少ないが、細菌感染度が２．０〜１０．０％と
低く、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の培養をする
ことができ、培養の後半においては、本培養で与えられ
る補給培地の炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１
で、窒素源が適度に豊富であるため、本培養中に蛋白質
含有量は６０％以上に増加し、窒素源が豊富な期間が短
いため細菌感染度が１０．０〜２５．０％と正常な範囲
で培養を終了し、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の
培養をすることができ、次回の種苗を計画通りに確保し
て、正常なクロレラを収穫することができる。この方法
によれば、基本的には、培養で与えられる炭素：窒素比
は、補給培地の炭素：窒素比と同じであるため、培養の
炭素：窒素比の管理が容易にできる。１日分の補給培地
に含まれた酢酸の補給量は、種苗培養も本培養も同じ
で、培養池１ｍ２当り１０３ｇ±４ｇで一定であり、種
苗量と培養日数を調整することにより酢酸を消費する藻
体量を調節することで、酢酸の消費速度をコントロール
し、クロロフィル含有量を３．５〜４．３％に安定して
維持することができる。１日の酢酸補給終了後２時間の
ｐＨ上昇値を０．５以上とするのは、１日分の酢酸補給
終了後の早い時間のうちに酢酸濃度をゼロとして、クロ
ロフィル含有量を増すためである。従来よりも種苗量を
多く設定することで、特に培養の前半において、従来よ
りも酢酸の消費量を多く、単位面積あたりの酢酸消費速
度を早くすることができる。また、細胞の増殖速度が遅
い低水温期においても、生産性を高くすることができ
る。低水温期の培養であっても、高水温期と同じ酢酸量
を補給し、藻体量を多くし、酢酸の消費量を多く、単位
面積あたりの酢酸消費速度を早くすることにより、高水
温期と同等の単位面積あたりの生産量を維持することが
できる。また、１日分の酢酸補給終了後の早い時間のう
ちに酢酸濃度がゼロとなることと、細胞１個あたりに与
えられる１日の酢酸量を少なくしたことにより、クロロ
フィルを安定して高めることができた。これは、細菌感
染度を低くする技術があって初めて実現したことであ
る。本発明の補給培地による酢酸補給方法、設定された
種苗量、培養日数は、酢酸補給の過不足のない方法であ
り、適切な藻体量を収穫して、計画通りに次回の種苗を
確保することができるのである。酢酸が過剰供給になら
ない設定値なので、細菌感染度が低い理由の１つにもな
っている。種苗量が従来よりも多く設定されていること
も、細菌感染度が低い理由である。本発明は、培養期間
における日中の最高水温が約１７〜３８℃の年間を通し
て実施できる。年間を高水温期（約２８〜３８℃）、中
水温期（約２２〜２８℃）、低水温期（約１７〜２２
℃）の３つの時期に分けて、それぞれの条件を設定して
培養が行なわれる。水温は一応の目安であり、培養期間
中の水温が全てこの範囲でなければいけないということ
ではない。培養日数を長くするほど、藻体量は増加し、
藻体量が多いほどクロロフィル含有量が高く酢酸収率が
低くなる傾向にある。培養藻体量の上限を設定し調整す
ることで、クロレラの生産性と収穫されたクロロフィル
含有量を良好に維持することができる。また、培養池の
水深は１５〜２５ｃｍで、この範囲は藻の高い増殖率と
低い細菌感染度を両立することができる。

【００３８】上記した請求項３の発明によれば、クロレ
ラの培養を種苗培養と本培養に分け、培養の前半におい
ては、培養を始める種苗培養用の基礎培地には窒素源で
ある尿素が含まれていないのでスタート時点の培養種苗
の細菌感染度がきわめて低く、種苗培養で与えられる補
給培地の炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１で、窒
素源が少ないため、種苗培養中の蛋白質含有量は４０〜
５５％と少ないが、細菌感染度が２．０〜１０．０％と
低く、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の培養をする
ことができ、培養の後半においては、本培養で与えられ
る補給培地の炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１
で、窒素源が適度に豊富であるため、本培養中に蛋白質
含有量は６０％以上に増加し、窒素源が豊富な期間が短
いため細菌感染度が１０．０〜２５．０％と正常な範囲
で培養を終了し、１日の生産性が２５〜２８ｇ／ｍ２の
培養をすることができ、次回の種苗を計画通りに確保し
て、正常なクロレラを収穫することができる。この方法
によれば、基本的には、培養で与えられる炭素：窒素比
は、補給培地の炭素：窒素比と同じであるため、培養の
炭素：窒素比の管理が容易にできる。１日分の補給培地
に含まれた酢酸の補給量は、種苗培養も本培養も同じ
で、培養池１ｍ２当り１０３ｇ±４ｇで一定であり、種
苗量と培養日数を調整することにより酢酸を消費する藻
体量を調節することで、酢酸の消費速度をコントロール
し、クロロフィル含有量を４．０〜５．０％に安定して
維持することができる。１日の酢酸補給終了後２時間の
ｐＨ上昇値を０．５以上とするのは、１日分の酢酸補給
終了後の早い時間のうちに酢酸濃度をゼロとして、クロ
ロフィル含有量を増すためである。従来よりも種苗量を
多く設定することで、特に培養の前半において、従来よ
りも酢酸の消費量を多く、単位面積あたりの酢酸消費速
度を早くすることができる。また、細胞の増殖速度が遅
い低水温期においても、生産性を高くすることができ
る。低水温期の培養であっても、高水温期と同じ酢酸量
を補給し、藻体量を多くし、酢酸の消費量を多く、単位
面積あたりの酢酸消費速度を早くすることにより、高水
温期と同等の単位面積あたりの生産量を維持することが
できる。また、１日分の酢酸補給終了後の早い時間のう
ちに酢酸濃度がゼロとなることと、細胞１個あたりに与
えられる１日の酢酸量を少なくしたことと、補給最終日
の酢酸補給量を前日までの５０〜６０％としたことによ
り、クロロフィルを安定して高めることができた。これ
は、細菌感染度を低くする技術があって初めて実現した
ことである。本発明の補給培地による酢酸補給方法、設
定された種苗量、培養日数は、酢酸補給の過不足のない
方法であり、適切な藻体量を収穫して、計画通りに次回
の種苗を確保することができる。酢酸が過剰供給になら
ない設定値なので、細菌感染度が低い理由の１つにもな
っている。種苗量が従来よりも多く設定されていること
も、細菌感染度が低い理由である。本発明は、培養期間
における日中の最高水温が約１７〜３８℃の年間を通し
て実施できる。年間を高水温期（約２８〜３８℃）、中
水温期（約２２〜２８℃）、低水温期（約１７〜２２
℃）の３つの時期に分けて、それぞれの条件を設定して
培養が行なわれる。水温は一応の目安であり、培養期間
中の水温が全てこの範囲でなければいけないということ
ではない。培養日数を長くするほど、藻体量は増加し、
藻体量が多いほどクロロフィル含有量が高く酢酸収率が
低くなる傾向にある。培養藻体量の上限を設定し調整す
ることで、クロレラの生産性と収穫されたクロロフィル
含有量を良好に維持することができる。また、培養池の
水深は１５〜２５ｃｍで、この範囲では藻の高い増殖率
と低い細菌感染度を両立することができる。

【００３９】上記した請求項４の発明によれば、上記第
１〜第３の発明が種苗培養と本培養に分かれているの
で、種苗培養を完了した培養液の一部をもとに別のプー
ル（培養池）で新たな種苗培養を行ない、残った培養液
を種に本培養を行なって全量を収穫することが可能であ
り、非常に能率的で、計画的な培養ができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献特公昭50−11466（ＪＰ，Ｂ１) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C12N 1/12 ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】日光照射下で酢酸を炭素源およびエネル
ギー源とした混合栄養的培養によりクロレラを工業的に
培養する方法において、種苗から収穫にいたる培養を前
半の種苗培養と後半の本培養に分けて培養し、種苗培養
を始める基礎培地には尿素を含んでおらず、種苗培養に
おいて基礎培地に補給する補給培地には窒素源としての
尿素が含まれていて炭素：窒素比が７．０：１〜７．
５：１の範囲であり、種苗培養を終了した藻体を種とし
て培養する本培養において基礎培地に補給する補給培地
には窒素源としての尿素が含まれていて炭素：窒素比が
４．５：１〜５．５：１の範囲であることを特徴とする
クロレラ培養方法。
【請求項２】日光照射下で酢酸を炭素源およびエネル
ギー源とした混合栄養的培養によりクロレラを工業的に
培養する方法において、培養池の水深を１５〜２５ｃｍ
の範囲とし、種苗から収穫にいたる培養を前半の種苗培
養と後半の本培養に分けて培養し、種苗培養を始める基
礎培地には尿素を含んでおらず、種苗培養において基礎
培地に補給する補給培地には窒素源としての尿素が含ま
れていて炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１の範囲
であり、種苗培養終了後の本培養において基礎培地に補
給する補給培地には窒素源としての尿素が含まれていて
炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１の範囲であり、
種苗培養並びに本培養における１日分の補給培地に含ま
れる酢酸量を培養池１ｍ２当たり１０３ｇ±４ｇとし、
補給培地の補給終了から２時間後のｐＨ上昇値が０．５
以上であり、培養池の日中最高水温が約１７〜２２℃の
低水温期においては、培養池１ｍ２当たりの最初の種苗
量を１７５〜２００ｇ乾燥藻体、種苗培養日数を基礎培
地での初日を数えず種苗培養用の補給培地を補給する６
日間と酢酸を補給しない最終日の計７日間、本培養日数
を本培養用の補給培地を補給する６日間と収穫する最終
日の計７日間、培養池１ｍ２当たりの収穫量の上限を３
３０ｇ乾燥藻体以下とし、培養池の日中最高水温が約２
２〜２８℃の中水温期においては、培養池１ｍ２当たり
の最初の種苗量を１５０〜１７５ｇ乾燥藻体、種苗培養
日数を基礎培地での初日を数えず種苗培養用の補給培地
を補給する５日間と酢酸を補給しない最終日の計６日
間、本培養日数を本培養用の補給培地を補給する５日間
と収穫する最終日の計６日間、培養池１ｍ２当たりの収
穫量の上限を３８５ｇ乾燥藻体以下とし、培養池の日中
最高水温が約２８〜３８℃の高水温期においては、培養
池１ｍ２当たりの最初の種苗量を１２５〜１５０ｇ乾燥
藻体、種苗培養日数を基礎培地での初日を数えず種苗培
養用の補給培地を補給する４日間と酢酸を補給しない最
終日の計５日間、本培養日数を本培養用の補給培地を補
給する４日間と収穫する最終日の計５日間、培養池１ｍ
２当たりの収穫量の上限を４４５ｇ乾燥藻体以下とする
ことを特徴とするクロレラ培養方法。
【請求項３】日光照射下で酢酸を炭素源およびエネル
ギー源とした混合栄養的培養によりクロレラを工業的に
培養する方法において、培養池の水深を１５〜２５ｃｍ
の範囲とし、種苗から収穫にいたる培養を前半の種苗培
養と後半の本培養に分けて培養し、種苗培養を始める基
礎培地には尿素を含んでおらず、種苗培養において基礎
培地に補給する補給培地には窒素源としての尿素が含ま
れていて炭素：窒素比が７．０：１〜７．５：１の範囲
であり、種苗培養終了後の本培養において基礎培地に補
給する補給培地には窒素源としての尿素が含まれていて
炭素：窒素比が４．５：１〜５．５：１の範囲であり、
種苗培養並びに本培養における１日分の補給培地に含ま
れる酢酸量を培養池１ｍ２当たり１０３ｇ±４ｇとし、
補給培地の補給終了から２時間後のｐＨ上昇値が０．５
以上であり、本培養の補給最終日における１日分の補給
培地に含まれる培養池１ｍ２当たりの酢酸補給量を前日
までの５０〜６０％として午前中に補給を完了させ、培
養池の日中最高水温が約１７〜２２℃の低水温期におい
ては、培養池１ｍ２当たりの最初の種苗量を１７５〜２
００ｇ乾燥藻体、種苗培養日数を基礎培地での初日を数
えず種苗培養用の補給培地を補給する６日間と酢酸を補
給しない最終日の計７日間、本培養日数を本培養用の補
給培地を補給する６日間と収穫する最終日の計７日間、
培養池１ｍ２当たりの収穫量の上限を３３０ｇ乾燥藻体
以下とし、培養池の日中最高水温が約２２〜２８℃の中
水温期においては、培養池１ｍ２当たりの最初の種苗量
を１５０〜１７５ｇ乾燥藻体、種苗培養日数を基礎培地
での初日を数えず種苗培養用の補給培地を補給する５日
間と酢酸を補給しない最終日の計６日間、本培養日数を
本培養用の補給培地を補給する５日間と収穫する最終日
の計６日間、培養池１ｍ２当たりの収穫量の上限を３８
５ｇ乾燥藻体以下とし、培養池の日中最高水温が約２８
〜３８℃の高水温期においては、培養池１ｍ２当たりの
最初の種苗量を１２５〜１５０ｇ乾燥藻体、種苗培養日
数を基礎培地での初日を数えず種苗培養用の補給培地を
補給する４日間と酢酸を補給しない最終日の計５日間、
本培養日数を本培養用の補給培地を補給する４日間と収
穫する最終日の計５日間、培養池１ｍ２当たりの収穫量
の上限を４４５ｇ乾燥藻体以下とし、本培養最終日にお
ける収穫を午後に実施することを特徴とするクロレラ培
養方法。
【請求項４】請求項１、２又は３記載のクロレラ培養
方法において、種苗培養を終了した段階の培養液を二分
し、一方を種苗培養用の種苗に使用して新たな種苗培養
を実施し、もう一方を本培養用の種苗に使用して本培養
を実施して全量を収穫し、この工程を繰り返すことを特
徴とするクロレラ培養方法。