JP3083577B2 - 精製マクロライド抗生物質の製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は，精製されたアルデヒド
基含有マクロライド抗生物質の製造法に関する。更に詳
しくは，本発明は粗製のアルデヒド基含有マクロライド
抗生物質の亜硫酸水素ナトリウム付加物を分解抽出して
精製することを主な特徴とする精製アルデヒド基含有マ
クロライド抗生物質の製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】マクロライド抗生物質は，主としてブド
ウ球菌などの広範囲のグラム陽性に属する病原菌やマイ
コプラズマなどに抗菌活性を示し，医薬品として重要で
ある。一般微生物の培養と同様，マクロライド抗生物質
を生産する場合においても，目的有効成分の他に，その
有効成分と構造上類似する副生物が同時に産生される場
合が多い。また，マクロライド抗生物質は，構造上類似
する多種の有効成分が同時に産生される場合も多い。通
常このような培養物から目的有効成分を単離し，精製す
るには，適当な溶剤に対する溶解性及び溶解度の差，溶
液からの析出性及び析出速度の差，種々の吸着剤に対す
る吸着親和性の差，２種の液相間における分配の差など
を利用する単離精製手段を，目的有効成分や，副生物な
どを考慮しながら，適宜選択し，組合せ，反復するなど
いろいろと駆使して行なわれるのが一般的である。

【０００３】しかしながら，工業的規模で生産し単離精
製するためには，できるだけ小規模装置でより工程数が
少なく，より簡便で効率よく目的有効物質を純度よく取
得しうる工業的単離精製法が生産性を向上させる上で望
ましく，その確立が望まれている。また，工業的単離精
製法は，種々のマクロライド抗生物質を取扱う場合に
は，更に汎用性の高い技術を確立することが望まれる。

【０００４】従来，多成分の塩基性マクロライド抗生物
質の分離採取法として，非イオン性のスチレン系樹脂に
吸着させ，これを有機溶媒とｐＨ３乃至８の水溶液の混
合溶媒で溶出する技術は公知である（特開昭４８−７６
８８０号公報）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら，緩衝液
のｐＨ調整で個々の有効成分を分離採取するこの技術
は，緩衝剤溶媒タンクをさらに必要とするばかりでな
く，その緩衝剤調整，ｐＨ制御も決して容易ではない。
そればかりか，同じく多成分の塩基性マクロライド抗生
物質が同時に産生される特開昭６１−２６８１７６号公
報記載の化１で示されるＹＳ−０２９３０Ｋ−Ｄ物質
（以下Ｄ物質という）及びＹＳ−０２９３０Ｋ−Ｅ物質
（以下Ｅ物質という）などのＹＳ−０２９３０Ｋ群抗生
物質に適用しても，純度が２０〜４８％程度に止まり，
この方法は到底工業的に利用できる方法ではなかった。

【０００６】

【化１】

【０００７】なお，特開昭６１−２６８１７６号公報に
記載の単離精製法は，実験室的製法であって，濾過して
菌体を除き，ｐＨ調整下で何度も酢酸エチルで分液抽出
乾燥し，シリカゲル薄層クロマトグラフィーで展開して
分離された個々のスポットをかきとり，必要によりさら
にシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製している
ものであるが，薄層クロマトグラフィーは工業的生産に
は不向きであり，かつｐＨ調整下酢酸エチルで抽出して
も工業的には所望の純度にまで高めることは困難であっ
た。

【０００８】

【課題を解決するための手段】このような技術水準下
に，本発明者らはマクロライド系抗生物質の工業的に有
利な単離精製法を確立すべく，マクロライド抗生物質の
多くに共通して存在するアルデヒド基に着目し，そのア
ルデヒド基に対する亜硫酸水素アルカリ金属付加物を，
分液可能で分配可能な有機溶媒の存在下に，強アルカリ
水溶液で処理すると，付加物の分解と，極性の高い不純
物から峻別しての抽出を同時に行うことが可能でありか
つ高純度，高収率で目的マクロライド抗生物質を取得し
うることを見い出した。

【０００９】また，本発明者らは，マクロライド抗生物
質の多くがジメチルアミノ基を有しかつ塩基性であるこ
とに着目し，上記の付加物を，酸性陽イオン交換樹脂を
用いて作成すれば，アルデヒド不含の類縁物質から完全
に分別できることは勿論のこと，不純物の多い流入材料
を用いても効率的に純度を高めうることを知った。

【０００１０】さらに，本発明者らは，非イオン性の吸
着型樹脂による類縁物質の分離が，緩衝液でｐＨ調整し
なくても，含水有機溶媒の有機溶媒濃度差で分離可能で
あることを確認して，上記の付加物を作成する工程に先
がけて，この分離を行なえば，目的物質以外のアルデヒ
ド基を含有する類縁物質のほとんどを予め分離しておく
ことが可能となることを知見した。

【００１１】本発明は，これらの知見に基づいて完成さ
れたものであって，その最も特徴とするものの一つとし
て，アルデヒド基を亜硫酸水素アルカリ金属との付加物
とし，強アルカリで戻す化学的方法が，マクロライド抗
生物質の精製に使用可能であり，かつこの方法によると
きはマクロライド抗生物質の収率及び純度を顕著に高め
うる点にある。また，本発明の方法は，上記ＹＳ−０２
９３０Ｋ群マクロライド抗生物質で効果を確認したもの
であるが，化学的な方法であるから，アルデヒド基含有
マクロライド抗生物質あるいはアルデヒド基含有塩基性
マクロライド抗生物質の全てに利用できる汎用性があ
る。

【００１２】以下に，本発明につき詳述する。上記した
ように，本発明において単離・精製の目的とされるマク
ロライド抗生物質としては，アルデヒド基あるいは該基
とジメチルアミノ基を含有するものであれば，いかなる
マクロライド抗生物質でもよく，限定されない。かかる
マクロライド抗生物質はＹＳ−０２９３０Ｋ群の他，ジ
ョサマイシン，ロイコマイシン群，スピラマイシン群，
カルボマイシン群，シラマイシン群，タイロシン，アン
ゴラマイシンや上記の基を含有するこれらの誘導体が代
表的なものとして例示できる。

【００１３】以下に本発明の各工程につき詳述する。な
お，説明の便宜上，非イオン性吸着型樹脂に吸着させ含
水有機溶媒で溶出する工程をＨＰ工程，酸性陽イオン交
換樹脂に吸着させ，重亜硫酸アルカリ金属塩の水溶液で
付加物を溶出させる工程をＳＫ工程，該付加物を分液分
配可能な有機溶媒中強アルカリ水溶液で処理して目的物
質を抽出する工程を抽出工程と称する。

【００１４】（ＨＰ工程）この工程は，精製のマクロラ
イド抗生物質を非イオン性吸着型樹脂に吸着させ，含水
有機溶媒の濃度差によって目的のマクロライド抗生物質
を含む成分に分離する工程である。ここに用いられる非
イオン性吸着型樹脂としては，スチレン系吸着型樹脂と
して市販されているものを用いることが可能であり，こ
のような市販品としてはダイヤイオンＨＰ２０，ＨＰ２
１，ＳＰ８００（いずれも商品名 三菱化成）やアンバ
ーライトＸＡＤ−２（商品名 ローム・アンド・ハー
ス）が有利に用いられる。含水有機溶媒は，その有機溶
媒濃度を設定することによって，目的のマクロライド抗
生物質が溶離可能なものであればよい。このような水に
可溶な有機溶媒としては，アセトンなどのケトン類，メ
タノール，エタノール，イソプロパノールなどのアルコ
ール類が挙げられる。中でもアセトンやイソプロパノー
ルが好適に用いられる。含水有機溶媒濃度は，目的物質
の溶離性が溶媒やその濃度によって異なるのでこれらを
考慮して適宜設定する必要があるが，例えばマクロライ
ド抗生物質としてＹＳ−０２９３０Ｋ群で有機溶媒がア
セトンのときは，約２０〜３５ｖ／ｖ％が有利である。
アセトンの溶離性は良好であるから，溶離性が悪い溶媒
を使用するときは有機溶媒濃度を高めに設定し，溶離性
が良い溶媒の場合は同等あるいは低めに設定すればよ
い。なお，このＨＰ工程に流入される粗製のマクロライ
ド抗生物質は，発酵ブロスから常法により菌体を遠心分
離あるいは濾過して除去したものを用いるのが有利であ
る。また，この発酵ブロスは，菌体凝集，樹脂への吸着
を良好にするために，塩酸，硫酸などの強酸を添加し，
ｐＨ１〜３程度に調整してもよい。含水有機溶媒の設定
濃度差で分離するこの工程によれば，その濃度差によっ
て目的物質よりも疎水性の類縁物質（この中にはアルデ
ヒド基を有する類縁物質も含まれる）が溶出されないの
で分離可能であり，また塩類はこの樹脂に吸着されない
ので脱塩可能であり，また着色物質などの不純物は疎水
性のものも多いので，溶出されずに残るものが多い。な
お，溶出は，溶出物の品質，収率などを考慮して，条件
を適宜選択設定制御して行なうのが好ましい。例えば温
度条件は２０〜３０℃程度に溶出速度ＳＶ（液空間速
度）＝０．５〜２に設定するのが有利である。

【００１５】（ＳＫ工程）この工程は化２で示されるよ
うに，アルデヒド基及びジメチルアミノ基を有するマク
ロライド抗生物質を，酸性陽イオン交換樹脂に吸着さ
せ，次いで重亜硫酸アルカリ金属塩の水溶液で，付加物
として溶出させる工程である。

【００１６】

【化２】

【００１７】（式中，ＲｅｓｉｎはＸ−Ｍを有する酸性
陽イオン交換樹脂を，Ｘは−ＳＯ_３−又は−ＣＯ_２−
を，Ｍはアルカリ金属を，Ａ^１はアルデヒド基及びジメ
チルアミノ基を除いたマクロライド抗生物質の残基を意
味する。）ここに酸性陽イオン交換樹脂としてはスルホ
ン酸型の強酸性陽イオン交換樹脂やカルボン酸型の弱酸
性陽イオン交換樹脂の双方が使用可能であるが，強酸性
陽イオン交換樹脂が有利に用いられる。このような交換
樹脂としては市販品を用いることが可能であり，このよ
うな市販品としてはダイヤイオンＳＫ１０４，ＳＫ１０
４Ｓ，ＰＫ２０８，ＰＫ２１６（いずれも商品名 三菱
化成），ＩＲ−１１８（商品名 ローム・アンド・ハー
ス）や５０ＷＸ１，５０ＷＸ２，５０ＷＸ４（商品名
ダウケミカル）のいずれを用いることもできる。また，
上記のアルカリ金属としては，ナトリウム，カリウムの
いずれかであってもよいが，ナトリウムが有利に用いら
れる。重亜硫酸ナトリウム塩は，通常二量体の無水重亜
硫酸ナトリウム（Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_５）として市販されてお
り，これを水に加えれば亜硫酸水素ナトリウム（ＮａＨ
ＳＯ_３）となる。溶出に際しては，溶出物の品質，収率
などを考慮して，重亜硫酸アルカリ金属塩の水溶液の溶
出条件を適宜，選択設定制御して行なわれるが，例えば
重亜硫酸アルカリ金属塩の水溶液のｐＨは３〜９，好ま
しくは４〜８に設定し，また溶出の際の温度条件は２０
〜３０℃に溶出速度ＳＶ＝０．５〜２程度に設定し，付
加物は不安定なので溶出液は１０℃以下に冷却するのが
好ましい。この工程によれば，アルデヒド基を有しない
マクロライド抗生物質などの類縁物質は，付加物を形成
しないので溶出されずに残り，着色物質の残りは吸着さ
れなかったり，吸着しても溶出されないので脱色が完全
になる。

【００１８】（抽出工程）この工程は，化３で示される
ようにアルデヒド基を有するマクロライド抗生物質の亜
硫酸水素アルカリ金属付加物を，水と分液が可能で目的
抗生物質が分離可能な有機溶媒中で強アルカリ水溶液を
加えて撹拌することにより目的抗生物質を抽出する工程
である。

【００１９】

【化３】

【００２０】（式中Ｍは前記の意味を有し，Ａ２はアル
デヒド基を除いたマクロライド抗生物質残基を意味す
る。）ここに，分液分配可能な有機溶媒としては，ジク
ロルメタン，ジクロルエタンなどのハロゲン化炭化水素
系有機溶媒，ｎ−ヘキシルアルコール，ｎ−ブタノール
などの比較的疎水性のアルコール類，酢酸エチルなどの
エステル類やメチルイソブチルケトンなどのケトン類な
どが挙げられるが，抽出効果の点でジクロルメタン，ジ
クロルエタンなどのハロゲン化炭化水素系溶媒が有利で
ある。強アルカリ水溶液としては水酸化ナトリウムや水
酸化カリウムなどの苛性アルカリが好適に用いられる。
なお，この工程においてはマクロライド抗生物質は付加
物を形成したものであればよく，塩基性のものに限定さ
れないがＳＫ工程と連続して処理するときはジメチルア
ミノ基を有するものとなる。この工程によれば，アルデ
ヒド基含有マクロライド抗生物質で，有機層に分配され
るものが回収され，親水性不純物の残りが完全に除去さ
れ，また，目的物質と同様にアルデヒド基を有し，目的
物質よりも低疎水性の類縁物質も有機溶媒の種類，その
使用量や苛性アルカリ量を適宜設定することによって抽
出不可とすることができるので除去が可能となる。この
際の有機溶媒量としては通常溶出液量の１／４以上に設
定するのが好適であるが，溶出性の度合を考慮して適宜
増減することは自由である。また，この抽出工程におい
ても，強アルカリ水溶液のｐＨなど種々の分配抽出条件
は，得られる製品の品質や収率などを考慮して適宜選
択，設定され，制御して行うのが好ましく，例えば強ア
ルカリ水溶液のｐＨは１３以上好ましくは１４以上に設
定される。

【００２１】このようにして抽出された抽出液は強アル
カリ性であるから中和した後，あるいは必要により酸転
して再度同様の有機溶媒を加え，分液抽出した後，濃縮
乾燥することにより目的抗生物質を高純度高収率で取得
することができる。

【００２２】なお，本発明の実施例としてＹＳ−０２９
３０Ｋ群抗生物質の精製法を掲記しているが，Ｄ物質と
Ｅ物質とは二重結合とそのエポキシ体との相違のみで理
化学的性質が近似しているため，極めて分離しにくい物
質である。もしＥ物質を除去したい場合は，Ｅ物質は酸
性条件下で不安定であるから，上記工程の前後で，酸性
条件処理することにより，共存する他のエポキシ体同
様，除去することができる。

【００２３】本発明によれば、原料付加物から目的とす
るアルデヒド基含有マクロライド抗生物質のみを、少な
くとも９１％以上のほぼ定量的な収率で、９０〜９８％
の高純度に取得しうることが可能であり、アルデヒド基
含有マクロライド抗生物質の画期的な精製法として極め
て有用である。付加物より強アルカリで分解して元のア
ルデヒド物質に変換することは分析法などで公知である
ものの、マクロライド抗生物質に適用し、しかもその分
解と抽出を同時に行ったのは初めてであり、高純度、高
収率で精製該マクロライド抗生物質を取得しえたこと
は、当該抗生物質精製の分野において全く予想外のこと
である。また、本発明はこの付加物を利用する工程と、
有機溶媒濃度差のみで行うＨＰ工程を組合わせることに
より、従来の、緩衝液によるｐＨ調整で分離する技術で
は達しえなかった純度の問題を一挙に解決した点におい
て予想外である。因みに本発明のＨＰ工程、ＳＫ工程及
び抽出工程、場合によりさらに酸転工程で処理した精製
された目的マクロライド抗生物質の収率はＨＰ工程（約
９５〜１００％）、ＳＫ、抽出、酸転工程合わせて（約
７７〜８１％）の全体で約７３〜８１％であり、精製品
の純度は９０〜９５％に達し、これは発酵ブロス（実施
例２の７０ｍ³製造の１７ロットの値）から６４０００
〜１３０００倍、濾液固形物（実施例２の７０ｍ³製造
の１７ロットの値）から４００〜２０００倍程度の高純
度である。従って、本発明は、マクロライド抗生物質の
画期的な精製法を提供できた点において産業上顕著な効
果を奏しえたものである。上記の効果は以下のようにし
て確認された。 １．抽出工程における収率及び純度 Ｄ物質８０ｍｇをｐＨ３．５の硫酸水２００ｍｌに溶解
し、無水重亜硫酸ナトリウム１００ｍｇを加え付加物を
作る。この付加物含有液に、ジクロルメタン２００ｍｌ
及び２５％水酸化ナトリウム水溶液１２．５ｍｌを加
え、付加物を加水分解抽出する。抽出液を水２００ｍｌ
を用いて洗浄し、濃縮乾燥すると、Ｄ物質＝７４ｍｇが
得られた。 収率＝９１．９％ 純度＝９９．３％ ２．ＳＫ工程から酸転工程までの回収率 実施例２のＨＰ工程終了後のサンプルに、Ｄ物質とＥ物
質を含む混合物を加え、それぞれ、２２３γ／ｍｌ、１
５４γ／ｍｌの濃度の溶液を調整する。この溶液２５０
ｍｌをダイヤイオンＳＫ−１０４Ｓを充填した１０ｍｌ
カラム（９φｘ１６ｍｍ）に吸着させ、水洗した後、
０．３〜０．６％の無水重亜硫酸ナトリウムの水溶液を
加え溶出し（溶出液は１０℃以下に冷却）、次いでジク
ロルメタンと２５％水酸化ナトリウム水溶液とを用いて
抽出し、硫酸を用いてｐＨ２に調整して酸転した結果回
収率はＤ物質が約７７．５％〜８０．７％であった。

【００２４】

【実施例】以下に実施例を掲記し，本発明を更に詳細に
説明する。なお，文中の収率，純度は実生産規模のもの
であり，当業者ならばその収率，純度の顕著性は明らか
である。

【００２５】実施例 １ 特開昭６１−２６８１７６号実施例記載の培養方法で得
られた培養液２ｍ^３（Ｄ物質＝２１８ｇ，Ｅ物質＝１９
０ｇ）に水２．２ｍ^３，ラジオライト昭和化学工業製１
５０ｋｇを加え撹拌する。硫酸を用いてｐＨ＝２．３に
調整した後濾過をする。得られた濾液５．２ｍ^３をＨＰ
２１のカラム（１００Ｌ，φ２８×１６２ｃｍ）に，Ｓ
Ｖ＝３にて通液しＹＳ−０２９３０Ｋ群抗生物質を吸着
した後，２００Ｌの水でカラムを洗浄し不純物を流出す
る。つぎに４００Ｌの２５％アセトンを用いＳＶ＝１，
２０℃の条件下にて溶出し，主溜分３００Ｌを分取す
る。得られた溶出液をＳＫ１０４Ｓ（１０Ｌ，φ１８×
４０ｃｍ）に，ＳＶ＝２にて通液しＹＳ−０２９３０Ｋ
群抗生物質を吸着した後，２０Ｌの水でカラムを洗浄
し，アセトンその他の不純物を流出する。つぎに１００
Ｌの０．４％無水重亜硫酸ナトリウムを用いてＳＶ＝
０．５，２０℃の条件下にて溶出し，主溜分９０Ｌを分
取する。得られた溶出液に４５Ｌのジクロルメタンと
５．６Ｌの２５％水酸化ナトリウム水溶液を加え，３０
分間撹拌した後ジクロルメタン層を分離する。つぎにジ
クロルメタン層に１５Ｌの水を加え，硫酸を用いてｐＨ
＝２．０に調整し３０分間撹拌した後水層を分離する。
得られた水層に７．５Ｌのジクロルメタンを加え，２５
％水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨ＝９．０に調整
し３０分間撹拌した後ジクロルメタン層を分離する。ジ
クロルメタン層を０．３Ｌの水で洗浄した後２０〜３０
℃にて減圧濃縮するとＤ物質＝７３％，Ｅ物質＝２２％
を含む２００ｇの白色粉末が得られた。 回収率：Ｄ物質＝６７％ 純度：Ｄ物質＝７３％ なお，このものの純度は前述した如く予じめ酸処理を経
てＥ物質を除去すればＤ物質として９０％以上の純度の
ものが得られることを示している。また，これらＤ物質
及びＥ物質の理化学的性状は特開昭６１−２６８１７６
号公報記載の標品と一致した。

【００２６】実施例 ２ 実施例１と同じ方法により得られた培養液６１ｍ^３（Ｄ
物質＝３．６ｋｇ，Ｅ物質＝３．０ｋｇ，純度０．００
５９％）に水１２０ｍ^３，ラジオライト４２００ｋｇを
加え撹拌する。硫酸を用いてｐＨ＝２．０調整した濾過
をする。得られた濾液１８０ｍ^３（濾液固形物として純
度０．１８％）をＨＰ２１のカラム（１０ｍ^３，φ２．
１×２．９ｍ）に，ＳＶ＝１にて通液しＹＳ−０２９３
０Ｋ群抗生物質を吸着した後，２０ｍ^３の水でカラムを
洗浄し不純物を流出する。つぎに３２ｍ^３の３０％アセ
トン水を用いＳＶ＝１，２０℃の条件下にて溶出し，主
溜分３０ｍ^３を分取する。得られた溶出液をＳＫ１０４
Ｓ（０．５ｍ^３，φ０．８×１．０ｍ）に，ＳＶ＝３に
て通液しＹＳ−０２９３０Ｋ群抗生物質を吸着した後，
２．５ｍ^３の水でカラムを洗浄し，アセトンその他の不
純物を流出する。つぎに５．５ｍ^３の０．４％無水重亜
硫酸ナトリウムを用いＳＶ＝０．５，２０℃の条件下に
て溶出し，主溜分５ｍ^３を分取する。得られた溶出液に
２．５ｍ^３のジクロルメタンと０．３１ｍ^３の２５％水
酸化ナトリウム水溶液を加え，３０分間撹拌した後ジク
ロルメタン層を分離する。つぎにジクロルメタン層に
０．８ｍ^３の水を加え，硫酸を用いてｐＨ＝２．０に調
整し３０分間撹拌した後水層を分離する。得られた水層
に０．４ｍ^３のジクロルメタンを加え，２５％水酸化ナ
トリウム水溶液を用いてｐＨ＝９．３に調整し３０分間
撹拌した後ジクロルメタン層を分離する。ジクロルメタ
ン層を０．２ｍ^３の水で洗浄した後２０〜３０℃にて減
圧濃縮するとＤ物質＝７２％，Ｅ物質＝２４％を含む
２．５ｋｇの白色粉末が得られた。なお，このものの純
度は，実施例１で前述したと同様に，予め酸処理をして
Ｅ物質を除去すればＤ物質として９０％以上の純度のも
のが得られることを示している。７２％の純度でも発酵
ブロスから１２２００倍，固形物から４００倍，９０％
の純度ではブロスから１５２５０倍，固形物から５００
倍に達する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07H 17/08 C07H 1/06 - 1/08 ＣＡ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アルデヒド基を有するマクロライド抗生
   物質の亜硫酸水素アルカリ金属付加物の水溶液を、分液
   可能で、該マクロライド抗生物質が有機層に分液可能な
   有機溶媒の存在下に、ｐＨ１３以上で分解・抽出を同時
   に行うことを特徴とする精製されたマクロライド抗生物
   質の製造法。
2. 【請求項２】 粗製のマクロライド系抗生物質を酸性
   陽イオン交換樹脂に吸着させ、重亜硫酸アルカリ金属塩
   の水溶液を加えて該マクロライド抗生物質に含まれるア
   ルデヒド基を有するマクロライド抗生物質のみの亜硫酸
   水素アルカリ金属付加物を溶出させ、該付加物の水溶液
   を、分液可能で、該アルデヒド基含有マクロライド抗生
   物質が有機層に分液可能な有機溶媒の存在下に、ｐＨ１
   ３以上で分解・抽出を同時に行うことを特徴とする精製
   されたマクロライド抗生物質の製造法。
3. 【請求項３】 粗製のマクロライド抗生物質を、非イ
   オン性吸着型樹脂に吸着させ、目的とするマクロライド
   抗生物質を溶離可能な含水有機溶媒を加えて、該マクロ
   ライド抗生物質を含む粗製物を溶出させ、溶出された粗
   製のマクロライド抗生物質を酸性陽イオン交換樹脂に吸
   着させ、重亜硫酸アルカリ金属塩の水溶液を加えて該マ
   クロライド抗生物質に含まれるアルデヒド基を有するマ
   クロライド抗生物質のみの亜硫酸水素アルカリ金属付加
   物を溶出させ、該付加物の水溶液を、分液可能で、該ア
   ルデヒド基含有マクロライド抗生物質が有機層に分液可
   能な有機溶媒の存在下に、ｐＨ１３以上で分解・抽出を
   同時に行うことを特徴とする精製されたマクロライド抗
   生物質の製造法。
4. 【請求項４】 分配可能な有機溶媒が、ハロゲン化炭
   化水素系有機溶媒である請求項第１項、第２項又は第３
   項のいずれかの項に記載の製造法。