JP3042753B2 - 解離剤を使用する免疫検定法 - Google Patents
解離剤を使用する免疫検定法Info
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- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、液体試料中の特別な物
質またはアナライトを測定するための免疫検定法に関す
る。詳細には、本発明の免疫検定法では解離剤を使用す
る。
質またはアナライトを測定するための免疫検定法に関す
る。詳細には、本発明の免疫検定法では解離剤を使用す
る。
【０００２】
【従来の技術】多くの免疫検定法では、抗体または抗原
による固相の飽和が高いアナライト濃度における服量反
応プロフィールの勾配を低下させるために検定の有効測
定範囲が制限される。
による固相の飽和が高いアナライト濃度における服量反
応プロフィールの勾配を低下させるために検定の有効測
定範囲が制限される。
【０００３】マイクロタイタープレートで実施される免
疫検定にまつわる別の問題は、数多くのテストウエルへ
試料をピペットで分注する際にかかる時間が原因となる
過剰な「アッセイドリフト」を受けることである。最初
の試料に含まれるアナライトは、最後に添加された試料
に含まれるアナライトよりも長い時間免疫試薬と反応す
ることができる。このため、得られる結果には「アッセ
イドリフト」として知られている系統偏向が導入されう
る。この偏向は、抗体−抗原の結合が迅速に起こる場合
には特に問題となる。同時に検定する試料数を限定する
方法は別にして、この問題の完全に有効な解決策は今の
ところ見当たらない。場合によっては、結果が「アッセ
イドリフト」のために偏向している事実を作業員は受け
入れるしかない。
疫検定にまつわる別の問題は、数多くのテストウエルへ
試料をピペットで分注する際にかかる時間が原因となる
過剰な「アッセイドリフト」を受けることである。最初
の試料に含まれるアナライトは、最後に添加された試料
に含まれるアナライトよりも長い時間免疫試薬と反応す
ることができる。このため、得られる結果には「アッセ
イドリフト」として知られている系統偏向が導入されう
る。この偏向は、抗体−抗原の結合が迅速に起こる場合
には特に問題となる。同時に検定する試料数を限定する
方法は別にして、この問題の完全に有効な解決策は今の
ところ見当たらない。場合によっては、結果が「アッセ
イドリフト」のために偏向している事実を作業員は受け
入れるしかない。
【０００４】解離剤は、アフィニティークロマトグラフ
ィー法において抗体へ抗原が結合するのを妨害すること
が知られている。よって、このような物質を使用してこ
のようなカラムから抗原または抗体を分離する。
ィー法において抗体へ抗原が結合するのを妨害すること
が知られている。よって、このような物質を使用してこ
のようなカラムから抗原または抗体を分離する。
【０００５】例えば米国特許出願第５，１５５，０２３
号明細書や独国特許出願公開第２９７，０１０号明細書
に記載されているように、各種の免疫検定法を改善する
ためにカオトロピック塩(chaotropic salt) を使用する
という提案がいくつかなされている。上記米国特許明細
書は、例えばクラミジア トラコマチス(Chlamydia tra
chomatis) またはクラミジア プシタチ(Chlamydia psi
ttaci)の原因となる微生物を診断できるリポ多糖を解離
し、非特異的に捕捉し、そして検出するための免疫試薬
について記載している。上記独国特許明細書は、カオト
ロピックイオンを使用した初期妊娠試験について記載し
ている。
号明細書や独国特許出願公開第２９７，０１０号明細書
に記載されているように、各種の免疫検定法を改善する
ためにカオトロピック塩(chaotropic salt) を使用する
という提案がいくつかなされている。上記米国特許明細
書は、例えばクラミジア トラコマチス(Chlamydia tra
chomatis) またはクラミジア プシタチ(Chlamydia psi
ttaci)の原因となる微生物を診断できるリポ多糖を解離
し、非特異的に捕捉し、そして検出するための免疫試薬
について記載している。上記独国特許明細書は、カオト
ロピックイオンを使用した初期妊娠試験について記載し
ている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】「アッセイドリフト」
を受けず、従って同時に検定される試料の数が制限され
ることのない免疫検定法の提供が望まれている。
を受けず、従って同時に検定される試料の数が制限され
ることのない免疫検定法の提供が望まれている。
【０００７】
【課題を解決するための手段】上記の課題は、特異的結
合試薬を塗被した容器において液体試料と少なくとも一
種の第一検定試薬とを接触せしめる第一工程と、前記容
器に少なくとも一種の第二検定試薬を添加する第二工程
とを含んでなる、液体試料中のアナライトを測定するた
めの免疫検定法であって、前記第一検定試薬が、前記試
料との接触前に又は接触と同時に添加される解離剤を含
み、前記解離剤は、(a) 前記第一工程においては当該検
定法の抗原−抗体結合を実質的に解離させることがで
き、(b) 当該検定試薬の所期の保存期間中安定であり、
(c) 当該検定用反応混合物において可溶性であり、そし
て(d) その後に前記第二工程において前記第二検定試薬
で希釈された時には当該検定の反応を実質的に妨害する
ことはないことを特徴とする免疫検定法によって解決さ
れる。
合試薬を塗被した容器において液体試料と少なくとも一
種の第一検定試薬とを接触せしめる第一工程と、前記容
器に少なくとも一種の第二検定試薬を添加する第二工程
とを含んでなる、液体試料中のアナライトを測定するた
めの免疫検定法であって、前記第一検定試薬が、前記試
料との接触前に又は接触と同時に添加される解離剤を含
み、前記解離剤は、(a) 前記第一工程においては当該検
定法の抗原−抗体結合を実質的に解離させることがで
き、(b) 当該検定試薬の所期の保存期間中安定であり、
(c) 当該検定用反応混合物において可溶性であり、そし
て(d) その後に前記第二工程において前記第二検定試薬
で希釈された時には当該検定の反応を実質的に妨害する
ことはないことを特徴とする免疫検定法によって解決さ
れる。
【０００８】本発明の実施に用いられる解離剤は、アッ
セイドリフトを低下させるのに必要とされる程度にまで
検定中に形成される抗原−抗体結合を解離させることが
できる剤である。さらに、この解離剤は、かなりの時間
にわたり安定であり、しかも検定混合物に溶解する。そ
の上、この解離剤は、検定混合物を希釈しうる新たに別
の試薬を検定混合物と接触させた場合には特に、所望の
結果を得るのに検定で必要とされる反応を有意に妨害す
ることがない。このように、この解離剤は、検定の条件
下で他の検定成分に対しては完全に不活性であるため、
その後の実施される検定の反応を妨害することがない。
セイドリフトを低下させるのに必要とされる程度にまで
検定中に形成される抗原−抗体結合を解離させることが
できる剤である。さらに、この解離剤は、かなりの時間
にわたり安定であり、しかも検定混合物に溶解する。そ
の上、この解離剤は、検定混合物を希釈しうる新たに別
の試薬を検定混合物と接触させた場合には特に、所望の
結果を得るのに検定で必要とされる反応を有意に妨害す
ることがない。このように、この解離剤は、検定の条件
下で他の検定成分に対しては完全に不活性であるため、
その後の実施される検定の反応を妨害することがない。
【０００９】特に有用な解離剤には、グアニジン塩酸
塩、カオトロピック塩（例、ドデシル硫酸ナトリウム、
ヨウ化カリウム、シアン化カリウム及びチオシアン化カ
リウム）並びに尿素が含まれる。尿素が好ましい。解離
剤は、反応混合物中の濃度に依存して、抗体−抗原結合
を遅延させる効果、妨害する効果、さらには解離させる
効果を有することができる。適当な濃度は検討下にある
アッセイ系の特徴に依存し、そして当業者であれば容易
に決定しうる。好ましくは、解離剤は、３０〜５０重量
％の量で存在するように希釈液中に加えられる。別法と
して、検定を行う適当な容器（例えば、マイクロタイタ
ープレート）の壁面に解離剤を塗被することもできる。
解離剤は、アナライトを含むと思われる試料の前にまた
は試料と同時に、検定混合物へ加えられる。
塩、カオトロピック塩（例、ドデシル硫酸ナトリウム、
ヨウ化カリウム、シアン化カリウム及びチオシアン化カ
リウム）並びに尿素が含まれる。尿素が好ましい。解離
剤は、反応混合物中の濃度に依存して、抗体−抗原結合
を遅延させる効果、妨害する効果、さらには解離させる
効果を有することができる。適当な濃度は検討下にある
アッセイ系の特徴に依存し、そして当業者であれば容易
に決定しうる。好ましくは、解離剤は、３０〜５０重量
％の量で存在するように希釈液中に加えられる。別法と
して、検定を行う適当な容器（例えば、マイクロタイタ
ープレート）の壁面に解離剤を塗被することもできる。
解離剤は、アナライトを含むと思われる試料の前にまた
は試料と同時に、検定混合物へ加えられる。
【００１０】「アッセイドリフト」の問題は、特に抗体
−抗原結合が迅速に起こる場合に本発明によって解決さ
れる。検定は定量検定であっても定性検定であってもよ
いが、本発明の利点は定量検定においてより顕著にな
る。
−抗原結合が迅速に起こる場合に本発明によって解決さ
れる。検定は定量検定であっても定性検定であってもよ
いが、本発明の利点は定量検定においてより顕著にな
る。
【００１１】本発明を使用すると、抗体物質または抗原
物質の検出をはじめとする広範囲にわたるアナライトを
検出することができる。好ましくは、本発明は、風疹Ｉ
ｇＧ及びトキソプラズマＩｇＧの検定のような抗体の検
出に有用である。これらの好ましい検定に使用される試
薬は当該技術分野では周知であり、コダック・クリニカ
ル・ダイアグノースティック社より市販のＫＯＤＡＫ
ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹ＩｇＧ検定試験キット
及びＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）トキソプ
ラズマＩｇＧ検定試験キットで提供されているものが含
まれる。
物質の検出をはじめとする広範囲にわたるアナライトを
検出することができる。好ましくは、本発明は、風疹Ｉ
ｇＧ及びトキソプラズマＩｇＧの検定のような抗体の検
出に有用である。これらの好ましい検定に使用される試
薬は当該技術分野では周知であり、コダック・クリニカ
ル・ダイアグノースティック社より市販のＫＯＤＡＫ
ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹ＩｇＧ検定試験キット
及びＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）トキソプ
ラズマＩｇＧ検定試験キットで提供されているものが含
まれる。
【００１２】実施例で使用する材料及び方法 ＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹ＩｇＧ検
定で使用した材料を以下に記載する。 １．適当な数の塗被ウエル（不活化風疹抗原、結合量＞
５ＩＵ第二国際標準特異的抗体／ウエル）。これらは一
般に１４４または２４０のパックで供給されている。 ２．抗微生物剤を含む抗−風疹ＩｇＧ標品Ａ〜Ｆ（標品
Ａ：ウシ血清、標品Ｂ〜Ｆ：ウシ血清中で希釈されたヒ
ト血清）のバイアル６本（各０．５ｍＬ）。公称値０、
１０、５０、１００、２００及び５００ＩＵ／ｍＬ（第
二国際標準）。 ３．抗微生物剤を含むバッファー中に試料希釈剤を含む
ボトル１本（３０ｍＬ、黄色）。 ４．抗微生物剤を含むバッファー中に検定試薬を含むボ
トル２本（３０ｍＬ、青色）。 ５．抗微生物剤を含むバッファー中に複合体濃縮物（西
洋ワサビペルオキシダーゼ−標識ヒツジ抗ヒトＩｇＧ、
濃度＞２．５μｇ／ｍＬ、０．６ｍＬ、赤色）を含むバ
イアル１本。 ６．抗微生物剤を含むバッファー中に複合体希釈剤（各
１７．１ｍＬ、赤色）を含むボトル２本。
定で使用した材料を以下に記載する。 １．適当な数の塗被ウエル（不活化風疹抗原、結合量＞
５ＩＵ第二国際標準特異的抗体／ウエル）。これらは一
般に１４４または２４０のパックで供給されている。 ２．抗微生物剤を含む抗−風疹ＩｇＧ標品Ａ〜Ｆ（標品
Ａ：ウシ血清、標品Ｂ〜Ｆ：ウシ血清中で希釈されたヒ
ト血清）のバイアル６本（各０．５ｍＬ）。公称値０、
１０、５０、１００、２００及び５００ＩＵ／ｍＬ（第
二国際標準）。 ３．抗微生物剤を含むバッファー中に試料希釈剤を含む
ボトル１本（３０ｍＬ、黄色）。 ４．抗微生物剤を含むバッファー中に検定試薬を含むボ
トル２本（３０ｍＬ、青色）。 ５．抗微生物剤を含むバッファー中に複合体濃縮物（西
洋ワサビペルオキシダーゼ−標識ヒツジ抗ヒトＩｇＧ、
濃度＞２．５μｇ／ｍＬ、０．６ｍＬ、赤色）を含むバ
イアル１本。 ６．抗微生物剤を含むバッファー中に複合体希釈剤（各
１７．１ｍＬ、赤色）を含むボトル２本。
【００１３】上記の材料を使用して、ＫＯＤＡＫ ＡＭ
ＥＲＬＩＴＥ（商品名）定量風疹ＩｇＧ検定を以下のよ
うに実施した。 １．市販のシェーカー、インキュベーター、ワークステ
ーション、洗浄機及び分析機器を準備した。 ２．必要なすべての標品及び試料の実験が可能な十分な
ウエルをもったストリップホルダーを組み立てた。最終
列が定数１２個の塗被ウエルを含まない場合には、別々
に設けた透明ブランクウエルで補完する。 ３．標品は二重に検定した。 ４．標品及び試料を試料希釈剤（黄色）で希釈した。適
当な希釈プロトコールは１０μＬの標品または試料と１
００μＬの試料希釈剤とを混合するものとした。希釈し
た標品及び試料は即座に使用した。 ５．１０μＬの標品または試料を適当なウエルへピペッ
トで分注した。この工程が遅延を生ぜしめ、アッセイド
リフトの原因となりうる工程である。 ６．２００μＬの検定試薬（青色）を各塗被ウエルへ分
配した。 ７．ウエルに透明な蓋をしてから、シェーカーインキュ
ベーターで３７℃で６０±５分間振盪及び保温した。 ８．すべてのウエルをアスピレーターで吸引し、そして
洗浄機で血清学的洗浄試薬を使用して洗浄した。 ９．１００μＬの複合体試薬（赤色）を各塗被ウエルへ
分配した。 １０．ウエルに透明な蓋をしてから、シェーカーインキ
ュベーターで３７℃で３０±２分間振盪及び保温した。 １１．すべてのウエルをアスピレーターで吸引し、そし
て洗浄機で血清学的洗浄試薬を使用して洗浄した。 １２．２５０μＬのシグナル試薬を即座にすべての塗被
ウエルへ分配した。シグナル試薬はＡＭＥＲＬＩＴＥ
（商品名）シグナル試薬であることが好ましい。 １３．分析機器でウエルのシグナルを読み取った。この
工程は、シグナル試薬添加後２〜２０分以内に実施する
のが適当である。 １４．適当な分析機器の作業マニュアルを使用して検定
結果を解釈した。
ＥＲＬＩＴＥ（商品名）定量風疹ＩｇＧ検定を以下のよ
うに実施した。 １．市販のシェーカー、インキュベーター、ワークステ
ーション、洗浄機及び分析機器を準備した。 ２．必要なすべての標品及び試料の実験が可能な十分な
ウエルをもったストリップホルダーを組み立てた。最終
列が定数１２個の塗被ウエルを含まない場合には、別々
に設けた透明ブランクウエルで補完する。 ３．標品は二重に検定した。 ４．標品及び試料を試料希釈剤（黄色）で希釈した。適
当な希釈プロトコールは１０μＬの標品または試料と１
００μＬの試料希釈剤とを混合するものとした。希釈し
た標品及び試料は即座に使用した。 ５．１０μＬの標品または試料を適当なウエルへピペッ
トで分注した。この工程が遅延を生ぜしめ、アッセイド
リフトの原因となりうる工程である。 ６．２００μＬの検定試薬（青色）を各塗被ウエルへ分
配した。 ７．ウエルに透明な蓋をしてから、シェーカーインキュ
ベーターで３７℃で６０±５分間振盪及び保温した。 ８．すべてのウエルをアスピレーターで吸引し、そして
洗浄機で血清学的洗浄試薬を使用して洗浄した。 ９．１００μＬの複合体試薬（赤色）を各塗被ウエルへ
分配した。 １０．ウエルに透明な蓋をしてから、シェーカーインキ
ュベーターで３７℃で３０±２分間振盪及び保温した。 １１．すべてのウエルをアスピレーターで吸引し、そし
て洗浄機で血清学的洗浄試薬を使用して洗浄した。 １２．２５０μＬのシグナル試薬を即座にすべての塗被
ウエルへ分配した。シグナル試薬はＡＭＥＲＬＩＴＥ
（商品名）シグナル試薬であることが好ましい。 １３．分析機器でウエルのシグナルを読み取った。この
工程は、シグナル試薬添加後２〜２０分以内に実施する
のが適当である。 １４．適当な分析機器の作業マニュアルを使用して検定
結果を解釈した。
【００１４】上記の第５工程にあるように、適当濃度の
解離剤を含有する試薬（この場合は試料希釈剤）で試料
を予備希釈することが好ましい。
解離剤を含有する試薬（この場合は試料希釈剤）で試料
を予備希釈することが好ましい。
【００１５】本発明の方法を採用する場合、試料希釈剤
（上記ＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹Ｉ
ｇＧ用材料の第３項目）に解離剤、好ましくは尿素、を
試料希釈剤の２０〜５０重量％（特に３０重量％）の濃
度で含有させるように改変することができる。この改変
した試料希釈剤を上記のＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ
（商品名）定量風疹検定の第４工程で使用して本発明の
検定法とする。
（上記ＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹Ｉ
ｇＧ用材料の第３項目）に解離剤、好ましくは尿素、を
試料希釈剤の２０〜５０重量％（特に３０重量％）の濃
度で含有させるように改変することができる。この改変
した試料希釈剤を上記のＫＯＤＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ
（商品名）定量風疹検定の第４工程で使用して本発明の
検定法とする。
【００１６】
【実施例】本発明を以下の実施例で説明する。
【００１７】上記の第１工程〜第１４工程に従うＫＯＤ
ＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹ＩｇＧ定量検定
を、最初に解離剤を含有しない従来型の試料希釈剤を第
４工程で使用し、次いで解離剤として尿素を希釈剤の３
０重量％の濃度で含有する上記の試料希釈剤を使用して
実施した。どちらの場合も、９６ウエル、ＡＭＥＲＬＩ
ＴＥ（商品名）シェーカーインキュベーター、ＡＭＥＲ
ＬＩＴＥ（商品名）ワークステーション、ＡＭＥＲＬＩ
ＴＥ（商品名）洗浄機及びＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）
分析機器を使用して検定を実施した。
ＡＫ ＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）風疹ＩｇＧ定量検定
を、最初に解離剤を含有しない従来型の試料希釈剤を第
４工程で使用し、次いで解離剤として尿素を希釈剤の３
０重量％の濃度で含有する上記の試料希釈剤を使用して
実施した。どちらの場合も、９６ウエル、ＡＭＥＲＬＩ
ＴＥ（商品名）シェーカーインキュベーター、ＡＭＥＲ
ＬＩＴＥ（商品名）ワークステーション、ＡＭＥＲＬＩ
ＴＥ（商品名）洗浄機及びＡＭＥＲＬＩＴＥ（商品名）
分析機器を使用して検定を実施した。
【００１８】尿素を含まない試料希釈剤を使用した場
合、第一のウエルへ添加された希釈試料は最後に添加さ
れた試料よりも約２０分間（９６試料をピペット分注す
るのにかかる時間）だけ長い時間固相と反応し、有意な
程度のアッセイドリフトをもたらした。尿素を含有する
試料希釈剤を使用すると、希釈試料中の抗体が固相上の
抗原と反応するのが妨害された。この反応は、尿素の機
能を失わせる濃度にまで尿素を希釈する検定試薬の添加
が引き金となった。検定試薬は、短時間（約２分）でプ
レートへ添加することができる。本発明の方法による
と、アッセイドリフトが約３分の１に低減された。この
ことは、各実験における第１番目の試料と第９６番目の
試料、すなわちそれぞれ０分時と２０分時に試験された
試料の風疹抗体の測定値（１ｍＬ当たりの国際単位数）
を記載した以下の表の結果が示している。
合、第一のウエルへ添加された希釈試料は最後に添加さ
れた試料よりも約２０分間（９６試料をピペット分注す
るのにかかる時間）だけ長い時間固相と反応し、有意な
程度のアッセイドリフトをもたらした。尿素を含有する
試料希釈剤を使用すると、希釈試料中の抗体が固相上の
抗原と反応するのが妨害された。この反応は、尿素の機
能を失わせる濃度にまで尿素を希釈する検定試薬の添加
が引き金となった。検定試薬は、短時間（約２分）でプ
レートへ添加することができる。本発明の方法による
と、アッセイドリフトが約３分の１に低減された。この
ことは、各実験における第１番目の試料と第９６番目の
試料、すなわちそれぞれ０分時と２０分時に試験された
試料の風疹抗体の測定値（１ｍＬ当たりの国際単位数）
を記載した以下の表の結果が示している。
【００１９】 尿素を含まない希釈剤を使用した場合の風疹抗体測定値（ＩＵ／ｍＬ） 試料 第１番試料（０分） 第９６番試料（２０分） ドリフト％ ＱＣＢ １８．１３ ８．９７ −５０．５ ＱＣＣ ５８．５ ２７．９ −５２．４ ＱＣＤ ４４０．３ ３０１．０ −３１．６ １１０ ３１６．３ １８８．０ −４０．６ １１１ ２９４．０ １９０．３ −３５．３ １１３ １２７．３ ７３．３ −４２．４
【００２０】 尿素を含む希釈剤を使用した場合の風疹抗体測定値（ＩＵ／ｍＬ） 試料 第１番試料（０分） 第９６番試料（２０分） ドリフト％ ＱＣＢ ９．７ ８．１ −１６．７ ＱＣＣ ２８．２ ２３．６ −１６．２ ＱＣＤ ３３４．３ ３１２．３ −６．６ １１０ １７９．０ １５１．３ −１５．５ １１１ ２１０．３ １９７．０ −６．３ １１３ ６２．９７ ６５．３７ ＋３．８
【００２１】上記表の結果は以下のように要約される。 平均ドリフト（試料数６）： 尿素を含まない試料希釈剤＝−４２．１％ 尿素を含む試料希釈剤＝−９．６％ 本発明による尿素を使用した場合のドリフト減少率＝＞
７０％
７０％
【００２２】これらの結果は、解離剤として尿素を含有
する試料希釈剤の使用によって、アッセイドリフトが顕
著に低減されたことを示している。
する試料希釈剤の使用によって、アッセイドリフトが顕
著に低減されたことを示している。
【００２３】
【発明の効果】本発明の免疫検定は、検定に必要な免疫
試薬との接触前または接触と同時に解離剤を添加するこ
とによって「アッセイドリフト」の重大な問題を受けず
に済む。
試薬との接触前または接触と同時に解離剤を添加するこ
とによって「アッセイドリフト」の重大な問題を受けず
に済む。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 マーク ウィリアム ジョーンズ イギリス国，バッキンガムシャー エイ チピー21 ７エフディー，アイレスバリ ー，メッセンジャー クローズ ６ (56)参考文献 特開 昭58−135962（ＪＰ，Ａ) 特開 昭56−158947（ＪＰ，Ａ) 米国特許4657851（ＵＳ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 33/531 G01N 33/53
Claims (2)
- 【請求項１】 特異的な免疫試薬を塗被した容器におい
て液体試料と少なくとも一種の第一検定試薬とを接触せ
しめる第一工程と、前記容器に少なくとも一種の第二検
定試薬を添加する第二工程とを含んでなる、液体試料中
のアナライトを測定するための免疫検定法であって、前
記第一検定試薬が、前記試料との接触前に又は接触と同
時に添加される解離剤を含み、前記解離剤は、(a) 前記
第一工程においては当該検定法の抗原−抗体結合を実質
的に解離させることができ、(b) 当該検定試薬の所期の
保存期間中安定であり、(c) 当該検定用反応混合物にお
いて可溶性であり、そして(d) その後に前記第二工程に
おいて前記第二検定試薬で希釈された時には当該検定の
反応を実質的に妨害することはないことを特徴とする免
疫検定法。 - 【請求項２】 前記解離剤が、グアニジン塩酸塩、ドデ
シル硫酸ナトリウム、ヨウ化カリウム、シアン化カリウ
ム、チオシアン化カリウム及び尿素からなる群より選ば
れる、請求項１に記載の免疫検定法。
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|---|---|---|---|
| GB939316743A GB9316743D0 (en) | 1993-08-12 | 1993-08-12 | Immunoassay method |
| GB9316743:5 | 1993-08-12 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
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| JP3042753B2 true JP3042753B2 (ja) | 2000-05-22 |
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1994
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- 1994-08-09 AT AT94202290T patent/ATE192235T1/de not_active IP Right Cessation
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