JP2992668B2 - 生体臓器灌流保存液 - Google Patents
生体臓器灌流保存液Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は生体臓器の灌流保存液、
より詳しくは手術中に血液の代用として使用されて、生
体臓器の壊死を防止する灌流保存液に関する。
より詳しくは手術中に血液の代用として使用されて、生
体臓器の壊死を防止する灌流保存液に関する。
【０００２】
【従来技術とその課題】臓器の手術は一般的に血液を止
めて行なわれるが、肝臓のようにエネルギー消費の大き
い臓器では長時間の虚血を行なうと、細胞の機能障害が
生じる。このため肝臓の手術では１時間以内に手術を終
えるか、それができない時には途中で血流を再開して酸
素を送り、ＡＴＰレベルを上昇させてから、再度手術を
行なう方法が採られている。しかしながら、この方法で
は臓器が虚血障害を受けるに加えて、余分な再酸素化障
害までをも受け、手術後の細胞機能の回復が遅れたり、
更には手術自体の不成功をも招く原因となると重大な不
利がある。
めて行なわれるが、肝臓のようにエネルギー消費の大き
い臓器では長時間の虚血を行なうと、細胞の機能障害が
生じる。このため肝臓の手術では１時間以内に手術を終
えるか、それができない時には途中で血流を再開して酸
素を送り、ＡＴＰレベルを上昇させてから、再度手術を
行なう方法が採られている。しかしながら、この方法で
は臓器が虚血障害を受けるに加えて、余分な再酸素化障
害までをも受け、手術後の細胞機能の回復が遅れたり、
更には手術自体の不成功をも招く原因となると重大な不
利がある。
【０００３】一方、上記手術時に利用される生体臓器の
灌流液として、現在クレブスリンゲル液が広く知られて
いるが、このものはその利用による生体臓器の保存時間
の延長に伴って、臓器組織障害が大きくなる欠点があ
り、臓器保存液としては尚満足できる性能を有していな
い。また、臓器移植との関連では、例えばコリンズ液、
ユーローコリンズ液、ウィスコンシン大保存液（ＵＷ
液）等が開発されているが、之等はすべて摘出した臓器
を低温で数十時間に亘って保存するためのものでしかな
く、手術時の使用には適当ではない。このように、現在
当業界では長時間の手術時に用い得る臓器灌流保存液の
開発が待たれている現状にある。
灌流液として、現在クレブスリンゲル液が広く知られて
いるが、このものはその利用による生体臓器の保存時間
の延長に伴って、臓器組織障害が大きくなる欠点があ
り、臓器保存液としては尚満足できる性能を有していな
い。また、臓器移植との関連では、例えばコリンズ液、
ユーローコリンズ液、ウィスコンシン大保存液（ＵＷ
液）等が開発されているが、之等はすべて摘出した臓器
を低温で数十時間に亘って保存するためのものでしかな
く、手術時の使用には適当ではない。このように、現在
当業界では長時間の手術時に用い得る臓器灌流保存液の
開発が待たれている現状にある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記現状
に鑑み、斯業の要望に合致し、特に手術時間の延長を可
能とする、新しい生体臓器灌流保存液を開発すべく鋭意
検討を重ねた。その結果、従来のクレブスヘンゼライト
リンゲル液に代表されるリンゲル液を始めとする各種の
灌流液に、特定濃度のクエン酸を添加配合する時には、
細胞組織の機能障害の起こる危険が顕著に抑制された理
想的な灌流保存液が提供されることを見出し、ここに本
発明を完成するに至った。
に鑑み、斯業の要望に合致し、特に手術時間の延長を可
能とする、新しい生体臓器灌流保存液を開発すべく鋭意
検討を重ねた。その結果、従来のクレブスヘンゼライト
リンゲル液に代表されるリンゲル液を始めとする各種の
灌流液に、特定濃度のクエン酸を添加配合する時には、
細胞組織の機能障害の起こる危険が顕著に抑制された理
想的な灌流保存液が提供されることを見出し、ここに本
発明を完成するに至った。
【０００５】即ち本発明によれば、灌流液に、その１リ
ットルに対して１．５〜７ミリモルとなる量のクエン酸
を加えたことを特徴とする生体臓器灌流保存液、特に上
記灌流液が生理食塩水及びリンゲル液から選ばれるもの
である上記生体臓器灌流保存液並び上記灌流液がクレブ
スヘンゼライトリンゲル液である上記生体臓器灌流保存
液が提供される。
ットルに対して１．５〜７ミリモルとなる量のクエン酸
を加えたことを特徴とする生体臓器灌流保存液、特に上
記灌流液が生理食塩水及びリンゲル液から選ばれるもの
である上記生体臓器灌流保存液並び上記灌流液がクレブ
スヘンゼライトリンゲル液である上記生体臓器灌流保存
液が提供される。
【０００６】本発明の生体臓器灌流保存液は、上記の通
り、灌流液中にその１リットルに対して１．５〜７ミリ
モルとなる濃度でクエン酸を添加配合することにより調
製される。ここで利用できる上記灌流液は、特に制限は
なく従来公知の各種のもののいすれでもよい。これには
代表的には例えば生理食塩水及び各種のリンゲル液が含
まれる。また本明細書において、「リンゲル液」とは、
単にリンゲル液のみならず、これを基本としてその利用
目的に応じて他の成分等を追加したり、その組成を改変
した各種の改良されたリンゲル液も包含する広い意味に
て用いられるものとする。上記改良されたリンゲル液の
代表例としては、例えばクレブスヘンゼライトリンゲル
液や乳酸加リンゲル液等を例示できる。本発明において
は、特に上記灌流液としてクレブスヘンゼライトリンゲ
ル液の利用が好適である。
り、灌流液中にその１リットルに対して１．５〜７ミリ
モルとなる濃度でクエン酸を添加配合することにより調
製される。ここで利用できる上記灌流液は、特に制限は
なく従来公知の各種のもののいすれでもよい。これには
代表的には例えば生理食塩水及び各種のリンゲル液が含
まれる。また本明細書において、「リンゲル液」とは、
単にリンゲル液のみならず、これを基本としてその利用
目的に応じて他の成分等を追加したり、その組成を改変
した各種の改良されたリンゲル液も包含する広い意味に
て用いられるものとする。上記改良されたリンゲル液の
代表例としては、例えばクレブスヘンゼライトリンゲル
液や乳酸加リンゲル液等を例示できる。本発明において
は、特に上記灌流液としてクレブスヘンゼライトリンゲ
ル液の利用が好適である。
【０００７】かくして得られる本発明の生体臓器灌流保
存液は、従来のこの種灌流液と同様に各種の生体臓器、
例えば肝臓、腎臓等のいずれにも適用できる。
存液は、従来のこの種灌流液と同様に各種の生体臓器、
例えば肝臓、腎臓等のいずれにも適用できる。
【０００８】特に、本発明の生体臓器灌流保存液は、上
記構成としたことに基づいて、従来のこの種の灌流保存
液に見られる組織細胞の機能障害を起す危険が多い欠点
を解消できる特徴があり、またこれに加えて、クレブス
ヘンゲライトリンゲル液に特有の、血中Ｋ+濃度と殆ど
等しいＫ+濃度を有するために、術後血流を再開する前
に心障害防止のためにＫ+濃度の低い液で生体臓器を一
度洗浄する作業を要しない利点もある。
記構成としたことに基づいて、従来のこの種の灌流保存
液に見られる組織細胞の機能障害を起す危険が多い欠点
を解消できる特徴があり、またこれに加えて、クレブス
ヘンゲライトリンゲル液に特有の、血中Ｋ+濃度と殆ど
等しいＫ+濃度を有するために、術後血流を再開する前
に心障害防止のためにＫ+濃度の低い液で生体臓器を一
度洗浄する作業を要しない利点もある。
【０００９】加えて、本発明の生体臓器灌流保存液は、
血流を再開した時に組織が受ける再酸素障害を防止乃至
顕著に抑制できる利点がある。
血流を再開した時に組織が受ける再酸素障害を防止乃至
顕著に抑制できる利点がある。
【００１０】更に本発明の生体臓器灌流保存液は、Ｋ+
濃度を高めるように調製することもでき、これによって
移植臓器の保存液としてもその用途を拡張することがで
き、この場合も、本発明に特有の組織細胞の機能障害防
止効果を奏し得、長期間に亘って移植臓器の保存を可能
とする。
濃度を高めるように調製することもでき、これによって
移植臓器の保存液としてもその用途を拡張することがで
き、この場合も、本発明に特有の組織細胞の機能障害防
止効果を奏し得、長期間に亘って移植臓器の保存を可能
とする。
【００１１】
【実施例】以下、本発明生体臓器灌流保存液の特徴とす
る所を一層明確なものとするためその調製例を実施例と
して挙げ、次いで本発明保存液を従来の灌流保存液と対
比して行なった試験例を挙げる。
る所を一層明確なものとするためその調製例を実施例と
して挙げ、次いで本発明保存液を従来の灌流保存液と対
比して行なった試験例を挙げる。
【００１２】
【実施例１】クレブスヘンゼライト（Krebs-Henseleit
e) オリジナルリンゲル ホスフェート溶液を基本溶液
とし、これに所定量のクエン酸を添加して、下記組成の
本発明生体臓器灌流保存液を調製した。
e) オリジナルリンゲル ホスフェート溶液を基本溶液
とし、これに所定量のクエン酸を添加して、下記組成の
本発明生体臓器灌流保存液を調製した。
【００１３】 成分 濃度（ｍＭ） ＮａＣｌ １１８ ＫＣｌ ４．７ ＣａＣｌ2 ２．５ ＫＨ2 ＰＯ4 １．２ ＭｇＳＯ4 １．２ リン酸緩衝液（ｐＨ７．４） １１．６ クエン酸ナトリウム（ｐＨ７．４） ５．０
【００１４】
【実施例２】クレブスヘンゼライト（Krebs-Henseleit
e) オリジナルリンゲル バイカーボネート溶液を基本
溶液とし、これに所定量のクエン酸を添加して、下記組
成の本発明生体臓器灌流保存液を調製した。
e) オリジナルリンゲル バイカーボネート溶液を基本
溶液とし、これに所定量のクエン酸を添加して、下記組
成の本発明生体臓器灌流保存液を調製した。
【００１５】 成分 濃度（ｍＭ） ＮａＣｌ １１８ ＫＣｌ ４．７ ＣａＣｌ2 ２．５ ＫＨ2 ＰＯ4 １．２ ＭｇＳＯ4 １．２ ＮａＨＣＯ3 ２５．０ クエン酸ナトリウム（ｐＨ７．４） ５．０ 尚、本実施例に記載の生体臓器灌流保存液は、９５％酸
素−５％炭酸ガスにより飽和させて利用される。
素−５％炭酸ガスにより飽和させて利用される。
【００１６】
【試験例１】この例では実験動物として、体重２００〜
３００ｇの雄性ラット（Spraque-Dawley）を、ペントバ
ルビタールの５ｍｇ／１００ｇ体重の投与（腹腔内注
射）により麻酔して利用した。
３００ｇの雄性ラット（Spraque-Dawley）を、ペントバ
ルビタールの５ｍｇ／１００ｇ体重の投与（腹腔内注
射）により麻酔して利用した。
【００１７】（１）ラット肝の灌流 実施例２で調製した本発明臓器灌流保存液又は対照とし
てクレブスヘンゼライト（Krebs-Henseleite) オリジナ
ルリンゲル バイカーボネート溶液を灌流液として用い
て、以下の試験を行なった。即ち、上記灌流液を予め３
７℃に保ち９５％酸素−５％炭酸ガスを通気して飽和さ
せた後、門脈よりおよそ３ｍｌ／分／ｇ肝の流速で注入
し、下大静脈から流出させた。この時の灌流液のｐＨは
７．４であり、肝臓の温度は３４℃であった。
てクレブスヘンゼライト（Krebs-Henseleite) オリジナ
ルリンゲル バイカーボネート溶液を灌流液として用い
て、以下の試験を行なった。即ち、上記灌流液を予め３
７℃に保ち９５％酸素−５％炭酸ガスを通気して飽和さ
せた後、門脈よりおよそ３ｍｌ／分／ｇ肝の流速で注入
し、下大静脈から流出させた。この時の灌流液のｐＨは
７．４であり、肝臓の温度は３４℃であった。
【００１８】本発明実験群では、実験開始前に３０分間
対照とする灌流液を流し、次いで１０分間実施例２で調
製したクエン酸を含む灌流液を流した（灌流）後、送液
ポンプを停止して３４℃にて肝を１２０分間保った（虚
血）。その後、実施例２で調製したクエン酸を含む灌流
液を２０分間流し、続いて対照灌流液に切り替えて１０
０分間灌流を続けた（再灌流）。
対照とする灌流液を流し、次いで１０分間実施例２で調
製したクエン酸を含む灌流液を流した（灌流）後、送液
ポンプを停止して３４℃にて肝を１２０分間保った（虚
血）。その後、実施例２で調製したクエン酸を含む灌流
液を２０分間流し、続いて対照灌流液に切り替えて１０
０分間灌流を続けた（再灌流）。
【００１９】また上記において本発明のクエン酸を含む
灌流液（実施例２で調製したもの）に代えてクエン酸を
含まない対照灌流液を用いた対照群を設けた。
灌流液（実施例２で調製したもの）に代えてクエン酸を
含まない対照灌流液を用いた対照群を設けた。
【００２０】（２）アデニンヌクレオチドの定量 上記（１）の実験に供したラット肝の一部を、上記実験
期間の適当な時期に切り取り、液体窒素で急速凍結した
後、凍結乾燥を行なって乾燥試料とした。全ての乾燥試
料を０．５Ｎ過塩素酸溶液で処理することにより、アデ
ニンヌクレオチドを抽出した。抽出液を水酸化カリウム
溶液で中和し、生じた沈殿を遠心分離により除いた後、
ＯＤＳカラムを用いた高速液体クロマトグラフィーによ
りＡＴＰ、ＡＤＰ及びＡＭＰの定量を行なった。尚、展
開液としては１００ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ
６．８）を用い、検出は２６０ｎｍの吸光度測定により
行なった。
期間の適当な時期に切り取り、液体窒素で急速凍結した
後、凍結乾燥を行なって乾燥試料とした。全ての乾燥試
料を０．５Ｎ過塩素酸溶液で処理することにより、アデ
ニンヌクレオチドを抽出した。抽出液を水酸化カリウム
溶液で中和し、生じた沈殿を遠心分離により除いた後、
ＯＤＳカラムを用いた高速液体クロマトグラフィーによ
りＡＴＰ、ＡＤＰ及びＡＭＰの定量を行なった。尚、展
開液としては１００ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ
６．８）を用い、検出は２６０ｎｍの吸光度測定により
行なった。
【００２１】結果を図１に示す。図において、縦軸は測
定されたＡＴＰ量（μモル／ｇ肝乾燥重量）を示す。ま
た横軸は灌流停止からの経過時間（分）を示し、その０
〜１２０分は虚血期であり、１２０〜２４０分は再灌流
期である。図中グラフ（１）が本発明実験群の結果であ
り、グラフ（２）が対照群の結果である。
定されたＡＴＰ量（μモル／ｇ肝乾燥重量）を示す。ま
た横軸は灌流停止からの経過時間（分）を示し、その０
〜１２０分は虚血期であり、１２０〜２４０分は再灌流
期である。図中グラフ（１）が本発明実験群の結果であ
り、グラフ（２）が対照群の結果である。
【００２２】図１より、本発明実験群では、対照群に比
べて、再灌流開始より急速なＡＴＰ量の増加が認めら
れ、このことから対照群に比して肝機能障害が顕著に抑
制されていることが明らかである。
べて、再灌流開始より急速なＡＴＰ量の増加が認めら
れ、このことから対照群に比して肝機能障害が顕著に抑
制されていることが明らかである。
【００２３】（３）ミトコンドリア画分の調製 試験に供したラット肝臓を１０容量の０．２５Ｍサッカ
ロース、１０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．０）及び
０．１ｍＭ ＥＤＴＡを含む溶液でホモジェナイズした
後、４００×ｇで１０分間の遠心分離を行ない、上清を
３０００×ｇ、８分間、次いで７０００×ｇ、２分間そ
れぞれ遠心分離し、得られた沈殿を元の肝臓組織の３容
量の上記サッカロース溶液に分散させ、更に３００×
ｇ、８分間及び７０００×ｇ、２分間の遠心操作を行な
った。かくして得られた沈殿を少量の上記サッカロース
溶液に分散させて、ミトコンドリア画分を得た。
ロース、１０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．０）及び
０．１ｍＭ ＥＤＴＡを含む溶液でホモジェナイズした
後、４００×ｇで１０分間の遠心分離を行ない、上清を
３０００×ｇ、８分間、次いで７０００×ｇ、２分間そ
れぞれ遠心分離し、得られた沈殿を元の肝臓組織の３容
量の上記サッカロース溶液に分散させ、更に３００×
ｇ、８分間及び７０００×ｇ、２分間の遠心操作を行な
った。かくして得られた沈殿を少量の上記サッカロース
溶液に分散させて、ミトコンドリア画分を得た。
【００２４】（４）ミトコンドリアの呼吸調節能の測定 １２０分間虚血を行なった後の肝及び再灌流開始６０分
後の肝について、上記（３）に従ってミトコンドリア画
分を調製し、之等各画分の呼吸活性を、クラーク型酸素
電極を用いて測定した。
後の肝について、上記（３）に従ってミトコンドリア画
分を調製し、之等各画分の呼吸活性を、クラーク型酸素
電極を用いて測定した。
【００２５】上記測定のための反応は、１０ｍＭトリス
塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）、５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
７．４）、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＭｇＳＯ4
及び０．１％牛血清アルブミンを含む０．２５Ｍサッカ
ロース中で、２５℃下に行なった。また基質としては５
ｍＭコハク酸を用い、呼吸速度は４００ナノモルのＡＤ
Ｐの存在下（State 3 ）及び非存在下（State 4 ）でそ
れぞれ求め、之等測定値の比より呼吸調節能（ＲＣＲ）
を算出した。
塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）、５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
７．４）、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＭｇＳＯ4
及び０．１％牛血清アルブミンを含む０．２５Ｍサッカ
ロース中で、２５℃下に行なった。また基質としては５
ｍＭコハク酸を用い、呼吸速度は４００ナノモルのＡＤ
Ｐの存在下（State 3 ）及び非存在下（State 4 ）でそ
れぞれ求め、之等測定値の比より呼吸調節能（ＲＣＲ）
を算出した。
【００２６】得られた結果を下記表１に示す。
【００２７】
【表１】
【００２８】上記表１より、本発明臓器灌流保存液の利
用（実験群）によれば、従来の灌流液の利用の場合（対
照群）に比して、呼吸調節能（ＲＣＲ）の顕著な改善が
認められることが判る。
用（実験群）によれば、従来の灌流液の利用の場合（対
照群）に比して、呼吸調節能（ＲＣＲ）の顕著な改善が
認められることが判る。
【００２９】（５）漏出酵素の活性測定 再灌流開始直後より、３０分間に肝から流出した灌流液
を集め、これに含まれているグルタミン酸−オキザロ酢
酸トランスアミラーゼ（ＧＯＴ）及びグルタミン酸−ピ
ルビン酸トランスアミラーゼ（ＧＰＴ）の測定を行なっ
た。之等の測定反応は全て２５℃下に実施した。
を集め、これに含まれているグルタミン酸−オキザロ酢
酸トランスアミラーゼ（ＧＯＴ）及びグルタミン酸−ピ
ルビン酸トランスアミラーゼ（ＧＰＴ）の測定を行なっ
た。之等の測定反応は全て２５℃下に実施した。
【００３０】得られた結果を図２に示す。
【００３１】図２において、縦軸は各酵素量（ｍＵ／ｇ
肝重量）を、横軸は各酵素（ＧＯＴ及びＧＰＴ）を示
し、棒グラフ（１）が本発明実験群の結果であり、同棒
グラフ（２）が対照群の結果である。
肝重量）を、横軸は各酵素（ＧＯＴ及びＧＰＴ）を示
し、棒グラフ（１）が本発明実験群の結果であり、同棒
グラフ（２）が対照群の結果である。
【００３２】之等結果より、本発明群では、対照群に比
べて、各酵素の漏出量が顕著に減少しており、このこと
から肝細胞障害の程度が非常に軽減されていることが明
らかである。
べて、各酵素の漏出量が顕著に減少しており、このこと
から肝細胞障害の程度が非常に軽減されていることが明
らかである。
【００３３】
【試験例２】試験例１の（１）と同様にして本発明臓器
灌流保存液又は対照灌流液を用い、同一スケジュールに
てラット肝の灌流実験を行ない、実験期間の適当な時期
に肝の一部を切取り、急速凍結乾燥して凍結試料を作成
し、以下の通り、得られた各試料の過酸化脂質量の測定
を行なった。
灌流保存液又は対照灌流液を用い、同一スケジュールに
てラット肝の灌流実験を行ない、実験期間の適当な時期
に肝の一部を切取り、急速凍結乾燥して凍結試料を作成
し、以下の通り、得られた各試料の過酸化脂質量の測定
を行なった。
【００３４】即ち、肝凍結試料を冷ＫＣｌ溶液中にホモ
ジェナイズした後、ホモジュネートの０．５ｍｌをネジ
蓋付試験官に入れ、これに０．３ｍｌのリン酸を加え、
更に１．０ｍｌのＴＢＡ試薬（０．６７％ ２−チオバ
ルビタール酸溶液）を加え、沸騰水中で４５分間加熱し
た。内容液を室温に冷やした後、これに４．０ｍｌのｎ
−ブタノールを加え、よく振り混ぜて抽出操作を行な
い、３０００ｒｐｍで１０分間遠心操作を行なって水層
とｎ−ブタノール層とを分離した。ブタノール層を取出
し、その５３５ｎｍ及び５２０ｎｍでの吸光度を測定し
た。
ジェナイズした後、ホモジュネートの０．５ｍｌをネジ
蓋付試験官に入れ、これに０．３ｍｌのリン酸を加え、
更に１．０ｍｌのＴＢＡ試薬（０．６７％ ２−チオバ
ルビタール酸溶液）を加え、沸騰水中で４５分間加熱し
た。内容液を室温に冷やした後、これに４．０ｍｌのｎ
−ブタノールを加え、よく振り混ぜて抽出操作を行な
い、３０００ｒｐｍで１０分間遠心操作を行なって水層
とｎ−ブタノール層とを分離した。ブタノール層を取出
し、その５３５ｎｍ及び５２０ｎｍでの吸光度を測定し
た。
【００３５】過酸化脂質の量は、妨害物質による測定精
度低下を防止するため、上記で測定された５３５ｎｍの
吸光度測定値から５２０ｎｍ吸光度測定値を差引いた値
として求めた。
度低下を防止するため、上記で測定された５３５ｎｍの
吸光度測定値から５２０ｎｍ吸光度測定値を差引いた値
として求めた。
【００３６】このとき、１，１，３，３−テトラエトキ
シプロパンを０．１Ｎ塩酸中で加水分解して定量的にマ
ロンジアルデヒドに転換させて標準物質として用いた。
シプロパンを０．１Ｎ塩酸中で加水分解して定量的にマ
ロンジアルデヒドに転換させて標準物質として用いた。
【００３７】得られた経時的過酸化脂質量変化を図３に
示す。該図において、縦軸は過酸化脂質量（ナノモル／
ｍｇ蛋白）を、横軸は灌流停止からの経過時間（分）を
示し、グラフ（１）が本発明実験群の結果であり、グラ
フ（２）が対照群のそれである。尚、図には再灌流開始
時を矢印にて示した。
示す。該図において、縦軸は過酸化脂質量（ナノモル／
ｍｇ蛋白）を、横軸は灌流停止からの経過時間（分）を
示し、グラフ（１）が本発明実験群の結果であり、グラ
フ（２）が対照群のそれである。尚、図には再灌流開始
時を矢印にて示した。
【００３８】上記図３より、本発明実験群によれば、対
照群に比して、組織中のミトコンドリアの活性酸素によ
る障害を受ける程度が、顕著に抑制されており、このこ
とから、本発明の臓器灌流保存液は、血流を再開した場
合に組織が受ける再酸素化障害を防止する作用を有して
いることが明らかとなった。
照群に比して、組織中のミトコンドリアの活性酸素によ
る障害を受ける程度が、顕著に抑制されており、このこ
とから、本発明の臓器灌流保存液は、血流を再開した場
合に組織が受ける再酸素化障害を防止する作用を有して
いることが明らかとなった。
【図１】試験例１の（２）に従い求められた、本発明臓
器灌流保存液を利用したラット肝灌流時のアデニンヌク
レオチド量の結果を示すグラフである。
器灌流保存液を利用したラット肝灌流時のアデニンヌク
レオチド量の結果を示すグラフである。
【図２】試験例１の（５）に従い求められた、本発明臓
器灌流保存液を利用したラット肝灌流時のＧＯＴ及びＧ
ＰＴの漏出量を求めた結果を示すグラフである。
器灌流保存液を利用したラット肝灌流時のＧＯＴ及びＧ
ＰＴの漏出量を求めた結果を示すグラフである。
【図３】試験例２に従い求められた、本発明臓器灌流保
存液を利用したラット肝灌流時の過酸化脂質量変化を求
めた結果を示すグラフである。
存液を利用したラット肝灌流時の過酸化脂質量変化を求
めた結果を示すグラフである。
Claims (3)
- 【請求項１】灌流液に、その１リットルに対して１．５
〜７ミリモルとなる量のクエン酸を加えたことを特徴と
する生体臓器灌流保存液。 - 【請求項２】灌流液が生理食塩水及びリンゲル液から選
ばれるものである請求項１に記載の生体臓器灌流保存
液。 - 【請求項３】灌流液がクレブスヘンゼライトリンゲル液
である請求項２に記載の生体臓器灌流保存液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5223057A JP2992668B2 (ja) | 1993-09-08 | 1993-09-08 | 生体臓器灌流保存液 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5223057A JP2992668B2 (ja) | 1993-09-08 | 1993-09-08 | 生体臓器灌流保存液 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0776501A JPH0776501A (ja) | 1995-03-20 |
| JP2992668B2 true JP2992668B2 (ja) | 1999-12-20 |
Family
ID=16792164
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5223057A Expired - Lifetime JP2992668B2 (ja) | 1993-09-08 | 1993-09-08 | 生体臓器灌流保存液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2992668B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005095152A (ja) * | 2003-08-29 | 2005-04-14 | Japan Tissue Engineering:Kk | 培養組織の保存方法 |
| CN105561425A (zh) * | 2015-12-16 | 2016-05-11 | 天津理工大学 | 一种减少异物沉积血管壁的1/3次间歇式单脉动流灌注方法 |
| CN106983088B (zh) * | 2017-04-10 | 2018-07-27 | 青岛大学 | 适用于婴幼儿的祛毒动物肝脏食品及其加工方法 |
-
1993
- 1993-09-08 JP JP5223057A patent/JP2992668B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0776501A (ja) | 1995-03-20 |
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