JP2946021B2 - タイマイの甲羅からのタンパク質の分離法 - Google Patents
タイマイの甲羅からのタンパク質の分離法Info
- Publication number
- JP2946021B2 JP2946021B2 JP7097763A JP9776395A JP2946021B2 JP 2946021 B2 JP2946021 B2 JP 2946021B2 JP 7097763 A JP7097763 A JP 7097763A JP 9776395 A JP9776395 A JP 9776395A JP 2946021 B2 JP2946021 B2 JP 2946021B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- proteins
- shells
- thai
- mai
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、タンパク質の中でもタ
イマイという海ガメの甲羅を構成するタンパク質の分離
法に関する。
イマイという海ガメの甲羅を構成するタンパク質の分離
法に関する。
【０００２】
【従来の技術】水溶液に溶けるタンパク質の分離は、従
来よりカラムクロマトグラフィーおよび高速液体クロマ
トグラフィー（以下ＨＰＬＣ）を用いて行われるのが一
般的である。最近、疎水性（水に溶けない）の膜タンパ
ク質などのタンパク質の分離、精製が界面活性剤あるい
は変性剤を用いることにより可能となってきている。
来よりカラムクロマトグラフィーおよび高速液体クロマ
トグラフィー（以下ＨＰＬＣ）を用いて行われるのが一
般的である。最近、疎水性（水に溶けない）の膜タンパ
ク質などのタンパク質の分離、精製が界面活性剤あるい
は変性剤を用いることにより可能となってきている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、疎水性
タンパク質の中でも、ツメ、毛髪、カメの甲羅などの硬
タンパク質からタンパク質の分離が難しく、その性質に
ついて詳しく解明されていなかった。タンパク質には、
数多くの種類があり、その分離法もさまざまな条件が必
要とされている。したがって、これまでほとんど報告が
ないような硬タンパク質の分離法の確立が望まれている
ところであった。これらの硬タンパク質の１つとしてカ
メ類の甲羅が挙げられる。特に海ガメの中でもタイマイ
の甲羅は、鼈甲細工に４００年も前から用いられてきた
動物性宝石である。しかしながら、ワシントン条約によ
り平成４年末をもって、タイマイ及びその甲羅の輸入は
禁止され、鼈甲細工従事者ならびに海ガメの研究者にと
っては大きな問題となっていた。
タンパク質の中でも、ツメ、毛髪、カメの甲羅などの硬
タンパク質からタンパク質の分離が難しく、その性質に
ついて詳しく解明されていなかった。タンパク質には、
数多くの種類があり、その分離法もさまざまな条件が必
要とされている。したがって、これまでほとんど報告が
ないような硬タンパク質の分離法の確立が望まれている
ところであった。これらの硬タンパク質の１つとしてカ
メ類の甲羅が挙げられる。特に海ガメの中でもタイマイ
の甲羅は、鼈甲細工に４００年も前から用いられてきた
動物性宝石である。しかしながら、ワシントン条約によ
り平成４年末をもって、タイマイ及びその甲羅の輸入は
禁止され、鼈甲細工従事者ならびに海ガメの研究者にと
っては大きな問題となっていた。
【０００４】本発明は、これまでよく使用されていた
が、その性質がよく知られていないタイマイの甲羅を構
成するタンパク質の分離法を提供することを目的として
いる。
が、その性質がよく知られていないタイマイの甲羅を構
成するタンパク質の分離法を提供することを目的として
いる。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、請求項１の発明は、タイマイの甲羅をパウダー状に
し、変性剤としてウレア、還元剤としてジチオスレイト
ールの存在下でタンパク質の抽出を行った後、イオン交
換クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィーを用い
たＨＰＬＣにより、分子量１５Ｋと５Ｋの２種のタンパ
ク質を精製する方法よりなる。
に、請求項１の発明は、タイマイの甲羅をパウダー状に
し、変性剤としてウレア、還元剤としてジチオスレイト
ールの存在下でタンパク質の抽出を行った後、イオン交
換クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィーを用い
たＨＰＬＣにより、分子量１５Ｋと５Ｋの２種のタンパ
ク質を精製する方法よりなる。
【０００６】
【０００７】
【０００８】
【作用】分離、精製したタンパク質のアミノ酸組成分析
を行うことによりタンパク量の定量、ならびにアミノ酸
の割合がわかる。
を行うことによりタンパク量の定量、ならびにアミノ酸
の割合がわかる。
【０００９】タンパク質のアミノ酸配列を調べることに
より、現在登録してあるタンパク質とホモロジー検索が
出来る。
より、現在登録してあるタンパク質とホモロジー検索が
出来る。
【００１０】上記の検索を行うことにより、既存か未知
タンパク質かを知ることができる。
タンパク質かを知ることができる。
【００１１】アミノ酸配列を基に親水性・疎水性度をコ
ンピューターで計算できる。
ンピューターで計算できる。
【００１２】
【００１３】
【００１４】
【実施例】実施例について図面を参照して説明すると、
図１において、タイマイの甲羅を粉細機などによって粉
末状にする。この実施例では、１００ミクロン以下のパ
ウダーとしたものを用いた。
図１において、タイマイの甲羅を粉細機などによって粉
末状にする。この実施例では、１００ミクロン以下のパ
ウダーとしたものを用いた。
【００１５】これを、変性剤として例えば８Ｍ尿素、及
び還元剤としての例えば４０ｍＭジチオスレイトール
（以下ＤＴＴ）、を含む２０ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ
６．８溶液中で４℃、一昼夜、スターラーをゆっくり攪
拌してタンパク質を抽出する。次いで、１８０００ｒｐ
ｍ、３０分遠心して上清を得る。
び還元剤としての例えば４０ｍＭジチオスレイトール
（以下ＤＴＴ）、を含む２０ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ
６．８溶液中で４℃、一昼夜、スターラーをゆっくり攪
拌してタンパク質を抽出する。次いで、１８０００ｒｐ
ｍ、３０分遠心して上清を得る。
【００１６】この場合、変性剤のみの使用ではタイマイ
の甲羅からタンパク質を抽出分離することは困難である
が、変性剤と共に還元剤を使用することによって、これ
まで困難であったタイマイの甲羅からタンパク質を抽出
分離することが可能となったのである。
の甲羅からタンパク質を抽出分離することは困難である
が、変性剤と共に還元剤を使用することによって、これ
まで困難であったタイマイの甲羅からタンパク質を抽出
分離することが可能となったのである。
【００１７】
【００１８】上清を、ＤＴＴ濃度５ｍＭにした前述の抽
出液で平衡化したＣＭイオン交換クロマトグラフィーに
供し、未吸着画分と吸着画分に分ける。抽出したタンパ
ク質を分離するために、ＨＰＬＣなどのカラムクロマト
グラフィーを用いることが効果的である。また、カラム
につめる樹脂は、イオン交換用樹脂、逆相用樹脂などを
組み合わせて使用する方がよい。
出液で平衡化したＣＭイオン交換クロマトグラフィーに
供し、未吸着画分と吸着画分に分ける。抽出したタンパ
ク質を分離するために、ＨＰＬＣなどのカラムクロマト
グラフィーを用いることが効果的である。また、カラム
につめる樹脂は、イオン交換用樹脂、逆相用樹脂などを
組み合わせて使用する方がよい。
【００１９】吸着画分は、上記緩衝液に塩化ナトリウム
濃度を上げ、０．５Ｍ濃度付近で溶出される分子量５０
００（以下５Ｋ）タンパク質が回収された。この画分を
逆相Ｃ１８カラムを用いたＨＰＬＣにて、単一ピークに
まで精製した（図２）。
濃度を上げ、０．５Ｍ濃度付近で溶出される分子量５０
００（以下５Ｋ）タンパク質が回収された。この画分を
逆相Ｃ１８カラムを用いたＨＰＬＣにて、単一ピークに
まで精製した（図２）。
【００２０】一方、未吸着画分は透析することにより沈
澱したタンパク質を、８Ｍ尿素、５ｍＭＤＴＴを含むト
リス緩衝液、ｐＨ９．１に溶解する。
澱したタンパク質を、８Ｍ尿素、５ｍＭＤＴＴを含むト
リス緩衝液、ｐＨ９．１に溶解する。
【００２１】上記溶液を同一緩衝液で平衡化したＤＥＡ
Ｅ陰イオンカラムを用いたＨＰＬＣに供した。塩化ナト
リウム濃度を上げていったら、約０．１付近で分子量１
５０００（以下１５Ｋ）タンパク質が溶出された。この
画分を逆相Ｃ１８カラムを用いたＨＰＬＣに供し、１５
Ｋタンパク質を単一ピークにまで精製した（図３，
４）。
Ｅ陰イオンカラムを用いたＨＰＬＣに供した。塩化ナト
リウム濃度を上げていったら、約０．１付近で分子量１
５０００（以下１５Ｋ）タンパク質が溶出された。この
画分を逆相Ｃ１８カラムを用いたＨＰＬＣに供し、１５
Ｋタンパク質を単一ピークにまで精製した（図３，
４）。
【００２２】５Ｋと１５Ｋの両タンパク質のアミノ酸組
成は１％フェノールを含む６Ｎ塩酸、１１０°Ｃ、２２
時間反応することにより行った。なおトリプトファンは
３％チオグリコール酸を含む５．８Ｎ塩酸、１１０°
Ｃ、２２時間加水分解し、システインは過ギ酸酸化後シ
ステイン酸として定量した。いずれもアミノ酸は、日立
高速アミノ酸分析計Ｌ−８５００により測定したのが表
１である。
成は１％フェノールを含む６Ｎ塩酸、１１０°Ｃ、２２
時間反応することにより行った。なおトリプトファンは
３％チオグリコール酸を含む５．８Ｎ塩酸、１１０°
Ｃ、２２時間加水分解し、システインは過ギ酸酸化後シ
ステイン酸として定量した。いずれもアミノ酸は、日立
高速アミノ酸分析計Ｌ−８５００により測定したのが表
１である。
【００２３】
【表１】
【００２４】５Ｋのタンパク質は、ピリジルエチル化
（ＰＥ）してそのアミノ酸配列を検討した。なおシステ
インのピリジルエチル化は、以下の方法で行った。ま
ず、タンパク質を０．５ｍｌの６Ｍ Guanidine-HCl、５
０ｍＭ Tris-HCl 、ｐＨ８．５、１ｍＭ EDTA 、５０ｍ
Ｍ DTTに溶解し（タンパク質濃度１ｍｇ／ｍｌ）、気相
を窒素置換後、３０°Ｃ、２時間反応させた。次に、４
−ビニルピリジンを加え、窒素置換し、３０°Ｃ、２時
間反応した。さらに、反応液をＨＰＬＣ（カラム；日本
分光 Biofine RPC-PO 、６×１５０ｍｍ）に供し、０．
１％ＴＦＡを含むアセトニトリルの濃度を直線的に上げ
ることによりＰＥタンパク質を溶出した。タンパク質
（ＰＥ化含む）のアミノ酸配列は、ＡＢＩ社の４７７Ａ
／１２０ＡプロテインシーケンサーによりＮ末端より４
９残基決定した。一方Ｃ末端はカルボキシペプチダーゼ
Ｙを作用することにより遊離するアミノ酸を５残基調
べ、５Ｋのタンパク質は、図５のような５１アミノ酸か
ら成ることがわかった。
（ＰＥ）してそのアミノ酸配列を検討した。なおシステ
インのピリジルエチル化は、以下の方法で行った。ま
ず、タンパク質を０．５ｍｌの６Ｍ Guanidine-HCl、５
０ｍＭ Tris-HCl 、ｐＨ８．５、１ｍＭ EDTA 、５０ｍ
Ｍ DTTに溶解し（タンパク質濃度１ｍｇ／ｍｌ）、気相
を窒素置換後、３０°Ｃ、２時間反応させた。次に、４
−ビニルピリジンを加え、窒素置換し、３０°Ｃ、２時
間反応した。さらに、反応液をＨＰＬＣ（カラム；日本
分光 Biofine RPC-PO 、６×１５０ｍｍ）に供し、０．
１％ＴＦＡを含むアセトニトリルの濃度を直線的に上げ
ることによりＰＥタンパク質を溶出した。タンパク質
（ＰＥ化含む）のアミノ酸配列は、ＡＢＩ社の４７７Ａ
／１２０ＡプロテインシーケンサーによりＮ末端より４
９残基決定した。一方Ｃ末端はカルボキシペプチダーゼ
Ｙを作用することにより遊離するアミノ酸を５残基調
べ、５Ｋのタンパク質は、図５のような５１アミノ酸か
ら成ることがわかった。
【００２５】１５Ｋのタンパク質は、Ｎ末端より１６残
基までを決定した。さらに詳しく調べるためにＶ８プロ
テアーゼ及びプロティネースＫにより酵素消化したタン
パク質を回収することにした。１５Ｋタンパク質のＶ８
プロテアーゼによる消化は、以下の条件で行った。１５
Ｋタンパク質（約８ｎmol)を、８Ｍ Urea に可溶化後、
５０ｍＭリン酸緩衝液水、Ｖ８プロテアーゼ（基質／酵
素＝３０／１、モル比）で加えた（Ureaの最終濃度５
Ｍ）。３５°Ｃ、１２時間反応後、２倍量の８ＭUrea
、DDT(最終２ｍＭ）を加えた。さらに反応物を２分間
加熱し、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加えた後、ＨＰ
ＬＣに供し、２つのピークよりＮ末より重複する１０〜
３２残基と重複しない２２残基を決定した。一方、 Pro
teinase Ｋ消化は、ＰＥ１５Ｋタンパク質（前述の〔０
０２４〕方法）を用いた。約２０ｎ molのＰＥ１５Ｋタ
ンパク質を、６Ｍ Urea 、５０ｍＭTris-HCl 、ｐＨ８
に溶解し、 Proteinase Ｋ（基質／酵素＝１００／１、
モル比）を加え、３３°Ｃ、７５分反応させた。反応液
に粉末Urea及びDDT を加え、それぞれ最終８Ｍと２ｍＭ
とした。次いで熱処理後、ＴＦＡを加え酸性としＨＰＬ
Ｃに供した。これにより得た２０のピークＰＫ１〜２０
のアミノ酸配列を調べ、最終的にＮ末端より７６残基を
決定した（図６）。これ以外のピークＰＫ４、５、６、
７、１０、１１、１２、１４、１６、１７のアミノ酸配
列は図７に示す。
基までを決定した。さらに詳しく調べるためにＶ８プロ
テアーゼ及びプロティネースＫにより酵素消化したタン
パク質を回収することにした。１５Ｋタンパク質のＶ８
プロテアーゼによる消化は、以下の条件で行った。１５
Ｋタンパク質（約８ｎmol)を、８Ｍ Urea に可溶化後、
５０ｍＭリン酸緩衝液水、Ｖ８プロテアーゼ（基質／酵
素＝３０／１、モル比）で加えた（Ureaの最終濃度５
Ｍ）。３５°Ｃ、１２時間反応後、２倍量の８ＭUrea
、DDT(最終２ｍＭ）を加えた。さらに反応物を２分間
加熱し、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加えた後、ＨＰ
ＬＣに供し、２つのピークよりＮ末より重複する１０〜
３２残基と重複しない２２残基を決定した。一方、 Pro
teinase Ｋ消化は、ＰＥ１５Ｋタンパク質（前述の〔０
０２４〕方法）を用いた。約２０ｎ molのＰＥ１５Ｋタ
ンパク質を、６Ｍ Urea 、５０ｍＭTris-HCl 、ｐＨ８
に溶解し、 Proteinase Ｋ（基質／酵素＝１００／１、
モル比）を加え、３３°Ｃ、７５分反応させた。反応液
に粉末Urea及びDDT を加え、それぞれ最終８Ｍと２ｍＭ
とした。次いで熱処理後、ＴＦＡを加え酸性としＨＰＬ
Ｃに供した。これにより得た２０のピークＰＫ１〜２０
のアミノ酸配列を調べ、最終的にＮ末端より７６残基を
決定した（図６）。これ以外のピークＰＫ４、５、６、
７、１０、１１、１２、１４、１６、１７のアミノ酸配
列は図７に示す。
【００２６】決定した５Ｋタンパク質のアミノ酸配列を
基に、国立遺伝学研究所のデータベースを用いてホモロ
ジー検索を行った。その結果、ホモロジーを示すタンパ
ク質はほとんどなかった。
基に、国立遺伝学研究所のデータベースを用いてホモロ
ジー検索を行った。その結果、ホモロジーを示すタンパ
ク質はほとんどなかった。
【００２７】このことより５Ｋタンパク質は、新規タン
パク質と考えられる。
パク質と考えられる。
【００２８】１５Ｋタンパク質のＮ末端より７６残基を
基にホモロジー検索を行ったところ、図８のようにニワ
トリ、ハト、アヒルなどの鳥類の羽毛、爪ケラチンと約
５０％のホモロジーを示すことが明らかになった。特
に、２５番目のＰｒｏから５１番目のＬｅｕにかけて
は、７８〜９３％と非常に似ている。さらに、立体構造
に関係があると考えられているシステインは、２２、２
６、３０番目のものは完全に、そして６、１０番目では
約７０％が一致している。一方、異なる点としては分子
量の大きさが違うことである。
基にホモロジー検索を行ったところ、図８のようにニワ
トリ、ハト、アヒルなどの鳥類の羽毛、爪ケラチンと約
５０％のホモロジーを示すことが明らかになった。特
に、２５番目のＰｒｏから５１番目のＬｅｕにかけて
は、７８〜９３％と非常に似ている。さらに、立体構造
に関係があると考えられているシステインは、２２、２
６、３０番目のものは完全に、そして６、１０番目では
約７０％が一致している。一方、異なる点としては分子
量の大きさが違うことである。
【００２９】よって１５Ｋタンパク質は、鳥類のケラチ
ンに似ているが新規のタンパク質と考えられる。
ンに似ているが新規のタンパク質と考えられる。
【００３０】図９は、５Ｋタンパク質の親水性、疎水性
度を示しており、このタンパク質は、非常に疏水性の高
い性質をもつことを明らかにした。
度を示しており、このタンパク質は、非常に疏水性の高
い性質をもつことを明らかにした。
【００３１】図１０は、１５Ｋタンパク質の親水性、疎
水性度を示しており、このタンパク質は疎水性の高い性
質を持つことを明らかにした。
水性度を示しており、このタンパク質は疎水性の高い性
質を持つことを明らかにした。
【００３２】
【００３３】
【００３４】なお、本発明は上記実施例に限定されるも
のではなく、この発明の精神を逸脱しない範囲で種々の
改変をなし得ることは勿論である。
のではなく、この発明の精神を逸脱しない範囲で種々の
改変をなし得ることは勿論である。
【００３５】
【発明の効果】本発明は、以上説明したように構成され
ているので、以下に記載されるような効果を奏する。
ているので、以下に記載されるような効果を奏する。
【００３６】請求項１の発明によれば、これまで抽出分
離が困難であったタイマイの甲羅からタンパク質を抽出
分離することができる。
離が困難であったタイマイの甲羅からタンパク質を抽出
分離することができる。
【００３７】また、請求項１の発明の分離法で得られた
タンパク質は、タイマイの甲羅素材の開発に利用するこ
とができる。
タンパク質は、タイマイの甲羅素材の開発に利用するこ
とができる。
【００３８】
【００３９】
【図１】タイマイの甲羅よりタンパク質の抽出法と精製
法を示す図である。
法を示す図である。
【図２】精製した５Ｋタンパク質のＨＰＬＣパターンを
示す図である。
示す図である。
【図３】精製した１５Ｋタンパク質のＨＰＬＣパターン
を示す図である。
を示す図である。
【図４】精製した１５Ｋタンパク質のＳＤＳ−ＰＡＧＥ
の図である。
の図である。
【図５】５Ｋタンパク質の全アミノ酸配列を示す図であ
る。
る。
【図６】１５Ｋタンパク質のＮ末端より７６アミノ酸ま
での配列を示す図である。
での配列を示す図である。
【図７】１５Ｋタンパク質の中間部およびＣ末端フラグ
メントと推定されるアミノ酸配列を示す図である。
メントと推定されるアミノ酸配列を示す図である。
【図８】１５Ｋタンパク質とホモロジーを示すタンパク
質を示す図である。
質を示す図である。
【図９】５Ｋタンパク質の親水性、疎水性度を示す図で
ある。
ある。
【図１０】１５Ｋタンパク質の親水性、疎水性度を示す
図である。
図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C07K 14/46 C07K 1/14 C07K 1/18 C07K 1/20 C07K 16/18 C12N 15/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ)
Claims (1)
- 【請求項１】 タイマイの甲羅をパウダー状にし、変性
剤としてウレア、還元剤としてジチオスレイトールの存
在下でタンパク質の抽出を行った後、イオン交換クロマ
トグラフィー、逆相クロマトグラフィーを用いたＨＰＬ
Ｃにより、分子量１５Ｋと５Ｋの２種のタンパク質を精
製することを特徴とするタイマイの甲羅からのタンパク
質の分離法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7097763A JP2946021B2 (ja) | 1995-03-29 | 1995-03-29 | タイマイの甲羅からのタンパク質の分離法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7097763A JP2946021B2 (ja) | 1995-03-29 | 1995-03-29 | タイマイの甲羅からのタンパク質の分離法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08269094A JPH08269094A (ja) | 1996-10-15 |
| JP2946021B2 true JP2946021B2 (ja) | 1999-09-06 |
Family
ID=14200916
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7097763A Expired - Lifetime JP2946021B2 (ja) | 1995-03-29 | 1995-03-29 | タイマイの甲羅からのタンパク質の分離法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2946021B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102319419A (zh) * | 2011-08-18 | 2012-01-18 | 江中药业股份有限公司 | 甲鱼肽在制药中的应用 |
| CN103630646B (zh) * | 2013-10-30 | 2015-12-02 | 山东东阿阿胶股份有限公司 | 一种胶类中药及其制品中龟源性成分的检测方法 |
| CN109142563B (zh) * | 2018-07-25 | 2021-03-02 | 山西广誉远国药有限公司 | 一种龟龄集uplc指纹图谱的构建方法及其应用 |
-
1995
- 1995-03-29 JP JP7097763A patent/JP2946021B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH08269094A (ja) | 1996-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ARAI et al. | Amino‐acid sequence of feather keratin from fowl | |
| Fitton et al. | The amino acid sequence of the delta haemolysin of Staphylococcus aureus | |
| US4607023A (en) | Natriuretic | |
| CN110590911B (zh) | 一种含酪氨酸硫酸化修饰的多肽合成方法及其应用 | |
| JPS6319520B2 (ja) | ||
| Roy et al. | Human insoluble lens protein II. Isolation and characterization of a 9600 dalton polypeptide | |
| Klip et al. | Alignment of the major tryptic fragments of the adenosine triphosphatase from sarcoplasmic reticulum. | |
| KR970001811B1 (ko) | 신규의 폴리펩티드 및 그 제조방법 | |
| Ramshaw et al. | The amino acid sequence of Helianthus annuus L (sunflower) cytochrome c deduced from chymotrypic peptides | |
| HEW et al. | Biosynthesis of antifreeze polypeptides in the winter flounder: characterization and seasonal occurrence of precursor polypeptides | |
| US4016258A (en) | Vasoactive intestinal peptide from fowl | |
| OZAWA et al. | On the species difference of N-terminal amino acid sequence in hemoglobin. I | |
| Chua et al. | The amino acid sequence of the α chain of the major haemoglobin of the rat (Rattus norvegicus) | |
| JP2946021B2 (ja) | タイマイの甲羅からのタンパク質の分離法 | |
| Romero-Herrera et al. | Human skeletal muscle proteins: The Primary Structure of Troponin C. | |
| US4632780A (en) | N-terminal fragment of human pro-opiomelanocortin and process therefor | |
| Kondo et al. | Primary Structure of the Membrane-Binding Segment of Rabbit Cytochrome b 5 | |
| Takagi et al. | Aplysia myoglobins with an unusual amino acid sequence | |
| Gerber et al. | [9] Primary structure of bacteriorhodopsin: Sequencing methods for membrane proteins | |
| Bosc-Bierne et al. | Isolation and partial structural characterization of chicken pancreatic colipase | |
| SWANN et al. | Characterization of turkey myelin basic protein isolated by a simple procedure | |
| Brockmoeller et al. | Cross-linked amino acids in the protein pair S13-S19 and sequence analysis of protein S13 of Bacillus stearothermophilus ribosomes | |
| WO1992015317A1 (en) | Synthetic preparation of amylin and amylin analogues | |
| KOTAKI | Studies on insulin II. Amino acid composition and terminal sequences of bonito insulin | |
| Deibler et al. | Limited digestion of guinea pig myelin basic protein and its carboxy‐terminal fragment (residues 89–169) with Staphylococcus aureus V8 protease |