JP2910929B2 - 磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法 - Google Patents
磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法Info
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- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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- G01N2446/00—Magnetic particle immunoreagent carriers
- G01N2446/80—Magnetic particle immunoreagent carriers characterised by the agent used to coat the magnetic particles, e.g. lipids
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法に係わ
り、例えば抗原抗体反応におけるビーズ凝集法に利用さ
れるビーズ表面の改質方法に関する。
り、例えば抗原抗体反応におけるビーズ凝集法に利用さ
れるビーズ表面の改質方法に関する。
免疫診断等に利用される抗原抗体反応としてビーズ凝
集法が知られている。このビーズ凝集法はプラスチック
ビーズ等の微粒子表面に抗体を付着させて抗原との反応
に利用し、ビーズの凝集の程度を測定することにより、
微量の抗原及び抗体の検出同定を行うものである。
集法が知られている。このビーズ凝集法はプラスチック
ビーズ等の微粒子表面に抗体を付着させて抗原との反応
に利用し、ビーズの凝集の程度を測定することにより、
微量の抗原及び抗体の検出同定を行うものである。
従来のビーズ凝集法においては、プラスチックビーズ
としてポリスチレンが使用されているが抗体との親和性
があまりなく、抗体をあまり付着しないために正確な検
査同定が困難であるという問題がある。
としてポリスチレンが使用されているが抗体との親和性
があまりなく、抗体をあまり付着しないために正確な検
査同定が困難であるという問題がある。
本発明者等は、免疫診断での抗原抗体反応のビーズ凝
集法に使用されるビーズの表面改質方法を検討している
中で、プラスチックビーズ等の微粒子の表面に単分子膜
を形成させることにより抗原抗体を容易に付着させるこ
とができることを見出した。
集法に使用されるビーズの表面改質方法を検討している
中で、プラスチックビーズ等の微粒子の表面に単分子膜
を形成させることにより抗原抗体を容易に付着させるこ
とができることを見出した。
本発明は磁気粒子よりなる粒子表面の改質方法の提供
を課題とする。
を課題とする。
本発明における磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法
は、単分子膜、又は単分子累積膜を液表面に形成した液
体中に磁気粒子よりなる粒子を存在させ、該粒子を気液
界面を介して対置した磁石により気液界面を通過させ、
粒子表面に単分子膜、又は単分子累積膜を形成させるこ
とを特徴とするものである。
は、単分子膜、又は単分子累積膜を液表面に形成した液
体中に磁気粒子よりなる粒子を存在させ、該粒子を気液
界面を介して対置した磁石により気液界面を通過させ、
粒子表面に単分子膜、又は単分子累積膜を形成させるこ
とを特徴とするものである。
また上記磁気粒子よりなる粒子は有機高分子に被覆さ
れた磁気粒子であってもよく、通常磁気粒子に乳化重合
等により有機高分子をコーティングして形成したものを
使用することができる。
れた磁気粒子であってもよく、通常磁気粒子に乳化重合
等により有機高分子をコーティングして形成したものを
使用することができる。
磁気粒子としては強磁性体であればよく、例えばγ−
酸化鉄、酸化クロム（CrO2）等を使用することができ、
その粒径には特に制限はなく、１μｍ程度の微粒子から
mm単位の大きさの粒子であってもよい。
酸化鉄、酸化クロム（CrO2）等を使用することができ、
その粒径には特に制限はなく、１μｍ程度の微粒子から
mm単位の大きさの粒子であってもよい。
磁石としては永久磁石、電磁石いずれを使用してもよ
いが、磁界強度を制御し、磁性粉の引き上げ速度を制御
する観点から電磁石を使用するとよい。
いが、磁界強度を制御し、磁性粉の引き上げ速度を制御
する観点から電磁石を使用するとよい。
磁気粒子に被膜される有機高分子としてはポリスチレ
ン、ポリアクリルアミド等があり、またシリカゲル等も
使用することができる。
ン、ポリアクリルアミド等があり、またシリカゲル等も
使用することができる。
単分子膜を形成する化合物としては、その化学構造中
に親水性部分と疎水性部分をその分子中に有する、所謂
界面活性剤に類似した構造を有する化合物である。親水
性部分としてはカルボキシル基及びその金属塩、又はア
ミン塩；スルホン酸基及びその金属塩、又はアミン塩；
スルホンアミド基；アミド基；アミノ基；イミノ基；ヒ
ドロキシル基；第４級アミノ基；オキシアミノ基；オキ
シイミノ基；ジアゾニウム基；グアニジン基；ヒドラジ
ン基； リン酸基；アルミン酸基等がある。一方疎水性
基としては長鎖アルキル基、或いは長鎖フルオロアルキ
ル基であって炭素原子数が５〜30程度のもの、好ましく
は10〜25程度のものである。またアルキル基の長さが適
当であれば直鎖、分岐鎖のいずれでもよい。その他のも
のとしては、例えばビニレン、ビニリデン、アセチレン
等のオレフィン系炭化水素基、フェニル、ナフチル、ア
ントラニル等の縮合多環芳香族基、ビフェニル、ターフ
ェニル等の鎖状多環芳香族基等がある。これら親水性部
分と疎水性部分とは、各々単独、又は複数の組み合わせ
による場合や、分子の両端に位置したり、或いは分子の
中央に位置することもある。また有機キレート化合物の
ような有機配位子を含む金属錯体、包接化合物等も単分
子膜を形成するものであれば使用することができる。
に親水性部分と疎水性部分をその分子中に有する、所謂
界面活性剤に類似した構造を有する化合物である。親水
性部分としてはカルボキシル基及びその金属塩、又はア
ミン塩；スルホン酸基及びその金属塩、又はアミン塩；
スルホンアミド基；アミド基；アミノ基；イミノ基；ヒ
ドロキシル基；第４級アミノ基；オキシアミノ基；オキ
シイミノ基；ジアゾニウム基；グアニジン基；ヒドラジ
ン基； リン酸基；アルミン酸基等がある。一方疎水性
基としては長鎖アルキル基、或いは長鎖フルオロアルキ
ル基であって炭素原子数が５〜30程度のもの、好ましく
は10〜25程度のものである。またアルキル基の長さが適
当であれば直鎖、分岐鎖のいずれでもよい。その他のも
のとしては、例えばビニレン、ビニリデン、アセチレン
等のオレフィン系炭化水素基、フェニル、ナフチル、ア
ントラニル等の縮合多環芳香族基、ビフェニル、ターフ
ェニル等の鎖状多環芳香族基等がある。これら親水性部
分と疎水性部分とは、各々単独、又は複数の組み合わせ
による場合や、分子の両端に位置したり、或いは分子の
中央に位置することもある。また有機キレート化合物の
ような有機配位子を含む金属錯体、包接化合物等も単分
子膜を形成するものであれば使用することができる。
このような有機化合物としては、ステアリン酸、ステ
アリン酸メチル、ステアリン酸金属塩、アラキジン酸
等、また色素系化合物、例えばローダミンＢ誘導体、フ
タロシアニン金属錯体誘導体、クロロフィル誘導体、シ
アニン染料誘導体、ルテニウムトリスビピリジン誘導体
等がある。また有機金属化合物としては、例えばフェロ
セン誘導体、テルル等の金属を含む有機カルボン酸等が
使用できる。
アリン酸メチル、ステアリン酸金属塩、アラキジン酸
等、また色素系化合物、例えばローダミンＢ誘導体、フ
タロシアニン金属錯体誘導体、クロロフィル誘導体、シ
アニン染料誘導体、ルテニウムトリスビピリジン誘導体
等がある。また有機金属化合物としては、例えばフェロ
セン誘導体、テルル等の金属を含む有機カルボン酸等が
使用できる。
本発明は、単分子膜、又は単分子累積膜を液表面に形
成した液体中に磁気粒子を存在させ、該磁気粒子を気液
界面を介して対置した磁石により気液界面を通過させ、
粒子表面に単分子膜、又は単分子累積膜を形成させるこ
とにより粒子表面を改質させることができることを見出
したものであり、粒子表面を単分子膜レベルで改質する
ことにより被膜を極薄膜化し、微環境を制御することが
できるものである。磁性粉粒子表面を疎水性とするに
は、単分子膜の疎水性部分が外側に向くように付着させ
ればよく、適当な単分子膜形成化合物を選択することに
よりその疎水性、親水性の程度を微妙に制御することが
できる。また異なる単分子膜形成化合物を積層すること
で高度な機能を有する粒子を構築することができる。
成した液体中に磁気粒子を存在させ、該磁気粒子を気液
界面を介して対置した磁石により気液界面を通過させ、
粒子表面に単分子膜、又は単分子累積膜を形成させるこ
とにより粒子表面を改質させることができることを見出
したものであり、粒子表面を単分子膜レベルで改質する
ことにより被膜を極薄膜化し、微環境を制御することが
できるものである。磁性粉粒子表面を疎水性とするに
は、単分子膜の疎水性部分が外側に向くように付着させ
ればよく、適当な単分子膜形成化合物を選択することに
よりその疎水性、親水性の程度を微妙に制御することが
できる。また異なる単分子膜形成化合物を積層すること
で高度な機能を有する粒子を構築することができる。
例えばビーズ凝集法に使用するビーズ表面を単分子膜
で改質すれば、その特異な疎水環境のために活性の高い
抗体ビーズを作製することができる。
で改質すれば、その特異な疎水環境のために活性の高い
抗体ビーズを作製することができる。
本発明の粒子の表面改質方法は、他にも例えば液体ク
ロマトグラフィー用充填剤、イオン交換樹脂、磁気ディ
スク等の固体潤滑剤、磁気記録材等における粒子の表面
改質に利用することができる。
ロマトグラフィー用充填剤、イオン交換樹脂、磁気ディ
スク等の固体潤滑剤、磁気記録材等における粒子の表面
改質に利用することができる。
〔実施例１〕 第１図は本発明の磁気粒子よりなる粒子の表面改質方
法を説明するための図で、図中１は磁気粒子よりなる粒
子、２は単分子膜、３は液体、４は電磁石、５は単分子
膜形成装置を示す。
法を説明するための図で、図中１は磁気粒子よりなる粒
子、２は単分子膜、３は液体、４は電磁石、５は単分子
膜形成装置を示す。
まず第１図（ａ）に示すように、単分子膜形成装置を
備えた水槽中に、γ−酸化鉄を内蔵するポリスチレンビ
ーズ（4.5μｍ径）を沈め、次いで水槽表面にローダミ
ンＢ誘導体であるＮ−〔９−（カルボキシフェニル）−
６−（エチルオクタデシルアミノ）−3H−キサンテン−
３−イリデン〕−Ｎ−エチルオクタデカミウム パーク
ロレートとアラキジン酸の混合物（モル比で0.5:99.5）
をクロロホルム溶液として、1.0×10-3M滴下し、上記混
合物の単分子膜２を水面状に形成した。
備えた水槽中に、γ−酸化鉄を内蔵するポリスチレンビ
ーズ（4.5μｍ径）を沈め、次いで水槽表面にローダミ
ンＢ誘導体であるＮ−〔９−（カルボキシフェニル）−
６−（エチルオクタデシルアミノ）−3H−キサンテン−
３−イリデン〕−Ｎ−エチルオクタデカミウム パーク
ロレートとアラキジン酸の混合物（モル比で0.5:99.5）
をクロロホルム溶液として、1.0×10-3M滴下し、上記混
合物の単分子膜２を水面状に形成した。
次いで単分子膜を挟むように配置した電磁石４に通電
し、磁性粉を気液界面を通過させ、電磁石面に磁着させ
た。更に単分子膜を表面に付着させた磁性粉を再度液中
に投入し、この操作を５回繰り返し、磁性粉表面に単分
子累積膜を形成した。
し、磁性粉を気液界面を通過させ、電磁石面に磁着させ
た。更に単分子膜を表面に付着させた磁性粉を再度液中
に投入し、この操作を５回繰り返し、磁性粉表面に単分
子累積膜を形成した。
単分子膜を形成した磁性粉を60℃で乾燥させ、螢光顕
微鏡で観察したところ磁性粉表面にローダミンＢによる
螢光か観察され、粒子表面にローダミンＢからなる単分
子膜が形成されていることが確認された。
微鏡で観察したところ磁性粉表面にローダミンＢによる
螢光か観察され、粒子表面にローダミンＢからなる単分
子膜が形成されていることが確認された。
〔実施例２〕 上記実施例１において、磁性粉としてプラスチック被
膜を有しないγ−酸化鉄（１μｍ径）を使用し、また単
分子膜形成材料としてアラキジン酸に代えてステアリン
酸エチルを使用した以外は実施例１と同様にして、磁性
粉表面に単分子膜を形成した。
膜を有しないγ−酸化鉄（１μｍ径）を使用し、また単
分子膜形成材料としてアラキジン酸に代えてステアリン
酸エチルを使用した以外は実施例１と同様にして、磁性
粉表面に単分子膜を形成した。
本発明は磁気粒子よりなる粒子表面に単分子膜を累積
させることにより、粒子表面を容易に改質させることが
でき、また単分子膜を形成する化合物を適宜選択するこ
とにより粒子表面の親水性、疎水性の程度、また表面の
分子配列構造、更に表面形態を微妙に変化させることが
できる。また単分子膜形成化合物として色素、錯体、包
接化合物、その他機能性分子を選択することにより、機
能性粒子を容易に得ることができ、例えば免疫診断での
ビーズ凝集法に使用されるビーズ表面を本発明により改
質し抗原抗体反応に利用すると、ビーズ表面を単分子膜
の配列した疎水環境とすることができるので、抗体を効
率よく吸着させることができ、検査の感度、及び精度を
向上させることができるものである。
させることにより、粒子表面を容易に改質させることが
でき、また単分子膜を形成する化合物を適宜選択するこ
とにより粒子表面の親水性、疎水性の程度、また表面の
分子配列構造、更に表面形態を微妙に変化させることが
できる。また単分子膜形成化合物として色素、錯体、包
接化合物、その他機能性分子を選択することにより、機
能性粒子を容易に得ることができ、例えば免疫診断での
ビーズ凝集法に使用されるビーズ表面を本発明により改
質し抗原抗体反応に利用すると、ビーズ表面を単分子膜
の配列した疎水環境とすることができるので、抗体を効
率よく吸着させることができ、検査の感度、及び精度を
向上させることができるものである。
第１図は本発明の磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法
を説明するための図である。 図中１は磁気粒子よりなる粒子、２は単分子膜、３は液
体、４は電磁石、５は単分子膜形成装置を示す。
を説明するための図である。 図中１は磁気粒子よりなる粒子、２は単分子膜、３は液
体、４は電磁石、５は単分子膜形成装置を示す。
フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭63−54933（ＪＰ，Ａ) 特開 昭63−171671（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−1564（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−96467（ＪＰ，Ａ) 特表 昭62−502708（ＪＰ，Ａ) 特表 昭62−501647（ＪＰ，Ａ)
Claims (4)
- 【請求項１】単分子膜、又は単分子累積膜を液表面に形
成した液体中に磁気粒子よりなる粒子を存在させ、 前記粒子を気液界面を介して対置した磁石により気液界
面を通過させることにより、通過した粒子表面に単分子
膜、又は単分子累積膜を形成させることを特徴とする磁
気粒子よりなる粒子の表面改質方法。 - 【請求項２】前記磁気粒子よりなる粒子が有機高分子に
被覆された磁気粒子であることを特徴とする請求項１に
記載の磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法。 - 【請求項３】前記単分子膜、又は単分子累積膜がローダ
ミンＢ誘導体からなる単分子膜、又は単分子累積膜形成
材料により形成されるものであることを特徴とする請求
項１又は２に記載の磁気粒子よりなる粒子の表面改質方
法。 - 【請求項４】前記気液界面を通過した粒子表面に単分子
膜、又は単分子累積膜を形成させた後、前記粒子表面に
形成された単分子膜、又は単分子累積膜上に抗体を吸着
させることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に
記載の磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1071350A JP2910929B2 (ja) | 1989-03-23 | 1989-03-23 | 磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法 |
| EP90105380A EP0388940B1 (en) | 1989-03-23 | 1990-03-21 | Method of modifying the surface of a magnetic particle |
| AT90105380T ATE107032T1 (de) | 1989-03-23 | 1990-03-21 | Verfahren zur modifizierung der oberfläche eines magnetischen teilchens. |
| DE69009554T DE69009554T2 (de) | 1989-03-23 | 1990-03-21 | Verfahren zur Modifizierung der Oberfläche eines magnetischen Teilchens. |
| US07/497,200 US5019416A (en) | 1989-03-23 | 1990-03-22 | Method of modifying the surface of a particle comprising a magnetic particle |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1071350A JP2910929B2 (ja) | 1989-03-23 | 1989-03-23 | 磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02248862A JPH02248862A (ja) | 1990-10-04 |
| JP2910929B2 true JP2910929B2 (ja) | 1999-06-23 |
Family
ID=13457961
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1071350A Expired - Lifetime JP2910929B2 (ja) | 1989-03-23 | 1989-03-23 | 磁気粒子よりなる粒子の表面改質方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5019416A (ja) |
| EP (1) | EP0388940B1 (ja) |
| JP (1) | JP2910929B2 (ja) |
| AT (1) | ATE107032T1 (ja) |
| DE (1) | DE69009554T2 (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5660760A (en) * | 1993-04-29 | 1997-08-26 | Basf Magnetics Gmbh | Magnetic coating dispersion |
| JPH0721550A (ja) * | 1993-06-30 | 1995-01-24 | Tdk Corp | 磁気記録媒体およびその製造方法 |
| FR2716206B1 (fr) * | 1994-02-11 | 1996-05-10 | Pasteur Institut | Surfaces hautement spécifiques pour réactions biologiques, procédé pour leur préparation et procédé de dosage d'une molécule utilisant ces surfaces. |
| FR2716263B1 (fr) * | 1994-02-11 | 1997-01-17 | Pasteur Institut | Procédé d'alignement de macromolécules par passage d'un ménisque et applications dans un procédé de mise en évidence, séparation et/ou dosage d'une macromolécule dans un échantillon. |
| GB9425138D0 (en) | 1994-12-12 | 1995-02-08 | Dynal As | Isolation of nucleic acid |
| US6248537B1 (en) | 1999-05-28 | 2001-06-19 | Institut Pasteur | Use of the combing process for the identification of DNA origins of replication |
| AU2003202026A1 (en) | 2002-01-16 | 2003-09-02 | Dynal Biotech Asa | Method for isolating nucleic acids and protein from a single sample |
| JP5781276B2 (ja) * | 2010-05-12 | 2015-09-16 | ジ・アリゾナ・ボード・オブ・リージェンツ・オン・ビハーフ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・アリゾナＴｈｅ Ａｒｉｚｏｎａ Ｂｏａｒｄ Ｏｆ Ｒｅｇｅｎｔｓ Ｏｎ Ｂｅｈａｌｆ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ａｒｉｚｏｎａ | 金属磁性粉末の製造方法 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US1407067A (en) * | 1920-11-05 | 1922-02-21 | Frank E Johnson | Method of coating metal articles |
| US4272510A (en) * | 1976-04-26 | 1981-06-09 | Smith Kendall O | Magnetic attraction transfer process for use in solid phase radioimmunoassays and in other assay methods |
| US4554088A (en) * | 1983-05-12 | 1985-11-19 | Advanced Magnetics Inc. | Magnetic particles for use in separations |
| FI844027A (fi) * | 1984-10-12 | 1986-04-13 | Labsystems Oy | Immunologiskt bestaemningsfoerfarande. |
| FI850481A0 (fi) * | 1985-02-06 | 1985-02-06 | Labsystems Oy | Foerfarande foer bestaemning av motmedel eller antigener. |
| FI851702A0 (fi) * | 1985-04-29 | 1985-04-29 | Labsystems Oy | Foerfarande och anordning foer utfoering immunobestaemningar. |
| JPS6354933A (ja) * | 1986-04-18 | 1988-03-09 | Kyowa Kaimen Kagaku Kk | 単分子異積膜成膜装置 |
| JPS63171671A (ja) * | 1986-09-24 | 1988-07-15 | エクソン リサーチ アンド エンヂニアリング コムパニー | 密にパックされたコロイド粒子の大面積・２次元配置物の製造法 |
-
1989
- 1989-03-23 JP JP1071350A patent/JP2910929B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-03-21 AT AT90105380T patent/ATE107032T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-03-21 EP EP90105380A patent/EP0388940B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-21 DE DE69009554T patent/DE69009554T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-03-22 US US07/497,200 patent/US5019416A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0388940A1 (en) | 1990-09-26 |
| JPH02248862A (ja) | 1990-10-04 |
| DE69009554T2 (de) | 1994-09-22 |
| DE69009554D1 (de) | 1994-07-14 |
| ATE107032T1 (de) | 1994-06-15 |
| EP0388940B1 (en) | 1994-06-08 |
| US5019416A (en) | 1991-05-28 |
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