JP2713534B2 - 弾性表面波バイオセンサ - Google Patents
弾性表面波バイオセンサInfo
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Description
ンサに関するものである。さらに詳しくは、この発明
は、小型電子デバイス化が可能で、新しいバイオセンサ
として有用な弾性表面波センサに関するものである。
療、エレクトロニクス等の諸分野においては、様々な形
状と大きさの導電センサ、あるいはpHセンサ等の溶液
センサが使用されてきている。しかしながら、これらの
溶液センサは、各種の分野の計測手段として重要な役割
を果しているにもかかわらず、従来の場合には、高精度
の計測機能を備えつつ、より小型のデバイス化を図るこ
とは極めて困難であった。
計測に用いているものも、いずれもガラス電極を使用
し、その使用態様にもおのずと制約があった。このた
め、飛躍的にマイクロデバイス化が進む様々な計測手段
とその処理システムとして、このようなガラス電極のp
Hセンサを一体として組込むことは難しく、これまでの
大きな問題の一つとされていた。
への応用が可能と考えられる弾性表面波デバイスについ
て検討を進めてきており、その応用の一つとして導電セ
ンサおよびPHセンサ等の溶液センサが実現されてき
た。しかしながら、これまでの検討では、小型微細な電
子デバイス化までをも可能とする、高精度なバイオセン
サとしての新しい態様についてはその技術は確立されて
いなかった。
ら、弾性表面波デバイスの特徴を生かしつつ、電子デバ
イス化も可能な新しい弾性表面波バイオセンサを提供す
ることを目的としている。
を解決するものとして、たとえば、圧電体等からなるS
Hモード弾性表面波デバイスであって、SH−弾性表面
波の伝搬面上に電気的短絡と電気的開放、および試料セ
ルとを設け、この試料セル内に酵素を固定してなること
を特徴とする弾性表面波溶液センサを提供する。
面波センサとしてその伝搬面を電気的に短絡(Short) に
すると機械的影響のみにより、また電気的に開放(Open)
にすると機械的影響の他に電気的影響によって波が摂動
を受けることが見出されたことから、この後者の知見に
基づいて完成されたものである。つまり、伝搬面が開放
(Open)の場合、固/液界面を伝搬するSH−SAWは負
荷液体により機械的・電気的摂動を受けることになる。
そこで、短絡および開放の伝搬面上に同一液体を負荷す
る場合には、機械的影響は双方で打ち消され、得られる
出力は電気的影響のみを含んでいることになる。このた
め、高精度での計測が可能となる。
上の電気的摂動のみを検知することができるが、各種の
溶液等の液体の電気的特性を表わすパラメータは比誘電
率ε r と導電率σである。そこで、複素誘電率εt を導
入して次のように定義する。
よび減衰の摂動量は次式で与えられる。
(たとえば純水)負荷時の短絡(Short) 、開放(Open)の
速度変化率で、Voは開放(Open)の伝搬速度である。ま
た、
において、(ΔV/V)としての速度変化率は、溶液の
物理化学的特性としての導電率、pH等と相関性を有し
ている。そして、この速度変化から、高精度なpH、導
電性等の物性が検出される。実際に、SH−SAWセン
サを用いてpHの異なる溶液の水に対する測定結果は、
上記(ΔV/V)速度変化率の対数表現として図1の通
りの線形関係として示される。これによって、SH−S
AWセンサがpHを検出可能であることがわかる。同時
に、このことは、pH変化とともなう化学反応の検出に
も、このSH−SAWセンサが有効であることを示して
いる。
を固定化して新しいバイオセンサを実現している。酵素
基質反応時に生じるpH変化によってバイオセンシング
を可能としているのである。しかもこの発明は、SH−
弾性表面波デバイスとして電子デバイス化が可能であ
る。
固定化酵素、その固定化方法、対象とする基質系につい
ては特に限定はなく、各種のものが使用される。以下、
実施例を示し、さらに詳しくこの発明のバイオセンサに
ついて説明する。
え、電気的短絡と電気的開放とを施したデバイスを用い
た。36°回転Y板X伝搬LiTaO3 上を伝搬する弾
性表面波で粒子変位が伝搬方向に垂直で伝搬面に平行な
モード(SHモード)を有している。
ase)を、基質として尿素(urea)を用いた。尿素は酵素に
より分解されるとアンモニウムイオンと重炭酸イオンと
を生成する。酵素を固相化する方法は様々あるが、ここ
ではタンパク質の架橋剤であるグルタルアルデヒド(G
A)を用い、牛血製アルブミン(BSA)と酵素を架橋
させる手法を用いた。
るものとした。 1)基板を洗浄後、1wt%のγアミノプロピルトリエ
トキシシラン水溶液をスピナー塗布(1500rpm,
30秒)し、110℃で5分加熱(シラン処理)、 2)5wt%GA水溶液、20wt%urease水溶液およ
び28wt%BSA/50mM PIPES−NaOH
水溶液を2:3:5で混合してスピナー塗布(2000
rpm,50秒)、 3)2時間室温で乾燥。
い、図3に示した位相差法により測定を行った。発振器
の励振周波数は51.7MHzとした。図2中のaはレ
ファレンスを、また、bはセンシングポートを示してい
る。測定には両性イオン緩衝液であるヘペス水溶液を用
い、NaOH水溶液を加えてpH=7.5に調整した。
このバッファの導電率は0.225S/mである。測定
では、バッファ中に尿素を溶かして基質溶液とした。図
4は、尿素−ウレアーゼ反応の時間応答測定結果を示し
ている。縦軸は速度変化である。測定では、最初にバッ
ファ溶液を200μl滴下(図中1)し、安定した後に
42.4mMの尿素溶液を100μlを加えた(同
2)。この図4より明らかなように、約2分で平衡状態
になることが分かる(同3:尿素−ウレアーゼ反応)。
この場合の尿素濃度は14.1mMである。次に、尿素
溶液の濃度を変え同様の測定を行った。その結果、図5
のように尿素溶液滴下1分後の、尿素溶液濃度に対する
速度変化を示す検量線が得られた。
に用いたurea溶液最低濃度0.27mMの時の速度変化
は−0.758×10-4であった。デバイスの遅延時間
温度係数(TCD)が約1ppm/℃(測定値)である
ことより、1ppmの速度変化が検出限界となる。この
値より3.03×10-3mMの尿素溶液が検出限界と推
定される。実際の人間の血液中には通常3.3〜6.7
mMの尿素が含まれており、腎臓病や心臓病になるとこ
の値が増加する。それゆえ、このSH−SAWバイオセ
ンサは十分検出可能となる。
限定されるものではない。さらに各種の態様が可能であ
り、試料が少量でも有効な電子デバイスとして可能であ
る。
り、弾性表面波デバイスによって、高精度で、小型な、
バイオセンサが実現される。
る。
ある。
である。
答図である。
Claims (1)
- 【請求項1】 SHモード弾性表面波デバイスであっ
て、SH−弾性表面波の伝搬面上に電気的短絡と電気的
開放、および試料セルとを設け、この試料セル内に酵素
を固定してなることを特徴とする弾性表面波バイオセン
サ。
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JP4290560A JP2713534B2 (ja) | 1992-10-28 | 1992-10-28 | 弾性表面波バイオセンサ |
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JP4290560A JP2713534B2 (ja) | 1992-10-28 | 1992-10-28 | 弾性表面波バイオセンサ |
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JP4290560A Expired - Fee Related JP2713534B2 (ja) | 1992-10-28 | 1992-10-28 | 弾性表面波バイオセンサ |
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-
1992
- 1992-10-28 JP JP4290560A patent/JP2713534B2/ja not_active Expired - Fee Related
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Title |
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SENSORS AND ACTUATORS B 20 P.199−203(1994) |
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