JP2599255B2 - ５α−コレスタ−８（１４）−エン−３β−オール−１５−オンおよび他の１５−酸素化ステロールの合成のための改良方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ある種の１５−酸素化
ステロール化合物を製造するための改良方法、並びに該
ステロール化合物を製造する時に形成される中間体およ
び副生成物に関する。前記１５−酸素化ステロール化合
物は、メバロン酸の生合成を阻害するのに有用であり、
メバロン酸の生合成の阻害から誘導される全ての作用を
包含する。メバロン酸の生合成の阻害から誘導される作
用は、結果として動物におけるコレステロールレベルの
低下を伴うステロールの生合成の抑制、並びに微生物お
よび細胞の増殖の阻害を包含する。１５−酸素化ステロ
ールはまた、食欲を抑制するのにも有効であり、この作
用はメバロン酸およびそれから誘導される生成物、特に
コレステロールの生合成におけるそれらの阻害活性に関
連すると思われる。

【０００２】

【従来の技術】多くの場合、ステロールの生合成の抑制
が望まれる。例えば、人間を含む動物においてコレステ
ロールの形成を抑制することがしばしば望まれ、これに
より動物中の血清のコレステロールレベルが低下するで
あろう。血清中のコレステロールの濃度は、多数の病
気、特にアテローム性動脈硬化症と関連がある。アテロ
ーム性動脈硬化症は、動脈系中のプラークの形成により
特徴づけられる状態である。コレステロールおよびコレ
ステロールエステルがこれらプラークの主要成分であ
る。この病気の病因は完全には解明されていないが、上
昇した血清のコレステロールレベルが、アテローム性動
脈硬化症をまねくと思われる。

【０００３】動物中のコレステロールは２つの源から誘
導され、その１つは食事のコレステロールの摂取および
吸収であり、２つめは体の種々の器官、例えば肝臓、腸
および皮膚の細胞によるアセテートからのコレステロー
ルの生合成である。体内でのアセテートからのコレステ
ロールおよび他のステロールの生合成は複雑な反応の連
鎖を含み、その１つは３−ヒドロキシ−３−メチルグル
タリル補酵素Ａのメバロン酸への変換である。この反応
が細胞でのコレステロールの正常な生合成の主な調節点
であると考えられている。もしメバロン酸の生合成が生
体内で阻害され得るならば、ステロールの生産が減少
し、そしてこれにより血清のコレステロールレベルを下
げることができる。

【０００４】英国特許第８６０，３０３号において、あ
る種のアリールオキシカルボン酸エステル、例えば２−
（４′−クロロ−フェノキシ）−イソ酪酸のメチルエス
テルが血清のコレステロールレベルを抑制する利用のた
めに提案されている。この化合物は人間の臨床的処置に
意義深い重要性を得たが、様々な理由で所望するほどに
は効果的でない。従って、血清のコレステロールレベル
を抑制するのにより有効な化合物に大きな関心と重要性
がある。

【０００５】肥満もまた深刻な健康問題である。体重過
剰と多くの病気、特に心血管の病気との間の相関性はよ
く知られている。多くの人々は、心理的または他の理由
で、体重のコントロールまたは体重低下のダイエットを
実行することが困難であるかまたは不可能である。この
ため、食欲を安全に且つ効果的に抑制する方法が非常に
必要とされる。

【０００６】米国特許第４，２０２，８９１号（この特
許は本明細書中に組み込まれる）から、ある種の１５−
酸素化ステロール類がメバロン酸およびステロールの生
合成を抑制するのに有効であることが知られている。動
物中でコレステロールの形成を抑制することを包含す
る、多数の望ましい作用がメバロン酸の生合成の阻害か
ら誘導され得、これにより血清のコレステロールレベル
が低下され得るだろう。

【０００７】加えて、高等生物およびある種の微生物、
例えば酵母および真菌の細胞の成長および増殖はステロ
ールの形成を含む。従って、メバロン酸の生合成の阻
害、およびそれによるステロール形成の減少は、正常の
ものと腫瘍のものと両方の細胞の成長を阻害するのに有
効である。さらにステロールの生合成の阻害は、ある種
の微生物の増殖を阻害し、それにより真菌および酵母感
染と戦う作用を有する。

【０００８】ステロール生合成における役割に加えて、
メバロン酸は細胞の多数の他の重要な構成要素の前駆体
である。故に、バクテリアは一般にステロールを含有ま
たは要求しないと思われるが、それらの成長および増殖
はメバロン酸およびそれから誘導される生成物の合成を
必要とする。従って、メバロン酸の生合成の阻害がバク
テリアの増殖を阻害するであろう。

【０００９】さらに１５−酸素化ステロール類およびそ
れらの誘導体が肥満を抑制するのに有効である。１５−
酸素化ステロールが肥満を抑制するのに働く機構は知ら
れていないが、この作用は１５−酸素化ステロールのメ
バロン酸またはステロール生合成阻害活性に何らかの関
連性があると思われる。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】米国特許第４，２０
２，８９１号の１５−酸素化ステロールは、高度な活性
を表わす望ましい化合物と示されている。しかしなが
ら、１５−酸素化ステロールを製造するための今までに
既知の方法は費用と時間がかかるものであった。しばし
ば、ごく少ない収量の所望の生成物しか得られなかった
り、または種々の理由、例えば高価なクロマトグラフィ
ーの必要性のために大スケールでこの方法を行なうこと
が困難であったりした。加えて、７−デヒドロコレステ
ロールからの１５−酸素化ステロールの製造における重
要な中間体である、３β−ベンゾイルオキシ−５−コレ
スタ−７，１４−ジエンの製造のための既知の方法は、
非常に可変的であるために不十分であった。時折、所望
の生成物を適度な純度で適度な収率で得たけれども、し
ばしば所望したよりも収率および純度が低く、そして未
知の副生成物が観察された。

【００１１】

【課題を解決するための手段】本発明は、大スケールに
おいて、一貫して高収率で高品質の１５−酸素化ステロ
ールを製造する方法を提供する。そのような方法は、も
ちろん、相当する有効性および効率を提供する。本発明
によれば、デヒドロコレステロールからの１５−酸素化
ステロールの合成のために、新しい４段階法が提供され
る。この方法は、７−デヒドロコレステロールの３β−
ベンゾイルオキシコレスタ−５，７−ジエンへの変換
（段階１）、３β−ベンゾイルオキシコレスタ−５，７
−ジエンの３β−ベンゾイルオキシ−５（αまたはβ）
−コレスタ−７，１４−ジエンへの変換（段階２）、３
β−ベンゾイルオキシ−５（αまたはβ）−コレスタ−
７，１４−ジエンの３β−ベンゾイルオキシ−１４α，
１５α−エポキシ−５（αまたはβ）−コレスタ−７−
エンへの変換（段階３）、そして最後に、３β−ベンゾ
イルオキシ−１４α，１５α−エポキシ−５（αまたは
β）−コレスタ−７−エンの１５−酸素化ステロールへ
の変換（段階４）を包含する。

【００１２】より詳しくは、本発明は、３β−ベンゾイ
ルオキシ−コレスタ−５，７−ジエンを３β−ベンゾイ
ルオキシ−５（αまたはβ）−コレスタ−７，１４−ジ
エンへ変換する（段階２）非常に望ましい方法を提供
し、この方法は（ｉ）高くとも約−５５℃の温度の溶媒
中、３β−ベンゾイルオキシ−コレスタ−５，７−ジエ
ンを３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１４
−ジエンに変換するのに十分な時間の間、３β−ベンゾ
イルオキシコレスタ−５，７−ジエンを前記溶媒中少な
くとも約２．０Ｍの濃度のＨＣｌと接触せしめることに
より第一反応混合物を形成せしめ；（ii）有意な量の３
β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−８，１４−ジエ
ンの形成を防ぐために、前記反応混合物を塩基で中和
し；そして（iii)３β−ベンゾイルオキシ−５−コレス
タ−７，１４−ジエンを回収する、ことを含んで成る。

【００１３】本明細書中で検討する化合物は、それぞれ
参照番号を当てられており、その参照番号は図１および
図３中の対応する構造式と互いに関係がある。本発明
は、７−デヒドロコレステロール（２）から３β−ヒド
ロキシ−５α−コレスタ−８（１４）−エン−１５−オ
ン（１ａ）のような１５−酸素化化合物を調製するため
の改良された合成方法に関する。そのような方法は、一
般にＰａｒｉｓｈら、Chemistry and Physics of Lipid
s,18, 233-239,1977; Ｓｃｈｒｏｅｐｆｅｒら、Journa
l of Biological Chemistry, 252, 8975-8980, 1977 に
おいて開示されている。しかしながら、本発明の改良方
法は、大スケールでの利用により適し、そして高収率の
比較的純粋な生成物を一貫して製造することのできるも
のである。本発明の方法の開発は、特に、種々の段階に
おける中間体および副生成物の単離および同定並びにそ
れら包含物の評価を包含している。

【００１４】本発明は、広い態様として、７−デヒドロ
コレステロール（２）から３β−ベンゾイルオキシコレ
スタ−５，７−ジエン（３）への変換、３β−ベンゾイ
ルオキシコレスタ−５，７−ジエンの３β−ベンゾイル
オキシ−５−コレスタ−７，１４−ジエン（４）への変
換、３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１４
−ジエンの３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−
エポキシ−５−コレスタ−７−エン（５）への変換、そ
して最後に前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５
α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンの１５−酸素化
ステロール、好ましくは３β−ヒドロキシ−５α−コレ
スタ−８（１４）−エン−１５−オン（１ａ）への変換
を包含する。

【００１５】本発明の好ましい態様によれば、（ｉ）３
β−ベンゾイルオキシコレスタ−５，７−ジエンを３β
−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１４−ジエン
に変換せしめるのに十分な時間の間、高くとも約−５５
℃の温度の溶媒中で、３β−ベンゾイルオキシコレスタ
−５，７−ジエンを少なくとも約２．０ＭのＨＣｌと接
触せしめ；（ii）有意な量の３β−ベンゾイルオキシ−
５−コレスタ−８，１４−ジエン（９ａおよび９ｂ）の
形成を防ぐために、生じた反応混合物を塩基で中和し；
そして（iii)３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−
７，１４−ジエンを回収する；ことを含んで成る方法に
より、３β−ベンゾイルオキシコレスタ−５，７−ジエ
ンを３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１４
−ジエンに変換する。

【００１６】ベンゾエートの調製（段階１）。７−デヒ
ドロコレステロール（２）のΔ^5,7ベンゾエート（３）
への変換は、既知の方法、例えば（２）を塩化ベンゾイ
ルと反応させることにより達成され得る。その反応体を
溶媒、例えばピリジン中で還流し、そして反応混合物を
冷却後、濾過により生成物を回収することができる。洗
浄（例えば、水および希炭酸塩で）および再結晶（例え
ば、熱ＣＨＣｌ₃ 中で）により、高収率において高純度
生成物を得ることができる。

【００１７】ジエンの異性化（段階２）。前記Δ^5,7 ジ
エン（３）を５α−Δ^7,14異性体（４ａ）に変換するた
めの従来技術は非常に可変的な結果を生むことがわかっ
た。収率は３０％（またはそれより少ない）から７０％
まで変化した。さらに、一定の反応条件を維持するため
の試みにもかかわらず、所望の生成物４ａはしばしば様
々な量の幾つかの異なる化合物で汚染された。生成物の
組成に関してかなりの複雑性が、最初の再結晶からの生
成物の二次収穫物を得るための試み中に観察された。反
応温度、出発物質および溶媒の純度、反応の時間、並び
に反応のクエンチング温度といったファクターの適度な
変化が、生成物の組成に識別可能な効果を全く又はほと
んど与えなかった。

【００１８】反応における主要な中間体および副生成物
の単離および同定は、最適な反応条件を見出すための試
みの中で行われた。低温にて前記Δ^5,7 ジエンをＨＣｌ
と接触させることによる５α−Δ^7,14異性体を調製する
時に、理論上の中間体は少量の種８ａおよび９ａととも
に３β−ベンゾイルオキシ−６α−クロロ−５α−コレ
スタ−７−エン（７）であることがわかった。理論上の
副生成物は５β−Δ^{8, 14}異性体９ｂであることがわかっ
た。３β−ベンゾイルオキシ−５β−コレスタ−７，１
４−ジエン異性体４ｂも少量の副生成物として単離され
た。これらの構造は当業者にとってよく知られている常
用の分析方法、例えばＮＭＲおよびＸ−線結晶学により
決定された。

【００１９】ステロールのジエン異性化におけるクロロ
中間体はD.H.R.Barton, Journal Chemical Society, 51
2-522(1946) により４０年以上も前に提唱されたけれど
も、そのような中間体は未だ単離または同定されていな
い。さらに、５β−異性体はステロールのジエン異性化
において以前に報告されている〔例えば、D.H.R.Barto
n, Journal Chemical Society, 1116-1123(1946) を参
照のこと〕一方、Δ^5,7系へのＨＣｌの低温添加による
５β−ジエンの生成は未だ報告されていない。

【００２０】図１中に記載されたジエンの異性化につい
て提唱される経路（３→４）は、理論上の中間体および
副生成物を指示しながら図２に示される。５β−ジエン
の異性化は５α−ジエンについてのものと同様な経路に
従うと思われる。しかしながら、下記に論じられるよう
に、その反応速度は５α系と５β系では異なるようであ
り、そして７に相当するクロロ中間体が５β−ステロー
ル経路では認められなかった。全体の反応生成物の分析
は、Δ^5,7 ジエン系の最初のプロトン化の約２０％が５
β−ステロールを与えるように起こることを示した。５
β−ジエンは異性化反応において嵩のある不純物を構成
するので、所望の生成物４ａの収率をさらに増加させる
ためのあらゆる試みは、該ステロールのα表面へのＨＣ
ｌの最初の付加により有利であるような条件の変更を常
に必要としている。

【００２１】５α−ステロールを製造するためには、理
論上の副生成物４ｂを減少せしめることが有利である。
しかしながら、１５−酸素化５β−ステロールもステロ
ール生合成の有力なインヒビターである。従って、重要
な中間体４ａと副生成物４ｂの両者の製造が有利であ
る。故に、両者は本発明の範囲内にある。さらに、検討
は５α−ステロールの製造に焦中するが、副生成物４ｂ
からの５β−ステロールの製造方法は４ａからの５α−
ステロールの製造方法と同じであることは明らかであろ
う。従って、５α−ステロールに関して本明細書中に開
示される方法は、同様に５β−ステロールにも適用さ
れ、そして４ａまたは４ｂ中間体のどちらの使用も本発
明の範囲内にある。

【００２２】ジエン異性化における様々な種は常法、例
えば ¹Ｈ−および¹³Ｃ−ＮＭＲ，ＴＬＣ並びにＨＰＬＣ
により一度同定され特徴づけられれば、反応の経路は反
応液のアリコートを定期的に分析することによりたどる
ことができる。この分析の結果は、Δ^5,7 異性体が非常
に速く反応して７を形成することを示す。Δ^5,7 系への
ＨＣｌのこの１，２−付加はBarton, J.Chem.Soc. 194
6, 512-522 により提唱された１，４−付加およひ優先
されるΔ⁵ ステロイドへのＨＣｌのマルコニコフ付加と
は対照的である。例えば、Barton, Experientia.Suppl.
II , 1955, 121-136 を参照のこと。この遅い反応の段
階は、７の脱ハロゲン化水素であると思われ、これはシ
ュード−エカトリアル塩素を生成する。低温では、この
脱離はかなり高濃度のＨＣｌを必要することがわかり、
このことは７のシュード−アキシャル６β−エピマーの
介在を示唆する。低いレベルの５α−Δ^6,8(14) 異性体
が反応が進行するにつれて観察され、このことは５α−
Δ^7,14ジエン４ａへの８ａの変換が７の脱ハロゲン化水
素よりもかなり速いことを示唆する。５α−Δ^8,14異性
体９ａへの４ａの異性化は、７の脱ハロゲン化水素より
も幾らか遅いと思われる。何故なら、７は完全に反応し
たが少量の９ａ異性体だけが形成した適当な時にその反
応をクエンチングできることが発見されたからである。

【００２３】これらの知見に基づき、該異性化反応にお
いて良好な収率および高い生成物純度を一貫して得るた
めの方法、即ち４ａの調製方法を開発した。一般に、そ
の反応は低温（約−５５℃よりも低く、そして好ましく
は−６５℃〜−７５℃）で行った。低い温度は溶媒中の
ＨＣｌの溶解度を高めそして５α−Δ^8,14異性体９ａの
形成を遅くするため、反応の最適なクエンチングの時間
が短かすぎない。ＣＨＣｌ₃ 溶媒へのＣＨ₂ Ｃｌ₂ の添
加によって、Δ^5,7 異性体３の溶解度に不利に影響する
ことなく、凝固点を低くすることが可能である。重量比
で約３：１のＣＨＣｌ₃ とＣＨ₂ Ｃｌ₂ との溶媒混合物
が満足であることが示され、もちろん、低い凝固点並び
にＨＣｌおよびΔ^5,7 異性体に対して良好な溶解度を有
する他の溶媒または溶媒混合物を使用してもよい。

【００２４】出発物質が低温において晶出する傾向を阻
止するために、好ましくは約２．０−２．５Ｍの濃度が
得られるまでＨＣｌガスを迅速に導入する。ＨＣｌの流
れを止めた後に、７の４ａへの変換が可能になり−５５
℃以下、好ましくは−６５℃〜−７０℃において進行す
る。その反応を定期的に反応混合物のアリコートについ
てクロマトグラフィー（例えばＴＬＣ）によってモニタ
ーして最適なクエンチング時間を決定することができ
る。

【００２５】Δ^5,7 ジエン（３）がΔ^7,14中間体（４
ａ）に異性化した後、ただし幾らか有意な量のΔ^8,14副
生成物（９ａ）の生成前に、その反応液をＮＨ₄ ＯＨの
ような塩基でクエンチング（中和）する。クエンチング
および生成物の抽出に続いて、ピリジンのようなさらな
る塩基をＣＨＣｌ₃ 溶液に添加して７の脱ハロゲン化水
素から遊離される追加のＨＣｌを中和し、こうして５α
−Δ^8,14異性体９ａへの５α−Δ^7,14異性体４ａのＨＣ
ｌ−触媒される異性化を防ぐことができる。

【００２６】ＣＨＣｌ₃ 抽出液の部分的蒸発に続くアセ
トンのような極性溶媒の添加は、約９０％の４ａ並びに
約１０％の９ａおよび９ｂ（合わせて）から成る沈澱物
を生ぜしめる。この方法を使うと、１２回の逐次的な反
応（７００−１０００ｇのスケール）が８３−９１％
（平均８８％）の純度の４ａの７７−８４％（平均８２
％）の収率を与えた。

【００２７】５α−異性体と一緒に製造される５β−異
性体は、ＣＨＣｌ₃ −アセトン（１：２）からの再結晶
により５α−異性体から容易に分離され得るが、５α−
異性体間、特に５α−Δ^7,14と５α−Δ^8,14の異性体
（４ａおよび９ａ）とは、分取スケールで再結晶または
クロマトグラフィーにより容易に分割されない。¹³Ｃ−
ＮＭＲは、全て既知成分が分解することなく解析できる
ので、ＨＣｌでのΔ^5,7 ジエン３の処理から導かれる反
応混合物の組成分析に最も有用なアプローチを提供す
る。ほとんどのジエン種は ¹Ｈ−ＮＭＲ、キャピラリー
ＧＣおよび逆相ＨＰＬＣにより解析できた；しかし、ク
ロロ中間体７はクロマトグラフィーにおいて不安定であ
った。ジエンのあらゆるペアの混合物（７を包含する）
の組成分析は、３α−Ｈ、ビニルまたはメチルのいずれ
かの ¹Ｈ−ＮＭＲ共鳴の考察により ¹Ｈ−ＮＭＲによっ
て行うことができたが、より複雑な混合物ではそれらの
ピークの重なりが定量を妨害した。ステロールベンゾエ
ートの分解がキャピラーＧＣによる定量にとって主要な
妨害であった。この問題は非常にきれいなカラムを使う
ことにより解決できる。しかしながら、これらの条件下
でさえも、５α−Δ^7,14と５α−Δ^8,14のピーク（４ａ
と９ａに相当）はほとんど分離しない。逆相ＨＰＬＣは
４ａおよび９ａを除く全てのジエンのかなり良好な分離
を与えた。ステロールベンゾエートの順相ＨＰＬＣは、
過剰なピークテーリングのために不満足である。

【００２８】５β−ジエンの単離は低温でのΔ^5,7 ジエ
ンの異性化について未だ報告されていない。５β−Δ
^6,8(14) アセテートの異性化から、Ｗｉｎｄａｕｓら、
JustusLiebigs Ann.Chemistry, 536 , 204-216(1938)
が新しいジエンを単離し、これは後にD.H.R.Barton, Jo
urnal Chemical Society, 1946, 1116-1123 により５β
−Δ^8,14ジエンアセテート９ｆとして同定された。５β
−Δ^8,14種９ｂのけん化およびアセチル化は、融点、Ｕ
Ｖスペクトルおよび旋光度がＷｉｎｄａｕｓのジエンと
事実上全く等しいジエンアセテート９ｆを与えた。

【００２９】５β−ジエンのより最近の例は、５β−Δ
^6,8(14) ジエンのエルゴステロール類の単離に関する報
告であり、これは水性ＨＣｌ／エタノールを用いた還流
下で他のジエンへの酸異性化に対し意外にも耐性であっ
た。J.Andrieux, D.H.R.Barton, H.Patin, Journal of
the Chemical Society , Perkin Transactions 1, 359
-363(1977)を参照のこと。驚くべきことに、エルゴステ
ロールをフィーザーの条件〔Ｆｉｅｓｅｒら、Journal
American Chemical Society , 74, 5397-5403(1952) を
参照のこと〕にさらした時に、５β−Δ^8,14種が全く観
察されなかった。

【００３０】ＣＨＣｌ₃ 中でジエン３の異性化の主な副
生成物は９ｂであるが、ＣＨ₂ Ｃｌ ₂ 中でのこの反応の
主な副生成物は５β−Δ^7,14種４ｂであった。明らかに
４ｂはＣＨＣｌ₃ ／ＣＨ₂ Ｃｌ₂ （４：１）中よりもＣ
Ｈ₂ Ｃｌ₂ 中でより遅く５β−Δ^8,14種に変換された。
ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中でのこの反応の主な副生成物は３β−ベ
ンゾイルオキシ−５α−コレスタ−８（１４）−エン−
７α−オール（１０ａ）であることがわかった。１０ａ
の構造は、既知のジオール１０ｂへの加水分解により立
証された。化合物１０ａは、おそらく５α−Δ^6,8(14)
または５α−Δ ^7,14種のどちらか（８ａまたは４ａ）の
プロトン化または水の付加により形成されるカチオン性
中間体またはクロロ中間体からの作成の間に生じた。

【００３１】クロロ中間体７の５β−エピマーは全く検
出されなかった。もしシン方式においてＨＣｌの１，２
−付加が起こったならば、生じる６β−クロロ置換体は
シュード−アキシャルであって、そして５β−Δ
^6,8(14) 種８ｂへの脱離を促進することのできる７では
なかったろう。ジエン８ｂは中間体であると思われ、不
純な形で単離される。

【００３２】酢酸エチルまたはベンゼン中の希（１％）
溶液において、７は１２日間の間安定であることが証明
された。メタノールもしくはエタノールまたは濃ＣＨＣ
ｌ₃溶液においては、７はジエン３，８ａおよびおそら
く３β−ベンゾイルオキシ−５α−コレスタ−６，８−
ジエン（１１）で表わされる成分の混合物に５時間以内
に分解した。ＣＨＣｌ₃ 中または１０％トリエチルアミ
ンまたはピリジンを含むＣＨＣｌ₃ 中の７の２％溶液に
ついて、３時間後にわずかな脱ハロゲン化水素が観察さ
れた。キャピラリーチューブ中でのゆっくりした加熱
（１０分）を行うと、７は１３５℃くらい低温で融解し
た。融点測定のための通常の加熱速度では、７は１５４
−１５５℃で融解した。これらを合わせた観察は、ＨＣ
ｌが７の分解を促進し；次いで遊離されたＨＣｌがさら
にその分解を加速させることを示唆している。アルコー
ル中での７の迅速を分解は、アルコールによる求核的置
換によるＨＣｌの触媒的脱離から生ずる。

【００３３】ケトン１へのエポキシ化および加水分解
（段階３および４）。Δ^7,14ジエン４ａは、Ｐａｒｉｓ
ｈら、Chem.Phys.Lipids, 18, 233-239(1977) により示
された既知の改良法、即ちｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣ
ＰＢＡ）での４ａの処理に従って５ａにエポキシ化され
得る。この既知の方法は、エーテル中での４ａの限られ
た溶解度のために簡単にはスケールアップすることがで
きなかった。

【００３４】この既知のエポキシ化法は、反応混合物中
に固体のＮａＨＣＯ₃ を添加して３−クロロ安息香酸
（ｍ−クロロ過安息香酸中の不純物としておよびエポキ
シ化反応の生成物としての両方で存在する）を中和し、
そしてエポキシ化生成物の酸触媒−分解を防ぐことによ
り改善され得る。加えて、出発物質の沈澱形成を防ぐた
めに、Ｐａｒｉｓｈ（前掲）により示されたものよりも
高い温度で反応混合物にＭＣＰＢＡを添加するのが望ま
しいことがわかった。

【００３５】１６４のエポキシ化反応を１４０ｇスケー
ルで行い、５７−６８％（平均６３％）の収率が得ら
れ、または出発のジエン４ａについて８８％の純度と仮
定すると６５−８１％（平均７２％）の収率が得られ
た。このエポキシド５の純度は融点（ｍｐ）により判定
した。というのは、 ¹Ｈ−ＮＭＲ，ＴＬＣおよびＨＰＬ
Ｃのような方法では、２１１℃の標準ｍｐより１２℃下
で融解する５の試料について全く不純物を示さなかった
からである。５の低−融点試料は、次なる１への変換に
おいて有意に低い収率（６５％に対して５０％）を与え
た。

【００３６】エポキシド５は、５ｇスケールでちょうど
５分で６に加水分解され得、８２％の収率を与えた。し
かしながら、２００ｇスケールでは中間体６の精製が多
くの時間および溶媒の量を消耗し、そして典型的な収率
はわずか約５０％であった。６を１に変換する現存の方
法をスケールアップすることも、加水分解溶媒中への６
の限られた溶解度により妨げられる；５ｌのフラスコを
使った時、この反応は３０−４０ｇスケールでしか実施
できなかった。

【００３７】既知の方法によれば、中間体６はその後１
に加水分解される。しかしながら、２つの段階のための
試薬は有機溶媒中の無機酸であり（初めの段階ではより
穏和な条件を用いる）、そしてその２つの段階が組み合
わされ得ることがわかった。特に、６を１に変換する条
件が５を１に変換するのにも十分であることがわかっ
た。５ｌのフラスコ中で１２０ｇスケールの反応を行う
ために、反応を大量の溶解されていない５を使って開始
し、これは反応が進行するにつれて溶液となった。２段
階反応では、第１段階は一般的に６よりも極性の低い副
生成物を与え、そして第２段階は１よりも極性の大きい
副生成物を与えた。ワンポット反応では、１は極性の大
きい副生成物からも小さい副生成物からも分離されなけ
ればならなかった。この分離は、ヘキサン／メタノール
／水からの二相の再結晶を使うことにより達せられた：
極性の不純物はメタノール／水の相に残り、非極性の不
純物はヘキサン相に残り、そしてどちらの相にも難溶で
ある１は、長い大きな針状晶において界面のところに晶
出した。

【００３８】２回のこのような再結晶の後、１の試料は
１％未満の非極性不純物および約５％の極性不純物を含
有した。比較的非極性の溶媒（ＣＨ₂ Ｃｌ₂ またはＣＨ
Ｃｌ ₃ ）を使ったシリカゲルを通す濾過が、９９％より
高い純度の１を与えた。本発明の方法を使って、１２０
−１４０スケールでの５の１０１回の加水分解が、５８
−７１％（平均６５％）の収率で９９％より高い純度の
１を与えた。ワンポットでの５から１への変換の主要な
副生成物は、ベンゾエートエステル６および芳香族環Ｃ
のステロール１２であった。１２のＣ−１７の位置の立
体配置は、１２およびそれのＣ−１７でのエピマーにつ
いて報告されたものとのＮＭＲ化学シフト（１７−Ｈお
よび２１−Ｈ₃ ）の比較により、１７α（Ｈ）であると
確定された。３つの少量の副生成物も単離され、１およ
び６の９α−ヒドロキシ誘導体（１３ａおよび１３ｂ）
並びにケト−ジオールであった。

【００３９】１および６を、５を１に変換する加水分解
条件にかけた時、回収された１は幾つかの不純物を含む
ことがわかった。この反応をアルゴン下で行うと、空気
中での反応と比べていくらか不純物の量が減少した。こ
れらの不純物の中に１２が無いことは、１も６も１２の
形成における中間体ではないことを示す。α，β−不飽
和ステロールエポキシドからの１２の形成は、既に研究
されており、そして７，９（１１），１４−トリエン中
間体を含むらしい。

【００４０】要約すれば、過度に短い時間に大スケール
で反応を行うことができるように、７−デヒドロコレス
テロール２からのケトン１の合成について意味深い改良
法を記載してきた。この合成は４段階に短縮され、この
ため各段階の平均収率は９７％、８２％（純度８８
％）、６３％および６５％であった。７−デヒドロコレ
ステロールの１への変換の平均の全収率は３３％であっ
た。各段階で最高の収率は９７％、８４％、６８％およ
び７１％であり、最高の全収率３９％を与え、これは１
の合成について報告されたものよりも少なくとも４０％
高い。本発明は、１の合成だけでなく多数の他の１５−
酸素化ステロールの合成における重要な中間体であるエ
ポキシド５の非常に改良された大スケールの合成のため
の方法も提供する。

【００４１】この合成スキームの各段階での条件を最適
化する過程で、これらの反応の主な副生成物を単離しそ
して同定した。加えて、ジエンの異性化反応において新
しい中間体および副生成物を発見し、この反応のメカニ
ズムおよび利用に関して重要なかかわり合いを有するこ
とを見出した。例えば、低温でのジエンの異性化に高い
ＨＣｌ濃度が要求される故は、３から４ａへの変換の中
で遅い段階である、クロロ中間体７の脱ハロゲン化水素
を促進するためである。さらに、本明細書中で開示され
た条件下では、５α−Δ^7,14ジエン４ａは、ごく少量の
５α−Δ^8,14異性体９ａだけを伴って得ることができ
る；観察される５−１５％のΔ^8,14混入物は主として５
β−Δ^8,14異性体９ｂであり、これは再結晶により除去
され得る。

【００４２】

【実施例】次の例において、本発明はより詳細に記載さ
れるだろう。下記の例は例示を目的としたものであり、
決して本発明の精神および範囲を限定する意図のもので
はない。例 １ ３β−ベンゾイルオキシコレスタ−５，７−ジエン
（３）。

【００４３】５ｌの丸底フラスコに、１０００．０ｇ
（２．６０モル）の７−デヒドロコレステロール（Ｃｈ
ｅｍｉｃａｌ Ｄｙｎａｍｉｃｓ、３．３％メタノール
含有）、２．４ｌの乾燥ピリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｇ
ｏｌｄ Ｌａｂｅｌ、０．０５％水）、および５００ml
（４．７４モル）の塩化ベンゾイル（Ａｌｄｒｉｃｈ、
９９％）を入れる。この内容物を簡単に混合し、迅速に
（１５min ）加熱して沸騰させ、そして５分間還流させ
る。少量（約２００ml）の下層の塩化ピリジンに（ ¹Ｈ
−および¹³Ｃ−ＮＭＲによる組成分析）が通常生成し、
そして反応混合物を冷却すると凝固する。空気中で３０
分冷却後、暗色の反応混合物を氷上に注ぎ、撹拌し、そ
して２０℃で１−２時間放置しておく。形成する沈澱物
を吸引濾過により集める。その濾過ケークを７ｌの水、
４ｌの希炭酸ナトリウム、７ｌの水、および５００mlの
アセトンで４回十分に洗浄する。その濾過ケークを微粉
砕し、そして空気中で一晩乾燥させておく。粗生成物
（収率９７−１０５％）は、ＴＬＣ（シリカゲルをトル
エン／ヘキサン１：１で溶出、Ｒ_f ０．５８）により単
一スポットを示し、そして１４０−１４４℃で融解し１
９１℃で透明になった。微量（１モル％未満）の安息香
酸メチルを除いて ¹Ｈ−および¹³Ｃ−ＮＭＲにより純粋
であるように思われる。幾つかの試料の過剰な質量（８
％まで）は明らかに水である。

【００４４】この粗生成物は、次のジエン異性化に満足
できる結果を与えるが、この物質は通常、２ｌの熱ＣＨ
Ｃｌ₃ 中にそれを溶解せしめ（形成する少量の水相は無
視する）そして５ｌのアセトンの添加によって該ステロ
ールを沈澱せしめることにより再結晶される。冷却およ
びそれに続く−２０℃での一晩の保存の後、結晶を濾過
し、３００mlの冷アセトンで２回洗い、そして一定の質
量まで乾燥する。白色結晶の収量は１１９３ｇ（収率９
７％）であった。この操作で、 ¹Ｈ−または¹³Ｃ−ＮＭ
Ｒにより１％レベルで不純物が全く検出されず、そして
ＴＬＣでＲ_f ０．５８（溶媒、トルエン／ヘキサン１：
１）に単一スポットが観察された。

【００４５】熱アセトン／ＣＨＣｌ₃ からのこの物質
５．００ｇの２回の再結晶は、分析試料（２．７ｇの無
色針状晶）を与えた。標準的な分析方法により得られた
値は、以前に報告された値とよく一致する。７００ｇス
ケールで行った４回の逐次反応は、８３６，８３８，８
３６および８２７ｇの収量（平均８３４ｇ；収率９７
％、出発の７−デヒドロコレステロール中の３．３％メ
タノールを基にして）および実質上等しい物理定数を伴
う結果を与えた。

【００４６】この反応について達成されたステロール物
質の均衡はアセトン洗浄液がピリジンおよび安息香酸メ
チルだけを含有しそして再結晶からの濾液がステロール
の混合物（全ステロール質量の１．９％）を含有するこ
とを示した。例 ２ ３β−ベンゾイルオキシ−５α−コレスタ−７，１４−
ジエン（４α）、大スケールでの調製。

【００４７】ＣＨＣｌ₃ （３０００ml）およびＣＨ₂ Ｃ
ｌ₂ （８００ml）の混合物中１０００ｇの３の溶液を、
温度計、ガス分散用チューブ、流出口および機械的撹拌
機を備えた５ｌの丸底フラスコ中で調製する。このフラ
スコを素早く−５５℃に冷却し、そして部分的に晶出し
ている反応混合物にＧｉｌｍｏｎｔのサイズ２の流量計
（Gilmont Instruments, Great Neck, NY)で５０の流速
においてＨＣｌガスをバブリングさせる。その反応混合
物をできるだけ迅速に−６５°〜−７０℃に次の３０−
６０分に渡ってさらに冷却し、そしてＨＣｌ流を前記流
量計で１００の流速まで増加させる。ＨＣｌ濃度が２．
０−２．５Ｍに達するまで（標準塩基で反応液のアリコ
ートを滴定して測定する）、この流速と温度条件を維持
する。次いでＨＣｌ流を止め、そして反応を１５−３０
分ごとにＴＬＣでモニターする（中和し洗浄した反応混
合物のアリコートをシリカゲルにスポットしそしてトル
エン／ヘキサン１：１で展開する）。Ｒ_f ０．５０，
０．５５および０．６０の３つの重なったスポットの代
わりにＲ_f ０．５５に単一のスポットが観察された時、
反応が完全であるとみなす。次にＨＣｌの大部分を、水
流アスピレーターを使って水酸化ナトリウムのトラップ
を通してＨＣｌ蒸気を引くことにより、次の４０−６０
分間で真空蒸発させる。

【００４８】冷却した暗色の反応混合物の６００ml部分
を、５００ｇの氷および１５０mlの濃縮ＮＨ₄ ＯＨを含
む２ｌのアーレンマイヤーフラスコの中に注ぎ入れるこ
とにより中和する。中和された混合物を６ｌの分液漏斗
中に一緒にし、水相を捨て、有機相を２．５ｌの水で洗
浄し、そしてすぐに下の相を１２０mlのピリジン中に流
し出す。濁った有機相は数分後に透明になり、そしてこ
の溶液をロータリーエバポレーターの連続供給チューブ
の中に流し込み、典型的に少量の水相を残す。（しばし
ば濁った）溶液は、約５ｌから３ｌに濃縮され、そして
これを２つの部分に分ける。次いでアセトン（全量３．
０ｌ）を撹拌しながら添加す。数分間結晶化を進行させ
ておき、さらに３ｌのアセトンを添加し、そしてその混
合物を４℃で一晩保存する。吸引濾過により結晶を集
め、１００mlのアセトンで２回洗い、押しつぶして乾燥
させ、微粉砕し、そして一定の質量まで乾燥させる。

【００４９】８３−８８％の純度でΔ^7,14ジエン４ａを
含む白色粉末（８１５−８４１ｇ）が得られた。不純物
はステロールベンゾエート（理論上９ａおよび９ｂ）の
混合物である。前者（後者は不可）の不純物は前述のよ
うにアセトン／ＣＨＣｌ₃ （２：１）からの再結晶によ
り除去され得る。上記に示された収率および純度は、６
回の１０００ｇスケールの反応に基づく。最良の反応は
８８％の純度で分析された物質８３６ｇ（粗収率８４
％）を与えた。（濾過の濃縮から得られた二次収穫物は
１：４の比で４ａおよび４ｂから成る。） この８８％純度の生成物を ¹Ｈ−ＮＭＲ（δ５．７６お
よびδ５．５２でのΔ ^7,14ビニルピークの強度をδ５．
４での５α−Δ^8,14／５β−Δ^8,14ピークの高さと比
較）、ＨＰＬＣ（４ａ／９ａのピークの強度を９ｂのピ
ークのものと比較）、キャピラリーＧＣ（一部分離した
４ａ／９ａのピークの強度を９ｂのピークのものと比
較）、ＴＬＣ（トルエン／ヘキサン１：１で展開したシ
リカゲル上でＲ_f ＝０．５３に単一スポット、およびト
ルエンヘキサン１：１で展開したＡｇＮＯ₃ でコーティ
ングされたシリカゲル上でＲ_f ＝０．３５に単一スポッ
ト）、およびｍｐ（１５１−１５３℃；９８％純度の４
ａは１５４．４−１５６℃で融解する、下記参照）によ
り分析した。

【００５０】例 ３ ３β−ベンゾイルオキシ−５α−コレスタ−７，１４−
ジエン（４ａ）、分析試料。 前述の方法を使って４５０ｇスケールでジエンの異性化
を行った。白色固体の２６９ｇ（収率６０％）の一次収
穫物（ ¹Ｈ−ＮＭＲにより９４％の４ａと分析され、主
に９ｂで汚染されていた）を、１mlのピリジンを含む熱
ＣＨＣｌ₃ ７００ml中に溶解しそして１．０ｌの熱アセ
トンを加えて再結晶した。生成物を２４時間後に回収す
ると、純度９５％（ ¹Ｈ−ＮＭＲ）の４ａの無色結晶２
２０ｇを与えた。２回のさらなる再結晶は１８１ｇ（９
８％純度）および１２７．８ｇ（９８％純度）を与え
た。構造と純度は標準的な分析方法により確認された。
ＨＰＬＣ分析によっては全く不純物が検出できなかった
ので、 ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルで観察された２％のΔ
^8,14不純物は９ａであると判断された。反応が進行する時のジエン中間体の濃度。

【００５１】１２０mlのＣＨＣｌ₃ ／ＣＨ₂ Ｃｌ
₂ （４：１）中２０ｇの４ａを使うことを除いて前記と
同じようにジエンの異性化を行った。反応液を−５５℃
に冷却し、ＣＨＣｌ₃ 中のＨＣｌ飽和溶液（３０ml、−
５５℃）を添加し、そして反応混合物にＨＣｌを２０分
間バブリングしておいた。次いでＨＣｌを止め、そして
反応液を−６５℃に維持した。様々な時間（２，６，１
７，２６，５５，７５，１１５，１６０，２２０および
３００分）で約１０mlのアリコートを反応液から取り出
し、そして冷却した濃ＮＨ₄ ＯＨに注いだ。生じた有機
相を水で洗浄し、オイルまたは固体まで回転蒸発させ、
そして ¹Ｈ−および¹³Ｃ−ＮＭＲ分析の直前にＣＤＣｌ
₃ （重水素化クロロホルム、Ｃ² ＨＣｌ₃ ）に溶解し
た。ＮＭＲ分析の結果を第１表に示す。２００ｇスケー
ルで行った類似実験は同様な結果を与えた。

【００５２】 第１表 ジエン中間体と生成物の相対濃度 ─────────────────────────────────── 時 間（分） ０ ２ ６ 17 ^b 26 55 75 115 160 220 330 ^c 化合物 相 対 濃 度 ─────────────────────────────────── ３ 100 0.5 0.1 0.2 0 0 0 0 0 0 0 ７ 0 46 49 24 5 0 0 0 0 0 0 ８ａ 0 2 2 2 3 2 3 2 4 2 2 11 0 1 2 0.5 0 0 0 0 0 0 0 ４ａ 0 27 26 54 76 78 70 75 73 76 34 ９ａ 0 0 0 0 0 0 3 2 2 4 19 ８ｂ 0 3 0 5 5 0 0 0 0 0 0 ４ｂ 0 15 18 8 0 2 0 0 0 0 0 ９ｂ 0 0 0 5 9 14 13 15 14 16 16 ｄ 0 4 2 1 0 -- 6 3 7 2 2 ｅ 0 1 2 2 2 -- 3 2 2 2 2 ─────────────────────────────────── ａ ¹Ｈ−および¹³Ｃ−ＮＭＲの組合せによりクエンチ
ングされた反応液のアリコートに関して決定された濃度
（≧１０％の値については±５％の誤差、＜１０％の値
については±２％の誤差）。

【００５３】ｂ 作業中試料が部分的に分解した。７，
８ａ，４ａ，９ａ，４ｂおよび９ｂの測定値は１６，１
０，４３，１１，０および１３％であった。表示された
値は、分解中に７，４ａおよび４ｂが部分的に８ａ，９
ａおよび９ｂに変換されたと仮定することにより評価さ
れた。 ｃ 最後の時間の間は反応液を１５℃に温めておいた。
生成物は一部のみＣＤＣｌ₃ に溶解性であり、そして幾
つかの少量の不純物を含有した；従って、組成率は９ｂ
が１６％の値を与えるように標準化した。

【００５４】ｄ δ０．７４に ¹Ｈ−ＮＭＲのシングレ
ットのピークを有する未知の物質。 ｅ δ０．６９に ¹Ｈ−ＮＭＲのシングレットのピーク
を有する未知の物質。例 ４ ３β−ベンゾイルオキシ−６α−クロロ−５α−コレス
タ−７−エン（７）。 −６５℃のＣＨＣｌ₃ １００ml（エタノール不含有）中
の１．６ＭＨＣｌ溶液に、撹拌しながら−５８℃のＣＨ
Ｃｌ₃ （エタノール不含有）１００ml中１０．０ｇの３
の溶液を添加する。生じたこはく色の溶液を−６２℃で
７０秒間撹拌し、そして濃ＮＨ₄ ＯＨ５０mlおよび氷５
０ｇの混合物に注ぎ入れる。この中和溶液を激しく撹拌
し、分液漏斗中に入れる。冷却した有機相を５mlのピリ
ジンの中に流し入れ、そして２×１５０mlの水で洗う。
さらに５mlのピリジンの添加後、湿った固体になるまで
回転蒸発させ、そして真空中で一晩乾燥させる。上記の
方法で得られた生じた固体（１０．７４ｇ）の試料を ¹
Ｈ−ＮＭＲで分析した。すると７を５０％、４ａを２５
％、３を５％、そして５β−Δ^6,8(14) 異性体８ｂであ
ると思われる物質を２０％含むことがわかった。粗試料
（１０．７４ｇ）を３０mlのＣＨＣｌ₃ に溶解した後、
６０mlのアセトンを添加するとゆっくりした沈澱形成が
起こり、これを３０分後に吸引濾過により集める。この
生成物（３．３８ｇ）の５回のさらなる再結晶を行い、
１３５℃（遅く加熱）または１５５℃（速い加熱）の２
°−３°範囲にわたって融解する７の分析試料（０．３
７ｇ）を得た。融解時にはガスが発生しそして生成物は
主として８ａに分解した（ ¹Ｈ−ＮＭＲによる融解物質
の分析）。７の構造は、種々の分析方法により確認され
た。

【００５５】例 ５ 様々な条件下での７の安定性 ７ の溶液をＥｔＯＡｃ（１％ｗ／ｖ）、無水エーテル
（１％）、ベンゼン（１％）およびアセトン（０．５
％）中に調製した。これら溶液のアリコートを０．５時
間後、２４時間後および１２日後に取り出し、窒素流中
で蒸発乾固し、ＣＤＣｌ₃ 中に溶解し、そしてすぐに ¹
Ｈ−ＮＭＲで分析した。Δ^5,7 およびΔ^{6,8( 14)} 不純物
（３，８ａ，８ｂ）のいずれも５％レベルで検出でき、
そしてΔ^7,14およびΔ^8,14不純物（４ａ，４ｂ，９ａ，
９ｂ）が２％レベルで検出できる。どの溶液においても
０．５時間後または２４時間後には不純物は全く検出さ
れなかった。１２日後、ＥｔＯＡｃまたはベンゼン溶液
については全く分解が観察されなかった。しかし、７は
エーテル溶液においては完全に８ａに、そしてアセトン
溶液においては部分的に８ａおよび３を含む混合物に分
解していた。

【００５６】別の実験において、２０℃にて６週間保存
したシクロヘキサン中の７の０．１３％溶液は、８ａま
たは他のいかなるステロールにも分解していないことを
示した（２％検出限界）。２０℃にて３０時間保存した
ヘキサン中の７の０．０６％溶液（Ｂｕｒｄｉｃｋおよ
びＪａｃｋｓｏｎ）は、８ａへの分解を示した（１１お
よび７各５−１０％と混合）。共に０．１mlピリミジン
を含む６mlのＣＨＣｌ ₃ ／メタノール（１：１）または
ＣＨＣｌ₃ ／エタノール（１：１）中５０mgの７の溶液
は２０℃で１時間後３，８ａおよび１１の混合物に完全
に分解した。

【００５７】ＣＤＣｌ₃ 中の７の２０％溶液は迅速に分
解し（１時間後５％の８ａを含み、５時間後には９ａと
未同定のステロールに完全に分解した）、一方ＣＤＣｌ
₃ 中の希（２％）溶液はよりゆっくりと分解した（１１
時間後８ａおよび１１それぞれ約１０％）。−２０℃で
は、ＣＤＣｌ₃ 中の７の２％溶液は１ヶ月間安定であっ
た。塩基の非存在下のＣＨＣｌ₃ 溶液においては、７は
９ａと少量の未同定物質に分解した。固体のＮａ₂ ＣＯ
₃ またはピリジンを含むＣＨＣｌ₃ 中の７の撹拌溶液
は、４８時間後、主として１１並びに各々２０％より少
ない８ａおよび３から成ることがわかった。１０％ピリ
ジンまたはトリエチルアミンを含むＣＤＣｌ₃ 中の７の
２％溶液は、２０℃にて３時間後には検出可能な分解生
成物（＜１０％）を全く示さなかった。固体のＡｇＮＯ
₃ を含むテトラヒドロフラン中の７の溶液を撹拌する
と、３，８ａおよび１１の混合物を生成する。未封管の
試験管中８０−１２０℃で１０分間７を加熱すること
は、検出可能な（１０％より多い）分解を導かなかった
（ ¹Ｈ−ＮＭＲ）。

【００５８】例 ６ ３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−エポキシ−
５α−コレスタ−７−エン（５）。 ５．３リットルのジエチルエーテル中１４０ｇ（０．２
９mol 、純度９０％）の４ａの溶液を、蒸気浴上での穏
やかな加熱により調製する。この溶液を氷浴中に置き、
２４℃まで冷却した時に１１８ｇ（０．６９mol 、純度
８０−８５％、Ａｌｄｒｉｃｈ）のＭＣＰＢＡ、６０ｇ
（０．６０mol ）のＮａＨＣＯ₃ および４００mlのジエ
チルエーテルの混合物を激しく撹拌しながら３分間で１
００mlの割合で添加する。この撹拌混合物を氷浴中５℃
に１時間保持し、結晶化を促進せしめる。針状晶の５お
よび固体のＮａＨＣＯ₃ を吸引濾過により一緒に集め、
そして濾過ケークを１ｌの熱ＴＨＦ中に溶解させる。そ
の溶液を注意深くＮａＨＣＯ₃ からデカンテーション
し、ヘキサン２ｌを添加し、そしてその溶液を一晩−１
５℃で結晶化させる。濾過により１０５．０ｇの無色結
晶が得られる（収率８１％）。５の構造は、種々の分析
法（ｍｐ，ＩＲおよびＮＭＲ）により確認された。

【００５９】上記の反応と同様であるが、ただし１．０
ｇのスケール（２．０mmol）においてそして５０mlの溶
媒（１００mlのジエチルエーテルを除く）を使って次の
溶媒において反応を行い、単離された収率をカッコ内に
示す：ジブチルエーテル（８８％）、ｔｅｒｔ−ブチル
エチルエーテル（８３％）、ジイソプロピルエーテル
（８６％）、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（８０
％）、シエチルエーテル（７６％）、ＣＨ₂ Ｃｌ₂ （７
７％）およびＣＨＣｌ₃ （７５％）。

【００６０】１００mlのジエチルエーテルおよび２５ml
の０．５ＭＮａＨＣＯ₃ を使った同様な反応は７５％の
収率を与えた。８０−８５％の純度のＭＣＰＢＡの代わ
りに９９％の純度のＭＣＰＢＡを使っても５の収率に影
響を及ぼさなかった。１．０ｇの４ａ、４０mlのｔｅｒ
ｔ−ブチルメチルエーテル、０．８ｇのＭＣＰＢＡおよ
び０．３７ｇのＮａＨＣＯ₃ を使う一連の反応を、該ジ
エン溶液が２８°、２４°および２０℃に冷却された時
にＭＣＰＢＡ溶液を添加することにより実施した；それ
ぞれ８３％、８０％および８０％の収率か得られた。

【００６１】例 ７ ３β−ヒドロキシ−５α−コレスタ−８（１４）−エン
−１５−オン（１）。 ５ｌの丸底フラスコ中の１２０ｇ（０．２３８mol ）の
５，３．０ｌの９５％エタノールおよび３５０mlの水の
混合物を氷浴中５℃に３０分間冷却する。濃Ｈ ₂ ＳＯ₄
（６５０ml）を１０分間にわたって５０mlずつこの混合
物に添加する。懸濁した物質のあらゆる大きなチャンク
を機械的に破壊する。この混合物を還流下２０−２４時
間加熱する。茶色がかった反応混合物を氷浴を使って２
０℃に冷却し、次いで１２ｌのカーボイ中の７kgの氷に
注ぎ入れる。ペースト様の沈澱物を、ポリプロピレン濾
布（Ａｌｄｒｉｃｈ）または三層のワットマン♯１濾紙
のどちらかを使ってブフナー漏斗上に集め、濾過を促進
するために時折かき取る。淡黄色のケークを１ｌの冷水
で３回洗い、そして１ｌの熱メタノールに溶解し、これ
に１ｌのヘキサンおよび５００mlの熱水を加える。生じ
た二相系を、全て固体物質が溶けるまで蒸気浴上で加熱
する。この混合物を２０℃まで２−３時間放冷する；こ
の時点で溶媒の界面に結晶が形成しはじめる。次にこの
混合物を−１５℃で一晩冷却して褐色の上層のヘキサン
相、淡黄色の下層の水相および白色の結晶物質を与え
る。結晶（ＴＬＣによりおおよそ９０％の純度）を吸収
により集め、そして前述したようにメタノール／ヘキサ
ン／水（２：２：１）から再結晶する。

【００６２】生じた物質（ＴＬＣにより９５％以上の純
度）を、中程度の多孔度のガラスフリットを有する３ｌ
のガラスのブフナー漏斗中ＣＨＣｌ₃ で溶出することに
より、シリカゲル（２００ｇ、６０−２００メッシュ、
Ｂａｋｅｒ）に通す。そのＣＨＣｌ₃ 溶液をロータリー
エバポレーターで乾固し、そして残渣をメタノール／水
から再結晶すると６６．６ｇ（７０％）の無色針状晶を
与える。

【００６３】このような方法により製造された生成物の
構造は、既知の分析法により１と確認された。窒素下で
２５°、４°および−１７℃において保存された１の試
料は、２年後全く分解を示さなかった（ＴＬＣおよびＨ
ＰＬＣによる分析）。１（空気とアルゴン中両方と
も）、６（アルゴン中）および５（空気とアルゴン中両
方とも）の試料を小スケールでの前記の加水分解にかけ
た。粗反応混合物のＴＬＣ分析は、Ｒ_f ０．７０，０．
６５（６と同じＲ_f ）および０．３１に主要なスポット
を示した。５の場合は（１と６は不可）、Ｒ_f ０．３６
（１２と同じＲ_f ）にさらに主要スポットが観察され
た。ＧＣおよびＨＰＬＣも同様な結果を与えた。

【００６４】発明の範囲および精神を逸脱することな
く、本発明に様々な変更を行うことができることは、当
業者にとって明らかであろう。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、相当する構造式と共に本発明に従った
反応式の模式的流れ図を表わす。

【図２】図２は、前記反応式のより詳細な模式的流れ図
であり、本発明の方法により製造された中間体および副
生成物を示している。

【図３】図３は、本明細書中で検討される幾つかの化合
物の詳細な構造式を表わす。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ウィリアム ケー．ウィルソン アメリカ合衆国，テキサス 77401，ベ ルエア，ニューキャスル ドライブ 6506 (72)発明者 ケー−シ ウァング アメリカ合衆国，バージニア 22209, アーリントン，309，ノース ピアース ストリート 1305 (72)発明者 アレムカ キシク アメリカ合衆国，テキサス 77025，ヒ ューストン，アパートメント 202，ベ ルフォンテイン 2601

Claims (26)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ
   −５，７−ジエンを３β−ベンゾイルオキシ−１４α，
   １５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンに変換する
   方法であって、 （ｉ）３β−ベンゾイルオキシコレスタ−５，７−ジエ
   ンを、高くても−５５℃の温度の溶媒中、前記３β−ベ
   ンゾイルオキシコレスタ−５，７−ジエンを前記３β−
   ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１４−ジエンに
   変換するのに十分な時間、少なくとも２Ｍの前記溶媒中
   の濃度のＨＣｌと接触させ； （ii）有意な量の３β−ベンゾイルオキシ−５−コレス
   タ−８，１４−ジエンの形成を防ぐために、生じた反応
   混合物を塩基で中和し； （iii)３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１
   ４−ジエンおよびジエチルエーテルの混合物を加熱する
   ことにより、それらの溶液を作成し、そして続いて前記
   溶液を冷却し； （iv）ｍ−クロル過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）およびＮａ
   ＨＣＯ₃ を含んで成る混合物を前記溶液に添加すること
   により第二の溶液を作成し、そして前記第二の反応混合
   物を冷却して、前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，
   １５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンを形成せし
   め；そして （ｖ）前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−
   エポキシ−５−コレスタ−７−エンを回収する方法。
2. 【請求項２】 前記３β−ベンゾイルオキシ−５−コレ
   スタ−７，１４−ジエンが３β−ベンゾイルオキシ−５
   α−コレスタ−７，１４−ジエンである、請求項１に記
   載の方法。
3. 【請求項３】 前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，
   １５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンが３β−ベ
   ンゾイルオキシ−１４α，１５α−エポキシ−５α−コ
   レスタ−７−エンである、請求項１に記載の方法。
4. 【請求項４】 前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，
   １５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンが３β−ベ
   ンゾイルオキシ−１４α，１５α−エポキシ−５β−コ
   レスタ−７−エンである、請求項１に記載の方法。
5. 【請求項５】 前記３β−ベンゾイルオキシ−５−コレ
   スタ−７，１４−ジエンが３β−ベンゾイルオキシ−５
   β−コレスタ−７，１４−ジエンである、請求項１に記
   載の方法。
6. 【請求項６】 前記混合物がジエチルエーテルをさらに
   含んで成る、請求項１に記載の方法。
7. 【請求項７】 ３β−ベンゾイルオキシ−６α−クロロ
   −５α−コレスタ−７−エン。
8. 【請求項８】 前記第二の反応混合物を５℃に１時間冷
   却して前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−
   エポキシ−５−コレスタ−７−エンの結晶を形成せしめ
   る、請求項１に記載の方法。
9. 【請求項９】 ３β−ベンゾイルオキシ−コレスタ−
   ５，７−ジエンを３β−ヒドロキシ−５−コレスタ−８
   （１４）−エン−１５−オンに変換する方法であって、
   次の段階： （ｉ）３β−ベンゾイルオキシ−コレスタ−５，７−ジ
   エンを、溶媒中高くとも−５５℃の温度で少なくとも
   ２．０Ｍの前記溶媒中濃度のＨＣｌと、前記３β−ベン
   ゾイルオキシ−コレスタ−５，７−ジエンを前記３β−
   ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１４−ジエンに
   変換するのに十分な時間の間接触せしめることにより第
   一反応混合物を形成せしめ； （ii）有意な量の３β−ベンゾイルオキシ−５−コレス
   タ−８，１４−ジエンの形成を防ぐために、前記反応混
   合物を塩基で中和し； （iii)３β−ベンゾイルオキシ−５−コレスタ−７，１
   ４−ジエンおよびジエチルエーテルの溶液を形成せし
   め、そして次に前記溶液を冷却し； （iv）前記溶液にｍ−クロル過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）
   およびＮａＨＣＯ₃ を含んで成る混合物を添加すること
   により第二反応混合物を形成せしめ、そして前記第二反
   応混合物を冷却して前記３β−ベンゾイルオキシ−１４
   α，１５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンを形成
   せしめ；そして （ｖ）前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−
   エポキシ−５−コレスタ−７−エンを前記３β−ヒドロ
   キシ−５−コレスタ−８（１４）−エン−１５−オンに
   変換する、 ことを含んで成る方法。
10. 【請求項１０】 前記３β−ベンゾイルオキシ−５−コ
    レスタ−７，１４−ジエンが３β−ベンゾイルオキシ−
    ５α−コレスタ−７，１４−ジエンである、請求項９に
    記載の方法。
11. 【請求項１１】 前記３β−ベンゾイルオキシ−５−コ
    レスタ−７，１４−ジエンが３β−ベンゾイルオキシ−
    ５β−コレスタ−７，１４−ジエンである、請求項９に
    記載の方法。
12. 【請求項１２】 前記ＨＣｌ濃度が２．０Ｍ〜２．５Ｍ
    である、請求項９に記載の方法。
13. 【請求項１３】 前記温度が−６５℃〜−７５℃であ
    る、請求項１２に記載の方法。
14. 【請求項１４】 前記ＨＣｌがガスとして２．０〜２．
    ５Ｍの濃度まで前記反応混合物中に導入される、請求項
    ９に記載の方法。
15. 【請求項１５】 前記溶媒がＣＨＣｌ₃ およびＣＨ₂ Ｃ
    ｌ₂ の混合物を含んで成る、請求項９に記載の方法。
16. 【請求項１６】 前記溶媒混合物が約３：１の比のＣＨ
    Ｃｌ₃ およびＣＨ₂Ｃｌ₂ から成る、請求項１５に記載
    の方法。
17. 【請求項１７】 前記の中和段階の前に、水酸化ナトリ
    ウムのトラップを通して前記反応混合物からＨＣｌを除
    去する段階をさらに含んで成る、請求項９に記載の方
    法。
18. 【請求項１８】 前記塩基が、濃ＮＨ₄ ＯＨである、請
    求項９に記載の方法。
19. 【請求項１９】 前記３β−ベンゾイルオキシ−１４
    α，１５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンが３β
    −ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−エポキシ−５α
    −コレスタ−７−エンである、請求項９に記載の方法。
20. 【請求項２０】 前記３β−ベンゾイルオキシ−１４
    α，１５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンが３β
    −ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−エポキシ−５β
    −コレスタ−７−エンである、請求項９に記載の方法。
21. 【請求項２１】 前記混合物がさらにジエチルエーテル
    を含んで成る、請求項９に記載の方法。
22. 【請求項２２】 前記３β−ベンゾイルオキシ−５−コ
    レスタ−７，１４−ジエンを得る前に、前記３β−ベン
    ゾイルオキシ−コレスタ−５，７−ジエンを３β−ベン
    ゾイルオキシ−６α−クロロ−５α−コレスタ−７−エ
    ンに変換する、請求項９に記載の方法。
23. 【請求項２３】 前記反応混合物を中和する時を決定す
    るために前記の最初の反応混合物をモニタリングする段
    階をさらに含んで成る、請求項９に記載の方法。
24. 【請求項２４】 前記モニタリングがクロマトグラフィ
    ーにより達せられる、請求項２３に記載の方法。
25. 【請求項２５】 前記３β−ベンゾイルオキシコレスタ
    −５，７−ジエンが、７−デヒドロコレステロールと塩
    化ベンゾイルとを反応することにより得られる、請求項
    １に記載の方法。
26. 【請求項２６】 請求項２５に記載の方法により得られ
    た前記３β−ベンゾイルオキシ−１４α，１５α−エポ
    キシ−５−コレスタ−７−エンを有機溶媒中無機酸と反
    応させることにより、前記３β−ベンゾイルオキシ−１
    ４α，１５α−エポキシ−５−コレスタ−７−エンを５
    −コレスタ−８（１４）−エン−３β−オール−１５−
    オンに変換する方法。