JP2573006B2 - 新規なヒドロキサム酸誘導体 - Google Patents

新規なヒドロキサム酸誘導体

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JP2573006B2
JP2573006B2 JP62317364A JP31736487A JP2573006B2 JP 2573006 B2 JP2573006 B2 JP 2573006B2 JP 62317364 A JP62317364 A JP 62317364A JP 31736487 A JP31736487 A JP 31736487A JP 2573006 B2 JP2573006 B2 JP 2573006B2
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Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、背椎動物由来のコラゲナーゼの作用を特異
的に阻害する新規なペプチジルヒドロキサム酸誘導体に
関するものであり、この新規なペプチジルヒドロキサム
酸誘導体を有効成分として含有するコラゲナーゼ活性阻
害剤に関するものである。
〔背景技術〕
コラゲナーゼは、結合組織の主要構成蛋白成分の一つ
であるコラーゲンを分解する酵素である。
動物の病態時において、組織の破壊、修復の過程でコ
ラゲナーゼの異常亢進が見られる。例えば、慢性間接リ
ウマチ、歯周疾患、角膜潰瘍、表皮水疱症などの場合に
おいて、コラゲナーゼの異常亢進が見られ、その場合に
コラゲナーゼ作用を阻害することは、それら疾患の治療
に対し、有用な手段となる。
〔従来技術〕
従来、コラゲナーゼ阻害作用を示す物質として、ある
種のペプチジルヒドロキサム酸が知られている。すなわ
ち、ウイリアム M.モーアらは、ベンジルオキシカルボ
ニル−プロリル−ロイシル−グリシルヒドロキサム酸
（Ｚ−Pro−Leu−Gly−NHOH）を報告しており（William
M. Moore and Curtis A.Spilburg;Biochemical and Bi
ophysical Research Communications,Vol.136,No.1,Pag
es 390−395,1986参照）、また、他のペプチド性の合成
コラゲナーゼ阻害剤として、メルカプト基を含む化合物
（Robert D.Gray,Hossain H.Saneii and Arno F.Spatol
a;Biochemical and Biophysical Research Communicati
ons,Vol.101,No.4,Pages 1251−1258,1981、Charles F.
Vencill,David Rasnick,Katherine V.Crumley,Norikazu
Nishino and James C.Powers;Biochemistry 24,3149−
3157,1985参照）あるいはカルボキシル基を含む化合物
（Jean−Marie Delaisse.Yves Eeckhout,ChristopherSe
ar,Alan Galloway,Keith McCullagh and Gilbert Vaes;
Biochemical and Biophysical Research Communication
s,Vol.133,No.2,Pages 483−490,1985参照）が報告され
ている。
本発明の目的は、他のプロテアーゼ作用を阻害するこ
となく、背椎動物由来のコラゲナーゼ作用のみを選択的
に阻害する、即ち、特異性の高い阻害作用を有し、さら
に毒性が低く、代謝速度等の改善された性質を有する新
規なペプチド化合物を提供することにある。
本発明者らは、かかる好ましい性質を有する新規なペ
プチド化合物を得るため、種々研究を行ったところ、本
発明により、一般式 X1−X2−X3−X4−NHOH （Ｉ） （式中、X1はグリシン及びザルコシンから選択されるα
−アミノ酸残基であり、X2はプロリン、ヒドロキシプロ
リン、アラニン、グリシン及びチオプロリンから選択さ
れるα−アミノ酸残基であり、X3はロイシン、グルタミ
ン、グルタミン酸、グリシン、イソロイシン、セリン、
リジン、アルギニン、プロリン及びフェニルアラニンか
ら選択されるα−アミノ酸残基であり、X4はロイシン、
グリシン、アラニン、バリン及びザルコシンから選択さ
れるα−アミノ酸残基もしくはβ−アラニン又はγ−ア
ミノ酪酸から選択されるアミノ酸残基であり、X1のα−
アミノ酸のカルボキシル基とX2のα−アミノ酸のアミノ
基、X2のα−アミノ酸のカルボキシル基とX3のα−アミ
ノ酸のアミノ基、X3のα−アミノ酸のカルボキシル基と
X4のα−アミノ酸またはアミノ酸のカルボキシル基と−
NHOHがそれぞれアミド結合を形成しており、X1のα−ア
ミノ酸のアミノ基における水素原子は、ｔ−ブチルオキ
シカルボニル基、ベンゾイル基、ｐ−アミノベンゾイル
基、ｐ−ヒドロキシベンゾイル基、アセチル基、ベンジ
ル基及びｏ−フタリル基によって１又は２原子置換され
ていてもよい）で表されるペプチジルヒドロキサム酸誘
導体又はその塩が、上記の目的に適うことを見出した。
本発明者らは、ヒトフアイブロブラスト由来のコラゲ
ナーゼ、オタマジヤクシ由来のコラゲナーゼ、バクテリ
ア由来のコラゲナーゼ、ウレアーゼ、サーモライシン、
α−キモトリプシンおよびトリプシン計７種の各酵素活
性に対する阻害作用を指標に、前２者の酵素作用を、強
く阻害する化合物を探索した結果、前記の目的に適う、
一般式（Ｉ）で表わされる新規化合物を提供することに
成功した。
一般式（Ｉ）で表わされる新規なペプチジルヒドロキ
サム酸誘導体の製造は、大別して下記およびの方法
により行われる。
式 Boc−X4−NHOBzlで表わされる化合物を出発原
料とし、Boc−Ｎ基側においてペプチド鎖を延長して最
初にX3−X4−基を形成し、順次X2−X3−X4−基を経て、
X1−X2−X3−X4−基を形成せしめ、最後にヒドロキサム
酸側のＯ−ベンジルを離脱して目的化合物を生成せしめ
る方法、 式 Boc−X4−OR2で表わされる化合物を出発原料と
し、相当するペプチド誘導体： X1−X2−X3−X4−OR2（R2:メチル基又はエチル基） を合成した後、この化合物にヒドロキシルアミンを反応
させ目的化合物を生成せしめる方法。
上記の方法においてペプチド鎖を形成する際に使用す
るアミノ酸の縮合方法ならびにその構造中に存在するこ
とのあるアミノ基、イミノ基、カルボキシル基、および
／又は水酸基の保護基による保護方法、および、それら
保護基を脱離させる方法の具体的な手段としては、ペプ
チド合成化学において常用されている手段が用いられ
る。これらの手段は、公知文献において詳しく述べられ
ており、例えば、「赤堀四郎、金子武夫、成田耕造編、
タンパク質化学Ｉ、アミノ酸・ペプチド、共立出版、昭
和44年」には、これらの具体的手段が記載されている。
上記のアミノ酸の縮合方法としては、例えば、ジシク
ロヘキシルカルボジイミド（DCC）を用いる方法、N,N′
−ジメチルアミノプロピルエチルカルボジイミド（WSC
D）を用いる方法、混合酸無水物法、アジド法、活性エ
ステル法、酸化還元法、DCC−添加物（１−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミド、
Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−2,3−ジカルボキ
シイミド等）を用いる方法等があげられる。反応に際し
て溶媒を用いる場合、溶媒として、N,N−ジメチルホル
ムアミド（DMF）、テトラヒドロフラン（THF）、塩化メ
チレン、ジオキサン、酢酸エチルまたはこれらの混合物
を使用することができる。
前述の保護基としては、例えばアミノ基あるいはイミ
ノ基の保護基として、ベンジルオキシカルボニル
（Ｚ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Boc）、ベンゾ
イル（Bz）、アセチル、ホルミル、ｐ−メトキシベンジ
ルオキシカルボニル、トリフルオロアセチル等が、カル
ボキシル基の保護基として、メチル（OMe）、エチル（O
Et）、ｔ−ブチル、ベンジル（OBzl）、ｐ−ニトロベン
ジル等があげられ、水酸基の保護基として、アセチル、
ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、ｔ−ブチル等が
あげられる。上述の化合物又は基を示す記述中のカツコ
内の記号は、これらの化合物又は基を示す際の略号であ
り、本明細書中においても文中でこれらの略号が使用さ
れている。
前述の保護基を離脱させる方法としては、例えば接触
還元による方法、トリフルオロ酢酸、フツ化水素、臭化
水素、塩化水素、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等
を使用する方法が用いられる。
本発明に係る前掲の一般式（Ｉ）で表わされる化合物
の薬理学的に許容できる塩としては、Ｎ−附加塩例えば
塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、ギ酸塩、酢
酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、乳酸
塩、蓚酸塩、酒石酸塩等があげられ、また、アミノ基が
保護されている場合には、ナトリウム塩、カリウム塩、
マグネシウム塩、カルシウム塩、アルミニウム塩、ピペ
リジン塩、モルホリン塩、ジメチルアミン塩、ジエチル
アミン塩等をあげることができる。
本発明に係る新規なヒドロキサム酸誘導体は、強力な
背椎動物のコラゲナーゼ阻害作用を有する。また、この
化合物は、その構造中の構成成分が、天然に存する安全
性の高いアミノ酸あるいはその誘導体よりなることか
ら、生体内代謝産物をも含めて、極めて、安全性が高い
ものと推測される。
以下に、本発明に係る新規化合物ならびにその製造法
を示す具体例として、実施例を掲げる。
実施例を含めて本明細書中において使用されている、
アミノ酸およびその誘導体、あるいはこれらの構造中に
存在する基、反応試薬等を表現する略号は、ペプチド合
成化学の分野において慣用されている記号によったもの
であり（IUPAC−IUB Commission on Biological Nomenc
lture参照）、以下の意味をもつ。
Gly:グリシン、Ala:アラニン、Ile:イソロイシン、Le
u:ロイシン、Pro:プロリン、Val:バリン、Sar:ザルコシ
ン、Phe:フエニルアラニン、Nle:ノルロイシン、Ser:セ
リン、Glu:グルタミン酸、Gln:グルタミン、Lys:リジ
ン、Arg:アルギニン、Pgl:フエニルグリシン、Hyp:ヒド
ロキシプロリン、thioPro:チオプロリン、Asp:アスパラ
ギン酸、Asn:アスパラギン:Tyr:チロシン、Trp:トリプ
トフアン、GAB:γ−アミノ酪酸、DCC:ジシクロヘキシル
カルボジイミド、HOBt:1−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル、HOSu:N−ヒドロキシコハク酸イミド、Ac:アセチ
ル、Boc:t−ブチルオキシカルボニル、Z:ベンジルオキ
シカルボニル、Bz:ベンゾイル、HPA:2−（ｐ−ヒドロキ
シフエニル）プロピオニル、ABA:p−アミノベンゾイ
ル、PTH:o−フタリル、HBA:p−ヒドロキシベンゾイル、
Bzl:ベンジル、OBzl:ベンジルエステル、OEt:エチルエ
ステル、OMe:メチルエステル、TEA:トリエチルアミン、
THF:テトラヒドロフラン、DMF:N,N−ジメチルホルムア
ミド、DMSO:ジメチルスルホキシド、TLC:シリカゲル薄
層クロマトグラフイー なお本明細書中、アミノ酸に関し、光学異性体があり
得る場合、特に明記しない場合はＬ−体を表す。
実施例 １ ｔ−ブチルオキシカルボニル−グリシル−Ｌ−プロリ
ル−Ｌ−ロイシル−グリシルヒドロキサム酸（Boc−Gly
−Pro−Leu−Gly−NHOH） （イ） Boc−Gly−NHOBzlの合成 HCl・NH2OBzl 11.2g（70.2mmol）をDMF 100mlに懸濁
し、氷冷下、TEA 11.2ml（80.0mmol）を滴下し、次いで
HOBt 7.43g（55.0mmol）およびBoc−Gyl−OH 8.76g（5
0.0mmol）を加え、−20℃の冷媒にて冷却し、CH2Cl2 70
mlに溶解したDCC14.5g（70.2mmol）を滴下した。滴下
後、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１晩反応を行わせた。
不溶物を別した後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOE
tに溶解して、水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序
で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した後、溶媒を減圧留
去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフイーにて精製
（富士デエビソン BW200、300gを用いてAcOEt:n−Hexan
e＝1:1の混合溶媒にて溶出した）することにより、淡黄
色油状物のBoc−Gly−NHOBzl13g（93％）を得た。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.75、Rf＝0.63の単一スポツトを与えた。
（ロ） HCl・Gly−NHOBzlの合成 （イ）で得られたBoc−Gly−NHOBzl 5.0g（17.8mmo
l）に氷冷下、4.5N−HCl/AcOEt30mlを加え、室温にもど
して１時間反応を行った。溶媒を減圧留去し、残留物を
Et2Oを用いて固化することにより、吸湿性無色粉末のHC
l・Gly−NHOBzl3.60g（93％）を得た。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝5:2:1、ｎ−BuO
H:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後
加熱）にてRf＝0.45、Rf＝0.44の単一スポツトを与
えた。
（ハ） Boc−Leu−Gly−NHOBzlの合成 （ロ）で得られたHCl・Gly−NHOBzl 7.15g（33.0mmo
l）をDMF20ml、THF80mlの混合溶媒に溶解し、氷冷下
に、TEA 4.9ml（35.0mmol）を滴下した。滴下後、HOBt
4.19g（31.0mmol）およびBoc−Leu−OH（１水和物7.48g
（30.0mmol）を共沸脱水したもの）を加え、−20℃の冷
媒にて冷却した後、THF20mlに溶解したDCC8.05g（39.0m
mol）を滴下し、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１晩反応
を行わせた。不溶物を別した後、溶媒に減圧留去し、
残留物をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％Na2C
O3、水の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した後、
溶媒を減圧留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフ
イーにて精製（富士デエビソンBW200 600gを用いてAcOE
t:n−Hexane＝2:1の混合溶媒にて溶出した）し、さらに
AcOEt−ｎ−Hexaneの混合溶媒にて再結晶することによ
り、無色針状晶のBoc−Leu−Gly−NHOBzl 10.9g（93
％）を得た。m.p.109〜113℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼
−8.3（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝80:10:5、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）
にてRf＝0.58、Rf＝0.79の単一スポツトを与えた。
（ニ） Boc−Gly−Pro−OEtの合成 HCl・Pro−OEt 10.8g（60.1mmol）をTHF70mlに溶解
し、氷冷下、TEA 8.4ml（60.0mmol）を滴下後、HOBt 7.
43g（55.0mmol）およびBoc−Gly−OH8.76g（50.0mmol）
を加えた。−20℃の冷媒にて冷却後、THF30mlに溶解し
たDCC 13.4g（65.0mmol）を滴下し、−10℃で１時間、
冷蔵庫にて１晩反応を行わせた。不溶物を別した後、
溶媒を減圧留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフ
イーにて精製（富士デエビソンBW200 250gを用いてAcOE
t:n−Hexane＝3:2の混合溶媒にて溶出した）し、さらに
AcOEt−ｎ−Hexaneにて再結晶することにより、無色板
状晶のBoc−Gly−Pro−OEt 10.5g（85％）を得た。m.p.
56.5〜57.0℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−84.9（ｃ＝1.
0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝80:10:5、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）
にて、Rf＝0.73、Rf＝0.90の単一スポツトを与え
た。
（ホ） Boc−Gly−Pro−OHの合成 （ニ）で得られたBoc−Gly−Pro−OEt 4.11g（15.0mm
ol）をMeOH 30mlに溶解し、氷冷下2N−NaOH10mlを加
え、１時間、さらに室温にもどして４時間反応を行わせ
た。MeOHを減圧留去し、1N−HClにてpHを２とした後、A
cOEtを用いて３回抽出した。抽出液を水洗した後、無水
MgSO4にて乾燥し、溶媒を減圧留去した。残留物をAcOEt
−ｎ−Hexaneの混合溶媒で再結晶することにより無色板
状晶のBoc−Gly−Pro−OH 3.44g（93％）を得た。m.p.1
40.5〜141℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−75.5（ｃ＝1.
0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧
後加熱）にてRf＝0.51、Rf＝0.51の単一スポツトを
与えた。
（ヘ） Boc−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOBzlの合成 （ハ）で得られたBoc−Leu−Gly−NHOBzl 3.93g（10.
0mmol）に氷冷下4.5N−HCl/AcOEt 40mlを加え、室温に
もどして1.5時間反応を行った。溶媒を減圧留去し、残
留物をDMF20mlに溶解した後、−20℃の冷媒にて冷却し
た。TEA 1.4ml（10mmol）を滴下後、HOBt 1.35g（10.0m
mol）および（ホ）で得られたBoc−Gly−Pro−OH 2.34g
（9.50mmol）を加え、THF 10mlに溶解したDCC2.68g（1
3.0mmol）を滴下し、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１晩
反応を行わせた。不溶物を別した後、溶媒を減圧留去
し、残留物をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％
No2CO3、水の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をシリカゲルクロマトグ
ラフイーにて精製（富士デエビソン BW200 250gを用い
てCHCl3:MeOH＝20:1の混合溶媒にて溶出した）すること
により、無色油状物のBoc−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOBz
l 4.7g（90％）を得た。
比旋光度▲〔α〕28 D▼−68.6（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝80:10:5、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）
にて、Rf＝0.37、Rf＝0.72の単一スポツトを得た。
（ト） Boc−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOHの合成 （ヘ）で得られたBoc−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOBzl
1.0g（1.83mmol）をMeOH 20mlに溶解し、10％Pd−Ｃ（5
0％wet）0.3gを用いて、室温にて１時間接触水素化を行
った。触媒を別後、溶媒を減圧留去し、残留物をシリ
カゲルクロマトグラフイーにて精製（富士デエビソンBW
200 15gを用いてCHCl3:MeOH＝20:1の混合溶媒にて溶出
した）し、さらにCHCl3−Et2Oの混合溶媒にて再固化す
ることにより無色粉末のBoc−Gly−Pro−Leu−Gly−NHO
H 0.70g（84％）を得た。m.p.90〜104℃、比旋光度▲
〔α〕28 D▼−84.3（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン噴
霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3噴霧）にてRf
＝0.34、Rf＝0.67の単一スポツトを与えた。
実施例 ２ ｔ−ブチルオキシカルボニル−グリシル−Ｌ−プロリル
−Ｌ−ロイシル−Ｌ−アラニルヒドロキサム酸（Boc−G
ly−Pro−Leu−Ala−NHOH） （イ） Boc−Ala−NHOBzlの合成 HCl・NHOBzl 2.07g（13.0mmol）をDMSO 10ml、DMF 30
mlの混合溶媒に溶解し、氷冷下、TEA 2.0ml（14.3mmo
l）を滴下した。滴下後、HOBt 1.35g（10.0mmol）およ
びBoc−Ala−OH 1.89g（10.0mmol）を加え、−20℃の冷
媒にて冷却した後、CH2Cl2 10mlに溶解したDCC2.70g（1
3.1mmol）を滴下し、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１晩
反応を行わせた。不溶物を別した後、溶媒を減圧留去
し、残留物をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％
Na2CO3、水の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した
後、残留物をシリカゲルクロマトグラフイーにて精製
（富士デエビソンBW200 170gを用いてAcOEt:n−Hexane
＝2:3の混合溶媒にて溶出した）し、さらにAcOEt−ｎ−
Hexaneの混合溶媒にて再結晶することにより、無色針状
晶のBoc−Ala−NHOBzl 2.68g（91％）を得た。m.p.98〜
99℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−42.1（ｃ＝1.0、EtO
H）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝20:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.60、Rf＝0.58の単一スポツトを得た。
（ロ） Boc−Leu−Ala−NHOBzlの合成 （イ）で得られたBoc−Ala−NHOBzl 1.47g（4.99mmo
l）に氷冷下、4.5N−HCl/AcOEt 10mlを加え、室温にも
どして１時間反応を行った。溶媒を減圧留去し、残留物
をTHF20mlに溶解した後、−20℃の冷媒にて冷却した。T
EA 0.84ml（6.0mmol）を滴下後、HOBt 0.68g（5.03mmo
l）およびBoc−Leu−OH（１水和物1.17g（4.69mmol）を
ベンゼンと共沸脱水したもの）を加え、THF5mlに溶解し
たDCC 1.35g（6.50mmol）を滴下し、−10℃で１時間、
冷蔵庫にて１晩反応を行わせた。不溶物を別した後、
溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解して、水、1N
−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄した。無水MgS
O4にて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEt
を用いて固化することにより、無色結晶のBoc−Leu−Al
a−NHOBzl 1.53g（80％）を得た。m.p.164〜166℃、比
旋光度▲〔α〕28 D▼−46.0（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝20:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.52、Rf＝0.60の単一スポツトを与えた。
（ハ） Boc−Gly−Pro−Leu−Ala−NHOBzlの合成 （ロ）で得られたBoc−Leu−Ala−NHOBzl 1.37g（3.3
6mmol）に氷冷下4.5N−HCl/AcOEt 10mlを加え、室温に
もどして２時間反応を行わせた。溶媒を減圧留去し、残
留物をDMF 10mlに溶解した後、−20℃の冷媒にて冷却
し、TEA 0.49ml（3.50mmol）を滴下した。次いで、HOBt
0.43g（3.18mmol）および実施例１の（ホ）で得られた
Boc−Gly−Pro−OH 0.75g（3.05mmol）を加え、THF5ml
に溶解したDCC 0.83g（4.00mmol）を滴下し、−10℃で
１時間、冷蔵庫にて１晩反応を行わせた。不溶物を別
した後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解し
て、水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄し
た。無水MgSO4にて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、残
留物をシリカゲルクロマトグラフイーにて精製（富士デ
エビソンBW200 100gを用いてCHCl3:MeOH＝20:1の混合溶
媒にて溶出した）し、さらにAcOEt−ｎ−Hexaneの混合
溶媒にて再結晶することにより無色結晶のBoc−Gly−Pr
o−Leu−Ala−NHOBzl 1.32g（81％）を得た。m.p.103〜
105℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−72.1（ｃ＝1.0、EtO
H）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝80:10:5、発色法0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.36、Rf＝0.80の単一スポツトを与えた。
（ニ） Boc−Gly−Pro−Leu−Ala−NHOHの合成 （ハ）で得られたBoc−Gly−Pro−Leu−Ala−NHOBzl
0.53g（0.94mmol）をMeOH10mlに溶解し、10％Pd−Ｃ
（エンゲルハルト50％wet）0.17gを用いて室温にて１時
間接触水素化を行わせた。触媒を別した後溶媒を減圧
留去し、残留物をMeOH−Et2Oの混合溶媒にて再固化する
ことにより、無色粉末のBoc−Gly−Pro−Leu−Ala−NHO
H 0.40g（86％）を得た。m.p.112〜118℃、比旋光度▲
〔α〕28 D▼−85.0（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン噴
霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3噴霧）にてRf
＝0.39、Rf＝0.67の単一スポツトを与えた。
実施例 ３ ｔ−ブチルオキシカルボニル−グリシル−Ｌ−プロリル
−Ｌ−フエニルアラニル−グリシルヒドロキサム酸（Bo
c−Gly−Pro−Phe−Gly−NHOH） （イ） Boc−Phe−Gly−NHOBzlの合成 実施例１の（ロ）で得られたHCl・Gly−NHOBzl2.38g
（11.0mmol）をDMF 6ml、THF 15mlの混合溶媒に溶解
し、−20℃の冷媒にて冷却後、TEA1.54ml（11.0mmol）
を滴下した。次いでHOBt1.42g（10.5mmol）および、Boc
−Phe−OH 2.65g（10.0mmol）を加え、CH2Cl210mlに溶
解したDCC 2.68g（13.0mmol）を滴下し、−10℃で１時
間、冷蔵庫にて１晩反応を行わせた。不溶物を別した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解して水、1
N−Hcl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄した。無水Mg
SO4にて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、残留物をシリ
カゲルクロマトグラフイーにて精製（富士デエビソンBW
200 100gを用いて、CHCl3:MeOH＝50:1の混合溶媒にて溶
出した）し、ベンゼンにて固化することにより無色粉末
のBoc−Phe−Gly−NHOBzl 3.75g（88％）を得た。m.p.7
1〜72℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋9.8（ｃ＝1.0、EtO
H）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.75、Rf＝0.62の単一スポツトを与えた。
（ロ） Boc−Gly−Pro−Phe−Gly−NHOBzlの合成 （イ）で得られたBoc−Phe−Gly−NHOBzl 2.75g（6.4
4mmol）に氷冷下、4.5N−HCl/AcOEt 20mlを加え、室温
にもどして１時間反応を行わせた。Et2O 30mlを加え、
析出した不溶物を取し、DMF 10mlに溶解した後、−20
℃の冷媒にて冷却した。TEA 0.90ml（6.44mmol）を滴下
した後、HOBt 0.83g（6.14mmol）および実施例１の
（ホ）で得られたBoc−Gly−Pro−OH 1.59g（5.85mmo
l）を加え、THF 5mlに溶解したDCC 1.57g（7.61mmol）
を滴下し、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１晩反応を行わ
せた。不溶物を別した後、溶媒を減圧留去し、残留物
をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水
の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した後、溶媒を
減圧留去し、少量のAcOEtで固化させることにより無色
粉末のBoc−Gly−Pro−Phe−Gly−NHOBzl 2.88g（85
％）を得た。m.p.87〜90℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−7
1.8（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.66、Rf＝0.48の単一スポツトを与えた。
（ハ） Boc−Gly−Pro−Phe−Gly−NHOHの合成 （ロ）で得られたBoc−Gly−Pro−Phe−Gly−NHOBzl
0.80g（1.38mmol）をMeOH 10mlに溶解し、10％Pd−Ｃ
（エンゲルハルト、50％wet）0.14gを用いて室温で２時
間接触水素化を行わせた。触媒を別した後、溶媒を減
圧留去し、残留物を、MeOH−Et2Oの混合溶媒にて固化す
ることにより無色粉末のBoc−Gly−Pro−Phe−Gly−NHO
H 0.46g（68％）を得た。m.p.166〜171℃、比旋光度▲
〔α〕28 D▼−89.7（ｃ＝1.0、MeOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン噴
霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3噴霧）にてRf
＝0.44、Rf＝0.71の単一スポツトを与えた。
実施例 ４ ベンゾイル−グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−ロイシル−
グリシルヒドロキサム酸（Bz−Gly−Pro−Leu−Gly−NH
OH） （イ） Bz−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOBzlの合成 実施例１の（ヘ）で得られたBoc−Gly−Pro−Leu−Gl
y−NHOBzl 0.55g（1.00mmol）に氷冷下4.5NHCl/AcOEt 2
mlを加え、室温にもどして１時間反応を行わせた。溶媒
を減圧留去した後、残留物をDMF 5mlに溶解し、−20℃
の冷媒にて冷却後、TEA 0.14ml（1.00mmol）を滴下し、
次いでBz−Cl 0.17g（1.21mmol）を滴下した。TEAを用
いてpH8〜９とし、１時間反応した後、不溶物を別
し、溶媒を減圧留去した。残留物をAcOEtに溶解し、
水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄した
後、無水MgSO4にて乾燥した。溶媒を減圧留去した後、
残留物をシリカゲルクロマトグラフイーにて精製（富士
デエビソンBW200 25gを用いてCHCl3:MeOH＝20:1の混合
溶媒にて溶出した）することにより無色粉末のBz−Gly
−Pro−Leu−Gly−NHOBzl 0.43g（78％）を得た。m.p.7
9〜84℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−69.0（ｃ＝1.0、EtO
H）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン次いで47％臭化
水素酸噴霧後加熱）にてRf＝0.22、Rf＝0.65の単一
スポツトを与えた。
（ロ） Bz−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOHの合成 （イ）で得られたBz−Gly−Pro−Leu−Gly−NHOBzl
0.30g（0.54mmol）をMeOH 10mlに溶解し、５％Pd−Ｃ
（エンゲルハルト、50％wet）0.10gを用いて室温にて3.
5時間接触水素化を行わせた。触媒を別した後、溶媒
を減圧留去し、残留物をAcOEt−ｎ−Hexaneの混合溶媒
にて再結晶することにより無色粉末のBz−Gly−Pro−Le
u−Gly−NHOH0.16g（65％）を得た。m.p.118〜123℃、
比旋光度▲〔α〕28 D▼−77.4（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン噴
霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3噴霧）にてRf
＝0.23、Rf＝0.60の単一スポツトを与えた。
実施例 ５ ｔ−ブチルオキシカルボニル−グリシル−Ｌ−ハイドロ
キシプロリル−Ｌ−ロイシル−グリシルヒドロキサム酸
（Boc−Gly−Hyp−Leu−Gly−NHOH） （イ） Boc−Hyp−Leu−Gly−NHOBzlの合成 実施例１の（ハ）で得られたBoc−Leu−Gly−NHOBzl
3.89g（9.89mmol）に氷冷下4.5N−HCl/AcOEt 30mlを加
え、室温にもどして１時間反応を行った。溶媒を減圧留
去し、残留物をTHF100mlに溶解して、−20℃の冷媒にて
冷却した。TEA 1.40ml（10.0mmol）を滴下した後、HOBt
1.22g（9.03mmol）およびBoc−Hyp−OH 1.99g（8.60mm
ol）を加え、THF10mlに溶解したDCC2.31g（11.2mmol）
を滴下し、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１晩反応を行わ
せた。不溶物を別した後、溶媒を減圧留去し、残留物
をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水
の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥後、溶媒を減圧
留去し、残留物をAcOEtにて再結晶することにより無色
結晶のBoc−Hyp−Leu−Gly−NHOBzl 2.45g（56％）を得
た。m.p.168〜173℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼−50.8
（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.40、Rf＝0.19の単一スポツトを与えた。
（ロ）Boc−Gly−Hyp−Leu−Gly−NHOBzlの合成 （イ）で得られたBoc−Hyp−Leu−Gly−NHOBzl 2.00g
（3.95mmol）に氷冷下4.5N−HCl/AcOEt10mlを加え、室
温にもどして１時間反応を行わせた。析出物を取し、
DMF 10mlに溶解後、氷冷下TEA 0.55ml（3.95mmol）を滴
下し、次いでBoc−Gly−ONSu 2.30g（7.87mmol）を加
え、室温にもどして３時間反応を行った。不溶物を別
した後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解し
て、水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄し
た。無水MgSO4にて乾燥後、溶媒を減圧留去し、残留物
をシリカゲルクロマトグラフイーにて精製（富士デエビ
ソンBW200 100gを用いてCHCl3:MeOH＝30:1の混合溶媒に
て溶出した）することにより、無色油状物のBoc−Gly−
Hyp−Leu−Gly−NHOBzl 1.57g（70％）を得た。比旋光
度▲〔α〕28 D▼−55.5（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、ｎ−BuOH:AcO
H:H2O＝4:1:1、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）
にてRf＝0.37、Rf＝0.64の単一スポツトを与えた。
（ハ）Boc−Gly−Hyp−Leu−Gly−NHOHの合成 （ロ）で得られたBoc−Gly−Hyp−Leu−Gly−NHOBzl
0.75g（1.33mmol）をMeOH 10mlに溶解し、10％Pd−Ｃ
（エンゲルハルト、50％wet）0.25gを用いて室温にて１
時間接触水素化を行った。触媒を別した後、溶媒を減
圧留去し、残留物をMeOH−Et2Oの混合溶媒にて再固化す
ることにより無色粉末のBoc−Gly−Hyp−Leu−Gly−NHO
H 0.5g（79％）を得た。m.p.178〜183℃、比旋光度▲
〔α〕28 D▼−73.8（ｃ＝1.0、MeOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝5:2:1、ｎ−BuOH:
AcOH:H2O＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン噴霧後
加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3噴霧）にてRf＝
0.61、Rf＝0.51の単一スポツトを与えた。
実施例 ６ ｐ−アミノベンゾイル−グリシル−Ｌ−プロリル−Ｄ−
ロイシル−Ｄ−アラニルヒドロキサム酸酢酸塩（AcOH・
ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH） （イ） Ｚ−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMeの合成 HCl・Ｄ−Ala−OMe 5.58g（40.0mmol）をDMF 100mlに
溶解し、氷冷下TEA 5.6ml（40.0mmol）を滴下後、HOSu
2.30g（20.0mmol）、Ｚ−Ｄ−Leu−OH 9.29g（35.0mmo
l）を加えた。−20℃の冷媒にて冷却した後、CH2Cl250m
lに溶解したDCC 9.28g（45.0mmol）を滴下し、−10℃で
１時間、冷蔵庫にて一晩反応を行わせた。不溶物を別
した後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解して
水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄した。
無水MgSO4にて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、残留物
をEt2O−ｎ−Hexaneの混合溶媒にて固化させることによ
り、無色粉末のＺ−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe 11.5g（94
％）を得た。m.p.94〜95℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋3
5.9（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン次いで47％臭化
水素酸噴霧後加熱）にてRf＝0.82、Rf＝0.78の単一
スポツトを与えた。
（ロ） Boc−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMeの合成 （イ）で得られたＺ−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe 8.80g
（25.1mmol）をMeOH 80mlに溶解し、4.5N−HCl/AcOEt 1
0mlを加えた後、10％Pd−Ｃ（エンゲルハルト、50％we
t）1.2gを用いて室温にて４時間接触水素化を行った。
触媒を別した後、溶媒を減圧留去し、残留物をTHF 50
mlに溶解して−20℃の冷媒にて冷却した。TEA 3.50ml
（25.0mmol）を滴下した後、HOSu 1.73g（15.0mmol）お
よびBoc−Pro−OH 5.38g（25.0mmol）を加え、CH2Cl2 3
0mlに溶解したDCC 6.81g（33.0mmol）を滴下し、−10℃
で１時間、冷蔵庫にて一晩反応を行わせた。不溶物を
別した後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解し
て水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄し
た。無水MgSO4にて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、残
留物をEt2O−ｎ−Hexaneの混合溶媒にて固化させること
により、無色粉末のBoc−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe
8.27g（85％）を得た。m.p.153〜157℃、比旋光度▲
〔α〕28 D▼＋11.6（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン噴霧後加熱）に
てRf＝0.80、Rf＝0.63の単一スポツトを与た。
（ハ） Ｚ−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMeの合成 （ロ）で得られたBoc−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe
4.13g（10.0mmol）に氷冷下4.5N−HCl/AcOEt30mlを加
え、室温にもどして1.5時間反応を行わせた。溶媒を減
圧留去し、残留物をDMF30mlに溶解した後、−20℃の冷
媒にて冷却した。TEA 1.40ml（10.0mmol）を滴下した
後、HOSu 0.58g（5.04mmol）およびＺ−Gly−OH 2.10g
（10.0mmol）を加え、CH2Cl2 10mlに溶解したDCC 2.60g
（12.6mmol）を滴下し、−10℃で１時間、冷蔵庫にて１
晩反応を行った。不溶物を別した後、溶媒を減圧留去
し、残留物をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％
Na2CO3、水の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEt−Et2Oの混合溶
媒にて再結晶することにより無色結晶のＺ−Gly−Pro−
Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe 3.95g（78％）を得た。m.p.130
〜134℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋11.8（ｃ＝1.0、EtO
H）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン次いで47％臭化
水素酸噴霧後加熱）にてRf＝0.74、Rf＝0.58の単一
スポツトを与えた。
（ニ） Ｚ−ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMeの
合成 （ハ）で得られたＺ−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−
OMe2.00g（3.96mmol）をMeOH 10mlに溶解し、10％Pd−
Ｃ（エンゲルハルト、50％wet）0.50gを用いて室温にて
２時間接触水素化を行った。触媒を別した後、溶媒を
減圧留去し、残留物をDMF15mlに溶解して−20℃の冷媒
にて冷却した。HOBt 0.27g（2.00mmol）、次いでＺ−AB
A−OH 1.09g（4.02mmol）を加えた後、CH2Cl2 5mlに溶
解したDCC1.03g（4.99mmol）を滴下し、−10℃で１時
間、冷蔵庫にて１晩反応を行わせた。不溶物を別した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をAcOEtに溶解して、
水、1N−HCl、水、10％Na2CO3、水の順序で洗浄した。
無水MgSO4にて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、残留物
をAcOEtにて再結晶することにより、無色粉末のＺ−ABA
−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe 1.78g（72％）を
得た。m.p.109〜112℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋4.7
（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン次いで47％臭化
水素酸噴霧後加熱）にてRf＝0.65、Rf＝0.46の単一
スポツトを与えた。
（ホ） Ｚ−ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH
の合成 （ニ）で得られたＺ−ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−
Ala−OMe 1.68g（2.69mmol）に氷冷下、別に調製した1M
NH2OH/MeOH溶液〔NH2OH・HCl 0.63g（9.06mmol）をMeO
H 4mlに溶解したものを、KOH 1.00g（85％、15.1mmol）
のMeOH 3ml溶液に氷冷下滴下し、析出したKClを別し
て得たもの〕を6ml加え、４時間反応を行わせた。3N−H
Clを用いてpHを２とし、析出物を取することにより無
色粉末のＺ−ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH
1.68g（定量的）を得た。m.p.189〜191℃、比旋光度▲
〔α〕28 D▼＋10.4（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法：イ0.1％ニンヒドリン次いで47％
臭化水素酸噴霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3
噴霧）にてRf＝0.40、Rf＝0.14の単一スポツトを与
えた。
（ヘ） AcOH・ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHO
Hの合成 （ホ）で得られたＺ−ABA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−
Ala−NHOH 1.40g（2.24mmol）をAcOH:水＝2:1の混合溶
媒10mlに溶解し、10％Pd−Ｃ（エンゲルハルト、50％we
t）0.35gを用いて室温にて2.5時間接触水素化を行っ
た。触媒を別した後、溶媒を減圧留去し、EtOHにて再
結晶することにより、無色粉末のAcOH・ABA−Gly−Pro
−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH 0.93g（75％）を得た。m.p.
213〜218℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋23.4（ｃ＝0.5、
H2O）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:H2O＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン噴
霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3噴霧）にてRf
＝0.25、Rf＝0.58の単一スポツトを与えた。
実施例 ７ ｐ−ハイドロキシベンゾイル−グリシル−Ｌ−プロリル
−Ｄ−ロイシル−Ｄ−アラニルヒドロキサム酸（HBA−G
ly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH） （イ） Bzl−HBA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe
の合成 実施例６の（ハ）で得られたＺ−Gly−Pro−Ｄ−Leu
−Ｄ−Ala−OMe 1.73g（3.43mmol）をMeOH 5mlに溶解
し、10％Pd−Ｃ（エンゲルハルト、50％wet）0.30gを用
いて室温で２時間接触水素化を行った。触媒を別した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をDMF 10mlに溶解して−
20℃の冷媒にて冷却した。DMF 3mlに溶解したBzl−HBA
−Cl〔Bzl−HBA−OH 1.17g（5.15mmol）をSOCl2 5mlに
溶解し３時間加熱還流した後、過剰のSOCl2を減圧留去
したもの〕を滴下し、TEAを用いてpH8とした後、４時間
反応を行わせた。不溶物を別した後、溶媒を減圧留去
し、残留物をAcOEtに溶解して、水、1N−HCl、水、10％
Na2CO3、水の順序で洗浄した。無水MgSO4にて乾燥した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をシリカゲルクロマトグ
ラフイー（富士デエビソンBW200 15gを用いてAcOEtにて
溶出した）することにより、無色油状物のBzl−HBA−Gl
y−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−OMe1.23g（62％）を得た。
比旋光度▲〔α〕28 D▼＋4.6（ｃ＝1.0、EtOH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法:0.1％ニンヒドリン次いで47％臭化
水素酸噴霧後加熱）にて、Rf＝0.73、Rf＝0.58の単
一スポツトを与えた。
（ロ） Bzl−HBA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH
の合成 （イ）で得られたBzl−HBA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ
−Ala−OMe 1.15g（1.98mmol）に氷冷下、実施例６の
（ホ）と同様にして調製した1M−NH2OH/MeOH5mlを加
え、３時間反応を行わせた。3N−HClを用いてpHを２と
し、析出物を取した後、MeOH−Et2Oの混合溶媒にて再
固化することにより、無色粉末のBzl−HBA−Gly−Pro−
Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOH 0.87g（76％）を得た。m.p.18
1〜184℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋13.6（ｃ＝1.0、Et
OH）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH＝14:1、CHCl3:MeOH:Ac
OH＝95:5:3、発色法：イ0.1％ニンヒドリン次いで47％
臭化水素酸噴霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５％FeCl3
噴霧）にて、Rf＝0.51、Rf＝0.25の単一スポツトを
与えた。
（ハ） HBA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ−Ala−NHOHの合
成 （ロ）で得られたBzl−HBA−Gly−Pro−Ｄ−Leu−Ｄ
−Ala−NHOH 0.83g（1.43mmol）をMeOH 5mlに溶解し、1
0％Pd−Ｃ（エンゲルハルト、50％wet）0.15gを用いて
室温にて２時間接触水素化を行った。触媒を別した
後、溶媒を減圧留去し、残留物をMeOH−Et2Oの混合溶媒
にて固化することにより無色粉末のHBA−Gly−Pro−Ｄ
−Leu−Ｄ−Ala−NHOH0.53g（76％）を得た。m.p.159〜
164℃、比旋光度▲〔α〕28 D▼＋12.6（ｃ＝0.5、EtO
H）。
TLC（展開溶媒CHCl3:MeOH:AcOH＝80:10:5、ｎ−B
uOH:AcOH:水＝4:1:1、発色法：イ0.1％ニンヒドリン次
いで47％臭化水素酸噴霧後加熱、ロ10％Na2CO3次いで５
％FeCl3噴霧）にてRf＝0.27、Rf＝0.67の単一スポ
ツトを与えた。
実施例 ８〜42 実施例１〜７に記載した方法に準拠して第１表に示し
たとおりの化合物を製造した。各実施例で得られた化合
物についてのデータは第１表に示すとおりである。
本発明に係る新規ペプチド化合物のコラゲナーゼ作用
に対する阻害活性ならびに他の酵素に対する阻害活性を
下記の各測定方法により測定した。
（１）各コラゲナーゼ作用に対する阻害活性 ヒトフアイブロブラストコラゲナーゼ（ヒト線維芽細
胞由来コラゲナーゼ）、オタマジヤクシ由来コラゲナー
ゼおよびバクテリア（クロストリジウム）由来コラゲナ
ーゼのコラゲナーゼ作用に対する阻害活性は、いずれ
も、蛍光標識コラーゲン（ウシタイプＩコラーゲンをFI
TC−化したもの）を用い、永井らの方法〔炎症４
（２）,123（1984）参照〕に従って測定した。
（２）ウレアーゼに対する阻害活性 ウレアーゼに対する阻害活性は、ナタマメ由来のウレ
アーゼを使用し、小橋らの方法〔Biochem.Biophys.Act
a,227429（1971）参照〕により測定した。
（３）サーモライシン、トリプシン、α−キモトリプシ
ンに対する阻害活性 それぞれの酵素（サーモライシン、トリプシン、α−
キモトリプシン）に、熱変性カゼインを基質として使用
し、ラスコウスキーの方法〔Meth.Enzymol.,２,8（195
5）参照〕に従って測定した。
それらの測定結果を第２表に示す。
本発明に係る新規なペプチド化合物は、公知のペプチ
ド物質に比較し、コラゲナーゼ阻害活性に特異性が認め
られ、極めて有用である。
本発明に係る新規なペプチド化合物の毒性を示す。
マウスを用いた急性毒性（LD50）試験
フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭62−103052（ＪＰ，Ａ) 米国特許4687841（ＵＳ，Ａ) Ｅｕｒ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ｃ ｈｉｍ．Ｔｈｅｒ．，18（６），489− 493（1983) Ａｒｚｎｅｉｍ．−Ｆｏｒｓｃｈ．33 （11），1577−1579（1983)

Claims (3)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】一般式 X1−X2−X3−X4−NHOH （Ｉ） （式中、X1はグリシン及びザルコシンから選択されるα
    −アミノ酸残基であり、X2はプロリン、ヒドロキシプロ
    リン、アラニン、グリシン及びチオプロリンから選択さ
    れるα−アミノ酸残基であり、X3はロイシン、グリタミ
    ン、グルタミン酸、グリシン、イソロイシン、セリン、
    リジン、アルギニン、プロリン及びフェニルアラニンか
    ら選択されるα−アミノ酸残基であり、X4はロイシン、
    グリシン、アラニン、バリン及びザルコシンから選択さ
    れるα−アミノ酸残基もしくはβ−アラニン又はγ−ア
    ミノ酪酸から選択されるアミノ酸残基であり、X1のα−
    アミノ酸のカルボキシル基とX2のα−アミノ酸のアミノ
    基、X2のα−アミノ酸のカルボキシル基とX3のα−アミ
    ノ酸のアミノ基、X3のα−アミノ酸のカルボキシル基と
    X4のα−アミノ酸またはアミノ酸のカルボキシル基と−
    NHOHがそれぞれアミド結合を形成しており、X1のα−ア
    ミノ酸のアミノ基における水素原子は、ｔ−ブチルオキ
    シカルボニル基、ベンゾイル基、ｐ−アミノベンゾイル
    基、ｐ−ヒドロキシベンゾイル基、アセチル基、ベンジ
    ル基及びｏ−フタリル基によって１又は２原子置換され
    ていてもよい）で表されるペプチジルヒドロキサム酸誘
    導体又はその塩。
  2. 【請求項２】上記式（Ｉ）において、X2のプロリンがＤ
    −又はＬ−プロリンであり、X3のロイシンがＤ−又はＬ
    −ロイシンであり、X4のロイシン及びアラニンがＤ−又
    はＬ−ロイシン及びＤ−又はＬ−アラニンである特許請
    求の範囲第１項のペプチジルヒドロキサム酸誘導体又は
    その塩。
  3. 【請求項３】上記式（Ｉ）において、X1はグリシンであ
    り、X2はプロリンであり、X3はＤ−ロイシン又はＬ−ロ
    イシンであり、X4はＤ−ロイシン又はＬ−ロイシン、Ｄ
    −アラニン又はＬ−アラニンもしくはバリンである特許
    請求の範囲第１項のペプチジルヒドロキサム酸誘導体又
    はその塩。
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