JP2024513169A - 創傷を安定化、保護、および処置する創傷処置および方法 - Google Patents

Abstract

脱細胞化魚皮の粒子を含む創傷処置および創傷処置方法が提供される。脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する。

Description

本開示は、概して、損傷組織を安定化、保護、および／または治癒するための創傷処置に関する。

外傷およびそこから生じる創傷は、特に、重大な失血、手足の喪失、感染、および／または他の外傷のリスクがある状況などの、軍事および緊急事態において、医療従事者や初期対応者にとって未解決の問題である。爆発による爆傷は、すべての野戦関連の軍人の負傷の最大４分の３の要因となっており、これらは、多くの場合、複雑な軟組織の喪失を引き起こし、結果として感染を引き起こす。たとえば、爆発物または銃撃に起因する創傷は、多くの場合、重大な失血を引き起こすため、血流を制御する（たとえば、血流を減少させるか、または完全に止める）ために従来止血帯が適用されているが、これには、組織の壊死や切断の高いリスクが伴う。しかし、止血帯は、単独で使用される場合、下流の組織の死を引き起こし、結果として切断につながりかねない。このような状況では、止血帯を超える改善策が必要であることは明らかである。

戦場や初期対応者の緊急事態などにおける一部の創傷処置は、凝固粉末、水和ケイ酸アルミニウム（たとえばカオリン）、および化学焼灼剤（たとえば、硝酸銀およびトリクロロ酢酸）などの、止血剤を含む。このような止血剤は、創傷部位での出血を遅らせたり止めたりするためにさまざまな方法で作用する。たとえば、一部の凝固粉末は、出血を遅らせるおよび／または止めるために顆粒キトサンを組み込んでいる。キトサンは甲殻類のキチンが豊富な殻に由来しており、その止血作用は、古典的な凝固経路とは独立して、負に帯電した赤血球の細胞膜と正に帯電したキトサンとの間の直接的な静電相互作用の結果であることが知られている。

一方で、一部の止血剤は、古典的な凝固経路に依存しており、凝固時間を短縮するために血液中の血液凝固因子を過剰に活性化するように作用する。カオリンなどの水和ケイ酸アルミニウムがこのように作用することが知られている。化学的焼灼剤は、組織を融合させる化学反応を介して、破壊的な方法で創傷閉鎖を引き起こす。

外傷性創傷を安定化および／または保護し、そこから生じる潜在的な合併症を処置および／または予防することを助けるために、抗炎症化合物、鎮痛剤、および抗生物質軟膏を含む、追加の化合物を現場で投与することができる。しかし、現在利用可能な処置オプションは、患者を安定させることに重点が置かれており、組織の状態を保存するようには作用しない。

外傷性創傷の組織の状態を保存することができないと、多くの場合、組織の乾燥および劣化につながる。さらに、現在の処置の多くは、続発する感染に対する適切なバリアを提供することができず、および／または創傷を汚れおよび有害な病原体から遠ざけることができない。さらに、現在の処置では、長期にわたる現場でのケアに適応するための設備が整っていない。要するに、さらなるその後のケアのために患者および創傷を保存するために、特に現場において、創傷を安定化および／または保護するための改良されたアプローチが必要とされている。

手術室、外傷、重度の火傷、および糖尿病患者などの長期の創傷ケア環境を含む、他の状況では、創傷ケアに対する既存のアプローチは、多くの場合、ひいき目に見ても満足することができるものではない。たとえば、陰圧創傷療法（「ＮＰＷＴ」）は、多くの場合、デブリードマン後に実施され、創傷への血流を促進し、浮腫を制御し、プロテアーゼの存在を減少させるために使用され、したがって、創傷床の肉芽形成および血行再建の改善につながる。

しかし、ＮＰＷＴは、多くの場合、幾何学的に困難な創傷、または接着シールが得られにくい解剖学的に敏感な領域の近くまたは解剖学的に敏感な領域での創傷において加えられる圧力を正確に制御することができないこと、（ドレッシングドレッシングからの妨害により評価が難しくなり得る）出血、皮膚刺激、感染、不快感、ドレッシング材料への肉芽組織の内方成長に加えて、技術的問題という点で不利である。さらに、ＮＰＷＴマシンは、典型的に、かさばり、電気に依存する。

創傷に対して一般的に処方される別の処置は、患者を純粋な酸素を呼吸させながら高圧（２．０～２．５ａｔｍ）にさらすことからなる、高圧酸素療法であり、これは、創傷治癒を促進するように創傷床に酸素を供給することを目的としている。これは、酸素分圧を高め、通常の状態で可能な量よりも多くの酸素を血流に送り込むことによって機能すると考えられている。特定の臨床医はこのアプローチを重視しているが、高圧酸素療法は、本質的に高価であり（専用の高圧装置および訓練を受けたスタッフを必要とする）、時間がかかり（毎日６０～９０分のセッションを何日も必要とする）、発作の危険性を含む既知のリスクがある。

創傷療法に対する他の伝統的なアプローチには、創傷床を安定させることから始まり、最終的には機能的および審美的な結果をもたらすために移植片および組織移植を含む、「はしごアプローチ」がある。しかし、外傷性爆発創などの特定の創傷は、多くの場合、組織損傷が目に見える創傷を超えて広がっているため、従来のはしごアプローチには適していない。

従来の再建はしごアプローチは、外傷外科医によって「再建エレベータ」に適応されており、利用可能な技術による急速な進歩を促進し、機能的および審美的な結果を優先させている。その結果、場合によっては、患者が最適な結果を得るためにより単純なオプションをスキップすることになる。しかし、より最近では、より単純な技術を使用して複雑な創傷のより効率的な処置を可能にする、真皮再生テンプレート（「ＤＲＴ」）などの新技術の導入から、処置オプションが恩恵を受けている。しかし、特定の既存のＤＲＴオプションは、患者の移送中に発生するせん断力による血腫形成および臨床感染の可能性があるため、長時間の現場のケア（「ＰＦＣ」）には理想的ではない。

爆傷、および大きく複雑な創傷などの他の創傷は、多くの場合、そのような外傷に対するドナー組織の欠如が理由で、また患者の安定性のため、問題となる。さらに、ＰＦＣおよび時間が重要である初期対応状況では、移植片は、入手が困難で、時間がかかり、資源集約的であるため、非現実的であり得る。したがって、既存のアプローチと同様に、ＰＦＣおよび／または初期対応状況中のせん断力に敏感ではない新しいＤＲＴ技術が必要とされている。

また、創傷の形状が複雑であることによって、創傷ケアも複雑になる。たとえば、創傷は、トンネル創傷、侵食する創傷、および空洞などを伴う、切開創傷、裂傷、擦過傷、穿刺、裂離、切断、またはそれらの組み合わせであり得、爆発、外傷性事故、またはその他の傷害の具体的な性質が複雑さを増大させている。

創傷療法および処置に対する既存のアプローチは、特定のサイズに切断された材料のシートを創傷床に配置することを伴うが、実施形態において、１つまたは複数の足場材料を提供することによって、組織の治癒、たとえば再生および／または再成長を促進するように構成されながら、創傷床のさまざまな領域に対するさまざまな条件およびニーズを有するさまざまなタイプの創傷の組み合わせであり得る、シート材料を特定のサイズに切断せずに患者の１つまたは複数の創傷の特定の幾何学的形状に合わせて容易に構成することができる創傷処置が必要とされている。

創傷ケアは、それでもなお、創傷の種類、たとえば、糖尿病性足部潰瘍（ＤＦＵ）、静脈性下腿潰瘍（ＶＦＵ）、外科的創傷、褥瘡（ＰＵ）、火傷、外傷性創傷、それらの組み合わせなどによって、さらに複雑になり得る。

創傷ケアへの既存のアプローチは、たとえばヒト胎盤ベースの結合組織マトリックス材料の使用を伴うが、これらの材料は、胎盤原料の入手可能性の制限およびヒト由来の組織を供与することの安全性による固有の制限がある。

上記を考慮して、本発明者らは、頑丈かつロバストで、軽量で、小型で、搬送および取り扱いが容易であり、外部電力または特殊な装置への依存性が低く、モジュール式であり、現在のケアに対するアプローチと相互利用可能である、創傷処置が必要性とされていることを発見した。さらに、せん断力に耐える創傷処置が必要とされている。さらに、本発明者らは、さまざまな創傷タイプのさまざまな形状により容易にかつより効果的に適応するように構成されている創傷処置が必要とされていることを発見した。さらに、持続可能で、スケーラブルで、人間が使用しても安全である創傷処置が必要とされている。

脱細胞化魚皮の粒子を含む創傷処置剤が提供され、当該粒子は、所定のサイズ閾値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する。

創傷処置方法が提供され、当該方法は、脱細胞化魚皮のシートを縮小することによって、細断された、脱細胞化魚皮粒子を提供する工程と、細断された、脱細胞化魚皮粒子を創傷床に適用する工程と、創傷床をドレッシングで覆う工程と、を含む。

脱細胞化魚皮の粒子を含む創傷処置方法が提供され、当該粒子は、所定のサイズ閾値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有し、当該方法は、脱細胞化魚皮の粒子を創傷床に適用する工程と、創傷床をドレッシングで覆う工程と、を含む。

創傷処置を提供する方法が提供され、当該方法は、脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを提供する工程と、脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを粒子に粉砕する工程と、を含む。

脱細胞化魚皮の粒子を含む創傷処置が提供され、ここで、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージは、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する。

創傷処置方法であって、当該方法は、脱細胞化魚皮の粒子を提供する工程であって、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効である、サイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する、工程と、脱細胞化魚皮の粒子を創傷床に適用する工程と、創傷床をドレッシングで覆う工程と、を含む。

創傷処置を提供する方法であって、当該方法は、脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを提供する工程と、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有するように、脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを脱細胞化魚皮の粒子に細断するまたは粉砕する工程と、を含む。

本開示の創傷処置の実施形態および処置方法は、戦場、自動車事故などの初期対応状況、手術室、および創傷が処置される他の傷の現場などの状況で、より容易におよび／または効果的に配備されるＤＲＴを提供することによって、創傷を安定化、保護、および／または治癒するための創傷処置の技術分野における課題の１つまたは複数を利点を有して解決する。創傷処置の実施形態は、利点として、せん断力に抵抗するように有利に構成され得ることで、戦場、初期対応状況、または生活支援環境などの、１つの場所と、臨床現場などの別の場所との間の患者の搬送を容易にし、その逆もしかりである。

さらに、本開示の実施形態は加えて、創傷の処置のためのドレッシングにも及ぶ。例示的なドレッシングは、細断された、脱細胞化魚皮粒子を含むことができるか、またはそれと協働するように構成することができる。細断された、脱細胞化魚皮粒子は、創傷部位への適用前に再水和することができる。ドレッシングはまた、細断された、脱細胞化魚皮粒子を、細断された、脱細胞化魚皮粒子を深創傷中に圧縮することができる、深創傷などの創傷部位において粒子形態で固定するための被覆物を含むことができる。

したがって、創傷処置、ドレッシング、キット、および創傷を安定化、保護、および／または治癒するための方法が開示される。

実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、シートベースの脱細胞化魚皮足場と組み合わせて使用され得る。

他の実施形態では、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を含む一時的な創傷処置が提供される。好ましくは、粉砕された脱細胞化魚皮の粒子形態は、一時的な創傷処置中に創傷部位で細胞足場形成を最小限に抑えるように構成されている。これによって、実施形態において、創傷を安定化および／または保護する一時的な創傷処置、たとえば、後続するまたはより高いレベルのケアを受ける準備が容易になる。たとえば、一時的な創傷処置は、臨床医が、さらなる処置のために創傷処置を除去するまで、創傷を保護および保存するように構成され得る。細胞足場形成を最小限に抑えることによって、一時的な創傷処置は、創傷を悪化させたり、必要な細胞および血管の成長および構造を除去したりすることなく、除去され得る。

いくつかの実施形態では、一時的な創傷処置は、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に送達するように構成および配置された一時的なドレッシングをさらに含む。一時的なドレッシングは、たとえば、創傷と接触し、粉砕された脱細胞化魚皮を創傷で保持するように構成された接触層と、接触層と関連付けられ、接触層を創傷で保持するように構成された外側カバーと、を含むことができる。

この概要は、以下の詳細な説明でさらに説明される概念の選択を簡略化した形式で導入するために提供されている。この概要は、請求される主題の主要な特徴または本質的な特徴を特定することを意図したものではなく、請求される主題の範囲を示すものとして使用されることを意図したものでもない。

本開示の追加の特徴および利点は、続く説明で明記され、一部はその説明から明らかになるか、または本開示の実施によって知られ得る。本開示の特徴および利点は、添付の請求項で特に指摘された指示および組み合わせによって実現および取得され得る。本開示のこれらおよび他の特徴は、以下の説明および添付の請求項からより十分に明らかになるか、または以下に明記されるような開示の実施によって知られ得る。

第１のサイズの細断された、脱細胞化魚皮粒子を含む実施形態による創傷処置の平面図である。 第２のサイズの細断された、脱細胞化魚皮粒子を含む別の実施形態による創傷処置の平面図である。 第３のサイズの細断された、脱細胞化魚皮粒子を含む別の実施形態による創傷処置の平面図である。 乾燥した細断された、脱細胞化魚皮粒子を適用する実施形態による創傷を処置する方法の図である。 湿らせた細断された、脱細胞化魚皮粒子を適用する実施形態による創傷を処置する方法の図である。 実施形態による創傷処置で処置するための調製された創傷床の斜視図である。 乾燥した細断された、脱細胞化魚皮粒子を、図３Ａの調製された創傷床に適用する斜視図である。 乾燥した細断された、脱細胞化魚皮粒子が適用された、図３Ａの創傷床の斜視図である。 創傷処置の実施形態による、液体が添加された、乾燥した細断された、脱細胞化魚皮粒子を含むパッケージの斜視図である。 液体で湿らせた、細断された、脱細胞化魚皮粒子を有する図４Ａのパッケージの斜視図である。 ペーストを形成する、細断された、脱細胞化魚皮粒子を有する図４Ａのパッケージの斜視図である。 図４Ｃのペーストの適用のための調製された創傷の斜視図である。 塗布器でペーストが適用された、調製された創傷の斜視図である。 ペーストが適用された、調製された創傷の斜視図である。 実施形態による創傷処置の適用のための調製された創傷の斜視図である。 創傷処置が適用された、調製された創傷の斜視図である。 創傷処置が適用され、創傷処置用足場シートが適用された、調製された創傷の斜視図である。 実施形態による創傷処置の適用のための調製された創傷の斜視図である。 創傷処置が適用された、調製された創傷の斜視図である。 創傷処置の適用後の調製された創傷の斜視図である。 実施形態による創傷処置の適用のための調製された創傷の斜視図である。 創傷処置が適用された、調製された創傷の斜視図である。 創傷処置が適用され、創傷処置用足場シートが適用された、調製された創傷の斜視図である。 粒子形態への粉砕前の脱細胞化魚皮足場材料のサンプルを例示する。 図８に示されるものに類似した脱細胞化魚皮足場材料のさまざまなサイズのサンプルを例示する。 本開示の実施形態による、脱細胞化魚皮足場材料のシートを麻グラインダーで粉砕することによって結果として得られる粉砕された脱細胞化魚皮の大きな粒子の例示的な描写を例示する。 本開示の実施形態による、脱細胞化魚皮足場材料のシートを麻グラインダーで粉砕することによって結果として得られる粉砕された脱細胞化魚皮の糸状の綿状繊維の例示的な描写を例示する。 本開示の実施形態による、脱細胞化魚皮足場材料のシートを麻グラインダーで粉砕することによって結果として得られる粉砕された脱細胞化魚皮の小さな、粉末状の粒子の例示的な描写を例示する。 本開示の例示的な処置による、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷部位で保持して上記創傷を安定化および／または保護する際の使用のための一時的なドレッシングの概略断面図を例示する。 本開示の例示的な処置による、創傷を安定化および／または保護するために粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮とともに使用するためのスリーブの概略断面図を例示する。 本開示の実施形態による例示的なキットの図であって、その構成要素を、創傷を安定化および／または保護するために使用することができる、図である。 本開示の実施形態による、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を使用して創傷を安定化および／または保護するための例示的な方法の図を例示する。

図面は必ずしも縮尺通りに描かれているわけではない。代わりに、これらは、コンポーネントのよりよい理解を提供するために描かれており、範囲を限定することを意図したものではなく、例示的な説明を提供することを意図している。図面は、本開示による創傷処置およびその特徴およびサブコンポーネントの例示的な構成を例示する。

本開示のさまざまな実施形態のよりよい理解は、同様の参照符号が同様の要素を指す添付図面とともに以下の説明から得られ得る。

本開示は、さまざまな修正および代替構造が可能であるが、特定の例示的な実施形態が以下に説明される図面に示されている。しかし、本開示を開示される具体的な実施形態に限定する意図はなく、逆に、本発明の意図は、本発明の精神および範囲内にあるすべての修正、代替構造、組み合わせ、および等価物を網羅するものであることが理解されるべきである。

使用される参考文献は、便宜上提供されているだけであり、したがって保護範囲や実施形態を定義するものではない。

用語が、記載された意味を持つように本出願において明示的に定義されていない限り、その単純なまたは通常の意味を超えて、明示的または間接的に、そのような用語の意味を制限する意図はないことが理解される。

実施形態では、創傷処置は、少なくとも１つの所定のサイズの粒子化された、特に細断された、脱細胞化魚皮粒子であるか、またはそれを含む。粒子化された、すなわち細断された、脱細胞化魚皮粒子は、２０１０年１０月６日に出願され、２０１３年１２月２４日に特許査定を受けた、米国特許第８，６１３，９５７号明細書に記載されるように、組織の修復および／または置換を促進するために、細胞の遊走、付着、増殖、および分化を支持するための足場材料を提供するように構成されている。

脊椎動物の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）は、細胞を取り囲み支持する複雑な構造実体である。ＥＣＭは、構造タンパク質の複雑な混合物で構成されており、その中で最も豊富に含まれるのはコラーゲンと、他の特殊なタンパク質およびプロテオグリカンである。本明細書に記載される足場材料は、魚皮からの天然の生物学的ＥＣＭ成分のほとんどインタクトな無細胞足場である。足場は、魚皮から天然に生じる脂質を含むこともできる。真皮ＥＣＭのネイティブな三次元構造、組成、および機能は、本質的に変化しておらず、細胞の遊走、付着、増殖、および分化を支持する足場を提供し、したがって組織の修復および／または置換を促進する。

本発明による足場材料は、インタクトな魚皮から得られる。硬骨魚や軟骨魚を含む、任意の種類の魚は、魚皮の供給源として使用することができる。たとえば、供給源は、タラ、ハドック、およびナマズのような丸い魚、オヒョウ、カレイ、およびヒラメのようなカレイ科、サケおよびマスなどのサケ科、マグロのようなサバ科、またはニシン、アンチョビ、サバ、およびイワシなどの小魚であり得る。特定の実施形態では、魚皮は、脂っこい冷水魚および／または大量のオメガ３油を含有することが知られている魚から得られる。オメガ３油を多く含む魚の例としては、サケ、マイワシ、マグロ、ニシン、タラ、イワシ、サバ、クロテン、ワカサギ、白身魚、ホキ、およびいくつかの種類のマスが挙げられる。

魚皮は加工前に魚から除去される。魚皮が鱗を有する種類の魚からのものである場合、鱗の大部分が除去されるか、または少なくともヒドロキシアパタイトが鱗から除去されるように、魚皮の鱗は除去されなければならない。「鱗の大部分が除去される」または「鱗を実質的に含まない」という表現は、魚皮上の鱗の少なくとも９５％、好ましくは少なくとも９９％、より好ましくは１００％が除去されることを意味している。「実質的に鱗を含まない」魚皮はまた、鱗のない魚種からの魚皮を指し得る。鱗は、すべての処理の前に、純粋に機械的圧力（たとえば、ナイフ、研磨剤を用いた振盪、水圧、ナイフと同じ機械力を使用する特別な鱗除去装置、またはセラミックもしくはプラスチックで研磨するような他の圧力装置を介する）を用いて、または何らかの化学処理（たとえば脱細胞）後に、鱗を洗い流すために機械的圧力を用いて除去される。魚皮が、最初に化学的および／または酵素的に処理される場合（たとえばＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ－１００による処理）、脱細胞化後に裂傷を受けやすいため、機械的圧力は概して穏やかである必要がある。鱗は、１つを超える工程で除去することができ、たとえば、脱細胞化の前に部分的に除去し、続いて脱細胞化の間および／または後にさらに除去することができる。代替的に、化学処理単独で鱗を除去することもできる。

鱗が除去された後、魚皮は、随意に脱細胞化の前に冷凍される。魚皮は、足場のコラーゲン構造を保存するために、液体窒素中で皮膚をインキュベートするか、または皮膚を－７０℃以下に凍結することができる他の特殊な冷凍装置を使用することによって急速に冷凍することができる。代替的に、魚皮は、水産工場で典型的に見られる従来型の冷凍庫で冷凍することもできる。冷凍プロセスは、インタクトな魚皮を含む細胞を溶解または部分的に溶解し、魚皮の脱細胞化を促進するのに役立ち得る。魚皮は、冷凍されている場合、後にさらに加工するために解凍することができる。

魚皮は、冷凍されているかどうかに関係なく、さらなる処理の前に緩衝液で洗浄することができる。たとえば、魚皮は、１つまたは複数の抗酸化剤（たとえば、アスコルビン酸（５０ｍＭのアスコルビン酸など）、ビタミンＡ、Ｃ、Ｅ、およびベータカロテン）、抗生物質（たとえば、ストレプトマイシンおよびペニシリン）、プロテアーゼ（たとえばディスパーゼＩＩ）、およびプロテアーゼ阻害剤（たとえば、アンチパイン、アプロチニン、ベンズアミジン、ベスタチン、ＤＦＰ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ロイペプチン、ペプスタチン、ホスホラミドン、およびＰＭＳＦ）を随意に含有する緩衝液で１～３回洗浄して、魚皮の消毒および安定化を促進することができる。緩衝液は、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０以上などの、少なくとも５．５のｐＨであり得る。特定の実施形態では、ｐＨは、７．０～９．０、たとえば７．５～８．５の間である。緩衝液は、魚皮を数日間から数週間以上保存することができる培地として使用することもできる。特定の実施形態では、魚皮は緩衝液中に約４℃の温度で保存される。

凍結および／または洗浄および／または緩衝液中での保存後、魚皮は、１つまたは複数の脱細胞化溶液を用いて、天然に生じる細胞外マトリックスの機械的および構造的完全性および生物学的活性に対する損傷を最小限に抑えて、またはまったく与えずに、抗原性物質を含む細胞材料を魚皮から除去するように処理される。

本明細書で使用されるような「細胞外マトリックス」または「ＥＣＭ」という用語は、さまざまな他の重要な機能を実施することに加えて、皮膚細胞に対する構造的支持を提供する、魚皮内に存在する非細胞組織材料を指す。本明細書に記載されるＥＣＭは、抽出、精製、または分離されたＥＣＭ成分（たとえばコラーゲン）から完全に構成または再形成されたマトリックス材料を含まない。

本明細書で使用されるような「無細胞」、「脱細胞化」、「脱細胞化魚皮」などの用語は、相当量の細胞内容物および核酸内容物が除去されて、ＥＣＭの複雑な三次元間質構造を残す、魚皮を指す。実施形態では、「脱細胞化魚皮」は、相当量の細胞内容物および核酸内容物を含まないＥＣＭの複雑な三次元間質構造に加えて、オメガ３多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）を含む、魚皮をさらに含み得る。

「脱細胞化剤」は、ＥＣＭから相当量の細胞内容物および核酸内容物を除去するのに有効な薬剤である。ＥＣＭは、生存可能な核酸および生存不可能な核酸および他の細胞材料の少なくとも５０％がＥＣＭから除去された場合に、細胞内容物および核酸内容物が「脱細胞化されている」か、またはそれらを「実質的に含まない」（すなわち、「相当量」が除去されている）。特定の実施形態では、生存可能な核酸および生存不可能な核酸および細胞材料の約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、または１００％が除去される。脱細胞化は、たとえば、処理された魚皮のＤＮＡ含有量を検査することによって確証することができる。ＥＣＭからの核酸の除去は、たとえば、ＥＣＭの組織学的検査、および／またはＰＩＣＯＧＲＥＥＮ（登録商標）アッセイ、ジフェニルアミンアッセイなどの生化学的アッセイ、またはＰＣＲによって判定することができる。

脱細胞化は、細胞膜を破壊し、細胞内容物を放出する。脱細胞化には、１つまたは複数の物理的処理、１つまたは複数の化学的処理、１つまたは複数の酵素的処理、またはそれらの任意の組み合わせが伴い得る。物理的処理の例としては、超音波処理、機械的撹拌、機械的マッサージ、機械的圧力、および凍結／解凍などが挙げられる。化学的脱細胞化剤の例としては、イオン性塩（たとえばアジ化ナトリウム）、塩基、酸、洗剤（たとえば、非イオン性およびイオン性洗剤）、酸化剤（たとえば、過酸化水素および過酸）、低張溶液、高張溶液、キレート剤（たとえば、ＥＤＴＡおよびＥＧＴＡ）、有機溶媒（たとえばリン酸トリ（ｎ－ブチル））、アスコルビン酸、メチオニン、システイン、マレイン酸、およびＤＮＡに結合するポリマー（たとえば、ポリ－Ｌ－リジン、ポリエチルイミン（ＰＥＩ）、およびポリアミンドアミン（ＰＡＭＡＭ））が挙げられる。非イオン性洗剤は、４－（１，１，３，３－テトラメチルブチル）フェニル－ポリエチレングリコール、ｔ－オクチルフェノキシポリエトキシエタノール、ポリエチレングリコールｔｅｒｔ－オクチルフェニルエーテル（ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ－１００）（Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．）を含む。イオン性洗剤は、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、デオキシコール酸ナトリウム、ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ－２００、および両性イオン性洗剤（たとえばＣＨＡＰＳ）を含む。他の適切な脱細胞化洗剤は、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエートおよびポリオキシエチレン（８０）ソルビタンモノオレエート（Ｔｗｅｅｎ ２０および８０）、３－［（３－クロラミドプロピル）－ジメチルアミノ］－１－プロパン－スルホネート、オクチル－グルコシド、およびドデシル硫酸ナトリウムを含む。酵素的脱細胞化剤の例としては、プロテアーゼ、エンドヌクレアーゼ、およびエキソヌクレアーゼが挙げられる。プロテアーゼは、セリンプロテアーゼ（たとえばトリプシン）、スレオニンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、メタロプロテアーゼ（たとえばサーモリシン）、およびグルタミン酸プロテアーゼを含む。脱細胞化は、概して、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０以上などの、少なくとも５．５のｐＨで実行される。特定の実施形態では、ｐＨは、７．０～９．０、たとえば７．５～８．５の間である。

脱細胞化工程の例は、１ＭのＮａＣｌ、２％のデオキシコール酸、０．０２％のアジ化ナトリウム、および５００ｐｐｍストレプトマイシンを含む溶液中で魚皮をインキュベートする工程である。別の例では、魚皮は、プロテアーゼ（たとえば、２．５Ｕ／ｍＬのディスパーゼＩＩ）および他の成分（たとえば、０．０２％アジ化ナトリウム）を含む第１の脱細胞化溶液でインキュベートされる。第１の脱細胞化溶液は注ぎ出され、魚皮は、その後、洗剤（たとえば、０．５％のＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ－１００）および他の成分（たとえば、０．０２％のアジ化ナトリウム）を含む溶液などの第２の脱細胞化溶液で処理される。別の例では、魚皮は、最初に、他の成分（たとえば、０．０２％のＥＤＴＡ、アジ化ナトリウム、および／またはデオキシホル酸）とともに洗剤（たとえば、０．５％のＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ－１００）を含む脱細胞化溶液で処理され、その後、ＳＤＳなどの洗剤を含む第２の脱細胞化溶液中でインキュベートされる。

魚皮は、振盪しながら培養されても、されなくてもよい。（１つまたは複数の）脱細胞化工程は、必要に応じて、残りの脱細胞化溶液を注ぎ出し、随意に緩衝液（たとえばハンクス平衡塩類溶液）で魚皮を洗浄し、その後、別の脱細胞化工程で魚皮を再度処理することによって繰り返すことができる。十分な量の細胞材料が除去されると、（たとえば、吸引または溶液を穏やかに注ぎ出すことによって）脱細胞化溶液を除去することができる。

脱細胞化後、魚皮は、随意に、水、緩衝液、および／または塩溶液で洗浄することができる。適切な洗浄液の例としては、ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）、Ｍｅｄｉｕｍ １９９（Ｍ１９９、ＳＡＦＣ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）、および／またはＬ－グルタミンが挙げられる。（１つまたは複数の）洗浄工程は、概して、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０以上などの、少なくとも５．５のｐＨで実行される。特定の実施形態では、ｐＨは、７．０～９．０、たとえば７．５～８．５の間である。

最終生成物の外観を改善するために、随意に魚皮を漂白することができる。漂白は、脱細胞化の前、後、および／または脱細胞化と同時に実行することができる。たとえば、１つまたは複数の漂白剤は、脱細胞化溶液の１つまたは複数および／または１つまたは複数の緩衝液に組み込むことができる。漂白剤の例としては、亜硫酸ナトリウム、過酸化水素、過硫酸アンモニウム、過硫酸カリウム、および過硫酸ナトリウムが挙げられる。特定の実施形態では、（１つまたは複数の）過硫酸塩のような強力な漂白剤が使用される場合、漂白および脱細胞化は、１つまたは複数の漂白剤、増粘剤、および過酸化物源の混合物中で魚皮をインキュベートすることを含む単一工程で組み合わせることができる。たとえば、乾燥漂白混合物を調製して（たとえば、実施例５に記載される「漂白混合物」を参照）、続いて、水、過酸化水素、またはそれらの組み合わせを乾燥混合物に加えて、脱細胞化にも十分であり得る漂白溶液を形成することができる。漂白剤（たとえば、亜硫酸ナトリウム、過酸化水素、過硫酸アンモニウム、過硫酸カリウム、および過硫酸ナトリウム）は、約４０～６０％ｗ／ｗの乾燥混合物であるべきである。ＥＤＴＡと過硫酸塩との組み合わせは混合物に加えられて、漂白の他に脱細胞化も加速させ得る。

特定の実施形態では、乾燥混合物中のＥＤＴＡの濃度は、約０．２５～５％ｗ／ｗである。過酸化水素は混合物の約１５～２５％になり得、過酸化物源は過炭酸ナトリウムおよび過炭酸カリウムであり得る。リン酸ナトリウム過水和物および炭酸ナトリウムまたはメタケイ酸マグネシウムおよびケイ酸ケイ酸も過酸化物源として使用することができる。乾燥混合物はまた、たとえば、１～１０％ｗ／ｗのシリカおよび水和シリカ、および随意に１つまたは複数のステアリン酸塩（たとえばステアリン酸アンモニウム、ステアリン酸ナトリウム、および／またはステアリン酸マグネシウム）を含むことができる。加えて、乾燥混合物は、随意に、漂白／脱細胞化溶液の粘度を高め、タンパク質繊維を損傷から保護するために、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、アルギン（すなわちアルギン酸塩）、有機ガム（たとえば、セルロース、キサンタンガム）、メタケイ酸ナトリウム、およびそれらの組み合わせなどの、増粘剤を含むことができる。漂白、および／または漂白と脱細胞化は、概して、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０以上などの、少なくとも５．５のｐＨで実行される。特定の実施形態では、ｐＨは、７．０～９．０、たとえば７．５～８．５の間である。漂白および／または漂白と脱細胞化の後、魚皮は、随意に、上記したｐＨ条件下でＬ－グルタミンを含む溶液で洗浄される。

特定の実施形態では、魚皮は消化酵素で処理される。漂白と同様に、消化は、脱細胞化の前、後、および／または脱細胞化と同時に実行することができる。適切な酵素は、プロテアーゼ、たとえば、セリンプロテアーゼ、スレオニンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、メタロプロテアーゼ、およびグルタミン酸プロテアーゼを含む。特定の実施形態では、消化酵素はトリプシンなどのセリンプロテアーゼである。消化酵素は、アルカリ環境で機能し、ＥＣＭ内の架橋を制限し、魚皮を軟化する酵素であり得る。消化は、概して、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０以上などの、少なくとも５．５のｐＨで実行される。特定の実施形態では、ｐＨは、７．０～９．０、たとえば７．５～８．５の間である。

脱細胞化魚皮は、随意に、凍結保存することができる。凍結保存には、凍結前に魚皮を凍結保護剤溶液に浸漬することが伴い得る。凍結保護剤溶液は、概して、適切な緩衝剤、１つまたは複数の凍結保護剤、および随意に溶媒、たとえば水と組み合わせて膨張および収縮を最小限に抑える有機溶媒を含む。凍結保護剤の例としては、スクロース、ラフィノース、デキストラン、トレハロース、ジメチルアセトアミド、メチルスルホキシド、エチレングリコール、グリセロール、プロピレングリコール、２－メチル－２，４－パンタンジアール（pantandial）、特定の不凍タンパク質およびペプチド、およびそれらの組み合わせが挙げられる。代替的に、凍結工程中に形成される氷の結晶を最小限に抑えるために昇華前に脱細胞化魚皮が急速冷凍（瞬間冷凍）される場合、魚皮は、随意に、凍結保護剤を含まない緩衝液中で冷凍することができる。冷凍保存は、概して、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０以上などの、少なくとも５．５のｐＨで実行される。特定の実施形態では、ｐＨは、７．０～９．０、たとえば７．５～８．５の間である。

脱細胞化魚皮は、ガラスバイアルやパウチなどの滅菌容器内に包装することができる。一実施形態では、ＴＹＶＥＫ（登録商標）パウチが使用される。たとえば、魚皮は、凍結保護剤溶液中でインキュベートされ、ＴＹＶＥＫ（登録商標）パウチに包装され、その後、凍結乾燥機に入れて、凍結保護剤と適合する速度で冷凍させることができる。

脱細胞化魚皮は、氷が再結晶化することなく各氷結晶相から水が順次除去されるように、低温および真空条件下で凍結乾燥、すなわち、凍らせることができる。凍結乾燥中、水は、概して、最初に昇華によって除去され、その後、必要に応じて脱着によって除去される。処理後および滅菌前に余分な水を除去する別の方法は、真空プレス成形である。

特定の実施形態では、脱細胞化魚皮は、冷凍の前および／または後に滅菌される。滅菌方法は当該技術分野で周知である。たとえば、脱細胞化魚皮を、エチレンオキシドチャンバに入れ、エチレンオキシドの適切なサイクルで処理することができる。他の滅菌方法には、オゾン、二酸化炭素、ガス状ホルムアルデヒド、または放射線（たとえば、ガンマ線、Ｘ線、電子線処理、および亜原子粒子）による滅菌を含む。

水の冷凍、冷凍乾燥、および／または真空プレス成形の代替として、またはそれに加えて、脱細胞化魚皮を、アルコールなどの非水溶液中で保存することができる。

結果として得られた生成物（足場材料）は、組織の再生、修復、および／または置換（たとえば、内因性組織の修復、再生、および／または増殖）を促進し得る特性を持つ、無菌の、コラーゲンベースのマトリックスである。「足場材料」という用語は、上で論じたように、脱細胞化され、随意に漂白、消化、凍結乾燥などをされた魚皮を含む材料を指す。足場材料は、内皮細胞および／または上皮細胞を支持するためのインタクトな足場を提供することができ、宿主によって組み込まれ得、生体適合性があり、著しく石灰化することはなく、周囲温度で保存および輸送することができる。「宿主によって組み込まれる」という表現は、本明細書では、足場材料で処置されている患者の細胞および組織が足場材料内で増殖することができ、足場材料が実際に患者の体内に組み込まれる／吸収されることを意味している。「生体適合性」という用語は、その使用目的のインビボ環境において実質的に無毒であり、患者の生理系によって実質的に拒絶されない（すなわち、非抗原性である）材料に言及する。

これは、「Use of International Standard ISO-10993,Biological Evaluation of Medical Devices Part 1:Evaluation and Testing」と題された、国際標準化機構（ＩＳＯ）規格番号１０９９３および／または米国薬局方（ＵＳＰ）２３および／または米国食品医薬品局（ＦＤＡ）青本備忘録番号Ｇ９５－１に明示された生体適合性試験に合格する材料の能力によって測定することができる。典型的に、これらの試験では、材料の毒性、感染性、発熱性、刺激性、反応性、溶血活性、発癌性、および／または免疫原性が測定される。生体適合性の構造または材料は、大多数の患者に導入された場合でも、深刻に有害で、長期にわたる、または増大する生物学的反応または応答を引き起こすことはなく、典型的に異物の手術または生存生物への移植に伴う、軽度で一時的な炎症とは区別される。

足場材料は、魚皮の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）からのタンパク質を含有している。足場材料内のＥＣＭ成分は、たとえば、構造タンパク質、接着性糖タンパク質、プロテオグリカン、非プロテオグリカン多糖類、およびマトリックス細胞タンパク質を含むことができる。構造タンパク質の例としては、線維状コラーゲン（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、およびＸＩ型）、ファシットコラーゲン（ＩＸ、ＸＩＩ、およびＸＩＶ型）、短鎖コラーゲン（ＶＩＩＩおよびＸ型）、基底膜コラーゲン（ＩＶ型）、および他のコラーゲン（ＶＩ、ＶＩＩ、およびＸＩＩＩ型）などのコラーゲン（ＥＣＭ中で最も豊富なタンパク質）、エラスチン、およびラミニンが挙げられる。接着性糖タンパク質の例としては、フィブロネクチン、テネイシン、およびトロンボスポンジンが挙げられる。プロテオグリカンの例としては、ヘパリン硫酸、コンドロイチン硫酸、およびケラタン硫酸が挙げられる。非プロテオグリカン多糖類の例としては、ヒアルロン酸が挙げられる。マトリックス細胞タンパク質は、細胞表面受容体、サイトカイン、増殖因子、プロテアーゼ、およびＥＣＭとの相互作用を介して細胞機能を調節する、構造上多様な群の細胞外タンパク質である。その例としては、トロンボスポンジン（ＴＳＰ）１および２、テネイシン、およびＳＰＡＲＣ（酸性でシステインが豊富な分泌タンパク質）が挙げられる。

特定の実施形態では、脱細胞化（および他の随意の処理工程）において、魚皮の脂質層から天然に生じる脂質のすべてが除去されるわけではない。したがって、足場材料は、魚皮、特に魚皮の脂質層から１つまたは複数の脂質を含むことができる。たとえば、足場材料は、０．１％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、または２４％ｗ／ｗの脂質などの、（凍結乾燥後の足場材料全体の乾燥重量の）最大で約２５％ｗ／ｗの脂質を含み得る。足場材料中の脂質の存在は、たとえば、有機溶媒抽出およびそれに続くクロマトグラフィーによって確認することができる。適切な有機溶媒の例としては、アセトンおよびクロロホルムが挙げられる。

足場材料中の脂質は、たとえば、脂肪酸アシル（すなわち、脂肪酸、それらの複合体、および誘導体）、グリセロ脂質、グリセロリン脂質（すなわちリン脂質）、スフィンゴ脂質、糖脂質、ポリケチド、ステロール脂質（すなわちステロール）、特定の脂溶性ビタミン、プレノール脂質、および／またはポリケチドを含むことができる。脂肪酸アシルの例としては、多価不飽和脂肪酸などの飽和脂肪酸、脂肪酸エステル、脂肪アミド、およびエイコサノイドが挙げられる。特定の実施形態では、脂肪酸は、（魚油中に高濃度で見られる）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などのオメガ３脂肪酸を含む。魚油に見られる他の脂肪酸は、アラキジン酸、ガドレイン酸、アラキドン酸、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、α－リノレン酸、γ－リノレン酸、ベヘン酸、エルカ酸、およびリグノセリン酸を含む。グリセロ脂質の例としては、モノアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、およびトリアシルグリセロール（すなわち、モノグリセリド、ジグリセリド、およびトリグリセリド）などのモノ、ジ、およびトリ置換グリセロールを含む。グリセロリン脂質の例としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、およびホスファチジルセリンが挙げられる。スフィンゴ脂質の例としては、リンスフィンゴ脂質およびスフィンゴ糖脂質が挙げられる。ステロール脂質の例としては、コレステロール、ステロイド、およびセコステロイド（さまざまな形態のビタミンＤ）が挙げられる。プレノール脂質の例としては、イソプレノイド、カロテノイド、およびビタミンＥやＫなどのキノン類ならびにハイドロキノン類が挙げられる。

足場材料は、抗生物質、防腐剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、抗寄生虫剤、および抗炎症剤などの、１つまたは複数の追加の活性剤（すなわち、足場材料の加工の間または後に加えられる薬剤）を含有することができる。活性成分は、抗酸化剤または薬剤などの、創傷ケアおよび／または組織治癒を促進する化合物または組成物であり得る。これはまた、タンパク質またはタンパク質類および／または他の生物学的物質であり得る。抗生物質、防腐剤、および抗菌剤は、足場材料に効果的な抗菌特性を提供するのに十分な量で加えることができる。特定の実施形態では、抗菌剤は、銀、金、白金、銅、亜鉛、またはそれらの組み合わせなどの、１つまたは複数の抗菌金属である。たとえば、銀は、イオン、金属、元素、および／またはコロイドの形態で加工中に足場材料に加えられ得る。銀は他の抗菌剤と組み合わせてもよい。抗炎症剤は、足場材料が適用される創傷または組織の領域で炎症を軽減および／または抑制するのに十分な量で加えることができる。

足場材料は乾燥した形態で使用することができる。代替的に、足場材料は使用前に再水和することもできる。特定の実施形態では、１つまたは複数の足場材料は一緒に積層されて、より厚い足場材料が形成される。

概して、足場材料は、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、または３．５ｍｍの厚さなどの、約０．１～４．０ｍｍの厚さ（すなわち、断面での厚さ）である。厚さは、出発材料として使用される魚の種類、加工、凍結乾燥、および／または再水和など、多数の要因に依存し得る。もちろん、製品が足場材料の１つを超える層を含む場合、厚さは比例して大きくなる。

創傷処置および方法の実施形態の細断された、脱細胞化魚皮粒子は、利点として、創傷の幾何学的状によく適応するように創傷に対して形成または加えられるように構成されながら、内因性組織などの組織の再生、修復、および／または増殖を促進し得る特性を持つ、無菌の、コラーゲンベースのマトリックスを提供する。実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、シートベースの材料を使用した場合には利用することができない方法で、侵食されたまたはトンネル状の創傷などの創傷に詰め込まれるように構成されている。すなわち、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、組み込みを促進するように構成され得る、すなわち、足場材料で処置されている患者の細胞および組織が足場材料内に増殖することができ、足場材料が実際に患者の身体内に組み込まれる／吸収されるように構成され得る。

実施形態による細断された、脱細胞化魚皮粒子は、実施形態において、細胞内方成長および血管新生など、創傷治癒／修復に関与する細胞に浸潤するための物理的足場として、創傷治癒を積極的に促進するように構成され得る。創傷処置の実施形態の細断された、脱細胞化魚皮粒子は、利点として、たとえば組織学的分析に関して認識可能な細胞外マトリックス（「ＥＣＭ」）を有する脱細胞化魚皮の三次元（「３Ｄ」）構造を保持するように構成されている。細断された、脱細胞化魚皮粒子の寸法は、創傷処置に対する既存のアプローチよりも高い精度で、細断された、脱細胞化魚皮粒子を創傷腔内に成形、包装、またはそうでなければ適用することを促進するようにさらに構成され得る。

実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する。すなわち、細断された、脱細胞化魚皮粒子の長さ、幅、および／または厚さのうちの最大の寸法などの、最大寸法は、１ｍｍなどの最大サイズより小さくなり得、ＥＣＭが破壊されるサイズなどの最小サイズより大きくなり得る。実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、上記したような脱細胞化魚皮のシートを提供し、その後、脱細胞化魚皮のシートを細断し、随意に、細断された、脱細胞化魚皮粒子が所定の最小および最大サイズ閾値内になるまで、細断された粒子を篩い分けることによって得られる。

細断された、脱細胞化魚皮粒子は、それらの寸法を考慮してせん断力に抵抗するようにさらに構成され得、したがって、細断された、脱細胞化魚皮粒子によって、場所またはセット間を移動する、または移動させられる患者に対する、または回復中の歩行などの患者の通常の活動中の創傷処置が改善されることが可能になる。

実施形態の細断された、脱細胞化魚皮粒子は、利点として、創傷に局所適用および／または移植されて、細胞内方成長および血管新生のための足場を提供し得、癒着バリア、軟組織修復、裂開防止などの、組織足場形成の恩恵を含む追加の恩恵をさらに提供し得る。

本開示の実施形態はさらに、創傷を安定化、保護、および／または治癒するためのキットを含む。例示的なキットは、創傷上または創傷内の配置のための、および接触要素によって創傷部位で保持される、粒子形態の細断された、脱細胞化魚皮を含む容器を含むことができる。細断された、脱細胞化魚皮粒子は、乾燥形態または湿潤形態で創傷床上に配置されるように構成され得る。

いくつかの実施形態では、容器は、創傷と接触し、細断された脱細胞化魚皮を創傷において粒子形態で保持するように構成された接触要素と、接触要素および細断された脱細胞化魚皮を創傷において粒子形態で保持するように構成された外側カバーと、をさらに含む。容器はさらに、細断された脱細胞化魚皮を粒子形態で運び、接触要素と関連付けるための基材を含むことができる。容器はまた、鎮痛剤、麻酔剤、サイトカイン、成長因子、止血剤、抗生物質、抗真菌剤、水和化合物、またはそれらの組み合わせを含む、１つまたは複数の治療薬を含み得る。

容器は、所定濃度の食塩水などの液体をさらに含み得、これにより、臨床医は、細断された、脱細胞化魚皮粒子を、乾燥形態での提供の代わりに、またはそれに加えて、湿潤形態で適用するように、創傷の適用の前または間に細断された、脱細胞化魚皮粒子を湿らすことが可能になる。

本開示の実施形態はさらに、創傷を安定化、保護、および／または治癒するための方法にも及ぶ。例示的な方法は、粒子形態での細断された脱細胞化魚皮を創傷に適用することを含むことができる。

細断された脱細胞化魚皮粒子を適用する方法は、壊死組織を除去して清浄な創傷表面を得ること、および／または洗浄して細片および滲出液を除去することなどによって、創傷床を調製する工程と、細断された脱細胞化魚皮粒子を乾燥形態で適用する場合に、細断された脱細胞化魚皮粒子を創傷床上に注ぐかまたはまき散らす工程と、細断された脱細胞化魚皮粒子を湿潤形態で適用する場合に、細断された脱細胞化魚皮粒子を生理食塩水などの液体で湿らせ、その後、指、舌圧子、または他の外科用器具を使用して、湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子を創傷床に適用する工程と、必要に応じて、非付着性ドレッシング、フォーム、ガーゼ、ラップ、および／または他の成分などのドレッシングで創傷床を覆い、固定する工程と、を含み得る。

実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子を創傷に適用することで、細断された、脱細胞化魚皮粒子内の細胞組織の内方成長を促進する足場材料が提供される。実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、創傷に適用されると、せん断力に抵抗する。

実施形態では、臨床医は、細断された脱細胞化魚皮粒子を創傷床に注ぎ、所望の粒子の分散を得ることが可能になるように、創傷処置の実施形態の細断された脱細胞化魚皮粒子を乾燥形態で適用することを選択し得る。他の実施形態では、臨床医は、結果として得たペーストを創傷床の具体的な寸法に成形することが可能になるように、細断された、脱細胞化魚皮粒子を湿潤形態で適用することを選択し得る。実施形態では、湿式および乾式の適用の組み合わせが使用され得る。他の実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子のサイズの組み合わせが使用され得る。

本明細書で使用されるように、「処置」という用語は、その共通の辞書の定義によって理解されるように意図されている。すなわち、「処置」という用語には、広い意味で、病気または傷害のために患者に与えられる医療および／または薬が含まれる。当業者に理解されるように、「処置」には、何かに特定の特性を保存または付与するための化学的、物理的、または生物学的な薬剤の使用が含まれる。したがって、「処置」は、提供される医療（すなわち、方法または一連の規定された行為の形態）であり得るか、または何かに特定の特性を保存または付与するために使用される薬を指し得る。

非限定的な例として、本明細書に開示される脱細胞化魚皮の粒子形態は、「処置」、すなわち、創傷を保存および／または安定化するために使用される、または他の開示された有益な効果のいずれかを創傷部位にもたらすことができる薬と呼ぶことができる。同様に、いくつかの例では、処置には、創傷を安定化および／または保護するための方法内における粒子形態での開示された脱細胞化魚皮の使用が含まれる。

本明細書で使用されるような「脱細胞化」、「脱細胞化魚皮」、「無細胞魚皮」などの用語は、任意の方法によって作られた魚皮を指し、「Scaffold Material for Wound Care and/or Other Tissue Healing Applications」と題される米国特許第８，６１３，９５７号明細書に開示される任意の実施形態を含む。したがって、本明細書で使用されるような「脱細胞化」、「脱細胞化魚皮」、「無細胞魚皮」などの用語は、相当量の細胞内容物および核酸内容物が除去されて、細胞外マトリックス材料（ＥＣＭ）の複雑な三次元間質構造を残す、魚皮を含む。概して、上記した脱細胞化は、多くの場合、過酷な化学処理および／または化学物質（たとえば、抗生物質）中での保管を利用する、他の方法で哺乳類の組織に対して必要とされるおよび／または定期的に実施される処理よりも穏やかな形式の処理である。

米国特許第８，６１３，９５７号明細書に記載される脱細胞化方法は、天然の細胞外マトリックス成分の三次元構造を維持する足場材料の生成を結果としてもたらし、これにより、いくつかの例では、物理媒体によって、幹細胞、および創傷治癒プロセスに寄与する他の細胞は、創傷治癒を促進するために横断して移動し、および／または支持され得る。コラーゲンなどの細胞外成分の天然構造は、オメガ３多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）などの他の天然成分に加えて、脱細胞化魚皮の足場材料内に維持される。

胎盤ベースの創傷処置など、哺乳類の皮膚／膜に由来する他の足場材料は、ウイルスやプリオンの伝染リスクおよびヒトにおける哺乳類の足場材料の使用によるアレルギーまたは他の免疫反応のリスクが懸念されるため、過酷な化学処置を受けている。これらの処置は、細胞外成分の自然な三次元構成を消去するか、またはそうでなければ脱細胞化魚皮と同じ程度または同様の程度に創傷治癒を促進するそれらの機能を損失させる。

他方で、タイセイヨウタラ（Gadus morhua）および多くの他の魚種から人間への疾病伝播のリスクは存在しないか、または少なくともその可能性ははるかに低い。さらに、脱細胞化魚皮は、アレルギーの原因となる成分を含まない傾向があり、アレルギーや他の免疫反応のリスクが大幅に低下する。疾病伝播およびアレルギー反応のリスクが低下するため、脱細胞化魚皮には、細胞外マトリックスの生物学的構造および生物活性化合物を保持する穏やかな処理が施される。したがって、脱細胞化魚皮は、加工中に皮膚細胞が剥がされるが、細胞外成分の天然の三次元構造を維持するため、天然の足場を提供して、創傷治癒を促進する。対照的に、哺乳類の足場材料は、三次元構造を欠いており、他の天然の細胞外成分を失っており、脱細胞化魚皮と同じ方法または同じ程度に創傷治癒を促進することができない。

過酷な物理的および化学的処置を介して採取される再構成されたコラーゲンベースの材料も、特に他の天然の細胞外成分の天然に関連する中で、それらの天然の三次元構造を維持することができない。上記で論じた哺乳類由来の足場材料と同様に、再構成されたコラーゲン材料によって提供された天然構造および／または三次元細胞外マトリックス環境の欠如によって、創傷治癒を促進するための同等のまたは類似した足場を提供することはできない。

図１Ａ～１Ｃの実施形態を参照すると、本開示の実施形態による創傷処置１００、１１０、１２０が示され、説明される。創傷処置１００、１１０、１２０は、１つまたは複数の細断された、脱細胞化魚皮粒子１０２、１１２、１２２を含む。

実施形態では、細断された、脱細胞化魚皮粒子は、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する。すなわち、細断された、脱細胞化魚皮粒子の長さ、幅、および／または厚さのうちの最大の寸法などの、最大寸法は、１ｍｍなどの最大サイズより小さくなり得、ＥＣＭが破壊されるサイズなどの最小サイズより大きくなり得る。

実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子は、上記したような脱細胞化魚皮のシートを提供し、その後、脱細胞化魚皮のシートを細断するかまたは砕き、実施形態において、細断された脱細胞化魚皮粒子が、全体的にまたは実質的に所定の最小および最大サイズ閾値内になるまで、細断された粒子を篩い分けることによって得られる。実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子は、粒子のおよそ７５％以上が、所定の最小サイズ閾値と最大サイズ閾値との間に収まる最大寸法を有する場合に、実施形態において粒子のおよそ９０％以上が、所定の最小サイズ閾値と最大サイズ閾値との間に収まる最大寸法を有する場合に、実施形態において粒子のおよそ９５％以上が、所定の最小サイズ閾値と最大サイズ閾値との間に収まる最大寸法を有する場合に、または適切なように他のパーセンテージがそうである場合に、実質的に所定の最小および最大サイズ閾値内にある。

細断された脱細胞化魚皮粒子１０２は、利点として、サイズが１ｍｍ未満である。すなわち、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１０２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値の１つまたは複数、すなわち、厚さ、長さ、および幅の最大値は１ｍｍ未満である。実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１２２は、平均して、または任意の適切な所定の閾値に従って、１ｍｍ未満である。他の実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１２２はすべて、１ｍｍ未満である。

実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１０２は、いかなる点においても１ｍｍ以下である。これによって、利点として、創傷内にぴったりとフィットするように、粒子化された脱細胞化魚皮粒子の成形性を最大限に高めることが可能になる。

他の実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１１２のサイズは、１～２ｍｍである。すなわち、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１０２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値の１つまたは複数、すなわち、厚さ、長さ、および幅の最大値は２ｍｍ未満かつ１ｍｍ超である。粒子化された脱細胞化魚皮粒子１１２は、それらのサイズにより、利点として、ＥＣＭ構造を保持することができ、依然として臨床医などの従事者によって容易に取り扱うことができる。

別の実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１２２のサイズは、２ｍｍ超である。すなわち、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１２２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値の１つまたは複数は２ｍｍ超であり、すなわち、厚さ、長さ、および幅の最大値は２ｍｍ超である。実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１２２は、平均して、または任意の適切な所定の閾値に従って、２ｍｍ超である。他の実施形態では、粒子化された脱細胞化魚皮粒子１２２はすべて、２ｍｍ超である。別の実施形態では、所定のサイズ閾値は、脱細胞化魚皮の粒子の厚さに関係していない。

粒子化された脱細胞化魚皮粒子１０２、１１２、１２２は、実施形態において、適切な粉砕装置、たとえば、Ｉｄａｒ－Ｏｂｅｒｓｔｅｉｎ，ＧｅｒｍａｎｙのＦｒｉｔｓｃｈ ＧｍｂＨから入手可能な、５０～７００ｒｐｍの可変速度を有するＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ｃｕｔｔｉｎｇ Ｍｉｌｌ Ｐｕｌｖｅｒｉｓｅｔｔｅ １９を使用して、シートベースの脱細胞化魚皮材料を所望のサイズに粉砕することによって得られ得る。

粉砕装置または魚皮の処理は、粉砕したシートベースの脱細胞化魚皮材料を適切なサイズ分布に分離するように構成された１つまたは複数の篩またはフィルタの使用を含み得る。たとえば、篩は、より小さな細断された粒子が通過して容器に達することを可能にしながら、所定の最大サイズ閾値より大きな細断された粒子を捕捉し得る。より小さな細断された粒子が通過して廃棄物容器などの第２の容器に達することを可能にしながら、所定の最小サイズ閾値より大きな細断された粒子を捕捉するために、第２の篩が使用され得る。

特定の実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子は、２ｍｍ～２．８ｍｍの間（すなわち、細断された脱細胞化魚皮粒子１２２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値のうちの１つまたは複数の最大値が、２ｍｍ～２．８ｍｍの間である）、１．４ｍｍ～１．９９ｍｍの間（すなわち、細断された脱細胞化魚皮粒子１２２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値のうちの１つまたは複数の最大値が、１．４ｍｍ～１．９９ｍｍの間である）、１ｍｍ～１．３９ｍｍの間（すなわち、細断された脱細胞化魚皮粒子１２２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値のうちの１つまたは複数の最大値が、１ｍｍ～１．３９ｍｍの間である）、１ｍｍ超（すなわち、細断された脱細胞化魚皮粒子１２２の厚さ、長さ、幅、または他の測定値のうちの１つまたは複数の最大値が、１ｍｍ超である）、または任意の他の適切な寸法のサイズ分布を有し得る。

創傷処置および関連方法の実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子の２つまたはそれ以上のさまざまなサイズの組み合わせが、体積または重量による５０：５０の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による６０：４０の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による７０：３０の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による２５：７５の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による８０：２０の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による９０：１０の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による９５：５の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による９７：３の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による９８：２の第１のサイズと第２のサイズ、体積または重量による９９：１の第１のサイズと第２のサイズ、または任意の他の適切な割合など、本明細書に記載されるサイズまたは閾値の適切な割合で提供される。

さらに、創傷処置および関連方法の実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子の３つまたはそれ以上のさまざまなサイズの組み合わせが、体積または重量による５０：２５：２５の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、体積または重量による６０：２０：２０の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、または他の任意の組み合わせ。体積または重量による７０：１５：１５の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、体積または重量による８０：１０：１０の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、体積または重量による９０：５：５の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、体積または重量による６０：３０：１０の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、体積または重量による７０：２０：１０の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、体積または重量による９０：９：１の第１のサイズ、第２のサイズ、および第３のサイズ、または任意の他の適切な組み合わせなど、本明細書に記載されるサイズまたは閾値の適切な割合で提供される。

１つまたは複数の実施形態では、細断された脱細胞化魚皮粒子の抗ウイルスおよび抗菌特性は、創傷部位での細菌および／またはウイルス感染を防止するように作用し、それによって、潜在的な合併症（たとえば創傷の感染症）を減少させ、および／または本開示による創傷処置および方法の実施形態が使用され得る用途および／または環境の多様性を増加させる。

さらに、細断された脱細胞化魚皮粒子内のオメガ３ ＰＵＦＡの抗炎症（または炎症調節）特性は、創傷部位の炎症を調節する助けになり、いくつかの実施形態では、組織を安定化、保護、および／または治癒する助けになる。

すなわち、オメガ３ ＰＵＦＡは、魚皮内で見られ、脱細胞化処理後も保持される。以前の研究では、オメガ３ ＰＵＦＡが、抗ウイルスおよび抗菌特性を有し、炎症の調節因子としても作用することが示されている。細断された脱細胞化魚皮粒子は、本明細書に記載されるような処理後に、これらの健康的な特性を受け継ぎ、保持し、創傷処置および関連方法の実施形態の細断された脱細胞化魚皮粒子の治癒特性にさらに寄与する。

いくつかの実施形態では、キット（またはそのコンポーネント）は、たとえば、出血している創傷（切り傷、裂傷、および擦過傷）の局所管理および／または重度の出血する創傷または出血性創傷の一時的な管理を含む、トンネル状の／侵食された創傷または他の外傷性創傷における創傷治癒プロセスの安定化、被覆、および／または初期化のために使用することができる。

いくつかの実施形態では、２種類の脱細胞化魚皮製品（たとえば、シートベースおよび細断された脱細胞化魚皮）を複雑な軟部組織の創傷のために加工のために一緒に組み込むシステム、キット、および／または方法の利用を介して、さらなる利点を実現することができる。これらの２種類の魚皮は、各々を組み合わせて使用することができ、異なる用途目的に応じて提供する。

たとえば、深く、非対称で、侵食された創傷には、最適な創傷治癒、出血制御、および高次施設への移行中の感染保護のためのシートで固定する前に、細断された脱細胞化魚皮を充填することができる。シートベースの脱細胞化魚皮シートを備えた二次カバーは、ドレッシング交換中に、細断された脱細胞化魚皮粒子ベースの創傷処置を、せん断力などから保護し、移行中に細菌および止血バリアを追加する。その結果、負傷者は、医療施設への搬送を待つ間に治癒を開始することができ、結果として、後続する移植のためのより質の高い創傷床が得られる。

さらに、細断された脱細胞化魚皮粒子を有するキットは、たとえば、出血を制御し、創傷床を安定させ、皮膚再生プロセスを開始し、微生物の制御を提供する初期処置アプローチを創傷に提供すること、従来の材料では対処のために物理的に最適化されないトンネル状のまたは侵食された創傷のための処置オプションを簡素化すること、深い仙骨の創傷および褥瘡を充填することで、より小さな皮弁を適用することを可能にし、皮弁の成功の可能性を高めること、および自家移植および／または皮弁の作成に備えて創傷を一時的に固定することを含む、１つまたは複数の外科的恩恵を提供することができる。

図２Ａを参照すると、本開示の実施形態による創傷処置のための方法が示され、説明されている。方法２００は、概して創傷処置の乾式適用に対応し、以下の工程の１つまたは複数を含み得るが、必ずしも図示される順序で行われる必要はない。方法２００は、創傷床を調製する工程２０２を含み得る。創傷床は、実施形態において、壊死組織を除去する、および／または創傷床を洗浄して細片および滲出液を除去するなど、創傷床を浄化することによって調製され得る。実施形態では、創傷床を調製する工程２０２は、細断された脱細胞化魚皮粒子が、所定の閾値期間後に統合されないと判定されると、細断された脱細胞化魚皮粒子を含む、以前に適用された創傷処置を除去することを含む。所定の閾値期間は、７日間、１０日間、２週間、または任意の他の適切な閾値期間であり得る。

方法２００は、乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を容器から創傷床に適用する工程２０４をさらに含み得る。乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を適用する工程２０４は、注ぎ、まき散らし、詰め込み、プレス、成形、それらの組み合わせなどの、任意の適切な適用方法を含み得る。

たとえば、工程２０４を実施するとき、臨床医は、乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子の第１の層をパッケージから直接創傷床上に注ぎ、その後、手袋をはめた指など、塗布器を使用して、一つまみの乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を適用して、トンネル状のまたは侵食された創傷などの創傷床の複雑な形状にし得る。臨床医は、トンネル状の創傷などの創傷床によって画定された空隙を実質的にまたは全体的に充填するのに十分な量の乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を適用し得る。実施形態では、工程２０４は、任意の適切な方法で乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を創傷床に適用する前に、乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を清浄なまたは滅菌された容器に注ぐことを含み得る。

方法２００は、創傷床を覆う工程２０６をさらに含み得る。創傷床を覆う工程２０６は、非付着性ドレッシングおよび随意にボルスターを利用するまたは含む被覆物を含み得ることで、細断された脱細胞化魚皮粒子と創傷床との間の接触を確かなものとする。すなわち、創傷床を覆う工程２０６は、細断された脱細胞化魚皮粒子を創傷床に対して押し付けるように、非付着性ドレッシングなどの被覆物を創傷床に対して十分同一平面上に配置することを含み得る。非付着性ドレッシングは、合成不織非付着性ドレッシング、綿織物非付着性ドレッシングなどの任意の適切なドレッシングであり得る。被覆物は任意の適切な被覆物を含み得る。

工程２０６は、代替的または追加的に、創傷床内の湿気を維持し、滲出液を管理するために、フォームまたはガーゼで被覆物を固定することを含み得る。方法２００は、創傷床を包んで被覆物を固定する工程２０８をさらに含み得る。

方法２００は、所定の閾値期間後に、細断された脱細胞化魚皮粒子の統合をチェックする工程２１０をさらに含み得る。たとえば、所定の閾値期間は、粒子が統合する、すなわち細胞内方成長および血管新生を促進するのに十分な時間を与える２週間の期間であり得る。工程２１０の実施時に統合が生じていないと判定された場合、創傷床を調製する工程２０２の一部として、前に適用された細断された脱細胞化魚皮粒子が除去されて、方法２００が繰り返され得る。

図２Ｂを参照すると、本開示の実施形態による創傷処置のための方法が示され、説明されている。方法２５０は、概して創傷処置の湿式適用に対応し、以下の工程の１つまたは複数を含み得るが、必ずしも図示される順序で行われる必要はない。方法２５０は、方法２００に関して上記したように、創傷床を調製する工程２５２を含み得る。

方法２５０は、細断された脱細胞化魚皮粒子を液体で湿らせる工程２５４をさらに含み得る。液体は、所定の濃度の生理食塩水などの任意の適切な液体であり得る。実施形態では、当業者に知られているように、液体は０．９％の生理食塩水であり得る。工程２５４は、１ｃｃ、２ｃｃなどの所定量の液体を加えることを含み得る。

方法２５０は、塗布器を使用して、湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子を創傷床内またはその上に適用する工程２５６を含み得る。工程２５６は、手袋をはめた指、舌圧子、外科用器具、または任意の他の適切な塗布器を使用して、ペーストを創傷床に適用する前に、湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子をペーストに形成することを含み得る。方法２５０と同様に、湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子を適用することは、臨床医は、トンネル状の創傷などの創傷床によって画定された空隙を実質的にまたは全体的に充填するのに十分な量の粒子を適用することを含み得る。他の実施形態では、工程２５６は、空隙を充填することに加えて、またはその代わりに、湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子の層を創傷床上に適用することを含む。

方法２５０は、工程２０８に関して上記したようなドレッシングを固定する工程２０６、２６０に関して上記したように、湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子が適用された創傷床を覆う工程２５８、および／または方法２００の工程２１０に関して上記したように統合をチェックする工程２６２をさらに含み得る。

図３Ａ～３Ｃを参照すると、本開示の実施形態による創傷処置の適用が示され、説明されている。図３Ａは、本開示の創傷処置のために調製された創傷床ＷＢを示す。図３Ａの創傷床ＷＢは、１つまたは複数の深領域を有する創傷床である。図２Ａおよび２Ｂに関して上記したように、創傷床ＷＢは、最初に壊死組織を除去し、創傷床ＷＢを洗浄して細片および滲出液を除去することによって調製され得る。

その後、（最初に包装から除去され、滅菌容器Ｃに加えられた）１つまたは複数の乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子を含む創傷処置３００が、図３Ｂに示されるように創傷床ＷＢに適用される。創傷処置３００は、手袋をはめた指、手術器具などのような塗布器を使用するなどして、注がれ得るか、まき散らされ得るか、詰め込まれ得るか、または他の方法で適用され得る。創傷処置３００は、創傷床ＷＢの１つまたは複数の深領域を実質的に充填するのに十分な量で加えられ得る。

図３Ｃは、創傷床ＷＢの１つまたは複数の深領域を実質的に充填するように適用された創傷処置３００を有する創傷床ＷＢを示す。創傷処置３００によって、利点として、臨床医がシートベースの脱細胞化魚皮材料を所定のサイズに切断するという大がかりで時間のかかる作業を行うことなく、複雑な幾何学的形状を有する創傷床ＷＢに足場材料を充填することを可能にする。さらに、創傷処置３００は、利点として、簡単な適用手順を使用して、１つまたは複数の深領域を含む複雑な幾何学的形状を充填する。創傷処置３００を提供することによって、細断された脱細胞化魚皮粒子は、利点として、創傷の複雑な幾何学的形状全体にわたって細胞内方成長を容易にすると同時に、それによって提供されるオメガ３ ＰＵＦＡの抗ウイルスおよび抗菌の恩恵も提供する。

ここで図４Ａ～４Ｆを参照すると、本開示の実施形態による創傷処置の適用が示され、説明されている。創傷処置４００は、図２Ｂの方法２５０に関して上記したように、湿潤または湿らせた形態で創傷床に適用される。上記したような適切なサイズ分布の細断された脱細胞化魚皮粒子を含む創傷処置剤４００は、パッケージ４０２で提供され得る。パッケージ４０２は、パッケージ４０２によって画定される内部ポケット内に０．９％の生理食塩水などの液体４５０を受け入れるのに適した、ポリマー材料などの任意の適切な材料で形成され得る。液体４５０は、シリンジ４５２または他の装置などの任意の適切なモダリティを使用して送達され得る。実施形態では、シリンジ４５２は、臨床医が、１ｃｃまたは２ｃｃなどの所定量の液体４５０を提供することを可能にする印を画定し得る。パッケージ４０２は、液体４５０が加えられると、臨床医が、乾燥した細断された脱細胞化魚皮粒子４００を視認し得るように、透明なまたはシースルーの材料で形成され得る。図４Ｂを参照すると、パッケージ４０２は、臨床医が中の湿らせた魚皮粒子４００にアクセスすることが可能になるように、層を剥がすなどによって開けられるように構成され得る。

湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子４００は、図４Ｃに示されるように、手袋をはめた指など、任意の適切な塗布器を使用してペースト４０４に形成され得る。これは、パッケージ４０２内またはその上、眼滅菌表面上、または任意の他の適切な位置で実施され得る。

図４Ｄを参照すると、創傷処置４００の適用のための創傷床ＷＢが示されている。創傷床ＷＢは、トンネル状のおよび／または侵食された創傷などの複雑な幾何学的形状を画定し得、および／またはシートベースの脱細胞化魚皮が不適切であるおよび／または適用するのが困難であるように配置され得る。図４Ｅに見られるように、ペースト４０４は、塗布器ＡＰＰを使用して創傷床ＷＢに適用される。塗布器ＡＰＰは、手袋をはめた指、舌圧子、外科用器具などであり得る。実施形態では、ペースト４０４の適用は、創傷床ＷＢによって画定される空隙を充填または実質的に充填するように、ペースト４０４を創傷床ＷＢ内に圧入するまたは詰め込むことを含む。細断された脱細胞化魚皮粒子のサイズのため、創傷処置４００のペースト４０４は、創傷床ＷＢの幾何学的形状にぴったりと沿うように構成されている。

図４Ｆに見られるように、創傷床ＷＢは、実施形態では、ペースト４０４を用いて、皮膚表面まで充填され得る。湿らせた細断された脱細胞化魚皮粒子の適用は、利点として、創傷処置４００の成形性、形状維持、柔軟性、および除去可能性を助け得る。創傷処置への既存のアプローチは適用中に適所から漏れ出る傾向があるが、ペースト４０４は、驚くべきことに、適所に保持され、その形状を維持し、それによって創傷処置の有効性を向上させることが判明した。これにより、創傷処置の無駄がさらに削減される。

図５Ａ～５Ｃを参照すると、創傷床ＷＢが示されている。図５Ａの創傷床ＷＢは、不均一で深い領域を有する中程度から大きなサイズの創傷である。創傷処置５００は、乾燥または湿潤状態で創傷床ＷＢに適用され得、創傷床の所望の部分を充填する、または実質的に充填するのに十分な量で適用され得る。図５Ａ～５Ｃの実施形態では、シートベースの脱細胞化魚皮材料５５０を適用するさらなる工程が実施される。シートベースの脱細胞化魚皮材料は、米国特許第８，６１３，９５７号明細書に教示されるような足場であり得る。シートベースの脱細胞化魚皮材料５５０は、利点として、それ自体が創傷治癒、細胞内方成長、および血管新生を促進しながら、創傷処置５００を適所に有利に保持する。１つまたは複数のファスナー５５２は、シートベースの脱細胞化魚皮材料５５０を創傷床ＷＢに相対する適所に保持する。

図６Ａ～６Ｃを参照すると、創傷床ＷＢが示されている。図６Ａの創傷床ＷＢは、深い創傷であり、その深さのために既存のシートベースの足場材料には適していない。本開示の実施形態による創傷処置６００は、創傷処置６００が創傷床ＷＢ全体を充填または実質的に充填するように、外科用器具などの塗布器ＡＰＰを使用して創傷床ＷＢに加えられ得る。創傷処置６００の細断された脱細胞化魚皮粒子の寸法が要因で、創傷処置６００は、創傷床内に足場材料を提供して、複雑な創傷の幾何学的形状全体にわたって細胞内方成長を促進しながら、無駄、コスト、および時間を削減して、創傷床ＷＢに容易に、迅速に、および効果的に加えられ得る。図６Ｃに見られるように、新しい組織ＮＴが、最終的に創傷処置６００から得られる。

図７Ａ～７Ｃを参照すると、不規則な形状を有する創傷床ＷＢが示されている。ＷＢは、異なる形状および深さの複数の創傷床を含み、既存の創傷処置の適用を複雑にしている。図７Ｂに見られるように、創傷処置７００は、創傷処置７００が創傷床ＷＢの複雑な幾何学的形状に実質的に適合するように、乾式または湿式のいずれかで本明細書に記載されるように複数の創傷床ＷＢに適用される。これは、細断された脱細胞化魚皮粒子の寸法のおかげで、最小限の労力、時間、無駄で行うことができ、それらのサイズが小さいにもかかわらず（これはそれらを創傷床に詰め込むことを可能にする）、創傷床ＷＢに健康的なオメガ３ ＰＵＦＡも提供しながら、細胞内方成長および血管新生を促進する足場材料を提供する。

図５Ａ～５Ｃの実施形態と同様に、シートベースの脱細胞化魚皮材料７５０を適用するさらなる工程が実施される。シートベースの脱細胞化魚皮材料７５０は、米国特許第８，６１３，９５７号明細書に教示されるような足場であり得る。シートベースの脱細胞化魚皮材料７５０は、利点として、それ自体が創傷治癒、細胞内方成長、および血管新生を促進しながら、創傷処置７００を適所に有利に保持する。１つまたは複数のファスナー７５２は、シートベースの脱細胞化魚皮材料７５０を創傷床ＷＢに相対する適所に保持する。

外傷性創傷を安定化および／または保護するための一時的な創傷処置
１つまたは複数の他の実施形態では、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を含む一時的な創傷処置が提供される。好ましくは、粉砕された脱細胞化魚皮の粒子形態は、一時的な創傷処置中に創傷部位で細胞足場形成を最小限に抑えるように構成されている。

これによって、実施形態において、創傷を安定化および／または保護する一時的な創傷処置、たとえば、後続するまたはより高いレベルのケアを受ける準備が容易になる。たとえば、一時的な創傷処置は、臨床医が、さらなる処置のために創傷処置を除去するまで、創傷を保護および保存するように構成され得る。細胞足場形成を最小限に抑えることによって、一時的な創傷処置は、創傷を悪化させたり、必要な細胞および血管の成長および構造を除去したりすることなく、除去され得る。

いくつかの実施形態では、一時的な創傷処置は、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に送達するように構成および配置された一時的なドレッシングをさらに含む。一時的なドレッシングは、たとえば、創傷と接触し、粉砕された脱細胞化魚皮を創傷で保持するように構成された接触層と、接触層と関連付けられ、接触層を創傷で保持するように構成された外側カバーと、を含むことができる。

創傷を安定化および／または保護するための一時的な創傷処置はまた、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を注入された、またはそうでなければ運ぶ生体適合性ポリマーなどの基材を含むことができる。追加的にまたは代替的に、創傷を安定化および／または保護するための一時的な創傷処置は、外側カバーを創傷の形状および／または創傷を含む部分的または全体的な手足の形状に適合させるように構成されている外側カバーに関連付けられた圧縮要素を含むことができる。圧縮要素は、たとえば、膨張可能な袋を有するスリーブを含むことができる。いくつかの実施形態では、一時的な創傷処置は、スリーブの底部または周壁に配された、および接触層と関連付けられた基材を含むことができる。

一時的な創傷処置内の粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、直径約１ｃｍより小さく、直径約０．１ｃｍよりも小さく、直径約１０ｍｍより小さく、直径約１ｍｍより小さく、直径約０．１ｍｍより小さく、直径約１０μｍより小さく、直径約１μｍより小さく、またはそれらの組み合わせであり得る。追加的にまたは代替的に、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子の剛性を低下させるように（１つまたは複数の）酵素で処理することなどによって部分的に加工することができる。いくつかの実施形態では、そのような部分的加工は、部分的に加工され、粉砕された脱細胞化魚皮粒子内の細胞外マトリックス材料の少なくとも一部を（１つまたは複数の）酵素によって切断させ、部分的に加工され、粉砕された脱細胞化魚皮粒子の延性および／または弾性を増大させることができる。

本開示の実施形態はさらに、創傷を安定化および／または保護するためのキットを含む。例示的なキットは、創傷上または創傷内の配置のための、および接触要素によって創傷部位で保持される、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を含む容器を含むことができる。

いくつかの実施形態では、容器は、創傷と接触し、粉砕された脱細胞化魚皮を創傷において粒子形態で保持するように構成された接触要素と、接触要素および粉砕された脱細胞化魚皮を創傷において粒子形態で保持するように構成された外側カバーと、をさらに含む。容器はさらに、粉砕された脱細胞化魚皮を粒子形態で運び、接触要素と関連付けるための基材を含むことができる。容器はまた、鎮痛剤、麻酔剤、サイトカイン、成長因子、止血剤、抗生物質、抗真菌剤、水和化合物、またはそれらの組み合わせを含む、１つまたは複数の治療薬を含み得る。

本開示の実施形態はさらに、創傷を安定化および／または保護するための方法にも及ぶ。例示的な方法は、粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に適用することを含むことができる。

いくつかの実施形態では、創傷を安定化および／または保護するための方法は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷で保持するように構成された接触要素で創傷を覆う工程と、創傷を含む部分的または全体的な手足に接触要素を固定するために接触要素に外側カバーを適用する工程と、を含むことができる。いくつかの実施形態では、粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に適用することでは、粒子形態での脱細胞化魚皮内の細胞組織の内方成長は促進されない。

本開示の実施形態はさらに、清浄でないおよび／または創面切除されていない創傷部位の処置のためのドレッシングにまで及ぶ。例示的なドレッシングは、粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮を含むことができる。粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮は、創傷部位への適用前に再水和することができる。ドレッシングはまた、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を、それを深創傷中に圧縮することができる、深創傷などの創傷部位において粒子形態で固定するための被覆物を含むことができる。

したがって、創傷を安定化および／または保護するための一時的な創傷処置、ドレッシング、キット、および方法が開示される。

四肢の出血を含む、現在の入院前の戦場での外傷のケアは、負傷した兵士が最終的な処置を受けられるようになるまで出血を制御することだけに焦点を当てている。これらの処置は、圧迫と止血帯の適用、およびガーゼと止血ドレッシングで創傷を覆うことで構成される。しかし、負傷した兵士に対する避難時間は増加すると予想されており、いくつかの例では、兵士が既に避難に数日かかる遠隔地に配置されており、より高度な避難前処置の必要性が高まっている。出血の制御に加えて、感染を予防し、さらなる組織損失を最小限に抑え、下層の組織／臓器を保護し、虚血および二次傷害を減少させ、痛みや苦痛を軽減する、避難前処置が必要とされている。

組織状態の保存は、壊死、デブリードマン、または切断によって引き起こされる（創傷周囲の組織を含む）損傷組織の損失を最小限に抑えるために重要であり、患部を回復させることができる可能性を最大限にするためにも重要である。外傷を迅速かつ適切に処置することができる場合、創傷部位でのまたはその周囲の構造および／または機能の損失を最小限に抑えながら、患部を回復させることができる可能性がより高くなる。しかし、外傷性創傷を適切に処置し、リハビリテーションからの前向きな結果を最大限に高めるために必要とされる医療施設および設備は、多くの場合、常設病院で、または場合によっては、集中化された野戦病院内で利用可能である。

戦場などの遠隔地で外傷性創傷を負った場合、負傷者を適切な処置施設に搬送するのに必要な長期間にわたって損傷組織を保存することは困難である。いくつかの例では、負傷した兵士を適切な処置施設に搬送するのに数日かかり得る。結果として、遠隔地で受けた外傷性創傷は、高度の組織壊死を伴い、処置前に組織デブリードマンのより広い領域が必要とし、切断およびより不良なリハビリテーションの結果につながる可能性が高い。

本開示の実施形態は、創傷、特に外傷性創傷、火傷、および／または切断の長期にわたる現場処置を可能および改善し、損傷組織の安定化および／または保存を可能にする。本開示の実施形態は、損傷した組織の損失を減少させ、および／または創傷の回復に成功することができる可能性を高める処置およびそれに関連するキットを含む。これは、少なくとも部分的に、創傷部位での粉砕された脱細胞化魚皮の粒子形態の組み込みから可能にされる。創傷部位に適用されると、粉砕された脱細胞化魚皮の粒子形態は、創傷部位を安定化および／または保存するように作用する。粒子は、清浄でない創傷および／または創面切除されていない創傷にその場で適用することができ、感染を軽減し、創傷に関連する痛みを軽減し、および／または創傷デブリードマンを繰り返す必要性を減少させるために有益に作用することができる。本明細書に開示される実施形態は、自家移植の可能性が増大させる、効果的な自家移植または皮弁閉鎖のために創傷を調製するために使用することができる。

利点として、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、実施形態において、新たに成長させられた細胞構造を損傷させることなく、後続する処置中に、一時的な創傷処置が除去され得るべく、細胞足場形成を最小限に抑えるように構成されている。

本明細書で使用されるように、「処置」という用語は、その共通の辞書の定義によって理解されるように意図されている。すなわち、「処置」という用語には、広い意味で、病気または傷害のために患者に与えられる医療および／または医薬が含まれる。当業者に理解されるように、「処置」には、何かに特定の特性を保存または付与するための化学的、物理的、または生物学的な薬剤の使用が含まれる。したがって、「処置」は、提供される医療（すなわち、方法または一連の規定された行為の形態）であり得るか、または何かに特定の特性を保存または付与するために使用される薬を指し得る。

非限定的な例として、本明細書に開示される脱細胞化魚皮の粒子形態は、「処置」、すなわち、創傷を保存および／または安定化するために使用される、または他の開示された有益な効果のいずれかを創傷部位にもたらすことができる薬と呼ぶことができる。同様に、いくつかの例では、処置には、創傷を安定化および／または保護するための方法内における粒子形態での開示された脱細胞化魚皮の使用が含まれる。

上述したように、創傷治癒を促進するための基礎となるのは、細胞の浸潤および成長のための足場として作用する細胞外マトリックス成分の天然の三次元構造である。しかし、足場として作用するために、脱細胞化魚皮が適用される前に、創傷部位は、通常、壊死組織を除去され、浄化される。死滅または損傷した皮膚の除去によって、表皮下組織に直接アクセスすることが可能になり、その上に新しい皮膚層を形成することができる。したがって、細胞内方成長にとって好ましくない条件または寸法でインタクトな脱細胞化魚皮を使用したり、さらには天然の細胞外マトリックス成分の三次元構造を破壊したりすることは、常識に反することであり、一見望ましくないように思われる。

しかし、驚くべきことに、本明細書に開示されるような、脱細胞化魚皮の機械的粉砕、および汚れた、創面切除されていない創傷に対する、その後続する粒子形態での使用は、結果として、いくつかの予期せぬ利点をもたらす。粒子形態での脱細胞化魚皮の健康的な特性の多くは、足場材料として使用されるときの脱細胞化魚皮の組織修復特性から独立しており、粉砕された脱細胞化魚皮の粒子形態は、組織を実質的には修復しないものの、利点として組織を保存するために利用することができる。

たとえば、出願人は、本明細書に開示される１つまたは複数の他の要素の有無にかかわらず、本開示の実施形態による、創傷部位での粉砕された脱細胞化魚皮粒子の適用が、創傷治癒／修復に関与する細胞の浸潤のための物理的足場として創傷治癒を積極的に促進する代わりに、創傷および周囲の組織を安定化および／または保護する予期せぬ効果をもたらす。

これらの驚くべき予想外の創傷の保存および安定化の特性は、実施形態の粉砕された脱細胞化魚皮粒子を、新たな、これまで予想されていないシナリオで利用することを可能にし、いくつかの実施形態では、脱細胞化魚皮足場についてこれまでに想定されていたものとは異なる目的を果たすために使用され得る。たとえば、粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮は、一時的なドレッシングの部分として使用することができ、ここで、さらなる処置が施されるまで脱細胞化魚皮粒子は創傷を安定化させるように作用する。

いくつかの実施形態では、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、汚れた（たとえば、清浄でないまたは創傷面切除されていない）創傷に直接適用され、創傷が浄化され、創面切除され、および適切に設備が整えられ、スタッフが配置された医療施設で処置され得るまで、創傷を安定化および／または保護する。粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮は、特に足場材料として創傷治癒を促進することを意図したものではない。代わりに、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、創傷部位に提供され、後に後続する処置前の創傷の浄化／創面切除中に除去される。本明細書に記載されるように、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、有益なことに、創傷の止血特性を向上させて、失血を管理し／減少させ、創傷部位での適切な湿潤環境を維持して組織へのさらなる損傷による乾燥を防ぐ助けとなり、抗菌性および抗ウイルス性の防御を提供し、炎症を調節し、いくつかの例では痛みを軽減する。

これは、長期の創傷治癒処置のための細胞内方成長を促進する足場材料として主に使用され、特に利点がある脱細胞化魚皮の他の用途および実施形態とは対照的である。脱細胞化魚皮の足場形成が、清浄なおよび創面切除された創傷に適用されたが、創傷治癒プロセス中（たとえば数日後）に除去された場合、創傷は足場材料として少なくとも部分的に再び開かれ、それと挿入される／関連付けられるすべての創傷治癒細胞が、創傷部位から引き剥がされる。このような作用は、創傷部位を安定化および／または保護する代わりに、それに対してさらなる外傷を引き起こし、問題を悪化させる可能性がある。

他方で、実施形態による粒子形態への脱細胞化魚皮の粉砕は、脱細胞化魚皮足場を変形させ、たとえば、汚れた創傷および／または創面切除されていない創傷に対する、創傷部位を一時的に保存し、その後創傷を処置することができる遠くの医療施設への負傷者の搬送を可能にする止血剤としての使用を含む、追加の処置上の恩恵および選択肢を可能にする。粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、特別な医学的訓練を必要とせずに現場で簡単に使用することができる。粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、基材の有無にかかわらず、または一時的なドレッシングの一部としても、創傷を安定化および／または保護するために含めることができる。これによって、現場でのケア処置の改善および／または長期化が可能になり、とりわけ、患部のリハビリテーションの可能性が高まる。

さらに、粉砕によって、非粉砕形態よりも脱細胞化魚皮をより動的かつ迅速に創傷部位に適用することが可能になる。いくつかの実施形態では、これによって、脱細胞化魚皮の止血特性、バリア機能特性、および／または鎮痛特性などの、いくつかの健康的な特性が、処置においてより顕著に現れることが可能になる。

本明細書で使用されるように、用語「粉砕」は、物質をより小さな断片または粒子に縮小する動作を指す。粉砕は、限定することなく、機械的な力（たとえば、切断、細断、引き裂き、破砕、せん断、砕き、ジェットミリングなど）、集中した熱（たとえば、レーザー切断）、物質を断片または粒子に縮小するための任意のプロセスまたはメカニズム、またはそれらの組み合わせを含む、任意のプロセスまたは力によって行われ得る。たとえば、非常に鋭利なブレードおよび／または低ＲＰＭミルを使用して、脱細胞化魚シートを粒子形態に粉砕することができる。

したがって、「粉砕された」という用語は、本明細書では、粉砕を受けた物質および／または結果として生じる生成物の物理的特性を指すために使用され得る。したがって、本明細書で使用されるような「粉砕された脱細胞化魚皮」という用語は、脱細胞化魚皮の物理的特性、すなわち、脱細胞化魚皮がより小さな断片または粒子として表されることを示し得るか、または追加的にまたは代替的に、結果として生じる生成物、すなわち脱細胞化魚皮が断片または粒子にされたことを示し得る。いくつかの実施形態では、粉砕は、脱細胞化魚皮の物理的サイズを少なくとも一次元で縮小させるが、粒子の超微細構造には影響を与え得ないことが理解されるべきである。すなわち、粉砕された脱細胞化魚皮のいくつかの実施形態は、物理的にサイズが縮小されるが、それらの三次元細胞外構造を保持する。

粉砕された粒子のさまざまな形態は、篩または穴フィルタを使用して分離することができるか、またはそうでなければ粉砕の方法に基づいて選択することができる。

上記に加えて、および背景技術で簡単に説明したように、戦闘地域に配置された兵士は爆発創による傷害の危険性が高くなる。将来の紛争では、遠隔地、都市環境、ならびに通信および制空権が縮小された他の状況での戦闘により、負傷した兵士の搬送がますます困難になる可能性がある。この戦闘環境の変化により、現在の標準ケアでは実用的ではない可能性があるため、現場での傷害を処置するための代替の解決策が必要とされる。

同様に、（たとえば、重機の使用、狩猟事故、全地形対応車の衝突または横転に関連した傷害などから結果として生じる）地方で受けた創傷は、病院または専門の医療現場への連絡が困難であるかまたは時間がかかる環境で被った傷害を処置するための代替の解決策から恩恵を受けることができる。

特に、頑丈かつロバストで（たとえば、長い半減期、極端な温度および条件での安定性）、軽量で、小型で、搬送が容易で、傷害箇所での取り扱いが簡単かつ迅速で、外部電源または特殊な機器にほとんどまたはまったく依存せず、モジュール式で相互運用可能な（たとえば、現在のケアのアプローチと統合することができる）、創傷ケアの解決策が必要とされている。

本開示の実施形態は、前述の課題の１つまたは複数を解決し、前述の所望の特性のすべてではないにしても多くを示すことができる。たとえば、粉砕された脱細胞化魚皮粒子の供給源を含むキットは、創傷（たとえば戦闘関連の外傷性創傷）の保存および／または安定化のために現場で使用することができる。

たとえば、粉砕された脱細胞化魚皮は、負傷した兵士の非対称深部組織創傷に詰められた場合、止血剤、抗菌剤としての用途があり、真皮の再生を開始することができる。これは、同様の恩恵が従来から実現されている最先端の医療施設の代わりに、現場においておよび／または傷害箇所に近い現場ベースの医療施設で実現することができる。

いくつかの実施形態では、脱細胞化魚皮のシートを、粉砕された脱細胞化魚皮と組み合わせて、または単独で使用して、創傷部位を覆うための速効性の止血特性および抗菌特性を提供することができる。シートベースの粉砕された脱細胞化魚皮は、組み合わせて使用するときに、創傷床の肉芽形成の強化などの、シートベースの生成物単独の使用では実現されない恩恵をもたらすことができ、創傷が早期の移植または皮弁手術により適したものになり、および／または最終的にはより良好な機能的および審美的な結果をもたらすだけでなく、創傷治癒率の向上などの長期的な恩恵ももたらされる。

本明細書に開示される実施形態が、特に、準最適な医療ケアおよび／またはインフラストラクチャが、深部組織創傷などの外傷性創傷の理想的な処置を妨げ得る地方の地域において、公での使用（たとえば、ショックおよび外傷センター）にも直接応用することができることは容易に理解されるべきである。

例示的な実施形態
本開示の実施形態は、長期および途上のケアのために、深部組織創傷の安定化、被覆、および／または組織再生の初期化のための、現場で使用可能な装置、キット、および組成物を提供する。

ここで図８および図９Ａを参照すると、粉砕および／または他の処置前の脱細胞化魚皮８００、９００の例示的な実施形態が例示されている。米国特許第８，６１３，９５７号明細書に記載されるように作られた脱細胞化魚皮８００の例示的な断面が、ユーザの手袋をはめた手８０２に関連して与えられたサイズで図８に例示されている。

脱細胞化魚皮は、粉砕されるか、またはさまざまなサイズに加工され得ることが理解されるべきである。図２Ａに示されるように、複数の脱細胞化魚皮シート８００、９００は、図８の脱細胞化魚皮８００と同様のサイズおよび形状（たとえば長方形）にすることができるか、または図９Ａに例示される脱細胞化魚皮シート９００などの、より均一な寸法（たとえば、正方形）形状を有することができる。

図８および９Ａに示される脱細胞化魚皮足場８００、９００は、凍結乾燥された形態では実質的に硬質であり、非弾性である。脱細胞化魚皮足場は、その延性および／または弾性を増加させるように作用する１つまたは複数の酵素で処理することができる。いくつかの実施形態では、酵素は、創傷の保存および／または安定化にとって重要な健康的な特性に実質的に影響を与えることなく、相互接続された細胞外マトリックス成分を切断することによって作用する。いくつかの実施形態では、酵素は、エラスチン、プロテオグリカン、コラーゲン、または他の細胞外マトリックス材料内および／またはそれらの間の共有結合を切断するが、修飾された脱細胞化魚皮は、たとえその天然の三次元構造から部分的に除去されたとしても、細胞外マトリックスの内容物のかなりの部分を保持する。

いくつかの実施形態では、酵素処理は、足場材料としての修飾された脱細胞化魚皮の使用に悪影響を与える。しかし、驚くべきことに、足場材料としての機能の喪失が、創傷の保存および安定化の材料としての脱細胞化魚皮の使用にそれほど影響を及ぼさないことが理解されるべきである。したがって、材料の延性および／または弾性は、細胞外成分の組成を維持しながら高められ得、これが創傷治癒のための足場としての材料の使用に悪影響を与え得るにもかかわらず、修飾された脱細胞化魚皮は、それでもなお創傷の保存／安定化の材料として機能することができる。

脱細胞化魚皮足場は、粉砕されて、粒子の形態で提供され得る。個々の粉砕した粒子のサイズが、粉砕の種類および／または方法に応じて変化し得ることが理解されるべきである。たとえば、脱細胞化魚皮粒子は、指定されたサイズ未満の粒子を出力するように設計されたジェットミリングプロセスを介して作成することができる。いくつかの実施形態では、脱細胞化魚皮は、切断、細断、または粉砕されて粒子にされ、これは均一な粒子を作成するために測定される方法で行われ得るか、または大まかに行われてもよく、それによってさまざまな異なるサイズの粒子が生成される。

一実施形態では、脱細胞化魚皮の粉砕は、脱細胞化魚皮のシートを直径１ｃｍ未満の断片および／または粒子に機械的に切断することによって行われる。代替的にまたは追加的に、脱細胞化魚皮の粉砕は、大麻グラインダーなどの機械式グラインダーを使用して行われる。

粉砕から結果として生じる断片および／または粒子の直径は、約０．１ｃｍ未満、約１０ｍｍ未満、約１ｍｍ未満、約０．１ｍｍ未満、約１０μｍ未満、約１μｍ未満、またはそれらの組み合わせであり得る。すなわち、いくつかの実施形態では、断片および／または粒子の直径は変動し得、前述の寸法の任意の組み合わせ間のサイズの範囲として定義されている。いくつかの実施形態では、粒子はサイズ分離され得る。

いくつかの実施形態では、粒子のサイズは均一であり得るか、または均一なもしくは変動するサイズの範囲内であり得る。たとえば、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、嵩高い粒子を保持し、篩メッシュサイズよりも小さい粒子の通過を可能にする、１つまたは複数の篩またはスクリーンに通してサイズを選択することができる。篩を通過する粒子は、第１の篩の篩メッシュサイズに上限閾値を有する範囲のサイズ内にある。いくつかの実施形態では、追加の（または一連の）（１つまたは複数の）サイズ選択篩を使用して、粒子サイズをさらに精練することができる。

たとえば、低ＲＰＭで処理する鋭利なブレードのミルを使用して、脱細胞化魚皮を粉砕することができる。ミルは穴フィルタと関連付けることができ、生成物の比較的信頼性の高いサイズ選択が可能になる。このような実施形態では、温度を制御した低ＲＰＭミルによってスケールアップが容易にされ得る。

前述の例に引き続き、第１の篩を通過した脱細胞化魚皮粒子は、今上限閾値サイズによって定義されているが、より小さなメッシュサイズを有する篩上でまたは篩を通してフィルタ処理することができる。サイズが小さい（たとえば、第２の篩を通過する）粒子は、第２の篩によって保持される粒子の上限閾値サイズよりも小さい上限閾値の粒子サイズを有する。第２の篩によって捕捉される粒子は、ここで、下限閾値の粒子サイズによって追加で定義される。

さまざまな粒子サイズは、さまざまな恩恵をもたらし得、粒子サイズに基づいてさまざまな用途のために選択され得る。追加的にまたは代替的に、さまざまな粒子サイズによってもたらされる組み合わされた効果を得るために、さまざまな粒子サイズの組み合わせが選択され得る。いくつかの実施形態では、粒子は、１ｃｍ、１０ｍｍ、８ｍｍ（２ １／２メッシュ）、６．７３ｍｍ（３メッシュ）、５．６６ｍｍ（３ １／２メッシュ）、４．７５ｍｍ（４メッシュ）、４．００ｍｍ（５メッシュ）、３．３６ｍｍ（６メッシュ）、２．８３ｍｍ（７メッシュ）、２．３８ｍｍ（８メッシュ）、２．００ｍｍ（９メッシュ）、１．６８ｍｍ（１０メッシュ）、１．４１ｍｍ（１２メッシュ）、１．１９ｍｍ（１４メッシュ）、１．００ｍｍ（１６メッシュ）、０．８４１ｍｍ（２０メッシュ）、０．７０７ｍｍ（２４メッシュ）、０．５９５ｍｍ（２８メッシュ）、０．５００ｍｍ（３２メッシュ）、０．４２０ｍｍ（３５メッシュ）、０．３５４ｍｍ（４２メッシュ）、０．２９７ｍｍ（４８メッシュ）、０．２５０ｍｍ（６０メッシュ）、０．２１０ｍｍ（６５メッシュ）、０．１７７ｍｍ（８０メッシュ）、０．１４９ｍｍ（１００メッシュ）、０．１２５ｍｍ（１１５メッシュ）、０．１０５ｍｍ（１５０メッシュ）、０．０８８ｍｍ（１７０メッシュ）、０．０７４ｍｍ（２００メッシュ）、０．０６３ｍｍ（２５０メッシュ）、０．０５３ｍｍ（２７０メッシュ）、０．０４４ｍｍ（３２５メッシュ）、０．０３７ｍｍ（４００メッシュ）、０．０２５ｍｍ（５００メッシュ）のサイズの開口部、上記のサイズより大きなサイズの開口部（たとえば、１ｃｍより大きい）、上記のいずれかの間のサイズの開口部（たとえば、０．０２５ｍｍから１０ｃｍの間の任意のサイズ）、または上記のサイズより小さなサイズの開口部（たとえば、０．０２５ｍｍ未満）を有する１つまたは複数の篩の通過および／またはそれらによる保持によって定義される上限および／または下限の閾値を有することができる。

したがって、粉砕後、粉砕された脱細胞化魚皮は、同じおよび／または異なる形状、同じおよび／または異なる厚さ（および／または同じおよび／または異なる幅および／または長さ）、ペレット形状、フレーク、粉末（または粉末状）、混合物／溶液中のコロイドとして懸濁したもの、それらの組み合わせ、および／または任意の他の物理的状態であり得る。一実施形態では、粉砕された脱細胞化魚皮は、創傷に適用される前および／または一時的なドレッシングとして使用される前に、溶液中で平衡化される。溶液の例としては、生理食塩水、水、アルコール、抗生物質溶液、水和化合物、および／または１つまたは複数の治療薬が添加（または溶解）されたまたは添加されていない任意の水溶液が挙げられ、いくつかの実施形態では、溶液は滅菌され得る。

一実施形態では、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、創傷での表面層および／または接触層もしくは基材内に適用される／それらと共に適用される、および／またはそれらに注入される一時的なドレッシングの部分である。本開示の目的のために、適切な場合、粉砕された魚皮粒子の使用を開示する実施形態が、追加的にまたは代替的に、脱細胞化魚皮または修飾された脱細胞化魚皮（たとえば、延性／弾性が増大した酵素処理された脱細胞化魚皮）を組み込み得るか、または使用し得ることが理解されるべきである。追加的にまたは代替的に、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、一時的なドレッシングを適用する前に、別個のまたは異なる処置として（たとえば、創傷上にまき散らすか、または創傷を被覆することによって）創傷に投与され得る。

図９Ｂは、脱細胞化魚皮足場材料のシートを大麻グラインダーで粉砕することによって結果として得られる粉砕された脱細胞化魚皮の大きな粒子の例示的な描写を例示している。図９Ｃは、本開示の実施形態による、脱細胞化魚皮足場材料のシートを大麻グラインダーで粉砕することによって結果として得られる粉砕された脱細胞化魚皮の糸状の綿状繊維の例示的な描写を例示している。図９Ｄは、脱細胞化魚皮足場材料のシートを麻グラインダーで粉砕することによって結果として得られる粉砕された脱細胞化魚皮の小さな、粉末状の粒子の例示的な描写を例示している。

ここで図１０を参照すると、一時的なドレッシング１０００が例示されている。一時的なドレッシング１０００は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を創傷に送達するように構成および配置されている。粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４は、一時的なドレッシング１０００の内面によって、または接触層１００６によって、創傷に送達および／または保持され得る。接触層１００６は、限定することなく、穿孔されたまたは織られたポリマー材料からなる非付着性材料、ヒドロゲル、フォーム（たとえば、ポリウレタンフォームドレッシング）、シリコーン、流体に透過性の多孔質材料（たとえば、複数の開口を含む疎水性シリコーン）、それらの組み合わせ、または任意の他の適切な接触層材料を含む、当該技術分野で知られている任意の接触層材料を含むことができる。接触層１００６は、創傷に由来する流体（たとえば、血液、滲出液など）に対して透過性であり得、さらにガスに対しても透過性であり得、創傷での空気の少なくとも一部の循環を可能にする。

いくつかの例では、接触層１００６は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を創傷に送達および／または保持するように主に作用する不透過性バリアであり得る。したがって、接触層１００６は、たとえば、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を創傷部位で、またはその近傍に保持するための輸送体および／または物理的バリアとして作用することによって、粉砕された脱細胞化魚皮１００４を含むことができるか、または創傷でそれを保持するように構成することができる。

接触層１００６は、追加的にまたは代替的に、それによっておよび／またはその中に画定される疎水性チャネルを介して、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を創傷に送達するように構成することができる。このような疎水性チャネルは、創傷部位から生じる流体の吸収に抵抗することができるが、そのような流体が創傷から引き離される媒体を提供し得る。

粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４は、チャネルに付着したり接着したりすることのない凍結乾燥形態で疎水性チャネルの対応する内腔に関連付けることができ、創傷滲出液、血液、または創傷部位から生じる他の流体がチャネル内に引き込まれると、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４は、水和され、創傷表面に拡散して、上記した恩恵（たとえば、止血、鎮痛効果、抗菌効果、バリア機能など）をもたらすことができる。いくつかの例では、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４は、接触層１００６によって創傷部位に搬送および保持されることに加えて、創傷に直接（乾燥または水和された形態で）適用することができる。

いくつかの例では、接触層１００６は、当業者に知られているヒドロゲルなどのヒドロゲルであるか、またはそれを含むことができる。粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４は、ヒドロゲルが、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を創傷部位で送達し保持して作用するように、ヒドロゲルの表面と関連付けることができる。追加的にまたは代替的に、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を、ヒドロゲルに組み込み、創傷部位で放出することができる。たとえば、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を含むヒドロゲルを創傷部位に適用することができ、創傷部位から水を吸収すると、それに関連付けられた粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４を放出して、創傷部位に拡散することができる。ヒドロゲルは、ヒドロゲルが膨潤すると接触層１００６を創傷部位に適合させることができるため、さらに有益であり得る。

一時的なドレッシング１０００は、随意に、接触層１００６と関連付けられたまたはそれを含む、および創傷と接触する、および／または創傷との脱細胞化魚皮粒子１００４の接触を促進するように構成された基材１００２を含むことができる。一時的なドレッシング１０００はさらに、接触層１００６と関連付けられたおよび／またはそれを少なくとも部分的に取り囲む、および接触層１００６を創傷で保持するように構成されている外側カバー１００８を含む。図１０に描写されるように、外側カバー１００８は、外側カバー１００８の対向する両側にストラップ１００９を含む。１つまたは複数の実施形態では、外側カバー１００８のストラップ１００９は、創傷部位の周囲に巻き付けられ、それに接着させられ、および／またはそうでなければそれに関連付けられ得、当該技術分野で知られている任意の手段（たとえば、ストラップの対向する両端上のフックおよびループ；１つまたは複数のストラップに適用され、創傷部位にまたはその近くに取り付けられるか、または外側カバーの対向するストラップまたは他の部分に取り付けられる、テープ、接着剤、エポキシ、セメントなどの接着材；一緒になったタイ／ヒューズストラップ；など）によってそれに接着させられ得る。

基材１００２は、含められる場合、上記の接触層１００６と同じ材料、または治療薬の放出および／または異物の流入を妨げることによるおよび／または適切な湿潤環境を維持するために創傷部位で滲出液を放出および／または保存することによる適切な湿潤環境の形成の複雑な機能によって創傷治癒効果を促進する材料などの任意の他の材料を含むことができるか、またはそれで作られ得る。このような基材には、たとえば、ゲル、半固体、生体適合性ポリマー、および／またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態では、基材１００２、外側カバー１００８、および／またはストラップ１００９は、伸縮可能または成形可能であり、創傷部位に適合する、および／または創傷部位をしっかりと圧縮するように構成されている。

いくつかの実施形態では、基材１００２は生体適合性ポリマーを含む。ドレッシング材料として使用可能な任意のポリマー材料が、限定することなく、生体適合性ポリマーとして使用され得、当業者によって適切に選択され得る。生体適合性ポリマーは、たとえば、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリエチレン、ポリエチレンオキシド、低密度ポリエチレン、ポリアクリル酸、ポリオキシエチレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリプロピレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリアミド、ポリアクリロニトリル、ポリエステル、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、ポリシロキサン（シリコーンゴム）、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリルアミド、多糖類、ポリビニルピロリドン、シリコーン、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、セルロース、ペクチン、キチン、キトサン、ゼラチン、コラーゲン、フィブリン、ヒアルロン酸、天然ゴム、合成ゴム、またはそれらの組み合わせの１つまたは複数を含み得る。

生体適合性ポリマーは、生体適合性ポリマーを繊維状に集めて、シートまたはシート状の形状に加工することによって調製され得るか、または繊維状の生体適合性ポリマーが不織布または織布に加工され得る。追加的にまたは代替的に、生体適合性ポリマーは、フィルム、フォーム、親水コロイド、ヒドロゲルの形態で使用され得るか、または当業者に知られている任意の他の形態で適切に加工され得る。

一実施形態では、基材１００２および／または生体適合性ポリマーは、当該技術分野で知られているように、または本明細書に別途記載されるように、少なくとも部分的に、創傷の水分含有量を調節する助けになる。

１つまたは複数の実施形態では、一時的なドレッシング１０００は、１つまたは複数の治療薬を含み、これらは、いくつかの実施形態では、鎮痛剤、麻酔剤、サイトカイン、成長因子、止血剤、抗生物質、抗真菌剤、水和化合物、またはそれらの組み合わせを含み得る。治療薬および／または粉砕された脱細胞化魚皮は、当該技術分野で知られているように、時間および／または温度に依存した放出（たとえばヒドロゲル）のために基材１００２内（たとえば、生体適合性ポリマー内）に注入され得る。

１つまたは複数の実施形態では、鎮痛剤は、アセトアミノフェン、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、オピオイドなどを含む。鎮痛剤は、追加的にまたは代替的に、たとえば、三環系抗うつ薬および抗けいれん薬などの、神経障害性疼痛を処置するための薬剤を含み得る。

１つまたは複数の実施形態では、麻酔剤は、エステル系および／またはアミド系の局所麻酔剤を含む。エステル系の局所麻酔剤は、たとえば、プロカイン、アメトカイン、コカイン、ベンゾカイン、テトラカインなどを含む。アミド系の局所麻酔剤は、たとえば、リドカイン、プリロカイン、ブピバカイン、レボブピバカイン、ロピバカイン、メピバカイン、ジブカイン、エチドカインなどを含む。一実施形態では、アミド系の局所麻酔剤が、それらの熱安定性および寿命（たとえば、約２年の保存寿命）のため好ましい。

１つまたは複数の実施形態では、サイトカインは、炎症促進性サイトカイン、抗炎症性サイトカイン、および／または炎症促進性サイトカインと抗炎症性サイトカインの組み合わせを含む。抗炎症性サイトカインは、炎症促進性サイトカイン応答を制御し、特定のサイトカイン阻害剤および可溶性サイトカイン受容体と連携してヒト免疫応答を調節するように作用し得る、一連の免疫調節分子を含む。実施形態では、創傷部位での痛み、腫れ、および他の炎症の症状を軽減するために、１つまたは複数の抗炎症性サイトカインが使用される。例示的な抗炎症性サイトカインは、たとえば、インターロイキン（ＩＬ）－１受容体アンタゴニスト、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、およびＴＧＦ－βを含む。

１つまたは複数の実施形態では、成長因子は、トランスフォーミング成長因子アルファ（ＴＧＦ－α）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ２（ＭＭＰ－２）、ＭＭＰ－９などを含む。

１つまたは複数の実施形態では、抗生物質は、以下の抗生物質クラスから選択される１つまたは複数の抗生物質を含む：
・ペニシリン類（たとえば、メチシヒン、アモキシシリン、ペニシリンＧなど）；
・テトラサイクリン類（たとえば、ドキシサイクリン、テトラサイクリンなど）；
・セファロスポリン類（たとえば、セフジニル、セフェピム、セフトリアキソンなど）；
・キノロン類／フルオロキノロン類（たとえば、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンなど）；
・マクロライド類（たとえば、アジスロマイシン、エリスロマイシンなど）；
・スルホンアミド類（たとえば、スルフィソオキサゾール、スルファメトキサゾール－トリメトプリムなど）；
・グリコペプチド類（たとえば、バンコマイシン、ダルババンシンなど）；
・アミノグリコシド類（たとえば、ゲンタマイシン、カナマイシンなど）；
・リンコサミド類（たとえば、クリンダマイシン、リンコマイシンなど）；
・ニトロフラン類（たとえば、フラゾリドン、ニトロフラントインなど）；
・オキサゾリジノン類（たとえば、リネゾリド、トレゾリドなど）；
・アンサマイシン類（たとえば、ゲルダナマイシン、リファキシミンなど）；
・カルバペナム類（たとえば、メロペネム、エラペネムなど）；および
・ポリペプチド類（たとえば、バシトラシン、ポリミキシンＢなど）。

実施形態では、抗生物質は、一般的な局所抗生物質カクテル（たとえば、バシトラシン、ネオマイシン／ポリミキシンＢ、ネオマイシン／ポリミキシン／プラモキシンなど）を含む。抗生物質は、限定されないが、ホスホマイシン、ムピロシン、およびクロラムフェニコールを含む、上述以外の任意の既知の抗生物質から選択され得る。

１つまたは複数の実施形態では、抗真菌剤は、ポリエン系抗真菌剤（たとえば、ナイスタチン、アムホテリシンＢなど）、エキノカンジン（たとえば、ミカファンギン、カスポファンギンなど）、アゾール系抗真菌剤（たとえば、ビフォナゾール、スルコナゾールなどのイミダゾール；たとえば、エポキシコナゾール、フルコナゾールなどのトリアゾール；およびたとえばアバファンギンなどのチアゾール）、アリルアミン（たとえば、ブテナフィン、ナフチフィンなど）、およびそれらの組み合わせを含む。

１つまたは複数の実施形態では、水和化合物は、創傷滲出液を吸い取るおよび／または保存する材料が含み、水和ゲル、油、または当該技術分野で知られている他の流体も含む。非限定的な例としては、ワセリン、ミツロウ、パンテノールなどが挙げられる。

ここで図１１を参照すると、一時的なドレッシングは、随意に、スリーブ１１００のベースに配された粉砕された脱細胞化魚皮粒子１１０４が注入された、またはそうでなければ関連付けられた生体適合性ポリマー１１０２を含むスリーブ１１００の形態で外側カバー１１０８と関連付けられ得る。生体適合性ポリマー１１０２は、創傷および／または部分的または全体的な手足を受け入れるように人間工学的に成形され得る、および／または変形可能であり得る。スリーブ１１００はさらに、圧縮装置１１１０と関連付けられてもよい。図１１に描写されるように、圧縮装置１１１０は、膨張されたスリーブ１１００が、スリーブ１１００内の創傷および／または手足または部分な手足に適合するように、外側カバー１１０８を膨張させる。

図１１に示されるように、外側カバー１１０８は、たとえば圧縮器１１１４からの空気を内袋１１１６に充填することによって膨張させられる。代替的に、圧縮装置は、ユーザの口を介して充填することができるか、または手動ポンプとすることもできる。内袋１１１６は、代替的に、流体（たとえば水）で充填されてもよい。

スリーブ１１００、特にスリーブ１１００の内袋１１１６は、通気することができるか、または通気孔１１１２に通して内袋１１１６を充填する空気または流体を排出することによって内袋１１１６の圧力を調整することができる。いくつかの例では、通気孔１１１２は、手動で操作されるが、いくつかの例では、内袋１１１６内の圧力を所与の閾値（たとえば２０ｐｓｉ）未満に維持するために自動的に通気する閾値圧力を有し得る。

一実施形態では、スリーブはさらに、追加の固定力を提供するための１つまたは複数のストラップ（図示せず）；膨張（または部分的に膨張）されると変形し、スリーブが減圧および／または真空化されると剛性構造を形成し、それによって生体適合性ポリマー（および粉砕された脱細胞化魚皮粒子および／または１つまたは複数の治療薬）を創傷に固定させて関連付けるスリーブの対向する層によって形成される腔内の変形可能な材料（図示せず）；複数の基材１１０２（および粉砕された脱細胞化魚皮粒子および／または１つまたは複数の治療薬）；および／または基材（および粉砕された脱細胞化魚皮粒子および／または１つまたは複数の治療薬）のライナー（図示せず）を含む。

１つまたは複数の実施形態では、外側カバー１１０８は、可撓性材料（たとえば、熱可塑性エラストマー、エラストマー、スパンデックス、ライクラ、ポリマーエアロゲルなど）；調節可能なストラップ（図示せず）；および／または体熱を保持するおよび／または関連付けられた創傷および／または近くの組織／身体に反射して戻すように構成された熱反射材料（たとえば、ポリマーエアロゲル；輻射バリア布地；アルミニウム箔－布地のラミネート；金属化薄膜－布地のラミネート；直接金属化された布地；たとえば、キルト風またはバッフル風の布地；および／または当該技術分野で知られている他の熱反射材料および／または断熱材料）で作られる、および／またはそれらを含む。

１つまたは複数の実施形態では、開示された一時的なドレッシング１０００、１１００の粉砕された脱細胞化魚皮粒子１００４、１１０４は、１つまたは複数の利点のあるおよび／または健康的な特性を提供する。たとえば、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、創傷からの失血を軽減および／または停止する止血剤として作用し得る。

止血用途
脱細胞化魚皮は、試験された凝固剤および他の生物学的製剤と比較して、有意に良好な止血特性を有する（表１）。脱細胞化魚皮の止血効果は、トロンビンの活性化によって直接放出されるのではなく、脱細胞化魚皮のコラーゲン含有量によるものであり得る。血液中の血小板は、コラーゲン特異的な糖タンパク質表面受容体を用いてコラーゲンに直接結合し得る。糖タンパク質に結合するコラーゲンは、とりわけ、脱細胞化魚皮への血小板の強固な結合を媒介する血小板インテグリンを活性化するシグナル伝達カスケードを開始し得る。このプロセスの結果、血小板が傷害の部位に接着する。脱細胞化魚皮の止血特性は、他の手段に由来する、またはトロンビン活性化に加えた、止血効果を有する新規の止血剤として有望である。長い保存寿命および軽い包装により、当該製品は、Ｓｅｖｅｒｅｌｙ Ｉｎｊｕｒｅｄ Ｌｉｍｂ（ＡＣＣＳＩＬ）の装置とは独立した、応急処置止血コンバットキットへの必須の追加となり得る。

戦闘現場で血液凝固を確立するために、出血の激しい地域にこれらの装置を適用する目的で、血液凝固を増加させる多様な物質が、さまざまな車両に追加されている。直感的には、これは、血液をこのようにして凝固させる良い考えであるように見える。使用される物質は、血小板活性化因子であるトロンビンと、カルシウムイオン（Ｃａ２⁺）を結合するキトサンを含む。Ｃａ２⁺は血栓形成の重要な因子である。大きなもしくは小さな組織欠損、または高速弾薬、榴散弾、または即席爆発装置（ＩＥＤ）の熱引き（ｈｅａｔ ｏｆｆ）で被った組織破壊をカバーするために設計された装置の止血特性が存在するべきであるが、傷害部位へのさらなる危害または創傷領域に対する今後の手術の妨げになる可能性があってはならない。

一実施形態では、Ｌｅｅ Ｗｈｉｔｅ血液凝固検査を３回行い、Ｏａｓｉｓ（登録商標）（Ｓｍｉｔｈ ＆ Ｎｅｐｈｅｗ Ｉｎｃ．）およびＭａｔｒｉｓｔｅｍ（登録商標）（Ａｃｅｌｌ Ｉｎｃ．）などの創傷処置製品の止血効果を、脱細胞化魚皮（Ｋｅｒｅｃｉｓ）の止血効果と比較した。これを、３．５ｍｇ／ｍＬの血液の固定濃度で行った。総量は１ｍＬの全血であった。１ＮＩＨ単位／ｍＬのトロンビンを陽性対照として使用した。添加物を含まない血液を陰性対照（ＮＥＧ）として使用した。血液が完全に凝固したときの血液凝固時間を記録した。ウィルコクソン順位和検定、別名マン・ホイットニーのＵ検定を使用して、統計分析を実施した。結果を以下の表１に示す。

別の実施形態では、Ｌｅｅ Ｗｈｉｔｅ血液凝固検査を、２３～４５歳の年齢範囲の６人の健康な個人に対して実施した。１ｃｍ２／１ｍＬの血液における以下の薬剤の止血効果を試験した：陽性対照用のＫｅｒｅｃｉｓ（商標）Ｏｍｅｇａ３、Ｏａｓｉｓ（登録商標）、Ｍａｔｒｉｓｔｅｍ（登録商標）、およびトロンビン（１ＮＩＨ単位／ｍＬ）。添加物を含まない血液を陰性対照（ＮＥＧ）として使用した。参加者から血液を空のバキュテナー内に採取し、試験物質を加えた。ガラス管を１０秒ごとに約４５°までゆっくりと傾け、血液が側面に漏れなくなったときの時間を記録した。結果を以下の表２に例示する。

脱細胞化魚皮は、哺乳動物由来の生成物よりも有意により速い凝固を誘発した（ｐ≦０．０００１）。また、脱細胞化魚皮は、人間の自然な止血経路で使用されるトロンビンによる凝固に優先する。脱細胞化魚皮は、トロンビンよりも平均で約２分速い血液凝固を示し、哺乳動物由来の膜生成物よりも約３分速い凝固を示す。

いくつかの実施形態では、脱細胞化魚皮は、トロンビンよりも２分を超えて速く、トロンビンよりも１分４５秒を超えて速く、トロンビンよりも１分３０秒を超えて速く、トロンビンよりも１分１５秒を超えて速く、トロンビンよりも１分を超えて速く、トロンビンよりも４５秒を超えて速く、トロンビンよりも３０秒を超えて速く、トロンビンよりも１５秒を超えて速く、またはトロンビンよりも速い任意の速度で、血液を凝固させ得る。一実施形態では、脱細胞化魚皮は、トロンビンと同じ速度で血液を凝固させ得る。

いくつかの実施形態では、より速い凝固は、トロンビン活性化のみによるものではなく、脱細胞化魚皮において糖タンパク質表面受容体に直接結合する血小板に関連し得る。別の実施形態では、より速い凝固は、トロンビンの活性化と脱細胞化魚皮において糖タンパク質表面受容体に直接結合する血小板との組み合わせによるものであり得る。

以下の表１および２は、それぞれ、図１および２に示される止血剤のさまざまな群間で実施された片側ｔ検定（ウィルコクソン順位和検定）の結果を含む。

失血に加えて、爆傷は、多くの場合、複雑な軟組織の損失を結果としてもたらし、最適な結果のために的を絞ったアプローチが必要となる。重要な要素には、早期のデブリードマンと、治癒を促進し、細菌汚染および感染を防ぐためのカバーの適用と、を含む。戦闘で負った創傷の最大４分の１が感染されており、高次ケアを必要とし、さらに、爆風関連の傷害後の感染は、負傷した軍人の罹患率および死亡率の主な原因のままである。したがって、回収後に利用可能である最終的な再建オプションにプラスの影響を与えるために、傷害箇所に近いケアを改善する必要がある。

１つまたは複数の実施形態では、粉砕された、脱細胞化魚皮粒子の抗ウイルスおよび抗菌特性は、創傷部位での細菌および／またはウイルス感染を防止するように作用し、それによって、潜在的な合併症（たとえば創傷の感染症）を減少させ、および／または一時的なドレッシングが使用され得る用途および／または環境の多様性を増加させる。

さらに、粉砕された、脱細胞化魚皮内のオメガ３ ＰＵＦＡの抗炎症（または炎症調節）特性は、創傷部位の炎症を調節する助けになり、いくつかの実施形態では、組織を安定化および／または保護する助けになる。

非限定的な例として、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、現場で汚れた（たとえば、予め浄化されたまたは創面切除されていない）創傷に直接適用され得る（たとえば、エシェロンＩ処置）。粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、独立型の処置法としてまたは一時的なドレッシングの一部として使用することができる。上記の粉砕された脱細胞化魚皮の１つまたは複数の健康的な特性によって、いくつかの実施形態では、下層の創傷の安定化および／または保護が可能になる。魚皮粒子は、創傷部位に適用されると、後に、関連組織のデブリードマンまたは創傷部位の洗浄によって除去することができることが理解されるべきである。創傷部位に粒子が残っている場合、脱細胞化魚皮粒子は、炎症反応を起こすことなく、またその後の外科的除去の必要なしで、安全に体内に吸収することができる。

上記で提供されたように、粉砕された脱細胞化魚皮粒子の１つの有益な態様は、創傷を安定化および／または保存するそれらの能力である。処置は、現場で汚れた創面切除されていない創傷などの創傷に適用されると（たとえばエシェロンＩ処置）、創傷部位を保存した状態で負傷者を長距離または長期間搬送することを可能にする。同様の方法で、粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、たとえばエシェロンＩＩ処置時に新鮮な一時的なドレッシングの適用前に清浄なおよび／または創面切除した創傷に適用することができるため、創傷は安定化および／または保存することができ、一方で、負傷者は、追加の処置のために他の場所に（たとえば、適切なようにエシェロンＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの処置に）移送される。粉砕された脱細胞化魚皮の健康的な特性は、いくつかの実施形態において、（たとえば、エシェロンＩＶまたはＶ処置で）屍体皮膚または他の既知の物質よりも良好に創傷を調製することによって自家移植片の取り込みの増加も可能にし得る。

上に開示した粉砕された脱細胞化魚皮粒子（またはそれらに関連付けられた一時的なドレッシング）は、外傷性創傷（たとえば、銃撃による創傷、刺し創傷、爆風および／または榴散弾によって受けた創傷、粉砕または切断された手足／付属肢など）、火傷、および／または切断（たとえば、自発的、緊急、または外傷から結果として生じるもの）を安定化および／または保護するために使用され得る。粉砕された脱細胞化魚皮粒子は、多くの健康的な効果（たとえば、止血効果、抗ウイルス効果、抗菌効果、炎症反応調節効果など）を与えることができ、一時的なドレッシングに使用される場合、基材は、創傷の水分含量／環境を緩和して組織の乾燥および／または劣化を防止するように作用することができ、一方で、外側カバーは、物理的支持を提供し、いくつかの実施形態において、搬送中に創傷を保護するための圧力および／または構造を提供する。

創傷の安定化および／または保護のためのキット
前述のまたは他の一時的なドレッシング（またはその構成要素）のいずれかをキットに含めることができることが理解されるべきである。たとえば、図１２に示されるように、創傷を安定化および／または保護するためのキット１２００は、（ｉ）創傷と接触するように構成された接触要素１２０４、（ｉｉ）創傷上の配置のためのおよび接触要素１２０４によって創傷上に保持される、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１２０６、および（ｉｉｉ）接触要素１２０４および粉砕された脱細胞化魚皮粒子１２０６を創傷で保持するように構成された外側カバー１２０８を収容する、含む、または含有する外側容器１２０２を含むことができる。

接触要素１２０４に関して、接触要素１２０４は、接触層１２０４とすることができるか、またはそれを含むことができ、接触層１２０４に関して上で論じた任意の材料または特性を含むことができる。代替的に、接触要素１２０４は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子１２０６を創傷で保持するように作用する材料とすることができる。これには、たとえば、ガーゼ、圧迫スリーブ、絆創膏、詰め物、粘着ラップ、または当該技術分野で知られている他の創傷ドレッシングを含めることができる。

本明細書に開示される任意のキットまたは一時的なドレッシングは、創傷を安定化および／または保護するための任意の数の方法に使用することができる。図１３は、創傷を安定化および／または保護するための例示的な方法１３００を例示している。方法１３００は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷に適用する工程（行為１３０２）と、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷で保持するように構成された接触要素で創傷を覆う工程（行為１３０４）と、を含む。方法１３００の変形例は、創傷を含む部分的または全体的な手足に接触要素を固定するために接触要素に外側カバーを適用する行為をさらに含むことができる。追加的にまたは代替的に、粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に適用する方法１３００の変形例は、創傷でまたは創傷近くで組織状態を保存することを含む。

実施形態では、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷に適用する工程（行為１３０２）は、粉砕された脱細胞化魚皮粒子をボールまたは他の塊／形状に圧縮するかまたは詰め込み、ボールまたは塊／形状を創傷に挿入することを含む。臨床医は、トンネル状／侵食された創傷などの創傷の幾何学的形状に基づいて、粉砕された脱細胞化魚皮粒子をボールに形成し得る。

いくつかの実施形態では、キット（またはそのコンポーネント）は、たとえば、出血している創傷（切り傷、裂傷、および擦過傷）の局所管理および／または重度の出血する創傷または出血性創傷の一時的な管理を含む、トンネル状の／侵食された創傷または他の外傷性創傷における創傷治癒プロセスの安定化、被覆、および／または初期化のために使用することができる。

いくつかの実施形態では、２種類の脱細胞化魚皮製品（たとえば、シートベースおよび粉砕された、脱細胞化魚皮）を複雑な軟部組織の創傷のために加工のために一緒に組み込むシステム、キット、および／または方法の利用を介して、さらなる利点を実現することができる。これらの２種類の魚皮は、各々を組み合わせて使用することができ、異なる用途目的に応じて提供する。たとえば、深く、非対称で、侵食された創傷には、最適な創傷治癒、出血制御、および高次施設への移行中の感染保護のためのシートで固定する前に、粉砕された、脱細胞化魚皮を充填することができる。シートベースの脱細胞化魚皮シートを備えた二次カバーは、ドレッシング交換中に、粉砕された生成物を保護し、移行中に細菌および（追加の）止血バリアを追加する。その結果、負傷者は、医療施設への搬送を待つ間に治癒を開始することができ、結果として、後続する移植のためのより質の高い創傷床が得られる。

さらに、粉砕された脱細胞化魚皮を有するキットは、たとえば、出血を制御し、創傷床を安定させ、皮膚再生プロセスを開始し、微生物の制御を提供する初期処置アプローチを創傷に提供すること、従来の材料では対処のために物理的に最適化されないトンネル状のまたは侵食された創傷のための処置オプションを簡素化すること、深い仙骨の創傷および褥瘡を充填することで、より小さな皮弁を適用することを可能にし、皮弁の成功の可能性を高めること、および自家移植および／または皮弁の作成に備えて創傷を一時的に固定することを含む、１つまたは複数の外科的恩恵を提供することができる。

本明細書に明記されるような以下の実施例は、例示目的のみを意図しており、本開示の精神および範囲から逸脱することなくそれらの多くの変形が可能であるため、いかなる方法でも本開示の範囲を限定することを意図されていない。

実施例１
マウスにおける深い皮下副木切除創傷の肉芽形成を誘導し、その治癒を促進する粒子化された魚皮の能力を調査するための、副木切除マウスモデルにおける粒子化されたおよびインタクトな魚皮シートの創傷治癒特性
マウスにおける創傷治癒は、主に収縮によって行われるため、ヒトの創傷治癒とは根本的に異なる。創傷を副木で固定することによって、修復プロセスは、その後、上皮化、細胞増殖、および血管新生に依存し、これらは人間の創傷治癒の生物学的プロセスを密に反映している。

雄のＣ５７ＢＬ／６を使用する。各マウスは２つの創傷を受け、同じ動物に対する脱細胞化魚皮と標準ケア（陽性対照）の両方の適用を可能にするため、各動物はそれ自身の対照となる。マウスの背中を慎重に剃り、脱毛した後、無菌の４ｍｍの生検を使用して、肩のレベルでのマウスの正中線の片側にある創傷に対する２つの円形パターンの輪郭を打ち抜く。鋸歯状の鉗子を使用して、輪郭の中央の皮膚を持ち上げ、虹彩はさみを使用して、多肉質肉の脂肪層（panniculus carnosus）を含む皮下組織を通って伸長する全層の創傷を作り出し、円形の組織片を切除する。

当該プロセスを、正中線の反対側の創傷に対して繰り返す。

シリコンの「ドーナツ」状の副木は、直径１０ｍｍ、厚さ０．５ｍｍであり、中央に５ｍｍの穴がある。プラスチック保護コーティングをシリコーンの副木の各側から除去する。シアノアクリレート接着剤をシリコーンの副木の片面に適用する。副木を、創傷上の中心に置き、断続６－０ナイロン縫合糸で固定して、適切な位置決めを確かなものとする。定規を副木の下に置き、マクロレンズを使用して写真を撮る。

マウスを、３つの時点：Ｄ７、Ｄ１４、Ｄ２１で２つの群に分ける：
群Ａ：処置創傷のみに粉砕された脱細胞化魚皮を充填し、対照創傷には充填しない。その後、両方の創傷を透明な閉塞ドレッシング（ＯｐＳｉｔｅなど）で覆う。
群Ｂ：処置創傷のみにインタクトな脱細胞化魚皮の小片を充填し、対照創傷には充填しない。その後、両方の創傷を透明な閉塞ドレッシング（ＯｐＳｉｔｅなど）で覆う。

ＮＳＡＩＤが炎症を阻害し、治癒プロセスに影響を与えかねないため使用されないことを例外として、麻酔および鎮痛を動物施設の推奨に従って提供する。

週に１～２回、ドレッシングを交換するたびに創傷を目視検査し、写真撮影し、それらのサイズを測定する。魚皮が１週間以内に創傷床に組み込まれ、まだ利用可能なスペースがある場合、追加の魚皮を挿入して、臨床実践を模倣する。

群を３日目、７日目、１４日目、および２１日目に屠殺して、マウスを最長２１日間経過観察する。頸椎脱臼による安楽死の後、副木を取り外し、創傷領域の周囲および下の広範囲の完全な切除を作り出す。組織を、組織学的検査によるさらなる診断のためにインキベートして、炎症、肉芽形成、および治癒の質を検査する。

ｑＰＣＲを実施して、関連する創傷治癒関連遺伝子（たとえば、ＶＥＧＦ、ＩＬ－１ｂ、ｅＮＯＳ、ｉＮＯＳ）の発現を定量化する。創傷のサイズを、ＩｍａｇｅＪまたは他の同等のソフトウェアを使用して判定する。

処置創傷および対照創傷を、マウスの右側または左側にランダム化する。

パラメトリックおよびノンパラメトリック統計分析を必要に応じて実施する。ＬＤＩデータおよび他のバイオアッセイ結果に対しても統計分析を実施する。対応のあるスチューデントｔ検定およびＡＮＯＶＡ Ｆ検定を実行して、処置群間の組織学的差異の有意性を評価する。事後分析を複数の試験用に調整する。Ｐ値＜０．０５は有意であるとみなされる。

結果は、粉砕された脱細胞化魚皮で処置した創傷が安定化されていること、および創傷部位での創傷治癒の初期化が対照よりも早くおよび／またはよりロバストであること、創傷部位での炎症の減少、ならびに存在量、濃度、および／または治癒関連転写物の半減期の増加を示していることを含む。

結果はまた、シートベースの脱細胞化魚皮で処置した創傷が、対照と比較して、感染の発生率が低く、細胞内方成長（肉芽形成）の量が多く、炎症が減少し、治癒の質が向上していることを含む。

実施例２
脱細胞化魚皮の止血特性を調査するためのブタ大腿動脈出血モデルにおける魚皮の止血特性
この研究の目的は、粒子化された魚皮が、明らかな副作用なしに対照（標準ケア）製品よりも出血の制御に効果的であることを実証することである。処置後の失血量の５０％の減少は、臨床的に有意であるとみなされる。

すべての外科的処置で、（実験プロトコルで禁忌でない限り）生理学的恒常性を維持し、動物の痛みや苦痛を最小限に抑えるために、麻酔、鎮痛、体液の維持、加温などの補助措置を講じる。麻酔後、体重３４ｋｇ～４４ｋｇのヨークシャー交雑雄豚に挿管し、耳の静脈にカテーテルを挿入して、維持液を投与する。

動脈出血モデルを使用する。

右頸動脈にカニューレを挿入し、トランスデューサに接続して、血圧を記録する。右頸静脈にカテーテルを挿入して、出血および創傷処置中に蘇生液を投与する。

正中開腹術および膀胱瘻造設術を実施し、皮膚を縫合およびステープル留めすることによって腹部を閉じる。大腿動脈に近い鼠径部領域に１０ｃｍの切開を行い、小さな動脈枝の焼灼および結紮により、動脈の５ｃｍを周囲の組織から切り離す。

動脈を２％のリドカインに浸して、その正常な直径になるまで希釈する。その後、液体維持を停止する。５～１０分間の安定化期間後、近位および遠位の動脈をクランプし、鼠径部の底から２～３ｃｍの場所で血管の前面上の直径６ｍｍの動脈切開を行う。クランプを解除し、４５秒間自由に出血させる。血液を吸引によって採取する。

ブタを以下の４つの群に分ける：（ａ）粉砕された脱細胞化魚皮、（ｂ）シートベースの脱細胞化魚皮、（ｃ）標準ケア（すなわち、コンバットガーゼ、陽性対照）、および（ｄ）通常の処置ガーゼ（陰性対照）。

自由な出血が開始した直後に、それぞれの製品を開いて傷口に詰め込み、開腹スポンジまたはガーゼで覆う：（ａ）付着ボールを形成するために圧迫された粉砕された脱細胞化魚皮；製品を適所で安定化させ、創傷に押し付けるためにスポンジを使用する；（ｂ）３×７ｃｍの脱細胞化魚皮シートを半分に折り、スポンジによって創傷に押し付ける；（ｃ）コンバットガーゼを創傷に押し付けるためにスポンジを使用する；（ｄ）通常のガーゼを創傷に押し付けるためにスポンジを使用する。

手動圧力を３分間維持して、出血を止める。試験材料をクランプしたり、追加の圧力を加えたりすることなく、皮膚フラップをスポンジ上に引っ張る。その後、補液蘇生を開始し、頸静脈カテーテルを介して５００ｍＬのＨｅｘｔｅｎｄ（平衡電解質溶液中の６％のＨＥＳ＋グルコース）を注入し、ＭＡＰを６０ｍｍのＨｇと６５ｍｍのＨｇとの間に上昇させて維持する。その後、最大１０ＬのＬＲ溶液を用いて補液蘇生を継続する。圧迫後、圧力をゆっくりと解放し、３分間止血を観察する。この期間中に出血が見られなければ、初期止血は達成されたとみなされる。流出した血液をすべて継続的に採取し、止血までの時間を記録する。失血量を計算し、処置後の失血量として報告する。ブタを、最長２．５時間または死亡するまでモニターする。生存時間を記録し、最終的な血液サンプルを収集する。生き残ったブタはＣＴでスキャンされ得る。生き残ったブタの脚を曲げて、止血の安定性を試験する。製品を除去して、血栓の状態および血管の開存性を検査する。動物を、施設の基準に従って静脈注射により安楽死させ、組織検査のために組織サンプルを収集する。肉眼的剖検を重要な臓器に対して実施する。組織スライドをＨ＆Ｅ染色用に調製する。

測定される主要エンドポイントは、処置後の失血、出血／止血時間（出血が止まるまでに必要な時間）、ＭＡＰ、生存時間、および生存率である。二次エンドポイントには、ヘモグロビン、ヘマトクリット、血小板数、ｐＨ、乳酸塩、塩基欠乏、および凝固値（たとえば、ＰＴ、ａＰＴＴ、フィブリノーゲン、およびＴＥＧパラメータ）が含まれる。

ＬＤＩデータおよび他のバイオアッセイ結果の統計分析を、必要に応じて実施する。ＡＮＯＶＡ Ｆ検定を実行して、経時的な％再上皮化率および分子変化率における処置群間の差異の有意性を評価する。事後分析を、複数のテストを調整するためにテューキーの正直有意差（Ｔｕｋｅｙ’ｓ ｈｏｎｅｓｔｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ）（ＨＳＤ）を使用して実行する。ノンパラメトリック検定を、対応するデータに応じて組み込む。Ｐ値＜０．０５は有意であるとみなされる。

結果は、群（ａ）および（ｂ）における処置後の失血の少なくとも５０％の減少を含み、群（ａ）は、処置後の失血の最大の減少および最も高い生存率を示している。

実施例３
ブタの深く侵食された皮下切除創傷において肉芽組織形成を誘発する粉砕された脱細胞化魚皮の能力を調査するための、および／または時間を短縮して、Ｓｐｌｉｔ Ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ Ｓｋｉｎ Ｇｒａｆ用のより好ましい創傷床をもたらすための、ブタにおける魚皮の深部軟組織創傷修復特性
デブリードマン後の１つのアプローチは、創傷への血流を促進し、浮腫を制御し、プロテアーゼの存在を減少させ、したがって創傷床の肉芽形成および血行再建の増加につながる陰圧創傷療法（ＮＰＷＴ）である。ＮＰＷＴは複雑な創傷治癒のための伝統的な治療であるが、長期にわたる現場でのケアや、およびより高次ケアへの迅速な避難中に使用するには必ずしも実用的ではない。ＮＰＷＴの注目すべき欠点は、たとえば、幾何学的に困難な創傷、または接着シールが得られにくい解剖学的に敏感な領域の近くまたは解剖学的に敏感な領域での創傷において加えられる圧力を正確に制御することができないこと、（ドレッシングからの閉塞により評価が難しくなり得る）出血、皮膚刺激、感染、痛みまたは不快感、ドレッシング材料への肉芽組織の内方成長に加えて、機械または装置関連の技術的課題を含む。たとえば、一部のＮＰＷＴ機械は、移動式ではなく、電気に依存し、効果的にするために継続的に患者の近位にある必要があり、回収中の患者の移動がさらに複雑になる。

若齢の去勢した雄のＤｕｒｏｃ豚を使用して、エストロゲンサイクルからの潜在的な干渉を最小限に抑え、動物の攻撃性を軽減する。すべての外科的処置で、（実験プロトコルで禁忌でない限り）生理学的恒常性を維持し、動物の痛みや苦痛を最小限に抑えるために、麻酔、鎮痛、体液の維持、加温などの補助措置を講じる。

各動物は、脇腹の両側に２つずつ、合計４つの創傷を受ける。創傷を、約３インチ×３インチの周囲内で鋭利な切除と鈍的切除を組み合わせて作り出す。深さは皮下組織、筋膜、筋肉にまで達しており、一部が侵食されている。創傷を、創傷作成後１時間以内に以下の方法で処置する：（ａ）ＳＯＣドレッシング（たとえば、生理食塩水、サルファマイロン、または類似したもの［ウェット・トゥ・ドライ（ｗｅｔ ｔｏ ｄｒｙ）］；（ｂ）カバーとして脱細胞化魚皮のシートを備えた粉砕された脱細胞化魚皮、縫合糸またはステープルで固定；（ｃ）ＶＡＣデバイスを用いたＮＰＷＴ（ＫＣＩ）；（ｄ）カバーとして脱細胞化魚皮シートを備えた粉砕された脱細胞化魚皮、インタクトな魚皮カバーおよびＮＰＷＴも。

その後、創傷を非粘着性ドレッシングで覆い、ネオプレンガーメントで固定する。動物を回収し、モニターする。

経験豊富な臨床医によって創傷が移植の準備ができていると判断されるまで、傷害後２／３、４／５、６／７日、または２～３日ごとに、ガーメントおよびドレッシングを取り外して、創傷を検査して移植の準備ができているかどうかを評価する。準備ができると、創傷に３：１または４：１の幅広メッシュの自家移植片を移植し、ドレッシングを施す。

移植後、創傷を週に１～２回検査し、少なくとも２８日目まで、またはそれより早い場合は再上皮化まで、移植片の採取および治癒をモニターする。研究の終わりに、動物を施設の標準および推奨手順に従って安楽死させる。

実験の上記の時点のすべてで、創傷を写真撮影して、レーザードップラーイメージング（ＬＤＩ）を使用して画像化し、灌流を評価し、その後の培養／マイクロバイオーム分析のために拭き取り、２つのパンチ生検を採取し（各２ｍｍ）、１つはホルマリンで保存し、もう１つはＡｌｌＰｒｏｔｅｃｔ試薬で保存する（または瞬間冷凍する）。

エンドポイントは、（ａ）創傷床が移植の準備ができた傷害後の日数；（ｂ）移植後５～７日目の移植片採取；（ｃ）完全な上皮化までの時間；（ｄ）移植の４週間後の治癒した創傷の瘢痕化／美的外観；（ｅ）炎症、再上皮化、およびＥＣＭ（Ｈ＆Ｅおよびマッソントリクローム）を検査するための組織学的分析；（ｆ）ｍＲＮＡ分析によって定量化された、選択された創傷治癒関連遺伝子の発現。

ブタを移植後６～８週間経過観察し、そのため総研究期間は９～１２週間になる。

臨床評価者を盲検化する。

ＡＮＯＶＡ Ｆ検定を実行して、経時的な％再上皮化率および分子変化率における処置群間の差異の有意性を評価する。事後分析を、複数のテストを調整するためにテューキーの正直有意差（ＨＳＤ）を使用して実行する。ノンパラメトリック検定を、対応するデータに応じて組み込む。Ｐ値＜０．０５は有意であるとみなされる。

結果は、群（ｂ）および（ｄ）が、陽性対照（群（ａ））より優れ、群（ｃ）と少なくとも同等であるか、または場合によってはそれより有意に良好であることを含む。

定義された用語の簡略リスト
前述の書面による説明および添付の請求項の範囲および内容の理解を助けるために、いくつかの選択された用語が以下に直接定義される。

本明細書で使用されるように、「基材」という用語は、治療薬のためのビヒクルとして作用し得、加えてまたは代替として、創傷でのおよび／またはその周囲の湿気を可能にし、および／または受動的に調節し得る、当該技術分野で既知の任意の材料を含み得る。

「生体適合性ポリマー」という用語は、人体に有害ではないポリマー材料を指す。生体適合性ポリマーには、人体に有害な物質を放出せず、創傷部位に直接接触した場合でも皮膚刺激などの副作用、または人体への任意の他の悪影響を引き起こさない、合成または天然のポリマー材料が含まれる。

本明細書で使用されるような「エシェロン」の程度は、軍人に提供される医療処置の位置および／または種類を指す。エシェロンＩは、戦場またはエシェロンＩＩの人事局／施設から離れた場所で施される自助および仲間援助による処置の他に、戦闘衛生兵による処置を指す。エシェロンＩＩは、医師、医師の助手、または他の資格のある医療従事者による高度な外傷ケアを指し、エシェロンＩＩのケアは、多くの場合、野戦病院で施される。エシェロンＩＩＩは、軍団レベルで提供されるケアを指し、典型的に、生命、四肢、視力を救うための再建手術および根治手術を含み、このケアは、必要な設備を備えた野戦病院で提供され得る。エシェロンＩＶは、複雑な手術および長期にわたる回復期（たとえば２週間を超える）を指し、概して、地域の常設病院で提供される。エシェロンＶは、広範なリハビリテーションおよび回復期のケアを必要とする傷害および／または手順を指し、エシェロンＶの処置は、米国本土の常設病院で施される。前述のエシェロンシステムは、特に軍人および処置シナリオに関連するが、適切なように、民間および／または地方の法執行シナリオにおける処置場所および／または処置シナリオの種類に類推されてもよい。

本明細書で使用されるような「創傷」という用語は、概して組織傷害を包含することを意図されている。したがって、「創傷」という用語には、たとえば、断裂、擦過傷、切開、穿刺、剥離、または他の同様の傷害などの、皮膚の切断、裂傷、および／または破壊を引き起こす傷害を含む。創傷は、創傷のサイズ、形状、規模のいずれかによって記述され得る。たとえば、紙で切った傷は、比較的小さな規模の小さい真っ直ぐな切開の例であり、一方で、１つまたは複数の身体部分を覆う大きな裂傷を結果としてもたらす脳震とうブラスト（concussive blast）は、より大きな規模の比較的大きな創傷の例である。しかし、前述の例は各々、本明細書で使用されるような「創傷」という用語の範囲内に含まれる。

用語「創傷」はさらに、外傷によって引き起こされるものなどの、下層組織への損傷も含まれる。したがって、用語「創傷」は、複数の異なる創傷の組み合わせを含むように意図されている。たとえば、爆発による外傷性切断は、概して、さまざまな裂傷、擦過傷、剥離、病変、および穿刺の集合体であっても、創傷と呼ばれ得る。さらに、前述の爆発による爆発に起因する任意の下層組織の損傷は、創傷に関するこの言及の理解の範囲内にさらに包含され得る。用語「創傷」はまた、火傷傷（たとえば、熱傷および／または化学熱傷）によって引き起こされる組織傷害を包含するように意図されている。さらに、用語「創傷」はまた、たとえば、糖尿病性足潰瘍、静脈性脚潰瘍、外科手術、褥瘡、および他の原因から結果として生じる傷害を包含するように意図されている。

さらに、本明細書に開示される創傷処置および方法による処置を受け入れ可能な創傷は、内部、界面、外部、間質、体外、および／または体内を含む任意の部位に位置し得る傷害を含む。足場材料で覆うのに適した創傷の例としては、当業者によって知られている、切り傷、深手、開放創傷、組織断裂、褥瘡、皮膚炎、病変、慢性創傷、戦場創傷、壊死性創傷、急性、慢性、外傷性、裂傷、擦過傷、打撲傷、壊死性顔面炎、中毒性表皮神経融解症、床擦れ、静脈不全潰瘍、動脈性潰瘍、糖尿病性または神経障害性潰瘍、圧迫潰瘍、混合性潰瘍、火傷、ムコール症、血管性創傷、膿皮症、壊疽、および同等の症状、および／またはそれらの組み合わせが挙げられる。ヒトおよび動物の被験体における創傷の処置が企図されている。

特定の実施形態では、本明細書に開示される創傷処置および方法は、腹壁の再構築に、たとえばヘルニアを修復するために使用される。たとえば、ヘルニアを修復する際に、外科医はヘルニアの場所の近くを切開する。鼠径ヘルニアの場合、腹部と大腿部が接するヒダ（ｃｒｅａｓｅ）のすぐ上を切開する。臍ヘルニアを修復するために、臍の近くで切開し、以前の手術の部位で臍ヘルニアが発生している場合には、その手術で得た切開部を再度開く。どこを切開しても、手術はほぼ同じように進行する。ヘルニア嚢を注意深く開き、腸または他の組織を腹部の中に戻す。弱くなった領域を、腹部の筋肉組織を一緒に引き寄せる合成メッシュまたは縫合糸で修復および強化する。

本明細書で使用されるような「外傷性創傷」は、皮膚と下層組織の両方を損傷させる物理的負傷に起因する任意の創傷を指す。銃創は、皮膚に穿刺（すなわち破壊）を引き起こし、下層組織を破裂するまたはそうでなければ損傷させるため、外傷性創傷の１つの非限定的な例である。別の非限定的な例として、脳震盪または爆発は、概して、（１つまたは複数の）外傷性創傷を結果として引き起こす。戦争中に受けた創傷のすべてではないが多くは、戦争および戦争関連の負傷の性質による外傷性創傷と記述され得る。「外傷性創傷」には、出血性創傷、骨および／または腱が露出した創傷、重度の火傷、深部組織創傷（たとえば、非対称深部組織創傷）、および／または大きな表面領域の創傷を含めることができる。

開示された実施形態に従って創傷処置を提供することによって、せん断力を受けやすく、複雑な創傷幾何学的形状に適用するのが困難である、既存の創傷処置の課題は、利点を有して対処される。本開示の創傷処置および方法の実施形態によって、臨床医は、創傷床により良好に適合し、実施形態では、足場材料のシートと協働して創傷治癒のための基材を提供しながら、細胞の内方成長および血管新生を促進する足場材料を提供することが可能である。

本開示は、さまざまな実施例、実施形態、および特徴を提供するが、明示的に記載されない限り、または相互に排他的である場合を除き、本明細書に記載される他の実施例、実施形態、または特徴と組み合わせ可能であることが理解されるべきである。

上記に加えて、さらなる実施形態および実施例には以下が含まれる：
１．脱細胞化魚皮の粒子を含む創傷処置であって、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する、創傷処置。
２．所定のサイズ閾値が１ｍｍより大きい、１記載の創傷処置。
３．所定のサイズ閾値が１ｍｍと１．３９ｍｍの間であるか、または所定のサイズ閾値が１．４ｍｍと１．９９ｍｍの間である、１記載の創傷処置。
４．所定のサイズ閾値が２ｍｍと２．８ｍｍの間である、１記載の創傷処置。
５．所定のサイズ閾値が１ｍｍ未満である、１記載の創傷処置。
６．所定のサイズ閾値が１ｍｍと２ｍｍの間である、１記載の創傷処置。
７．所定のサイズ閾値が２ｍｍを超える、１記載の創傷処置。
８．所定のサイズ閾値が、脱細胞化魚皮の粒子の長さおよび／または幅に関係するか、または所定のサイズ閾値が、脱細胞化魚皮の粒子の厚さに関係していない、上記１～７または下記９～１０のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置。
９．所定のサイズ閾値とサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する脱細胞化魚皮の粒子の所定のパーセンテージが、粒子の７５％またはそれより大きい、上記１～８または下記１０のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置。
１０．脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第２の部分の第２の所定のパーセンテージが、第２の所定のサイズ閾値の最大値および／または第２のサイズ閾値の最小値の範囲内の最大寸法を有し、第２の所定のサイズ閾値の最大値が、粒子の第１の部分の所定のサイズ閾値の最大値とは異なり、および／または第２のサイズ閾値の最小値が、粒子の第１の部分のサイズ閾値の最小値とは異なる、上記１～９のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置。
１１．創傷処置方法であって、当該方法が、脱細胞化魚皮の粒子を提供する工程であって、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する、工程と、脱細胞化魚皮の粒子を創傷床に適用する工程と、創傷床をドレッシングで覆う工程と、を含む、創傷処置方法。
１２．脱細胞化魚皮の粒子を創傷床に適用する前に処置のために創傷床を準備する工程と、ドレッシングを固定する工程と、細断された、脱細胞化魚皮の粒子の融合に関して創傷床をチェックする工程と、をさらに含む、上記１１または下記１３～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１３．ドレッシングが、合成不織ドレッシングまたは綿織ドレッシングを含む非付着性ドレッシングである、上記１１～１２または下記１４～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１４．脱細胞化魚皮の粒子を創傷床に適用する工程が、脱細胞化魚皮の粒子を創傷床の形状に適合させることを含む、上記１１～１３または下記１５～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１５．適用前に脱細胞化魚皮粒子を液体で湿らせて、脱細胞化魚皮の湿った粒子を得る工程をさらに含む、上記１１～１４または下記１５～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１６．融合に関して創傷床をチェックする工程が、創傷床への脱細胞化魚皮の粒子の適用後２週間以内に行われる、１２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１７．脱細胞化魚皮の粒子が実質的に長方形の形状を画定する、上記１１～１６または下記１８～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１８．脱細胞化魚皮の粒子が、液体を受けるように構成されているパッケージ内に提供される、上記１１～１７または下記１９～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
１９．脱細胞化魚皮の湿った粒子が、創傷床への適用前にペーストに形成される、１５のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
２０．脱細胞化魚皮の粒子が、シートベースの脱細胞化魚皮足場と組み合わせて使用される、上記１１～１９または下記２１～２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
２１．シートベースの脱細胞化魚皮足場が、脱細胞化魚皮の粒子の適用後に創傷床上に適用される、上記１１～２０または下記２２のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
２２．脱細胞化魚皮の粒子を提供する工程が、第２の所定のサイズ閾値の最大値および／または第２のサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第２の部分の第２の所定のパーセンテージを提供することを含み、かつ第２の所定のサイズ閾値の最大値が、粒子の第１の部分の所定のサイズ閾値の最大値とは異なり、および／または第２のサイズ閾値の最小値が、粒子の第１の部分のサイズ閾値の最小値とは異なる、１１～２１のいずれかまたは組み合わせによる創傷処置方法。
２３．創傷処置を提供する方法であって、当該方法が、脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを提供する工程と、脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有するように、脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを脱細胞化魚皮の粒子に細断するまたは粉砕する工程と、を含む方法。

上記に加えて、さらなる実施形態および実施例は以下を含む：
１．粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を含む一時的な創傷処置。
２．一時的な創傷処置が、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に送達するように構成および配置された一時的なドレッシングを含み、一時的なドレッシングが、創傷と接触し、粉砕された脱細胞化魚皮を創傷で保持するように構成された接触層と、接触層と関連付けられた外側カバーであって、接触層を創傷で保持するように構成された外側カバーと、を含む、上記１または下記２～１２のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。
３．接触層に関連付けられた、および粉砕された脱細胞化魚皮粒子を運ぶ基材をさらに含む、上記２による一時的な創傷処置。
４．粉砕された脱細胞化魚皮粒子が、時間依存的様式で基材から解放可能である、上記３による一時的な創傷処置。
５．粉砕された脱細胞化魚皮粒子が、直径約１ｃｍより小さく、直径約０．１ｃｍよりも小さく、直径約１０ｍｍより小さく、直径約１ｍｍより小さく、直径約０．１ｍｍより小さく、直径約１０μｍより小さく、直径約１μｍより小さく、またはそれらの組み合わせである、上記１～４または下記６～１２のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。
６．外側カバーに関連付けられた圧縮要素であって、外側カバーを創傷の形状に適合させるように構成された圧縮要素をさらに備える、上記１～５または下記７～１２のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。
７．外側カバーに関連付けられた圧縮要素であって、外側カバーを創傷を含む部分的または全体的な手足の形状に適合させるように構成された圧縮要素をさらに備える、上記１～５または下記８～１２のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。
８．圧縮要素が、膨張可能な袋を有するスリーブを備える、上記６～７のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。
９．接触層に関連付けられた、および粉砕された脱細胞化魚皮粒子を運ぶ基材をさらに含み、基材がスリーブの底部または周壁に配されている、８による一時的な創傷処置。
１０．粉砕された脱細胞化魚皮粒子が、部分的に加工された、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を含む、上記１～９または下記１１～１２のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。
１１．部分的に加工された、粉砕された脱細胞化魚皮粒子が、粉砕された脱細胞化魚皮粒子の剛性を低下させるために１つまたは複数の酵素で処理されている、上記１０による一時的な創傷処置。
１２．部分的に加工された、粉砕された脱細胞化魚皮粒子内の細胞外マトリックス材料の少なくとも一部が、１つまたは複数の酵素によって切断されており、部分的に加工された、粉砕された脱細胞化魚皮粒子の延性または弾性の１つまたは複数を増大させる、上記１１による一時的な創傷処置。
１３．創傷を安定化および／または保護するためのキットであって、創傷上または創傷内の配置のための、および接触要素によって創傷部位で保持される、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を含む容器を含む、キット。
１４．容器が、創傷と接触し、粉砕された脱細胞化魚皮を創傷において粒子形態で保持するように構成された接触要素と、接触要素および粉砕された脱細胞化魚皮を創傷において粒子形態で保持するように構成された外側カバーと、をさらに含む、上記１３または下記１５～１８のいずれかまたは組み合わせによるキット。
１５．容器が、粉砕された脱細胞化魚皮を粒子形態で運び、接触要素と関連付けるための基材をさらに含む、上記１３～１４または下記１６～１８のいずれかまたは組み合わせによるキット。
１６．容器が、鎮痛剤、麻酔剤、サイトカイン、成長因子、止血剤、抗生物質、抗真菌剤、水和化合物、またはそれらの組み合わせを含む、１つまたは複数の治療薬をさらに含む、上記１３～１５または下記１７～１８のいずれかまたは組み合わせによるキット。
１７．粉砕された脱細胞化魚皮粒子が、直径約１ｃｍより小さく、直径約０．１ｃｍよりも小さく、直径約１０ｍｍより小さく、直径約１ｍｍより小さく、直径約０．１ｍｍより小さく、直径約１０μｍより小さく、直径約１μｍより小さく、またはそれらの組み合わせである、上記１３～１６または下記１８のいずれかまたは組み合わせによるキット。
１８．容器が、外側カバーに関連付けられた圧縮要素をさらに含み、圧縮要素が、外側カバーを創傷に、および／または圧縮要素が外側カバーと関連付けられたときの創傷を含む部分的または全体的な手足の形状に適合させる、上記１４～１７のいずれかまたは組み合わせによるキット。
１９．創傷を安定化および／または保護するための方法であって、当該方法が、粒子形態の粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に適用する工程を含む、方法。
２０．当該方法が、粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷で保持するように構成された接触要素で創傷を覆う工程と、創傷を含む部分的または全体的な手足に接触要素を固定するために接触要素に外側カバーを適用する工程と、さらに含む、上記１９または下記２１～２８のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２１．粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に適用する工程が、創傷でまたは創傷近くで組織状態を保存することを含む、上記１９～２０または下記２２～２８のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２２．創傷でまたは創傷近くで組織状態を保存することが、損傷組織の損失を減少させること、または創傷を含む患部を回復させることができる可能性を高めることのうちの１つまたは複数を含む、上記２１による方法。
２３．創傷でまたは創傷近くで組織状態を保存することが、創傷が乾燥することまたは創傷でのもしくは創傷近くでの組織の劣化を引き起こすことを防ぐために、創傷の水分含有量を調節することを含む、上記２１または２２による方法。
２４．脱細胞化魚皮を創傷に適用する工程が、創傷での止血を高めることを含む、上記１９～２３または下記２５～２８のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２５．脱細胞化魚皮を創傷に適用する工程が、創傷に関連付けられた痛みを軽減することを含む、上記１９～２４または下記２６～２８のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２６．粉砕された脱細胞化魚皮粒子を創傷に適用する工程が、粉砕された脱細胞化魚皮粒子をボールに圧縮し、ボールを創傷に挿入することを含む、上記１９～２５または下記２７～２８のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２７．創傷が、深部組織創傷、出血性創傷、または骨および／または腱が露出した創傷である、上記１９～２６または下記２８のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２８．粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮を創傷に適用する工程が、粒子形態での脱細胞化魚皮内の細胞組織の内方成長を促進しない、上記１９～２７のいずれかまたは組み合わせによる方法。
２９．清浄でないおよび／または創面切除されていない創傷部位の処置のための包帯（bandage）であって、粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮を含む、包帯。
３０．粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮が、創傷部位への適用前に再水和される、上記２９または下記３１～３３のいずれかまたは組み合わせによるドレッシング。
３１．粒子形態での粉砕された脱細胞化魚皮を創傷部位に固定するための被覆物をさらに含む、上記２９～３０または下記３２～３３のいずれかまたは組み合わせによるドレッシング。
３２．創傷部位が深創傷を含み、粒子形態での粉砕された魚皮が深創傷に圧縮される、上記２９～３１または下記３３のいずれかまたは組み合わせによるドレッシング。
３３．粒子形態が、一時的な創傷処置中に創傷部位で細胞足場形成を最小限に抑えるように構成されている、上記１～１２のいずれかまたは組み合わせによる一時的な創傷処置。

関連技術に精通した本開示を所有する当業者であれば想到思いつくであろう、本明細書に例示される本発明の特徴のさまざまな変更および／または修正、および本明細書に例示される原理の追加の応用が、請求項によって定義されるような本発明の精神および範囲から逸脱することなく、例示された実施形態に対して行われ得、本開示の範囲内にあるとみなされるべきである。したがって、本明細書ではさまざまな態様および実施形態が開示されているが、他の態様および実施形態も企図される。本明細書に記載されるものと同様または同等の多数の方法および構成要素を本開示の実施形態を実施するために使用することができるが、特定の構成要素および方法のみが本明細書に記載される。

また、本開示の特定の実施形態によるシステム、デバイス、製品、キット、方法、および／またはプロセスが、明細書に開示および／または記載される他の実施形態に記載されている特性、特徴（たとえば、コンポーネント、部材、要素、部品、および／または部分）を含み得るか、組み込み得るか、またはそうでなければ備え得ることが理解される。したがって、特定の実施形態のさまざまな特徴は、本開示の他の実施形態と互換性があり得、組み合わせられ得、それらに含まれ得、および／またはそれらに組み込まれ得る。したがって、本開示の特定の実施形態に関する特定の特徴の開示は、特定の実施形態への上記特徴の適用または包含を限定するものとして解釈されるべきではない。むしろ、他の実施形態が、必ずしも本開示の範囲から逸脱することなく、上記特徴、部材、要素、部品、および／または部分を含むこともできることが理解される。

また、特徴が別の特徴と組み合わせて必要とされると記載されていない限り、本明細書の任意の特徴は、本明細書に開示される同じまたは異なる実施形態の任意の他の特徴と組み合わされ得る。さらに、例示的なシステム、方法、装置などのさまざまな周知の態様は、例示的な実施形態の態様を分かりにくくすることを避けるために、本明細書では特に詳細に説明されない。しかし、本明細書ではそのような態様も考慮される。

必ずしもすべての目的または利点が本開示の実施形態の下で達成されるわけではないことが理解されるべきである。当業者は、創傷処置および創傷処置を作成するための方法が、本明細書で教示または示唆されるような他の目的または利点を達成することなく、本明細書で教示されるような１つの利点または利点のグループを達成または最適化する方法で、具体化または実行され得ることを認識する。

当業者であれば、さまざまな開示された特徴の互換性を認識する。当業者であれば、本明細書に記載される変形例に加えて、創傷処置を調製し、本開示の原理に基づいて創傷処置を作成する方法を利用するために、各特徴に対する他の既知の同等物を混合して適合させることができる。当業者であれば、本明細書に記載される特徴が、他の種類の創傷処置および医療用途全般に適用され得ることを理解する。

本開示は、創傷処置の特定の例示的な実施形態および実施例を説明しているが、本開示が、具体的に開示された創傷処置の実施形態を超えて、他の代替実施形態および／または本開示の使用およびその明白な修正および同等物に及ぶことが当業者に理解される。本開示が、上で説明した開示された実施形態によって限定されるべきではなく、本明細書で説明した特徴を利用し得る他の用途に拡張され得ることが意図されている。

Claims (23)

1. 脱細胞化魚皮の粒子を含む創傷処置であって、
   前記脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、
   所定のサイズ閾値の最大値と、
   脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値と
   の範囲内の最大寸法を有する、創傷処置。
2. 前記所定のサイズ閾値が１ｍｍより大きい、請求項１記載の創傷処置。
3. 前記所定のサイズ閾値が１ｍｍと１．３９ｍｍの間であるか、または
   前記所定のサイズ閾値が１．４ｍｍと１．９９ｍｍの間である
   請求項１記載の創傷処置。
4. 前記所定のサイズ閾値が２ｍｍと２．８ｍｍの間である、請求項１記載の創傷処置。
5. 前記所定のサイズ閾値が１ｍｍ未満である、請求項１記載の創傷処置。
6. 前記所定のサイズ閾値が１ｍｍと２ｍｍの間である、請求項１記載の創傷処置。
7. 前記所定のサイズ閾値が２ｍｍを超える、請求項１記載の創傷処置。
8. 前記所定のサイズ閾値が、前記脱細胞化魚皮の粒子の長さおよび／または幅に関係するか、または前記所定のサイズ閾値が、前記脱細胞化魚皮の粒子の厚さに関係していない、請求項１記載の創傷処置。
9. 前記所定のサイズ閾値と前記サイズ閾値の最小値との範囲内の前記最大寸法を有する前記脱細胞化魚皮の粒子の前記所定のパーセンテージが、前記粒子の７５％またはそれより大きい、請求項１記載の創傷処置。
10. 前記脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第２の部分の第２の所定のパーセンテージが、
    第２の所定のサイズ閾値の最大値および／または第２のサイズ閾値の最小値の範囲内の最大寸法を有し、かつ
    前記第２の所定のサイズ閾値の最大値が、前記粒子の前記第１の部分の前記所定のサイズ閾値の最大値とは異なり、および／または前記第２のサイズ閾値の最小値が、前記粒子の前記第１の部分の前記サイズ閾値の最小値とは異なる、請求項１記載の創傷処置。
11. 創傷処置方法であって、前記創傷処置方法が、
    脱細胞化魚皮の粒子を提供する工程であって、前記脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、所定のサイズ閾値の最大値と、前記脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効なサイズ閾値の最小値との範囲内の最大寸法を有する、工程と；
    前記脱細胞化魚皮の粒子を創傷床に適用する工程と；
    前記創傷床をドレッシングで覆う工程と
    を含む、創傷処置方法。
12. 前記脱細胞化魚皮の粒子を前記創傷床に適用する前に処置のために前記創傷床を準備する工程と、
    前記ドレッシングを固定する工程と、
    細断された、脱細胞化魚皮の粒子の融合に関して前記創傷床をチェックする工程と
    をさらに含む、請求項１１記載の創傷処置方法。
13. 前記ドレッシングが、合成不織ドレッシングまたは綿織ドレッシングを含む非付着性ドレッシングである、請求項１１記載の創傷処置方法。
14. 前記脱細胞化魚皮の粒子を前記創傷床に適用する工程が、前記脱細胞化魚皮の粒子を前記創傷床の形状に適合させることを含む、請求項１１記載の創傷処置方法。
15. 適用前に前記脱細胞化魚皮粒子を液体で湿らせて、脱細胞化魚皮の湿った粒子を得る工程をさらに含む、請求項１１記載の創傷処置方法。
16. 融合に関して前記創傷床をチェックする工程が、前記創傷床への前記脱細胞化魚皮の粒子の適用後２週間以内に行われる、請求項１２記載の創傷処置方法。
17. 前記脱細胞化魚皮の粒子が実質的に長方形の形状を画定する、請求項１１記載の創傷処置方法。
18. 前記脱細胞化魚皮の粒子が、液体を受けるように構成されているパッケージ内に提供される、請求項１１記載の創傷処置方法。
19. 前記脱細胞化魚皮の湿った粒子が、前記創傷床への適用前にペーストに形成される、請求項１５記載の創傷処置方法。
20. 前記脱細胞化魚皮の粒子が、シートベースの脱細胞化魚皮足場と組み合わせて使用される、請求項１１記載の創傷処置方法。
21. 前記シートベースの脱細胞化魚皮足場が、前記脱細胞化魚皮の粒子の適用後に前記創傷床上に適用される、請求項２０記載の創傷処置方法。
22. 前記脱細胞化魚皮の粒子を提供する工程が、第２の所定のサイズ閾値の最大値および／または第２のサイズ閾値の最小値の範囲内の最大寸法を有する、前記脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第２の部分の第２の所定のパーセンテージを提供することを含み、かつ
    前記第２の所定のサイズ閾値の最大値が、前記粒子の前記第１の部分の前記所定のサイズ閾値の最大値とは異なり、および／または前記第２のサイズ閾値の最小値が、前記粒子の前記第１の部分の前記サイズ閾値の最小値とは異なる
    請求項１１記載の創傷処置方法。
23. 創傷処置を提供する方法であって、前記方法が、
    脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを提供する工程と、
    前記脱細胞化魚皮の粒子の少なくとも第１の部分の所定のパーセンテージが、
    所定のサイズ閾値の最大値と、
    前記脱細胞化魚皮のマトリックス構造を保存し、かつ創傷内への細胞の再生性内方成長を促進するのに有効であるサイズ閾値の最小値と
    の範囲内の最大寸法を有するように、前記脱細胞化魚皮の１枚または複数枚のシートを脱細胞化魚皮の粒子に細断するまたは粉砕する工程と
    を含む方法。

Images