JP2024042541A - 流路構造体、及び脂質粒子の製造方法 - Google Patents

Abstract

【課題】 脂質粒子をより均一な粒径で製造することができる流路構造体、及び脂質粒子の製造方法を提供する。【解決手段】 実施形態に従う流路構造体は、第１の流路と、第２の流路と、第３の流路と、第１の流路の一方の端部、第２の流路の一方の端部及び第３の流路の一方の端部を互いに接続する第１の合流部と、第４の流路と、第５の流路と、第３の流路の他方の端部、第４の流路の一方の側端部及び第５の流路の一方の端部を互いに接続する第２の合流部とを有する。実施形態に従う流路構造体の第１の流路の一方の端部は、第１の合流部の深さよりも浅い第１の浅部を有し、第４の流路の一方の端部は、第２の合流部の深さよりも浅い第２の浅部を有する。【選択図】図１

Description

本発明の実施形態は、流路構造体、及び脂質粒子の製造方法に関する。

従来、脂質粒子の製造は、脂質粒子を構成する脂質及び脂質粒子の内包物となる物質を有機溶媒中で混合する混合工程、並びに、混合工程で得られた有機溶媒の溶液を水溶液で希釈し、脂質粒子を形成する希釈工程をもって行われる。

しかしながら、従来の方法に従って得られた脂質粒子の粒径は、均一でない場合があった。脂質粒子の粒径が不均一であると、脂質粒子を含有する製剤としての効果の安定性に欠けるという点で問題があった。

本発明が解決しようとする課題は、脂質粒子をより均一な粒径で製造することができる流路構造体、及び脂質粒子の製造方法を提供することである。

実施形態に従う流路構造体は、第１の流路と、第２の流路と、第３の流路と、第１の流路の一方の端部、第２の流路の一方の端部及び第３の流路の一方の端部を互いに接続する第１の合流部と、第４の流路と、第５の流路と、第３の流路の他方の端部、第４の流路の一方の側端部及び第５の流路の一方の端部を互いに接続する第２の合流部とを有する。実施形態に従う流路構造体の第１の流路の一方の端部は、第１の合流部の深さよりも浅い第１の浅部を有し、第４の流路の一方の端部は、第２の合流部の深さよりも浅い第２の浅部を有する。

図１は、第１実施形態の流路構造体の一例を示す平面図及び断面図である。 図２は、第１実施形態の流路構造体の一例を示す斜視図である。 図３は、第１実施形態の流路構造体の流路断面の一例を示す断面図であり、（ａ）は第１のスワール構造の断面形状を、（ｂ）は第２のスワール構造の断面形状を示す。 図４は、第１実施形態の流路構造体の流路断面の一例を示す断面図であり、（ａ）は正方形の流路断面、（ｂ）は底部の２隅をＲ形状とした略正方形の流路断面、及び（ｃ）は正方形の辺の半分の断面の距離を半径としたＲ形状の流路断面を示す。 図５は、第２実施形態の流路構造体の一例を示す平面図である。 図６は、第３実施形態の流路構造体の一例を示す平面図である。 図７は、第４実施形態の流路構造体の一例を示す平面図であり、（ａ）は直列的に接続された複数の混合ユニットを備える流路構造体を、（ｂ）は一部の混合ユニットの第１の分岐合流路と、第２の分岐合流路とが反転して配置された流路構造体を示す。 図８は、第４実施形態の流路構造体の一例を示す平面図であり、（ａ）は複数の混合ユニットが並列的に接続される流路構造体を、（ｂ）は複数の混合ユニットが直列的かつ並列的に接続される流路構造体を示す。 図９は、第４実施形態の流路構造体の一例を示す平面図である。 図１０は、第５実施形態の流路構造体の一例を示す断面図であり、（ａ）は流路長が他の流路よりも長い流路を備える流路構造体を、（ｂ）は流路幅が他の流路よりも広い流路を備える流路構造体を示す。 図１１は、第７実施形態の流路構造体の一例を示す平面図である。 図１２は、第７実施形態の流路構造体のトラップ構造における流路断面の一例を示す、断面図である。 図１３は、第７実施形態の流路構造体のトラップ構造に異物を含有する流体を流したときのトラップ構造の様子を示す、斜視図である。 図１４は、第７実施形態の流路構造体のトラップ構造の一例を示す平面図である。 図１５は、実施形態の流路構造体製造方法に係る図であり、（ａ）～（ｅ）は、それぞれ、同方法で製造される流路構造体の一例を示す断面図である。 図１６は、実施形態の脂質粒子を示す画像である。 図１７は、実施形態の脂質粒子製造方法を示すフローチャートである。 図１８は、実施形態の脂質粒子製造方法に用いる流路構造体の一例を示す平面図である。 図１９は、例１の実験に用いた流路構造体の概略平面図であり、（ａ）は実施例の流路構造体、（ｂ）は比較例の流路構造体であり、（ｃ）は比較例の流路構造体の第２の合流部を示す。 図２０は、例２の実験に用いた比較例の流路構造体の概略図である。 図２１は、例３の実験に用いた流路構造体の第２のスワール構造の概略図であり、（ａ）は第４の流路が浅部を備え、（ｂ）は一部のみならず第４の流路の全域に亘って第５の流路の深さよりも浅く、（ｃ）は第４の流路が全域に亘って、第５の流路の深さよりも浅く、かつ、第５の流路の幅よりも広い流路構造体を示す、概略平面図である。

以下、実施形態について、添付の図面を参照して説明する。なお、各実施形態において、実質的に同一の構成部位には同一の符号を付し、その説明を一部省略する場合がある。図面は模式的なものであり、各部の厚さと平面寸法との関係、各部の厚さの比率等は現実のものとは異なる場合がある。

（第１実施形態）
第１実施形態に従う流路構造体は、第１の流路と、第２の流路と、第３の流路と、第１の流路の一方の端部、第２の流路の一方の端部、及び第３の流路の一方の端部を互いに接続する第１の合流部と、第１の流路の一方の端部に位置する、第１の合流部の深さよりも浅い第１の浅部と、第４の流路と、第５の流路と、第３の流路の他方の端部、第４の流路の一方の端部、及び第５の流路の一方の端部を互いに接続する第２の合流部と、第４の流路の一方の端部に位置する、第２の合流部の深さよりも浅い第２の浅部と、を備える。

後述するが、第１の流路、第２の流路及び第３の流路が互いに接続された第１の合流部、並びに、第３の流路、第４の流路及び第５の流路が互いに接続された第２の合流部は、旋回流（スワール）を発生させる構造である。すなわち、第１実施形態に従う流路構造体は、２つのスワール構造が連結されてなる流路構造体である。以下、第１実施形態の流路構造体の２つのスワール構造のうち、上流側を第１のスワール構造、下流側を第２のスワール構造と称する。ここで、上流側とは、実施形態の流路構造体を使用する際に流体を送出する側のことを指し、逆に、下流側とは流体が送出される側を指す。

従って、流体の流れ方向を基準に説明すると、第１実施形態に従う流路構造体は、第１の流路、第２の流路、第３の流路、第４の流路及び第５の流路を有する流路構造体である。第１の流路の下流側端部と、第２の流路の下流側端部と、第３の流路の上流側端部とが、第１の合流部において互いに接続され、第３の流路の下流側端部と、第４の流路の下流側端部と、第５の流路の上流側端部とが、第２の合流部において互いに接続される。第１の流路の下流側端部は、第１の合流部の深さよりも浅い、第１の領域を有し、第４の流路の下流側端部は、第２の合流部の深さよりも浅い、第２の領域を有する。

例えば、図１に示すように、第１実施形態の流路構造体１は、第１のスワール構造２と第２のスワール構造３とを備え、第１のスワール構造２と第２のスワール構造３は流路構造体１の外部空間と直接連通しない流路によって接続される。以下、第１のスワール構造２と第２のスワール構造３について詳述する。

なお、本明細書において「流路」とは、流路構造体の内部に形成される、上流側の端と下流側の端にそれぞれ開口部を有する空間として定義され、同空間は、流路構造体を構成する液密の基材を壁面とし、かつ、その天面が流路構造体の基材によって封止されるように規定される。また、２つの流路同士が「接続されている」とは、一方の流路の下流側の端（又は上流側の端）の開口部と、他方の流路の上流側の端（又は下流側の端）の開口部とが、互いの内部空間と連通するように液密に接続され、ひとつながりの空間が形成されている状態を指す。

第１のスワール構造２は、第１の流路４、第２の流路５、及び第３の流路６から構成されており、第１の流路４の下流側の端と第２の流路５の下流側の端とが、第３の流路６の上流側の端に接続されることで形成された流路系である。第１の流路４及び第２の流路５の上流側の端はそれぞれ開口部（図示せず）を有し、それぞれの開口部を介して流路構造体１の外部空間と連通し得る。ただし、各開口部と連通する外部空間が密閉系の場合には、第１の流路４及び第２の流路５の内部空間も密閉系である。このような第１の流路４及び第２の流路５の開口部には、例えば流体を収容するタンクやポンプ（図示せず）を接続し、流体を供給することが可能である。第３の流路６は、その上流側の端が第１の流路４及び第２の流路５の下流側の端と接続される流路である。従って、第３の流路６の上流側の端は、流路構造体１の外部空間と直接連通しない。以下、第１の流路４、第２の流路５及び第３の流路６の３つが接続・合流した流路の領域を、第１の合流部７と称する。

第１のスワール構造２の第１の合流部７を構成する壁面は、第２の流路５の下流側端部及び／又は第３の流路６の上流側端部のどちらであってもよい。すなわち、第１の合流部７は、より第２の流路５に近接した位置にあってもよいし、より第３の流路６に近接した位置にあってもよいし、第１の合流部７にあたる流路の一部は第２の流路５に、残りの部分は第３の流路６に含まれると解釈されてもよい。

第２のスワール構造３は、第３の流路６、第４の流路８及び第５の流路９から構成されており、第３の流路６の下流側の端と第４の流路８の下流側の端とが第５の流路９の上流側の端に接続されることで形成された流路系である。第４の流路８の上流側の端及び第５の流路９の下流側の端はそれぞれ開口部（図示せず）を有し、それぞれの開口部を介して流路構造体１の外部空間と連通し得る。ただし、各開口部と連通する外部空間が密閉系の場合には、第４の流路８及び第５の流路９の内部空間も密閉系である。このような第４の流路８の開口部には、例えば流体を収容するタンクやポンプ（図示せず）を接続し、流体を供給することが可能である。一方、第５の流路９の開口部には、例えば流体を収容し得るタンク（図示せず）を接続し、同開口部から排出される流体を回収することが可能である。第３の流路６の下流側端は、第４の流路８の下流側の端及び第５の流路９の上流側の端に接続されている。従って、第３の流路６の下流側の端は、流路構造体１の外部空間と直接連通しない。以下、第３の流路６、第４の流路８及び第５の流路９の３つが接続・合流した流路の領域を、第２の合流部１０と称する。

第２のスワール構造３の第２の合流部１０を構成する壁面は、第３の流路６の下流側端部及び／又は第５の流路９の上流側端部のどちらであってもよい。すなわち、第２の合流部１０は、第３の流路６内にあると解釈されてもよいし、第５の流路９内にあると解釈されてもよいし、第２の合流部１０にあたる流路の一部は第３の流路６に、残りの部分は第５の流路９に含まれると解釈されてもよい。

上記のように構成される第１のスワール構造２と第２のスワール構造３は、両者に共通して構成される第３の流路６によって接続されている。換言すれば、第３の流路６は、第１の合流部７と第２の合流部１０とを接続する流路である。第３の流路６は、第１の流路４、第２の流路５、第４の流路８及び第５の流路９を介して流路構造体１の外部空間と連通する流路であり、流路構造体１の外部空間と直接的には連通しない。従って、第３の流路６は、外部空間と直接的に連通しないという意味において、その内部空間が流路構造体１の外部空間から隔離されており、一種の密閉系が形成されている。また、第３の流路６は、その内部空間が密閉系であるように構成されていれば、任意の流路構造を採用してもよい。例えば、第３の流路６は、その上流側の端と下流側の端との間で、複数の流路に分岐し、かつ、複数に分岐した流路が１つに合流するように構成されていてもよい。

第１実施形態では、第３の流路６の長軸を対称軸として、第１の流路４と第２の流路５とが互いに対称の位置にあるように接続し、全体としてＹ字形状を成した流路構造体１を例示して説明する。後述するが、第１の流路４の長軸と第２の流路５の長軸がなす角θ_１は例えば直角であり、このとき、第１の流路４の長軸と第３の流路６の長軸とがなす角θ_２は例えば１３５°である。同様に、第４の流路８と第５の流路９とがなす角度θ_３は例えば直角である。

第１の流路４の下流側の端は、第１の合流部７における流路（すなわち第２の流路５及び／又は第３の流路６）よりも深さが浅い領域を有する。この領域を以下、第１の浅部４ａと称する。第１の流路４の第１の合流部７周辺の斜視図として図２を、上流側から下流側にかけての断面図として図３の（ａ）を示した。図２及び図３の（ａ）に示すように、例えば第１の浅部４ａは、第１の浅部４ａよりも上流の領域（以下、「第１の深部４ｂ」と称する）、及び第１の合流部７における流路よりも底面が突出し、流路の内腔を狭くしている。第１の深部４ｂの深さと、第１の合流部７における流路の深さは同じであってもよい。

第４の流路８の下流側の端は、第２の合流部１０における流路（すなわち、第３の流路６及び／又は第５の流路９）の深さよりも浅い領域を有する。この領域を以下、第２の浅部８ａと称する。上流側から下流側にかけての断面図として図３の（ａ）を示した。図３の（ｂ）に示す通り、例えば第２の浅部８ａは、第２の浅部８ａよりも上流の領域（以下、「第２の深部８ｂ」と称する）、及び第２の合流部１０における流路よりも底面が突出し、流路の内腔を狭くしている。第２の深部８ｂ及び第２の合流部１０における流路の深さは同じであってもよい。

上記説明した流路構成を備える、実施形態に従う流路構造体１において、第１の流路４には第１流体が、第２の流路５には第２流体が、第４の流路８には第３流体がそれぞれ供給される。このとき第３の流路６には、第１の流路４を通過した第１流体と、第２の流路５を通過した第２流体の混合流体とが混合された流体が送出される。さらに、第５の流路９には、第３の流路６を通過した第１流体及び第２流体の混合流体と、第４の流路８を通過した第３流体とが混合された流体が送出される。なお、図１では流体の進行方向を矢印で示した。図１に示すように、第１の流路４の流体の進行方向は、第２の流路５と異なる。また、第４の流路８の流体の進行方向は、第５の流路９と異なる。

図２は、第１のスワール構造２の第１の流路４及び第２の流路５に、それぞれ第１流体と第２流体を送出した時の様子を示す。矢印は流体の進行方向を示している。第１の流路４を流れる第１流体は、第１の浅部４ａを通過して第１の合流部７へと流れ込み、第１の合流部７を囲む壁面（すなわち、第２の流路５又は第３の流路６）と衝突することで横渦が発生する。横渦はその回転軸が第３の流路６の長軸と一致した旋回流である。

図２に示すように、第１流体は第１の合流部７において第２の流路５から供給される第２流体と合流するため、第１流体は横渦を発生させながら第３の流路６の長軸に沿って流れる。このような横渦の発生により、第３の流路６を流れるうちに第１流体及び第２流体が十分に混合され、攪拌される。すなわち、第１のスワール構造２として、上述のように構成される第１の流路４、第２の流路５及び第３の流路６を備えているため、第１流体と第２流体とを十分に混合し、撹拌することができる。

第２のスワール構造３は第１のスワール構造２と同様の構造を備えているので、第２のスワール構造３においても旋回流が発生する。第２のスワール構造３では、第２の浅部８ａが第４の流路８に設けられており、第２の浅部８ａを通過した第３の流体が第５の流路９と衝突することで横渦が発生する。その横渦は、その回転軸が第５の流路９の長軸と一致した旋回流である。このような横渦の発生により、第３流体と、第１流体及び第２流体の混合流体とを十分に混合することができる。すなわち、第１流体、第２流体及び第３流体の混合流体を十分に撹拌することができる。

第１の流路４、第２の流路５、第３の流路６、第４の流路８及び第５の流路９のそれぞれの断面積は、各流路を流れる流体の所望の流量に応じて決定されることが好ましい。例えば、第１の流路４、第２の流路５、第３の流路６、第４の流路８及び第５の流路９のそれぞれの断面積は、圧力損失を最小限にするために、例えば各流路の流量に正比例するように決定されてもよい。

例えば、流路構造体１の第３の流路６は、第１流体と第２流体との混合流体が送出される流路であるから、第３の流路６内の流量は、第１の流路４内の流量及び第２の流路５内の流量よりも大きい。従って、第３の流路６の断面積は、少なくとも第１の合流部７の直前において、第１の流路４の断面積及び第２の流路５の断面積よりも大きい方が好ましい。同様に、第５の流路９の断面積は、少なくとも第２の合流部１０の直前において、第３の流路６の断面積及び第４の流路８の断面積よりも大きい方が好ましい。

また、後述するが、第１流体と第２流体の混合流体を、第３流体によって高い倍率で希釈し、かつ、混合ひいては攪拌するために、実施形態の流路構造体が使用される場合がある。そのような場合、第３流体の流量は、第１流体、第２流体及びその混合流体の流量を上回る場合が多い。従って、第３流体が通過する第４の流路８の断面積は、第１流体が通過する第１の流路４、第２流体が通過する第２の流路５、及び、第１流体と第２流体の混合流体が通過する第３の流路６の断面積よりも大きい方が好ましい。

このように、流路構造体１の用途によっては、第２のスワール構造３で合流する流路同士の断面積の差異は大きくともよい。流体が合流及び接続される流路同士で断面積が異なる非対称なスワール構造になっている。

図３の（ａ）に示すように、第１の浅部４ａの深さｄ_１は第３の流路６の深さｄ_２に対して１／２未満であることが好ましい。ｄ_１／ｄ_２は１／３以下であればより好ましい。このような深さとすることにより、第１の浅部４ａから第３の流路６へ流体が流れ込む際の流速が上がり、横渦がより発生しやすくなる。同様に、図３の（ｂ）に示すように、第２の浅部８ａの深さｄ_３は第５の流路９の深さｄ_４に対して１／２未満であることが好ましい。ｄ_３／ｄ_４は１／３以下であればより好ましい。このような深さとすることにより、第２の浅部８ａから第５の流路９へ流体が流れ込む際の流速が上がり、横渦がより発生しやすくなる。

第１の浅部４ａの深さｄ_１及び第２の浅部８ａの深さｄ_３は、より浅い方がより大きく強い横渦を発生させる流速を得られるものの、浅くしすぎると過剰な圧力損失が起こる可能性があり、また万が一異物が存在する場合には閉塞を招く虞もある。そのため、実験又はシミュレーションによって、第１の浅部４ａ及び第２の浅部８ａを浅く設計していき（すなわち、ｄ_１／ｄ_２、又はｄ_３／ｄ_４を、例えば１／３、１／４、１／５・・・と、より小さい値に変更する）、流路の工作上の精度又は圧力損失、異物に対するロバスト性が妥当であった深さのうち、最も浅い深さをｄ_１及びｄ_３として設定すればよい。

実際には、本流路構造体の製造に用いられる好ましい手法である金型成形又は切削加工の精度が一般的に５μｍであることから、第１の浅部４ａ及び第２の浅部８ａの深さは、誤差による流路の閉塞を回避するためにも、最低でも１０μｍ以上であることが望ましい。

また、定常的に安定な横渦を形成させるために、又はキャビテーションによる予期せぬ反応を生じさせないために、流速が乱流域に至るような浅さにまで第１の浅部４ａ及び第２の浅部８ａの深さを減少させることは避けた方がよい。

第１の浅部４ａの長さは、第３の流路６の流路幅と同じかそれ以上の長さとすることが好ましい。そのような構成にすることにより、第１の深部４ｂから第１の浅部４ａへ流体が流れた時に生じる流れの乱れが、第１の浅部４ａ内で適度に収まり得る。流れの乱れを抑えることで、より効率的に横渦の発生させることができる。同様に、第２の浅部８ａの長さは、第５の流路９の流路幅と同じかそれ以上の長さとすることが好ましい。しかしながら、第１の浅部４ａ及び第２の浅部８ａを無用に長くすることは、圧力（流体抵抗）を過剰に上げる可能性がある。そのため、第１の浅部４ａの長さは、最長で流路幅の約３倍程度であることが通常である。しかしながら、ポンプの吐出性能によっては３倍よりも長くすることも可能であり、流路の配置等の都合等で必要であればそのような長さに設定してもよい。

第１の流路４の第１の深部４ｂ及び第３の流路６の流路幅及び深さ、第１の浅部４ａの深さ、並びに流体の供給量は限定されるものではなく、流体の種類に従って決定される。混合及び希釈に使用する流体は液体に限らず気体でもよい。例えば、横渦を発生させるためにも層流となることを防止する目的で、第１の浅部４ａ以外の通常の深さを有する流路部分におけるレイノルズ数が１０以上となるように調節することが好ましい。また均一な横渦を作る目的において乱流を避けるためにも、少なくともレイノルズ数を２３００未満とすることが好ましい。更に好ましくは、一般的に入手できるポンプの性能と、実効的な横渦の強さを念頭に入れ、レイノルズ数が５０～約１０００であることが好ましい。

例えば、第１の深部４ｂ及び第３の流路６の断面を０．３ｍｍ角とする場合、流速を約０．５ｍ／ｓ以上とすることが好ましい。流体を水に近いものと想定すると、室温付近では、この際のレイノルズ数は１００前後である。

例えばレイノルズ数を一定に維持したまま流路断面の一辺の長さを短くすると、圧力へは２乗で影響する。そのため、例えば一辺０．３ｍｍの流路において、第１の浅部４ａの深さｄ_１を０．１ｍｍとすることで第１の浅部４ａにおける圧力損失は１０倍になる。また第１の浅部４ａにおける圧力の１０倍前後の上昇により、流量範囲に対する適用可能なポンプの仕様変更の必要性が高くなり、またその場合ポンプの種類も限られる。そのため、第１の浅部４ａの深さｄ_１が０．１ｍｍ以上となるように設計することが望ましい。またポンプの負担を軽減するために圧力の上昇の上限は１０倍程度とすることが好ましい。

一方で、本流路構造体でポンプを用いる場合、脈動を起こさないポンプを用いることが好ましい。そのようなポンプとしては１ｍＬ／ｓｅｃ程度の送液量のものが容易に入手できる。それを考慮した場合、第１の深部４ｂ及び第３の流路６の断面の幅及び深さは３ｍｍ程度が妥当な上限であり得る。

第３の流路６の流路断面は、図４の（ａ）に示すように幅及び深さが同じ長さである正方形であることが好ましい。しかしながら精密に正方形にする必要はなく、一方の辺が僅かに長い略正方形であってもよい。また、可能であれば図４の（ｂ）に示すように断面の底部の２隅を曲面形状、Ｒ形状とした形状もまた好ましく、又は図４の（ｃ）に示すように断面の底部を正方形の辺の半分の距離を半径とした曲面形状、Ｒ形状としてもよい。このような断面形状により、横渦がより真円に近い形状となり、横渦がより長く維持される。その結果、流体をよく混合及び撹拌することができる。なお、第３の流路６の全域に亘りこのような断面形状でなくともよく、少なくとも第１の合流部７がこのような断面形状であればよい。

以上に説明した通り、第１実施形態の流路構造体は、流体が通過する際に横渦を発生させる第１のスワール構造及び第２のスワール構造を備えていることから、３種の流体をそれぞれ第１の流路、第２の流路及び第４の流路に供給することによって、ミクロなスケールにおける３種の流体の効果的な混合が可能である。異なる種類の流体同士（例えば、それぞれの溶質及び／又は溶媒が互いに異なる流体同士）が混合され攪拌されると、それぞれの流体は混合前と比較して希釈されることとなる。このとき、流体同士を効果的に混合ひいては攪拌することによって、より均一に希釈することができる。また、実施形態の流路構造体に流体が供給される場合、流路構造体の複数の流路には密閉系のタンク又はポンプが接続されるため、流路構造体の複数の流路のそれぞれの内部空間は密閉系である。さらに、上述したように複数の流路同士も液密に接続されている。すなわち、実施形態の流路構造体を使用することによって、密閉系における流体の希釈が可能である。

従来、脂質粒子の製造は、脂質粒子を構成する脂質、及び脂質粒子の内包物となる物質を有機溶媒中で混合し、さらに、混合して得られた有機溶媒の溶液を水溶液で希釈することで行われる。希釈の操作は、一般的には、開放系の作業環境において実施されているが、そのような開放系の作業環境における希釈操作を経て得られた脂質粒子の粒径は不均一になりやすく、粒径の均一さが評価される脂質粒子を含有する製品を製造する際の課題であった。

近時、発明者らは、作業環境中の水蒸気量が同環境中で形成される脂質粒子の粒径を決定する要素の一つであり、水蒸気量が変動するような開放系の作業環境中で脂質粒子を作製することが上記課題の一因であることを見出した。

実施形態の流路構造体を使用することで、希釈操作を密閉系において実施できるため、作業環境中の水蒸気量の影響を排除することが可能であり、ひいては、粒径の均一な脂質粒子を優れた効率で製造することができる。
（第２実施形態）
第２実施形態に従う流路構造体は、さらなるスワール構造を備える点で第１実施形態の流路構造体と異なる。すなわち、第２実施形態の流路構造体は、少なくとも３つ以上のスワール構造を備える流路構造体である。以下、第１実施形態に記載の流路構造体と同様の構成については、説明を省略する。

例えば、図５に示す流路構造体２０は、第２のスワール構造３の下流側すなわち第５の流路９に、第３のスワール構造２１が接続される。第３のスワール構造２１は、第５の流路９、第６の流路２２、及び第７の流路２３から構成されており、第５の流路９の下流側の端と第６の流路２２の下流側の端とが、第７の流路２３の上流側の端に接続されることで形成された、液密で密閉された空間からなる流路系である。

第６の流路２２の上流側の端及び第７の流路２３の下流側の端はそれぞれ開口部（図示せず）を有し、それぞれの開口部を介して流路構造体１の外部空間と連通し得る。ただし、各開口部と連通する外部空間が密閉系の場合には、第６の流路２２及び第７の流路２３の内部空間も密閉系である。このような第６の流路２２の開口部には、例えば流体を収容するタンクやポンプ（図示せず）を接続し、流体を供給することが可能である。一方、第７の流路２３の開口部には、例えば流体を収容し得るタンク（図示せず）を接続し、同開口部から排出される流体を回収することが可能である。第５の流路９の下流側の端は、第６の流路２２の下流側の端及び第７の流路２３の上流側の端と接続される。従って、第５の流路９の下流側の端は、流路構造体１の外部空間と直接連通しない。

また、以下、第５の流路９、第６の流路２２及び第７の流路２３同士が接続され合流した流路の領域を、第３の合流部２４と称する。第３の合流部２４を構成する壁面は、第５の流路９の下流側端部及び／又は第７の流路２３の上流側端部のどちらであってもよい。すなわち、第３の合流部２４は、第５の流路９内にあると解釈されてもよいし、第７の流路２３内にあると解釈されてもよいし、第３の合流部２４にあたる流路の一部は第５の流路９に、残りの部分は第７の流路２３に含まれると解釈されてもよい。

第６の流路２２の下流側の端は、第３の合流部２４にあたる流路（すなわち第５の流路９及び／又は第７の流路２３）の深さよりも浅い領域が形成されている。この領域を以下、第３の浅部２２ａと称する。第３の浅部２２ａは、第６の流路２２の第３の浅部２２ａよりも上流の領域（以下、「第３の深部２２ｂ」と称する）、及び、第３の合流部２４にあたる流路よりも底面が突出し、流路の内腔を狭くしている。例えば、第３の深部２２ｂ及び第３の合流部２４にあたる流路の深さは同じであってもよい。

上記の構成を有する流路構造体２０の第６の流路２２に、第１の流路４、第２の流路５及び第４の流路８を通過するそれぞれの流体とは異なる流体を送出すると、第３のスワール構造２１が発生させる横渦によって、４種の流体を密閉系において十分に混合、攪拌及び希釈することが可能である。

さらなる実施形態として、流路構造体２０は、第６の流路２２及び第７の流路２３よりもさらに下流側に、浅部を有する流路をさらに少なくとも１つ以上備え、かつ、同浅部を有する流路の下流側の端部に、上流側の端部が接続される流路をさらに少なくとも１つ以上備えることにより、さらなるスワール構造を少なくとも１つ以上備えてもよい。

例えば、第２実施形態の流路構造体が、浅部を備える流路を例えば第１の流路４、第４の流路８、第６の流路２２、・・・、及び第Ｘの流路（ここで、Ｘは８以上の偶数であり、計（Ｘ／２）本である）を有するとすると、計（Ｘ／２＋１）本の、浅部を備える流路と合流する流路（例えば、第２の流路５、第３の流路６、第５の流路９、・・・、及び第（Ｘ＋１）の流路）を備えることで、計（Ｘ／２）のスワール構造群（例えば、第１のスワール構造２、第２のスワール構造３、第３のスワール構造２１、・・・第（Ｘ／２）のスワール構造）が形成されていてもよい。このような流路構造体によれば、異なる複数種類の流体（例えば、第１流体、第２流体、第３流体、・・・、第（Ｘ／２＋１）流体）を、密閉系において混合、攪拌ひいては希釈することが可能である。

第１実施形態の流路構造体１を基準として説明すると、第５の流路の他方の端部側に浅部を有する流路Ａをさらに計ｍ本（以下、ｍは１以上のいずれかの整数）備え、かつ、各流路Ａとそれぞれが接続される流路Ｂをさらに計ｍ本備える。ここで、計ｍ本の流路Ａのそれぞれを第（２ｎ＋４）の流路（以下、ｎは１からｍまでの各整数）と表し、計ｍ本の流路Ｂのそれぞれを第（２ｎ＋５）の流路と表すと、第（２ｎ＋３）の流路の他方の端部と、第（２ｎ＋４）の流路の一方の端部と、第（２ｎ＋５）の流路の一方の端部とが、第（ｎ＋２）の合流部において互いに接続されている。第（２ｎ＋４）の流路の一方の端部は、第（ｎ＋２）の合流部の深さよりも浅い、第（ｎ＋２）の浅部を有する。

流体の流れ方向を基準として説明すると、さらなるスワール構造を少なくとも１つ以上備える第２実施形態の流路構造体は、第１の流路４及び第４の流路８に加えて、浅部を有する流路（以下、流路Ａと称する）をさらにｍ本備え、かつ、第２の流路５、第３の流路６及び第５の流路９に加えて、その上流側の端部が、同浅部を有する流路の下流側の端部と接続される流路（以下、流路Ｂと称する）をさらにｍ本備える。ここで、ｍは１以上の整数である。

計ｍ本の流路Ａのそれぞれを第（２ｎ＋４）の流路（以下、ｎは１からｍまでの各整数）と表すと、ｍ本の流路Ｂのそれぞれは第（２ｎ＋５）の流路である。このとき、流路構造体の第（２ｎ＋３）の流路の下流側端部と、第（２ｎ＋４）の流路の下流側端部と、第（２ｎ＋５）の流路の上流側端部とが、第（ｎ＋２）の合流部において互いに接続され、第（２ｎ＋４）の流路の下流側端部は、第（ｎ＋２）の合流部の深さよりも浅い、第（ｎ＋２）の浅部を有する。

例えば、ｍ＝１の場合、ｎ＝１である。この場合、流路Ａは第６の流路、流路Ｂは第７の流路であり、第５の流路の下流側端部と、第６の流路の下流側端部と、第７の流路の上流側端部とが、第３の合流部において互いに接続され、第６の流路の下流側端部は、第３の合流部の深さよりも浅い、第３の浅部を有する。

また、例えば、ｍ＝２の場合、ｎ＝１又は２である。この場合、流路Ａは第６の流路及び第８の流路、流路Ｂは第７の流路及び第９の流路である。第５の流路の下流側端部と、第６の流路の下流側端部と、第７の流路の上流側端部とが、第３の合流部において互いに接続され、第６の流路の下流側端部は、第３の合流部の深さよりも浅い、第３の浅部を有する。また、第７の流路の下流側端部と、第８の流路の下流側端部と、第９の流路の上流側端部とが、第４の合流部において互いに接続され、第８の流路の下流側端部は、第４の合流部の深さよりも浅い、第４の浅部を有する。

すなわち、第１実施形態の流路構造体１を基準にすると、さらなる実施形態に係る流路構造体は、さらなるスワール構造を計ｍつ備えている。そのため、流路構造体は、第１流体、第２流体及び第３流体に加えて、さらに計ｍ種の流体を混合、攪拌ひいては希釈することが可能である。このような流路構造体を脂質粒子の製造に使用する際には、第１の流路、第２の流路、第４の流路、及び、流路Ａのうち第６の流路から第（２ｍ＋２）の流路までのそれぞれの流路に対し、有機溶媒中に脂質粒子の材料の脂質を含む脂質溶液、又は、水性溶媒中に種々の薬剤を含む薬液をそれぞれ供給し、かつ、第（２ｍ＋４）の流路に水性溶媒を供給するとよい。
（第３実施形態）
第３実施形態に従う流路構造体は、流路群である混合ユニットをさらに備える点で、第１及び第２実施形態の流路構造体と異なる。図６に、第３実施形態の一例である流路構造体３０を示す。図６では便宜上、浅部（８，３４ｂ，２３ｃ及び１３）を斜線パターンで示す。また、流体の流れる向きを矢印で示す。

詳述すると、第３実施形態に従う流路構造体は、第１実施形態に従う流路構造体の第３の流路が混合ユニットを更に有する。混合ユニットは、第３の流路の他方の端部から一方の端部までの間で、第３の流路から分岐し、再び第３の流路に合流する２つの流路である、第１の分岐合流路及び第２の分岐合流路を備える。第１の分岐合流路及び第２の分岐合流路は、第３の流路から分岐した分岐部と、第３の流路に合流する合流部と、分岐部及び合流部を接続し、接続箇所を屈曲させる中間部と、第１の分岐合流路の合流部側の端部に位置する、第３の流路の深さよりも浅い第３の浅部と、第２の分岐合流路の中間部に位置する、第２の分岐合流路の分岐部及び合流部よりも深さが浅い第４の浅部と、を有する。

また、流体の流れ方向を基準に説明すると、第３実施形態に従う流路構造体は、第１実施形態に従う流路構造体の第３の流路が混合ユニットを更に有する。混合ユニットは、第３の流路の上流側の端部から下流側の端部までの間で、第３の流路から分岐し、再び第３の流路に合流する、第１の分岐合流路及び第２の分岐合流路を備える。第１の分岐合流路及び第２の分岐合流路は、第３の流路から分岐した分岐部と、第３の流路に合流する合流部と、分岐部及び合流部を接続し、接続箇所を屈曲させる中間部と、第１の分岐合流路の合流部の下流側の端部に位置する、第３の流路の深さよりも浅い第３の浅部と、第２の分岐合流路の中間部に位置する、第２の分岐合流路の分岐部及び合流部よりも深さが浅い第４の浅部とを有する。以下、詳細に説明する。

流路構造体３０は、第１実施形態の流路構造体１と同様の第１のスワール構造２及び第２のスワール構造３と、第１のスワール構造２と第２のスワール構造３の間に配置された混合ユニット３１とを備えている。換言すれば、図１の流路構造体１の構成を基準とした場合には、混合ユニット３１は流路構造体１の第３の流路６に挿入されるように配置される。換言すれば、第１実施形態において、「内部空間が密閉系であれば第３の流路には任意の流路構造が採用されていてもよい」と説明したように、混合ユニット３１は第３の流路６の一部であるとも解釈できる。以下、混合ユニット３１は、図１の流路構造体１の構成を基準として、第１スワール構造２と第２スワール構造３との間に配置される（すなわち、第３の流路６に挿入される）ものとして説明する。

第３の流路６は、混合ユニット３１が挿入されているために、混合ユニット３１よりも上流側に位置する上流側流路６ａと、混合ユニット３１よりも下流側に位置する下流側流路６ｂとに分割される。このような上流側流路６ａは第１のスワール構造２の構成の一部とみなしてもよく、下流側流路６ｂは第２のスワール構造３の構成の一部とみなすこともできる。以下、流路構造体３０の第１のスワール構造２及び第２のスワール構造３の部分をまとめて、「合流ユニット３２」とも称する。

混合ユニット３１は、第１のスワール構造２で混合された流体を更に混合及び撹拌し、第２のスワール構造３に供給するように構成される流路群である。混合ユニット３１は、第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４を備える。第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４は、例えば上流側流路６ａから下流側に２つに分岐し、かつ、下流側流路６ｂに合流するような流路であり、それぞれの下流側の端と下流側流路６ｂの上流側の端とが接続されている。

以下、混合ユニット３１の第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４の構造についてより詳しく説明する。第１の分岐合流路３３は、分岐部３３ａ、中間部３３ｂ及び合流部３３ｃから構成される流路である。分岐部３３ａ、中間部３３ｂ及び合流部３３ｃは、流路構造体の上流側から下流側にかけて、列記した順に接続されている。同様に、第２の分岐合流路３４は、分岐部３４ａ、中間部３４ｂ及び合流部３４ｃとから構成される流路であり、流路構造体の上流側から下流側にかけて分岐部３４ａ、中間部３４ｂ及び合流部３４ｃが列記した順に接続されている。

分岐部３３ａ及び３４ａは、ともに上流側流路６ａの下流の端に連結されており、第１のスワール構造２を通過した流体はそれぞれに分流される。中間部３３ｂ及び３４ｂは、それぞれ分岐部３３ａ又は３４ａの下流の端との接続箇所において、例えば流路６ａの長軸と平行な角度となるように、屈曲している。合流部３３ｃ及び３４ｃは、それぞれ中間部３３ｂ又は３４ｂの下流の端と接続される箇所において内側に屈曲し、さらに、ともに下流側流路６ｂの上流側の端に連結されており、それぞれを通過した分流は下流側流路６ｂへと合流する。

分岐部３３ａと３４ａとがなす角は限定されるものではないが、例えば直角である。ただし、分岐部３３ａ及び上流側流路６ａがなす角度と、分岐部３４ａ及び上流側流路６ａがなす角度とが同じであること、すなわち、上流側流路６ａを軸として互いに対称に連結されていることが好ましい。さらに、分岐部３３ａと３４ａとは、互いに同じ流路幅及び深さであることが好ましい。分岐部３３ａ及び３４ａが上流側流路６ａを軸として互いに対称に連結され、かつ、互いに同じ流路幅及び深さであると、第１の分岐合流路３３を通過する流体の流量、及び第２の分岐合流路３４を通過する流体の流量を同等にすることが可能である。両分岐部における流量が同等でなくとも、分岐部よりも下流にあるそれぞれの浅部（図６においては、中間部３４ｂまたは合流部３３ｃ）で横渦を発生させることは可能である。従って、互いの流路の大きさ又は角度は異なっていてもよいが、しかし、流量比が大きくなればなるほど流量が少ない方の流路における圧力調整の困難度（必要精度）が増大する可能性があることは考慮されたい。従って、製品のロバスト性の観点からは、おおよそ同量に分岐させることが好ましい。

合流部３３ｃ及び合流部３４ｃは、分岐部３３ａ及び３４ａと同様に、例えば互いに同じ角度で（すなわち、下流側流路６ｂを軸として互いに対称に）下流側流路６ｂに連結され、かつ、互いに同じ流路幅及び深さであることが好ましい。合流部３３ｃと合流部３４ｃとがなす角は例えば直角である。

第１の分岐合流路３３において、例えば合流部３３ｃは、分岐部３３ａ及び中間部３３ｂの深さに対して１／２未満の深さを有する浅部となっている。浅部が形成されていることにより、下流側流路６ｂの上流側の付近（混合領域３５）で横渦が発生する。それにより流体を更に混合及び撹拌することができる。混合領域３５の流路の断面形状は、図４に示す何れかの形状となっていることが好ましい。

第２の分岐合流路３４において、例えば中間部３４ｂは、合流部３４ｃの深さに対して１／２未満の深さを有する浅部となっている。第２の分岐合流路３４における浅部は、分岐部３４ａに設けることも可能であるが、中間部３４ｂに配置する方が分流化をより単純にするため、好ましい。

浅部である中間部３４ｂと合流部３４ｃとの接続部にかけて流路が屈曲しているため、合流部３４ｃの上流付近（混合領域３６）で横渦が発生し、流体を更に撹拌することができる。混合領域３６の流路の断面形状は、図４に示す何れかの形状であることが好ましい。

なお、混合ユニット３１は、第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４の一部（例えば、合流部３３ｃ及び中間部３４ｂ）に浅部を設けるようには構成されず、代わりに、第１の分岐合流路３３全域の深さと第２の分岐合流路３４全域の深さとを異ならせるように構成されていてもよい。そのような構成の混合ユニット３１は、第１の分岐合流路３３と第２の分岐合流路３４との合流箇所で発生する横渦により、流体の混合及び撹拌が可能である。

他方、図６に示す第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４の両方に浅部が配置される構成は、両分岐合流路に掛かる圧力が同等となるため、流体を両分岐合流路へと均等に分流させることができる。また、万が一、異物の混入によって一方の分岐合流路が閉塞した場合でも、他方の分岐合流路において流体に浅部を経由させて横渦を発生させることで、混合ユニット３１による流体の更なる混合及び撹拌をおこなうことができる。

なお、第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４の流路幅及び深さがより狭められた混合ユニット３１を、流量を維持したうえで使用すると、混合ユニット３１を通過する流体の流速は、より増加する。流速が増加すると発生する横渦の速さ等も増加するため、混合ユニット３１による混合及び攪拌効果を高めることができる。従って、流路構造体に対して、より高い混合及び攪拌効果を求める場合には、第１の分岐合流路３３及び第２の分岐合流路３４の流路幅及び深さがより狭い混合ユニット３１を使用することが好ましい。ただし、流路幅及び深さが狭すぎると圧力損失が非常に大きくなり、ポンプによっては機能しなくなる虞があることについては注意されたい。

以上、第３実施形態の流路構造体として、混合ユニットが第１のスワール構造と第２のスワール構造との間に（すなわち、第１実施形態の流路構造体１の第３の流路に挿入されるように）配置された例を示したが、混合ユニットはこのような配置に限られない。さらなる実施形態として、混合ユニット３１は、例えば第２のスワール構造よりも下流側、例えば第５の流路９の下流側などに接続されてもよい。

また、第３実施形態の流路構造体の混合ユニットの構成として、合流ユニット３２の第１の浅部４ａを有する流路（ここでは第１の流路４）の対角に配置された流路（ここでは第２の分岐合流路３４）が浅部として中間部３４ｂを有している例を示したが、混合ユニットはこのような構成に限られない。さらなる実施形態として、後述する図７（ｂ）のように、第１の分岐合流路３３と、第２の分岐合流路３４とが反転して配置されていてもよい。

（第４実施形態）
第４実施形態に従う流路構造体は、混合ユニットを複数備える点で第３実施形態の流路構造体と異なる。

例えば、図７の（ａ）に示すように、流路構造体４０は、第１のスワール構造２の下流側、かつ、第２のスワール構造３の上流側において、直列に配置された３つの混合ユニット、すなわち第１の混合ユニット４１ａ、第２の混合ユニット４１ｂ及び第３の混合ユニット４１ｃを備える。

図７の（ｂ）に示す流路構造体４２は、第２の混合ユニット４１ｂにおいて、第１の分岐合流路４３（合流部４３ｃに浅部を備える）と、第２の分岐合流路４４（中間部４４ｂに浅部を備える）とが上流側流路６ａ及び下流側流路６ｂを軸として反転して配置される。この例のように第１の分岐合流路４３及び第２の分岐合流路４４の配置が反転した混合ユニットを交互に配置することで、より均等に流体を混合することができる。

第４実施形態に従う流路構造体として図７の（ａ）及び（ｂ）を例示したが、複数の混合ユニットの数は３つに限られるものではなく、２つ若しくは４つ、５つ、６つ又はそれ以上としてもよいし、複数の混合ユニットは流路構造体において任意の位置に接続・配置されていてもよい。

例えば、図８（ａ）に示す流路構造体４５も、第４実施形態に従う流路構造体の一例である。流路構造体４５は、第１混合ユニット４１ａ、第２混合ユニット４２ｂ及び第３混合ユニット４２ｃの各上流側の端又は各下流側の端と上流側流路６ａ又は下流側流路６ｂとが並列的に接続されている（換言すれば、上流側流路６ａ及び下流側流路６ｂがそれぞれ分岐するように延びて各混合ユニットの端と接続されている）。このような流路構造体４０に供給され、かつ、上流側流路６ａを通過した流体は、分流されて各混合ユニットへと送出される。各混合ユニットを通過した各流体は、下流側流路６ｂへと合流する。

複数の混合ユニットを並列的に配置することで、直列的に配置される場合と比較して送液に対する抵抗を低減できる。流路構造体への送液にポンプを用いる場合、ポンプへの負荷を低減しながらも、より多くの流量を流路構造体に送液することが可能となる。

また、第４実施形態に従う流路構造体は、複数の混合ユニットを、直列的かつ並列的に接続してなる混合ユニット群として備えていてもよい。例えば、図８（ｂ）に示す流路構造体４６は、第１のスワール構造２と第２のスワール構造３との間に配置された混合ユニット群４７を備える。混合ユニット群４７は、２つの混合ユニットが直列に接続された流路構造を４組備え、かつ、これら４組の流路構造が上流側流路６ａ及び下流側流路６ｂと並列的に接続されている。また、混合ユニット群４７の下流で流体が合流する部分では、混合及び撹拌を促進するために、合流する流路の一方に、浅部４８を配置することが好ましい。混合ユニット群４７の構成は図８に示す例に限定されるものではなく、流体の種類又は用途に応じて、例えば混合ユニットの配置等を改変し得る。混合ユニット群の構成を適宜改変することにより、流路構造体への送液の抵抗を調節することができ、かつ、流体の混合及び攪拌の効果を高めることができる。

以上説明したように、第４実施形態に従う流路構造体は、複数の混合ユニットを備えているため、混合ユニットが１つの場合と比較して更に流体を混合及び撹拌することができる。このような第４実施形態の流路構造体を脂質粒子の製造に使用することで、１つの混合ユニットを備える流路構造体を使用した場合よりも、より多量の脂質粒子をより均一な粒径で形成できる。

さらなる実施形態として、流路構造体は、第１のスワール構造２の下流端だけでなく、第２のスワール構造３の下流端にも混合ユニット又は混合ユニット群が接続された構成であってもよい。例えば、図９に示すように、流路構造体４９は、第１のスワール構造２の下流端に、例えば３つの混合ユニット４１ａ、４１ｂ及び４１ｃからなる混合ユニット群４７ａと、第２のスワール構造３の下流端に、例えば３つの混合ユニット４１ｄ、４１ｅ及び４１ｆからなる混合ユニット群４７ｂが接続されたような構成であってもよい。

また、そのような構成に限らず、図７の（ｂ）、図８の（ａ）又は（ｂ）にそれぞれ示した流路構造体４２、４５又は４６の第２のスワール構造３の下流側に、混合ユニット又は混合ユニット群が接続された構成であってもよい。
（第５実施形態）
第５実施形態に従う流路構造体は、第１のスワール構造と第２のスワール構造との間に、通過する流体の滞留時間が流路構造体を構成する他の流路よりも長い流路をさらに備える（すなわち、第３の流路が、通過する流体の滞留時間が他の流路よりも長い流路をさらに有する）点で、第１～第４実施形態の流路構造体と異なる。

ここで、通過する流体の滞留時間が長い流路とは、例えば、他の流路よりも流路長が長い流路、又は他の流路よりも流路幅が広い流路等である。従って、例えば第５実施形態に従う流路構造体５０は、図１０の（ａ）に示すように、第３の流路６が、上流側流路６ａの下流側の端と下流側流路６ｂの上流側の端とに接続される、流路長が他の流路よりも長い流路５１を備える。又は、例えば第５実施形態に従う流路構造体５２は、図１０の（ｂ）に示すように、その第３の流路６が、上流側流路６ａの下流側の端と下流側流路６ｂの上流側の端とに接続される、流路幅が他の流路よりも広い流路５３を備える。

上記に例示した、流路５１や流路５３には、同流路に対して各種エネルギー（例えば光、熱、音波及び磁気など）を与える素子（図示せず）が接続される。熱エネルギーを与える素子として例えばヒータやペルチェ素子などが、光エネルギーを与える素子として例えば紫外線発生素子などが接続されるが、このような素子は流路５１又は５３内に配置されていてもよいし、流路構造体５０又は５２の外部に配置されていてもよい。

各種エネルギーを与える素子が流路構造体５０又は５２の外部に配置される場合には、第３の流路６の一部としての流路５１や流路５３は密閉系であるため、このような密閉系の流路にエネルギーを与えることが可能な素子であることが好ましい。また、使用される素子の種類に合わせて、流路が各種エネルギーを受け取りやすい素材や構造となるように構成されていることが好ましい。例えば、密閉系である流路５１又は５３に素子として紫外線発生素子を接続する場合には、同流路を透明部材で形成することで、通過する流体により高強度の紫外線を照射することが可能である。

流路５１や流路５３は通過する流体の滞留時間が他の流路よりも長いため、流体が同流路を通過する途中であっても、通過する流体に各種の反応を進行させることが可能である。例えば、同流路を通過する流体に、超音波処理のような物理的処理を施したり、熱処理や紫外線処理などの化学的処理を施したりすることが可能である。

以上に説明した第５実施形態に従う流路構造体を脂質粒子の製造に使用する場合には、脂質粒子を製造すると同時に、脂質粒子の製造に係る他の工程（例えば、脂質粒子に内包させる物質を熱変性させるなどの前処理工程や、蛍光標識を検出して行われる検査工程など）をおこなうことが可能である。
（第６実施形態）
第６実施形態に従う流路構造体は、第１の流路が、第１の浅部よりも上流側に異物をトラップする流路をさらに備える点で、第１～第５実施形態の流路構造体と異なる。

すなわち、第６実施形態に従う流路構造体は、第１の浅部よりも他方の端部側の第１の流路に、異物をトラップするためのトラップ構造をさらに有し、トラップ構造の深さは、トラップ構造よりも他方の端部側の第１の流路の深さよりも浅い。流体の流れを基準に説明すると、第１の浅部よりも上流側の第１の流路において、異物をトラップするためのトラップ構造をさらに有し、トラップ構造の深さは上流側の第１の流路の深さよりも浅い。

さらに詳述すると、図１１に示すように、第６実施形態に従う流路構造体６０の第１の流路４は、第１の深部４ｂの上流側において、第１の深部４ｂの深さｄ_３よりも浅い領域（以下、「上流浅部４ｃ」と称する）を有する。上流浅部４ｃの深さｄ_７は、上流浅部４ｃよりも上流の領域（以下、「上流深部４ｄ」と称する）の深さｄ_８よりも浅い。また、以下、第１の深部４ｂと、上流浅部４ｃと、上流深部４ｄとがなす構造を、「第１のトラップ構造」と称する。

図１２の（ａ）に、上流浅部４ｃ周辺の第１の流路４の断面図を示す。上流浅部４ｃにおいて、例えば底面が天面に向けて突出している。上流深部４ｄの深さｄ_８及び第１の深部４ｂの深さｄ_３は互いに同程度であり得る。

図１３は、流体を流したときの第１のトラップ構造の様子を示す。矢印は流体の進行方向を示す。第１流体が上流浅部４ｃを通過する際、上流浅部４ｃの深さｄ_７よりも大きな異物６１は上流浅部４ｃに進入することができず、上流浅部４ｃの直前に捕捉される。それによって異物６１がそれより下流へ流れることを防止することができる。

上流浅部４ｃの深さｄ_７は除去の対象及び目的に応じて設定される。例えば、特定の大きさ又は形状の異物が、流路構造体６０の下流側に設けられた、他の流路構造が有する機能に悪影響を与える場合には、その大きさ又は形状の異物を捕捉できる深さに設定される。また、流路構造体６０の使用者が目視で確認できない異物を除去することを目的とする場合、例えば異物６１の大きさは、一般に肉眼での限界と言われる髪の毛の太さ以下（０．１～０．２ｍｍ）である。

第１の浅部４ａで止まるような大きさの異物６１の流入を防ぐことを目的とした場合、上流浅部４ｃの深さｄ_７は第１の浅部４ａと同じかそれ未満であることが好ましい。ここで、「同じ」は工作精度を考慮し±０．０１ｍｍ異なる場合も含む。例えば、第１の流路４の深さが０．３ｍｍであり、かつ、第１の浅部４ａの深さが１／３の０．１ｍｍである場合、上流浅部４ｃの深さｄ_７は０．１ｍｍ以下とすることが好ましい。このように上流浅部４ｃを第１の流路４に設けることで、容易に異物６１の進入を防止し、異物６１が除去された流体を流路構造体６０に流すことができる。

一方、上流浅部４ｃを通過する小さな異物６１が存在する場合でも、もとよりその異物６１は第１の浅部４ａで詰まりを起こす可能性が低いため、考慮から外してもよい場合がある。この場合は浅部３ａの深さは浅部３ｃと同様であればよい。しかしながら、そのような小さな異物６１も取り除くことが好ましい場合は、上流浅部４ｃの深さを第１の浅部４ａよりも浅くしてもよい。

上流浅部４ｃの深さｄ_７は、上記のように除去の対象及び目的に応じて設定されるため、限定されるものではないが、例えば上流深部４ｄの深さｄ_８よりも浅ければよい。例えば、深さｄ_７は、深さｄ_８の１／２未満であってもよく、１／３、１／４又は１／５等としてもよい。

また、流路構造体６０の製造に用いられる好ましい手法である金型成形又は切削加工の精度が一般的に５μｍであることから、誤差による流路の閉塞を回避するためにも、最低でも上流浅部４ｃの深さｄ_７は１０μｍ以上であることが望ましい。

上流浅部４ｃの第１流体の流れ方向の長さは、第１の深部４ｂ及び上流深部４ｄの流路幅と同程度とすることが好ましい。又は製造可能な限り、それよりも短くてもよい。

第１の深部４ｂ及び上流深部４ｄの、流路幅、深さ及び流体の供給量は限定されるものではなく、流体の種類に従って決定される。

一方で、本流路構造体でポンプを用いる場合、均一な粒径の脂質粒子を製造するという観点から、脈動を起こさないポンプを用いることが好ましい。そのようなポンプとしては１ｍｌ／ｓｅｃ程度の送液量のものが容易に入手できる。従って、ポンプの入手容易性を考慮した場合、第１の深部４ｂ及び上流深部４ｄの断面の幅及び深さは３ｍｍ程度が妥当な上限であり得る。例えば、第１の深部４ｂ及び上流深部４ｄの断面の深さ及び幅は０．１ｍｍ～３ｍｍとすることが好ましい。

さらに、第１のトラップ構造における流体の流速は、比較的小さい方が好ましく、第１のトラップ構造における流体の流速を比較的遅くするためにも、上流浅部４ｃの流路の断面積を上流深部４ｄと同じか、それ以上にすることが好ましい。従って、流路構造体６０の上流浅部４ｃの幅は、第１の深部４ｂ及び上流深部４ｄよりも広い方が好ましい。ここで、幅とは、第１の流路４の流体の流れ方向に直交する方向の長さのことをいう。

例えば、図１４の（ａ）に示すように、第１のトラップ構造は、上流浅部４ｃから長さＩ_１上流側に亘って、及び、上流浅部４ｃから長さＩ_２下流側に亘って、広い流路幅が維持されていてもよい。換言すれば、流路構造体６０の第１の流路４は、上流浅部４ｃを含む長方形の幅広部を有してもよい。

また、図１４の（ｂ）に示すように、第１のトラップ構造は、上流深部４ｄから長さＩ_１上流側にかけて徐々に幅広となり、上流浅部４ｃで幅が最も広くなり、ひいては、上流浅部４ｃから長さＩ_２下流側にかけて元の幅まで流路幅が徐々に幅狭になるように構成されていてもよい。換言すれば、流路構造体６０の第１の流路４は、上流浅部４ｃで最も幅が広くなる、菱形様の幅広部を有してもよい。

幅広部の長さＩ_１及びｌ_２が、長すぎると流路構造体６０に対してデッドボリュームとして影響する場合があり、短すぎるとトラップされた異物６１による抵抗の増加が著しくなる可能性がある。よって、異物６１が上流浅部４ｃ全般に均等にいき渡り易くするためにも、幅広部の幅と同程度であることが望ましい。長さｌ_１及び長さｌ_２は、互いに同じであってもよいし、異なってもよい。

このように上流浅部４ｃの幅を広く設定することによって、上流浅部４ｃにおける圧力抵抗の上昇を抑え、上流浅部４ｃにおける平均流速をより低下させることが可能である。例えば、上流浅部４ｃの深さｄ_７が上流深部４ｄの深さｄ_８の１／ｎ（ここで、ｎは０以上の整数）であるとき、上流浅部４ｃの流路幅を上流深部４ｄの流路幅のｎ倍以上とすることによって、上流浅部４ｃにおける平均流速を上流深部４ｄにおける平均流速と同程度以下とすることができる。

上流浅部４ｃにおける平均流速をより低下させることにより、上流浅部４ｃでの圧力上昇により捕捉された異物６１が押し出されて下流に流れる可能性を低減することができる。また、万が一多量の異物６１が捕捉された場合の圧力抵抗の上昇を防ぐことも可能である。加えて、上流浅部４ｃの幅を広く設定することによって、異物６１が幅方向に分散されて捕捉され、異物６１が流路を閉塞する可能性を低減することも可能である。

以上に説明したように、第６実施形態の流路構造体は、第１の合流部よりも上流側の第１の流路において、さらに浅部を設けるという単純な構造をもって、フィルタ等の複雑な構造を用いることなく異物を除去することが可能である。

さらなる実施形態として、流路構造体６０は、第１のトラップ構造と同様の構造を、第１の流路以外にも、異物が存在すると予想される流体を導入する流路に対し、第１のトラップ構造と同様の構造を設けてもよい。また、予期できない異物の発生及び進入を防ぐために、用いられるすべての流路に第１のトラップ構造と同様の構造を設けることも好ましい。

例えば、第２の浅部よりも他方の端部側の第４の流路に、及び／又は、第１の合流部よりも他方の端部側の第２の流路に、トラップ構造をさらに備えてもよい。流体の流れ方向を基準に説明すると、第２の流路５が、第１の合流部７よりも上流側にさらなるトラップ構造を備えていてもよいし、及び／又は、第４の流路８が第２の浅部８ａよりも上流側にさらなるトラップ構造を備えてもよい。また、流路構造体が、第２の実施形態で説明したような、さらに複数の流路を有する場合（すなわち、浅部を有する流路と、同流路と合流する流路を複数ある場合）には、それら複数の流路の全て、又はそれら複数の流路のうち浅部を有する流路の全てに、第１のトラップ構造と同様の構造が設けられてもよい。

このように、複数のトラップ構造を、流路構造体の流路の上流側に設置することによって、その流路への異物の進入を防ぎ、その流路が有する機能をより確実に発揮させることができる。

（流路構造体の製造方法）
以上に説明した流路構造体（以下、まとめて「流路構造体１００」と記す）の製造方法について、図１５を用いて説明する。図１５の（ａ）に示すように、流路構造体１００は、例えば流路として機能する溝１０１が形成された基板１０２と、溝１０１の天面を塞いで密閉するように基板１０２に接合された、板状の蓋部１０３とを備える。

基板１０２の材料は、アクリル、ポリエチレン、ポリプロピレン等の樹脂、ガラス、セラミックス又は金属等から用途によって適切なものを選択すればよい。例えば、流路構造体が医療用途であるならば、シクロオレフィンポリマー等も好ましい例である。何度も再利用するのであればガラス、石英などのセラミックスが安定性から好ましく、温度などの調整を図るのであれば、表面に耐食性の処理を施した金属を用いてもよい。溝１０１は、例えば金型を用いたプレス加工又は切削により形成することができる。浅部に相当する箇所は、他の部分よりも溝１０１を浅く形成又は切削すればよい。

蓋部１０３の材料は、例えば、基板１０２で説明したものと同様の材料を使用することができる。蓋部１０３は、例えば板状であり得る。又は、図１５の（ｂ）に示すように薄いフィルム状の蓋部１０４を用いてもよい。

フィルム状の蓋部１０４は、流体の状態を監視するためのセンサー端子１０５を取り付けることも可能である。又は蓋部１０４に高い熱伝導性若しくは特定の物質に対して特定の処理を行う機能（図示せず）等、様々な機能又は特性を付与することも可能である。

蓋部１０４が内圧により膨らむことが懸念される場合には、図１５の（ｃ）に示すように、押さえ板１０６を蓋部１０４の上から押し付けることで膨らみを抑制してもよい。押さえ板１０６は、その内部に配置された熱交換用の熱媒流路１０７、又はセンサー機能を有する電気端子（図示せず）等を備えてもよい。

このように基板１０２に溝１０１を形成して蓋部１０３又は１０４を接合するという単純な手順で、内部空間を密閉系とする流路構造体１００を製造することができる。そのような製造方法では、例えば基板１０２と蓋部１０３の両方に溝を形成し、かつ、両者の精密な位置合わせをする工程、基材にトンネル構造を成形する工程、及び、流路同士を積層させる工程が不要である。従って、実施形態の流路構造体の製造によれば、製造時に高い工作精度を要求せず、簡単かつ低コストで製造することができ、量産性が非常に高い。

更なる実施形態によれば、溝１０１のうち、浅部を設ける箇所の深さを他の部分と同じ深さとしておき、対応する箇所に凸部を有する蓋部１０４を取り付けることで、浅部を形成してもよい。即ち、このように形成された浅部の流路内腔は、上から凹むことによって流路が狭くなっている。このような構造は、上記のような底が突出する構造と比較して蓋部の形成、位置合わせ等の製造の手順は増えるが、第１実施形態の流路構造体で説明したように横渦を発生させることは可能である。

更なる実施形態として、流体を導入するための流路、及び、流体を導入するための流路を備える流路構造体を製造してもよい。例えば、図１５の（ｄ）に示すように、所望の深さの流路面と端が接触し、かつ、鉛直方向に延びる導入用流路１０８と、同流路面と端が接触し、かつ、鉛直方向に延びる排出用流路１０９を備えてもよい。図１５の（ｄ）に示す流路構造体１０１の導入用流路１０８に流体が供給されると、流体は、導入用流路１０８内を重力方向に通過し、溝部１０１を通過した後、排出用流路１０９内を重力方向と逆方向に通過して排出される。

また、図１５の（ｅ）に示すように、排出用流路１０９は、流路面から重力方向に延びるように設けられていてもよい。この場合、溝部１０１を通過した流体は、排出用流路１０９内を重力方向に通過して排出される。流体の自重を利用することで、流体の排出に必要な圧力が低減され、流体を供給する際の圧力を低減することが可能である。ただし、図１５の（ｄ）に示す流路構造体は、流路面の一方の面から加工することで製造することができるので、製造の容易性という面では、図１５の（ｅ）に示す流路構造体よりも図１５の（ｄ）に示す流路構造体の方が優れている。

（薬剤を内包する脂質粒子の製造方法）
以下、実施形態の流路構造体を用いて薬剤を内包する脂質粒子を製造する方法について説明する。

まず、本方法で製造される脂質粒子について説明する。図１６に示すように、脂質粒子２００は脂質分子が配列して形成された脂質膜からなり、中空の略球状である。脂質粒子２００の内腔２０１に薬剤２０２が内包されている。脂質粒子２００は例えば薬剤２０２を細胞内に送達するために用いられ得る。

製造方法は、例えば図１７に示すように次の工程を含む：
薬剤（核酸の場合）を凝縮すること（凝縮工程Ｓ１）、
有機溶媒中に脂質粒子の材料の脂質を含む第１溶液と、水性溶媒中に薬剤を含む第２溶液とを密閉系の流路構造体を用いて混合して、混合液を得ること（混合工程Ｓ２）、
密閉系の流路構造体を用いて混合液と水性溶媒とを混合し、有機溶媒の濃度を低下させることで脂質を粒子化し、薬剤を内包した脂質粒子を生成すること（粒子化工程Ｓ３）、及び、
生成した脂質粒子を含有する溶液を濃縮すること（濃縮工程Ｓ４）。

本製造方法は、例えば図１８に示す流路構造体を用いて行うことができる。図１８の（ａ）は流路構造体のうち凝縮工程Ｓ１が行われる凝集用流路３０１を示し、（ｂ）は混合工程Ｓ２が行われる混合用流路３０２を示し、（ｃ）は粒子化工程Ｓ３が行われる粒子化用流路３０３を示し、（ｄ）は濃縮工程Ｓ４が行われる濃縮用流路３０４を示す。

以下、本製造方法の手順の例について説明する。まず第１溶液と第２溶液とを用意する。第１溶液は、有機溶媒中に脂質を含む。脂質は、脂質粒子２００を構成する材料となる脂質である。第２溶液は、水性溶媒中に薬剤２０２を含む。

・凝縮工程Ｓ１
薬剤２０２は、限定されるものではないが、例えば核酸である。核酸の薬剤２０２は、例えばＤＮＡ、ＲＮＡ及び／又は他のヌクレオチドを含む核酸等であり、例えば特定の遺伝子のｍＲＮＡ、遺伝子をコードするＤＮＡ、遺伝子とプロモーター等の遺伝子を発現するためのその他の配列とを含む遺伝子発現カセットを含むＤＮＡ、ベクター等であり得る。薬剤２０２が核酸である場合、まず核酸（薬剤２０２）を凝集する凝集工程Ｓ１を行ってもよい。

核酸の凝縮は、例えば核酸凝縮ペプチドを用いて行われる。核酸凝縮ペプチドは、核酸を小さく凝縮することにより、脂質粒子２００の粒径をより小さくすることができ、また脂質粒子２００内により多くの核酸を内包することができる。その結果、脂質粒子２００の凝集の原因となり得る脂質粒子２００外に残留する核酸がより少なくなり得る。

好ましい核酸凝縮ペプチドは、例えば、カチオン性のアミノ酸を全体の４５％以上含むペプチドである。より好ましい核酸凝縮ペプチドは、一方の端にＲＲＲＲＲＲ（配列番号１、以下「第１のアミノ酸配列」と称する）を有し、他方の端が配列ＲＱＲＱＲ（配列番号２、以下「第２のアミノ酸配列」と称する）を有する。第１のアミノ酸配列と第２アミノ酸配列との間には、ＲＲＲＲＲＲ又はＲＱＲＱＲからなる中間配列を０個又は１個以上含む。また、第１のアミノ酸配列、第２のアミノ酸配列及び中間配列のうち、隣り合う２つの配列の間に２つ以上の中性アミノ酸を含む。中性アミノ酸は、例えば、Ｇ又はＹである。他方の端は第２のアミノ酸配列に変えて、ＲＲＲＲＲＲ（配列番号１、以下「第１のアミノ酸配列」と称する）を有してもよい。

上記核酸凝縮ペプチドは、好ましくは、以下のアミノ酸配列を有する：
ＲＱＲＱＲＹＹＲＱＲＱＲＧＧＲＲＲＲＲＲ （配列番号３）
ＲＱＲＱＲＧＧＲＲＲＲＲＲ （配列番号４）
ＲＲＲＲＲＲＹＹＲＱＲＱＲＧＧＲＲＲＲＲＲ （配列番号５）。

更に、次のようなアミノ酸配列ＧＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号６、以下「Ｍ９」と称する）有する核酸凝縮ペプチドを上記の何れかの核酸凝縮ペプチドと組み合わせて用いることもできる。このペプチドは、上記核酸凝縮ペプチドで凝縮した核酸凝縮体を更に凝縮することができる。

図１３の（ａ）に示す通り、凝集工程Ｓ１を行うための凝集用流路３０１は、例えばＹ字型の流路である。Ｙ字型の分岐した一方の流路３１１の上流の端には例えば凝集剤流入口３１２が設けられ、そこから核酸凝縮ペプチドを含む凝集剤を流す。他方の流路３１３の上流の端には薬剤流入口３１４が設けられ、そこから核酸（薬剤２０２）を水性溶媒中に含む溶液を流す。水性溶媒は、例えば、水、生理食塩水のような食塩水、グリシン水溶液又は緩衝液等である。その結果、流路３１１と流路３１３とが合流する流路３１５内で凝縮剤と薬剤２０２を含む溶液とが混合される。混合により、凝縮された薬剤２０２を含む第２溶液が得られる。

凝縮工程Ｓ１は必ずしも流路を用いて行う必要はなく、凝集剤と、核酸（薬剤２０２）を水性溶媒中に含む溶液とを混合及び撹拌すればよい。

以上の効果を奏することから薬剤２０２が核酸である場合は凝縮工程Ｓ１を行うことが好ましい。しかしながら薬剤２０２が核酸でない場合、又は核酸であるが凝縮する必要のない場合等は凝縮工程Ｓ１を行う必要はない。

・混合工程Ｓ２
次に、第１溶液及び第２溶液を混合する。

第２溶液は薬剤２０２が核酸である場合上記のように作製されたものであってもよい。又は凝縮しない核酸若しくは核酸でない薬剤２０２を使用する場合は、その種類に応じて選択された上記の何れかの水性溶媒に薬剤２０２を混合することで第２溶液を作製することができる。核酸でない薬剤２０２は、例えば、活性成分としてタンパク質、ペプチド、アミノ酸、他の有機化合物又は無機化合物等を含む。薬剤２０２は、例えば疾患の治療薬又は診断薬等であってもよい。しかしながら薬剤２０２はこれらに限定されるものではなく、脂質粒子２００に内包することができれば何れの物質であってもよい。

薬剤２０２は必要に応じて、例えばｐＨ調整剤、浸透圧調整剤及び／又は薬剤活性化剤等の試薬を更に含んでもよい。ｐＨ調整剤は、例えば、クエン酸等の有機酸及びその塩等である。浸透圧調整剤は、糖又はアミノ酸等である。薬剤活性化剤は、例えば活性成分の活性を補助する試薬である。これらは凝縮工程Ｓ１を行う場合、その後に添加してもよい。

薬剤２０２は、１種類の物質であってもよく、複数の物質を含んでもよい。第２溶液中の薬剤２０２の濃度は、例えば０．０１％～１．０％（重量）であることが好ましい。

第１溶液は、脂質と有機溶媒とを混合することで製造され得る。脂質は、例えば生体膜の主成分の脂質であってもよい。また、脂質は人工的に合成したものであってもよい。脂質は、例えば、リン脂質又はスフィンゴ脂質、例えば、ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミド、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、ケファリン又はセレブロシド、或いはこれらの組み合わせ等のベース脂質を含み得る。

例えば、ベース脂質として、
１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、
１，２－ステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、
１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、
１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、
１，２－ジ－Ｏ－オクタデシル－３－トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＯＴＭＡ）、
１，２－ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン（ＤＯＤＡＰ）、
１，２－ジミリストイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン（１４：０ ＤＡＰ）、
１，２－ジパルミトイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン（１６：０ ＤＡＰ）、
１，２－ジステアロイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン（１８：０ ＤＡＰ）、
Ｎ－（４－カルボキシベンジル）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ビス（オレオイロキシ）プロパン（ＤＯＢＡＱ）、
１，２－ジオレオイル－３－トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＯＴＡＰ）、
１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホクロリン（ＤＯＰＣ）、
１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホクロリン（ＤＬＰＣ）、
１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－Ｌ－セリン（ＤＯＰＳ）、又は
コレステロール、
或いはこれらの何れかの組み合わせ等を用いることが好ましい。特にＤＯＴＡＰ及び／又はＤＯＰＥを用いることが好ましい。

脂質は、生分解性脂質である第１の脂質化合物及び／又は第２の脂質化合物を更に含むことが好ましい。第１の脂質化合物はＱ－ＣＨＲ_２の式で表すことができる。
（式中、
Ｑは、３級窒素を２つ以上含み、酸素を含まない含窒素脂肪族基であり、
Ｒは、それぞれ独立に、Ｃ_１２～Ｃ_２４の脂肪族基であり、
少なくとも一つのＲは、その主鎖中又は側鎖中に、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ－、及び－ＮＨＣ（＝Ｏ）－からなる群から選択される連結基ＬＲを含む）。

第１の脂質化合物は、例えば下記式で表される構造を有する脂質である。

特に、式（１－０１）の脂質化合物及び／又は式（１－０２）の脂質化合物を用いることが好ましい。

第２の脂質化合物は、Ｐ－［Ｘ－Ｗ－Ｙ－Ｗ’－Ｚ］_２の式で表すことができる。
（式中、
Ｐは、１つ以上のエーテル結合を主鎖に含むアルキレンオキシであり、
Ｘは、それぞれ独立に、三級アミン構造を含む２価連結基であり、
Ｗは、それぞれ独立に、Ｃ_１～Ｃ_６アルキレンであり、
Ｙは、それぞれ独立に、単結合、エーテル結合、カルボン酸エステル結合、チオカルボン酸エステル結合、チオエステル結合、アミド結合、カルバメート結合及び尿素結合からなる群から選ばれる２価連結基であり、
Ｗ’は、それぞれ独立に、単結合又はＣ_１～Ｃ_６アルキレンであり、
Ｚは、それぞれ独立に、脂溶性ビタミン残基、ステロール残基、又はＣ_１２～Ｃ_２２脂肪族炭化水素基である）。

第２の脂質化合物は、例えば下記式で表される構造を有する脂質である。特に、式（２－０１）の化合物を用いることが好ましい。

第１の脂質化合物及び第２の脂質化合物を含む場合、脂質粒子２００への薬剤２０２の内包量を増加させ、薬剤２０２の細胞への導入効率を高めることが可能である。また、導入した細胞の細胞死も低減することができる。
ベース脂質は、脂質材料の全体に対して３０％～約８０％（モル比）含まれることが好ましい。或いは、１００％近くがベース脂質から構成されていてもよい。第１及び第２の脂質化合物は、脂質材料の全体に対して約２０％～約７０％（モル比）で含まれることが好ましい。

脂質は、脂質粒子２００同士の凝集を防止する脂質を含むこともまた好ましい。例えば、凝集を防止する脂質は、ＰＥＧ修飾した脂質、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ジミリストイルグリセロール（ＤＭＧ－ＰＥＧ）、オメガ－アミノ（オリゴエチレングリコール）アルカン酸モノマーから誘導されるポリアミドオリゴマー（米国特許第６，３２０，０１７号）又はモノシアロガングリオシド等を更に含むことが好ましい。このような脂質は、脂質粒子２００の脂質材料全体に対して約１％～約１０％（モル比）で含まれることが好ましい。

脂質は、毒性を調整するための相対的に毒性の低い脂質；脂質粒子２００に配位子を結合させる官能基を有する脂質；ステロール、例えばコレステロール等の内包物の漏出を抑制するための脂質等の脂質を更に含んでもよい。特に、コレステロールを含ませることが好ましい。

例えば、脂質粒子２００は、式（１－０１）若しくは式（１－０２）の化合物及び／又は式（２－０１）の化合物と、ＤＯＰＥ及び／又はＤＯＴＡＰと、コレステロールと、ＤＭＧ－ＰＥＧとを含むことが好ましい。

脂質の種類及び組成は、目的とする脂質粒子２００の酸解離定数（ｐＫａ）若しくは脂質粒子２００のサイズ、内包物の種類、或いは導入する細胞中での安定性等を考慮して適切に選択される。例えば脂質粒子２００を構成する脂質を所望の組成とするためには、第１溶液に含まれる脂質の組成を同じ比率に設定すればよい。

第１溶液の有機溶媒は、例えば、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール、エーテル、クロロホルム、ベンゼン又はアセトン等である。有機溶媒中の脂質の濃度は、例えば０．１％～０．５％（重量）であることが好ましい。

第１溶液と第２溶液との混合は、図１８の（ｂ）に示すように混合用流路３０２において行われる。ここでは、混合用流路３０２として、第４実施形態で説明した流路構造体４０と同様の構造を示したが、混合用流路３０２はそれに限定されるものではなく、例えば第１実施形態の流路構造体１、第３実施形態の流路構造体３０又は第５実施形態の流路構造体５０などと同様の構造であってもよい。

凝集工程Ｓ１を行う場合は、凝集用流路３０１の流路３１５の下流の端が、流路構造体４０の第１の流路４の上流側の端に連結されており、第１の流路４に第２溶液が供給される。凝縮工程Ｓ１を行わない場合は、第１の流路４の上流側の端に第２溶液流入口（図示せず）が設けられ、そこから第２溶液が供給される。第２の流路５は、例えばその上流側の端に第１流体流入口３１６を備え、そこから第１溶液を供給する。その結果、第４実施形態で説明したように第１スワール構造２及び混合ユニット４１において、第１溶液及び第２溶液が混合及び攪拌され、混合液が得られる。例えば、凝縮工程Ｓ１を行わない場合は第１の流路４に第１溶液を流し、第２の流路５に第２溶液を流してもよい。

・粒子化工程Ｓ３
次に粒子化工程Ｓ３において混合液の有機溶媒の濃度を低下させる。例えば、混合液に水溶液を多量に添加することにより有機溶媒濃度を相対的に低下させることが好ましい。例えば、混合液の３倍量の水溶液を混合液に添加する。水溶液として、第１溶液に用いられる水性溶媒と同じものを用いることができる。有機溶媒濃度を低下させることによりにより脂質が粒子化し、薬剤２０２を内包する脂質粒子２００が生成し得る。その結果、脂質粒子２００を含む脂質粒子含有液が得られる。

図１３の（ｃ）に示すように、粒子化工程Ｓ３を行う粒子化用流路３０３は、第１実施形態に記載の第２スワール構造と同様である。粒子化用流路３０３は、それに限定されるものではなく、例えば第２～５の実施形態の流路構造体と同様の構造であってもよい。第４の流路８の上流側の端は、例えば水溶液流入口３１７を備え、そこから水溶液を供給する。その結果、脂質が粒子化し、薬剤２０２が内包された脂質粒子２００が形成され、脂質粒子２００を含む脂質粒子溶液が得られる。以上のようにして、脂質粒子２００を製造することができる。

・濃縮工程Ｓ４
実施形態の脂質粒子製造方法は、必要に応じて脂質粒子溶液を濃縮すること（濃縮工程Ｓ４）を更に含んでもよい。濃縮は、例えば脂質粒子溶液から溶媒の一部及び／又は余った脂質と薬剤２０２とを除去することにより行われる。濃縮は、例えば限外ろ過により行うことができる。限外ろ過には、例えば細孔径２ｎｍ～１００ｎｍの限外ろ過フィルタを用いることが好ましい。例えばフィルタとしてＡｍｉｃｏｎ（登録商標）Ｕｌｔｒａ－１５（メルク）等を用いることができる。濃縮工程Ｓ４を行うことにより純度及び濃度の高い脂質粒子溶液を得ることができる。濃縮後の脂質粒子溶液の脂質粒子２００の濃度は、１×１０^１３個/ｍＬ～５×１０^１３個/ｍＬ程度であることが好ましい。しかしながら濃縮工程Ｓ４は必ずしも行う必要はない。

図１８の（ｄ）に示すように、濃縮工程Ｓ４を行う濃縮用流路３０４は、流路３４１と、流路３４１の壁面に設けられたフィルタ３４２とを備える。流路３４１の上流の端は、例えば粒子化用流路３０３の下流側の端である、第５の流路９の端と連結している。

フィルタ３４２は例えば流路３４１の一部の壁面に代えて設けられている。フィルタ３４２として上で説明した何れかの限外ろ過用のフィルタを用いることができる。

流路３４１内に脂質粒子溶液を通過させることによって、残留した材料及び余分な溶媒等がフィルタ３４２を通過して流路３４１外に排出される。脂質粒子２００は流路３４１内に残り、下流へと流れることで脂質粒子溶液が濃縮される。流路３４１の下流の端は、濃縮後の脂質粒子溶液を回収するための排出口３４３を備えるか、又は脂質粒子溶液を回収するためのタンクと連結されていてもよい。

濃縮工程Ｓ４は必ずしも流路を用いて行う必要はなく、例えば容器に回収された脂質粒子溶液をフィルタでろ過してもよい。

また、実施形態の脂質粒子製造方法は、必要に応じて脂質粒子２００の品質を向上するための処理を更に行ってもよい。品質の向上とは、例えば薬剤２０２の脂質粒子２００からの漏出の防止、薬剤２０２の脂質粒子２００への内包量の向上、薬剤２０２を内包する脂質粒子２００の割合（内包率）の向上、脂質粒子２００同士の凝集の低減及び防止、及び／又は脂質粒子のサイズのばらつきの軽減等であり得る。例えば、脂質粒子溶液を冷却する処理を行ってもよい。このような処理もまた流路を用いて行ってもよく、例えば、第５実施形態で説明した、滞留時間の長い流路を備える流路構造体５０を用いてもよい。

以上に説明した上記の各流路は、例えばマイクロ流路である。流路内の流体の流れ、流体の流路内への注入、タンクからの流体の取り出し及び／又は脂質粒子溶液の容器への収容等は、例えばこれらの操作が自動的に行われるように構成され及び制御されたポンプ又は押し出し機構等により行われ得る。

実施形態の脂質粒子の製造方法は、上記したように凝縮工程Ｓ１、濃縮工程Ｓ４を必ずしも行う必要はなく、少なくとも混合工程Ｓ２及び粒子化工程Ｓ３を含めばよい。

実施形態の脂質粒子の製造方法によれば、混合工程Ｓ２を実施形態の流路構造体を用いて行うため、第１溶液と第２溶液とが十分に混合及び撹拌され、粒径がより均一な脂質粒子２００を製造することが可能である。脂質粒子２００の粒径がより均一であると、例えば、薬剤２０２の内包量の向上、脂質粒子２００の平均粒子径の低減、及び薬剤２０２が内包されている脂質粒子の割合の向上等の効果が期待される。すなわち、実施形態の脂質粒子の製造方法によって、より高品質な脂質粒子を製造することができる。

さらなる実施形態として、第１実施形態の流路構造体１を基準にしてスワール構造をさらに計ｍつ備える流路構造体、すなわち、第２実施形態に係る流路構造体を使用して脂質粒子を製造してもよい。

第２実施形態に係る流路構造体を使用した製造方法は、例えば、次の工程を含む：
第１の流路、第２の流路、第４の流路及び流路Ａのうち、第６の流路から第（２ｍ＋２）の流路までのそれぞれの流路に対し、脂質溶液、又は、種々の薬剤を含む複数種類の薬液を、それぞれ供給して、脂質溶液と複数種類の薬液との混合液を得ること；及び
第（２ｍ＋４）の流路から水性溶媒を供給し、混合液の前記有機溶媒の濃度を低下させて脂質を粒子化し、薬剤を内包した脂質粒子を生成すること溶液と複数種類の薬液とを十分に混合して得た混合液の有機溶媒の濃度を低下させて脂質を粒子化することで、種々の薬剤を均一に内包した脂質粒子を生成すること。

さらなる実施形態として、第２実施形態に係る流路構造体を使用することで、種々の薬剤を均一に内包した脂質粒子を生成することができ、高品質な脂質粒子製剤を製造することができる。

［例］
以下に、実施形態の流路構造体及び脂質粒子の製造方法を用いて行った実験について記載する。

例１．密閉系における希釈と開放系における希釈との比較
・実施例１
図１９の（ａ）に示す、密閉系における希釈が可能な流路構造体３００を用意した。流路構造体３００は、第４実施形態に係る流路構造体４９と同様の構成とした。なお、流路構造体３００の寸法は、第１のスワール構造２及び混合ユニット群４７ａと、第２のスワール構造３及び混合ユニット群４７ｂとで、その流路幅ひいては断面積の大きさが異なるようにした。具体的には、第１のスワール構造２及び混合ユニット群４７ａの流路幅を０．３ｍｍとし、第２のスワール構造３及び混合ユニット群４７ｂの流路幅を０．６ｍｍとした。ただし、第３の流路６の流路幅は０．３ｍｍから０．６ｍｍへと広がる構造となっている。

脂質溶液として、脂質組成Ａ（ＦＦＴ２０：ＤＯＰＥ：ＤＯＴＡＰ：コレステロール：ＤＮＧ－ＰＥＧ２０００＝７０：１０：２０：１２０：８（モル比））の脂質組成物をエタノールに溶解させた溶液を用意した。

０．１ｍｇ／ｍｌの（５ｋｂｐの）二本鎖核酸を、９倍量の１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）に溶解させた水溶液を薬液として用意した。

実施例１として、上記の脂質を含有する脂質溶液と、上記の水性溶媒中に核酸を薬剤として含有する薬液を、それぞれ流路構造体３００の第１の流路４及び第２の流路５に供給し、かつ、同薬液の水性溶媒と同じ水性溶媒を第４の流路８に供給することで、脂質粒子を製造した。

製造した脂質粒子について、Ｚｅｔａｓａｉｚｅｒ（登録商標）Ｎａｎｏ ＺＳＰ（Ｍａｌｖｅｒｎ社）の粒子径測定モードで、平均粒子径及び多分散指数（ｐｄｉ）を測定した。多分散指数が高いほど、得られた脂質粒子の粒径のバラツキが大きく、逆に少ないほど脂質粒子の粒径が均一であることを意味する。

また、脂質粒子の核酸内包量は、Ｑｕａｎｔ－ｉＴ^ＴＭＰｉｃｏＧｒｅｅｎ（登録商標）ｄｓ ＤＮＡ Ａｓｓａｙキット（Ｔｈｅｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）のプラスミド測定モードで測定して得られた蛍光強度の相対比を換算することで算出した。

・比較例１
比較例１として、図１９の（ｂ）に示す流路構造体４００を用意した。流路構造体４００は、流路構造体３００の第１のスワール構造２及び混合ユニット群４７ａと同一の構造を備えるが、流路構造体３００の第２のスワール構造３及び混合ユニット群４７ｂにあたる構造を備えず、実施形態の流路構造体による希釈と粒子化工程は行わなかった。

代わりに、比較例１では、流路構造体４００から排出された脂質溶液と薬液との混合液を、大気中（すなわち開放系）で水性溶媒と混合する操作によって希釈し、脂質粒子を製造した。比較例１において製造した脂質粒子について、実施例１と同様の方法をもって、その平均粒径、多分散指数及び核酸内包量を測定した。

・実施例２及び比較例２
実施例２として、図１９の（ａ）の流路構造体３００に、実施例１とは異なる脂質組成の脂質溶液を供給し、脂質粒子を製造した。異なる脂質組成の脂質溶液として、脂質組成Ｂ（ＦＦＴ１０：ＦＦＴ２０：ＤＯＰＥ：ＤＯＴＡＰ：コレステロール：ＤＮＧ－ＰＥＧ２０００＝３５：７０：２１：９．４：８８．５：９．４（モル比）の脂質組成物をエタノールに溶解させた溶液を用意し、使用した。脂質粒子に使用した薬液の組成は実施例１と同一である。

また、比較例２として、図１９の（ｂ）の流路構造体４００に、比較例１とは異なる脂質組成の脂質溶液を供給した。異なる脂質組成の脂質溶液として、脂質組成Ｂ（ＦＦＴ１０：ＦＦＴ２０：ＤＯＰＥ：ＤＯＴＡＰ：コレステロール：ＤＮＧ－ＰＥＧ２０００＝３５：７０：２１：９．４：８８．５：９．４（モル比））の脂質組成物をエタノールに溶解させた溶液を用意し、使用した。また、比較例２の脂質粒子の製造に使用した薬液の組成は、実施例１、実施例２及び比較例１と同一である。脂質粒子は、比較例１と同じ方法で行った。

実施例２及び比較例２において製造した脂質粒子について、実施例１と同様の方法をもって、その平均粒径、多分散指数及び核酸内包量を測定した。

・結果
表１に、例１の実験結果を示す。

実施例１と比較例１との結果を比較すると、実施例１は比較例１よりも多分散指数が低く、製造された脂質粒子の粒径がより均一であることが分かる。また、実施例１は比較例１に比べて、製造された脂質粒子の平均粒径はわずかに小さい一方で、核酸内包量を大幅に向上させたことが分かる。

同様に、実施例２と比較例２との結果を比較すると、実施例２は比較例２よりも多分散指数が低く、製造された脂質粒子の粒径はより均一である。また、実施例２は比較例２に比べて、製造された脂質粒子の平均粒径が低い一方で、核酸内包量はわずかに増加していることが分かる。

従って、密閉系の流路構造体を用いた希釈及び粒子化（実施例１及び２）は、流路構造体を用いた混合液の用意と開放系における希釈とを組み合わせる製造方法（比較例１及び２）よりも、品質の良い脂質粒子を製造できることが示された。

また、実施例１と実施例２では組成が異なる脂質溶液を供給したが、両者ともに品質の良い脂質粒子が製造できたため、異なる脂質組成の溶液にも適用可能であることが示された。

例２．スワール構造による希釈と層流構造による希釈との比較
・比較例３
図２０の（ａ）に示す流路構造体５００を用意した。流路構造体５００は、流路構造体３００及び４００の第１のスワール構造２及び混合ユニット群４７と同一の構造を備えるが、流路構造体３００の第２のスワール構造３及び混合ユニット群４７ｂにあたる構造を備えず、代わりに層流構造５０１を備え、層流構造５０１をもって脂質溶液を水性溶媒と混合することにより、希釈した。

層流構造５０１とは、溶液が混合される際にスワールが発生しないように構成される流路合流部のことを指す。図２０の（ｂ）に示すように、層流構造５０１は、流体の流れが壁面と衝突しないように構成される。流路構造体５００は、流路構造体４００とは希釈及び粒子化を行う流路を備えている点で異なる。

比較例３として、流路構造体５００に脂質溶液、薬液及び水性溶媒を供給し、脂質粒子の製造を行った。脂質溶液、薬液及び水性溶媒の組成、並びに供給流量などの実験条件、さらには測定項目及び測定条件も、実施例１と同一である。

・結果
表２に、例２の実験結果を示す。

実施例１と比較例３との結果を比較すると、実施例１は比較例３よりも多分散指数が低く、製造された脂質粒子の粒径がより均一であることが分かる。また、実施例１は比較例３に比べて、製造された脂質粒子の平均粒径は小さい一方で、核酸内包量を大幅に向上させたことが分かる。

従って、スワール構造を備える流路構造体を用いた希釈及び粒子化（実施例１）は、層流構造を備える流路構造体を用いた希釈及び粒子化（比較例１及び２）よりも、品質の良い脂質粒子を製造できることが示された。

例３．スワール構造の形状パターン間の比較
スワール構造の形状パターンが希釈効果に影響するかを検証するため、図２１（ａ）に示す実施例１の第２のスワール構造３の形状パターン（以下、Ｔｙｐｅ－Ａと称する）とは異なる形状パターンの第２のスワール構造３を備える流路構造体を、さらに２つ用意した。具体的には、図２１の（ｂ）に示す形状パターン（以下、Ｔｙｐｅ－Ｂと称する）の第２のスワール構造３を備える流路構造体と、図２１の（ｃ）に示す形状パターン（以下、Ｔｙｐｅ－Ｃと称する）の流路構造体とを用意した。両流路構造体は、第２のスワール構造の形状パターン以外、実施例１と同様の構成である。

・実施例３
実施例３として、Ｔｙｐｅ－Ｂの第２のスワール構造を備える流路構造体を使用する以外は、実施例１と同じ条件で脂質粒子の製造を行った。

Ｔｙｐｅ－Ｂは、同一直線上に乗るように延びる第３の流路６と第５の流路９（すなわち、第３の流路６と第５の流路９とがなす角度は１８０°である）に対して、第４の流路８が接続される形状である。なお、Ｔｙｐｅ－Ｂの第３の流路６、第４の流路８及び第５の流路９の流路幅は０．６ｍｍであり、この点はＴｙｐｅ－Ａの構造と同一である。

・実施例４
実施例４として、Ｔｙｐｅ－Ｃの第２のスワール構造を備える流路構造体を使用する以外は、実施例１と同じ条件で脂質粒子の製造を行った。

Ｔｙｐｅ－Ｃは、Ｔｙｐｅ－Ｂと同様、同一直線上に乗るように延びる第３の流路６と第５の流路９（すなわち、第３の流路６と第５の流路９とがなす角度は１８０°である）に対して、第４の流路８が接続される形状である。ただし、Ｔｙｐｅ－Ｃの第３の流路６及び第５の流路９の流路幅を０．６ｍｍ、第４の流路８を１．２ｍｍとする非対称なスワール構造とした。この点において、Ｔｙｐｅ－Ｃの形状は、Ｔｙｐｅ－Ａ及びＴｙｐｅ－Ｂの形状と異なる。

・結果
表３に、例３の実験結果を示す。

実施例１、実施例３及び実施例４で製造された脂質粒子の、平均粒径、多分散指数及び核酸内包量に大きな差異は見られなかった。従って、Ｔｙｐｅ－Ａ、Ｔｙｐｅ－Ｂ及びＴｙｐｅ－Ｃの何れのスワール構造の形状パターンでも、効果的に希釈が行えることが示された。

本発明のいくつかの実施形態を説明したが、これらの実施形態は、例として提示したものであり、発明の範囲を限定することは意図していない。これら新規な実施形態は、その他の様々な形態で実施されることが可能であり、発明の要旨を逸脱しない範囲で、種々の省略、置き換え、変更を行うことができる。これら実施形態やその変形は、発明の範囲や要旨に含まれるとともに、特許請求の範囲に記載された発明とその均等の範囲に含まれる。

１、２０、３０、４０、４２、４９、５０、６０、１００、３００、４００、５００…流路構造体、
２…第１のスワール構造、３…第２のスワール構造、
４…第１の流路、４ａ…第１の浅部、４ｂ…第１の深部、
５…第２の流路、６…第３の流路、７…第１の合流部、
８…第４の流路、８ａ…第２の浅部、８ｂ…第２の深部、
９…第５の流路、１０…第２の合流部、
２００…脂質粒子、２０２…薬剤

Claims (15)

1. 第１の流路と、
   第２の流路と、
   第３の流路と、
   前記第１の流路の一方の端部、前記第２の流路の一方の端部、及び前記第３の流路の一方の端部を互いに接続する第１の合流部と、
   前記第１の流路の前記一方の端部に位置する、前記第１の合流部の深さよりも浅い第１の浅部と、
   第４の流路と、
   第５の流路と、
   前記第３の流路の他方の端部、前記第４の流路の一方の端部、及び前記第５の流路の一方の端部を互いに接続する第２の合流部と、
   前記第４の流路の前記一方の端部に位置する、前記第２の合流部の深さよりも浅い第２の浅部と、を備える流路構造体。
2. 前記第１の浅部の深さは前記第１の合流部の深さの１／２未満である、及び／又は、前記第２の浅部の深さは前記第２の合流部の深さの１／２未満である、請求項１に記載の流路構造体。
3. 前記第４の流路の断面積は、前記第１の流路、前記第２の流路及び前記第３の流路のうちの何れの断面積よりも大きい、請求項１に記載の流路構造体。
4. 前記第３の流路は、混合ユニットを更に有し、
   前記混合ユニットは、前記第３の流路の前記他方の端部から前記一方の端部までの間で、前記第３の流路から分岐し、再び前記第３の流路に合流する２つの流路である、第１の分岐合流路及び第２の分岐合流路を備え、
   前記第１の分岐合流路及び前記第２の分岐合流路は、
   前記第３の流路から分岐した分岐部と、
   前記第３の流路に合流する合流部と、
   前記分岐部及び前記合流部を接続し、接続箇所を屈曲させる中間部と、
   前記第１の分岐合流路の前記合流部側の端部に位置する、前記第３の流路の深さよりも浅い第３の浅部と、
   前記第２の分岐合流路の前記中間部に位置する、前記第２の分岐合流路の前記分岐部及び前記合流部よりも深さが浅い第４の浅部と、を有する、
   請求項１に記載の流路構造体。
5. 前記第１の分岐合流路及び前記第２の分岐合流路の前記第３の流路への合流部は、前記第３の流路の長軸に対して互いに対称な角度で前記第３の流路に接続する、請求項４に記載の流路構造体。
6. 前記第３の流路は前記混合ユニットを複数備え、前記混合ユニット同士が互いに直列的に及び／又は並列的に接続されている、請求項４に記載の流路構造体。
7. 前記第３の流路は、前記第１の流路、前記第２の流路、前記第４の流路及び前記第５の流路よりも滞留時間が長い流路をさらに有する請求項１に記載の流路構造体。
8. 前記滞留時間が長い流路は、前記第１の流路、前記第２の流路、前記第４の流路及び前記第５の流路よりも流路長が長い、及び／又は、流路幅が広い、請求項７に記載の流路構造体。
9. 前記第１の浅部よりも前記他方の端部側の前記第１の流路に、異物をトラップするためのトラップ構造をさらに有し、
   前記トラップ構造の深さは、前記トラップ構造よりも前記他方の端部側の前記第１の流路の深さよりも浅い、請求項１に記載の流路構造体。
10. 前記第２の浅部よりも他方の端部側の前記第４の流路に、及び／又は、前記第１の合流部よりも他方の端部側の前記第２の流路に、前記トラップ構造をさらに備える、請求項９に記載の流路構造体。
11. 前記第５の流路の他方の端部側に浅部を有する流路Ａをさらに計ｍ本（以下、ｍは１以上のいずれかの整数）備え、かつ、各前記流路Ａとそれぞれが接続される流路Ｂをさらに計ｍ本備え、
    ここで、計ｍ本の前記流路Ａのそれぞれを第（２ｎ＋４）の流路（以下、ｎは１からｍまでの各整数）と表し、計ｍ本の前記流路Ｂのそれぞれを第（２ｎ＋５）の流路と表すと、
    第（２ｎ＋３）の流路の他方の端部と、前記第（２ｎ＋４）の流路の一方の端部と、第（２ｎ＋５）の流路の一方の端部とが、第（ｎ＋２）の合流部において互いに接続され、
    前記第（２ｎ＋４）の流路の前記一方の端部は、前記第（ｎ＋２）の合流部の深さよりも浅い、第（ｎ＋２）の浅部を有する、
    請求項１に記載の流路構造体。
12. 請求項１～１０の何れか１項に記載の流路構造体を用いて薬剤を内包する脂質粒子を製造する方法であって、
    前記第１の流路及び前記第２の流路の何れか一方から、有機溶媒中に前記脂質粒子の材料の脂質を含む第１溶液を供給し、他方から水性溶媒中に前記薬剤を含む第２溶液を供給して前記第１溶液と前記第２溶液とを混合し、混合液を得ること、及び
    前記第４の流路から水性溶媒を供給して希釈して、前記混合液の前記有機溶媒の濃度を低下させることで前記脂質を粒子化し、前記薬剤を内包した前記脂質粒子を生成すること
    を含む、
    脂質粒子の製造方法。
13. 前記薬剤は核酸であり、前記第１溶液と前記第２溶液とを混合する前に、前記核酸を凝集することを更に含む、請求項１２に記載の方法。
14. 前記粒子化の後に、前記脂質粒子を含む脂質粒子溶液を濃縮する工程を更に含む、請求項１２に記載の方法。
15. 請求項１１に記載の流路構造体を用いて薬剤を内包する脂質粒子を製造する方法であって、
    前記第１の流路、前記第２の流路、前記第４の流路、及び、前記流路Ａのうち第６の流路から第（２ｍ＋２）の流路までのそれぞれの流路に対し、有機溶媒中に前記脂質粒子の材料の脂質を含む脂質溶液、又は、水性溶媒中に前記薬剤を含む薬液を、それぞれ供給して、前記脂質溶液と前記薬液との混合液を得ること；及び
    前記第（２ｍ＋４）の流路から水性溶媒を供給し、前記混合液の前記有機溶媒の濃度を低下させて前記脂質を粒子化し、前記薬剤を内包した前記脂質粒子を生成すること；
    を含む、
    脂質粒子の製造方法。

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