JP2023540759A

JP2023540759A - ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するヒトモノクローナル抗体及びその使用

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Publication number: JP2023540759A
Application number: JP2023514983A
Authority: JP
Inventors: コビー，ジェームズ; ウォルター，マーク・アール; ピーペンブリンク，マイケル; デシュパンデ，アスレシャ; ゴープフェルト，ポール; エルドマン，ナサニエル; マルティネス－ソブリド，ルイス; バス，マデュバンチ; サルカール，サンギータ; オラドゥンニ，ファタイ; パーク，ジュン－ギュ
Original assignee: ザ・ユー・エイ・ビー・リサーチ・ファウンデーション; テキサスバイオメディカルリサーチインスティチュート
Priority date: 2020-09-03
Filing date: 2021-09-03
Publication date: 2023-09-26
Also published as: WO2022051650A1; AU2021338380A1; CA3190311A1; EP4208479A1; CN116615450A

Abstract

本開示は、少なくとも部分的に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して、予測外の広範な中和活性を有する、ある特定のヒトモノクローナル抗体又はその抗原結合断片に基づく。開示された抗体及び／又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置するための治療剤であり、個体を、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染から保護する治療法における使用に適するものである。

Description

コロナウイルス（ＣｏＶ）は、コロナウイルス科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）のメンバーである。コロナウイルス科は、各属が、１つ以上の亜属を有する、４つの個別の属である、アルファコロナウイルス属（Ａｌｐｈａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）、ベータコロナウイルス属（Ｂｅｔａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）、デルタコロナウイルス属（Ｄｅｌｔａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）及びガンマコロナウイルス属（Ｇａｍｍａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）を有する。アルファコロナウイルス属及びベータコロナウイルス属は、主に、コウモリに感染するが、また、ヒト、ラクダ、ウサギ、イヌ及びハクビシンなど、他の種にも感染する。ＣｏＶは、２６～３２キロベースの範囲の長さの、極めて大型の一本鎖ＲＮＡゲノムを有するエンベロープウイルスである。ＣｏＶは、歴史的に、ごく軽微な疾患を引き起こすに過ぎない病原体と考えられていた。現在、少なくとも７つのＣｏＶ種が、ヒトにおいて、疾患を引き起こすことが公知である。ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３及びＨＣｏＶ－ＨＫＵ１は、一般に、ごく軽微な一般的感冒の症状を引き起こす。重度の疾病は、各々が、ベータコロナウイルス属に属する、残りの３つのウイルスにより引き起こされる場合がある。ＳＡＲＳ－ＣｏＶは、２００２年及び２００３年に、重度急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）を結果としてもたらした。ＭＥＲＳ－ＣｏＶは、２０１２年に出現し、ラクダにおいて、依然として発症している中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）の一因となった。ＭＥＲＳ－ＣｏＶの小流行は、２０２０年６月２日に、サウジアラビアにおいて報告された（５例の死亡例と共に、９例が報告された）。最後に、２０１９年１２月に、中国武漢州において出現し、ＣＯＶＩＤ－１９を引き起こすＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。ＣＯＶＩＤ－１９のパンデミックは、事実上、世界中のあらゆる国に影響を与え、緩和の目先観を許さない。米国は、現在のところ、世界中において、感染者の数において抜きん出ており、症例の増加が間近に迫っている。

ＳＡＲＳについての致死率が、約１０％であり、致死性転帰に対する危険性が、年齢と共に増大したのに対し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の死亡率は、約１．５～１０％であると推定され、致死性転帰に対する危険性は、年齢及びある特定の併存疾患と共に増大した。ＭＥＲＳ－ＣｏＶについての致死率は、約３７％であった。加えて、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の基本再生産数（Ｒ_０）が、３．３～５．５であり、これが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びＭＥＲＳ－ＣｏＶのＲ_０（２．７～３．９）より高値であることは、他のヒトコロナウイルスより高度な、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の伝染性を指し示す。各々、個体への感染が、１０，０００例未満であったＳＡＲＳ及びＭＥＲＳと異なり、ＣＯＶＩＤ１９は、現在のところ、１６，０００，０００例を超える個体に感染しており、世界中において、６５０，０００例を超える死亡例の一因となっている。

現在のところ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を含む、ＣｏＶ感染の処置のために承認された処置は存在しない。したがって、当技術分野は、ＣｏＶ感染、特に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の処置のための、新たな治療法を必要としている。

本開示は、とりわけ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を含む、ＣｏＶ感染のために、新たな治療をもたらすことにより、当技術分野の欠落に対する解決策を提示する。

組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質への結合についての、本開示の抗体の、ＥＬＩＳＡによる結合プロファイルを示す図である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞への、本開示の抗体の結合を示す図である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク受容体結合ドメインに対する、ある特定のｍＡｂの高アフィニティーを描示する図である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤへの結合は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により決定した。合理的にデザインされ、中和活性を増大させた、１２１２Ｃ２ｍＡｂ変異体を描示する図である。図４Ａは、１２１２Ｃ２ｍＡｂ及びその変異体の配列を示す。合理的にデザインされ、中和活性を増大させた、１２１２Ｃ２ｍＡｂ変異体を描示する図である。図４Ｂは、１２１２Ｃ２ｍＡｂによる、ウイルスの中和を示す。合理的にデザインされ、中和活性を増大させた、１２１２Ｃ２ｍＡｂ変異体を描示する図である。図４Ｃは、１２１２Ｃ２－Ｖ１ｍＡｂによる、ウイルスの中和を示す。合理的にデザインされ、中和活性を増大させた、１２１２Ｃ２ｍＡｂ変異体を描示する図である。図４Ｄは、１２１２Ｃ２－Ｖ２ｍＡｂによる、ウイルスの中和を示す。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの、予防活性及び治療活性を示す図である。（図５Ａ）２×１０^５のＰＦＵＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、鼻腔内（ｉ．ｎ．）における抗原投与の６時間前に、ゴールデンシリアハムスターを、１０ｍｇ／ｋｇの、表示のｈｍＡｂ又はＰＢＳにより、腹腔内において予防処置した。各記号は、個々の動物を表す。両側ｔ検定により決定されたｐ値である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの、予防活性及び治療活性を示す図である。（図５Ｂ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、鼻腔内における抗原投与の６時間後に、ゴールデンシリアハムスターを、２５ｍｇ／ｋｇの、表示のｈｍＡｂ又はＰＢＳにより、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射を介して治療処置した。鼻甲介及び肺において存在するウイルスは、プラークアッセイにより決定した。点線は、検出限界を指し示す。各記号は、個々の動物を表す。両側ｔ検定により決定されたｐ値である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの、予防活性及び治療活性を示す図である。（Ｃ）予防処置された動物において、ＩｍａｇｅＪを使用して、圧密化、うっ血及び肺病変を含む、病理学的病変の分布を測定し、全肺表面積に対する百分率として表した。各記号は、個々の動物を表す。両側ｔ検定により決定されたｐ値である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの、予防活性及び治療活性を示す図である。（Ｄ）治療処置された動物において、ＩｍａｇｅＪを使用して、圧密化、うっ血及び肺病変を含む、病理学的病変の分布を測定し、全肺表面積に対する百分率として表した。各記号は、個々の動物を表す。両側ｔ検定により決定されたｐ値である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、吸入型１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの治療活性を示す図である。ゴールデンシリアハムスターの鼻腔内に、２×１０^５ＰＦＵのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させ、１２時間後に、腹腔内投与又は吸入投与を介して、表示のｈｍＡｂにより処置した。鼻甲介及び肺において存在するウイルスは、感染の２日後において、プラークアッセイにより決定した。点線は、検出限界を指し示す。腹腔内ＰＢＳ処置群と比較して、両側ｔ検定により決定された、^＊ｐ＜０．００５５及び^＊＊ｐ＜０．０００５５である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、吸入型１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの治療活性を示す図である。ゴールデンシリアハムスターの鼻腔内に、２×１０^５ＰＦＵのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させ、１２時間後に、腹腔内投与又は吸入投与を介して、表示のｈｍＡｂにより処置した。鼻甲介及び肺において存在するウイルスは、感染の４日後において、プラークアッセイにより決定した。点線は、検出限界を指し示す。腹腔内ＰＢＳ処置群と比較して、両側ｔ検定により決定された、^＊ｐ＜０．００５５及び^＊＊ｐ＜０．０００５５である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターにおける、吸入型１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの治療活性を示す図である。ゴールデンシリアハムスターの鼻腔内に、２×１０^５ＰＦＵのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させ、１２時間後に、腹腔内投与又は吸入投与を介して、表示のｈｍＡｂにより処置した。（図６Ｃ）ＩｍａｇｅＪを使用して、病理学的病変の分布を測定し、全肺表面積に対する百分率として表した。腹腔内ＰＢＳ処置群と比較して、両側ｔ検定により決定された、^＊ｐ＜０．００５５及び^＊＊ｐ＜０．０００５５である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターの吸入治療処置による、体重の保存を示す図である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。図８Ａ及び８Ｂに示された通り、５週齢のＫ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスに、アイソタイプＩｇＧ対照又は１２１２Ｃ２ＭＡｂを注射し、処置の１２時間後に、マウスに、（マウス１匹当たり１０^５ＰＦＵの）組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａ（Ｎｌｕｃ－２Ａ）を感染させた。モック処置及びモック感染マウスを、対照として組み入れた。感染の１、２、４及び６日後に、マウスに麻酔をかけ、Ｎｌｕｃ基質を、眼窩後注入した。Ｎｌｕｃの発現は、ＩＶＩＳシステムを使用して決定した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。図８Ａ及び８Ｂに示された通り、５週齢のＫ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスに、アイソタイプＩｇＧ対照又は１２１２Ｃ２ＭＡｂを注射し、処置の１２時間後に、マウスに、（マウス１匹当たり１０^５ＰＦＵの）組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａ（Ｎｌｕｃ－２Ａ）を感染させた。モック処置及びモック感染マウスを、対照として組み入れた。感染の１、２、４及び６日後に、マウスに麻酔をかけ、Ｎｌｕｃ基質を、眼窩後注入した。Ｎｌｕｃの発現は、Ａｕｒａプログラムにより、定量的に解析した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。感染の１、２、４及び６日後に、肺を切り出して撮像した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。感染の１、２、４及び６日後に、肺表面上の肉眼的病変を、ＩｍａｇｅＪにより、定量的に解析した。ｎｓ：非有意である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。感染マウスに由来する、鼻甲介（左）、肺（中）及び脳（右）における、Ｎｌｕｃ活性は、マルチプレートリーダーを使用して測定した（図８Ｅ）。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。鼻甲介（左）、肺（中）及び脳（右）におけるウイルス力価は、プラークアッセイにより決定した（図８Ｆ）。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。５週齢のＫ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスに、アイソタイプＩｇＧ対照又は１２１２Ｃ２ＭＡｂを注射し、処置の１２時間後に、マウスに、（マウス１匹当たり１０^５ＰＦＵの）ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａ（Ｎｌｕｃ－２Ａ）を感染させた。モック処置及びモック感染マウスを、対照として組み入れた。マウスを、体重の変化について、１２日間にわたりモニタリングした。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたマウスにおける、１２１２Ｃ２の予防活性を示す図である。５週齢のＫ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスに、アイソタイプＩｇＧ対照又は１２１２Ｃ２ｍＡｂを注射し、処置の１２時間後に、マウスに、（マウス１匹当たり１０^５ＰＦＵの）ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａ（Ｎｌｕｃ－２Ａ）を感染させた。モック処置及びモック感染マウスを、対照として組み入れた。マウスを、生存について、１２日間にわたりモニタリングした。Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータ株（南アフリカ（ＳＡ）株）に対する、１２１２Ｃ２及び１２１３Ｈ７の予防活性を示す図である。６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝５）を、２５ｍｇ／ｋｇの、ＩｇＧアイソタイプ対照、ｈｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｈｍＡｂである１２１３Ｈ７により（腹腔内）処置し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（左）、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）（中）又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）の両方（右）を感染させた。マウスを、体重の変化について、１２日間にわたりモニタリングした。データは、個々のマウスについて決定された結果の、平均値及びＳＤを表す。Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータ株（南アフリカ（ＳＡ）株）に対する、１２１２Ｃ２及び１２１３Ｈ７の予防活性を示す図である。６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝５）を、２５ｍｇ／ｋｇの、ＩｇＧアイソタイプ対照、ｈｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｈｍＡｂである１２１３Ｈ７により（腹腔内）処置し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（左）、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）（中）又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）の両方（右）を感染させた。マウスを、生存について、１２日間にわたりモニタリングした。データは、個々のマウスについて決定された結果の、平均値及びＳＤを表す。１２１２Ｃ２及び１２１３Ｈ７による、マウスにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の肺内ウイルス負荷の阻害を示す図である。６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝３）に、２５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧアイソタイプ対照、ｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｍＡｂである１２１３Ｈ７を腹腔内注射し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（上）、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（中）又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡの両方（ベータ）（下）を感染させた。感染後２及び４日目に、ＡｍｉＨＴイメージングシステムを使用して、Ｖｅｎｕｓ及びｍＣｈｅｒｒｙによる蛍光発現を決定するように、肺を回収した。ＢＦ：明視野である。１２１２Ｃ２及び１２１３Ｈ７による、マウスにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の肺内ウイルス負荷の阻害を示す図である。Ｖｅｎｕｓ及びｍＣｈｅｒｒｙの放射輝度値は、マウス肺内の目的の領域についての平均値に基づき定量した。平均値は、各時点のモック感染マウスにおける自己蛍光に照らして正規化し、誘導倍数を計算するのに使用した。モック感染Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスの肺における、肉眼的病理学スコアは、感染罹患肺の面積％に基づき計算した。１２１２Ｃ２ｍＡｂ又は１２１３Ｈ７ｍＡｂにより処置され、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータを感染させられた、Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスの肺、鼻甲介及び脳におけるウイルス力価を示す図である。６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝３）に、２５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧアイソタイプ対照、ｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｍＡｂである１２１３Ｈ７を腹腔内注射し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）を感染させた。感染後２及び４日目の、肺（上）、鼻甲介（中）及び脳（下）におけるウイルス力価は、ＶｅｒｏＥ６細胞内のプラークアッセイにより決定した。バーは、肺内ウイルス力価についての、平均値及びＳＤを指し示す。点線は、検出限界を指し示す。１２１２Ｃ２ｍＡｂ又は１２１３Ｈ７ｍＡｂにより処置され、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータを感染させられた、Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスの肺、鼻甲介及び脳におけるウイルス力価を示す図である。６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝３）に、２５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧアイソタイプ対照、ｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｍＡｂである１２１３Ｈ７を腹腔内注射し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）を感染させた。感染後２及び４日目の、肺（上）、鼻甲介（中）及び脳（下）におけるウイルス力価は、ＶｅｒｏＥ６細胞内のプラークアッセイにより決定した。バーは、肺内ウイルス力価についての、平均値及びＳＤを指し示す。点線は、検出限界を指し示す。１２１２Ｃ２ｍＡｂ又は１２１３Ｈ７ｍＡｂにより処置され、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータを感染させられた、Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスの肺、鼻甲介及び脳におけるウイルス力価を示す図である。６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝３）に、２５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧアイソタイプ対照、ｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｍＡｂである１２１３Ｈ７を腹腔内注射し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）の両方を感染させた。感染後２及び４日目の、肺（上）、鼻甲介（中）及び脳（下）におけるウイルス力価は、ＶｅｒｏＥ６細胞内のプラークアッセイにより決定した。バーは、肺内ウイルス力価についての、平均値及びＳＤを指し示す。点線は、検出限界を指し示す。１２１２Ｃ２ｍＡｂ又は１２１３Ｈ７ｍＡｂにより処置され、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータを感染させられた、Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスの肺、鼻甲介及び脳におけるウイルス力価を示す図である。図１１Ｄは、感染後２及び４日目における、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）の両方を共感染させられたマウスに由来する肺（上）、鼻甲介（中）及び脳（下）における、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）についての定量を示す。ＲＢＤ変異株への、ｍＡｂの結合を示す図である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ変異株（５０ｎＭ）を、Ｂｉａｃｏｒｅチップ上に捕捉されたｍＡｂ上に注入し、それらの結合レベルを測定し、参照（ＷＴ）Ｗｕｈａｎ－１株ＲＢＤに対する結合反応に照らして正規化した。実験の開始時及び終了時に、２回のＷＴＲＢＤ結合実験を実施し、アッセイの再現性について検証した。ｍＡｂの結合は、ＷＴへの結合に対する％として、行列により提示する。ｍＡｂについてのエピトープマッピングを示す図である。ＳＰＲを、既に記載された変異体解析と組み合わせて使用する、競合エピトープマッピングを使用して、ｍＡｂの結合エピトープを規定した。図１３Ａ～１３Ｃは、異なるエピトープクラスである、Ｃ１、Ｃ１Ｄ、Ｃ２又はＣ４へと割り当てられたｈｍＡｂにより実施された、３つの、顕著に異なる競合マッピング実験を表す。ｍＡｂについてのエピトープマッピングを示す図である。ＳＰＲを、既に記載された変異体解析と組み合わせて使用する、競合エピトープマッピングを使用して、ｍＡｂの結合エピトープを規定した。図１３Ａ～１３Ｃは、異なるエピトープクラスである、Ｃ１、Ｃ１Ｄ、Ｃ２又はＣ４へと割り当てられたｈｍＡｂにより実施された、３つの、顕著に異なる競合マッピング実験を表す。ｍＡｂについてのエピトープマッピングを示す図である。ＳＰＲを、既に記載された変異体解析と組み合わせて使用する、競合エピトープマッピングを使用して、ｍＡｂの結合エピトープを規定した。図１３Ａ～１３Ｃは、異なるエピトープクラスである、Ｃ１、Ｃ１Ｄ、Ｃ２又はＣ４へと割り当てられたｈｍＡｂにより実施された、３つの、顕著に異なる競合マッピング実験を表す。ｍＡｂについてのエピトープマッピングを示す図である。ＳＰＲを、既に記載された変異体解析と組み合わせて使用する、競合エピトープマッピングを使用して、ｍＡｂの結合エピトープを規定した。図１３Ｄは、エピトープマッピングデータ及び変異体結合データを説明する、ｍＡｂ／ＲＢＤ複合体についての構造モデルを示す。図中において、ｍＡｂ／ＲＢＤ複合体をモデル化するのに使用された、ＰｒｏｔｅｉｎＤａｔａＢａｎｋ（ＰＤＢ）の登録項目に、下線を付す。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＡｂについての、ＭＡＲＭ解析を示す図である。ＶｅｒｏＥ６細胞に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＡ－１株を感染させ、濃度を減少させるｍＡｂと共にインキュベートした。免疫蛍光アッセイを使用して、表示のｍＡｂに対する耐性を出現させたウイルスを、ｍＡｂによる認識について調べた（上）。ＭＡＲＭのスパイクをシーケンシングし、突然変異について注記した。ＲＢＤ内の突然変異を、太字により指し示す（下）。２０２０－２０研究の結果、特に、ＩＶ経路、ＩＮ経路及びＩＨ経路による投与後のマウスの、投与の０．５、６、１２及び２４時間後の、血清、気管支組織及び肺における、ＩｇＧｍＡｂの、示差的な生体内分布及び力価を示す図である。１２１２Ｃ２（Ａ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。１２１３Ｈ７（Ｂ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。１２１５Ｄ１（Ｃ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。１２１２Ｃ２＋１２１３Ｈ７（Ｄ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。１２１３Ｈ７＋１２１５Ｄ１（Ｅ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。１２１２Ｃ２＋１２１５Ｄ１（Ｆ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。１２１２Ｃ２＋１２１３Ｈ７＋１２１５Ｄ１（Ｇ）による処置を伴う、中和抗体アッセイについて、処理前及び処理後における、ウイルス感染パーセントに対してプロットされた、代表的ウェル及びｍＡｂ用量を示す図である。

本開示は、広範に中和性である抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２モノクローナル抗体及びその抗原結合断片を提示する。本開示は、本開示の抗体を含む医薬組成物及び本開示の抗体を使用する方法をさらに提示する。本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の防止のほか、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の処置においても有効であることが示されている。本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質内のエピトープに結合する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）内のエピトープに結合する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の、受容体結合部分（ＲＢＭ）内のエピトープに結合する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ１領域内のエピトープに結合する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ２領域内のエピトープに結合する。

ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、標的細胞への結合を低減する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と標的細胞との細胞融合を低減する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、感染性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、感染細胞からの放出を低減する。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、標的細胞の感染を低減する。

本明細書において、より詳細に論じられた通り、本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が記録された対象であって、その後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染から回復した対象から単離された。したがって、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に対する、有効な免疫学的応答を惹起した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する中和抗体は、単一細胞免疫グロブリンクローニングを使用して、対象から単離された。
定義
定義、主題の免責又は否認を除き、かつ、組み込まれた材料が、本明細書における明白な開示と整合しない場合、本開示における表現に従うが、こうした場合を除き、本明細書において引用された、全ての特許出願、特許及び公報書面は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

本明細書において使用された、「約」という用語は、所与の値又は範囲の、１０％以内、好ましくは、５％以内を指し、より好ましくは、１％以内を指す。代替的に、「約」という用語は、当業者により検討された場合に、平均値の許容可能な標準誤差の範囲内を指す。

本明細書において使用された、「アフィニティー」という用語は、抗体又は他の分子の、単一の結合性部位と、その結合パートナー（抗原などであるが、これらに限定されない）との間の非共有結合的相互作用の強度の総計を指す。そうでないことが指し示されない限りにおいて、「結合アフィニティー」という用語は、抗体と抗原との間の１：１の相互作用又は結合性対のメンバーの間の１：１の相互作用を反映する、内因性結合アフィニティーを指す。アフィニティーは、一般に、解離定数（ＫＤ）により表される。

本明細書において使用された、「抗体」という用語は、全抗体及びその任意の抗原結合断片を含む。抗体の例は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つの抗体又はそれらの抗原結合断片から形成された、多特異性抗体（例えば、二特異性抗体）、キメラ抗体、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、イントラボディー及び前出のもののうちのいずれかの抗原結合断片を含むが、これらに限定されず、全抗体は、ジスルフィド結合により相互接続された、少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む、糖タンパク質である。各重鎖は、重鎖可変（Ｖ_Ｈ）領域及び重鎖定常（Ｃ_Ｈ）領域から構成される。Ｃ_Ｈ領域は、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２、Ｃ_Ｈ３及びＣ_Ｈ４である、３つ～４つのドメインから構成される。各軽鎖は、軽鎖可変（Ｖ_Ｌ）領域及び軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメインである、Ｃ_Ｌから構成される。Ｖ_Ｈ領域及びＶ_Ｌ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称するより保存的な領域を散在させた、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する超可変性の領域へとさらに細分されうる。各Ｖ_Ｈ及び各Ｖ_Ｌ領域は、アミノ末端からカルボキシ末端へと、以下の順序で配置される、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲ：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４から構成される。Ｖ_Ｈ領域及びＶ_Ｌ領域は、抗原と、抗原特異的に相互作用する結合性ドメインを形成する。Ｃ_Ｈ領域及びＣ_Ｌ領域は、抗体の、宿主組織又は免疫系の多様な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）を含む、細胞又は因子への結合を媒介する。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹを含む、任意の種類の抗体であることが可能であり、クラスである、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２を含む、任意のクラス又はサブクラスの抗体でありうる。

本明細書において使用された、「抗原結合断片」又は「抗原結合性部分」という用語は、本明細書において記載された抗体（親抗体）に由来する１つ以上の断片であって、親抗体と同じ抗原に特異的に結合する能力を保持する断片を指す。結合性断片の例は、Ｆａｂ断片（Ｖ_Ｌドメイン、Ｖ_Ｈドメイン、Ｃ_Ｌドメイン及びＣ_Ｈ１ドメインからなる一価断片）、Ｆ（ａｂ）２断片（ヒンジ領域において、ジスルフィド架橋により連結された、２つのＦａｂ断片を含む二価断片）、Ｆａｂ’断片（ヒンジ領域の部分を含むＦａｂ断片）、Ｆ（ａｂ’）２断片（ヒンジ領域において、ジスルフィド架橋により連結され、ヒンジ領域の部分を含有する、２つのＦａｂ断片を含む二価断片）、Ｆｄ断片（Ｖ_Ｈドメイン及びＣ_Ｈ１ドメインからなる一価断片）、Ｆｖ断片（抗体の単一アームのＶ_Ｌドメイン及びＶ_Ｈドメインからなる一価断片）、ジスルフィド連結型Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ｄＡｂ断片（Ｖ_Ｈドメインからなる単量体断片）、単離ＣＤＲ、ナノボディー又は単一ドメイン抗体（単一の抗体可変ドメインからなる、単量体断片）、単一のＣＤＲ及び２つのＦＲを含有する、Ｖ_Ｈ領域の部分、単一のＣＤＲ及び２つのＦＲを含有する、Ｖ_Ｌ領域の部分、ダイアボディー（２つの抗原結合性部位を伴う抗体断片；このようなダイアボディーは、二価又は二特異性でありうる）、トリアボディー（３つの抗原結合性部位を伴う抗体断片；このようなトリアボディーは、三価又は三特異性でありうる）及びテトラボディー（４つの抗原結合性部位を伴う抗体断片；このようなテトラボディーは、４価又は４特異性でありうる）を含むが、これらに限定されない。用語はまた、Ｖ_Ｈ遺伝子と、Ｖ_Ｌ遺伝子とを、合成リンカーにより、組換え接続することにより創出され、単一のポリペプチドとして発現された単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）も含む。ｓｃＦｖの例は、ｓｃＦｖ－ＦＣ、ｓｃＦｖ－ＣＨ、ｓｃＦａｂ及びｓｃＦｖ－ジッパーを含むが、これらに限定されない。本明細書において記載された抗原結合断片は、当技術分野において公知である、常套的な方法を使用して得られる場合があり、常套的な全抗体についてなされる通り、結合について調べられうる。適切な抗原結合断片については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（「ＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」、１１３巻、Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ及びＭｏｏｒｅ編（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ、ＮｅｗＹｏｒｋ）、２６９～３１５頁（１９９４））、Ｈｕｄｓｏｎら、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．、９：１２９～１３４（２００３）、ＷＯ９３／１６１８５、米国特許第５，５７１，８９４号明細書及び同第５，５８７，４５８号明細書において記載されている。

本明細書において使用された、「本開示の抗体」という用語は、本明細書において開示された抗体を意味し、薬学的に許容される塩、水和物及び／又は溶媒和物などであるが、これらに限定されない、その薬学的に許容される形態を含む。ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、抗原結合断片である。

本明細書において使用された、「抗体変異体」という用語は、親抗体と比べた、１つ以上の置換、欠失又は挿入を有する抗体及びタンパク質部分又は非タンパク質部分へと連結された抗体などであるが、これらに限定されない、本明細書において記載された抗体の、任意の修飾形態を指す。

抗体に言及して、本明細書において使用された、「エピトープに結合する」又は「エピトープを認識する」という用語は、抗体が結合するエピトープを指す。用語は、抗体が、エピトープ内の、あらゆるアミノ酸に、直接接触することを要求しない。

２つ以上の抗体に言及して、本明細書において使用された、「同じエピトープに結合する」という用語は、このようなアミノ酸が、連続セグメントであれ、不連続セグメントであれ、抗体が、同じアミノ酸又は重複するアミノ酸に結合することを意味する。用語は、抗体が、正確に同じアミノ酸に結合又は接触することを要求しない。抗体が接触する、正確なアミノ酸は、異なりうる。一例において、第１の抗体は、第２の抗体が結合するアミノ酸の群により、完全に包含された、アミノ酸の群に結合しうる。別の例において、第１の抗体は、第２の抗体が結合するアミノ酸の群と重複する、アミノ酸の群に結合しうる。

本明細書において使用された、「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列のうちの、少なくとも一部（ＣＤＲ配列及びＦＲ配列又はＣＤＲ配列だけを含む）が、１つの種（例えば、ラット）に由来し、定常領域配列が、別の種（例えば、ヒト）に由来する抗体を指す。用語はまた、その可変領域配列又はＣＤＲ（複数可）が、１つの供給源（例えば、ＩｇＡ１抗体）に由来し、定常領域配列又はＦｃが、異なる供給源（例えば、ＩｇＧ抗体、ＩｇＡ２抗体、ＩｇＤ抗体、ＩｇＥ抗体又はＩｇＭ抗体など、異なる抗体）に由来する抗体も含む。キメラ抗体については、米国特許第４，８１６，５６７号明細書及びＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１～６８５５（１９８４）において記載されている。

本明細書において使用された、「検出用標識」という用語は、対象又は放射性同位体、蛍光化合物、化学発光化合物、発色団、酵素、酵素基質、酵素補因子、酵素阻害剤、発色団、色素、金属イオン、金属ゾル、リガンド、挿入色素などを含むが、これらに限定されないアッセイにおける検出が可能な分子を指す。

本明細書において使用された、「エピトープ」という用語は、抗体分子の可変領域内の、特異的抗原結合性部位（パラトープ）と相互作用する（これが結合する）抗原決定基を指す。単一の抗原（ポリペプチドなどであるが、これらに限定されない）は、１つを超えるエピトープを有しうる。したがって、異なる抗体は、抗原上の異なるエピトープに結合する場合があり、どのエピトープに結合するのかに応じて、異なる生物学的効果を及ぼしうる。「エピトープ」という用語はまた、Ｂ細胞及び／又はＴ細胞が応答する、抗原上の部位も指す。「エピトープ」という用語はまた、抗体が結合する、抗原の領域も指す。エピトープは、構造エピトープ（抗体のＣＤＲループが接触する、抗原決定基の部分）又は機能エピトープ（構造エピトープの中心に配置され、抗体－エピトープ間相互作用のアフィニティーに直接寄与する活動性残基を含む、構造エピトープのサブセット）として規定されうる。エピトープは、抗原の断片化又は変性の後において、免疫学的に結合可能となる場合もある（クリプトトープ）。エピトープは、直鎖状エピトープの場合もあり、コンフォメーションエピトープの場合もある（折りたたまれた３次元構造にまとめられた非直鎖状アミノ酸により構成される）。エピトープは、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリル基又はスルホニル基など、化学的に活性な表面分子の群分けである残基を含む場合があり、特異的三次元構造的特徴及び／又は特異的電荷特徴を有しうる。エピトープは、典型的に、少なくとも３つ～１５のアミノ酸を含む。

本明細書において使用された、「エピトープマッピング」という用語は、抗体－抗原間の認識のための、エピトープの同定工程を指す。

本明細書において開示された抗体に言及して、本明細書において使用された、「機能的同等物」という用語は、本明細書において開示された親抗体の、１つ以上の特徴（同じエピトープへの結合などであるが、これらに限定されない）を保持する、親抗体の抗体変異体を指す。機能的同等物は、親抗体の、１つ以上の特徴（結合アフィニティー、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣなどであるが、これらに限定されない）において、任意選択的に異なりうる。

本明細書において使用された、「ヒト抗体」という用語は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域のいずれもが、ヒト生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を指す。さらに、抗体が、定常領域を含有する場合、定常領域もまた、ヒト生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する。ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列の免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（インビトロにおいて、ランダム突然変異誘発又は部位特異的突然変異誘発により導入された突然変異又はインビボにおいて、体細胞突然変異により導入された突然変異など）を含みうる。本明細書において使用された、ヒト抗体という用語は、ＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列及び／又はヒト定常領域へとグラフトされた、マウスなど、別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来する抗体を含むことが意図されない。

本明細書において使用された、「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、ヒトから得られたモノクローナル抗体を指す。

本明細書において使用された、「免疫応答」という用語は、外来病原体に対する、脊椎動物内部の生体応答であって、脊椎動物を、少なくとも部分的に、外来病原体及び外来病原体により引き起こされた疾患に対して防御する応答を指す。免疫応答は、浸潤性の外来病原体、外来病原体により感染させられた細胞又は組織の選択的ターゲティング、これらへの結合、これらに対する損傷、これらの破壊及び／又はこれらの、脊椎動物の体内からの消失を結果としてもたらす、免疫系の細胞（例えば、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好酸球、マスト細胞、樹状細胞又は好中球）及びこれらの細胞のうちのいずれか又は肝臓により産生された可溶性高分子（抗体、サイトカイン及び補体を含む）の作用により媒介される。好ましい実施形態において、本明細書において使用された、「免疫応答」という用語は、自己抗原に対する応答を含まない。

本明細書において使用された、「単離された抗体」という用語は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指す。単離された抗体は、任意選択的に、他の細胞素材及び／又は試薬を、実質的にさらに含まない場合がある。

本明細書において使用された、「アイソタイプ」という用語は、重鎖定常領域遺伝子によりコードされる抗体クラス（ＩｇＧ１～ＩｇＧ４を含むＩｇＧ、ＩｇＭ並びにＩｇＡ１及びＩｇＡ２を含むＩｇＡ、ＩｇＤ並びにＩｇＥ）を指す。

本明細書において使用された、「Ｋ_{ａｓｓｏｃ}」又は「Ｋ_ａ」という用語は、特定の抗体－抗原間相互作用の会合速度を指す。

本明細書において使用された、「Ｋ_ｄｉｓ」又は「Ｋ_ｄ」という用語は、特定の抗体－抗原間相互作用の解離速度を指す。

本明細書において使用された、「Ｋ_Ｄ」という用語は、Ｋ_ｄの、Ｋ_ａに対する比から得られ、モル濃度（Ｍ）として表された解離定数を指す。

本明細書において使用された、「モノクローナル抗体」という用語は、抗体分子の各々が、所与のエピトープに対して、単一の結合特異性及び結合アフィニティーを提示するように、単一の分子組成を有する抗体分子を指す。

本明細書において使用された、「薬学的に許容される」という用語は、本開示の抗体又は組成物の他の成分と適合性であり、本開示の抗体又は組成物を施される対象に対して有害でない化合物を指す。一部の実施形態において、「薬学的に許容される」という用語は、動物における使用及び、より特定すると、ヒトにおける使用について、米国連邦政府若しくは州政府の規制機関により承認されている、又は米国薬局方若しくは他の一般に認知された薬局方において収載されていることを意味する。

本明細書において使用された、「薬学的に許容される担体又は賦形剤」という用語は、本開示の抗体又は組成物の他の有効成分の有効性に干渉せず、投与された濃度において、対象に対して毒性でない、担体媒体又は賦形剤を指す。用語は、溶媒、安定化剤、可溶化剤、張性増強剤、構造形成剤、懸濁剤、分散剤、キレート剤、乳化剤、消泡剤、軟膏基剤、湿潤剤、皮膚保護剤、ゲル形成剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、保存剤、浸透増強剤、複合体化剤、滑沢剤、鎮痛剤、粘性増強剤、生態接着性ポリマー又はこれらの組合せを含むが、これらに限定されない。薬学的活性物質を製剤化するための、このような薬剤の使用は、当技術分野において周知である（例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ」、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ、１８版、１９９０、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．：Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．を参照されたい）。

本明細書において使用された、「薬学的に許容される塩」という用語は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、ギ酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、グリコール酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マロン酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ナフタレン－２－スルホン酸及び他の酸を含む、無機酸又は有機酸に由来する塩を指す。薬学的に許容される塩形態はまた、塩を含む分子の比が、１：１ではない形態も含みうる。例えば、塩は、抗体分子１つ当たり、２つの塩酸分子など、抗体分子１つ当たり、１つを超える無機酸又は有機酸分子を含みうる。別の例として述べると、塩は、酒石酸分子１つ当たり、２つの抗体化合物分子など、抗体分子１つ当たり、１つ未満の無機酸又は有機酸分子を含みうる。塩はまた、溶媒和物又は水和物としても存在しうる。

「医薬組成物」とは、本開示の抗体のうちの１つ以上の、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤などであるが、これらに限定されない、他の成分との混合物を指す。医薬組成物の目的は、本開示の化合物の投与を容易とすることである。

本明細書において使用された、「組換え抗体」という用語は、トランスジェニック若しくはトランスクロモソーマルである動物又はこれらから調製されたハイブリドーマから単離された抗体、抗体を発現するように形質転換された宿主細胞（トランスフェクトーマ）から単離された抗体、組換え抗体ライブラリー又はコンビナトリアル抗体ライブラリーから単離された抗体及び免疫グロブリン遺伝子配列の、他のＤＮＡ配列へのスプライシングを伴う、任意の手段により調製又は創出された抗体などであるが、これらに限定されない、組換え手段により、調製された、発現された、創出された、又は単離された、全ての抗体を含む。このような組換え抗体は、ヒト組換え抗体でありうる。このような組換え抗体は、インビトロにおける突然変異誘発にかけられる場合もあり、インビボにおける体細胞突然変異誘発にかけられる場合もある。

本明細書において使用された、「対象」という用語は、動物を指す。好ましくは、動物は、哺乳動物である。対象はまた、例えば、霊長動物（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚類、鳥類なども指す。好ましい実施形態において、対象は、ヒトである。

本明細書において使用された、「治療有効量」という用語は、臨床結果を含む、有益な結果又は所望の結果を達成するのに十分な、本開示の抗体の量を指す。したがって、「治療有効量」は、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染若しくは１つ以上のその症状の重症度及び／若しくは持続期間を低減若しくは改善する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染と関連する、１つ以上の症状の再発、発症若しくは発生を防止する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶの複製若しくは繁殖を防止若しくは低減する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２粒子の産生及び／若しくは放出を防止若しくは低減する又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の処置において使用された、別の治療の予防効果若しくは治療効果（複数可）を増強する、若しくは他の形において改善するのに十分でありうる。ある特定の実施形態において、「治療有効量」は、望ましくない副作用を回避する、又は実質的に和らげる、本開示の抗体の量である。

ある特定の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の文脈における、「治療有効量」とは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の生活環の、以下のステップ：ウイルス粒子の、細胞へのドッキング、ウイルス遺伝情報の、細胞への導入、ウイルスタンパク質の発現、ウイルスＲＮＡの翻訳、ウイルスＲＮＡの転写、ウイルスＲＮＡの複製、新たなウイルスＲＮＡの合成、新たなウイルス粒子の産生及び細胞からのウイルス粒子の放出のうちの１つ以上を低減するのに十分な量である。前出のもののうちのいずれかの、このような低減は、少なくとも５％、好ましくは、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の低減でありうる。一部の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の文脈における、「治療有効量」は、ウイルスの複製、繁殖又は蔓延を、少なくとも５％、好ましくは、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％低減する。一部の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の文脈における、「治療有効量」は、感染対象の生存率を、少なくとも５％、好ましくは、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％上昇させる。前出の各々において、増大の低減が特定される場合、このような増大の低減は、本開示の抗体により処置されなかった対象及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を診断された対象に関して決定されうる。

本明細書において使用された、「～を処置すること」又は「処置」という用語は、臨床結果を含む、有益な結果又は所望の結果を得るための手法を意味する。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の文脈における、有益な結果又は所望の臨床結果は、１つ以上の症状又は状態の軽減又は改善、疾患の程度の減弱、疾患状態の安定化（すなわち、非増悪）、疾患の蔓延の防止、疾患進行の遅速化又は緩徐化、疾患状態の改善又は緩和及び、検出可能であれ、検出不能であれ（部分的であれ、全体的であれ）、寛解を含むが、これらに限定されない。「処置」又は「～を処置すること」とはまた、処置を施されなかった場合に予測された生存と比較した、生存の延長も意味しうる。

本明細書において使用された、「ある（ａ）」及び「ある（ａｎ）」及び「その」という用語、並びに本開示の文脈において（とりわけ、特許請求の範囲の文脈において）使用された同様の用語は、本明細書においてそうでないことが指し示されない、又は文脈により明確に逆のことが指示されない限り、単数及び複数の両方を対象とするように解釈されるものとする。本明細書における値の範囲の列挙は、範囲内に収まる各個別の値に、個々に言及することの縮約法として用いられることだけが意図される。本明細書においてそうでないことが指し示されない限り、各個別の値は、本明細書において個別に列挙された場合と同様に、本明細書へと組み込まれる。本明細書においてそうでないことが指し示されない、又は文脈により明確に逆のことが指示されない限り、本明細書において記載された全ての方法は、任意の適切な順序において実施されうる。本明細書において提示された、任意の例及び全ての例又は例示のための表現（例えば、「など」）の使用は、本開示をよりよく例示することだけが意図され、他の形において特許請求されている、本発明の範囲に、限定を課するものではない。本明細書におけるいかなる表現も、本発明の実施に不可欠な、任意の、特許請求されていない要素を指し示すとは解釈されないものとする。
ヒト中和抗体
本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する、以下のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２中和抗体：１２１２Ｃ２、１２１２Ｆ５、１２１３Ｈ７、１２１２Ｆ２、１２０６Ｄ１、１２１２Ｄ５、１２０７Ｂ４、１２１３Ｆ２、１２１２Ｄ４、１２０６Ａ５、１２１２Ｄ６、１２０６Ｄ１２、１２０７Ｆ１０、１２０６Ｇ１２、１２１２Ｃ８、１２１２Ｅ９、１２１４Ｅ９及び１２１５Ｄ１を提示する。ある特定の実施形態において、抗体である、１２１２Ｃ２、１２１２Ｆ５、１２１３Ｈ７、１２１２Ｆ２、１２０６Ｄ１、１２１２Ｄ５、１２０７Ｂ４、１２１３Ｆ２、１２１２Ｄ４、１２０６Ａ５、１２１２Ｄ６、１２０６Ｄ１２、１２０７Ｆ１０、１２０６Ｇ１２、１２１２Ｃ８、１２１２Ｅ９、１２１４Ｅ９及び１２１５Ｄ１の抗原結合断片が提供される。ある特定の実施形態において、抗体は、ヒトモノクローナル抗体であり、かつ／又は抗原結合断片は、ヒトモノクローナル抗体に由来する。表１は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のヌクレオチド（ＮＴ）配列、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のアミノ酸（ＡＡ）配列、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２及び重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列並びに軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２及び軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列についての配列番号を提示する。

本開示の抗体の５０％中和力価（ＮＴ_５０）は、０．０５０μｇ／ｍｌ～１．６１μｇ／ｍｌ未満の範囲である。好ましくは、本開示の抗体のＮＴ_５０値は、１０μｇ／ｍｌ以下、８μｇ／ｍｌ以下、６μｇ／ｍｌ以下、４μｇ／ｍｌ以下、３μｇ／ｍｌ以下、２μｇ／ｍｌ以下又は１μｇ／ｍｌ以下である。より好ましくは、本開示の抗体のＮＴ_５０値は、０．５μｇ／ｍｌ以下、０．２５μｇ／ｍｌ以下、０．１μｇ／ｍｌ以下、０．０７５μｇ／ｍｌ以下、０．０５μｇ／ｍｌ以下、０．０２５μｇ／ｍｌ以下又は０．０１μｇ／ｍｌ以下である。本開示の目的のために、ＮＴ_５０値は、本開示の実施例４において記載された通りに決定される。

第１の実施形態において、本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
１．（ｉ）それぞれ、配列番号３８～４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号４２～４４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｃ２）；
２．（ｉ）それぞれ、配列番号４６～４８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号５０～５２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１５Ｆ５）；
３．（ｉ）それぞれ、配列番号５４～５６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号５８～６０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｈ７）；
４．（ｉ）それぞれ、配列番号６２～６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号６６～６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｆ２）；
５．（ｉ）それぞれ、配列番号７０～７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号７４～７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１）；
６．（ｉ）それぞれ、配列番号７８～８０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号８２～８４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ５）；
７．（ｉ）それぞれ、配列番号８６～８８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号９０～９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｂ４）；
８．（ｉ）それぞれ、配列番号９４～９６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号９８～１００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｆ２）；
９．（ｉ）それぞれ、配列番号１０２～１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１０６～１０８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ４）；
１０．（ｉ）それぞれ、配列番号１１０～１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１１４～１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ａ５）；
１１．（ｉ）それぞれ、配列番号１１８～１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１２２～１２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ６）；
１２．（ｉ）それぞれ、配列番号１２６～１２８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１３０～１３２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１２）；
１３．（ｉ）それぞれ、配列番号１３４～１３６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１３８～１４０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｆ１０）；並びに
１４．（ｉ）それぞれ、配列番号１４２～１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１４６～１４８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｇ１２）；
又は薬学的に許容される塩、溶媒和物及び／若しくは水和物などであるが、これらに限定されない、前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態
を含む単離された抗体又はその抗原結合断片を提示する。

第２の実施形態において、本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
１．（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号４１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｃ２）；
２．（ｉ）配列番号４５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１５Ｆ５）；
３．（ｉ）配列番号５３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号５７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｈ７）；
４．（ｉ）配列番号６１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号６５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｆ２）；
５．（ｉ）配列番号６９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号７３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１）；
６．（ｉ）配列番号７７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ５）；
７．（ｉ）配列番号８５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｂ４）；
８．（ｉ）配列番号９３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｆ２）；
９．（ｉ）配列番号１０１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１０５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ４）；
１０．（ｉ）配列番号１０９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１１３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ａ５）；
１１．（ｉ）配列番号１１７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１２１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ６）；
１２．（ｉ）配列番号１２５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１２）；
１３．（ｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１３７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｆ１０）；
１４．（ｉ）配列番号１４１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１４５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｇ１２）；
１５．（ｉ）配列番号１４９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５０のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１５Ｄ１）；
１６．（ｉ）配列番号１５１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５２のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１４Ｅ９）；
１７．（ｉ）配列番号１５３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５４のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｅ９）；並びに
１８．（ｉ）配列番号１５５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５６のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｃ８）；
又は薬学的に許容される塩、溶媒和物及び／若しくは水和物などであるが、これらに限定されない、前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態
を含む単離された抗体又はその抗原結合断片を提示する。

第３の実施形態において、本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、（ｉ）それぞれ、配列番号１５８、３９及び１５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号４２、４３及び１６１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２の変異体）又は薬学的に許容される塩、溶媒和物及び／若しくは水和物などであるが、これらに限定されない、前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態を含む単離された抗体又はその抗原結合断片を提示する。

第３の実施形態についての一側面において、配列番号１５８の３位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＩｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＡｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｌｅｕ（Ｌ）又はＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ａｓｎ（Ｎ）又はＳｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）又はＰｈｅ（Ｆ）である。

第３の実施形態についての一側面において、配列番号１５８の３位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ａｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｌｅｕ（Ｌ）又はＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸（好ましくは、Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）又はＭｅｔ（Ｍ））であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ａｓｎ（Ｎ）又はＳｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）である。

第３の実施形態についての一側面において、配列番号１５８の３位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＩｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＡｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｌｅｕ（Ｌ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ａｓｎ（Ｎ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｐｈｅ（Ｆ）又はＶａｌ（Ｖ）である。

第３の実施形態についての一側面において、配列番号１５８の３位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ａｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｌｅｕ（Ｌ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸（好ましくは、Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）又はＭｅｔ（Ｍ））であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ａｓｎ（Ｎ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）である。

第３の実施形態についての一側面において、配列番号１５８の３位におけるアミノ酸は、Ｉｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ａｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｐｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ｓｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）である。

第３の実施形態についての一側面において、配列番号１５８の３位におけるアミノ酸は、Ｉｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ａｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｐｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸（好ましくは、Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、又はＭｅｔ（Ｍ））であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ｓｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）である。

第４の実施形態において、本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、（ｉ）配列番号１５７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１６０のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２の変異体）又は薬学的に許容される塩、溶媒和物及び／若しくは水和物などであるが、これらに限定されない、前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態を含む単離された抗体又はその抗原結合断片を提示する。

第４の実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、下記の表２Ａから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｂから選択される。

第４の実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｃから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｄから選択される。

第４の実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｅから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｆから選択される。

第４の実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｇから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｈから選択される。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、薬学的に許容される塩として提供される。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の、ＲＢＤ内のエピトープに結合する。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＲＢＭ内のエピトープに結合する。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ１領域内のエピトープに結合する。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ２領域内のエピトープに結合する。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、標的細胞への結合を低減する。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と標的細胞との細胞融合を低減する。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、感染性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、感染細胞からの放出を低減する。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、標的細胞の感染を低減する。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、抗体変異体である。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、親抗体と比べた、１つ以上の置換、欠失及び／又は挿入を含む、抗体変異体である。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、親抗体と比べた、１つ以上の置換を含む、抗体変異体である。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、対象のインビボにおける半減期が、親抗体と比べて長い、対象のインビボにおける免疫原性が、親抗体と比べて小さい、又は前出のものの組合せを有する抗体変異体である。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、タンパク質部分又は非タンパク質部分が、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、水溶性ポリマーが、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ポリエチレングリコールポリマーが、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ポリオキサゾリンポリマーが、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、変異体Ｆｃ定常領域を含み、この場合、変異体Ｆｃ定常領域は、対象のインビボにおける半減期が、親抗体と比べて長い、対象のインビボにおける免疫原性が、親抗体と比べて小さい、又は前出のものの組合せをもたらす。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ヒト抗体である。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、キメラ抗体である。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、クラススイッチ抗体である。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、治療剤へと連結されている。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、検出用標識へと連結されている。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、酵素へと連結されている。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、酵素阻害剤へと連結されている。

第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、抗原結合断片である。第１の実施形態～第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ジスルフィド連結型Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ｄＡｂ断片、単離ＣＤＲ、ナノボディー又は単一ドメイン抗体、単一の可変ドメインと、２つの定常ドメインとを含有する、Ｖ_Ｈ領域の部分、ダイアボディー、トリアボディー、テトラボディー、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＦＣ、ｓｃＦｖ－ＣＨ、ｓｃＦａｂ及びｓｃＦｖ－ジッパーからなる群から選択される抗原結合断片である。

第２の実施形態又は第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、アミノ酸配列は、参照配列に対する、少なくとも８５％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９０％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９５％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９６％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９７％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９８％の相同性又は参照配列に対する、少なくとも９９％の相同性を有する。

第２の実施形態又は第４の実施形態による抗体のうちのいずれかについての一側面において、抗体は、ＣＤＲにわたり、参照配列と１００％相同であり、アミノ酸配列は、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも８５％の相同性を有し、アミノ酸配列は、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも８５％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９０％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９５％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９６％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９７％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９８％の相同性又はＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９９％の相同性を有する。

抗体断片
ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、抗原結合断片である。抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｄ、ｓｄＦｖ、ｄＡｂ、ｓｃＦｖ断片（ｓｃＦｖ－ＦＣ、ｓｃＦｖ－ＣＨ、ｓｃＦａｂ及びｓｃＦｖ－ジッパーを含むが、これらに限定されない）、ダイアボディー、トリアボディー、テトラボディー、ナノボディー及び本明細書において記載された他の断片を含むが、これらに限定されない。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、インビボにおける半減期を延長した、Ｆａｂ断片及びＦ（ａｂ）_２断片に対する議論について、米国特許第５，８６９，０４６号明細書を参照されたい。

抗体断片は、無傷抗体のタンパク質分解性消化のほか、組換え宿主細胞による産生を含むが、これらに限定されない、本明細書において記載された多様な技法、又は当技術分野において公知の多様な技法により作製されうる。

キメラ抗体
ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、キメラ抗体である。一実施形態において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、若しくはサル又は他の非ヒト霊長動物に由来する可変領域）と、ヒト定常領域とを含む。別の実施形態において、キメラ抗体は、抗体のクラス又はサブクラスが、親抗体のクラス又はサブクラスから変化させられた、「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。ある特定の実施形態において、キメラ抗体は、ヒト化キメラ抗体である。

ヒト抗体
ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野において公知である、多様な技法を使用して、又は本明細書において記載された技法を使用して作製されうる。ヒト抗体については、一般に、ｖａｎＤｉｊｋ及びｖａｎｄｅＷｉｎｋｅｌ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、５：３６８～７４（２００１）並びにＬｏｎｂｅｒｇ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２０：４５０～４５９（２００８）において記載されている。ヒト抗体は、免疫源を、抗原投与に応答して、無傷ヒト抗体又はヒト可変領域を伴う無傷抗体を産生するように改変された、トランスジェニック動物へと投与することにより調製されうる。このような動物は、典型的に、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置きかえる、又は染色体外に存在する、又は動物の染色体に、ランダムに組み込まれた、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含有する。このようなトランスジェニック動物において、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般に、不活化されている。ヒト抗体を、トランスジェニック動物から得るための方法について、Ｌｏｎｂｅｒｇ、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７～１１２５（２００５）；米国特許第６，０７５，１８１号明細書及び同第６，１５０，５８４号明細書；米国特許第５，７７０，４２９号明細書；米国特許第７，０４１，８７０号明細書並びに米国特許出願公開第ＵＳ２００７／００６１９００号明細書を参照されたい。このような動物により作出された無傷抗体に由来するヒト可変領域は、異なるヒト定常領域との組合せなどであるが、これらに限定されない手段により、さらに修飾されうる。

ヒト抗体はまた、ハイブリドーマベースの方法によっても作製されうる。ヒトモノクローナル抗体を産生するための、ヒト骨髄腫細胞系及びマウス－ヒト異種骨髄腫細胞系は、当技術分野において公知である（Ｋｏｚｂｏｒ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒら、「ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」、５１～６３頁（ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、ＮｅｗＹｏｒｋ、１９８７）；並びにＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７：８６（１９９１））。当技術分野において、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して作出されたヒト抗体もまた公知である（Ｌｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０３：３５５７～３５６２（２００６））。さらなる方法は、米国特許第７，１８９，８２６号明細書；Ｎｉ、ＸｉａｎｄａｉＭｉａｎｙｉｘｕｅ、２６（４）：２６５～２６８（２００６）；Ｖｏｌｌｍｅｒｓ及びＢｒａｎｄｌｅｉｎ、ＨｉｓｔｏｌｏｇｙａｎｄＨｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ、２０（３）：９２７～９３７（２００５）；並びにＶｏｌｌｍｅｒｓ及びＢｒａｎｄｌｅｉｎ、ＭｅｔｈｏｄｓａｎｄＦｉｎｄｉｎｇｓｉｎＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２７（３）：１８５～９１（２００５）において記載された方法を含む。ヒト抗体はまた、ヒト由来ファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクローンの可変ドメイン配列を単離することによっても作出されうる。次いで、このような可変ドメイン配列は、所望のヒト定常ドメインと組み合わされうる。

抗体変異体
本開示はまた、開示された抗体の変異体も提示する。ある特定の実施形態において、本明細書において提示された抗体の、アミノ酸配列変異体が想定される。このような変異体は、抗体の結合アフィニティーを改善する、抗体の生物学的特性（半減期などであるが、これらに限定されない）を改善する、又は前出のものの組合せをもたらすのに使用されうる。抗体のアミノ酸変異体は、適切な修飾を、抗体をコードするヌクレオチド配列に導入することにより調製される場合もあり、このようなアミノ酸変化を直接組み込む、ペプチド合成により調製される場合もある。抗体変異体は、本開示の抗体、１つ以上のアミノ酸の置換、１つ以上のアミノ酸の欠失、１つ以上のアミノ酸の挿入及び前出のものの任意の組合せを含む融合タンパク質を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態において、抗体変異体は、同じエピトープに結合する能力を保持する。

ある特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異体が提供される。置換が導入される場合、置換は、任意の所望の位置において施されうる。置換突然変異誘発を目的とする部位は、Ｖ_Ｈ領域、Ｖ_Ｌ領域、重鎖ＣＤＲ、軽鎖ＣＤＲ及び／又はＦＲ領域を含む。このような置換は、保存的置換の場合もあり、非保存的置換の場合もある。保存的置換は、本明細書において規定されている。

ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、保存的アミノ酸置換を含む。このような保存的アミノ酸置換は、Ｖ_Ｈ領域、Ｖ_Ｌ領域、重鎖ＣＤＲ、軽鎖ＣＤＲ及び／又はＦＲ領域において施されると適切でありうる。ある特定の実施形態において、本開示は、配列番号３７～１５６のポリペプチドのうちの１つ以上の抗体変異体を提示する。ある特定の実施形態において、本開示は、配列番号３７～１５６のポリペプチドのうちの１つ以上の保存的置換を含む、１つ以上の置換を含む、抗体変異体を提示する。ある特定の実施形態において、本開示は、配列番号３７～１５６のポリペプチドのうちの１つ以上の、重鎖可変領域（ＣＤＲ１～ＣＤＲ３を含む）及び／又は軽鎖可変領域（ＣＤＲ１～ＣＤＲ３を含む）の保存的置換を含む、１つ以上の置換を含む、抗体変異体を提示する。

前出のもののうちのいずれかについての、一実施形態において、抗体変異体は、親抗体と、少なくとも６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一である、アミノ酸配列を有する。

本開示の目的のために、２つのアミノ酸配列の間の相同性パーセントは、２つの配列の間の同一性パーセントと同義である。２つの配列の間の同一性パーセントは、２つの配列の最適なアライメントのために導入される必要があるギャップの数及び各ギャップの長さを考慮に入れた、配列により共有された、同一な位置の数の関数（相同性％＝（同一な位置の数／位置の総数）×１００）である。２つのアミノ酸配列の間の同一性パーセントは、好ましくは、ギャップ長ペナルティーを１２とし、ギャップペナルティーを４として、ＰＡＭ１２０重み付け残基表を使用する、ＡＬＩＧＮプログラム（ｖｅｒｓｉｏｎ２．０）へと組み込まれた、Ｅ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．、４：１１～１７（１９８８））によるアルゴリズムを使用して決定される。

一実施形態において、抗体変異体は、保存的修飾を含む。本明細書において使用された、「保存的修飾」という用語は、保存的修飾を含有する抗体の結合特徴に著明な影響を及ぼさない、又はこれを著明に変更しないアミノ酸修飾を指す。このような保存的修飾は、アミノ酸の置換、付加及び欠失を含む。

一実施形態において、抗体変異体は、保存的アミノ酸置換を含有する。保存的アミノ酸置換とは、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基により置きかえられた、アミノ酸置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野において規定されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖（リシン、アルギニン及びヒスチジン）、酸性側鎖（アスパラギン酸及びグルタミン酸）、非帯電極性側鎖（グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン及びトリプトファン）、非極性側鎖（アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン及びメチオニン）、ベータ分枝状側鎖（トレオニン、バリン及びイソロイシン）及び芳香族側鎖（チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン及びヒスチジン）を伴うアミノ酸を含む。非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを、別のクラスのうちの１つのメンバーと交換することを伴う。

例えば、保存的アミノ酸置換は、その位置におけるアミノ酸残基の極性、立体バルク性、電荷、疎水性及び／又は親水性に、ほとんど又は全く影響を及ぼさないように、天然アミノ酸残基の、非天然残基による置換を伴いうる。保存的アミノ酸置換はまた、典型的に、生体系における合成ではなく、化学的ペプチド合成により組み込まれた、天然に存在しないアミノ酸残基も包含する。これらは、アミノ酸部分のペプチド模倣体、他の反転形態又は逆位形態を含む。当業者により、本明細書において記載されたポリペプチドは、化学合成されうるほか、組換え手段によっても作製されうることが理解される。

本明細書において記載されたアミノ酸置換を施す場合、アミノ酸のハイドロパシー指数が検討されうる。各アミノ酸は、その疎水性及び荷電特徴に基づき、ハイドロパシー指数を割り当てられている。ハイドロパシー指数値は、イソロイシン（＋４．５）；バリン（＋４．２）；ロイシン（＋３．８）；フェニルアラニン（＋２．８）；システイン／シスチン（＋２．５）；メチオニン（＋１．９）；アラニン（＋１．８）；グリシン（－０．４）；トレオニン（－０．７）；セリン（－０．８）；トリプトファン（－０．９）；チロシン（－１．３）；プロリン（－１．６）；ヒスチジン（－３．２）；グルタミン酸（－３．５）；グルタミン（－３．５）；アスパラギン酸（－３．５）；アスパラギン（－３．５）；リシン（－３．９）；及びアルギニン（－４．５）により提示される。

当技術分野において、相互作用性の生物学的機能を、タンパク質へと付与する場合における、アミノ酸のハイドロパシー指数の重要性が理解されている（Ｋｙｔｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１５７：１０５～１３１、１９８２）。ある特定のアミノ酸は、同様のハイドロパシー指数又はハイドロパシースコアを有する、他のアミノ酸により置換されうるが、なおも、同様の生物活性を保持することが公知である。一実施形態において、ハイドロパシー指数に基づき、変化を施す場合、それらのハイドロパシー指数が±１以内であるアミノ酸置換、代替的実施形態において、ハイドロパシー指数は、±０．５以内であり、別の代替的実施形態において、ハイドロパシー指数は、±０．２５以内である。

本明細書において記載されたアミノ酸置換を施す場合、親水性もまた検討されうる。ある特定の実施形態において、その隣接するアミノ酸の親水性により統御された、ポリペプチドの、最大局所平均親水性は、タンパク質の生物学的特性と相関する。アミノ酸残基へは、以下の親水性指数値：アルギニン（＋３．０）；リシン（＋３．０）；アスパラギン酸（＋３．０±１）；グルタミン酸（＋３．０±１）；セリン（＋０．３）；アスパラギン（＋０．２）；グルタミン（＋０．２）；グリシン（０）；トレオニン（－０．４）；プロリン（－０．５±１）；アラニン（－０．５）；ヒスチジン（－０．５）；システイン（－１．０）；メチオニン（－１．３）；バリン（－１．５）；ロイシン（－１．８）；イソロイシン（－１．８）；チロシン（－２．３）；フェニルアラニン（－２．５）；トリプトファン（－３．４）が割り当てられている。

一実施形態において、同様の親水性値に基づき、変化を施す場合、それらの親水性値が±１以内であるアミノ酸置換が含まれ、代替的実施形態において、親水性値は、±０．５以内であり、別の代替的実施形態において、親水性値は、±０．２５以内である。

当業者は、当技術分野において公知の技法を使用して、配列番号３７～１５６のうちのいずれかに明示されたポリペプチドの、それらの組合せを含む、適切な置換、挿入及び欠失を決定することが可能である。活性を破壊せずに変化させられうる、ポリペプチドの適切な領域を同定するために、当業者は、活性に重要でないと考えられる領域をターゲティングしうる。例えば、同じ種又は他の種に由来し、活性が同様である、相同なポリペプチドが公知で場合、当業者は、相同なポリペプチドを、本明細書において記載されたポリペプチドのアミノ酸配列と比較しうる。このような比較により、同様のポリペプチドの間において保存された、分子の残基及び部分を同定することができる。このような相同なポリペプチドと比べて保存されていない、本明細書において記載されたポリペプチドの領域内の変化は、本明細書において記載されたポリペプチドの生体活性及び／又は構造に有害な影響を及ぼす可能性が小さいことが理解される。当業者はまた、保存が相対的である領域内においてもなお、活性を保持しながら、化学的に類似するアミノ酸により、天然に存在する残基を置換しうることも承知している（例えば、保存的アミノ酸置換）。したがって、生体活性又は構造に重要でありうる領域であってもなお、生体活性を破壊したり、ポリペプチド構造に有害な影響を及ぼしたりせずに、このようなアミノ酸置換にかけられうる。

欠失、挿入及び置換は、所望のポリペプチド変異体を作出するように、当業者に公知の通りに選択されうる。例えば、ポリペプチドの非機能的領域内における、欠失、挿入及び置換は、活性を変更しないことが予測される。同様に、保存的アミノ酸置換及び／又は親水性指数値及び／又はハイドロパシー指数値が同様であるアミノ酸の置換は、保存的領域内において許容されることが予測され、ポリペプチド活性は、このような置換により保存されうる。

例示的な置換変異体は、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、「ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ」、１７８：１～３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、（２００１）において記載されているアフィニティー成熟法など、ファージディスプレイベースのアフィニティー成熟法を使用して作出されうると好都合である、アフィニティー成熟抗体である。アミノ酸配列の挿入は、１残基～１００残基以上を含有するポリペプチドの長さの範囲である、アミノ末端融合体及び／又はカルボキシル末端融合体のほか、単一又は複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例は、Ｎ末端メチオニル残基を伴う抗体を含む。抗体分子の、他の挿入変異体は、抗体のＮ末端又はＣ末端の、酵素又はポリペプチドとの融合体であって、抗体の血清半減期を延長する融合体を含む。

抗体変異体は、エピトープへの結合の保持、エピトープへの結合の改善、免疫原性の低下、抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）の改善又は前出のものの任意の組合せを含むが、これらに限定されない所望の活性についてスクリーニングされうる。

本開示の抗体は、さらなるタンパク質部分及びタンパク質ベースではない、さらなる部分を含有するように改変されうる。一実施形態において、非タンパク質ベースの部分は、ポリマー、好ましくは、水溶性ポリマーである。適切な水溶性ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリオキサゾリン（ＰＯＺ）、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はコポリマーとしての）及びデキストラン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリオキシエチル化ポリオール（グリセロールなど）、ポリビニルアルコール、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー、酸化プロピレンとエチレンオキシドとのコポリマー並びに前出のもののうちのいずれかの混合物を含むが、これらに限定されない。水溶性ポリマーが、コポリマーである場合、コポリマーは、ブロックコポリマー又はランダムコポリマーとして存在しうる。アミノ酸置換は、水溶性ポリマーの、抗体への接合のための部位を導入するのに使用されうる。

水溶性ポリマーは、任意の分子量の水溶性ポリマーであることが可能であり、デンドリマーの場合もあり、分枝状ポリマーの場合もあり、非分枝状ポリマーの場合もある。抗体へと接合されたポリマーの数は、変動しうる。一実施形態において、水溶性ポリマー平均分子量数は、２，５００～７５，０００Ｄａ、５，０００～５０，０００Ｄａ、７，５００～４０，０００Ｄａ又は１０，０００～３０，０００Ｄａである。一実施形態において、１つ～１０の水溶性ポリマー鎖が接合される。１つを超える水溶性ポリマーが接合される場合、水溶性ポリマーは、同じ場合もあり、異なる場合もあり、平均分子量数が同じ場合もあり、異なる場合もある。一実施形態において、水溶性ポリマーは、本開示の抗体の半減期を延長し、かつ／又は本開示の抗体の免疫原性を減少させる。水溶性ポリマーは、ポリマー上及び抗体上における、常套的な反応性基を使用して、本開示の抗体へと連結されうる。例えば、ＰＯＺポリマー及びＰＥＧポリマーなどであるが、これらに限定されない、水溶性ポリマーは、アシル化アルキル化反応を使用して、抗体へと連結されうる。水溶性ポリマーは、抗体へと、部位特異的に連結される場合もあり、ランダムに連結される場合もある（例えば、リシン残基のεアミノ基又はシステイン残基のチオール基は、水溶性ポリマー上の、適切な官能基とのコンジュゲーション反応において使用されうる）。ある特定の実施形態において、非天然アミノ酸は、抗体へと導入される場合があり、水溶性ポリマーを、抗体へと連結するのに使用されうる。例えば、セレノシステイン残基は、適切な官能基（例えば、マレイミド基又はヨードアセトイミド基）を含有する水溶性ポリマーとの反応のために、抗体へと導入されうる。ある特定の実施形態において、水溶性ポリマーは、本明細書において記載された、治療剤、検出用標識、酵素又は酵素阻害剤へと連結されうる。

当技術分野において、水溶性ポリマーを、タンパク質へと連結するための方法が公知であり、本開示の抗体へと、直接適用されうる（ＥＰ０１５４３１６）。

別の実施形態において、非タンパク質ベースの部分は、治療剤、例えば、本明細書において記載された、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の処置に有用な治療剤又は細胞傷害剤である。別の実施形態において、非タンパク質ベースの部分は、検出用標識である。別の実施形態において、非タンパク質ベースの部分は、酵素である。別の実施形態において、非タンパク質ベースの部分は、酵素阻害剤、例えば、ＴＭＰＲＳＳ２阻害剤などであるが、これらに限定されない、セリンプロテアーゼ阻害剤である。

グリコシル化変異体
ある特定の実施形態において、本開示の抗体は、抗体がグリコシル化された程度を、増大又は減少させるように変更される。抗体へのグリコシル化部位の付加又は抗体からのグリコシル化部位の欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が、創出又は除去されるように、アミノ酸配列を変更することにより達せられると、好都合でありうる。例えば、非グリコシル化抗体が作製されうる。グリコシル化は、抗体の、抗原に対するアフィニティーの増大を含むが、これらに限定されない、様々な目的のために変更されうる。一実施形態において、抗体の、抗原に対するアフィニティーを増大させうる、１つ以上のＦＲグリコシル化部位の消失を結果としてもたらす、１つ以上のアミノ酸置換が、施されうる。このような手法については、米国特許第５，７１４，３５０号明細書及び同第６，３５０，８６１号明細書において、さらに詳細に記載されている。定常領域内のグリコシル化部位もまた、消失させられうる。例えば、ＩｇＧ１において、Ｆｃ部分内のＮ２９７が、別の残基（例えば、アラニン）により置換され、これにより、Ｎ２９７におけるグリコシル化を低減する場合もあり、かつ／又は隣接するアミノ酸が、突然変異され、これにより、Ｎ２９７におけるグリコシル化を低減する場合もある。

加えて、又は代替的に、フコシル残基の量を低減した低フコシル化抗体又は二分枝型ＧｌｃＮａｃ構造を増大させた抗体など、グリコシル化の種類を変化させた抗体が作製されうる。このようなグリコシル化パターンの変更は、抗体のＡＤＣＣ能を増大させることが裏付けられている。このような炭水化物修飾は、例えば、グリコシル化機構を変更した宿主細胞内において、抗体を発現させることにより達せられうる（このような細胞は、ＥＰ１，１７６，１９５；ＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０３５８３５号；Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ら（２００２）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７７：２６７３３～２６７４０；ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／５４３４２号；Ｕｍａｎａら（１９９９）、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．、１７：１７６～１８０において記載されている）。

Ｆｃ領域変異体
本明細書において論じられた、Ｆｃ領域内の残基の番号付けは、ＫａｂａｔによるＥＵインデックスの番号付け（ＰＣＴ公開第ＷＯ２０００／４２０７２号）である。本明細書において記載された抗体の可変領域は、任意のアロタイプ又はイソアロタイプ（ＩｇＧ１について：Ｇ１ｍ、Ｇ１ｍ１（ａ）、Ｇ１ｍ２（ｘ）、Ｇ１ｍ３（ｆ）、Ｇ１ｍ１７（ｚ）；ＩｇＧ２について：Ｇ２ｍ、Ｇ２ｍ２３（ｎ）；ＩｇＧ３について：Ｇ３ｍ、Ｇ３ｍ２１（ｇ１）、Ｇ３ｍ２８（ｇ５）、Ｇ３ｍ１１（ｂ０）、Ｇ３ｍ５（ｂ１）、Ｇ３ｍ１３（ｂ３）、Ｇ３ｍ１４（ｂ４）、Ｇ３ｍ１０（ｂ５）、Ｇ３ｍ１５（ｓ）、Ｇ３ｍ１６（ｔ）、Ｇ３ｍ６（ｃ３）、Ｇ３ｍ２４（ｃ５）、Ｇ３ｍ２６（ｕ）、Ｇ３ｍ２７（ｖ）；ＩｇＡについて：Ａ２Ｍ、Ａ２ｍ１及びＡ２ｍ２；並びにＫについて：Ｋｍ、Ｋｍ１、Ｋｍ２、Ｋｍ３を含む）でありうる、Ｆｃ領域（ＩｇＧ１Ｆｃ、ＩｇＧ２Ｆｃ、ＩｇＧ３Ｆｃ又はＩｇＧ４Ｆｃなどであるが、これらに限定されない）へと連結されうる（Ｊｅｆｆｅｒｉｅｓら（２００９）、ｍＡｂ１（４）、３２３～３３８）。ある特定の実施形態において、本明細書において記載された抗体の可変領域は、１つ以上の活性化Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）に結合し、これにより、ＡＤＣＣを刺激するＦｃへと連結される。ある特定の実施形態において、本明細書において記載された抗体の可変領域は、広範にわたるＦｃ受容体にエンゲージするように最適化されたＦｃ領域へと連結される。ガンマ以外のアイソタイプに対するＦｃ受容体は、特定の白血球上に存在する。ＦｃγＲＩ及びＦｃαＲＩなど、複数のＦｃ受容体と相互作用しうるＦｃ領域を創出することにより、エフェクター細胞にエンゲージする新規の能力を拡張された抗体が創出されうる。好中球は、体内において最も豊富な白血球であり、ＦｃαＲＩを介して、ＩｇＡ抗体のＦｃにエンゲージする。

ある特定の実施形態において、本明細書において記載された、抗体の可変領域は、典型的に、血清半減期、補体への結合、Ｆｃ受容体への結合、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣなど、抗体の、１つ以上の機能的特性を変更するように、１つ以上の修飾を含むＦｃへと連結されうる。

Ｆｃ領域は、抗体の定常領域に由来するドメインを包含する。適切な免疫グロブリンは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２並びにＩｇＤ、ＩｇＥ及びＩｇＭなど、他のクラスを含む。抗体の定常領域は、抗体のＣ末端領域と相同な、天然に存在するポリペプチド又は合成により作製されたポリペプチドとして規定され、個別の、又は組合せにおける、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン又はＣＨ４ドメインを含みうる。一部の実施形態において、本開示の抗体は、野生型ＩｇＡ１のＦｃ領域以外のＦｃ領域を有する。本開示の抗体は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）又はＩｇＡ２、ＩｇＤ、ＩｇＥ及びＩｇＭなど、他のクラスのＦｃ領域に由来するＦｃ領域を有しうる。本開示の抗体は、野生型ＩｇＡ１の置換、欠失又は挿入を含有するＦｃ領域を有しうる。

抗体のＦｃは、ＦｃＲへの結合及び補体への結合を含む、多くの重要な機能の一因となる。各々が、アイソタイプにより指定された、特徴的なエフェクター機能を伴う、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＥ及びＩｇＭとして分類された、重鎖定常領域の、５つの主要なクラスが存在する。抗体の血清半減期は、この抗体が、ＦｃＲに結合する能力の影響を受ける。

抗体分子は、複数のクラスの細胞内受容体と相互作用する。ＩｇＧ分子は、抗体のＩｇＧクラスに特異的な、ＦｃγＲの３つのクラス、すなわち、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩＩｂと相互作用する。ＩｇＧの、ＦｃγＲ受容体への結合に重要な配列は、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインに配置されていることが報告されている。

ある特定の実施形態において、Ｆｃ領域は、（ｉ）ＡＤＣＣの増大若しくは低下；（ｉｉ）ＣＤＣの増大若しくは低下；（ｉｉｉ）Ｃ１ｑに対するアフィニティーの増大若しくは低下及び／又は（ｉｖ）ＦｃＲに対するアフィニティーの増大若しくは低下（親Ｆｃと比べた、前出の各々）を含むが、これらに限定されない、所望の構造特色及び／又は生体活性をもたらすように、親Ｆｃ配列と比べた、変異体Ｆｃ領域（アミノ酸の置換、欠失及び／又は挿入などにより修飾されたＦｃ配列）である。このようなＦｃ領域変異体は、一般に、Ｆｃ領域内の、少なくとも１つのアミノ酸置換、欠失及び／又は挿入を含む。ある特定の実施形態において、Ｆｃ領域は、１つ～６つのアミノ酸置換、欠失及び／又は挿入（好ましくは、置換）を含有する。

変異体Ｆｃ領域はまた、ジスルフィド結合の形成に関与するアミノ酸が、除去された、又は別のアミノ酸により置きかえられた、配列の修飾も含みうる。他の実施形態において、Ｆｃ領域は、それを、選択された宿主細胞と適合性とするように改変されうる。例えば、プロリンイミノペプチダーゼなど、Ｅ．コリー（Ｅ．ｃｏｌｉ）における消化酵素により認知されうる、典型的な天然Ｆｃ領域のＮ末端近傍のＰＡ配列を除去することができる。他の実施形態において、Ｆｃドメイン内の、１つ以上のグリコシル化部位が除去される。典型的なグリコシル化残基（例えば、アスパラギン）は、細胞溶解応答を付与しうる。このような残基は、非グリコシル化残基（例えば、アラニン）により、欠失させられうる、又は置換されうる。他の実施形態において、Ｃ１ｑ結合性部位など、補体との相互作用に関与する部位は、Ｆｃ領域から除去されうる。例えば、ヒトＩｇＧ１のＥＫＫ配列を欠失させる、又は置換することができる。ある特定の実施形態において、Ｆｃ受容体への結合に影響を及ぼす部位、好ましくは、サルベージ受容体結合部位以外の部位が除去されうる。他の実施形態において、Ｆｃ領域は、当技術分野において公知のＡＤＣＣ部位を除去するように改変されうる。変異体Ｆｃドメインの具体例は、例えば、ＷＯ１９９７／３４６３１及びＷＯ１９９６／３２４７８において開示されている。

一実施形態において、Ｆｃのヒンジ領域は、ヒンジ領域内のシステイン残基の数を増大又は低下させる（米国特許第５，６７７，４２５号明細書）、例えば、軽鎖及び重鎖のアセンブリーを容易とし、かつ／又は抗体の安定性を増大若しくは減少させるように修飾される。一実施形態において、抗体のＦｃヒンジ領域は、抗体の生体内半減期を短縮するように突然変異させられる。より具体的に述べると、抗体の、ブドウ球菌プロテインＡ（ＳｐＡ）への結合が、天然Ｆｃ－ヒンジドメインのＳｐＡへの結合と比べて損なわれるように、Ｆｃ－ヒンジ断片の、ＣＨ２－ＣＨ３ドメイン間界面領域へと、１つ以上のアミノ酸突然変異が導入される（米国特許第６，１６５，７４５号明細書）。

さらに他の実施形態において、Ｆｃ領域は、抗体のエフェクター機能を変更するように、少なくとも１つのアミノ酸残基を、異なるアミノ酸残基により置き換えることにより変更される。例えば、抗体が、エフェクターリガンドに対するアフィニティーは変更されているが、親抗体の抗原結合能を保持するように、ＩｇＧ抗体内において、アミノ酸残基である、２３４、２３５、２３６、２３７、２９７、３１８、３２０及び３２２から選択される１つ以上のアミノ酸が、異なるアミノ酸残基により置きかえられうる。アフィニティーが変更されたエフェクターリガンドは、例えば、ＦｃＲ又は補体のＣ１成分でありうる（米国特許第５，６２４，８２１号明細書及び同第５，６４８，２６０号明細書）。別の例において、抗体の、Ｃ１ｑへの結合が変更され、かつ／又はＣＤＣが低減され、若しくは失われるように、ＩｇＧ抗体内において、アミノ酸残基である、３２９、３３１及び３２２から選択される１つ以上のアミノ酸が、異なるアミノ酸残基により置きかえられうる（米国特許第６，１９４号明細書）。別の例において、ＩｇＧ抗体内において、アミノ酸位置である、２３１及び２３９内の、１つ以上のアミノ酸残基が変更されて、これにより、補体に結合する抗体能力が変更される（ＰＣＴ公開第ＷＯ１９９４／２９３５１号）。Ｆｃ領域のアミノ酸の番号付けに対する、全ての言及は、ＫａｂａｔによるＥＵインデックス（Ｋａｂａｔら（１９８３）、「ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ」、ＵＳＤｅｐｔ．ＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ）に従いなされる。

さらに別の例において、Ｆｃ領域は、以下の位置：２３４、２３５、２３６、２３８、２３９、２４０、２４１、２４３、２４４、２４５、２４７、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６２、２６３、２６４、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、２９９、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１３、３１５、３２０、３２２、３２４、３２５、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８又は４３９において、１つ以上のアミノ酸を修飾することにより、ＡＤＣＣを増大させ、かつ／又はＦｃγＲに対するアフィニティーを増大させるように修飾されうる。例示的置換は、２３６Ａ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、２６８Ｄ、２６７Ｅ、２６８Ｅ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、３３２Ｄ及び３３２Ｅを含む。例示的変異体は、２３９Ｄ／３３２Ｅ、２３６Ａ／３３２Ｅ、２３６Ａ／２３９Ｄ／３３２Ｅ、２６８Ｆ／３２４Ｔ、２６７Ｅ／２６８Ｆ、２６７Ｅ／３２４Ｔ及び２６７Ｅ／２６８Ｆ７３２４Ｔを含む。ＦｃγＲと補体との相互作用を増強するための、他の修飾は、置換である、２９８Ａ、３３３Ａ、３３４Ａ、３２６Ａ、２４７１、３３９Ｄ、３３９Ｑ、２８０Ｈ、２９０Ｓ、２９８Ｄ、２９８Ｖ、２４３Ｌ、２９２Ｐ、３００Ｌ、３９６Ｌ、３０５１及び３９６Ｌを含むが、これらに限定されない。これらの修飾及び他の修飾については、Ｓｔｒｏｈｌ、２００９、ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２０：６８５～６９１において記載されている。

ＦｃγＲへの結合を増大させるＦｃ修飾は、Ｆｃ領域のアミノ酸位置である、２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７９、２８０、２８３、２８５、２９８、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３１２、３１５、３２４、３２７、３２９、３３０、３３５、３３７、３３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７９、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８又は４３９のうちのいずれか１つ以上におけるアミノ酸修飾を含む。

施されうる、他のＦｃ修飾は、ＦｃγＲ及び／又は補体タンパク質への結合を低減又は除去し、これにより、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ及びＣＤＣなどのＦｃ媒介エフェクター機能を低減又は除去するためのＦｃ修飾である。例示的修飾は、２３４、２３５、２３６、２３７、２６７、２６９、３２５及び３２８位における、置換、挿入及び欠失を含むが、これらに限定されず、この場合、番号付けは、ＫａｂａｔによるＥＵインデックスに従う。例示的置換は、２３４Ｇ、２３５Ｇ、２３６Ｒ、２３７Ｋ、２６７Ｒ、２６９Ｒ、３２５Ｌ及び３２８Ｒを含むが、これらに限定されず、この場合、番号付けは、ＫａｂａｔによるＥＵインデックスに従う。Ｆｃ変異体は、２３６Ｒ／３２８Ｒを含みうる。ＦｃγＲと補体との相互作用を低減するための、他の修飾は、置換である、２９７Ａ、２３４Ａ、２３５Ａ、２３７Ａ、３１８Ａ、２２８Ｐ、２３６Ｅ、２６８Ｑ、３０９Ｌ、３３０Ｓ、３３１Ｓ、２２０Ｓ、２２６Ｓ、２２９Ｓ、２３８Ｓ、２３３Ｐ及び２３４Ｖのほか、突然変異的手段若しくは酵素的手段による、又はタンパク質をグリコシル化しない細菌などの生物における産生による、２９７位におけるグリコシル化の除去を含む。これらの修飾及び他の修飾については、Ｓｔｒｏｈｌ、２００９、ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２０：６８５～６９１において総説されている。

任意選択的に、Ｆｃ領域は、当業者に公知である、さらなる位置及び／又は代替的位置における、天然に存在しないアミノ酸残基を含みうる（米国特許第５，６２４，８２１号明細書；同第６，２７７，３７５号明細書；同第６，７３７，０５６号明細書；同第６，１９４，５５１号明細書；同第７，３１７，０９１号明細書；同第８，１０１，７２０号明細書；ＰＣＴ公開第ＷＯ２０００／４２０７２号；同第ＷＯ２００１／５８９５７号；同第ＷＯ２００２／０６９１９号；同第ＷＯ２００４／０１６７５０号；同第ＷＯ２００４／０２９２０７号；同第ＷＯ２００４／０３５７５２号；同第ＷＯ２００４／０７４４５５号；同第ＷＯ２００４／０９９２４９号；同第ＷＯ２００４／０６３３５１号；同第ＷＯ２００５／０７０９６３号；同第ＷＯ２００５／０４０２１７号；同第ＷＯ２００５／０９２９２５号及び同第ＷＯ２００６／０２０１１４号）。

阻害性受容体である、ＦｃγＲＩＩｂに対するアフィニティーを増強するＦｃ変異体もまた、使用されうる。このような変異体は、例えば、Ｂ細胞及び単球を含む、ＦｃγＲＩＩｂ細胞と関連する免疫調節活性を伴う、Ｆｃ融合タンパク質をもたらしうる。一実施形態において、Ｆｃ変異体は、ＦｃγＲＩＩｂに対するアフィニティーの、１つ以上の活性化受容体と比べた、選択的増強をもたらす。ＦｃγＲＩＩｂへの結合を変更するための修飾は、ＫａｂａｔによるＥＵインデックスに従い、２３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２６６、２６７、２６８、３２５、３２６、３２７、３２８及び３３２、からなる群から選択される位置における、１つ以上の修飾を含む。ＦｃγＲＩＩｂに対するアフィニティーを増強するための例示的置換は、２３４Ｄ、２３４Ｅ、２３４Ｆ、２３４Ｗ、２３５Ｄ、２３５Ｆ、２３５Ｒ、２３５Ｙ、２３６Ｄ、２３６Ｎ、２３７Ｄ、２３７Ｎ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、２６６Ｍ、２６７Ｄ、２６７Ｅ、２６８Ｄ、２６８Ｅ、３２７Ｄ、３２７Ｅ、３２８Ｆ、３２８Ｗ、３２８Ｙ及び３３２Ｅを含むが、これらに限定されない。例示的置換は、２３５Ｙ、２３６Ｄ、２３９Ｄ、２６６Ｍ、２６７Ｅ、２６８Ｄ、２６８Ｅ、３２８Ｆ、３２８Ｗ及び３２８Ｙを含む。ＦｃγＲＩＩｂへの結合を増強するための、他のＦｃ変異体は、２３５Ｙ／２６７Ｅ、２３６Ｄ／２６７Ｅ、２３９Ｄ／２６８Ｄ、２３９Ｄ／２６７Ｅ、２６７Ｅ／２６８Ｄ、２６７Ｅ／２６８Ｅ及び２６７Ｅ／３２８Ｆを含む。

Ｆｃ領域の、そのリガンドに対するアフィニティー及び結合特性は、平衡法（酵素免疫測定アッセイ、ラジオイムノアッセイ又は反応速度法及び間接結合アッセイ、競合阻害アッセイ、蛍光共鳴エネルギー移動、ゲル電気泳動及びクロマトグラフィーなど、他の方法）を含むが、これらに限定されない、当技術分野において公知の、様々なインビトロアッセイ法（生化学ベースのアッセイ又は免疫学ベースのアッセイ）により決定されうる。これらの方法及び他の方法は、検討される成分のうちの１つ以上における標識を利用する場合もあり、かつ／又は発色標識、蛍光標識、発光標識又は同位体標識を含むが、これらに限定されない、様々な検出法を利用する場合もある。結合アフィニティー及び反応速度についての詳細な記載は、抗体－免疫源間相互作用に焦点を当てる、Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．編、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、４版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（１９９９）において見出されうる。

ある特定の実施形態において、抗体は、その生体内半減期を延長するように改変される。多様な手法が可能である。例えば、これは、Ｆｃ領域の、ＦｃＲｎに対する結合アフィニティーを増大させることによりなされうる。例えば、米国特許第６，２７７，３７５号明細書において記載される通り、以下の残基：２５２、２５４、２５６、４３３、４３５及び４３６のうちの１つ以上が突然変異させられうる。例示的な特異的置換は、以下：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ及び／又はＴ２５６Ｆのうちの１つ以上を含む。代替的に、生体内半減期を延長するために、抗体は、米国特許第５，８６９，０４６号明細書及び同第６，１２１，０２２号明細書において記載される通り、ＣＨ１領域内又はＣＬ領域内において、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから採取された、サルベージ受容体結合エピトープを含有するように変更されうる。ＦｃＲｎへの結合を強化し、かつ／又は薬物動態特性を改善する、他の例示的変異体は、２５９、３０８、４２８及び４３４位における置換であって、例えば、２５９Ｉ、３０８Ｆ、４２８Ｌ、４２８Ｍ、４３４Ｓ、４３４Ｈ、４３４Ｆ、４３４Ｙ及び４３４Ｍを含む置換を含む。Ｆｃの、ＦｃＲｎへの結合を増大させる、他の変異体は、２５０Ｅ、２５０Ｑ、４２８Ｌ、４２８Ｆ、２５０Ｑ／４２８Ｌ（Ｈｉｎｔｏｎら、２００４、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７９（８）：６２１３～６２１６；Ｈｉｎｔｏｎら、２００６ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１７６：３４６～３５６）、２５６Ａ、２７２Ａ、２８６Ａ、３０５Ａ、３０７Ａ、３０７Ｑ、３１１Ａ、３１２Ａ、３７６Ａ、３７８Ｑ、３８０Ａ、３８２Ａ、４３４Ａ（Ｓｈｉｅｌｄｓら、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００１、２７６（９）：６５９１～６６０４）、２５２Ｆ、２５２Ｔ、２５２Ｙ、２５２Ｗ、２５４Ｔ、２５６Ｓ、２５６Ｒ、２５６Ｑ、２５６Ｅ、２５６Ｄ、２５６Ｔ、３０９Ｐ、３１１Ｓ、４３３Ｒ、４３３Ｓ、４３３１、４３３Ｐ、４３３Ｑ、４３４Ｈ、４３４Ｆ、４３４Ｙ、２５２Ｙ／２５４Ｔ／２５６Ｅ、４３３Ｋ／４３４Ｆ／４３６Ｈ、３０８Ｔ／３０９Ｐ／３１１Ｓ（Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、２００２、１６９：５１７１～５１８０；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら、２００６、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８１：２３５１４～２３５２４）を含む。ＦｃＲｎへの結合をモジュレートするための、他の修飾は、Ｙｅｕｎｇら、２０１０、ＪＩｍｍｕｎｏｌ、１８２：７６６３～７６７１において記載されている。

ある特定の実施形態において、特定の生物学的特徴を伴う、ハイブリッド体のＩｇＧアイソタイプが使用されうる。例えば、ＩｇＧ１／ＩｇＧ３ハイブリッド変異体は、ＩｇＧ１の、ＣＨ２領域内及び／又はＣＨ３領域内の位置を、２つのアイソタイプが異なる位置における、ＩｇＧ３に由来するアミノ酸により置換することにより構築されうる。したがって、１つ以上の置換、例えば、２７４Ｑ、２７６Ｋ、３００Ｆ、３３９Ｔ、３５６Ｅ、３５８Ｍ、３８４Ｓ、３９２Ｎ、３９７Ｍ、４２２１、４３５Ｒ及び４３６Ｆを含む、ハイブリッド変異体ＩｇＧ抗体が構築されうる。他の実施形態において、本明細書において記載された、ＩｇＧ１／ＩｇＧ２ハイブリッド変異体は、ＩｇＧ２の、ＣＨ２領域内及び／又はＣＨ３領域内の位置を、２つのアイソタイプが異なる位置における、ＩｇＧ１に由来するアミノ酸により置換することにより構築されうる。したがって、１つ以上の置換、例えば、以下のアミノ酸置換：２３３Ｅ、２３４Ｌ、２３５Ｌ、２３６Ｇ（２３６位におけるグリシンの挿入を指す）及び３２１Ｈのうちの１つ以上を含む、ハイブリッド変異体ＩｇＧ抗体が構築されうる。

さらに、ヒトＩｇＧ１上の、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ及びＦｃＲｎに対する結合性部位もマップされ、結合が改良された変異体についても説明されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ら（２００１）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７６巻、６５９１～６６０４参照）。２５６、２９０、２９８、３３３、３３４及び３３９位における特異的な突然変異は、ＦｃγＲＩＩＩへの結合を改善することが示された。加えて、ＦｃγＲＩＩＩａへの結合及びＡＤＣＣ活性の増強を呈することが示されている（Ｓｈｉｅｌｄｓら、２００１）、以下の組合せ突然変異：Ｔ２５６Ａ／Ｓ２９８Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｋ２２４Ａ及びＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａも、ＦｃγＲＩＩＩへの結合を改善することが示された。ＦｃγＲＩＩＩａへの結合が、強力に増強された、他のＩｇＧ１変異体であって、カニクイザルにおいて、ＦｃγＲＩＩＩａに対するアフィニティーの、最大の増大、ＦｃγＲＩＩｂへの結合の減少及び強力な細胞傷害活性を示した（Ｌａｚａｒら、２００６）、突然変異である、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ及びＳ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌを伴う変異体を含む変異体も同定されている。アレムツズマブ（ＣＤ５２特異的抗体）、トラスツズマブ（ＨＥＲ２／ｎｅｕ特異的抗体）、リツキシマブ（ＣＤ２０特異的抗体）及びセツキシマブ（ＥＧＦＲ特異的抗体）など、抗体への三重突然変異の導入は、インビトロにおけるＡＤＣＣ活性の、大幅な増強へと変換され、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ変異体は、サルにおいて、Ｂ細胞を枯渇させる能力の増強を示した（Ｌａｚａｒら、２００６）。加えて、Ｂ細胞悪性腫瘍及び乳がんのモデルにおいて、ヒトＦｃγＲＩＩＩａを発現するトランスジェニックマウスにおけるＦｃγＲＩＩＩａへの結合の増強と、共時的なＡＤＣＣ活性の増強とを呈した突然変異である、Ｌ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ及びＰ３９６Ｌを含有するＩｇＧ１突然変異体も、同定されている（Ｓｔａｖｅｎｈａｇｅｎら、２００７；Ｎｏｒｄｓｔｒｏｍら、２０１１）。使用されうる、他のＦｃ突然変異体は、：Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｌ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌ及びＭ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓを含むが、これらに限定されない。

ある特定の実施形態において、ＦｃγＲへの結合を低減したＦｃが選び出される。例示的Ｆｃ、例えば、ＦｃγＲへの結合が低減されたＩｇＧ１Ｆｃは、以下の３つのアミノ酸置換：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ及びＧ２３７Ａを含む。

ある特定の実施形態において、補体への結合を低減したＦｃが選び出される。例示的Ｆｃ、例えば、補体への結合が低減されたＩｇＧ１Ｆｃは、以下の２つアミノ酸置換：Ａ３３０Ｓ及びＰ３３１Ｓを有する。

ある特定の実施形態において、エフェクター機能を本質的に有さないＦｃ、すなわち、ＦｃγＲへの結合を低減し、かつ、補体への結合を低減したＦｃが選び出される。例示的Ｆｃ、エフェクターレスであるＩｇＧ１Ｆｃは、以下の５つの突然変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｇ２３７Ａ、Ａ３３０Ｓ及びＰ３３１Ｓを含む。

ＩｇＧ４の定常ドメインを使用する場合、通例、ＩｇＧ１内のヒンジ配列を模倣する置換である、Ｓ２２８Ｐを含み、これにより、ＩｇＧ４分子を安定化させることが好ましい。

核酸、ベクター、及び宿主細胞
本開示はまた、本開示の抗体をコードする核酸配列も提示する。核酸配列は抗原結合断片をコードしうる。一部の実施形態において、核酸は、抗体が作製される方法に基づいて最適化されたコドンである。

一実施形態において、核酸配列は、配列番号１～３６のうちの１つ以上を含む。この実施形態についての一側面において、核酸配列は、配列番号１～３６のうちの１つ以上との、少なくとも７５％の相同性、少なくとも８０％の相同性、少なくとも８５％の相同性、少なくとも９０％の相同性、少なくとも９５％の相同性又は９５％を超える相同性を有する。

本開示はまた、本開示の抗体をコードする核酸配列を含むベクターも提示する。ある特定の実施形態において、ベクターは、重鎖可変領域をコードする核酸配列及び軽鎖可変領域をコードする核酸配列を含む。本開示の任意の核酸配列（配列番号１～３６）は、本明細書において記載されたベクターと組み合わされうる。一部の実施形態において、重鎖可変をコードする核酸配列は、軽鎖可変をコードする核酸配列と、同じベクター上にある。一部の実施形態において、重鎖可変領域をコードする核酸配列は、軽鎖可変領域をコードする核酸配列と、異なるベクター上にある。一部の実施形態において、ベクターは、プラスミドである。一部の実施形態において、ベクターは、λファージなどであるが、これらに限定されない、ファージベクターである。一部の実施形態において、ベクターは、非複製型アデノウイルスベクター、レンチウイルスベクター、ｐＳＶ、ｐＣＭＶ及びレトロウイルスベクターなどであるが、これらに限定されない、ウイルスベクターである。一部の実施形態において、ベクターは、コスミドである。一部の実施形態において、ベクターは、組換え染色体である。一部の実施形態において、前出のベクターの組合せが利用される。異なる核酸配列の発現は、一般に、同時に生じる場合もあり、時間的に隔てられる場合もある。１つ以上の核酸配列の発現は、誘導的でありうる。ベクターは、無傷抗体又は抗原結合断片、特に、本明細書において開示された、抗原結合断片をコードする核酸を含みうる。一部の実施形態において、ベクターは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）の定常領域などであるが、これらに限定されない、免疫グロブリンの定常領域をコードする核酸配列を含む。例示的実施形態において、免疫グロブリンの定常領域は、ＩｇＧ１の定常領域を含む。

一実施形態において、本開示は、１２１２Ｃ２、１２１２Ｆ５、１２１３Ｈ７、１２１２Ｆ２、１２０６Ｄ１、１２１２Ｄ５、１２０７Ｂ４、１２１３Ｆ２、１２１２Ｄ４、１２０６Ａ５、１２１２Ｄ６、１２０６Ｄ１２、１２０７Ｆ１０、１２０６Ｇ１２、１２１２Ｃ８、１２１２Ｅ９、１２１４Ｅ９及び１２１５Ｄ１からなる群から選択される抗体の、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含むベクターを提示する。ベクターは、哺乳動物細胞に、ベクターがトランスフェクトされ、安定的トランスフェクションの場合、ＤＮＡが、相同組換えにより、ゲノムへと組み込まれうるように、又は、代替的に、細胞に、一過性にトランスフェクトされうるように、哺乳動物発現ベクターでありうる。複製基点、マルチクローニング部位及び選択用マーカーが、大半の操作ベクターに一般的である。哺乳動物発現ベクターに一般的なプロモーターは、ＣＭＶ及びＳＶ４０プロモーター並びにＥＦ－１プロモーターなどであるが、これらに限定されない、非ウイルス性プロモーターを含む。ある特定の実施形態において、本開示は、本開示の抗体（例えば、配列番号３８～４０、４２～４４、４６～４８、５０～５２、５４～５６、５８～６０、６２～６４、６６～６８、７０～７２、７４～７６、７８～８０、８２～８４、８６～８８、９０～９２、９４～９６、９８～１００、１０２～１０４、１０６～１０８、１１０～１１２、１１４～１１６、１１８～１２０、１２２～１２４、１２６～１２８、１３０～１３２、１３４～１３５、１３８～１４０、１４２～１４４及び１４６～１４８のアミノ酸配列をコードする核酸又は配列番号３８～４０、４２～４４、４６～４８、５０～５２、５４～５６、５８～６０、６２～６４、６６～６８、７０～７２、７４～７６、７８～８０、８２～８４、８６～８８、９０～９２、９４～９６、９８～１００、１０２～１０４、１０６～１０８、１１０～１１２、１１４～１１６、１１８～１２０、１２２～１２４、１２６～１２８、１３０～１３２、１３４～１３５、１３８～１４０、１４２～１４４及び１４６～１４８との、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％若しくは９５％を超える相同性を有するアミノ酸）のうちの１つ以上の、１つ以上の重鎖及び／又は軽鎖の、１つ以上のＣＤＲをコードする、１つ以上の核酸配列を含むベクターを提示する。ある特定の実施形態において、本開示は、本開示の抗体（例えば、配列番号３７、４２、４５、４９、５３、５７、６１、６５、６９、７３、７７、８１、８５、８９、９３、９７、１０１、１０５、１０９、１１３、１１７、１２１、１２５、１２９、１３３、１３７、１４１、１４５及び１４９～１５６のアミノ酸配列をコードする核酸又は配列番号３７、４２、４５、４９、５３、５７、６１、６５、６９、７３、７７、８１、８５、８９、９３、９７、１０１、１０５、１０９、１１３、１１７、１２１、１２５、１２９、１３３、１３７、１４１、１４５及び１４９～１５６との、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％若しくは９５％を超える相同性を有するアミノ酸）のうちの１つ以上の、１つ以上の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードする、１つ以上の核酸配列を含むベクターを提示する。

核酸配列は、保存的置換を含有する抗体を含む、本明細書において記載された抗体変異体をコードしうる。本開示の抗体の可変領域（複数可）の一方又は両方をコードするベクターは、このような抗体を作出するのに要求された配列番号の一方若しくは両方又はこのような配列番号との、最小限の相同性（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は９５％を超える相同性）を共有するヌクレオチド配列を含有しうる。例えば、抗体である１２１２Ｃ２の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードするベクターは、配列番号１及び２又はこのような配列番号１及び２との、最小限の相同性（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は９５％を超える相同性）を共有するヌクレオチド配列を含みうる。

本開示はまた、本明細書において記載されたベクターにより形質転換された細胞も提示する。当業者は、異なる細胞型は、異なる抗体産物をもたらす場合があり、例えば、グリコシル化パターン、とりわけ、Ｎ結合型グリコシル化パターンの、顕著に異なる変動を示すことを介して、おそらく、抗体産物の治療有効性に影響を及ぼしうることを理解する。このような議論は、ＬｉｕＬ、ＪＰｈａｒｍＳｃｉ．、２０１５年６月、１０４（６）：１８６６～８４；Ｒｏｓｅｎｌｏｃｈｅｒら、ＪＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓ．、２０１６年２月１６日、１３４：８５～９２；Ｍｉｍｕｒａら、ＪＩｍｍｕｎｏｌＭｅｔｈｏｄｓ．、２０１６年１月；４２８：３０～６及びＣｒｏｓｅｔら、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１６１（３）、２０１２年１０月３１日において見出されうる。

一部の実施形態において、細胞は、細菌細胞、酵母細胞、植物細胞又は哺乳動物細胞である。一部の実施形態において、哺乳動物細胞は、ＤＵＸＢ１１系統、ＤＧ４４系統及びＣＨＯＫ１系統を含む、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳ０マウス骨髄腫細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞及びＨＥＫ２９３系統を含む、ヒト胎児腎（ＨＥＫ）細胞のうちの１つである。他のそれほど一般的でない宿主細胞は、植物細胞、例えば、アグロバクテリウム・ツメファキエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）の、腫瘍誘導（Ｔｉ）プラスミドに基づく、植物細胞を含む。例えば、転写／翻訳に必要な細胞成分を含有する、Ｅ．コリー細胞溶解物に基づく、無細胞発現系もまた存在する。当技術分野において、真核生物無細胞系及び哺乳動物による無細胞系．例えば、コムギ胚芽無細胞発現系もまた公知である。一部の組換え抗体産生系は、組換え抗体を、採取前の宿主細胞の表面上において発現し、他の組換え抗体産生系は、単純に、回収のための培地へと、抗体を放出する。このような変動は、本開示の範囲内にあることが意図される。

本開示はまた、本開示の組換え抗体を作製する方法も提示する。一部の実施形態において、抗体は、抗原結合断片である。本明細書において記載されたベクターを含む宿主細胞は、組換え抗体を作製するように誘導され、宿主細胞は、宿主細胞内において、抗体を、重／軽鎖からアセンブルし、次いで、細胞から外部へと輸送する、又は抗体は、宿主細胞の外部において、セルフアセンブルし、重／軽鎖として移出される場合もある。組換えモノクローナル抗体産生のための細胞培養工程についての概観は、Ｌｉら、Ｍａｂｓ．、２０１０年９～１０月、２（５）：４６６～４７７において見出されうる。一実施形態において、本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質に特異的に結合する組換え抗体又はその抗原結合断片を作製する方法であって、配列番号１～３６のうちのいずれか１つの、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードする核酸配列を含むベクターを含む細胞を用意するステップ、ベクター内の、少なくとも１つの核酸配列を発現させて、重鎖、軽鎖又はこれらの組合せのうちの少なくとも１つを創出するステップ並びに形成された抗体又はその抗原結合断片を回収するステップを含む方法を提示する。

抗体の同定及び単離
本開示の抗体は、コンビナトリアルライブラリーを、１つ以上の所望の活性を伴う抗体についてスクリーニングすることにより単離されうる。例えば、当技術分野において、ファージディスプレイライブラリーを作出し、このようなライブラリーを、所望の結合特徴を保有する抗体についてスクリーニングするための、様々な方法が公知である（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、「ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ」、１７８：１～３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００１）；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ、３４８：５５２～５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３５２：６２４～６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１～５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ及びＢｒａｄｂｕｒｙ、「ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ」、２４８：１６１～１７５（Ｌｏ編、ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３）；Ｓｉｄｈｕら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３３８（２）：２９９～３１０（２００４）；Ｌｅｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３４０（５）：１０７３～１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０１（３４）：１２４６７～１２４７２（２００４）並びにＬｅｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、２８４（１～２）：１１９～１３２（２００４））。

ある特定のファージディスプレイ法において、ＶＨ遺伝子及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により、個別にクローニングされ、ファージライブラリー内において、ランダムに組み換えられ、次いで、これが、抗原結合性ファージについてスクリーニングされうる。ファージは、典型的に、抗体断片を、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片として、又はＦａｂ断片として提示する。免疫化供給源に由来するライブラリーは、ハイブリドーマの構築を要件とせずに、免疫源に対する、高アフィニティー抗体をもたらす。代替的に、免疫化を伴わずに、広範囲にわたる非自己に対する、単一の抗体供給源をもたらすように、ナイーブレパートリー（例えば、ヒトに由来する）がクローニングされうる（Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、ＥＭＢＯＪ、１２：７２５～７３４（１９９３））。最後に、ナイーブライブラリーはまた、幹細胞に由来する非再配列Ｖ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、インビトロにおいて再配列を達することを介して、合成によっても作製されうる（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ及びＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１～３８８（１９９２））。ヒト抗体ライブラリーから単離された抗原結合断片を含む抗体は、ヒト抗体であると考えられる。

処置法及び使用
第１の態様において、本開示は、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置するための方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。好ましい実施形態において、１２１２Ｃ２ｍＡｂと、１２１３Ｈ７ｍＡｂとの組合せが使用される。

第２の態様において、本開示は、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を抑制するための方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。

第３の態様において、本開示は、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を防止するための方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。

第４の態様において、本開示は、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に関する疾患又は状態を処置、抑制及び／又は防止する方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。第４の態様についての、ある特定の実施形態において、疾患又は状態は、ギラン－バレー症候群である。第４の態様についての、ある特定の実施形態において、疾患又は状態は、特に、対象が、２５歳未満の年齢である場合に、多系統炎症性症候群である。第４の態様についての、ある特定の実施形態において、疾患又は状態は、肺損傷、肝損傷及び／又は心損傷などであるが、これらに限定されない臓器損傷である。第４の態様についての、ある特定の実施形態において、疾患又は状態は、急性呼吸器逼迫症候群である。第４の態様についての、ある特定の実施形態において、疾患又は状態は、レニン－アンジオテンシン系（アンジオテンシンＩＩの過剰産生及び／又はアンジオテンシン１～７の産生の低下などであるが、これらに限定されない）の不均衡から生じる炎症の増大である。

第５の態様において、本開示は、対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、細胞への侵入を低減又は防止する方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体若しくはその抗原結合断片又は前出のものの組合せを、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。

第６の態様において、本開示は、対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、細胞内ＡＣＥ２への結合を低減又は防止する方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離抗された体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。

第７の態様において、本開示は、対象の体液中、組織内又は細胞内における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス力価を低減するための方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。ある特定の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の伝染（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した対象から、未感染である対象への伝染）は、ウイルス力価の低下の結果として低減される。

第８の態様において、本開示は、第１の対象から、第２の対象への、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の伝染を低減又は防止するための方法であって、第１の対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。第８の態様についての、ある特定の実施形態において、このような低減又は防止は、第１の対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、細胞への侵入を低減することにより、少なくとも部分的に得られる。ある特定の実施形態において、第１の対象への投与は、第１の対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、第１の対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、又は第１の対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されうる前において行われる。

第９の態様において、本開示は、第１の対象から、第２の対象への、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の伝染を低減又は防止するための方法であって、第２の対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。第９の態様についての、ある特定の実施形態において、第２の対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に対する危険性がありうる。第９の態様についての、ある特定の実施形態において、このような低減又は防止は、第２の対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、細胞への侵入を防止又は低減することにより、少なくとも部分的に得られる。第９の態様についての、ある特定の実施形態において、このような低減又は防止は、第２の対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を防止又は抑制することにより、少なくとも部分的に得られる。第９の態様についての、ある特定の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が、第２の対象において生じる場合、この感染は、さらなる治療用化合物の投与を伴うか、又はこれを伴わずに、第２の対象により、生理学的に（例えば、免疫系により）消失させられうる。第９の態様についての、ある特定の実施形態において、第２の対象への投与は、第２の対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、第２の対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、又は第２の対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されうる前において行われる。

第１０の態様において、本開示は、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を中和する方法であって、対象へと、有効量の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を、単独において、１つ以上の他の抗体と組み合わせて、かつ／又は医薬組成物の一部として投与するステップを含む方法を提示する。

第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、それらが、細胞内ＡＣＥ２と相互作用しうる前に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス粒子に結合し、これにより、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス粒子が細胞に進入することを低減又は防止する。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス粒子が、細胞内ＡＣＥ２に結合することを低減又は防止する。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の切断を低減する。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、標的細胞への結合を低減する。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と標的細胞との細胞融合を低減する。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、感染性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、感染細胞からの放出を低減する。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、標的細胞の感染を低減する。

第１の態様～第１０の態様による方法は、（ｉ）処置、防止、抑制、低減又は阻害を必要とする対象を同定するステップ；並びに（ｉｉ）本開示の抗体若しくはその抗原結合断片又は前出のものを含む医薬組成物を施すステップのうちの１つ以上をさらに含みうる。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又は抗体若しくはその抗原結合断片（複数可）は、本明細書において記載された、任意の１つ以上の抗体若しくは抗原結合断片（複数可）又はその薬学的に許容される形態である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又は抗体若しくはその抗原結合断片（複数可）は、
１．（ｉ）それぞれ、配列番号３８～４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号４２～４４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｃ２）；
２．（ｉ）それぞれ、配列番号４６～４８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号５０～５２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１５Ｆ５）；
３．（ｉ）それぞれ、配列番号５４～５６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号５８～６０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｈ７）；
４．（ｉ）それぞれ、配列番号６２～６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号６６～６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｆ２）；
５．（ｉ）それぞれ、配列番号７０～７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号７４～７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１）；
６．（ｉ）それぞれ、配列番号７８～８０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号８２～８４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ５）；
７．（ｉ）それぞれ、配列番号８６～８８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号９０～９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｂ４）；
８．（ｉ）それぞれ、配列番号９４～９６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号９８～１００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｆ２）；
９．（ｉ）それぞれ、配列番号１０２～１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１０６～１０８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ４）；
１０．（ｉ）それぞれ、配列番号１１０～１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１１４～１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ａ５）；
１１．（ｉ）それぞれ、配列番号１１８～１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１２２～１２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ６）；
１２．（ｉ）それぞれ、配列番号１２６～１２８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１３０～１３２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１２）；
１３．（ｉ）それぞれ、配列番号１３４～１３６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１３８～１４０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｆ１０）；並びに
１４．（ｉ）それぞれ、配列番号１４２～１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１４６～１４８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｇ１２）；
又は前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態
を含む。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、
１．（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号４１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｃ２）；
２．（ｉ）配列番号４５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１５Ｆ５）；
３．（ｉ）配列番号５３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号５７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｈ７）；
４．（ｉ）配列番号６１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号６５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｆ２）；
５．（ｉ）配列番号６９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号７３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１）；
６．（ｉ）配列番号７７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ５）；
７．（ｉ）配列番号８５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｂ４）；
８．（ｉ）配列番号９３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１３Ｆ２）；
９．（ｉ）配列番号１０１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１０５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ４）；
１０．（ｉ）配列番号１０９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１１３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ａ５）；
１１．（ｉ）配列番号１１７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１２１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｄ６）；
１２．（ｉ）配列番号１２５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｄ１２）；
１３．（ｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１３７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０７Ｆ１０）；
１４．（ｉ）配列番号１４１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１４５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２０６Ｇ１２）；
１５．（ｉ）配列番号１４９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５０のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１５Ｄ１）；
１６．（ｉ）配列番号１５１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５２のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１４Ｅ９）；
１７．（ｉ）配列番号１５３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５４のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｅ９）；並びに
１８．（ｉ）配列番号１５５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５６のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２Ｃ８）；
又は前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態
を含む。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、（ｉ）それぞれ、配列番号１５８、３９及び１５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号４２、４３及び１６１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（１２１２の変異体）又は薬学的に許容される塩、溶媒和物及び／若しくは水和物などであるが、これらに限定されない、前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態を含む。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５８の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＩｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＡｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｌｅｕ（Ｌ）又はＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ａｓｎ（Ｎ）又はＳｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）又はＰｈｅ（Ｆ）である。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５８の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＩｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸は、Ａｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸は、Ｌｅｕ（Ｌ）又はＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸は、任意のアミノ酸（好ましくは、Ａｌａ（Ａ））であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸は、Ａｓｎ（Ｎ）又はＳｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸は、Ｖａｌ（Ｖ）である。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５８の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）であり、配列番号１５９の１及び９位におけるアミノ酸は、それぞれ、Ｔｈｒ（Ｔ）及びＬｅｕ（Ｌ）であり、配列番号１６１の１、６及び１０位におけるアミノ酸は、それぞれ、任意のアミノ酸、Ａｓｎ（Ｎ）及びＰｈｅ（Ｆ）である。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５８の１位におけるアミノ酸は、Ｔｈｒ（Ｔ）であり、配列番号１５９の１及び９位におけるアミノ酸は、それぞれ、Ａｌａ（Ａ）及びＬｅｕ（Ｌ）であり、配列番号１６１の１、６及び１０位におけるアミノ酸は、それぞれ、任意のアミノ酸（好ましくは、Ａｌａ（Ａ））、Ａｓｎ（Ｎ）及びＶａｌ（Ｖ）である。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５８の１位におけるアミノ酸は、Ｉｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１及び９位におけるアミノ酸は、それぞれ、Ａｌａ（Ａ）及びＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１、６及び１０位におけるアミノ酸は、それぞれ、任意のアミノ酸、Ｓｅｒ（Ｓ）及びＶａｌ（Ｖ）である。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５８の１位におけるアミノ酸は、Ｉｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１及び９位におけるアミノ酸は、それぞれ、Ａｌａ（Ａ）及びＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１、６及び１０位におけるアミノ酸は、それぞれ、任意のアミノ酸（好ましくは、Ａｌａ（Ａ））、Ｓｅｒ（Ｓ）及びＶａｌ（Ｖ）である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、（ｉ）配列番号１５７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１６０のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（１２１２の変異体）又は薬学的に許容される塩、溶媒和物及び／若しくは水和物などであるが、これらに限定されない、前出のもののうちのいずれかの、薬学的に許容される形態を含む。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、表２Ａから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、表２Ｂから選択される。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、表２Ｃから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、表２Ｄから選択される。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、表２Ｅから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、表２Ｆから選択される。

この実施形態についての一側面において、配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｇから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸は、下記の表２Ｈから選択される。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、前出のもののうちのいずれかの混合物を含む。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、薬学的に許容される塩として存在する。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の、ＲＢＤ内のエピトープに結合する。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＲＢＭ内のエピトープに結合する。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ１領域内のエピトープに結合する。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ２領域内のエピトープに結合する。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、標的細胞への結合を低減する。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と標的細胞との細胞融合を低減する。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、感染性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、感染細胞からの放出を低減する。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、標的細胞の感染を低減する。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、抗体変異体である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、親抗体と比べた、１つ以上の置換、欠失及び／又は挿入を含む、抗体変異体である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、親抗体と比べた、１つ以上の置換を含む、抗体変異体である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、対象のインビボにおける半減期が、親抗体と比べて長い、対象のインビボにおける免疫原性が、親抗体と比べて小さい、又は前出のものの組合せを有する、抗体変異体である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、タンパク質部分又は非タンパク質部分が、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、水溶性ポリマーが、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ポリエチレングリコールポリマーが、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ポリオキサゾリンポリマーが、Ｆｃ定常領域へと連結された、変異体Ｆｃ定常領域を含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、変異体Ｆｃ定常領域を含み、この場合、変異体Ｆｃ定常領域は、対象のインビボにおける半減期が、親抗体と比べて長い、対象のインビボにおける免疫原性が、親抗体と比べて小さい、又は前出のものの組合せをもたらす。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ヒト抗体である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、キメラ抗体である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、クラススイッチ抗体である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、治療剤へと連結されている。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、検出用標識へと連結されている。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、酵素へと連結されている。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、酵素阻害剤へと連結されている。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、抗原結合断片である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ジスルフィド連結型Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ｄＡｂ断片、単離ＣＤＲ、ナノボディー又は単一ドメイン抗体、単一の可変ドメインと、２つの定常ドメインとを含有する、Ｖ_Ｈ領域の部分、ダイアボディー、トリアボディー、テトラボディー、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＦＣ、ｓｃＦｖ－ＣＨ、ｓｃＦａｂ及びｓｃＦｖ－ジッパーからなる群から選択される抗原結合断片である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片、抗体又はその抗原結合断片のアミノ酸配列は、参照配列に対する、少なくとも８５％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９０％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９５％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９６％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９７％の相同性、参照配列に対する、少なくとも９８％の相同性又は参照配列に対する、少なくとも９９％の相同性を有する。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片、抗体又はその抗原結合断片のアミノ酸配列は、ＣＤＲにわたり、参照配列と１００％相同であり、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも８５％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも８５％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９０％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９５％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９６％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９７％の相同性、ＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９８％の相同性又はＦＲにわたる、参照配列に対する、少なくとも９９％の相同性を有する。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ウイルスＲＮＡポリメラーゼ活性の阻害剤並びに／又は他のセリンプロテアーゼ阻害剤及び非セリンプロテアーゼ阻害剤など、本明細書において記載された、他の抗ウイルス剤と組み合わされて使用される。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２及び１つ以上のさらなるウイルスにより感染させられている。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、有効量において投与される。適切な有効量については、本明細書において、より詳細に記載されている。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、処置コースに従い、抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量を投与すること（単回用量が、有効量を含有しうる場合）を含みうる。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、処置コースに従い、抗体又はその抗原結合断片を含む、１回より多く用量を投与すること（１回以上の用量が、有効量を含有しうる場合）を含みうる。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、処置コース期間において投与された各回の投与の用量において、同じであることが要求されない。例えば、第１の態様～第１０の態様による方法のうちのいずれかにおいて、投与するステップは、処置コース期間において、少なくとも１回、負荷用量、及び少なくとも１回、維持用量を投与することを含みうる。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、処置コースに従い、抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、処置コースに従い、抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を、静脈内投与により投与することを含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、処置コースに従い、抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を、鼻腔内投与により投与することを含む。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、処置コースに従い、抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を、肺内投与により投与することを含む。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を患っている、又はこれを患うことが疑われている。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物及び／又は医薬は、本明細書において記載された方法に従い投与されうる。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、哺乳動物である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、ヒトである。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、投与するステップは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において（すなわち、対象は、感染に対する危険性がある）、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後である（が、感染が検出されうる前において）、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、そのような個体が、それらを、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の高危険性にさらす措置を講じるように要求されうるので、医療従事者、初期対応者（例えば、警察官又は消防士）又は軍隊の隊員である。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が記録されている領域を訪れたことがあり、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が記録されている領域を訪れたことがある者と接触したことがあり、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染（検出されていないＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を含む）を有する、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を有することが疑われた者と接触したことがあり、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染（検出されていないＣｏＶ感染を含む）を有する、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を有する危険性がある者の家族構成員又は知人であり、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を有する、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を有する危険性がある介助者又は親を有する、乳児又は小児（例えば、１８歳未満の対象）である。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、対象は、肺疾患、心疾患、糖尿病、細菌重複感染、敗血症症候群、高血圧、慢性肺疾患（ぜんそく、慢性閉塞性肺疾患及び肺気腫を含む、）慢性腎疾患、慢性肝疾患、免疫不全、免疫力不全状態、神経障害、神経発達障害又は知的障害を患っている可能性がある。

第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、静脈内投与、筋内投与若しくは皮下投与などにより、非経口投与される、経口投与される、又は気道を介して（例えば、肺内投与又は鼻腔内投与により）投与される。第１の態様～第１０の態様についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、静脈内投与される。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、筋内投与される。第１の態様～第１０の態様による方法についての、ある特定の実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、鼻腔内投与される。

さらなる治療剤
加えて、本明細書において記載された医薬組成物又は方法は、本開示の抗体と組み合わされた、１つ以上のさらなる抗ウイルス剤をさらに含みうる。このような抗ウイルス剤の例は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＲＮＡポリメラーゼ活性の阻害などにより、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製を阻害する薬剤並びにセリンプロテアーゼ阻害剤（例えば、ＴＭＰＲＳＳ２の阻害剤）及びシステインプロテアーゼ阻害剤を含むが、これらに限定されない、プロテアーゼ阻害剤を含むが、これらに限定されない。代表的薬剤は、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルを含むが、これらに限定されない。他の薬剤及びそれらの相乗作用的組合せは、Ｂｏｂｒｏｗｓｋｉら、ｂｉｏＲｘｉｖ（２０２０年６月、ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／２０２０．０６．２９．１７８８８９）及びＫｏ、ら、ｂｉｏＲｘｉｖ（２０２０年５月、ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／２０２０．０５．１２．０９００３５）において記載されている。

インフルエンザポリメラーゼの阻害に関する化合物について、例えば、米国特許第７，３８８，００２号明細書；同第７，５６０，４３４号明細書並びに米国特許出願第１２／４４０，６９７号明細書（米国特許公開第２０１００１２９３１７号として公開されている）及び同第１２／３９８，８６６号明細書（米国特許公開第２００９０２２７５２４号として公開されている）において記載されている。

投与量及び投与
本開示の方法に従い、本開示のポリペプチドは、有効量において、対象へと投与される（又は対象の細胞と接触される）。一部の実施形態において、有効量は、対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス力価を減少させ、かつ／又は対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス粒子のウイルス力価の増大を制限若しくは防止する。一部の実施形態において、有効量は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、対象へのウイルスの侵入を減少させる。一部の実施形態において、有効量は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、標的細胞への結合を低減する。一部の実施形態において、有効量は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と標的細胞との細胞融合を低減する。一部の実施形態において、有効量は、感染性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、対象の感染細胞からの放出を低減する。一部の実施形態において、有効量は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、標的細胞の感染を低減する。

ある特定の実施形態において、本開示の抗体の有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇの範囲である。例えば、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ又は約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇの用量である。

ある特定の実施形態において、本開示の抗体の有効量は、ｉ）約１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ；ｉｉ）約１ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ；ｉｉｉ）約１ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ又はｉｖ）約１ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇの範囲である。

ある特定の実施形態において、本明細書において記載された有効量は、毎日、隔日、３日ごとに、４日ごとに、５日ごとに、６日ごとに、又は７日ごとに投与される。ある特定の実施形態において、本明細書において記載された有効量は、週単位の間隔において（毎週、２週間ごとに、３週間ごとに、４週間ごとに、５週間ごとに、６週間ごとに、７週間ごとに、８週間ごとに、又はこれより長い間隔などにおいて）投与される。ある特定の実施形態において、本明細書において記載された有効量は、月単位の間隔において（毎月、２カ月ごとに、３カ月ごとに、４カ月ごとに、５カ月ごとに、６カ月ごとに、７カ月ごとに、８カ月ごとに、９カ月ごとに、１０カ月ごとに、１１カ月ごとに、１２カ月ごとに、又はこれより長い間隔などにおいて）投与される。

一実施形態において、有効量は、処置コース期間中に、毎日投与される。１日当たりの有効量は、１日当たりの単回用量において投与される場合もあり、１日当たりの複数回用量（１日当たり２～３回の用量など）において投与される場合もある。ある特定の実施形態において、１日当たりの有効量は、１日当たり１回の用量として投与される。ある特定の実施形態において、１日当たりの有効量は、毎日２回の用量（すなわち、ｂ．ｉ．ｄ．）により投与され、この場合、各用量における抗体の量は、同じである必要はない。

一実施形態において、上記において記載された有効量は、処置コース期間中に、隔日、３日ごとに、４日ごとに、５日ごとに、６日ごとに、又は７日ごとに投与される。投与スケジュールにおける有効量は、単回用量において投与される場合もあり、複数回用量（２～３回の用量など）において投与される場合もある。ある特定の実施形態において、投与スケジュールにおける有効量は、投与日における単回用量として投与される。ある特定の実施形態において、投与スケジュールにおける有効量は、投与日における２回の用量により投与され、この場合、各用量における抗体の量は、同じである必要はない。

一実施形態において、上記において記載された有効量は、処置コース期間中に、週単位の間隔において（毎週、２週間ごとに、３週間ごとに、４週間ごとに、５週間ごとに、６週間ごとに、７週間ごとに、８週間ごとに、又はこれより長い間隔などにおいて）投与される。週単位の間隔当たりの有効量は、単回用量において投与される場合もあり、複数回用量において投与される場合もある。ある特定の実施形態において、１週間当たりの有効量は、投与日における単回用量として投与される。ある特定の実施形態において、１週間当たりの有効量は、投与日における２回の用量により投与され、この場合、各用量における抗体の量は、同じである必要はない。

一実施形態において、上記において記載された有効量は、処置コース期間中に、月単位の間隔において（毎月、２カ月ごとに、３カ月ごとに、４カ月ごとに、５カ月ごとに、６カ月ごとに、７カ月ごとに、８カ月ごとに、９カ月ごとに、１０カ月ごとに、１１カ月ごとに、１２カ月ごとに、又はこれより長い間隔などにおいて）投与される。月単位の間隔当たりの有効量は、単回用量において投与される場合もあり、複数回用量において投与される場合もある。ある特定の実施形態において、１カ月当たりの有効量は、投与日における単回用量として投与される。ある特定の実施形態において、１カ月当たりの有効量は、投与日における２回の用量により投与され、この場合、各用量における抗体の量は、同じである必要はない。

本明細書において使用された、「用量」という用語は、所与の時点において投与された本開示の抗体の量を指す。例えば、本開示の抗体のための処置コースが、７日間にわたり、１日２回（１日当たり２回の投与）である場合、１～７日目の各日における各回の投与は、用量（各日２回の用量のため）の投与を含む。

２回以上、用量が所与の日に投与される場合、投与される各用量は、同じ量の、本開示の抗体を含有する場合もあり、投与される用量のうちの１つ以上は、この日に投与される、別の用量と比較して、多量又は少量の、本開示の抗体を含有する場合もある。例えば、本開示の抗体のための処置コースが、毎月の各回の投与において、有効量が、１日２回投与される、毎月の投与を要求する場合、投与される初回用量は、第１の量（すなわち、１０ｍｇ／ｋｇ）を含有する場合があり、投与される２回目の用量は、第２の量（すなわち、５ｍｇ／ｋｇ）を含有しうる。別の例として述べると、本開示の抗体のための処置コースが、７日間にわたり、１日２回である場合、１日目に投与される初回用量は、第１の量（すなわち、１０ｍｇ／ｋｇ）を含有する場合があり、１日目に投与される２回目の用量は、第２の量（すなわち、５ｍｇ／ｋｇ）を含有する場合があり、２～４日目の各々において投与される、２回分の用量は、第２の量を含有する場合があり、５～７日目の各々において投与される、２回分の用量は、第３の量（すなわち、２ｍｇ／ｋｇ）を含有しうる。

さらに、所与の処置コースのために、有効量のための投与スケジュールは、同じであることが要求されない。例えば、処置コースは、有効量が、最初の６カ月間にわたり、毎月送達され（単回用量又は複数回用量として）、次いで、次の１２カ月間にわたり、３カ月ごとに送達される（単回用量又は複数回用量として）ことを要求しうる。

なおさらに、所与の処置コースのために、処置コースの期間中に、各回の投与において送達される有効量は、同じであることが要求されない。例えば、処置コースは、有効量が、最初の６カ月間にわたり、毎月送達され（単回用量又は複数回用量として）、次いで、次の６カ月間にわたり、２カ月ごとに送達される（単回用量又は複数回用量として）ことを要求する場合があり、この場合、最初の毎月の投与のための有効量は、１０ｍｇ／ｋｇであり、残りの毎月の投与及び隔月の投与のための有効量は、２．５ｍｇ／ｋｇである。

任意の所与の用量が、単一の単位剤形により送達される場合もあり、１つを超える単位剤形により送達される場合もある。例えば、用量は、ＩＶ投与により施与される場合、単回のＩＶ注入（すなわち、２０ｍｇ／ｋｇの単回ＩＶ注入）として施される場合もあり、相次いで投与され、単一用量による投与と考えられる、２回以上のＩＶ注入（すなわち、１０ｍｇ／ｋｇずつ２回のＩＶ注入）として施される場合もある。用量は、部分用量へと、さらに分割される場合がある。部分用量は、例えば、吸入器からの複数回の吸入、眼への複数の液滴の適用又は経口投与のための複数の錠剤など、多数回の、個別の、緩やかに間隔を空けた投与のための用量の場合もある。

ある特定の実施形態において、処置コースの期間中において、本開示の抗体の用量が１回だけ投与され、さらなる用量は投与されない。したがって、本明細書において記載された方法において、方法は、処置コースの全期間中において、有効量の本開示の抗体の単回用量の投与を含みうる。ある特定の実施形態において、処置コースの期間中に、本開示の抗体の、１回より多く用量が投与される。したがって、方法は、処置コースの期間中に、本開示の抗体の、複数回用量の投与を含みうる。ある特定の実施形態において、処置コースは、２日間～１カ月間、２日間～３週間、２日間～２週間又は２日間～１週間の範囲でありうる。ある特定の実施形態において、処置コースは、１カ月間～６カ月間、１カ月間～１２カ月間、１カ月間～２４カ月間又は１カ月間～３６カ月間の範囲でありうる。ある特定の実施形態において、処置コースは、２日間～６日間、２日間～５日間、２日間～４日間又は２日間～３日間の範囲でありうる。ある特定の実施形態において、用量は、処置コースの期間中に、１日当たり少なくとも１回（すなわち、１～３回にわたり）送達される。ある特定の実施形態において、処置コースは、連続コースである。ある特定の実施形態において、用量は、処置コースの期間中に、毎日投与されない（例えば、用量は、処置コースの期間中に、隔日において、１日当たり少なくとも１回投与されるものとする）。さらに、上記において論じられた通り、各用量における、本開示の抗体の量は、同じである必要はない。前出のもののうちの、ある特定の実施形態において、１回以上の用量、好ましくは、全ての回の用量は、有効量の本開示の抗体を含有する。

ある特定の実施形態において、処置コースは、負荷用量としての、少なくとも１回の用量及び維持用量としての、少なくとも１回の用量の投与を含みうるが、この場合、負荷用量は、維持用量と比較して大きな量の、本開示の抗体（２～１０倍などであるが、これらに限定されない）を含有する。この実施形態についての一側面において、初期に、負荷用量が投与された後において、処置コースの残りの期間にわたり、１回以上、維持用量が投与される。例えば、７日間にわたり、ｂ．ｉ．ｄ．である処置コースのために、１日目における初回用量としての、１０ｍｇ／ｋｇの負荷用量が投与され、続いて、処置コースの残りの期間にわたる、２ｍｇ／ｋｇの維持用量が投与されうる。さらなる例として述べると、７日間にわたり、ｂ．ｉ．ｄ．である処置コースのために、１日目における初回用量としての、２０ｍｇ／ｋｇの負荷用量が投与され、続いて、１日目における２回目の用量及び２～４日目における各用量としての、５ｍｇ／ｋｇ維持用量、続いて、処置コースの残りの期間にわたる、２ｍ／ｋｇの維持用量が投与されうる。

さらに、負荷用量は、処置コースの期間中に投与された初回用量ではない用量として投与される場合がある。例えば、負荷用量は、１日目における初回用量として及び１日以上のさらなる日（例えば、４日目）における用量として投与されうる。例えば、７日間にわたり、ｂ．ｉ．ｄ．である処置コースのために、１日目における初回用量としての、１０ｍｇ／ｋｇの負荷用量が投与され、続いて、１日目における２回目の用量及び２～３日目における各用量としての、２ｍｇ／ｋｇ維持用量、続いて、４日目における初回用量としての、１０ｍｇ／ｋｇの負荷用量、続いて、処置コースの残りの期間にわたる、２ｍｇ／ｋｇの維持用量が投与されうる。１回より多く負荷用量が、処置コースの期間中に投与される場合、負荷用量は、同じ（すなわち、１０ｍｇ／ｋｇ）場合もあり、異なる（すなわち、１回目の負荷用量のための２０ｍｇ／ｋｇ及び他の各負荷用量のための１０ｍｇ／ｋｇ）場合もある。

ある特定の実施形態において、負荷用量は、同じ処置コース期間中に投与された維持用量と比較して、２～１５倍の本開示の抗体を含む。ある特定の実施形態において、負荷用量は、同じ処置コース期間中に投与された維持用量と比較して、２～１０倍の本開示の抗体を含む。ある特定の実施形態において、負荷用量は、同じ処置コース期間中に投与された維持用量と比較して、２～５倍の本開示の抗体を含む。

上記において論じられた、負荷用量及び維持用量についての、ある特定の実施形態において、負荷用量及び維持用量のうちの１回分以上、好ましくは、負荷用量及び維持用量の全ては、有効量の本開示の抗体を含有する。さらに、上記において論じられた、負荷用量及び維持用量についての、ある特定の実施形態において、１回以上の負荷用量の投与及び／又は維持用量の投与は、１回以上の部分用量の投与及び／又は１つ以上の単位剤形の投与を含みうる。

ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において開始される（すなわち、初回用量が投与される）。ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後の、任意の時点において開始される。ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であり、かつ、活動性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が検出されうる前である、任意の時点において開始される（すなわち、検査室における診断又は他の方法により）。ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、活動性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を有する、任意の時点において開始される（すなわち、検査室における診断又は他の方法により）。ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した１～５日後において開始される。ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した５～１０日後において開始される。

ある特定の実施形態において、処置コースは、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前に開始される（すなわち、予防的投与）。例えば、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が報告されている地域を訪れようと計画している、又は自身が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２へと曝露されうると考える場合、対象は、地域への訪問の前に、又は潜在的曝露の前に、本開示の抗体による処置コースを受けることができる。さらに、対象は、非ヒトベクター供給源に由来するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染へと、最初に曝露された者ではない者でありうる。例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２へと曝露されている、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２への曝露に対する危険性がある者の（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が報告されている地域を訪れることにより）、配偶者又はパートナーもまた、本開示の抗体による処置コースを受けることができる。本開示の抗体の、このような予防的使用は、本開示の抗体を投与される対象を保護するだけでなく、それらと接触する対象（例えば、家族構成員及び同僚）の防御においてもまた、有益である。

前出の実施形態うちのいずれかにおいて、用量は、単独において、本開示の抗体を含む場合もあり、医薬組成物中に、本開示の抗体を含む場合もある。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、非経口投与により送達される。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、ＩＶ投与により送達される。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、ＩＭ投与により送達される。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、皮下投与により送達される。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、肺内経路を介して送達される。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、肺内投与により送達される。前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、鼻腔内投与により送達される。

前出の実施形態うちのいずれかにおいて、各用量は、薬学的に許容される塩など、薬学的に許容される形態中に、ある量の、本開示の抗体を含有する。

医薬組成物
本開示の抗体は、インビボにおける投与に適する、薬学的に許容される形態における、対象への投与のための医薬組成物へと製剤化されうる。本開示は、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤と組み合わされた、本開示の抗体を含む医薬組成物を提示する。薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤は、活性化合物に対して、化学的に不活性であり、使用条件下において非毒性であることが多い。本明細書において利用された、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤は、医薬組成物のための材料として使用され、鎮痛剤、緩衝剤、保湿剤、乳化剤（ｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇａｇｅｎｔｓ）、ｐＨ調整剤、結合剤、崩壊剤、希釈剤、乳化剤（ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ）、増量材、流動促進剤、可溶化剤、安定化剤、懸濁剤、等張剤、媒体、増粘剤、抗酸化剤、着色剤、香味改善剤、保存剤及び甘味剤として組み込まれた、多様な有機材料又は無機材料から選択されうる。

一実施形態において、本開示は、本開示の抗体を含む医薬組成物を提示するが、この場合、医薬組成物は、１～６，０００ｍｇの抗体を含む。例えば、医薬組成物は、１～２，０００ｍｇ、１～６００ｍｇ、１～５００ｍｇ、１～４００ｍｇ、１～３００ｍｇ、１～２００ｍｇ又は１～１００ｍｇの抗体を含有しうる。一実施形態において、本開示の抗原は、医薬組成物中に、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ又は５００ｍｇ／ｍＬ（前出の各々における濃度は、７５０ｍｇ／ｍＬ未満である）の濃度において存在する。

医薬組成物中の、本開示の抗体の量は、当技術分野において公知の通りに変動しうる。一般に、本開示の抗体の量は、医薬組成物の総重量により、約０．０１％～約９９％、好ましくは、約０．１％～約７０％、約０．５％～５０％又は約１％～約３０％の範囲である。

薬学的に許容される担体の例は、例えば、水又は生理食塩液、ポリエチレングリコール、炭水化物及びその誘導体、油、脂肪酸又はアルコールなどのポリマーを含みうる。一部の実施形態において、薬学的に許容される担体は、生理食塩水又は水である。一部の実施形態において、薬学的に許容される担体は、生理食塩水である。一部の実施形態において、薬学的に許容される担体は、水又は生理食塩液である。

サーファクタントなどであるが、これらに限定されない、界面活性剤もまた、製剤における使用に適する。界面活性剤の具体例は、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、酢酸ビニルとビニルピロリドンとのコポリマー、ポリエチレングリコール、ベンジルアルコール、マンニトール、グリセロール、ソルビトール若しくはソルビタンのポリオキシエチル化エステル；レシチン若しくはカルボキシメチルセルロースナトリウム；又はメタクリレート及び他のアクリル誘導体などのアクリル誘導体、アルカリ性ステアリン酸、特に、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸カリウム若しくはステアリン酸アンモニウムなどのアニオン性界面活性剤；ステアリン酸カルシウム若しくはステアリン酸トリエタノールアミン；硫酸アルキル、特に、ラウリル硫酸ナトリウム及びセチル硫酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム若しくはスルホコハク酸ジオクチルナトリウム；又は脂肪酸、特に、ヤシ油に由来する脂肪酸、式：Ｎ^＋Ｒ’Ｒ’’Ｒ’’’Ｒ’’’’Ｙ^－［式中、Ｒラジカルは、任意選択的にヒドロキシル化された、同一の炭化水素ラジカル又は異なる炭化水素ラジカルであり；Ｙ^－は、ハロゲン化物アニオン、硫酸アニオン及びスルホン酸アニオンなど、強酸のアニオンである］の、水溶性四級アンモニウム塩（臭化セチルトリメチルアンモニウムは、使用されうるカチオン性界面活性剤のうちの１つである）；式：Ｎ^＋Ｒ’Ｒ’’Ｒ’’’［式中、Ｒラジカルは、任意選択的にヒドロキシル化された、同一の炭化水素ラジカル又は異なる炭化水素ラジカルである］の、アミン塩（オクタデシルアミン塩酸塩は、使用されうるカチオン性界面活性剤のうちの１つである）などのカチオン性界面活性剤；任意選択的に、ソルビタンのポリオキシエチル化エステルなどの非イオン性界面活性剤；特に、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ８０又はポリオキシエチル化アルキルエーテル；ステアリン酸ポリエチレングリコール、ヒマシ油のポリオキシエチル化誘導体、ポリグリセロールエステル、ポリオキシエチル化脂肪族アルコール、ポリオキシエチル化脂肪酸又はエチレンオキシドと酸化プロピレンとのコポリマー、ベタインの置換ラウリル化合物などの両親媒性界面活性剤を含む。

対象へと投与された場合、医薬組成物は、好ましくは、滅菌である。本開示の医薬組成物は、医薬技術分野において周知の方法により調製される。例えば、本開示の抗体は、懸濁液又は溶液としての、担体及び／又は賦形剤と合わせられる。任意選択的に、１つ以上のアクセサリー成分（例えば、緩衝剤、香味剤、界面活性剤など）もまた、添加されうる。担体及び／又は賦形剤の選び出しは、抗体の可溶性及び化学的性質、選び出された投与経路及び標準的な薬学的慣行により決定される。一部の実施形態において、医薬組成物は、本開示の抗体及び水を含む。一部の実施形態において、製剤は、本開示の抗体及び生理食塩水を含む。

経口投与のために、本開示の医薬組成物は、カプセル、錠剤、粉末、顆粒として提示される場合もあり、懸濁液又は溶液として提示される場合もある。カプセル製剤は、ゼラチンの場合もあり、軟質ゲルの場合もあり、固体の場合もある。錠剤及びカプセル製剤は、それらの各々が、当技術分野において公知である、１つ以上のアジュバント、結合剤、希釈剤、崩壊剤、賦形剤、増量剤又は滑沢剤をさらに含有しうる。このような物質の例は、ラクトース又はスクロースなどの炭水化物、無水二塩基性リン酸カルシウム、トウモロコシデンプン、マンニトール、キシリトール、セルロース又はこれらの誘導体、微結晶セルロース、ゼラチン、ステアリン酸、二酸化ケイ素、滑石、デンプングリコール酸ナトリウム、アカシアガム、香味剤、保存剤、緩衝剤、崩壊剤及び着色剤を含む。経口投与用医薬組成物は、薬学的に美味の調製物をもたらすように、果糖、アスパルターム又はサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、ウィンターグリーン油又はチェリー油などの香味剤；着色剤；並びに保存剤などであるが、これらに限定されない、１つ以上の任意選択の薬剤を含有しうる。

非経口投与のために、本開示の抗体は、対象の血液と等張性である、滅菌水溶液と組み合わされうる。このような製剤は、水溶液をもたらすように、固体の有効成分を、塩化ナトリウム、グリシンなど、生理学的に適合性の物質を含有する水中に溶解させ、生理学的条件と適合性であるｐＨへと緩衝処理し、次いで、溶液を滅菌溶液とすることにより調製されうる。製剤は、シーリングされたアンプル又はバイアルなど、単位剤形において提示されうる。製剤は、限定せずに述べると、筋膜上投与、関節包内投与、頭蓋内投与、皮内投与、髄腔内（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ）投与、筋内投与、眼窩内投与、腹腔内投与、髄腔内（ｉｎｔｒａｓｐｉｎａｌ）投与、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）投与、血管内投与、静脈内投与、吸入投与、鼻腔内投与、実質内投与、皮下投与又は舌下投与を含む、任意の注入方式により送達される場合もあり、対象の体内へのカテーテルにより送達される場合もある。好ましい注入方式は、静脈内投与、筋内投与又は鼻腔内投与である。

非経口投与は、水性ベースの溶液及び非水性ベースの溶液を含む。これらの例は、例えば、水、生理食塩水、水性糖溶液又は糖アルコール溶液、アルコール類（エチルアルコール、イソプロパノール、グリコールなど）、エーテル、油、グリセリド、脂肪酸及び脂肪酸エステルを含む。一部の実施形態において、水は、非経口投与のために使用される。一部の実施形態において、生理食塩水は、非経口投与のために使用される。非経口注射のための油は、動物油、植物油、合成油又は石油ベースの油を含む。溶液のための糖の例は、スクロース、ラクトース、デキストロース、マンノースなどを含む。油の例は、鉱物油、石油、ダイズ油、トウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油などを含む。脂肪酸及びエステルの例は、オレイン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸及びこれらのエステルを含む。一部の実施形態において、水は、本開示の抗体が、静脈内投与される場合、賦形剤及び／又は担体である。一部の実施形態において、賦形剤及び／又は担体は、本開示の抗体が、静脈内投与される場合、生理食塩液である。一部の実施形態において、賦形剤及び／又は担体は、本開示の抗体が、静脈内投与される場合、乳酸加リンゲル液である。本開示の抗体が、静脈内投与される場合、水性デキストロース溶液及び水性グリセロール溶液もまた、賦形剤及び／又は担体として利用されうる。

本開示の抗体は、気道（例えば、肺内投与又は経鼻投与）を介して投与される、エアゾール製剤へと製剤化されうる。これらのエアゾール製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン及び窒素など、許容可能な高圧ガス中に封入されうる。このようなエアゾール製剤は、用量計量型吸入器により投与されうる。エアゾール製剤はまた、噴霧器又はアトマイザー内の非高圧化調製物などの非高圧化調製物のための医薬剤としても製剤化されうる。

単独において、又は適切な賦形剤及び／又は担体と組み合わされて、本開示の抗体は、経鼻噴霧又は肺内噴霧としての水溶液中の投与が可能であり、当業者に公知の、様々な方法により、噴霧形態において分注されうる。製剤は、複数回用量用容器により、例えば、米国特許第４，５１１，０６９号明細書において開示されている、密封型分注システムにより提示されうる。さらなるエアゾール送達形態は、例えば、医薬用溶媒、例えば、水、エタノール又はこれらの混合物中に溶解又は懸濁された活性薬剤を送達する、圧縮空気式噴霧器、ジェット式噴霧器、超音波式噴霧器及び圧電式噴霧器を含みうる。

本開示の経鼻溶液及び肺内溶液は、典型的に、薬物又は任意選択的に、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）などの界面活性剤及び１つ以上の緩衝液により製剤化されて送達される薬物を含む。本発明の一部の実施形態において、経鼻噴霧溶液は、高圧ガスをさらに含む。経鼻噴霧溶液のｐＨは、任意選択的に、約ｐＨ３．０～６．０の間、好ましくは、４．５±０．５である。これらの組成物中の使用に適する緩衝液は、上記において記載された通りである、又は当技術分野の他の形において公知である。化学的安定性を増強又は維持するように、保存剤、界面活性剤、分散剤又はガスを含む、他の成分も添加されうる。適切な保存剤は、フェノール、メチルパラベン、パラベン、ｍ－クレゾール、チメロサール、クロロブタノール、塩化ベンザルコニウムなどを含むが、これらに限定されない。適切な界面活性剤は、オレイン酸、トリオレイン酸ソルビタン、ポリソルベート、レシチン、ホスファチジルコリン並びに多様な長鎖ジグリセリド及びリン脂質を含むが、これらに限定されない。適切な分散剤は、エチレンジアミン四酢酸などを含むが、これらに限定されない。適切なガスは、窒素、ヘリウム、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、ヒドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）、二酸化炭素、空気などを含むが、これらに限定されない。

代替的実施形態内において、経鼻製剤及び肺内製剤は、鼻腔内送達のための、適切な粒子サイズである、又は適切な粒子サイズ範囲内にある、乾燥形態、通例、乾燥凍結形態の活性薬剤を含む、乾燥粉末製剤として投与される。経鼻経路又は肺内経路内の沈着に適切な最小粒子サイズは、約０．５μｍの空気動力学的中央粒子径（ＭＭＥＡＤ）、主に、約１μｍのＭＭＥＡＤであることが多く、より典型的に、約２μｍのＭＭＥＡＤであることが多い。経鼻経路内の沈着に適切な最大粒子サイズは、約１０μｍのＭＭＥＡＤ、主に、約８μｍのＭＭＥＡＤであることが多く、より典型的に、約４μｍのＭＭＥＡＤであることが多い。これらのサイズ範囲内の鼻腔内吸入用粉末及び肺内吸入用粉末は、例えばジェットミリング、噴霧乾燥、溶媒沈殿、超臨界流体凝縮など、様々な常套的技法により作製されうる。適切なＭＭＥＡＤを有する、これらの乾燥粉末は、粉末を、エアゾール化量へと分散するのに、肺内吸入時又は経鼻吸入時における、患者の呼吸に依拠する、常套的な乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）を介して、患者へと投与されうる。代替的に、乾燥粉末は、粉末を、エアゾール化量へと分散するのに、外部の動力供給源を使用する、空気支援型デバイス例えば、ピストン式ポンプを介して投与されうる。

経鼻送達又は肺内送達のための組成物を製剤化するために、活性薬剤は、薬学的に許容される、多様な添加剤のほか、活性薬剤（複数可）を分散させるための基剤又は担体と共に組み合わされうる。所望の添加剤は、例えば、アルギニン、水酸化ナトリウム、グリシン、塩酸、クエン酸などのｐＨ制御剤を含むが、これらに限定されない。加えて、局所麻酔剤（例えば、ベンジルアルコール）、等張剤（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール）、吸着阻害剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ８０）、可溶性増強剤（例えば、シクロデキストリン及びその誘導体）、安定化剤（例えば、血清アルブミン）及び還元剤（例えば、グルタチオン）も組み入れられうる。経鼻送達又は肺内送達のための組成物が、液体である場合、０．９％（ｗ／ｖ）の生理学的生理食塩液の張性を１とした張性に照らして測定された製剤の張性は、典型的に、投与部位の鼻粘膜内において、実質的な、不可逆的組織損傷が誘導されない値へと調整される。一般に、溶液の張性は、約１／３～３、より典型的に、１／２～２の値へと調整され、最もしばしば、３／４～１．７の値へと調整される。

本開示の抗体は、活性薬剤及び任意の所望の添加剤を分散する能力を有する、親水性化合物を含みうる、基剤中又は媒体中に分散されうる。基剤は、ポリカルボン酸又はその塩、カルボン酸無水物（例えば、無水マレイン酸）の、他の単量体（例えば、アクリル酸（メタクリル酸）メチル、アクリル酸など）とのコポリマー、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンなどの親水性ビニルポリマー、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどのセルロース誘導体並びにキトサン、コラーゲン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ヒアルロン酸及びこれらの非毒性金属塩などの天然ポリマーを含むが、これらに限定されない、広範囲にわたる適切な担体から選択されうる。生体分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリ（乳酸－グリコール酸）コポリマー、ポリヒドロキシ酪酸、ポリ（ヒドロキシ酪酸－グリコール酸）コポリマー及びこれらの混合物が、基剤又は担体として選択されることが多い。代替的に、又は、加えて、ポリグリセリン脂肪酸エステル、スクロース脂肪酸エステルなどの合成脂肪酸エステルも、担体として利用されうる。親水性ポリマー及び他の担体は、単独において使用される場合もあり、組合せにおいて使用される場合もあり、部分的結晶化、イオン結合、架橋などにより、構造的完全性の増強が、担体へと付与されうる。担体は、鼻粘膜への直接的な適用のための、流体又は粘稠性溶液、ゲル、ペースト、粉末、微粒子及び薄膜を含む、様々な形態においてもたらされうる。この文脈における、選択された担体の使用は、活性薬剤の吸収の促進を結果としてもたらしうる。

一部の実施形態において、本開示の抗体は、錠剤、カプセル、静脈内投与のための注入バッグ又は単回用量バイアルなどの単位剤形である。適切な単位剤形は、有効量（本明細書において記載された有効量の具体例を含む）を含有しうる。有効量は、本開示の抗体の投与が適応である状態の各々のために適切にデザインされた臨床試験時における決定及び／又は変更が可能であり、当然ながら、所望の臨床エンドポイントに応じて変動する。

本開示はまた、対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染などの障害を処置及び防止するための製品も提示する。製品は、任意選択的に、本明細書において記載された、少なくとも１つのさらなる抗ウイルス化合物をさらに含有する、本開示の抗体又は本開示の抗体を含む医薬組成物を含む。製品は、医薬組成物が、処置及び／又は防止することが可能な、多様な障害についての表示と共に、パッケージングされうる。例えば、製品は、ある特定の障害を処置又は防止することが可能な、本開示の抗体の単位用量、及び単位用量が、ある特定の障害、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置又は防止することが可能であることの表示を含みうる。

検出及び診断
本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出及び診断のために使用されうる。検出は、当技術分野において公知である、任意の手段により、例えば、ＥＬＩＳＡを含むイムノアッセイによりなされうる。他のイムノアッセイは、酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ）、ＥＬＩＳＰＯＴ（ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｐｏｔ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、免疫蛍光法及びウェスタンブロット解析及び／又は免疫沈殿法を含むが、これらに限定されない、当技術分野において公知である、他のアッセイを含むが、これらに限定されない。

例えば、ＥＬＩＳＡ（直接ＥＬＩＳＡ又はサンドウィッチＥＬＩＳＡ）において、抗原、又は抗原を含む試料の、緩衝液を、マイクロ滴定プレートのウェルへと添加する。次いで、非特異的結合を防止するように、非反応性タンパク質溶液を、ウェルへと添加する。本開示の抗体又はその抗原結合断片を添加する。このような抗体又は抗原結合断片は、典型的に、ルシフェラーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ又はβ－Ｄ－ガラクトシダーゼなどであるが、これらに限定されない、レポーター分子へとコンジュゲートされる。本開示の抗体又はその抗原結合断片が、レポーター分子へとコンジュゲートされない場合、本開示の抗体を認知する二次抗体であって、レポーター分子へとコンジュゲートされた二次抗体を添加することができる。次いで、レポーター分子のための基質を添加して、検出可能なシグナルをもたらす。ＥＬＩＳＡは、定性的フォーマットにおいて行われる場合もあり、定量的フォーマットにおいて行われる場合もある。定性的結果は、試料についての、単純な陽性結果又は陰性結果（「あり」又は「なし」）をもたらす。競合的ＥＬＩＳＡもまた、使用されうる。このフォーマットにおいて、標識されていない、本開示の抗体又はその抗原結合断片（レポーター分子へとコンジュゲートされている場合もあり、標識されていない場合もある、一次抗体）を、抗原を含有する試料の存在下においてインキュベートし、次いで、この混合物を、同じ抗原（参照抗原）によりコーティングされたマイクロ滴定プレートへと添加する。結合しなかった抗体を除去するように、プレートを洗浄する。一次抗体が、レポーター分子へとコンジュゲートされていない場合、レポーター分子へとコンジュゲートされた二次抗体であって、一次抗体に特異的な二次抗体を添加して、検出可能なシグナルを発生させる。試料中の抗原の量に応じて、参照抗原に結合可能な一次抗体が、抗原より多くなる、又は少なくなる。これは、試料中に存在する抗原が多いほど、少数の参照抗原が検出され、検出可能なシグナルが弱くなることを意味する。標識化抗体ではなく、標識化抗原を使用することができる。このフォーマットにおいて、試料中の抗原が少ないほど、標識化抗原が保持され、検出可能なシグナル結果が強くなる。

ＲＩＡにおいて、典型的に、既知数量の抗原は、Ｉ－１２５などであるが、これらに限定されない放射性トレーサーへと連結し、次いで、これを、抗原（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質など）に結合する、既知量の本開示の抗体と混合する。その後、未知数量の抗原を含有する試料を添加する、標識されていない抗原の濃度が増大するので、抗体と、標識化標準物質との結合が低下するが、これは、放射能を測定することにより、直接測定可能である。

一態様において、本開示は、患者におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を決定（イムノアッセイによる決定など）するための方法であって、ａ）患者に由来する身体試料を、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片及び検出用標識と共にインキュベートして、決定可能基を含有する免疫複合体を形成させるステップであって、検出用標識が、抗体若しくはその抗原結合断片上に存在する、又は検出用標識が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２又は抗体若しくはその抗原結合断片に対する結合パートナー上に存在するステップ；並びにｂ）試料中の検出用標識の存在を決定するステップであって、検出用標識の存在が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、試料中に存在することを指し示すステップを含む方法を提示する。

一実施形態において、このような方法は、免疫複合体を、試料から単離するステップ、及び単離された免疫複合体内又は残余の試料中における、検出用標識の存在を決定するステップをさらに含みうる。

ある特定の実施形態において、身体試料は、血清試料、血液試料、血漿試料、咽頭スワブ試料、鼻咽頭スワブ試料、痰試料、糞便試料、尿試料、唾液試料又は気管支肺胞洗浄液試料である。

本明細書において記載された、任意のアッセイは、診断を目的として使用されうる。したがって、本開示は、本開示の抗体を使用して、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を診断する方法を提示する。このような診断的使用は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が存在するのかどうかを決定し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染からの回復をモニタリングし、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置するための治療処置の有効性について査定することへと方向付けられる場合があり、当技術分野において公知である、他の目的のために方向付けられうる。

キット
本開示はまた、本明細書において記載された方法における使用のためのキットであって、本開示の抗体又はその薬学的に許容される形態並びに以下：（ｉ）少なくとも１つの他の治療剤；（ｉｉ）緩衝剤；（ｉｉｉ）本開示の抗体又はその薬学的に許容される形態を、対象へと投与して、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置する、又は試料（対象に由来する試料など）中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出するための指示書のうちの少なくとも１つを含むキットも提示する。

開示されたキットについての一実施形態において、対象は、ヒトである。開示されたキットについての一実施形態において、抗体は、表１又は表２Ａ～２Ｈによる抗体、上記において記載された、第１の実施形態～第４の実施形態又は第１の実施形態～第４の実施形態についての具体的側面のうちのいずれかによる抗体である。

本開示は、以下の非限定的実施例により、さらに記載される。

［実施例１］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２特異的抗体の同定、精製、シーケンシング及び組換え作製
末梢血試料は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の検証時において、又はこの検証後において、単一の個体から得た。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、密度勾配精製により単離した。

ＳＡＲ－ＣｏＶ－２スパイク受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）特異的Ｂ細胞を得るために、ＰＢＭＣを、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＩｇＤ－ＰＥ抗体、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ１４抗体に加えた、カスタムにより作出された、蛍光コンジュゲート組換えＲＢＤ四量体タンパク質により、Ｋｏｂｉｅら、ＭｏｎｏｃｌｏｎＡｎｔｉｂＩｍｍｕｎｏｄｉａｇｎＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、２０１５年４月１日、３４（２）：６５～７２において記載されているのと同様に、４℃において、６０分間にわたり染色した。ＦＡＣＳＭｅｌｏｄｙｃｅｌｌｓｏｒｔｅｒ（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、単一のＣＤ３－ＣＤ１４－ＣＤ１９＋ＲＢＤ＋細胞を、０．５倍濃度のＰＢＳウェル１つ当たり４μＬを、１０ｍＭのＤＴＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び８ＵのＲｉｂｏＬｏｃｋ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）ＲＮアーゼ阻害剤と共に含有する９６ウェルＰＣＲプレート（Ｂｉｏ－Ｒａｄ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、Ｃａｌｉｆ．）へと、直接分取した。ＭＩＣＲＯＳＥＡＬＦＦＩＬＭ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）により、プレートをシーリングし、ＲＴ－ＰＣＲのために使用されるまで、－８０℃において瞬時凍結させた。

Ｋｏｂｉｅらにおいて既に記載されている通りに、ｃＤＮＡを合成し、ＩｇＨ、Ｉｇλ及びＩｇκのＶ遺伝子転写物についてのセミネステッドＲＴ－ＰＣＲを実施した。ＩｇＧ１発現ベクターのクローニング及びヒトＨＥＫ２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、Ｖａ．）のトランスフェクションは、Ｋｏｂｉｅら、ＭｏｎｏｃｌｏｎＡｎｔｉｂＩｍｍｕｎｏｄｉａｇｎＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、２０１５年４月１日、３４（２）：６５～７２及びＴｉｌｌｅｒら、ＪＩｍｍｕｎｏｌＭｅｔｈｏｄｓ．、２００８年１月１日、３２９（１～２）：１１２～１２４において既に記載されている通りに実施した。ＰＣＲ産物は、ＧｅｎｅｗｉｚＳｅｑｕｅｎｃｅにおいてシーケンシングされ、同一性が最大である生殖細胞系列Ｖ（Ｄ）Ｊ遺伝子セグメントを同定し、配列特性を決定するように、ＩｇＢｌａｓｔ及びＩＭＧＴ／Ｖ－ＱＵＥＳＴにより解析した（表３に示される）。ＭＡＧＮＡＰＲＯＴＥＩＮＧビーズ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓ．）を使用して、ＩｇＧを、培養物上清から精製した。

表３は、各抗体のほか、元の抗体アイソタイプについて、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のための、生殖細胞系列Ｖ（Ｄ）Ｊを指し示す、本開示のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｈｍＡｂについての記載を提示する。

［実施例２］
本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タンパク質に結合する
本開示の抗体が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質に結合したのかどうかを決定するために、結合実験を実施した。ＥＬＩＳＡプレートを、以下の組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ポリペプチド：ｉ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）ポリペプチド（配列番号１６２）；ｉｉ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１ドメインポリペプチド（ＲＢＤを含有する）（配列番号１６３）；ｉｉｉ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１ドメインポリペプチド及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ２ドメインポリペプチド（配列番号１６４）；並びにｉｖ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ヌクレオタンパク質（Ｎ；陰性対照）（配列番号１６５）によりコーティングした。ＣＲ３０２２抗体（スパイクタンパク質に特異的に結合する組換えヒト抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶモノクローナル抗体）を、陽性対照として用いる一方、ＰＢＳだけと共にインキュベートされた（組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ポリペプチドを伴わない）ウェルもまた、陰性対照として用いた。組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ポリペプチドを、１μｇ／ｍｌの濃度においてコーティングし、プレートを、ＰＢＳ中に３％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）によりブロッキングした。本開示の抗体を、ＰＢＳ中において希釈し、１及び１０μｇ／ｍｌにおいて調べた。抗体の結合は、西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲート抗ヒトＩｇＧを使用して検出した。結果を、図１において、１及び１０μｇ／ｍｌの抗体濃度の両方について、ＯＤ読取りの曲線下面積として表された値と共に示す。

図１から見られる通り、本開示の抗体は、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質ポリペプチドに、特異的に結合したが、陰性対照であるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｎポリペプチドへの著明な結合を示さなかった。図１はまた、本開示の抗体が、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤポリペプチドに対して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１ポリペプチドポリペプチド及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１＋Ｓ２ポリペプチドと比較して、より優先的な結合を示したことも示す。抗体である、１２１３Ｈ７、１２０６Ｄ１、１２１２Ｄ４、１２０６Ｄ１２、１２０７Ｆ１０及び１２０６Ｇ１２が、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤポリペプチドに対して、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１ポリペプチドと比較して、２倍以上の結合を示したことは、全長ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質内において、エピトープの少なくとも一部が、遮蔽されうることを示唆する。これに対し、抗体である、１２１２Ｃ２、１２１２Ｆ２、１２１２Ｄ５、１２０６Ａ５、１２１２Ｄ６及び１２０６Ｄ１２は、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤポリペプチドへの結合において、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１ポリペプチド及び組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓ１＋Ｓ２ポリペプチドと比較して、最小の差違を示した。

［実施例３］
本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞に結合する
本開示の抗体が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞に結合したのかどうかを決定するために、結合実験を実施した。ＶｅｒｏＥ６細胞に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス（ＢＥＩＲｅｓｏｕｒｃｅｓ（ＮＲ－５２２８１）から得られた、ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０（ＧｅｎＢａｎｋ：受託番号：ＭＮ９８５３２５．１））を感染させる、又はモック感染させ、感染後異なる時間にわたり、インキュベートした。次いで、細胞を、４％の中性ホルムアルデヒドにより、３０分間にわたり固定するのに続き、０．５％のｔｒｉｔｏｎＸ－１００を、１５分間にわたり使用して、透過化処理を行った。次いで、細胞を、２．５％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）により、３７℃において、１時間にわたりブロッキングした。次いで、細胞を、表示の抗体（１μｇ／ｍｌ）と共に、３７℃において、１時間にわたりインキュベートするのに続き、ＦＩＴＣコンジュゲート抗ヒトＩｇＧ二次Ａｂを伴うインキュベーションを行った。蛍光顕微鏡を使用して、ＦＩＴＣＡｂの画像を撮影した。

結果を、図２に示す。全ての被験抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞に結合したが、モック感染細胞への有意な結合は見られなかった。

［実施例４］
本開示の抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体により、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを中和した
ＰＲＭＮＴ（ｐｌａｑｕｅｒｅｄｕｃｔｉｏｎｍｉｃｒｏｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ）アッセイを使用して、本開示の抗体が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを中和する能力について解析した。Ａｂ含有試料の系列希釈液を使用するので、ＰＲＭＮＴアッセイは、Ａｂの中和活性を、濃度依存的に測定する。中和抗体が、ウイルス感染を阻害する能力は、ウイルスが、目視可能なプラークを産生する能力の、ウイルスに感染しただけの対照細胞と比較した場合の低減において顕示される。ＰＲＭＮＴアッセイは、ＰＲＭＮＴが、９６ウェルプレートを活用することが異なる以外は、プラーク減少中和アッセイと同様である。

抗体が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを中和する能力は、２つの異なる手法である、処理前法及び処理後法を使用して決定した。処理前実験において、本開示の抗体を、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と共に、３７℃において、１時間にわたりプレインキュベートする。これは、抗体が、スパイクタンパク質に結合し、ウイルスの付着を遮断し、その後、ウイルスの侵入過程に干渉することを可能とする。処理後実験において、ウイルスの吸着を、３７℃において、１時間にわたり進行させる。これは、ウイルスに、細胞表面受容体（ＡＣＥ２）に結合することにより、ウイルス侵入を開始する機会を与える。感染細胞と共にインキュベートされた抗体は、後続の細胞へのウイルス侵入ステップを、部分的に遮断することにより、かつ／又は細胞間におけるウイルス後代の蔓延を阻害することにより、活動性のウイルス複製に干渉しうる。処理前実験及び処理後実験のいずれにおいても、ウイルス中和の程度は、交差反応性抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１抗体による染色時に視覚化することができ、５０％中和力価（ＮＴ_５０）は、Ｓ字型用量反応曲線を使用して計算される。抗体のＮＴ_５０は、感染細胞のうちの５０％において、ウイルスの複製を阻害した希釈率である。

処理前ＰＲＭＮＴアッセイが、ある程度まで、抗体活性についての予防的評価として記載されうるのに対し、処理後ＰＲＭＮＴアッセイは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する、Ａｂの中和活性についての治療的査定をもたらす。加えて、処理前ＰＲＭＮＴアッセイが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質ＲＢＤをターゲティングする抗体の同定に焦点を当てるのに対し、処理後ＰＲＭＮＴアッセイは、タンパク質分解性切断ステップ（例えば、Ｓ１領域）、融合イベント（例えば、Ｓ２領域）に関与する、ウイルススパイクタンパク質上の他の領域をターゲティングする抗体又はウイルスの複製周期（例えば、ウイルスのアセンブリー及び／又は発芽）における他のステップに影響を及ぼす抗体の同定を可能とする。一般に、強力なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２中和抗体が、低ＮＴ_５０力価を示すのに対し、弱い中和抗体は、高ＮＴ_５０値をもたらす。

処理前実験のために、ウェル１つ当たり１００ＰＦＵのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＢＥＩＲｅｓｏｕｒｃｅｓ製のＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０（ＮＲ－５２２８１））を、１００μｌの感染培地（１％のペニシリン－ストレプトマイシン－Ｌ－グルタミン酸を伴うＤＭＥＭ）中の濃度を減少させる、本開示の抗体（出発濃度を、ウェル１つ当たり２５，０００ｎｇとする、本開示の抗体についての、２倍希釈液）と混合し、感染培地中、３７℃、５％のＣＯ_２において、１時間にわたりインキュベートした。ＶｅｒｏＨＬ細胞（９６ウェルプレートフォーマット、ウェル１つ当たりの細胞４×１０^４個、四連）に、ウイルス－抗体混合物を感染させ、１時間にわたりインキュベートした（ウイルスの吸着）。インキュベーションの１時間後、培地を、感染後培地（２％のＦＢＳ及び１％のＡｖｉｃｅｌを含有するＤＭＥＭ）により置きかえた。

処理後実験のために、感染培地中のＶｅｒｏＨＬ細胞（９６ウェルプレートフォーマット、ウェル１つ当たりの細胞４×１０^４個、四連）に、ウェル１つ当たり１００ＰＦＵの、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＢＥＩＲｅｓｏｕｒｃｅｓ製のＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０（ＮＲ－５２２８１））を感染させた。ウイルスの吸着の１時間後、感染培地を、濃度を減少させる、本開示の抗体（出発濃度を、５０，０００又は２５，０００ｎｇ／ｍｌとする、本開示の抗体についての、２倍希釈液）を含有する、１００μｌの感染後培地と交換した。

感染の２４時間後、感染細胞（処理前細胞及び処理後細胞の両方）を、１０％の中性ホルマリンにより、２４時間にわたり固定し、抗ＮＰ（ヌクレオタンパク質）モノクローナル１Ｃ７Ｃ７抗体を使用して、免疫染色した。ＥＬＩＳＰＯＴを使用して、ウイルスの中和について、査定及び定量し、Ｓ字型用量反応曲線を使用して、感染性の百分率を計算した。モック感染細胞及び本開示の抗体の非存在下におけるウイルスを、内部対照として使用した。

結果を、下記の表４に示す。結果は、本開示の抗体が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２中和抗体であることを示す。被験抗体のうちの９つは、処理前条件及び処理後条件において、同様の活性を提示した（処理前条件及び処理後条件について、ＮＴ_５０値が、互いの２倍以内であった）。被験抗体のうちの８つは、処理前条件及び処理後条件において、異なる活性を提示した（処理前条件及び処理後条件について、ＮＴ_５０値が、互いの２倍を超えた）。

抗体である１２１２Ｃ２が、処理前条件及び処理後条件のいずれにおいても、強力な中和活性を呈し、各アッセイにおけるＮＴ_５０値が、＜５０ｎｇ／ｍｌであったことは注目に値する。抗体である１２１２Ｃ２は、組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤポリペプチドに対する、強い結合を呈した（図１）。同様に、抗体である１２１２Ｆ５及び１２１３Ｈ７は、処理前条件及び処理後条件のいずれにおいても、強力な中和活性を呈し、各アッセイにおけるＮＴ_５０値は、＜１００ｎｇ／ｍｌであった。

［実施例５］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２受容体結合ドメインに対する、高アフィニティー及び顕著に異なる結合プロファイル
ｈｍＡｂの、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクＲＢＤに対するアフィニティーを確認するために、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を実施した。ＳＰＲ実験は、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．００７５％のＰ２０及び１００μｇ／ｍＬのＢＳＡからなるランニング緩衝剤を使用して、ＢｉａｃｏｒｅＴ２００（Ｃｙｔｉｖａ）上、２５℃において実施した。アフィニティーを測定するために、ヒトＩｇＧ捕捉キット（Ｃｙｔｉｖａ）を使用して、抗体を、ＣＭ－５センサーチップ上に捕捉した。全てのＳＰＲアフィニティー実験は、二重参照実験とした（例えば、センサーグラムデータを、対照表面データ及び緩衝剤ブランク注入データから差し引いた）。全ての実験のための対照表面は、捕捉抗体からなった。約１００ＲＵの各ｈｍＡｂを、チップ表面へと捕捉した。ＲＢＤを、４つの濃度（８０ｎＭ、２０ｎＭ、５ｎＭ及び１．２５ｎＭ）において、９０秒間にわたり、ＮｍＡｂ上に注入するのに続き、３００秒間にわたる解離相にかけた。各回の注入の後、表面を、３ＭのＭｇＣｌ２による３０秒間にわたるパルスにより再生するのに続き、新たなｈｍＡｂの捕捉を行った。アフィニティー解析のための緩衝剤の流量は、５０μＬ／分であった。ＢｉａｃｏｒｅＴ－２００ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓｏｆｔｗａｒｅｖｅｒｓｉｏｎ１．０を使用して、バルク指数補正を伴わずに、センサーグラムを、１：１モデルへと全体的に当てはめた。速度定数についての標準誤差は、当てはめられたセンサーグラムデータから得た。反復ＫＤ誤差は、ＮｍＡｂ－ＲＢＤ間相互作用のうちの４つ（１２１２Ｃ２、１２０６Ｄ１、１２１５Ｄ１及びＣＢ６／ＪＳ０１６による）について、実験を反復することにより推定した。これらの実験による標準偏差を使用して、１１％の平均ＫＤ誤差を規定した。

下記の図３及び表５に示される通り、この解析は、７１ｐＭ～約１０ｎＭの範囲の平衡解離定数（ＫＤ）を呈する、様々な高アフィニティーｈｍＡｂを裏付けた。ｈｍＡｂのうちのいくつか（１２１２Ｃ２、１２１５Ｄ１、１２１５Ｄ５）は、主に、それらの小さなオフ速度（ｋｄ）のために、対照ｈｍＡｂ（ＲＥＧＮ１０９８７、ＲＥＧＮ１０９３３，２０及びＣＢ６／ＪＳ０１６１７）の約８倍以上の、ＲＢＤに対するアフィニティーを呈した。これらの結果は、ｈｍＡｂについてのこのパネルが、固有の特徴及び高アフィニティーを伴い、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤを、特異的に認識することを指し示す。

［実施例６］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体による、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株の、広範かつ顕著に異なる中和
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、スパイクタンパク質内の突然変異を含む、実質的な突然変異を経ており、このような突然変異は、抗体が、これらの新興変異体を認識する能力に影響を与えた。ＶｏＣ（ｖａｒｉａｎｔｓｏｆｃｏｎｃｅｒｎ）株は、特に、ヒトの健康に対して脅威となりつつあり、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２パンデミックの複数の波を駆動している。ＶｏＣについて、スパイク内の突然変異の規定は、米国疾病予防管理センター及びＮｅｘｔｓｔｒａｉｎにより報告された、以下の通りである。ベータ：Ｄ８０Ａ、Ｄ２１５Ｇ、ｄｅｌ２４１～２４３、Ｋ４１７Ｎ、Ｅ４８４Ｋ、Ｎ５０１Ｙ、Ｄ６１４Ｇ、Ａ７０１Ｖである。デルタ：Ｔ１９Ｒ、ｄｅｌ１５６～１５７Ｒ１５８Ｇ、Ｌ４５２Ｒ、Ｔ４７８Ｋ、Ｄ６１４Ｇ、Ｐ６８１Ｒ、Ｄ９５０Ｎである。ガンマ：Ｌ１８Ｆ、Ｔ２０Ｎ、Ｐ２６Ｓ、Ｄ１３８Ｙ、Ｒ１９０Ｓ、Ｋ４１７Ｔ、Ｅ４８４Ｋ、Ｎ５０１Ｙ、Ｄ６１４Ｇ、Ｈ６５５Ｙ、Ｔ１０２７Ｉ、Ｖ１１７６Ｆである。イプシロン：Ｓ１３Ｉ、Ｗ１５２Ｃ、Ｌ４５２Ｒ、Ｄ６１４Ｇである。

野生型ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０ウイルスの、ＶｏＣ（ｖａｒｉａｎｔｓｏｆｃｏｎｃｅｒｎ）株である、（ＷＨＯ表示による）ベータ株、ガンマ株、デルタ株及びイプシロン株並びにＲＢＤ内に、単一突然変異又は三重突然変異を含有する組換えウイルスに対する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体の、インビトロにおける中和活性について調べた。ｈｍＡｂを、Ｊｕｎ－ＧｙｕＰａｒｋら、ＪＶｉｒｏｌＭｅｔｈｏｄｓ．、２０２１年１月、２８７：１１３９９５において記載されている通りに、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（分離株である、ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０；ＢＥＩＲｅｓｏｕｒｃｅｓ）の中和について調べた。ｈｍＡｂについての２倍希釈液（出発濃度：５μｇ／ｍｌ）を含有する、ウェル１つ当たり１００～２００プラーク形成単位（ＰＦＵ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を、１００μＬの培地中に混合し、３７℃において、１時間にわたりインキュベートした。ＶｅｒｏＥ６細胞（９６ウェルプレートフォーマット、ウェル１つ当たりの細胞４×１０^４個、四連）に、ウイルスの吸着のために、１時間にわたり、ウイルス－ｈｍＡｂ混合物又はウイルス－血清混合物（対照ウェル）を感染させるのに続き、培地を、２％のＦＢＳ、１％のペニシリン－ストレプトマイシンＬグルタミン（ＰＳＧ）、及び１％のＡｖｉｃｅｌを含有する感染後培地と交換した。感染の２４時間後、感染細胞を、１０％の中性ホルマリンにより、２４時間にわたり固定し、抗ＮＰモノクローナル１Ｃ７Ｃ７抗体を使用して免疫染色した。ＥＬＩＳＰＯＴを使用して、ウイルスの中和について、査定及び定量し、Ｓ字型用量反応曲線を使用して、感染性の百分率を計算した。各濃度についてのウイルス感染パーセントを計算する式は、［（各処理ウェルによる平均プラーク数－「ウイルスなしの」ウェルによる平均プラーク数）／（「ウイルスだけの」ウェルによる平均プラーク数－「ウイルスなしの」ウェルによる平均プラーク数）］×１００として与えられる。ＮＴ５０を計算するように、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍを使用して、希釈曲線に対する、非線形回帰曲線による当てはめ解析を実施することができる。モック感染細胞及びｈｍＡｂの非存在下におけるウイルスを、内部対照として使用した。

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株に対する、固有の中和プロファイルを示す。１２１２Ｃ２は、ＷＡ１株、デルタ株、イプシロン株及びｒＫ４１７株に対するＮＴ_５０を、＜５０ｎｇ／ｍｌとする、強力な中和を示す。１２１２Ｃ２による中和は、ｒＮ５０１に対して、ある程度減少しており、ベータ株、ガンマ株、ｒＥ４８４Ｋ株又はｒＫ４１７Ｎ／Ｅ４８４Ｋ／Ｎ５０１Ｙ三重突然変異変異株に対して明らかでない。このパターンは、ＣＢ６／ＪＳ０１６、ＲＧＮ１０９３３及びＲＧＮ１０９８７と顕著に異なる。１２１３Ｈ７は、全ての被験ウイルスを中和することが可能であり、これは、ＣＢ６／ＪＳ０１６及びＲＧＮ１０９３３と対照的である。１２１３Ｈ７は、ＷＡ１株及びｒＫ４１７Ｎ／Ｅ４８４Ｋ／Ｎ５０１Ｙ三重突然変異変異株に対して、ＲＧＮ１０８７と比較して、優れた中和活性を有する。

上記の表６は、表示の生ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＶｏＣ（ｖａｒｉａｎｔｓｏｆｃｏｎｃｅｒｎ）株による、表示のｈｍＡｂの、インビトロにおける中和を示す。

［実施例７］
１２１２Ｃ２の重鎖可変残基を修飾することによる、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の中和の改善
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体である１２１２Ｃ２の活性を改善しようとする取組みにおいて、重鎖の可変領域内のアミノ酸が変更された、一連のｍＡｂを合成した（図４Ａ）。特に、相補性決定領域内のアミノ酸及びこれと近接するアミノ酸を修飾した。これらの１２１２Ｃ２変異体ｍＡｂを、中和活性について調べた。変化である、Ｉ２８Ｔ、Ｉ３４Ｍ、Ｈ９３Ｙ、Ｔ９６Ａ、Ｓ１１４Ｙを、１２１２Ｃ２へと導入することにより、１２１２Ｃ２－Ｖ１（図４Ｃ）を創出する結果として、中和効力の３３％の増大をもたらした。Ｑ１Ｅ、Ｑ６Ｅ、Ｉ２８Ｔ、Ｄ３１Ａ、Ｉ３４Ｌ、Ｈ９３Ｙ、Ｔ９６Ａ、Ｓ１１４Ｙを導入することにより、１２１２Ｃ２－Ｖ２（図４Ｄ）を創出する結果として、中和効力の少なくとも４４％の増大をもたらした。これらの結果は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して、その活性を改善しうる、１２１２Ｃ２（図４Ａ）の改変を指し示す。

［実施例８］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、ハムスターにおいて、予防活性及び治療活性を有する
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体である１２１２Ｃ２及び１２０６Ｄ１のインビボ活性を、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染についてのゴールデンシリアハムスターモデルにおいて査定した。予防的活性について調べるために、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の鼻腔内（ｉ．ｎ．）における抗原投与の６時間前に、１０ｍｇ／ｋｇのｈｍＡｂを、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射により投与した。感染の２日後（ｄｐｉ）に、全てのＰＢＳ対照ハムスター及びアイソタイプ対照ハムスターは、それらの鼻甲介及び肺におけるプラークアッセイにより測定される通り、検出可能な生ウイルスを有した。これに対し、感染の２日後に既に、１２１２Ｃ２を施されたハムスターは、それらの鼻甲介及び肺において、有意味なウイルス量の低減を呈し始めた（図５Ａ）。感染の４日後に、ＰＢＳ対照群及びアイソタイプ対照群におけるハムスターの全ての鼻甲介及び肺において、ウイルスを検出したが、感染の２日後と比較した、全体的な減少は、ハムスターにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染のウイルス動態と符合した。感染の４日後における対照群と比較して、予防的に処置された１２１２Ｃ２ハムスターは、動物４匹中３匹の鼻甲介及び肺における、ウイルス量の根絶を呈した。１２１２Ｃ２処置動物が、感染の２日後（ｐ＝０．０３３４）及び感染の４日後（ｐ＝０．０００４）におけるＰＢＳ処置群と比較して、有意に少数の肺病態を呈したことは、ウイルス量の低減と符合し、この低減もまた、感染の４日後におけるアイソタイプ対照群と比較して、有意性に到達した（ｐ＜０．０００１）（図５Ｃ）。１２１２Ｃ２が、予防的に施された場合に、感染の４日後に、肺病態の、約８０％の低減が見られた。１２０６Ｄ１ｈｍＡｂは、ＰＢＳ対照群及びアイソタイプ対照群と比較して、力価を低下させる傾向を示したが、鼻甲介において、検出可能なウイルスを有さないハムスターのうちの５０％及び肺において、検出可能なウイルスを有する、全ての１２０６Ｄ１ハムスターに顕著である、微弱な活性を呈した。これらのインビボ結果は、１２１２Ｃ２と比較した、１２０６Ｄ１の、インビトロにおけるウイルス中和活性の低下と符合する。全体として、１２１２Ｃ２は、ハムスターのうちの６３％における殺菌保護に見られた通り、実質的な予防活性を示した。

ハムスターの、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、ｉ．ｎ．感染の６時間後における、２５ｍｇ／ｋｇの１２１２Ｃ２を伴う処置により、治療活性について調べ、ｈｍＡｂのアベイラビリティーの限定のために、感染の４日後だけにおいて、ウイルス負荷を査定した。ＰＢＳ対照群内及びアイソタイプ対照群内の動物４匹中３匹の鼻甲介において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出した。１２１２Ｃ２処置ハムスターの鼻甲介において、ウイルスは検出されなかった。全てのＰＢＳ対照処置ハムスター及びアイソタイプ対照処置ハムスターの肺においてにおいて、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出したが、１２１２Ｃ２処置ハムスターにおいて、４匹中１匹だけであった（図５Ｂ）。全体として、１２１２Ｃ２は、処置ハムスターのうちの７５％において、ウイルスを、検出不能なレベルまで低減する、実質的な治療活性を示した。ハムスターにおけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染は、密化、うっ血及び無気肺を含む、肉眼的肺病変を結果としてもたらす。治療的にもまた、１２１２Ｃ２処置ハムスター群において、ＰＢＳ処置群と比較して、有意に少数の肺病態が観察され（ｐ＝０．０１３６）、１２１２Ｃ２群において、肺病態は、対照ハムスターと比較して、約５８％低減された（図５Ｄ）。重要なことは、肺病変内において観察された、これらの差違が、上気道及び下気道（Ａ＋Ｂ）において見られた、ウイルス負荷と符合することである。全体として、これらの結果は、予防的に又は治療的に使用された場合に、１２１２Ｃ２が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染のウイルス負荷及び肺病態を実質的に低減する能力を裏付ける。

［実施例９］
吸入型ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体の送達
治療用ｍＡｂは、典型的に、静脈内注入又は筋内注射を介して、全身送達する。このような送達は、典型的に、注入用量のうちの＜０．１％である、肺上皮層体液中のＣｍａｘを結果としてもたらし、このため、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２など、呼吸器感染に対する保護又は処置のために、気道内の最適濃度の達成において、極めて非効率的である。

肺送達投与の効率及びｉ．ｐ．ボーラス投与として送達された場合のＩｇＧ１ｈｍＡｂの、吸入型噴霧エアゾールと比較したクリアランスについて査定するために、ハムスターに、抗原投与研究において使用された、非特異的ＩｇＧを投与し、投与の３０分後及び４２時間後における、血清濃度及び気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬ）濃度について解析した。ｈｍＡｂ約２５ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与は、高血清濃度を結果としてもたらしたが、処置の３０分後、ＢＡＬ中において、ｈｍＡｂは、ほとんど～全く検出できなかった。しかし、４２時間後、ＢＡＬ中において、ｈｍＡｂが検出できたことは、ｉ．ｐ．注入されたｈｍＡｂが、徐々に、血清コンパートメントから、肺に浸透することを示唆する。市販の噴霧器（ＡｅｒｏｇｅｎＡｅｒｏｎｅｂＳｏｌｏｎｅｂｕｌｉｚｅｒ）から、動物へと全身送達された、液体エアゾールを使用するｈｍＡｂの吸入（ＩＨ）投与は、吸入投与による用量のうちの、約１．７％が、ＢＡＬ中に沈着することを示した。吸入投与による用量のうちの、低百分率の用量が、ハムスターの肺内に沈着したことは、本実施例において使用された噴霧器によりもたらされた、直径約４μｍの（レーザー回折により測定された、体積平均径を、４．１μｍとする）液滴についての、かつての肺内取込み研究と符合するが、これは、小動物の上気道内における、液体エアゾールによる、高度の慣性衝突の結果である。しかしながら、これらの肺内（ＢＡＬ中）沈着用量は、いずれの時点においても、やはり、ｉ．ｐ．経路により達成されたＢＡＬ濃度より、実質的に高用量であった。吸入経路によりもたらされた、より高い肺内沈着用量は、肺への送達効率が、ｉ．ｐ．経路より高度であることを裏付ける。吸入投与の４２時間後、ｍＡｂのうちの大半（ＩＨ投与＜３０分後において、ＩＨ投与による容量のうちの約８５％）が、ＢＡＬからクリアランスされたが、これは、他の研究において報告された、約８日間の予測肺内半減期より、急速なクリアランス速度であると考えられる。

［実施例１０］
１２１２Ｃ２の吸入送達は、ハムスターにおけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に対して、腹腔内送達と比較して、より有効な治療活性をもたらす
Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）の結合及び後続のＦｃ媒介エフェクター機能を低減するように、１２１２Ｃ２のＦｃ（ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｂｌｅｆｒａｇｍｅｎｔ）を、ＬＡＬＡ突然変異（すなわち、Ｌｅｕ２３４Ａｌａを、Ｌｅｕ２３５Ａｌａと併せた、二重突然変異）により改変し、半減期を延長するように、さらに改変した（突然変異である、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ（ＹＴＥ）を伴い、１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡと称した）。吸入型１２１２Ｃ２の有効性を決定し、治療用量反応関係について査定するために、ハムスターに、２×１０^５プラーク形成単位（ＰＦＵ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を、ｉ．ｎ．において感染させ、吸入（ＩＨ）経路又はｉ．ｐ．経路を使用した１２時間後において、１２１２Ｃ２ｈｍＡｂ又はアイソタイプ対照ｈｍＡｂの単回用量により処置した。感染後２日目及び４日目に、有効性の尺度として、体重を記録し、肺病変を測定し、ウイルス力価を、鼻甲介及び肺から定量した。感染の２日後に、全ての感染対照ハムスター（ＰＢＳ対照及びアイソタイプ対照ｈｍＡｂ）の鼻甲介及び肺において、ウイルスを検出した（図６Ａ）。１６．３ｍｇ／ｋｇの１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡにより、ＩＨを介して処置された任意のハムスターの肺内において、ウイルスは、検出されず、それらの鼻甲介において、ウイルスは、対照と比較して低下した。これに対し、感染の２日後の、２５ｍｇ／ｋｇの１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡにより、ｉ．ｐ．処置されたハムスターのうちの、５０％の肺において、ウイルスは検出され、鼻甲介においても、対照と比較して、それほど低下しなかった。感染の２日後に、ウイルスは、肺送達用量を、３．２ｍｇ／ｋｇ及び０．６ｍｇ／ｋｇとする、１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡにより、ＩＨを介して処置されたハムスターのうちの、それぞれ、２５％及び５０％の肺だけにおいて検出された。感染の２日後に、１６．３及び３．２ｍｇ／ｋｇの吸入型１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡは、肺内のウイルス力価の低減において、ｉ．ｐ．投与と比較して優れていた。感染の４日後に、全ての感染対照ハムスター（生理食塩水及びアイソタイプｈｍＡｂ）の鼻甲介及び肺において、ウイルスを検出し、アイソタイプ対照ｈｍＡｂによる、ウイルス力価の、微弱な非特異的低減への傾向は、鼻甲介だけに限られた（図６Ｂ）。０．６ｍｇ／ｋｇ吸入型１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡ群の全てにおいて、ウイルスが検出されたことを除き、１２１２Ｃ２処置群の鼻甲介におけるウイルス力価の検出は、散発的な検出に過ぎなかった。感染の４日後に、０．６ｍｇ／ｋｇＩＨ１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡ群を含む、いずれの１２１２Ｃ２処置ハムスターの肺内においても、ウイルス力価が検出されなかったことは、対照群と比較した、少なくとも２ｌｏｇの低減を表す。対照ＰＢＳ処置ハムスターは、約１０％の最大体重減少を呈したが；１２１２Ｃ２処置動物は、評価可能な体重減少を示さなかった。感染の４日後、特に、対照群において、肺病態は明らかとなったが；全体的に、非感染ハムスターと比べて、２４匹中９匹（３７．５％）の１２１２Ｃ２処置ハムスターにおいて、肺病態は、１２匹中１１匹（９１．７％）の対照処置感染ハムスターにおいて明らかな肺病態と比較して、明らかとならなかった（図６Ｃ）。感染の４日後、３．２ｍｇ／ｋｇの吸入型１２１２Ｃ２ｈｍＡｂにより処理されたハムスターにおいて、肺病変は、ＰＢＳ処置ハムスターと比較して、有意に（ｐ＝０．００２８）低下した。ＬＡＬＡ突然変異の付加によりもたらされた、エフェクター機能の除去に関して、１２１２Ｃ２－ＨＬＥ－ＬＡＬＡにより処置された動物は、非改変１２１２Ｃ２ｍＡｂと同等のウイルス低減を達成すると考えられた。全体として、これらの結果は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に対する、１２１２Ｃ２ｈｍＡｂの治療活性を確認したことから、わずか０．６ｍｇ／ｋｇの単回吸入投与により、肺内ウイルス負荷の消失をもたらした、吸入型１２１２Ｃ２ｈｍＡｂによる有効性の増大を示唆した。さらに、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染ハムスターの吸入治療処置は、体重を保存することが示された（図７）。

［実施例１１］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、マウスにおけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を防止する
１２１２Ｃ２ｍＡｂの有効性を、Ｋ１８ヒトアンジオテンシン転換酵素２（ｈＡＣＥ２）トランスジェニックマウスにおいて調べた。Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスを、１２１２Ｃ２により予防処置し、次いで、１２時間後に、これらに、Ｎａｎｏルシフェラーゼを発現させる組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａ）を感染させた（１０^５ＰＦＵ）。マウスについての、非侵襲的な長期的イメージングは、任意の被験時点において、有意なＮｌｕｃシグナルが検出されなかったので、１２１２Ｃ２処置マウスが、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａの繁殖を、劇的に制限することを明らかにした（図８Ａ及び８Ｂ）。これらの結果はまた、１２１２Ｃ２処置マウスの鼻甲介、肺及び脳における、肺表面病変（図８Ｃ及び８Ｄ）、Ｎｌｕｃ発現（図８Ｅ）及びウイルス力価（図８Ｆ）の低減の観察によっても裏付けられた。さらに、１２１２Ｃ２は、マウスを、体重の変化（図８Ｇ）及び生存率（図８Ｈ）により決定された、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｎｌｕｃ－２Ａ感染の臨床症状から保護することが可能であった。

［実施例１２］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、マウスにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株感染を防止する
また、１２１２Ｃ２ｍＡｂ及び１２１３Ｈ７ｍＡｂが、Ｖｅｎｕｓ蛍光タンパク質を発現させるｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２野生型ウイルス及びベータ変異株のＲＢＤ突然変異により操作され、ｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質を発現させるｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を中和する能力についても、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染についての、Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスモデルにおいて、単独において、又は組合せにおいて評価した。マウスを、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙベータ又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙベータの両方の併用による抗原投与の２４時間前に、２５ｍｇ／ｋｇの１２１２Ｃ２、１２１３Ｈ７又はＩｇＧアイソタイプ対照により、腹腔内（ｉ．ｐ．）処置した。体重（図９Ａ）及び生存率（図９Ｂ）について、感染後（ｐｉ）１２日間にわたり査定した。ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙベータ又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙベータの両方の併用により感染させられた、ＩｇＧアイソタイプ対照処置マウスは、感染後４日目から、体重減少を呈し（図９Ａ）、感染後６～８日目の間に、ウイルス感染により死亡した（図９Ｂ）。しかし、１２１２Ｃ２又は１２１３Ｈ７により処置された、全てのマウスが、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓによる抗原投与後に生存したことは、インビトロにおける、これらの２つのｍＡｂによる、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＡ－１株の有効な中和と符合した。これに対し、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙベータにより感染させられたマウス（図９Ａ及び図９Ｂ）を保護できたのは、１２１３Ｈ７だけであり、１２１２Ｃ２は、これを保護できなかったことは、インビトロにおいて、１２１２Ｃ２が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータを中和できないことと符合した。マウスに、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙベータの両方を共感染させた場合に、１２１３Ｈ７により処置されたマウスだけが、それらの初期の体重を保持し、感染後に生存した（図９Ａ及び図９Ｂ）ことは、個別の感染を使用して得られた結果と同様であった。

１２１２Ｃ２と、１２１３７Ｈ７とが、肺、経鼻及び脳におけるウイルス負荷を、同様に制限したことは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２野生型又は野生型及びベータのそれぞれに対する、それらの活性と符合した。図１０Ａ及び１０Ｂに示された通り、６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝３）に、２５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧアイソタイプ対照、ｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｍＡｂである１２１３Ｈ７を腹腔内注射し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（上）、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（中）又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡの両方（ベータ）（下）を感染させた。感染後２及び４日目に、ＡｍｉＨＴイメージングシステムを使用して、Ｖｅｎｕｓ及びｍＣｈｅｒｒｙによる蛍光発現を決定するように、肺を回収した（図１０Ａ）。ＢＦ：明視野である。Ｖｅｎｕｓ及びｍＣｈｅｒｒｙの放射輝度値は、マウス肺内の目的の領域についての平均値に基づき定量した（図１０Ｂ）。平均値は、各時点のモック感染マウスにおける自己蛍光に照らして正規化し、誘導倍数を計算するのに使用した。モック感染Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスの肺における、肉眼的病理学スコアは、感染罹患肺の面積％に基づき計算した。

６～８週齢の雌Ｋ１８ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（ｎ＝３）に、２５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧアイソタイプ対照、ｍＡｂである１２１２Ｃ２又はｍＡｂである１２１３Ｈ７を腹腔内注射し、１０^４ＰＦＵの、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）（図１１Ａ）、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）（図１１Ｂ）又はｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）の両方（図１１Ｃ）を感染させた。感染後２及び４日目の、肺（上）、鼻甲介（中）及び脳（下）におけるウイルス力価は、ＶｅｒｏＥ６細胞内のプラークアッセイにより決定した。バーは、肺内ウイルス力価についての、平均値及びＳＤを指し示す。点線は、検出限界を指し示す。図１１Ｄに示された通り、感染後２及び４日目における、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）の両方を共感染させられたマウスに由来する肺（上）、鼻甲介（中）及び脳（下）における、ｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｖｅｎｕｓ（ＷＴ）及びｒＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｍＣｈｅｒｒｙＳＡ（ベータ）についての定量である。

これらの結果は、１２１２Ｃ２及び１２１３Ｈ７のいずれも、ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウスにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＷＴ株の感染及び病態を防止することが可能であり、さらに、１２１３Ｈ７がまた、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ベータ感染を防止することも可能であることを裏付ける。

［実施例１３］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、顕著に異なる、残基依存的な、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２受容体結合ドメインへの結合を示す
コンピュータによるｍＡｂエピトープ解析に基づき、結合研究のために、Ｃ１エピトープ（Ｋ４１７Ｔ、Ａ４７５Ｖ、Ｎ５０１Ｙ、Ｙ５０５Ｗ）、Ｃ１Ｄ／Ｃ２エピトープ（Ｇ４４６Ｖ、Ｌ４５２Ｒ及びＥ４８４Ｋ）及びＣ３エピトープ（Ｔ３４５Ｉ、Ｎ４４０Ｙ及びＧ４４６Ｖ）に局在化する、９つのＲＢＤ変異株を作製した。図１２に示された構造解析は、ある特定のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ変異株への、ｍＡｂに結合の喪失が、ｍＡｂのクラスを同定するのに使用されうることを確認する。さらに、アッセイは、ＲＢＤ変異株に対して感受性でなく、このため、潜在的に、治療剤として有用であるｍＡｂを同定するのに使用されうる。これらの問題に取り組むために、未知のｍＡｂ及び３つの対照［ＣＢ６、ＲＧＮ１０９３３及びＲＧＮ１０９８７］を、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ変異株に結合する、それらの能力について調べた。データは、さらなる研究のための、最適ｍＡｂの選択幅を狭めるために、ＲＢＤ変異株への結合の幅が広い、６つの抗体（１２１２Ｃ２、１２１２Ｄ４、１２１２Ｆ２、１２１２Ｆ５、１２１３Ｈ７及び１２１５Ｄ１）を明らかにした。とりわけ、１２１２Ｃ２及びＲｅｇｅｎｅｒｏｎ１０９８７は、それぞれ、Ｅ４８４Ｋ突然変異及びＧ４４６Ｖ突然変異への結合の低減を呈する。

［実施例１４］
競合エピトープマッピングによる、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体の分類
競合ベースのエピトープマッピングを実施して、ｍＡｂの、異なるクラスへの割当ての決定の一助とした。全体として、ｍＡｂの割当てと、エピトープ解析との間に、優れた相関が見られた。Ｃ１ｍＡｂである、１２１２Ｄ５、１２１２Ｆ２、１２１３Ｆ２、１２１２Ｄ４及び１２１２Ｃ８は、Ｃ２ｍＡｂである、１２０７Ｂ４、１２１５Ｄ１及び１２０７Ｆ１０の、同時的結合を許容した。これに対し、Ｃ２ｍＡｂである１２１２Ｃ２は、アッセイされた、全てのＣ１ｍＡｂ及びＣ２ｍＡｂを遮断した（図１３Ａ～１３Ｃ）。これらの観察に取り組むために、異なるＣ２ＮＡｂへと割り当てられた、ＮＡｂ－ＲＢＤ複合体の構造を比較した（図１３Ｄ）。具体的に述べると、１２１５Ｄ１ｍＡｂ、１２０７Ｂ４ｍＡｂ及び１２０７Ｆ１０ｍＡｂを、Ｃ３８６－２／ＲＢＤ複合体へと割り当てる一方、１２１２Ｃ２を、Ｃ１２１／ＲＢＤ複合体へと割り当てた。１２１２Ｃ２（Ｃ１２１－ＲＢＤによりモデル化された）が、Ｃ１ＮＡｂ（Ｐ２Ｃ－１Ｆ１１／ＲＢＤによりモデル化された）及びＣ２ＮＡｂと重複するのに対し、１２１５Ｄ１（Ｃ３８６－２／ＲＢＤによりモデル化された）は、いくつかのＣ１ｍＡｂ（１２１４Ｄ４、１２１２Ｃ８、１２１２Ｄ５など）及びＣ１ＤｍＡｂ（１２１３Ｈ７）と同時に結合しうる。

［実施例１５］
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体の結合の、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２残基への依存性は、ウイルスの免疫回避を介して消失した
感染個体又はインビトロにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、最適未満レベルのｍＡｂへの定常的曝露は、ＭＡＲＭ（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｉｓｔａｎｔｍｕｔａｎｔ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の選択を促進しうる。分子法を使用して、ＭＡＲＭを選択し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染についてのインビトロモデル（ＶｅｒｏＥ６細胞）を使用して同定した（図１４）。１２１２Ｃ２、１２１３Ｈ７又は１２１５Ｄ１の存在下における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の培養は、ｍＡｂによる認識の喪失を結果としてもたらす、スパイクタンパク質内の突然変異を発生させる、ＭＡＲＭの作出を結果としてもたらした。

１２１２Ｃ２ＭＡＲＭは、ＲＢＤ内のＥ４８４Ｋ突然変異を有する。１２１２Ｃ２／ＲＢＤモデルは、ＨＣＤＲ２Ｎ５３及びＨＣＤＲ３Ｒ１０３を、ＲＢＤＥ４８４と相互作用し、１２１２Ｃ２の、ＲＢＤＥ４８４Ｋへの結合に立体障害をもたらす残基として同定する。これらの残基及びさらなる残基は、ＲＢＤＥ４８４において、グルタミン酸及びこれより小型の残基に最適化されたポケットを形成するが、リシン側鎖及びアルギニン側鎖を遮蔽する。

１２１３Ｈ７ＭＡＲＭは、ＲＢＤ突然変異である、Ｇ４７６Ｄ及びＦ４９０Ｓを有する。１２１３Ｈ７／ＲＢＤ複合体についての、本発明者らの最新モデルは、１２１２Ｃ２と、１２１５Ｄ１との相互作用より分解能が低い。しかしながら、１２１３Ｈ７は、１２１５Ｄ１エピトープと比べて、ＲＢＤ先端部の反対側に結合する、Ｃ１Ｄエピトープを有するとして割り当てられている。このモデルは、競合エピトープマッピングと符合する。

Ｆ４９０は、１２１５Ｄ１／ＲＢＤモデルの重鎖結合性部位の中心に位置し、これは、１２１５Ｄ１の、Ｆ４９０ＳＭＡＲＭに対する感受性についての最初の説明をもたらし、１２１５Ｄ１／ＲＢＤモデルの概略的位置を検証する。ＨＣＤＲ３Ｆ１１１からの寄与である、疎水性パッキング相互作用は、１２１５Ｄ１／ＲＢＤ間相互作用への重要な寄与因子であることが予測される。突然変異については、下記の表８に記載されている。

［実施例１６］
ハムスターにおける、ＩｇＧｍＡｂの吸入送達
本研究の目標は、送達のＩＶ経路、ＩＮ経路及びＩＨ経路に従う、ヒトｍＡｂの、肺組織への送達の効率及び動態を比較及び対比することであった。送達の測定値は、定量的ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、ヒトＩｇＧについて査定された、ＢＡＬ力価、肺力価及び血清力価を定量することにより決定した。比較解析は、図１５に示され、送達のＩＶ経路、ＩＮ経路及びＩＨ経路による投与の、３０分、６時間、１２時間及び２４時間後における査定から２４時間にわたる、血清、ＢＡＬ及び肺におけるＩｇＧ力価を指し示す。ＩＶ、ＩＮ及びＩＨにおける、薬物使用の濃度は、各経路について異なり、送達効率の差違を反映することに留意されたい。ＩＶ送達により、血清力価は、高値であり（３０分後における検出限界を上回った）、２４時間にわたり、高値を維持した。これは、３０分後において、低値であり、２４時間にわたり、低レベルを維持した、ＩＶ送達後におけるＢＡＬ力価と対照的である。ｍＡｂを、吸入により送達したところ、ＢＡＬ力価は、３０分後に最高となり、２４時間にわたり、同様のレベルにおいて維持された。注目すべきことは、吸入後におけるＢＡＬ力価が、被験ｍＡｂの濃度を、４ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇのいずれとした場合にも、同様であったことである。鼻腔内送達もまた、ＩＶ送達と比較した、ＢＡＬ力価の増大を結果としてもたらした。しかし、吸入は、鼻腔内経路と比較して、送達のより有効な経路であると考えられるが、鼻腔内送達により使用されたｍＡｂの用量は、０．０４ｍｇ／ｋｇであり、吸入のために使用された用量である、４ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇと比較して、１００分の１の用量への用量の低減を反映する。

これらのデータは、各時点における、送達されたヒトｍＡｂの、ＢＡＬ中及び血清中における、力価及び分布の、送達経路に依存する差違を、明確に裏付ける。差違は、ＢＡＬと、血清との間において、明確に観察された。予測された通り、ＢＡＬへと送達されたｍＡｂの、吸入後における力価は、早期の時点から高値であり、２４時間にわたり、高レベルにおいて維持された。これに対し、ｍＡｂの、ＩＶ送達後における、ＢＡＬ中力価は、低値であり、２４時間にわたり、わずかに増大した。肺内の力価は、この組織内に、血液及びＢＡＬのいずれもが存在するために、解釈が最も困難であった。これらのデータに基づき、ＢＡＬへの送達は、最も有効であり、最高力価及びこの最早期の時点は、送達の吸入経路により観察された。

［実施例１７］
単独におけるｈｍＡｂ又は組合せにおけるｈｍＡｂについての中和アッセイ
単独及び組合せの両方の、１２１２Ｃ２ｍＡｂ、１２１３Ｈ７ｍＡｂ及び１２１５Ｄ１ｍＡｂを、ＷＡ１Ｐ７（１．７×１０^５ｐｆｕ／ｍＬ）に対する中和抗体アッセイにおいて評価した。ウイルスを含有しない対照ウェルを除き、９６ウェルプレートに、ウェル１つ当たり１００ＰＦＵ（ＭＯＩ：０．０５）を接種した。ウイルスを含有するウェルを、１％のＡｖｉｃｅｌ培地中に、１００ｎｇ、５０．０ｎｇ、２５ｎｇ、１２．５ｎｇ、６．２５ｎｇ、３．１２ｎｇ、１．６ｎｇ、０．８ｎｇ、０．４ｎｇ、０．２ｎｇ又は０ｎｇの、１つ以上の抗体により、２４時間にわたり処理し、処理前及び処理後において、ＮＴ_５０を評価した。１２１２Ｃ２についてのＮＴ_５０は、処理前及び処理後において、それぞれ、４．５ｎｇ及び３．２ｎｇであった。１２１３Ｈ７についてのＮＴ_５０は、処理前及び処理後において、それぞれ、６．６ｎｇ及び４．８ｎｇであった。１２１５Ｄ１についてのＮＴ_５０は、処理前及び処理後において、それぞれ、２２．６ｎｇ及び５．９ｎｇであった。

評価されたｍＡｂの組合せは、１２１２Ｃ２（図１６Ａ）；１２１３Ｈ７（図１６Ｂ）；１２１５Ｄ１（図１６Ｃ）；１２１２Ｃ２＋１２１３Ｈ７（図１６Ｄ）；１２１３Ｈ７＋１２１５Ｄ１（図１６Ｅ）；１２１２Ｃ２＋１２１５Ｄ１（図１６Ｆ）；並びに１２１２Ｃ２＋１２１３Ｈ７＋１２１５Ｄ１（図１６Ｇ）を含んだ。

Claims

１２１２Ｃ２、１２１２Ｆ５、１２１３Ｈ７、１２１２Ｆ２、１２０６Ｄ１、１２１２Ｄ５、１２０７Ｂ４、１２１３Ｆ２、１２１２Ｄ４、１２０６Ａ５、１２１２Ｄ６、１２０６Ｄ１２、１２０７Ｆ１０、１２０６Ｇ１２、１２１２Ｃ８、１２１２Ｅ９、１２１４Ｅ９、１２１５Ｄ１及び１２１２の変異体からなる群から選択される、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に特異的に結合する、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
（ｉ）それぞれ、配列番号３８～４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号４２～４４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｃ２）。
（ｉ）それぞれ、配列番号４６～４８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号５０～５２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１５Ｆ５）。
（ｉ）それぞれ、配列番号５４～５６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号５８～６０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１３Ｈ７）。
（ｉ）それぞれ、配列番号６２～６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号６６～６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｆ２）。
（ｉ）それぞれ、配列番号７０～７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号７４～７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ｄ１）。
（ｉ）それぞれ、配列番号７８～８０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号８２～８４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｄ５）。
（ｉ）それぞれ、配列番号８６～８８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号９０～９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０７Ｂ４）。
（ｉ）それぞれ、配列番号９４～９６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号９８～１００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１３Ｆ２）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１０２～１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１０６～１０８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｄ４）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１１０～１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１１４～１１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ａ５）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１１８～１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１２２～１２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｄ６）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１２６～１２８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１３０～１３２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ｄ１２）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１３４～１３６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１３８～１４０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０７Ｆ１０）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１４２～１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号１４６～１４８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ｇ１２）。
（ｉ）それぞれ、配列番号１５８、３９及び１５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域並びに（ｉｉ）それぞれ、配列番号４２、４３及び１６１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２の変異体）。
配列番号１５８の１位におけるアミノ酸が、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＩｌｅ（Ｉ）であり、配列番号１５９の１位におけるアミノ酸が、Ｔｈｒ（Ｔ）又はＡｌａ（Ａ）であり、配列番号１５９の９位におけるアミノ酸が、Ｌｅｕ（Ｌ）又はＰｈｅ（Ｆ）であり、配列番号１６１の１位におけるアミノ酸が、任意のアミノ酸であり、配列番号１６１の６位におけるアミノ酸が、Ａｓｎ（Ｎ）又はＳｅｒ（Ｓ）であり、配列番号１６１の１０位におけるアミノ酸が、Ｖａｌ（Ｖ）又はＰｈｅ（Ｆ）である、請求項１６に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号４１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｃ２）。
（ｉ）配列番号４５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１５Ｆ５）。
（ｉ）配列番号５３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号５７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１３Ｈ７）。
（ｉ）配列番号６１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号６５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｆ２）。
（ｉ）配列番号６９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号７３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ｄ１）。
（ｉ）配列番号７７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｄ５）。
（ｉ）配列番号８５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０７Ｂ４）。
（ｉ）配列番号９３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１３Ｆ２）。
（ｉ）配列番号１０１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１０５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｄ４）。
（ｉ）配列番号１０９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１１３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ａ５）。
（ｉ）配列番号１１７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１２１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｄ６）。
（ｉ）配列番号１２５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ｄ１２）。
（ｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１３７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０７Ｆ１０）。
（ｉ）配列番号１４１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１４５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２０６Ｇ１２）。
（ｉ）配列番号１４９のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５０のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１５Ｄ１）。
（ｉ）配列番号１５１のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５２のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１４Ｅ９）。
（ｉ）配列番号１５３のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５４のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｅ９）。
（ｉ）配列番号１５５のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５６のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２Ｃ８）。
（ｉ）配列番号１５７のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１６０のアミノ酸配列又はこれと少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片（１２１２の変異体）。
配列番号１５７の１３、２３、２８、５９、６５、７７、７９、９４、９７、１０５及び１１３位におけるアミノ酸が、表２Ａから選択され、配列番号１６０の１、２、３、９１、９６及び１００位におけるアミノ酸が、表２Ｂから選択される、請求項３６に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
抗体変異体である、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
変異体Ｆｃ定常領域をさらに含む、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
変異体Ｆｃ定常領域をさらに含み、タンパク質部分又は非タンパク質部分が、Ｆｃ定常領域へと連結されている、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
非タンパク質部分が、水溶性ポリマーである、請求項４０に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
対象のインビボにおける半減期が、親抗体と比べて長い、対象のインビボにおける免疫原性が、親抗体と比べて小さい、又は前出のものの組合せを有する、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
キメラ抗体、クラススイッチ抗体又はモノクローナル抗体である、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
治療剤、酵素、酵素阻害剤又は検出用標識へと連結された、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
抗原結合断片が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ジスルフィド連結型Ｆｖ、ｄＡｂ断片、単離ＣＤＲ、ナノボディー、単一ドメイン抗体、単一の可変ドメインと、２つの定常ドメインとを含有する、Ｖ_Ｈ領域の部分、ダイアボディー、トリアボディー、テトラボディー、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＦＣ、ｓｃＦｖ－ＣＨ、ｓｃＦａｂ及びｓｃＦｖ－ジッパーからなる群から選択される、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の、受容体結合ドメイン内のエピトープに結合する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の、受容体結合モチーフ内のエピトープに結合する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ１領域内のエピトープに結合する、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＳ２領域内のエピトープに結合する、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、標的細胞への結合を低減する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と標的細胞との細胞融合を低減する、感染性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、感染細胞からの放出を低減する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による、標的細胞の感染を低減する、又は前出のものの組合せである、請求項１～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片。
請求項２～３３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片の重鎖可変領域、軽鎖可変領域又は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方をコードする単離された核酸。
請求項４８に記載の核酸を含む発現ベクター。
請求項４９に記載の発現ベクターを含む培養宿主細胞。
請求項１～３７のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と、薬学的に許容される担体及び薬学的に許容される賦形剤のうちの少なくとも１つとを含む医薬組成物。
静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与のために製剤化された、請求項５１に記載の医薬組成物。
対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置するための方法であって、対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項５３に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項５３に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項５３に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項５３～５６のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項５７に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項５７に記載の方法。
対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、細胞への侵入を低減する方法であって、対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項６０に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項６０に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項６０に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項６０～６３のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項６４に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項６４に記載の方法。
対象における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、細胞内ＡＣＥ２への結合を低減する方法であって、対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項６７に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項６７に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項６７に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項６７～７０のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項７１に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項７１に記載の方法。
対象の体液中、組織内又は細胞内における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス力価を低減するための方法であって、対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項７４に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項７４に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項７４に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項７４～７７のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項７７に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項７７に記載の方法。
第１の対象から、第２の対象への、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の伝染を低減するための方法であって、第１の対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項８１に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項８１に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項８１に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項８１～８４のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項８４に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項８４に記載の方法。
第１の対象から、第２の対象への、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の伝染を低減するための方法であって、第２の対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項８８に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項８８に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項８８に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項８８～９１のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項９２に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項９２に記載の方法。
対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を中和する方法であって、対象へと、有効量の、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片を投与するステップを含む方法。
投与するステップが、処置コースに従い、少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片を含む単回用量又は複数回用量を投与するステップを含む、請求項９５に記載の方法。
投与するステップが、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染する前において、対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後であるが、感染が検出されうる前において、又は対象が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した後において、かつ、感染が検出されえた後において行われる、請求項９５に記載の方法。
少なくとも１つの抗体又はその抗原結合断片が、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、肺内投与又は鼻腔内投与により投与される、請求項９５に記載の方法。
対象へと、さらなる治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項９５～９８のいずれか一項に記載の方法。
さらなる治療剤が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、システインプロテアーゼ阻害剤又は前出のものの組合せである、請求項９９に記載の方法。
さらなる治療剤が、ガリデシビル、レムディシビル、ヒドロクロロキン、クロロキン、イルベサルタン、トレミフェン、カンフル、エクイリン、メサラジン、メルカプトプリン、ナファモスタット、パラオキセチン、シロリムス、カルベジロール、ダクチノマイシン、メラトニン、キナクリン、エプレレノン、エノクリン、オキシメタロン、ＥＮＵ２０００、アジトロマイシン、ロピノビル／リトナビル、ウミフェノビル、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ、ガンシクロビル、ホスカルネットナトリウム、リバビリン、インターフェロン、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、ＡＺＴ、アマンタジン、リマンタジン、アシクロビル、ホスカルネット、ラニナミビル、オセルタミビル、ザナミビル、ファビピラビル、バロキサビル・マルボキシル及びペラミビルからなる群から選択される、請求項９９に記載の方法。
試料中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在を検出するためのキットであって、（ｉ）請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片並びに以下：（ｉ）少なくとも１つの他の治療剤；（ｉｉ）緩衝剤及び（ｉｉｉ）抗体を、対象へと投与して、対象におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置する、又は試料中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出するための指示書のうちの少なくとも１つを含むキット。
患者におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を、イムノアッセイにより決定するための方法であって、
ａ．患者の身体試料を、請求項２～３７のいずれか一項に記載の、少なくとも１つの単離された抗体又はその抗原結合断片及び検出用標識と共にインキュベートして、決定可能基を含有する免疫複合体を形成させるステップであって、検出用標識が、抗体若しくはその抗原結合断片上に存在する、或いは検出用標識が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２又は少なくとも１つの抗体若しくはその抗原結合断片に対する結合パートナー上に存在するステップ；並びに
ｂ．試料中の検出用標識の存在を決定するステップであって、検出用標識の存在は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が試料中に存在することを指し示すステップ
を含む方法。
免疫複合体を、試料から単離するステップ、及び単離された免疫複合体内又は残余の試料中における、検出用標識の存在を決定するステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
身体試料が、血清試料、血液試料、血漿試料、咽頭スワブ試料、鼻咽頭スワブ試料、痰試料、糞便試料、尿試料、唾液試料又は気管支肺胞洗浄液試料である、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
イムノアッセイによる決定は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が、対象において存在するのかどうかを決定する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染からの、対象の回復をモニタリングする、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を処置するための治療処置の有効性について査定するために使用される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。