JP2023536388A - 癌の治療のための炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤としての２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミドおよびその誘導体 - Google Patents
癌の治療のための炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤としての２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミドおよびその誘導体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023536388A JP2023536388A JP2022574320A JP2022574320A JP2023536388A JP 2023536388 A JP2023536388 A JP 2023536388A JP 2022574320 A JP2022574320 A JP 2022574320A JP 2022574320 A JP2022574320 A JP 2022574320A JP 2023536388 A JP2023536388 A JP 2023536388A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cancer
- carbonic anhydrase
- formula
- cells
- treatment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 41
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 27
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 23
- BHEXZFRNIHDPAK-UHFFFAOYSA-N 1-[2-methyl-6-(4-methylphenyl)pyridin-3-yl]-3-(2-sulfamoylphenyl)urea Chemical compound CC1=CC=C(C=C1)C2=NC(=C(C=C2)NC(=O)NC3=CC=CC=C3S(=O)(=O)N)C BHEXZFRNIHDPAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 7
- 108700012439 CA9 Proteins 0.000 title claims description 30
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 title claims description 30
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title abstract description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 36
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 15
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 claims abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 23
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 21
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 229940121959 Carbonic anhydrase IX inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims 1
- 102000003846 Carbonic anhydrases Human genes 0.000 abstract description 23
- 108090000209 Carbonic anhydrases Proteins 0.000 abstract description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 16
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 14
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 abstract description 8
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 abstract description 7
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 abstract description 7
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 abstract description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 51
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 19
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 10
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 10
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 10
- 239000003489 carbonate dehydratase inhibitor Substances 0.000 description 9
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 8
- FNHKPVJBJVTLMP-UHFFFAOYSA-N regorafenib Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=C(F)C(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 FNHKPVJBJVTLMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002138 L01XE21 - Regorafenib Substances 0.000 description 7
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 7
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 7
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- KTEIFNKAUNYNJU-GFCCVEGCSA-N crizotinib Chemical compound O([C@H](C)C=1C(=C(F)C=CC=1Cl)Cl)C(C(=NC=1)N)=CC=1C(=C1)C=NN1C1CCNCC1 KTEIFNKAUNYNJU-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 7
- 229960004836 regorafenib Drugs 0.000 description 7
- 239000002146 L01XE16 - Crizotinib Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 229960005061 crizotinib Drugs 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 6
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 6
- 101710168331 ALK tyrosine kinase receptor Proteins 0.000 description 5
- 102100033793 ALK tyrosine kinase receptor Human genes 0.000 description 5
- 229940122072 Carbonic anhydrase inhibitor Drugs 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 5
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- -1 biaryl urea derivative Chemical class 0.000 description 5
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 5
- YJQZNWPYLCNRLP-UHFFFAOYSA-N 1-(4-fluorophenyl)-3-(4-sulfamoylphenyl)urea Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)N)=CC=C1NC(=O)NC1=CC=C(F)C=C1 YJQZNWPYLCNRLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010052358 Colorectal cancer metastatic Diseases 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 4
- 229940006133 antiglaucoma drug and miotics carbonic anhydrase inhibitors Drugs 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 4
- HFFXLYHRNRKAPM-UHFFFAOYSA-N 2,4,5-trichloro-n-(5-methyl-1,2-oxazol-3-yl)benzenesulfonamide Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C(=CC(Cl)=C(Cl)C=2)Cl)=N1 HFFXLYHRNRKAPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 4-[5-[3-(carboxymethoxy)phenyl]-3-(4,5-dimethyl-1,3-thiazol-2-yl)tetrazol-3-ium-2-yl]benzenesulfonate Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=C(OCC(O)=O)C=CC=2)=NN1C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 3
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 3
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 238000012288 TUNEL assay Methods 0.000 description 3
- BZKPWHYZMXOIDC-UHFFFAOYSA-N acetazolamide Chemical compound CC(=O)NC1=NN=C(S(N)(=O)=O)S1 BZKPWHYZMXOIDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 3
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 3
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 3
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 3
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 3
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 3
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 3
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- YAZSBRQTAHVVGE-UHFFFAOYSA-N 2-aminobenzenesulfonamide Chemical compound NC1=CC=CC=C1S(N)(=O)=O YAZSBRQTAHVVGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KNIFBVXXQJQCIB-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-6-(4-methylphenyl)pyridine-3-carbohydrazide Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC=C(C(=O)NN)C(C)=N1 KNIFBVXXQJQCIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SWFSTMKLFHDKRA-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-6-(4-methylphenyl)pyridine-3-carbonyl azide Chemical compound CC(C=C1)=CC=C1C(C=C1)=NC(C)=C1C(N=[N+]=[N-])=O SWFSTMKLFHDKRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WUTIWOZYHHSBBU-UHFFFAOYSA-N 3-methoxy-4-nitrobenzaldehyde Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1[N+]([O-])=O WUTIWOZYHHSBBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930183010 Amphotericin Natural products 0.000 description 2
- QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N Amphotericin A Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CCCC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100033040 Carbonic anhydrase 12 Human genes 0.000 description 2
- 101710094325 Carbonic anhydrase 12 Proteins 0.000 description 2
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 208000037062 Polyps Diseases 0.000 description 2
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 229940009444 amphotericin Drugs 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 2
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 2
- 150000008331 benzenesulfonamides Chemical class 0.000 description 2
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 2
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 2
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- SRYALXBZLHTHHG-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene-1-sulfonamide Chemical class C1=CC=C2C(S(=O)(=O)N)CCCC2=C1 SRYALXBZLHTHHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 1
- 102100021573 Bcl-2-binding component 3, isoforms 3/4 Human genes 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- QHAUOSBZGOANEX-UHFFFAOYSA-N C1=CC=NC=C1.C1=CC=C2C(=O)C(=O)NC2=C1 Chemical compound C1=CC=NC=C1.C1=CC=C2C(=O)C(=O)NC2=C1 QHAUOSBZGOANEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100033007 Carbonic anhydrase 14 Human genes 0.000 description 1
- 101710094327 Carbonic anhydrase 14 Proteins 0.000 description 1
- 102100024633 Carbonic anhydrase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710167917 Carbonic anhydrase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024650 Carbonic anhydrase 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710167915 Carbonic anhydrase 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100024644 Carbonic anhydrase 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710167916 Carbonic anhydrase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100036372 Carbonic anhydrase 5A, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101710133954 Carbonic anhydrase 5A, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 102100036376 Carbonic anhydrase 5B, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101710203682 Carbonic anhydrase 5B, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 102100036369 Carbonic anhydrase 6 Human genes 0.000 description 1
- 101710167912 Carbonic anhydrase 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100036368 Carbonic anhydrase 7 Human genes 0.000 description 1
- 101710167910 Carbonic anhydrase 7 Proteins 0.000 description 1
- ZEOWTGPWHLSLOG-UHFFFAOYSA-N Cc1ccc(cc1-c1ccc2c(n[nH]c2c1)-c1cnn(c1)C1CC1)C(=O)Nc1cccc(c1)C(F)(F)F Chemical compound Cc1ccc(cc1-c1ccc2c(n[nH]c2c1)-c1cnn(c1)C1CC1)C(=O)Nc1cccc(c1)C(F)(F)F ZEOWTGPWHLSLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000006969 Curtius rearrangement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000116 DAPI staining Methods 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 231100001074 DNA strand break Toxicity 0.000 description 1
- 101100481408 Danio rerio tie2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102100023593 Fibroblast growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710182386 Fibroblast growth factor receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 102100022623 Hepatocyte growth factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000971203 Homo sapiens Bcl-2-binding component 3, isoforms 1/2 Proteins 0.000 description 1
- 101000971209 Homo sapiens Bcl-2-binding component 3, isoforms 3/4 Proteins 0.000 description 1
- 101000910338 Homo sapiens Carbonic anhydrase 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000972946 Homo sapiens Hepatocyte growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000744394 Homo sapiens Oxidized purine nucleoside triphosphate hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 101000984244 Mus musculus Carbonic anhydrase 15 Proteins 0.000 description 1
- 101100481410 Mus musculus Tek gene Proteins 0.000 description 1
- 229910017833 NH2NH2.H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100039792 Oxidized purine nucleoside triphosphate hydrolase Human genes 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000018967 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010051742 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000004617 QSAR study Methods 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010053096 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010053100 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100033178 Vascular endothelial growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033179 Vascular endothelial growth factor receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229960000571 acetazolamide Drugs 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012925 biological evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 1
- 230000005773 cancer-related death Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 238000003783 cell cycle assay Methods 0.000 description 1
- 230000006369 cell cycle progression Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000010192 crystallographic characterization Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 1
- 229940125436 dual inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- KTEIFNKAUNYNJU-LBPRGKRZSA-N ent-crizotinib Chemical compound O([C@@H](C)C=1C(=C(F)C=CC=1Cl)Cl)C(C(=NC=1)N)=CC=1C(=C1)C=NN1C1CCNCC1 KTEIFNKAUNYNJU-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 102000051505 human CA9 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000006698 hydrazinolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229950002216 linifanib Drugs 0.000 description 1
- MPVGZUGXCQEXTM-UHFFFAOYSA-N linifanib Chemical compound CC1=CC=C(F)C(NC(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C=2C=3C(N)=NNC=3C=CC=2)=C1 MPVGZUGXCQEXTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010859 live-cell imaging Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- VUZPPFZMUPKLLV-UHFFFAOYSA-N methane;hydrate Chemical compound C.O VUZPPFZMUPKLLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229940124303 multikinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000007524 negative regulation of DNA replication Effects 0.000 description 1
- 150000002828 nitro derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 208000037920 primary disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012342 propidium iodide staining Methods 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- KFUSANSHCADHNJ-UHFFFAOYSA-N pyridine-3-carbohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CN=C1 KFUSANSHCADHNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 229940124617 receptor tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 229940090374 stivarga Drugs 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000013042 tunel staining Methods 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N urea group Chemical group NC(=O)N XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D213/72—Nitrogen atoms
- C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
Abstract
本発明は、２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミド（式Ｉ）である化合物、および関連するピリジンベースのスルホンアミド誘導体に関する。本発明の化合物は、炭酸脱水酵素を標的とした小分子であり、炭酸脱水酵素の活性および過剰発現の阻害剤でもあり、したがって、特に、癌などの増殖性疾患に関連する障害の治療および／または予防において、医薬品として有用である。
Description
本発明は、癌組織で過剰発現するタンパク質である炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡ ＩＸ）の酵素阻害剤としての新規なピリジンベースのスルホンアミド誘導体小分子として、２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミド（式Ｉ）を開示し、特許請求する。本発明は、式Ｉの合成手法も含む。本発明によるヒト炭酸脱水酵素ＩＸの阻害剤は、癌治療に使用される医薬品の活性成分として使用することができる。式Ｉを含む医薬組成物、および式（Ｉ）の製造方法も開示および特許請求される。
現在の医療の時代において、スルホンアミドベースの小分子は、効果的なアポトーシス促進活性を有する新規な抗癌剤の開発にとって魅力的で有望なクラスとして注目されている。さまざまなピリジンベースの誘導体が癌治療剤として承認されており、数例が挙げられる：Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ（Ｓｔｉｖａｒｇａ（商標））、Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ（Ｘａｌｋｏｒｉ（商標））およびＳｏｒａｆｅｎｉｂ（Ｎｅｘａｖａｒ（商標））［１－３］。レゴラフェニブ（Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ）は、ＶＥＧＦＲ－１／３、ＰＤＧＦＲｂ、ＦＧＦＲ１、およびＴｉｅ－２などのいくつかの血管新生キナーゼを阻害する、ピリジン含有ビアリール尿素誘導体である［４］。レゴラフェニブは、２０１２年９月に、転移性結腸直腸癌（ｍＣＲＣ）の治療薬として承認された［５］。レゴラフェニブの抗腫瘍活性は、その抗血管新生および抗増殖作用に加えて、アポトーシスの誘導を介して媒介されることが報告されている［６、７］。
クリゾチニブ（Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ）（Ｘａｌｋｏｒｉ（商標））は、（ＡＬＫ）、（ＨＧＦＲ、ｃ－Ｍｅｔ）、および（ＲＯＮ）として、経口で活性な複数の受容体のチロシンキナーゼ阻害剤である［８］。ＦＤＡは、治療歴のあるＡＬＫ陽性の進行性非小細胞肺癌の成人の治療にクリゾチニブを承認した［９］。クリゾチニブは、アポトーシスやその他のメカニズムを通して抗癌活性を発揮すると考えられている［１０］。
さらに、ジアリール尿素は、小分子抗癌剤の開発にとって重要なフラグメント／ファーマコフォアである。尿素官能基は、リニファニブ、ソラフェニブ、およびレゴラフェニブなどのさまざまな抗癌治療剤における主要なファーマコフォアの特徴を表している［１１］。
炭酸脱水酵素（ＣＡ）は、二酸化炭素と水から重炭酸塩とプロトンへの相互変換を触媒する重要な役割を果たす亜鉛金属酵素である［１１］。現在までに、７つの異なるＣＡファミリー（α－ＣＡ、β－ＣＡ、γ－ＣＡ、δ－ＣＡ、ζ－ＣＡ、η－ＣＡ、およびθ－ＣＡ）が知られている［１１］。それらは、ヒト（ｈ）で分離された１５の異なるα－ＣＡアイソフォームで存在し、特徴は、いくつかは細胞質（ＣＡ Ｉ、ＣＡ ＩＩ、ＣＡ ＩＩＩ、ＣＡ ＶＩＩ、およびＣＡ ＸＩＩＩ）であり、その他は膜結合（ＣＡ ＩＶ、ＣＡ ＩＸ、ＣＡ ＸＩＩ、ＣＡ ＸＩＶ、およびＣＡ ＸＶ）であり、２つはミトコンドリア（ＣＡ ＶＡおよびＣＡ ＶＢ）であり、１つのアイソザイムは唾液中に分泌される（ＣＡ ＶＩ）［１２］。ｈＣＡ ＩＸの過剰発現は、通常、乳癌、神経膠腫、結腸癌などのさまざまな種類の固形腫瘍において低酸素症によって引き起こされる［１３－１５］。そのため、ｈＣＡ ＩＸの阻害は、ｈＣＡ ＩＸをさまざまな腫瘍の治療の有効な標的にする、原発腫瘍の段階の増殖および転移の顕著な抑制と強く関連している［１５］。したがって、ｈＣＡ ＩＸの選択的阻害剤の開発は、アイソフォームｈＣＡ ＩおよびＩＩ阻害に起因する従来からの副作用を排除した効率的な癌治療を生み出すための重要なステップとして注目される。
ＳＬＣ－０１１１は、ジアリール尿素ベースのスルホンアミド誘導体で、転移を伴う進行した低酸素性腫瘍の治療を目的とした第Ｉ／ＩＩ相臨床試験が進行中である。ＳＬＣ－０１１１は、膜透過型腫瘍関連アイソフォームｈＣＡ ＩＸおよびＸＩＩの阻害に対して（細胞質アイソフォームｈＣＡ ＩおよびＩＩよりも）優れた選択性を有している［１６－１８］。
結腸直腸癌（大腸癌）は、世界で３番目に死亡率の高いがんであり、死亡原因の第４位であると考えられている。これは、すべての癌発生率の９％以上である［１９］。現在、西側諸国では、癌関連死亡率の約１０％を占めており［２０］、オーストラリア、ニュージーランド、カナダ、米国、およびヨーロッパの一部で、発生率が最も高い［１９］。そらに、２０１９年のアメリカの癌の統計によると、米国では結腸直腸癌は、男性と女性の両方で診断される３番目に多い癌として分類されており、米国では約１０１，４２０件の新しい結腸癌の症例と４４，１８０件の新しい直腸癌の症例があり、２０１９年中に約５１，０２０人が死亡すると予想されている［２１］。
結腸直腸癌は、ポリープとして知られる直腸または結腸の内層で増殖する腫瘍として始まり、最終的に癌を引き起こす、ゆっくりと進行する癌として知られている。このポリープは、直腸または結腸の壁に腫瘍を形成し、血液循環またはリンパ管に入り、他の身体構造学的部位に広がって転移をもたらす可能性がある。結腸直腸癌の大部分（９５％以上）は、腺癌に分類される。これらは、結腸および直腸の内側にある粘液分泌腺において始まる［２２］。
国際特許文献ＷＯ２００８０７１４２１Ａ１において、炭酸脱水酵素阻害剤のニトロ誘導体剤は、アイソフォームＩＸおよびＸＩＩを含むいくつかの炭酸脱水酵素アイソフォームの潜在的な阻害剤として記載されている。しかしながら、これらの化合物は、いずれもピリジンまたはスルホンアミド誘導体ではなく、ＣＡ ＩＸおよび／またはＣＡ ＸＩＩに対して高い選択性を有していない。
国際特許文献ＷＯ２０１２０８７１１５Ａ１において、化学療法および放射線療法のための炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤として、多くの芳香族スルホンアミドが提示されている。国際特許文献ＷＯ２０１２１７５６５４Ａ１において、ＣＡ ＩおよびＩＩよりもＣＡ ＩＸおよびＸＩＩに対して選択的な阻害剤としてテトラリンスルホンアミド誘導体が記載されている。
原発性および転移性の結腸直腸癌に対するさまざまな高度な外科的および医学的治療法、例えば、原発性疾患に対する腹腔鏡手術；転移性疾患の切除；直腸癌の放射線療法；および緩和化学療法など、が存在するにもかかわらず、治癒率と長期生存率は、過去数十年よりもわずかな割合しか変化していない［２０］。炭酸脱水酵素について多数の異なる酵素阻害剤が開発または発見されたにもかかわらず、主要な問題は、それらが非特異的でありおよび非選択的であることである。人体に存在するすべてのヒト炭酸脱水酵素形態が非特異的阻害である結果として、臨床研究で使用される阻害剤には、毒性を含む多くの副作用がある。さらに、これらの治療剤は、患者の生活の質に影響を与える深刻な副作用を引き起こす。したがって、ヒト炭酸脱水酵素の特定のアイソフォームに特異的な阻害剤の開発は、依然として現在の重要な課題として残っている。これらの必要性および他の必要性が、本発明によって満たされる。
本発明の第１の態様によれば、新規な式Ｉの炭酸脱水酵素阻害剤またはその薬学的に許容される塩が提供される。さらに、この新規な小分子（式Ｉ）は、ピリジンベースのスルホンアミド誘導体であり、腫瘍関連の特異的な炭酸脱水酵素阻害剤であり、この阻害剤はアイソフォームＩＸに特異的である。
本発明の他の態様は、炭酸脱水酵素ＩＸに対する高い選択性を有し、原発腫瘍段階の増殖および転移を顕著に抑制し、癌細胞の５０％のアポトーシスを誘導するのに使用する薬物の濃度が健康なヒト細胞に影響を与えないような、毒性が非常にわずかであることを特徴とする、炭酸脱水酵素阻害剤を提供することである。
本発明の別の態様は、式Ｉの非毒性の炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を提供することである。これらの化合物は、有害で望ましくない作用をもたらささない。
したがって、本発明の広範な実施形態は、新規な式Ｉ：
で示される炭酸脱水酵素阻害剤化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。
本発明の他の態様は、癌など、好ましくは、乳癌、子宮頸部癌、卵巣癌、腎臓癌、肺癌、食道癌、結腸直腸癌、膀胱癌、前立腺癌、脳腫瘍からなる群から選択される癌、より好ましくは結腸直腸癌などの、増殖性障害を治療および／または予防するための特定の炭酸脱水酵素阻害剤であって、化合物が炭酸脱水酵素ＩＸを標的とすることを特徴とする、炭酸脱水酵素阻害剤を提供することである。
本発明の別の態様は、式Ｉの製造のための有機合成方法を提供することである。
本発明は、炭酸脱水酵素ＩＸ過剰発現の阻害による障害の治療および／または予防に有用な医薬の製造に使用することができる。
本発明のさらに別の態様は、薬学的担体、および、治療有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、医薬組成物を提供することである。
本発明のさらなる態様は、癌、好ましくは結腸直腸癌などの増殖性疾患の診断および／またはモニタリングのための式Ｉの非治療的な使用に関する。
本発明の本目的および他の目的は、以下の本発明の詳細な説明から明らかになる。
本発明は、添付の図面により説明される。
図１は、式１で処理したＨＣＴ１１６細胞の生存率の図であり、（ａ）２４時間後（Ｐ＜０．０００１）、（ｂ）４８時間後（Ｐ＜０．０００１）、（ｃ）７２時間後（Ｐ＜０．０００１）である。
図２は、式Ｉで７２時間処理したＨＵＶＥＣ細胞の生存率の図である（有意差なし）。
図３は、アネキシンＶアポトーシスアッセイの図であり、（ａ）および（ｂ）は、式Ｉで２４時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＞０．００１）、（ｃ）および（ｄ）は、式Ｉで４８時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＞０．０００１）、（ｅ）および（ｆ）は、式Ｉで７２時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＞０．０００１）である。
図４は、細胞周期アッセイの図であり、（ａ）式Ｉで４８時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＜０．０５）、（ｂ）式Ｉで７２時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＜０．０００１）である。
図５は、ＴＵＮＥＬアッセイによるアポトーシス細胞を示す図である。細胞は、ＴＵＮＥＬ染色およびＤＡＰＩ染色で標識され、アポトーシス細胞は緑色であった。（ａ）未処理の陰性対照細胞、および（ｂ）式Ｉで処理した細胞（スケールバーは２０μｍを表す）である。
図１は、式１で処理したＨＣＴ１１６細胞の生存率の図であり、（ａ）２４時間後（Ｐ＜０．０００１）、（ｂ）４８時間後（Ｐ＜０．０００１）、（ｃ）７２時間後（Ｐ＜０．０００１）である。
図２は、式Ｉで７２時間処理したＨＵＶＥＣ細胞の生存率の図である（有意差なし）。
図３は、アネキシンＶアポトーシスアッセイの図であり、（ａ）および（ｂ）は、式Ｉで２４時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＞０．００１）、（ｃ）および（ｄ）は、式Ｉで４８時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＞０．０００１）、（ｅ）および（ｆ）は、式Ｉで７２時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＞０．０００１）である。
図４は、細胞周期アッセイの図であり、（ａ）式Ｉで４８時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＜０．０５）、（ｂ）式Ｉで７２時間処理したＨＣＴ１１６細胞（Ｐ＜０．０００１）である。
図５は、ＴＵＮＥＬアッセイによるアポトーシス細胞を示す図である。細胞は、ＴＵＮＥＬ染色およびＤＡＰＩ染色で標識され、アポトーシス細胞は緑色であった。（ａ）未処理の陰性対照細胞、および（ｂ）式Ｉで処理した細胞（スケールバーは２０μｍを表す）である。
本発明は、新規なピリジンベースのスルホンアミド誘導体、および癌組織で過剰発現する酵素である炭酸脱水酵素ＩＸに対してのその特異的阻害効果を開示する。本発明は、合成手法も含む。
本発明は、炭酸脱水酵素阻害剤（式Ｉ）に関する。
特に断りのない限り、用語「式Ｉ」または「化合物」または「小分子」または「阻害剤」は、式Ｉの化合物、そのプロドラッグ、その化合物および／またはプロドラッグの塩、その化合物の水和物または溶媒和物、立体異性体、互変異性体、同位体標識化合物、多形、および式Ｉの誘導体、を意味する。
本発明の目的は、炭酸脱水酵素ＩＸの活性および／または過剰発現の阻害剤として、化学名が２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミドである、特定の炭酸脱水酵素阻害剤化合物を提供することである。
本発明の目的に従って、具体化され、本明細書に広く記載されるように、本発明は、炭酸脱水酵素ＩＸの活性および／または過剰発現を阻害することができる、特定の炭酸脱水酵素阻害化合物に関する。これに関して、本発明は、次の式Ｉ：
で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩、に関する。
本発明の２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミド（式Ｉ）は、一般合成スキームＡ～Ｄに従って得ることができる。このスキームは、本発明の式Ｉの合成においてなされる一般的手法を示す。
Ａ）合成は、エステル１を、エチルアルコール中でヒドラジン水和物と反応させることによりヒドラジン分解させることによって開始され、２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノヒドラジド２を得た。（（ｉ）；エタノール、ＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ、還流３時間）。
Ｂ）ニコチノヒドラジド２を、亜硝酸ナトリウムで、冷塩酸中で処理して、ニコチノイルアジド３を得た。（（ｉｉ）；ＮａＮＯ２、ＨＣｌ、撹拌２時間）。
Ｃ）次いで、ニコチノイルアジド３を、還流乾燥キシレン中で撹拌しながらクルチウス転位に供して、対応するイソシアネート誘導体４を生成した。（（ｉｉｉ）；キシレン、還流１時間）。
Ｄ）最後に、イソシアネート４を、２－アミノベンゼンスルホンアミド５と還流キシレン中で反応させて、目的の式Ｉのスルホンアミドを、収率８３％で得た。（（ｉｖ）；キシレン、還流７時間）
Ａ）合成は、エステル１を、エチルアルコール中でヒドラジン水和物と反応させることによりヒドラジン分解させることによって開始され、２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノヒドラジド２を得た。（（ｉ）；エタノール、ＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ、還流３時間）。
Ｂ）ニコチノヒドラジド２を、亜硝酸ナトリウムで、冷塩酸中で処理して、ニコチノイルアジド３を得た。（（ｉｉ）；ＮａＮＯ２、ＨＣｌ、撹拌２時間）。
Ｃ）次いで、ニコチノイルアジド３を、還流乾燥キシレン中で撹拌しながらクルチウス転位に供して、対応するイソシアネート誘導体４を生成した。（（ｉｉｉ）；キシレン、還流１時間）。
Ｄ）最後に、イソシアネート４を、２－アミノベンゼンスルホンアミド５と還流キシレン中で反応させて、目的の式Ｉのスルホンアミドを、収率８３％で得た。（（ｉｖ）；キシレン、還流７時間）
本明細書に記載の化合物の塩は、従来の化学的方法によって、親化合物から合成することができる。
炭酸脱水酵素アイソフォーム（Ｉ、ＩＩ、ＩＶおよびＩＸ）に対する式Ｉの阻害定数の測定は、この化合物が、前記の腫瘍関連酵素アイソフォームである炭酸脱水酵素ＩＸに対して特異的であることを示した（表１）。
式Ｉの炭酸脱水酵素阻害活性は、生理学的に関連するｈＣＡアイソフォーム、ｈＣＡ Ｉ、ＩＩ（サイトゾル）、およびｈＣＡ ＩＸおよびＸＩＩ（膜透過型、腫瘍関連アイソフォーム）に対して、ＣＡ触媒によるＣＯ２水和活性をアッセイするためのＡｐｐｌｉｅｄ Ｐｈｏｔｏｐｈｙｓｉｃｓのストップトフロー機器を用いて、評価された［２４］。それらの阻害活性は、ＳＬＣ－０１１１、および臨床的に使用される標準的な炭酸脱水酵素阻害剤アセタゾラミド（ＡＡＺ）と比較した。表１に阻害データを示す。
表１．参照薬物としてＳＬＣ－０１１１およびアセタゾラミド（ＡＡＺ）を用いた、ストップトフローＣＯ２ヒドラーゼアッセイによって決定された、式１のヒトＣＡアイソフォームｈＣＡ Ｉ、ＩＩ、ＩＶ、およびＩＸの阻害データ
表から、腫瘍細胞の増殖と腫瘍を増強するｈＣＡ ＩＸに対するこの特異的阻害剤（式Ｉ）の阻害定数（ＫＩ；ｎＭ）［２６］は、５５．９ｎＭであり、ｈＣＡ Ｉ、ｈＣＡ ＩＩ、および／またはｈＣＡ ＩＶに対する阻害定数（ＫＩ；ｎＭ）よりも著しく低いことがわかる。さらに、ｈＣＡ ＩＸに対するこの特異的阻害剤（式Ｉ）の阻害定数（ＫＩ＝５５．９ｎＭ）は、ｈＣＡ ＩＸに対する参照薬物（ＳＬＣ－００１およびＡＡＺ）の阻害定数（それぞれ、ＫＩ＝４５ｎＭ、および２５．８ｎＭ）にかなり近い。表のデータによると、特異的阻害剤（式Ｉ）は、ｈＣＡ ＩＸに対して高い親和性を示す。
本発明によれば、式Ｉがヒト結腸直腸癌細胞系（ＨＣＴ１１６）に対して抗増殖活性を示すことが見出された。これらの知見は、実施例に示される細胞生存率アッセイと一致している。
本明細書に記載のスルホンアミド誘導体化合物は、抗腫瘍および抗癌活性を有し、対象における増殖性疾患の治療、診断および／または予後において有用であることが見出された。
本発明によれば、式Ｉが、特定の癌のタイプ、特にヒト結腸直腸癌に対して、抗増殖およびアポトーシス作用を有することが見出された。
さらに、この阻害の結果、炭酸脱水酵素ＩＸの発現が式Ｉによって調節され、その機能が抑制されることが見出された。式Ｉは、アポトーシスの誘導を介して媒介される抗増殖剤として機能する。
さらなる態様において、本発明は、炭酸脱水酵素ＩＸタンパク質を阻害し、その活性をネガティブに調節する化合物（式Ｉ）に関する。
本発明の一実施形態において、開示された化合物は、炭酸脱水酵素タンパク質に対して選択性および高い親和性を示す。したがって、阻害は強力である。
文献によると、炭酸脱水酵素ＩＸに化合物ＷＥＳ－１を結合させることにより、腫瘍細胞の増殖と腫瘍の進行に関与する炭酸脱水酵素ＩＸを阻害すると、腫瘍細胞の増殖と遊走が抑制される。
本明細書において、「阻害」、「阻害する」または「阻害すること」との用語は、所与の状態、症状、または障害、または疾患の低減または抑制、または、炭酸脱水酵素などの生物学的な活性またはプロセスのベースライン活性においての有意な減少を意味する。
本発明の化合物の「治療有効量」との用語は、対象の生物学的または医学的な応答、例えば、タンパク質の活性の阻害、または症状を改善する、状態を緩和する、病気の進行を緩やかにするまたは遅らせる、または疾患や障害を予防することなど、を誘発する、本発明の化合物の非毒性で十分な量を意味する。
本明細書に開示される本発明の様々な実施形態はすべて、本明細書に記載される様々な疾患および障害を治療および／または予防する方法に関する。本明細書で述べられるように、本発明の方法で使用される化合物は、炭酸脱水酵素ＩＸの酵素活性を阻害することが可能である。
本発明は、増殖性疾患の治療または予防のための方法をさらに提供する。本発明において、「増殖性疾患」との用語には、新生物および癌、異形成、前悪性または前癌病変、異常細胞増殖、良性腫瘍、悪性腫瘍、または転移が含まれ、好ましくは癌を意味する。
さらに、本発明は、上記の化合物を含む医薬組成物、および、炭酸脱水酵素ＩＸの酵素の過剰発現に関連する障害の治療および／または予防における上記の化合物の使用および使用方法に関する。本発明の他の実施形態において、上記の化合物を含む医薬組成物は、炭酸脱水酵素ＩＸの活性の阻害により増殖障害の治療および／または予防に有用である。
本発明は、薬学的担体、および、治療有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、を含む、医薬組成物に関する。
一態様において、本開示は、治療有効量の開示の化合物を薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることを含む、哺乳動物において炭酸脱水酵素ＩＸの活性および／または過剰発現を阻害するための医薬の製造方法に関する。
これらの例は、本発明の特定の実施形態を代表することを意図しており、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
特定の実施形態
これらの実施形態において、有機合成の手法を適用して、炭酸脱水酵素ＩＸタンパク質を特異的に阻害する、式Ｉの小分子を生成した。スキームＡ～Ｄに示される合成方法によって候補分子を得た後、実験的研究により、炭酸脱水酵素ＩＸに特異的に結合する化合物（式Ｉ）が決定される。さらに、式Ｉの阻害活性の特徴付けをインビトロで研究した。
これらの実施形態において、有機合成の手法を適用して、炭酸脱水酵素ＩＸタンパク質を特異的に阻害する、式Ｉの小分子を生成した。スキームＡ～Ｄに示される合成方法によって候補分子を得た後、実験的研究により、炭酸脱水酵素ＩＸに特異的に結合する化合物（式Ｉ）が決定される。さらに、式Ｉの阻害活性の特徴付けをインビトロで研究した。
実施例１：本発明の化合物の合成
化学の部
融点は、Ｓｔｕａｒｔ融点装置で測定し、補正しなかった。赤外（ＩＲ）スペクトルは、Ｓｃｈｉｍａｄｚｕ ＦＴ－ＩＲ ８４００Ｓ分光光度計を使用し、ＫＢｒディスクとして記録した。１Ｈ－ＮＭＲおよび１３Ｃ－ＮＭＲの実験は、Ｂｒｕｋｅｒ ＮＭＲ分光計（４００／１００ＭＨｚ）を使用して実施した。化学シフト（δＨ）は、内部標準としてのＴＭＳと比較して報告する。すべてのカップリング定数（Ｊ）の値は、ヘルツで示される。化学シフト（δＣ）は、s、シングレット；ｄ、ダブレット；ｍ、マルチプレットのように報告した。すべての試薬および溶媒は、標準的な技術により乾燥および精製した。化合物１および２［２３］は、以前に製造されている。
化学の部
融点は、Ｓｔｕａｒｔ融点装置で測定し、補正しなかった。赤外（ＩＲ）スペクトルは、Ｓｃｈｉｍａｄｚｕ ＦＴ－ＩＲ ８４００Ｓ分光光度計を使用し、ＫＢｒディスクとして記録した。１Ｈ－ＮＭＲおよび１３Ｃ－ＮＭＲの実験は、Ｂｒｕｋｅｒ ＮＭＲ分光計（４００／１００ＭＨｚ）を使用して実施した。化学シフト（δＨ）は、内部標準としてのＴＭＳと比較して報告する。すべてのカップリング定数（Ｊ）の値は、ヘルツで示される。化学シフト（δＣ）は、s、シングレット；ｄ、ダブレット；ｍ、マルチプレットのように報告した。すべての試薬および溶媒は、標準的な技術により乾燥および精製した。化合物１および２［２３］は、以前に製造されている。
目的の式Ｉのスルホンアミドの製造のための一般的手順
２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノヒドラジド２（１．２ｇ、５ｍｍｏｌ）および亜硝酸ナトリウム（０．５ｇ、７ｍｍｏｌ）の塩酸溶液を、氷浴中で１時間撹拌し、次いで、室温でさらに１時間、撹拌を続け、砕いた氷の上に注いだ。得られた固体を濾過し、風乾して、２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノイルアジド３を得て、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノイルアジド３を、乾燥キシレン中で１時間還流加熱し、次いで、２－アミノベンゼンスルホンアミド５（０．８６ｇ、５ｍｍｏｌ）をこの溶液に加えた。次いで、反応混合物を還流温度で７時間加熱した。得られた固体を室温に冷却した後、濾別し、ジエチルエーテルで洗浄し、ジオキサンから再結晶して、目的の式Ｉのスルホンアミドを得た。
２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノヒドラジド２（１．２ｇ、５ｍｍｏｌ）および亜硝酸ナトリウム（０．５ｇ、７ｍｍｏｌ）の塩酸溶液を、氷浴中で１時間撹拌し、次いで、室温でさらに１時間、撹拌を続け、砕いた氷の上に注いだ。得られた固体を濾過し、風乾して、２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノイルアジド３を得て、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。２－メチル－６－（ｐ－トリル）ニコチノイルアジド３を、乾燥キシレン中で１時間還流加熱し、次いで、２－アミノベンゼンスルホンアミド５（０．８６ｇ、５ｍｍｏｌ）をこの溶液に加えた。次いで、反応混合物を還流温度で７時間加熱した。得られた固体を室温に冷却した後、濾別し、ジエチルエーテルで洗浄し、ジオキサンから再結晶して、目的の式Ｉのスルホンアミドを得た。
２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミド（式Ｉ）
白色結晶（収率８３％）、ｍ．ｐ．２１３－２１５℃；ＩＲ（ＫＢｒ，ν ｃｍ－１）：３２０７（ＮＨ２），１７１３（Ｃ＝Ｏ）および１３４２，１１６１（ＳＯ２）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）δ ｐｐｍ：２．３３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），２．５３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），７．１５（ｄｔ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－４，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ），７．２４（ｄ，２Ｈ，４－（Ｈ３Ｃ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－３およびＨ－５，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４９（ｄｔ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－５，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ），７．７１（ｄ，１Ｈ，Ｈ－５ピリジン，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．７９（ｄｄ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－３，Ｊ＝８．０，１．２Ｈｚ），７．９２（ｄ，２Ｈ，４－（Ｈ３Ｃ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－２およびＨ－６，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９６（ｄ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－６，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ－４ピリジン，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．２４（ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ２Ｏ交換可能），８．２７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ２Ｏ交換可能）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，１００ＭＨｚ）δ ｐｐｍ：２１．２５（ＣＨ３），２２．０３（ＣＨ３），１１７．７０，１２２．８８，１２４．２９，１２６．４１（２Ｃ），１２７．８１，１２９．６８（２Ｃ），１３１．１３，１３２．６５，１３２．７１，１３２．９０，１３６．２２，１３６．５９，１３８．１８，１４９．９１，１５０．４７，１５３．２６（Ｃ＝Ｏ）．
白色結晶（収率８３％）、ｍ．ｐ．２１３－２１５℃；ＩＲ（ＫＢｒ，ν ｃｍ－１）：３２０７（ＮＨ２），１７１３（Ｃ＝Ｏ）および１３４２，１１６１（ＳＯ２）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）δ ｐｐｍ：２．３３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），２．５３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），７．１５（ｄｔ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－４，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ），７．２４（ｄ，２Ｈ，４－（Ｈ３Ｃ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－３およびＨ－５，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４９（ｄｔ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－５，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ），７．７１（ｄ，１Ｈ，Ｈ－５ピリジン，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．７９（ｄｄ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－３，Ｊ＝８．０，１．２Ｈｚ），７．９２（ｄ，２Ｈ，４－（Ｈ３Ｃ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－２およびＨ－６，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９６（ｄ，１Ｈ，２－（Ｈ２ＮＯ２Ｓ）－Ｃ６Ｈ４のＨ－６，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ－４ピリジン，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．２４（ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ２Ｏ交換可能），８．２７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ２Ｏ交換可能）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，１００ＭＨｚ）δ ｐｐｍ：２１．２５（ＣＨ３），２２．０３（ＣＨ３），１１７．７０，１２２．８８，１２４．２９，１２６．４１（２Ｃ），１２７．８１，１２９．６８（２Ｃ），１３１．１３，１３２．６５，１３２．７１，１３２．９０，１３６．２２，１３６．５９，１３８．１８，１４９．９１，１５０．４７，１５３．２６（Ｃ＝Ｏ）．
実施例２：炭酸脱水酵素ＩＸに対する式Ｉの特異的阻害効果
ＣＡ阻害アッセイ
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｈｏｔｏｐｈｙｓｉｃｓのストップトフロー装置を使用して、ＣＡ触媒によるＣＯ２水和活性を分析した。フェノールレッド（濃度０．２ｍＭ）を指示薬として使用し、最大吸光度５５７ｎｍとし、バッファーとして２０ｍＭのＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．５）、および２０ｍＭのＮａ２ＳＯ４（イオン強度を一定に維持するため）を使用し、続いて、１０～１００秒間のＣＡ触媒ＣＯ２水和反応の初期速度とした。ＣＯ２濃度は、動力学的パラメーターと阻害定数の決定のために、１．７～１７ｍＭの範囲とした。各阻害剤について、初期速度を決定するために、反応の最初の５～１０％の少なくとも６つのトレースが使用される。非触媒の速度を同じ方法で決定し、観察された総速度から差し引いた。阻害剤のストック溶液（０．１ｍＭ）を蒸留脱イオン水で調製し、アッセイバッファーで０．０１ｎＭまで希釈した。Ｅ－Ｉ複合体の形成を可能にするために、アッセイ前に、阻害剤および酵素溶液を一緒に室温で１５分間、プレインキュベートした。阻害定数は、ＰＲＩＳＭ３およびＣｈｅｎｇ－Ｐｒｕｓｏｆｆ式を使用した非線形最小二乗法によって得られ、少なくとも３つの異なる測定値の平均を表した。
ＣＡ阻害アッセイ
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｈｏｔｏｐｈｙｓｉｃｓのストップトフロー装置を使用して、ＣＡ触媒によるＣＯ２水和活性を分析した。フェノールレッド（濃度０．２ｍＭ）を指示薬として使用し、最大吸光度５５７ｎｍとし、バッファーとして２０ｍＭのＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．５）、および２０ｍＭのＮａ２ＳＯ４（イオン強度を一定に維持するため）を使用し、続いて、１０～１００秒間のＣＡ触媒ＣＯ２水和反応の初期速度とした。ＣＯ２濃度は、動力学的パラメーターと阻害定数の決定のために、１．７～１７ｍＭの範囲とした。各阻害剤について、初期速度を決定するために、反応の最初の５～１０％の少なくとも６つのトレースが使用される。非触媒の速度を同じ方法で決定し、観察された総速度から差し引いた。阻害剤のストック溶液（０．１ｍＭ）を蒸留脱イオン水で調製し、アッセイバッファーで０．０１ｎＭまで希釈した。Ｅ－Ｉ複合体の形成を可能にするために、アッセイ前に、阻害剤および酵素溶液を一緒に室温で１５分間、プレインキュベートした。阻害定数は、ＰＲＩＳＭ３およびＣｈｅｎｇ－Ｐｒｕｓｏｆｆ式を使用した非線形最小二乗法によって得られ、少なくとも３つの異なる測定値の平均を表した。
実施例３：生物学的評価
細胞培養
ＨＣＴ１１６、ヒト結腸直腸癌細胞株、およびヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、米国のＡＴＣＣから入手し、１０％熱不活化ウシ胎児血清１％ペニシリン／ストレプトマイシン／アムホテリシン（Ｌｉｆｅ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＴＭ、米国）を含む高グルコースＤＭＥＭ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で増殖させた。
細胞培養
ＨＣＴ１１６、ヒト結腸直腸癌細胞株、およびヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、米国のＡＴＣＣから入手し、１０％熱不活化ウシ胎児血清１％ペニシリン／ストレプトマイシン／アムホテリシン（Ｌｉｆｅ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＴＭ、米国）を含む高グルコースＤＭＥＭ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で増殖させた。
細胞生存率アッセイ
異なる濃度の式Ｉ（５０μＭ、２５μＭ、１２．５μＭ、６．２５μＭ、３．１２５μＭ、１μＭ）で、２４、４８、および７２時間処理した後の、および、通常の細胞培養条件である温度３７℃、相対湿度８０％、５％ＣＯ２でのインキュベーション後の、生存している結腸直腸癌細胞（ＨＣＴ１１６細胞）、およびヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）のパーセンテージは、３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－５－（３－カルボキシメトキシフェニル）－２－（４－スルホフェニル）－２Ｈ－テトラゾリウム（ＭＴＳ）還元アッセイ（Ｃｅｌｌ ｔｉｔｅｒ９６（登録商標）水性ＭＴＳ試薬粉末、Ｐｒｏｍｅｇａ（登録商標））によって決定した。さらに、ＨＣＴ１１６細胞の５０％の細胞死を引き起こす用量である式Ｉの薬剤のＩＣ５０は、ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェアを使用して決定した。
異なる濃度の式Ｉ（５０μＭ、２５μＭ、１２．５μＭ、６．２５μＭ、３．１２５μＭ、１μＭ）で、２４、４８、および７２時間処理した後の、および、通常の細胞培養条件である温度３７℃、相対湿度８０％、５％ＣＯ２でのインキュベーション後の、生存している結腸直腸癌細胞（ＨＣＴ１１６細胞）、およびヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）のパーセンテージは、３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－５－（３－カルボキシメトキシフェニル）－２－（４－スルホフェニル）－２Ｈ－テトラゾリウム（ＭＴＳ）還元アッセイ（Ｃｅｌｌ ｔｉｔｅｒ９６（登録商標）水性ＭＴＳ試薬粉末、Ｐｒｏｍｅｇａ（登録商標））によって決定した。さらに、ＨＣＴ１１６細胞の５０％の細胞死を引き起こす用量である式Ｉの薬剤のＩＣ５０は、ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェアを使用して決定した。
ＨＵＶＥＣ細胞（健康な細胞）をさまざまな濃度の式Ｉの薬剤でそれぞれ、２４時間、４８時間（データは示していない）、および７２時間（図２）、インキュベートした後、５０μＭの濃度の式Ｉで処理した場合の平均生存率は、８０．５３％であったが、濃度（２５μＭ、１２．５μＭ、６．２５μＭ、３．１２５μＭ、１μＭ）で処理した場合、平均生存率の範囲は、９２．０７％～９６．８９％であった。一方、濃度（５０μＭ、２５μＭ、１２．５μＭ、６．２５μＭ、３．１２５μＭ、１μＭ）の式Ｉで、２４時間処理したＨＣＴ１１６細胞（ヒト結腸直腸癌細胞株）の平均生存率の範囲は、６９．２８％～９７．３１％（図１ａ）であり、４８時間の処理後は、５７．６０％～９９．９６％（図１ｂ）の範囲であり、さらに、７２時間処理後の生存率は、３８．１５％～９７．８２％（図１ｃ）の範囲であった。上記のＨＣＴ１１６細胞の生存率の結果から、ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェアでＩＣ５０を計算すると、約２４μＭであった。
アネキシンＶ－ＦＩＴＣアポトーシス検出アッセイ
ＨＣＴ１１６細胞を、式ＩのＩＣ５０でそれぞれ、２４、４８、および７２時間処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、インキュベートした。アポトーシス細胞は、製造業者のプロトコルに従って、ＡｐｏＤＥＴＥＣＴＴＭアネキシンＶ－ＦＩＴＣキット（Ｌｉｆｅ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＴＭ、米国）を使用したフローサイトメトリー（Ｂｅｃｋｍａｎフローサイトメーター）によって、検出した。
ＨＣＴ１１６細胞を、式ＩのＩＣ５０でそれぞれ、２４、４８、および７２時間処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、インキュベートした。アポトーシス細胞は、製造業者のプロトコルに従って、ＡｐｏＤＥＴＥＣＴＴＭアネキシンＶ－ＦＩＴＣキット（Ｌｉｆｅ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＴＭ、米国）を使用したフローサイトメトリー（Ｂｅｃｋｍａｎフローサイトメーター）によって、検出した。
ＨＣＴ１１６細胞を、式Ｉで２４時間処理すると、初期アポトーシス細胞の割合は約３０％増加したが（図３ａ～図３ｂ）、４８時間インキュベーションすると、初期アポトーシスを受けた細胞の割合は、約３３％になった（図３ｃ～図３ｄ）。さらに、ＨＣＴ１１６細胞を、式Ｉで７２時間処理すると、初期段階のアポトーシスの細胞の割合が２５％になり、後期段階のアポトーシスの細胞の割合が約１６．５％になることが分かった（図３ｅ～３ｆ）。これらの所見は、式Ｉの薬剤がヒト結腸直腸癌（ＨＣＴ１１６）細胞株に対して抗増殖活性を示すことを示した細胞生存率アッセイと一致する。
フローサイトメトリーによる細胞周期分析
ＨＣＴ１１６細胞を、式ＩのＩＣ５０でそれぞれ、４８時間および７２時間処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、インキュベートした。細胞周期を、ヨウ化プロピジウム染色によるＤＮＡ含有量の定量化によって分析し、細胞周期の進行に対する式Ｉの効果を決定した。
ＨＣＴ１１６細胞を、式ＩのＩＣ５０でそれぞれ、４８時間および７２時間処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、インキュベートした。細胞周期を、ヨウ化プロピジウム染色によるＤＮＡ含有量の定量化によって分析し、細胞周期の進行に対する式Ｉの効果を決定した。
ＨＣＴ１１６細胞を、式Ｉでそれぞれ、４８時間および７２時間処理すると（図４ａ～図４ｂ）、Ｇ１期の細胞の割合が減少し、Ｓ期の細胞の割合が増加したことが分かった。これらの所見は、細胞がＳ期で停止し、Ｓ期の細胞の蓄積が、アポトーシスの誘導を生じさせるＤＮＡ複製の遮断をもたらすことを示した［２５］。
ＴＵＮＥＬ（ＤＮＡ断片化）アッセイ
アポトーシスを、アポトーシスの後期段階の特徴であるＤＮＡ断片化を検出するＴＵＮＥＬアッセイによって確認した。ＨＣＴ１１６細胞をカバースリップ上に播種し、式ＩのＩＣ５０で処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、７２時間インキュベートした。処理後、Ａｌｅｘａ ＦｌｕｏｒＴＭ４８８色素（緑色）を用いたＣｌｉｃｋ－ｉＴＴＭ Ｐｌｕｓ ＴＵＮＥＬアッセイ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎＴＭ）を使用して、断片化したＤＮＡを検出し、細胞をＤＡＰＩで対比染色した。染色された細胞を共焦点顕微鏡で分析した。
アポトーシスを、アポトーシスの後期段階の特徴であるＤＮＡ断片化を検出するＴＵＮＥＬアッセイによって確認した。ＨＣＴ１１６細胞をカバースリップ上に播種し、式ＩのＩＣ５０で処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、７２時間インキュベートした。処理後、Ａｌｅｘａ ＦｌｕｏｒＴＭ４８８色素（緑色）を用いたＣｌｉｃｋ－ｉＴＴＭ Ｐｌｕｓ ＴＵＮＥＬアッセイ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎＴＭ）を使用して、断片化したＤＮＡを検出し、細胞をＤＡＰＩで対比染色した。染色された細胞を共焦点顕微鏡で分析した。
図５ｂに示すように、式Ｉで７２時間処理したＨＣＴ１１６細胞は、陰性対照細胞（図５ａ）と比較して、ＴＵＮＥＬ陽性（緑色蛍光）のＤＮＡ鎖切断を示した。これらの所見により、ＨＣＴ１１６細胞に対する式Ｉのアポトーシス効果が確認された。
インビトロ生細胞イメージング
ＨＣＴ１１６細胞を、６ウェルプレートに播種し、ＩＣ５０の式Ｉの薬剤で処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、７２時間インキュベートし、細胞の挙動を７２時間、オリンパスの顕微鏡を用いた動画で追跡してモニタリングした。
ＨＣＴ１１６細胞を、６ウェルプレートに播種し、ＩＣ５０の式Ｉの薬剤で処理し、温度３７℃、相対湿度８０％、および５％ＣＯ２で、７２時間インキュベートし、細胞の挙動を７２時間、オリンパスの顕微鏡を用いた動画で追跡してモニタリングした。
結論
以上の知見から、炭酸脱水酵素アッセイによると、新たに合成した式ＩのｈＣＡ ＩＸ阻害剤は、腫瘍細胞の増殖と腫瘍の進行を誘導するｈＣＡ ＩＸ酵素に対して高い親和性を示すことが分かった。さらに、ＨＣＴ１１６癌細胞を式Ｉで処理した際のアポトーシスアッセイの結果に基づくと、ＨＵＶＥＣ（健康なヒト臍帯静脈内皮細胞）の処理では軽度の毒性を示す９４％を超える生存率を示す一方で、式１が細胞のアポトーシスを誘導することが分かった。最終的に、新しく合成した新規化合物（２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミド）（式Ｉ）は、健康なヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の細胞に対して非常にわずかな毒性であり、ヒト結腸直腸癌細胞株ＨＣＴ１１６に対して、抗増殖性およびアポトーシス性の効果を有すると結論付けることができる。
以上の知見から、炭酸脱水酵素アッセイによると、新たに合成した式ＩのｈＣＡ ＩＸ阻害剤は、腫瘍細胞の増殖と腫瘍の進行を誘導するｈＣＡ ＩＸ酵素に対して高い親和性を示すことが分かった。さらに、ＨＣＴ１１６癌細胞を式Ｉで処理した際のアポトーシスアッセイの結果に基づくと、ＨＵＶＥＣ（健康なヒト臍帯静脈内皮細胞）の処理では軽度の毒性を示す９４％を超える生存率を示す一方で、式１が細胞のアポトーシスを誘導することが分かった。最終的に、新しく合成した新規化合物（２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミド）（式Ｉ）は、健康なヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の細胞に対して非常にわずかな毒性であり、ヒト結腸直腸癌細胞株ＨＣＴ１１６に対して、抗増殖性およびアポトーシス性の効果を有すると結論付けることができる。
参考文献
1. U.S. FOOD & DRUG ADMINISTRATION. FDA expands approved use of Stivarga to treat liver cancer. 2017, April 27; Available from https://www.fda.gov/news-events/press-announcements/fda-expands-approved-use-stivarga-treat-liver-cancer.
2. Cui, J.J., et al., Structure-based drug design of crizotinib (PF-02341066), a potent and selective dual inhibitor of mesenchymal-epithelial transition factor (c-MET) kinase and anaplastic lymphoma kinase (ALK). J Med Chem, 2011. 54(18): p. 6342-63.
3. Wilhelm, S., et al., Discovery and development of sorafenib: a multikinase inhibitor for treating cancer. Nat Rev Drug Discov, 2006. 5(10): p. 835-44.
4. Wilhelm; Scott; (Orange, C.D.J.B., CT) ; Ladouceur; Gaetan; (Guilford, CT) ; Lynch; Mark; (Madison, CT) ; Scott; William J.; (Guilford, CT), Diaryl ureas with kinase inhibiting activity 2007, January 25: U.S.
5. Roed Skarderud, M., et al., Efficacy and safety of regorafenib in the treatment of metastatic colorectal cancer: A systematic review. Cancer Treat Rev, 2018. 62: p. 61-73.
6. Zhang, L. and J. Yu, Role of apoptosis in colon cancer biology, therapy, and prevention. Curr Colorectal Cancer Rep, 2013. 9(4): p. 013-0188.
7. Chen, D. et al., Regorafenib inhibits colorectal tumor growth through PUMA-mediated apoptosis. Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research, 2014. 20(13): p. 3472-3484.
8. Sahu, A., et al., Crizotinib: A comprehensive review. South Asian J Cancer, 2013. 2(2): p. 91-7.
9. Frampton, J.E., Crizotinib: a review of its use in the treatment of anaplastic lymphoma kinase-positive, advanced non-small cell lung cancer. Drugs, 2013. 73(18): p. 2031-51.
10. Dai, X. et al., (S)-crizotinib induces apoptosis in human non-small cell lung cancer cells by activating ROS independent of MTH1. J Exp Clin Cancer Res, 2017. 36(1): p. 017-0584.
11. Supuran, C.T., Carbonic anhydrases: novel therapeutic applications for inhibitors and activators. Nat Rev Drug Discov, 2008. 7(2): p. 168-81.
12. Ozensoy Guler, O., C. Capasso, and C.T. Supuran, A magnificent enzyme superfamily: carbonic anhydrases, their purification and characterization. J Enzyme Inhib Med Chem, 2016. 31(5): p. 689-94.
13. Supuran, C.T., Carbonic Anhydrase Inhibition and the Management of Hypoxic Tumors. Metabolites, 2017. 7(3).
14. De Simone, G. and C.T. Supuran, Carbonic anhydrase IX: Biochemical and crystallographic characterization of a novel antitumor target. Biochim Biophys Acta, 2010. 2: p. 404-9.
15. Pastorek, J. and S. Pastorekova, Hypoxia-induced carbonic anhydrase IX as a target for cancer therapy: from biology to clinical use. Semin Cancer Biol, 2015. 31: p. 52-64.
16. Lou, Y., et al., Targeting tumor hypoxia: suppression of breast tumor growth and metastasis by novel carbonic anhydrase IX inhibitors. Cancer Res, 2011. 71(9): p. 3364-76.
17. Pacchiano, F. et al., Selective hydrophobic pocket binding observed within the carbonic anhydrase II active site accommodate different 4-substituted-ureido-benzenesulfonamides and correlate to inhibitor potency. Chem Commun, 2010. 46(44): p. 8371-3.
18. Pacchiano, F., et al., Ureido-substituted benzenesulfonamides potently inhibit carbonic anhydrase IX and show antimetastatic activity in a model of breast cancer metastasis. J Med Chem, 2011. 54(6): p. 1896-902.
19. Haggar, F.A. and R.P. Boushey, Colorectal cancer epidemiology: incidence, mortality, survival, and risk factors. Clinics in colon and rectal surgery, 2009. 22(4): p. 191-197.
20. Kuipers, E.J., et al., Colorectal cancer. Nature reviews. Disease primers, 2015. 1: p. 15065-15065.
21. American Cancer Society. Key statistics for colorectal cancer. 2019; Available from https://www.cancer.org/cancer/colon-rectal-cancer/about/key-statistics.html.
22. Marley, A.R. and H. Nan, Epidemiology of colorectal cancer. International journal of molecular epidemiology and genetics, 2016. 7(3): p. 105-114.
23. Eldehna, W.M., et al., Design, synthesis and QSAR study of certain isatin-pyridine hybrids as potential anti-proliferative agents. Eur J Med Chem, 2015. 90: p. 684-94.
24. Khalifah, R.G., The carbon dioxide hydration activity of carbonic anhydrase. I. Stop-flow kinetic studies on the native human isoenzymes B and C. J Biol Chem, 1971. 246(8): p. 2561-73.
25. Xu, X., et al., Inhibition of DNA replication and induction of S phase cell cycle arrest by G-rich oligonucleotides. J Biol Chem, 2001. 276(46): p. 43221-30.
26. Okuno, K., et al., Carbonic anhydrase IX enhances tumor cell proliferation and tumor progression in osteosarcoma. Onco Targets Ther, 2018. 11: p. 6879-6886.
1. U.S. FOOD & DRUG ADMINISTRATION. FDA expands approved use of Stivarga to treat liver cancer. 2017, April 27; Available from https://www.fda.gov/news-events/press-announcements/fda-expands-approved-use-stivarga-treat-liver-cancer.
2. Cui, J.J., et al., Structure-based drug design of crizotinib (PF-02341066), a potent and selective dual inhibitor of mesenchymal-epithelial transition factor (c-MET) kinase and anaplastic lymphoma kinase (ALK). J Med Chem, 2011. 54(18): p. 6342-63.
3. Wilhelm, S., et al., Discovery and development of sorafenib: a multikinase inhibitor for treating cancer. Nat Rev Drug Discov, 2006. 5(10): p. 835-44.
4. Wilhelm; Scott; (Orange, C.D.J.B., CT) ; Ladouceur; Gaetan; (Guilford, CT) ; Lynch; Mark; (Madison, CT) ; Scott; William J.; (Guilford, CT), Diaryl ureas with kinase inhibiting activity 2007, January 25: U.S.
5. Roed Skarderud, M., et al., Efficacy and safety of regorafenib in the treatment of metastatic colorectal cancer: A systematic review. Cancer Treat Rev, 2018. 62: p. 61-73.
6. Zhang, L. and J. Yu, Role of apoptosis in colon cancer biology, therapy, and prevention. Curr Colorectal Cancer Rep, 2013. 9(4): p. 013-0188.
7. Chen, D. et al., Regorafenib inhibits colorectal tumor growth through PUMA-mediated apoptosis. Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research, 2014. 20(13): p. 3472-3484.
8. Sahu, A., et al., Crizotinib: A comprehensive review. South Asian J Cancer, 2013. 2(2): p. 91-7.
9. Frampton, J.E., Crizotinib: a review of its use in the treatment of anaplastic lymphoma kinase-positive, advanced non-small cell lung cancer. Drugs, 2013. 73(18): p. 2031-51.
10. Dai, X. et al., (S)-crizotinib induces apoptosis in human non-small cell lung cancer cells by activating ROS independent of MTH1. J Exp Clin Cancer Res, 2017. 36(1): p. 017-0584.
11. Supuran, C.T., Carbonic anhydrases: novel therapeutic applications for inhibitors and activators. Nat Rev Drug Discov, 2008. 7(2): p. 168-81.
12. Ozensoy Guler, O., C. Capasso, and C.T. Supuran, A magnificent enzyme superfamily: carbonic anhydrases, their purification and characterization. J Enzyme Inhib Med Chem, 2016. 31(5): p. 689-94.
13. Supuran, C.T., Carbonic Anhydrase Inhibition and the Management of Hypoxic Tumors. Metabolites, 2017. 7(3).
14. De Simone, G. and C.T. Supuran, Carbonic anhydrase IX: Biochemical and crystallographic characterization of a novel antitumor target. Biochim Biophys Acta, 2010. 2: p. 404-9.
15. Pastorek, J. and S. Pastorekova, Hypoxia-induced carbonic anhydrase IX as a target for cancer therapy: from biology to clinical use. Semin Cancer Biol, 2015. 31: p. 52-64.
16. Lou, Y., et al., Targeting tumor hypoxia: suppression of breast tumor growth and metastasis by novel carbonic anhydrase IX inhibitors. Cancer Res, 2011. 71(9): p. 3364-76.
17. Pacchiano, F. et al., Selective hydrophobic pocket binding observed within the carbonic anhydrase II active site accommodate different 4-substituted-ureido-benzenesulfonamides and correlate to inhibitor potency. Chem Commun, 2010. 46(44): p. 8371-3.
18. Pacchiano, F., et al., Ureido-substituted benzenesulfonamides potently inhibit carbonic anhydrase IX and show antimetastatic activity in a model of breast cancer metastasis. J Med Chem, 2011. 54(6): p. 1896-902.
19. Haggar, F.A. and R.P. Boushey, Colorectal cancer epidemiology: incidence, mortality, survival, and risk factors. Clinics in colon and rectal surgery, 2009. 22(4): p. 191-197.
20. Kuipers, E.J., et al., Colorectal cancer. Nature reviews. Disease primers, 2015. 1: p. 15065-15065.
21. American Cancer Society. Key statistics for colorectal cancer. 2019; Available from https://www.cancer.org/cancer/colon-rectal-cancer/about/key-statistics.html.
22. Marley, A.R. and H. Nan, Epidemiology of colorectal cancer. International journal of molecular epidemiology and genetics, 2016. 7(3): p. 105-114.
23. Eldehna, W.M., et al., Design, synthesis and QSAR study of certain isatin-pyridine hybrids as potential anti-proliferative agents. Eur J Med Chem, 2015. 90: p. 684-94.
24. Khalifah, R.G., The carbon dioxide hydration activity of carbonic anhydrase. I. Stop-flow kinetic studies on the native human isoenzymes B and C. J Biol Chem, 1971. 246(8): p. 2561-73.
25. Xu, X., et al., Inhibition of DNA replication and induction of S phase cell cycle arrest by G-rich oligonucleotides. J Biol Chem, 2001. 276(46): p. 43221-30.
26. Okuno, K., et al., Carbonic anhydrase IX enhances tumor cell proliferation and tumor progression in osteosarcoma. Onco Targets Ther, 2018. 11: p. 6879-6886.
Claims (8)
- ２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミドである、
- 炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤として使用するための、請求項１に記載の化合物。
- 医薬として使用するための、請求項２に記載の化合物。
- 炭酸脱水酵素ＩＸの酵素活性および／または過剰発現を阻害する医薬を製造するための、請求項１～４のいずれかに記載の化合物の使用。
- 炭酸脱水酵素ＩＸの酵素の過剰発現を特徴とする疾患または障害の治療および／または予防に有用な医薬を製造するための、請求項１～４のいずれかに記載の化合物の使用。
- 疾患または障害が、癌である、請求項５に記載の使用。
- 疾患または障害が、結腸直腸癌である、請求項６に記載の使用。
- 薬学的担体、および、治療有効量の先行する請求項のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、を含む、医薬組成物。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/TR2020/050477 WO2021246974A1 (en) | 2020-06-02 | 2020-06-02 | 2-(3-(2-methyl-6-(p-tolyl) pyridine-3-yl) ureido) benzenesulfonamide and derivatives as inhibitor of carbonic anhydrase ix for the treatment of cancer |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023536388A true JP2023536388A (ja) | 2023-08-25 |
| JP7514036B2 JP7514036B2 (ja) | 2024-07-10 |
Family
ID=78831369
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2022574320A Active JP7514036B2 (ja) | 2020-06-02 | 2020-06-02 | 癌の治療のための炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤としての２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミドおよびその誘導体 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20230234926A1 (ja) |
| EP (1) | EP4161910A4 (ja) |
| JP (1) | JP7514036B2 (ja) |
| CN (1) | CN115697981A (ja) |
| CA (1) | CA3178176A1 (ja) |
| WO (1) | WO2021246974A1 (ja) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008017932A2 (en) | 2006-08-09 | 2008-02-14 | Pfizer Products Inc. | Heterocycles useful as inhibitors of carbonic anhydrase |
| WO2008071421A1 (en) | 2006-12-15 | 2008-06-19 | Nicox S.A. | Nitrate esters of carbonic anhydrase inhibitors |
| NL1038473C2 (en) * | 2010-12-24 | 2012-06-27 | Centre Nat Rech Scient | Cancer targeting using carbonic anhydrase isoform ix inhibitors. |
| WO2012175654A1 (en) | 2011-06-23 | 2012-12-27 | Facultes Universitaires Notre-Dame De La Paix | Tetraline sulfonamide derivatives for use in the treatment of proliferative disorders |
| BR112018000065B1 (pt) | 2015-07-01 | 2023-11-07 | Signalchem Lifesciences Corporation | Compostos de aril sulfonamida como inibidores de anidrase carbônica, composição farmacêutica compreendendo os ditos compostos e usos terapêuticos dos mesmos no tratamento de câncer |
-
2020
- 2020-06-02 EP EP20939077.2A patent/EP4161910A4/en active Pending
- 2020-06-02 WO PCT/TR2020/050477 patent/WO2021246974A1/en active Application Filing
- 2020-06-02 JP JP2022574320A patent/JP7514036B2/ja active Active
- 2020-06-02 CA CA3178176A patent/CA3178176A1/en active Pending
- 2020-06-02 US US18/007,749 patent/US20230234926A1/en active Pending
- 2020-06-02 CN CN202080101662.1A patent/CN115697981A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115697981A (zh) | 2023-02-03 |
| US20230234926A1 (en) | 2023-07-27 |
| CA3178176A1 (en) | 2021-12-09 |
| JP7514036B2 (ja) | 2024-07-10 |
| WO2021246974A1 (en) | 2021-12-09 |
| EP4161910A1 (en) | 2023-04-12 |
| EP4161910A4 (en) | 2023-08-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2970221B1 (en) | Cdc7 inhibitors | |
| EP3325488B1 (en) | Chiral diaryl macrocycle and use thereof in the treatment of cancer | |
| US20100063066A1 (en) | Raf inhibitor compounds and methods of use thereof | |
| TWI466870B (zh) | Anti - tumor efficacy enhancer | |
| KR20210087440A (ko) | 삼중 음성 유방암의 치료를 위한 병용 요법 | |
| TWI837478B (zh) | 用於治療ｂｒａｆ相關的疾病和病症之化合物 | |
| US20220119378A1 (en) | Compounds and uses thereof | |
| WO2008120004A1 (en) | Combination of a mek- inhibitor and a b-raf inhibitor for the treatment of cancer | |
| CA2922542A1 (en) | Arylquinoline and analog compounds and use thereof to treat cancer | |
| Kardile et al. | Design, synthesis, and biological evaluation of novel quinoline derivatives as small molecule mutant EGFR inhibitors targeting resistance in NSCLC: In vitro screening and ADME predictions | |
| An et al. | Discovery of novel artemisinin-sulfonamide hybrids as potential carbonic anhydrase IX inhibitors with improved antiproliferative activities | |
| KR20070085677A (ko) | 만성 림프성 백혈병의 치료 방법 및 치료 조성물 | |
| JP7514036B2 (ja) | 癌の治療のための炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤としての２－（３－（２－メチル－６－（ｐ－トリル）ピリジン－３－イル）ウレイド）ベンゼンスルホンアミドおよびその誘導体 | |
| JP6462868B2 (ja) | 抗がん薬物とするアリールアミン置換のキノキサリン | |
| RU2815012C1 (ru) | 2-(3-(2-метил-6-(п-толил)пиридин-3-ил)уреидо)бензолсульфонамид и производные в качестве ингибиторов карбоангидразы ix для лечения рака | |
| Wang et al. | Novel metronidazole-sulfonamide derivatives as potent and selective carbonic anhydrase inhibitors: design, synthesis and biology analysis | |
| Xi et al. | Modification of osimertinib to discover new potent EGFRC797S-TK inhibitors | |
| CN107406418A (zh) | 4,5‑二氢咪唑衍生物及其作为组蛋白脱甲基酶(kdm2b)抑制剂的用途 | |
| US20230382920A1 (en) | SHMT Inhibitors | |
| TWI695000B (zh) | 用於抑制ａｄａｍ９活性之化合物、其醫藥組合物及其用途 | |
| Soliman et al. | Design, synthesis, and docking studies of novel pyrazole-based scaffolds and their evaluation as VEGFR2 inhibitors in the treatment of prostate cancer | |
| Yu et al. | Structural classification of EZH2 inhibitors and prospects for the treatment of tumor: a review | |
| TWI735210B (zh) | Ａｄａｍ９抑制劑作為免疫調節劑之用途 | |
| Kuczak et al. | 4-furanylvinylquinoline derivative as a new scaffold for the design of oxidative stress initiator and glucose transporters inhibitor drugs | |
| CA3162280A1 (en) | 4,5-dihydro-1h-pyrazolyl compounds as repication protein a (rpa)-dna interaction inhibitors |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230601 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230601 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240528 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240621 |