JP2023531252A - 抗ｂ７－ｈ３抗体を含む抗体－薬物コンジュゲート - Google Patents

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キム，スンヨン
パーク，スホ
ジュン，ドゥファン
ソ，ドンフン
リ，サングァン
ユン，サンヒョン
ハ，ジヒョン
リ，ヒャン，スク
パーク，オック
ソ，ボムソク
キム，セナ
ソル，ミナ
ソン，ジナ
ウ，スン，ホ
チョ，ジョンウン
リ，ジェホ
リ，ヒュン，ミ
ウン パーク，ジェ
ソ，ヨンジャ
リ，ウンジン
ジュ リ，ヒョン
シム，ウン－ヨン
コ，ユンジュン
リ，ミンジュ
パーク，ヨン，ウ
リュウ，ヨサプ
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イントゥーセル，インコーポレーティッド
ワイ－バイオロジクス インコーポレーテッド
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Abstract

本開示は、１つ以上の活性薬剤が、リンカーを介して抗Ｂ７－Ｈ３抗体にコンジュゲート化される、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。リンカーは、活性薬剤を抗体に共有結合的に連結する単位を含み得る。本開示は、Ｂ７－Ｈ３に特異的に結合するモノクローナル抗体及び抗原結合断片、バリアント、多量体態様、若しくはその二重特異性、並びに様々な治療、診断及び予防の適応において、これらの抗Ｂ７－Ｈ３抗体及びその抗原結合断片を作製し、使用する方法に更に関する。【選択図】なし

Description

関連出願
本出願は、２０２０年６月２６日に出願された米国仮特許出願第６３／０４４，７６４号に対する優先権の利益を主張する。本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、抗体の結合特異性と、化学療法剤の効力とを組み合わせたものである。ＡＤＣ技術は、薬物を標的がん細胞に正確に送達し、健康な細胞に対する巻き添え損傷を最小限に抑えつつ、特定の条件下で放出することを可能にするため、ＡＤＣ技術は、治療抗体の有効性を増加させ、有害反応のリスクを減少させる。
Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）は、Ｂ７ファミリーの新規のメンバーであり、最大およそ３０％の配列相同性を共有する。Ｂ７－Ｈ３は、初期に、Ｔ細胞の共刺激分子として導入されたが、ヒト免疫においてヘルパーＴ細胞、細動傷害性Ｔ細胞、及びナチュラルキラー細胞を調節することができる、共阻害チェックポイントリガンドであることが証明されている。Ｂ７－Ｈ３タンパク質の発現は、正常組織では非常に限定されているが、抗原提示細胞の細胞表面上で誘導され、原発性がん及び転移性がんを有する様々な固形腫瘍では、広範に広がっている。また、Ｂ７－Ｈ３発現は、がん幹細胞及び腫瘍血管系を含む複数のがん細胞型で検出される。Ｂ７－Ｈ３過剰発現は、腫瘍における疾患の重症度及び臨床転帰不良と深く相関しているようにみえる。
したがって、Ｂ７－Ｈ３を標的化する改善された抗体－薬物コンジュゲートの必要性が存在する。
いくつかの態様では、本開示は、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。いくつかの実施形態では、本開示は、抗体と、リンカーと、活性薬剤（例えば、薬物）と、を含む、抗体－薬物コンジュゲートに関する。抗体－薬物コンジュゲートは、例えば、抗体及びリンカーから活性薬剤を放出する際に使用するための、自己犠牲基を含み得る。
本開示は、Ｂ７－Ｈ３に結合するモノクローナル抗体及び抗原結合断片、又は任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくはその二重特異性を提供する。これらの抗体及び抗原結合断片、又はその任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくはその二重特異性は、本明細書では、抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体、若しくは抗Ｂ７－Ｈ３ ｍＡｂ、若しくは抗原結合断片、又はその任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくはその二重特異性と総称される。好ましくは、モノクローナル抗体及び抗原結合断片、又は任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくはその二重特異性は、少なくともヒトＢ７－Ｈ３に特異的である。いくつかの実施形態では、ヒトＢ７－Ｈ３を認識するモノクローナル抗体及び抗原結合断片、又は任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくはその二重特異性は、少なくとも１つの他の非ヒトＢ７－Ｈ３タンパク質、例えば、非限定的な例として、非ヒト霊長類Ｂ７－Ｈ３、例えば、カニクイザルＢ７－Ｈ３、及び／又はげっ歯類Ｂ７－Ｈ３に対しても交差反応性である。
いくつかの態様では、本開示は、抗体と、抗体に共有結合的にカップリングされた少なくとも１つの分岐リンカーと、分岐リンカーに共有結合的にカップリングされた少なくとも１つ又は２つの活性薬剤と、を含む、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。分岐リンカーは、分岐単位を含んでいてもよく、少なくとも１つの薬物が、二次リンカーを介して分岐単位にカップリングされており、分岐単位は、一次リンカーによって抗体にカップリングされる。一次リンカー及び／又は二次リンカーは、少なくとも１つのポリエチレングリコール単位を含み得る。
いくつかの態様では、本開示は、式Ｉによって表される抗体コンジュゲート、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であって、
Figure 2023531252000001
式中、
Ａｂが、可変重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲＨ１）、可変重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲＨ２）、可変重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲＨ３）、可変軽鎖相補性決定領域１（ＣＤＲＬ１）、可変軽鎖相補性決定領域２（ＣＤＲＬ２）、及び可変軽鎖相補性決定領域３（ＣＤＲＬ３）を含む、抗Ｂ７－Ｈ３抗体又はその抗原結合断片であり、
ＣＤＲＨ１が、配列番号１、７、１３、１９、２５、３１、３７、又は４３のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＨ２が、配列番号２、８、１４、２０、２６、３２、３８、又は４４のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＨ３が、配列番号３、９、１５、２１、２７、３３、３９、又は４５のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＬ１が、配列番号４、１０、１６、２２、２８、３４、４０、又は４６のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＬ２が、配列番号５、１１、１７、２３、２９、３５、４１、又は４７のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＬ３が、配列番号６、１２、１８、２４、３０、３６、４２、又は４８のアミノ酸配列を含み、
各Ｇが、独立して、活性薬剤及びリンカーを含む化学部分であり、リンカーが、Ａｂを活性薬剤に連結し、
ｎが、１～２０の整数である、抗体コンジュゲート、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物に関する。
ＪＩＭＴ－１におけるＴ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＪＩＭＴ－１におけるＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＮＣＩ－Ｎ８７におけるＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＨＣＴ－１１６におけるＴ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＨＣＴ－１１６におけるＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＮＣＩ－Ｈ２３におけるＴ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＮＣＩ－Ｈ４６０におけるＴ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＮＣＩ－Ｈ２３におけるＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＮＣＩ－Ｈ４６０におけるＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１についてのシグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成されたＩＣ５０を示す。 ＪＩＭＴ－１異種移植片における腫瘍体積に対するＴ－２０－ＡＢ２．１及びＴ－２１－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＪＩＭＴ－１異種移植片における体重に対するＴ－２０－ＡＢ２．１及びＴ－２１－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＨＣＴ－１１６異種移植片における腫瘍体積に対するＴ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１及びＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＨＣＴ－１１６異種移植片における体重に対するＴ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１及びＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＮＣＩ－Ｈ２３異種移植片における腫瘍体積に対するＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＮＣＩ－Ｈ２３異種移植片における体重に対するＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＮＣＩ－Ｈ４６０異種移植片における腫瘍体積に対するＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１の効果を示す。 ＮＣＩ－Ｈ４６０異種移植片における体重に対するＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１の効果を示す。
抗体－薬物コンジュゲートの基本構造は、以下の通りである。抗体－リンカー－低分子量薬物又は毒素。リンカーは、例えば、薬物が標的細胞に到達した後に抗体から分離した後、理想的には、薬物が標的がん細胞に対する影響を示すことを可能にする。リンカーはまた、抗体と薬物とを接続することによって、機能的な役割を果たす。
Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）は、Ｂ７ファミリーのメンバーであり、このファミリーとの高い配列相同性（最大約３０％）を示す。Ｂ７－Ｈ３の発現は、正常組織では非常に限定されているが、乳がん、肺がん、膵臓がん、前立腺がん、腎臓がん、及び結腸がん、並びに黒色腫及び膠芽腫を含む様々な固形腫瘍では、広範に広がっている。Ｂ７－Ｈ３は、腫瘍上皮、及び腫瘍関連血管系及び間質において観察されてきた。更に、Ｂ７－Ｈ３の過剰発現は、多くのがん疾患における転帰不良と相関している。ＮＳＣＬＣにおいて一般的な（約８５％）高いＢ７－Ｈ３発現は、転移及び進行期と関連している。抗ＰＤ－１療法に耐性のあるがんにおいて、Ｂ７－Ｈ３の更に高い発生率及び発現レベルが観察された。したがって、Ｂ７－Ｈ３の標的化は、再発性又は難治性のＮＳＣＬＣについて妥当である。一連の抗Ｂ７－Ｈ３ ＡＤＣを調製し、試験した。ＡＤＣの主要な構成要素は、ＯＨＰＡＳリンカー、及びＯＨＰＡＳ互換性官能基を備えたベンゾジアゼピンである。血漿中の安定性が証明されている場合、ＡＤＣは、標的腫瘍細胞において効率的に毒素を放出し、このことは、治療ウインドウの増幅の可能性を暗示している。ＡＤＣは、インビボでの体重変化を最小限に抑えつつ、優れた有効性を示し、抗ＰＤ－１療法に対して難治性のＮＳＣＬＣ患者に新しい選択肢を提供する。
一連の密に結合する抗Ｂ７－Ｈ３ ｍＡｂ及びそれらのチオマブ態様を生成した（Ｋｄ約１．７～５．４×１０－１１Ｍ）。新たに発見されたＯＨＰＡＳリンカー及びＯＨＰＡＳ適合性ベンゾジアゼピンペイロードを利用して、一連の抗Ｂ７－Ｈ３ ＡＤＣを調製し、試験した。例示的なＯＨＰＡＳリンカーは、本明細書に更に記載され、例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際出願公開第２０１９／００８４４１号にも開示されている。例示的なＯＨＰＡＳ適合性ベンゾジアゼピンペイロードは、本明細書に更に記載され、例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１９／０３６７４８８号にも開示されている。ＡＤＣは、Ｂ７－Ｈ３陽性腫瘍細胞株に対してインビトロで非常に強力であった。ＡＤＣは、ＮＳＣＬＣのマウス異種移植片モデルで試験した場合に有効であった。
本明細書に開示されるＡＤＣは、Ｂ７－Ｈ３を発現する特定の腫瘍（例えば、乳がん、肺がん、膵臓がん、前立腺がん、腎臓がん、及び結腸がん、並びに黒色腫及び膠芽腫）を標的化することができる（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ．２０１７ Ａｐｒ １０；３１（４）：５０１－５１５．ｅ８）。Ｂ７－Ｈ３の過剰発現は、疾患の重症度及び転帰不良と良好な相関関係を示す。Ｂ７－Ｈ３は、広範囲の腫瘍にわたって、高頻度で強く発現する。がん療法のためのＢ７－Ｈ３標的化は、がん幹細胞集団並びに腫瘍血管系及び間質上でのその発現のため、有益である（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ３５，ｎｏ．１５＿ｓｕｐｐｌ）。腫瘍細胞及び腫瘍血管系は、両方とも、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）陽性である（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ．２０１７ Ａｐｒ １０；３１（４）：５０１－５１５．ｅ８）。開示されたＢ７－Ｈ３抗体は、Ｆａｂ－Ａｓｓａｙによって確認される、改善された内在化能力を有する。したがって、Ｂ７－Ｈ３を標的化する、本明細書に開示される改善された抗体－薬物コンジュゲートは、がんと関連する症状を治療又は緩和する方法において有用であると予想される。
Ｂ７－Ｈ３抗体の例及びその使用を表１に列挙する。
Figure 2023531252000002
Figure 2023531252000003
Ｂ７－Ｈ３発現は、腫瘍浸潤及び転移に寄与する。がん細胞におけるＢ７－Ｈ３フコシル化又は異なるアイソフォーム発現の異なるパターンは、相反する共刺激機能及び共阻害機能を示す（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２０１７；２７６：５２－６５）。Ｂ７－Ｈ３は、腫瘍組織において高度に発現される（図２６Ａ～２６Ｂ）。Ｂ７－Ｈ３発現は、ＲＣＣ、肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、胆嚢がん、食道扁平上皮がん、子宮頸がん、骨肉腫、乳がん、頭頸部、膵臓がん、及び卵巣がんを有する患者における転帰不良と有意に関連している（Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；１４：５１５０－７、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．Ｖｏｌ ２１，Ｎｏ ９，２０１７ ｐｐ．２１９９－２２１０、ＯｎｃｏＴａｒｇｅｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０１４：７ １４６５－１４７２、Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌｕｍｅ ２７，ｐａｇｅｓ１０３４－１０４５（２０１７）、Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｌ Ｒｅｓ ２０１５；７（１２）：２６４６－２６６０、Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０１２，１８（１４）：３８３４－３８４５）。
Ｂ７－Ｈ３は、多くの血液細胞株では発現しない（Ｔｉｓｓｕｅ Ａｎｔｉｇｅｎｓ ２００５：６６：８３－９２）。急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）及び急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）の４４．８％は、Ｂ７－Ｈ３発現を示し、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の症例の６５％は、Ｂ７－Ｈ３発現を示す。Ｂ細胞、Ｔ細胞、及び単球において、Ｂ７－Ｈ３の発現はない（ＣＭＩ ２００５ ２（４）３０７－３１１）。Ｂ７－Ｈ３は、マクロファージ、ＤＣｓｍ及び腫瘍において、誘導的に発現される。Ｂ７－Ｈ３は、単球に由来する樹状細胞（Ｍｏ－ＤＣ）において、構成的に発現される。Ｂ７－Ｈ３は、単球由来のＤＣにおいて、弱く発現される（Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １８（１４）；３８３４－４５，２０１２）。
本開示はまた、Ｂ７－Ｈ３に特異的な第１のアームを少なくとも含む、一価抗体及び／又は二重特異性抗体を提供する。好ましくは、一価抗体及び／又は二重特異性抗体は、少なくともヒトＢ７－Ｈ３に特異的である。いくつかの実施形態では、ヒトＢ７－Ｈ３を認識する一価抗体及び／又は二重特異性抗体は、少なくとも１つの他の非ヒトＢ７－Ｈ３タンパク質、例えば、非限定的な例として、非ヒト霊長類Ｂ７－Ｈ３、例えば、カニクイザルＢ７－Ｈ３、及び／又はげっ歯類Ｂ７－Ｈ３に対しても交差反応性である。本開示はまた、本明細書に開示される抗Ｂ７－Ｈ３一価抗体及び／又は抗Ｂ７－Ｈ３二重特異性抗体と同じエピトープに結合する抗体を提供する。
本開示の例示的な抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体及びその抗原結合断片には、例えば、表１９～２４に列挙される抗体が含まれる。
いくつかの実施形態では、本開示の例示的な抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体及びその抗原結合断片は、表１９に示されるＣＤＲ配列から選択される重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）と、表１９に示されるＣＤＲ配列から選択される軽鎖ＣＤＲとの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、本開示の例示的な抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体及びその抗原結合断片は、表２０～２４に示される重鎖ドメイン及び軽鎖ドメインの可変配列の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、本開示の例示的な抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体は、表２１～２４に示される重鎖ドメイン及び軽鎖ドメインの可変配列の組み合わせを含む。
抗体－薬物コンジュゲート
特定の態様では、本明細書に開示される抗体－薬物コンジュゲートは、式Ｉ又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物によって表され、
Figure 2023531252000004
式中、
Ａｂが、可変重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲＨ１）、可変重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲＨ２）、可変重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲＨ３）、可変軽鎖相補性決定領域１（ＣＤＲＬ１）、可変軽鎖相補性決定領域２（ＣＤＲＬ２）、及び可変軽鎖相補性決定領域３（ＣＤＲＬ３）を含む、抗Ｂ７－Ｈ３抗体又はその抗原結合断片であり、
ＣＤＲＨ１が、配列番号１、７、１３、１９、２５、３１、３７、又は４３のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＨ２が、配列番号２、８、１４、２０、２６、３２、３８、又は４４のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＨ３が、配列番号３、９、１５、２１、２７、３３、３９、又は４５のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＬ１が、配列番号４、１０、１６、２２、２８、３４、４０、又は４６のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＬ２が、配列番号５、１１、１７、２３、２９、３５、４１、又は４７のアミノ酸配列を含み、
ＣＤＲＬ３が、配列番号６、１２、１８、２４、３０、３６、４２、又は４８のアミノ酸配列を含み、
各Ｇが、独立して、１つ以上の活性薬剤及びリンカーを含む化学部分であり、リンカーが、Ａｂを活性薬剤に共有結合的に連結し、
ｎが、１～２０の整数である。
いくつかの実施形態では、Ａｂは、モノクローナル抗体、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、単鎖抗体（ｓｃＡｂ）、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ－Ｆｃ断片、単一ドメイン重鎖抗体、単一ドメイン軽鎖抗体、バリアント抗体、多量体抗体、又は二重特異性抗体である。Ａｂは、ウサギ、マウス、キメラ、ヒト化、又は完全ヒトモノクローナル抗体であり得る。いくつかの実施形態では、Ａｂは、ＩｇＧアイソタイプ、例えば、ＩｇＧ１アイソタイプである。
いくつかの実施形態では、Ａｂは、配列番号４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、又は８１のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、又は９７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖との組み合わせを含む。
いくつかの実施形態では、Ａｂは、
（ａ）配列番号４９のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５０のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
（ｂ）配列番号５１のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
（ｃ）配列番号５３のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５４のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５６のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
（ｅ）配列番号５７のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５８のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
（ｆ）配列番号５９のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号６０のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
（ｇ）配列番号６１のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号６２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、及び
（ｈ）配列番号６３のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号６４のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、から選択される可変重鎖配列と可変軽鎖配列との組み合わせを含む。
いくつかの実施形態では、Ｂ７－Ｈ３は、ヒトＢ７－Ｈ３である。
いくつかの実施形態では、切断可能基は、標的細胞内で切断することができる。いくつかの実施形態では、切断可能基は、１つ以上の活性薬剤を放出することができる。いくつかの実施形態では、抗体コンジュゲートは、Ａｂと、Ａｂに共有結合的にカップリングされた少なくとも１つの分岐リンカーと、分岐リンカーに共有結合的にカップリングされた少なくとも２つの活性薬剤と、を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも２つの分岐リンカーは、Ａｂにカップリングされ、各分岐リンカーは、少なくとも２つの活性薬剤にカップリングされる。いくつかの実施形態では、３つの分岐リンカーは、Ａｂにカップリングされる。他の実施形態では、４つの分岐リンカーは、Ａｂにカップリングされる。更に他の実施形態では、正確に１つの分岐リンカーは、Ａｂにカップリングされる。なお他の実施形態では、各分岐リンカーは、正確に２つの活性薬剤にカップリングされる。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、少なくとも２つの異なる活性薬剤を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの分岐リンカーは、２つの異なる活性薬剤にカップリングされる。
いくつかの実施形態では、各活性薬剤は、切断可能（例えば、加水分解可能）結合によって分岐リンカーにカップリングされる。いくつかの実施形態では、各分岐リンカーは、分岐単位を含み、各活性薬剤は、二次リンカーを介して分岐単位に連結しており、分岐単位は、一次リンカーによって抗Ｂ７－Ｈ３抗体にカップリングされる。いくつかの実施形態では、分岐単位は、窒素原子、例えば、アミン又はアミドの窒素原子である。いくつかの実施形態では、分岐単位は、アミドであり、一次リンカーは、アミドのカルボニルを含む。いくつかの実施形態では、分岐単位は、アミドであり、二次リンカーは、アミドのカルボニルを含む。いくつかの好ましい実施形態では、分岐単位は、リジン単位である。
リンカー及びコンジュゲーションパートナー
いくつかの好ましい実施形態では、各Ｇは、独立して、式（ＩＩ）の構造を有する基であり、
Figure 2023531252000005
 各Ｑが、独立して、ヘテロ原子、好ましくはＯ又はＮを介してＬ’に連結された活性薬剤であり、
Ｚ’が、連結基であり、
Ｌ’が、Ｏ、Ｓ、及びＮ、好ましくはＯ若しくはＮから選択されるヘテロ原子を介してＳＯ２に結合されたスペーサー部分であり、Ｌ’とＳＯ２との間の結合の切断が、Ｌ’とＱとの間の結合の切断を促進して、活性薬剤を放出するように選択され、
Ｘが、－Ｏ－、－Ｃ（Ｒｂ）２－、又は－Ｎ（Ｒｃ）－、好ましくは－Ｏ－であり、
Ａｒが、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキル等の環、好ましくはアリール又はヘテロアリールを表し、
Ｙ’が、－（ＣＲｂ ２）ｙＮ（Ｒａ）－、－（ＣＲｂ ２）ｙＯ－、又は－（ＣＲｂ ２）ｙＳ－であり、ｙが１である場合、Ｎ、Ｏ、又はＳ原子が、ＴＧに結合するように配置され、
Ｘ及びＹ’が、Ａｒの隣接原子上に配置され、
ＴＧが、活性化されたときに、ＳＯ２と反応して（Ｑ）ｑ－（Ｌ’）ｗを置き換え、Ｘ－ＳＯ２及びＡｒの介在原子を含む５～６員環を形成することができるＮ、Ｏ、又はＳ原子を生成するトリガー基であり、
ｑが、１～約２０、好ましくは１～約１０の値を有する整数であり、
ｗ、ｘ、及びｙが、各々独立して、０又は１の値を有する整数であり、
各Ｒａ及びＲｃが、独立して、水素又は低級アルキルであり、
各Ｒｂが、独立して、水素又は低級アルキルであるか、あるいは
２個のＲｂが、それらが結合している原子と一緒になって、３～５員環、好ましくは３～４員環を形成し、
但し、ｗが０の場合に、ｑが１である。
各活性薬剤は、以下により詳細に記載されるように、任意の好適な活性薬剤であり得る。多くの従来のコンジュゲート化方法は、安定な連結を形成するためにアミン又はヒドロキシル基等の官能基の存在を必要とするが、本明細書の開示は、フェノール及び三級アミン等のこれまでこの目的に利用することができなかった官能基を使用して接続を形成するための戦略を提供する。これらの官能基は、本明細書に開示されるコンジュゲートにおいて安定な結合を形成する一方で、トリガー基を活性化する所定の条件下での放出を依然として可能にする。
多くの好適なトリガー基が当該技術分野で既知であり、例示的なトリガー基、及びそれらを活性化する条件は、例えば、以下にＹについて記載される部分等について以下に考察する。いくつかのトリガー基としては、Ｎ、Ｏ、又はＳ原子が挙げられるが、非求核性形態である。例えば、ＮＯ２基は、還元条件下で、ＳＯ２と反応することが可能なＮＨ２又はＮＨＯＨ基に還元されるトリガー基であり、アセテート基は、加水分解条件下で、ＳＯ２と反応することができるヒドロキシル基へと加水分解されるトリガー基である。他のトリガー基は、Ｎ、Ｏ、又はＳ原子を含まないが、活性化されると、求核性Ｎ、Ｏ、又はＳ原子に変換される。例えば、ボロネート基は、酸化条件下（例えば、ペルオキシド）で、ＳＯ２と反応することができるヒドロキシル基に変換されるトリガー基である。好ましくは、トリガー基は、それを活性化する条件が、標的化部分等のコンジュゲートの他の部分を切断又は分解することなく、それを選択的に行うように選択される。求核性Ｎ、Ｏ、又はＳ原子が生成されると、その原子は、ＳＯ２部分を分子内で攻撃して、環を形成し、部分（Ｑ）ｑ－（Ｌ’）ｗ－Ｈ（式中、Ｈは、以前にＳＯ２部分に接続していたＱ又はＬ’のヘテロ原子に結合する）を排出する。
ｗが０である実施形態では、ｑは、１であり、Ｑは、ヘテロ原子を介してＳＯ２に直接結合される。したがって、トリガー基を活性化すると、求核性ヘテロ原子を生成し、これがＳＯ２部分を分子内で攻撃して、環を形成し、活性薬剤Ｑ－Ｈ（式中、Ｈは、以前にＳＯ２に接続していたヘテロ原子に結合する）を排出する。
ｗが１である実施形態では、Ｌ’は、同じであってもよく、又は異なっていてもよいＱの複数の出現の接続を可能にするように選択されてもよい。したがって、Ｑの各場合は、スペーサー部分を介してＳＯ２に間接的に接続される。かかる実施形態では、トリガー基を活性化すると、求核性ヘテロ原子を生成し、これがＳＯ２部分を分子内で攻撃して、環を形成し、部分（Ｑ）ｑ－Ｌ’－Ｈ（式中、Ｈは、以前にＳＯ２に接続していたＬ’中のヘテロ原子に結合する）を排出する。かかる実施形態では、放出されたヘテロ原子は、活性薬剤Ｑ（例えば、Ｑが、四級アンモニウムとしてＬ’に接続した三級アミンを有する場合）又はＱ－Ｈを排出する分子内反応のトリガーとなる。例えば、ヘテロ原子は、Ｑ－Ｈのヒドロキシルにより形成されたエステル部分との分子内環化反応を受け、環を形成し、活性薬剤Ｑ－Ｈを排出してもよい。代替的に、ヘテロ原子は、活性薬剤Ｑ又はＱ－Ｈを排出する分子内互変異性化を受けてもよい。
Ａｒは、分子内環化を受ける部分が、トリガー基の活性化の後の反応を促進するように近接した位置に保持されるように、二環又は他の多環の環を含む任意の好適な環であり得る。芳香族環及びヘテロ芳香族環の平面特性が好ましい。これは、そのような環上の置換基の剛性な幾何学的形状が、反応性部分の望ましい配置を確保するからであるが、他の種類の環、例えば、シクロアルケニル又はヘテロシクロアルケニルは、同様の幾何学的形状を強制することができる。５員環若しくは６員環、及び／又は環の中のヘテロ原子の数若しくは同一性、及び／又はその環の他方の置換基（例えば、電子供与性若しくは電子求引性の置換基）は、環の得られる結合角に基づいて環化速度を調節するように選択され得る。同様に、シクロアルキル環及びヘテロシクリル環のより柔軟な立体配座は、分子内環化の速度を遅くすることが所望される場合に有用であり得る。
Ｚ’は、Ａｒを１つ以上のＡｂ基に接続する任意の好適な連結基であり得る。典型的には、連結基は、例えば、ポリエチレングリコール部分、ペプチド配列、電荷を有する部分（例えば、カルボキシレート、アミン、窒素含有環等）等の部分を含むことによって、水溶性を促進し、コンジュゲートの凝集を阻害するのに十分なほど親水性であるべきであり、これにより、含まれ得るアルキル鎖の疎水性特性と均衡する。モジュラー方式でコンジュゲートを調製することが有利であることが多いため、Ｚ’は、１つの反応性部分を別の反応性部分へとコンジュゲート化して得られる官能基である連結単位を含有し得る。代表的な連結単位は、（例えば、変数Ｚに関連して）以下により詳細に考察され、一般的な連結基としては、アミド、トリアゾール、オキシム、カルバメート等が挙げられる。代表的なＺ’基としては、以下により詳細に考察されるＬ１’－Ｚ基が挙げられる。いくつかの実施形態では、各Ａｂに結合されるＧ基の全てが同一であり、一方で他の実施形態では、各Ａｂは、２つ以上の異なるＧ基に結合されてもよい。例えば、いくつかのＧ基は、第１の条件下で活性化されるトリガー基を有していてもよく、一方で、他のＧ基は、第２の条件下で活性化されるトリガー基を有していてもよく、その結果、例えば、１つの活性薬剤は、第１の条件下で選択的に放出させることができるが、第２の活性薬剤は、第２の条件下で選択的に放出させることができる。
式（ＩＩ）の特定の実施形態では、－Ｙ’は、－（ＣＨ２）ｙＮＲ”－、－（ＣＨ２）ｙＯ－、又は－（ＣＨ２）ｙＳ－であり、ｙが１である場合、Ｎ、Ｏ、又はＳ原子が、ＴＧに結合するように配置され、Ｒ”は、水素又はＣ１～Ｃ６－アルキルであり、ｙは、０又は１の値を有する整数である。いくつかのかかる実施形態では、ＴＧは、β－ガラクトシド、β－グルクロニド、又はβ－ガラクトシドとβ－グルクロニドとの組み合わせである。
式（ＩＩ）のいくつかの実施形態では、（Ｌ’）ｗは、各Ｑを－ＳＯ２－に連結し、各Ｑは、ヘテロ原子、好ましくはＯ又はＮを介してＬ’基の１つに連結された活性薬剤であり、Ｑのヘテロ原子を含む－Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、又は－ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－連結を形成する。他の実施形態では、（Ｑ）ｑ－（Ｌ’）ｗ－は、
Figure 2023531252000006
 から選択され、式中、
Ｑは、ヘテロ原子、好ましくはＯ又はＮを介してＬ’に連結された活性薬剤であり、
Ｘ４は、存在しないか、又はＱのヘテロ原子を含む－Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、又は－ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－連結を形成し、
Ｘ１は、－Ｏ－又は－ＮＲａ－であり、
Ｘ２は、－Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、又は－ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－であり、
Ｘ３は、－ＯＣ（＝Ｏ）－であり、
ｗ’は、１、２、３、４、又は５の値を有する整数であり、
Ｒ９及びＲ１０は、各々独立して、水素、アルキル、アリール、又はヘテロアリールであり、アルキル、アリール、及びヘテロアリールは、非置換であるか、又は１つ以上の置換基、例えば、アルキル、－（ＣＨ２）ｕＮＨ２、－（ＣＨ２）ｕＮＲｕ１Ｒｕ２、及び－（ＣＨ２）ｕＳＯ２Ｒｕ３から選択される置換基で置換され、
Ｒｕ１、Ｒｕ２、及びＲｕ３は、各々独立して、水素、アルキル、アリール、又はヘテロアリールであり、
ｕは、１～約１０の値を有する整数である。
いくつかのかかる実施形態では、（Ｑ）ｑ－（Ｌ’）ｗ－は、
Figure 2023531252000007
 から選択される。
特定の実施形態では、Ｚ’は、反応性基（例えば、Ｚに関して以下により詳細に考察されるような前駆体基）を含み、これを使用して、化合物をトリガー剤に、固体表面に（例えば、固体担持アレイ、又はセンサ粒子を形成するために）、又は目的の任意の他の分子又は支持体に接続することができる。
特定の実施形態では、Ｚ’は、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、又は（ＩＩｈ）の構造を有する連結基であり、
Figure 2023531252000008
Figure 2023531252000009
 式中、
＊は、Ａｂに対する接続点であり、
＊＊は、Ａｒに対する接続点であり、
Ｒｅは、アルキルであり、
Ｘ”は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、又は－ＣＨ２－であり、
Ｘ４は、－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ２）ｇ－ＮＨ－又は－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ２）ｈ－ＮＨ－であり、
Ｗｂ１及びＷｂ２は、各々独立して、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、
Figure 2023531252000010
 であり、
Ｌ２は、任意選択的に存在するスペーサー部分であり、１つ以上の置換基、例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ５～Ｃ１４アリール、及びＣ３～Ｃ８ヘテロアリールで更に置換されていてもよく、アルキル、アリール、及びヘテロアリールは、例えば、Ｃ１～Ｃ１０アルキル、－（ＣＨ２）ｕＮＨ２、－（ＣＨ２）ｕＮＲｕ１Ｒｕ２、－（ＣＨ２）ｕＣＯ２Ｈ、－（ＣＨ２）ｕＣＯ２Ｒｕ１、及び－（ＣＨ２）ｕＳＯ２Ｒｕ３からなる群から選択される１つ以上の置換基で更に置換されてもよく、Ｒｕ１、Ｒｕ２、及びＲｕ３は、各々独立して、水素、Ｃ１～Ｃ１５アルキル、Ｃ６～Ｃ２０アリール、又はＣ３～Ｃ１０ヘテロアリールであり、ｕは、１～約１０の値を有する整数であり、
Ｒ１２は、水素、Ｃ１～Ｃ８アルキル、又はナウラルアミノ酸部分等のアミノ酸部分であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｇ、ｈ、ｏ、及びｑｑは、各々独立して、１～約１０の値を有する整数であり、
ｓ’は、１～約１０の値を有する整数である。
好ましい実施形態では、Ｗｂ１及びＷｂ２は、各々独立して、
Figure 2023531252000011
 である。
他の実施形態では、Ｚ’は、式（ＩＩａ’）、（ＩＩｂ’）、（ＩＩｃ’）、（ＩＩｄ’）、（ＩＩｅ’）、（ＩＩｆ’）、（ＩＩｇ’）、又は（ＩＩｈ’）の構造を有する連結基であり、
Figure 2023531252000012
Figure 2023531252000013
 式中、
＊は、Ａｂに対する接続点であり、
＊＊は、Ａｒに対する接続点である。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｚ’は、
Figure 2023531252000014
Figure 2023531252000015
Figure 2023531252000016
Figure 2023531252000017
 から選択される連結基であり、式中、
Ｒｚａは、Ｈ又はメチルであり、
Ｒｚｂは、－ＯＨ、＝Ｏ、又は＝ＮＨＯＨであり、
Figure 2023531252000018
 単結合又は二重結合、
ａ”は、式（ＩＩ）のＺ’とＡｒとの間の結合を表し、
ｂ”は、Ｚ’とＡｂとの間の結合を表し、
Ｚ”は、
[化１０]
いずれかの方向に配向される、
Figure 2023531252000019
 から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｇは、以下：
Figure 2023531252000020
 から選択される部分を含み、式中、Ｑは、活性薬剤であり、
Figure 2023531252000021
 は、Ｚ’を置換フェニル基（式（ＩＩ）においてＡｒとして表される）に接続する連結基Ｚ’の断片である。
特定の実施形態では、Ａｂ－（Ｇ）ｎは、式（ＩＩＩ）の化合物、
Figure 2023531252000022
 又はその塩によって表され、式中、
Ａは、
Figure 2023531252000023
 であり、
Ｍは、Ｎ、ＣＲ３０、又はＣ（－Ｌ－Ｑ）であり、
各Ｌは、独立して、スペーサー部分から選択され、
各Ｑは、活性薬剤であり、
Ｊは、本明細書に記載されるように、Ｂ７－Ｈ３抗体であり、
Ｒ３０及びＲ３１は、各々独立して、電子求引基、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択され、
Ｒ４２及びＲ４３は、各々独立して、－ＯＨ、アルコキシ、－ＮＲ４４Ｒ４５、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、及びヘテロシクリルから選択され、式中、Ｒ４４及びＲ４５は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意選択的にアリール又はヘテロアリール環と縮合した５～８員環を形成することができ、
Ｒ３２、Ｒ４４、及びＲ４５は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択され、
ｎは、１～４である。
いくつかの実施形態では、Ｍは、Ｎである。
特定の実施形態では、Ｍは、ＣＲ３０であり、Ｒ３０は、電子求引基である。
いくつかの実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000024
 から選択され、
式中、Ｒ３１は、電子求引基であり、好ましくは、Ｌは、アミド又はエステルから選択される電子求引基によってＣにカップリングされる。
いくつかの実施形態では、Ｍは、Ｃ（－Ｌ－Ｑ）であり、式中、Ｌは、電子求引基によってＣにカップリングされる。
いくつかの実施形態では、Ｒ３０は、－ＣＯ２ＮＲ３３Ｒ３４又は－ＣＯ２Ｒ３５であり、Ｒ３３、Ｒ３４、及びＲ３５は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択される。
いくつかの実施形態では、各電子求引基は、独立して、－ＮＯ２、－ＣＮ、－ハロアルキル、－ＣＯ２ＮＲ３３Ｒ３４、－ＣＯ２Ｒ３５、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３６、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒ３７、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ３８、及び－ＮＲ３９Ｒ４０Ｒ４１から選択され、Ｒ３６ 、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９ 、Ｒ４０、及びＲ４１は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択される。
特定の実施形態では、各電子求引基は、独立して、－ＣＮ、－ＣＯＮＲ３３Ｒ３４、及び－ＣＯ２Ｒ３５から選択される。
いくつかの実施形態では、各電子求引基は、独立して、－ＣＮ、－ＣＯＮＨ２、及び－ＣＯ２Ｍｅから選択される。
特定の実施形態では、Ｑは、薬剤である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、Ｌ’及びＱ’を含み、Ｌ’は、リンカーであり、Ｑ’は、活性薬剤である。
特定の実施形態では、Ｌ’は、カップリング基を含み、カップリング基は、Ｌにカップリングされる。
いくつかの実施形態では、カップリング基は、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ３２）－、－Ｃ＝ＮＯ－、－ＮＲ３２－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ３２－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｓ－、－ＮＲ３２Ｓ（＝Ｏ）２Ｏ－、及び－ＯＳ（＝Ｏ）２Ｏ－から選択される。
特定の好ましい実施形態では、カップリング基は、
いずれかの方向に配向される、
Figure 2023531252000025
 から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ’は、切断可能基を更に含み、切断可能基は、Ｑ’にカップリングされる。
特定の実施形態では、切断可能基である－Ｑ’部分は、
Figure 2023531252000026
 から選択され、式中、
Ｒ４９は、水素又は－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５０であり、
Ｒ５０は、低級アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｌ’は、－ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、及び－Ｓ（＝Ｏ）２－から選択される少なくとも１つの基を含むＣ６～Ｃ１００アルキレンを更に含む。
特定の実施形態では、Ｌは、－ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、及び－Ｓ（＝Ｏ）２－から選択される少なくとも１つの基を含むＣ６～Ｃ１００アルキレンを含む。例えば、Ｌは、
Figure 2023531252000027
 を含み、式中、
ａ’は、Ｍ含有芳香族環に対する結合であり、ｂ’は、Ｌ’に対する結合であり、
ｎは、２～２０である。
いくつかの実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000028
 である。例えば、Ａは、
Figure 2023531252000029
 であってもよい。代替的に、Ａは、
Figure 2023531252000030
 であってもよい。他の実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000031
 であり得る。いくつかの実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000032
 である。
特定の実施形態では、Ｒ４２は、－ＯＨ又は－ＮＲ４４Ｒ４５である。
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に開示される抗体を、式（ＩＶ）又は式（Ｖ）の化合物と反応させることを含む、ここに開示されるＡＤＣを作製する方法であって、
Figure 2023531252000033
 式中、Ａ’が、
Figure 2023531252000034
 であり、
Ｍが、Ｎ、ＣＲ３０、又はＣ（－Ｌ－Ｑ）であり、
各Ｌが、独立して、スペーサー部分から選択され、
各Ｑが、独立して、活性薬剤又は反応性基から選択され、
Ｘが、－Ｃｌ、－Ｂｒ、及び－Ｉから選択され、
Ｒ３０及びＲ３１が、各々独立して、電子求引基、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択され、
Ｒ４６が、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択されから選択され、
Ｒ３２が、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択され、
Ｒ４７が、Ｏ－アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリルであり、
ｎが、１～４である、方法に関する。
いくつかの実施形態では、Ｍは、Ｎである。
特定の実施形態では、Ｍは、ＣＲ３０であり、Ｒ３０は、電子求引基である。
いくつかの実施形態では、Ａ’は、
Figure 2023531252000035
 から選択され、
式中、Ｒ３１は、電子求引基であり、好ましくは、Ｌは、アミド又はエステルから選択される電子求引基によってＣにカップリングされる。
いくつかの実施形態では、Ａ’は、
Figure 2023531252000036
 であり、式中、Ｒ４６は、Ｃ１～３アルキルで置換されたアリール基である。
いくつかの実施形態では、Ａ’は、
Figure 2023531252000037
 である。
いくつかの実施形態では、Ａ’は、
Figure 2023531252000038
 であり、式中、Ｘは、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。
いくつかの実施形態では、Ｍは、Ｃ（－Ｌ－Ｑ）であり、式中、Ｌは、電子求引基によってＣにカップリングされる。
いくつかの実施形態では、Ｒ３０は、－ＣＯ２ＮＲ３３Ｒ３４又は－ＣＯ２Ｒ３５であり、Ｒ３３、Ｒ３４、及びＲ３５は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択される。
いくつかの実施形態では、各電子求引基は、独立して、－ＮＯ２、－ＣＮ、－ハロアルキル、－ＣＯ２ＮＲ３３Ｒ３４、－ＣＯ２Ｒ３５、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３６、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒ３７、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ３８、及び－ＮＲ３９Ｒ４０Ｒ４１から選択され、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０、及びＲ４１は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択される。
特定の実施形態では、各電子求引基は、独立して、－ＣＮ、－ＣＯＮＲ３３Ｒ３４、及び－ＣＯ２Ｒ３５から選択される。
いくつかの実施形態では、各電子求引基は、独立して、－ＣＮ、－ＣＯＮＨ２、及び－ＣＯ２Ｍｅから選択される。
特定の実施形態では、Ｑは、活性薬剤である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、Ｌ’及びＱ’を含み、Ｌ’は、リンカーであり、Ｑ’は、活性薬剤である。
特定の実施形態では、Ｌ’は、カップリング基を含み、カップリング基は、Ｌにカップリングされる。
いくつかの実施形態では、カップリング基は、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ３２）－、－Ｃ＝ＮＯ－、－ＮＲ３２－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ３２－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｓ－、－ＮＲ３２Ｓ（＝Ｏ）２Ｏ－、及び－ＯＳ（＝Ｏ）２Ｏ－から選択される。
特定の実施形態では、カップリング基は、
いずれかの方向に配向される、
Figure 2023531252000039
 から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ’は、切断可能基を更に含み、切断可能基は、Ｑ’にカップリングされる。
特定の実施形態では、Ｑ’にカップリングされた切断可能基は、
Figure 2023531252000040
 から選択され、式中、
Ｒ４９は、水素又は－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５０であり、
Ｒ５０は、低級アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｌ’は、－ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、及び－Ｓ（＝Ｏ）２－から選択される少なくとも１つの基を含むＣ６～Ｃ１００アルキレンを更に含む。
特定の実施形態では、Ｌは、－ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、及び－Ｓ（＝Ｏ）２－から選択される少なくとも１つの基を含むＣ６～Ｃ１００アルキレンを含む。例えば、Ｌは、
Figure 2023531252000041
 を含み、式中、
ａは、Ｍ含有芳香族環に対する結合であり、ｂは、Ｌ’に対する結合であり、
ｎは、２～２０である。
いくつかの実施形態では、Ｑ’は、ホルモン、オリゴヌクレオチド、毒素、親和性リガンド、検出用プローブ、又はそれらの組み合わせである。
特定の実施形態では、Ｑ’は、サイトカイン、免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗真菌剤、鎮痛剤、又はそれらの組み合わせから選択される。
特定の実施形態では、Ｑは、反応性基である。
いくつかの実施形態では、反応性基は、－Ｎ３、－Ｃ≡ＣＨ、
Figure 2023531252000042
 、－Ｓ（Ｏ）２Ｈａｌ、－ＮＨ２、－ＣＯ２Ｈａｌ、－ＯＨ、－Ｃ（Ｏ）Ｈ、－ＳＨ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、及び－Ｎ＝Ｓ＝Ｃから選択され、Ｈａｌは、－Ｃｌ、－Ｂｒ、又は－Ｉである。
いくつかの実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000043
 である。
特定の実施形態では、Ｒ３１は、－ＣＮ、－ＣＯ２ＮＲ３３Ｒ３４、又は－ＣＯ２Ｒ３５である。
特定の実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000044
 である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３２は、水素又はＣ１～３アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000045
 である。
特定の実施形態では、Ｒ４６は、任意選択的に置換されたＣ１～３アルキル、任意選択的に置換されたＣ６～Ｃ１２アリール、又は任意選択的に置換されたヘテロアリールである。
いくつかの実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000046
 である。
特定の実施形態では、Ｒ４７は、Ｏ－又はＣ１～３アルキルである。
特定の実施形態では、Ａは、
Figure 2023531252000047
 である。
活性薬剤
上述のように、本開示の好ましい実施形態では、Ｑは、本明細書に開示されるＡＤＣの一部を形成する活性薬剤である。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、独立して、化学療法剤及び毒素から選択される。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗真菌剤、鎮痛剤、又はそれらの組み合わせである。
コンジュゲート化のための例示的な薬物
本発明のＡＤＣは、１つ以上の活性薬剤が特定の細胞に送達されるにつれて、例えば、抗がん療法でよくみられる副作用を低減し得る、標的療法を提供する。
例えば、活性薬剤は、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．）；ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ、ＭｉｌｌｅｎｉｕｍＰｈａｒｍ．）；フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；スーテント（ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）；レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；イマチニブメシル酸塩（ＧＬＥＥＶＥＣ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ、Ｓａｎｏｆｉ）；５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）；ロイコボリン；ラパマイシン（Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ、ＲＡＰＡＭＵＮＥ、Ｗｙｅｔｈ）；ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ、ＧＳＫ５７２０１６、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；ロナファルニブ（ＳＣＨ ６６３３６）；ソラフェニブ（ＢＡＹ４３－９００６、Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ．）；ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ、Ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ）；ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ ５２７１、Ｓｕｇｅｎ）；アルキル化剤（例えば、チオテパ、若しくはＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミド）；アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン、インプロスルファン、若しくはピポスルファン）；アジリジン（例えば、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボクオン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、若しくはウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ））；エチレンイミン、メチルメラミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド、トリメチロールメラミン；アセトゲニン（例えば、ブラタシン若しくはブラタシノン）；合成類似体であるトポテカンを含むカンプトテシン；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（アドゼレシン、カルゼレシン、若しくはビゼレシンのその合成類似体を含む）；クリプトフィシン（例えば、クリプトフィシン１若しくはクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体であるＫＷ－２１８９及びＣＢ１－ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード（例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、チョロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベムビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、若しくはウラシルマスタード）；ニトラウスウレア（ｎｉｔｒｏｕｓｕｒｅａ）（例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、若しくはラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ））；抗生物質（例えば、カリケアミシンガンマ１ Ｉ及びカリケアミシンオメガＩ １から選択されるカリケアミシン、若しくはエンジイン抗生物質としてダイネマイシンＡを含むダイネマイシン）；ビスホスホネート（例えば、クロドロネート）；エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、若しくは関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質クロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルニノマイシン（ｃａｒｎｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｕｃｉｎ）、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ＡＤＲＬＩＭＹＣＩＮ（登録商標）ドキソルビシン（例えば、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、若しくはデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン（例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン（ｏｌｉｖｏｍｙｃｉｎ）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトミグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｉｇｒｉｎ）、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、若しくはゾルビシン）；代謝拮抗薬（例えば、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ））；葉酸類似体（例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、若しくはトリメトレキサート）；プリン類似体（例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、若しくはチグアニン（ｔｈｉｇｕａｎｉｎｅ）；ピリミジン類似体（例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、若しくはフロクスウリジン）；アンドロゲン（例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン（ｄｒｏｍｏｓｔａｎｏｌｏｎｅ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、エピチオスタノール、メピチオスタン、若しくはテストラクトン）；抗副腎薬（例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、若しくはトリロスタン）；葉酸補給薬（例えば、フォリン酸）；アセグラトン；アルドホルホラミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルシン；ジアジクオン；エルホルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；マイタンシノイド（例えば、マイタンシン若しくはアンサマイトシン；トリコテセン（例えば、Ｔ－２毒素、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ、若しくはアングイジン）；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモル（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ－２毒素、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ、若しくはアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド（例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）クレモフォール無含有、パクリタキセルのアルブミン操作されたナノ粒子製剤、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒ，Ｉ１１．若しくはＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）（（Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）））；クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｎｂｕｃｉｌ）；ゲムシタビン；６－チオグアニン；メルカプトプリン；白金類似体（例えば、シスプラチン若しくはカルボプラチン）；ビンブラスチン；白金；エトポシド、イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート、；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）；レチノイド（例えば、レチノイン酸）；カペシタビン；及びそれらの薬学的に許容される塩、それらの溶媒和物、それらの酸、若しくはそれらの誘導体からなる群から選択されてもよい。
有糸分裂阻害剤
いくつかの実施形態では、本開示のリンカーを使用して、抗体を１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲート化して、がんの治療のためのＡＤＣを形成してもよい。「有糸分裂阻害剤」という用語は、本明細書で使用される場合、がん細胞にとって特に重要な生物学的プロセスである有糸分裂又は細胞分裂をブロックする、細胞傷害性薬剤及び／又は療法剤を指す。有糸分裂阻害剤は、多くの場合、微小管重合又は微小管脱重合に影響を与えることによって細胞分裂が防止されるように、微小管を破壊する。したがって、特定の実施形態では、抗体は、チューブリン重合を阻害することによって微小管形成を破壊する１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲート化される。特定の実施形態では、本開示のＡＤＣで使用される有糸分裂阻害剤は、Ｔａｘｏｌ（登録商標）（パクリタキセル）、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）（ドセタキセル）、又はＩｘｅｍｐｒａ（登録商標）（イクサベピロン）である。本明細書に開示されるＡＤＣにおいて使用され得る有糸分裂阻害剤の例は、以下に提供される。有糸分裂阻害剤の属には、上に記載されるアウリスタチンが含まれる。
アウリスタチン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアウリスタチンにコンジュゲート化してもよい。アウリスタチンは、微小管動態及びＧＴＰ加水分解に干渉し、それによって細胞分裂を阻害する抗がん活性を有することが一般的に示されているドラスタチン類似体の一群を表す。例えば、アウリスタチンＥ（米国特許第５，６３５，４８３号）は、抗がん薬物ビンクリスチンと同じチューブリン上の部位に結合することによってチューブリン重合を阻害する化合物である、海洋天然産物ドラスタチン１０の合成類似体である（Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｔｉｔ，Ｐｒｏｇ．Ｃｈｅｍ．Ｏｒｇ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ，７０：１－７９（１９９７））。ドラスタチン１０、アウリスタチンＰＥ、及びアウリスタチンＥは、４個のアミノ酸を有する直鎖ペプチドであり、そのうちの３個は、ドラスタチン群の化合物に固有である。有糸分裂阻害剤のアウリスタチンサブクラスの例示的な実施形態としては、限定されないが、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ又はアウリスタチンＤ誘導体）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ又はアウリスタチンＥ誘導体）、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ又はアウリスタチンＦ誘導体）、アウリスタチンＦフェニレンジアミン（ＡＦＰ）、アウリスタチンＥＢ（ＡＥＢ）、アウリスタチンＥＦＰ（ＡＥＦＰ）、及び５－ベンゾイル吉草酸－ＡＥエステル（ＡＥＶＢ）が挙げられる。アウリスタチン誘導体の合成及び構造は、米国特許出願公開第２００３－００８３２６３号、同第２００５－０２３８６４９号及び第２００５－０００９７５１号、国際特許公開第０４／０１０９５７号、国際特許公開第０２／０８８１７２号、及び米国特許第６，３２３，３１５号、同第６，２３９，１０４号、同第６，０３４，０６５号、同第５，７８０，５８８号、同第５，６６５，８６０号、同第５，６６３，１４９号、同第５，６３５，４８３号、同第５，５９９，９０２号、同第５，５５４，７２５号、同第５，５３０，０９７号、同第５，５２１，２８４号、同第５，５０４，１９１号、同第５，４１０，０２４号、同第５，１３８，０３６号、同第５，０７６，９７３号、同第４，９８６，９８８号、同第４，９７８，７４４号、同第４，８７９，２７８号、同第４，８１６，４４４号、及び同第４，４８６，４１４号に記載されており、その各々が参照により本明細書に組み込まれる。
ドラスタチン
特定の実施形態では、本明細書に記載のＡＤＣにおける活性薬剤は、ドラスタチンである。ドラスタチンは、インド洋のアメフラシＤｏｌａｂｅｌｌａ ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａから単離された短いペプチド化合物である（Ｐｅｔｔｉｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９７６，９８，４６７７を参照されたい）。ドラスタチンの例としては、ドラスタチン１０及びドラスタチン１５が挙げられる。ドラスタチン１５は、Ｄｏｌａｂｅｌｌａ ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａに由来する７つのサブユニットのデプシペプチドであり、同じ生物から得られた５つのサブユニットである抗チューブリン剤ドラスタチン１０に構造的に関連する強力な抗有糸分裂剤である。したがって、特定の実施形態では、本開示のＡＤＣは、抗体と、本明細書に記載のリンカーと、少なくとも１つのドラスタチンと、を含む。上述のアウリスタチンは、ドラスタチン１０の合成誘導体である。
マイタンシノイド
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのマイタンシノイドにコンジュゲート化して、ＡＤＣを形成してもよい。マイタンシノイドは、元々は高等植物のＣｅｌａｓｔｒａｃｅａｅ、Ｒｈａｍｎａｃｅａｅ及びＥｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ科のメンバー、並びにいくつかの種の苔類から単離された、強力な抗腫瘍剤である（Ｋｕｐｃｈａｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９４：１３５４－１３５６［１９７２］、Ｗａｎｉ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ ３９０：［１９７３］、Ｐｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．４６：６６０－６６６［１９８３］、Ｓａｋａｉ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．５１：８４５－８５０［１９８８］、及びＳｕｗａｎｂｏｒｉｒｕｘ ｅｔ ａｌ，Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ ４６：１１７－１２０［１９９０］）。証拠は、マイタンシノイドが、微小管タンパク質チューブリンの重合を阻害することによって有糸分裂を阻害し、それによって、微小管の形成を防止することを示唆している（例えば、米国特許第６，４４１，１６３号及びＲｅｍｉｌｌａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１８９，１００２－１００５（１９７５）を参照されたい）。マイタンシノイドは、細胞培養モデルを使用してインビトロで、及び実験動物系を使用してインビボで、腫瘍細胞成長を阻害することが示されている。更に、マイタンシノイドの細胞傷害性は、従来の化学療法剤、例えば、メトトレキサート、ダウノルビシン、及びビンクリスチンよりも１，０００倍大きい（例えば、米国特許第５，２０８，０２０号を参照されたい）。
マイタンシン、マイタンシノール、マイタンシノールのＣ－３エステル、並びに他のマイタンシノール類似体及び誘導体を含むような、マイタンシノイド（例えば、その各々が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，２０８，０２０号及び同第６，４４１，１６３号を参照されたい）。マイタンシノールのＣ－３エステルは、天然に存在するものであってもよく、又は合成的に誘導されてもよい。更に、天然に存在するＣ－３マイタンシノールエステル及び合成Ｃ－３マイタンシノールエステルは両方とも、単純なカルボン酸を有するＣ－３エステル、又はＮ－メチル－Ｌ－アラニンの誘導体を有するＣ－３エステルに分類することができ、後者は、前者よりも細胞傷害性が高い。合成マイタンシノイド類似体は、例えば、Ｋｕｐｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２１，３１－３７（１９７８）に記載される。
本開示のＡＤＣでの使用に好適なマイタンシノイドは、天然源から単離され、合成的に生成され、又は半合成的に生成され得る。更に、マイタンシノイドは、究極のコンジュゲート分子において十分な細胞傷害性が保持される限り、任意の好適な様式で修飾され得る。例示的なマイタンシノイドであるメルタンシン（ＤＭ１）の構造を以下に提供する。
Figure 2023531252000048
マイタンシノイドの代表的な例としては、限定されないが、ＤＭ１（Ｎ２’－デアセチル－Ｎ２’－（３－メルカプト－１－オキソプロピル）－マイタンシン、メルタンシンとも称される、薬物マイタンシノイド１、ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ，Ｉｎｃ．、Ｃｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５２：１２７も参照されたい）、ＤＭ２、ＤＭ３（Ｎ２’－デアセチル－Ｎ２’－（４－メルカプト－１－オキソペンチル）－マイタンシン）、ＤＭ４（４－メチル－４－メルカプト－１－オキソペンチル）－マイタンシン）及びマイタンシノール（合成マイタンシノイド類似体）が挙げられる。マイタンシノイドの他の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８，１４２，７８４号に記載されている。
アンサマイトシンは、様々な細菌源から単離されたマイタンシノイド抗生物質の一群である。これらの化合物は、強力な抗腫瘍活性を有する。代表的な例としては、限定されないが、アンサマイトシンＰ１、アンサマイトシンＰ２、アンサマイトシンＰ３、及びアンサマイトシンＰ４が挙げられる。
植物アルカロイド
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの植物アルカロイド、例えば、タキサン又はビンカアルカロイドにコンジュゲート化してもよい。植物アルカロイドは、特定の種類の植物から作製された化学療法治療薬である。ビンカアルカロイドは、ニチニチソウ植物ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅａ）から作製されるが、一方で、タキサンは、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｙｅｗ ｔｒｅｅ ｔａｘｕｓ）の樹皮から作製される。ビンカアルカロイド及びタキサンは両方とも、抗微小管剤としても知られており、以下でより詳細に記載される。
タキサン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのタキサンにコンジュゲート化してもよい。本明細書で使用される「タキサン」という用語は、微小管作用の機構を有し、タキサン環構造、及び細胞増殖抑制活性に必要な立体特異的側鎖を含む構造を有する抗新生物性剤の一種を指す。「タキサン」という用語には、親水性誘導体及び疎水性誘導体の両方を含む、様々な既知の誘導体も含まれる。タキサン誘導体としては、限定されないが、国際特許出願第９９／１８１１３号に記載のガラクトース及びマンノース誘導体、ＷＯ９９／１４２０９に記載のピペラジノ及び他の誘導体、ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１、及び米国特許第５，８６９，６８０号に記載のタキサン誘導体、ＷＯ９８／２８２８８に記載の６－チオ誘導体、米国特許第５，８２１，２６３号に記載のスルフェンアミド誘導体、及び米国特許第５，４１５，８６９号に記載のタキソール誘導体が挙げられ、その各々が参照により本明細書に組み込まれる。タキサン化合物は、米国特許出願第５，６４１，８０３号、同第５，６６５，６７１号、同第５，３８０，７５１号、同第５，７２８，６８７号、同第５，４１５，８６９号、同第５，４０７，６８３号、同第５，３９９，３６３号、同第５，４２４，０７３号、同第５，１５７，０４９号、同第５，７７３，４６４号、同第５，８２１，２６３号、同第５，８４０，９２９号、同第４，８１４，４７０号、同第５，４３８，０７２号、同第５，４０３，８５８号、同第４，９６０，７９０号、同第５，４３３，３６４号、同第４，９４２，１８４号、同第５，３６２，８３１号、同第５，７０５，５０３号、及び同第５，２７８，３２４号にも以前に記載されており、これらは全て、参照により明示的に組み込まれる。タキサンの更なる例としては、限定されないが、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）、パクリタキセル（Ａｂｒａｘａｎｅ（登録商標）又はＴａｘｏｌ（登録商標）、Ａｂｒａｘｉｓ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、及びナノ粒子パクリタキセル（ＡＢＩ－００７／Ａｂｒａｘｅｎｅ（登録商標）、Ａｂｒａｘｉｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）が挙げられる。
特定の実施形態では、本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのドセタキセルにコンジュゲート化してもよい。特定の実施形態では、本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのパクリタキセルにコンジュゲート化してもよい。
ビンカアルカロイド
特定の実施形態では、本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのビンカアルカロイドにコンジュゲート化してもよい。ビンカアルカロイドは、チューブリンに作用することによってがん細胞が分裂する能力を阻害し、微小管の形成を防止することによって機能する細胞周期特異的薬物の一種である。本開示のＡＤＣで使用され得るビンカアルカロイドの例として、限定されないが、硫酸ビンデシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、及びビノレルビンが挙げられる。
抗腫瘍抗生物質
本開示のリンカーを使用して、がんの治療のために、抗体を１つ以上の抗腫瘍抗生物質にコンジュゲート化してもよい。本明細書で使用される場合、「抗腫瘍抗生物質」という用語は、ＤＮＡに干渉することによって細胞成長をブロックし、微生物から作製される抗新生物薬を意味する。多くの場合、抗腫瘍抗生物質は、ＤＮＡ鎖を破壊するか、又はＤＮＡ合成を遅くするか、又は停止させるかのいずれかである。本明細書に開示されるＡＤＣに含まれ得る抗腫瘍抗生物質の例としては、限定されないが、アクチノマイシン（例えば、ピロロ［２，１－ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン）、アントラサイクリン、カリケアミシン、及びデュオカルマイシンが挙げられ、以下により詳細に記載される。
アクチノマイシン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアクチノマイシンにコンジュゲート化してもよい。アクチノマイシンは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。代表的な例のアクチノマイシンとしては、限定されないが、アクチノマイシンＤ（コスメゲン［アクチノマイシン、ダクチノマイシン、アクチノマイシンＩＶ、アクチノマイシンＣ１としても知られる］、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ，Ｉｎｃ．）、アントラマイシン、チカマイシンＡ、ＤＣ－８１、マゼトラマイシン（ｍａｚｅｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、ネオトラマイシンＡ、ネオトラマイシンＢ、ポロトラマイシン、プロトラカルシンＢ、ＳＧ２２８５、シバノミシン、シビロマイシン、及びトマイマイシンが挙げられる。特定の実施形態では、Ｄは、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）である。ＰＢＤの例として、限定されないが、アントラマイシン、チカマイシンＡ、ＤＣ－８１、マゼトラマイシン、ネオトラマイシンＡ、ネオトラマイシンＢ、ポロトラマイシン、プロトラカルシンＢ、ＳＧ２０００（ＳＪＧ－１３６）、ＳＧ２２０２（ＺＣ－２０７）、ＳＧ２２８５（ＺＣ－４２３）、シバノミシン、シビロマイシン、及びトマイマイシンが挙げられる。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、アクチノマイシン、例えば、アクチノマイシンＤ、又はＰＢＤ、又はピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体である。
ＰＢＤの構造は、例えば、米国特許出願公開第２０１３／００２８９１７及び同第２０１３／００２８９１９号、並びにＷＯ２０１１／１３０５９８Ａ１に見出すことができ、これらの各々は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。ＰＢＤの一般的な構造を以下に提供する。
Figure 2023531252000049
ＰＢＤは、芳香族Ａ環及びピロロＣ環の両方における置換基の数、種類及び位置、並びにＣ環の飽和度において異なる。Ｂ環において、一般に、ＤＮＡのアルキル化を担う求電子中心であるＮ１０－Ｃ１１位には、イミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノールアミン（ＮＨ－ＣＨ（ＯＨ））、又はカルビノールアミンメチルエーテル（ＮＨ－ＣＨ（ＯＭｅ））が存在する。既知の天然生成物は全て、キラルＣ１１α位に（Ｓ）配置を有し、Ｃ環からＡ環に向かって見たときに、それらに右周りのねじれを与える。本明細書に開示されるリンカーを介して抗体にコンジュゲート化され得るＰＢＤの更なる例は、例えば、米国特許出願公開第２０１３／００２８９１７Ａ１号及び同第２０１３／００２８９１９Ａ１号、米国特許第７，７４１，３１９Ｂ２号、並びにＷＯ２０１１／１３０５９８Ａ１及びＷＯ２００６／１１１７５９Ａ１に見出すことができ、これらの各々は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
アントラサイクリン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアントラサイクリンにコンジュゲート化してもよい。アントラサイクリンは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。代表的な例としては、限定されないが、ダウノルビシン（セルビジン、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、ドキソルビシン（アドリアマイシン、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ドキソルビシン塩酸塩とも称される、ヒドロキシダウノルビシン、及びルベックス）、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ、Ｐｆｉｚｅｒ）、及びイダルビシン（イダマイシン、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）が挙げられる。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、アントラサイクリン、例えば、ドキソルビシンである。
カリケアミシン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのカリケアミシンにコンジュゲート化してもよい。カリケアミシンは、土壌生物Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａに由来するエンジイン抗生物質のファミリーである。カリケアミシンは、ＤＮＡの小さな溝に結合し、二本鎖ＤＮＡ切断を誘導し、他の化学療法剤よりも１００倍大きな細胞死を引き起こす（Ｄａｍｌｅ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ３：３８６）。本開示において薬物コンジュゲートとして使用され得るカリケアミシンの調製については、既に記載されており、米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、及び同第５，８７７，２９６号を参照されたい。使用可能なカリケアミシンの構造類似体としては、限定されないが、γ１ Ｉ、α２ Ｉ、α３ Ｉ、Ｎ－アセチル－γ１ Ｉ、ＰＳＡＧ及びθＩ １が挙げられる（Ｈｉｎｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５３：３３３６－３３４２（１９９３），Ｌｏｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５８：２９２５－２９２８（１９９８）、及び上述の米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、及び同第５，８７７，２９６号）。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、カリケアミシンである。
デュオカルマイシン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのデュオカルマイシンにコンジュゲート化してもよい。デュオカルマイシンは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。（Ｎａｇａｍｕｒａ ａｎｄ Ｓａｉｔｏ（１９９８）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．１２を参照されたい。）デュオカルマイシンは、ＤＮＡの小さな溝に結合し、核酸塩基アデニンをＮ３位でアルキル化する（Ｂｏｇｅｒ（１９９３）Ｐｕｒｅ ａｎｄ Ａｐｐｌ Ｃｈｅｍ ６５（６）：１１２３、及びＢｏｇｅｒ ａｎｄ Ｊｏｈｎｓｏｎ（１９９５）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ９２：３６４２）。デュオカルマイシンの合成類似体には、限定されないが、アドゼレシン、ビゼレシン、及びカルゼレシンが含まれる。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、デュオカルマイシンである。
その他の抗腫瘍抗生物質
上述のものに加えて、本開示のＡＤＣに使用され得る追加の抗腫瘍抗生物質としては、ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、マイトマイシン、及びプリカマイシン（ミトラマイシンとしても知られる）が挙げられる。
免疫調節剤
いくつかの実施形態では、本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの免疫調節剤にコンジュゲート化してもよい。本明細書で使用される場合、「免疫調節剤」という用語は、免疫応答を刺激又は改変することができる薬剤を指す。特定の実施形態では、免疫調節剤は、対象の免疫応答を増強する免疫刺激剤である。いくつかの実施形態では、免疫調節剤は、対象の免疫応答を防止又は減少させる免疫抑制剤である。免疫調節剤は、骨髄細胞（単球、マクロファージ、樹状細胞、巨核球及び顆粒球）又はリンパ球細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）、並びにそれらの任意の更なる分化細胞を調節し得る。代表的な例としては、限定されないが、カルメット－ゲラン菌（ＢＣＧ）、及びレバミゾール（エルガミゾール）が挙げられる。本開示のＡＤＣに使用され得る免疫調節剤の他の例としては、限定されないが、がんワクチン、サイトカイン、及び免疫調節遺伝子療法が挙げられる。
がんワクチン
本開示のリンカーを使用して、抗体をがんワクチンにコンジュゲート化してもよい。本明細書で使用される場合、「がんワクチン」という用語は、腫瘍特異的免疫応答を誘発する組成物（例えば、腫瘍抗原及びサイトカイン）を指す。応答は、がんワクチンを投与することによって、又は本開示の場合、抗体及びがんワクチンを含むＡＤＣを投与することによって、対象自身の免疫系から誘発される。好ましい実施形態では、免疫応答は、体内の腫瘍細胞（例えば、原発性又は転移性の腫瘍細胞）を根絶させる。がんワクチンの使用は、一般に、例えば、特定のがん細胞の表面上に存在するか、又はがん形成を促進することが示されている特定の感染性薬剤の表面上に存在する特定の抗原又は抗原の群の投与を伴う。いくつかの実施形態では、がんワクチンの使用は予防目的のためのものであり、一方で、他の実施形態では、使用は、治療目的のためのものである。本明細書に開示されるＡＤＣに使用され得るがんワクチンの非限定的な例としては、組換え二価ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ワクチン１６型及び１８型のワクチン（Ｃｅｒｖａｒｉｘ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、組換え四価ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）６型、１１型、１６型、及び１８型のワクチン（Ｇａｒｄａｓｉｌ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ）、並びにシプリューセル－Ｔ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ、Ｄｅｎｄｒｅｏｎ）が挙げられる。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、免疫刺激剤であるか、又は免疫抑制剤のいずれかである、がんワクチンである。
サイトカイン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのサイトカインにコンジュゲート化してもよい。「サイトカイン」という用語は、一般に、細胞間メディエーターとして別の細胞に作用する、ある細胞集団によって放出されるタンパク質を指す。サイトカインは、腫瘍部位において免疫エフェクター細胞及び間質細胞を直接刺激し、細胞傷害性エフェクター細胞による腫瘍細胞認識を強化する（Ｌｅｅ ａｎｄ Ｍａｒｇｏｌｉｎ（２０１１）Ｃａｎｃｅｒｓ ３：３８５６）。多数の動物腫瘍モデル研究は、サイトカインが広範な抗腫瘍活性を有することを実証し、これは、がん療法のためのいくつかのサイトカインベースのアプローチに翻訳されている（Ｌｅｅ ａｎｄ Ｍａｒｇｏｌｉ、上記）。近年、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、及びＩＬ－２１を含むいくつかのサイトカインがみとめられ、進行がんを有する患者の臨床試験に入っている（Ｌｅｅ ａｎｄ Ｍａｒｇｏｌｉ、上記）。
本開示のＡＤＣに使用され得るサイトカインの例としては、限定されないが、副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；糖タンパク質ホルモン、例えば、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）；肝細胞成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子；ミュラー管抑制因子；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；神経成長因子、例えば、ＮＧＦ；血小板成長因子；トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子－Ｉ及びインスリン様成長因子－ＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロン、例えば、インターフェロンα、β、及びγ、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）；顆粒球－マクロファージ－Ｃ－ＳＦ（ＧＭ－ＣＳＦ）；及び顆粒球－ＣＳＦ（Ｇ－ＣＳＦ）；インターロイキン（ＩＬ）、例えば、ＩＬ－１、ＩＬ－ｌａ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２；腫瘍壊死因子；並びにＬＩＦ及びｋｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子が挙げられる。本明細書で使用される場合、サイトカインという用語は、天然源又は組換え細胞培養物由来のタンパク質、及び天然配列サイトカインの生物学的に活性な等価物を含む。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、サイトカインである。
コロニー刺激因子（ＣＳＦ）
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）にコンジュゲート化してもよい。コロニー刺激因子（ＣＳＦ）は、赤血球を作製する際に骨髄を補助する成長因子である。いくつかのがん治療（例えば、化学療法）は、白血球（感染に対抗するのに役立つ）に影響を及ぼす可能性があるため、コロニー刺激因子を導入して、白血球レベルをサポートし、免疫系を強化するのに役立てることができる。コロニー刺激因子は、新しい骨髄が白血球の産生を開始するのを助けるために、骨髄移植後にも使用し得る。本明細書に開示されるＡＤＣに使用され得るＣＳＦの代表的な例としては、限定されないが、エリスロポエチン（エポエチン）、フィルグラスチム（ネオポゲン（Ｎｅｏｐｏｇｅｎ）（顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）としても知られる、Ａｍｇｅｎ，Ｉｎｃ．）、サルグラモスチム（ロイキン（顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子及びＧＭ－ＣＳＦ）、Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、プロメガポエチン、及びオプレルベキン（組換えＩＬ－１１、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）が挙げられる。したがって、特定の実施形態では、Ｄは、ＣＳＦである。
遺伝子療法
本開示のリンカーを使用して、遺伝子療法のために、抗体を少なくとも１つの核酸に（直接的に、又は担体を介して間接的に）コンジュゲート化してもよい。遺伝子療法は、一般に、遺伝物質を細胞に導入することを指し、それによって遺伝物質は、疾患を治療するように設計される。それは免疫調節剤に関係しており、遺伝子療法は、がん細胞の増殖を阻害するか、又はがん細胞を死滅させるための対象の自然な能力を刺激するために使用される。特定の実施形態では、本開示のＡＤＣは、がんと関連する変異した遺伝子又はその他の機能不全（例えば、切断した）遺伝子を置き換えるために使用される機能的な治療遺伝子をコードする核酸を含む。他の実施形態では、本開示のＡＤＣは、がんを治療するための治療用タンパク質の産生をコードするか、又はその他の方法で提供する核酸を含む。治療遺伝子をコードする核酸は、抗体に直接コンジュゲート化されてもよく、又は代替的に、担体を介して抗体にコンジュゲート化されてもよい。遺伝子療法のための核酸を送達するために使用され得る担体の例としては、限定されないが、ウイルスベクター又はリポソームが挙げられる。
アルキル化剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアルキル化剤にコンジュゲート化してもよい。アルキル化剤は、アルキル基をＤＮＡに結合させる抗新生物性化合物の一種である。本開示のＡＤＣで使用され得るアルキル化剤の例としては、限定されないが、アルキルスルホネート、エチレンイミム（ｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｍｅ）、メチルアミン誘導体、エポキシド、ナイトロジェンマスタード、ニトロソ尿素、トリアジン、及びヒドラジンが挙げられる。
アルキルスルホネート
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアルキルスルホネートにコンジュゲート化してもよい。アルキルスルホネートは、一般式Ｒ－ＳＯ２－Ｏ－Ｒ１（式中、Ｒ及びＲ１は、典型的にはアルキル又はアリール基である）を有するアルキル化剤のサブクラスである。アルキルスルホネートの代表的な例は、ブスルファン（Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｂｕｓｕｌｆｅｘ ＩＶ（登録商標）、ＰＤＬ ＢｉｏＰｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．）である。
ナイトロジェンマスタード
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのナイトロジェンマスタードにコンジュゲート化してもよい。この抗がん化合物のサブクラスの代表的な例としては、限定されないが、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ、Ｎｅｏｓａｒ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、エストラムスチン（エストラムスチンリン酸ナトリウム又はＥｓｔｒａｃｙｔ（登録商標））、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、イホスファミド（Ｉｆｅｘ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、メクロレタミン（Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標）、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ Ｉｎｃ．）、及びメルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標）又はＬ－Ｐａｍ（登録商標）、又はフェニルアラニンマスタード、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）が挙げられる。
ニトロソ尿素
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのニトロソ尿素にコンジュゲート化してもよい。ニトロソ尿素は、脂質可溶性であるアルキル化剤のサブクラスである。代表的な例としては、限定されないが、カルムスチン（ＢＣＮＵ［ＢｉＣＮＵ、Ｎ，Ｎ－ビス（２－クロロエチル）－Ｎ－ニトロソ尿素、又は１，３－ビス（２－クロロエチル）－１－ニトロソ尿素としても知られる］、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、フォテムスチン（Ｍｕｐｈｏｒａｎ（登録商標）としても知られる）、ロムスチン（ＣＣＮＵ、又は１－（２－クロロ－エチル）－３－シクロヘキシル－１－ニトロソ尿素、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ニムスチン（ＡＣＮＵとしても知られる）、及びストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標）、Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）が挙げられる。
トリアジン及びヒドラジン
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのトリアジン又はヒドラジンにコンジュゲート化してもよい。トリアジン及びヒドラジンは、窒素含有アルキル化剤のサブクラスである。いくつかの実施形態では、これらの化合物は、自発的に分解されるか、又は代謝されて、核酸、ペプチド、及び／又はポリペプチドへのアルキル基の移行を促進するアルキルジアゾニウム中間体を生成し、それによって変異原性効果、発がん性効果、又は細胞傷害性効果を引き起こすことができる。代表的な例としては、限定されないが、ダカルバジン（ＤＴＩＣ－Ｄｏｍｅ、Ｂａｙｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．）、プロカルバジン（Ｍｕｔａｌａｎｅ（登録商標）、Ｓｉｇｍａ－Ｔａｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）、及びテモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）が挙げられる。
他のアルキル化剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのエチレンイミン、メチルアミン誘導体、又はエポキシドにコンジュゲート化してもよい。エチレンイミンは、典型的には、少なくとも１つのアジリジン環を含有するアルキル化剤のサブクラスである。エポキシドは、３つの環原子のみを有する環状エーテルとして特徴付けられるアルキル化剤のサブクラスを表す。
エチレンイミンの代表的な例としては、限定されないが、チオテパ（Ｔｈｉｏｐｌｅｘ、Ａｍｇｅｎ）、ジアジクオン（アジリジニルベンゾクオン（ＡＺＱ）としても知られる）、及びマイトマイシンＣが挙げられる。マイトマイシンＣは、アジリジン環を含有し、架橋ＤＮＡを介して細胞傷害性を誘導するようにみえる天然産物である（Ｄｏｒｒ Ｒ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９８５；４５：３５１０、Ｋｅｎｎｅｄｙ Ｋ Ａ，ｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９８５；４５：３５４１）。メチルアミン誘導体及びその類似体の代表的な例としては、限定されないが、ヘキサメチルアミン及びヘキサスタットとしても知られるアルトレタミン（Ｈｅｘａｌｅｎ、ＭＧＩ Ｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．）が挙げられる。この種の抗がん化合物のエポキシドの代表的な例としては、限定されないが、ジアンヒドロガラクチトールが挙げられる。ジアンヒドロガラクチトール（１，２：５，６－ジアンヒドロダルシトール）は、アジリジンと化学的に関連しており、一般に、上述のような同様の機構を介したアルキル基の移行を促進する。ジブロモズルシトールは、ジアンヒドロガラクチトールに加水分解されるため、エポキシドに対するプロドラッグである（Ｓｅｌｌｅｉ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ Ｒｅｐ．１９６９；５３：３７７）。
抗血管新生剤
いくつかの実施形態では、本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの抗血管新生剤にコンジュゲート化してもよい。抗血管新生剤は、新しい血管の成長を阻害する。抗血管新生剤は、様々な方式でその効果を発揮する。いくつかの実施形態では、これらの薬剤は、成長因子がその標的に到達する能力と干渉する。例えば、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、細胞表面上の特定の受容体に結合することによって血管新生を開始することに関与する一次タンパク質の１つである。したがって、ＶＥＧＦとそのコグネイト受容体との相互作用を防止する特定の抗血管新生剤は、ＶＥＧＦが血管新生を開始することを防止する。他の実施形態では、これらの薬剤は、細胞内シグナル伝達カスケードと干渉する。例えば、細胞表面上の特定の受容体がトリガーされると、血管の成長を促進するために、他の化学シグナルのカスケードが開始される。したがって、例えば、細胞増殖に寄与する細胞内シグナル伝達カスケードを促進することが知られている特定の酵素、例えば、いくつかのチロシンキナーゼは、がん治療の標的である。他の実施形態では、これらの薬剤は、細胞間シグナル伝達カスケードと干渉する。しかしながら、他の実施形態では、これらの薬剤は、細胞成長を活性化し、促進するか、又は血管細胞の成長と直接的に干渉することによって、特定の標的を無効化する。血管新生阻害特性は、多数の直接的及び間接的な阻害効果を有する３００を超える物質で発見されている。
本開示のＡＤＣに使用され得る抗血管新生剤の代表的な例としては、限定されないが、アンギオスタチン、ＡＢＸ ＥＧＦ、Ｃ１－１０３３、ＰＫＩ－１６６、ＥＧＦワクチン、ＥＫＢ－５６９、ＧＷ２０１６、ＩＣＲ－６２、ＥＭＤ５５９００、ＣＰ３５８、ＰＤ１５３０３５、ＡＧ１４７８、ＩＭＣ－Ｃ２２５（アービタックス、ＺＤ１８３９（イレッサ）、ＯＳＩ－７７４、エルロチニブ（タルセバ）、アンギオスタチン、アレスチン、エンドスタチン、ＢＡＹ１２－９５６６及びフルオロウラシル又はドキソルビシンを含むもの、カンスタチン、カルボキシアミドトリオゾール（ｃａｒｂｏｘｙａｍｉｄｏｔｒｉｏｚｏｌｅ）及びパクリタキセルを含むもの、ＥＭＤ１２１９７４、Ｓ－２４、ビタキシン、ジメチルキサンテノン酢酸、ＩＭ８６２、インターロイキン－１２、インターロイキン－２、ＮＭ－３、ＨｕＭＶ８３３、ＰＴＫ７８７、ＲｈｕＭａｂ、アンジオザイム（リボザイム）、ＩＭＣ－１Ｃ１１、ネオバスタット、マリムスタット（ｍａｒｉｍｓｔａｔ）、プリノマスタット、ＢＭＳ－２７５２９１、ＣＯＬ－３、ＭＭ１２７０、ＳＵ１０１、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＳＵ５４１６、パクリタキセルを含むもの、ゲムシタビン及びシスプラチンを含むもの、及びイリノテカン及びシスプラチンを含むもの、放射線を伴うもの、テコガラン（ｔｅｃｏｇａｌａｎ）、テモゾロミド及びＰＥＧインターフェロンα２ｂ、テトラチオモリブデート、ＴＮＰ－４７０、サリドマイド、ＣＣ－５０１３及びタキソテールを含むもの、タムスタチン、２－メトキシエストラジオール、ＶＥＧＦトラップ、ｍＴＯＲ阻害剤（デフォロリムス、エベロリムス（アフィニトール、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、及びテムシロリムス（トーリセル、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．））、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、エルロチニブ（タルセバ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、イマチニブ（グリベック、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ゲフィチニブ（イレッサ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ダサチニブ（スプリセル、Ｂｒｙｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、スニチニブ（スーテント、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、ニロチニブ（タシグナ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ラパチニブ（タイケルブ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ソラフェニブ（ネクサバール、Ｂａｙｅｒ ａｎｄ Ｏｎｙｘ）、ホスホイノシチド３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）が挙げられる。
代謝拮抗剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの代謝拮抗剤にコンジュゲート化してもよい。代謝拮抗剤は、細胞内の通常の物質と非常に類似した化学療法治療薬の一種である。細胞が、代謝拮抗剤を細胞代謝に組み込むとき、その結果は、その細胞に対して陰性であり、例えば、細胞は、分裂することができない。代謝拮抗剤は、それらと干渉する物質に従って分類される。本開示のＡＤＣで使用され得る代謝拮抗剤の例としては、限定されないが、以下に更に詳細に記載されるように、葉酸アンタゴニスト（例えば、メトトレキサート）、ピリミジンアンタゴニスト（例えば、５－フルオロウラシル、フォクスリジン、シタラビン、カペシタビン、及びゲムシタビン）、プリンアンタゴニスト（例えば、６－メルカプトプリン及び６－チオグアニン）、並びにアデノシンデアミナーゼ阻害剤（例えば、クラドリビン、フルダラビン、ネララビン、及びペントスタチン）が挙げられる。
抗葉酸剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの抗葉酸剤にコンジュゲート化してもよい。抗葉酸剤は、葉酸塩と構造的に類似した代謝拮抗剤のサブクラスである。代表的な例としては、限定されないが、メトトレキサート、４－アミノ－葉酸（アミノプテリン及び４－アミノプテロイン酸としても知られる）、ロメトレキソール（ＬＭＴＸ）、ペメトレキセド（アリムプタ（Ａｌｉｍｐｔａ）、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）、及びトリメトレキサート（ノイトレキシン（Ｎｅｕｔｒｅｘｉｎ）、Ｂｅｎ Ｖｅｎｕｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）が挙げられる。
プリンアンタゴニスト
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのプリンアンタゴニストにコンジュゲート化してもよい。プリン類似体は、プリンとして知られる化合物群と構造的に同様の代謝拮抗剤のサブクラスである。プリンアンタゴニストの代表的な例として、限定されないが、アザチオプリン（アザサン、Ｓａｌｉｘ、イムラン、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、クラドリビン（ロイスタチン［２－ＣｄＡとしても知られる］、Ｊａｎｓｓｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、メルカプトプリン（ピュリネソール［６－メルカプトエタノールとしても知られる］、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、フルダラビン（フルダラ、Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ペントスタチン（ニペント、２’－デオキシコホルマイシン（ＤＣＦ）としても知られる）、６－チオグアニン（ランヴィス（Ｌａｎｖｉｓ）［チオグアニンとしても知られる］、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）が挙げられる。
ピリミジンアンタゴニスト
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのピリミジンアンタゴニストにコンジュゲート化してもよい。ピリミジンアンタゴニストは、プリンとして知られる化合物群と構造的に同様の代謝拮抗剤のサブクラスである。ピリミジンアンタゴニストの代表的な例としては、限定されないが、アザシチジン（ビダーザ、Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、カペシタビン（ゼローダ、Ｒｏｃｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、シタラビン（シトシンアラビノシド及びアラビノシルシトシンとしても知られる、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、デシタビン（ダコゲン、Ｅｉｓａｉ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、５－フルオロウラシル（アドルシル、Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、エフデックス、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ）、５－フルオロ－２’－デオキシウリジン ５’－ホスフェート（ＦｄＵＭＰ）、５－フルオロウリジントリホスフェート、及びゲムシタビン（ジェムザール、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）が挙げられる。
ホウ素含有剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのホウ素含有剤にコンジュゲート化してもよい。ホウ素含有剤は、細胞増殖と干渉するがん治療化合物の一種を含む。ホウ素含有剤の代表的な例としては、限定されないが、ボロフィシン及びボルテゾミブ（ベルケイド、Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）が挙げられる。
化学保護剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの化学保護剤にコンジュゲート化してもよい。化学保護薬物は、化学療法の特定の毒性効果から身体を保護するのに役立つ化合物の一種である。化学保護剤は、治療されるがん細胞に化学療法剤を同時に投与することを可能にしつつ、化学療法薬の毒性効果から健康な細胞を保護するために、様々な化学療法剤と共に投与されてもよい。代表的な化学保護剤としては、限定されないが、シスプラチンの累積用量と関連する腎毒性を低下させるために使用されるアミフォスチン（エチヨール（Ｅｔｈｙｏｌ）、Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．）、アントラサイクリン（トテクト）の投与によって引き起こされる血管外漏出の治療のため、また、抗腫瘍抗生物質ドキソルビシン（ザインガード（Ｚｉｎｅｃａｒｄ））の投与によって引き起こされる心臓関連合併症の治療のための、デクスラゾキサン（トテクト、Ａｐｒｉｃｕｓ Ｐｈａｒｍａ、ザインカード）、及びイホクファミド（ｉｆｏｃｆａｍｉｄｅ）による化学療法治療中の出血性膀胱炎を予防するために使用されるメスナ（メスネックス、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）が挙げられる。
ホルモン剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのホルモン剤にコンジュゲート化してもよい。ホルモン剤（合成ホルモンを含む）は、内分泌系の内因的に産生されるホルモンの産生又は活性と干渉する化合物である。いくつかの実施形態では、これらの化合物は、細胞成長と干渉するか、又は細胞傷害性効果を生じさせる。非限定的な例として、アンドロゲン、エストロゲン、酢酸メドロキシプロゲステロン（プロベラ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、及びプロゲスチンが挙げられる。
抗ホルモン剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの抗ホルモン剤にコンジュゲート化してもよい。「抗ホルモン」剤は、特定の内因性ホルモンの産生を抑制し、及び／又はその機能を防止する薬剤である。特定の実施形態では、抗ホルモン剤は、アンドロゲン、エストロゲン、プロゲステロン、及びゴアナドトロピン放出ホルモンから選択されるホルモンの活性と干渉し、それによって様々ながん細胞の成長と干渉する。抗ホルモン剤の代表的な例としては、限定されないが、アミノグルテチミド、アナストロゾール（アリミデックス、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ビカルタミド（カソデックス、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、酢酸シプロテロン（シプロスタット、Ｂａｙｅｒ ＰＬＣ）、デガレリクス（ファーマゴン、Ｆｅｒｒｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、エキセメスタン（アロマシン、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）、フルタミド（ドロゲニル、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ－Ｐｌｏｕｇｈ Ｌｔｄ）、フルベストラント（ファソロデックス（Ｆａｓｌｏｄｅｘ）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ゴセレリン（ゾロデックス（Ｚｏｌｏｄｅｘ）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、レトロゾール（フェマーラ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ロイプロリド（プロスタップ（Ｐｒｏｓｔａｐ））、ルプロン（ｌｕｐｒｏｎ）、酢酸メドロキシプロゲステロン（プロベラ、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）、酢酸メゲストロール（メガス、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ）、タモキシフェン（ノルバデックス、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、及びトリプトレリン（デカペチル（Ｄｅｃａｐｅｔｙｌ）、Ｆｅｒｒｉｎｇ）が挙げられる。
コルチコステロイド
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのコルチコステロイドにコンジュゲート化してもよい。本開示のＡＤＣにコルチコステロイドを使用して炎症を減少させてもよい。コルチコステロイドの例としては、限定されないが、グルココルチコイド、例えば、プレドニゾン（デルタゾン、Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＆ Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．の一部門）が挙げられる。
光活性療法剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの光活性療法剤にコンジュゲート化してもよい。光活性療法剤としては、特定の波長の電磁放射線に曝露すると、治療細胞を死滅させるように配置することができる化合物が挙げられる。治療に関連する化合物は、組織を貫通する波長で電磁放射を吸収する。好ましい実施形態では、本化合物は、十分な活性化時に細胞又は組織に毒性のある光化学効果を生成することができる非毒性形態で投与される。他の好ましい実施形態では、これらの化合物は、がん性組織によって保持され、正常な組織から容易に除去される。非限定的な例として、様々な色原体及び染料が挙げられる。
オリゴヌクレオチド
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのオリゴヌクレオチドにコンジュゲート化してもよい。オリゴヌクレオチドは、遺伝情報の処理と干渉することによって機能する短い核酸鎖から作製される。いくつかの実施形態では、ＡＤＣで使用するためのオリゴヌクレオチドは、非修飾一本鎖及び／又は二本鎖ＤＮＡ若しくはＲＮＡ分子であり、一方で、他の実施形態では、これらの治療用オリゴヌクレオチドは、化学修飾一本鎖及び／又は二本鎖ＤＮＡ若しくはＲＮＡ分子である。特定の実施形態では、ＡＤＣで使用されるオリゴヌクレオチドは、比較的短く（１９～２５ヌクレオチド）、細胞内に存在する核酸標的の全プールにおける固有の核酸配列にハイブリダイズする。いくつかの重要なオリゴヌクレオチド技術としては、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を含む）、アプタマー、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、及びリボザイムが挙げられる。
アンチセンスオリゴヌクレオチド
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドにコンジュゲート化してもよい。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、Ｗａｔｓｏｎ－Ｃｒｉｃｋハイブリダイゼーションを通じてＲＮＡに結合するように設計される。いくつかの実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、コンジュゲート化抗体の領域、ドメイン、部分、又はセグメントをコードするヌクレオチドに相補的である。いくつかの実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約５～約１００ヌクレオチド、約１０～約５０ヌクレオチド、約１２～約３５ヌクレオチド、及び約１８～約２５ヌクレオチドを含む。
オリゴヌクレオチドが標的ＲＮＡに結合するとき、ＲＮＡの機能を阻害するために利用され得る複数の機構が存在する（Ｃｒｏｏｋｅ ＳＴ．（１９９９）．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１４８９，３０－４２）。最も良く特性決定されたアンチセンス機構によって、ＲＮａｓｅ Ｈ又はＲＮＡ干渉機構と関連するヌクレアーゼ等の内因性細胞ヌクレアーゼによる、標的化ＲＮＡの切断が生じる。しかしながら、スプライシングの調節又は翻訳停止等の非触媒機構によって標的遺伝子の発現を阻害するオリゴヌクレオチドも、遺伝子機能の強力かつ選択的な調節因子であり得る。
最近多くの注目を浴びている別のＲＮａｓｅ依存性アンチセンス機構は、ＲＮＡｉである（Ｆｉｒｅ ｅｔ ａｌ．（１９９８）．Ｎａｔｕｒｅ，３９１，８０６－８１１、Ｚａｍｏｒｅ ＰＤ．（２００２）．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９６，１２６５－１２６９）。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、二本鎖ＲＮＡが配列特異的な方法で遺伝子発現を阻害する転写後プロセスである。いくつかの実施形態では、ＲＮＡｉ効果は、比較的長い二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）の導入によって達成され、一方で、好ましい実施形態では、このＲＮＡｉ効果は、より短い二本鎖ＲＮＡ、例えば、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）及び／又はマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）の導入によって達成される。更に別の実施形態では、ＲＮＡｉは、標的遺伝子に相補的なｄｓＲＮＡを生成するプラスミドを導入することによっても達成することができる。前述の実施形態の各々では、二本鎖ＲＮＡは、細胞内の特定の標的配列の遺伝子発現と干渉するように設計される。一般に、この機構は、リボヌクレアーゼを相同ｍＲＮＡ標的に指向させる短いＲＮＡへのｄｓＲＮＡの変換を伴い（Ｒｕｖｋｕｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９４：７９７（２００１）にまとめられている）、次いで、対応する内因性ｍＲＮＡを分解し、それによって、遺伝子発現の調節をもたらす。特に、ｄｓＲＮＡは、抗増殖特性を有することが報告されており、これにより、治療用途を想定することも可能である（Ａｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ ８８：９０６（１９９１））。例えば、合成ｄｓＲＮＡは、マウスにおける腫瘍成長を阻害することが示されており（Ｌｅｖｙ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，６２：３５７－３６１（１９６９））、これは、白血病マウスの治療において活性であり（Ｚｅｌｅｚｎｉｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１３０：１２６－１２８（１９６９））、マウス皮膚において化学的に誘導される腫瘍形成を阻害する（Ｇｅｌｂｏｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ １６７：２０５－２０７（１９７０））。したがって、好ましい実施形態では、本開示は、乳がんの治療のためのＡＤＣにおけるアンチセンスオリゴヌクレオチドの使用を提供する。他の実施形態では、本開示は、アンチセンスオリゴヌクレオチド治療を開始するための組成物及び方法であって、ｄｓＲＮＡが、ｍＲＮＡレベルでのＥＧＦＲの標的細胞発現と干渉する、組成物及び方法を提供する。ｄｓＲＮＡは、上記で使用される場合、天然に存在するＲＮＡ、部分的に精製されたＲＮＡ、組換え産生されたＲＮＡ、合成ＲＮＡ、並びに非標準ヌクレオチド、非ヌクレオチド材料、ヌクレオチド類似体（例えば、ロックド核酸（ＬＮＡ））、デオキシリボヌクレオチド、及びこれらの任意の組み合わせを含むことによって天然に存在するＲＮＡとは異なる改変ＲＮＡを指す。本開示のＲＮＡは、本明細書に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドベースの調節を媒介する能力を有するように、天然のＲＮＡと十分に類似していればよい。
アプタマー
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのアプタマーにコンジュゲート化してもよい。アプタマーは、他の分子に結合する能力に基づいてランダムプールから選択された核酸分子である。抗体と同様に、アプタマーは、卓越した親和性及び特異性で標的分子と結合することができる。多くの実施形態では、アプタマーは、標的タンパク質と相互作用することを可能にする複合体、配列依存性、三次元形状を想定し、抗体－抗原相互作用に類似する密に結合された複合体が得られ、それによって上述のタンパク質の機能と干渉する。アプタマーがその標的タンパク質に密に、かつ特異的に結合する特定の能力は、標的分子療法としてのそれらの可能性を強調するものである。
ＣｐＧオリゴヌクレオチド
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのＣｐＧオリゴヌクレオチドにコンジュゲート化してもよい。細菌ＤＮＡ及びウイルスＤＮＡは、ヒトにおける先天性免疫及び特異的免疫の両方の強力な活性化因子であることが知られている。これらの免疫学的特徴は、細菌ＤＮＡに見られる非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドモチーフと関連している。これらのモチーフがヒトにおいて稀であるという事実に起因して、ヒト免疫系は、感染の初期兆候としてこれらのモチーフを認識し、その後の免疫応答を開始する能力を進化させてきた。したがって、このＣｐＧモチーフを含有するオリゴヌクレオチドを利用して、抗腫瘍免疫応答を開始することができる。
リボザイム
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのリボザイムにコンジュゲート化してもよい。リボザイムは、約４０～１５５ヌクレオチド長の範囲の触媒ＲＮＡ分子である。特定のＲＮＡ分子を認識し、切断するリボザイムの能力は、治療薬の候補となる可能性をもたらす。代表的な例には、アンギオザイムが含まれる。
放射性核種剤（放射性同位体）
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの放射性核種剤にコンジュゲート化してもよい。放射性核種剤は、放射性崩壊を受けることができる不安定な核を特徴とする薬剤を含む。放射性核種治療の成功の基礎は、がん細胞による放射性核種の十分な濃度及び長期間の保持に依存する。その他の考慮すべき因子としては、放射性核種の半減期、放出された粒子のエネルギー、放出された粒子が移動可能な最大範囲が挙げられる。好ましい実施形態では、療法剤は、１１１Ｉｎ、１７７Ｌｕ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１１Ａｔ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、９０Ｙ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３２Ｐ、３３Ｐ、４７Ｓｃ、１１１Ａｇ、６７Ｇａ、１４２Ｐｒ、１５３Ｓｍ、１６１Ｔｂ、１６６Ｄｙ、１６６Ｈｏ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１８９Ｒｅ、２１２Ｐｂ、２２３Ｒａ、２２５Ａｃ、５９Ｆｅ、７５Ｓｅ、７７Ａｓ、８９Ｓｒ、９９Ｍｏ、１０５Ｒｈ、１０９Ｐｄ、１４３Ｐｒ、１４９Ｐｍ、１６９Ｅｒ、１９４Ｉｒ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、及び２１１Ｐｂからなる群から選択される放射性核種である。また、オージェ発光粒子で実質的に崩壊する放射性核種も好ましい。例えば、Ｃｏ－５８、Ｇａ－６７、Ｂｒ－８０ｍ、Ｔｃ－９９ｍ、Ｒｈ－１０３ｍ、Ｐｔ－１０９、Ｉｎ－１１１ １、Ｓｂ－１１９、１－１２５、Ｈｏ－１６１、Ｏｓ－１８９ｍ、及びＩｒ－１９２。有用なβ粒子放出核種の崩壊エネルギーは、好ましくは、Ｄｙ－１５２、Ａｔ－２１１、Ｂｉ－２１２、Ｒａ－２２３、Ｒｎ－２１９、Ｐｏ－２１５、Ｂｉ－２１１、Ａｃ－２２５、Ｆｒ－２２１、Ａｔ－２１７、Ｂｉ－２１３、及びＦｍ－２５５である。有用なα粒子放出放射性核種の崩壊エネルギーは、好ましくは２，０００～１０，０００ｋｅＶ、より好ましくは３，０００～８，０００ｋｅＶ、及び最も好ましくは４，０００～７，０００ｋｅＶである。使用される追加の潜在的な放射性同位体としては、１１Ｃ、１３Ｎ、１５０、７５Ｂｒ、１９８Ａｕ、９５Ｒｕ、９７Ｒｕ、１０３Ｒｕ、１０５Ｒｕ、１０７Ｈｇ、２０３Ｈｇ、１２１ｍＴｅ、１２２ｍＴｅ、１２５ｍＴｅ、１６５Ｔｍ、１６７Ｔｍ、１６８Ｔｍ、１９７Ｐｔ、１０９Ｐｄ、１０５Ｒｈ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１６１Ｔｂ、１６６Ｈｏ、１９９Ａｕ、５７Ｃｏ、５８Ｃｏ、５１Ｃｒ、５９Ｆｅ、７５Ｓｅ、２０１Ｔｌ、２２５Ａｃ、７６Ｂｒ、１６９Ｙｂ等が挙げられる。
放射線増感剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つの放射線増感剤にコンジュゲート化してもよい。「放射線増感剤」という用語は、本明細書で使用される場合、電磁放射線に対して放射線感作される細胞の感受性を増加させる、及び／又は電磁放射線で治療可能な疾患の治療を促進するために、治療有効量で動物に投与される分子、好ましくは低分子量分子として定義される。放射線増感剤は、がん細胞を放射線療法に対してより感受性を高める一方で、典型的には、正常細胞に対する影響をはるかに低くする薬剤である。したがって、放射線増感剤は、放射線標識された抗体又はＡＤＣと併用され得る。放射線増感剤の添加によって、放射線標識された抗体又は抗体断片単独での治療と比較して、有効性を向上させることができる。放射線増感剤は、Ｄ．Ｍ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ（編集），Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（１９９５）に記載される。放射線増感剤の例としては、ゲムシタビン、５－フルオロウラシル、タキサン、及びシスプラチンが挙げられる。
放射線増感剤は、Ｘ線の電磁放射によって活性化され得る。Ｘ線活性化放射線増感剤の代表的な例としては、限定されないが、以下のものが挙げられる。メトロニダゾール、ミソニダゾール、デスメチルミソニダゾール、ピモニダゾール、エタニダゾール、ニモラゾール、マイトマイシンＣ、ＲＳＵ１０６９、ＳＲ４２３３、Ｅ０９、ＲＢ６１４５、ニコチンアミド、５－ブロモデオキシウリジン（ＢＵｄＲ）、５－ヨードデオキシウリジン（ＩＵｄＲ）、ブロモデオキシシチジン、フルオロデオキシウリジン（ＦＵｄＲ）、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、並びにそれらの治療に有効な類似体及び誘導体。代替的に、放射線増感剤は、光線力学的療法（ＰＤＴ）を使用して活性化され得る。光線力放射線増感剤の代表的な例としては、限定されないが、ヘマトポルフィリン誘導体、フォトフリン（ｒ）、ベンゾポルフィリン誘導体、ＮＰｅ６、スズエチオポルフィリン（ＳｎＥＴ２）、フェオボルビド（ｐｈｅｏｂｏｒｂｉｄｅ）ａ、バクテリオクロロフィルａ、ナフタロシアニン、フタロシアニン、亜鉛フタロシアニン、及びそれらの治療に有効な類似体及び誘導体が挙げられる。
トポイソメラーゼ阻害剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのトポイソメラーゼ阻害剤にコンジュゲート化してもよい。トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼ酵素（トポイソメラーゼＩ及びＩＩ）の作用と干渉するように設計された化学療法剤であり、トポイソメラーゼ酵素は、正常な細胞周期中にＤＮＡ鎖のホスホジエステル骨格を触媒し、次いで、切断し、再接続することによってＤＮＡ構造の変化を制御する酵素である。ＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害剤の代表的な例としては、限定されないが、カンプトテシン及びその誘導体であるイリノテカン（ＣＰＴ－１１、カンプトサール、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、並びにトポテカン（ハイカムチン、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）が挙げられる。ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の代表的な例としては、限定されないが、アムサクリン、ダウノルビシン、ドキソトルビシン（ｄｏｘｏｔｒｕｂｉｃｉｎ）、エピポドフィロトキシン、エリプチシン、エピルビシン、エトポシド、ラゾキサン、及びテニポシドが挙げられる。
チロシンキナーゼ阻害剤
本開示のリンカーを使用して、抗体を少なくとも１つのチロシンキナーゼ阻害剤にコンジュゲート化してもよい。チロシンキナーゼは、アミノ酸チロシンにリン酸基を結合するように機能する細胞内の酵素である。タンパク質チロシンキナーゼが機能する能力をブロックすることによって、腫瘍成長が阻害され得る。本開示のＡＤＣ上で使用され得るチロシンキナーゼの例として、限定されないが、アキシチニブ、ボスチニブ、セディラニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマキシニブ、スニチニブ、及びバンデタニブが挙げられる。
他の薬剤
本開示のＡＤＣに使用され得る他の薬剤の例としては、限定されないが、アブリン（例えば、アブリンＡ鎖）、アルファ毒素、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉタンパク質、アマトキシン、クロチン、クルシン、ジアンチンタンパク質、ジフテリア毒素（例えば、ジフテリアＡ鎖及びジフテリア毒素の非結合活性断片）、デオキシリボヌクレアーゼ（Ｄｎａｓｅ）、ゲロニン、ミトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、モデシンＡ鎖、ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ阻害剤、ネオマイシン、オンコナーゼ、フェノマイシン、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ－Ｓ）、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ内毒素、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素（例えば、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来））、レストリクトシン、リシンＡ鎖、リボヌクレアーゼ（Ｒｎａｓｅ）、ｓａｐａｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ阻害剤、サポリン、アルファ－サルシン、Ｓｔａｐｈｙｌｃｏｃｃａｌエンテロトキシン－Ａ、破傷風毒素、シスプラチン、カルボプラチン、及びオキサリプラチン（エロキサチン、Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）、プロテアソーム阻害剤（例えば、ＰＳ－３４１［ボルテゾミブ又はベルケイド］）、ＨＤＡＣ阻害剤（ボリノスタット（ゾリンザ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．））、ベリノスタット、エンチノスタット、モセチノスタット、及びパノビノスタット）、ＣＯＸ－２阻害剤、置換尿素、熱ショックタンパク質阻害剤（例えば、ゲルダナマイシン、及びその多くの類似体）、副腎皮質抑制剤、及びトリコテセンが挙げられる。（例えば、ＷＯ９３／２１２３２を参照されたい。）他の薬剤としては、アスパラギナーゼ（エスパー（Ｅｓｐａｒ）、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ Ｉｎｃ．）、ヒドロキシ尿素、レバミゾール、ミトタン（リゾドレン、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、及びトレチノイン（レノーヴァ、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．）も挙げられる。
本開示のＡＤＣで使用され得る薬物部分の前述の群は、薬物の特定の例が１つより多いカテゴリーに見出され得るという点で排他的ではないことに留意すべきであり、例えば、アンサマイトシンは、有糸分裂阻害剤でもあり、抗腫瘍抗生物質でもある。
上述の薬物部分の全ての立体異性体は、本開示の化合物、すなわち、Ｄのキラル炭素におけるＲ及びＳ配座の任意の組み合わせを企図している。
「検出可能な部分」又は「マーカー」は、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、放射性又は化学的手段によって検出可能な組成物を指す。例えば、有用な標識としては、３２Ｐ、３５Ｓ、蛍光色素、高電子密度試薬、酵素（例えば、一般的にＥＬＩＳＡに使用される酵素）、ビオチン－ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、及び抗血清若しくはモノクローナル抗体が利用可能なタンパク質、又は標識に相補的な配列を有する核酸分子が挙げられる。検出可能な部分は、多くの場合、測定可能なシグナル、例えば、放射性シグナル、色シグナル、又は蛍光シグナルを生成し、これを、試料中で結合する検出可能な部分の量を定量化するために使用することができる。シグナルの定量化は、例えば、シンチレーションカウント、密度ゲージ、フローセル分析、ＥＬＩＳＡ、又は環状ペプチド若しくはその後に消化されたペプチドの質量分析による直接分析によって達成され得る（１つ以上のペプチドがアッセイされ得る）。当業者は、目的の標識化合物のための技術及び検出手段に精通している。これらの技術及び方法は、従来のものであり、当該技術分野で周知である。
検出用プローブは、（ｉ）検出可能なシグナルを提供することができる材料、（ｉｉ）第１のプローブ若しくは第２のプローブと相互作用して、第１のプローブ若しくは第２のプローブによって提供される検出可能なシグナルを変化させることができる材料、例えば、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）、（ｉｉｉ）抗原若しくはリガンドとの相互作用を安定化するか、若しくは結合親和性を増加させることができる材料、（ｉｖ）電荷、疎水性等の物理パラメータによって電気移動度若しくは細胞侵襲作用に影響を与えることができる材料、又は（ｖ）リガンド親和性、抗原－抗体結合、若しくはイオン錯体形成を調整することができる材料を指す。
いくつかの実施形態では、各活性薬剤は、独立して、
（ａ）エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、イマチニブメシル酸塩、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４、オキサリプラチン、５－フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボクオン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、ウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチイレンチオホスホラミド（ｔｒｉｅｔｈｉｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリメチローロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、ＣＣ－１０６５、アドゼレシン、カルゼレシン、ビゼレシン、クリプトフィシン１、クリプトフィシン８、ドラスタチン、デュオカルマイシン、ＫＷ－２１８９、ＣＢ１－ＴＭ１、エレウテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）、スポンギスタチン、クロラムブシル、クロルナファジン、チョロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベムビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ１、カリケアミシンオメガ１、ダイネマイシン、ダイネマイシンＡ、クロドロネート、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントルマイシン（ａｎｔｒｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルニノマイシン（ｃａｒｎｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｕｃｉｎ）、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン（ｏｌｉｖｏｍｙｃｉｎｓ）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトミグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｉｇｒｉｎ）、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、５－フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チグアニン（ｔｈｉｇｕａｎｉｎｅ）、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン（ｄｒｏｍｏｓｔａｎｏｌｏｎｅ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホルホラミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）、デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）、デメコルシン、ジアジクオン、エルホルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）、マイタンシン、アンサマイトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモル（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）、ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、２－エチルヒドラジド、プロカルバジン、多糖－ｋ、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジクオン、２，２’，２”－トリクロロトリエチルアミン、Ｔ－２毒素、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ、及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン操作されたナノ粒子製剤、ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）、クロラムブシル、ゲムシタビン、６－チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、ＣＰＴ－１１、トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン、又は上述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、若しくは酸、
（ｂ）モノカイン、リンホカイン、従来のポリペプチドホルモン、副甲状腺ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞成長因子線維芽細胞成長因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子－α、腫瘍壊死因子－β、ミュラー管抑制因子、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮成長因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン－α、インターフェロン－β、インターフェロン－γ、コロニー刺激因子（「ＣＳＦ」）、マクロファージ－ＣＳＦ、顆粒球－マクロファージ－ＣＳＦ、顆粒球－ＣＳＦ、インターロイキン（「ＩＬ」）、ＩＬ－１、ＩＬ－１α、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、腫瘍壊死因子、ＴＮＦ－α、ＴＮＦ－β、ポリペプチド因子、ＬＩＦ、ｋｉｔリガンド、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
（ｃ）ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α－アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、ＡＭ毒素、アウリスタチン、チュブリシン（ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ）、ゲルダナマイシン、マイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ビンデシン、ＳＧ２２８５、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン類似体及び代謝産物、リゾキシン、リゾキシン誘導体、ＣＣ－１０６５、ＣＣ－１０６５類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
（ｄ）親和性リガンドであって、親和性リガンドが、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射線同位体、又は上述のうちのいずれかの組み合わせである、親和性リガンド、
（ｅ）放射性標識、３２Ｐ、３５Ｓ、蛍光色素、高電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
（ｆ）免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗菌剤、抗真菌剤、及び抗寄生虫剤、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
（ｇ）タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、又はトレミフェン、
（ｈ）４（５）－イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール、又はアナストロゾール、
（ｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、又はトロキサシタビン、
（ｊ）アロマターゼ阻害剤、
（ｋ）タンパク質キナーゼ阻害剤、
（ｌ）脂質キナーゼ阻害剤、
（ｍ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、
（ｎ）リボザイム、
（ｏ）ワクチン、及び
（ｐ）抗血管新生剤から選択される。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｇは、以下：
Figure 2023531252000050
Figure 2023531252000051
Figure 2023531252000052
Figure 2023531252000053
Figure 2023531252000054
Figure 2023531252000055
Figure 2023531252000056
Figure 2023531252000057
Figure 2023531252000058
 から選択される部分を含み、式中、
Figure 2023531252000059
 は、Ｚ’をＡｒ、この場合には置換Ｐｈ基に接続する連結基Ｚ’の断片である。
コンジュゲート化戦略
式Ｉの化合物を、１ステップ又は２ステップのコンジュゲート化手順で調製することができる。
１ステップのコンジュゲート化
いくつかの実施形態では、本開示は、抗体とリンカーとの間の１ステップのコンジュゲート化を伴う、式Ｉの化合物の調製方法に関する。上述の式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物は、抗体との１ステップのコンジュゲート化に好適である。
例えば、メチルフェニルスルホン部分（ＭＰＳ）を含有する前駆体は、スキーム１に示される一連のステップに従ってコンジュゲート化を受けることができる。ステップＡは、ｐ－メチルフェニルスルホニル基の系中での脱離を伴い、反応性中間体を形成する。ステップＢでは、この中間体は、抗体のチオール残基とのコンジュゲート化を受ける。
Figure 2023531252000060
得られたＡＤＣを、スキーム２に示されるように、ヒドロキシルアミン又は還元剤による処理によって更に安定化することができる。
Figure 2023531252000061
いくつかの実施形態では、ＭＰＳ含有前駆体は、スルフィン酸の脱離時に活性化マイケル受容体を生成する部分を含む。そのような前駆体の例をスキーム３に示す。
Figure 2023531252000062
いくつかの実施形態では、前駆体は、コンジュゲート化反応において活性化マイケル受容体として作用する部分を含む。活性化マイケル受容体によるコンジュゲート化反応の一例をスキーム４に示す。
Figure 2023531252000063
いくつかの実施形態では、１ステップのコンジュゲート化のための前駆体は、マレイミドを含有する。チオール含有抗体とマレイミド含有前駆体とのコンジュゲーションの例をスキーム５に示す。マレイミドメチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（Ｍａｌ－ｍｃｃ）リンカーを含有する前駆体をパートＡに示し、ＰＥＧスペーサーに直接結合したメリミド部分を有する前駆体をパートＢに示す。
Figure 2023531252000064
２ステップのコンジュゲート化
いくつかの実施形態では、本開示は、２ステップのコンジュゲート化を伴う、式Ｉの化合物の調製方法に関する。第１のステップは、抗体とリンカーとのコンジュゲート化を伴い、リンカーが、アジド又はアルキン等の反応性基を末端に有する。第２のステップでは、抗体含有前駆体は、活性薬剤を含有する前駆体との反応を受け、最終的なＡＤＣを生成する。
いくつかの実施形態では、２ステップの手順の第１のステップは、上記「１ステップのコンジュゲート化」のセクションで開示した反応性基のうちのいずれかを含有する前駆体と、抗体とのコンジュゲート化を伴う。第１のコンジュゲート化ステップのための例示的な前駆体をスキーム６に示す。
Figure 2023531252000065
いくつかの実施形態では、コンジュゲート化プロセスの第２のステップは、第１のステップで得られる抗体含有前駆体と、活性薬剤含有前駆体とを反応させることを伴う。活性薬剤含有前駆体は、第１のステップで得られた前駆体の反応性基に相補的な反応性基を含む。例えば、抗体含有前駆体は、アジドを末端に有し、活性薬剤含有前駆体は、アルキンを末端に有するか、又はその逆である。活性薬剤含有前駆体の例をスキーム７に示す。
Figure 2023531252000066
Figure 2023531252000067
抗Ｂ７－Ｈ３抗体
例示的な抗Ｂ７－Ｈ３抗体としては、本明細書の表１９～２４において示される抗体、又はその任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくは二重特異性が挙げられる。同様に、抗Ｂ７－Ｈ３抗体は、表１９～２４に列挙される抗体と同じエピトープに結合する抗体、又はその任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくは二重特異性バリアントであり得る。本開示の好適な抗Ｂ７－Ｈ３抗体としては、完全ヒトモノクローナル抗体、並びにヒト化モノクローナル抗体及びキメラ抗体、又はその任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくは二重特異性が挙げられる。これらの抗体は、ヒトＢ７－Ｈ３に対する特異性を示し、それらは、Ｂ７－Ｈ３の少なくとも１つの生物学的機能又は活性を調節し、例えば、ブロックし、阻害し、減少させ、拮抗し、中和するか、又はそれ以外の方法で干渉することが示されている。
抗体は、その抗体の存在下でＢ７－Ｈ３の機能活性のレベルが、本明細書に記載の抗体との結合が存在しない状態でのＢ７－Ｈ３の機能活性のレベルと比較すると、少なくとも９５％、例えば、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％減少する場合に、Ｂ７－Ｈ３の少なくとも１つの機能活性を完全に調節し、ブロックし、阻害し、減少させ、拮抗し、中和するか、又はそれ以外の方法で干渉すると考えられる。抗体は、その抗体の存在下でＢ７－Ｈ３の機能活性のレベルが、本明細書に記載の抗体との結合が存在しない状態でのＢ７－Ｈ３の機能活性のレベルと比較すると、９５％未満、例えば、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７５％、８０％、８５％、又は９０％減少する場合に、Ｂ７－Ｈ３の少なくとも１つの機能活性を部分的に調節し、ブロックし、阻害し、減少させ、拮抗し、中和するか、又はそれ以外の方法で干渉すると考えられる。
本明細書に記載の抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体、又はその任意の断片、バリアント、多量体態様、若しくは二重特異性バリアントの各々は、表２０～２４に列挙されるアミノ酸及び対応する核酸配列に示されるような、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
定義
本明細書で別段の定義がない限り、本出願で使用される科学用語及び技術用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有するものとする。一般に、本明細書に記載される化学、細胞及び組織培養、分子生物学、細胞及びがん生物学、神経生物学、神経化学、ウイルス学、免疫学、微生物学、薬理学、遺伝学、並びにタンパク質及び核酸化学と関連して使用される専門用語及びそれらの技術は、当該技術分野で周知であり、一般的に使用されている。
本開示の方法及び技術は、別段の指示がない限り、当該技術分野で周知の従来の方法に従って、及び本明細書全体を通して引用され、考察される種々の一般的及びより具体的な参考文献に記載されるように、一般的に実行される。例えば、“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｎｅｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ”，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（２０００）、Ｍｏｔｕｌｓｋｙ，“Ｉｎｔｕｉｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ”，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．（１９９５）、Ｌｏｄｉｓｈ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．”，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（２０００）、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，“Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，７ｔｈ ｅｄ．”，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．（１９９９）、及びＧｉｌｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，６ｔｈ ｅｄ．”，Ｓｉｎａｕｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，ＭＡ（２０００）を参照されたい。
本明細書で使用する化学用語は、本明細書で別段の定義がない限り、「Ｔｈｅ ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｓ”，Ｐａｒｋｅｒ Ｓ．，Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃ．Ａ．（１９８５）に例示されるように、当該技術分野での従来の使用に従って使用される。
本出願において言及される上述の全て、並びに任意の他の刊行物、特許、及び公開された特許出願は、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。矛盾する場合には、本明細書の具体的な定義も含め、本明細書が支配する。
「薬剤」という用語は、本明細書では、化学化合物（例えば、有機化合物若しくは無機化合物、化学化合物の混合物）、生物学的巨大分子（例えば、核酸、抗体（その一部を含む）、及びヒト化抗体、キメラ抗体及びヒト抗体、及びモノクローナル抗体、タンパク質又はその一部、例えば、ペプチド、脂質、炭水化物）、又は細菌、植物、真菌、若しくは動物（特に哺乳動物）細胞若しくは組織等の生物学的材料から作製される抽出物を示すために使用される。薬剤としては、例えば、構造が既知の薬剤、及び構造が未知の薬剤が挙げられる。そのような薬剤がＡＲを阻害するか、又はＡＲ分解を促進する能力は、本開示の方法及び組成物における「治療薬剤」として好適に奏効し得る。
「患者」、「対象」、又は「個体」は、互換的に使用され、ヒト又は非ヒト動物のいずれかを指す。これらの用語には、ヒト、霊長類、家畜動物（ウシ、ブタ等を含む）、コンパニオンアニマル（例えば、イヌ、ネコ等）、並びにげっ歯類（例えば、マウス及びラット）等の哺乳動物が含まれる。
状態又は患者を「治療すること」は、臨床結果を含む有益又は望ましい結果を得るための措置を講じることを指す。本明細書で使用される場合、及び当該技術分野でよく理解されているように、「治療」は、臨床結果を含む、有益又は所望の結果を得るためのアプローチである。有益又は所望の臨床結果としては、限定されないが、検出可能であるか、又は検出不可能であるかにかかわらず、１つ以上の症状若しくは状態の緩和若しくは改良、疾患の程度の減少、疾患の安定した（すなわち、悪化していない）状態、疾患の広がりの防止、疾患の進行の遅延若しくは遅れ、疾患の状態の緩和若しくは一時的な抑制、及び寛解（部分的であるか、若しくは全体的であるかにかかわらず）が挙げることができる。「治療」はまた、治療を受けていない場合に予想される生存期間と比較して、生存期間を延長することを意味し得る。
「予防する」という用語は、当該技術分野で認識されており、局所再発（例えば、疼痛）、がん等の疾患、心不全等の複合性症候群、又は任意の他の医学的状態等の状態に関連して使用される場合、当該技術分野において十分に理解されており、組成物を受けていない対象と比較して、対象における医学的状態の症状の頻度を減少させるか、又は発症を遅延させる組成物の投与を含む。したがって、がんの予防としては、例えば、未治療の対象集団と比較して、予防治療を受ける患者の集団における検出可能ながん成長の数を減少させること、及び／又は例えば、統計的及び／若しくは臨床的に有意な量まで、未治療の対象集団に対する、治療集団における検出可能ながん成長の出現を遅延させることが挙げられる。
物質、化合物、又は薬剤を対象に「投与する」、又は対象へのそれら「の投与」は、当業者に既知の様々な方法のうちの１つを使用して行うことができる。例えば、化合物又は薬剤は、静脈内、動脈内、皮内、筋肉内、腹腔内、皮下、眼内、舌下、経口（摂取によって）、鼻腔内（吸入によって）、脊髄内、脳内、及び経皮（吸収によって、例えば、皮膚導管を介して）投与され得る。化合物又は薬剤はまた、化合物又は薬剤の長期間放出、遅延放出、又は制御放出を提供する、充電式又は生分解性の高分子デバイス又は他のデバイス、例えば、パッチ及びポンプ、又は製剤によって適切に導入することもできる。投与することは、例えば、１回、複数回、及び／又は１回以上の長期間にわたって実施することもできる。
物質、化合物又は薬剤を対象に投与する適切な方法は、例えば、対象の年齢及び／又は身体状態、並びに化合物又は薬剤の化学的特性及び生物学的特性（例えば、溶解度、消化性、バイオアベイラビリティ、安定性及び毒性）にも依存するであろう。いくつかの実施形態では、化合物又は薬剤は、例えば、摂取によって対象に経口投与される。いくつかの実施形態では、経口投与される化合物又は薬剤は、持続放出製剤又は徐放製剤であるか、又はこのような徐放又は持続放出のためのデバイスを使用して投与される。
本明細書で使用される場合、「併用投与（ｃｏｎｊｏｉｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という語句は、以前に投与された治療薬剤が依然として体内で有効である状態で第２の薬剤が投与されるような、２つ以上の異なる治療薬剤の投与の任意の形態を指す（例えば、２つの薬剤が、患者において同時に有効であり、その２つの薬剤の相乗効果を含み得る）。例えば、異なる治療用化合物は、同時又は逐次のいずれかで、同じ製剤又は別個の製剤のいずれかで投与され得る。したがって、かかる治療を受ける個体は、異なる療法剤の併用効果から利益を得ることができる。
薬物又は薬剤の「治療有効量」又は「治療有効用量」は、対象に投与されるときに意図される治療効果を有する薬物又は薬剤の量である。完全な治療効果は、必ずしも１用量の投与によって生じるわけではなく、一連の用量の投与後にのみ生じる場合がある。したがって、治療有効量は、１回以上の投与において投与され得る。対象に必要な正確な有効量は、例えば、対象のサイズ、健康及び年齢、並びにがん又はＭＤＳ等の治療される状態の性質及び程度に依存するであろう。当業者は、日常的な実験によって、所与の状況に対する有効量を容易に決定することができる。
本明細書で使用される場合、「任意選択的な」又は「任意選択的に」という用語は、その後に記載された事象又は状況が起こっても起こらなくてもよいこと、また、その記載が、その事象又は状況が起こる場合の例及びそれが起こらない場合の例を含むことを意味する。例えば、「任意選択的に置換されたアルキル」は、アルキルが置換されてもよく、また、アルキルが置換されていない場合をも指す。
本発明の化合物上の置換基及び置換パターンは、当業者によって選択され、容易に入手可能な出発物質から、当該技術分野で公知の技術、及び以下に記載される方法によって容易に合成され得る化学的に安定な化合物をもたらすことができることが理解される。置換基自体が、１つより多い基で置換されている場合、これらの複数の基は、安定した構造をもたらす限り、同じ炭素上にあっても異なる炭素上にあってもよいことを理解されたい。
本明細書で使用される場合、「任意選択的に置換された」という用語は、所与の構造中の１～６個の水素原子を、限定されないが、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、シリル、アシル、アシルオキシ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アミノ、アミノアルキル、シアノ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、－ＯＣＯ－ＣＨ２－Ｏ－アルキル、－ＯＰ（Ｏ）（Ｏ－アルキル）２、又は－ＣＨ２－ＯＰ（Ｏ）（Ｏ－アルキル）２を含む特定の置換基により置き換えることを指す。好ましくは、「任意選択的に置換された」は、所与の構造中の１～４個の水素原子を、上述の置換基により置き換えることを指す。より好ましくは、上述のように、１～３個の水素置換基が置換基によって置き換えられる。置換基は、更に置換され得ることを理解されたい。
本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、限定されないが、Ｃ１～Ｃ１０直鎖アルキル基又はＣ１～Ｃ１０分岐鎖アルキル基を含む、飽和脂肪族基を指す。好ましくは、「アルキル」基は、Ｃ１～Ｃ６直鎖アルキル基又はＣ１～Ｃ６分岐鎖アルキル基を指す。最も好ましくは、「アルキル」基は、Ｃ１～Ｃ４直鎖アルキル基又はＣ１～Ｃ４分岐鎖アルキル基を指す。「アルキル」の例としては、限定されないが、メチル、エチル、１－プロピル、２－プロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、１－ペンチル、２－ペンチル、３－ペンチル、ｎｅｏ－ペンチル、１－ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル、１－ヘプチル、２－ヘプチル、３－ヘプチル、４－ヘプチル、１－オクチル、２－オクチル、３－オクチル又は４－オクチル等が挙げられる。「アルキル」基は、任意選択的に置換され得る。
「アシル」という用語は、当該技術分野で認識されており、一般式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）－、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）－によって表される基を指す。
「アシルアミノ」という用語は、当該技術分野で認識されており、アシル基で置換されたアミノ基を指し、例えば、式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）ＮＨ－によって表されてもよい。
「アシルオキシ」という用語は、当該技術分野で認識されており、一般式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）Ｏ－、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）Ｏ－によって表される基を指す。
「アルコキシ」という用語は、アルキル基に酸素が接続した、アルキル基を指す。代表的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ等が挙げられる。
「アルコキシアルキル」という用語は、アルコキシ基で置換されたアルキル基を指し、一般式アルキル－Ｏ－アルキルによって表されてもよい。
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、及びシクロアルキル置換アルキル基を含む、飽和脂肪族基を指す。好ましい実施形態では、直鎖又は分岐鎖アルキルは、その骨格に３０個以下の炭素原子（例えば、直鎖の場合はＣ１～３０、分岐鎖の場合はＣ３～３０）、より好ましくは２０個以下の炭素原子を有する。
更に、本明細書、実施例、及び特許請求の範囲全体で使用される「アルキル」という用語は、非置換アルキル基及び置換アルキル基の両方を含むことが意図され、後者は、トリフルオロメチル及び２，２，２－トリフルオロエチル等のハロアルキル基を含む、炭化水素骨格の１個以上の炭素上の水素を置き換える置換基を有するアルキル部分を指す。
「Ｃｘ～ｙ」又は「Ｃｘ～Ｃｙ」という用語は、化学部分、例えば、アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、又はアルコキシと組み合わせて使用される場合、鎖中にｘ～ｙ個の炭素を含有する基を含むことを意味する。Ｃ０アルキルは、その基が末端位置にある水素を示し、内部の場合は結合である。例えば、Ｃ１～６アルキル基は、鎖の中に１～６個の炭素原子を含有する。
「アルキルアミノ」という用語は、本明細書で使用される場合、少なくとも１つのアルキル基で置換されたアミノ基を指す。
「アルキルチオ」という用語は、本明細書で使用される場合、アルキル基で置換されたチオール基を指し、一般式アルキルＳ－によって表されてもよい。
「アミド」という用語は、本明細書で使用される場合、基
Figure 2023531252000068
 を指し、式中、Ｒ９及びＲ１０は、各々独立して、水素若しくはヒドロカルビル基を表すか、又はＲ９及びＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、環構造中に４～８個の原子を有するヘテロ環を完成する。
「アミン」及び「アミノ」という用語は、当該技術分野で認識されており、非置換及び置換の両方のアミン及びその塩、例えば、
Figure 2023531252000069
 によって表すことができる部分を指すか、
Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１０’は、各々独立して、水素若しくはヒドロカルビル基を表すか、又はＲ９及びＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、環構造中に４～８個の原子を有するヘテロ環を完成する。
「アミノアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、アミノ基で置換されたアルキル基を指す。
「アラルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、アリール基で置換されたアルキル基を指す。
本明細書で使用される「アリール」という用語は、環の各原子が炭素である、置換又は置換の単環芳香族基を含む。好ましくは、環は、５～７員環、より好ましくは６員環である。また、「アリール」という用語は、２個以上の炭素が２つの隣接する環で共通しており、環のうちの少なくとも１つが芳香族であり、例えば、他の環式環が、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、及び／又はヘテロシクリルであり得る、２つ以上の環式環を有する多環式環系を含む。アリール基としては、ベンゼン、ナフタレン、フェナントレン、フェノール、アニリン等が挙げられる。
「カルバメート」という用語は、当該技術分野で認識され、基
Figure 2023531252000070
 を指し、式中、Ｒ９及びＲ１０が、独立して、水素又はヒドロカルビル基を表す。
「カルボシクリルアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素環基で置換されたアルキル基を指す。
「炭素環」という用語は、５～７員の単環式環及び８～１２員の二環式環を含む。二環式炭素環の各環は、飽和環、不飽和環、及び芳香族環から選択され得る。炭素環には、２つの環の間で１、２、又は３個以上の原子が共有されている二環式分子が含まれる。「縮合炭素環」という用語は、環の各々が他方の環と２つの隣接する原子を共有する二環式炭素環を指す。縮合炭素環の各環は、飽和環、不飽和環、及び芳香族環から選択され得る。例示的な実施形態では、芳香環、例えば、フェニルは、飽和環又は不飽和環、例えば、シクロヘキサン、シクロペンタン、又はシクロヘキセンに縮合していてもよい。原子価が許す限り、飽和、不飽和、及び芳香族の二環式環の任意の組み合わせは、炭素環の定義に含まれる。例示的な「炭素環」としては、シクロペンタン、シクロヘキサン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、１，５－シクロオクタジエン、１，２，３，４－テトラヒドロナフタレン、ビシクロ［４．２．０］オクタ－３－エン、ナフタレン、及びアダマンタンが挙げられる。例示的な縮合炭素環としては、デカリン、ナフタレン、１，２，３，４－テトラヒドロナフタレン、ビシクロ［４．２．０］オクタン、４，５，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－インデン、及びビシクロ［４．１．０］ヘプタ－３－エンが挙げられる。「炭素環」は、水素原子を有することができる任意の１つ以上の位置で置換され得る。
「カルボシクリルアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素環基で置換されたアルキル基を指す。
「カーボネート」という用語は、当該技術分野で認識され、－ＯＣＯ２－基を指す。
「カルボキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、式－ＣＯ２Ｈによって表される基を指す。
「エステル」という用語は、本明細書で使用される場合、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ９基を指し、Ｒ９は、ヒドロカルビル基を表す。
「エーテル」という用語は、本明細書で使用される場合、酸素を介して別のヒドロカルビル基に連結したヒドロカルビル基を指す。したがって、ヒドロカルビル基のエーテル置換基は、ヒドロカルビル－Ｏ－であり得る。エーテルは、対称又は非対称のいずれであってもよい。エーテルの例としては、限定されないが、ヘテロ環－Ｏ－ヘテロ環及びアリール－Ｏ－ヘテロ環が挙げられる。エーテルには「アルコキシアルキル」基が含まれ、これは一般式アルキル－Ｏ－アルキルによって表され得る。
本明細書で使用される「ハロ」及び「ハロゲン」という用語は、ハロゲンを意味し、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを含む。
「ヘタラアルキル（ｈｅｔａｒａｌｋｙｌ）」及び「ヘテロアラルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、ヘタアリール（ｈｅｔａｒｙｌ）基で置換されたアルキル基を指す。
「ヘテロアリール」及び「ヘタアリール」という用語は、置換又は非置換の芳香族単環構造、好ましくは５～７員環、より好ましくは５～６員環であって、環構造が、少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１～４個のヘテロ原子、より好ましくは１個又は２個のヘテロ原子を含むものを含む。また、「ヘテロアリール」及び「ヘタアリール」という用語は、２個以上の炭素が２つの隣接する環で共通しており、環のうちの少なくとも１つがヘテロ芳香族であり、例えば、他の環式環が、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、及び／又はヘテロシクリルであり得る、２つ以上の環式環を有する多環式環系を含む。ヘテロアリール基としては、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、及びピリミジン等が挙げられる。
本明細書で使用される「ヘテロ原子」という用語は、炭素又は水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、及び硫黄である。
「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、ヘテロ環基で置換されたアルキル基を指す。
「ヘテロシクリル」、「ヘテロ環」及び「ヘテロ環系」という用語は、置換又は非置換の非芳香族環構造、好ましくは３～１０員環、より好ましくは３～７員環であって、環構造が、少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１～４個のヘテロ原子、より好ましくは１個又は２個のヘテロ原子を含むものを指す。また、「ヘテロシクリル」及び「ヘテロ環」という用語は、２個以上の炭素が２つの隣接する環で共通しており、環のうちの少なくとも１つがヘテロ環であり、例えば、他の環式環が、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、及び／又はヘテロシクリルであり得る、２つ以上の環式環を有する多環式環系を含む。ヘテロシクリル基としては、例えば、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、ラクトン、ラクタム等が挙げられる。
「ヒドロカルビル」という用語は、本明細書で使用される場合、＝Ｏ又は＝Ｓ置換基を有していない炭素原子を介して結合され、典型的には少なくとも１つの炭素－水素結合と、主に炭素骨格とを有する基を指すが、任意選択的にヘテロ原子を含んでいてもよい。したがって、メチル、エトキシエチル、２－ピリジル、更にはトリフルオロメチル等の基は、本出願の目的ではヒドロカルビルとみなされるが、アセチル（連結炭素上に＝Ｏ置換基を有する）及びエトキシ（炭素ではなく酸素を介して連結している）等の置換基は、ヒドロカルビルとみなされない。ヒドロカルビル基としては、限定されないが、アリール、ヘテロアリール、炭素環、ヘテロ環、アルキル、アルケニル、アルキニル、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
「ヒドロキシアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒドロキシ基で置換されたアルキル基を指す。
「低級」という用語は、化学部分、例えば、アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、又はアルコキシと組み合わせて使用される場合、置換基中に１０個以下の原子、好ましくは６個以下の原子が存在する基を含むことを意味する。例えば、「低級アルキル」は、１０個以下、好ましくは６個以下の炭素原子を含有するアルキル基を指す。特定の実施形態では、本明細書で定義されるアシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、又はアルコキシ置換基は、それぞれ、単独で、又はヒドロキシアルキル及びアラルキル（この場合、例えば、アリール基内の元素は、アルキル置換基中の炭素原子を数えるときに計数されない）といった記述等、他の置換基と組み合わせて現れるかどうかにかかわらず、低級アシル、低級アシルオキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、又は低級アルコキシである。
「ポリシクリル」、「多環」、及び「多環式」という用語は、２個以上の原子が２つの隣接する環で共通している（例えば、環が「縮合環」である）、２つ以上の環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、及び／又はヘテロシクリル）を指す。多環の各環は、置換又は非置換であり得る。特定の実施形態では、多環の各環は、環内に３～１０個、好ましくは５～７個の原子を含有する。
「サルフェート」という用語は、当該技術分野で認識されており、－ＯＳＯ３Ｈ基、又はその薬学的に許容される塩を指す。
「スルホンアミド」という用語は、当該技術分野で認識され、一般式
Figure 2023531252000071
 によって表される基を指し、式中、Ｒ９及びＲ１０が、独立して、水素又はヒドロカルビルを表す。
「スルホキシド」という用語は、当該技術分野で認識され、－Ｓ（Ｏ）－基を指す。
「スルホネート」という用語は、当該技術分野で認識されており、ＳＯ３Ｈ基、又はその薬学的に許容される塩を指す。
「スルホン」という用語は、当該技術分野で認識され、－Ｓ（Ｏ）２－基を指す。
「置換された」という用語は、骨格の１つ以上の炭素上の水素を置き換える置換基を有する部分を指す。「置換」又は「～で置換された」は、かかる置換が置換された原子及び置換基の許容される価に従い、置換が、例えば、転位、環化、脱離等によって自発的に変換を受けない安定した化合物をもたらすという暗黙の条件を含むことが理解されるであろう。本明細書で使用される場合、「置換された」という用語は、有機化合物の全ての許容される置換基を含むことが企図される。広い観点では、許容される置換基としては、有機化合物の非環式及び環式、分岐及び非分岐、炭素環式及びヘテロ環式、芳香族及び非芳香族の置換基が挙げられる。許容される置換基は、適切な有機化合物について、１つ以上であってもよく、同じであってもよく、又は異なっていてもよい。本発明の目的のために、窒素等のヘテロ原子は、水素置換基及び／又はヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載の有機化合物の任意の許容可能な置換基を有していてもよい。置換基には、本明細書に記載の任意の置換基、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（例えば、カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、若しくはアシル）、チオカルボニル（例えば、チオエステル、チオアセテート、若しくはチオホルメート）、アルコキシル、ホスホリル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、サルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、又は芳香族若しくは複素芳香族部分を含むことができる。適切であれば、炭化水素鎖上で置換された部分自体が置換され得ることは、当業者には理解されるであろう。
「チオアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、チオール基で置換されたアルキル基を指す。
「チオエステル」という用語は、本明細書で使用される場合、－Ｃ（Ｏ）ＳＲ９又は－ＳＣ（Ｏ）Ｒ９基を指し、
式中、Ｒ９が、ヒドロカルビルを表す。
「チオエーテル」という用語は、本明細書で使用される場合、酸素が硫黄で置き換えられている、エーテルと等価物である。
「尿素」という用語は、当該技術分野で認識されており、一般式
Figure 2023531252000072
 によって表されてもよく、式中、Ｒ９及びＲ１０が、独立して、水素又はヒドロカルビルを表す。
本明細書で使用される「調節する」という用語には、機能又は活性（細胞増殖等）の阻害又は抑制、並びに機能又は活性の増強が含まれる。
「薬学的に許容される塩」又は「塩」は、本明細書では、患者の治療に好適であるか、又は患者の治療に適合する酸付加塩又は塩基性付加塩を指すために使用される。
本明細書で使用される「薬学的に許容される酸付加塩」という用語は、式Ｉによって表される任意の塩基化合物の任意の無毒の有機塩又は無機塩を意味する。好適な塩を形成する例示的な無機酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、及びリン酸、並びにオルトリン酸一水素ナトリウム及び硫酸水素カリウム等の金属塩が挙げられる。好適な塩を形成する例示的な有機酸としては、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸及びサリチル酸等のモノカルボン酸、ジカルボン酸及びトリカルボン酸、並びにｐ－トルエンスルホン酸及びメタンスルホン酸等のスルホン酸が挙げられる。一塩基酸塩又は二塩基酸塩のいずれかを形成することができ、かかる塩は、水和、溶媒和、又は実質的に無水形態のいずれかで存在してもよい。一般に、式Ｉの化合物の酸付加塩は、水及び種々の親水性有機溶媒中で、それらの遊離塩基形態と比較して、可溶性が高く、一般に、高い融点を示す。適切な塩の選択は、当業者に既知であろう。他の薬学的に許容されない塩、例えば、シュウ酸塩は、例えば、実験室での使用のために、又はその後の薬学的に許容される酸付加塩への変換のために、式Ｉの化合物の単離で使用され得る。
本明細書で使用される「薬学的に許容される塩基性付加塩」という用語は、式Ｉ又はそれらの中間体のいずれかによって表される任意の酸化合物の任意の無毒の有機又は無機塩基付加塩を意味する。好適な塩を形成する例示的な無機塩基としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、又はバリウムの水酸化物が挙げられる。好適な塩を形成する例示的な有機塩基としては、メチルアミン、トリメチルアミン、ピコリン又はアンモニア等の脂肪族、脂環式、又は芳香族有機アミンが挙げられる。適切な塩の選択は、当業者に既知であろう。
本開示の方法及び組成物に有用な化合物の多くは、それらの構造内に少なくとも１つの立体中心を有する。この立体中心は、Ｒ配座又はＳ配座で存在してもよく、このＲ及びＳという表記は、Ｐｕｒｅ Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．（１９７６），４５，１１－３０に記載される規則に従って使用される。本開示は、化合物、塩、プロドラッグ、又はそれらの混合物（立体異性体の全ての可能な混合物を含む）の鏡像異性体形態及びジアステレオ異性体形態等の全ての立体異性体形態を企図する。例えば、ＷＯ０１／０６２７２６を参照されたい。
特定の実施形態では、本開示の化合物は、ラセミ体であり得る。特定の実施形態では、本開示の化合物は、１つのエナンチオマーを豊富に含んでいてもよい。例えば、本開示の化合物は、約３０％ｅｅ、４０％ｅｅ、５０％ｅｅ、６０％ｅｅ、７０％ｅｅ、８０％ｅｅ、９０％ｅｅ、９５％、９６％ｅｅ、９７％ｅｅ、９８％ｅｅ、９９％ｅｅ、又はそれより大きなｅｅを有し得る。
当該技術分野で一般的に理解されるように、立体化学を伴わずに描かれる単結合は、化合物の立体化学を示していない。式Ｉの化合物は、立体化学が示されていない化合物の一例を提供する。
特定の実施形態では、本開示の組成物又は化合物は、化合物の主に１つのエナンチオマーを提供するように濃縮され得る。エナンチオマー的に濃縮された組成物又は化合物は、例えば、少なくとも６０モルパーセントの１つのエナンチオマー、又はより好ましくは少なくとも７５、９０、９５、又は更に９９モルパーセントの１つのエナンチオマーを含み得る。特定の実施形態では、１つのエナンチオマーを豊富に含む化合物は、他のエナンチオマーを実質的に含まず、実質的に含まないとは、問題の物質が、（例えば、組成物又は混合物化合物中の）他のエナンチオマーの量と比較した場合に、１０％未満、又は５％未満、又は４％未満、又は３％未満、又は２％未満、又は１％未満を構成することを意味する。例えば、組成物又は化合物が、９８グラムの第１のエマンチオマーと、２グラムの第２のエナンチオマーと、を含有する場合、９８モルパーセントの第１のエナンチオマーと、わずか２モル％の第２のエナンチオマーと、を含有すると言われるであろう。
更に、アルケニル基を含有する特定の化合物は、Ｚ（ツザメン）又はＥ（エントゲーゲン）異性体として存在し得る。各々の場合では、本開示は、混合物及び別個の個々の異性体の両方を含む。
化合物のいくつかはまた、互変異性形態で存在し得る。そのような形態は、本明細書に記載される式において明示的に示されないが、本開示の範囲内に含まれることが意図される。
「プロドラッグ」又は「薬学的に許容されるプロドラッグ」は、投与後に宿主で代謝され、例えば、加水分解されるか、又は酸化され、本開示の化合物（例えば、式Ｉの化合物）を形成する化合物を指す。プロドラッグの典型的な例としては、活性化合物の機能性部分上に生物学的に不安定又は切断可能な（保護）基を有する化合物が挙げられる。プロドラッグとしては、酸化、還元、アミノ化、脱アミノ化、ヒドロキシル化、脱ヒドロキシル化、加水分解、脱加水分解、アルキル化、脱アルキル化、アシル化、脱アシル化、リン酸化、又は脱リン酸化されて、活性化合物を生成することができる化合物が挙げられる。生物学的に不安定又は切断可能な（保護）基としてエステル又はホスホラミデートを使用するプロドラッグの例は、米国特許第６，８７５，７５１号、同第７，５８５，８５１号、及び同第７，９６４，５８０号に開示されており、これらの開示は参照により本明細書に組み込まれる。本開示のプロドラッグは、式Ｉの化合物を生成するように代謝される。本開示は、その範囲内に、本明細書に記載される化合物のプロドラッグを含む。好適なプロドラッグの選択及び調製のための従来の手順は、例えば、“Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ”Ｅｄ．Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５に記載される。
本明細書で使用される「溶解度のＬｏｇ」、「ＬｏｇＳ」又は「ｌｏｇＳ」という用語は、化合物の水溶解度を定量化するために当該技術分野で使用される。化合物の水溶解度は、その吸収及び分布特性に著しく影響を及ぼす。低い溶解度は、吸収不良を伴うことが多い。ＬｏｇＳ値は、モル／リットルで測定される溶解度の単位なし対数（基数１０）である。
抗体の調製のための一般的な方法
当該技術分野内で知られる様々な手順は、例えば、Ｂ７－Ｈ３、腫瘍関連抗原、若しくは他の標的等の所与の標的に対して、又はそれらの誘導体、断片、類似体ホモログ、若しくはオルソログ等に対して指向するポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体の産生に使用され得る。（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｈａｒｌｏｗ Ｅ，ａｎｄ Ｌａｎｅ Ｄ，１９８８，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹを参照されたい。）
抗体は、主に免疫血清のＩｇＧ断片を提供する、タンパク質Ａ又はタンパク質Ｇを使用する親和性クロマトグラフィー等の周知の技術によって調製することができる。その後、又は代替的に、求められる免疫グロブリンの標的である特異的抗原、又はそのエピトープをカラムに固定して、免疫親和性クロマトグラフィーによって免疫特異的抗体を精製してもよい。免疫グロブリンの精製については、例えば、Ｄ．Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ（Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｓｔ，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｓｔ，Ｉｎｃ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ ＰＡ，Ｖｏｌ．１４，Ｎｏ．８（Ａｐｒｉｌ １７，２０００），ｐｐ．２５－２８）によって考察される。
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体は、例えば、本明細書で提供される実施例に記載される手順を使用することによって生成される。抗体はまた、例えば、ＢＡＬＢ／ｃマウスを、その表面上で高レベルの所与の標的を発現する細胞形質移入体の組み合わせで免疫化することによっても生成される。次いで、骨髄腫／Ｂ細胞融合から生じるハイブリドーマを、選択された標的に対する反応性についてスクリーニングする。
モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）に記載されているもの等のハイブリドーマ法を使用して調製される。ハイブリドーマ法では、マウス、ハムスター、又は他の好適な宿主動物は、典型的には、免疫化剤で免疫化し、免疫化剤に特異的に結合するであろう抗体を産生するか、又はそれを産生することができるリンパ球を誘発する。代替的に、リンパ球をインビトロで免疫化することができる。
免疫化剤は、典型的には、タンパク質抗原、その断片、又はその融合タンパク質を含むであろう。一般に、ヒト起源の細胞が望まれる場合は末梢血リンパ球が使用されるか、又は非ヒト哺乳動物源が望まれる場合は脾臓細胞若しくはリンパ節細胞が使用されるかのいずれかである。次いで、リンパ球は、ポリエチレングリコール等の好適な融合剤を使用して不死化細胞株と融合され、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，（１９８６）ｐｐ．５９－１０３）。不死化細胞株は、通常、形質転換された哺乳動物細胞、特にげっ歯類、ウシ、及びヒト起源の骨髄腫細胞である。通常、ラット又はマウスの骨髄腫細胞株が使用される。ハイブリドーマ細胞は、好ましくは融合していない不死化細胞の成長又は生存を阻害する１つ以上の物質を含有する好適な培養培地中で培養することができる。例えば、親細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマのための培養培地は、典型的には、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジン（「ＨＡＴ培地」を含み、これらの物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を防止する。
好ましい不死化細胞株は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの発現をサポートし、ＨＡＴ培地等の培地に感受性である不死化細胞株である。より好ましい不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ及びＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａから得ることができるマウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株も、モノクローナル抗体の産生について記載されている。（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，（１９８７）ｐｐ．５１－６３）を参照されたい。）
次いで、ハイブリドーマ細胞が培養される培養培地を、抗原に対して指向するモノクローナル抗体の存在についてアッセイすることができる。好ましくは、ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、又はラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）若しくは酵素結合免疫吸収アッセイ（ＥＬＩＳＡ）等のインビトロ結合アッセイによって決定される。かかる技術及びアッセイは、当該技術分野で既知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｓｃａｔｃｈａｒｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｍｕｎｓｏｎ ａｎｄ Ｐｏｌｌａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）によって決定することができる。更に、モノクローナル抗体の治療用途では、標的抗原に対して高度の特異性及び高い結合親和性を有する抗体を特定することが重要である。
所望のハイブリドーマ細胞が特定された後、クローンを、限界希釈手順によってサブクローニングし、標準的な方法によって成長させることができる。（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，（１９８６）ｐｐ．５９－１０３を参照されたい。）この目的に好適な培養培地としては、例えば、ダルベッコの改変イーグル培地及びＲＰＭＩ－１６４０培地が含まれる。代替的に、ハイブリドーマ細胞は、哺乳動物における腹水としてインビボで成長させることができる。
サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、例えば、タンパク質Ａ－セファロース、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又は親和性クロマトグラフィー等の従来の免疫グロブリン精製手順によって、培養培地又は腹水液から単離又は精製することができる。
モノクローナル抗体はまた、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されるもの等の組換えＤＮＡ法によって作製することができる。本開示のモノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離し、配列決定することができる。本開示のハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好ましい供給源として役立つ。単離されたら、ＤＮＡを発現ベクターに入れることができ、次いで、その他の方法では免疫グロブリンタンパク質を産生しない、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又は骨髄腫細胞等の宿主細胞にトランスフェクトされ、組換え宿主細胞におけるモノクローナル抗体の合成を得る。ＤＮＡはまた、例えば、相同マウス配列の代わりにヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインのコード配列を置換することによって（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８，８１２－１３（１９９４）を参照されたい）、又は免疫グロブリンコード配列に非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列の全て又は一部分を共有結合することによって、改変することができる。そのような非免疫グロブリンポリペプチドは、本開示の抗体の定常ドメインの代わりに使用することができるか、又は本開示の抗体の１つの抗原組み合わせ部位の可変ドメインの代わりに使用して、キメラ二価抗体を作製することができる。
本開示のモノクローナル抗体としては、ヒト化抗体又はヒト抗体が挙げられる。これらの抗体は、投与された免疫グロブリンに対するヒトによる免疫応答を生じさせることなく、ヒトに投与するのに好適である。抗体のヒト化形態は、主にヒト免疫グロブリンの配列で構成され、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含有する、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又はその断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、若しくは抗体の他の抗原結合配列）である。ヒト化は、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者らの方法（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６（１９８８））に従い、げっ歯類ＣＤＲ若しくはＣＤＲ配列をヒト抗体の対応する配列と置換することによって行われる。（米国特許第５，２２５，５３９号も参照されたい。）いくつかの場合には、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。ヒト化抗体はまた、例えば、レシピエント抗体にも、移入されたＣＤＲ中にも、又はフレームワーク配列中にもみられない残基を含む。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ＣＤＲ領域の全て、又は実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、フレームワーク領域の全て、又は実質的に全てが、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体はまた、最適には、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分（Ｆｃ）、典型的には、ヒト免疫グロブリンの免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分を含む（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３－５９６（１９９２））。
完全ヒト抗体は、ＣＤＲを含む、軽鎖及び重鎖の両方の配列全体がヒト遺伝子から生じる、抗体分子である。そのような抗体は、本明細書では「ヒト抗体」又は「完全ヒト抗体」と呼ばれる。モノクローナル抗体は、トリオーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術（Ｋｏｚｂｏｒ，ｅｔ ａｌ．，１９８３ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ ４：７２を参照されたい）、モノクローナル抗体を産生するためのＥＢＶハイブリドーマ技術（Ｃｏｌｅ，ｅｔ ａｌ．，１９８５ Ｉｎ：ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ ＡＮＤ ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＹ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，ｐｐ．７７－９６）を使用することによって調製することができる。モノクローナル抗体を利用してもよく、ヒトハイブリドーマを使用することによって（Ｃｏｔｅ，ｅｔ ａｌ．，１９８３．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８０：２０２６－２０３０）、又はヒトＢ細胞をインビトロでエプスタインバーウイルスで形質転換することによって産生されてもよい（Ｃｏｌｅ，ｅｔ ａｌ．，１９８５ Ｉｎ：ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ ＡＮＤ ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＹ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，ｐｐ．７７－９６）。
これに加えて、ヒト抗体はまた、ファージディスプレイライブラリを含む、追加の技術を使用して産生することができる。（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）を参照されたい。）同様に、ヒト抗体は、トランスジェニック動物、例えば、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的又は完全に不活性化されているマウスに、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入することによって作製することができる。チャレンジ時に、ヒト抗体産生が観察され、これは、遺伝子再配置、アセンブリ、及び抗体レパートリーを含む、全ての態様においてヒトにみられるものと非常によく似ている。このアプローチは、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、同第５，６６１，０１６号、及びＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０，７７９－７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８ ８５６－８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８，８１２－１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４，８４５－５１（１９９６）、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４，８２６（１９９６）、及びＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３ ６５－９３（１９９５）に記載されている。
更に、ヒト抗体は、抗原によるチャレンジに応答して、動物の内因性抗体ではなく完全ヒト抗体を産生するように改変されたトランスジェニック非ヒト動物を使用して産生され得る。（ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／０２６０２号を参照されたい）。非ヒト宿主における重鎖及び軽鎖免疫グロブリン鎖をコードする内因性遺伝子は、無力化されており、ヒト重鎖及び軽鎖免疫グロブリンをコードする活性遺伝子座は、宿主のゲノムに挿入される。ヒト遺伝子は、例えば、必要なヒトＤＮＡセグメントを含有する酵母人工染色体を使用して、組み込まれる。次いで、全ての所望の改変を提供する動物は、改変の完全な相補体よりも少ない相補体を含有する中間トランスジェニック動物を交配することによって、子孫として得られる。そのような非ヒト動物の一例は、ＰＣＴ公開第ＷＯ９６／３３７３５号及び同第ＷＯ９６／３４０９６号に開示されているように、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（商標）と呼ばれるマウスである。この動物は、完全ヒト免疫グロブリンを分泌するＢ細胞を産生する。抗体は、例えば、ポリクローナル抗体の調製物として、目的の免疫原での免疫化後、動物から直接的に得ることができ、又は代替的に、モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ等の動物に由来する不死化Ｂ細胞から得ることができる。更に、ヒト可変領域を有する免疫グロブリンをコードする遺伝子を回収し、発現させて、抗体を直接的に得ることができるか、又は例えば、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子等の抗体の類似体を得るように更に改変することができる。
内因性免疫グロブリン重鎖の発現を欠いている、マウスとして例示される非ヒト宿主を産生する方法の一例は、米国特許第５，９３９，５９８号に開示される。これは、胚性幹細胞における少なくとも１つの内因性重鎖遺伝子座からＪセグメント遺伝子を欠失させ、遺伝子座の再配置を防止し、再配置された免疫グロブリン重鎖遺伝子座の転写物の形成を防止し、この欠失が、選択可能なマーカーをコードする遺伝子を含有する標的化ベクターによって行われることと、胚性幹細胞から、体細胞及び生殖細胞が選択可能なマーカーをコードする遺伝子を含有するトランスジェニックマウスを産生することと、を含む、方法によって得ることができる。
ヒト抗体等の目的の抗体を産生するための１つの方法は、米国特許第５，９１６，７７１号に開示される。この方法は、重鎖をコードするヌクレオチド配列を含有する発現ベクターを、培養物中の１つの哺乳動物宿主細胞へ導入することと、軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含有する発現ベクターを、別の哺乳動物宿主細胞へ導入することと、２つの細胞を融合させてハイブリッド細胞を形成することと、を含む。ハイブリッド細胞は、重鎖及び軽鎖を含有する抗体を発現する。
この手順に対する更なる改善では、免疫原の上の臨床的に関連するエピトープを特定するための方法、及び関連するエピトープに高い親和性で特異的に結合する抗体を選択するための相関する方法は、米国公開第２００３／００９２１２号に開示されている。
抗体は、上述の一本鎖抗体をコードするＤＮＡセグメントを含有するベクターによって発現させることができる。
これらは、ベクター、リポソーム、裸のＤＮＡ、アジュバントを利用するＤＮＡ、遺伝子銃、カテーテル等を含み得る。ベクターは、標的化部分（例えば、細胞表面受容体に対するリガンド）、及び核酸結合部分（例えば、ポリリジン）、ウイルスベクター（例えば、ＤＮＡ若しくはＲＮＡウイルスベクター）を有する、ＷＯ９３／６４７０１に記載されるような化学コンジュゲート、標的化部分（例えば、標的細胞に特異的な抗体）、及び核酸結合部分（例えば、プロタミン）、プラスミド、ファージ等を含有する融合タンパク質である米国特許第７，１８６，６９７号に記載の融合タンパク質が挙げられる。ベクターは、染色体、非染色体、又は合成であり得る。
好ましいベクターとしては、ウイルスベクター、融合タンパク質、及び化学コンジュゲートが挙げられる。レトロウイルスベクターとしては、モロニーマウス白血病ウイルスが挙げられる。ＤＮＡウイルスベクターが好ましい。これらのベクターとしては、オルソポックス又はアビポックスベクター等のポックスベクター、単純ヘルペスウイルスＩ型（ＨＳＶ）ベクター等のヘルペスウイルスベクター（Ｇｅｌｌｅｒ，Ａ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，６４：４８７（１９９５）、Ｌｉｍ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，ｉｎ ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｄ．Ｇｌｏｖｅｒ，Ｅｄ．（Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｅｎｇｌａｎｄ）（１９９５）、Ｇｅｌｌｅｒ，Ａ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．：Ｕ．Ｓ．Ａ．９０：７６０３（１９９３）、Ｇｅｌｌｅｒ，Ａ．Ｉ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ ８７：１１４９（１９９０を参照されたい）、アデノウイルスベクター（ＬｅＧａｌ ＬａＳａｌｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５９：９８８（１９９３）、Ｄａｖｉｄｓｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ ３：２１９（１９９３）、Ｙａｎｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６９：２００４（１９９５を参照されたい）、及びアデノ随伴ウイルスベクター（Ｋａｐｌｉｔｔ，Ｍ．Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．８：１４８（１９９４を参照されたい）が挙げられる。
ポックスウイルスベクターは、遺伝子を細胞の細胞質に導入する。アビポックスウイルスベクターは、核酸の短期間の発現のみをもたらす。核酸を神経細胞に導入するためには、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、及び単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）ベクターが好ましい。アデノウイルスベクターは、アデノ随伴ウイルス（約４ヶ月）よりも短期間の発現（約２ヶ月）をもたらし、ＨＳＶベクターよりも短い。選択される特定のベクターは、標的細胞及び治療される状態に依存するであろう。導入は、標準的な技術、例えば、感染、トランスフェクション、形質導入、又は形質転換によって行うことができる。遺伝子導入の態様の例としては、例えば、裸のＤＮＡ、ＣａＰＯ４沈殿、ＤＥＡＥデキストラン、エレクトロポレーション、プロトプラスト融合、リポフェクション、細胞マイクロインジェクション、及びウイルスベクターが含まれる。
ベクターは、本質的に任意の所望の標的細胞を標的化するために使用することができる。例えば、定位固定注射を使用して、ベクター（例えば、アデノウイルス、ＨＳＶ）を所望の位置に指向させることができる。更に、粒子は、ＳｙｎｃｈｒｏＭｅｄ Ｉｎｆｕｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ等のミニポンプ注入システムを使用した脳室内（ｉｃｖ）注入によって送達することができる。対流と呼ばれるバルクフローに基づく方法は、脳の広い領域に大きな分子を送達するのに効果的であることも証明されており、ベクターを標的細胞に送達するのに有用であり得る。（Ｂｏｂｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：２０７６－２０８０（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６６：２９２－３０５（１９９４）を参照されたい。）使用可能な他の方法としては、カテーテル、静脈内、非経口、腹腔内、及び皮下注射、並びに経口又は他の好適な投与経路が挙げられる。
二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる抗原に対して結合特異性を有する抗体である。この場合、結合特異性の１つは、Ｂ７－Ｈ３又はその任意の断片等の標的に対するものである。第２の結合標的は、任意の他の抗原であり、有利なことに、細胞表面タンパク質又は受容体又は受容体サブユニットである。
二重特異性抗体を作製するための多くの方法は、当該技術分野において既知である。従来、二重特異性抗体の組換え産生は、２つの免疫グロブリン重鎖／軽鎖対の共発現に基づき、２つの重鎖は、異なる特異性を有する（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，３０５：５３７－５３９（１９８３））。免疫グロブリンの重鎖及び軽鎖のランダムアソートメントのため、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０個の異なる抗体分子の可能な混合物を産生し、そのうちの１つのみが、正しい二重特異性構造を有する。正しい分子の精製は、通常、親和性クロマトグラフィーステップによって達成される。同様の手順は、１９９３年５月１３日に公開されたＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１０：３６５５－３６５９（１９９１）に開示される。
本開示の二重特異性抗体及び／又は一価抗体は、２０１１年８月１６日に出願された出願第ＷＯ２０１２／０２３０５３号に開示されるものを含む、当該技術分野で認識されている様々な技術のうちのいずれかを使用して作製することができ、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。ＷＯ２０１２／０２３０５３に記載されている方法は、ヒト免疫グロブリンと構造が同一である二重特異性抗体を生成する。この種類の分子は、固有の重鎖ポリペプチドの２つのコピー、定常カッパドメインに融合された第１の軽鎖可変領域、及び定常ラムダドメインに融合された第２の軽鎖可変領域で構成される。各組み合わせ部位は、重鎖及び軽鎖の両方が寄与する異なる抗原特異性を示す。軽鎖可変領域は、ラムダ又はカッパファミリーのものであってもよく、好ましくは、それぞれ、ラムダ及びカッパ定常ドメインに融合される。このことは、非天然ポリペプチド接合部の生成を回避するために好ましい。しかしながら、第１の特異性のためにカッパ軽鎖可変ドメインを定常ラムダドメインに融合させ、第２の特異性のためにラムダ軽鎖可変ドメインを定常カッパドメインに融合させることによって、本開示の二重特異性抗体を得ることも可能である。ＷＯ２０１２／０２３０５３に記載される二重特異性抗体は、ＩｇＧκλ抗体又は「κλ体」と称され、新しい完全ヒト二重特異性ＩｇＧフォーマットである。このκλ体フォーマットは、標準的なモノクローナル抗体と区別することができない、したがって、以前のフォーマットと比較して好ましい特徴を有する、標準的なＩｇＧ分子と区別することができない二重特異性抗体の親和性精製を可能にする。
本方法の必須のステップは、同じ重鎖可変ドメインを共有する異なる抗原特異性を有する２つの抗体Ｆｖ領域（各々が可変軽鎖ドメイン及び可変重鎖ドメインによって構成される）の特定である。モノクローナル抗体及びその断片の生成のための多数の方法が記載されている。（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｈａｒｌｏｗ Ｅ，ａｎｄ Ｌａｎｅ Ｄ，１９８８，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹを参照されたい）。完全ヒト抗体は、ＣＤＲ１及び２を含む、軽鎖及び重鎖の両方の配列がヒト遺伝子から生じる抗体分子である。ＣＤＲ３領域は、ヒト起源のものであり得るか、又は合成手段によって設計され得る。そのような抗体は、本明細書では「ヒト抗体」又は「完全ヒト抗体」と呼ばれる。ヒトモノクローナル抗体は、トリオーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術（Ｋｏｚｂｏｒ，ｅｔ ａｌ．，１９８３ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ ４：７２を参照されたい）、ヒトモノクローナル抗体を産生するためのＥＢＶハイブリドーマ技術（Ｃｏｌｅ，ｅｔ ａｌ．，１９８５ Ｉｎ：ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ ＡＮＤ ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＹ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，ｐｐ．７７－９６）を使用することによって調製することができる。ヒトモノクローナル抗体を利用してもよく、ヒトハイブリドーマを使用することによって（Ｃｏｔｅ，ｅｔ ａｌ．，１９８３．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８０：２０２６－２０３０）、又はヒトＢ細胞をインビトロでエプスタインバーウイルスで形質転換することによって産生されてもよい（Ｃｏｌｅ，ｅｔ ａｌ．，１９８５ Ｉｎ：ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ ＡＮＤ ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＹ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，ｐｐ．７７－９６）。
モノクローナル抗体は、例えば、標的抗原又はその免疫原性断片、誘導体又はバリアントで動物を免疫化することによって生成される。代替的に、標的抗原が発現し、トランスフェクト細胞の表面と会合するように、標的抗原をコードする核酸分子を含有するベクターでトランスフェクトした細胞で動物を免疫化する。異種非ヒト動物を産生するための様々な好適な技術は、当該技術分野で周知である。例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号を参照されたい。
代替的に、抗体は、標的抗原に結合するための抗体又は抗原結合ドメイン配列を含有するライブラリをスクリーニングすることによって得られる。このライブラリは、例えば、組み立てられたファージ粒子表面上で発現されるバクテリオファージコートタンパク質に対するタンパク質又はペプチド融合物として、バクテリオファージ中で調製され、コードＤＮＡ配列は、ファージ粒子内に含有する（すなわち、「ファージディスプレイライブラリ」）。
次いで、骨髄腫／Ｂ細胞融合から生じるハイブリドーマを、標的抗原に対する反応性についてスクリーニングする。モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）に記載されているもの等のハイブリドーマ法を使用して調製される。ハイブリドーマ法では、マウス、ハムスター、又は他の好適な宿主動物は、典型的には、免疫化剤で免疫化し、免疫化剤に特異的に結合するであろう抗体を産生するか、又はそれを産生することができるリンパ球を誘発する。代替的に、リンパ球をインビトロで免疫化することができる。
厳密には不可能ではないが、同じ重鎖可変ドメインを有するが、異なる抗原に対して指向される異なる抗体の偶発的な特定は、非常に可能性が低い。実際に、ほとんどの場合、重鎖は、抗原結合表面に大きく寄与し、配列においても最も可変性が高い。特に、重鎖上のＣＤＲ３は、配列、長さ、及び構造において、最も多様なＣＤＲである。したがって、異なる抗原に特異的な２つの抗体は、ほぼ必ず異なる重鎖可変ドメインを有する。
米国特許第９，９２６，３８２号の出願に開示されている方法は、この制限を克服し、重鎖可変ドメインが全てのライブラリメンバーに対して同じであり、したがって多様性が軽鎖可変ドメインに限定される抗体ライブラリを使用することによって、同じ重鎖可変ドメインを有する抗体の単離を大幅に促進する。かかるライブラリは、例えば、各々が参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第８，９２１，２８１号及び出願第ＷＯ２０１１／０８４２５５号に記載されている。しかしながら、軽鎖可変ドメインは、重鎖可変ドメインと併せて発現されるため、両方のドメインが抗原結合に寄与し得る。このプロセスを更に促進するために、同じ重鎖可変ドメインと、ラムダ可変軽鎖又はカッパ可変軽鎖のいずれかの多様性と、を含有する抗体ライブラリを、異なる抗原に対する抗体のインビトロ選択のために並行して使用することができる。このアプローチは、共通の重鎖を有するが、一方がラムダ軽鎖可変ドメインを保有し、他方がカッパ軽鎖可変ドメインを保有する２つの抗体の特定を可能にし、本開示の完全な免疫グロブリンフォーマットにおける二重特異性抗体の生成のためのビルディングブロックとして使用することができる。本開示の二重特異性抗体は、異なるアイソタイプのものであってもよく、異なるＦｃ受容体への結合特性を改変し、このようにして抗体のエフェクター機能及び薬物動態特性を改変するために、それらのＦｃ部分を改変することができる。Ｆｃ部分の改変のための多数の方法が記載されており、本開示の抗体に適用可能である。（例えば、Ｓｔｒｏｈｌ，ＷＲ Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２００９（６）：６８５－９１、米国特許第６，５２８，６２４号、２００９年１月９日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００９／０１９１１９９を参照されたい。）また、本開示の方法を使用して、Ｆｃ部分を欠くＦ（ａｂ’）２形式の二重特異性抗体及び抗体混合物を生成することができる。
共通の重鎖及び２つの異なる軽鎖を単一の細胞内で共発現させ、本開示の二重特異性抗体の組み立てを可能にする。全てのポリペプチドが同じレベルで発現し、免疫グロブリン分子を形成するために等しく良好に組み立てられる場合、単一特異性（同じ軽鎖）及び二重特異性（２つの異なる軽鎖）の比は、５０％であるはずである。しかしながら、異なる軽鎖が異なるレベルで発現し、及び／又は同じ効率で組み立てられない可能性がある。したがって、異なるポリペプチドの相対的発現を調節するための手段は、それらの固有の発現特徴又は共通の重鎖と共に組み立てるための異なる傾向を補うために使用される。この調節は、プロモーター強度、異なる効率性を特徴とする内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）の使用、又は転写若しくは翻訳レベルで作用することができ、かつｍＲＮＡ安定性に作用する他の種類の調節要素を介して達成することができる。異なる強度の異なるプロモーターとしては、ＣＭＶ（前初期サイトメガロウイルスプロモーター）、ＥＦ１－１α（ヒト伸長因子１αサブユニットプロモーター）、Ｕｂｃ（ヒトユビキチンＣプロモーター）、ＳＶ４０（シミアンウイルス４０プロモーター）を挙げることができる。哺乳動物及びウイルス起源から、異なるＩＲＥＳも記載されている。（例えば、Ｈｅｌｌｅｎ ＣＵ ａｎｄ Ｓａｒｎｏｗ Ｐ． Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ ２００１ １５：１５９３－６１２を参照されたい）。これらのＩＲＥＳは、それらの長さ及びリボソームの動員効率において大きく異なる場合がある。更に、ＩＲＥＳの複数のコピーを導入することによって、活性を更に調整することができる（Ｓｔｅｐｈｅｎ ｅｔ ａｌ．２０００ Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９７：１５３６－１５４１）。発現の調節は、１つ又は他の軽鎖を発現する個々の遺伝子のコピー数を増加させ、したがってそれらの相対的発現を改変するために、細胞の複数の連続的なトランスフェクションによって達成することもできる。本明細書で提供される実施例は、異なる鎖の相対的発現を制御することが、二重特異性抗体の組み立て及び全体的な収率を最大化するために重要であることを示す。
重鎖及び２つの軽鎖の共発現は、細胞培養上清内の３つの異なる抗体：２つの単一特異性二価抗体及び１つの二重特異性二価抗体の混合物を生成する。後者は、目的の分子を得るために、混合物から精製されなければならない。本明細書に記載の方法は、ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ Ｆａｂ Ｋａｐｐａ ａｎｄ ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ Ｆａｂ Ｌａｍｂｄａ親和性マトリックス（ＢＡＣ ＢＶ、Ｈｏｌｌａｎｄ）等、カッパ又はラムダ軽鎖定常ドメインと特異的に相互作用する親和性クロマトグラフィー媒体の使用によって、この精製手順を大幅に促進する。この複数ステップの親和性クロマトグラフィー精製アプローチは、効率的であり、一般に、本開示の抗体に適用可能である。これは、クアドローマ又は抗体混合物を発現する他の細胞株に由来する各々の二重特異性抗体について開発され、最適化されなければならない特殊な精製方法とは鋭い対照をなす。実際に、混合物中の異なる抗体の生化学的特徴が類似している場合、イオン交換クロマトグラフィー等の標準的なクロマトグラフィー技術を使用したそれらの分離は、困難であるか、又は全く不可能である可能性がある。
他の好適な精製方法には、ＵＳ２０１３／０３１７２００に開示されているものが含まれ、その内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
二重特異性抗体を産生する他の実施形態では、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体－抗原結合部位）は、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合され得る。融合は、好ましくは、ヒンジ、ＣＨ２、及びＣＨ３領域の少なくとも一部分を含む免疫グロブリン重鎖定常ドメインとの融合である。融合物の少なくとも１つの中に存在する軽鎖結合に必要な部位を含有する第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）を有することが好ましい。免疫グロブリン重鎖融合物、及び必要に応じて免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡは、別個の発現ベクターに挿入され、好適な宿主生物に共トランスフェクトされる。二重特異性抗体の生成の更なる詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）を参照されたい。
ＷＯ９６／２７０１１に記載される別のアプローチによれば、一対の抗体分子間の界面を操作して、組換え細胞培養物から回収されるヘテロ二量体の割合を最大化することができる。好ましい界面は、抗体定常ドメインのＣＨ３領域の少なくとも一部分を含む。この方法では、第１の抗体分子の界面からの１つ以上の小さなアミノ酸側鎖が、より大きな側鎖（例えば、チロシン又はトリプトファン）で置き換えられる。大きな側鎖と同一、又は類似の大きさに釣り合いの取れた「空洞」は、大きなアミノ酸側鎖をそれより小さなもの（例えば、アラニン又はスレオニン）に置き換えることによって、第２の抗体分子の界面に作製される。これにより、ホモ二量体等の他の望ましくない最終生成物よりもヘテロ二量体の収率を増加させるための機構を提供する。
抗体断片から二重特異性抗体を生成するための技術は、文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、化学結合を使用して調製することができる。産生される二重特異性抗体は、酵素の選択的固定化のための薬剤として使用することができる。
組換え細胞培養から直接的に二重特異性抗体断片を産生し、単離するための様々な技術も説明されている。例えば、二重特異性抗体は、ロイシンジッパーを使用して産生されている。Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７－１５５３（１９９２）。Ｆｏｓ及びＪｕｎタンパク質からのロイシンジッパーペプチドを、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結した。抗体ホモ二量体をヒンジ領域で還元して単量体を形成し、次いで再酸化して抗体ヘテロ二量体を形成した。この方法はまた、抗体ホモ二量体の生成に利用することができる。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－６４４８（１９９３）によって記載される「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗体断片を作製するための代替的な機構を提供する。断片は、短すぎて同じ鎖上の２つのドメイン間の対形成をすることができないリンカーによって軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。したがって、１つの断片のＶＨ及びＶＬドメインは、別の断片の相補的なＶＬ及びＶＨドメインと強制的に対形成され、それによって２つの抗原結合部位を形成する。また、一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用によって二重特異性抗体断片を作製するための別の戦略も報告されている。Ｇｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい。
２より大きな価数を有する抗体が企図される。例えば、三重特異性抗体を調製することができる。Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）。
例示的な二重特異性抗体は、２つの異なるエピトープに結合することができ、そのうちの少なくとも１つは、本開示のタンパク質抗原に由来する。代替的に、免疫グロブリン分子の抗抗原性アームを、特定の抗原を発現する細胞に細胞防御機構を集中させるように、Ｔ細胞受容体分子（例えば、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ２８、若しくはＢ７）、又はＩｇＧ（ＦｃγＲ）に対するＦｃ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、及びＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）等の白血球上のトリガー分子に結合するアームと組み合わせることができる。二重特異性抗体はまた、特定の抗原を発現する細胞に、細胞傷害性薬剤を指向させるために使用することができる。これらの抗体は、抗原結合アーム、及びＥＯＴＵＢＥ、ＤＰＴＡ、ＤＯＴＡ、又はＴＥＴＡ等の細胞傷害性薬剤又は放射性核種キレート剤に結合するアームを有する。目的の別の二重特異性抗体は、本明細書に記載のタンパク質抗原に結合し、組織因子（ＴＦ）に更に結合する。
ヘテロコンジュゲート抗体も、本開示の範囲内である。ヘテロコンジュゲート抗体は、２つの共有結合した抗体で構成される。そのような抗体は、例えば、免疫系細胞を望ましくない細胞に標的化するために（米国特許第４，６７６，９８０号を参照されたい）、及びＨＩＶ感染の治療のために提案されている（ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／２００３７３、ＥＰ０３０８９を参照されたい）。抗体は、架橋剤を含むものを含め、合成タンパク質化学を使用してインビトロで調製できることが企図される。例えば、免疫毒素は、ジスルフィド交換反応を使用して、又はチオエーテル結合を形成することによって構築することができる。この目的に好適な試薬の例としては、イミノチオレート及びメチル－４－メルカプトブチルイミデート、並びに例えば米国特許第４，６７６，９８０号に開示されるものが挙げられる。
例えば、がん、及び／又は異常なＢ７－Ｈ３発現及び／若しくは活性と関連する他の疾患及び障害の治療における抗体の有効性を高めるように、エフェクター機能に関して本開示の抗体を改変することが望ましい場合がある。例えば、システイン残基は、Ｆｃ領域に導入することができ、それによってこの領域での鎖間ジスルフィド結合形成を可能にする。このように生成されたホモ二量体抗体は、改善された内在化能力及び／又は増加した補体媒介性細胞死滅及び抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を有し得る。（Ｃａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ Ｍｅｄ．，１７６：１１９１－１１９５（１９９２）及びＳｈｏｐｅｓ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８：２９１８－２９２２（１９９２）を参照されたい。）代替的に、二重Ｆｃ領域を有し、それによって強化された補体溶解及びＡＤＣＣ能力を有することができる抗体を操作することができる。（Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉ－Ｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，３：２１９－２３０（１９８９）を参照されたい。）
コンジュゲート化抗体
本開示はまた、毒素等の細胞傷害性剤（例えば、細菌、真菌、植物、若しくは動物起源の酵素的に活性な毒素、又はその断片）（本明細書ではイムノコンジュゲートとも称される）、又は放射性同位体（すなわち、ラジオコンジュゲート）にコンジュゲート化された抗体若しくはその抗原結合断片を含む、コンジュゲート化抗体に関する。
いくつかの実施形態では、毒素は、微小管阻害剤又はその誘導体である。いくつかの実施形態では、毒素は、ドラスタチン又はその誘導体である。いくつかの実施形態では、毒素は、アウリスタチンＥ、アウリスタチンＦ、ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ、ＭＭＡＤ、ＤＭＡＦ、又はＤＭＡＥである。いくつかの実施形態では、毒素は、マイタンシノイド又はマイタンシノイド誘導体である。いくつかの実施形態では、毒素は、ＤＭ１又はＤＭ４である。いくつかの実施形態では、毒素は、核酸損傷毒素である。いくつかの実施形態では、毒素は、デュオカルマイシン又はその誘導体である。いくつかの実施形態では、毒素は、カリケアミシン又はその誘導体である。いくつかの実施形態では、薬剤は、ピロロベンゾジアゼピン又はその誘導体である。いくつかの実施形態では、薬剤は、エキサテカン又はその誘導体である。
使用可能な酵素的に活性な毒素及びその断片としては、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、エクソトキシンＡ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ－サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンチンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ－Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ阻害剤、クルシン、クロチン、ｓａｐａｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、及びトリコテセンが挙げられる。ラジオコンジュゲートされた抗体の精製には、様々な放射性核種が利用可能である。例としては、２１２Ｂｉ、１３１Ｉ、１３１Ｉｎ、９０Ｙ、及び１８６Ｒｅが挙げられる。
抗体と細胞傷害性剤とのコンジュゲートは、Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオール）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（ジメチルアジピミデートＨＣＬ等）、活性エステル（スベリン酸ジスクシンイミジル等）、アルデヒド（グルタレルデヒド（ｇｌｕｔａｒｅｌｄｅｈｙｄｅ）等）、ビス－アジド化合物（ビス－（ｐ－アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン等）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミン）等）、ジイソシアネート（トルエン ２，６－ジイソシアネート等）、及びビス－活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼン等）等の様々な二官能性タンパク質カップリング剤を使用して作製することができる。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８：１０９８（１９８７）に記載されるように調製することができる。炭素－１４－標識された１－イソチオシアナトベンジル－３－メチルジエチレントリアミン五酢酸（ＭＸ－ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドを抗体にコンジュゲート化するための例示的なキレート剤である。（ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい）。
当業者であれば、多種多様な可能な部分が、本開示の得られた抗体にカップリングされ得ることを認識するであろう。（例えば、その全容が参照により本明細書に組み込まれる、“Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｖａｃｃｉｎｅｓ”，Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ ｔｏ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊ．Ｍ．Ｃｒｕｓｅ ａｎｄ Ｒ．Ｅ．Ｌｅｗｉｓ，Ｊｒ（編集），Ｃａｒｇｅｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，（１９８９）を参照されたい）。
カップリングは、抗体及び他の部分がそれらの各々の活性を保持する限り、２つの分子を結合するであろう任意の化学反応によって達成されてもよい。この結合は、多くの化学機構、例えば、共有結合、親和性結合、インターカレーション、配位結合、複合体化を含み得る。しかしながら、好ましい結合は、共有結合である。共有結合は、既存の側鎖の直接縮合によって、又は外部架橋分子の組み込みのいずれかによって達成することができる。多くの二価連結剤又は多価連結剤は、本開示の抗体等のタンパク質分子を他の分子にカップリングするのに有用である。例えば、代表的なカップリングとしては、チオエステル、カルボジイミド、スクシンイミドエステル、ジイソシアネート、グルタルアルデヒド、ジアゾベンゼン、及びヘキサメチレンジアミン等の有機化合物を挙げることができる。このリストは、当該技術分野で知られている様々な種類のカップリング剤を網羅することを意図するものではなく、むしろ、より一般的なカップリング剤の例示である。（Ｋｉｌｌｅｎ ａｎｄ Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ，Ｊｏｕｒ．Ｉｍｍｕｎ．１３３：１３３５－２５４９（１９８４）、Ｊａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ６２：１８５－２１６（１９８２）、及びＶｉｔｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８：１０９８（１９８７）を参照されたい。
好適なリンカーは、文献に記載されている。（例えば、ＭＢＳ（Ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルの使用について記載するＲａｍａｋｒｉｓｈｎａｎ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４４：２０１－２０８（１９８４）を参照されたい。）オリゴペプチドリンカーによって抗体にカップリングしたハロゲン化アセチルヒドラジド誘導体の使用について記載する、米国特許第５，０３０，７１９号も参照されたい。特に好ましいリンカーとしては、（ｉ）ＥＤＣ（１－エチル－３－（３－ジメチルアミノ－プロピル）カルボジイミド塩酸塩、（ｉｉ）ＳＭＰＴ（４－スクシンイミジルオキシカルボニル－アルファ－メチル－アルファ－（２－ピリジル－ジチオ）－トルエン（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．、カタログ（２１５５８Ｇ）、（ｉｉｉ）ＳＰＤＰ（スクシンイミジル－６［３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド］ヘキサノエート（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．、カタログ番号２１６５１Ｇ）、（ｉｖ）スルホ－ＬＣ－ＳＰＤＰ（スルホスクシンイミジル６［３－（２－ピリジルジチオ）－プロピオンアミド］ヘキサノエート（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．カタログ番号２１６５－Ｇ）、及び（ｖ）ＥＤＣにコンジュゲート化されたスルホ－ＮＨＳ（Ｎ－ヒドロキシスルホ－スクシンイミド：Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．、カタログ番号２４５１０）が挙げられる。
上述のリンカーは、異なる属性を有する成分を含有し、したがって、異なる物理化学的特性を有するコンジュゲートをもたらす。例えば、アルキルカルボキシレートのスルホ－ＮＨＳエステルは、芳香族カルボキシレートのスルホ－ＮＨＳエステルよりも安定である。ＮＨＳ－エステル含有リンカーは、スルホ－ＮＨＳエステルよりも溶解性が低い。更に、リンカーＳＭＰＴは、立体的に嵩高いジスルフィド結合を含有し、増加した安定性を有するコンジュゲートを形成することができる。ジスルフィド結合は、一般に、他の結合よりも安定性が低く、これはジスルフィド結合がインビトロで切断され、利用可能なコンジュゲートが少なくなるためである。特に、スルホ－ＮＨＳは、カルボジミドカップリングの安定性を高めることができる。カルボジミドカップリング（ＥＤＣ等）は、スルホ－ＮＨＳと組み合わせて使用されると、カルボジミドカップリング反応単独よりも加水分解に対してより耐性のあるエステルを形成する。
また、本明細書に開示の抗体を、免疫リポソームとして製剤化してもよい。本抗体を含有するリポソームは、Ｅｐｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８（１９８５）、Ｈｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４０３０（１９８０）、及び米国特許第４，４８５，０４５号及び第４，５４４，５４５号に記載されるもの等の任意の好適な方法によって調製することができる。循環時間が向上したリポソームは、米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。
特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロール、及びＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ－ＰＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発法によって生成することができる。リポソームは、定義された孔径のフィルターを通して押し出されて、所望の直径のリポソームが得られる。本開示の抗体のＦａｂ’断片は、Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５７：２８６－２８８（１９８２）に、ジスルフィド交換反応を介して記載されているリポソームにコンジュゲート化され得る。
抗Ｂ７－Ｈ３抗体の使用
本開示による治療実体の投与は、好適な担体、賦形剤、及び改善された移行、送達、忍容性等をもたらすために製剤に組み込まれる他の薬剤と共に投与されることを理解されたい。多くの適切な製剤は、全ての製薬化学者に知られている以下の処方集の中に見出すことができる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１５ｔｈ ｅｄ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９７５））、特にその中のＢｌａｕｇ，ＳｅｙｍｏｕｒによるＣｈａｐｔｅｒ ８７。これらの製剤には、例えば、粉末、ペースト、軟膏、ゼリー、ワックス、油、脂質、小胞（例えば、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（商標）を含有する脂質（カチオン性又はアニオン性）、ＤＮＡコンジュゲート、無水吸収ペースト、水中油及び油中水エマルション、エマルションカーボワックス（種々の分子量のポリエチレングリコール）、半固体ゲル、並びにカーボワックスを含有する半固体混合物が含まれる。前述の混合物のいずれかは、製剤中の活性成分が製剤によって不活性化されず、かつ製剤が生理学的に適合性であり、投与経路と忍容性であることを条件として、本開示による治療及び療法において適切であり得る。また、Ｂａｌｄｒｉｃｋ Ｐ．“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ： ｔｈｅ ｎｅｅｄ ｆｏｒ ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ ｇｕｉｄａｎｃｅ．”Ｒｅｇｕｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３２（２）：２１０－８（２０００）、Ｗａｎｇ Ｗ．“Ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ．”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２０３（１－２）：１－６０（２０００）、Ｃｈａｒｍａｎ ＷＮ “Ｌｉｐｉｄｓ，ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ ｄｒｕｇｓ，ａｎｄ ｏｒａｌ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ－ｓｏｍｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｃｏｎｃｅｐｔｓ．”Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ．８９（８）：９６７－７８（２０００）、Ｐｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．“Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ｆｏｒ ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ”ＰＤＡ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ Ｔｅｃｈｎｏｌ．５２：２３８－３１１（１９９８）、及びその中における製薬化学者に周知の製剤、賦形剤及び担体に関連する追加の情報についての引用も参照されたい。
本開示のコンジュゲートを含む、本開示の治療用製剤を使用して、がん、例えば、非限定的な例として、白血病、リンパ腫、乳がん、結腸がん、卵巣がん、膀胱がん、前立腺がん、神経膠腫、肺及び気管支がん、結腸直腸がん、膵臓がん、食道がん、肝臓がん、膀胱がん、腎臓及び腎盂がん、口腔及び咽頭がん、子宮体がん、及び／又は黒色腫に関連する症状を治療又は緩和する。本開示はまた、がんと関連する症状を治療又は緩和する方法も提供する。治療レジメンは、例えば、標準的な方法を使用して、対象、例えば、がんに罹患している（又はがんを発症するリスクがある）ヒト患者を特定することを含むことができる。
Ｂ７－Ｈ３を認識し、任意選択的に第２の標的を認識する本開示のコンジュゲートを含む、本開示の治療用製剤を使用して、自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患、例えば、非限定的な例として、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ（ＲＡ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ヴァルデンストローム高ガンマグロブリン血症、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、及び／又はループス腎炎を含む、Ｂ細胞媒介性自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患と関連する症状を治療又は緩和することができる。
治療の有効性は、特定の免疫関連障害を診断又は治療するための任意の好適な方法と関連して決定することができる。免疫関連障害の１つ以上の症状の緩和は、コンジュゲートが臨床的利益を与えることを示している。
Ｂ７－Ｈ３、腫瘍関連抗原又は他の抗原等の標的に対して指向されるコンジュゲートは、例えば、適切な生理学的試料内のこれらの標的のレベルの測定で使用するために、診断法で使用するために、タンパク質の画像化で使用するために、これらの標的の局在化及び／又は定量化に関連する方法で使用されてもよい。例えば、抗体由来の抗原結合ドメインを含有する、これらの標的、又はその誘導体、断片、類似体、若しくはホモログのいずれかに特異的なコンジュゲートは、薬理学的に活性な化合物（以下、「治療薬」と称される）として利用することができる。
本開示のコンジュゲートを使用して、免疫親和性、クロマトグラフィー、又は免疫沈降等の標準的な技術を使用して、特定の標的を単離することができる。本開示のコンジュゲートは、臨床試験手順の一部として、例えば、所与の治療レジメンの有効性を決定するために、組織中のタンパク質レベルをモニタリングするために診断的に使用することができる。検出は、抗体を検出可能な物質にカップリングする（すなわち、物理的に連結する）ことによって促進することができる。検出可能な物質の例としては、様々な酵素、補綴基、蛍光材料、発光材料、生物発光材料、及び放射性材料が挙げられる。好適な酵素の例としては、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、又はアセチルコリンエステラーゼが挙げられ、好適な補綴基複合体の例としては、ストレプトアビジン／ビオチン及びアビジン／ビオチンが挙げられ、好適な蛍光材料の例としては、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシル、又はフィコエリスリンが挙げられ、発光材料の一例としては、ルミノールが挙げられ、生物発光材料の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、及びエクオリンが挙げられ、好適な放射性材料の例としては、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、又は３Ｈが挙げられる。
本開示のコンジュゲートは、治療薬剤として使用可能である。そのような薬剤は、一般に、対象における所与の標的の異常な発現又は活性化と関連する疾患又は病態を治療又は予防するために使用されるであろう。コンジュゲート調製物、好ましくは、その標的抗原に対して高い特異性及び高い親和性を有するコンジュゲート調製物が、対象に投与され、一般に、その標的との結合に起因する効果をもたらすであろう。コンジュゲートの投与により、標的のシグナル伝達機能を無効化するか、阻害するか、又は干渉することができる。コンジュゲートの投与は、それが自然に結合する内因性リガンドとの標的の結合を無効化するか、阻害するか、又は干渉することができる。
本開示のコンジュゲートの治療有効量は、一般に、治療目的を達成するために必要な量に関連する。上述のように、これは、特定の場合には、標的の機能及び／又は抗体にコンジュゲート化された活性薬剤の効果と干渉する、抗体とその標的抗原との間の結合相互作用であり得る。投与されることが必要な量は、更に、その特異的な抗原に対する抗体の結合親和性及び／又は活性薬剤の効力に依存し、また、それが投与される他の対象の自由体積から投与される抗体が枯渇する速度にも依存する。本開示のコンジュゲートの治療に有効な投薬のための一般的な範囲は、非限定的な例として、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重～約５０ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。一般的な投薬頻度は、例えば、１日２回～１週間に１回の範囲であり得る。
本開示のコンジュゲートは、薬学的組成物の形態で、様々な疾患及び障害の治療のために投与され得る。かかる組成物の調製に関与する原理及び考慮事項、並びに成分の選択に関するガイダンスは、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ １９ｔｈ ｅｄ．（Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｔ ａｌ．，編集者）Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．：１９９５、Ｄｒｕｇ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｉｅｓ，Ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ，Ａｎｄ Ｔｒｅｎｄｓ，Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｌａｎｇｈｏｒｎｅ，Ｐａ．，１９９４、及びＰｅｐｔｉｄｅ Ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（Ａｄｖａｎｃｅｓ Ｉｎ Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．４），１９９１，Ｍ．Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋに提供される。
製剤はまた、治療される特定の適応症に必要な１つより多い活性化合物、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有するものを含有することができる。代替的に、又は追加的に、本組成物は、例えば、細胞傷害性剤、サイトカイン、化学療法剤、又は成長阻害剤等のその機能を増強する薬剤を含むことができる。かかる分子は、意図する目的に効果的な量で組み合わせて存在するのが好適である。
活性成分はまた、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子、及びナノカプセル）において、又はマイクロエマルションにおいて、例えば、コアセルベーション技術によって、又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン－マイクロカプセル及びポリ（メタクリル酸メチル）マイクロカプセルに封入することができる。
インビボ投与に使用される製剤は、無菌であることが好ましい。これは、滅菌濾過膜を介した濾過によって容易に達成される。
徐放性調製物を調製することができる。徐放性調製物の好適な例としては、マトリックスが成形品の形態である抗体を含有する固体疎水性高分子の半透過性マトリックス、例えば、フィルム又はマイクロカプセルが挙げられる。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）、又はポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ－グルタミン酸とγエチル－Ｌ－グルタミン酸との共高分子、非分解性エチレン酢酸ビニル、分解性乳酸－グリコール酸共高分子、例えば、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸－グリコール酸共高分子及び酢酸ロイプロリドで構成される注射可能なマイクロスフェア）、及びポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が挙げられる。エチレン－酢酸ビニル及び乳酸－グリコール酸等の高分子は、１００日間より長い間にわたる分子の放出を可能にするが、特定のヒドロゲルは、より短い期間にわたってタンパク質を放出する。
本開示によるコンジュゲートは、試料中の所与の標的（又はそのタンパク質断片）の存在を検出するための薬剤として使用することができる。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、検出可能な標識を含有する。抗体は、ポリクローナルであってもよく、又はより好ましくは、モノクローナルであってもよい。インタクト抗体、又はその断片（例えば、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、又はＦ（ａｂ）２を使用することができる。「生物学的試料」という用語は、対象から単離された組織、細胞、及び生体液、並びに対象内に存在する組織、細胞、及び流体を含むことが意図されている。したがって、「生物学的試料」という用語の使用には、血液、及び血清、血漿、又はリンパ液を含む血液の画分又は成分が含まれる。すなわち、本開示の検出方法を使用して、インビトロ及びインビボで生物学的試料中の分析物であるｍＲＮＡ、タンパク質、又はゲノムＤＮＡを検出することができる。例えば、分析物であるｍＲＮＡの検出のためのインビトロ技術としては、ノーザンハイブリダイゼーション及びインサイチュハイブリダイゼーションが挙げられる。分析物であるタンパク質の検出のためのインビトロ技術としては、酵素結合免疫吸収アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロット、免疫沈降、及び免疫蛍光が挙げられる。分析物であるゲノムＤＮＡの検出のためのインビトロ技術としては、サザンハイブリダイゼーションが挙げられる。イムノアッセイを実施するための手順は、例えば、“ＥＬＩＳＡ：Ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ”，Ｖｏｌ．４２，Ｊ．Ｒ．Ｃｒｏｗｔｈｅｒ（Ｅｄ．）Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，１９９５、“Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ”，Ｅ．Ｄｉａｍａｎｄｉｓ ａｎｄ Ｔ．Ｃｈｒｉｓｔｏｐｏｕｌｕｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，１９９６、及び“Ｐｒａｃｔｉｃｅ ａｎｄ Ｔｈｅｏｒｙ ｏｆ Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ”，Ｐ．Ｔｉｊｓｓｅｎ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８５に記載される。更に、分析物タンパク質の検出のためのインビボ技術は、標識された抗分析物コンジュゲートを対象に導入することを含む。例えば、抗体は、対象におけるその存在及び位置が標準的な画像化技法によって検出され得る放射性マーカーで標識され得る。
薬学的組成物
抗体－薬物コンジュゲートを使用して、組成物を調製する任意の好適な方法を使用して、対象の標的細胞に活性薬剤を移行して、対象を治療してもよい。いくつかの態様では、本開示は、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートを含む組成物（例えば、薬学的組成物）に関する。
本開示の組成物及び方法を利用して、それを必要とする個体を治療してもよい。特定の実施形態では、個体は、ヒト等の哺乳動物、又は非ヒト哺乳動物である。ヒト等の動物に投与する場合、組成物又は化合物は、好ましくは、例えば、本開示の化合物と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物として投与される。薬学的に許容される担体は、当該技術分野で周知であり、例えば、例えば、水若しくは生理学的緩衝化食塩水等の水溶液、又はグリコール、グリセロール、オリーブ油等の油、若しくは注射可能な有機エステル等の他の溶媒若しくはビヒクルを含む。好ましい実施形態では、そのような薬学的組成物がヒト投与用、特に侵襲的投与経路（すなわち、上皮性関門を通る輸送又は拡散を回避する注射又は移植等の経路）用である場合、水溶液は、発熱物質を含まず、又は実質的に発熱物質を含まない。賦形剤は、例えば、薬剤の遅延放出をもたらすため、又は１つ以上の細胞、組織若しくは器官を選択的に標的化するために選択することができる。薬学的組成物は、再構成、粉末、溶液、注射等のための凍結乾燥物等の投薬単位形態であり得る。
薬学的に許容される担体は、例えば、本開示の化合物等の化合物を安定化させ、溶解度を増加させ、又は化合物の吸収を増加させるように作用する生理学的に許容される薬剤を含有することができる。そのような生理学的に許容される薬剤としては、例えば、グルコース、スクロース若しくはデキストラン等の炭水化物、アスコルビン酸若しくはグルタチオン等の抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質、又は他の安定剤若しくは賦形剤が挙げられる。生理学的に許容される薬剤を含む薬学的に許容される担体の選択は、例えば、組成物の投与経路に依存する。調製物又は薬学的組成物は、自己乳化性薬物送達系又は自己微細乳化性薬物送達系であり得る。薬学的組成物（調製物）は、リポソーム又は他の高分子マトリックスであってもよく、これらは例えば本開示の化合物を組み込むことができる。例えば、リン脂質又は他の脂質を含め、リポソームは、比較的簡単に作製し、投与することができる、毒性がなく、生理学的に許容され、代謝可能な担体である。
「薬学的に許容される」という語句は、本明細書において、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又はその他の問題若しくは合併症がなく、合理的な利益／リスク比に見合った、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適な化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指すために使用される。
薬学的組成物（調製物）は、いくつかの投与経路のうちのいずれかによって対象に投与することができる。例えば、化合物は、単に滅菌水に溶解又は懸濁され得る。適切な投与経路及びそれに好適な組成物の詳細は、例えば、米国特許第６，１１０，９７３号、同第５，７６３，４９３号、同第５，７３１，０００号、同第５，５４１，２３１号、同第５，４２７，７９８号、同第５，３５８，９７０号、及び同第４，１７２，８９６号、並びにそれらに引用されている特許に見出すことができる。
製剤は、単位投薬形態で簡便に提示されてもよく、薬学の分野における任意の好適な方法によって調製されてもよい。単回剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、治療される宿主、特定の投与様式に応じて変化する。単回剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、一般に、治療効果をもたらす化合物の量になる。一般に、１００パーセントのうち、この量は、活性成分の約１パーセント～約９９パーセント、好ましくは約５パーセント～約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント～約３０パーセントの範囲である。
これらの製剤又は組成物を調製する方法は、本開示の化合物等の活性化合物を担体及び任意選択的に１つ以上の副成分と会合させるステップを含む。一般に、製剤は、本開示の化合物を液体担体、又は微細に分割した固体担体、又はその両方と均一かつ密接に会合させ、次いで必要に応じて製品を成形することによって調製される。
本明細書で使用される「非経口投与」及び「非経口で投与される」という語句は、通常は注射による経腸投与及び局所投与以外の投与様式を意味し、限定されないが、静脈内、眼内（硝子体内等）、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢内、くも膜下、脊髄内及び胸骨内の注射及び注入を含む。非経口投与に好適な薬学的組成物は、１つ以上の活性化合物を、１つ以上の薬学的に許容される滅菌等張性の水性若しくは非水性の溶液、分散液、懸濁液若しくはエマルション、又は使用直前に滅菌注射用溶液若しくは分散液に再構成され得る滅菌粉末と共に含み、これらは、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、製剤を意図したレシピエントの血液と等張性にする溶質、又は懸濁化剤若しくは増粘剤を含有していてもよい。
本開示の薬学的組成物に使用可能な好適な水性及び非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、及びそれらの好適な混合物、オリーブ油等の植物油、並びにオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティング材料の使用によって、分散液の場合は必要な粒径の維持によって、また界面活性剤の使用によって維持され得る。
これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤等のアジュバントを含有し得る。微生物の活動の防止は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸等を含むことによって確実となり得る。糖、塩化ナトリウム等の等張性剤を組成物に含めることも望ましい場合がある。これに加えて、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチン等の吸収を遅らせる薬剤を含めることにより、注射可能な薬剤形態の長期吸収がもたらされ得る。
いくつかの場合に、薬物の効果を延長するために、皮下注射又は筋肉内注射からの薬物の吸収を遅らせることが望ましい。これは、低い水溶性を有する結晶性又は非晶質材料の液体懸濁液の使用によって達成され得る。その場合、薬物の吸収速度は、溶解速度に依存し、次に、溶解速度は、結晶サイズ及び結晶形態に依存する可能性がある。代替的に、非経口投与された薬物形態の吸収の遅延は、薬物を油性ビヒクルに溶解又は懸濁することにより達成される。
注射可能なデポー形態は、ポリラクチド－ポリグリコリド等の生分解性高分子中で、対象化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって作製される。高分子に対する薬物の比率、及び使用される特定の高分子の性質に依存して、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性高分子の例として、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射可能製剤は、生体組織に適合するリポソーム又はマイクロエマルション中に薬物を捕捉することによっても調製される。
本開示の方法で使用するために、活性化合物は、それ自体で、又は例えば０．１～９９．５％（より好ましくは０．５～９０％）の活性成分を薬学的に許容される担体と組み合わせて含有する薬学的組成物として与えられ得る。
導入方法はまた、充電式又は生分解性のデバイスによって提供されてもよい。タンパク質性バイオ医薬品を含む薬物の制御送達のために、近年、様々な徐放高分子デバイスが開発され、インビボで試験されている。生分解性高分子及び非分解性高分子の両方を含む様々な生体適合性高分子（ヒドロゲルを含む）を使用して、特定の標的部位で化合物を徐放性放出するためのインプラントを形成することができる。
薬学的組成物中の活性成分の実際の投薬量レベルは、患者に対して毒性のない状態で、特定の患者、組成物、及び投与様式に対する所望の治療応答を達成するのに有効である、活性成分の量を得るように変化し得る。
選択される投薬量レベルは、使用される特定の化合物若しくは化合物の組み合わせ、若しくはそのエステル、塩若しくはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用される特定の化合物の排泄速度、治療期間、使用される特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物及び／若しくは材料、治療される患者の年齢、性別、体重、状態、全般的な健康及び以前の病歴等の医学分野で周知の因子を含む、様々な因子に依存するであろう。
当該技術分野の通常の技能を有する医師又は獣医は、必要な薬学的組成物の治療有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師又は獣医は、所望の治療効果を達成するために必要なレベルよりも低いレベルで薬学的組成物又は化合物の投与を開始し、所望の効果が達成されるまで投薬量を徐々に増加させることができる。「治療有効量」とは、所望の治療効果を誘発するのに十分な化合物の濃度を意味する。一般に、化合物の有効量は、対象の体重、性別、年齢、及び病歴に応じて変わると理解されている。有効量に影響する他の因子としては、限定されないが、患者の状態の重症度、治療される障害、化合物の安定性、及び必要に応じて本開示の化合物と共に投与される別の種類の療法剤が挙げられ得る。薬剤の複数回投与により、より多くの総用量を送達することができる。有効性及び投薬量を決定するための多くの方法は、当業者に知られている（Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １３ ｅｄ．，１８１４－１８８２、参照により本明細書に組み込まれる）。
一般に、本開示の組成物及び方法で使用される活性化合物の好適な１日用量は、治療効果をもたらすのに有効な最低用量である化合物の量であろう。そのような有効用量は、一般的に上述の因子に依存する。
この治療を受ける患者は、霊長類、特にヒト、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ネコ、及びイヌ等の他の哺乳動物、家禽、ペット全般を含む、必要としている任意の動物であってもよい。
特定の実施形態では、本開示の化合物は、単独で、又は別の種類の療法剤と併用して投与され得る。
湿潤剤、乳化剤、及びラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、並びに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、香味料及び芳香剤、保存剤及び抗酸化剤もまた、組成物中に存在し得る。
薬学的に許容される抗酸化剤の例としては、（１）水溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、システイン塩酸塩、硫酸水素ナトリウム、メタ亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等、（２）油溶性抗酸化剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ－トコフェロール等、（３）金属キレート剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸等が挙げられる。
組成物は、液体溶液又は懸濁液のいずれかとして、注射可能な形態で調製され得る。注射に好適な固体形態はまた、例えば、エマルションとして、又はリポソームに封入された抗体－薬物コンジュゲートを用いて調製され得る。抗体－薬物コンジュゲートを、担体を受け入れる対象に有害な抗体の産生を誘導しない任意の担体を含む、薬学的に許容される担体と組み合わせてもよい。好適な担体は、典型的には、ゆっくりと代謝される大きな巨大分子、例えば、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、高分子アミノ酸、アミノ酸共高分子、脂質凝集体等を含む。
組成物はまた、希釈剤、例えば、水、生理食塩水、グリセロール、及びエタノールを含有してもよい。補助物質、例えば、湿潤剤又は乳化剤、ｐＨ緩衝物質等もまた、その中に存在し得る。組成物は、注射によって非経口投与されてもよく、かかる注射は、皮下注射又は筋肉内注射のいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、組成物は、腫瘍に投与されてもよい。組成物は、腫瘍に挿入（例えば、注射）され得る。追加の製剤は、坐剤投与又は経口投与等の他の投与形態に好適である。経口組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、丸剤、カプセル、又は徐放性製剤として投与され得る。
組成物は、用量及び製剤と適合する様式で投与され得る。組成物は、好ましくは、治療有効量の抗体－薬物コンジュゲートを含む。用量は、治療される対象、対象の健康及び身体状態、所望される保護の程度、及び他の関連因子に応じて変化し得る。活性成分（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）の正確な量は、医師の判断に依存し得る。例えば、治療有効量の抗体－薬物コンジュゲート、又はそれを含有する組成物を、がん又は腫瘍に罹患している患者に投与して、そのがん又は腫瘍を治療してもよい。
本開示による抗体－薬物コンジュゲート、又はそれを含有する組成物は、その薬学的に許容される塩の形態で投与され得る。いくつかの実施形態では、本開示による抗体－薬物コンジュゲート、又はそれを含有する組成物は、薬学的に許容される担体、薬学的に許容される賦形剤、及び／又は薬学的に許容される添加剤と共に投与され得る。薬学的に許容される塩、賦形剤、及び添加剤の有効量及び種類を、標準的な方法を使用して測定してもよい（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１８ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９０を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートを含む薬学的組成物を対象に投与することを含む、対象においてがんを治療する方法に関する。好ましい実施形態では、対象は、哺乳動物である。例えば、対象は、げっ歯類、兎形目、ネコ、イヌ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ウマ、及び霊長類から選択され得る。特定の好ましい実施形態では、対象は、ヒトである。
本開示のコンジュゲート（本明細書では「活性化合物」とも称される）、並びにそれらの誘導体、断片、類似体、及びホモログは、投与に好適な薬学的組成物に組み込むことができる。かかる組成物は、典型的には、コンジュゲートと、薬学的に許容される担体と、を含む。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、薬学的投与に適合する、ありとあらゆる溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張性剤、並びに吸収遅延剤等を含むことが意図されている。好適な担体は、当該分野の標準的な参照テキストであり、参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの最新版に記載されている。そのような担体又は希釈剤の好ましい例として、限定されないが、水、生理食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、及び５％ヒト血清アルブミンが挙げられる。リポソーム、及び固定油等の非水性ビヒクルも、使用され得る。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体及び薬剤の使用は、当該技術分野において周知である。いずれの従来の媒体又は薬剤も、活性化合物と適合性のない場合を除いて、本組成物におけるそれらの使用が企図される。また、補助的な活性化合物も組成物に組み込むことができる。
本開示の薬学的組成物は、その意図される投与経路と適合性であるように製剤化される。投与経路の例としては、非経口、例えば、静脈内、皮内、及び皮下投与が挙げられる。非経口、皮内、又は皮下適用に使用される溶液又は懸濁物として、以下の成分を挙げることができる。注射用水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、又は他の合成溶媒等の滅菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベン等の抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウム等の抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等のキレート剤；アセテート、シトレート又はホスフェート等の緩衝液、及び塩化ナトリウム又はデキストロース等の浸透圧を調整するための薬剤。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウム等の酸又は塩基を用いて調整することができる。非経口調製物は、アンプル、使い捨てシリンジ、又はガラス若しくはプラスチック製の複数用量バイアルに封入することができる。
注射剤使用に好適な薬学的組成物は、滅菌水溶液（水溶性である場合）、又は滅菌注射剤若しくは分散液を即時調製するための分散液及び滅菌粉末を含む。静脈内投与では、好適な担体として、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）、又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。全ての場合に、組成物は、無菌でなければならず、容易な注射可能性が存在する程度まで流体であるべきである。組成物は、製造及び保存条件下で安定でなければならず、また、細菌及び真菌等の微生物の汚染作用から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール等）、並びにそれらの好適な混合物を含有する溶媒又は分散媒体であってもよい。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティング材料の使用によって、分散液の場合は必要な粒径の維持によって、また界面活性剤の使用によって維持され得る。微生物の活動の防止は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサール等によって達成することができる。多くの場合、等張性剤、例えば、糖、多価アルコール（マンニトール、ソルビトール等）、塩化ナトリウムを組成物中に含むことが好ましい。注射可能組成物の長期吸収は、組成物中に吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを含めることによってもたらすことができる。
滅菌注射可能溶液は、必要に応じて、上に列挙される成分の１つ又はその組み合わせを含む適切な溶媒に、必要とされる量の活性化合物を組み込み、その後で濾過滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、基本の分散媒、及び上に列挙されるものから必要とされる他の成分を含有する無菌ビヒクルに活性化合物を組み込むことによって調製される。無菌注射可能溶液を調製するための滅菌粉末の場合、調製方法は、真空乾燥及び凍結乾燥であり、予め滅菌濾過したその溶液から、活性成分及び任意の追加の所望の成分の粉末を得る。
特定の実施形態では、活性化合物は、インプラント及びマイクロカプセル化送達系を含む制御放出製剤等、体内からの急速な排出から化合物を保護する担体を用いて調製される。エチレン酢酸ビニル、無水ポリ酸、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸等の生分解性の生体適合性高分子を使用することができる。そのような製剤を調製するための方法は、当業者には明白であろう。材料はまた、Ａｌｚａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ及びＮｏｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から商業的に得ることもできる。リポソーム懸濁液（ウイルス抗原に対するモノクローナル抗原を用いて感染細胞に標的化されるリポソームを含む）を、薬学的に許容される担体として使用することもできる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されるように、好適な方法に従って調製することができる。
経口組成物又は非経口組成物を、投与の容易さ及び投薬量の均一性のために投薬単位形態に製剤化することが特に有利である。本明細書で使用される投薬単位形態は、治療される対象のための単位投薬量として適した物理的に別個の単位を指し、各単位は、必要な薬学的担体と関連して所望の治療効果がもたらされるように計算された所定の量の活性化合物を含有する。本開示の投薬単位形態の仕様は、活性化合物の固有の特徴、及び達成されるべき特定の治療効果、並びに個体の治療のためにそのような活性化合物を調合する技術分野に固有の制限によって左右され、かつそれらに直接的に依存する。
薬学的組成物は、容器、パック、又はディスペンサーに、投与のための指示書と共に含まれてもよい。
いくつかの態様では、本開示は、本明細書に記載の抗体薬物コンジュゲートを含み、任意選択的に、治療有効量の化学療法剤を更に含む、薬学的組成物を提供する。
いくつかの態様では、本開示は、がんを治療する方法であって、本開示の抗体－薬物コンジュゲート、又はその薬学的組成物を投与することを含む、方法を提供する。いくつかのかかる実施形態では、がんは、白血病、リンパ腫、乳がん、結腸がん、卵巣がん、膀胱がん、前立腺がん、神経膠腫、肺がん、気管支がん、結腸直腸がん、膵臓がん、食道がん、肝臓がん、膀胱がん、腎臓がん、腎盂がん、口腔がん、咽頭がん、子宮体がん、又は黒色腫から選択される。
いくつかの態様では、本開示は、自己免疫疾患又は炎症性疾患を治療する方法であって、本開示の抗体薬物コンジュゲート、又はその薬学的組成物を投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、自己免疫疾患又は炎症性疾患は、Ｂ細胞媒介性自己免疫疾患又は炎症性疾患、例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ（ＲＡ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ヴァルデンストローム高ガンマグロブリン血症、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、又はループス腎炎から選択される。
以下、実施例を通して本開示の構成を詳細に説明するが、以下の実施例は、本開示の理解を補助するためのものに過ぎない。本開示の範囲は、これに限定されない。更に、別段に具体的に記載されていない限り、本明細書に記載されている試薬、溶媒、及び出発物質は、商業的供給業者から容易に入手することができる。
例示
以下の表は、以下の実施例全体で使用される略語を示す。
Figure 2023531252000073
Figure 2023531252000074
Figure 2023531252000075
実施例１．ＭＰＳ誘導体の合成
実施例１．１．ＭＰＳ－Ｄ１の調製
Figure 2023531252000076
 化合物ＭＰＳ－Ｄ１ａの調製
４－アセチル安息香酸（９ｇ、５４．８２ｍｍｏｌ）ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）溶液に、塩酸ピペリジン（６．６６ｇ、５４．８２ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（４．９５ｇ、１６４．５ｍｍｏｌ）、及び濃ＨＣｌ（０．６ｍＬ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。混合物を１００℃で１６時間撹拌し、室温まで冷却し、これにアセトン（９０ｍＬ）を滴下した。混合物を０℃で１時間撹拌した。固体を濾過し、ジエチルエーテル（３０ｍＬ×２）で洗浄して、化合物ＭＰＳ－Ｄ１ａ（６．１１ｇ、３８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ８．０８（ｓ，４Ｈ），５．７３（ｓ，１Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３１（ｍ，６Ｈ），１．７４（ｓ，４Ｈ）。
化合物ＭＰＳ－Ｄ１ｂの調製
ＭＰＳ－Ｄ１ａ（６．１１ｇ、２０．５２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２６ｍＬ）中の溶液に、４－メトキシベンゼンチオール（２．５５ｇ、２０．５２ｍｍｏｌ）及びピペリジン（０．３ｍＬ、３．０８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を１００℃で１６時間撹拌し、０℃まで冷却し、更に１時間撹拌した。固体を濾過し、エーテル（３０ｍＬ×２）で洗浄して、化合物ＭＰＳ－Ｄ１ｂ（５．５６ｇ、９０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．０４－７．９９（ｍ，４Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３９－３．３６（ｍ，２Ｈ），３．２５－３．２１（ｍ，２Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ）。
化合物ＭＰＳ－Ｄ１の調製
ＭＰＳ－Ｄ１ｂ（５．５６ｇ、１８．５１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（９０ｍＬ）及び蒸留水（９０ｍＬ）中の溶液に、オキソン（２５．０３ｇ、４０．７２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。室温で１４時間撹拌した後、混合物を、蒸留水（１００ｍＬ）及びクロロホルム（１５０ｍＬ×３）でクエンチした。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物ＭＰＳ－Ｄ１（５．２９ｇ、８６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．０４－７．９９（ｍ，４Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．４１（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３３３（Ｍ＋）。
実施例１．２．ＢＣＮ－ＰＮＰの調製
Figure 2023531252000077
 （１Ｒ，８Ｓ，９Ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノナ－４－イン－９－イルメタノール（８００ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）を、室温で、Ｎ２雰囲気下で、ＤＣＭ（１２５ｍＬ）に溶解した。ピリジン（１．２２ｍＬ、１５．９ｍｍｏｌ）及びクロロギ酸４－ニトロフェニル（１．７５ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）をこれに添加した。混合物を同じ温度で４時間撹拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１００ｍＬ）を添加することによって反応をクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ×４）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、高減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝１０：１）によって精製し、化合物ＢＣＮ－ＰＮＰ（１．３４ｇ、８４％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．２９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．４１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），２．３６－２．２４（ｍ，６Ｈ），１．６２－１．５５（ｍ，２Ｈ），１．５３－１．４９（ｍ，１Ｈ），１．０７（ｔ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，２Ｈ）。
実施例１．３．ＭＰＳ－Ｄ１－１の調製
Figure 2023531252000078
 化合物ＭＰＳ－Ｄ１（５００ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）溶液に、プロパルギルアミン（１０６μＬ、１．６５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。反応物を０℃まで冷却し、ＰｙＢｏｐ（１．１７ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（５２４μＬ、３．０１ｍｍｏｌ）をこれに添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、ＥＡ（３０ｍＬ×２）及び蒸留水（２０ｍＬ）で希釈した。有機層を抽出し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１（５１０ｍｇ、９２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．１１（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９８－７．８９（ｍ，４Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．０５－４．０３（ｍ，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．１２（ｓ，１Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ）。
実施例１．４．Ｌ－２及びＬ－２ａの調製
Figure 2023531252000079
 化合物Ｌ－２は、参照により本明細書に組み込まれるＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐａｒｔ Ａ：Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１２，５０（１９），３９８６－３９９５に記載されるのと同様の合成経路によって合成された。
化合物Ｌ－２－１の調製
収率３０％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７４－３．５８（ｍ，１４Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｌ－２－２の調製
収率６８％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ３．７４－３．６１（ｍ，１４Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．４５（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）。
化合物Ｌ－２－３の調製
収率６３％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．２１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７２－３．６７（ｍ，１４Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－２の調製
収率７６％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．２０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７１－３．６１（ｍ，１２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－２ａの調製
０℃で、Ｎ２雰囲気下、化合物Ｌ－２－２（３．０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（１００ｍＬ）に、ジョーンズ試薬（２０ｍＬ）で処理し、４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＤＣＭ（５０ｍＬ×２）及び蒸留水（１５ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－２ａ（２．８ｇ、８８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．２２－４．１４（ｍ，２Ｈ），３．８０－３．６４（ｍ，１０Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ）。
実施例１．５．Ｌ－３の調製
Figure 2023531252000080
 化合物Ｌ－３－１の調製
ヘキサエチレングリコール（５．０ｇ、１７．７１ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１７８ｍＬ）溶液に、ＫＩ（２９４ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）及びＡｇ２Ｏ（４．９２ｇ、１９．４８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－３－１（５．９８ｇ、７３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７１－３．５８（ｍ，２２Ｈ），２．８８（ｂｒ，１Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｌ－３－２の調製
化合物Ｌ－３－１（５．９８ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、ＮａＮ３（１．３４ｇ、２０．５５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を１１０℃で１時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－３－２（４．１ｇ、９７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ３．７２－３．６０（ｍ，２２Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｂｒ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－３－３の調製
５％Ｐｄ／Ｃ（１．０４ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を、Ｌ－３－２（１．０ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）の撹拌したＥｔＯＨ（５ｍＬ）溶液に、室温で添加した。水素気体を、反応混合物に４時間通してバブリングした。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過してＰｄ／Ｃを除去し、減圧下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（２５ｍＬ）に溶解した後、ＢＯＣ２Ｏ（８５２．１ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）をこれに添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－３－３（３３０ｍｇ、２８％）を生成した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ５．１９（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７３（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６７（ｓ，１２Ｈ），３．６３－３．６０（ｍ，６Ｈ），３．５４（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３４－３．２７（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３８２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－３－４の調製
化合物Ｌ－３－２（１．９ｇ、６．１８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下で、ＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（２．０ｍＬ、１４．２２ｍｍｏｌ）及びｐ－ＴｓＣｌ（２．４ｇ、１２．３６ｍｍｏｌ）をこれに添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－３－４（２．５８ｇ、９１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７０－３．６１（ｍ，１６Ｈ），３．５６（ｓ，１Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４６２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－３－５の調製
Ｌ－２（１．１ｇ、３．４ｍｍｏｌ）の均質な無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を、Ｎ２雰囲気下、ＮａＨ（鉱油中の６０％の分散液、１３５ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）で処理し、０℃まで冷却した。混合物を０℃で２０分間撹拌した後、Ｌ－３－４（１．５６ｇ、３．４ｍｍｏｌ）をこれに添加した。反応物を室温まで加温し、一晩撹拌した。反応物を冷却し、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）でクエンチし、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－３－５（１．９１ｇ、９３％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６１０（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－３の調製
０℃で、化合物Ｌ－３－５（９０６．７ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）のＥＡ（４ｍＬ）及びエーテル（４ｍＬ）中の溶液に、Ｎ２雰囲気下、５％のＨＣｌ溶液（８ｍＬ）及びトリフェニルホスフィン（３９０ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。混合物を０℃で一晩撹拌した。混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈した。水層をＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出した。水相を高減圧下で濃縮し、化合物Ｌ－３（４９５ｍｇ、５４％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５８４（Ｍ＋＋１）。
実施例１．６．Ｌ－４の調製
Figure 2023531252000081
 化合物Ｌ－４－１の調製
－２０℃で、Ｎ２雰囲気下、ＫＯｔＢｕ（９４３ｍｇ、８．４１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ溶液（５０ｍＬ）に、テトラエチレングリコール（４．３５ｍＬ、２５．２２ｍｍｏｌ）、続いて臭化プロパルギル（１．０ｇ、８．４１ｍＬ）を添加した。反応物を室温まで加温し、１７時間撹拌した。反応物を、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を、氷浴中で冷却しながら添加することによってクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－４－１（１．４６ｇ、７５％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．２６－４．２０（ｍ，２Ｈ），３．７８－３．６０（ｍ，１６Ｈ），２．４２－２．４０（ｍ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－４－２の調製
ＣＢｒ４（１．４３ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）の氷浴で冷却した乾燥ＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（１．１３ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）、続いてＬ－４－１（５００ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温まで加温し、１８時間撹拌した。反応物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－４－２（４１０ｍｇ、６５％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．２１（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７４－３．６４（ｍ，１２Ｈ），３．４５（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４５－２．４２（ｍ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－４の調製
化合物Ｌ－４－２（３００ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン（５５５μＬ、５．０８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。混合物を室温で５時間撹拌した。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－４（２１８ｍｇ、７１％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３０３（Ｍ＋１）。
実施例１．７．Ｌ－５の調製
Figure 2023531252000082
 化合物Ｌ－５－１の調製
２，４－ジブロモ酪酸メチル（１０ｇ、３８．４７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）の均質な溶液を、室温で、Ｎ２雰囲気下で、乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のチオ酢酸（２．７５ｍＬ、３８．４７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＤＩＰＥＡ（８．５ｍＬ、４８．９ｍｍｏｌ、１．３当量）の混合物に１．５時間かけて滴下した。Ｎ２雰囲気下、－２０℃で４時間撹拌した後、混合物を濃縮し、水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝１２：１）によって精製し、化合物Ｌ－５－１（９．６７ｇ、９８％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．３８（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），３．４６－３．３９（ｍ，２Ｈ），２．５６－２．４７（ｍ，１Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．３２－２．２３（ｍ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－５－２の調製
ＡｃＯＨ（８０ｍＬ）中のＬ－５－１（９．６７ｇ、３７．９０ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で、３５％過酸化水素（４０ｍＬ）を添加した。混合物を一晩撹拌し、次いで、濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３で中和し、ＥＡ／Ｈｅｘ（１／１、３０ｍＬ×２）で洗浄した。水層を減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝８：１：０．０１～５：１：０．０１）によって精製し、化合物Ｌ－５－２（７．０ｇ、７１％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ４．１１（ｄｄ，Ｊ＝５．４，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．６５－３．６２（ｍ，１Ｈ），３．５２－３．４７（ｍ，１Ｈ），２．６２－２．４８（ｍ，２Ｈ）。
化合物Ｌ－５－３の調製
Ｌ－５－２（７．０ｇ、２６．８１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＮ３（４．５ｇ、６９．７１ｍｍｏｌ、２．６当量）をＮ２雰囲気下で添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝７：１：０．０１～５：１：０．０１）によって精製し、化合物Ｌ－５－３（５．４ｇ、９０％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ３．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．２，６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），３．３６－３．２６（ｍ，２Ｈ），２．２９－２．０２（ｍ，２Ｈ）。
化合物Ｌ－５－４の調製
５０ｍＬの丸底フラスコに、Ｌ－５－３（５００ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）、１０ｍＬのＭｅＯＨ、５％Ｐｄ／Ｃ（７１５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、０．１５当量）、及びＢｏｃ２Ｏ（５３８ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。空気を吸引して追い出した後、混合物を、Ｈ２下、室温で１５時間撹拌した。触媒をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）をＭｅＯＨ（２０ｍＬ×２）で洗浄した。溶媒をロータリーエバポレーターによって除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝７：１：０．０１～５：１：０．０１）によって精製し、化合物Ｌ－５－４（４５０．２ｍｇ、６８％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ６．７９（ｓ，１Ｈ），４．１３（ｂｒｓ，１Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），２．８８－２．８０（ｍ，２Ｈ），１．９６－１．８８（ｍ，２Ｈ），１．３ ６（ｓ，９Ｈ）。
化合物Ｌ－５－５の調製
Ｎ２下、室温でＬ－５－４（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／水（４ｍＬ／８ｍＬ）均質溶液をＬｉＯＨ（２１．２ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、１．５当量）で処理し、８時間撹拌した。反応混合物を２ＮのＨＣｌ溶液で中和し、減圧下で濃縮した。化合物Ｌ－５－５を、更に精製することなく次のステップで直接使用した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２８４（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－５－６の調製
Ｌ－５－５（０．３４ｍｍｏｌ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（７７．４ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ、２．０当量）及びＥＤＣＩ－ＨＣｌ（２６０．７ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ、４．０当量）のＤＭＦ（２ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。混合物を、Ｌ－３（２１０．８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＩＰＥＡ（１７７．６ｕＬ、１．０２ｍｍｏｌ、３．０当量）で処理し、一晩撹拌した。反応物を減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝１２：１：０．０１～５：１：０．０１）によって精製し、化合物Ｌ－５－６（１５９．１ｍｇ、５５％）を黄色油状物として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８５０（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－５の調製
室温で、Ｎ２雰囲気下、Ｌ－５－６（１００ｍｇ ０．１２ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン（２ｍＬ）均質溶液を、ｃ－ＨＣｌ（５００ｕＬ）で処理し、３０分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、化合物Ｌ－５（９２ｍｇ、９９％）を黄色油状物として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７４９（Ｍ＋＋１）。
実施例１．８．Ｌ－６の調製
Figure 2023531252000083
 化合物Ｌ－６－１の調製
室温で、Ｎ２雰囲気下、Ｂｏｃ－Ｌ－セリンメチルエステル（５．０ｇ、２２．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）均質溶液を、ピリジン（８ｍＬ）、Ｐ－トルエンスルホニルクロリド（５．２２ｇ、２７．４ｍｍｏｌ、１．２当量）で処理し、一晩撹拌した。反応物を、水（５０ｍＬ）を加えることによってクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝９：１～２：１）によって精製し、化合物Ｌ－６－１（７．０ｇ、８２％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．７６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），５．２９（Ｓ，１Ｈ），４．５３－４．４７（ｍ，１Ｈ），４．３９（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．２９（ｄ，Ｊ＝７．２，２．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｌ－６－２の調製
室温で、Ｎ２雰囲気下、ＣｓＣＯ３（１．０５ｇ、３．２１ｍｍｏｌ、０．６当量）のＤＭＦ（１２ｍＬ）懸濁液を、ＤＭＦ（８ｍＬ）中のチオ酢酸（４９８ｕＬ、６．９６ｍｍｏｌ、１．３当量）及びＬ－６－１（２．０ｇ、５．３６ｍｍｏｌ）で処理し、一晩撹拌した。混合物を、水（５０ｍＬ）を加えることによってクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝５：１）によって精製し、化合物Ｌ－６－２（１．４ｇ、９５％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ５．２４（ｓ，１Ｈ），４．５３－４．４９（ｍ，１Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ），４．４１－４．３１（ｍ，２Ｈ）。
化合物Ｌ－６－３の調製
ＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中のＬ－６－２（１．２ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で、３５％過酸化水素（４ｍＬ）を添加した。混合物を７時間撹拌し、次いで、減圧下で濃縮した。残渣を水（５ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を０℃で使用し、ｐＨ９まで塩基性化した。Ｂｏｃ２Ｏ（１．４ｇ、６．４９ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、得られた混合物を一晩撹拌した。混合物を２ＮのＨＣｌ溶液で０℃で中和し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝８：１：０．０１～５：１：０．０１）によって精製し、化合物Ｌ－６－３（５２１．５ｍｇ、４２％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ６．９６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．２０（ｑ，Ｊ＝６．８，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５８（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝１４，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７６（ｄｄ，Ｊ＝９．２，４．４Ｈｚ，１Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ）。
化合物Ｌ－６－４の調製
Ｌ－６－３（７１ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２．０ｍＬ／４．０ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＬｉＯＨ（１７．３ｍｇ、０．４１、１．５当量）で処理し、３時間撹拌した。混合物を２ＮのＨＣｌで０℃で中和し、減圧下で濃縮して、化合物Ｌ－６－４（６７ｍｇ、９９％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ６．４０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｑ，Ｊ＝６．４，５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８８－２．７８（ｎ，２Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ）。
化合物Ｌ－６－５の調製
Ｌ－６－４（３５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（２２．４ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ、１．５当量）、及びＥＤＣＩ－ＨＣｌ（５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、２．０当量）を、Ｎ２雰囲気下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を一晩撹拌した後、化合物Ｌ－６－５を、更に精製することなく次のステップで直接使用した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３６７（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－６－６の調製
室温で、Ｎ２雰囲気下、Ｌ－６－５（０．１３ｍｍｏｌ）の撹拌ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｌ－２（０．１９ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＥＤＣＩ－ＨＣｌ（５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮した後、残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝１２：１：０．０１～５：１：０．０１）によって精製し、化合物Ｌ－６－６（３４．８ｍｇ、６４％）を黄色油状物として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４８３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－６の調製
ｃ－ＨＣｌ（３００μＬ）を、Ｌ－６－６（２９．６ｍｇ ０．０６１ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン（１．２ｍＬ）撹拌溶液に、Ｎ２雰囲気下、室温で添加し、混合物を３０分間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、化合物Ｌ－６（２５．４ｍｇ、９９％）を黄色油状物として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３８２（Ｍ＋＋１）。
実施例１．９．ＭＰＳ－Ｄ１－１０の調製
Figure 2023531252000084
 化合物Ｌ－１－１の調製
Ｎ２雰囲気下、室温で、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（Ａｌｄｒｉｃｈ、ＣＡＳ１３４１７９－３８－７、５．０ｇ、２２．９ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン（１００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２５ｍＬ）中の透明溶液を、ＮａＨＣＯ３（３．８ｇ、４５．８ｍｍｏｌ、２．０当量）及びＢＯＣ２Ｏ（６．０ｇ、２７．５ｍｍｏｌ、１．２当量）で処理し、次いで、６時間撹拌した。反応物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中１％～３％ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物Ｌ－１－１（７．２ｇ、９９％）を無色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ５．０３（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７２－３．６０（ｍ，１０Ｈ），３．９８－３．５２（ｍ，１Ｈ），３．４３－３．３６（ｍ，１Ｈ），３．３５－３．２４（ｍ，１Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３１９（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－１の調製
Ｌ－１－１（７．２ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）、エーテル（１５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１５ｍＬ）中の透明溶液を、室温で、Ｎ２雰囲気下で、トリフェニルホスフィン（６．５ｇ、２４．９ｍｍｏｌ、１．１当量）で処理し、次いで、一晩撹拌した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（６０ｍＬ×３）で抽出した。水層を減圧下で濃縮して、化合物Ｌ－１－１（６．３ｇ、９５％）を無色油状物として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２９３（Ｍ＋＋１）
化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０ａは、実施例２の化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０ａの調製
収率７１％、淡黄色油状物。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．９９－７．９３（ｍ，４Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３０（ｂｒｓ，１Ｈ），５．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７４－３．４６（ｍ，２６Ｈ），３．３４－３．２６（ｍ，２Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６９５（Ｍ＋＋１）。
化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０ｂは、実施例１．８の化合物Ｌ－６の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０ｂの調製
収率９９％、淡黄色油状物。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－Ｄ６）δ ８．７４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｄｄ，Ｊ＝１２，８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６８－３．３６（ｍ，２４Ｈ），３．０１－２．９４（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５９５（Ｍ＋＋１）。
化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０の調製
ＭＰＳ－Ｄ１－１０ｂ（６３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及びＢＣＮ－ＰＮＰ（３１．５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１．０当量）の無水ＤＭＦ（２．０ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＤＩＰＥＡ（５２ｕＬ、０．３ｍｍｏｌ、３当量）及びＨＢＴＵ（５７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）で処理し、２時間撹拌した。反応物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、分取ＴＬＣによって精製して、化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０（５７ｍｇ、７４％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７７１（Ｍ＋＋１）。
実施例１．１０．Ｌ－１１の調製
Figure 2023531252000085
 化合物Ｌ－１１－１の調製
ヘキサエチレングリコール（５．０ｇ、１７．７１ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１７８ｍＬ）溶液に、ＫＩ（２９４ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）、Ａｇ２Ｏ（４．９２ｇ、１９．４８ｍｍｏｌ）、及びｐ－ＴｓＣｌ（３．７ｇ、１９．４８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグをＤＣＭ（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１１－１（５．９８ｇ、７３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７１－３．５８（ｍ，２２Ｈ），２．８８（ｂｒ，１Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｌ－１１－２の調製
化合物Ｌ－１１－１（５．９８ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、ＮａＮ３（１．３４ｇ、２０．５５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を１１０℃で１時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１１－２（４．１ｇ、９７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ３．７２－３．６０（ｍ，２２Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｂｒ，１Ｈ）。
化合物Ｌ－１１－２ａの調製
化合物Ｌ－１１－２（１．９ｇ、６．１８ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）にＮ２雰囲気下で溶解し、トリエチルアミン（２．０ｍＬ、１４．２２ｍｍｏｌ）及びｐ－ＴｓＣｌ（２．４ｇ、１２．３６ｍｍｏｌ）をこれに添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１１－２ａ（２．５８ｇ、９１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７０－３．６１（ｍ，１６Ｈ），３．５６（ｓ，１Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４６２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－１１－３の調製
化合物Ｌ－１１－２（１．０ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５ｍＬ）溶液に、５％Ｐｄ／Ｃ（１．０４ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）をＨ２雰囲気下で添加した。混合物を室温で４時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過してＰｄ／Ｃを除去し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＤＣＭ（２５ｍＬ）に溶解した。ＢＯＣ２Ｏ（８５２．１ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１１－３（３３０ｍｇ、２８％）を生成した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ５．１９（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７３（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６７（ｓ，１２Ｈ），３．６３－３．６０（ｍ，６Ｈ），３．５４（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３４－３．２７（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３８２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－１１－４の調製
Ｎ２雰囲気下、０℃で、化合物Ｌ－１１－３（４５０ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）均質溶液を、ＮａＨ（鉱油中の６０％分散液、４７．２ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を０℃で２０分間撹拌した後、Ｌ－１１－２ａ（５４４．５ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）をこれに添加した。反応物を室温まで加温し、一晩撹拌した。反応物を冷却し、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）でクエンチし、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１１－４（５８２．９ｍｇ、７４％）を得た。
化合物Ｌ－１１の調製
化合物Ｌ－１１－４（５８２．９ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で４Ｍ－ＨＣｌ（１，４－ジオキサン中、１ｍＬ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮して、化合物Ｌ－１１（５２７．６ｍｇ、定量的）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５７１（Ｍ＋＋１）。
以下の表２は、実施例２に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された化合物を列挙したものである。
Figure 2023531252000086
Figure 2023531252000087
Figure 2023531252000088
実施例２．マレイミド誘導体及びＰＯＳ誘導体の合成
実施例２．１．Ｍａｌ－１の調製
Figure 2023531252000089
 化合物Ｌ－４を、参照により本明細書に組み込まれるＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５２（１９），５８１６－５８２５；２００９に記載されるのと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｍａｌ－１ａの調製
収率５５％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．２１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．７２－３．６０（ｍ，２４Ｈ），２．７９（ｂｒｓ，１Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）。
化合物Ｍａｌ－１の調製
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４００（Ｍ＋）
実施例２．２．Ｍａｌ－２の調製
Figure 2023531252000090
 Ｎ－スクシンイミジル ４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－カルボキシレート（８５．５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及びＬ－２（７５．３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ均質溶液をＮ２雰囲気下、室温で、ＤＩＰＥＡ（４４．５ｕＬ、０．２６ｍｍｏｌ、１当量）で処理し、室温になるまで４５分間撹拌した。反応物をＤＣＭ（３２ｍＬ）で希釈し、１ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、高減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物Ｌ－５（７０．８ｍｇ、６１％、混合物９ｍｇ）を白色ガム状物として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４５１（Ｍ＋１）
実施例２．３．Ｍａｌ－３の調製
Figure 2023531252000091
 化合物Ｍａｌ－３－１の調製
ＢＯＣ２Ｏ（９．６ｇ、４４．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、０℃で、Ｎ２雰囲気下で２，２’－ジアミノ－Ｎ－メチルジエチルアミン（１０．３ｇ、８８．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）及びＤＣＭ（１５０ｍＬ×２）でクエンチした。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムによって精製して、化合物Ｍａｌ－３－１（３．３ｇ、３５％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ５．０４（ｂｒｓ，１Ｈ），３．２６－３．１６（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．４７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
化合物Ｍａｌ－３－２の調製
室温で、Ｍａｌ－３－１（５００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（３．０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下で無水マレイン酸（２４８ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を無水酢酸（５．０ｍＬ）に室温で溶解した。ＮａＯＡｃ（９５．７ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、７５℃で５時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣をカラムによって精製して、化合物Ｍａｌ－３－２（４１５ｍｇ、６０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ６．７０（ｓ，２Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．１８－３．１０（ｍ，２Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２９８（Ｍ＋）。
化合物Ｍａｌ－３－３の調製
化合物Ｍａｌ－３－２（３７０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４．０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（３．０ｍＬ）を０℃で添加した。反応物を室温まで加温し、２．５時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、更に精製することなく次のステップで直接使用した（３８７ｍｇ、定量的）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１９８（Ｍ＋）。
化合物Ｍａｌ－３の調製
化合物Ｍａｌ－３－３（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びＢＣＮ－ＰＮＰ（５０．６ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（５７ｕＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。混合物を２．５時間撹拌し、ＥＡ（５０ｍＬ×２）及びＨ２Ｏ（３０ｍＬ）を添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍａｌ－３（１３．２ｍｇ、２２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ６．７０（ｓ，２Ｈ），５．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．２４－３．１８（ｍ，２Ｈ），２．５８（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．５０（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．３０－２．２０（ｍ，９Ｈ），１．２８－１．２２（ｍ，３Ｈ），０．９８－０．９４（ｍ，１Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３７４（Ｍ＋）。
実施例２．４．ＰＯＳ－１の調製
Figure 2023531252000092
 化合物ＰＯＳ－１－１の調製
４－ヒドロ安息香酸エチル（２０ｇ、１２０．３５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６０ｍＬ）溶液に、ＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ（８８ｍＬ、１８０５．４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を還流状態で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮し、続いて、ＥｔＯＨで粉砕し、それによって、化合物ＰＯＳ－１－１（１７．５４ｇ、９６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ９．５０（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．３７（ｓ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４３１（Ｍ＋＋１）。
化合物ＰＯＳ－１－２の調製
化合物ＰＯＳ－１－１（１７．５４ｇ、１１５．２８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２００ｍＬ）及びＤＭＦ（１００ｍＬ）中の溶液に、ＣＳ２（４５ｍＬ、７４９．３２ｍｍｏｌ）及びＫＯＨ（６．５ｇ、１１５．２８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。８５℃で１８時間撹拌した後、反応混合物を１ＭのＨＣｌ溶液の添加によってｐＨ４に調整し、蒸留水（５００ｍＬ）及びＥＡ（５００ｍＬ２）で希釈した。有機層をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）、及びブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、エーテル／Ｈｅｘ粉砕に供して、化合物ＰＯＳ－１－２（２０．７ｇ、９３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．４４（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１９５（Ｍ＋＋１）。
化合物ＰＯＳ－１－３の調製
化合物ＰＯＳ－１－２（５ｇ、２５．７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（４．３ｍＬ、３０．９ｍｍｏｌ）及びＭｅＩ（１．７６ｍＬ、２８．３３ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。０℃で１０分間撹拌した後、混合物を室温まで加温し、２時間撹拌した。混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、エーテル粉砕に供して、化合物ＰＯＳ－１－３（５．１５ｇ、９６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），２．７４（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２０９（Ｍ＋＋１）。
化合物ＰＯＳ－１－４の調製
化合物ＰＯＳ－１－３（３．２ｇ、１５．３７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で７０％ｍ－ＣＰＢＡ（１１．４ｇ、４６．１１ｍｍｏｌ）を添加した。室温で５時間撹拌した後、７０％ｍ－ＣＰＢＡ（１１．４ｇ、４６．１１ｍｍｏｌ）を更に添加した。次いで、混合物を室温で一晩撹拌し、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３００ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（５００ｍＬ×２）で抽出した。有機層をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、Ｈｅｘ／ＥＡ＝１：１（１００ｍＬ）粉砕に供して、化合物ＰＯＳ－１－４（３．２ｇ、８９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ７．９５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（４ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２４１（Ｍ＋＋１）。
化合物ＰＯＳ－１の調製
ＰＯＳ－１－４（３１０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）及びＬ－８－１（６６０ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）及びＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の溶液に、ＰＰｈ３（６６７ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃まで冷却し、ＤＥＡＤ（１．１７ｍＬ、２．５８ｍｍｏｌ）をこれに添加し、混合物を０℃で３時間撹拌した。混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（１５ｍＬ×２）で抽出した。得られた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物ＰＯＳ－１（２０５ｍｇ、３０％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４５５（Ｍ＋＋１）。
実施例２．５．Ｉｎｔ－３の調製
Figure 2023531252000093
 化合物Ｉｎｔ－３－ａの調製
Ｎ２雰囲気下、室温で、Ｉｎｔ－ＴＧ（１８．５ｇ、４５．０ｍｍｏｌ）、４－ヒドロキシベンズアルデヒド（５．０ｇ、４０．９ｍｍｏｌ）、モレキュラーシーブ（１０．０ｇ）のＡＣＮ（１５０ｍＬ）溶液に、Ａｇ２Ｏ（３８．０ｇ、０．１６４ｍｏｌ）で処理し、３時間撹拌した。セライトのパッドを通して反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－３－ａ（１６．０ｇ、８６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．９３（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）。７．１１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），５．５２－５．４７（ｍ，２Ｈ），５．１８－５．１４（ｍ，２Ｈ），４．２４－４．１１（ｍ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，６Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－３－ｂの調製
Ｎ２雰囲気下、０℃で、Ｉｎｔ－３－ａ（５４０ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ４（１１３ｍｇ、２．９８ｍｍｏｌ）で処理し、０℃で１０分間撹拌した。室温で４時間撹拌した後、反応物をＨ２Ｏ及びＥＡで希釈した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ：ＨＥＸ＝１：１）によって精製して、化合物Ｉｎｔ－３－ｂ（４３０ｍｇ、７９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。５．５１－５．５４（ｍ，２Ｈ），５．１１（ｄｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６５（ｄ，Ｊ＝５．６２Ｈ）４．２５－４．０４（ｍ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－３の調製
Ｉｎｔ－３－ｂ（１．０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（６．０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、室温で、ビス（ペンタフルオロフェニルカーボネート）（１．３ｇ、３．３ｍｍｏｌ）で処理し、３時間撹拌した。反応混合物を、ＥＡ（２０ｍＬ×２）、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。反応混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｉｎｔ－３（１．４ｇ、９８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）： δ ７．３８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．５２９－５．４６５（ｍ，２Ｈ），５．２８０（ｓ，２Ｈ），５．１４１－５．０６８（ｍ，２Ｈ），４．２６２－４．０７０（ｍ，４Ｈ），２．１９５（ｓ，３Ｈ），２．０７８（ｓ，３Ｈ），２．０７３（ｓ，３Ｈ），２．０２５（ｓ，３Ｈ）。
実施例２．６．Ｉｎｔ－４の調製
Figure 2023531252000094
 化合物Ｉｎｔ－４は、実施例２．５に記載したものと同様の方法によって合成した。
収率７２％。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．９３（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）。７．１１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），５．５２－５．４７（ｍ，２Ｈ），５．１８－５．１４（ｍ，２Ｈ），４．２４－４．１１（ｍ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，６Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）。
実施例２．７．Ｉｎｔ－５の調製
Figure 2023531252000095
 化合物Ｉｎｔ－５－１の調製
４－ヒドロキシ安息香酸（５．０ｇ、３６．２ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍＬ）溶液に、塩化チオニル（２６．３ｍＬ、３６２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で、０℃で添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応物をＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－５－１（４．８７ｇ、８９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１５３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｉｎｔ－５－２の調製
化合物Ｉｎｔ－５－１（１．０ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２２．０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（２．３ｍＬ、１３．４ｍｍｏｌ）及びＭＯＭ－Ｃｌ（０．５５ｍＬ、７．２３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下で０℃で添加した。反応混合物を室温で６時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－５－２（１．１４ｇ、８８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．０１－７．９７（ｍ，２Ｈ），７．０７－７．０４（ｍ，２Ｈ），５．２３（ｓ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ）
化合物Ｉｎｔ－５の調製
化合物Ｉｎｔ－５－２（１．１４ｇ、５．８１ｍｍｏｌ）のメタノール／Ｈ２Ｏ／１，４－ジオキサン（１６．０ｍＬ／８．０ｍＬ／１６．０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（９７５ｍｇ、２３．２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。反応物を２ＮのＨＣｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物Ｉｎｔ－５を、更に精製することなく次のステップで使用した。（９９５ｍｇ、９４％）
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＭｅＯＨ－Ｄ４）δ ７．９６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ）
実施例３．ＯＨＰＡＳ－リンカー誘導体の合成
実施例３．１．Ｉｎｔ－ＴＧの調製
Figure 2023531252000096
 β－Ｄ－ガラクトースペンタアセテート（Ａｌｆａ、ＣＡＳ４１６３－６０－４、５．０ｇ、１２．８１ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で、ＡｃＯＨ（２０ｍＬ）中の３３％ＨＢｒに溶解した。混合物を室温まで加温した。室温で４時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、次いで、ＥＡ（１０００ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（１０００ｍＬ）を添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－ＴＧ（５．２ｇ、９９％）を得た。
実施例３．１．２ Ｉｎｔ－ＴＧ２の調製
Figure 2023531252000097
 化合物Ｉｎｔ－ＴＧ２は、実施例３．１．１に記載したものと同様の方法によって合成した。
収率８０％
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ６．６５４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），５．６２７（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），５．２５２（ｄｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，９．６Ｈｚ，１Ｈ），４．８６５（ｄｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５９３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７７７（ｓ，３Ｈ），２．１１３（ｓ，３Ｈ），２．０７１（ｓ，３Ｈ），２．０６５（ｓ，３Ｈ）
実施例３．１．３ Ｉｎｔ－ＴＧ３の調製
Figure 2023531252000098
 化合物Ｉｎｔ－ＴＧ３－１の調製
ベータ－Ｄ－ガラクトースペンタアセテート（１ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、３－（ジメチルアミノ）１－プロピルアミン（１．６１ｍＬ、１２．８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。同じ温度で３時間撹拌した後、反応物をＥＡ（２５０ｍｌ×３）、Ｈ２Ｏ（２００ｍｌ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物Ｉｎｔ－ＴＧ３－１（８９１ｍｇ、１００％）を生成し、それを更に精製することなく使用した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３７１（Ｍ＋＋Ｎａ）。
化合物Ｉｎｔ－ＴＧ３の調製
Ｉｎｔ－ＴＧ３－１（８９１ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃でトリクロロアセトニトリル（２．５７ｍＬ、２５．６ｍｍｏｌ）及びＤＢＵ（０．３ｍＬ、２．０５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分間撹拌した後、反応物をＤＣＭ（２５０ｍｌ×３）、Ｈ２Ｏ（２００ｍｌ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－ＴＧ３（８８０ｍｇ、７０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．７０（ｓ，１Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄｄ，Ｊ＝２．８，０．８Ｈｚ，１Ｈ），５．５５－５．３５（ｍ，２Ｈ），４．４４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１９－４．０６（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５１５（Ｍ＋＋Ｎａ）。
実施例３．１．３ Ｉｎｔ－ＴＧ４の調製
Figure 2023531252000099
 化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４－１の調製
４－ヒドロキシ安息香酸（５．０ｇ、３６．２ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍＬ）溶液に、塩化チオニル（２６．３ｍＬ、３６２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で、０℃で添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応物をＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４－１（４．８７ｇ、８９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）
ＥＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１５３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４－２の調製
化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４－１（１．０ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２２．０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（２．３ｍＬ、１３．４ｍｍｏｌ）及びＭＯＭ－Ｃｌ（０．５５ｍＬ、７．２３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下で０℃で添加した。反応混合物を室温で６時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４－２（１．１４ｇ、８８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．０１－７．９７（ｍ，２Ｈ），７．０７－７．０４（ｍ，２Ｈ），５．２３（ｓ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ）
化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４の調製
化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４－２（１．１４ｇ、５．８１ｍｍｏｌ）のメタノール／Ｈ２Ｏ／１，４－ジオキサン（１６．０ｍＬ／８．０ｍＬ／１６．０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（９７５ｍｇ、２３．２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。反応物を２ＮのＨＣｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４を、更に精製することなく次のステップで使用した。（９９５ｍｇ、９４％）
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＭｅＯＨ－Ｄ４）δ ７．９６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ）
実施例３．２．ＯＨＰＡＳ－Ｄ１、ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ、及びＯＨＰＡＳ－Ｄ２の調製
Figure 2023531252000100
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ－１の調製
Ｌ－１－１（２ｇ、６．２８２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（３０１ｍｇ、１２．５６ｍｍｏｌ、６０％）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。１０分後、ヨードメタン（３．９ｍＬ、６２．８２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、同じ温度で添加した。反応物を、Ｎ２雰囲気下、室温で３時間撹拌した。反応が完了した後、反応混合物を２ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（５００ｍＬ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ－１（黄色油状物）を、更に精製することなく次のステップで直接使用した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ３．７０－３．６２（ｍ，１２Ｈ），３．４（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），２．９１（ｓ，３Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３３３（Ｍ＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ－２の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ－１（３．３ｇ、６．２８２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７０ｍＬ）溶液に、ジオキサン（２５ｍＬ）中の４Ｎ ＨＣｌを、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。反応物を、Ｎ２雰囲気下、０℃で１時間撹拌した。反応が完了した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ－２を、更に精製することなく次のステップで直接使用した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ３．９２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７３－３．６９（ｍ，１０Ｈ），３．４５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２２－３．１６（ｍ，２Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，３Ｈ），２．３５（ｂｒｓ，１Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２３３（Ｍ＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－１の調製
３－ホルミル－４－ヒドロキシ安息香酸（５ｇ、４３．０６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液に、臭化ベンジル（５．１ｍＬ、４３．０６ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ３（２．５３ｇ、４３．０６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で、一晩撹拌した。反応物をＥＡ（２００ｍＬ×２）及び蒸留水（１００ｍＬ）で抽出した。得られた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－１（２．５６ｇ、３９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ １１．４１（ｓ，１Ｈ），９．９５（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｄｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４６－７．３５（ｍ，５Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－２の調製
化合物Ｉｎｔ－ＴＧ－１（１．０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）及び化合物Ｉｎｔ－ＴＧ（１．６ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）の無水ＡＣＮ（３０ｍＬ）溶液に、モレキュラーシーブ（８ｇ）及びＡｇ２Ｏ（３．６２ｇ、１５．６１ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。混合物を、室温で１時間撹拌し、次いで、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）によって濾過した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－２（２．１ｇ、９２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ １０．３４（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２６（ｄｄ，Ｊ＝６．８，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４５－７．３５（ｍ，５Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．６３－５．６０（ｍ，１Ｈ），５．５０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），５．２３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１６（ｄｄ，Ｊ＝７．２，３．６Ｈｚ，１Ｈ）４．２４－４．１０（ｍ，４Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．１０－２．０３（ｍ，９Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－３の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－２（２．１ｇ、３．５８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液に、ｍ－ＣＰＢＡ（２．６５ｇ、１０．７４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。０℃で７時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム（４０ｍＬ×２）を加えることによって混合物をクエンチした。混合物を分離し、有機層を、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン水和物（２６１μＬ、５．３７ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。０℃で１時間撹拌した後、ＥＡ（３０ｍＬ×２）及び１ＭのＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を添加した。得られた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－３（１．１ｇ、５５％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５７４（Ｍ＋＋Ｎａ）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－４の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－３（２８０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、ＴＢＤＭＳ－ＯＴｆ（２２４μＬ、０．９７ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（２０７μＬ、１．４６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。混合物を、室温で１．５時間撹拌し、次いで、クエン酸（２０ｍｌ）を加えることによってクエンチした。有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－４（２４６．３ｍｇ、６８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｓ，１Ｈ），７．４４－７．３４（ｍ，５Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．４９－５．４４（ｍ，２Ｈ），５．３０（ｓ，２Ｈ），５．１９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｄｄ，Ｊ＝６．８，３．２Ｈｚ，１Ｈ）４．２０－４．１１（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ），１．０２（ｓ，９Ｈ），０．２０（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，６Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－５の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－４（２８３．２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のＥＡ（５ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（５％、８７．５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を、Ｈ２下、室温で添加した。混合物を１時間撹拌し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）によって濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－５を、更に精製することなく次のステップで直接使用した（２４６ｍｇ、定量的）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｓ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．４９－５．４５（ｍ，２Ｈ），５．２２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝７．２，３．６Ｈｚ，１Ｈ）４．２０－４．０６（ｍ，４Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ），１．０１（ｓ，９Ｈ），０．２１（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，６Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－５（２４３．２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及び１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（Ａｌｄｒｉｃｈ、ＣＡＳ１３４１７９－３８－７、８９．５ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＰｙＢＯＰ（２７５ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１７６ｕＬ、１．０２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で２時間撹拌した。反応物をＥＡ（３０ｍＬ×２）及び蒸留水（１０ｍＬ）で抽出した。得られた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１（２７２．８ｍｇ、８４％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３４（ｓ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），５．４８－５．４４（ｍ，２Ｈ），５．１９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｄｄ，Ｊ＝６．４，３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２０－４．１０（ｍ，２Ｈ），４．０６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６６（ｓ，１４Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，９Ｈ），１．００（ｓ，９Ｈ），０．２０（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，６Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７９９（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ及びＯＨＰＡＳ－Ｄ２は、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａの調製
収量：８３％。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．００－６．９６（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｓ，１Ｈ），５．４８－５．４３（ｍ，２Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２０－４．１１（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７６－３．４９（ｍ，１４Ｈ），３．４６－３．３９（ｍ，２Ｈ），３．１０－３．０４（ｍ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），０．２１（ｓ，３Ｈ），０．１７（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８１３（Ｍ＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ２の調製
収率：８１％、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１５２（Ｍ＋１）。
実施例３．３．ＯＨＰＡＳ－Ｄ３、ＯＨＰＡＳ－Ｄ３ａ、及びＯＨＰＡＳ－Ｄ４の調製
Figure 2023531252000101
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１の調製
４－ヒドロキシベンズアルデヒド（１ｇ、８．１９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（２．２８ｍＬ、１６．３８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。ＳＯ２Ｆ２気体を風船によって導入し、混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ×３）及びブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１（７９０ｍｇ、６３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ １０．０６（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－２の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１（１００ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）及び化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１（２６ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の無水ＡＣＮ（３ｍＬ）溶液に、ＤＢＵ（４μＬ、２５μｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（１０ｍＬ×２）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－２（１０３ｍｇ、９４％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８６９（Ｍ＋）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－３の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－２（１０３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ４（９ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。室温で２時間撹拌した後、蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（１０ｍＬ×２）を添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－３（１０１ｍｇ、９８％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８７１（Ｍ＋）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－３（３２０．５ｍｇ、０．０．３７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍｌ）溶液に、ＤＣＭ中の１ＭのＰＢｒ３（１６５ｕｌ、０．１９ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。２時間撹拌した後、混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム（８ｍＬ×２）を加えることによってクエンチした。有機層を、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３（２０２．６ｍｇ、５９％）を生成した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９３４（Ｍ＋）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ４の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－３（４７ｍｇ、５４μｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（２５ｍｇ、８１μｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１４μＬ、８１μｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、室温で添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（１０ｍＬ×２）を添加し、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－４（５３ｍｇ、９４％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０３６（Ｍ＋）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３ａ及びＯＨＰＡＳ－Ｄ４ａは、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３又はＯＨＰＡＳ－Ｄ４を調製する同様の合成経路によって調製した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３ａ－１の調製
収率８０％；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ １０．０４（ｓ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４４－７．２７（ｍ，３Ｈ），５．５７－５．５１（ｍ，１Ｈ），５．４７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．１４－５．１０（ｍ，２Ｈ），４．２７－４．０９（ｍ，３Ｈ），３．７６－３．５３（ｍ，１４Ｈ），３．４２－３．３６（ｍ，２Ｈ），３．１２－３．０４（ｍ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８８３（Ｍ＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３ａ－２の調製
収率８１％；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．４７－７．４２（ｍ，２Ｈ），７．４０－７．３１（ｍ，３Ｈ），７．２４－７．２１（ｍ，２Ｈ），５．５４－５．４５（ｍ，２Ｈ），５．１１－５．０７（ｍ，２Ｈ），４．７４－４．７０（ｍ，２Ｈ），４．２５－４．２１（ｍ，１Ｈ），４．１７－４．１２（ｍ，１Ｈ），４．０６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７４－３．４４（ｍ，１２Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．０７－３．０４（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，６Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８８５（Ｍ＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３ａの調製
収率９０％；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．４８－７．４１（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２９－７．２１（ｍ，２Ｈ），５．５９－５．５５（ｍ，１Ｈ），５．４７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．１３－５．０９（ｍ，２Ｈ），４．２６－４．２２（ｍ，１Ｈ），４．１８－４．０８（ｍ，２Ｈ），３．８０－３．４８（ｍ，１２Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．１２－３．０６（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９４８（Ｍ＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ４ａの調製
収率９４％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０３６（Ｍ＋１）
実施例３．４．ＯＨＰＡＳ－Ｄ５の調製
Figure 2023531252000102
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－１の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１（５ｇ、２４．４９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍＬ）及びＴＨＦ（２４５ｍＬ）中の溶液に、ＮａＢＨ４（１．８５ｇ、４８．９８ｍｍｏｌ）を－７８℃で、Ｎ２雰囲気下で添加した。０℃で１時間撹拌した後、２ＮのＨＣｌ（５ｍＬ）を加えることによって反応混合物をクエンチし、Ｈ２Ｏ（２５０ｍＬ）及びＥＡ（２５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－１（５．０１ｇ、９９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５０－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．３４－７．３１（ｍ，２Ｈ），４．７５（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），１．９０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－２の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－１（２ｇ、９．７ｍｍｏｌ）のエーテル（３２ｍＬ）溶液に、ＤＣＭ中の１．０ＭのＰＢｒ３（３．８８ｍＬ、３．８８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。２時間撹拌した後、エーテル（１００ｍＬ）及びＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ×３）を添加し、抽出を行った。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－２（２．３５ｇ、９０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５２－７．４９（ｍ，２Ｈ），７．３４－７．３１（ｍ，２Ｈ），４．４９（ｓ，２Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－３の調製
４－ヒドロキシイソファタルアルデヒド（ｈｙｄｒｏｘｙｉｓｏｐｈａｔｈａｌａｌｄｅｈｙｄｅ）（１１２ｍｇ、０．７４６ｍｍｏｌ、ＣＡＳ番号：３３２８－７０－９）及び水素化ナトリウム（４５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、６０％）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－２（２８０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。室温で、Ｎ２雰囲気下で４時間撹拌した後、反応混合物を、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えることによってクエンチし、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）及びＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－３（１８０ｍｇ、７１％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ １０．５４（ｓ，１Ｈ），９．９８（ｓ，１Ｈ），８．３８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．３３（ｓ，２Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５－３（１ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）溶液に、ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）及びＴＨＦ（１ｍＬ）中の水素化ホウ素ナトリウム（３９１ｍｇ、１０．３５ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、－７８℃で添加した。反応混合物を、Ｎ２雰囲気下、０℃で１時間撹拌した。反応が完了した後、混合物を２ＮのＨＣｌ（２ｍＬ）でクエンチし、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）及びＥＡ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ５（８５０ｍｇ、８５％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３９－７．３７（ｍ，３Ｈ），７．３０－７．２８（ｍ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１６（ｓ，２Ｈ），４．７６（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）。
実施例３．５．ＯＨＰＡＳ－Ｄ６の調製
Figure 2023531252000103
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－１の調製
２，６－ジメトキシ－４－ヒドロキシベンズアルデヒド（０．５ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８ｍＬ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（３．８ｍＬ、２７．４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。ＳＯ２Ｆ２気体を風船によって導入し、混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ×３）及びブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－１（７２８ｍｇ、９９％）を得た。
収率９９％
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２６５（Ｍ＋）。１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．４１（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｓ，６Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－２の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－１（１０１ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及び化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１（２５４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６ｍＬ）溶液に、ＢＥＭＰ（１９μｌ、０．０６４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２時間後、反応混合物をクエン酸水溶液（８ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×８ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－２（２９５ｍｇ、９９％）を生成した。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９２９（Ｍ＋）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６は、実施例３．３に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－３の調製
収率９６％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９３１（Ｍ＋）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６の調製
収率７５％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７５０（Ｍ＋）。
実施例３．６．ＯＨＰＡＳ－Ｄ７の調製
Figure 2023531252000104
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－１の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－３（３ｇ、５．２２ｍｍｏｌ）のＥＡ（２４０ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（３００ｍｇ、１０ｗｔ％）を０℃で添加し、混合物を、Ｈ２気体を注入しながら、室温で３時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－１を、更に精製することなく次の反応で直接使用した（２．８４ｇ、１００％、ベージュ色泡状物）。
ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：５０７．２（Ｍ＋１＋Ｎａ）
ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－２は、実施例３．２において化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１を調製する同様の方法によって調製した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－２の調製
収率８４％、白色固体；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３８－７．３４（ｍ，２Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｂｒｓ，１Ｈ），５．４９－５．４５（ｍ，２Ｈ），５．１４（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２７－４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７４－３．６３（ｍ，１４Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ）。ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：６８５．３（Ｍ＋１）。
ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－３は、実施例３．３において化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－２を調製する同様の方法によって調製した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－３の調製
収率８１％、白色固体；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）７．４３－７．４０（ｍ，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２９－７．２５（ｍ，２Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６０－５．５６（ｍ，１Ｈ），５．４７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．１７－５．１０（ｍ，４Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），４．６４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．２６－４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７１－３．５８（ｍ，１４Ｈ），３．３４（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．４１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），１．７７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：１００７．２（Ｍ＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－４の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－３（１５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）溶液に、塩化メタンスルホニル（１５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。反応混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－４（２１４ｍｇ、１００％）をベージュ色泡状物として生成し、それを更に精製することなく次のステップで直接使用した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－５の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－４（２１４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（３ｍＬ）溶液に、チオ酢酸カリウム（４３ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。Ｎ２雰囲気下、室温で３時間撹拌した後、混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７（１４７ｍｇ、８８％）を淡黄色泡状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４３－７．４１（ｍ，２Ｈ），７．３１－７．２７（ｍ，２Ｈ），７．１５（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０７－７．０６（ｍ，１Ｈ），６．７９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６１－５．５６（ｍ，１Ｈ），５．４７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．１７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１４－５．１０（ｍ，３Ｈ），４．２６－４．０９（ｍ，５Ｈ），４．０５（ｓ，２Ｈ），３．６６－３．５９（ｍ，１４Ｈ），３．３４（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ）。ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１２３．２（Ｍ＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－６の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－５（１００ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ－クロロスクシンイミド（９０ｍｇ、０．６７６ｍｍｏｌ）及び２ＮのＨＣｌ（３５６ｕＬ、０．７１２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。Ｎ２雰囲気下、０℃で１時間撹拌した後、室温でジメチルスルフィド（１９．６ｕＬ、０．２６７ｍｍｏｌ）をこれに添加した。反応混合物を更に同じ温度で５分間撹拌した。Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）及びＥＡ（２０ｍＬ×３）を加えて抽出を行い、得られた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７（１４０ｍｇ、１００％）を白色泡状物として生成し、それを更に精製することなく次のステップで直接使用した。
ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１７３．９（Ｍ＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７－６（１４０ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（２ｍＬ）溶液に、Ｈ２Ｏ（０．２ｍＬ）中のフッ化水素カリウム（４１．７ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。室温で２時間撹拌した後、混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ７（４２ｍｇ、４１％）を白色泡状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５３－７．４３（ｍ，６Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１３－７．１１（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６１－５．５６（ｍ，１Ｈ），５．４８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．２０（ｓ，２Ｈ），５．１７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．７８（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，２Ｈ），４．２６－４．０９（ｍ，３Ｈ），３．７０－３．６０（ｍ，１４Ｈ），３．５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ）。ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１３９．１（Ｍ＋１）。
実施例３．７．ＯＨＰＡＳ－Ｄ９及びＯＨＰＡＳ－Ｄ１０の調製
Figure 2023531252000105
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－１の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１－５（１．０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及びＬ－１（５８６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、１．２当量）のＤＭＦ（１０ｍＬ）均質溶液を、室温で、Ｎ２雰囲気下、ＰｙＢＯＰ（１．１３ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、１．３当量）、ＤＩＰＥＡ（８７３ｕＬ、５．０１ｍｍｏｌ、３．０当量）で処理し、４時間撹拌した。反応物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝１：１～１：３）によって精製し、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－１（１．０５ｇ、７２％）を白色泡状固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８７４（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－２の調製
Ｎ２雰囲気下、室温で、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－１（５００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）及び化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１（１４０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ、１．２当量）の無水ＡＣＮ（１０ｍＬ）均質溶液を、ＢＥＭＰ（６６．３μＬ、０．２３ｍｍｏｌ、０．４当量）で処理し、４時間撹拌した。反応物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中４％ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－２（４９５ｍｇ、８５％）を白色泡状固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８６９（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－３の調製
Ｎ２雰囲気下、０℃で、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－２（４９５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ４（３９．７ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、２．０当量）で処理し、２時間撹拌した。反応物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中２％～３％ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－３（４１８ｍｇ、９１％）を白色泡状固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９４５（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－４の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－３（２１４．２ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で、メタンスルホニルクロリド（２４．６ｕＬ、０．３２ｍｍｏｌ、１．４当量）及びＴＥＡ（７９．２ｕＬ、０．５７ｍｍｏｌ、１．５当量）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応物を水（１０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（１００％ＤＣＭ～ＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－４（１６４ｍｇ、７０％）を白色泡状固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０２４（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９の調製
Ｎ２雰囲気下、室温で、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９－４（１６４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液をＬｉＢｒ（６９．６ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ、５．０当量）で処理し、３時間撹拌した。反応物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中３％～５％ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９（１６１ｍｇ、９９％）を白色泡状固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１００８（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１０は、化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ９の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１０－１の調製
収率７２％、無色油状物
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２２６（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１０－２の調製
収率８２％、無色油状物
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２９６（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１０－３の調製
収率７５％、無色油状物
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２９８（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１０－４の調製
収率８２％、無色油状物
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３７６（Ｍ＋＋１）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１０の調製
収率８２％、無色油状物
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３６１（Ｍ＋＋１）。
実施例３．８．ＯＨＰＡＳ－Ｄ１１の調製
Figure 2023531252000106
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１１は、実施例３．３の化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１１の調製
収率８１％、白色泡状固体
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．８８（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６２－５．５６（ｍ，１Ｈ），５．４８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ １Ｈ），５．１７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝７．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．２６－４．０８（ｍ，３Ｈ），３．７２－３．６０（ｍ，１４Ｈ），３．３６（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，６Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７６７（Ｍ＋＋１）。
実施例３．９．ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２及びＯＨＰＡＳ－Ｄ１３の調製
Figure 2023531252000107
 化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２は、実施例３．２に記載したものと同様の方法によって合成した。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２－１
収率６５％
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ １０．３２（ｓ，１Ｈ），８．５４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４５－７．３５（ｍ，５Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．３９－５．３４（ｍ，６Ｈ），４．２８－４．２６（ｍ，１Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），２．１１－２．０６（ｍ，９Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２－２
収率６３％
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６６（ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４３－７．３１（ｍ，５Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｓ，１Ｈ），５．４１－５．２８（ｍ，５Ｈ），５．１２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，６Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２－３
収率７０％
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６０（ｄｄ，Ｊ＝２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４８－７．３２（ｍ，５Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．４０－５．２６（ｍ，６Ｈ），４．１８（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），２．０９－２．０４（ｍ，９Ｈ）。０．９９（ｓ，９Ｈ），０．１８（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ）。
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２－４
収率 定量的
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６０７（Ｍ＋＋Ｎａ）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１３－１
収率９６％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ９．７３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），５．４５（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１５－５．０２（ｍ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ），２．０４－１．９８（ｍ，９Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７８５（Ｍ＋＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１３－２
収率７８％
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６８５（Ｍ＋＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２
収率８５％。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７８５（Ｍ＋＋１）
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１２ａ
収率７０％
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５５９（Ｍ＋＋１）
実施例４．薬剤誘導体の合成
実施例４．１．１ Ｑ－１及びＱ－２の調製
Figure 2023531252000108
 Ｑ－１－１及びＱ－２－１は、実施例３．３において化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－１を調製する同様の方法によって、β－アマニチン及びα－アマニチンから調製した。
化合物Ｑ－１－１の調製
収率８９％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１００２（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－２－１の調製
収率８８％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１００３（Ｍ＋１）。
Ｑ－１－２及びＱ－２－２は、実施例３．３において化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３－２を調製する同様の方法によって調製した。
化合物Ｑ－１－２の調製
収率６２％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６６６（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－２－２の調製
収率４１％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６６７（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－１の調製
化合物Ｑ－１－２（５０ｍｇ、０．３０μｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（２１ｍｇ、１．５μｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。０．５時間撹拌した後、得られた残渣をＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｑ－１（１０．５ｍｇ、１９％）を淡黄色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４９８（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－２の調製
２ステップで収率６１％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４９９（Ｍ＋１）。
実施例４．１．２．Ｑ－１ａの調製
化合物Ｑ－１ａは、実施例４．１．１に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
Figure 2023531252000109
 化合物Ｑ－１ａの調製
収率８３％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７５６（Ｍ／２＋１）。
実施例４．２．Ｑ－３の調製
Figure 2023531252000110
 化合物Ｑ－３－１の調製
β－アマニチン（４０ｍｇ、４３．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン（１０μｌ、４７．８３μｍｏｌ）及びＴＢＴＵ（４６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（１８μｌ、０．１３ｍｍｏｌ）を室温で添加した。４０℃で一晩加熱撹拌した後、混合物を分離し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｑ－３－１（２８ｍｇ、６５％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９９１（Ｍ＋１）
化合物Ｑ－３－２の調製
化合物Ｑ－３－１（２０ｍｇ、２０．２μｍｏｌ）及びＯＨＰＡＳ－Ｄ３（３０ｍｇ、２４．２μｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下でＤＩＰＥＡ（１１μＬ、６０．６ｍｍｏｌ）を滴下した。室温で一晩撹拌した後、混合物を分離し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｑ－３－２（３４ｍｇ、収率６５％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９９２（Ｍ／２＋１）を得た。
化合物Ｑ－３は、実施例４．１．１に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｑ－３の調製
収率７１％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８３８（Ｍ／２＋１）
実施例４．３．Ｑ－４及びＱ－４ａの調製
Figure 2023531252000111
 化合物Ｑ－４－１の調製
化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ４（６５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）及びＭＭＡＦ－ＯＭｅ（５２ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、ＨＯＢｔ（２ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１２μＬ、０．０６９ｍｍｏｌ）、及びピリジン（３３０μＬ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。一晩撹拌した後、混合物を１ＮのＨＣｌで２～３のｐＨを有するように調節し、ＥＡ（８ｍＬ×２）で抽出した。有機層を蒸留水（８ｍＬ）及びブライン（１２ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物Ｑ－４－１（７３ｍｇ、７１％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６４４（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－４は、実施例４．２に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｑ－４の調製
収率６９％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４６２（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－４ａは、上に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｑ－４－１ａの調製
収率９９％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８２８（Ｍ／２＋１）。
化合物Ｑ－４ａの調製
収率４６％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７３８（Ｍ／２＋１）。
実施例４．４．Ｑ－５の調製
Figure 2023531252000112
 Ｑ－５－１及びＱ－５－２は、実施例３．５に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｑ－５－１の調製
収率９８％
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．３７（ｂｒｓ，１Ｈ）８．０２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．２，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），４．０５（ｍ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５２（ｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），１．６１（ｓ，９Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４３８．２（Ｍ＋１＋Ｎａ）。
化合物Ｑ－５－２の調製
収率７９％
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．０９（ｂｒｓ，１Ｈ）７．７７（ｍ，３Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｍ，１Ｈ），５．５６（ｍ，１Ｈ），５．４６（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．２５－４．０２（ｍ，５Ｈ），３．９３（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｍ，１５Ｈ），３．３１（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｓ，６Ｈ），１．５６（ｓ，９Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０８０．６（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－５の調製
化合物Ｑ－５－２（５０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気、０℃で、１，４－ジオキサン中の４Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）に溶解した。室温で４時間撹拌した後、混合物をＤＣＭ（５ｍＬ）で希釈し、濃縮した。化合物Ｑ－５を、更に精製することなく次のステップで直接使用した（４７ｍｇ、９９％）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９８０．５（Ｍ＋１）。
実施例４．５．Ｑ－６の調製
Figure 2023531252000113
 化合物Ｑ－６ａの調製
化合物Ｑ－６ａは、文書に記載したものと同様の合成経路によって合成した［Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ２０１５，１２，１８１３－１８３５を参照されたい］。
化合物Ｑ－６－１の調製
化合物Ｑ－６－１は、文書に記載したものと同様の合成経路によって合成した［Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１０，４９，７３３６－７３３９及びＷＯ２０１５／１１０９３５Ａ１を参照されたい］。
化合物Ｑ－６－２の調製
化合物Ｑ－６ａ（８０ｍｇ、０．２３９ｍｍｏｌ）及び化合物Ｑ－６－１（１１８ｍｇ、０．２３９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で、モレキュラーシーブ及びＢＦ３・ＯＥｔ２（１４．８μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。２時間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物Ｑ－６－２（１０５ｍｇ、６６％）を白色泡状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．１２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈ，１Ｈ），７．８９（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｍ，１Ｈ），７．３５（ｍ，１Ｈ），５．７０（ｍ，１Ｈ），５．５１（ｓ，１Ｈ），５．３３（ｍ，１Ｈ），５．２０（ｍ，１Ｈ），４．２３（ｍ，３Ｈ），４．１１（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｓ，９Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５６４．４（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－６－３の調製
化合物Ｑ－６－２（１００ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、次いで、１，４－ジオキサン中の４Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）を、０℃で、Ｎ２の雰囲気下で添加した。４時間撹拌した後、反応物を減圧下で濃縮した。反応混合物を、Ｎ２下、室温で４時間撹拌した。化合物Ｑ－６－２を、更に精製することなく次のステップで直接使用した（９０ｍｇ、９９％）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５６４．２（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－６－４の調製
化合物Ｑ－６－３（９０ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、無水グルタル酸（１８．８μＬ、０．１６４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（５２μＬ、０．３７３ｍｍｏｌ）、及び４－ＤＭＡＰ（２ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって精製し、化合物Ｑ－６－４（３０ｍｇ、３０％）を白色固体として得た。
化合物Ｑ－６－５の調製
化合物Ｑ－６－４（３０ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）及び化合物Ｑ－５（５１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２７．２ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。１１時間撹拌した後、混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｑ－６－５（２０ｍｇ、２８％）を淡褐色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８２１．７（Ｍ＋１／２）。
化合物Ｑ－６の調製
化合物Ｑ－６－５（１０ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）溶液に、ＭｅＯＨ中のＮａＯＭｅ２５％（１１μＬ、０．０４８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。反応混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で１時間撹拌し、５％ＴＦＡのＡＣＮ溶液を添加することによって、ｐＨ７に調整した。混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｑ－６（５ｍｇ、６３％）を淡黄色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３０５．３（Ｍ＋１）。
実施例４．６．Ｑ－７の調製
Figure 2023531252000114
 化合物Ｑ－７ａの調製
ＰＮＵ－１５９６８２（５２ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍｌ）／蒸留水（３ｍＬ）溶液に、ＮａＩＯ４（１８ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、粗化合物Ｑ－７ａ（５１ｍｇ、９９％）を生成した。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６２８（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－７ｂの調製
化合物Ｑ－７ａ（５１ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、２－（ジメチルアミノ）エチルアミン（６．１μｌ、０．０８９ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（３４μｌ、０．２４３ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（５２ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。１時間撹拌した後、混合物をＤＣＭ（２×８ｍＬ）で希釈した。有機層をＨ２Ｏ（８ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｑ－７ｂ（３８ｍｇ、６７％）を生成した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６９８（Ｍ＋１）。
Ｑ－７は、実施例４．２において化合物Ｑ－３－２を調製する同様の方法によって調製した。
化合物Ｑ－７－１の調製
収率３８％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１５５１（Ｍ＋１）。
化合物Ｑ－７の調製
収率５４％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３８３（Ｍ＋１）。
実施例４．７．Ｑ－８の調製
Figure 2023531252000115
 化合物Ｑ－８は、実施例４．６に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｑ－８－１の調製
収率４２％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８３７（Ｍ／２＋１）。
化合物Ｑ－８の調製
収率８１％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７４６（Ｍ／２＋１）。
実施例４．８．ベンゾジアゼピン単量体誘導体の調製
実施例４．８．１ ピロロ－ベンゾジアゼピン単量体（以下「ＰＢＤ－単量体」）の調製
Figure 2023531252000116
 ＰＢＤ単量体を、ＥＰ２００７／１８１３６１４に記載される同様の方法で反応を行うことにより得た。
実施例４．８．２ インドリノ－ベンゾジアゼピン単量体（以下「ＩＢＤ－単量体」）の調製
Figure 2023531252000117
 ＩＢＤ単量体を、ＷＯ２０１０／０９１１５０に記載される同様の合成方法で反応を行うことによって得た。
実施例４．８．３ ＭＣＢＩ－単量体の調製
Figure 2023531252000118
 ＩＢＤ単量体を、ＵＳ５９８５９０８に記載される同様の合成方法で反応を行うことによって得た。
実施例４．８．４ テトラヒドロイソキノリノ－ベンゾジアゼピン単量体（以下「ＴＢＤ単量体」）の調製
Figure 2023531252000119
 化合物Ｍ－１－１の調製
（ｓ）－（－）－１，２，３，４，－テトラヒドロイソキノリン－３－カルボン酸（５．０ｇ、２８．２２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１４０ｍＬ）溶液に、ＳＯＣｌ２（２．３０ｍＬ、３１．０４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃になるまで滴下した。４０℃で２１時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮した。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）を加えて沈殿物を得て、これをジエチルエーテルで濾過して、化合物Ｍ－１－１（６．４２ｇ、収率９９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．０２（ｓ，２Ｈ），７．２７（ｓ，４Ｈ），４．６０－４．５６（ｍ，１Ｈ），４．３９－４．２９（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．１９－３．１２（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１９２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１－２の調製
化合物Ｉｎｔ－１（９．０７ｇ、２８．２２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５０ｍｌ）溶液に、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の化合物Ｍ－１－１（６．４２ｇ、２８．２２ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（７．９ｍＬ、５６．４３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で２時間撹拌した後、反応物を蒸留水（５００ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（８００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１－２（１２．０１ｇ、９０％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４７７（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１－３の調製
化合物Ｍ－１－２（４ｇ、８．３９ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１８ｍＬ）及びトルエン（５２ｍＬ）中の溶液に、ＤＩＢＡＬ（１６．８ｍＬ、１６．７９ｍｍｏｌ、トルエン中１．０Ｍ）を、Ｎ２雰囲気下、－７８℃で滴下した。－７８℃で４時間撹拌した後、ＭｅＯＨ（０．４ｍＬ）及び２ＮのＨＣｌ（２５ｍＬ）で、－７８℃で反応物をクエンチした。混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（５００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１－３（３．０７ｇ、８２％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４４７（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１－４の調製
化合物Ｍ－１－３（３ｇ、６．７２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１３０ｍＬ）及び蒸留水（８６ｍＬ）中の溶液に、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４・２Ｈ２Ｏ（１１．３ｇ、５３．７６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。５時間撹拌した後、トルエンを共溶媒として使用することにより、反応物を減圧下で４回濃縮し、それによって水を除去した。次いで、得られた黄色固体を無水ＭｅＯＨ（２２０ｍＬ）に溶解し、塩化アセチル（４．８ｍＬ、６７．１９ｍｍｏｌ）をこれに添加した。１５分間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えることによってｐＨ７に調整し、蒸留水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（２５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１－４（２．４８ｇ、９３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５５（ｓ，１Ｈ），７．４５－７．２７（ｍ，１０Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），５．２４－５．１５（ｍ，２Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝１５．２，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝１５．６，１Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．９３－３．９２（ｍ，１Ｈ），３．３１－３．１２（ｍ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３９９（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１の調製
化合物Ｍ－１－４（１ｇ、２．５１ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のメタンスルホン酸（５ｍＬ）を０℃で添加した。０℃で３時間撹拌した後、混合物をＮａＨＣＯ３溶液、水（１００ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（４００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１（７０３ｍｇ、９１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５４（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３７－７．２６（ｍ，４Ｈ），６．８８（ｓ，１Ｈ），６．０３（ｓ，１Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．９５－３．９０（ｍ，１Ｈ），３．３０－３．１３（ｍ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３０９（Ｍ＋＋１）。
実施例４．８．５ Ｃ２－アリール置換基を有するＰＢＤ化合物の調製
Figure 2023531252000120
 化合物Ｍ－２－１の調製
ｔｒａｎｓ－４－ヒドロキシ－Ｌ－プロリン（３０ｇ、２３０ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ３（４３ｇ、５７０ｍｍｏｌ、２．５当量）の撹拌したＨ２Ｏ／トルエン（５００ｍＬ／１２０ｍＬ）溶液に、室温で、Ｎ２雰囲気下で、Ｃｂｚ－Ｃｌ（３７．４ｍＬ、２６０ｍｍｏｌ、１．１５当量）を添加した。添加後、混合物をこの温度で一晩撹拌した。混合物をＥＡ（５００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を水（５００ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物Ｍ－２－１（５７．５ｇ、９５％）を淡褐色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １２．７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４０－７．２８（ｍ，５Ｈ），５．１８－５．０２（ｍ，２Ｈ），４．３１－４．２４（ｍ，２Ｈ），３．５１－３．３５（ｍ，２Ｈ），２．２３－２．１０（ｍ，１Ｈ），２．００－１．８７（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２６６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－２の調製
化合物Ｍ－２－１（５７．５ｇ、２２０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４００ｍＬ）褐色溶液を、０℃、Ｎ２雰囲気下で、塩化チオニル（４５．３ｍＬ、６１０ｍｍｏｌ、２．８当量）で処理した。反応混合物を室温まで加温し、一晩撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、化合物Ｍ－２－２（６０．５ｇ、定量的）を淡褐色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３８－７．２８（ｍ，５Ｈ），５．２３－５．０９（ｍ，２Ｈ），４．５６－４．４７（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，１Ｈ），３．７６－３．６６（ｍ，２Ｈ），３．５８－３．５２（ｍ，１Ｈ）２．３８－２．２６（ｍ，１Ｈ），２．１６－２．０８（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２７０（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－３の調製
化合物Ｍ－２－２（６０．５ｇ、２２０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５００ｍＬ）褐色溶液を、０℃、Ｎ２雰囲気下で、ＬｉＢＨ４（３．９ｇ、１８０ｍｍｏｌ、０．８当量）で処理し、３０分間撹拌した。次いで、混合物を、室温で更に２日間撹拌した。水（２００ｍＬ）及び２ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）で混合物をクエンチした。有機溶媒をロータリーエバポレーターによって除去した。残渣をＥＡ（５００ｍＬ×３）で抽出し、次いで、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物Ｍ－２－３（５４．６ｇ、９８％）を淡褐色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３９－７．３０（ｍ，５Ｈ），５．２１－５．１２（ｍ，２Ｈ），４．６６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３９（ｓ，１Ｈ），４．２１（ｑ，Ｊ＝７．６，７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７６（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ），３．６６－３．５８（ｍ，１Ｈ），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．１０－２．２３（ｍ，１Ｈ），１．７８－１．６４（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２５２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－４の調製
Ｍ－２－３（５３ｇ、２１０ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（５００ｍＬ）褐色溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（２５．４ｇ、１７０ｍｍｏｌ、０．８当量）、ＴＥＡ（３０ｍＬ、２１０ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＤＢＵ（６．３ｍＬ、４２．２ｍｍｏｌ、０．２当量）で処理した。添加後、混合物を一晩撹拌した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ（３００ｍＬ）、その後、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、次いで、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝１：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－４（４８．２ｇ、６３％）を淡褐色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３８－７．２８（ｍ，５Ｈ），５．２０－５．０８（ｍ，２Ｈ），４．５０（ｓ，１Ｈ），４．１２－４．００（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｄｄ，Ｊ＝６．４，４．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７１（ｄｄ，Ｊ＝５．６，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６６－３．５８（ｍ，１Ｈ），３．５２－３．４８（ｍ，１Ｈ），２．２８－２．１８（ｍ，１Ｈ），２．０２－１．９２（ｍ，１Ｈ），０．１０ －０．０８（ｍ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３６６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－５の調製
炭素上パラジウムである５％Ｐｄ／Ｃ（１．３ｇ、１．２３ｍｍｏｌ、０．０３当量）を、Ｎ２雰囲気下で、Ｍ－２－４（１５ｇ、４１．０ｍｍｏｌ）の撹拌したＥＡ（５０ｍＬ）溶液に添加した。このフラスコに、室温で、水素気体を溶液に通してバブリングすることによって流した。混合物を同じ温度で５時間撹拌した。混合物をＥＡ（３０ｍＬ）で希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグをＥＡ（５０ｍＬ×２）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、化合物Ｍ－２－５（９．５ｇ、定量的）を淡褐色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ ４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ４．４１（ｂｒｓ，１Ｈ），３．６０－３．４４（ｍ，３Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），１．８４－１．７９（ｍ，１Ｈ），１．７４－１．６７（ｍ，１Ｈ），０．８９（ｓ，９Ｈ），０．０６（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２３２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－６の調製
化合物Ｍ－２－５（１１．９ｇ、５１．４２ｍｍｏｌ）及びＩｎｔ－２（１４．４ｇ、５６．６ｍｍｏｌ、１．１当量）の無水ＴＨＦ（４００ｍｌ）褐色溶液を、０℃、Ｎ２雰囲気下で、ＤＩＰＥＡ（２６．９ｍＬ、１５４．３ｍｍｏｌ、３．０当量）で処理し、５時間撹拌した。反応混合物を蒸留水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝２：１～２：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－６（２０ｇ、８３％）を黄色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．９５（ｓ，１Ｈ），６．８７（ｓ，１Ｈ），４．６０－４．５１（ｍ，１Ｈ），４．４９－４．４１（ｍ，１Ｈ），４．２４－４．０８（ｍ，１Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．８０－３．６８（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｄｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４．０Ｈｚ，１Ｈ），３．１４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．１８－２．０８（ｍ，１Ｈ），０．９１（ｓ，９Ｈ），０．１（ｓ ６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４６９（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－７の調製
炭素上パラジウムである５％Ｐｄ／Ｃ（９．１ｇ、４．２７ｍｍｏｌ、０．１当量）を、Ｎ２雰囲気下で、Ｍ－２－６（２０ｇ、４２．６８ｍｍｏｌ）の撹拌したＥＡ（２１３ｍＬ）溶液に添加した。このフラスコに、室温で、水素気体を溶液に通してバブリングすることによって流した。８時間撹拌した後、混合物をＥＡ（５０ｍＬ）で希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグをＥＡ（５０ｍＬ×２）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、化合物Ｍ－２－７（１８．５ｇ、９９％）を黄色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ６．８１（ｓ，１Ｈ），６．４４（ｓ，１Ｈ），５．７９（ｂｒｓ，１Ｈ），４．５８－４．５０（ｍ，１Ｈ），４．４２－４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１０（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３０－２．２４（ｍ，１Ｈ），２．０６－２．０１（ｍ，１Ｈ），０．８９（ｓ，９Ｈ），０．０５（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４３９（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－８の調製
Ｍ－２－７（１８．５ｇ、４２．１８ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（２１０ｍＬ）黄色溶液を、０℃、Ｎ２雰囲気下で、クロロギ酸２，２，２－トリクロロエチル（６．４ｍＬ、４６．４ｍｍｏｌ、１．１当量）及びピリジン（６．９ｍＬ、８７．４ｍｍｏｌ、２．０当量）で処理し、次いで、３時間撹拌した。混合物をＣｕＳＯ４溶液（５０ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝２：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－８（２１．２ｇ、８２％）を褐色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．８７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），４．８４（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７１（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４５（ｓ，１Ｈ），４．２０（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．７０－３．６２（ｍ，１Ｈ），３．５７（ｓ，２Ｈ），２．３２（ｓ，４Ｈ），２．１１－２．０２（ｍ，１Ｈ），１．８０（ｓ，１Ｈ），０．９０（ｓ，９Ｈ），０．０５（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６１５（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－９の調製
塩化オキサリル（２１ｍＬ、２４．４ｍｍｏｌ、１．５当量）の無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）均質溶液を、－７８℃、Ｎ２雰囲気下で、無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（３．５ｍＬ、４８．９ｍｍｏｌ、３．０当量）で処理し、１時間撹拌した。Ｍ－２－８（１０ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液を反応混合物に滴下し、２時間撹拌した。反応混合物をＴＥＡ（２２．７ｍＬ、１６２．９ｍｍｏｌ、１０当量）で処理し、室温で１時間撹拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ溶液（３０ｍＬ）及びＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝４：１～１：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－９（８．２ｇ、８３％）を褐色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．６８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），５．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．８０（ｓ，２Ｈ），４．１３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０４（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９８ －３．８６（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７６－３．６２（ｍ，１Ｈ），２．８４－２．７２（ｍ，２Ｈ），２．５４（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），２．０８－１．９８（ｍ，１Ｈ），０．８８（ｓ，９Ｈ），０．２１（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６１２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－１０の調製
Ｍ－２－９（２．０ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）及び２，６－ルチジン（４．６ｍＬ、１２当量）の無水ＤＣＭ（１００ｍＬ）黄色溶液を、－１０℃、Ｎ２雰囲気下で、無水トリフルオロメタンスルホン酸（５．５ｍＬ、３２．６８ｍｍｏｌ、１０当量）で処理し、６時間撹拌した。反応混合物を室温まで加温し、更に１時間撹拌した。反応混合物を蒸留水（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝４：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－１０（５０２ｍｇ、２１％）を黄色油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．７８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），４．８６－４．７２（ｍ，３Ｈ），４．２０－４．３２（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７６－３．６８（ｍ，１Ｈ），３．２０－３．００（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），０．８９（ｓ，９Ｈ），０．０６（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ ６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７４５（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－１１の調製
Ｍ－２－１０（５００ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）のトルエン（４．０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．６ｍＬ）及びエタノール（４．０ｍＬ）中の黄色溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で４，４，５，５－テトラメチル－２－フェニル－１，３，２－ジオキサボロラン（１６４．６ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｐｄ（ＴＰＰ）４（７７．５ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ、０．１当量）及びＴＥＡ（２３４．２ｕＬ、１．６８ｍｍｏｌ、２．５当量）で処理し、次いで３時間撹拌した。混合物を蒸留水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝３：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－１１（３４３ｍｇ、７６％）を黄色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．７６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９６（ｓ，１Ｈ），７．３８－７．２８（ｍ，５Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），４．７８－４．６８（ｍ，３Ｈ），４．１６－４．０４（ｍ，２Ｈ），３．９２－３．８４（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．２４－３．１２（ｍ，１Ｈ），３．０８－２．９０（ｍ，１Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），０．８５（ｓ，９Ｈ），０．０５（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６７３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－１２の調製
Ｍ－２－１１（３４０ｍｇ、０．５０５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４．０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２．０ｍＬ）中の黄色溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、酢酸（８．０ｍＬ）で処理し、２０時間撹拌した。混合物を蒸留水（１０ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝２：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－１２（２５０ｍｇ、８９％）を黄色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．８６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．３６－７．２８（ｍ，５Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），４．９３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），４．１６－４．１０（ｍ，３Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．６４（ｓ，１Ｈ），３．３３（ｔ，Ｊ＝１３．６，５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．７７（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ）２．３４（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５５８（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－１３の調製
塩化オキサリル（５８ｕＬ、０．６７ｍｍｏｌ、１．５当量）の無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）均質溶液を、－７８℃、Ｎ２雰囲気下で、無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（８０ｕＬ、１．１２ｍｍｏｌ、３．０当量）で処理し、１５分間撹拌した。Ｍ－２－１２（２５０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（３．０ｍＬ）溶液を、反応混合物に滴下し、３時間撹拌し、続いてＴＥＡ（５００ｕＬ、３．５８ｍｍｏｌ、８．０当量）を添加し、室温で更に３０分間撹拌した。反応混合物を蒸留水（５．０ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（１５ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝３：１）によって精製し、化合物Ｍ－２－１３（２０２ｍｇ、８１％）を黄色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．４５（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｓ，５Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｂｒｓ，１Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３１（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１８－４．０６（ｍ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｓ，１Ｈ），３．４３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），３．１２（ｄ，Ｊ＝１８．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５５６（Ｍ＋＋１）
化合物Ｍ－２の調製
Ｍ－２－１３（１７５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１６ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３．０ｍＬ）中の黄色溶液を、室温で、Ｎ２雰囲気下で、Ｋ２ＣＯ３（１０９ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ、２．５当量）で処理し、２時間撹拌した。混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、ＥＡ（１０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ：ＥＡ＝２：１）によって精製し、化合物Ｍ－２（１３５ｍｇ、８５％）を黄色形態固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．４９（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｓ，５Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），５．９３（ｂｒｓ，１Ｈ），５．８８－５．８２（ｍ，１Ｈ），５．１４（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１８－４．００（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．４１（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．１０（ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５１４（Ｍ＋＋１）
Ｍ－２ａは、化合物Ｍ－２を調製する同様の方法によって調製した。
化合物Ｍ－２－１１ａの調製
黄色泡状固体としての収率５９％；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．７８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９５（ｓ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），４．８７－４．６９（ｍ，３Ｈ），４．０９－４．０２（ｍ，１Ｈ），３．９３－３．８８（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ），３．２０－３．１２（ｍ，１Ｈ），３．０５－２．９７（ｍ，１Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），０．８５（ｓ，９Ｈ），０．６０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７０３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－１２ａの調製
黄色泡状固体として収率７９％。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．８５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），７．２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），４．９５－４．８７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，２Ｈ），４．０４－３．８４（ｍ，３Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，６Ｈ），３．３４－３．２４（ｍ，１Ｈ），２．７２（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５８８（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２－１３ａの調製
黄色泡状固体として収率８０％。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３７（ｓ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１１（ｓ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），５．８６－５．８１（ｍ，１Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．３０（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１０－４．０５（ｍ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４４－３．３５（ｍ，１Ｈ），３．１２－３．０５（ｍ，１Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５８６（Ｍ＋＋１）
化合物Ｍ－２ａの調製
黄色泡状固体として収率７５％。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３７（ｓ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３０（ｓ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．９３（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｄｄ，Ｊ＝５．２，４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．０７－３．９９（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｓ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４３－３．３４（ｍ，１Ｈ），３．１０－３．０３（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５４４（Ｍ＋＋１）
実施例４．８．６ 化合物Ｍ－３の調製
Figure 2023531252000121
 化合物Ｍ－３－１の調製
（Ｓ）－２－アミノ－３－（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）プロパン酸（８．０ｇ、１８．４８ｍｍｏｌ）の濃縮ＨＣｌ水溶液（９０ｍＬ）中の溶液に、１，２－ジメトキシエタン（７．５ｍＬ）及びパラホルムアルデヒド（Ｈ２Ｏ中で３７重量％、９２．３８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を激しく撹拌し、７２℃までゆっくりと加熱した。反応混合物を７２℃で一晩撹拌した。次いで、懸濁液を氷浴中で冷却し、固体を濾過によって収集し、１，２－ジメトキシエタン（３×１０ｍＬ）で十分に洗浄し、高減圧下で乾燥させて、化合物Ｍ－３－１（２．４９ｇ、収率２８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．０２（ｂｒｓ，１Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），４．３１（ｄｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０５（ｑ，Ｊ＝１８．８Ｈｚ，１６Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．１２－３．０２（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４４６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－３－２の調製
Ｍ－３－１（１．４ｇ、３．１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１．４ｍＬ、１０．３８ｍｍｏｌ）及び５％Ｐｄ／Ｃ（３３５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（４０ｍＬ／ｍＬ）中の混合物を、Ｈ２雰囲気下で、室温で３時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、濾液を濃縮した。得られた残渣を水で希釈し、沈殿物を濾過した。固体を冷水で洗浄し、高減圧下で乾燥させて、化合物Ｍ－３－２（３３７．３ｍｇ、６０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ９．５５（ｂｒｓ，１Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｓ，２Ｈ），３．４６（ｄｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４６（ｄｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，５．２Ｈｚ，１Ｈ），２．８２－２．７５（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１９４（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－３－３の調製
Ｍ－３－２（３３７．３ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）溶液に、ＳＯＣｌ２（３８０ｕＬ、５．２４ｍｍｏｌ）を０℃、Ｎ２雰囲気下で、滴下した。２時間還流した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、更に精製することなく次のステップで直接使用した（４０６ｍｇ、収率９６％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ９．８３（ｂｒｓ，２Ｈ），９．５６（ｓ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（ｓ，１Ｈ），４．５３－４．４９（ｍ，１Ｈ），４．２８－４．２２（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｓ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．０４－２．９７（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２０８（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－３－４の調製
化合物Ｉｎｔ－１（６４０．９ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（４．０ｍＬ）溶液に、ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の化合物Ｍ－３－３（３５０ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（７５０ｕＬ、４．３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で２時間撹拌した後、混合物を蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（２×５０ｍＬ）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－３－４（６１６ｍｇ、８７％）ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４９３（Ｍ＋＋１）を得た。
化合物Ｍ－３－５の調製
ｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（１８８．５ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を、Ｍ－３－４（６１６ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（１０２．２ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ溶液（６．０ｍＬ）に０℃で添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応物を２ＮのＨＣｌ（５ｍＬ）及びブライン（１０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（１０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－３－５（６５５．２ｍｇ、８６％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６０７（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－３－６の調製
化合物Ｍ－３－５（３０９ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１．５ｍＬ）及びトルエン（３．５ｍＬ）中の溶液に、Ｎ２雰囲気下、－７８℃で、ＤＩＢＡＬ（９９０ｕＬ、０．９９ｍｍｏｌ、トルエン中１．０Ｍ）を滴下した。１．５時間撹拌した後、ＭｅＯＨ（０．４ｍＬ）及び２ＮのＨＣｌ（１５ｍＬ）で、－７８℃で反応物をクエンチし、次いで、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）及びＥＡ（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－３－６（２８０．４ｍｇ、９５％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５７７（Ｍ＋＋１）を得た。
化合物Ｍ－３－７の調製
化合物Ｍ－３－６（２８０．４ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６．０ｍＬ）及び蒸留水（８６ｍＬ）中の溶液に、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４（６７７．２ｍｇ、３．８９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。５時間撹拌した後、トルエンを共溶媒として使用することにより、混合物を減圧下で４回濃縮し、それによって水を除去した。得られた黄色固体を無水ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）に溶解した。塩化アセチル（３４５．６ｕＬ、４．８６ｍｍｏｌ）をこれに添加した。１５分間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を１時間撹拌した。反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えることによってｐＨ７に調整し、蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（２×５０ｍＬ）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－３－７（１０７．７ｍｇ、４２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５５（ｓ，１Ｈ），７．４８－７．３１（ｍ，６Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．８２－６．７６（ｍ，２Ｈ），５．２８－５．１５（ｍ，２Ｈ），４．９３（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．４６（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．９２－３．８６（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．１０－３．０２（ｍ，１Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），０．２１（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５２９（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－３の調製
化合物Ｍ－３－７（５３．４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６．０ｍＬ）溶液に、５％Ｐｄ／Ｃ（１０７．５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。次に、１，４－シクロヘキサジエン（７６４．４ｕＬ、８．０８ｍｍｏｌ）を反応混合物中に添加した。３時間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過してＰｄ／Ｃを除去し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－３（３０．３ｍｇ、６８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５４（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝８．８２Ｈｚ，１Ｈ），６．８７（ｓ，１Ｈ），６．８４－６．７５（ｍ，２Ｈ），５．９８（ｓ，１Ｈ），４．９３（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．９４－３．８５（ｍ，１Ｈ），３．１９（ｄｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．１２－３．０２（ｍ，１Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），０．２１（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４３９（Ｍ＋＋１）。
実施例４．８．７ 化合物Ｉｎｔ－１の調製
Figure 2023531252000122
 化合物Ｉｎｔ－１－１の調製
バニリン酸（５０．０ｇ、０．３０ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（７００ｍＬ）溶液に、ＳＯＣｌ２（２０７ｍＬ、２．８５ｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で滴下した。室温で１５時間撹拌した後、反応物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で７～８のｐＨを有するように調整し、次いで、蒸留水（１００ｍＬ）及びＥＡ（４００ｍＬ）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－１－１（５４．２ｇ、定量的）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６４（ｄｄ，Ｊ＝６．４，１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｓ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０５（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－１－２の調製
化合物Ｉｎｔ－１－１（５４．２ｇ、０．３０ｍｏｌ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下でＫ２ＣＯ３（６１．６ｇ、０．４５ｍｏｌ）及び臭化ベンジル（３９．０ｍＬ、０．３３ｍｏｌ）を添加した。１００℃で６時間撹拌した後、混合物を室温まで冷却し、蒸留水（１００ｍＬ）及びＥＡ（４００ｍＬ）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－１－２（７９．８ｇ、９８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６０（ｄｄ，Ｊ＝６．４，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４４－７．３１（ｍ，５Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．２２（ｓ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－１－３の調製
化合物Ｉｎｔ－１－２（７９．８ｇ、０．２９ｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下で、無水酢酸（５５０ｍＬ）に溶解し、次いで０℃まで冷却した。硝酸銅（ＩＩ）ヘミ（五水和物）（７５．０ｇ、０．３２ｍｏｌ）を何回かに分けて加えた。０℃で６時間撹拌した後、反応物を氷水（８００ｍＬ）でクエンチした。固体を濾過し、蒸留水（１００ｍＬ）及びヘキサン（４００ｍＬ）で洗浄して、化合物Ｉｎｔ－１－３（８５．５ｇ、９２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５２（ｓ，１Ｈ），７．４５－７．３５（ｍ，５Ｈ），７．０８（ｓ，１Ｈ），５．２２（ｓ，２Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－１－４の調製
化合物Ｉｎｔ－１－３（８５．５ｇ、０．２７ｍｏｌ）のＴＨＦ（８００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中の溶液に、２ＮのＮａＯＨ（４０４ｍＬ、０．８１ｍｏｌ）を添加した。６５℃で５時間撹拌した後、反応物を室温まで冷却し、２ＮのＨＣｌ溶液を添加することによって、ｐＨ２を有するように調整し、次いで、蒸留水（１００ｍＬ）及びＥＡ（３００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣固体を収集し、ヘキサンで洗浄して、化合物Ｉｎｔ－１－４（７９．２ｇ、９７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ７．６９（ｓ，１Ｈ），７．４７－７．３５（ｍ，５Ｈ），７．０３（ｓ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－１の調製
化合物Ｉｎｔ－１－４（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５００μＬ）及び無水ＤＣＭ（１．５ｍＬ）中の溶液に、塩化オキサリル（４２．４μＬ）をゆっくりと滴下し、Ｎ２雰囲気下、０℃でＤＭＦを１滴添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。化合物Ｉｎｔ－１を、更に精製することなく次のステップで直接使用した。
化合物Ｉｎｔ－１－５の調製
化合物Ｉｎｔ－１－３（５．０ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３００ｍＬ）溶液に、０℃、Ｎ２雰囲気下で、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中のメタン－スルホン酸（５０ｍＬ）の溶液をゆっくりと滴下し、２時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３溶液でクエンチし、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉｎｔ－１－５（２．５４ｇ、７１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．４８（ｓ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），６．０５（ｓ，１Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ）。
化合物Ｉｎｔ－１－６の調製
Ｎ２雰囲気下、Ｉｎｔ－１－５（２．０ｇ、８．８ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン（２８ｍｌ）溶液に、６ＮのＮａＯＨ溶液（４．４ｍｌ、２６．４ｍｍｏｌ）で処理し、４０℃で４時間撹拌した。反応混合物を０℃まで冷却し、２ＮのＨＣｌで酸性化した。混合物をＥＡ／Ｈ２Ｏで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、高減圧下で乾燥させ、白色固体Ｉｎｔ－１－６（２．０ｇ、定量的）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．６０（ｓ，１Ｈ），７．３０５（ｓ，１Ｈ），７．２４（ｓ，１Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ）
化合物Ｉｎｔ－２の調製
Ｎ２雰囲気下、Ｉｎｔ－１－６（１．８７ｇ、８．７７ｍｍｏｌ）の無水酢酸（１．０ｍｌ、１０．５ｍｍｏｌ）溶液に、ＴＥＡ（１．８ｍｌ、１３．１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．２ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）で処理し、室温で３．５時間撹拌した。反応混合物をＥＡ／Ｈ２Ｏで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、高減圧下で乾燥させ、白色固体Ｉｎｔ－２（２．２ｇ褐色固体、４９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）： δ ７．９８１（ｓ，１Ｈ），７．４５１（ｓ，１Ｈ），３．９３３（ｓ，３Ｈ），２．２９４（ｓ，３Ｈ）。
実施例４．８．８ 化合物Ｍ－４の調製
Figure 2023531252000123
 化合物Ｍ－４－１の調製
チエニルアラニン（５００ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ）の蒸留水（５．０ｍＬ）溶液に、濃ＨＣｌ（２０６ｕＬ）を滴下し、Ｎ２雰囲気下、０℃で撹拌し、次いでホルムアルデヒド（３７％、２６１ｕＬ、３．５ｍｍｏｌ）をこれに添加した。混合物を一晩還流させた。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＩＰＡ（３．０ｍＬ）に懸濁させ、４ＭのＨＣｌ（１，４－ジキソアン（ｄｉｘｏａｎｅ）中、１．０ｍＬ）をこれに添加した。２時間撹拌した後、固体を濾過し、ＩＰＡ（５ｍＬ）、エーテル（２０ｍＬ）で洗浄して、化合物Ｍ－４－１（４９５．７ｍｇ、７７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ９．９５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４８－４．４４（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１８（ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．１７－３．１０（ｍ，１Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１８４（Ｍ＋＋１）．
化合物Ｍ－４－２の調製
化合物Ｍ－４－１（４９５．７ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１０．０ｍＬ）にＮ２雰囲気下で溶解し、次いで０℃まで冷却した。ＳＯＣｌ２（４９１．３ｕＬ、６．７６ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。次いで、反応混合物を３時間還流させた。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をエーテル（５ｍＬ×２）で洗浄して、化合物Ｍ－４－２（５２１．５ｍｇ、９９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．２２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６５－４．６１（ｍ，１Ｈ），４．３０（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．２１－３．１４，（ｍ，１Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１９８（Ｍ＋＋１）．
化合物Ｍ－４－３の調製
化合物Ｉｎｔ－１（８５６．５ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（３．０ｍｌ）溶液に、化合物Ｍ－４－２（５１８．５ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）の添加を、ＤＭＦ（３．０ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（７７２．８ｕＬ、４．４４ｍｍｏｌ）に０℃で溶解した。次いで、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応が完了した後。蒸留水（２０ｍＬ）及びＥＡ（５０ｍＬ×２）を反応混合物中に添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－４－３（８８８．５ｍｇ、８９％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４８３（Ｍ＋＋１）．
化合物Ｍ－４－４の調製
化合物Ｍ－４－３（８８０ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（５．０ｍＬ）及びトルエン（１５．０ｍＬ）中の溶液に、ＤＩＢＡＬ（３．６ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ、トルエン中１．０Ｍ）を、Ｎ２雰囲気下、－７８℃で滴下した。反応混合物を－７８℃で３時間撹拌した。反応物を、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）、２ＮのＨＣｌ（２０．０ｍＬ）で、－７８℃でクエンチした。次いで、蒸留水（２０ｍＬ）及びＥＡ（５０ｍＬ×２）を反応混合物中に添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－４－４（７０１．９ｍｇ、８５％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４５３（Ｍ＋＋１）．
化合物Ｍ－４－５の調製
化合物Ｍ－４－４（７００ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５．０ｍＬ）及び蒸留水（３．０ｍＬ）中の溶液に、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４（２．２ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を室温で４時間かけて添加した。反応が完了した後。反応物を、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）でクエンチした。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をトルエン（２０ｍＬ）に懸濁させ、蒸発させて、残留水を除去するのに役立てた。得られた白色固体を、高減圧下で一晩放置することによって更に完全に乾燥させた。残渣を無水ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に懸濁させ、続いて、塩化アセチル（１．１ｍＬ、１５．５ｍｍｏｌ）の添加により添加した。１５分後、濁った溶液を濾過し、無水ＭｅＯＨ（５ｍＬ×２）で固体を洗浄した。濾液を２時間撹拌した。反応は完了した。反応混合物をＮａＨＣＯ３溶液（ｐＨ約７）でクエンチした。蒸留水（２０ｍＬ）及びＥＡ（５０ｍＬ×２）を反応混合物中に添加した後。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－４－５（７０１．９ｍｇ、８５％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５５（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｍ，５Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），５．２６－５．１４（ｍ，２Ｈ），４．９８（ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０８－４．０２（ｍ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．３２－３．２６（ｍ，１Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４５３（Ｍ＋＋１）．
化合物Ｍ－４の調製
化合物Ｍ－４－５（６０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（３ｍＬ）溶液に、０℃で冷却した。次に、ＤＣＭ（２．０ｍＬ）中のメタンスルホン酸（７００μＬ）を添加し、０℃で２時間撹拌した。反応が完了した後。反応物をＮａＨＣＯ３溶液（ｐＨ約７）でクエンチした。次いで、蒸留水（５ｍＬ）及びＥＡ（２０ｍＬ×２）を反応混合物中に添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－４（３８．３ｍｇ、８２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５８（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），６．０６（ｓ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１０－４．０４（ｍ，１Ｈ），３．９９（ｓ，３Ｈ），３．３２－３．２６（ｍ，１Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３１５（Ｍ＋１）．
化合物Ｍ－４－６の調製
Ｍ－４－２（１ｇ、４．２８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ２０ｍｌ溶液に、０℃、Ｎ２雰囲気下で、ＴＨＦ中の１Ｍ ＬＡＨ溶液（５．３１ｍｌ、５．３１ｍｍｏｌ）で処理し、１５時間撹拌した。反応混合物を水（５．３ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ（５．３ｍｌ）、Ｈ２Ｏ（１６．０ｍＬ）でクエンチし、３０分間撹拌した。無機固体を濾過し、ＥＡで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物Ｍ－４－６（６５２ｍｇ、３．８５ｍｍｏｌ、９０％）を赤色固体として得て、それを更に精製することなく使用した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．０８（ｄ，Ｊ＝４．８，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０１－３．８８（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｄｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５５（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．１３－３．０７（ｍ，１Ｈ），２．７８－２．７４（ｍ，１Ｈ），２．６０－２．５１（ｍ，１Ｈ）；ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：１７０．０（Ｍ＋１）。
化合物Ｍ－４－７の調製
Ｍ－４－６（７００ｍｇ、４．１４ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（２０ｍｌ）溶液に、０℃、Ｎ２雰囲気下で、イミダゾール（８４４ｍｇ、１２．４１ｍｍｏｌ）、ＴＢＤＭＳ－Ｃｌ（６８６ｍｇ、４．５５ｍｍｏｌ）で処理し、室温で４時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）、ＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－４－７（７９２ｍｇ、６７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．０７（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０４－３．９２（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｄｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｄｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．０５－３．００（ｍ，１Ｈ），２．７５－２．７１（ｍ，１Ｈ），２．６５－２．５９（ｍ，１Ｈ）；ＥＴ－ＭＳ ｍ／ｚ：２８４．１（Ｍ＋１）。
化合物Ｍ－４－８の調製
Ｉｎｔ－２（５３６ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）及びＭ－４－７（６６６ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１．８ｍｌ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で、ＤＩＰＥＡ（０．８５ｍｌ、４．８９ｍｍｏｌ）で処理し、室温で３時間撹拌した。反応混合物をＥＡ／Ｈ２Ｏで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。反応混合物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＨＥＸ：１／１）によって精製して、黄色固体Ｍ－４－８（７５８．５ｍｇ ７６％）、ＥＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５２１（Ｍ＋＋１）を得た。
化合物Ｍ－４ａの調製
Ｍ－４－８（２００ｍｇ、０．３８４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４．５ｍｌ）溶液を、０℃、Ｎ２雰囲気下で、Ｋ２ＣＯ３（６３．７ｍｇ、０．４６１ｍｍｏｌ）で処理し、２０分間撹拌した。反応混合物をＥＡ／Ｈ２Ｏで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、高減圧下で乾燥させ、黄色固体Ｍ－４ａ（１８９．８ｍｇ 定量的）、ＥＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４７９（Ｍ＋＋１）を得た。
以下の表３は、実施例４．８．７に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された単量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000124
Figure 2023531252000125
実施例４．８．９ Ｍ－１０及びＭ－１０ａの調製
Figure 2023531252000126
 化合物Ｍ－１０－１の調製
化合物ＭＣＢＩ－単量体（３３０ｍｇ、０．９０７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５．０ｍＬ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（０．５１０ｍＬ、３．６３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。ＳＯ２Ｆ２気体を風船によって導入し、混合物を室温で４５分間撹拌した。混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１０－１（３０６ｍｇ、７６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．２０－７．８２（ｍ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１８－４．１１（ｍ，１Ｈ），４．０１－３．８９（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．５０（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），１．６０（ｓ，９Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４６８（Ｍ＋＋Ｎａ）。
化合物Ｍ－１０－２の調製
化合物Ｍ－１０－１（１５０ｍｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５０ｍＬ）溶液に、ＯＨＰＡＳ－Ｄ１ａ（２４７ｍｇ、０．３５３ｍｍｏｌ）及びＢＥＭＰ（８４μＬ、０．３０２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下で、０℃で添加した。反応混合物を室温で４０分間撹拌した。反応物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１０－２（３４４ｍｇ、９１％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１２４（Ｍ＋）。
化合物Ｍ－１０の調製
化合物Ｍ－１０－２（１４０ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６．０ｍＬ）溶液に、１，４－ジオキサン中の塩化水素４．０Ｍ溶液（２．０ｍＬ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。１．５時間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭで希釈し、減圧下で濃縮した。化合物Ｍ－１０を、更に精製することなく次のステップで使用した。（１２８ｍｇ、９７％）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０２４（Ｍ＋）。
化合物Ｍ－１０－３の調製
化合物Ｍ－１０－１（３０．２ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３０ｍＬ）溶液に、ＯＨＰＡＳ－Ｄ１３（３７．８ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）、ＢＥＭＰ（２３．５μＬ、０．０８１ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（９．３５ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｍ－１０－３（１０ｍｇ、１５％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：９８４（Ｍ＋）。
化合物Ｍ－１０－４の調製
化合物Ｍ－１０－３（３２．１ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）のピリジン（０．６５ｍＬ）溶液に、無水酢酸（２４．７μＬ、０．２６１ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（０．４０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｍ－１０－４（３５．０ｍｇ、９７％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１１０（Ｍ＋）。
化合物Ｍ－１０ａの調製
化合物Ｍ－１０－４（１９．８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．５０ｍＬ）溶液に、１，４－ジオキサン中の塩化水素４．０Ｍ溶液（０．２０ｍＬ）を、Ｎ２雰囲気下で、０℃で添加した。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭで希釈し、減圧下で濃縮した。化合物Ｍ－１０ａを、更に精製することなく次のステップで使用した。（１４．５ｍｇ、７８％）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０１０（Ｍ＋）。
実施例４．８．１０ Ｍ－１１の調製
Figure 2023531252000127
 化合物Ｍ－１１－１の調製
ナトリウムメトキシドの０．５Ｍメタノール溶液（５２．８ｍＬ、２６．４ｍｍｏｌ）に、３，４，５－トリメトキシベンズアルデヒド（６５０ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ）及びアジド酢酸メチル（３．８１ｇ、３３．１ｍｍｏｌ、ＣＡＳ Ｎｏ．１８１６－９２－８）のＭｅＯＨ（５．３０ｍＬ）溶液を、Ｎ２雰囲気下、－２０℃で添加した。反応混合物を０℃で６時間撹拌した。冷水を添加した後、得られた沈殿物を濾過によって収集した。固体を水で洗浄し、高減圧下で乾燥させて、化合物Ｍ－１１－１（６４０ｍｇ、６６％）を黄色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．１０（ｓ，２Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｓ，６Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ）
化合物Ｍ－１１－２の調製
Ｎ２雰囲気下、室温で、化合物Ｍ－１１－１（１００ｍｇ、０．３４１ｍｍｏｌ）のｐ－キシレン（３．４０ｍＬ）溶液に。反応混合物を１８０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を室温で冷却し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１１－２（９２．０ｍｇ、定量的）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．１０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），４．０８（ｓ，３Ｈ），３．９３（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，６Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２６６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１１の調製
化合物Ｍ－１１－２（１．０ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）のメタノール／Ｈ２Ｏ／１，４－ジオキサン（１０．０ｍＬ／５．００ｍＬ／１０．０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（３１６ｍｇ、７．５４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。反応物をＨＣｌでクエンチした後、得られた沈殿物を濾過によって収集した。固体を水で洗浄し、高減圧下で乾燥させて、化合物Ｍ－１１（８３０ｍｇ、８８％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．２４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），４．０９（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２５２（Ｍ＋＋１）。
実施例４．８．１１ Ｍ－１２の調製
Figure 2023531252000128
 化合物Ｍ－１２－１の調製
イソバニリン（５．０ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）の１．６ＮのＮａＯＨ溶液（４１．１ｍＬ）溶液に、１，２－ジブロモエタン（１７．１ｍＬ、１９７ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を一晩還流させた。反応が完了した後、混合物を室温で冷却した。反応混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１２－１（５．６０ｇ、６６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．８５（ｓ，１Ｈ），７．５３－７．５０（ｍ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２６０（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１２－２及びＭ－１２－３は、実施例４．８．１０の化合物Ｍ－１１－１及びＭ－１１－２の調製方法と同様の方式で合成した。
化合物Ｍ－１２－２
収率１８％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），４．３８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）
化合物Ｍ－１２－３
収率７３％
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．１４（ｓ，１Ｈ），７．１１－７．１０（ｍ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３２９（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１２－４の調製
化合物Ｍ－１２－３（１００ｍｇ、０．３０５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．５０ｍＬ）溶液に、ジメチルアミン（０．７７ｍＬ、１．５３ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（４２．２ｍｇ、０．３０５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１２－４（９０．０ｍｇ、定量的）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２９３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１２の調製
Ｎ２雰囲気下、０℃で、化合物Ｍ－１２－４（４５．０ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）のメタノール（１．０ｍＬ）溶液に、２ＮのＮａＯＨ溶液（０．９２ｍＬ、１．８５ｍｍｏｌ）で処理し、一晩撹拌した。混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｍ－１２（５３ｍｇ、定量的）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ １１．６（ｓ，１Ｈ），７．２４（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｓ，１Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４８－３．４４（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｓ，６Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２７９（Ｍ＋＋１）。
以下の表４は、実施例４．８．９に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された単量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000129
Figure 2023531252000130
実施例４．８．１２ Ｍ－１９の調製
Figure 2023531252000131
 化合物Ｍ－１９－１の調製
化合物Ｍ－１８（９０ｍｇ、０．４１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１９３ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）及び臭化ベンジル（０．０７９ｍＬ、０．６５８ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。反応物を、Ｎ２雰囲気下、室温で４時間撹拌した。反応が完了した後、反応混合物をＥＡ（５０ｍＬ×３）、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－１９－１（９９ｍｇ、７８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．０６（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７－７．３６（ｍ，５Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），２．８２（ｓ，３Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３１０（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－１９－２の調製
化合物Ｍ－１９－１（５ｍｇ、０．４１１ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｉｎｔ－ＴＧ（６６．５ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ）、酸化銀（５６．３ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）、及びモレキュラーシーブ（２００ｍｇ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で加えた。同じ温度で１８時間撹拌した後、反応物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通して濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｍ－１９－２（３．２ｍｇ、３１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ １０．９５（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７－７．３３（ｍ，５Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．６１（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．４９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），５．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１７（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３１－４．０５（ｍ，３Ｈ），２．７１（ｓ，３Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６６２（Ｍ＋＋Ｎａ）。
化合物Ｍ－１９の調製
化合物Ｍ－１９－２（３．２ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（５％、１ｍｇ、０．０００５ｍｍｏｌ）をＨ２下、室温で添加した。混合物を１時間撹拌し、ＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通して濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。化合物Ｍ－１９を、更に精製することなく次のステップで直接使用した（２．７ｍｇ、１００％）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５７２（Ｍ＋＋Ｎａ）。
以下の表５は、実施例４．８．１２に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された単量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000132
実施例４．８．１３ Ｍ－２２の調製
Figure 2023531252000133
 化合物Ｍ－２２－１の調製
ＭＣＢＩ－単量体（１００ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（５．５ｍＬ）溶液に、塩化水素溶液（３ｍＬ、ジオキサン中の４．０Ｍ）をＮ２雰囲気下で、０℃で添加した。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。化合物Ｍ－２２－１（８２ｍｇ、１００％）を生成し、それを更に精製することなく使用した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２６４（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２２の調製
Ｍ－２２－１（７．０ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、化合物Ｍ－１１（８．６ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（１３．２ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。同じ温度で２時間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し、化合物Ｍ－２２（６．５ｍｇ、５８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ－ｄ４）δ ８．０９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０６－６．９８（ｍ，４Ｈ），４．６５（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．１０－４．０７（ｍ，１Ｈ），４．０５（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．６４（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，９．２Ｈｚ，１Ｈ）。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４９６（Ｍ＋）。
以下の表６は、実施例４．８．１３に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000134
Figure 2023531252000135
Figure 2023531252000136
実施例４．８．１４ Ｍ－２９の調製
Figure 2023531252000137
 化合物Ｍ－２９－１の調製
２－アミノ－５－ニトロピリジン（５．０ｇ、３５．９ｍｍｏｌ）のエタノール（７２．０ｍＬ）溶液に、ブロモピルビン酸エチル（６．３１ｍＬ、５０．３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。混合物を一晩還流させた。反応が完了した後、混合物を室温で冷却した。冷水を添加した後、得られた沈殿物を濾過によって収集した。固体を水で洗浄し、高減圧下で乾燥させて、化合物Ｍ－２９－１（６．２８ｇ、７４％）を褐色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．３０－９．２９（ｍ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄｄ，Ｊ＝１０，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），４．５３－４．４７（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２３６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｍ－２９－２の調製
化合物Ｍ－２９－１（２．０ｇ、８．５０ｍｍｏｌ）のメタノール（２０．０ｍＬ）懸濁液を０℃まで冷却し、塩酸（６．４ｍＬ）を１滴ずつ添加し、続いて亜鉛（２．２２ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応混合物を３０分間撹拌した。次に、メタノール（１４ｍＬ）を添加し、濃縮アンモニアで反応物をクエンチした。懸濁液を濾過し、残渣をメタノールで洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、残渣をクロロホルム（７０ｍＬ）、水（３０ｍＬ）、及び濃縮アンモニア（３０ｍＬ、３０％溶液）の混合物に懸濁させた。混合物を透明になるまで撹拌した。層を分離し、水層をクロロホルムで１回抽出した。合わせた有機層を、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。化合物Ｍ－２９－２を、更に精製することなく次のステップで使用した。（１．１２ｇ、６４％）
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．０１（ｓ，１Ｈ），７．５４－７．５１（ｍ，２Ｈ），６．８６（ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｍ，２Ｈ），３．５３（ｓ，２Ｈ），１．４７（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）
化合物Ｍ－２９－３の調製
Ｍ－２９－２（１．１２ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）のＤＭＡ（１８ｍＬ）溶液に、化合物Ｉｎｔ－ＴＧ４（９９５ｍｇ、５．４６ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ・ＨＣｌ（１．２６ｇ、６．５５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。続いて、反応混合物を濃縮した。残渣を水及びＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、層を分離した。有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｍ－２９－３（９２７ｍｇ、４６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ９．３３－９．３２（ｍ，１Ｈ），８．４５（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９７－７．９３（ｍ，２Ｈ），７．６１－７．５２（ｍ，２Ｈ），７．１８－７．１５（ｍ，２Ｈ），５．２８（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｓ，１Ｈ），４．４４－４．３８（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ），１．４１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）
化合物Ｍ－２９の調製
Ｍ－２９－３（３００ｍｇ、０．８１２ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン／Ｈ２Ｏ（１．５ｍＬ／１．５ｍＬ）溶液に、２ＮのＮａＯＨ（３．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を７０℃で１時間撹拌した。混合物を７０℃で１時間撹拌した。次に、混合物を室温まで冷却し、水を添加し、混合物を４Ｍ塩酸溶液で酸性化した。得られた懸濁液を濾過し、残渣を乾燥させて、化合物Ｍ－２９（２４２ｍｇ、８７％）を黄褐色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＤＭＳＯ）δ １０．３７（ｓ，１Ｈ），９．４７（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｔ，Ｊ＝１４Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３４２（Ｍ＋＋１）。
実施例４．８．１５ Ｍ－３０の調製
Figure 2023531252000138
 化合物Ｍ－３０は、実施例４．８．１３に記載したものと同様の方法によって合成した。
収率２３％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５８８（Ｍ＋＋１）。
実施例４．９．ベンゾジアゼピン二量体誘導体の調製
実施例４．９．１ Ｌ－１の調製
Figure 2023531252000139
 化合物Ｌ－１－１の調製
５－ヒドロキシイソフタル酸ジメチル（５ｇ、２３．７９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液に、ＬＡＨ（３．６ｇ、９５．１５ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下で、－７８℃で滴下した。反応混合物を室温で１７時間撹拌した。反応が完了した後、１５％ＮａＯＨ溶液（４ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（８ｍＬ）及びＥＡ（１００ｍＬ）を添加し、次いで、反応混合物を１時間撹拌した。混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１－１（３．０２ｇ、８２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ９．２１（ｓ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），６．５８（ｓ，２Ｈ），５．０７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，４Ｈ）。
化合物Ｌ－１－２の調製
化合物Ｌ－１－１（２ｇ、１２．９７ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２雰囲気下、ＨＢｒ（５．０ｍＬ、ＡｃＯＨ中３３％）に溶解した。６０℃で１８時間撹拌した後、ＮａＨＣＯ３溶液（ｐＨ約８）を添加することによって、反応物をクエンチした。次いで、蒸留水（５０ｍＬ）及びＥＡ（１００ｍＬ×２）を反応混合物中に添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１－２（２．９ｇ、８０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ６．９９（ｓ，１Ｈ），６．８１（ｓ，２Ｈ），４．８５（ｓ，１Ｈ），４．４１（ｓ，２Ｈ）。
化合物Ｌ－１の調製
化合物Ｌ－１－２（１００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（３ｍＬ）溶液に、イミダゾール（２７ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）及びＴＢＤＭＳ－Ｃｌ（５９ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。１６時間撹拌した後、蒸留水（５０ｍＬ）及びＥＡ（１００ｍＬ）を反応混合物中に添加した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－１（１１０ｍｇ、７９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．００（ｓ，１Ｈ），６．８０（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｓ，４Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），０．２１（ｓ，６Ｈ）。
実施例４．９．２ Ｌ－７の調製
Figure 2023531252000140
 化合物Ｌ－７－１の調製
３，５－ピリジンジカルボン酸（１．０ｇ、５．９８ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、０℃、Ｎ２雰囲気下で、三フッ化ホウ素テトラヒドロフラン複合体（３０．０ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌ、１Ｍ ＴＨＦ）を添加した。混合物を室温まで加温し、１８時間撹拌した。混合物を２ＮのＨＣｌでｐＨ２になるまでクエンチし、蒸留水（２０ｍＬ）及びＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、分取ＴＬＣによって精製して、化合物Ｌ－７－１（３６３ｍｇ、４８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ８．３８（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），５．５９（ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）。
化合物Ｌ－７は、実施例４．９．１に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｌ－７の調製
収率６５％；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ８．５６（ｓ，２Ｈ），７．７７（ｓ，１Ｈ），４．４７（ｓ，２Ｈ）。
実施例４．９．３ Ｌ－８の調製
Figure 2023531252000141
 化合物Ｌ－８－１の調製
４－クロロピリジン－ヒロクロリド（４－ｃｈｌｏｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ－ｈｙｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１．０ｇ、６．６７ｍｍｏｌ）及びジエタノールアミン（１．０５ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１２ｍＬ）溶液を、室温で、Ｎ２雰囲気下で、ＮａＯＨ（１．０７ｇ、２６．６７ｍｍｏｌ）で処理し、マイクロ波反応器を使用して１時間かけて１１０℃まで加熱した。反応物を蒸留水（１８ｍＬ）／メタノール（１０ｍＬ）でクエンチした後、ＥＡ（２００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｌ－８－１（１６０ｍｇ、１３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ８．１０（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），６．８３（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．９１（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５７（ｓ，８Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１８３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｌ－８は、実施例４．９．１に記載したものと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｌ－８の調製
収率７０％；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：３０９（Ｍ＋＋１）。
実施例４．９．４ Ｌ－９の調製
Figure 2023531252000142
 化合物Ｌ－９は、実施例３．５の化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ６－１の調製方法と同様の様式によって合成した。
収率７３％；１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．４７（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｓ，２Ｈ），４．４６（ｓ，４Ｈ）。
実施例４．９．５ Ｌ－１０の調製
Figure 2023531252000143
 化合物Ｌ－１０は、実施例４．９．１の化合物Ｌ－１－２の調製方法と同様の様式によって合成した。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２４５（Ｍ＋＋１）。
実施例４．９．６ 二量体誘導体の調製
Figure 2023531252000144
 化合物Ｍ－１（３１ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及び化合物Ｌ－１（２０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１４ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。室温で７時間撹拌した後、反応混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、５０×２５０ｍｍ、流速：４０ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ８０：２０～２０：８０、４５分間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｄ－３（１３ｍｇ、３０％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７３４（Ｍ＋＋１）。
実施例４．９．７ 二量体誘導体の調製
Figure 2023531252000145
 化合物Ｄ－１４は、実施例４．９．６の化合物Ｄ－１の合成と同様の方式で合成した。
化合物Ｄ－１４－１
収率３２％、白色固体。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：４９４（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｄ－１４
収率７％、白色固体。 ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７２５（Ｍ＋＋１）
以下の表７は、実施例４．９．６又は４．９．７に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000146
Figure 2023531252000147
Figure 2023531252000148
実施例４．９．８ 二量体誘導体の調製
Figure 2023531252000149
 化合物Ｄ－１０１－１の調製
化合物Ｍ－１（１００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及び１，３，５－トリス（ブロモメチル）ベンゼン（５７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４５ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、室温で添加した。４時間撹拌した後、ＥＡ（１００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）及び２ＮのＨＣｌ水溶液（５ｍＬ）を添加して抽出を行い、得られた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｄ－１０１－１（５４ｍｇ、４２％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８１２（Ｍ＋）。
化合物Ｄ－１０１の調製
化合物Ｄ－１０１－１（５０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ジメチルアミン（１ｍＬ）に溶解した。１時間撹拌した後、混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、５０×２５０ｍｍ、流速：４０ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ８０：２０～２０：８０、４５分間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｄ－１０１（２．２ｍｇ、１７％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７７６（Ｍ＋＋１）。
実施例４．９．９ 二量体誘導体の調製
Figure 2023531252000150
 化合物Ｄ－１１１－１の調製
化合物Ｍ－４（１０ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）及び１，３，５－トリス（ブロモメチル）ベンゼン（１１．３５ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）のＤＭＦ（１ｍＬ）黄色溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、Ｋ２ＣＯ３（４．４ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）で処理し、５時間撹拌した。反応混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、２１．２×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ９５：５～５：９５、１時間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｄ－１１１－１（２０．９ｍｇ、２２％）を白色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５９１（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｄ－１１１－２の調製
化合物Ｄ－１１１－１（２０ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）及びＭ－２（１８．４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、Ｋ２ＣＯ３（４．７ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）で処理し、５時間撹拌した。反応混合物をＴＨＦ中の１Ｍジメチルアミン（０．５ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌した。反応混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、２１．２×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ９５：５～５：９５、１時間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｄ－１１１－２（３．４ｍｇ、９．８％）を白色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０１８（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｄ－１１１の調製
化合物Ｄ－１１１－２（３．４ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ）及び１０％Ｃｄ／Ｐｂ（１００ｍｇ）のＴＨＦ（０．５ｍＬ）溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、１ＮのＮＨ４ＯＡｃ（３００μＬ）で処理し、３日間撹拌した。反応混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、２１．２×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ９５：５～５：９５、１時間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｄ－１１１（０．８ｍｇ、２９％）を白色固体として得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８２４（Ｍ＋＋１）。
以下の表８は、実施例４．９．８又は４．９．９に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000151
Figure 2023531252000152
Figure 2023531252000153
実施例４．９．１０ Ｄ－１１２の調製
Figure 2023531252000154
 化合物Ｄ－１１２－１の調製
１，３，５－トリス（ブロモメチル）ベンゼン（３．９ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）、化合物Ｉｎｔ－２（４．９６ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、室温で、Ｋ２ＣＯ３（４４．２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）で処理し、６時間撹拌した。反応混合物をジメチルアミン（５．０ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌した。反応混合物を蒸留水（５０ｍＬ）及びＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｄ－１１２－１（２．７４ｇ、４１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．５０（ｓ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，３Ｈ），７．０８（ｓ，２Ｈ），５．２０（ｓ，４Ｈ），３．９７（ｓ，６Ｈ），３．９１（ｓ，６Ｈ），３．４７（ｓ，２Ｈ），２．２５（ｓ ６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：６１４（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｄ－１１２－２の調製
化合物Ｄ－１１２－１（２．７４ｇ、４．４６ｍｏｌ）のＴＨＦ（７５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５０ｍＬ）中の溶液に、ＬｉＯＨ（９３７ｍｇ、２２．３３ｍｏｌ）を添加した。５時間撹拌した後。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を０℃まで冷却し、２ＮのＨＣｌ溶液を添加することによってｐＨ２を有するように調整し、次いで固体を濾過し、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）、ＥＡ（１００ｍＬ）で洗浄して、化合物Ｄ－１１２－２（２．５ｇ、９６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ７．７１（ｓ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，３Ｈ），７．３２（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，４Ｈ），３．９１（ｓ，６Ｈ），２．６７（ｓ，６Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５８６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｄ－１１２－３の調製
化合物Ｄ－１１２－２（１．５ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）、化合物Ｍ－４ａ（１．５２ｇ、５．３８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０．０ｍｌ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＰｙＢｏｐ（３．５ｇ、６．４０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２．２ｍＬ、１２．８ｍｍｏｌ）で処理し、２時間撹拌した。反応混合物を蒸留水（１００ｍＬ）及びＥＡ（１００ｍＬ×２）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｄ－１１２－３（２．７ｇ、９４％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１１１６（Ｍ＋）を得た。
化合物Ｄ－１１２－４の調製
化合物Ｄ－１１２－３（２．７ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）のＥＡ（５０．０ｍｌ）溶液に、Ｈ２下、室温で、５％Ｐｄ／Ｃ（５．１ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通して濾過し、次いで、減圧下で濃縮して、化合物Ｄ－１１２－４（１．８７ｇ、９３％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０５６（Ｍ＋）を得た。
化合物Ｄ－１１２－５の調製
化合物Ｄ－１１２－４（１００ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）、Ｉｎｔ－３（１８９ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（３．０ｍｌ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＨＯＢＴ（１３．０ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３６ｕＬ、０．２０８ｍｍｏｌ）で処理し、４４時間撹拌した。反応混合物を蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｄ－１１２－５（７６ｍｇ、４０％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２０１７（Ｍ＋）を得た。
化合物Ｄ－１１２－６の調製
化合物Ｄ－１１２－５（１１６．７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（２．０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（８００ｕＬ）中の溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で、ＴＦＡ／ＡＣＮ（１．０ｍＬ）で処理し、２時間撹拌した。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｄ－１１２－６（８３．３ｍｇ、８０％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１７８８（Ｍ＋）を得た。
化合物Ｄ－２の調製
化合物Ｄ－１１２－６（８３．３ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（３．０ｍｌ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（４５．４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）で処理し、４時間撹拌した。反応混合物を蒸留水（１０ｍＬ）及びＥＡ（３０ｍＬ×２）で希釈した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｄ－１１２（５９．３ｍｇ、７１％）、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１７８４（Ｍ＋）を得た。
以下の表９は、実施例４．９．１０に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000155
Figure 2023531252000156
実施例４．１０．
実施例４．１０．１ Ｔ－Ｉｎｔ－１の調製
Figure 2023531252000157
 化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１－１の調製
化合物Ｄ－７（１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）及び化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１（１１ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（１ｍＬ）溶液に、ＢＥＭＰ（０．８ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１－１（１２ｍｇ、６３％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３８２（Ｍ＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１の調製
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１－１（１０ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。室温で２時間撹拌した後、混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１（７．４ｍｇ、８５％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２１４（Ｍ＋１）。
以下の表１０は、実施例４．１０．１に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000158
Figure 2023531252000159
Figure 2023531252000160
実施例４．１０．２ Ｔ－Ｉｎｔ－１０１の調製
Figure 2023531252000161
 化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０１－１の調製
化合物Ｄ－１０１（８．０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）及び化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ３（１１．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（５．４μＬ、０．０３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。室温で６時間撹拌した後、反応混合物を、ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０１－１（１１．９ｍｇ、７１％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６３０（Ｍ＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０１の調製
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０１－１（１１．９ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で添加した。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を、ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、５０×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ８０：２０～２０：８０、４５分間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０１（６．４ｍｇ、６０％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４６２（Ｍ＋１）。
実施例４．１０．３ Ｔ－Ｉｎｔ－１０２、Ｔ－Ｉｎｔ－１０４及びＴ－Ｉｎｔ－１０５の調製
Figure 2023531252000162
 Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－２及びＴ－Ｉｎｔ－１０３－２は、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０１の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－１の調製
白色固体として収率７０％。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１７０４（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－２の調製
収率８１％、白色固体
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１５３６（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０３－１の調製
収率８４％、黄色固体
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２０５７（Ｍ＋＋１）、１０２９（Ｍ／２＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０３－２の調製
収率８４％、無色油状物
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１８８９（Ｍ＋＋１）、９４５（Ｍ／２＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－３の調製
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－２（５６ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、０℃で、ＤＣＭ（１ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ）で処理し、２時間撹拌した。反応混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、２１．２×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ９５：５～５：９５、１時間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－３（４４．４ｍｇ、８２％）を象牙色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４３６（Ｍ＋＋１）。
Ｔ－Ｉｎｔ－１０３－３は、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－３の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０３－３の調製
収率７４％、象牙色固体
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１７８９（Ｍ＋＋１）、８９５（Ｍ／２＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２の調製
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－３（５０ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）及びＢＣＮ－ＰＮＰ（１１ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＭＦ（３．０ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＤＩＰＥＡ（１１ｕＬ、０．０６８ｍｍｏｌ、２．０当量）で処理し、２時間撹拌した。混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、２１．２×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ９５：５～５：９５、１時間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２（２２ｍｇ、３９％）をベージュ色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６１２（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０４－１の調製
Ｔ－Ｉｎｔ－１０３－３（２０ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）及びＬ－６－５（５．１ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）均質溶液を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＤＩＰＥＡ（７．３ｕＬ、０．０４２ｍｍｏｌ、３．０当量）で処理し、２時間撹拌した。混合物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｎｏｖａｌ ＯＤＳ－２ １０ｕｍ、１００Å、２１．２×２５０ｍｍ、流速：１５ｍＬ／分、Ａ緩衝液 ０．１％ギ酸水溶液／Ｂ緩衝液 ０．１％ギ酸のＡＣＮ溶液、方法勾配、溶媒Ａ：溶媒Ｂ ９５：５～５：９５、１時間、波長２１４ｎｍ）によって精製し、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０４－１（１９．９ｍｇ、８５％）を黄色固体として得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６８７（Ｍ＋＋１）、８４４（Ｍ／２＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０４の調製
Ｔ－Ｉｎｔ－１０４は、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－３の調製方法と同様の様式によって合成した。
収率７２％、象牙色固体
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１７８９（Ｍ＋＋１）、８９５（Ｍ／２＋＋１）。
Ｔ－Ｉｎｔ－１０５は、化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０４の調製方法と同様の様式によって合成した。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０５－１の調製
収率７５％、象牙色固体
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：２０４０（Ｍ＋＋１）、１０１０（Ｍ／２＋＋１）。
化合物Ｔ－Ｉｎｔ－１０５の調製
収率６０％、象牙色固体
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１９４０（Ｍ＋＋１）、９７０（Ｍ／２＋＋１）。
以下の表１１は、実施例４．１０．１に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000163
Figure 2023531252000164
Figure 2023531252000165
Figure 2023531252000166
実施例４．１１．
実施例４．１１．１ Ｔ－１の調製
Figure 2023531252000167
 Ｔ－Ｉｎｔ－１（２．３ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２ｍＬ）溶液に、５ｍｍｏｌの濃度を有するように調製した（ＢｉｍＣ４Ａ）３を添加した。次に、１００ｍｍｏｌの濃度を有するように調製したＣｕＢｒを、１８９μＬの量で、これに添加した。次いで、混合物を２分間撹拌した。化合物ＭＰＳ－Ｄ１－２（３．７ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（６７４μＬ）に溶解し、これに添加し、その後、１０分間撹拌した。反応が完了した後、混合溶液を分離し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－１（１．０ｍｇ、３２％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１８６８（Ｍ＋＋１）。
以下の表１２は、実施例４．１１．１に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000168
Figure 2023531252000169
Figure 2023531252000170
Figure 2023531252000171
Figure 2023531252000172
Figure 2023531252000173
Figure 2023531252000174
Figure 2023531252000175
Figure 2023531252000176
Figure 2023531252000177
Figure 2023531252000178
Figure 2023531252000179
Figure 2023531252000180
Figure 2023531252000181
Figure 2023531252000182
Figure 2023531252000183
実施例４．１１．２ Ａ４、Ａ５、Ａ６、及びＡ７の調製
Figure 2023531252000184
 化合物Ａ－１、Ａ－２及びＡ－３の調製
各基質は、韓国特許出願公開第１０－２０１５－０１３７０１５号の実施例２及び３に記載されている方法と同様の方法で調製することによって得られた。
化合物Ａ－４、Ａ－５、Ａ－６、及びＡ－７は、実施例３．２又は実施例４．１．１において化合物ＯＨＰＡＳ－Ｄ１又はＱ－１を調製する同様の合成経路によって調製した。
化合物Ａ－４の調製
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４２６（Ｍ＋１）。
化合物Ａ－５の調製
収率７５％、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４５７（Ｍ＋１）。
化合物Ａ－６の調製
収率６３％、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２７２（Ｍ＋１）。
化合物Ａ－５の調製
収率８９％、ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３０３（Ｍ＋１）。
以下の表９は、実施例４．１１．１に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された二量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000185
実施例４．１１．３ Ｔ－８８の調製
Figure 2023531252000186
 化合物Ｔ－８８を、参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２０１５／０９５２２７Ａ２に記載されるのと同様の合成経路によって合成した。
化合物Ｔ－８８－２の調製
Ｔ－８８－１（３２０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、Ｌ－２ａ（２８０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。反応物を、Ｎ２雰囲気下、室温で１時間撹拌した。反応が完了した後、ＤＭＦを減圧下で除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｔ－８８－２（３１０ｍｇ、６２％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：５９５（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－８８－３の調製
Ｔ－８８－２（７０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下で、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（５４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＤＩＰＥＡ（４１μＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をブライン（５０ｍＬ）及びＥＡ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｔ－８８－３（４４ｍｇ、４９％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：７６０（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－８８－４の調製
Ｔ－８８－３（４０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下、室温で、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した。ＭＭＡＦ－ＯＭｅ（４３ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（１．４ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を添加した後、ピリジン（０．３３ｍＬ）及びＤＩＰＥＡ（１０μＬ、０．０６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２２時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をＥＡ（１００ｍＬ）、蒸留水（３００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）及び１Ｎ塩酸水溶液（２０ｍＬ）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｔ－８８－４（４７ｍｇ、６５％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３６７（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－８８－５の調製
化合物Ｔ－８８－４（４０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃で、水（０．５ｍＬ）に溶解させたＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で２時間撹拌した。反応が完了した後、得られた残渣を２Ｎ塩酸水溶液（２ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－８８－５（２９．５ｍｇ、７５％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３５３（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－８８の調製
化合物Ｔ－８８－５（３．０ｍｇ、２．２０μｍｏｌ）及びＭａｌ－１（１．８５ｍｇ、４．６０μｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．１ｍＬ）中の均質溶液、及び（ＢｉｍＣ４Ａ）３（５．６７ｍｇ、６．９０μｍｏｌ）、ＣｕＢｒ（３．３２ｍｇ、２３．１０μｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、室温で添加し、１０分間撹拌した。反応混合物を分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物Ｔ－８８（３．０ｍｇ、７７％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：８７７（Ｍ／２＋１）。
実施例４．１１．４ Ｔ－８９の調製
Figure 2023531252000187
 化合物Ｔ－４２（２．４ｍｇ、０．００１３ｍｍｏｌ）の０．１％ギ酸Ｈ２Ｏ溶液（１．０ｍＬ）に、室温で、ＮａＨＳＯ３で処理し、６時間撹拌した。反応混合物を凍結乾燥させて、化合物Ｔ－８９（２．７ｍｇ、定量的）を得た。
実施例４．１１．５ Ｔ－２００の調製
Figure 2023531252000188
 化合物Ｔ－２００ａの調製
Ｍ－１０（３５ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液に、化合物Ｍ－１７（８．７ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（１９ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。同じ温度で１時間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－２００ａ（２９ｍｇ、６９％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２２５（Ｍ＋）。
化合物Ｔ－２００ｂの調製
Ｔ－２００ａ（４ｍｇ、０．００３２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（４．５ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。同じ温度で１時間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－２００ｂ（２．８ｍｇ、８２％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１０５７（Ｍ＋）。
化合物Ｔ－２００の調製
化合物Ｔ－２００ｂ（６．３ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）、Ｍａｌ－１（４．８ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ２窒素雰囲気下、室温で、ＣｕＢｒ（５．１ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－２００（５．３ｍｇ、６１％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１４５６（Ｍ＋）。
以下の表１４は、実施例４．１１．５に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された単量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000189
Figure 2023531252000190
Figure 2023531252000191
実施例４．１１．６ Ｔ－２１２の調製
Figure 2023531252000192
 化合物Ｔ－２１２－１の調製
Ｍ－１０（７０ｍｇ、０．０６６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．２ｍＬ）溶液に、化合物Ｍ－２９（２２．５ｍｇ、０．０６６０ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（３７．９ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。同じ温度で１時間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し、化合物Ｔ－２１２－１（４８．３ｍｇ、５４％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３４７（Ｍ＋）
化合物Ｔ－２１２－２の調製
Ｔ－２１２－１（４８．３ｍｇ、０．０３５８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．０ｍＬ）溶液に、４Ｎの１，４－ジオキサン中のＨＣｌ（０．７ｍＬ）を、Ｎ２雰囲気下、０℃で添加した。同じ温度で１時間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し、化合物Ｔ－２１２－２（４３．５ｍｇ、９３％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１３０３（Ｍ＋）。
化合物Ｔ－２１２－３の調製
化合物Ｔ－２１２－２（４３．５ｍｇ、０．０３３４ｍｍｏｌ）の無水ＡＣＮ（１．０ｍＬ）溶液に、βＧａｌ－Ｂｒ（１９２ｍｇ、０．４６８ｍｍｏｌ）、酸化銀（１７１ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、及びモレキュラーシーブ（９０ｍｇ）を、Ｎ２雰囲気下、室温で添加した。同じ温度で一晩撹拌した後、反応物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通して濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－２１２－３（３３．１ｍｇ、６１％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６３５（Ｍ＋＋１）。
化合物Ｔ－２１２－４の調製
Ｔ－２１２－３（３３．１ｍｇ、０．０２０３ｍｍｏｌ）のメタノール（２．０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（２８．１ｍｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、０℃で添加した。同じ温度で１時間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し、化合物Ｔ－２１２－４（２１．２ｍｇ、８１％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１２９７（Ｍ＋）。
化合物Ｔ－２１２の調製
化合物Ｔ－２１２－４（５．０ｍｇ、０．００３８５ｍｍｏｌ）、Ｍａｌ－１（３．０８ｍｇ、０．００７７１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ２窒素雰囲気下、室温で、ＣｕＢｒ（３．３ｍｇ、０．０２３１ｍｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物Ｔ－２１２（５．４ｍｇ、８２％）を得た。
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ：１６９７（Ｍ＋）。
以下の表１５は、実施例４．１１．６に記載されるのと同様の合成経路を介して合成された単量体誘導体を列挙したものである。
Figure 2023531252000193
Figure 2023531252000194
Figure 2023531252000195
実施例５．コンジュゲート化のための抗体の還元／酸化：
システイン操作されたモノクローナル抗体を、１ｍＭのＥＤＴＡを含む４ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．３）中の約２０～５０倍過剰のＴＣＥＰ（トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩又はＤＴＴ（ジチオスレイトール）を用い、３７℃で１時間還元させた。還元チオマブを希釈し、ＰＢＳ中のＰＤ－１０カラムにロードした。カラムを、１０ｍＭのＰＢＳ（ｐＨ７．３）で溶出した。溶出した還元チオマブを空気酸化によって再建した。チオール／Ａｂ値は、溶液の２８０ｎｍにおける吸光度からの還元抗体濃度、及びＤＴＮＢ（Ａｌｄｒｉｃｈ、ＣＡＳ Ｎｏ Ｄ８１３０）との反応及び４１２ｎｍにおける吸光度の決定によるチオール濃度を決定することによって調べた。
実施例６．ＡＤＣの調製のための１ステップのコンジュゲート化方法
実施例６．１．
Figure 2023531252000196
 抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を、表１５Ａ～Ｅにまとめられるコンジュゲート化手順に従って合成した。表１５Ａは、コンジュゲート化方法１及び２について示され、表１５Ｂは、コンジュゲート化方法２、３、及び４を示し、表１５Ｃはコンジュゲート化方法５及び６を示し、表１５Ｄは、コンジュゲート化方法３及び４を示し、表１５Ｅは、コンジュゲート化方法３及び４を示す。ＡＤＣのインビトロデータを表１５Ｆ～Ｊに示す。
コンジュゲート化方法１：ＭＰＳコンジュゲート化プロトコル。（ＮａＢＨ４）
還元及び再酸化反応の後、抗体をＰＢＳに溶解した。ＤＭＳＯ中の実施例４．１１．１で得られた化合物Ｔ－４７（３．８０μＬ、３．０ｍｍｏｌ、リンカー－毒素中間体として）を還元再酸化された抗体（４５μＬ、０．０５３ｍｍｏｌ）で処理し、室温で３時間穏やかに撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（３．８０μＬ、３００ｍｍｏｌ）を反応混合物の溶液に添加し、３７℃で１時間インキュベートして、可逆的脱コンジュゲート化反応をブロックした。コンジュゲート化混合物をロードし、ＰＤ－１０カラムを通して溶出させ、過剰な薬物－リンカー中間体及び他の不純物を除去した。
コンジュゲート化方法２：ＭＰＳコンジュゲート化プロトコル。（ＮＨ２ＯＨ）
還元及び再酸化反応の後、抗体をＰＢＳに溶解した。実施例４．１１．１で得られた化合物Ｔ－１１（８．８６μＬ、３．０ｍｍｏｌ、リンカー－毒素中間体として）のＤＭＳＯ溶液を、還元再酸化された抗体（７０μＬ、０．０５３ｍｍｏｌ）で処理し、室温で３時間穏やかに撹拌した。ヒドロキシルアミン（８．８６μＬ、１，５００ｍｍｏｌ）を反応混合物の溶液に添加し、３７℃で８時間インキュベートして、可逆的脱コンジュゲート化反応をブロックした。コンジュゲート化混合物をロードし、ＰＤ－１０カラムを通して溶出させ、過剰な薬物－リンカー中間体及び他の不純物を除去した。
実施例６．２．
Figure 2023531252000197
 コンジュゲート化方法３：マレイミドコンジュゲート化プロトコル。
還元及び再酸化反応の後、抗体をＰＢＳに溶解した。実施例４．１１．１で得られた化合物Ｔ－４８（５．０４μＬ、３．０ｍｍｏｌ、リンカー－毒素中間体として）のＤＭＳＯ溶液を、還元再酸化された抗体（３６μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）で処理し、４０℃で１時間穏やかに撹拌した。コンジュゲート化混合物をロードし、ＰＤ－１０カラムを通して溶出させ、過剰な薬物－リンカー中間体及び他の不純物を除去した。コンジュゲート化抗体のＤＡＲ（抗体に対する薬物の比率）をＨＩＣによって分析した。
コンジュゲート化方法４：マレイミドコンジュゲート化プロトコル。（加水分解）
マレイミドコンジュゲート化の後、抗体薬物コンジュゲートを、ホウ酸緩衝液（ｐＨ９．２）中、３７℃で１６時間インキュベートし、マレイミド環を加水分解した。そして、ホウ酸緩衝液を、ｖｉｖａ－ｓｐｉｎカラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を通してＰＢＳ（ｐＨ７．３）に変更した。
実施例７．ＡＤＣの調製のための２ステップのコンジュゲート化方法
Figure 2023531252000198
 コンジュゲート化方法５：ＭＰＳ－Ｎ３＋ＢＣＮ－薬物。（ＮａＢＨ４）
還元及び再酸化反応の後、実施例２（表２）で得られた化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１１を使用して、抗体の操作されたシステインのチオール基との第１のステップのコンジュゲート化反応を行った。ＰＢＳ中の抗体を、ＤＭＳＯ中の各化合物（６．６２ｕＬ、３．０ｍｍｏｌ）で処理した。３時間後、水素化ホウ素ナトリウム（６．６２ｕｌ、３００ｍｍｏｌ）をコンジュゲート化溶液に添加し、可逆的脱コンジュゲート化反応を室温で１時間かけてブロックした。第１のコンジュゲート化抗体を、ＰＤ－１０カラムによって精製した。第２のコンジュゲート化については、Ｃｕ（Ｉ）触媒の非存在下での環化付加が促進されるＮ３等の官能基を有する実施例４．１０．２で得られたＴ－Ｉｎｔ－１０２（１３．２４ｕＬ、３．０ｍｍｏｌ）を、Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－１１ ＡＢ２．１コンジュゲート化抗体（７．４ｕＬ、０．１１７ｍｍｏｌ）に供し、３７℃でインキュベートした。およそ２４時間後、抗体薬物コンジュゲートをＰＤ－１０カラムにより精製し、遠心分離超濾過により濃縮した。コンジュゲート化抗体のＤＡＲ（抗体に対する薬物の比率）をＨＩＣによって分析した。
コンジュゲート化方法６：ＭＰＳ－ＢＣＮ＋Ｎ３－薬物。（ＮａＢＨ４）
還元及び再酸化反応の後、実施例１．９で得られた化合物ＭＰＳ－Ｄ１－１０を使用して、抗体の操作されたシステインのチオール基との第１のステップのコンジュゲート化反応を行った。ＰＢＳ中の抗体を、ＤＭＳＯ中、各化合物（６．６２ｕＬ、３．０ｍｍｏｌ）で処理した。３時間後、水素化ホウ素ナトリウム（６．６２ｕｌ、３００ｍｍｏｌ）をコンジュゲート化溶液に添加し、可逆的脱コンジュゲート化反応を室温で１時間かけてブロックした。第１のコンジュゲート化抗体を、ＰＤ－１０カラムによって精製した。第２のコンジュゲート化については、Ｃｕ（Ｉ）触媒の非存在下での環化付加が促進されるＢＣＮ等の官能基を有する実施例４．６で得られたＱ－７（１３．２４ｕＬ、３．０ｍｍｏｌ）を、Ｑ－７ ＡＢ２．１コンジュゲート化抗体（７．４ｕＬ、０．１１７ｍｍｏｌ）に供し、３７℃でインキュベートした。およそ２４時間後、抗体薬物コンジュゲートをＰＤ－１０カラムにより精製し、遠心分離超濾過により濃縮した。コンジュゲート化抗体のＤＡＲ（抗体に対する薬物の比率）をＨＩＣによって分析した。
Figure 2023531252000199
Figure 2023531252000200
Figure 2023531252000201
Figure 2023531252000202
Figure 2023531252000203
Figure 2023531252000204
Figure 2023531252000205
Figure 2023531252000206
Figure 2023531252000207
Figure 2023531252000208
Figure 2023531252000209
Figure 2023531252000210
Figure 2023531252000211
Figure 2023531252000212
Figure 2023531252000213
Figure 2023531252000214
Figure 2023531252000215
Figure 2023531252000216
Figure 2023531252000217
Figure 2023531252000218
Figure 2023531252000219
Figure 2023531252000220
Figure 2023531252000221
実施例８．抗体薬物コンジュゲートの精製
混合物を遠心分離超濾過によって濃縮し、コンジュゲートを、ＨＩＣ ＮＰＲカラム（ＴＯＳＯＨ＃０００７６５６ ＴＳＫｇｅｌ Ｐｈｅｎｙｌ－５ＰＷ、２１．５×１５０ｍｍ、１３μｍ）で精製し、０．８ｍｌ／分で４０～１００％Ｂの線形勾配（Ａ緩衝液 ５０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ７．０）中の１．５Ｍの硫酸アンモニウム、Ｂ緩衝液、５０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ７．０）中の２０％のアセトニトリル）で溶出させた。コンジュゲート化抗体のＤＡＲ（抗体に対する薬物の比率）をＨＩＣによって分析した。
実施例９．タンパク質－薬物コンジュゲートのインビトロ分析
ＨＥＫ２９３（Ｂ７－Ｈ３過剰発現）、ＮＣＩ－Ｎ８７、ＪＩＭＴ－１、Ｃａｌｕ－６、ＮＣＩ－Ｈ４６０、Ａ５４９、ＨＣＴ－１１６、ＤＵ－１４５、ＮＣＩ－Ｈ２３及びＮＣＩ－Ｈ３５８がん細胞を、１００μＬ培地中のウェル当たり２，０００～８，０００個の細胞密度で９６ウェルプレートに播種し、２４時間培養した。ＡＤＣを５０ｎＭ～０．０００３ｎＭの１：４の連続希釈で処理し、抗体薬物コンジュゲートＴ－ＤＭ１を５０ｎＭ～０．０００７ｎＭの１：４の連続希釈で処理した。一連の化合物のＤＭＳＯ希釈液を、ウェル当たり５μＬで２４ウェルプレートの３つのウェルに添加した。各個々のプレート上の３つのウェルには、対照として、化合物を含まない５μＬのＤＭＳＯを入れた。ウェル当たりのＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であった。プレートを３７℃、加湿した５％ＣＯ２－空気雰囲気中で、６日間インキュベートした。細胞生存率を、ＭＴＴアッセイによって決定した。ＰＢＳ緩衝溶液（５ｍｇ／ｍＬ）に溶解した０．２ｍＬの３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）染料を、プレートの各ウェルに添加した。ミトコンドリアオキシドレダクターゼによる生細胞中のＭＴＴ色素の還元によって形成されたホルマザンをＤＭＳＯに溶解し、５５０ｎｍでの吸光度を使用して測定した。ＩＣ５０を、シグモイド用量応答非線形回帰曲線フィット（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して生成し、その結果を図１～９及び以下の表１７～２７に示す。
Figure 2023531252000222
Figure 2023531252000223
Figure 2023531252000224
Figure 2023531252000225
Figure 2023531252000226
Figure 2023531252000227
Figure 2023531252000228
Figure 2023531252000229
Figure 2023531252000230
Figure 2023531252000231
Figure 2023531252000232
Figure 2023531252000233
Figure 2023531252000234
Figure 2023531252000235
Figure 2023531252000236
Figure 2023531252000237
実施例１０．インビボ有効性
２０ｍｇスケールの反応で、Ｔ－２０－ＡＢ２．１、Ｔ－２３－ＡＢ２．１、Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１、及びＴ－Ｉｎｔ０１１２－ＡＢ２．１を調製した。ＨＩＣカラムによる精製後、最終的な試料を、５～１０ｍｇ／ｍｌのタンパク質になるまで濃縮した。
マウスにおける腫瘍異種移植片試験によって、Ｔ－２０－ＡＢ２．１及びＴ－２３－ＡＢ２．１のインビボでの有効性を測定した。雌ＢＡＬＢ／ｃ ｎｕ／ｎｕを、それぞれ５×１０６個のＪＩＭＴ－１細胞のＰＢＳ懸濁液を用い、右脇腹に皮下注射した。腫瘍がおよそ１５０ｍｍ３に達したとき、マウスを試験群に無作為に分けた。Ｔ－ＤＭ１（５ｍｇ／ｋｇ）及びＴ－２０－ＡＢ２．１及びＴ－２３－ＡＢ２．１コンジュゲート（０．３ｍｇ／ｋｇ、ＱＷ Ｘ４）を静脈内に投与した。全ての治療群は、１群当たり６～１０匹の動物からなり、腫瘍サイズは、キャリパー測定を使用して週に２回モニタリングされた。腫瘍質量を体積＝（幅×幅×長）／２として計算した。本開示のコンジュゲートは、観察期間、すなわち、実験の開始から８０日以内に腫瘍退縮をもたらした。対照コンジュゲートＴ－ＤＭ１は、本願発明者らのコンジュゲートよりも活性が低かった。これらの結果を図１０及び図１１に示す。ＨＣＴ－１１６、ＮＣＩ－Ｈ２３及びＮＣＩ－Ｈ４６０モデルは、Ｔ－Ｉｎｔ－１０２－Ｄ１－５ ＡＢ２．１及びＴ－Ｉｎｔ－１１２－ＡＢ２．１と同様の方法で進行した。
本コンジュゲートは、実験開始から６０～９０日の間に腫瘍を退縮させた。これらの結果を図１２～１７に示した。これらのインビボ実験は、ＣＡＣＴ（ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｉｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ａｓａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ、プロジェクトコード番号：ＨＩ１５Ｃ０９７２）及びＢｉｏｔｏｘｔｅｃｈによって行われた。
実施例１１．抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体の生成
Ｂ７－Ｈ３特異的抗体は、Ｙｍａｘ－ＡＢＬライブラリ（Ｙ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｉｎｃ．）によって、３つの連続したバイオパニングプロセス及び追加の親和性成熟技術によって発見された。
異なる塩基配列、及びＢ７－Ｈ３に特異的な約１４０ｓｃＦｖ抗体ヒットをスクリーニングした後、完全なヒトＩｇＧ形態に変換し、Ｙｍａｘ－ｔＥＸＰＲＥＳＳシステム（Ｙ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｉｎｃ．）を使用して産生させた。
ＤＮＡ配列分析及びインビトロ特性決定アッセイによってＢ７－Ｈ３特異的抗体を選択し、チオマブＩｇＧ（ＩｇＧ＿Ａ１Ｃ）の形態で産生させた（表２８、２９、３０、及び３１）。
Figure 2023531252000238
選択された抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ配列を含む抗体、並びにそれらを含む重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を表２９及び３０に示す。
Figure 2023531252000239
Figure 2023531252000240
Figure 2023531252000241
Figure 2023531252000242
Figure 2023531252000243
方法：Ｙｍａｘ－ＡＢＬライブラリを使用したバイオパニング
Ｅ．ｃｏｌｉ細胞を、様々な約３×１０Ｅ１０を有するヒトｓｃＦｖファージライブラリ（Ｙ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｉｎｃ．）で感染させ、次いで３０℃で１６時間培養した。培養後、培養溶液を遠心分離し、得られた上清をＰＥＧで濃縮し、次いで、ＰＢＳ緩衝液に溶解し、ヒトｓｃＦｖファージディスプレイを得た。ライブラリファージを、ヒトＢ７－Ｈ３タンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｃ．ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｃ．又はＹ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｉｎｃ．）でコーティングした免疫チューブに充填し、続いて室温で２時間反応させた。１×ＰＢＳ／Ｔ及び１×ＰＢＳで洗浄した後、抗原に特異的に結合したｓｃＦｖファージのみを溶出した。
溶出したファージを再びＥ．ｃｏｌｉ細胞に感染させ、増幅し（パニングプロセス）、陽性ファージのプールを得た。ＰＢＳＴ洗浄ステップの回数のみを最大２５回まで増加させたことを除き、第２及び第３のパニングプロセスを、記載されたのと同様の様式で、第１のパニングプロセスで増幅させたファージを使用して行った。抗原に結合したファージの数（出力）は、第３のパニングプロセス中に増加した。
パニングプロセスの各ラウンドでそれぞれ得られた陽性ポリｓｃＦｖ－ファージ抗体プールの抗原特異性を調査するために、ポリファージＥＬＩＳＡ（酵素結合イムノアッセイ）を実施した。第１～第３のパニングプロセス後に凍結した細胞ストックを、５ｍｌの２×ＹＴＣＭ、２％グルコース、及び５ｍＭのＭｇＣｌ２を含有する培地に、ＯＤ６００が０．１になるように添加し，次いで、３７℃で２～３時間培養した（ＯＤ６００＝０．５～０．７）。細胞を、Ｍ１ヘルパーファージで感染させ、２×ＹＴＣＭＫ、５ｍＭのＭｇＣｌ２、及び１ｍＭのＩＰＴＧを含有する培地中、３０℃で１６時間培養した。得られた細胞培養物を遠心分離し（４，５００ｒｐｍ、１５分、４℃）、上清を新しいチューブ（第１～第３のパニングされたポリｓｃＦｖファージ）に移した。抗原を、コーティング緩衝液を用い、４℃で１６時間かけて、９６ウェル免疫プレート（ＮＵＮＣ４３９４５４）上で、１００ｎｇ／ウェルの密度でコーティングし、ＰＢＳに溶解した４％脱脂乳を使用して、各ウェルをブロックした。各ウェルを０．２ｍｌのＰＢＳ／Ｔで洗浄し、第１～第３のパニングされたポリｓｃＦｖファージ１００μｌを各ウェルに添加し、続いて室温で２時間反応させた。次いで、各ウェルを０．２ｍｌのＰＢＳ／Ｔで４回洗浄し、二次抗体である抗Ｍ１３－ＨＲＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ ２７－９４２１－０１）を４％脱脂乳／ＰＢＳで１：２０００（体積／体積）で希釈したものを各ウェルに添加し、室温で１時間反応させた。ＰＢＳ／Ｔで洗浄した後、ＰＣ緩衝液中に溶解したＯＰＤ錠（Ｓｉｇｍａ．８７８７－ＴＡＢ）の溶液を１００μｌ／ウェルの濃度でウェルに添加し、１０分間かけて発色を誘導した。次いで、吸光度を、分光光度計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ）を用いて４９０ｎｍで測定した。ＥＬＩＳＡは、Ｂ７－Ｈ３抗原に対する結合親和性が、第３のパニングしたポリｓｃＦｖファージにおいて濃縮されていることを示した。
高い結合親和性を有するポリクローナルファージ抗体群（第３のパニング）から得られたコロニーを、１ｍｌの９６深型ウェルプレート（Ｂｉｏｎｅｅｒ ９００３０）中、３７℃で１６時間培養した。このようにして成長させた細胞１００～２００μｌを、２×ＹＴＣＭ、２％グルコース、及び５ｍＭのＭｇＣｌ２を含有する培地に、ＯＤ６００が０．１になるように添加し、１ｍｌの２×ＹＴＣＭ、２％グルコース、及び５ｍＭのＭｇＣｌ２を含有する培地に添加し、次いで、９６深型ウェルプレート中、ＯＤ６００が０．５～０．７になるまで３７℃で２～３時間培養した。細胞を、１：２０のＭＯＩで、Ｍ１ヘルパーファージで感染させ、２×ＹＴＣＭＫ、５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＩＰＴＧを含有する培地中、３０℃で１６時間培養した。抗原Ｂ７－Ｈ３を、４℃で１６時間かけて、９６ウェル免疫プレート上で、１００ｎｇ／ウェルの密度でコーティングし、ＰＢＳに溶解した４％脱脂乳を使用して、各ウェルをブロックした。各モノクローナルｓｃＦｖファージ（１００のｓｃＦｖファージ）を０．２ｍｌのＰＢＳ／Ｔで洗浄し、１６時間培養したものを、１００μｌの用量で各ウェルに添加し、室温で２時間反応させた。次いで、各ウェルを０．２ｍｌのＰＢＳ／Ｔで４回洗浄し、二次抗体である抗Ｍ１３－ＨＲＰを４％脱脂乳／ＰＢＳで１：２０００（体積／体積）で希釈し、室温で１時間反応させた。０．２ｍｌのＰＢＳ／Ｔで洗浄した後、発色を行い、吸光度を４９０ｎｍで測定した。各抗原に対して高い結合親和性を有する単一ファージクローンとして、Ｂ７－Ｈ３について合計数十個の単一ファージクローンを得た。
方法：ＤＮＡ配列分析による選択
選択された単一クローンを、ＤＮＡ精製キット（Ｑｉａｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してＤＮＡ－ｐｒｅｐに供してＤＮＡを得て、ＤＮＡの配列分析を（Ｓｏｌｇｅｎｔ）によって行った。選択された抗体のＶＨ及びＶＬのＣＤＲ領域を、配列分析の結果に基づいて特定し、これらの抗体と生殖細胞系抗体群との類似性（同一性）を、Ｉｇ ＢＬＡＳＴプログラムを使用して調査した（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２０１３，４１，Ｗ３４－４０）。Ｂ７－Ｈ３に特異的な９種類のファージ抗体を得て、表１８、１９、及び２０にまとめている。
方法：Ｂ７－Ｈ３特異的抗体の構築及び産生
選択された抗体クローンの重鎖及び軽鎖に対してＰＣＲ（ｉＣｙｃｌｅｒ ｉＱ、ＢＩＯ－ＲＡＤ）を行った。その結果、重鎖及び軽鎖を得て、ベクター（ｐＮＡＴＶＨ及びｐＮＡＴＶＬ）及び２本鎖を制限酵素で切断（消化）した。ＤＮＡをＤＮＡゲル抽出キット（Ｑｉａｇｅｎ）で溶出した。ライゲーションは、１μｌ（１０ｎｇ）のベクター、１５μｌ（１００～２００ｎｇ）の重鎖若しくは軽鎖、２μｌの１０×ライゲーション緩衝液、１μｌのリガーゼ（１Ｕ／μｌ）及び蒸留水を混合し、混合物を室温で１～２時間放置し、得られた混合物をコンピテント細胞（ＸＬ１－青色）に注射し、細胞を氷上に５分間置き、細胞を４２℃で９０秒間熱ショックにさらすことによって実施した。熱ショック後、培地１ｍｌを細胞に添加し、次いで、細胞を３７℃で１時間成長させ、ＬＢ Ａｍｐプレート上に広げ、３７℃で１６時間インキュベートした。得られたコロニーを５ｍｌのＬＢ Ａｍｐ培地に播種し、３７℃で１６時間培養し、ＤＮＡ－ｐｒｅｐキット（Ｎｕｃｌｏｇｅｎ）を使用してＤＮＡ－ｐｒｅｐに供した。得られたＤＮＡの配列分析を（Ｓｏｌｇｅｎｔ）によって行った。選択された抗体クローンの各チオマブＩｇＧを部位変異誘発法により構築した。選択されたクローンのファージ抗体の配列に対応するチオマブを含む変換された全ＩｇＧクローン構築物を、配列分析によって確認した（表２１及び２２）。ＨＥＫ ２９３Ｆ細胞にトランスフェクトするために、全ＩｇＧ又はチオマブＩｇＧに変換されたそれぞれのクローンの重鎖（ｐＮＡＴＶＨ）及び軽鎖（ｐＮＡＴＶＬ）を、ＬＢ Ａｍｐ培地１００ｍｌ中で成長させ、Ｍｉｄｉ－ｐｒｅｐキット（ＱＩＡｇｅｎ）を使用してＤＮＡを得た。
クローニングしたｐＮＡＴＶＨ及びｐＮＡＴＶＬベクターを６：４の比率でＨＥＫ２９３Ｆ細胞に共トランスフェクトし、７日目に上清を収集し、遠心分離及び０．２２μｍトップフィルターにより細胞及び破片を除去し、上清を回収し、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーに供してＩｇＧ抗体を精製した。精製プロセス中、グリシン緩衝液を使用して抗体を分離し、最終的な再懸濁緩衝液がＰＢＳとなるように緩衝液を交換した。精製された抗体をＢＣＡ及びナノドロップにより定量化し、各抗体を還元条件下及び非還元条件下で５μｇの用量でゲルにロードし、ＳＤＳ－ＰＡＧＥにより分析して、精製されたタンパク質の純度及び移動度を決定した。選択された抗体は全て、非還元条件下で分子量１５０ｋＤａ以上で検出され、ＳＣ００４１又はＳＣ００４１．０１を対照抗体として産生した（表３３及び３４）。
Figure 2023531252000244
Figure 2023531252000245
Figure 2023531252000246
Figure 2023531252000247
Figure 2023531252000248
Figure 2023531252000249
Figure 2023531252000250
Figure 2023531252000251
Figure 2023531252000252
Figure 2023531252000253
Figure 2023531252000254
Figure 2023531252000255
Figure 2023531252000256
実施例１２：抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体のインビトロ結合親和性
精製された抗Ｂ７－Ｈ３モノクローナル抗体の結合親和性を、ＢＬＩベースのＯＣＴＥＴ又はＳＰＲベースのＢｉａｃｏｒｅによって決定した。ＯＣＴＥＴによって選択された抗Ｂ７－Ｈ３ ｍＡｂの結合動態を表３６に示す。更に、ヒト、カニクイザル及びマウスＢ７－Ｈ３抗原に結合する抗体の結合速度を表３７に示す。
Figure 2023531252000257
方法：ＯＣＴＥＴ結合動態
ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｏｃｔｅｔ ＱＫｅ装置を使用して、ヒトＢ７－Ｈ３の抗Ｂ７－Ｈ３抗体への結合動態を測定した。Ｏｃｔｅｔ ＱＫｅシステムは、動態分析を目的としてリアルタイムで分子相互作用を測定する、標識を含まないバイオセンサ技術であるＢＬＩ（Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ）に基づく。
ＡＨＣ（抗ｈＩｇＧ捕捉）バイオセンサ（ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｉｎｃ、１８－５０６０）を、１×Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｂｕｆｆｅｒ（Ｆｏｒｔｅｂｉｏ Ｉｎｃ．）中で１０分間かけて平衡化し、ヒトＢ７－Ｈ３（Ｙ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｉｎｃ．）を、１×Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｂｕｆｆｅｒ中の２倍連続希釈（０．９４ｎＭ～３０ｎＭ）として調製した。１．５ナノメートルの光学シフトが達成されるまで、Ｂ７－Ｈ３抗体リガンドをＡＨＣバイオセンサに１０μｇ／ｍｌでロードした。ロードした後、バイオセンサをベースライン化し、規定濃度のヒトＢ７－Ｈ３で１０分間会合させ、次いで、緩衝液中で１０分間かけて解離させた。実験全体を、１，０００ｒｐｍの速度で振とうする９６ウェルの黒色平底ポリプロピレンマイクロプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ部品番号６５５２０９）を用い、３０℃で実施した。全ての溶液の最終体積は、ウェル当たり２００μｌであった。
全ての測定値を、試行緩衝液のみに曝露された対照センサを引き算することによって、ベースラインドリフトを補正した。非特異的結合試験を、ブランクセンサを使用することによって実施し、センサ表面に対する抗Ｂ７－Ｈ３抗体の結合が存在するかどうかを確認した。
データ分析及び曲線フィッティングを、Ｏｃｔｅｔデータ分析ソフトウェア９．０を使用して実施した。得られたデータを処理して、重ね合わされたフィット及びＫＤ、Ｋｏｎ及びＫｏｆｆ値を決定した。参照ウェルを、緩衝液アーチファクトについて、分析物ウェルから引き算した。次に、ｙ軸アラインメント、ステップ間補正、及びＳａｖｉｔｚｋｙ－Ｇｏｌａｙフィルタリングも、データに適用した。次いで、処理されたデータを、グローバルフィッティングを用いる１：１モデルフィッティングを使用して、会合及び解離についての曲線にフィッティングすることが可能であった。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ８を使用して、ベースライン補正された結合曲線を分析した。
Figure 2023531252000258
Figure 2023531252000259
方法：Ｂｉａｃｏｒｅ結合動態
Ｂｉａｃｏｒｅ ８Ｋ（ＧＥ Ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅ）装置を使用して、様々なｍＡｂ（リガンド）に対するいくつかのＢ７－Ｈ３バリアント（分析物）の結合に関する結合動態を測定した。抗体を、固定された抗ヒトＦｃ抗体（ＧＥ Ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅ）上に捕捉した。抗Ｆｃ抗体を、活性細胞及び参照細胞の両方で、標準的なアミンカップリング法を使用して、ＣＭ５センサチップ上に、およそ７，０００ＲＵになるまで固定した。結合動態測定のために、ＨＢＳ－ＥＰ＋を、試行緩衝液（１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のポリソルベート２０）に使用した。抗Ｂ７－Ｈ３抗体を、試行緩衝液中、０．５ｕｇ／ｍＬまで希釈し、活性細胞のみに対して１１０秒間注射した。リガンドを捕捉した後、様々なＢ７－Ｈ３抗原を１２０秒間分析し、３０ｕｌ／分の流速で６００秒間、解離をモニタリングした。３ＭのＭｇＣｌ２溶液を、再生のために３０μｌ／分で３０秒間、活性細胞及び参照細胞の両方に注射した。動態分析のために、２倍希釈された分析物を５点、２０ｎＭのヒト４ＩｇＢ７－Ｈ３（Ｙ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｉｎｃ．）、３２０ｎＭのヒト２ＩｇＢ７－Ｈ３（Ａｃｒｏｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）、４０ｎＭのカニクイザルＢ７－Ｈ３（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｃ．）、及び１６０ｎＭのマウスＢ７－Ｈ３（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｃ．）の範囲の捕捉されたリガンドの上に飛ばした。Ｂｉａｃｏｒｅ Ｉｎｓｉｇｈｔ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して、１：１結合モデルにデータをフィッティングすることによって、動態情報を計算し、ｋａ（会合定数）、ｋｄ（解離定数）、及びＫＤ（平衡解離定数）を決定した。
参照による組み込み
本明細書において言及される全ての刊行物及び特許は、各個々の刊行物又は特許が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されるかのように、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。矛盾する場合には、本明細書のいずれの定義も含め、本出願が支配する。
均等物
本開示の具体的な実施形態が考察されているが、上述の明細書は例示であり、限定的ではない。本明細書及び以下の特許請求の範囲をレビューすれば、本開示の多くの変形が当業者には明白になるであろう。本開示の全範囲は、特許請求の範囲を、その均等物の全範囲と共に、本明細書およびそのような変形形態と共に参照することにより判断されるべきである。

Claims (26)

  1. 式Ｉによって表される抗体コンジュゲート、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であって、
    Figure 2023531252000260
    式中、
    Ａｂが、可変重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲＨ１）、可変重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲＨ２）、可変重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲＨ３）、可変軽鎖相補性決定領域１（ＣＤＲＬ１）、可変軽鎖相補性決定領域２（ＣＤＲＬ２）、及び可変軽鎖相補性決定領域３（ＣＤＲＬ３）を含む、抗Ｂ７－Ｈ３抗体又はその抗原結合断片であり、
    ＣＤＲＨ１が、配列番号１、７、１３、１９、２５、３１、３７、又は４３のアミノ酸配列を含み、
    ＣＤＲＨ２が、配列番号２、８、１４、２０、２６、３２、３８、又は４４のアミノ酸配列を含み、
    ＣＤＲＨ３が、配列番号３、９、１５、２１、２７、３３、３９、又は４５のアミノ酸配列を含み、
    ＣＤＲＬ１が、配列番号４、１０、１６、２２、２８、３４、４０、又は４６のアミノ酸配列を含み、
    ＣＤＲＬ２が、配列番号５、１１、１７、２３、２９、３５、４１、又は４７のアミノ酸配列を含み、
    ＣＤＲＬ３が、配列番号６、１２、１８、２４、３０、３６、４２、又は４８のアミノ酸配列を含み、
    各Ｇが、独立して、１つ以上の活性薬剤及びリンカーを含む化学部分であり、前記リンカーが、Ａｂを前記活性薬剤に連結し、
    ｎが、１～２０の整数である、抗体コンジュゲート、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物。
  2. Ａｂが、配列番号４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、又は８１のアミノ酸配列を含む可変重鎖と、配列番号５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、又は９７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖との組み合わせを更に含む、請求項１に記載の抗体コンジュゲート。
  3. Ａｂが、
    （ａ）配列番号４９のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号５０のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｂ）配列番号５１のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号５２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｃ）配列番号５３のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号５４のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号５６のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｅ）配列番号５７のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号５８のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｆ）配列番号５９のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号６０のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｇ）配列番号６１のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号６２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｈ）配列番号６３のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号６４のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｉ）配列番号６５のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号８３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｊ）配列番号６７のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号８３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｋ）配列番号６９のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号８５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｌ）配列番号７１のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号８７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｍ）配列番号７３のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号８９のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｎ）配列番号７５のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号９１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｏ）配列番号７７のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号９３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、
    （ｐ）配列番号７９のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号９５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、並びに
    （ｑ）配列番号８１のアミノ酸配列を含む可変重鎖及び配列番号９７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖から選択される、可変重鎖配列と可変軽鎖配列との組み合わせを更に含む、請求項１に記載の抗体コンジュゲート。
  4. 前記抗Ｂ７－Ｈ３抗体が、ＡＢ１、ＡＢ２、ＡＢ３、ＡＢ４、ＡＢ５、ＡＢ６、ＡＢ７、又はＡＢ８である、請求項１に記載の抗体コンジュゲート。
  5. 前記Ｂ７－Ｈ３が、ヒトＢ７－Ｈ３である、請求項１から４のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  6. Ａｂが、モノクローナル抗体、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、単鎖抗体（ｓｃＡｂ）、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ－Ｆｃ断片、単一ドメイン重鎖抗体、単一ドメイン軽鎖抗体、バリアント抗体、又は多量体抗体である、請求項１に記載の抗体コンジュゲート。
  7. Ａｂが、ウサギ、マウス、キメラ、ヒト化、又は完全ヒトモノクローナル抗体である、請求項１から６のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  8. Ａｂが、ＩｇＧアイソタイプである、請求項１から７のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  9. Ａｂが、ＩｇＧ１アイソタイプである、請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  10. Ａｂと前記活性薬剤との間の前記連結が、切断可能である、請求項１から９のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  11. Ｇが、式ＩＩによって表され、
    Figure 2023531252000261
     式中、
    各Ｑが、独立して、ヘテロ原子、好ましくはＯ又はＮによってＬ’に連結された活性薬剤であり、
    Ｚ’が、連結基であり、
    Ｌ’が、Ｏ、Ｓ、及びＮ、好ましくはＯ若しくはＮから選択されるヘテロ原子を介してＳＯ２に結合されたスペーサー部分であり、Ｌ’とＳＯ２との間の結合の切断が、Ｌ’とＱとの間の結合の切断を促進して、前記活性薬剤を放出するように選択され、
    Ｘが、－Ｏ－、－Ｃ（Ｒｂ）２－、又は－Ｎ（Ｒｃ）－、好ましくは－Ｏ－であり、
    Ａｒが、環、例えば、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキル、好ましくはアリール又はヘテロアリールを表し、
    Ｙ’が、－（ＣＲｂ ２）ｙＮ（Ｒａ）－、－（ＣＲｂ ２）ｙＯ－、又は－（ＣＲｂ ２）ｙＳ－であり、ｙが１である場合、前記Ｎ、Ｏ、又はＳ原子が、ＴＧに結合するように配置され、
    Ｘ及びＹ’が、Ａｒの隣接原子上に配置され、
    ＴＧが、活性化されたときに、ＳＯ２と反応して（Ｑ）ｑ－（Ｌ’）ｗを置き換え、Ｘ－ＳＯ２及びＡｒの介在原子を含む５～６員環を形成することができるＮ、Ｏ、又はＳ原子を生成するトリガー基であり、
    ｑが、１～約２０、好ましくは１～約１０の値を有する整数であり、
    ｗ、ｘ、及びｙが、各々独立して、０又は１の値を有する整数であり、
    各Ｒａ及びＲｃが、独立して、水素又は低級アルキルであり、
    各Ｒｂが、独立して、水素又は低級アルキルであるか、あるいは
    ２個のＲｂが、それらが結合している原子と一緒になって、３～５員環、好ましくは３～４員環を形成し、
    但し、ｗが０の場合に、ｑが１である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  12. Ａｂ－（Ｇ）ｎが、式（ＩＩＩ）の化合物
    Figure 2023531252000262
     又はその塩によって表され、式中、
    Ａが、
    Figure 2023531252000263
     であり、
    Ｍが、Ｎ、ＣＲ３０、又はＣ（－Ｌ－Ｑ）であり、
    各Ｌが、独立して、スペーサー部分から選択され、
    各Ｑが、活性薬剤であり、
    Ｘが、－Ｃｌ、－Ｂｒ、及び－Ｉから選択され、
    Ｊが、Ａｂであり、
    Ｒ３０及びＲ３１が、各々独立して、電子求引基、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択され、
    Ｒ４２及びＲ４３が、各々独立して、－ＯＨ、アルコキシ、－ＮＲ４４Ｒ４５、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、及びヘテロシクリルから選択され、式中、Ｒ４４及びＲ４５が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意選択的にアリール又はヘテロアリール環と縮合した５～８員環を形成することができ、
    Ｒ３２、Ｒ４４、及びＲ４５が、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、及びハロアルキルから選択され、
    ｎが、１～４である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  13. Ｚ’が、以下から選択され、
    Figure 2023531252000264
    Figure 2023531252000265
    Figure 2023531252000266
    Figure 2023531252000267
     式中、
    Ｒｚａが、Ｈ又はメチルであり、
    Ｒｚｂが、－ＯＨ、＝Ｏ、又は＝ＮＨＯＨであり、
    Figure 2023531252000268
     単結合又は二重結合、
    ａ”が、式（ＩＩ）のＺ’とＡｒとの間の結合を表し、
    ｂ”が、Ｚ’とＡｂとの間の結合を表し、
    Ｚ”が、
    いずれかの方向に配向される
    Figure 2023531252000269
     から選択される、請求項１１又は１２に記載の抗体コンジュゲート。
  14. Ｇが、以下から選択される部分を含み、
    Figure 2023531252000270
     式中、
    Ｑが、活性薬剤であり、
    Figure 2023531252000271
     が、Ｚ’をＡｒに接続するＺ’の断片である、請求項１から１３のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  15. Ｇが、以下から選択される部分を含み、
    Figure 2023531252000272
    Figure 2023531252000273
    Figure 2023531252000274
    Figure 2023531252000275
    Figure 2023531252000276
    Figure 2023531252000277
    Figure 2023531252000278
    Figure 2023531252000279
    Figure 2023531252000280
    Figure 2023531252000281
     が、Ｚ’をＡｒに接続するＺ’の断片である、請求項１１から１４のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  16. 前記活性薬剤が、化学療法剤及び毒素から選択される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  17. 前記活性薬剤が、化学療法剤である、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  18. 前記活性薬剤が、免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗真菌剤、鎮痛剤、又はそれらの組み合わせである、請求項１から１７のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  19. 前記活性薬剤が、
    （ａ）エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、イマチニブメシル酸塩、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４、オキサリプラチン、５－フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボクオン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、ウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチイレンチオホスホラミド（ｔｒｉｅｔｈｉｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリメチローロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、ＣＣ－１０６５、アドゼレシン、カルゼレシン、ビゼレシン、クリプトフィシン１、クリプトフィシン８、ドラスタチン、デュオカルマイシン、ＫＷ－２１８９、ＣＢ１－ＴＭ１、エレウテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）、スポンギスタチン、クロラムブシル、クロルナファジン、チョロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベムビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ１、カリケアミシンオメガ１、ダイネマイシン、ダイネマイシンＡ、クロドロネート、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントルマイシン（ａｎｔｒｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルニノマイシン（ｃａｒｎｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｕｃｉｎ）、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン（ｏｌｉｖｏｍｙｃｉｎｓ）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトミグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｉｇｒｉｎ）、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、５－フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チグアニン（ｔｈｉｇｕａｎｉｎｅ）、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン（ｄｒｏｍｏｓｔａｎｏｌｏｎｅ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホルホラミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）、デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）、デメコルシン、ジアジクオン、エルホルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）、マイタンシン、アンサマイトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモル（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）、ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、２－エチルヒドラジド、プロカルバジン、多糖－ｋ、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジクオン、２，２’，２”－トリクロロトリエチルアミン、Ｔ－２毒素、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ、及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン操作されたナノ粒子製剤、ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）、クロラムブシル、ゲムシタビン、６－チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、ＣＰＴ－１１、トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン、又は上述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、若しくは酸、
    （ｂ）モノカイン、リンホカイン、従来のポリペプチドホルモン、副甲状腺ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞成長因子線維芽細胞成長因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子－α、腫瘍壊死因子－β、ミュラー管抑制因子、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮成長因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン－α、インターフェロン－β、インターフェロン－γ、コロニー刺激因子（「ＣＳＦ」）、マクロファージ－ＣＳＦ、顆粒球－マクロファージ－ＣＳＦ、顆粒球－ＣＳＦ、インターロイキン（「ＩＬ」）、ＩＬ－１、ＩＬ－１α、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、腫瘍壊死因子、ＴＮＦ－α、ＴＮＦ－β、ポリペプチド因子、ＬＩＦ、ｋｉｔリガンド、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
    （ｃ）ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α－アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、ＡＭ毒素、アウリスタチン、チュブリシン（ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ）、ゲルダナマイシン、マイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、エキサテカン、エキサテカン誘導体、ビンデシン、ＳＧ２２８５、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン類似体及び代謝産物、リゾキシン、リゾキシン誘導体、ＣＣ－１０６５、ＣＣ－１０６５類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
    （ｄ）親和性リガンドであって、前記親和性リガンドが、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射線同位体、又は上述のうちのいずれかの組み合わせである、親和性リガンド、
    （ｅ）放射性標識、３２Ｐ、３５Ｓ、蛍光色素、高電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
    （ｆ）免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗菌剤、抗真菌剤、及び抗寄生虫剤、又は上述のうちのいずれかの組み合わせ、
    （ｇ）タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、又はトレミフェン、
    （ｈ）４（５）－イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール、又はアナストロゾール、
    （ｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、又はトロキサシタビン、
    （ｊ）アロマターゼ阻害剤、
    （ｋ）タンパク質キナーゼ阻害剤、
    （ｌ）脂質キナーゼ阻害剤、
    （ｍ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、
    （ｎ）リボザイム、
    （ｏ）ワクチン、及び
    （ｐ）抗血管新生剤から選択される、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  20. 前記活性薬剤が、表３～５に列挙される化合物、アウリスタチンＦ、ＰＮＵ、α－アマニチン、Ｑ－α－アマニチン、β－アマニチン、ＣＢＩインドール、ＣＢＩ二量体、（ＣＡ４－ＣＡ４）、（ＣＡ４－ＳＮ３８）、フェンパンスタチン、エキサテカン、ｄＰＢＤ、Ｑ－ｄＰＢＤ、ｄＴＢＤ、Ｑ－ｄＴＢＤ、ａｄＴＢＤ、ａｄＴＢＤ ＤＭＢＡ、ｄＴＢＤアルキルアミン、ｄＴｈＢＤ、ｄＴｈＢＤ、Ｑ－ｄＴｈＢＤ ＮａＳＯ３、ｄＩｍＢＤ、Ｑ－ｄＦｕＢＤ、及びＩｍＢＤ－ＴＢＤから選択される、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート。
  21. 請求項１から２０のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲートを含む、薬学的組成物。
  22. 治療有効量の化学療法剤を更に含む、請求項２１に記載の薬学的組成物。
  23. がんを治療する方法であって、その治療を必要とする対象に、請求項１から２０のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート、請求項２１又は２２に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
  24. 前記がんが、白血病、リンパ腫、乳がん、結腸がん、卵巣がん、膀胱がん、前立腺がん、神経膠腫、肺がん、気管支がん、結腸直腸がん、膵臓がん、食道がん、肝臓がん、膀胱がん、腎臓がん、腎盂がん、口腔がん、咽頭がん、子宮体がん、又は黒色腫から選択される、請求項２３に記載の方法。
  25. 自己免疫疾患又は炎症性疾患を治療する方法であって、その治療を必要とする対象に、請求項１から２０のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート、又は請求項２１又は２２に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
  26. 前記自己免疫疾患又は前記炎症性疾患が、Ｂ細胞媒介性自己免疫疾患又は炎症性疾患、例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ（ＲＡ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ヴァルデンストローム高ガンマグロブリン血症、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、又はループス腎炎から選択される、請求項２５に記載の方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2023125530A1 (en) * 2021-12-28 2023-07-06 Beigene, Ltd. Antibody drug conjugates
WO2024092219A1 (en) * 2022-10-28 2024-05-02 Eli Lilly And Company Self-hydrolyzing maleimides for bioconjugation
CN116949044B (zh) * 2023-09-20 2023-12-12 北京炫景瑞医药科技有限公司 一种双链寡链核苷酸、包含该双链寡核苷酸的缀合物以及它们的用途
CN117777296B (zh) * 2024-02-28 2024-05-28 北京肿瘤医院(北京大学肿瘤医院) B7h3亲和体及其诊疗核素标记物的制备方法与应用

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3193933B1 (en) * 2014-09-17 2021-04-28 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Anti-cd276 antibodies (b7h3)
EP3442574A4 (en) * 2016-04-15 2019-12-11 MacroGenics, Inc. NOVEL B7-H3 BINDING MOLECULES, THEIR ANTIBODY-MEDICINAL CONJUGATES AND METHODS OF USE
EP3458479B1 (en) * 2016-06-08 2020-11-04 AbbVie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
AU2018243123A1 (en) * 2017-03-31 2019-09-26 Changzhou Hansoh Pharmaceutical Co., Ltd. B7-H3 antibody, antigen-binding fragment thereof and medical use thereof
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