JP2023529713A - スライドにカバーガラスを装着するシステム及び方法 - Google Patents

Abstract

スライド上の試料にカバーガラスを装着するシステム及び方法には、カバーガラステープが用いられる。本システム及び方法は、カバーガラス装着のためのキシレン及び他の毒性溶媒の使用を低減又は排除することができる。【選択図】図１

Description

本開示は、分析のためのスライドの作製に関し、より詳細には、スライド上に試料をマウントし、カバーガラスを装着する（coverslipping）ことに関する。

［関連出願の相互参照］
本願は、２０２０年６月１２日に出願された米国仮特許出願第６３／０３８，２６４号の利益を主張し、その内容の全体が本明細書の一部をなすものとする。

組織学的分析（histological analysis）のための組織試料の作製には、概して、（例えば、ホルマリンを使用した）試料の固定、試料のパラフィンへの包埋（embedding）、包埋された試料のミクロトームによる切片化、及び組織切片のスライド上へのマウントが含まれる。続いて、パラフィンは、通常、溶媒で処理することによって除去され、組織試料は、色素、染色剤又は他の試薬で処理することができる。かかる処理の後、通常、封入剤が試料に適用され、カバーガラスが試料及びスライドに適用される。例えば、液体マウント剤（mountant）が試料上に付着され、カバーガラス（coverslip）が適用され、次いで溶媒が乾燥される。

組織スライドは、通常、キシレン（xylene）ベースの方法又は水性ベースの方法のいずれかを用いてカバーガラスが装着される（coverslipped）。キシレンベースの方法が水性ベースの方法よりも信頼性が高く永続的であると考えられていることから、臨床病理学者は概してキシレンベースの方法を好んでいる。

封入剤は、カバーガラス装着試料を作製する際に、１つ以上の目的を果たしうる。封入剤は、撮像中に試料を定位置に保持するのに役立ち、試料の乾燥を防止しうる。封入剤は、撮像に使用される対物レンズにとって所望の屈折率を有することが望ましい。封入剤はまた、長期保管のために経時的に試料を保存することに寄与しうる。例示的な封入剤は、Agilent Technologies, Inc.製のＤａｋｏ Ｍｏｕｎｔｉｎｇ Ｍｅｄｉｕｍである。Ｄａｋｏ Ｍｏｕｎｔｉｎｇ Ｍｅｄｉｕｍは、トルエン及びキシレンを含有しており、自動ガラスカバースリッパ（automated glass coverslipper）とともに使用するために設計された低粘度の速乾性封入剤である。

液体封入剤を用いたカバーガラス装着（coverslipping）の手法には、幾つかの欠点がある。マウント剤は、スライドの縁部を覆い、自動ハンドリングを妨げる可能性がある。一部の封入剤の分配には、粘性材料の流体処理が必要となり、それによって、配管が詰まり、機器上に残留化学膜が残る可能性がある。ユーザによって手動で装填されたカバーガラスは、詰まったり壊れたりして処理の中断を引き起こす可能性がある。マウント剤の量は、少なすぎると空隙又は気泡が残り、多すぎると側面から滲み出る可能性があるため、非常に重要である。また、適用後に長時間の乾燥ステップが必要となる。

カバーガラス装着に対する別の手法は、マウント剤をコーティングした酢酸セルローステープ（Sakura Tissue Tek, Sakura Finetek Japan Co., Ltd. Tokyo, Japan）を使用するものである。しかしながら、このテープはキシレンを使用して活性化されている。

キシレンが有毒かつ可燃性であると考えられることから、キシレンの使用は、既存の多くのカバーガラス装着のための手法に対して重大な欠点となる。キシレンを使用するカバーガラス装着器具（coverslipping instrumentation）は、換気用の化学的安全フード内に位置決めすべきことが推奨されているため、複雑性が増大し、運用コストが高くなる。キシレンは、欧州連合によって潜在的な発癌物質として指定されており、多くの国の種々の当局において非推奨であることから、カバーガラス装着プロセスからキシレンを排除することが望まれている。

既存の一部の手法の別の欠点は、カバーガラス装着試料中に水の存在が十分に許容されないことである。しかしながら、免疫組織化学（ＩＨＣ：immunohistochemistry）等の一部の試料処理では、最終染色ステップが水性であるため、カバーガラスを装着する前に試料を溶媒で脱水する必要がある。水中の試料が許容されるカバーガラス装着手法であれば、このステップを排除又は自動化することができるため、有利である。

既存の一部の水性カバーガラス装着法は、カバーガラスがスライドに固定されておらず（付加的な接着ステップを必要とする）、数日間で試料が乾燥し、長期保管に適さないという理由で、臨床使用には信頼性が低いと考えられている。

本開示は、病理試料にカバーガラスを装着する改善されたシステム及び方法を提供する。

本システム及び方法は、既存のシステム及び方法を上回る１つ以上の利点を提供することができ、該利点として、例えば、キシレン及び他の毒性溶媒の低減又は排除と、機械的操作の数を減少させ、液体マウント剤の分配及びカバーガラスのハンドリングを排除することによって、自動カバーガラス装着を簡略化することと、スライド縁部のマウント剤汚損又はコーティングを低減又は排除することによって、カバーガラス装着スライドの自動ハンドリングの信頼性を改善することと、ハンドリング前の溶媒乾燥の必要性を排除することによって、処理速度を改善することと、水性湿潤試料の使用を許容し、又は可能にすることによって、ＩＨＣ処理を加速することと、が挙げられる。

本方法の一部の実施形態では、接着剤は試料に浸透し、及び／又は試料に結合し（つまり、浸透又は結合あるいはそれらの両方）、それによってより長い保管安定性が得られる。

カバーガラス装着システム及びプロセスの例示的な実施形態を示す図である。 スライドキャリアの一実施形態を示す図である。 スライドキャリアモジュールの例示的な実施形態を示す図である。 スライドキャリアモジュールの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラス装着モジュールの例示的な実施形態の図及び態様を示す図である。 カバーガラス装着モジュールの例示的な実施形態の図及び態様を示す図である。 カバーガラス装着モジュールの例示的な実施形態の図及び態様を示す図である。 カバーガラス装着モジュールの例示的な実施形態の図及び態様を示す図である。 カバーガラス装着モジュールの例示的な実施形態の図及び態様を示す図である。 溶媒交換モジュールの例示的な実施形態を示す図である。 溶媒交換モジュールの別の例示的な実施形態を示す図である。 溶媒交換モジュールの別の例示的な実施形態を示す図である。 溶媒交換モジュールの別の例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラス装着プロトコルの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラスストリップ及びディスペンサの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラスストリップ及びディスペンサの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラスストリップ及びディスペンサの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラスストリップ及びディスペンサの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラスストリップ及びディスペンサの例示的な実施形態を示す図である。 カバーガラスストリップ及びディスペンサの例示的な実施形態を示す図である。 本明細書で説明されるカバーガラス装着システムのためのシステムアーキテクチャの例示的な実施形態を示す図である。 本明細書で説明されるカバーガラス装着システムのためのシステムアーキテクチャの例示的な実施形態を示す図である。 本明細書で説明されるスライド上にカバーガラスを装着した標本の画像を示す図である。 本明細書で説明されるスライド上にカバーガラスを装着した標本の画像を示す図である。 本明細書で説明されるスライド上にカバーガラスを装着した標本の画像を示す図である。 本明細書で説明されるスライド上にカバーガラスを装着した標本の画像を示す図である。 本明細書で説明されるスライド上にカバーガラスを装着した標本の画像を示す図である。 溶媒交換モジュールの別の例示的な実施形態を示す図である。 溶媒交換のためのキャピラリヘッドの一実施形態を示す図である。 溶媒交換のためのキャピラリヘッドの一実施形態を示す図である。 溶媒交換のためのキャピラリヘッドの一実施形態を示す図である。 溶媒交換のためのキャピラリヘッドの一実施形態を示す図である。 溶媒交換のためにキャピラリヘッドを使用する方法の一実施形態を示す図である。 本装置の実施形態を使用して処理された未染色組織切片の画像及びヒートマップ分析を示す図である。 実施例９に説明されるように処理された標本の画像を示す図である。

種々の実施形態について記載する前に、本開示の教示は、記載される特定の実施形態に限定されないことを理解されたい。別段定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。本明細書において参照される全ての特許及び刊行物は、その全体が引用することにより明示的に本明細書の一部をなすものとする。

本明細書において使用される場合、「略（approximately）」及び「約（about）」という用語は、通常の意味に加えて、当業者にとって許容可能な限度又は量内であることを意味する。「約」という用語は、概して、示された数の±１５％を指す。例えば、「約１０」は、８．５～１１．５の範囲を示すことができる。例えば、「略同じ」とは、当業者には比較される事物が同じであるとみなされることを意味する。本開示において、数値範囲には、その範囲を規定する数字が含まれる。記載の値又は記載の範囲内にある値と、他の任意の記載の値又は記載の範囲内にある値との間の各下位範囲も開示されるものとする。記載の範囲が限度値を含む場合、含まれる限度値のいずれか又は双方を除外した範囲も本開示に含まれる。

本明細書において使用される場合、「a」、「an」、及び「the」という用語は、文脈によって別段明記されない限り、単数及び複数の双方の指示対象を含む。したがって、例えば、「a fluid」は、１つの流体及び複数の流体を含む。別段示されない限り、「第１」、「第２」、「第３」という用語、及び他の序数は、本明細書において、本システム及び方法の異なる要素を区別するために使用され、数値的な制限を与えるようには意図されない。第１の層及び第２の層と称する場合、構成要素が２つの層のみを有することを意味するように解釈すべきではない。第１の要素及び第２の要素を有する構成要素は、別段示されない限り、第３の要素、第４の要素、第５の要素（以下略）も含むことができる。

概して、図面及び図面に示された様々な要素は、縮尺どおりに描かれていないことが理解される。さらに、「上」、「下」、「頂」、「底」、「上側」、「下側」、「左」、「右」、「鉛直」、及び「水平」等の相対的な用語は、添付図面に示されうるような様々な要素の互いに対する関係を説明するために使用される。これらの相対的な用語は、図面に示される向きに加えて、装置及び／又は要素（つまり、装置又は要素あるいはそれらの両方）の異なる向きを包含するように意図されることが理解される。例えば、毛細管処理モジュールが図面の視点に対して反転される場合、例えば、別の要素の「上」として記載される要素は、ここではその要素の「下」となる。同様に、装置が図面の視点に対して９０度回転される場合、例えば、「鉛直」として記載される要素は、ここでは「水平」となる。

本明細書で使用される場合、「スライド（slide）」とは、生体試料又は化学的試料のための少なくとも１つの実質的に平坦な表面を有する任意の試料ホルダ、支持体又は基材を指す。スライドは、少なくとも１つの試料を支持しうるキャリア、顕微鏡スライド、試験管、チップ、アレイ、又はディスクでありうる。スライドは、通常、第１の主スライド表面及び第２の主スライド表面を有する。主スライド面は、通常、長軸及び短軸、例えば長方形の長軸及び短軸を有する。

試料は、種々の方法でスライド上に配設することができる。一部の実施形態では、試料は、組織又は細胞の層又はスライス等の生体試料である。しばしば、試料は、組織学的分析のための組織切片又は細胞スメア又はペレットである。組織又は他の試料は、ホルムアルデヒド中又はパラフィン等の包埋媒体中で保存することができる。パラフィン又は他の包埋媒体中の試料は、脱パラフィン化（deparaffinization）等のステップに供することができ、それによって、試料を覆い、及び／又は浸潤する（つまり、覆い又は湿潤するあるいはそれらの両方）パラフィン又は他の包埋媒体が除去される。

本発明の方法及びシステムは、カバーガラステープ等のカバーガラスを用いることができ、このテープは、試料用のカバーガラス（coverslip）である。本明細書で使用される場合、用語「テープ（tape）」は、テープ、ストリップ、バンド、パッチ、及び他の比較的平坦な形態を包含する。組織切片にカバーガラスを装着する際に使用する接着剤としては、試料及びスライドへの十分に強力な接着を提供するものが望ましい。

本明細書で使用される場合、「自動」又は「自動化（automated）」とは、機械的デバイス、コンピュータ、及び／又は電子制御（つまり、機械的デバイス、コンピュータ、又は電子制御あるいはそれらの全て）若しくは信号によって実質的に実行される複数のステップを意味するが、説明される特徴又はステップのうちの１つを手動で置換する等、一部の人間の介入ステップを除外するものではない。本明細書で使用される場合、自動カバーガラス装着システムはまた、１つ以上の試料作製ステップを行う自動溶媒交換システム又は他の自動装置を含みうる。

［図示の実施形態の説明］
本開示は、被覆標本スライドを作製する改善された方法及びシステムを提供する。

一部の実施形態では、カバーガラステープ（coverslip tape）は、第１のリール上に提供されるか、又は巻き付けられており、カバーガラステープは、第１のリールからカバーガラス装着領域を横断して第２のリールまで延在するか、又は巻き出される。カバーガラステープは、カバーガラステープの第１の切片がスライドの領域に適用された後に、（第１のリールから一部分を巻き出し、第２のリールに一部分を巻き付けること等によって）カバーガラス装着領域を横切って前進することができる。このようにして、カバーガラステープの第２の切片を次のスライド上に位置決めすることができる。

一部の実施形態では、本開示は、以下の要素、すなわち任意選択のスライドキャリアモジュール２００と、任意選択の溶媒交換モジュール５００と、カバーガラステープ等のカバーガラスを分配し、それを試料及びスライドに適用し、それを定位置に堅固に押圧するカバーガラス装着モジュール４００と、を備えるカバーガラス装着システム１００に関する。

スライドにカバーガラスを装着するための例示的な一般的プロセスを図１に示している。設定サブプロセス又は領域において、ユーザは、試料が配設されたスライド１０をスライドキャリア２０に装填する。ユーザは、スライドキャリア２０内にスライド１０を提供し、次いで、該スライドキャリア２０は、溶媒タンク３０内に浸漬されうる。組織切片等の試料１２がスライド１０上に配設される。スライド１０は、試料領域１４及びスライドバーコード１６を含みうる。１つの実施形態では、溶媒タンクは、水である入力溶媒を収容する。スライドキャリアの一例を図２に示している。スライドキャリア２０は、溶媒タンク３０に浸漬されうる。スライドキャリアハンドル２１は、スライドキャリア２０と一体化されうるか、又はスライドキャリア２０をロックオン及びロックオフしうる。スライドキャリアハンドル２１は、溶媒タンクへのスライドキャリア２０の浸漬及び溶媒タンクからのスライドキャリア２０の取り出しを容易にする。スライドキャリアハンドル２１は、フランジ２２を含むことができ、該フランジ２２は、スライドキャリアを移動させるロボットアームによって係合されうる。スライド１０は、包埋媒体の除去、又は試料から溶媒を除去するため、又は試料に新しい溶媒を適用するため等、１つ以上の目的のために溶媒タンク３０に浸漬されうる。一部の実施形態では、溶媒タンク３０は、封入剤として好適な予備湿潤（prewet）溶媒を含む。他の実施形態では、溶媒タンク３０は、アッセイ溶媒又は水等、マウント以外の目的のための入力溶媒を含み、入力溶媒は、その後、予備湿潤溶媒と交換することができる。所望の期間の後、スライドキャリア２０は、溶媒タンク３０から取り出され、スライドキャリアモジュール２００に配置され、カバーガラス装着モジュールへと移動する。設定中に、ユーザはまた、スライド１０に適用されるカバーガラステープの長さ等のカバーガラス装着のためのプロトコルを入力する。図３Ａ及び図３Ｂは、スライドキャリアモジュール２００によりスライドキャリア２０が溶媒タンクから取り出され、各スライド１０がカバーガラス装着モジュール４００に順次移送される様子を示している。スライド１０は、スライドキャリアモジュール２００内に垂直に保持される。スライドリムーバは、単一のスライド１０の短辺に係合し、スライド１０を上方に押し上げてスライドキャリア２０から出すことができるようなサイズである。手順の前述の部分のうちの１つ以上は、ユーザによって行われるのではなく、自動化されてもよいことが理解されるであろう。

カバーガラス装着サブプロセス又は領域において、スライド１０は、スライドキャリア２０から取り出され、処理のために支持体に移送される。支持体は、溶媒交換モジュール及び／又はカバーガラス装着モジュール（つまり、溶媒交換モジュール又はカバーガラス装着モジュールあるいはそれらの両方）の一部であってもよく、これらは以下でより詳細に説明される。一部の実施形態では、スライド１０は、カバーガラステープが適用される前に溶媒交換に供される。他の実施形態では、スライド１０は既にカバーガラス装着のために好適となっている。カバーガラスがスライドに適用された後、カバーガラス装着スライドは、スライドキャリア２０（以前と同じスライドキャリア又は異なるスライドキャリアでありうる）内に配置される。手順の前述の部分のうちの１つ以上は、自動化されうるか、又はユーザによって行われうることが理解されるであろう。

図４Ａ～図４Ｅは、カバーガラス装着モジュール４００の例示的な実施形態を示している。スライドは、図４及び図５Ａに示すように、カバーガラス装着モジュール４００内のスライドマウントテーブル４０２上に位置決めされる。概して、スライドは、その長軸が、スライドマウントテーブル４０２が移動する方向、及び／又はカバーガラステープディスペンサがスライドマウントテーブルに対して移動する方向（つまり、スライドマウントテーブル４０２が移動する方向又はカバーガラステープディスペンサがスライドマウントテーブルに対して移動する方向あるいはそれらの両方）と整合するように位置決めされる。スライドマウントテーブル４０２は、手動又は自動動作によって移動させることができる。例えば、スライドマウントテーブル４０２は、リニアステージ４０３に取り付けることができ、該リニアステージ４０３は、自動化された直線運動を提供する。一部の実施形態では、スライドは、その長軸が、カバーガラステープがリールから巻き出される方向と整列するように位置決めされる。カバーガラス装着モジュール４００は、カバーガラステープディスペンサアセンブリ４０４を含んでおり、該カバーガラステープディスペンサアセンブリ４０４は、カバーガラステープの供給源が巻き付けられたリール４０６を備える。剥離ライナモータ（release liner motor）は、剥離ライナアセンブリ４０８上の剥離ライナを転がして、ソーステープアセンブリ４１６内のソーステープ４１０を、カバーガラステープディスペンサアセンブリ４１８を通して引き出す。剥離ライナ４１２は、押出スロット４２０を通過し、押出ガイド４２２上を通過する剥離されたテープ４１４から分離される。剥離されたテープが位置センサ４２４をトリガすると、剥離ライナモータが停止する。

一部の実施形態では、本システムは、圧力を印加し、スライド上にカバーガラステープを積層するためのラミネータアセンブリ４３０を備える。ラミネータアセンブリ４３０は、所望の又は所定の圧力及び／又は速度（つまり、圧力又は速度あるいはそれらの両方）でカバーガラステープを水平方向に転がすラミネータローラ４３４を含みうる。ラミネータアセンブリ４３０はまた、ラミネータローラ４３４をスライドマウントテーブル４０２に対して垂直に移動させるため、及び／又はカバーガラステープ４１４に印加される圧力を増加又は減少させるため（つまり、ラミネータローラ４３４をスライドマウントテーブル４０２に対して垂直に移動させるため又はカバーガラステープ４１４に印加される圧力を増加又は減少させるためあるいはそれらの両方）のラミネータアクチュエータ４３２を含みうる。一部の実施形態では、スライドマウントテーブル４０２は、スライド１０の長軸に沿った水平移動のために構成されている。かかる移動は、ステージによって提供されうる。図４Ｃ～図４Ｅの例示的な実施形態に示すように、スライドマウントテーブル４０２は、ラミネータ開始位置４３６に移動され、ラミネータアクチュエータ４３２は、スライド１０がラミネータアクチュエータ４３２によって位置決めされると、ラミネータローラ４３４を使用してスライド１０上に剥離されたテープ４１４を押圧する。十分な長さのカバーガラステープ４１４がスライド１０に適用された後、適用されたカバーガラステープは、ソーステープから切断されうる。図４Ｄの例示的な実施形態に示すように、ナイフアクチュエータ４４２は、切断スロット４４６を通してナイフ４４４を延伸させて、剥離されたテープ４１４が適切な長さに切断されるようにする。リニアステージは、ラミネータ開始位置４３６からラミネータ終了位置４３８まで制御された速度で移動して、剥離されたカバーガラステープ４１４をスライド１０上に押圧する。

カバーガラス装着モジュール４００は、ラミネータローラ４３４がスライドと同一平面上にあるように構成されている。ラミネータの力及びラミネーション速度もまた、カバーガラス装着モジュール４００によって制御される。一部の実施形態では、１０ニュートン／インチ～３００ニュートン／インチのローララミネータ力、又はスライドに接触するローラの１５０ニュートン／インチ～２５０ニュートン／インチの力が好適であることが分かっている。一部の実施形態では、ＡＳＴＭ Ｄ２２４０タイプＡ又はタイプＤスケールによって決定されるように、１０～８０、特に２０～３０のショアデュロメータ硬度を有するラミネータローラが有用であった。一部の実施形態では、０．０１ｍｍ／秒～１０ｍｍ／秒、特に０．１ｍｍ／秒～０．５ｍｍ／秒の積層速度（lamination speed）が有用であった。ラミネータ開始位置とラミネータ終了位置との間でスライドマウントテーブルが複数回の移動するため、スライドへのカバーガラステープの積層は、複数回のパスで行うことができる。一部の実施形態では、１回～１０回の積層パス、又は２回～４回の積層パスが好適であることが分かっている。

積層が完了した後、ラミネータアクチュエータ４３２はラミネータローラ４３４を後退させ、リニアステージ４０３はスライドマウントテーブルを抜き取り位置（unload position）に移動させる。スライドキャリアモジュールは、スライドをスライドキャリア（通常は出力スライドキャリア）に移送する。

本方法の一部の実施形態では、カバーガラステープを適用する前に試料上の溶媒を交換することが望ましい場合がある。図５は、溶媒交換（すなわち、本発明のカバーガラス装着法において望ましくない溶媒を除去し、所望の溶媒を適用する）のための例示的な新規の溶媒交換モジュール５００を示している。例えば、望ましくない溶媒とは、色素を試料に適用するために使用される入力溶媒とすることができ、予備湿潤溶媒が封入剤と適合するように選択されてもよい。従来の手法では、予備湿潤溶媒としてキシレンが使用されるが、上述したように、キシレンは望ましいものではない。他の有用な予備湿潤溶媒としては、水、ヘキサン、エタノール、イソプロピルアルコール、Ｃｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）及び他の溶媒が挙げられる。また、これらの溶媒の混合物、並びに界面活性剤及びプロピレングリコールを含む湿潤を増強するための他の物質の添加も有用であった。入力溶媒（試料を処理するために溶媒タンク内で使用される溶媒でありうる）が予備湿潤溶媒として適切でない場合、入力溶媒を予備湿潤溶媒に変更するためのプロセス経路を提供する溶媒交換モジュール５００を本システムに含めることができる。再現可能かつ完全な溶媒交換を確実にするために、１つ又は複数の中間溶媒を連続的に使用することが有用でありうる。

例示的な実施形態では、図５に示すように、スライド１０は、支持体上に配設され、この支持体は、この場合、スライド１０から除去される溶媒を収集する溶媒戻り部５５０（例えば、真空チャック）である。吸引を行うために、真空チャック又は他の溶媒戻り部５５０は、溶媒トラップ５５２を通して溶媒戻りポンプ５５１に接続されうる。真空チャック５５０は、スライドマウントテーブル上に配設されうるか、又はスライドマウントテーブルと一体化されうる。図５において、スライドマウントテーブルは、第１のエアナイフ５１０から始まり、第１の溶媒源５２２から第１の溶媒を分配する第１のディスペンサ５２０、第２のエアナイフ５３０、及び第２の溶媒源５４２から第２の溶媒を分配する第２のディスペンサ５４０へと移動する。第１のエアナイフ５１０及び第２のエアナイフ５３０は、流量計５１１、５３１に流体接続され、該流量計５１１、５３１は、エアナイフ５１０、５３０に供給されるガスを制御、決定、又は測定する。流量計５１１、５３１は、空気供給源５１４又は他のガス源から空気又は他のガスを受け取り、これらは、エアナイフ５１０、５３０に直接、又は圧力調節器５１３、空気流弁５１２、及び流量計５１１、５３１等の１つ以上の他のデバイスを介して接続することができる。

本方法の１つの実施形態では、スライド上の入力溶媒は、水であり、溶媒交換モジュール５００を通過する。該溶媒交換モジュール５００では、アルコール溶媒が使用される。このアルコール溶媒は、エタノール含有溶媒、例えば、１００％エタノール、又は少なくとも９２％エタノール若しくは少なくとも９６％エタノールを含有する水溶液でありうる。一部の実施形態では、第１の溶媒源５２２、第１のエアナイフ５１０、及び第１のディスペンサ５２０のみが使用され、アルコール溶媒は、予備湿潤溶媒として機能する。付加的なエアナイフ、ディスペンサ、及び溶媒が溶媒交換モジュールに付加されうることも企図される。溶媒ディスペンサは、当業者に知られているような種々の形状を有する噴霧器、ブラシ、スタンプ、又はドリップチューブでありうる。

図６は、噴霧器６０２が第１のディスペンサとして使用される溶媒交換モジュール６００の別の例示的な実施形態を示している。スライド１０は、支持体６０４上に配設されており、空気流６０６は、第１のエアナイフ６０８によってスライド１０の先端に方向付けられ、入力溶媒６１０をスライド１０の後端に蓄積させる。噴霧器６０２は、スライド１０が支持体６０４内の真空チャックによって左から右に移動されるときに、スライド１０の先端上に予備湿潤溶媒６１２を噴霧する。

図７Ａは、溶媒交換ヘッドが交換液を分配し、試料から水又は他の望ましくない溶媒を除去する溶媒交換モジュール７００の別の実施形態を示している。キャピラリ力（capillary force）により、スライドと溶媒交換ヘッドとによって形成されるキャピラリ間隙内に分配された交換液が保持され、溶媒がスライドから流れ落ちることが防止される。図７Ａに示す実施形態では、スライド１０と溶媒交換ヘッド７０２との間にキャピラリ間隙が形成される。溶媒交換ヘッド７０２は、少なくとも１つの分配孔及び少なくとも１つの排出孔を備えており、それを通して交換液をスライド１０上に分配することができ、かつ排出液をスライドから除去することができる。溶媒交換モジュール７００は、スライド１０から距離をおいて溶媒交換ヘッド７０２を位置決めするように構成され、その距離は、スライドと溶媒交換ヘッド７０２の溶媒交換面との間にキャピラリ間隙を形成するために十分に小さい。例えば、この距離は、１６００μｍ未満、又は８００μｍ未満、又は４００μｍ未満、又は２００μｍ未満、又は１００μｍ未満、又は５０μｍ未満でありうる。一部の実施形態では、溶媒交換ヘッド７０２は、溶媒交換ヘッドの中央に分配孔と、スライドの縁部付近の溶媒交換ヘッドの各端部に１つずつ、２つの排出孔とを備える。一部の実施形態では、交換溶媒が溶媒交換ヘッドの下に維持されるように、排出孔（複数の場合もある）は分配孔（複数の場合もある）よりも大きい。溶媒交換ヘッド７０２は、交換液がスライドの試料及び染色領域の実質的に全体にわたって流れるように、スライド１０に沿って一方向又は前後に１回以上移動させることができる。例えば、溶媒交換ヘッドは、試料を少なくとも１回、２回、３回、４回、５回、又はそれ以上通過することができる。複数回の往復運動により、溶媒交換の効率を増加させることができる。分配孔及び排出孔（複数の場合もある）を通る液体流の速度は、キャピラリ間隙内に液体の層流を提供するように選択すべきである。例えば、一部の実施形態では、排出孔（複数の場合もある）を通る流量は、分配孔を通る流量が２．４ｍＬ／ｓ超であるとき、２．６ｍＬ／ｓ未満でありうる（又は２つの排出孔のそれぞれを１．３ｍＬ／ｓ超の流量が通る）。流量は、分配ライン及び戻りラインに接続されたポンプによって設定することができる。染色面積を最大化するために、ヘッドは、スライド縁部まで移動できる必要があるが、漏出を防止するために縁部を越えて延在してはならない。

交換溶媒（エタノール等）を含む交換液が、リザーバ７０４からの分配ライン７０６からスライド１０上に分配され、排出液がスライドから除去され、戻りライン７０８、７１０を通ってリザーバ７０４に戻される。分配ライン７０６及び戻りライン７０８、７１０を通る液体の流れは、ポンプ７０７、７０９、７１１によって提供される。交換溶媒は、キャピラリ力によって溶媒交換ヘッド７０２の下に維持され、装置の設計により、スライド上面からの漏出又はウィッキング（wicking）が制限される。スライド上に残留する交換溶媒の量は、溶媒交換ヘッド７０２の下のスライドの最終通過中に制御することができ、これにより、スライドのカバーガラス装着においてより安定した結果が得られる。一部の実施形態では、エタノール等の交換溶媒からのガスは、石炭フィルタ７１２を有するヒュームフード（hume hood）７１３を使用すること等によって収集され、これによりガスが所望のレベル未満に保たれ、安全性が確保される。交換溶媒の大部分がスライド１０を通過し、望ましくない溶媒とともに排出孔を通って除去され、次にリザーバ７０４に戻される。結果として、リザーバ内の交換液は、より多くのスライドが溶媒交換ヘッド７０２によって処理されるにつれて希釈され、最終的に、リザーバ７０４内の交換液は、ユーザによって補充されなければならない。例えば、リザーバ内の交換液は、最初に、エタノール等の交換溶媒の９６％ｖ／ｖの濃度を有していてもよく、ユーザは、交換溶媒の濃度が９０％ｖ／ｖ又は別の所定の限界に到達した際にリザーバを交換又は補充してもよい。リザーバ７０４内の交換溶媒を希釈する水を減らすために、ユーザは、本溶媒交換方法が使用される前に、スライド上の水を除去するための付加的なステップを行ってもよい。

図７Ｂは、図７Ａの装置における溶媒交換ヘッド７０２を示している。一部の実施形態では、溶媒交換ヘッド７０２は、スライドの幅と実質的に同じ幅を有する。溶媒交換ヘッド７０２は、１つの中央分配孔７１４及び２つの排出孔７１６、７１７を有し、キャピラリ間隙への流れ抵抗を低減し、ヘッドの下の容積の交換時間を短縮する。しかしながら、好適な溶媒交換ヘッドは、任意の所望の数、例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又はそれ以上の分配孔及び排出孔を備えうる。交換液及び除去液の流れは、１つ以上のポンプによって制御することができる。一部の実施形態では、溶媒交換モジュールは、分配ライン及び戻りラインのそれぞれのための別個のポンプを備え、代替として、一部の実施形態では、モジュールは、分配ラインのためのものと、戻りラインのための１つのポンプとを備える。図７Ｂにおいて、排出孔７１６、７１７は、排出孔の周りに隆起表面７１８、７１９を有すること等によって、分配孔７１４の周りの領域よりも小さいキャピラリ間隙を有する領域に位置決めされる。

図８は、上述したスライド装填、溶媒交換、カバーガラス装着、及びスライド抜き取りのアクティビティ及びモジュールを実装する、被覆試料スライドを作製するための全体的な機器プロトコルの例示的な実施形態を示している。より一般的には、図８は、被覆試料スライドを作製する本方法の種々の実施形態を示している。スライドを処理するための命令を含む１つ以上のサブルーチンが、コントローラに入力される。試料を有するスライドがスライドキャリア内に提供され、スライドキャリアは、溶媒交換モジュール及びカバーガラス装着モジュールを備えた機器に装填される。アクチュエータは、スライドキャリアからスライドを選択する。機器内のバーコードリーダがスライドを識別し、識別情報がコントローラに伝達され、コントローラは、スライドを処理用の場所に方向付ける信号を提供する。そのスライドに対する指示が溶媒除去を必要とする場合、スライドは、図５、図６又は図７Ａによるモジュール等の溶媒除去モジュールに移動される。スライドは、ステージ又はコンベヤ等の支持体上に配置され、該支持体は、１つの軸に沿って、好ましくはその長軸に沿ってスライドを移動させる。エアナイフを作動させて、スライド上の入力溶媒が除去される。一部の実施形態では、モジュールはまた、予備湿潤溶媒等の溶媒を適用するための溶媒ディスペンサを含む。スライドは、カバーガラス装着モジュールに移動させることができる。一部の実施形態では、同じ支持体（ステージ等）が溶媒交換モジュールからカバーガラス装着モジュールに移動する。カバーガラステープは、ディスペンサアセンブリから押し出され、ステージは、スライドの後端がカバーガラステープの先端の下にあるようにスライドを位置決めする。ステージ及び／又はディスペンサアセンブリ（つまり、ステージ又はディスペンサアセンブリあるいはそれらの両方）は、スライドの長軸の方向（カバーガラステープを押し出す方向と実質的に同じであることが好ましい）に直線的に移動する。ラミネータアセンブリは、ラミネータ（ローラ等）を延伸させる。カバーガラステープを好適な長さに切断して、スライド上の試料が被覆される。ラミネータは、カバーガラステープに圧力を印加し、カバーガラステープをスライドに付着させる。ラミネータアセンブリは、ラミネータを後退させる。次に、ステージはスライドを抜き取り位置（unloading location）に移動させ、そこでアクチュエータがスライドを取り出し、スライドを出力スライドキャリア内に配置する。

本システム及び方法において、清浄なカバーガラステープを任意の形態で使用するために提供することができる。一部の実施形態では、清浄なカバーガラステープは、カバーガラスソーステープとして提供され、カバーガラス装着ソーステープは、カバーガラステープを清浄に保つため、及び／又はスライドへのその適用を容易にするため（つまり、カバーガラステープを清浄に保つため又はスライドへのその適用を容易にするためあるいはそれらの両方）の１つ以上の特徴を有する。カバーガラスソーステープ９０２の例示的な構成を図９に示している。カバーガラスソーステープ９０２は、概して、裏材層９０４及び接着層９０６を備える。一部の構成では、カバーガラスソーステープ９０２はまた、剥離層９０８を備える。剥離層９０８は、カバーガラスソーステープ９０２がリールに巻き付けて提供される場合に特に望ましい。

一部の実施形態では、カバーガラスソーステープは、キスカット（kiss cut）部分を備え、該キスカット部分は、カバーガラステープとして使用される部分の境界内に軽切削部（light cut）を含む。カバーガラスがキスカットで作製される場合、それらは裏材から剥がすことができる。複数のキスカット部分を剥離層等のストリップ上に直線的に位置決めすることができる。

図１０、図１１Ａ及び図１１Ｂ、図１２及び図１３は、有利でありうる種々のカバーガラスソーステープの例示的な実施形態を示している。図１０では、カバーガラスソーステープ１００２は、テープディスペンサアセンブリを通して引き出される剥離ライナ１００４を含み、剥離されたテープ１００６は、ガイド表面１００８上に押し出され、ナイフ１０１０で切断される。図１１Ａ及び図１１Ｂにおいて、キスカットソーステープ１１０２は、１組のキスカットカバーガラス１１０４から構成され、光学的に透明な裏材及び感圧接着剤を有する一連のキスカット領域として、連続剥離ライナ１１０６上に設けられている。キスカットカバーガラスソーステープ１１０２は、一連のキスカットカバーガラス１１０４が剥離ライナ１１０６の長さに沿って均一に位置決めされるように作製されている。テープディスペンサアセンブリ１１０８は、移動制御のための位置センサを使用して、右側に示すように各キスカットカバーガラスを押し出す。図１２において、フレームカットされたカバーガラスソーステープ１２０２は、カバーガラス１２０６を画定するための穿孔１２０４を有しており、テープリールを使用してテープをスライド上で前進させる。環状パンチ１２０８は、フレームカットされたカバーガラス１２０６を剥離し、カバーガラス１２０６をスライドに取り付ける。テープの残りの部分（穿孔（perforate）されたカバーガラスが剥離された後）は、テープリール１２１０上に収集することができる。図１３では、カバーガラスソーステープ１３０２は、剥離ライナを有していない。テープ駆動機構１３０４は、ナイフ１３０６によって切断された各長さのテープを押し出して、各スライド１０に適用する。その他、バーコードリーダ、エアナイフ、カバーガラステープディスペンサ、ラミネータ、及びカバーガラステープカッタ又はナイフ等の上述したような構成要素がある。

スライド処理に対する一部の従来の手法では、水中のスライドが一連のアルコール浴（alcohol bath）に浸漬され、キシレン浴（xylene bath）への浸漬の前の確実な脱水が行われる。したがって、本システムの一部の例示的な実施形態では、図１４に示すように、自動バスケットムーバは、７０％エタノール、９５％エタノール、１００％エタノール、及びＣｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）を含むスライド浴等の一連のスライド浴又はタンク間でスライドキャリアを移動させる。図１４はまた、本明細書に記載されるスライド作製システムの一実施形態内の配置を示している。図１５に示されるスライド作製システムの第２の構成では、スライドマウントテーブルにより、エアナイフと溶媒ディスペンサとの間でスライドが移動する。

一部の実施形態では、本システムは、スライドキャリアのための保管ユニットを備える。例えば、システムは、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又はそれ以上のスライドキャリアのための入力保管部及び出力保管部を備えてもよい。一部の実施形態では、本システムを用いて、スライドキャリアからスライドが回収され、必要に応じてスライドが処理され、同じスライドキャリアにスライドが戻される。例として、処理には、最初に溶媒交換を行い、次にカバーガラスを装着し、次にスライドを回収されたスライドキャリアに戻すことが含まれうる。これにより、処理されたスライドを受け取る新しいスライドキャリアが不要となるため、機器が簡素化され、それにより、スライドキャリアのハンドリングが少なくなり、機器内部でのバスケットのハンドリングが減少する。例えば、一部の実施形態では、バスケットは、水中で装填され、スライド処理が開始するときに水から取り出される。一部の実施形態では、スライド処理は、組織試料の乾燥から生じるアーチファクトが低減又は排除されている時間内に完了することができる。例えば、一部の実施形態では、スライド処理は約１５秒で完了し、２０枚のスライドを有するバスケットが５分で処理することができる。これにより、スライドが水から出る最長時間は４分４５秒であるため、組織試料の乾燥から生じるアーチファクトを低減又は排除することができる。一部の実施形態では、溶媒交換プロセスは、約５秒以下で完了する。一部の実施形態では、カバーガラス装着プロセスは、約５秒以下で完了する。一部の実施形態では、スライドをスライドキャリアに戻すプロセスは、約５秒以下で完了する。

一部の実施形態では、本システムは、インサイチュハイブリダイゼーション（in situ hybridization）等の免疫組織化学アッセイ（immunohistochemistry assay）以外のアッセイに供されたスライドの自動カバーガラス装着のために使用することができる。かかる実施形態では、システムは、スライドキャリアをドライ装填するオプションと、交換溶媒を適用する代わりにアッセイ用の封入剤（mounting medium）（例えば、ＦＩＳＨ封入剤）を適用するディスペンサとを含む。

［材料］
一部の実施形態では、カバーガラステープは、３Ｍ（商標）Microfluidic Diagnostic Tape 9795R又は他の透明接着テープ等の材料から作製することができる。一部の実施形態では、カバーガラステープは片面である（すなわち、片面のみに接着剤が配設されている）。一部の実施形態では、カバーガラステープは、遅延粘着性接着剤を含む。カバーガラステープは、５０ミクロン～５００ミクロン、好ましくは１００ミクロン～３００ミクロンの厚さを有しうる。接着剤の厚さは、５ミクロン～２００ミクロン、好ましくは１５ミクロン～３０ミクロンでありうる。

カバーガラステープは感圧接着剤を含み、これは、一部の実施形態では、複数のシリコーン系及びアクリル系配合物から選択することができる。現在、3M Company（ミネソタ州メープルウッド）、Polymer Science, Inc.（インディアナ州モンティチェロ）、及びAdhesives Research, Inc.（ペンシルベニア州グレンロック）等の企業によって、消費者用電子機器ディスプレイ及び他の用途のための透明かつ光学的に透明な裏材材料及び接着剤が製造されている。好適な接着剤の例としては、アクリロニトリルコポリマー（例えば、ブタジエン－アクリロニトリルポリマー（ＢＡＣＮポリマー）、ブタジエン－アクリロニトリル－イソプレンポリマー（ＢＡＣＮＩポリマー））、スチレンコポリマー（例えば、スチレン／ブタジエン／スチレン（ＳＢＳポリマー）、スチレン／イソプレン／スチレン（ＳＩＳポリマー）、及びスチレン／エチレン／ブチレン／スチレン（ＳＥＢＳポリマー））、並びにアクリレートコポリマー等の低粘着性感圧接着剤が挙げられる。所望であれば、ポリマー材料のブレンド及び混合物を使用してもよい。感圧接着剤はまた、十分な酸化防止剤、ＵＶ安定剤及び架橋剤を含有していてもよい。

カバーガラステープはまた、通常光学的に透明なポリマーフィルムである裏材を含む。好適なポリマーフィルム材料としては、二酢酸セルロース、三酢酸セルロース、ポリエチレンテレフタレート、スチレン－アクリロニトリル、及びポリメチルメタクリレートフィルムが挙げられる。一部の実施形態では、裏材は、環状オレフィンポリマー又は環状オレフィンコポリマーである。一部の実施形態では、裏材は、５０ミクロン～３００ミクロンの厚さを有する。一部の実施形態では、カバーガラステープはまた、ポリマーフィルムと感圧接着剤との間に結合層を含みうる。適切な結合層材料の選択は、使用される感圧接着剤及び裏材のタイプに基づいて行うことができる。結合層として有用であることが知られている多くの材料が有用であり、例えば、ポリ塩化ビニル、塩化ビニル／酢酸ビニルコポリマー、ポリ塩化ビニリデンのような塩素含有ポリマー、ポリカルボジイミド及びエチレン酢酸ビニルポリマー及びコポリマー、酸又は無水物変性ポリエチレン、プロピレン及びエチレン酢酸ビニルポリマー及びコポリマーを使用することができる。

［パラメータ］
一部の実施形態では、カバーガラステープ全体及び／又はその個々の構成要素（つまり、カバーガラステープ全体又はその個々の構成要素あるいはそれらの両方）の屈折率は、１～２、又は１．２～１．８、又は１．４５～１．６５でありうる。一部の実施形態では、屈折率は、スライドの屈折率と実質的に整合するように選択される。

一部の実施形態では、カバーガラステープの光の視感透過率（ＡＳＴＭ Ｄ１００３－９５に従って決定される）は、少なくとも約８５％又は少なくとも７５％である。

一部の実施形態では、接着剤は、約０．１Ｎ／２５ｍｍ幅～約３．０Ｎ／２５ｍｍ幅の１８０°剥離接着力値を示しうる。

一部の実施形態では、接着剤は、少なくとも約２ｋＮ／ｍ^２、又は少なくとも約４ｋＮ／ｍ^２の動的せん断強度を示しうる。

［カバーガラス装着の前後における試料の作製方法］
本方法は、分析用の試料を作製するため、及び／又は処理後の試料を安定化させるため（つまり、分析用の試料を作製するため又は処理後の試料を安定化させるためあるいはそれらの両方）に、カバーガラス装着の前又は後に付加的なステップを含みうる。概して、試料は、任意の好適な技術によって、分析及び／又は保管（つまり、分析又は保管あるいはそれらの両方）のために作製されうる。一部の実施形態では、試料は、包埋媒体を有しており、これは、スライド上に配置された後に除去される。包埋媒体を除去するためのステップ（複数の場合もある）は、ＦＦＰＥブロックからの組織切片等のほとんどの試料がパラフィンに包埋されていることから、概して脱パラフィン化（deparaffinization）と称される。脱パラフィン化は、スライド上の試料から包埋媒体を除去する任意の技術の代表例である。組織化学的分析のために、一部の実施形態では、標的回収プロセスは、試料を、高ｐＨ又は低ｐＨに調整されたＭＥＳ緩衝液又はクエン酸緩衝液等の好適な緩衝液と接触させ、好適な温度（約９５℃）以上に加熱することによって行われる。これは、熱誘導エピトープ回復（ＨＩＥＲ：heat-induced epitope retrieval）と称される。或いは、試料は、ペプシン、プロテイナーゼＫ若しくは別の消化酵素を適用することによるタンパク質分解消化、又はギ酸等の酸による酸ベースの抗原回復のいずれかに供され、その後、抗体等のアッセイ試薬によるアクセスを容易にするためにそれをインキュベートすることができる。本発明の方法及びシステムはまた、カバーガラステープを適用する前に、試料に対するｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ：in-situ hybridization）ベースのアッセイを使用して分子分析を行うための１つ以上のプロセスを含みうる。ＩＳＨは、緩衝液の存在下での加熱による核酸の変性（denaturation）、及び蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ：fluorescence in-situ hybridization）のための蛍光標識核酸プローブのハイブリダイゼーション、又は発色ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＣＩＳＨ：chromogenic in-situ hybridization）のための色素原の適用を必要とする。ＩＳＨ試料は、封入剤及びカバーガラスの適用前に乾燥される。

以下の実施例は、本開示を例示するものであり、決して本開示を限定するものと見なされるべきではない。

［実施例１］
本実施例では、感圧接着剤（３Ｍ９７９５Ｒ）を含む透明テープを、カバーガラステープとして使用するための適合性について評価した。子宮組織をホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ：formalin fixation and paraffin embedding）のために処理し、５μｍ切片に切断し、スライド上にマウントした。切片試料を脱脂し、ヘマトキシリン及びエオシンを用いて染色し、エタノールで脱水し、次いで予備湿潤溶媒としてのＣｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）に浸漬した。

3M Company（ミネソタ州メープルウッド）製のテープ３Ｍ９７９５Ｒには、剥離ライナを有するシリコーン接着剤でコーティングされた透明ポリプロピレン裏材が含まれる。２４ｍｍ幅のテープのロールを、図４Ａに示すようなカバーガラス装着モジュール上に装填した。カバーガラス装着モジュールは、図１０に示すように、接着テープを分配するように構成された。スライドをＣｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）予備湿潤溶媒浴から手動で取り出し、スライドテーブル４０２上に置き、コンピュータを使用して装置を作動させた。カバーガラステープを各スライドに適用し、続いて積層した。ラミネータアクチュエータ圧力は８０ｐｓｉであり、リニアステージ速度は１０ｍｍ／ｓであった。カバーガラス装着試料の走査画像の例を図１６に示している。

［実施例２］
本実施例では、本発明のカバーガラステープが標本及びスライドに付着した後に、本発明のカバーガラステープを除去する能力を評価する。実施例１の試料の一部を用いて、適用後にカバーガラスを除去する試みを行った。カバーガラステープは、３分後に第１の試料から容易に剥がされ、無傷の組織試料、並びにＣｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）で洗い流すことができる軟質接着剤の残留物が残った。第２の試料については、カバーガラステープを１週間後に剥がしたところ、組織試料の多くがスライドから浮き上がっていた。第３の試料については、カバーガラステープを６０℃で１ヶ月保管した後に剥がしたところ、試料はスライドから完全に浮き上がっていた。Ｃｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）等の溶媒は、接着剤と相互作用し、接着剤を軟化させ、接着剤を組織内に膨潤させると考えられる。時間の経過とともにＣｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）は蒸発し、組織は接着剤で充填された状態になる。

［実施例３］
本実施例では、加速エージングプロトコルを使用して、実施例１で作製したカバーガラス装着試料スライドを評価した。カバーガラス装着試料スライドを６０℃で数週間保管して、２．３年、３．３年、及び４．３年にわたる色素の潜在的な退色を評価した。図１６は、種々の時点でのカバーガラス装着試料の画像を提供している。Ｕｌｔｒａｍｏｕｎｔカバーガラス装着を用いたカバーガラス装着試料では、ヘマトキシリン色素の退色が見られたが、３Ｍ９７９５Ｒカバーガラス装着試料は、比較的安定であった。

［実施例４］
本実施例では、アルコール予備湿潤溶媒を用いて本発明のカバーガラス装着技術を評価する。実施例１と同様に、子宮組織の試料をスライド上に置き、ヘマトキシリンで染色し、実施例１に記載したように、カバーガラス装着モジュールを用いて３Ｍ９７９５Ｒによりカバーガラスを装着した。１００％エタノール、１００％イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、及びこれらのそれぞれが１％プロピレングリコールを含む、異なる予備湿潤溶液を使用した。優れたカバーガラス性能が達成された。図１７は、カバーガラス装着試料の画像を示している。

［実施例５］
本実施例では、ＩＨＣ染色試料に対する本発明のカバーガラス装着技術を評価する。試料を種々の予備湿潤溶媒、すなわちＣｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）及びアルコール及びポリエチレングリコールと接触させた。マイクロ非湿潤化の効果と、良好なＩＨＣ画像を構築する能力とを評価した。マルチブロック試料は、抗体が３，３’－ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）で染色され、核がヘマトキシリンで対比染色されるＩＨＣを用いた染色を除いて、実施例１と同様の方法で作製した。カバーガラスとして３Ｍ９７９５Ｒを使用して、Ｃｌｅａｒｉｆｙ（登録商標）予備湿潤溶媒を使用することで、図１８のパネル（ａ）に示すように、マイクロドライアウトの領域をもたらすことが見出された。図１８のパネル（ｂ）及び（ｃ）に示すように、エタノール及び１％プロピレングリコールの予備湿潤溶液を使用することで、カバーガラス装着を改善することができた。これらのカバーガラス装着試料は、溶媒ボイドを示さなかった。

［実施例６］
本実施例では、ＦＩＳＨ試料に対する本発明のカバーガラス装着技術の使用を評価する。実施例１と同様に試料を作製し、それらをＦＩＳＨについて染色した。Ｄａｋｏ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｍｏｕｎｔｉｎｇ Ｍｅｄｉｕｍを予備湿潤溶媒として試料に適用し、次いで試料を3M Company（ミネソタ州メープルウッド）製の３Ｍ８２１１アクリル転写テープ及びカバーガラスで被覆した。カバーガラス装着スライド上での蛍光顕微鏡検査により、核酸染色のフォーカスと細胞対比染色とが明らかとなった。テープによる実験（図１９Ｂ）では、対照（図１９Ａ）よりも蛍光バックグラウンドが高かった。

［実施例７］
一部の実施形態では、溶媒交換モジュール（図５、図７Ａ、及び図７Ｂに図示されるもの等）はまた、図２０に示すように、リニアステージ４０３を使用してスライド１０の表面にわたって掃引されるキャピラリヘッド３６０を備えうる。キャピラリヘッドは、０．０２ｍｍ～３ｍｍ、好ましくは０．５ｍｍ～２ｍｍの範囲の距離でスライド表面に近接して位置決めされるキャピラリ表面３６２を備える。キャピラリヘッド３６０はまた、ディスペンサ（図５の第１のディスペンサ５２０等）に流体接続された溶媒供給ポート（Solvent Supply Port）３６４と、溶媒戻り部（溶媒戻り部５５０等）に流体接続された溶媒戻りポート（Solvent Return Port）３６６とを備える。溶媒戻り部の流量は、第１のディスペンサ３２０の流量を超えるように調整され、それによって、キャピラリ表面とスライドとの間の過剰な溶媒を確実に除去する。溶媒戻りポートは、供給流を超える戻り流の空気が吸引されるように設置される。任意選択で、供給流を超える戻り流のために、エアベント（Air Vent）３６８がキャピラリヘッド上に設けられる。

［実施例８］
図２１Ａ～図２１Ｄに示すように、性能を改善するために、様々な設計のキャピラリヘッド３６０を使用することができる。重要な設計の変形形態には、溶媒供給ポート３６４及び溶媒戻りポート３６６の様々な形状、並びにキャピラリ表面（Capillary Surface）３６２上のそれらの相対位置が含まれる。キャピラリ表面の輪郭を形成することで、キャピラリヘッドの流れ特性に影響を与えることもできる。

実施例８、図２１Ａでは、溶媒供給ポート３６４及び溶媒戻りポート３６６は、両方とも、スライド幅にわたって広がるスロットとして成形される。両方のポートは、キャピラリ表面３６２上に位置決めされる。

実施例８、図２１Ｂでは、溶媒戻りポートは、キャピラリ表面３６３から離れて位置決めされる。この設計は、キャピラリ表面からこぼれた溶媒のみが確実に除去されるという利点を有する。

実施例８、図２１Ｃでは、溶媒供給ポート３６４及び溶媒戻りポート３６６は両方とも円形の孔である。この設計は、製造がより単純であり、流れが良好に掃引されるという利点を有する。

実施例８、図２１Ｄでは、キャピラリ表面の端部に位置決めされた２つの溶媒戻りポート３６６が存在する。この設計は、溶媒供給ポートと溶媒戻りポートとの間の経路がより短いという利点を有する。

［実施例９］
図２１Ｂの設計のキャピラリヘッド３６０を使用した。キャピラリ表面３６２は、図２２に示すように、キャピラリ表面とスライドとの間のギャップ３６３が０．５ｍｍとなるようにスライド１０の上方に位置決めした。第１のディスペンサ（図５の第１のディスペンサ５２０等）は、１．５ｍｌ／ｓの速度で第１の溶媒９５％エタノールを提供した。溶媒戻りポンプは、５０ｋＰａに設定された真空トラップであった。以下のプロトコルは、図４Ａ及び図５に示され、上述されたシステムを使用して、表１で実行された。

このプロトコルは、図２３に示すように、未染色組織を有するマルチブロック組織切片に対して実施した。組織切片を溶媒交換なしで作製した。図２３のパネルａは画像を示し、図２３のパネルｃは切片のヒートマップを示している。キャピラリヘッド３６０を意図的にずらし、スライドの上半分のみを処理するこのプロトコルで第２の切片を処理した（図２３のパネルｂの画像及び図２３のパネルｄの吸光度ヒートマップ）。

このプロトコルは、ＫＩ６７及びヘマトキシリンで染色した卵巣組織切片に対しても行った。１００％エタノール中に２分間浸漬させることによって処理した対照切片を図２４のパネルａに示している。このプロトコルを用いて処理した実験用切片を図２４のパネルｂに示している。

［例示的な実施形態］
ここで開示されている主題により提供される例示的な実施形態は、以下を含むが、これらに限定されない。

実施形態１。光学顕微法等の光学分析のための被覆試料スライドを作製する方法であって、スライド上の試料（組織切片等）を封入剤と接触させることであって、封入剤は、キシレンを含有しないことと、スライド上の試料をカバーガラスで被覆することであって、カバーガラスは、第１の主表面及び第２の主表面を有し、試料に面する第１の主表面上に感圧接着剤を備えることと、テープに好適な圧力を印加し、それによってカバーガラステープをスライドに付着させることとを含む方法。

実施形態２。カバーガラスは、カバーガラステープを備える、実施形態１に記載の方法。

実施形態３。清浄なカバーガラステープが、テープリールに巻き付けられており、方法は、清浄なカバーガラステープの切片を巻き出し、巻き出された切片をスライドに適用することを更に含む、実施形態２に記載の方法。

実施形態４。清浄なカバーガラステープは、剥離層上にあり、方法は、カバーガラステープを剥離層から分離することを含む、実施形態２又は３に記載の方法。一部の実施形態では、剥離層は剥離層端部を有し、剥離層端部は剥離層リールに巻き取られる。剥離層リールの回転により、カバーガラステープを前進又は駆動することができる。

実施形態５。試料をスライド上に配置し、試料を被覆する前に標本から溶媒を除去することを更に含む、実施形態１～４のいずれかに記載の方法。

実施形態６。スライド上に配置した後に試料を部分的に又は完全に脱水することを更に含む、実施形態１～５のいずれかに記載の方法。例えば、標本は、０％～２０％、好ましくは１５％未満の含水量まで部分的に脱水することができる。

実施形態７。試料は、溶媒交換によって部分的に又は完全に脱水される、実施形態６に記載の方法。

実施形態８。交換溶媒が、噴霧によって試料に適用される、実施形態７に記載の方法。

実施形態９。試料上にガスのラインを吹き付けて（例えば、エアナイフを用いて空気を吹き付けて）溶媒を蒸発させることを更に含む、実施形態８に記載の方法。

実施形態１０。交換溶媒が、試料を横切ってキャピラリ間隙を通って流れることによって、試料に適用される、実施形態７に記載の方法。例えば、スライドは、キャピラリ間隙に対して移動して、より大きな表面積を処理する。

実施形態１１。圧電変換器が、スライドに適用され、高周波圧力波を誘導して溶媒交換を加速する、実施形態７に記載の方法。

実施形態１２。スライドをスライドキャリアから取り出し、スライドをスライドテーブル上に配置することを更に含む、実施形態１～１１のいずれかに記載の方法。一部の実施形態では、スライドテーブルは、スライドを保持し、スライドによる運動を防止するように構成されたスライドテーブル表面を有する。スライドテーブル表面は、実質的に水平であってもよいし、角度を有していてもよい。

実施形態１３。感圧接着剤は、試料の孔に浸透する、実施形態１～１２のいずれかに記載の方法。

実施形態１４。カバーガラステープ上でローラを転がすことによって、例えば６０ｐｓｉの圧力でカバーガラステープに圧力が印加される、実施形態１～１３のいずれかに記載の方法。ローラは、テープ上を一方向に移動することができ、又は第１の方向に移動した後に第２の方向に移動する（例えば、テープに沿って前後に移動する）ことができる。ローラはテープ上を１回以上転がることができ、印加される圧力は毎回同じであっても異なっていてもよい。

実施形態１５。カバーガラス装着モジュールであって、スライドのための表面を有するスライドマウントテーブルであって、スライドマウントテーブル上のスライドの移動を防止又は低減するための１つ以上のスライドストップを備えるスライドマウントテーブルと、スライドマウントテーブルをスライドテーブル上のスライドの長軸方向に移動させるリニアアクチュエータと、スライドマウントテーブルの上方にあり、供給端及び押出端を有するカバーガラステープディスペンサであって、カバーガラステープディスペンサは、供給端でカバーガラステープを受け取り、スライドマウントテーブル上のスライドに対して角度を有して押出端からカバーガラステープを押し出すように構成されているカバーガラステープディスペンサと、テープディスペンサの押出端部の後に位置決めされ、スライド上のカバーガラステープを転がしてカバーガラステープに圧力を印加するように構成されたローラとを備える、カバーガラス装着モジュール。

実施形態１６。カバーガラステープディスペンサから剥離ライナを受け取る剥離ライナリールを更に備える、実施形態１５に記載の装置。カバーガラステープディスペンサの供給端によってリールを位置決めすることができる。

実施形態１７。テープディスペンサは、剥離ライナをカバーガラステープから分離するために、ウェッジ又はローラ等の剥離ライナセパレータを備える、実施形態１５又は１６に記載の装置。

実施形態１８。スライド上の試料の溶媒交換モジュールであって、溶媒交換モジュールは、スライドのための支持体と、支持体の上方にあり、支持体上のスライド上にガスのラインを吹き付けるように構成されたガス供給装置とを備え、支持体及びガス供給装置の一方又は両方は直線運動するように構成されている、溶媒交換モジュール。

実施形態１９。支持体は、コンベヤである、実施形態１８に記載のモジュール。

実施形態２０。支持体は、ヒータ（支持体に埋め込まれた抵抗ヒータ等）を備える、実施形態１８に記載のモジュール。

実施形態２１。被覆標本スライドを作製する装置であって、溶媒交換モジュールと、カバーガラス装着モジュールとを備える装置。

実施形態２２。スライドハンドラモジュールを更に備える、実施形態２１に記載の装置。

実施形態２３。実質的にキシレンを含まないカバーガラス装着試料スライドであって、表面上に試料を有するスライドと、試料に付着したカバーガラステープであって、試料の実質的に全てが、カバーガラステープによって被覆されている、カバーガラステープと、カバーガラステープとスライドとの間で試料と接触しているマウント剤であって、マウント剤はキシレンではない、マウント剤とを備えるカバーガラス装着試料スライド。

実施形態２４。マウント剤は、１つ以上のＣ_１－４アルコール又はＣ_１－４グリコールを含む、実施形態２３に記載のスライド。

実施形態２５。試料は、１つ以上の蛍光染料等の色素を含む、実施形態２３又は２４に記載のスライド。

実施形態２６。色素を含む試料は、少なくとも１０年間安定である、実施形態２３～２５のいずれかに記載のスライド。

実施形態２７。カバーガラステープの接着面をスライド上の試料に適用するように構成されたカバーガラステープディスペンサを備えるカバーガラス装着装置。

実施形態２８。スライド上の試料の溶媒交換モジュールであって、溶媒交換モジュールは、スライドのための支持体と、交換液を分配し排出液を除去する溶媒交換ヘッドであって、溶媒交換ヘッドは、スライドから距離を置いて位置決めすることができ、支持体及び溶媒交換の一方又は両方は、直線運動するように構成されている溶媒交換ヘッドとを備える、溶媒交換モジュール。

実施形態２９。溶媒交換ヘッドは、スライドに面する交換面を備え、交換面は、排出孔を取り囲む隆起部分を備える、実施形態２８に記載の溶媒交換モジュール。

実施形態３０。交換面は、長さ及び幅を有し、幅は、スライド幅と実質的に同じである、実施形態２８又は２９に記載の溶媒交換モジュール。

実施形態３１。交換液を収容するリザーバと、リザーバと溶媒交換ヘッドとを接続する１つ以上の分配ラインと、リザーバと溶媒交換ヘッドとを接続する１つ以上の戻りラインとを更に備える、実施形態２８～３０のいずれかに記載の溶媒交換モジュール。

実施形態３２。交換ヘッドとスライドとの間の距離により、キャピラリ間隙が形成される、実施形態３１に記載の溶媒交換モジュール。また、溶媒交換モジュールは、スライドを横切って移動して、溶媒交換ヘッドよりも大きい面積を処理することができる。

実施形態３３。高周波圧力波を誘導してスライド上での溶媒交換を加速するように構成された圧電変換器を更に備える、実施形態２８～３２のいずれかに記載の溶媒交換モジュール。

実施形態３４。分配ラインに流体接続された分配ポンプと、１つ以上の戻りラインに接続された少なくとも１つの戻りポンプとを更に備える、実施形態２８から３３のいずれかに記載の溶媒交換モジュール。

実施形態３５。分析のための試料スライドを作製する方法であって、スライド上に試料を提供することとを含み、ここで、試料は、第１の溶媒を含むことと、スライド上の試料（例えば、組織切片）と溶媒交換ヘッドとの間にキャピラリ間隙を形成することと、溶媒交換ヘッド内の分配孔から第２の溶媒を含む交換液を分配することと、キャピラリ間隙から排出液を除去することとを含む方法。

実施形態３６。第１の溶媒は、水を含み、第２の溶媒は、アルコール（例えば、エタノール）を含む、実施形態３５に記載の方法。

実施形態３７。排出液は、第１の溶媒及び第２の溶媒の混合物を含む、実施形態３５又は３６に記載の方法。

実施形態３８。排出液をリザーバに通すことを更に含み、リザーバは、第２の溶媒を含む交換液を収容する、実施形態３５～３７のいずれかに記載の方法。

実施形態３９。交換液は、分配ステップ及び除去ステップの間、交換ヘッドの下に保持される、実施形態３５～３８のいずれかに記載の方法。

実施形態４０。溶媒交換ヘッドは、溶媒交換ヘッドの中間部分の分配孔を通して第２の溶媒を分配する、実施形態３５～３９のいずれかに記載の方法。

実施形態４１。スライド上に配置した後に試料から第１の溶媒を部分的に又は完全に除去することを更に含む、実施形態３５～４０のいずれかに記載の方法。例えば、試料は、第１の溶媒として水を含む場合、試料は、０％～２０％、好ましくは１５％未満の含水量まで部分的に脱水することができる。

実施形態４２。試料は、溶媒交換によって部分的に又は完全に脱水される、実施形態４１に記載の方法。

実施形態４３。１つ以上の分配ラインが、スライドに交換液を提供し、１つ以上の戻りラインが、スライドから排出液を除去する、実施形態４２に記載の方法。

実施形態４４。分配ラインから戻りラインへの経路が、溶媒が移動するためのキャピラリ間隙を形成する、実施形態４３に記載の方法。

実施形態４５。圧電変換器が、スライドに適用され、高周波圧力波を誘導して溶媒交換を加速する、実施形態３５～４４のいずれかに記載の方法。

実施形態４６。交換液は、溶媒交換のために６０秒以下の間、試料に適用される、実施形態３５～４５のいずれかに記載の方法。

実施形態４７。交換液は、約５秒以下の間、試料に適用される、実施形態３５～４６のいずれかに記載の方法。

実施形態４８。スライド上の試料をカバーガラスで被覆することを更に含み、カバーガラスは、第１の主表面及び第２の主表面を有し、試料に面する第１の主表面上に感圧接着剤を備える、実施形態３５～４７のいずれかに記載の方法。

実施形態４９。試料をカバーガラスで被覆するプロセスが、約５秒以下を要する、実施形態３５～４８のいずれかに記載の方法。

実施形態５０。スライドは、試料がカバーガラスで被覆された後に、スライドキャリア内に配置される、実施形態４９に記載の方法。

実施形態５１。スライドキャリア内にスライドを配置するプロセスが、約５秒以下を要する、実施形態５０に記載の方法。

本明細書において使用される用語が、特定の実施形態を説明するためのものであり、制限的であることを意図されないことが理解される。規定される用語は、規定される用語の技術的及び科学的意味に加えて、本教示の技術分野において一般に理解され受け入れられているものである。

［引用文献］
国際公開第１９９９／０５３３５７号
国際公開第２００２／０１２８５７号
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国際公開第０２１２８５７号
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英国出願公開第２４８２７２６号
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米国特許出願公開第２００７１６６１９７号
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欧州出願公開第１３０９８４７号
米国特許出願公開第２０１００６９２５９号

本開示を考慮して、方法及び装置を、本教示を踏まえて実装することができることが留意される。さらに、種々の構成要素、材料、構造、及びパラメータは、単に例証及び例として含まれ、制限的な意味で含まれない。本開示を考慮して、本教示を、他の用途で実装することができ、これらの用途を実施する構成要素、材料、構造、及び機器を、添付の特許請求項の範囲内に留まりながら、決定することができる。

Claims (53)

1. スライドのための表面を有するスライドマウントテーブルであって、該スライドマウントテーブル上の前記スライドの移動を防止又は低減するための１つ以上のスライドストップを備えるスライドマウントテーブルと、
   前記スライドマウントテーブルを前記スライドテーブル上のスライドの長軸方向に移動させるリニアアクチュエータと、
   前記スライドマウントテーブルの上方にあり、供給端及び押出端を有するカバーガラステープディスペンサであって、該カバーガラステープディスペンサは、前記供給端でカバーガラステープを受け取り、前記スライドマウントテーブル上の前記スライドに対して角度を有して前記押出端から前記カバーガラステープを押し出すように構成されているカバーガラステープディスペンサと、
   前記テープディスペンサの前記押出端の後に位置決めされ、ロールして、前記スライド上の前記カバーガラステープに圧力を印加するように構成されたローラと
   を備えるカバーガラス装着モジュール。
2. 前記カバーガラステープディスペンサから剥離ライナを受け取る剥離ライナリールを更に備える、請求項１に記載の装置。
3. 前記テープディスペンサは、前記カバーガラステープから前記剥離ライナを分離する剥離ライナセパレータを備える、請求項１又は２に記載の装置。
4. スライドのための支持体と、
   前記支持体の上方にあり、前記支持体上のスライド上にガスのラインを吹き付けるように構成されたガス供給装置であって、前記支持体及び前記ガス供給装置の一方又は両方は、直線運動するように構成されているガス供給装置と
   を備える、スライド上の試料の溶媒交換モジュール。
5. 前記支持体はコンベヤである、請求項４に記載のモジュール。
6. 前記支持体はヒータを備える、請求項４に記載のモジュール。
7. スライド上の試料をキシレンを含有しない封入剤と接触させることと、
   前記スライド上の前記試料をカバーガラスで被覆することであって、前記カバーガラスは、第１の主表面及び第２の主表面を有し、前記試料に面する前記第１の主表面上に感圧接着剤を備える被覆することと、
   前記カバーガラスに好適な圧力を印加し、それによって前記カバーガラスを前記スライドに付着させることと
   を含む、光学分析のための被覆試料スライドを作製する方法。
8. 前記カバーガラスはカバーガラステープを備える、請求項７に記載の方法。
9. 清浄なカバーガラステープがテープリールに巻き付けられており、前記方法は、
   前記清浄なカバーガラステープの切片を巻き出し、前記巻き出された切片を前記スライドに適用すること
   を更に含む、請求項８に記載の方法。
10. 前記清浄なカバーガラステープは剥離層上にあり、前記方法は、前記カバーガラステープを前記剥離層から分離することを含む、請求項８又は９に記載の方法。
11. 前記試料を前記スライド上に配置し、前記試料を被覆する前に前記標本から溶媒を除去することを更に含む、請求項７～１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記スライド上に配置した後に前記試料を部分的に又は完全に脱水することを更に含む、請求項７～１１のいずれか一項に記載の方法。
13. 前記試料は溶媒交換によって部分的に又は完全に脱水される、請求項１２に記載の方法。
14. 交換溶媒が噴霧によって前記試料に適用される、請求項１３に記載の方法。
15. 前記試料上にガスのラインを吹き付けて溶媒を蒸発させることを更に含む、請求項１４に記載の方法。
16. 交換溶媒が前記試料を横切ってキャピラリ間隙を通って流れることによって、前記試料に適用される、請求項１２に記載の方法。
17. 前記スライドは前記キャピラリ間隙に対して移動して、より大きな表面積を処理する、請求項１６に記載の方法。
18. 圧電変換器が前記スライドに適用され、高周波圧力波を誘導して前記溶媒交換を加速する、請求項１３に記載の方法。
19. 前記スライドをスライドキャリアから取り出し、前記スライドをスライドテーブル上に配置することを更に含む、請求項７～１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記感圧接着剤は前記試料の孔に浸透する、請求項７～１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記圧力は、前記カバーガラステープ上でローラをロールさせることによって、前記カバーガラステープに印加される、請求項７～２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 溶媒交換モジュールと、
    カバーガラス装着モジュールと
    を備える、被覆標本スライドを作製する装置。
23. スライドキャリアモジュールを更に備える、請求項２２に記載の装置。
24. 表面上に試料を有するスライドと、
    前記試料に付着したカバーガラステープであって、前記試料の実質的に全てが、前記カバーガラステープによって被覆されている、カバーガラステープと、
    前記カバーガラステープと前記スライドとの間で前記試料と接触しているキシレンではないマウント剤と
    を備える実質的にキシレンを含まないカバーガラス装着試料スライド。
25. 前記マウント剤は１つ以上のＣ_１－４アルコール又はＣ_１－４グリコールを含む、請求項２４に記載のスライド。
26. 前記試料は１つ以上の色素を含む、請求項２４又は２５に記載のスライド。
27. 前記色素を含む試料は少なくとも１０年間安定である、請求項２４～２６のいずれか一項に記載のスライド。
28. カバーガラステープの接着面をスライド上の試料に適用するように構成されたカバーガラステープディスペンサを備える、カバーガラス装着装置。
29. スライドのための支持体と、
    交換液を分配し、排出液を除去する溶媒交換ヘッドであって、該溶媒交換ヘッドは前記スライドから距離を置いて位置決めすることができ、前記支持体及び前記溶媒交換の一方又は両方は、直線運動するように構成されている、溶媒交換ヘッドと
    を備える、スライド上の試料の溶媒交換モジュール。
30. 前記溶媒交換ヘッドは前記スライドに面する交換面を備え、前記交換面は前記排出孔を取り囲む隆起部分を備える、請求項２９に記載の溶媒交換モジュール。
31. 前記交換面は長さ及び幅を有し、前記幅はスライド幅と実質的に同じである、請求項２９又は３０に記載の溶媒交換モジュール。
32. 前記交換液を収容するリザーバと、前記リザーバと前記溶媒交換ヘッドとを接続する１つ以上の分配ラインと、前記リザーバと前記溶媒交換ヘッドとを接続する１つ以上の戻りラインとを更に備える、請求項２９～３１のいずれか一項に記載の溶媒交換モジュール。
33. 前記交換ヘッドと前記スライドとの間の前記距離により、キャピラリ間隙が形成される、請求項３２に記載の溶媒交換モジュール。
34. 前記溶媒交換モジュールは前記スライドを横切って移動して、前記溶媒交換ヘッドよりも大きい面積を処理することができる、請求項３３に記載の溶媒交換モジュール。
35. 高周波圧力波を誘導して前記スライド上での前記溶媒交換を加速するように構成された圧電変換器を更に備える、請求項２９～３４のいずれか一項に記載の溶媒交換モジュール。
36. 前記分配ラインに流体接続された分配ポンプと、前記１つ以上の戻りラインに接続された少なくとも１つの戻りポンプとを更に備える、請求項２９～３５のいずれか一項に記載の溶媒交換モジュール。
37. スライド上に試料を提供することであって、前記試料は第１の溶媒を含む、提供することと、
    前記スライド上の前記試料と溶媒交換ヘッドとの間にキャピラリ間隙を形成することと、
    前記溶媒交換ヘッド内の分配孔から第２の溶媒を含む交換液を分配することと、
    前記キャピラリ間隙から排出液を除去することと
    を含む、分析のための試料スライドを作製する方法。
38. 前記第１の溶媒は水を含み、前記第２の溶媒はアルコールを含む、請求項３７に記載の方法。
39. 前記排出液は前記第１の溶媒及び前記第２の溶媒の混合物を含む、請求項３７又は３８に記載の方法。
40. 前記排出液をリザーバに通すことを更に含み、前記リザーバは前記第２の溶媒を含む交換液を収容する、請求項３７～３９のいずれか一項に記載の方法。
41. 前記交換液は、前記分配ステップ及び前記除去ステップの間、前記交換ヘッドの下に保持される、請求項３７～４０のいずれか一項に記載の方法。
42. 前記溶媒交換ヘッドは、前記溶媒交換ヘッドの中間部分の分配孔を通して前記第２の溶媒を分配する、請求項３７～４１のいずれか一項に記載の方法。
43. 前記スライド上に配置した後に前記試料から前記第１の溶媒を部分的に又は完全に除去することを更に含む、請求項３７～４２のいずれか一項に記載の方法。
44. 前記試料は溶媒交換によって部分的に又は完全に脱水される、請求項４３に記載の方法。
45. １つ以上の分配ラインが前記スライドに交換液を提供し、１つ以上の戻りラインが前記スライドから排出液を除去する、請求項４４に記載の方法。
46. 前記分配ラインから前記戻りラインへの経路が前記溶媒が移動するためのキャピラリ間隙を形成する、請求項４５に記載の方法。
47. 圧電変換器が前記スライドに適用され、高周波圧力波を誘導して前記溶媒交換を加速する、請求項３７～４６のいずれか一項に記載の方法。
48. 前記交換液は、溶媒交換のために６０秒以下の間、前記試料に適用される、請求項３７～４７のいずれか一項に記載の方法。
49. 前記交換液は、約５秒以下の間、前記試料に適用される、請求項３７～４８のいずれか一項に記載の方法。
50. 前記スライド上の前記試料をカバーガラスで被覆することを更に含み、前記カバーガラスは第１の主表面及び第２の主表面を有し、前記試料に面する前記第１の主表面上に感圧接着剤を備える、請求項３７～４９のいずれか一項に記載の方法。
51. 前記試料をカバーガラスで被覆するプロセスが、約５秒以下である、請求項３７～５０のいずれか一項に記載の方法。
52. 前記スライドは、前記試料が前記カバーガラスで被覆された後に、スライドキャリア内に配置される、請求項５１に記載の方法。
53. 前記スライドキャリア内に前記スライドを配置するプロセスが約５秒以下である、請求項５２に記載の方法。

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