CN115917286A - 用于对载玻片施加盖玻片的系统和方法 - Google Patents

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Abstract

用于对载玻片上的样品施加盖玻片的系统和方法采用盖玻片带。该系统和方法能够减少或消除用于施加盖玻片的二甲苯和其他有毒溶剂的使用。

Description

用于对载玻片施加盖玻片的系统和方法
相关申请的交叉引用
本申请要求于2020年6月12日提交的美国临时专利申请号63/038,264的权益，该申请通过引用以其全文并入本文。
技术领域
本公开涉及用于分析的载玻片的制备，更具体地，涉及对载玻片上的样品进行安装和施加盖玻片。
背景技术
用于组织学分析的组织样品的制备通常包括固定样品(例如，使用福尔马林)，将样品包埋入石蜡中，用切片机将包埋的样品切片，并且将组织切片安装在载玻片上。随后，通常通过用溶剂处理来去除石蜡，并且可以用染料、染色剂或其他试剂来处理组织样品。在这样的处理之后，通常将封固介质(mounting medium)施加到样品上，并且将盖玻片施加到样品和载玻片上。例如，将液体封固剂沉积在样品上，施加玻璃盖玻片，然后允许溶剂干燥。
组织学载玻片通常使用基于二甲苯或水基方法施加盖玻片。临床病理学家通常喜欢基于二甲苯的方法，因为它们被认为比水基方法更可靠和持久。
在制备施加盖玻片的样品时，封固介质可以用于一个或多个目的。它有助于在成像过程期间将样品保持在适当位置，并防止样品变干。期望封固介质对于用于成像的物镜具有期望的折射率。封固介质也有助于长期保存样品。示例性封固介质是Dako封固介质，其可从Agilent Technologies公司商购。Dako封固介质包含甲苯和二甲苯，并且是低粘度、快速干燥的封固介质，被设计用于自动玻璃盖玻片机。
使用液体封固介质的盖玻片施加方法有一些缺点。封固剂有时可能覆盖载玻片的边缘，并干扰自动处理。一些封固介质的分配需要对粘性材料进行流体处理，这可能会堵塞管道并在设备上留下残留的化学薄膜。用户手动装载的盖玻片可能会堵塞和破裂，导致处理中断。封固剂的量很关键，因为太少会留下空隙或气泡，太多会从侧表面渗出。在施加之后，需要漫长的干燥步骤。
另一种施加盖玻片的方法是使用涂有封固剂的醋酸纤维素带(由日本东京的Sakura Tissue Tek,Sakura Finetek Japan公司生产)。但是，带是用二甲苯激活的。
由于二甲苯被认为是有毒和易燃的，所以使用二甲苯对许多现有的施加盖玻片方法来说是一个显著的缺点。建议使用二甲苯的施加盖玻片仪器应放置在化学安全罩内通风，这增加了复杂性和更高的操作成本。从施加盖玻片过程中消除二甲苯是合乎需要的，因为二甲苯已被欧盟指定为潜在的致癌物，许多国家的各种机构都不鼓励。
一些现有方法的另一个缺点是不能很好地容忍施加盖玻片的样品中存在水。然而，在一些样品处理中，例如免疫组织化学(IHC)，最后的染色步骤是水性的，因此在施加盖玻片之前，样品必须用溶剂脱水。通过消除或自动化这一步骤，接受水中样品的施加盖玻片方法将是有利的。
一些现有的水性施加盖玻片方法被认为对于临床使用是不可靠的，因为盖玻片没有被固定到载玻片上(这需要额外的胶合步骤)，并且样品可能在几天后变干，使其不适合长期储存。
发明内容
本公开提供了用于对病理样品施加盖玻片的改进的系统和方法。本系统和方法可以提供优于现有系统和方法的一个或多个优点，包括例如减少或消除二甲苯和其他有毒溶剂；通过减少机械操作的次数和消除液体封固剂分配和玻璃盖玻片处理来简化自动施加盖玻片；通过减少或消除载玻片边缘的封固剂污染或覆盖来提高自动处理盖玻片的可靠性；通过消除在处理前对溶剂干燥的需要来提高处理速度；以及通过允许或使得能够使用水性润湿样品来加速IHC处理。
在本方法的一些实施例中，粘合剂渗透样品和/或结合到样品，从而提供更长的储存稳定性。
附图说明
图1示出了施加盖玻片系统和过程的示例性实施例。
图2示出了载玻片托架的实施例。
图3A和图3B示出了载玻片托架模块的示例性实施例。
图4A至图4E示出了施加盖玻片模块的示例性实施例的各种视图和方表面。
图5示出了溶剂交换模块的示例性实施例。
图6示出了溶剂交换模块的另一个示例性实施例。
图7A和图7B示出了溶剂交换模块的另一个示例性实施例。
图8示出了施加盖玻片方案的示例性实施例。
图9、图10、图11A、图11B、图12和图13示出了盖玻片条和分配器的示例性实施例。
图14和图15示出了如本文所述的施加盖玻片系统的系统架构的示例性实施例。
图16、图17、图18、图19A和图19B是本文所述的载玻片上的施加盖玻片的样本的图像。
图20示出了溶剂交换模块的另一个示例性实施例。
图21A-D示出了用于溶剂交换的毛细管头的不同实施例。
图22示出了使用毛细管头进行溶剂交换的方法的实施例。
图23示出了使用本装置的实施例处理的未染色组织切片的图像和热图分析。
图24示出了如示例9所述的经处理的样本的图像。
具体实施方式
在描述各种实施例之前，应理解，本公开的教导不限于所描述的特定实施例。除非另有定义，否则本文使用的技术和科学术语具有本公开所属领域的技术人员通常理解的含义。本文提及的所有专利和公开都通过援引以其全文并入本文。
如本文所用，术语“大致”和“约”是指在本领域普通技术人员可接受的限度或数量内。术语“约”通常指所示数值的正负15％。例如，“约10”可以表示8.5到11.5的范围。例如，“大致相同”意味着本领域普通技术人员认为被比较的项目是相同的。在本公开中，数值范围包括定义该范围的数值。还公开了在指定范围内的任何指定值或中间值与该指定范围内的任何其他指定值或中间值之间的每个较小范围。当所述范围包括极限时，排除这些所包括的极限中的一个或两个的范围也包括在本公开中。
如本文所用，术语“一”、“一个”和“所述”包括单数和复数指代物两者，除非上下文另有明确指示。因此，例如，“流体”包括一种流体和多种流体。除非另有说明，否则术语“第一”、“第二”、“第三”和其他序数在本文中用于区分本系统和方法的不同元素，并且不旨在提供数值限制。提及第一层和第二层不应被解释为意味着该部件只有两层。除非另有说明，具有第一元件和第二元件的部件还可以包括第三元件、第四元件、第五元件等。
通常，应理解，附图和其中描述的各种元件不是按比例绘制的。此外，相关术语(例如“上方”、“下方”、“顶”、“底”、“上”、“下”、“左”、“右”、“垂直”和“水平”)用于描述各种元件彼此之间的关系，如附图中所示。应理解，这些相对术语旨在包括除了附图中描绘的方向之外的装置和/或元件的不同方向。例如，如果毛细管处理模块相对于附图中的视图被倒置，例如被描述为在另一个元件“上方”的元件现在将在该元件“下方”。类似地，如果设备相对于附图中的视图旋转90度，例如，被描述为“垂直”的元件现在将是“水平”的。
如本文所用，“载玻片”指的是对于生物或化学样品具有至少一个基本平坦的表面的任何样品支架、支撑件或基底。载玻片可以是能够支撑至少一个样品的托架、显微镜载玻片、试管、芯片、阵列或圆盘。载玻片通常具有第一主载玻片表面和第二主载玻片表面。主载玻片表面通常具有长轴和短轴，例如矩形的长轴和短轴。
样品可以以各种方式放置在载玻片上。在一些实施例中，样品是生物样品，例如组织或细胞的层或薄片。通常，样品是用于组织学分析的组织切片或细胞涂片或沉淀。组织或其他样品可以保存在甲醛或例如石蜡等包埋介质中。石蜡或其他包埋介质中的样品可以经受例如脱蜡的步骤，通过该步骤移除覆盖和/或渗透样品的石蜡或其他包埋介质。
本方法和系统可以采用盖玻片，例如盖玻片带，其中，该盖玻片带是用于样品的盖玻片。本文使用的术语“带”包括带、条、绑带、补片和其他相对平坦的形式。用于对组织切片施加盖玻片的期望的粘合剂是那些对样品和载玻片提供足够强的粘附力的粘合剂。
如本文所使用的，“自动”意味着基本上由机械设备、计算机和/或电子控制或信号执行的多个步骤，尽管它不排除一些人工干预步骤，例如人工替换所描述的特征或步骤之一。如本文所用，自动施加盖玻片系统还可以包括自动溶剂交换系统或执行一个或多个样品制备步骤的其他自动装置。
图示实施例的描述
本公开提供了用于制备覆盖样本载玻片的改进的方法和系统。
在一些实施例中，盖玻片带被提供或卷绕在第一卷轴上，并且盖玻片带从第一卷轴延伸或展开穿过施加盖玻片区域到达第二卷轴。在盖玻片带的第一切片被施加到载玻片的区域之后，盖玻片带可以穿过施加盖玻片区域前进(例如通过从第一卷轴展开一部分并将一部分卷绕在第二卷轴上)。以这种方式，盖玻片带的第二切片可以定位在随后的载玻片上。
在一些实施例中，本公开涉及包括以下元件的施加盖玻片系统100：可选的载玻片托架模块200、可选的溶剂交换模块500和施加盖玻片模块400，施加盖玻片模块400分配盖玻片(例如盖玻片带)，将其施加到样品和载玻片上，并将其牢固地压在适当位置。
图1示出了对载玻片施加盖玻片的示例性一般过程。在设置的子过程或区域中，用户将上面放置有样品的载玻片10装载到载玻片托架20中。用户在载玻片托架20中提供载玻片10，然后可以将其浸入溶剂罐30中。诸如组织切片之类的样品12被放置在载玻片10上。载玻片10可以包括样品区域14和载玻片条形码16。在一个实施例中，溶剂罐包含输入溶剂(即水)。图2示出了载玻片托架的一个示例。载玻片托架20可以浸入溶剂罐30中。载玻片托架手柄21可以与载玻片托架20成一体，或者可以锁住和解锁载玻片托架20。载玻片托架手柄21便于载玻片托架20浸入溶剂罐和从溶剂罐移除。载玻片托架手柄21可以包括凸缘22，该凸缘22可以由移动载玻片托架的机器人臂接合。载玻片10可以出于一个或多个目的而浸入溶剂罐30中，例如移除包埋介质，或从样品中移除溶剂，或向样品施加新的溶剂。在一些实施例中，溶剂罐30包括适合作为封固介质的预湿溶剂。在其他实施例中，溶剂罐30包括用于除安装之外的目的的输入溶剂，例如化验溶剂或水，并且输入溶剂可以随后用预湿溶剂进行交换。在期望的时间段之后，将载玻片20从溶剂罐30移除，放置在载玻片托架模块200中，并移动到施加盖玻片模块。在设置期间，用户还输入用于施加盖玻片的方案，例如要施加于载玻片10的盖玻片带的长度。图3A和图3B示出了载玻片托架模块200从溶剂罐移除载玻片托架20，并顺序地将每个载玻片10转移到施加盖玻片模块400。载玻片10垂直保持在载玻片托架模块200中。载玻片移除器的尺寸使得它可以接合单个载玻片10的短边缘，并将其向上推出载玻片托架20。应理解，该过程的一个或多个前述部分可以是自动的，而不是由用户来执行。
在施加盖玻片子过程或区域中，载玻片10从载玻片托架20上移除并转移到支撑件上进行处理。支撑件可以是溶剂交换模块和/或施加盖玻片模块的一部分，这将在下表面更详细地描述。在一些实施例中，载玻片10在盖玻片带被施加之前经历溶剂交换。在其他实施例中，载玻片10已经适合于施加盖玻片。在将盖玻片施加于载玻片之后，盖玻片将被放置在载玻片托架20中(其可以是与先前相同的载玻片托架或不同的载玻片托架)。应理解，该过程的一个或多个前述部分可以是自动的或者由用户执行。
图4A至图4E示出了施加盖玻片模块400的示例性实施例。如图4和图5A所示，载玻片被放置在施加盖玻片模块400中的载玻片安装台402上。通常，载玻片将被定位成使得其长轴与载玻片安装台402移动的方向和/或盖玻片带分配器相对于载玻片安装台移动的方向对齐。载玻片安装台402可以通过手动或自动动作来移动。例如，载玻片安装台402可以附接到提供自动线性运动的线性载物台403。在一些实施例中，载玻片被定位成使得其长轴与盖玻片带从卷轴展开的方向对齐。施加盖玻片模块400包括盖玻片带分配器组件404，该盖玻片带分配器组件404包括卷轴406，盖玻片带源卷绕在卷轴406上。释放衬垫发动机滚动释放衬垫组件408上的释放衬垫，拉动源带组件416中的源带410穿过盖玻片带分配器组件418。释放衬垫412穿过挤出槽420，并与越过挤出引导件422的释放带414分离。当释放带触发位置传感器424时，释放衬垫发动机被停用。
在一些实施例中，本系统包括层压机组件430，以向载玻片施加压力并将盖玻片带层压在载玻片上。层压机组件430可以包括层压机辊434，该层压机辊以期望的或预定的压力和/或速度在水平方向上滚动盖玻片带。层压机组件430还可以包括层压机致动器432，以相对于载玻片安装台402垂直移动层压机辊434和/或增加或减小施加到盖玻片带414的压力。在一些实施例中，载玻片安装台402被配置为沿着载玻片10的长轴水平移动。这样的运动可以由载物台提供。如图4C至图4E的示例性实施例所示，载玻片安装台402移动到层压机开始位置436，一旦载玻片10被层压机致动器432定位，层压机致动器432就使用层压机辊434将释放带414压在载玻片10上。在将足够长度的盖玻片带414施加到载玻片10上之后，可以从源带上切下所施加的盖玻片带。如图4D的示例性实施例所示，刀具致动器442使刀具444延伸穿过切割槽446，使得释放带414被切割成合适的长度。线性载物台以受控的速率从层压机开始位置436移动到层压机结束位置438，以将释放的盖玻片带414压到载玻片10上。
施加盖玻片模块400被配置为使得层压机辊434与载玻片共面。层压机力和层压速度也由施加盖玻片模块400控制。在一些实施例中，已经发现10至300牛顿/英寸的辊层压机力或者150至250牛顿/英寸的辊接触载玻片的力是合适的。在一些实施例中，由ASTM D2240A型或D型硬度计测定的肖氏硬度计硬度为10至80(特别是20至30)的层压机辊是有用的。在一些实施例中，0.01至10毫米/秒(特别是0.1至0.5毫米/秒)的层压速度是有用的。当载玻片安装台在层压机开始位置和层压机结束位置之间移动多次时，盖玻片带到载玻片的层压可以在多次通过中发生；在一些实施例中，已经发现1至10次层压通过(或2至4次层压通过)是合适的。
在层压完成之后，层压机致动器432撤回层压机辊434，并且线性载物台403将载玻片安装台移动到卸载位置。载玻片托架模块将载玻片转移至载玻片托架，通常为输出载玻片托架。
在本方法的一些实施例中，可能期望在施加盖玻片带之前交换样品上的溶剂，并且图5示出了用于溶剂交换的示例性新型溶剂交换模块500(即，移除本施加盖玻片方法中不期望的溶剂并施加期望的溶剂)。例如，不期望的溶剂可以是用于将染料施加到样品上的输入溶剂，并且预湿溶剂可以选择为与封固介质相容。常规方法使用二甲苯作为预湿溶剂，但是如上所述，二甲苯不是期望的。其他有用的预湿溶剂包括水、己烷、乙醇、异丙醇、ClearifyTM和其他溶剂。此外，这些溶剂的混合物以及添加表面活性剂和包括丙二醇在内的其他物质来增强润湿性也是有用的。如果输入溶剂(可以是用于处理样品的溶剂罐中使用的溶剂)不适合作为预湿溶剂，溶剂交换模块500可以包括在本系统中，提供将输入溶剂改变为预湿溶剂的处理路径。顺序使用一种或几种中间溶剂以确保可再现的和完全的溶剂交换可能是有用的。
在示例性实施例中，如图5所示，载玻片10被放置在支撑件上，在这种情况下，该支撑件是收集从载玻片10移除的溶剂的溶剂返回装置550(例如真空吸盘)。为了提供吸力，真空吸盘或其他溶剂返回装置550可以通过溶剂阱552连接到溶剂返回泵551。真空吸盘550可以设置在载玻片安装台上或者与载玻片安装台集成。在图5中，载玻片台从第一气刀510移动到从第一溶剂源522分配第一溶剂的第一分配器520，从第二气刀530移动到从第二溶剂源542分配第二溶剂的第二分配器540。第一气刀510和第二气刀530与流量计511、531流体连接，流量计511、531控制、确定或测量供给气刀510、530的气体。流量计511、531从气源514或其他气体源接收空气或其他气体，气源514或其他气体源可以直接或通过一个或多个其他设备，例如压力调节器513、气流阀512和流量计511、531连接到气刀510、530。
在本方法的一个实施例中，载玻片上的输入溶剂是水，并且该输入溶剂穿过使用醇溶剂的溶剂交换模块500。醇溶剂可以是含乙醇的溶剂，例如100％乙醇，或含至少92％乙醇或至少96％乙醇的水溶液。在一些实施例中，仅使用第一溶剂源522、第一气刀510和第一分配器520，并且醇溶剂用作预湿溶剂。还可以考虑将附加的气刀、分配器和溶剂添加到溶剂交换模块中。溶剂分配器可以是具有本领域技术人员已知的各种形状的喷涂器、刷子、戳子或滴管。
图6示出了溶剂交换模块600的另一个示例性实施例，其中，喷涂器602用作第一分配器。载玻片10被置于支撑件604上，并且气流606被第一气刀608引导向载玻片10的前端，导致输入溶剂610积聚在载玻片10的尾端。当载玻片10被支撑件604中的真空吸盘从左向右移动时，喷涂器602将预湿溶剂612喷涂到载玻片10的前端。
图7A示出了溶剂交换模块700的另一个实施例，其中，溶剂交换头分配交换液体并从样品中移除水或其他不需要的溶剂。毛细管力将分配的交换液体保持在由载玻片和溶剂交换头形成的毛细间隙中，并防止溶剂从载玻片上流出或滴下。在图7A所示的实施例中，在载玻片10和溶剂交换头702之间形成毛细间隙。溶剂交换头702包括至少一个分配孔和至少一个排出孔，交换液体可以通过这些孔分配到载玻片10上，并且排出的液体可以从载玻片移除。溶剂交换模块700被配置为将溶剂交换头702定位在离载玻片10一定距离处，其中，该距离足够小以在载玻片和溶剂交换头702的溶剂交换表面之间产生毛细间隙。例如，该距离可以小于1600米，或小于800米，或小于400米，或小于200米，或小于100米，或小于50米在一些实施例中，溶剂交换头702包括在溶剂交换头中间的分配孔和两个排出孔，在靠近载玻片边缘的溶剂交换头的每一端各有一个。在一些实施例中，排出孔大于分配孔，使得交换溶剂保持在溶剂交换头以下。溶剂交换头702可以沿着载玻片10在一个方向上或前后移动一次或多次，使得交换液体流过载玻片的基本上所有样品和染色区域。例如，溶剂交换头可以移动经过样品至少1、2、3、4、5次或更多次。来回移动几次可以提高溶剂交换的效率。应选择液体流过分配孔和排放孔的速率，以在毛细间隙中提供液体的层流。例如，在一些实施例中，当通过分配孔的流速小于2.4毫升/秒时，通过排放孔的流速可以大于2.6毫升/秒(或者通过两个排放孔中的每一个大于1.3毫升/秒)流速可以通过连接到分配和返回管线的泵来设定。为了使染色表面积最大化，溶剂交换头应能够移动到载玻片边缘，但不能伸出边缘以防止泄漏。
包括交换溶剂(例如乙醇)的交换液体从分配管线706从储器704分配到载玻片10上，并且排出的液体从载玻片移除并通过返回管线708、710返回到储器704。通过分配管线706和返回管线708、710的液体流由泵707、709、711提供。交换溶剂通过毛细作用力保持在溶剂交换头702下方，并且装置设计限制了从载玻片顶表面的泄漏或毛细作用。在载玻片最终通过溶剂交换头702下方的过程中，可以控制留在载玻片上的交换溶剂的量，这导致对载玻片施加盖玻片的结果更加一致。在一些实施例中，来自例如乙醇的交换溶剂的气体被收集(例如通过使用具有煤过滤器712的通风橱713)，以保持气体低于期望的水平并确保安全。很大一部分交换溶剂穿过载玻片10，并通过排出孔与不需要的溶剂一起被移除，然后返回到储器704。结果，随着更多的载玻片被溶剂交换头702处理，储器中的交换液体被稀释，最终储器704中的交换液体必须由用户补充。例如，储器中的交换液体最初可以具有96％v/v的交换溶剂浓度，例如乙醇，当交换溶剂的浓度达到90％v/v或另一个预定极限时，用户可以更换或补充储器。为了减少稀释储器704中的交换溶剂的水，用户可以在使用本溶剂交换方法之前执行额外的步骤来移除载玻片上的水。
图7B示出了图7A装置中的溶剂交换头702。在一些实施例中，溶剂交换头702的宽度基本上与载玻片的宽度相同。溶剂交换头702具有一个中心分配孔714和两个排出孔716、717，以减少进入毛细间隙的流动阻力，并减少在头下方交换体积的时间。然而，合适的溶剂交换头可以包括任何期望数量的分配孔和排出孔，例如1、2、3、4、5、6个或更多。交换液体和移出液体的流动可以由一个或多个泵控制。在一些实施例中，溶剂交换模块包括用于每个分配管线和返回管线的单独的泵；替代性地，在一些实施例中，模块包括一个用于分配管线的泵和一个用于返回管线的泵。在图7B中，排水孔716、717定位在毛细间隙小于分配孔714周围区域的区域中，例如通过在排水孔周围具有凸起表面718、719。
图8示出了用于制备覆盖样品载玻片的整个仪器方案的示例性实施例，其实施了载玻片装载、溶剂交换、施加盖玻片和载玻片卸载活动以及上面已经描述的模块。更一般地，图8示出了制备覆盖样品载玻片的本方法的各种实施例。包括用于处理载玻片的指令的一个或多个子程序被输入控制器。具有样品的载玻片被提供在载玻片托架中，该载玻片托架被装载到包括溶剂交换模块和施加盖玻片模块的仪器中。致动器从载玻片托架中选择载玻片。仪器中的条形码读取器识别载玻片，并将识别结果传送给控制器，控制器进而提供信号，将载玻片引导至某个位置进行处理。如果该载玻片的说明书要求移除溶剂，则将该载玻片移至溶剂移除模块，例如根据图5、图6或图7A的模块。载玻片被放置在支撑件上，例如沿一个轴，优选沿其长轴移动载玻片的载物台或传送带。激活气刀以移除载玻片上的输入溶剂。在一些实施例中，模块还包括溶剂分配器以施加溶剂，例如预湿溶剂。载玻片可以被移动到施加盖玻片模块。在一些实施例中，相同的支撑件(例如载物台)从溶剂交换模块移动到施加盖玻片模块。盖玻片带从分配器组件中挤出，并且载物台定位载玻片，使得载玻片的尾端在盖玻片带的前端下方。载物台和/或分配器组件在载玻片的长轴方向上线性移动(该方向优选与挤出盖玻片带的方向基本相同)。层压机组件延伸层压机(例如辊)。盖玻片带被切割成合适的长度，以覆盖载玻片上的样品。层压机向盖玻片带施加压力，使其粘附到载玻片。层压机组件收回层压机。然后，载物台将载玻片移动到卸载位置，在该位置，致动器移除载玻片并将其放置在输出载玻片托架中。
干净的盖玻片可以以任何形式提供在目前的系统和方法中以供使用。在一些实施例中，干净的盖玻片带被提供为施加盖玻片源带，其具有一个或多个特征以保持盖玻片带干净和/或便于其施加于载玻片。图9中示出了盖玻片源带902的示例性配置。盖玻片源带902通常包括背衬层904和粘合层906。在一些配置中，盖玻片源带902还包括释放层908。当通过将盖玻片源带902卷绕在卷轴上来提供盖玻片源带902时，释放层908是特别期望的。
在一些实施例中，盖玻片源带包括轻触切割部分，该轻触切割部分包括在将被用作盖玻片带的部分的边界内的轻切割。当盖玻片用轻触切割法制作时，它们可以从背衬上剥离。多个轻触切割部分可以线性定位在例如释放层的条上。
图10、图11A和图11B、图12和图13示出了可能有利的各种盖玻片源带示例性实施例。在图10中，盖玻片源带1002包括释放衬垫1004，该释放衬垫被拉过带分配器组件，释放带1006被挤压在引导表面1008上，并用刀1010切割。在图11A和图11B中，轻触切割源带1102由一组轻触切割盖玻片1104组成，该盖玻片作为一系列具有光学透明背衬和压敏粘合剂的轻触切割区域设置在连续释放衬垫1106上。已经准备好轻触切割盖玻片源带1102，使得一系列轻触切割盖玻片1104沿着释放衬垫1106的长度均匀定位。带分配器组件1108使用用于运动控制的位置传感器挤压每个轻触切割的盖玻片，如右部所示。在图12中，框架切割盖玻片源带1202具有穿孔1204以限定盖玻片1206，并使用带卷轴在载玻片上推进带。环形冲头1208释放框架切割盖玻片1206并将其附接到载玻片。带的剩余部分(在穿孔的盖玻片被释放之后)可以被收集在带卷轴1210上。在图13中，盖玻片源带1302不具有释放衬垫。带驱动机构1304挤出由刀1306切割并施加到每个载玻片10上的每段长度的带。上面描述的其他部件，例如条形码读取器、气刀、盖玻片带分配器、层压机和盖玻片带切割器或刀。
在一些常规的载玻片处理方法中，在浸入二甲苯浴槽之前，将水中的载玻片浸入一系列醇浴槽中以确保脱水。因此，在本系统的一些示例性实施例中，如图14所示，自动篮移动器在一系列载玻片浴槽或罐(例如包括70％乙醇、95％乙醇、100％乙醇和ClearifyTM的载玻片浴槽)之间移动载玻片托架。图14还示出了在本文所述的载玻片制备系统的实施例中的放置。在载玻片制备系统的第二种配置中，如图15所示，载玻片安装台在气刀和溶剂分配器之间移动载玻片。
在一些实施例中，本系统包括用于载玻片的存储单元。例如，该系统可以包括用于一个、两个、三个、四个、五个或更多载玻片托架的输入和输出存储。在一些实施例中，本系统被用于从载玻片托架取回载玻片，根据需要处理载玻片，并将载玻片返回到同一载玻片托架。举例来说，该处理可以包括首先进行溶剂交换，然后施加盖玻片，然后将载玻片返回到取出它的载玻片托架。这简化了仪器，因为不需要新的载玻片托架来接收已经处理过的载玻片，从而减少了载玻片托架的处理，并减少了仪器内部的篮处理。例如，在一些实施例中，当载玻片处理开始时，将篮装入水中并从水中取出。在一些实施例中，载玻片处理可以在减少或消除由组织样品干燥导致的假象的时间内完成。例如，在一些实施例中，载玻片处理在约15秒内完成，允许在5分钟内处理具有20个载玻片的篮，从而减少或消除由于组织样品干燥导致的假象，因为载玻片离开水的最长时间是4分45秒。在一些实施例中，溶剂交换过程在约5秒或更短时间内完成。在一些实施例中，施加盖玻片过程在约5秒或更短时间内完成。在一些实施例中，将载玻片返回到载玻片托架的过程在约5秒或更短时间内完成。
在一些实施例中，本系统可以用于对已经进行了除免疫组织化学化验之外的化验(例如原位杂交)的载玻片进行自动施加盖玻片。在这样的实施例中，系统包括干装载载玻片托架的选项，以及施加用于化验的封固介质(例如，FISH封固介质)而不是施加交换溶剂的分配器。
材料
在一些实施例中，盖玻片带可以由类似3MTM微流体诊断带9795R或其他透明粘合带的材料制成。在一些实施例中，盖玻片带是单表面的(即，只有一面具有设置在其上的粘合剂)。在一些实施例中，盖玻片带包括延迟粘性粘合剂。盖玻片带可以具有50微米至500微米(优选100微米至300微米)的厚度。粘合剂的厚度可以是5微米至200微米，优选地为15微米至30微米。
盖玻片带包括压敏粘合剂，在一些实施例中，该压敏粘合剂可选自几种硅酮基配方和丙烯酸基配方。透明和光学透明的背衬材料和粘合剂目前由包括明尼苏达州Maplewood的3M公司、印第安纳州Monticello的Polymer Science公司和宾夕法尼亚州GlenRock的Adhesives Research公司在内的公司生产，用于消费电子显示器和其它应用。合适的粘合剂的示例包括低粘性压敏粘合剂，例如丙烯腈共聚物(例如，丁二烯-丙烯腈聚合物(BACN聚合物)、丁二烯-丙烯腈-异戊二烯聚合物(BACNI聚合物))；苯乙烯共聚物(例如，苯乙烯/丁二烯/苯乙烯(SBS聚合物)、苯乙烯/异戊二烯/苯乙烯(SIS聚合物)和苯乙烯/乙烯/丁烯/苯乙烯(SEBS聚合物))；以及丙烯酸酯共聚物。如果需要，可以使用聚合材料的共混物和混合物。压敏粘合剂也可以含有足够的抗氧化剂、紫外线稳定剂和交联剂。
盖玻片带还包括背衬，该背衬通常是光学透明的聚合物薄膜。合适的聚合物薄膜材料包括二醋酸纤维素、三醋酸纤维素、聚对苯二甲酸乙二醇酯、苯乙烯-丙烯腈和聚甲基丙烯酸甲酯薄膜。在一些实施例中，背衬是环烯烃聚合物或环烯烃共聚物。在一些实施例中，背衬的厚度为50微米至300微米。在一些实施例中，盖玻片带还可以包括聚合物膜和压敏粘合剂之间的粘结层。可以根据所用压敏粘合剂和背衬的类型来选择合适的粘结层材料。许多已知可用作粘结层的材料是有用的，例如，可以使用含氯聚合物，如聚氯乙烯、氯乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、聚偏氯乙烯、聚碳化二亚胺和乙烯乙酸乙烯酯聚合物和共聚物、酸或酸酐改性的聚乙烯、丙烯和乙烯乙酸乙烯酯聚合物和共聚物。
参数
在一些实施例中，盖玻片带作为整体的折射率和/或其单个部件的折射率可以在1和2之间，或1.2和1.8之间，或1.45和1.65之间。在一些实施例中，选择折射率以基本上匹配载玻片的折射率。
在一些实施例中，盖玻片带的光的透光率(根据ASTM D1003-95测定)为至少约85％或至少75％。
在一些实施例中，粘合剂可以表现出约0.1至约3.0N/25mm宽度的180°剥离粘合值。
在一些实施例中，粘合剂可以表现出至少约2kN/m2或至少约4kN/m2的动态剪切强度。
施加盖玻片前后的样品制备方法
本方法可以包括在施加盖玻片之前或之后的额外步骤，以准备用于分析的样品和/或在处理后稳定样品。通常，可以通过任何合适的技术制备用于分析和/或储存的样品。在一些实施例中，样品被放置在载玻片上后，包埋介质被移除。移除包埋介质的步骤通常被称为脱蜡，因为大多数样品被包埋在石蜡中，例如来自FFPE块的组织切片。脱蜡是从载玻片上的样品中移除包埋介质的任何技术的代表。对于组织化学分析，在一些实施例中，通过将样品与合适的缓冲液如MES缓冲液或柠檬酸盐缓冲液接触，调节至高pH或低pH，并加热至合适的温度(约95℃)或更高，来进行靶取回过程。这被称为热诱导表位修复(HIER)。替代性地，可以通过应用胃蛋白酶、蛋白酶K或另一种消化酶对样品进行蛋白水解消化，或者通过酸(例如甲酸)进行基于酸的抗原修复，随后对其进行温育，以便于检测试剂(例如抗体)的进入。本方法和系统还可以包括一个或多个过程，用于在施加盖玻片带之前使用基于原位杂交(ISH)的化验对样品进行分子分析。ISH需要通过在存在缓冲液的情况下加热使核酸变性，并杂交荧光标记的核酸探针用于荧光原位杂交(FISH)或应用色原用于色原位杂交(CISH)。在施加封固介质和盖玻片之前，对ISH样品进行干燥。
以下实施例说明了本公开，并且不应以任何方式
被认为是对本公开的限制。
示例
示例1
在该示例中，评估了包括压敏粘合剂(3M9795R)的透明带用作盖玻片带的适用性。子宫组织经福尔马林固定和石蜡包埋(FFPE)处理，切成5um切片并置于载玻片上。使用苏木精和曙红对切片样品进行脱蜡和染色，用乙醇脱水，然后浸入作为预湿溶剂的ClearifyTM中。
可从明尼苏达州Maplewood的3M公司获得的带3M9795R包括涂有硅酮粘合剂的透明聚丙烯背衬和释放衬垫。将一卷24mm宽的带装载在如图4A所示的施加盖玻片模块上。施加盖玻片模块被配置为分配粘合带，如图10所示。将载玻片从ClearifyTM预湿溶剂浴槽中手动取出，放置在载玻片台402上，并使用计算机启动该装置。将盖玻片带贴在每张载玻片上，然后进行层压。层压机致动器压力为80psi，线性载物台速度为10mm/s。施加了盖玻片的样品的扫描图像示例如图16所示。
示例2
该示例评估了在盖玻片带已经粘附到样本和载玻片上之后移除该盖玻片带的能力。对于示例1中的一些样品，尝试在施加后移除盖玻片。3分钟后，盖玻片带很容易从第一个样品上剥离，留下完整的组织样品，以及可以用ClearifyTM冲洗掉的软粘合剂残留物。对于第二个样品，盖玻片带在一周后被剥离，并且大部分组织样品从载玻片上剥离。对于第三个样品，在60℃下储存一个月后剥离盖玻片带，样品完全脱离载玻片。据信，ClearifyTM等溶剂会与粘合剂相互作用，使其软化并膨胀到组织中。随着时间的推移，ClearifyTM会蒸发，留下充满粘合剂的组织。
示例3
在该实施例中，加速老化方案用于评估示例1中制备的施加了盖玻片的样品。施加了盖玻片的样品在60℃下储存数周，以评估染料在2.3年、3.3年和4.3年内的潜在褪色。图16提供了施加了盖玻片的样品在不同时间点的图像。对于使用Ultramount施加盖玻片的施加了盖玻片的样品，观察到苏木精染料褪色，而3M9795R施加了盖玻片的样品相对稳定。
示例4
该示例评估了使用醇预湿溶剂的施加盖玻片技术。类似于示例1，将子宫组织样品置于载玻片上，用苏木精染色，并使用施加盖玻片模块用3M9795R施加盖玻片，如实施例1中所述。使用不同的预湿溶液，包括100％乙醇、100％异丙醇(IPA)，并且每种溶液都含有1％丙二醇。获得了出色的盖玻片性能。图17示出了施加了盖玻片的样品的图像。
示例5
本实施例评估了目前在IHC染色样品上的施加盖玻片技术。样品与各种预湿溶剂接触：ClearifyTM和醇和聚乙二醇。评估了微取样的效果和组合良好IHC图像的能力。以类似于示例1的方式制备多块样品，除了使用IHC染色，其中，抗体用3,3’-二氨基联苯胺(DAB)染色，细胞核用苏木精复染。使用3M9795R作为盖玻片，发现使用ClearifyTM预湿溶剂会导致微干燥区域，如图18分图(a)所示。使用乙醇和1％丙二醇的预湿溶液实现了改进的施加盖玻片，如图18的分图(b)和分图(c)所示。那些施加了盖玻片的样品没有表现出溶剂空隙。
示例6
该示例评估了本施加盖玻片技术在FISH样品中的使用。类似于示例1，制备样品，但是它们被染色用于FISH。将Dako荧光封固介质作为预湿溶剂施加到样品上，然后用3M8211丙烯酸转移带(可从明尼苏达州Maplewood的3M公司获得)和玻璃盖玻片覆盖样品。盖玻片上的荧光显微镜显示了核酸染色以及细胞复染的病灶。基于带的实验中的荧光背景(图19B)高于对照(图19A)。
示例7
在一些实施例中，溶剂交换模块(例如图5、图7A和图7B所示的那些)还可以包括毛细管头360，该毛细管头使用线性载物台403扫过载玻片10的表面，如图20所示。毛细头包括毛细表面362，该毛细表面靠近载玻片表面0.02mm至3mm的距离，优选在0.5mm至2mm的范围内。毛细头360还包括流体连接到分配器(例如图5中的第一分配器520)的溶剂供给口364和流体连接到溶剂返回装置(例如溶剂返回装置550)的溶剂返回口366。调节溶剂返回装置的流速，使其超过第一分配器320的流量，从而确保移除毛细管表面和载玻片之间的过量溶剂。溶剂返回口被定位成使得空气被抽吸用于超过供给流量的回流。可选地，通气孔368设置在毛细管头上，用于超过供给流量的回流。
示例8
如图21A至图21D所示，可以采用不同设计的毛细管头360来提高性能。关键的设计变化包括溶剂供给口364和溶剂返回口366的不同形状，以及它们在毛细管表面362上的相对位置。毛细管表面的轮廓也可以用来影响毛细管头的流动特性。
在图21A的示例8中，溶剂供给口364和溶剂返回口366都成形为横跨载玻片宽度的槽。两个口都定位在毛细管表面362上。
在图21B的示例8中，溶剂返回口定位在毛细管表面363之外。这种设计的优点是确保溶剂仅在从毛细管表面溢出时才被移除。
在图21C的示例8中，溶剂供给口364和溶剂返回口366都是圆孔。这种设计的优点是制造更简单，扫过流动更好。
在图21D的示例8中，有两个定位在毛细管表面端部的溶剂返回口366。这种设计的优点是溶剂供给口和溶剂返回口之间的路径较短。
示例9
使用了图21B中设计的毛细管头360。毛细管表面362定位在载玻片10上方，毛细管表面到载玻片的间隙363为0.5mm，如图22所示。第一分配器(例如图5中的第一分配器520)以1.5毫升/秒的速度提供第一溶剂95％乙醇。溶剂返回泵是设定在50千帕的真空阱。使用如图4A和图5所示并如上所述的系统，在表1中实施以下方案。
Figure BDA0003977685630000181
如图23所示，该方案在含有未染色组织的多块组织切片上执行。在没有溶剂交换的情况下制备组织切片。图23的分图a示出了该图像，图23的分图c示出了该切片的热图。用该方案处理第二切片，其中，毛细管头360故意不对齐，以仅处理载玻片的上半部分：图23的分图b中的图像和图23的分图d中的吸光度热图。
该方案也在用KI67和苏木精染色的卵巢组织切片上进行。通过在100％乙醇中浸泡2分钟对对照切片进行处理，如图24的分图a所示。使用该方案对实验切片进行处理，如图24的分图b所示。
示例性实施例
根据当前公开的主题提供的示例性实施例包括但不限于以下内容：
实施例1.一种制备用于光学分析如光学显微镜的覆盖样品载玻片的方法，包括：将载玻片上的样品(如组织切片)与封固介质接触，其中，封固介质不含二甲苯；用盖玻片覆盖载玻片上的样品，其中，盖玻片具有第一主表面和第二主表面，并且在面向样品的第一主表面上包括压敏粘合剂；以及向带施加合适的压力，从而将盖玻片带粘附到载玻片。
实施例2.根据实施例1所述的方法，其中，盖玻片包括盖玻片带。
实施例3.根据实施例2所述的方法，其中，干净的盖玻片带卷绕在带卷轴上，并且该方法还包括：展开干净的盖玻片带的切片，并将经展开的切片施加于载玻片。
实施例4.根据实施例2至3中任一实施例所述的方法，其中，清洁的盖玻片带在释放层上，并且该方法包括将盖玻片带与释放层分离。在一些实施例中，释放层具有释放层端部，并且释放层端部卷绕在释放层卷轴上。释放层卷轴的旋转可以推进或驱动盖玻片带。
实施例5.根据实施例1至4中任一实施例所述的方法，还包括将样品放置在载玻片上，并在覆盖样品之前从样本移除溶剂。
实施例6.根据实施例1至5中任一实施例所述的方法，还包括在将样品放置在载玻片上之后对样品进行部分或完全脱水。例如，样本可以部分脱水至含水量在0％和20％之间，优选小于15％。
实施例7.根据实施例6所述的方法，其中，样品通过溶剂交换部分或完全脱水。
实施例8.根据实施例7的方法，其中，通过喷涂将交换溶剂施加于样品。
实施例9.根据实施例8所述的方法，还包括在样品上吹气体管线(例如，使用气刀吹气)以蒸发溶剂。
实施例10.根据实施例7的方法，其中，交换溶剂通过毛细间隙流过样品而被施加到样品。例如，其中，载玻片相对于毛细间隙移动以处理更大的表面积。
实施例11.根据实施例7的方法，其中，将压电换能器施加于载玻片以感生高频压力波来加速溶剂交换。
实施例12.根据实施例1至11中任一实施例所述的方法，还包括从载玻片托架上移除载玻片并将载玻片放置在载玻片台上。在一些实施例中，载玻片台具有载玻片台表面，该载玻片台表面被配置为保持载玻片并防止载玻片的运动。载玻片台表面可以基本水平或成一角度。
实施例13.根据实施例1至12中任一实施例所述的方法，其中，所述压敏粘合剂渗透样品中的孔。
实施例14.根据实施例1至13中任一项实施例所述的方法，其中，通过在盖玻片带上滚动辊来向盖玻片带施加压力，例如以60psi的压力。辊可以在带上沿一个方向移动，或者沿第一方向接着沿第二方向移动(例如，沿带前后移动)。辊可以在带上滚动一次或多次，并且每次施加的压力可以相同或不同。
实施例15.一种施加盖玻片模块，包括：载玻片安装台，其具有用于载玻片的表面，并包括一个或多个载玻片挡板，以防止或减少载玻片在载玻片安装台上的移动；线性致动器，用于在载玻片台上沿载玻片的长轴方向移动载玻片安装台；位于载玻片安装台上方的盖玻片带分配器，其具有进给端和挤出端，其中，盖玻片带分配器被配置为在进给端接收盖玻片带，并从挤出端以与载玻片安装台上的载玻片成一定角度挤出盖玻片带；以及辊，其被定位在带分配器的挤出端之后，并配置成滚动载玻片上的盖玻片带并向其施加压力。
实施例16.根据实施例15所述的装置，还包括用于从盖玻片带分配器接收释放衬垫的释放衬垫卷轴。卷轴可由盖玻片带分配器的进给端定位。
实施例17.根据实施例15或16中任一实施例所述的装置，其中，带分配器包括例如楔形物或辊的释放衬垫分离器，以将释放衬垫从盖玻片带分离。
实施例18.一种用于载玻片上的样品的溶剂交换模块，该溶剂交换模块包括：用于载玻片的支撑件；支撑件上方的气体供给器，其被配置为将气体管线吹到支撑件上的载玻片上；其中，支撑件和气体供给器中的一者或两者被配置用于线性运动。
实施例19.根据实施例18所述的模块，其中，所述支撑件是输送机。
实施例20.根据实施例18所述的模块，其中，所述支撑件包括加热器(例如包埋在支撑件中的电阻加热器)。
实施例21.一种用于制备覆盖样本载玻片的装置，包括溶剂交换模块；以及施加盖玻片模块。
实施例22.根据实施例21所述的装置，还包括载玻片处理器模块。
实施例23.基本上不含二甲苯的施加了盖玻片的样品载玻片，包括表面上具有样品的载玻片；粘附到样品的盖玻片带，其中，基本上所有样品都被盖玻片带覆盖；在盖玻片带和载玻片之间与样品接触的封固剂，其中，封固剂不是二甲苯。
实施例24.根据实施例23所述的载玻片，其中，所述封固剂包括一种或多种C1-4醇或C1-4二醇。
实施例25.根据实施例23或24所述的载玻片，其中，样品包括一种或多种染料，例如荧光染料。
实施例26.根据实施例23至25中任一项所述的载玻片，其中，染色的样品在至少十年的时期内是稳定的。
实施例27.一种施加盖玻片装置，包括盖玻片带分配器，所述盖玻片带分配器被配置为将盖玻片带的粘合剂侧施加到载玻片上的样品。
实施例28.一种用于载玻片上的样品的溶剂交换模块，该溶剂交换模块包括：用于载玻片的支撑件；溶剂交换头，用于分配交换液体并移除排出的液体，其中，溶剂交换头可以定位在离载玻片一定距离处，并且支撑件和溶剂交换件中的一个或两个被配置用于线性运动。
实施例29.根据实施例28的溶剂交换模块，其中，溶剂交换头包括面向载玻片的交换表面，其中，交换表面包括围绕排出孔的凸起部分。
实施例30.根据实施例28或29所述的溶剂交换模块，其中，所述交换表面具有长度和宽度，并且所述宽度基本上与载玻片宽度相同。
实施例31.根据实施例28至30中任一实施例所述的溶剂交换模块，还包括用于容纳交换液体的储器、连接储器和溶剂交换头的一个或多个分配管线、以及连接储器和溶剂交换头的一个或多个返回管线。
实施例32.根据实施例31所述的溶剂交换模块，其中，交换头和载玻片之间的距离产生毛细间隙。此外，溶剂交换模块可以在载玻片上移动，以处理比溶剂交换头大的区域。
实施例33.根据实施例28至32中任一实施例所述的溶剂交换模块，还包括压电换能器，所述压电换能器被配置为感生高频压力波以加速载玻片上的溶剂交换。
实施例34.根据实施例28至33中任一实施例所述的溶剂交换模块，还包括流体连接到分配管线的分配泵，以及连接到一个或多个返回管线的至少一个返回泵。
实施例35.一种制备用于分析的样品载玻片的方法，包括：在载玻片上提供样品，其中，样品包括第一溶剂；在载玻片上的样品(如组织切片)和溶剂交换头之间形成毛细间隙；从溶剂交换头中的分配孔分配包括第二溶剂的交换液体；以及从毛细间隙移除排出的液体。
实施例36.根据实施例35所述的方法，其中，第一溶剂包括水，第二溶剂包括醇(例如乙醇)。
实施例37.根据实施例35或36所述的方法，其中，排出的液体包括第一溶剂和第二溶剂的混合物。
实施例38.根据实施例35至37中任一实施例所述的方法，还包括将排出的液体传递至储器，其中，储器包含包括第二溶剂的交换液体。
实施例39.根据实施例35至38中任一实施例所述的方法，其中，在分配步骤和移除步骤期间，交换液体保持在交换头下方。
实施例40.根据实施例35至39中任一实施例所述的方法，其中，所述溶剂交换头通过所述溶剂交换头中部的分配孔分配所述第二溶剂。
实施例41.根据实施例35至40中任一实施例所述的方法，还包括在放置于载玻片上之后从样品中部分或完全移除第一溶剂。例如，当样品包括水作为第一溶剂时，样品可以部分脱水至含水量在0％和20％之间，优选小于15％。
实施例42.根据实施例41所述的方法，其中，样品通过溶剂交换部分或完全脱水。
实施例43.根据实施例42所述的方法，其中，一个或多个分配管线向载玻片提供交换液体，并且一个或多个返回管线从载玻片移除排出的液体。
实施例44.根据实施例43所述的方法，其中，所述分配管线到所述返回管线的路径产生用于所述溶剂移动的毛细间隙。
实施例45.根据实施例35至44中任一实施例所述的方法，其中，将压电换能器施加于载玻片以感生高频压力波来加速溶剂交换。
实施例46.根据实施例35至45中任一实施例所述的方法，其中，将交换液体施加至样品60秒或更短时间以进行溶剂交换。
实施例47.根据实施例35至46中任一实施例所述的方法，其中，将交换液体施加至样品约5秒或更短时间。
实施例48.根据实施例35-47中任一实施例所述的方法，还包括用盖玻片覆盖载玻片上的样品，其中，盖玻片具有第一主表面和第二主表面，并且在面向样品的第一主表面上包括压敏粘合剂。
实施例49.根据实施例35-48中任一实施例所述的方法，其中，用盖玻片覆盖样品的过程花费约5秒或更少时间。
实施例50.根据实施例49所述的方法，其中，在样品被盖玻片覆盖之后，载玻片被放置在载玻片托架中。
实施例51.根据实施例50所述的方法，其中，将载玻片托架放置在载玻片上的过程花费约5秒或更少时间。
应理解，本文使用的术语仅仅是为了描述特定的实施例，而不是旨在加以限制。这些定义的术语是对本发明技术领域中通常理解和接受的定义的术语的技术和科学含义的补充。
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鉴于本公开，注意，该方法和装置可以按照本教导来实施。此外，仅通过说明和示例的方式包括各种部件、材料、结构和参数，而没有任何限制的意义。鉴于本公开，本教导可以在其他应用中实施，并且可以确定实施这些应用的部件、材料、结构和设备，同时保持在所附权利要求的范围内。

Claims (53)

1.一种施加盖玻片模块，包括：
载玻片安装台，具有用于载玻片的表面，并且包括一个或多个载玻片挡板，以防止或减少所述载玻片在所述载玻片安装台上的移动；
线性致动器，用于在所述载玻片台上沿载玻片的长轴方向移动所述载玻片安装台；
盖玻片带分配器，位于所述载玻片安装台上方，并且具有进给端和挤出端，其中，所述盖玻片带分配器被配置为在所述进给端接收盖玻片带，并且从所述挤出端以与所述载玻片安装台上的载玻片成一定角度挤出所述盖玻片带；以及
辊，被定位在所述带分配器的挤出端之后，并且被配置为滚动所述载玻片上的盖玻片带并向所述盖玻片带施加压力。
2.根据权利要求1所述的装置，还包括释放衬垫卷轴，该释放衬垫卷轴用于从所述盖玻片带分配器接收释放衬垫。
3.根据权利要求1或2所述的装置，其中，所述带分配器包括释放衬垫分离器，该释放衬垫分离器用于将所述释放衬垫与所述盖玻片带分离。
4.一种用于载玻片上的样品的溶剂交换模块，所述溶剂交换模块包括：
用于载玻片的支撑件；以及
位于所述支撑件上方的气体供给器，该气体供给器被配置为将气体管线吹到所述支撑件上的载玻片上；其中，所述支撑件和所述气体供给器中的一者或两者被配置用于线性运动。
5.根据权利要求4所述的模块，其中，所述支撑件是输送机。
6.根据权利要求4所述的模块，其中，所述支撑件包括加热器。
7.一种制备用于光学分析的覆盖样品载玻片的方法，包括：
将载玻片上的样品与封固介质接触，其中，所述封固介质不含二甲苯；
用盖玻片覆盖所述载玻片上的样品，其中，所述盖玻片具有第一主表面和第二主表面，并且包括在面向所述样品的所述第一主表面上的压敏粘合剂；以及
向所述盖玻片施加合适的压力，从而将所述盖玻片粘附到所述载玻片。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述盖玻片包括盖玻片带。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，干净的盖玻片带被卷绕在带卷轴上，并且所述方法还包括：
展开所述干净的盖玻片带的片段，并且将经展开的片段施加于所述载玻片。
10.根据权利要求8至9中任一项所述的方法，其中，所述干净的盖玻片带在释放层上，并且所述方法包括将所述盖玻片带从所述释放层分离。
11.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，还包括将所述样品放置在所述载玻片上，并且在覆盖所述样品之前从所述样本移除溶剂。
12.根据权利要求7至11中任一项所述的方法，还包括在将所述样品放置在所述载玻片上之后，对所述样品进行部分或完全脱水。
13.根据权利要求12所述的方法，其中，通过溶剂交换对所述样品进行部分或完全脱水。
14.根据权利要求13所述的方法，其中，通过喷涂将交换溶剂施加于所述样品。
15.根据权利要求14所述的方法，还包括在所述样品上吹气体管线，以蒸发溶剂。
16.根据权利要求12所述的方法，其中，通过经由毛细间隙流过所述样品而将交换溶剂施加到所述样品上。
17.根据权利要求16所述的方法，其中，使所述载玻片相对于所述毛细间隙移动，以处理更大的表面积。
18.根据权利要求13所述的方法，其中，将压电换能器施加于所述载玻片以感生高频压力波来加速所述溶剂交换。
19.根据权利要求7至18中任一项所述的方法，还包括从载玻片托架移除载玻片并将所述载玻片放置在载玻片台上。
20.根据权利要求7至19中任一项所述的方法，其中，所述压敏粘合剂渗透所述样品中的孔。
21.根据权利要求7至20中任一项所述的方法，其中，通过在所述盖玻片带上滚动辊来向所述盖玻片带施加所述压力。
22.一种用于制备覆盖样本载玻片的装置，包括：
溶剂交换模块；以及
施加盖玻片模块。
23.根据权利要求22所述的装置，还包括载玻片托架模块。
24.一种被施加了盖玻片的样品载玻片，其基本上不含二甲苯，该样品载玻片包括：
在表面上具有样品的载玻片；
粘附到所述样品的盖玻片带，其中，基本上所有所述样品都被所述盖玻片带覆盖；以及
封固剂，在所述盖玻片带和所述载玻片之间与所述样品接触，其中，所述封固剂不是二甲苯。
25.根据权利要求24所述的载玻片，其中，所述封固剂包括一种或多种C1-4醇或C1-4二醇。
26.根据权利要求24或25所述的载玻片，其中，所述样品包括一种或多种染料。
27.根据权利要求24至26中任一项所述的载玻片，其中，所染色的样品在至少十年的时间段内是稳定的。
28.一种施加盖玻片装置，包括盖玻片带分配器，所述盖玻片带分配器被配置为将盖玻片带的粘合剂侧施加到载玻片上的样品。
29.一种用于载玻片上的样品的溶剂交换模块，所述溶剂交换模块包括：
用于载玻片的支撑件；以及
溶剂交换头，用于分配交换液体并移除排出的液体，其中，所述溶剂交换头能够定位在离所述载玻片一段距离处，并且所述支撑件和所述溶剂交换件中的一者或两者被配置用于线性运动。
30.根据权利要求29所述的溶剂交换模块，其中，所述溶剂交换头包括面向所述载玻片的交换表面，其中，所述交换表面包括围绕所述排出孔的凸起部分。
31.根据权利要求29或30所述的溶剂交换模块，其中，所述交换表面具有长度和宽度，并且所述宽度与载玻片宽度基本相同。
32.根据权利要求29至31中任一项所述的溶剂交换模块，还包括用于容纳所述交换液体的储器、连接所述储器和所述溶剂交换头的一条或多条分配管线以及连接所述储器和所述溶剂交换头的一条或多条返回管线。
33.根据权利要求32所述的溶剂交换模块，其中，所述交换头和所述载玻片之间的距离产生毛细间隙。
34.根据权利要求33所述的溶剂交换模块，其中，所述溶剂交换模块能够在所述载玻片上移动，以处理比所述溶剂交换头大的区域。
35.根据权利要求29至34中任一项所述的溶剂交换模块，还包括压电换能器，所述压电换能器被配置为感生高频压力波以加速所述载玻片上的溶剂交换。
36.根据权利要求29至35中任一项所述的溶剂交换模块，还包括流体连接到所述分配管线的分配泵，以及连接到所述一个或多个返回管线的至少一个返回泵。
37.一种制备用于分析的样品载玻片的方法，包括：
在载玻片上提供样品，其中，所述样品包括第一溶剂；
在所述载玻片上的样品和溶剂交换头之间形成毛细间隙；
从所述溶剂交换头中的分配孔分配包括第二溶剂的交换液体；以及
从所述毛细间隙移除排出的液体。
38.根据权利要求37所述的方法，其中，所述第一溶剂包括水，所述第二溶剂包括醇。
39.根据权利要求37或38所述的方法，其中，所述排出的液体包括所述第一溶剂和所述第二溶剂的混合物。
40.根据权利要求37到39中任一项所述的方法，还包括将所述排出的液体传递到储器，其中，所述储器含有包括所述第二溶剂的交换液体。
41.根据权利要求37至40中任一项所述的方法，其中，在所述分配步骤和移除步骤期间，所述交换液体保持在所述交换头下方。
42.根据权利要求37至41中任一项所述的方法，其中，所述溶剂交换头通过所述溶剂交换头中部的分配孔分配所述第二溶剂。
43.根据权利要求37到42中任一项所述的方法，还包括在放置于所述载玻片上之后从所述样品中部分或完全移除所述第一溶剂。
44.根据权利要求43所述的方法，其中，通过溶剂交换将所述样品部分或完全脱水。
45.根据权利要求44所述的方法，其中，一条或多条分配管线向所述载玻片提供交换液体，并且一条或多条返回管线从所述载玻片移除排出的液体。
46.根据权利要求45所述的方法，其中，所述分配管线到所述返回管线的路径产生用于所述溶剂移动的毛细间隙。
47.根据权利要求37至46中任一项所述的方法，其中，将压电换能器施加于所述载玻片以感生高频压力波来加速所述溶剂交换。
48.根据权利要求37至47中任一项所述的方法，其中，将所述交换液体施加至所述样品60秒或更短时间以进行溶剂交换。
49.根据权利要求37至48中任一项所述的方法，其中，将所述交换液体施加至所述样品约5秒或更短时间。
50.根据权利要求37至49中任一项所述的方法，还包括用盖玻片覆盖所述载玻片上的样品，其中，所述盖玻片具有第一主表面和第二主表面，并且在面向所述样品的所述第一主表面上包括压敏粘合剂。
51.根据权利要求37至50中任一项所述的方法，其中，用盖玻片覆盖所述样品的过程耗时约5秒或更短时间。
52.根据权利要求51所述的方法，其中，在用所述盖玻片覆盖所述样品之后，将所述载玻片放置在载玻片托架中。
53.根据权利要求52所述的方法，其中，将所述载玻片放入所述载玻片托架的过程耗时约5秒或更短时间。
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