JP2023528632A - Ｃｄ３０陽性癌の処置 - Google Patents

Abstract

対象においてＣＤ３０陽性癌を処置するための方法が開示され、前記方法が、リンパ球除去化学療法およびＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞を投与するステップを含む。【選択図】図２

Description

この出願は、２０２０年６月５日に出願された米国特許出願第６３／０３５，１０４号の優先権を主張し、その特許出願の内容および要素は、全ての目的のために参照により本明細書に組み入れられている。

この出願は、国立衛生研究所によって授与されたＨＬ１１４５６４による政府支援でなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
本発明は、医学的処置および予防の方法に関する。

ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ治療は、ＣＤ３０膜貫通糖タンパク質を発現する癌細胞をターゲットして、死滅させるために、ＣＤ３０に特異的なキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するように遺伝子修飾されたＴ細胞で構成される。その製剤は、ＣＤ３０陽性リンパ腫を有する患者から採取された末梢血単核球（ＰＢＭＣ）から作製される。

古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）を含むＣＤ３０陽性血液悪性腫瘍を有する患者における最初の第１相研究において、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ投与は、安全であると示されたが、少数の患者のみが持続的応答を生じた（ＮＣＴ０１３１６１４６；Ｒａｍｏｓら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１）。

ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ治療は、耐容性が良いことが示されており、激しく前処置された、ＣＤ３０陽性の再発性または不応性の古典的ＨＬを有する患者およびいくらかのＮＨＬ患者において、リンパ球除去化学療法後に、有意な臨床活性が実証された（ＮＣＴ０２９１７０８３（ＲＥＬＹ－３０）；Ｒａｍｏｓら、Ｂｉｏｌ Ｂｌｏｏｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ２５（２０１９）Ｓ７～Ｓ７５、Ａｂｓｔｒａｃｔ ７９）。

第１の側面において、本開示は、対象においてＣＤ３０陽性癌を処置する方法であって、
（ｉ）リンパ球除去化学療法を前記対象に投与するステップ、および
（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ
を含む、方法を提供する。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための、ＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞の集団であって、前記方法が
（ｉ）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および
（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ
を含む、集団を提供する。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための医薬の製造におけるＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞の集団の使用であって、前記方法が
（ｉ）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および
（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ
を含む、使用を提供する。

いくつかの態様において、リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップは、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含む。
いくつかの態様において、方法は、フルダラビンを１日あたり１５～６０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した２～６日間、投与するステップを含む。

いくつかの態様において、方法は、フルダラビンを１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与するステップを含む。
いくつかの態様において、方法は、ベンダムスチンを１日あたり３５～１４０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した２～６日間、投与するステップを含む。

いくつかの態様において、方法は、ベンダムスチンを１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与するステップを含む。
いくつかの態様において、方法は、５×１０^７個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２～１×１０^９個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２を対象に投与するステップを含む。

いくつかの態様において、方法は、１×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２～６×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２を対象に投与するステップを含む。

いくつかの態様において、方法は
（ｉ）フルダラビンを１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で、およびベンダムスチンを１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、対象に投与するステップ、ならびに
（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を２×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２～６×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２の用量で前記対象に投与するステップ
を含む。

いくつかの態様において、ＣＤ３０陽性癌は、血液癌、固形癌、造血器悪性腫瘍、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型、Ｔ細胞白血病、Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型、ＥＢＶ陽性Ｂ細胞リンパ腫、ＥＢＶ陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫、進行性全身性マスト細胞腫、胚細胞性腫瘍、および精巣胎芽性癌から選択される。

いくつかの態様において、ＣＤ３０陽性癌は、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型、節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型、および原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫から選択される。

いくつかの態様において、対象は以前、ＣＤ３０陽性癌についての治療が不成功であった。
いくつかの態様において、ＣＤ３０陽性癌は、再発性または不応性ＣＤ３０陽性癌である。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、（ｉ）ＣＤ３０と特異的に結合する抗原結合性ドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲを含み、前記シグナル伝達ドメインが、（ａ）ＣＤ２８の細胞内ドメインに由来したアミノ酸配列および（ｂ）免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含むアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２６と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８の膜貫通ドメインに由来する。

いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、配列番号２０と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、配列番号１４と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列、および配列番号１５と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、配列番号１８と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、（ａ）ＣＤ３ζの細胞内ドメインに由来したアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２５と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様において、ＣＡＲは、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に提供されるヒンジ領域を含む。

いくつかの態様において、ヒンジ領域は、配列番号３３と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様において、ＣＡＲは、配列番号３５または３６と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

ＣＤ３０陽性癌
本開示は、癌、より特に、ＣＤ３０陽性癌の処置に関する。
ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８としても知られている）は、ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ２８９０８により識別されるタンパク質である。ＣＤ３０は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーの１回貫通のＩ型膜貫通糖タンパク質である。ＣＤ３０構造および機能は、例えば、ｖａｎ ｄｅｒ Ｗｅｙｄｅｎら、Ｂｌｏｏｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｊｏｕｒｎａｌ（２０１７） ７：ｅ６０３ならびにＭｕｔａおよびＰｏｄａｃｋ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．（２０１３） ５７（１－３）：１５１～８（どちらも、全体として参照により本明細書に組み入れられている）に記載されている。

ヒトＴＮＦＲＳＦ８遺伝子によりコードされるｍＲＮＡの選択的スプライシングは、３つのアイソフォーム：アイソフォーム１（「長い」アイソフォーム；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ２８９０８－１，ｖ１；配列番号１）、アイソフォーム２（「細胞質の」、「短い」、または「Ｃ３０Ｖ」アイソフォーム、ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ２８９０８－２；配列番号２）（配列番号１の位置１～４６３に対応するアミノ酸配列が欠損している）、およびアイソフォーム３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ２８９０８－３；配列番号３）（配列番号１の位置１～１１１および位置４４６に対応するアミノ酸配列が欠損している）を生じる。配列番号１のＮ末端の１８アミノ酸がシグナルペプチド（配列番号４）を形成し、その後に、３６７アミノ酸の細胞外ドメイン（配列番号１の位置１９～３８５。配列番号５に示されている）、２１アミノ酸の膜貫通ドメイン（配列番号１の位置３８６～４０６。配列番号６に示されている）、および１８９アミノ酸の細胞質ドメイン（配列番号１の位置４０７～５９５。配列番号７に示されている）が続く。

この明細書において、「ＣＤ３０」は、任意の種由来のＣＤ３０を指し、任意の種由来のＣＤ３０アイソフォーム、断片、バリアント、または相同体を含む。本明細書で用いられる場合、参照タンパク質の「断片」、「バリアント」、または「相同体」は、任意で、参照タンパク質（例えば、参照アイソフォーム）のアミノ酸配列と少なくとも６０％、好ましくは７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有すると特徴づけられ得る。いくつかの態様において、参照タンパク質の断片、バリアント、アイソフォーム、および相同体は、参照タンパク質により実行される機能を実行する能力により特徴づけられ得る。

いくつかの態様において、ＣＤ３０は、哺乳動物由来である（例えば、霊長類（アカゲザル、カニクイザル、またはヒト）および／または齧歯類（例えば、ラットまたはマウス）ＣＤ３０）。好ましい態様において、ＣＤ３０はヒトＣＤ３０である。アイソフォーム、断片、バリアント、または相同体は、任意で、所定の種、例えばヒト由来の未成熟または成熟ＣＤ３０アイソフォームのアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有すると特徴づけられ得る。ＣＤ３０の断片は、１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、または５９０アミノ酸のうちの１つの最小限の長さを有し得、および１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、または５９５アミノ酸のうちの１つの最大限の長さを有し得る。

いくつかの態様において、ＣＤ３０は、配列番号１、２、または３と少なくとも７０％、好ましくは、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ＣＤ３０は、配列番号５と少なくとも７０％、好ましくは、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ＣＤ３０の断片は、配列番号５または１９と少なくとも７０％、好ましくは、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

本開示は、ＣＤ３０関連癌の処置に関する。
本明細書で用いられる場合、「癌」は、任意の望ましくない細胞増殖（または望ましくない細胞増殖によってそれ自体、顕在化した任意の疾患）、新生物、または腫瘍を指し得る。癌は、良性または悪性であり得、および原発性または続発性（転移性）であり得る。新生物または腫瘍は、細胞の任意の異常な成長または増殖であり得、および任意の組織内に位置し得る。癌は、例えば、副腎、副腎髄質、肛門、虫垂、膀胱、血液、骨、骨髄、脳、乳房、盲腸、中枢神経系（脳を含む、または除外する）、小脳、子宮頚部、結腸、十二指腸、子宮内膜、上皮細胞（例えば、腎臓上皮）、胆嚢、食道、グリア細胞、心臓、回腸、空腸、腎臓、涙腺、咽頭、肝臓、肺、リンパ、リンパ節、リンパ芽球、上顎骨、縦隔、腸間膜、子宮筋、上咽頭、網、口腔、卵巣、膵臓、耳下腺、末梢神経系、腹膜、胸膜、前立腺、唾液腺、Ｓ状結腸、皮膚、小腸、軟組織、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、舌、扁桃腺、気管、子宮、外陰部、および／または白血球に由来した組織／細胞であり得る。

いくつかの態様において、癌は、ＣＤ３０が病理学的に結びつけられる癌である。すなわち、いくつかの態様において、癌は、ＣＤ３０発現によって引き起こされもしくは憎悪する癌、ＣＤ３０の発現がリスク因子である癌、および／またはＣＤ３０の発現が癌の発症、発達、進行、重症度、もしくは転移と正の関連を示す癌である。癌は、ＣＤ３０発現により特徴づけられ、例えば、癌は、ＣＤ３０を発現する細胞を含み得る。そのような癌は、ＣＤ３０陽性癌と呼ばれ得る。

ＣＤ３０陽性癌は、ＣＤ３０を発現する細胞（例えば、細胞表面にＣＤ３０タンパク質を発現する細胞）を含む癌であり得る。ＣＤ３０陽性癌は、ＣＤ３０を過剰発現し得る。ＣＤ３０の過剰発現は、等価の非癌性細胞／非腫瘍組織による発現のレベルより高い、ＣＤ３０の遺伝子またはタンパク質発現のレベルの検出により決定され得る。所定の癌／試料は、当業者によく知られた技術、例えば、ｑＲＴ－ＰＣＲ（遺伝子発現について）、抗体に基づいたアッセイ（タンパク質発現について、例えば、ウェスタンブロット、フローサイトメトリーなど）によりＣＤ３０の遺伝子／タンパク質発現について評価され得る。

ＣＤ３０陽性癌は、例えば、ｖａｎ ｄｅｒ Ｗｅｙｄｅｎら、Ｂｌｏｏｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｊｏｕｒｎａｌ（２０１７） ７：ｅ６０３ならびにＭｕｔａおよびＰｏｄａｃｋ、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ（２０１３）、５７（１－３）：１５１～８（どちらも、全体として参照により本明細書に組み入れられている）に記載されている。ＣＤ３０は、活性化Ｔリンパ球およびＢリンパ球のごく一部に、ならびに古典的ホジキンリンパ腫および未分化大細胞リンパ腫を含む様々なリンパ球系新生物により、発現している。ＣＤ３０の可変性発現はまた、末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型（ＰＴＣＬ－ＮＯＳ）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫、様々なＢ細胞非ホジキンリンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、特に、ＥＢＶ陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫が挙げられる）、および進行性全身性マスト細胞腫についても示されている。ＣＤ３０発現はまた、胚細胞性腫瘍および精巣胎芽性癌を含むいくつかの非造血器悪性腫瘍にも観察されている。

膜貫通糖タンパク質ＣＤ３０は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーのメンバーである（Ｆａｌｉｎｉら、Ｂｌｏｏｄ（１９９５）８５（１）：１～１４）。ＴＮＦ／ＴＮＦ受容体（ＴＮＦ－Ｒ）スーパーファミリーのメンバーは、免疫応答を複数のレベルで調整し、ＣＤ３０は、正常なリンパ球系細胞の機能または増殖を制御することにおいて役割を果たす。ＣＤ３０は、最初、モノクローナル抗体Ｋｉ－１（マウスをＨＬ由来細胞株Ｌ４２８で免疫することにより産生された）により認識される抗原として記載された（ＭｕｔａおよびＰｏｄａｃｋ、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ（２０１３） ５７：１５１～１５８）。ＣＤ３０抗原発現は、ＡＬＣＬおよびホジキン病におけるリード・シュテルンベルク細胞を同定するために用いられている（Ｆａｌｉｎｉら、Ｂｌｏｏｄ（１９９５）８５（１）：１～１４）。リンパ腫悪性細胞における幅広い発現のゆえに、ＣＤ３０は、抗体に基づいた免疫療法と細胞療法の両方を開発するための標的候補である。重要なことには、ＣＤ３０は、生理的条件下で正常組織上に典型的に発現することはなく、したがって、休止成熟または前駆体Ｂ細胞またはＴ細胞上での非存在がはっきりわかる（ＹｏｕｎｅｓおよびＡｎｓｅｌｌ、Ｓｅｍｉｎ Ｈｅｍａｔｏｌ（２０１６） ５３：１８６～１８９）。ＣＤ３０をターゲットする抗体－薬物コンジュゲートである、ブレンツキシマブベドチンは、最初、ＣＤ３０陽性ＨＬの処置のために承認された（Ａｄｃｅｔｒｉｓ（登録商標）ＵＳ Ｐａｃｋａｇｅ Ｉｎｓｅｒｔ ２０１８）。ブレンツキシマブベドチン治験からのデータは、ＣＤ３０陽性リンパ腫の処置のための治療標的としてのＣＤ３０を裏付けているが、それの使用に関連した毒性が懸念材料である。

ホジキンリンパ腫（ＨＬ）は、リンパ節およびリンパ系が関与する稀な悪性腫瘍である。ＨＬの発生率は、二峰性であり、たいていの患者は１５歳から３０歳の間に診断され、その後、もう一つのピークが５５歳以上の成人にある。２０１９年には、米国において８，１１０例の新症例（女性において３，５４０件、男性において４５７０件）が存在し、およびこの疾患により１，０００人が死亡（４１０人の女性および５９０人の男性）するであろうと推定されている（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１９）。国立癌研究所のＳＥＥＲデータベースにおける２０１２～２０１６の症例に基づいて、米国における小児ＨＬ患者に関するＨＬの発生率は、以下の通りである：１００，０００人あたり、１～４歳：０．１人；５～９歳：０．３人；１０～１４歳：１．３人；１５～１９歳：３．３人（ＳＥＥＲ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ Ｒｅｖｉｅｗ、１９７５－２０１６］）。

世界保健機関（ＷＨＯ）分類は、ＨＬを２つの主な型：古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）および結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫（ＮＬＰＨＬ）に分けている。西洋の国々において、ｃＨＬは、全ＨＬの９５％を占め、ＮＬＰＨＬは５％を占める（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ２０１９）。

進行性疾患を有するｃＨＬ患者に対する第一選択化学療法による治癒率は、７０％から７５％の間である（Ｋａｒａｎｔａｎｏｓら、Ｂｌｏｏｄ Ｌｙｍｐｈａｔ Ｃａｎｃｅｒ（２０１７） ７：３７～５２）。救済化学療法、続く自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）は、一次治療後に再発する患者において一般的に用いられる。残念ながら、ｃＨＬ患者の最高５０％が、ＡＳＣＴ後に疾患再発を経験する。ＡＳＣＴ後に再発する患者の全生存期間中央値は、およそ２年間である（Ａｌｉｎａｒｉ Ｂｌｏｏｄ（２０１６） １２７：２８７～２９５）。積極的な併用化学療法にも関わらず、患者の１０％～４０％は、救済化学療法に対する応答を達成せず、非応答者におけるＡＳＣＴを支持する無作為化臨床試験データは存在しない。救済化学療法に対して応答しない患者、ＡＳＣＴ後に再発する患者、またはこのアプローチの候補ではない患者について、予後は、依然として重篤であり、新しい処置アプローチが緊急に必要とされている（Ｋｅｕｄｅｌｌ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ（２０１９） １８４：１０５～１１２）。

小児科集団（小児、青年、および若年成人）の大部分は、現在利用できる治療で治癒するが、ほんの一部の患者は、不応性または再発性疾患を有することもあり、有効性のベネフィットの向上と共に、受け入れ可能な安全性プロファイルを有する新規の治療を必要とする（Ｆｌｅｒｌａｇｅら、Ｂｌｏｏｄ（２０１８） １３２：３７６～３８４；Ｋｅｌｌｙ、Ｂｌｏｏｄ（２０１５） １２６：２４５２～２４５８；ＭｃＣｌａｉｎおよびＫａｍｄａｒ、ＵｐＴｏＤａｔｅ ２０１９；Ｍｏｓｋｏｗｉｔｚ、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ（２０１９） ４７７～４８６）。小児期に高用量の化学療法で処置されたＨＬ患者は一般的に、心臓、肺、生殖腺、および内分泌の毒性、加えて、続発性悪性新生物などの処置に関連した長期の後遺症を経験する（Ｃａｓｔｅｌｌｉｎｏら、Ｂｌｏｏｄ（２０１１） １１７（６）：１８０６～１８１６）。

いくつかの態様において、本開示によるＣＤ３０陽性癌は、血液癌、固形癌、造血器悪性腫瘍、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型、Ｔ細胞白血病、Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型、ＥＢＶ陽性Ｂ細胞リンパ腫、ＥＢＶ陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫、進行性全身性マスト細胞腫、胚細胞性腫瘍、および精巣胎芽性癌から選択され得る。

ＣＤ３０陽性癌は、再発性ＣＤ３０陽性癌であり得る。本明細書で用いられる場合、「再発性」癌は、処置（例えば、その癌についての第一選択治療）に応答したが、その後、例えば寛解期後、再興／進行している癌を指す。例えば、再発性癌は、成長／進行が処置（例えば、その癌についての第一選択治療）によって抑制され、かつその後、成長／進行している癌であり得る。

ＣＤ３０陽性癌は、不応性ＣＤ３０陽性癌であり得る。本明細書で用いられる場合、「不応性」癌は、処置（例えば、その癌についての第一選択治療）に対して応答しなかった癌を指す。例えば、不応性癌は、成長／進行が処置（例えば、その癌についての第一選択治療）により阻害されなかった癌であり得る。いくつかの態様において、不応性癌は、その癌についての処置を受ける対象が、その処置に対する部分的または完全な応答を示さなかった癌であり得る。

ＣＤ３０陽性癌が未分化大細胞リンパ腫である態様において、その癌は、化学療法、ブレンツキシマブベドチン、またはクリゾチニブでの処置に関して再発性または不応性であり得る。

ＣＤ３０陽性癌が末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型である態様において、その癌は、化学療法またはブレンツキシマブベドチンでの処置に関して再発性または不応性であり得る。
ＣＤ３０陽性癌が節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫である態様において、その癌は、化学療法（アスパラギナーゼを含むまたは含まない）またはブレンツキシマブベドチンでの処置に関して再発性または不応性であり得る。

ＣＤ３０陽性癌がびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型である態様において、その癌は、化学療法（リツキシマブを含むまたは含まない）またはＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ治療での処置に関して再発性または不応性であり得る。

ＣＤ３０陽性癌が原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫である態様において、その癌は、化学療法、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＰＤ－１阻害剤）またはＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ治療での処置に関して再発性または不応性であり得る。

ＣＤ３０特異的ＣＡＲ
ＣＡＲ
本開示は、ＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む／発現する免疫細胞に関する。

キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、抗原結合性機能とＴ細胞活性化機能の両方を提供する組換え受容体分子である。ＣＡＲ構造およびエンジニアリングは、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、Ｄｏｔｔｉら、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ（２０１４） ２５７（１）に概説されている。

ＣＡＲは、膜貫通ドメインを介してシグナル伝達ドメインと連結された抗原結合性ドメインを含む。任意のヒンジまたはスペーサードメインは、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に分離を与え得、可動性リンカーとして働き得る。細胞によって発現した場合、抗原結合性ドメインは、細胞外空間において提供され、シグナル伝達ドメインは細胞内である。

抗原結合性ドメインは、ＣＡＲが特異的である標的抗原との結合を媒介する。ＣＡＲの抗原結合性ドメインは、ＣＡＲが向けられる抗原に特異的である抗体の抗原結合性領域に基づき得る。例えば、ＣＡＲの抗原結合性ドメインは、標的抗原と特異的に結合する抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）についてのアミノ酸配列を含み得る。ＣＡＲの抗原結合性ドメインは、標的抗原と特異的に結合する抗体の軽鎖可変領域および重鎖可変領域のアミノ酸配列を含み得、またはそれらからなり得る。抗原結合性ドメインは、抗体の軽鎖可変領域および重鎖可変領域のアミノ酸配列の配列を含む一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）として提供され得る。ＣＡＲの抗原結合性ドメインは、リガンド：受容体結合などの他のタンパク質：タンパク質相互作用に基づいた抗原をターゲットし得る；例えばＩＬ－１３Ｒα２ターゲット化ＣＡＲは、ＩＬ－１３に基づいた抗原結合性ドメインを用いて開発されている（例えば、Ｋａｈｌｏｎら、２００４ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６４（２４）：９１６０～９１６６参照）。

膜貫通ドメインは、ＣＡＲの抗原結合性ドメインとシグナル伝達ドメインとの間に提供される。膜貫通ドメインは、ＣＡＲを発現する細胞の細胞膜にＣＡＲを繋留するために提供され、抗原結合性ドメインは細胞外空間にあり、シグナル伝達ドメインは細胞内にある。ＣＡＲの膜貫通ドメインは、細胞膜結合型タンパク質（例えば、ＣＤ２８、ＣＤ８など）についての膜貫通領域配列に由来し得る。

この明細書を通じて、参照ポリペプチド／ドメイン／アミノ酸配列「に由来する」ポリペプチド、ドメイン、およびアミノ酸配列は、前記参照ポリペプチド／ドメイン／アミノ酸配列のアミノ酸配列と少なくとも６０％、好ましくは、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有する。参照ポリペプチド／ドメイン／アミノ酸配列「に由来する」ポリペプチド、ドメイン、およびアミノ酸配列は、好ましくは、前記参照ポリペプチド／ドメイン／アミノ酸配列の機能的および／または構造的性質を保持する。

例示として、ＣＤ２８の細胞内ドメインに由来したアミノ酸配列は、例えば配列番号２６に示されているような、ＣＤ２８の細胞内ドメインと６０％、好ましくは、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。さらに、ＣＤ２８の細胞内ドメインに由来したアミノ酸配列は、好ましくは、配列番号２６のアミノ酸配列の機能的性質、すなわち、ＣＤ２８媒介性シグナル伝達を活性化する能力を保持する。

所定のポリペプチドまたはそのドメインのアミノ酸配列は、当業者に知られたデータベースから検察され得、またはそれから検察された核酸配列から決定され得る。そのようなデータベースには、ＧｅｎＢａｎｋ、ＥＭＢＬ、およびＵｎｉＰｒｏｔが挙げられる。

シグナル伝達ドメインは、免疫細胞機能の活性化に必要とされるアミノ酸配列を含む。ＣＡＲシグナル伝達ドメインは、ＣＡＲ発現細胞のリン酸化および活性化のための免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を提供するＣＤ３－ζの細胞内ドメインのアミノ酸配列を含み得る。ＦｃγＲＩのＩＴＡＭ含有領域を含むドメインなど、他のＩＴＡＭ含有タンパク質の配列を含むシグナル伝達ドメインもまた、ＣＡＲに用いられている（Ｈａｙｎｅｓら、２００１ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６６（１）：１８２～１８７）。ＣＤ３－ζの細胞内ドメインに由来したシグナル伝達ドメインを含むＣＡＲは、しばしば、第１世代ＣＡＲと呼ばれる。

ＣＡＲのシグナル伝達ドメインは、典型的には、免疫細胞活性化およびエフェクター機能を増強するのに必要な共刺激シグナルを与えるために共刺激性タンパク質（例えば、ＣＤ２８、４－１ＢＢなど）のシグナル伝達ドメインも含む。追加の共刺激性配列を含むシグナル伝達ドメインを有するＣＡＲは、しばしば、第２世代ＣＡＲと呼ばれる。場合によっては、ＣＡＲは、異なる細胞内シグナル伝達経路の共刺激を与えるようにエンジニアリングされる。例えば、ＣＤ２８共刺激は、優先的にホスファチジルイノシトール３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）経路を活性化し、一方、４－１ＢＢ共刺激は、ＴＮＦ受容体関連因子（ＴＲＡＦ）アダプタータンパク質を通してシグナル伝達をトリガーする。したがって、ＣＡＲのシグナル伝達ドメインは、１つより多い共刺激性分子のシグナル伝達ドメインに由来した共刺激性配列を含有することがある。複数の共刺激性配列を有するシグナル伝達ドメインを含むＣＡＲは、しばしば、第３世代ＣＡＲと呼ばれる。

任意のヒンジまたはスペーサー領域は、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に分離を与え得、可動性リンカーとして働き得る。例えばＩｇＧのＣＨ１－ＣＨ２ヒンジ領域に由来し得る、そのような領域は、結合性部分を様々な方向に向けることを可能にする可動性ドメインであり得、またはそれを含み得る。

特定の標的抗原に特異的なＣＡＲを発現するようにエンジニアリングすることを通して、免疫細胞（典型的にはＴ細胞であるが、ＮＫ細胞などの他の免疫細胞も）は、その標的抗原を発現する細胞を死滅させるために方向づけられ得る。ＣＡＲ発現Ｔ細胞（ＣＡＲ－Ｔ細胞）の、それが特異的である標的抗原との結合が、細胞内シグナル伝達、および結果的に、そのＴ細胞の活性化をトリガーする。活性化されたＣＡＲ－Ｔ細胞は、刺激されて、分裂しかつ標的抗原を発現する細胞の死滅を生じる因子を産生する。

ＣＤ３０特異的ＣＡＲ
ｃＨＬは、明らかに、細胞性免疫応答（移植片対リンパ腫効果）および抗体処置に対して感受性が高いため、人工キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の作製を通して両方のアプローチを組み合わせることに関心が集まっている。

前臨床研究におけるＣＤ３０をターゲットするＣＡＲは、この受容体を発現するようにエンジニアリングされたＴリンパ球が、再方向づけられて、ＣＤ３０陽性ＨＬ細胞株を死滅させることを示している（Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（１９９８）５８（６）：１１１６～９、Ｓａｖｏｌｄｏら、Ｂｌｏｏｄ（２００７） １１０（７）：２６２０～３０）。これに付け加えて、潜在的なオンターゲット毒性を調べるためのインビトロおよびインビボ実験は、抗ＣＤ３０ ＣＡＲ－Ｔ細胞が、ＣＤ３０陽性活性化ＨＳＰＣおよびＢリンパ球を残しながら、ＣＤ３０陽性リンパ腫に対する特異的な細胞傷害性を示すことを示した（Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ（２０１６） ２４：１４２３～１４３４）。

進行中の臨床研究の一部として製造されたＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞のインビトロ評価が行われた（ＮＣＴ０１３１６１４６；Ｒａｍｏｓら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１）。エンジニアリング化Ｔ細胞についての出発材料は、リンパ腫患者由来の末梢血単核球であった。この発表された研究における製造されたＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞は、提案された臨床試験のための最終製剤と同じレトロウイルスベクターを形質導入された。ＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞の合計２２個のロットは、ＩＬ－２（１１個の製造物）かまたはＩＬ－７／ＩＬ－１５（１１個の製造物）のいずれかを用いて製造された。

培養の１５日目までに、ＩＬ－７／ＩＬ－１５中で成長したＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞は、ＩＬ－２中で増殖したもの（それぞれ、２７．４±１３および６．５×１０^８±３．３×１０^８）より、ベースラインからのより大きい増殖およびより高い最終細胞数（それぞれ、４５±１３および１．２×１０^９±５．５×１０^８）を有した。ＣＡＲ発現は、両方の群において同等であった（＞８９％）。

ＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞の特異的なインビトロ細胞傷害性は、４０：１、２０：１、１０：１、および５：１のエフェクター対標的比を用いる４時間の５１Ｃｒ放出アッセイにおいて決定された。ＨＤＬＭ－２細胞株は、ＣＤ３０陽性標的細胞として用いられ、一方、ＣＤ３０陰性Ｒａｊｉ腫瘍細胞が、対照（Ｃｔｒ－Ｔｓ）として用いられた。ＩＬ－２中で培養された細胞の合計ｎ＝９のロットが試験され、一方、ＩＬ－７／ＩＬ－１５中で増殖した細胞の合計ｎ＝８のロットが試験された。Ｒａｍｏｓら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１の図２Ｄは、平均特異的溶解を示し、ＣＤ３０陽性腫瘍細胞に対する直接的で特異的な細胞傷害性により示されているように、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの提案された作用機構の証拠を提供している。

抗原結合性ドメイン
「抗原結合性ドメイン」は、標的抗原と結合する能力があるドメインを指す。本開示のＣＡＲの標的抗原はＣＤ３０またはその断片である。本開示による抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０に対して方向づけられた抗体／抗体断片（例えば、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、一本鎖Ｆａｂ（ｓｃＦａｂ）、単一ドメイン抗体（例えば、ＶｈＨ）など）、または別のＣＤ３０結合性分子（例えば、標的抗原結合性ペプチドもしくは核酸アプタマー、リガンド、または他の分子）に由来し得る。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０との特異的な結合の能力がある抗体の抗体重鎖可変領域（ＶＨ）および抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。いくつかの態様において、標的抗原と結合する能力があるドメインは、ＣＤ３０結合性ペプチド／ポリペプチド、例えば、ペプチドアプタマー、チオレドキシン、モノボディ、アンチカリン、クニッツドメイン、アビマー、ノッチン、フィノマー（ｆｙｎｏｍｅｒ）、アトリマー（ａｔｒｉｍｅｒ）、ＤＡＲＰｉｎ、アフィボディ、ナノボディ（すなわち、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ））、アフィリン（ａｆｆｉｌｉｎ）、アルマジロリピートタンパク質（ＡｒｍＲＰ）、ＯＢｏｄｙ、またはフィブロネクチンを含み、またはそれからなる － 例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、Ｒｅｖｅｒｄａｔｔｏら、Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０１５；１５（１２）：１０８２～１１０１に概説されている（例えば、Ｂｏｅｒｓｍａら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ（２０１１） ２８６：４１２７３～８５およびＥｍａｎｕｅｌら、Ｍａｂｓ（２０１１） ３：３８～４８も参照）。

本開示の抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０との特異的な結合の能力がある抗体のＶＨおよびＶＬに由来し得る。抗体は、一般的に、６つの相補性決定領域ＣＤＲ：重鎖可変領域（ＶＨ）における３つ：ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３、ならびに軽鎖可変領域（ＶＬ）における３つ：ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含む。６つのＣＤＲは合わせて、抗体のパラトープ（標的抗原と結合する抗体の部分である）を定義する。ＶＨ領域およびＶＬ領域は、各ＣＤＲの両側にフレームワーク領域（ＦＲ）を含み、そのＦＲは、ＣＤＲの足場を提供する。Ｎ末端からＣ末端へ、ＶＨは以下の構造：Ｎ末端－［ＨＣ－ＦＲ１］－［ＨＣ－ＣＤＲ１］－［ＨＣ－ＦＲ２］－［ＨＣ－ＣＤＲ２］－［ＨＣ－ＦＲ３］－［ＨＣ－ＣＤＲ３］－［ＨＣ－ＦＲ４］－Ｃ末端を含み、ＶＬは以下の構造：Ｎ末端－［ＬＣ－ＦＲ１］－［ＬＣ－ＣＤＲ１］－［ＬＣ－ＦＲ２］－［ＬＣ－ＣＤＲ２］－［ＬＣ－ＦＲ３］－［ＬＣ－ＣＤＲ３］－［ＬＣ－ＦＲ４］－Ｃ末端を含む。

ＶＨおよびＶＬ配列は、抗原結合性ドメインがＣＡＲの他のドメインと連結され得るという条件で、任意の適切な型式で提供され得る。本開示の抗原結合性ドメインに関連して企図される型式には、Ｃａｒｔｅｒ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００６、６：３４３～３５７に記載されたもの、例えば、ｓｃＦｖ、ｄｓＦＶ、（ｓｃＦｖ）_２ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、Ｆａｂ、ミニボディ、およびＦ（ａｂ）_２型式が挙げられる。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０と結合する能力がある抗体／抗体断片のＣＤＲを含む。いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０と結合する能力がある抗体／抗体断片のＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。抗体のＶＨおよびＶＬで構成される部分はまた、本明細書で、可変断片（Ｆｖ）とも呼ばれ得る。ＶＨおよびＶＬは、同じポリペプチド鎖上に提供され得、リンカー配列を介して繋ぎ合わされ得る；そのような部分は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）と呼ばれる。ｓｃＦｖの調製のための適切なリンカー配列は、当業者に知られており、セリンおよびグリシン残基を含み得る。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０と結合する能力があるＦｖを含み、またはそれからなる。いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、ＣＤ３０と結合する能力があるｓｃＦｖを含み、またはそれからなる。

本開示のＣＡＲのＣＤ３０結合性ドメインは、好ましくは、ＣＤ３０またはその断片との特異的結合を示す。本開示のＣＡＲのＣＤ３０結合性ドメインは、好ましくは、ＣＤ３０の細胞外ドメインとの特異的結合を示す。ＣＤ３０結合性ドメインは、抗ＣＤ３０抗体または他のＣＤ３０結合性物質、例えば、ＣＤ３０結合性ペプチドもしくはＣＤ３０結合性小分子に由来し得る。

ＣＤ３０結合性ドメインは、抗ＣＤ３０抗体の抗原結合性部分に由来し得る。
抗ＣＤ３０抗体には、ＨＲＳ３およびＨＲＳ４（例えば、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９９８） ４８（５）：４９７～５０１に記載されている）、Ｓｃｈｌａｐｓｃｈｙら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ（２００４） １７（１２）：８４７～８６０に記載されたＨＲＳ３誘導体、ＢｅｒＨ２（ＭＢＬ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｔ＃ Ｋ０１４５－３、ＲＲＩＤ：ＡＢ＿５９０９７５）、ＳＧＮ－３０（ｃＡＣ１０としても知られ、例えば、Ｆｏｒｅｒｏ－Ｔｏｒｒｅｓら、Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ（２００９） １４６：１７１～９に記載されている）、ＭＤＸ－０６０（例えば、Ａｎｓｅｌｌら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ （２００７） ２５：２７６４～９に記載されている；５Ｆ１１、イラツムマブとしても知られている）、およびＭＤＸ－１４０１（例えば、Ｃａｒｄａｒｅｌｌｉら、Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２００９） １５（１０）：３３７６～８３に記載されている）、ならびにＷＯ２０２０／０６８７６４ Ａ１、ＷＯ２００３／０５９２８２ Ａ２、ＷＯ２００６／０８９２３２ Ａ２、ＷＯ２００７／０８４６７２ Ａ２、ＷＯ２００７／０４４６１６ Ａ２、ＷＯ２００５／００１０３８ Ａ２、ＵＳ２００７／１６６３０９ Ａ１、ＵＳ２００７／２５８９８７ Ａ１、ＷＯ２００４／０１０９５７ Ａ２、およびＵＳ２００５／００９７６９ Ａ１に記載された抗ＣＤ３０抗体が挙げられる。

いくつかの態様において、本開示によるＣＤ３０結合性ドメインは、抗ＣＤ３０抗体のＣＤＲを含む。いくつかの態様において、本開示によるＣＤ３０結合性ドメインは、抗ＣＤ３０抗体のＶＨおよびＶＬ領域を含む。いくつかの態様において、本開示によるＣＤ３０結合性ドメインは、抗ＣＤ３０抗体のＶＨおよびＶＬ領域を含むｓｃＦｖを含む。

Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版 Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ． １９６：９０１～９１７（１９８７）に記載されたもの、およびＲｅｔｔｅｒら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．（２００５） ３３（ｓｕｐｐｌ １）：Ｄ６７１～Ｄ６７４に記載されているようなＶＢＡＳＥ２など、抗体ＣＤＲおよびＦＲを定義するためのいくつかの異なる慣習がある。本明細書に記載された抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域のＣＤＲおよびＦＲは、ＶＢＡＳＥ２に従って定義される。

いくつかの態様において、本開示の抗原結合性ドメインは以下を含む：
以下のＣＤＲを組み入れるＶＨ：
配列番号８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数における１個もしくは２個もしくは３個のアミノ酸が別のアミノ酸と置換されている、そのバリアント；
および
以下のＣＤＲを組み入れるＶＬ：
配列番号１１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号１２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号１３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数における１個もしくは２個もしくは３個のアミノ酸が別のアミノ酸と置換されている、そのバリアント。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは以下を含む：
配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％配列同一性（例えば、少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなるＶＨ；
および
配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％配列同一性（例えば、少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなるＶＬ。

いくつかの態様において、ＣＤ３０結合性ドメインは、本明細書に記載されているようなＶＨ配列およびＶＬ配列を含む一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含み得、またはそれからなり得る。ＶＨ配列およびＶＬ配列は、共有結合的に連結され得る。いくつかの態様において、ＶＨおよびＶＬ配列は、可動性リンカー配列、例えば、本明細書に記載されているような可動性リンカー配列により連結される。可動性リンカー配列は、ＶＨ配列の末端およびＶＬ配列の末端に繋がれ、それにより、ＶＨ配列とＶＬ配列を連結し得る。いくつかの態様において、ＶＨおよびＶＬは、配列番号１６または１７のアミノ酸配列を含むまたはそれからなるリンカー配列を介して、繋ぎ合わされる。

いくつかの態様において、ＣＤ３０結合性ドメインは、配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ＣＤ３０結合性ドメインは、ＣＤ３０と、例えばＣＤ３０の細胞外ドメインにおいて、結合する能力がある。いくつかの態様において、ＣＤ３０結合性ドメインは、抗体ＨＲＳ３により結合されるＣＤ３０のエピトープと、例えば、配列番号１９に示された、配列番号１に従ってナンバリングされたヒトＣＤ３０のアミノ酸位置１８５～３３５の領域内で、結合する能力がある（全体として参照により本明細書に組み入れられた、Ｓｃｈｌａｐｓｃｈｙら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ（２００４） １７（１２）：８４７～８６０）。

いくつかの態様において、ＣＤ３０結合性ドメインは、本明細書に記載されているようなＶＨ配列およびＶＬ配列を含む一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含み得、またはそれからなり得る。ＶＨ配列およびＶＬ配列は、共有結合的に連結され得る。いくつかの態様において、ＶＨおよびＶＬ配列は、可動性リンカー配列、例えば、本明細書に記載されているような可動性リンカー配列により連結される。可動性リンカー配列は、ＶＨ配列の末端およびＶＬ配列の末端に繋がれ、それにより、ＶＨ配列とＶＬ配列を連結し得る。いくつかの態様において、ＶＨおよびＶＬは、配列番号１６のアミノ酸配列を含むまたはそれからなるリンカー配列を介して、繋ぎ合わされる。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメイン（および、それに従って、ＣＡＲ）は、多重特異性である。「多重特異性の」とは、抗原結合性ドメインが、１つより多い標的との特異的結合を示すことを意味する。いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、二重特異性抗原結合性ドメインである。いくつかの態様において、抗原結合性分子は、少なくとも２つの異なる抗原結合性部分（すなわち、例えば非同一の複数のＶＨおよび非同一の複数のＶＬを含む、少なくとも２つの抗原結合性部分）を含む。多重特異性抗原結合性ドメインの個々の抗原結合部分は、例えばリンカー配列を介して、接続され得る。

いくつかの態様において、抗原結合性ドメインは、少なくとも２つの非同一の標的抗原と結合し、それゆえに、少なくとも二重特異性である。用語「二重特異性の」は、抗原結合性ドメインが、少なくとも２つの別個の抗原決定基と特異的に結合することができる。いくつかの態様において、多重特異性抗原結合性ドメイン／ＣＡＲについての標的抗原の少なくとも１つはＣＤ３０である。

本開示による抗原結合性ドメイン（例えば、多重特異性抗原結合性ドメイン）が、その抗原結合性ドメインが特異的である（１つまたは複数の）標的と結合する能力がある抗原結合性部分を含むことは理解されているだろう。例えば、ＣＤ３０、およびＣＤ３０以外の抗原と結合する能力がある抗原結合性ドメインは、（ｉ）ＣＤ３０と結合する能力がある抗原結合性部分、および（ｉｉ）ＣＤ３０以外の標的抗原と結合する能力がある抗原結合性部分を含み得る。

ＣＤ３０以外の標的抗原は、任意の標的抗原であり得る。いくつかの態様において、標的抗原は、その発現／活性または上方制御された発現／活性が疾患または障害（例えば、癌、感染性疾患、または自己免疫疾患）と正の関連を示す、抗原である。標的抗原は、好ましくは、標的抗原を発現する細胞の細胞表面に発現している。ＣＡＲが、ＣＡＲを発現する細胞のエフェクター活性を、標的抗原（それに対して特異的な抗原結合性ドメインをＣＡＲが含む）を発現する細胞／組織に向けることは理解されているだろう。

いくつかの態様において、標的抗原は、癌細胞抗原であり得る。癌細胞抗原は、癌細胞によって発現または過剰発現する抗原である。癌細胞抗原は、任意のペプチド／ポリペプチド、糖タンパク質、リポタンパク質、グリカン、糖脂質、脂質、またはその断片であり得る。癌細胞抗原の発現は、癌と関連づけられ得る。癌細胞抗原は、癌細胞によって異常に発現し得（例えば、癌細胞抗原は、異常な局在性で発現し得る）、または癌細胞によって異常な構造で発現し得る。癌細胞抗原は、免疫応答を誘発する能力があり得る。いくつかの態様において、その抗原は、癌細胞の細胞表面に発現している（すなわち、癌細胞抗原は癌細胞表面抗原である）。いくつかの態様において、本明細書に記載された抗原結合性分子により結合される抗原の部分は、癌細胞の外面上にディスプレイされる（すなわち、細胞外である）。癌細胞抗原は、癌関連抗原であり得る。いくつかの態様において、癌細胞抗原は、発現が癌の症状の発生、進行、または重症度と関連する抗原である。癌関連抗原は、癌の原因または病理と関連し得、または癌の結果として、異常に発現し得る。いくつかの態様において、癌細胞抗原は、その発現が、例えば匹敵する非癌性細胞（例えば、同じ組織／細胞型に由来した非癌性細胞）による発現のレベルと比較して、癌の細胞によって（例えば、ＲＮＡおよび／またはタンパク質レベルにおいて）上方制御されている抗原である。いくつかの態様において、癌関連抗原は、好ましくは、癌性細胞により発現し得、かつ匹敵する非癌性細胞（例えば、同じ組織／細胞型に由来した非癌性細胞）によって発現し得ない。いくつかの態様において、癌関連抗原は、変異型癌遺伝子または変異型腫瘍抑制遺伝子の産物であり得る。いくつかの態様において、癌関連抗原は、過剰発現した細胞性タンパク質、オンコウイルスにより産生された癌抗原、癌胎児性抗原、または細胞表面糖脂質もしくは糖タンパク質の産物であり得る。

癌細胞抗原は、Ｋｕｆｅ ＤＷ、Ｐｏｌｌｏｃｋ ＲＥ、Ｗｅｉｃｈｓｅｌｂａｕｍ ＲＲら編、Ｈｏｌｌａｎｄ－Ｆｒｅｉ Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第６版、Ｈａｍｉｌｔｏｎ（ＯＮ）：ＢＣ Ｄｅｃｋｅｒ；２００３における、Ｚａｒｏｕｒ ＨＭ、ＤｅＬｅｏ Ａ、Ｆｉｎｎ ＯＪら、Ｃａｔｅｇｏｒｉｅｓ ｏｆ Ｔｕｍｏｒ Ａｎｔｉｇｅｎｓにより概説されている。癌細胞抗原には、癌胎児性抗原：ＣＥＡ、未成熟ラミニン受容体、ＴＡＧ－７２；ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７などのオンコウイルス抗原；過剰発現タンパク質：ＢＩＮＧ－４、カルシウム活性化塩素イオンチャネル２、サイクリンＢ１、９Ｄ７、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、テロメラーゼ、メゾテリン、ＳＡＰ－１、サバイビン；癌／精巣抗原：ＢＡＧＥ、ＣＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＭＡＧＥ、ＳＡＧＥ、ＸＡＧＥ、ＣＴ９、ＣＴ１０、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＳＳＸ－２；系統制限抗原（ｌｉｎｅａｇｅ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎｓ）：ＭＡＲＴ１、Ｇｐ１００、チロシナーゼ、ＴＲＰ－１／２、ＭＣ１Ｒ、前立腺特異的抗原；変異型抗原：β－カテニン、ＢＲＣＡ１／２、ＣＤＫ４、ＣＭＬ６６、フィブロネクチン、ＭＡＲＴ－２、ｐ５３、Ｒａｓ、ＴＧＦ－βＲＩＩ；翻訳後変化抗原：ＭＵＣ１、イディオタイプ抗原：Ｉｇ、ＴＣＲが挙げられる。他の癌細胞抗原には、熱ショックタンパク質７０（ＨＳＰ７０）、熱ショックタンパク質９０（ＨＳＰ９０）、グルコース制御タンパク質７８（ＧＲＰ７８）、ビメンチン、ヌクレオリン、胎児性膵腺房タンパク質（ＦＡＰＰ）、アルカリホスファターゼ胎盤様２（ＡＬＰＰＬ－２）、ｓｉｇｌｅｃ－５、ストレス誘導性リン酸化タンパク質１（ＳＴＩＰ１）、タンパク質チロシンキナーゼ７（ＰＴＫ７）、およびサイクロフィリンＢが挙げられる。

いくつかの態様において、癌細胞抗原は、全体として参照により本明細書に組み入れられている、ＺｈａｏおよびＣａｏ、Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１９；１０：２２５０に記載された癌細胞抗原である。いくつかの態様において、癌細胞抗原は、ＣＤ３０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＲＯＲ１Ｒ、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ３８、ＢＣＭＡ、メゾテリン、ＥＧＦＲ、ＧＰＣ３、ＭＵＣ１、ＨＥＲ２、ＧＤ２、ＣＥＡ、ＥｐＣＡＭ、ＬｅＹ、およびＰＳＣＡから選択される。

いくつかの態様において、癌細胞抗原は、血液悪性腫瘍の細胞によって発現した抗原である。いくつかの態様において、癌細胞抗原は、ＣＤ３０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＲＯＲ１Ｒ、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ３８、およびＢＣＭＡから選択される。

いくつかの態様において、癌細胞抗原は、固形腫瘍によって発現した抗原である。いくつかの態様において、癌細胞抗原は、メゾテリン、ＥＧＦＲ、ＧＰＣ３、ＭＵＣ１、ＨＥＲ２、ＧＤ２、ＣＥＡ、ＥｐＣＡＭ、ＬｅＹ、およびＰＳＣＡから選択される。

膜貫通ドメイン
本開示のＣＡＲは、膜貫通ドメインを含む。膜貫通ドメインは、生体膜、例えば細胞膜において熱力学的に安定であるアミノ酸の配列により形成される任意の３次元構造を指す。本開示に関連して、膜貫通ドメインは、ＣＡＲを発現する細胞の細胞膜にまたがるアミノ酸配列であり得る。

膜貫通ドメインは、疎水性アルファ－ヘリックスまたはベータ－バレルを形成するアミノ酸の配列を含み得、またはそれからなり得る。本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインのアミノ酸配列は、膜貫通ドメインを含むタンパク質の膜貫通ドメインのアミノ酸配列であり得、またはそれに由来し得る。膜貫通ドメインは、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ、ＴｒＥＭＢＬ、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄａｔａ Ｂａｎｋ、Ｅｎｓｅｍｂｌ、およびＩｎｔｅｒＰｒｏなどのデータベースに記録され、ならびに／または、例えばＴＭＨＭＭ（Ｋｒｏｇｈら、２００１ Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ３０５：５６７～５８０）などのアミノ酸配列分析ツールを用いて、同定／予測することができる。

いくつかの態様において、本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインのアミノ酸配列は、細胞表面に発現したタンパク質の膜貫通ドメインのアミノ酸配列であり得、またはそれに由来し得る。いくつかの態様において、細胞表面に発現したタンパク質は、受容体またはリガンド、例えば、免疫受容体またはリガンドである。いくつかの態様において、膜貫通ドメインのアミノ酸配列は、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、ＣＤ８６、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ２８、ＣＤ８０、ＭＨＣクラスＩα、ＭＨＣクラスＩＩα、ＭＨＣクラスＩＩβ、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３－ζ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、４－１ＢＢ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＴＩＭ－３、ガレクチン９、ＬＡＧ３、ＣＤ２７、ＣＤ７０、ＬＩＧＨＴ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－４、ＴＩＭ－１、ＩＣＡＭ１、ＬＦＡ－１、ＬＦＡ－３、ＣＤ２、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＬＩＬＲＢ４、ＬＩＬＲＢ２、ＶＴＣＮ１、ＣＤ２、ＣＤ４８、２Ｂ４、ＳＬＡＭ、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、ＤＲ３、ＴＬ１Ａ、ＣＤ２２６、ＣＤ１５５、ＣＤ１１２、およびＣＤ２７６のうちの１つの膜貫通ドメインのアミノ酸配列であり得、またはそれに由来し得る。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８、ＣＤ３－ζ、ＣＤ８α、ＣＤ８β、またはＣＤ４の膜貫通ドメインのアミノ酸配列であり、またはそれに由来する。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８の膜貫通ドメインのアミノ酸配列であり、またはそれに由来する。

いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

シグナル伝達ドメイン
本開示のキメラ抗原受容体は、シグナル伝達ドメインを含む。シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲを発現する細胞において細胞内シグナル伝達を惹起するための配列を提供する。

シグナル伝達ドメインは、ＩＴＡＭ含有配列を含む。ＩＴＡＭ含有配列は、１つまたは複数の免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含む。ＩＴＡＭは、アミノ酸配列ＹＸＸＬ／Ｉ（配列番号２３）（式中、「Ｘ」は任意のアミノ酸を表示する）を含む。ＩＴＡＭ含有タンパク質において、配列番号２３による配列は、６～８アミノ酸によって分離されている場合が多い；ＹＸＸＬ／Ｉ（Ｘ）_６－８ＹＸＸＬ／Ｉ（配列番号２４）。ＩＴＡＭのチロシン残基にチロシンキナーゼによりリン酸基が付加された時、シグナル伝達カスケードが細胞内で開始される。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２３または配列番号２４によるアミノ酸配列の１つまたは複数のコピーを含む。いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２３によるアミノ酸配列の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのコピーを含む。いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２４によるアミノ酸配列の少なくとも１つ、２つ、または３つのコピーを含む。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、ＩＴＡＭ含有アミノ酸配列を有するタンパク質のＩＴＡＭ含有配列のアミノ酸配列でありまたはそれに由来する、アミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ζ、ＦｃγＲＩ、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ７９α、ＣＤ７９β、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＣ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＶ、またはＤＡＰ１２のうちの１つの細胞内ドメインのアミノ酸配列でありまたはそれに由来する、アミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ζの細胞内ドメインでありまたはそれに由来する、アミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含みまたはそれからなる、アミノ酸配列を含む。

シグナル伝達ドメインは、さらに１つまたは複数の共刺激配列を含む。共刺激配列は、本開示のＣＡＲを発現する細胞の共刺激を与えるアミノ酸配列である。共刺激は、標的抗原との結合により、ＣＡＲ発現細胞の増殖および生存を促進し、また、ＣＡＲ発現細胞によるサイトカイン産生、分化、細胞傷害性機能、およびメモリ形成を促進し得る。Ｔ細胞共刺激の分子機構は、ＣｈｅｎおよびＦｌｉｅｓ、２０１３ Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３（４）：２２７～２４２に概説されている。

共刺激配列は、共刺激タンパク質のアミノ酸配列であり得、またはそれに由来し得る。いくつかの態様において、共刺激配列は、共刺激タンパク質の細胞内ドメインのアミノ酸配列でありまたはそれに由来する、アミノ酸配列である。

ＣＡＲの標的抗原との結合により、共刺激配列は、その共刺激配列がその同族リガンドによるライゲーションの際に由来する共刺激タンパク質によって与えられる種類の共刺激を、ＣＡＲを発現する細胞へ与える。例として、ＣＤ２８に由来した共刺激配列を含むシグナル伝達ドメインを含むＣＡＲの場合、標的抗原との結合が、ＣＤ８０および／またはＣＤ８６のＣＤ２８との結合によりトリガーされるようなシグナル伝達を、ＣＡＲを発現する細胞においてトリガーする。したがって、共刺激配列は、その共刺激配列が由来している共刺激タンパク質の共刺激シグナルを送達する能力がある。

いくつかの態様において、共刺激タンパク質は、Ｂ７－ＣＤ２８スーパーファミリーのメンバー（例えば、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ）、またはＴＮＦ受容体スーパーファミリーのメンバー（例えば、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＨＶＥＭ）であり得る。いくつかの態様において、共刺激配列は、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２７、ＯＸ４０、ＨＶＥＭ、ＣＤ２、ＳＬＡＭ、ＴＩＭ－１、ＣＤ３０、ＧＩＴＲ、ＤＲ３、ＣＤ２２６、およびＬＩＧＨＴのうちの１つの細胞内ドメインであり、またはそれに由来する。いくつかの態様において、共刺激配列は、ＣＤ２８の細胞内ドメインであり、またはそれに由来する。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、１つより多い非重複共刺激配列を含む。いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの共刺激配列を含む。複数の共刺激配列はタンデムで提供され得る。

所定のアミノ酸配列が、所定の共刺激タンパク質により媒介されるシグナル伝達を惹起する能力があるかどうかは、例えば共刺激タンパク質により媒介されるシグナル伝達の相関物（例えば、共刺激タンパク質により媒介されるシグナル伝達の結果として、発現／活性が上方制御または下方制御される因子の発現／活性）を分析することにより、調べることができる。

共刺激タンパク質は、細胞成長、エフェクター機能、および生存を促進する遺伝子の発現を、いくつかの伝達経路を通して上方制御する。例えば、ＣＤ２８およびＩＣＯＳは、細胞成長、エフェクター機能、および生存を促進する遺伝子の発現をＮＦ－κＢ、ｍＴＯＲ、ＮＦＡＴ、およびＡＰ１／２を通して上方制御するように、ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）およびＡＫＴを通してシグナル伝達する。ＣＤ２８はまた、ＡＰ１／２を、ＣＤＣ４２／ＲＡＣ１を介して、およびＥＲＫ１／２を、ＲＡＳを介して、活性化し、ＩＣＯＳはＣ－ＭＡＦを活性化する。４－１ＢＢ、ＯＸ４０、およびＣＤ２７は、ＴＮＦ受容体関連因子（ＴＲＡＦ）をリクルートし、ＭＡＰＫ経路、加えてＰＩ３Ｋを通して、シグナル伝達する。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８でありまたはそれに由来する、共刺激配列を含む。
いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含みまたはそれからなる、共刺激配列を含む。

Ｋｏｆｌｅｒら、Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．（２０１１） １９：７６０～７６７は、ｌｃｋキナーゼ結合部位が、ＣＡＲ－Ｔ細胞活性の制御性Ｔ細胞媒介性抑制を最小限にするために、ＣＡＲライゲーション時のＩＬ－２産生の誘導を低下させるために、変異している、バリアントＣＤ２８細胞内ドメインを記載する。バリアントＣＤ２８細胞内ドメインのアミノ酸配列は配列番号２７に示されている。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含みまたはそれからなる、共刺激配列を含む。

いくつかの態様において、シグナル伝達ドメインは、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含みまたはそれからなる、共刺激配列を含む。

ヒンジ領域
ＣＡＲはさらに、ヒンジ領域を含み得る。ヒンジ領域は、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に提供され得る。ヒンジ領域はまた、スペーサー領域とも呼ばれ得る。ヒンジ領域は、ＣＡＲの抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの可動性連結を提供するアミノ酸配列である。

ヒンジ領域の存在、非存在、および長さは、ＣＡＲ機能に影響することが示されている（例えば、Ｄｏｔｔｉら、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ（２０１４） ２５７（１）上記に概説されている）。

いくつかの態様において、ＣＡＲは、ヒトＩｇＧ１のＣＨ１－ＣＨ２ヒンジ領域でありもしくはそれに由来するアミノ酸配列を含み、もしくはそれからなるヒンジ領域、例えば、ＷＯ２０１２／０３１７４４ Ａ１に記載されているようなＣＤ８αに由来したヒンジ領域、または例えば、ＷＯ２０１１／０４１０９３ Ａ１に記載されているようなＣＤ２８に由来したヒンジ領域を含む。いくつかの態様において、ＣＡＲは、ヒトＩｇＧ１のＣＨ１－ＣＨ２ヒンジ領域に由来したヒンジ領域を含む。

いくつかの態様において、ヒンジ領域は、配列番号２９または３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ＣＡＲは、ヒトＩｇＧ１のＣＨ２－ＣＨ３領域（すなわち、Ｆｃ領域）でありもしくはそれに由来するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる、ヒンジ領域を含む。

いくつかの態様において、ヒンジ領域は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１０） １７：１２０６～１２１３は、単球およびＮＫ細胞などのＦｃγＲ発現細胞の活性化を低下させるためのバリアントＣＨ２－ＣＨ３領域を記載する。バリアントＣＨ２－ＣＨ３領域のアミノ酸配列は、配列番号３２に示されている。

いくつかの態様において、ヒンジ領域は、配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ヒンジ領域は、ヒトＩｇＧ１のＣＨ１－ＣＨ２ヒンジ領域でありもしくはそれに由来するアミノ酸配列、およびヒトＩｇＧ１のＣＨ２－ＣＨ３領域（すなわち、Ｆｃ領域）でありもしくはそれに由来するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ヒンジ領域は、配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

追加の配列
ＣＡＲは追加として、シグナルペプチド（リーダー配列またはシグナル配列としても知られている）を含み得る。シグナルペプチドは、通常、単一アルファ－ヘリックスを形成する、５～３０個の疎水性アミノ酸の配列からなる。分泌性タンパク質および細胞表面に発現したタンパク質は、シグナルペプチドを含む場合が多い。シグナルペプチドは、多くのタンパク質について知られており、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＥｎｓｅｍｂｌなどのデータベースに記録されており、ならびに／または、例えばＳｉｇｎａｌＰ（Ｐｅｔｅｒｓｅｎら、２０１１ Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ ８：７８５～７８６）もしくはＳｉｇｎａｌ－ＢＬＡＳＴ（ＦｒａｎｋおよびＳｉｐｐｌ、２００８ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２４：２１７２～２１７６）などのアミノ酸配列分析ツールを用いて、同定／予測され得る。

シグナルペプチドは、ＣＡＲのＮ末端に存在し得、新しく合成されたＣＡＲに存在し得る。シグナルペプチドは、ＣＡＲの細胞表面への効率的な輸送を与える。シグナルペプチドは、切断により除去され、したがって、細胞表面により発現した成熟ＣＡＲにおいては含まれない。

いくつかの態様において、シグナルペプチドは、配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ＣＡＲは、異なるドメイン（すなわち、抗原結合性ドメイン、ヒンジ領域、膜貫通ドメイン、シグナル伝達ドメイン）間に１つまたは複数のリンカー配列を含む。いくつかの態様において、ＣＡＲは、ドメインの部分配列間（例えば、抗原結合性ドメインのＶＨとＶＬの間）に１つまたは複数のリンカー配列を含む。

リンカー配列は、当業者に知られており、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、Ｃｈｅｎら、Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ（２０１３） ６５（１０）：１３５７～１３６９に記載されている。いくつかの態様において、リンカー配列は、可動性リンカー配列であり得る。可動性リンカー配列は、リンカー配列により連結されるアミノ酸配列の相対運動を可能にする。可動性リンカーは、当業者に知られており、いくつかが、Ｃｈｅｎら、Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ（２０１３） ６５（１０）：１３５７～１３６９において同定されている。可動性リンカー配列は、グリシンおよび／またはセリン残基の高い割合を含む場合が多い。いくつかの態様において、リンカー配列は、少なくとも１個のグリシン残基および／または少なくとも１個のセリン残基を含む。いくつかの態様において、リンカー配列は、グリシンおよびセリン残基からなる。いくつかの態様において、リンカー配列は、１～２、１～３、１～４、１～５、１～１０、１～２０、１～３０、１～４０、または１～５０アミノ酸の長さを有する。

いくつかの態様において、リンカー配列は、配列番号１６に示されたアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。いくつかの態様において、リンカー配列は、配列番号１６に示されたアミノ酸配列の１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのタンデムコピーを含み、またはそれからなる。

ＣＡＲは、追加として、さらなるアミノ酸またはアミノ酸の配列を含み得る。例えば、抗原結合性分子およびポリペプチドは、発現、フォールディング、輸送、プロセシング、精製、または検出を促進するためのアミノ酸配列を含み得る。例えば、ＣＡＲは、Ｈｉｓ（例えば、６×Ｈｉｓ）、Ｍｙｃ、ＧＳＴ、ＭＢＰ、ＦＬＡＧ、ＨＡ、Ｅ、またはビオチンタグをコードする配列を、任意でＮ末端またはＣ末端に、含み得る。いくつかの態様において、ＣＡＲは、検出可能な部分、例えば、蛍光、発光、免疫検出可能な、放射性、化学的、核酸、または酵素の標識を含む。

特定の例示的なＣＡＲ
本開示のいくつかの態様において、ＣＡＲは、以下を含み、またはそれからなる：ヒトＩｇＧ１のＣＨ２－ＣＨ３に由来したスペーサーおよびヒンジドメインに接続された、抗ＣＤ３０ ＨＲＳ３ ｓｃＦｖドメインの細胞外部分、ＣＤ２８の膜貫通および細胞内ドメイン、ならびにＣＤ３ζの細胞内ドメイン。

本開示のいくつかの態様において、ＣＡＲは、以下を含み、またはそれからなる：
配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる抗原結合性ドメイン；
配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなるヒンジ領域；
配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる膜貫通ドメイン；および
配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなるシグナル伝達ドメイン。

本開示のいくつかの態様において、ＣＡＲは、配列番号３５または３６のアミノ酸配列と少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またはそれからなる。

いくつかの態様において、ＣＡＲは、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（１９９８） ５８（６）：１１１６～９、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ（２０００） ７：１０６７～１０７５、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．（１９９９） ２２（６）：４７３～８０、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２００１） ６１：１９７６～１９８２、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００１） １６７：６１２３～６１３１、Ｓａｖｏｌｄｏら、Ｂｌｏｏｄ（２００７） １１０（７）：２６２０～３０、Ｋｏｅｈｌｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２００７） ６７（５）：２２６５～２２７３、Ｄｉ Ｓｔａｓｉら、Ｂｌｏｏｄ（２００９） １１３（２５）：６３９２～４０２、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１０） １７：１２０６～１２１３、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１１） １８：６２～７２、Ｋｏｆｌｅｒら、Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．（２０１１） １９（４）：７６０～７６７、Ｇｉｌｈａｍ、Ａｂｋｅｎ、およびＰｕｌｅ、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．（２０１２） １８（７）：３７７～３８４、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１３） ２０：１７７～１８６、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．（２０１６） ２４（８）：１４２３～１４３４、Ｒａｍｏｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１、ＷＯ２０１５／０２８４４４ Ａ１、またはＷＯ２０１６／００８９７３ Ａ１（それらの全部は、全体として参照により本明細書に組み入れられている）に記載されたＣＤ３０特異的ＣＡＲの態様から選択される。

ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞
本開示の側面は、ＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む／発現する免疫細胞、特にＣＤ特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞に関する。

細胞が単数形（すなわち、「１つの／その細胞」）で本明細書に言及される場合、そのような細胞の複数／集団もまた企図されることは理解されているだろう。
ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、本開示によるＣＡＲを発現し得、または含み得る。ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、本開示によるＣＡＲをコードする核酸を含み得、または発現し得る。ＣＡＲ発現細胞は、それが発現するＣＡＲを含むことは、理解されているだろう。ＣＡＲをコードする核酸を発現する細胞もまた、その核酸によってコードされるＣＡＲを発現しかつ含むこともまた理解されているだろう。

Ｔ細胞は、例えば、ＣＤ３ポリペプチド（例えば、ＣＤ３γ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、またはＣＤ３δ）、ＴＣＲポリペプチド（ＴＣＲαまたはＴＣＲβ）、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４、またはＣＤ８を発現し得る。いくつかの態様において、Ｔ細胞はＣＤ３＋ Ｔ細胞である。いくつかの態様において、Ｔ細胞は、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋ Ｔ細胞である。いくつかの態様において、Ｔ細胞は、ＣＤ３＋、ＣＤ８＋ Ｔ細胞である。いくつかの態様において、Ｔ細胞は、Ｔヘルパー細胞（Ｔ_Ｈ細胞）である。いくつかの態様において、Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ））である。

ＣＡＲ発現Ｔ細胞を作製するための方法は、当業者によく知られている。それらは一般的に、ＣＡＲを発現し／含むようにＴ細胞を改変すること、例えばＣＡＲをコードする核酸をＴ細胞へ導入することを含む。

Ｔ細胞は、当業者によく知られている方法により、本明細書に記載されたＣＡＲ、またはそのＣＡＲをコードする核酸を含み／発現するように改変され得る。方法は、一般的に、移入される核酸の永久的（安定的）または一過性発現のための核酸移入を含む。

任意の適切な遺伝子工学プラットフォームは、本開示による細胞を改変するために用いられ得る。細胞を改変するための適切な方法は、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられたＭａｕｓら、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２０１４） ３２：１８９～２２５に記載されているような、ガンマレトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ＤＮＡトランスフェクション、トランスポゾンに基づいた遺伝子送達、およびＲＮＡトランスフェクションなどの遺伝子工学プラットフォームの使用を含む。

方法にはまた、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、ＷａｎｇおよびＲｉｖｉｅｒｅ Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌｙｔｉｃｓ（２０１６） ３：１６０１５に記載されたものが挙げられる。核酸／ベクターを細胞へ導入するための適切な方法には、形質導入、トランスフェクション、およびエレクトロポレーションが挙げられる。

インビトロ／エクスビボでＣＡＲ発現Ｔ細胞の集団を生成／拡大するための方法は当業者によく知られている。適切な培養条件（すなわち、細胞培地、添加物、刺激、温度、気体雰囲気）、細胞数、培養期間、およびＣＡＲをコードする核酸を細胞へ導入するための方法は、例えば、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００１） １６７：６１２３～６１３１、Ｒａｍｏｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１、およびＷＯ２０１５／０２８４４４ Ａ１（それらの全部は、全体として参照により本明細書に組み入れられている）への参照により、決定することができる。

好都合には、本開示による細胞の培養は、５％ＣＯ_２を含有する加湿された大気中、３７℃で維持され得る。細胞培養の細胞は、当業者により容易に決定することができるように、樹立されおよび／または、任意の適切な密度で維持され得る。

培養は、その培養の体積に適した任意の容器において、例えば、細胞培養プレートのウェル、細胞培養フラスコ、バイオリアクターなどにおいて、実施することができる。いくつかの態様において、細胞は、バイオリアクター、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、ＳｏｍｅｒｖｉｌｌｅおよびＤｕｄｌｅｙ、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１２） １（８）：１４３５～１４３７に記載されたバイオリアクターにおいて培養される。いくつかの態様において、細胞は、ＧＲｅｘ細胞培養容器、例えば、ＧＲｅｘフラスコまたはＧＲｅｘ １００バイオリアクターにおいて培養される。

Ｔ細胞は、ＣＡＲをコードする核酸の導入前に活性化され得る。例えば、ＰＢＭＣ集団内のＴ細胞は、ＩＬ－２の存在下で、アゴニスト抗ＣＤ３抗体およびアゴニスト抗ＣＤ２８抗体でのインビトロの刺激により、非特異的に活性化され得る。

核酸／ベクターを細胞へ導入することは、形質導入、例えば、レトロウイルス形質導入を含み得る。したがって、いくつかの態様において、前記核酸はウイルスベクターであり／ウイルスベクターに含まれ、または前記ベクターはウイルスベクターである。免疫細胞のウイルスベクターでの形質導入は、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、ＳｉｍｍｏｎｓおよびＡｌｂｅｒｏｌａ－Ｉｌａ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．（２０１６） １３２３：９９～１０８に記載されている。

形質導入の効率性を増強するために作用物質が用いられ得る。臭化ヘキサジメトリン（ポリブレン）は、ビリオンと、細胞表面上に発現したシアル酸残基との間の電荷反発を中和することを通して、形質導入を向上させるために一般的に用いられるカチオンポリマーである。形質導入を増強するために一般的に用いられる他の作用物質には、例えば、ＬｅｎｔｉＢＯＯＳＴ（Ｓｉｒｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）などのポロキサマーに基づいた作用物質、Ｒｅｔｒｏｎｅｃｔｉｎ（Ｔａｋａｒａ）、Ｖｅｃｔｏｆｕｓｉｎ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、ならびにまたＳｕｒｅＥＮＴＲＹ（Ｑｉａｇｅｎ）およびＶｉｒａＤｕｃｔｉｎ（Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌａｂｓ）が挙げられる。

いくつかの態様において、方法は、ＣＡＲをコードする核酸を導入することが望まれる細胞を、前記核酸を含むウイルスベクターを含む細胞培地の存在下で、遠心分離するステップ（当技術分野において「スピンフェクション」と呼ばれる）を含む。

いくつかの態様において、方法は、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、Ｋｏｈら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ － Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ（２０１３） ２、ｅ１１４に記載されているように、エレクトロポレーションにより、本開示による核酸またはベクターを導入するステップを含む。

方法は一般的に、ＣＡＲをコードする核酸を細胞へ導入するステップ、および前記核酸／ＣＡＲの前記細胞による発現に適した条件下で前記細胞を培養するステップを含む。いくつかの態様において、方法は、ＣＡＲをコードする核酸が導入されているＴ細胞を、それらの数を拡大するために、培養するステップを含む。いくつかの態様において、方法は、ＣＡＲをコードする核酸が導入されているＴ細胞を、ＩＬ－７および／またはＩＬ－１５（例えば、組換えＩＬ－７および／またはＩＬ－１５）の存在下で培養するステップを含む。

いくつかの態様において、方法は、ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、例えば他の細胞（例えば、前記ＣＡＲを発現しない細胞）から、精製／単離するステップをさらに含む。免疫細胞を異種性細胞集団から精製／単離するための方法は、当技術分野においてよく知られており、例えば、免疫細胞のマーカーの発現に基づいて細胞集団をソートするためのＦＡＣＳまたはＭＡＣＳに基づいた方法を用い得る。いくつかの態様において、方法は、特定の型の細胞、例えば、ＣＡＲ発現ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＡＲ発現ＣＴＬを精製／単離するステップを含む。

好ましい態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、以下のステップを含むプロセスによりＰＢＭＣ集団内のＴ細胞から作製し得る：アンタゴニスト抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体でＰＢＭＣを刺激するステップ、ＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードするウイルスベクター（例えば、ガンマウイルスベクター）で前記細胞を形質導入するステップ、ならびにその後、前記細胞を、ＩＬ－７およびＩＬ－１５の存在下で培養するステップ。

本開示によるＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、ＣＤ３０に応答して、またはＣＤ３０を含む／発現する細胞に応答して、Ｔ細胞のある特定の機能的性質を示し得る。いくつかの態様において、その性質は、エフェクターＴ細胞、例えば、細胞傷害性Ｔ細胞に関連した機能的性質である。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、以下の性質の１つまたは複数を示し得る：ＣＤ３０を含む／発現する細胞への細胞傷害性；ＣＤ３０での刺激に応答して、またはＣＤ３０を含む／発現する細胞への曝露に応答しての、増殖、ＩＦＮγ発現、ＣＤ１０７ａ発現、ＩＬ－２発現、ＴＮＦα発現、パーフォリン発現、グランザイム発現、グラニュリシン発現、および／またはＦＡＳリガンド（ＦＡＳＬ）発現；ＣＤ３０を発現する細胞を含む癌に対する抗癌活性（例えば、癌細胞への細胞傷害性、腫瘍成長阻害、転移の減少など）。

細胞増殖／集団拡大は、ある期間にわたって細胞分裂または細胞の数を分析することにより調べることができる。細胞分裂は、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられた、ＦｕｌｃｈｅｒおよびＷｏｎｇ、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ（１９９９） ７７（６）：５５９～５６４に記載されているように、^３Ｈ－チミジンの取込みのインビトロ分析によりまたはＣＦＳＥ希釈アッセイにより、分析することができる。増殖した細胞もまた、例えば、Ｂｕｃｋら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２００８年６月；４４（７）：９２７～９、ならびにＳａｌｉおよびＭｉｔｃｈｉｓｏｎ、ＰＮＡＳ ＵＳＡ ２００８年２月１９日；１０５（７）：２４１５～２４２０（どちらも、全体として参照により本明細書に組み入れられている）に記載されているような適切なアッセイによる、５－エチニル－２’－デオキシウリジン（ＥｄＵ）の取込みの分析により同定することができる。

本明細書で用いられる場合、「発現」は、遺伝子またはタンパク質の発現であり得る。遺伝子発現は、ＤＮＡのＲＮＡへの転写を包含し、当業者に知られた様々な手段、例えば、定量的リアルタイムＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）によりｍＲＮＡのレベルを測定することにより、またはレポーターに基づいた方法により、測定することができる。同様に、タンパク質発現は、当技術分野においてよく知られた様々な方法、例えば、抗体に基づいた方法、例えば、ウェスタンブロット、免疫組織化学法、免疫細胞化学法、フローサイトメトリー、ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴにより、またはレポーターに基づいた方法により、測定することができる。

細胞傷害性および細胞死滅は、例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられた、Ｚａｒｉｔｓｋａｙａら、Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｖａｃｃｉｎｅｓ（２０１１）、９（６）：６０１～６１６に概説された方法のいずれかを用いて、調べることができる。細胞傷害性／細胞死滅アッセイのインビトロアッセイの例には、^５１Ｃｒ放出アッセイ、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）放出アッセイ、３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）放出アッセイ、およびカルセイン－アセトキシメチル（カルセイン－ＡＭ）放出アッセイなどの放出アッセイが挙げられる。これらのアッセイは、溶解した細胞により放出される因子の検出に基づいて細胞死滅を測定する。所定の細胞型による細胞死滅は、例えば、試験細胞を前記所定の細胞型と共培養し、適切な時間後、生存する／死滅した試験細胞の数／割合を測定することにより、分析することができる。

細胞は、関連した癌の適切なインビトロアッセイまたはインビボモデルにおける分析により抗癌活性について評価され得る。
リンパ球除去化学療法
本開示の側面は、リンパ球除去化学療法を用いる。

本明細書で用いられる場合、「リンパ球除去化学療法」は、処置が投与される対象内でリンパ球（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、もしくは自然リンパ球（ＩＬＣ）、またはその前駆体）の除去を生じる化学療法剤での処置を指す。「リンパ球除去化学療法剤」は、リンパ球の除去を生じる化学療法剤を指す。

リンパ球除去化学療法、および養子細胞移入による処置の方法におけるそれの使用は、例えば、Ｋｌｅｂａｎｏｆｆら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００５） ２６（２）：１１１～７およびＭｕｒａｎｓｋｉら、Ｎａｔ Ｃｌｉｎ Ｐｒａｃｔ Ｏｎｃｏｌ．（２００６） （１２）：６６８～８１（どちらも、全体として参照により本明細書に組み入れられている）に記載されている。リンパ球除去化学療法の目的は、レシピエント対象の内因性リンパ球集団を除去することである。

免疫細胞の養子移入による疾患の処置の関連において、リンパ球除去化学療法は、典型的には、養子移入される細胞を受けるのにレシピエント対象を適当な状態にするために、養子細胞移入の前に投与される。リンパ球除去化学療法は、例えば免疫抑制サイトカインを発現する細胞の排除を通して、寛容な環境を生み出し、かつ養子移入されるリンパ球系細胞の増殖および活性に必要とされる「リンパ間隙」を生み出すことにより、養子移入された細胞の持続および活性を促進すると考えられる。

リンパ球除去化学療法に一般的に用いられる化学療法剤には、例えば、フルダラビン、ベンダムスチン（ｂｅｄａｍｕｓｔｉｎｅ）、シクロフォスファミド、およびペントスタチンが挙げられる。

本開示の側面および態様は特に、フルダラビンおよび／またはベンダムスチンの投与を含むリンパ球除去化学療法に関する。特定の態様において、本開示によるリンパ球除去化学療法は、フルダラビンおよびベンダムスチンの投与を含む。

フルダラビンは、リボヌクレオチドレダクターゼおよびＤＮＡポリメラーゼに干渉することによりＤＮＡ合成を阻害するプリン類似体である。それは、白血病（特に、慢性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病）およびリンパ腫（特に、非ホジキンリンパ腫）の処置のための化学療法剤として用いられる場合が多い。フルダラビンは、静脈内または経口的に投与され得る。

ベンダムスチンは、ＤＮＡ塩基間に鎖内および鎖間の架橋を引き起こすアルキル化剤である。それは、慢性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、および非ホジキンリンパ腫の処置のための化学療法剤として用いられる場合が多い。ベンダムスチンは、典型的には、静脈内に投与される。

処置の方法
本開示は、ＣＤ３０陽性癌の処置のための方法、そのような方法における使用のための物品、およびそのような方法における使用のための薬剤の製造のための物品の使用を提供する。

方法は、一般的に、ＣＤ３０陽性癌を有する対象にリンパ球除去化学療法を投与するステップ、および引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む。

具体的には、本開示は、以下のステップを含む、対象においてＣＤ３０陽性癌を処置する方法を提供する：（ｉ）リンパ球除去化学療法を前記対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞（例えば、そのような細胞の集団）であって、前記方法が、（ｉ）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を提供する。本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための薬剤の製造におけるＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞（例えば、そのような細胞の集団）の使用であって、前記方法が、（ｉ）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、使用を提供する。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための、リンパ球除去化学療法剤（例えば、フルダラビンおよび／またはベンダムスチン）であって、前記方法が、ｉ）（例えば、フルダラビンおよび／またはベンダムスチンを投与することを含む）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、リンパ球除去化学療法剤を提供する。本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための薬剤の製造におけるリンパ球除去化学療法剤（例えば、フルダラビンおよび／またはベンダムスチン）の使用であって、前記方法が、（ｉ）（例えば、フルダラビンおよび／またはベンダムスチンを投与することを含む）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、使用を提供する。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のためのフルダラビンであって、前記方法が、（ｉ）フルダラビンを投与することを含むリンパ球除去化学療法（例えば、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法）を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、フルダラビンを提供する。本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための薬剤の製造におけるフルダラビンの使用であって、前記方法が、（ｉ）フルダラビンを投与することを含むリンパ球除去化学療法（例えば、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法）を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、フルダラビンの使用を提供する。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のためのベンダムスチンであって、前記方法が、（ｉ）ベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法（例えば、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法）を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、ベンダムスチンを提供する。本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための薬剤の製造におけるベンダムスチンの使用であって、前記方法が、（ｉ）ベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法（例えば、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法）を対象に投与するステップ、および（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、ベンダムスチンの使用を提供する。

本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のためのフルダラビンおよびベンダムスチンの組合せ（例えば、フルダラビンおよびベンダムスチンを含む薬学的組成物または組合せ）であって、前記方法が、（ｉ）フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、ならびに（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、フルダラビンおよびベンダムスチンの組合せを提供する。本開示はまた、ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための薬剤の製造におけるフルダラビンおよびベンダムスチンの組合せ（例えば、フルダラビンおよびベンダムスチンを含む薬学的組成物または組合せ）の使用であって、前記方法が、（ｉ）フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含むリンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、ならびに（ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップを含む、フルダラビンおよびベンダムスチンの組合せの使用を提供する。

本開示の方法による細胞および化学療法剤の投与は、好ましくは、「治療的有効」量であり、これは、対象に治療効果を示すのに十分である。
実際の、投与される量ならびに投与の速度およびタイムコースは、処置されるべき癌の性質および重症度ならびに作用物質の性質に依存する。処置の処方、例えば、投薬量の決定などは、一般開業医および他の医師の責任の範囲内であり、典型的には、処置されるべき癌、個々の対象の状態、送達の部位、投与方法、および医師に知られた他の因子を考慮する。上記で言及された技術およびプロトコールの例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第２０版、２０００、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ出版に見出すことができる。

本開示による投与について、細胞および化学療法剤は、好ましくは、当業者によく知られた薬学的に許容される成分を含む薬剤または薬学的組成物として製剤化され、その薬学的に許容される成分には、薬学的に許容される担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、増量剤、バッファー、保存剤、抗酸化剤、滑沢剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（例えば、湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、香味剤、および甘味剤が挙げられるが、それらに限定されない。

本明細書で用いられる場合、用語「薬学的に許容される」は、健全な医学的判断の範囲内で、合理的なベネフィット／リスク比に見合った、過剰な毒性、刺激作用、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なしで、問題の対象（例えば、ヒト）の組織と接触しての使用に適している、化合物、成分、材料、組成物、剤形などに関連する。各担体、アジュバント、賦形剤などはまた、製剤の他の成分と適合しているという意味でも、「許容され」なければならない。適切な担体、アジュバント、賦形剤などは、標準薬学テキスト、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．、１９９０；およびＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第２版、１９９４に見出すことができる。

製剤は、薬学の分野においてよく知られた任意の方法により調製され得る。そのような方法は、関連した活性物質を、１つまたは複数の副成分を構成する担体と会合させるステップを含む。一般的に、製剤は、活性化合物を担体（例えば、液体担体、微粉化固体担体など）と均一かつ密に会合させ、その後、必要ならば、その生成物を成形することにより、調製される。

本開示の細胞および化学療法剤は、その作用物質および処置されるべき癌に従って受け入れられる投与様式のために製剤化され得る。例えば、本発明による細胞および化学療法剤は、対象への静脈内投与、例えば、静脈内注射または注入のために製剤化され得る。適切な製剤は、無菌または等張性媒体中に、選択された作用物質を含み得る。

いくつかの態様において、本開示によるリンパ球除去化学療法を投与するステップは、好ましくは、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含む。
本開示によるリンパ球除去化学療法のコースは、１つまたは複数の化学療法剤の複数回の投与を含み得る。リンパ球除去化学療法のコースは、本明細書に記載された用量で、かつ本明細書に記載された日数の間、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含み得る。例として、リンパ球除去化学療法のコースは、フルダラビンを、１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で連続した３日間、投与すること、およびベンダムスチンを１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で連続した３日間、投与することを含み得る。

リンパ球除去化学療法のコースに従っての、化学療法剤の最終用量の投与の日は、リンパ球除去化学療法のコースの終了の日であると見なされ得る。
いくつかの態様において、フルダラビンは、１日あたり５～１００ｍｇ／ｍ^２、例えば、１日あたり１５～９０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１５～８０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１５～７０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１５～６０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１５～５０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１０～４０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり５～６０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１０～６０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１５～６０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり２０～６０ｍｇ／ｍ^２、または１日あたり２５～６０ｍｇ／ｍ^２のうちの１つの用量で投与される。いくつかの態様において、フルダラビンは、１日あたり２０～４０ｍｇ／ｍ^２、例えば、１日あたり２５～３５ｍｇ／ｍ^２、例えば、１日あたり約３０ｍｇ／ｍ^２の用量で投与される。

いくつかの態様において、フルダラビンは、前の段落による用量で、連続した、１日より長くかつ１４日間未満、投与される。いくつかの態様において、フルダラビンは、前の段落による用量で、連続した２～１４日間、例えば、２～１３日間、２～１２日間、２～１１日間、２～１０日間、２～９日間、２～８日間、２～７日間、２～６日間、２～５日間、または２～４日間のうちの１つの間、投与される。いくつかの態様において、フルダラビンは、前の段落による用量で、連続した２～６日間、例えば、連続した２～４日間、例えば、連続した３日間、投与される。

いくつかの態様において、フルダラビンは、１日あたり１５～６０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した２～６日間、例えば、１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与される。

いくつかの態様において、ベンダムスチンは、１日あたり１０～２００ｍｇ／ｍ^２、例えば、３５～１８０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３５～１６０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３５～１４０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３５～１２０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３５～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３５～８０ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１０～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり１５～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり２０～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり２５～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３０～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり３５～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり４０～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり４５～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり５０～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり５５～１００ｍｇ／ｍ^２、１日あたり６０～１００ｍｇ／ｍ^２、または１日あたり６５～１００ｍｇ／ｍ^２のうちの１つの間の用量で投与される。

いくつかの態様において、ベンダムスチンは、前の段落による用量で、連続した、１日より長くかつ１４日間未満、投与される。いくつかの態様において、ベンダムスチンは、前の段落による用量で、連続した２～１４日間、例えば、２～１３日間、２～１２日間、２～１１日間、２～１０日間、２～９日間、２～８日間、２～７日間、２～６日間、２～５日間、または２～４日間のうちの１つの間、投与される。いくつかの態様において、ベンダムスチンは、前の段落による用量で、連続した２～６日間、例えば、連続した２～４日間、例えば、連続した３日間、投与される。

いくつかの態様において、ベンダムスチンは、１日あたり３５～１４０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した２～６日間、例えば、１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与される。

いくつかの態様において、方法は、フルダラビンを１日あたり１５～６０ｍｇ／ｍ^２（例えば、１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２）の用量で、連続した２～６日間（例えば、連続した３日間）、投与するステップ、およびベンダムスチンを１日あたり３５～１４０ｍｇ／ｍ^２（例えば、１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２）の用量で、連続した２～６日間（例えば、連続した３日間）、投与するステップを含む。

いくつかの態様において、フルダラビンおよびベンダムスチンは、同時にまたは別々に投与され得る。同時投与は、一緒に、例えば両方の作用物質を含有する薬学的組成物（すなわち、混合調製物における）としての投与、またはお互いにすぐ後に、任意で、同じ投与経路を介して、例えば同じ動脈、静脈、もしくは他の血管への投与を指す。逐次投与は、作用物質のうちの１つの投与、続いて、所定の時間間隔の後、他方の作用物質の別個の投与を指す。作用物質が同じ経路により投与されることは必要とされないが、いくつかの態様においては、そのようにされる。

本開示によるリンパ球除去化学療法のコースのいくつかの態様において、フルダラビンおよびベンダムスチンは、同じ日（複数可）に投与される。実例として、フルダラビンを１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与するステップ、およびベンダムスチンを１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与するステップを含む、リンパ球除去化学療法のコースの例において、フルダラビンおよびベンダムスチンは、同じ連続した３日間に投与され得る。そのような例において、リンパ球除去化学療法のコースは、フルダラビンおよびベンダムスチンが対象に投与される連続した３日間の最終日に終了すると言える。

リンパ球除去化学療法は、適切な時間にわたって静脈内注入により投与され得る。いくつかの態様において、リンパ球除去化学療法剤は、１５～６０分間、例えば、２０～４０分間、例えば、約３０分間にわたって静脈内注入により投与され得る。

本開示の側面はまた、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、ＣＤ３０陽性癌を有する対象に投与するステップを含む。したがって、方法は、養子細胞移入を含む。
養子細胞移入は、一般的に、対象から細胞（例えば、免疫細胞）を得るプロセスを指し、典型的には血液試料を採取してそこから細胞を分離する。その後、細胞は、典型的には、改変および／または増殖され、その後、同じ対象（自家／自己遺伝子性細胞の養子移入の場合）または異なる対象（同種異系細胞の養子移入の場合）のいずれかへ投与される。養子細胞移入は、典型的には、ある特定の所望の特性を有する細胞集団を対象へ供給すること、またはその対象においてそのような特性を有するそのような細胞の頻度を増加させることを目的とする。養子移入は、細胞もしくは細胞集団を対象へ導入すること、および／または対象において細胞もしくは細胞集団の頻度を増加させることを目的として、実施され得る。

ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の養子移入は、例えば、Ｈｏｍｂａｃｈら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００１） １６７：６１２３～６１３１、Ｒａｍｏｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１、およびＷＯ２０１５／０２８４４４ Ａ１（それらの全部は上記で参照により組み入れられている）に記載されている。当業者は、これらの文書の参照により、本開示の方法によるそのような細胞の養子移入についての適切な試薬および手順を決定することができる。

本開示は、ＣＤ３０特異的ＣＡＲを含む／発現するＴ細胞、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を含む／発現するＴ細胞を対象に投与するステップを含む方法を提供する。

いくつかの態様において、方法は、ＣＤ３０特異的ＣＡＲを含む／発現するようにＴ細胞を改変するステップを含む。いくつかの態様において、方法は、ＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を含む／発現するようにＴ細胞を改変するステップを含む。

いくつかの態様において、方法は以下のステップを含む：
（ａ）ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように、Ｔ細胞を改変するステップ；および
（ｂ）ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞を対象に投与するステップ。

いくつかの態様において、方法は以下のステップを含む：
（ａ）Ｔ細胞を含む免疫細胞集団（例えば、ＰＢＭＣ）を単離または取得するステップ；
（ｂ）ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように、Ｔ細胞を改変するステップ；および
（ｃ）ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞を対象に投与するステップ。

いくつかの態様において、方法は以下のステップを含む：
（ａ）Ｔ細胞を含む免疫細胞集団（例えば、ＰＢＭＣ）を対象から単離または取得するステップ；
（ｂ）ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように、Ｔ細胞を改変するステップ；および
（ｃ）ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞を対象に投与するステップ。

いくつかの態様において、Ｔ細胞を含む免疫細胞集団（例えば、ＰＢＭＣ）が単離される対象は、細胞が投与される同じ対象である（すなわち、養子移入は、自家／自己遺伝子性細胞であり得る）。いくつかの態様において、Ｔ細胞を含む免疫細胞集団（例えば、ＰＢＭＣ）が単離される対象は、細胞が投与される対象と異なる対象である（すなわち、養子移入は同種異系細胞であり得る）。

いくつかの態様において、方法は、以下のステップのうちの１つまたは複数を含み得る：
対象から血液試料を取得するステップ；
対象から取得されている血液試料から、Ｔ細胞を含む免疫細胞集団（例えば、ＰＢＭＣ）を単離するステップ；
前記免疫細胞をインビトロまたはエクスビボ細胞培養で培養するステップ；
ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように（例えば、そのようなＣＡＲをコードするウイルスベクター、またはそのような核酸を含むウイルスベクターでの形質導入により）、Ｔ細胞を改変するステップ；
ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞をインビトロまたはエクスビボ細胞培養で培養するステップ；
ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞を収集／単離するステップ；
ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、またはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞を薬学的組成物へ、例えば前記細胞を薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体と混合することにより、製剤化するステップ；
ＣＤ３０特異的ＣＡＲを発現しもしくは含むように改変された、もしくはＣＤ３０特異的ＣＡＲをコードする核酸を発現しもしくは含むように改変されたＴ細胞、またはそのような細胞を含む薬学的組成物を対象に投与するステップ。

いくつかの態様において、方法は追加として、前記細胞または対象を、ＣＡＲの発現を誘導／増強するように、および／または前記ＣＡＲを含む／発現する細胞の増殖もしくは生存を誘導／増強するように処理するステップを含み得る。

いくつかの態様において、血液試料は、静脈切開または白血球アフェレーシス（どちらも当業者によく知られている）により取得され得る。静脈切開により取得される血液試料の総血液体積は、好ましくは、１００ｍｌから５００ｍｌの間、例えば、１５０ｍｌから３００ｍｌまでの間、例えば、約２００ｍｌである。血液試料収集は、好ましくは、対象へ投与されるべき用量のためのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の十分な量の産生のために、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の対象への計画された投与より十分な期間の前に、実施される。いくつかの態様において、血液試料は、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の対象への計画された投与より６～８週間前に取得される。

本開示の方法において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、リンパ球除去化学療法が対象に投与された後に対象へ投与される。
いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、リンパ球除去化学療法のコース、例えば本明細書に記載されたリンパ球除去化学療法のコースの終了後から特定の期間内に、対象へ投与される。すなわち、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、本開示によるリンパ球除去化学療法の投与に従っての化学療法剤の最終用量の投与日後から特定の期間内に対象へ投与される。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、本明細書に記載されたリンパ球除去化学療法のコースの終了から１～２８日以内、例えば、１～２１日以内、１～１４日以内、１～７日以内、２～７日以内、２～５日以内、または３～５日以内のうちの１つで、対象に投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、本明細書に記載されたリンパ球除去化学療法のコースの終了から２～１４日以内に対象に投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、本明細書に記載されたリンパ球除去化学療法のコースの終了から３～５日以内に対象に投与される。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、１×１０^７細胞／ｍ^２～１×１０^９細胞／ｍ^２、例えば、５×１０^７細胞／ｍ^２～１×１０^９細胞／ｍ^２、１×１０^８細胞／ｍ^２～９×１０^８細胞／ｍ^２、２×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２、または２×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２のうちの１つの用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、１×１０^８細胞／ｍ^２～６×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、２×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、４×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、６×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、１×１０^８細胞／ｍ^２より高い用量で、例えば、２×１０^８細胞／ｍ^２より高い、３×１０^８細胞／ｍ^２より高い、４×１０^８細胞／ｍ^２より高い、５×１０^８細胞／ｍ^２より高い、６×１０^８細胞／ｍ^２より高い、７×１０^８細胞／ｍ^２より高い、８×１０^８細胞／ｍ^２より高い用量で、投与される。そのような態様は、特に、処置されるべき癌が非ホジキンリンパ腫である場合、企図される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、２×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、３×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、４×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、５×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、６×１０^８細胞／ｍ^２～８×１０^８細胞／ｍ^２の用量で投与される。

いくつかの態様において、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、１ｋｇの体重あたり１×１０^６～１×１０^７細胞、例えば、１ｋｇの体重あたり１．５×１０^６～９×１０^６細胞、１ｋｇの体重あたり２．０×１０^６～８×１０^６細胞、１ｋｇの体重あたり２．０×１０^６～６×１０^６細胞、または１ｋｇの体重あたり２．０×１０^６～５×１０^６細胞のうちの１つの用量で、投与される。この様式で計算された用量の投与は、特に、処置されるべき対象の体重が５０ｋｇ以下である場合に、企図される。

ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与は、静脈内注入により投与され得る。投与は、０．５～６×１０^７細胞／ｍｌ、例えば、１～３×１０^７細胞／ｍｌを含有する体積であり得る。

ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の複数回（例えば、２回、３回、４回、またはそれ以上）投与が与えられ得る。複数回投与は、あらかじめ決められた時間間隔だけ離すことができ、その時間間隔は、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、もしくはそれ以上、または１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、２１日間、２２日間、２３日間、２４日間、２５日間、２６日間、２７日間、２８日間、２９日間、３０日間、もしくは３１日間、または１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、もしくは６ヶ月間のうちの１つであるように選択され得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の１つまたは複数のさらなる用量を投与する決定は、対象の処置に対する応答、および／またはＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の入手可能性に基づいて、なされ得る。

いくつかの態様において、本開示の方法は、さらなる治療的または予防的介入、例えば、追加の化学療法、免疫療法、放射線療法、手術、ワクチン接種、および／またはホルモン療法を含み得る。そのようなさらなる治療的または予防的介入は、本開示の方法によるリンパ球除去化学療法またはＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与の前、その間、および／またはその後に起こり得、同じまたは異なる投与経路で起こり得る。

追加の化学療法は、化学物質、例えば、小分子医薬品、抗生物質、ＤＮＡインターカレータ、タンパク質阻害剤（例えば、キナーゼ阻害剤）、または生物剤、例えば、抗体、抗体断片、アプタマー、核酸（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ）、ペプチド、ポリペプチド、もしくはタンパク質を用い得る。薬物は、薬学的組成物または薬剤として製剤化され得る。製剤は、１つまたは複数の薬物（例えば、１つまたは複数の活性物質）を、１つまたは複数の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、または担体と共に含み得る。放射線療法は、電離放射線を用い得、例えば、Ｘ線またはγ線を用いる放射線療法である。

本開示の側面によるリンパ球除去化学療法および／またはＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞の投与前に、対象は、ブリッジング療法を投与される場合がある。ブリッジング療法は、血液試料収集後でかつリンパ球除去化学療法の投与前に対象に投与され得る。ブリッジング療法は、対象が本開示の方法による処置をやり通すように設計された治療である。ブリッジング療法を投与する決定は、医師の裁量であり、かつ医師の管理下にある。ブリッジング療法は、ステロイド、化学療法、緩和的放射線療法、免疫チェックポイント阻害剤、または抗ＣＤ３０抗体の１つまたは複数を対象に投与することを含み得る。ブリッジング療法の後に、本開示の方法によるリンパ球除去化学療法の投与前に休薬期間が続き得る。休薬期間は、本開示によるリンパ球除去化学療法に従ってのリンパ球除去化学療法剤の初回用量の投与前にブリッジング療法に関連した毒性の十分な回復を保証する。適切な休薬期間は、用いられる特定のブリッジング療法に依存する。ブリッジング療法としてステロイドが投与される場合、休薬期間は、１週間であり得る。ブリッジング療法として化学療法が投与される場合、休薬期間は、３週間であり得る。ブリッジング療法として緩和的放射線療法が投与される場合、休薬期間は２週間であり得る。ブリッジング療法として免疫チェックポイント阻害剤が投与される場合、休薬期間は３週間であり得る。ブリッジング療法として抗ＣＤ３０抗体が投与される場合、休薬期間は８週間であり得る。

本開示による処置の方法の特定の例示的な態様は、下に記載されている。
いくつかの態様において、方法は以下のステップを含む：
（ｉ）フルダラビンを３０ｍｇ／ｍ^２／日の用量で、およびベンダムスチンを７０ｍｇ／ｍ^２／日の用量で、連続した３日間、対象に投与するステップ、ならびに
（ｉｉ）フルダラビンおよびベンダムスチンの投与の最終日から２～５日後（例えば、２日後）、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を１×１０^８細胞／ｍ^２の用量で前記対象に投与するステップ。

いくつかの態様において、方法は以下のステップを含む：
（ｉ）フルダラビンを３０ｍｇ／ｍ^２／日の用量で、およびベンダムスチンを７０ｍｇ／ｍ^２／日の用量で、連続した３日間、対象に投与するステップ、ならびに
（ｉｉ）フルダラビンおよびベンダムスチンの投与の最終日から２～５日後（例えば、２日後）、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を２×１０^８細胞／ｍ^２の用量で前記対象に投与するステップ。

いくつかの態様において、方法は以下のステップを含む：
（ｉ）フルダラビンを３０ｍｇ／ｍ^２／日の用量で、およびベンダムスチンを７０ｍｇ／ｍ^２／日の用量で、連続した３日間、対象に投与するステップ、ならびに
（ｉｉ）フルダラビンおよびベンダムスチンの投与の最終日から２～５日後（例えば、２日後）、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を２×１０^８～６×１０^８細胞／ｍ^２（例えば、４×１０^８細胞／ｍ^２）の用量で前記対象に投与するステップ。

対象
本開示の側面による対象は、任意の動物またはヒトであり得る。対象は、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトである。対象は、非ヒト哺乳動物であり得るが、より好ましくはヒトである。対象は患者であり得る。対象は男性または女性であり得る。対象は、成人対象（年齢≧１８歳）、小児対象（年齢≦１８歳）、または青年期対象（年齢≧１２歳かつ≦２１歳；例えば、青年期早期（年齢≧１２歳かつ≦１４歳）、青年期中期（年齢≧１５歳かつ≦１７歳）、または青年期後期（年齢≧１８歳かつ≦２１歳））であり得る。対象は、年齢≦７５歳であり得る。

対象はＣＤ３０陽性癌（例えば、本明細書に記載された態様によるＣＤ３０陽性癌）を有し得る。対象は、ＣＤ３０陽性腫瘍を有し得る。対象は、ＣＤ３０陽性癌を有すると決定されている場合でも、ＣＤ３０陽性癌と診断されている場合でも、ＣＤ３０陽性癌を有するのではないかと疑われる場合でも、またはＣＤ３０陽性癌を発生するリスクがある場合でもよい。いくつかの態様において、対象は、その対象がＣＤ３０陽性癌を有するという決定に基づいて、本開示の方法による処置に選ばれ得る。対象は、応答評価のための改定判定基準：Ｌｕｇａｎｏ分類（Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ：Ｔｈｅ Ｌｕｇａｎｏ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）（例えば、全体として参照により本明細書に組み入れられている、Ｃｈｅｓｏｎら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（２０１４） ３２：３０５９～３０６８に記載されている）による少なくとも１つの測定可能な病変を有し得る。

対象は、癌についての処置後、再発している対象であり得る。対象は、癌についての処置（癌についての第一選択治療）に応答していた可能性があるが、その癌が、その後、例えば寛解の期間後、再興／進行している可能性がある。

対象は、癌の処置に応答することができなかった対象であり得る。対象は、癌についての処置（癌についての第一選択治療）に応答しなかった可能性がある。対象は、癌についての処置（癌についての第一選択治療）への部分的または完全な応答を示さなかった可能性がある。

対象は、本開示の方法により投与されたＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が由来する細胞の供給源に関して自己遺伝子性／自家であり得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される対象は、そのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の産生のために血液試料または細胞が取得される同じ対象であり得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される対象は、そのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の産生のために血液試料または細胞が取得される対象と遺伝的に同一であり得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される対象は、そのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の産生のために血液試料または細胞が取得される対象のＭＨＣ／ＨＬＡ遺伝子によりコードされるＭＨＣ／ＨＬＡ分子と同一であるＭＨＣ／ＨＬＡ分子をコードするＭＨＣ／ＨＬＡ遺伝子を含み得る。

あるいは、対象は、本開示の方法により投与されるＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が由来する細胞の供給源に関して同種異系／非自家であり得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される対象は、そのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の産生のために血液試料または細胞が取得される対象と異なる対象であり得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される対象は、そのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の産生のために血液試料または細胞が取得される対象と遺伝的に非同一であり得る。ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される対象は、そのＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の産生のために血液試料または細胞が取得される対象のＭＨＣ／ＨＬＡ遺伝子によりコードされるＭＨＣ／ＨＬＡ分子と同一であるＭＨＣ／ＨＬＡ分子をコードするＭＨＣ／ＨＬＡ遺伝子を含み得る。

本開示による処置により達成される効果
本開示の方法は、その方法により達成された処置効果および／または臨床成績を参照することにより、特徴づけられ得る。

本開示の方法による対象の処置は、以下の処置効果の１つまたは複数を達成する：対象においてＣＤ３０陽性癌細胞の数を低下させること、対象においてＣＤ３０陽性腫瘍／病変のサイズを低下させること、対象においてＣＤ３０陽性癌細胞の成長を阻害する（例えば、防止し、または遅くする）こと、ＣＤ３０陽性癌の（例えば、より後期のステージまたは転移への）発達／進行を阻害する（例えば、防止し、または遅くする）こと、対象においてＣＤ３０陽性癌の症状の重症度を低下させること、対象の生存期間（例えば、無増悪生存期間または全生存期間）を増加させること、対象においてＣＤ３０陽性癌細胞の数もしくは活性の相関物を低下させること、および／または対象においてＣＤ３０陽性癌負荷量を低下させること。

対象は、処置への彼らの応答を決定するために、応答評価のための改定判定基準：Ｌｕｇａｎｏ分類（Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ： Ｔｈｅ Ｌｕｇａｎｏ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）（例えば、上記で参照により本明細書に組み入れられている、Ｃｈｅｓｏｎら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（２０１４） ３２：３０５９～３０６８に記載されている）に従って評価され得る。いくつかの態様において、本開示の方法による対象の処置は、以下のうちの１つを達成する：完全応答、部分応答、または安定した疾患。

本開示の方法は、集団レベルでの、達成された効果／観察された応答を参照することにより、特徴づけられ得る。すなわち、いくつかの態様において、本開示の方法は、処置が１人より多い対象、例えば対象集団に投与される場合に、達成された効果／観察された応答を参照することにより、特徴づけられ得る。対象集団は、２人以上、例えば、５人、１０人、１５人、２０人、２５人、３０人、４０人、５０人、６０人、７０人、８０人、９０人、または１００人、またはそれ以上のうちの１つの対象を含み得る。

集団レベルでの、達成された効果／観察された応答は、所定の臨床成績（例えば、完全応答、部分応答、全応答（完全応答＋部分応答）、安定した疾患、進行した疾患）を示す、処置された対象の割合（例えば、パーセンテージ）に関して表現され得る。所定の臨床成績を示す、処置された対象の割合は、その臨床成績についての「率」と呼ばれ得る。実例として、処置への完全応答を示す対象のパーセンテージは、完全応答率と呼ばれ得る。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、５０％以上、例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％、もしくはそれ以上のうちの１つの全応答率（すなわち、完全応答＋部分応答）、または１００％の全応答率を達成する。いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、７０％以上、例えば、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、または８１％、またはそれ以上のうちの１つの全応答率を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、５０％以上、例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％、もしくはそれ以上のうちの１つの完全応答率、または１００％の完全応答率を達成する。いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、７０％以上、例えば、７１％、７２％、７３％、７４％、または７５％、またはそれ以上のうちの１つの完全応答率を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、５０％以下、例えば、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、もしくは５％、もしくはそれ未満のうちの１つの進行率、または０％の進行率を達成する。いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、３０％以下、例えば、２９％、２８％、２７％、２６％、２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、または１３％、またはそれ未満のうちの１つの進行率を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、２０％以上、例えば、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％、もしくはそれ以上のうちの１つの１年無増悪生存期間率、または１００％の１年無増悪生存期間率を達成する。いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、４０％以上、例えば、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、または５７％、またはそれ以上のうちの１つの完全応答率を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、１ヶ月間以上、例えば、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１３ヶ月間、１４ヶ月間、１５ヶ月間、１６ヶ月間、１７ヶ月間、１８ヶ月間、１９ヶ月間、２０ヶ月間、２１ヶ月間、２２ヶ月間、２３ヶ月間、または２４ヶ月間、またはそれ以上のうちの１つの無増悪生存期間中央値を達成する。いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、９ヶ月間以上、例えば、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、または１３ヶ月間、またはそれ以上のうちの１つの無増悪生存期間中央値を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、９０％以上、例えば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％、もしくはそれ以上のうちの１つの１年全生存率、または１００％の１年全生存率を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、６ヶ月間以上、例えば、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１３ヶ月間、１４ヶ月間、１５ヶ月間、１６ヶ月間、１７ヶ月間、１８ヶ月間、１９ヶ月間、２０ヶ月間、２１ヶ月間、２２ヶ月間、２３ヶ月間、または２４ヶ月間、またはそれ以上のうちの１つの全生存期間中央値を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、２０％以上、例えば、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％、もしくはそれ以上のうちの１つの１年応答期間率（例えば、完全応答または部分応答を達成した対象における）、または１００％の１年応答期間率を達成する。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、１ヶ月間以上、例えば、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１３ヶ月間、１４ヶ月間、１５ヶ月間、１６ヶ月間、１７ヶ月間、１８ヶ月間、１９ヶ月間、２０ヶ月間、２１ヶ月間、２２ヶ月間、２３ヶ月間、または２４ヶ月間、またはそれ以上のうちの１つの応答期間中央値（例えば、完全応答または部分応答を達成した対象における）を達成する。

本開示の態様において、処置効果および臨床成績は、参照方法による処置により達成された効果／成績（例えば、臨床応答）を参照することにより、特徴づけられ得る。参照方法は、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を対象に投与することを含む方法であり得る。

いくつかの態様において、参照方法は、リンパ球除去化学療法の事前投与なしに、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を（例えば、２×１０^７細胞／ｍ^２、１×１０^８細胞／ｍ^２、または２×１０^８細胞／ｍ^２の用量で）投与することによる処置を含み得る。いくつかの態様において、参照方法は、Ｒａｍｏｓら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１に記載されているように、またはＮＣＴ０１３１６１４６について記載された介入（下記で再現されている）に従って、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を対象に投与することによるＣＤ３０陽性癌の処置を含み得る：
薬物：ＣＡＲ．ＣＤ３０ Ｔ細胞

３つの用量レベル：
群１、２×１０^７細胞／ｍ^２
群２、１×１０^８細胞／ｍ^２
群３、２×１０^８細胞／ｍ^２；

細胞投与：ＣＡＲ^＋ 活性化Ｔリンパ球が、１～１０分間にわたる、末梢ラインまたは中心ラインのいずれかを通しての静脈内注射により与えられる。予想体積＝１～５０ｃｃ。

いくつかの態様において、参照方法は、フルダラビンおよびシクロフォスファミド（例えば、３０ｍｇ／ｍ^２／日の用量のフルダラビンおよび５００ｍｇ／ｍ^２／日のシクロフォスファミドの用量で、連続した３日間）を投与することを含むリンパ球除去化学療法を投与するステップ、および引き続いて（例えば、リンパ球除去化学療法のコースの終了から２～１４日以内）、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞（例えば、２×１０^７細胞／ｍ^２、１×１０^８細胞／ｍ^２、または２×１０^８細胞／ｍ^２の用量で）を投与するステップによる処置を含み得る。いくつかの態様において、参照方法は、Ｒａｍｏｓら、Ｂｉｏｌ Ｂｌｏｏｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ２５（２０１９）Ｓ７～Ｓ７５、要約７９に記載されているような、またはＮＣＴ０２９１７０８３について記載された介入（下記に再現されている）による、ＣＤ３０陽性癌の処置を含み得る：
遺伝学的：ＣＡＲ Ｔ細胞
３つの用量レベル。各患者は、以下の投与計画により、ＣＡＲ改変型Ｔ細胞の１回の注入を受ける：

用量レベル１：２×１０^７細胞／ｍ^２。用量レベル２：１×１０^８細胞／ｍ^２。用量レベル３：２×１０^８細胞／ｍ^２。

薬物：シクロフォスファミド
自家移植後ではない患者は、シクロフォスファミドの１日３回の投与（Ｃｙ：５００ｍｇ／ｍ^２／日）を受けるが、この投与は、Ｔ細胞注入の少なくとも４８時間前であるが、その細胞の注入前の２週間以内に終える。
別名：シトキサン

薬物：フルダラビン
自家移植後ではない患者は、フルダラビン（Ｆｌｕ：３０ｍｇ／ｍ^２／日）を受けるが、これはＴ細胞注入の少なくとも４８時間前であるが、その細胞の注入前の２週間以内に終える。

本開示の方法による処置は、参照方法による処置と比較して、処置効果の向上および／または臨床成績の向上を伴い得る。
本開示の方法による処置は、以下のうちの１つまたは複数を達成し得る：参照方法による処置と比較しての、対象におけるＣＤ３０陽性癌細胞の数のより幅広い低下、対象におけるＣＤ３０陽性腫瘍／病変のサイズのより幅広い低下、対象におけるＣＤ３０陽性癌細胞の成長のより幅広い阻害、対象におけるＣＤ３０陽性腫瘍／病変の成長のより幅広い阻害、ＣＤ３０陽性癌の（例えば、より後期のステージ、または転移への）発達／進行のより幅広い阻害、対象におけるＣＤ３０陽性癌の症状の重症度のより幅広い低下、対象の生存期間（例えば、無増悪生存期間または全生存期間）のより幅広い増加、対象におけるＣＤ３０陽性癌細胞の数もしくは活性の相関物のより幅広い低下、および／または対象におけるＣＤ３０陽性癌負荷量のより幅広い低下。

「より幅広い」低下／阻害／増加は、参照方法による処置によって達成された低下／阻害／増加のレベルの１倍より幅広い、例えば、≧１．０１倍、≧１．０２倍、≧１．０３倍、≧１．０４倍、≧１．０５倍、≧１．１倍、≧１．２倍、≧１．３倍、≧１．４倍、≧１．５倍、≧１．６倍、≧１．７倍、≧１．８倍、≧１．９倍、≧２倍、≧３倍、≧４倍、≧５倍、≧６倍、≧７倍、≧８倍、≧９倍、または≧１０倍のうちの１つである、低下／阻害／増加であり得る。

低下／阻害は、参照方法による処置によって達成されたレベルの１倍未満、例えば、≦０．９９倍、≦０．９５倍、≦０．９倍、≦０．８５倍、≦０．８倍、≦０．７５倍、≦０．７倍、≦０．６５倍、≦０．６倍、≦０．５５倍、≦０．５倍、≦０．４５倍、≦０．４倍、≦０．３５倍、≦０．３倍、≦０．２５倍、≦０．２倍、≦０．１５倍、≦０．１倍、≦０．０５倍、または≦０．０１倍であるレベルであり得る。

増加は、参照方法による処置によって達成されたレベルの１倍より大きく、例えば、≧１．０１倍、≧１．０２倍、≧１．０３倍、≧１．０４倍、≧１．０５倍、≧１．１倍、≧１．２倍、≧１．３倍、≧１．４倍、≧１．５倍、≧１．６倍、≧１．７倍、≧１．８倍、≧１．９倍、≧２倍、≧３倍、≧４倍、≧５倍、≧６倍、≧７倍、≧８倍、≧９倍、または≧１０倍のうちの１つであるレベルであり得る。

いくつかの態様において、本開示の方法による処置は、参照方法による処置と比較して、臨床成績（例えば、臨床応答）の向上を伴う。
本開示の方法による処置は、以下のうちの１つまたは複数を達成し得る：参照方法による処置と比較しての、全応答（すなわち、完全応答＋部分応答）率の増加、完全応答率の増加、進行率の低下、１年無増悪生存期間率の増加、無増悪生存期間中央値の増加、１年全生存率の増加、全生存期間中央値の増加、１年応答期間率の増加、応答期間中央値の増加。

「増加した」率／中央値は、参照方法による処置によって達成された率／中央値の１倍より大きく、例えば、≧１．０１倍、≧１．０２倍、≧１．０３倍、≧１．０４倍、≧１．０５倍、≧１．１倍、≧１．２倍、≧１．３倍、≧１．４倍、≧１．５倍、≧１．６倍、≧１．７倍、≧１．８倍、≧１．９倍、≧２倍、≧３倍、≧４倍、≧５倍、≧６倍、≧７倍、≧８倍、≧９倍、または≧１０倍のうちの１つである率／中央値であり得る。

「低下した」率は、参照方法による処置によって達成された率の１倍未満、例えば、≦０．９９倍、≦０．９５倍、≦０．９倍、≦０．８５倍、≦０．８倍、≦０．７５倍、≦０．７倍、≦０．６５倍、≦０．６倍、≦０．５５倍、≦０．５倍、≦０．４５倍、≦０．４倍、≦０．３５倍、≦０．３倍、≦０．２５倍、≦０．２倍、≦０．１５倍、≦０．１倍、≦０．０５倍、または≦０．０１倍である率であり得る。

本開示の方法による処置は、参照方法による処置と比較して、有害事象を示す対象の割合の低下を伴い得る。
本開示の方法による処置は、参照方法による処置と比較して、以下のうちの１つまたは複数を示す対象の割合の低下を伴い得る：リンパ球減少症、白血球減少症、好中球減少症、血小板減少症、貧血、低アルブミン血症、低ナトリウム血症、呼吸困難、発疹、頭痛、咽頭炎、肺感染、サイトカイン放出症候群、２８日目におけるグレード３／４好中球減少症、２８日目におけるグレード３／４血小板減少症、２８日目におけるグレード３／４貧血、遷延性グレード３／４好中球減少症（例えば、３ヶ月目における）、遷延性グレード３／４血小板減少症（例えば、３ヶ月目における）、または遷延性グレード３／４貧血（例えば、３ヶ月目における）。

配列同一性
２つ以上のアミノ酸または核酸配列間のパーセント同一性を決定するためのペアワイズおよび複数の配列アラインメントは、例として、ＣｌｕｓｔａｌＯｍｅｇａ（Ｓｏｄｉｎｇ、Ｊ． ２００５、Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２１、９５１～９６０）、Ｔ－ｃｏｆｆｅｅ（Ｎｏｔｒｅｄａｍｅら、２０００、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（２０００） ３０２、２０５～２１７）、Ｋａｌｉｇｎ（ＬａｓｓｍａｎｎおよびＳｏｎｎｈａｍｍｅｒ ２００５、ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ、６（２９８））、およびＭＡＦＦＴ（ＫａｔｏｈおよびＳｔａｎｄｌｅｙ ２０１３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ、３０（４）７７２～７８０）ソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを用いて、当業者に知られた様々な方法で達成することができる。そのようなソフトウェアを用いた場合、好ましくは、例えばギャップペナルティおよび伸長ペナルティについての、デフォルトパラメータが用いられる。

配列

本発明は、本明細書に記載された側面および好ましい特徴の組合せを含むが、ただし、そのような組合せが、明らかに容認できず、または明確に回避される場合を除く。
本明細書で用いられるセクション見出しは、組織化のみを目的とし、記載された主題を限定すると解釈されるべきではない。

本発明の側面および態様は、今、例として、添付の図を参照して、示される。さらなる側面および態様は、当業者に明らかであろう。この本文で言及された全ての文書は、参照により本明細書に組み入れられている。

以下に続く特許請求の範囲を含むこの明細書を通して、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの語尾変化は、述べられた整数もしくはステップ、または整数群もしくはステップ群の包含を意味するが、任意の他の整数もしくはステップ、または整数群もしくはステップ群の排除を意味しないと理解される。

本明細書および添付の特許請求の範囲に用いられる場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに他に指図しない限り、複数の指示物を含む。範囲は、「約」一つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値までとして、本明細書で表現され得る。そのような範囲が表現される場合、別の態様は、前記一つの特定の値からおよび／または前記他方の特定の値までを含む。同様に、値が近似値として表現される場合、先行詞「約」の使用によって、その特定の値は別の態様を形成すると理解される。

核酸配列が本明細書に記載される場合、その逆の相補体もまた明確に企図される。
本明細書に記載された方法は、インビトロまたはインビボで実施され得る。いくつかの態様において、本明細書に記載された方法は、インビトロで実施される。用語「インビトロ」は、培養中の細胞を用いた実験を包含することを意図され、一方、用語「インビボ」は、インタクトな多細胞生物体を用いた実験を包含することを意図される。

本発明の原理を説明する態様および実験は、今、添付の図を参照して論じられる。

処置の時点で測定可能な疾患を有するＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬからの古典的ＨＬ患者の応答期間を示すスイマープロットを示す図である（データカットオフ：２０２０年２月１４日）。 ＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬからの古典的ＨＬ患者のＰＦＳを示すカプラン・マイアープロットを示す図である。ベンダムスチンおよびフルダラビンで処置された、ＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬからの評価可能な古典的ＨＬ患者（ｎ＝１６）の無増悪生存期間が示されている。 ＴＥＳＳＣＡＲ００１（ＮＣＴ０４２６８７０６）研究デザインの概略図である。主要エンドポイント：独立放射線審査委員会（Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ Ｒｅｖｉｅｗ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）により評価される場合のＯＲＲ；副次的エンドポイント：安全性、治験責任医師により評価される場合のＯＲＲ、ＤＯＲ、ＰＦＳ、ＯＳ、ＨＲＱｏＬ；予備的エンドポイント：血液中のＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の増殖および持続性；免疫原性；サイトカインプロファイリング；免疫学的パラメータ；腫瘍マーカーおよびｃｔＤＮＡ；安全性評価：ＡＥおよび併用薬収集；長期フォローアップ：追加の安全性モニタリング×１５年間。^＊ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の２回目の注入：治験責任医師の裁量でかつスポンサーまたは被指名人との議論後に、患者が、最初の応答評価時に、ＣＲ、ＰＲ、またはＳＤを有し、かつその後、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入から少なくとも３ヶ月後、疾患進行を有する場合には、２回目のＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入が、投与され得る。略語：ＣＲ、完全応答；ＤＯＲ、応答期間；ＨＲＱｏＬ、健康関連の生活の質；ＯＳ、全生存期間；ＯＲＲ、客観的応答率；ＰＦＳ、無増悪生存期間；ＰＤ、進行した疾患；ＰＲ、部分応答；ＳＤ、安定した疾患。 ＴＥＳＳＣＡＲ００１（ＮＣＴ０４２６８７０６）およびＴＥＳＳＣＡＲ００２研究手順の概略図である。^＊ ＬＤ前の１週間以内に再イメージングスキャンが行われ得る；^＊＊ 休薬期間は、用いられる治療の型に基づく；＃ 処置期からＬＴＦＵ期までに実施され得るＬＤおよびＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ関連安全性評価。↑ 腫瘍応答評価。略語：ＬＴＦＵ、長期フォローアップ；ＩＣＦ、インフォームドコンセントフォーム；ＬＤ、リンパ球除去化学療法；ＥＯＴ、処置の終了；ＥＯＳ、研究の終了；Ｍ、ヶ月目；ＹＲ、年。 ＴＥＳＳＣＡＲ００２研究デザインの概略図である。‡ 対象は、もしＤＬＴ以外の任意の理由により、ＤＬＴ期間を通じてフォローアップを完了することができないならば、置き換えられ得る。§ 次の患者についての用量を増やすという決定がなされる前に、最低限３人の患者が、ＤＬＴ評価期間を完了することを必要とされる。各新しい用量レベルにおいて、第１および第２の患者は、４週間離して投薬される；もし第１の患者からＤＬＴが検出されなかったならば、第２および第３の患者は、同時に投薬され得る。少なくとも６人の患者が最高用量において受け入れ可能な安全性であると評価されている時点まで（すなわち、「受け入れ可能な安全性」は、ＢＯＩＮが同じ用量レベルに留まるかまたは増やすかのいずれかを推奨する場合である）、または合計およそ２１人の患者が投薬されている時点まで、用量漸増／漸減が実施され得る。＃ ＤＬ１において、１人の患者で１つのＤＬＴ、または２人の患者の中で１つのＤＬＴ、または３人の患者の中で２つのＤＬＴの場合には、用量がＤＬ０ １×１０^８個／ｍ^２のＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞へ漸減される。略語：ＤＯＲ、応答期間；ＯＲＲ、客観的応答率；ＯＳ、全生存期間；ＰＦＳ、無増悪生存期間；ＰＫ、薬物動態；ＲＰ２Ｄ、推奨第２相用量。

以下の実施例において、本発明者らは、リンパ球除去化学療法およびＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞の養子移入を用いる方法を使用するＣＤ３０陽性癌の処置を記載する。
実施例１
研究ＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬ（ＮＣＴ０２６９０５４５）：再発性または不応性ＣＤ３０＋ ホジキンリンパ腫およびＣＤ３０＋ 非ホジキンリンパ腫についてのＣＤ３０キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴリンパ球の投与の第１／２相研究
１．１ 概要
再発性または不応性ホジキンリンパ腫を有する患者における第１／２相研究を、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ（ＵＮＣ、Ｃｈａｐｅｌ Ｈｉｌｌ、Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ）で、プロトコールＮＣＴ０２６９０５４５において行った。

製造管理および品質管理に関する基準（ＧＭＰ）に準拠した施設において、臨床グレードのガンマレトロウイルスベクターを用いかつ標準作業手順書（ＳＯＰ）に従って製造されたＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔを、患者は受けた。

少なくとも２ラインの治療後に進行した再発性／不応性ＣＤ３０^＋ リンパ腫を有する患者が、登録の資格があった。ＢＶ処置が許されたが、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の予定された注入前の４週間以内では許されなかった。施設内血液病理学標準に基づいた免疫組織化学法による実証されたＣＤ３０発現が必要とされたが、ＣＤ３０^＋ 腫瘍細胞のパーセンテージについての特定のカットオフはなかった。

ＣＤ３０^＋ Ｔ細胞または未分化大細胞リンパ腫、加えてＣＤ３０^＋ Ｂ細胞リンパ腫を有する患者もまた登録されたが、本実施例は、ＨＬ（２６人の患者）を有する３４人の患者の成績のみを報告する。

処置を行う医師の裁量でのブリッジング化学療法は、リンパ球除去の前に許された。移植前処置は、８人の患者の第１のコホートについての２日間の９０ｍｇ／ｍ^２／日の用量でのベンダムスチン、および第２のコホートに登録された次の１８人の患者についての３日間のベンダムスチン７０ｍｇ／ｍ^２／日とフルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２／日からなった。

ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の注入は、リンパ球除去の２～５日後に起こった。患者は、１×１０^８個のＣＡＲ－Ｔ細胞／ｍ^２かまたは２×１０^８個のＣＡＲ－Ｔ細胞／ｍ^２のいずれかを受けた。患者の拡大コホートは、２×１０^８個のＣＡＲ－Ｔ細胞／ｍ^２の最高用量レベルを受けた。最高レベルでのＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の２回目の注入は、１回目の処置後に安定または部分応答を有した患者において許された。

本研究の第１相部の主要な目的は、リンパ球除去後に注入するＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の安全用量を確立することであった。副次的エンドポイントは、ＯＲＲ、応答期間（ＤＯＲ）、全生存期間（ＯＳ）、ならびに注入後の末梢血におけるＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの増殖および持続性の測定を含んだ。データは、非フルダラビンに基づいたリンパ球除去を受けた患者およびフルダラビンを含有するレジメンを受けた患者において別々に分析された。

応答は、Ｌｕｇａｎｏ判定基準（Ｃｈｅｓｏｎら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（２０１４） ３２：３０５９～３０６８）を用いて、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後６～８週間目に評価された。応答率は、リンパ球除去の時点で活動性疾患を有する患者においてのみ、推定された。

１．２ 患者個体群統計学
２０１６年９月から２０２０年２月１４日の間、ＨＬを有する２９人の患者がＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬ研究に登録され、２６人がＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞を受けた。２０２０年２月１４日のデータカットオフ時点で、処置を受けなかった、ＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬ研究に登録された３人の患者があった。３人の患者のうち、１人は、臨床試験を続行しないことを選び、１人は収集時点で活動性疾患をもたず、１人は、集中的な以前の自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）、同種異系幹細胞移植（ａｌｌｏＳＣＴ）、および複数のドナーリンパ球注入により、ＣＡＲ－Ｔ細胞製造に不合格であった。

１．３ 有効性
ＬＣＣＣ １５３２－ＡＴＬ研究において１８人の患者がベンダムスチンおよびフルダラビンを受けた。これらのうち、２人の患者が、注入時点でＣＲにあり、ＣＲを維持し、有効性の分析に含まれなかった。

ベンダムスチンおよびフルダラビンのリンパ球除去化学療法で処置された患者において、ＯＲＲは８１％であり、ＣＲが１２人の患者（７５％）、ＰＲが１人の患者（６％）、ＳＤが１人の患者（６％）、およびＰＤが２人の患者（１３％）で報告された（表２）。それらの中で、１８歳未満の１人の患者が処置され、ＣＲを達成した（表３）。

８人の患者は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞注入の前に、ベンダムスチン単独を用いたリンパ球除去を受けた。これらの８人の患者のうち、３人の患者は、ブリッジング療法により、リンパ球除去前にＣＲであり、分析に含まれなかった（エラー！参照元に見出されない。表２）。活動性疾患を有する５人の患者の誰も、処置された時、客観的臨床応答を示さなかった（表２）。

処置の時点で測定可能な疾患を有する患者の応答期間（ＤＯＲ）が図１に示されている。１回目の注入後にＣＲを有する１２人の患者の中で、６人の患者が応答を継続した。
ベンダムスチンおよびフルダラビンレジメンで処置された１６人の患者の１年ＰＦＳ率は、５７％（９５％ ＣＩ：２８％～７８％）であり、１３．０ヶ月間のＰＦＳ中央値であった（９５％ ＣＩ：５．４－ＮＥ） － 図２参照。

１．４ 安全性
ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞注入に関連した用量制限毒性は観察されなかった。処置された１８歳未満の患者は、グレード１のＡＬＴを除いて、ＣＲＳも他のＣＡＲ－Ｔ細胞関連毒性も経験しなかった（表３）。

サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）が３人の患者（２４％）で観察された（表４）。全てのＣＲＳ事象は、グレード１であり、トシリズマブまたはステロイド投与を必要とすることなく、自然に消散した。ＩＬ－６およびＩＬ１Ｒα、ならびにＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）などのＣＲＳの発生に関連したサイトカインは、ＣＲＳの臨床徴候を発症した患者の血漿中で上昇した。神経毒性は観察されなかった。

６人の患者が、非そう痒性、非圧痛性の斑状丘疹状皮疹を発症した。それは３～７日以内に自然に消散したため、いずれの患者も発疹についての特定の処置を必要としなかった。

最初の６週間の間にグレード３以上の毒性が報告され、それらの大部分は、血液学的であり、移植前化学療法によって引き起こされる毒性と一致した。グレード３以上の毒性は、リンパ球減少症、白血球減少症、好中球減少症、血小板減少症、貧血、低アルブミン血症、低ナトリウム血症、呼吸困難、咽頭炎、肺感染症、および頭痛を含んだ（表４）。２８日目までに消散しなかったグレード３／４好中球減少症（ＡＮＣ＜１．０／ｍＬ）は、２人の患者に生じた。しかしながら、両方の患者は、グレード３／４好中球減少症を９０日目までに解消した。６人の患者は、２８日目までに消散しなかったグレード３／４血小板減少症（血小板＜５０，０００／ｍＬ）を有した。３人の患者は、３ヶ月目においてグレード３／４血小板減少症を有した（表４）。

ベンダムスチンおよびフルダラビンで処置された患者におけるグレード３以上のＡＥの発生率は低く（表４）、そのＡＥは、白血球減少症（４４％）、好中球減少症（３９％）、低アルブミン血症（０％）、低ナトリウム血症（０％）、呼吸困難、咽頭炎、肺感染症、および頭痛（０％）を含んだ。１人の患者は、フルダラビンおよびベンダムスチンの初回投与を受けた後だが、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞注入前に、グレード３の急性腎損傷および血圧低下を経験した。この患者は、予定されたリンパ球除去レジメンを完了しなかったが、彼の症状は、その後、消散し、彼は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの予定された用量を受けた。

１．５ 結論
ベンダムスチンおよびフルダラビンを用いるリンパ球除去、引き続いてＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞注入を受けた患者は、Ｒａｍｏｓら、Ｂｉｏｌ Ｂｌｏｏｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ２５（２０１９） Ｓ７～Ｓ７５、Ａｂｓｔｒａｃｔ ７９におけるベンダムスチンおよびフルダラビンを用いるリンパ球除去、引き続いてＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞注入を受けた患者について報告された応答率と比較して、全応答率および完全応答率の向上を示している。

Ｒａｍｏｓらは、ＮＣＴ０２９１７０８３（ＲＥＬＹ－３０）についての予備データを報告しており、その場合、１０人の再発性／不応性ＨＬ患者は、シクロフォスファミド ５００ｍｇ／ｍ^２およびフルダラビン ３０ｍｇ／ｍ^２を毎日、３日間、受け、その後、ＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。注入後６週間目に評価された９人の患者のうち、６人がＣＲを有し、３人の患者が疾患進行を有した（すなわち、ＯＲＲ＝６６．６％、ＣＲ＝６６．６％）。９人の患者のうちの３人は、進行した（ＰＤ＝３３．３％）。

対照的に、本実施例において、ベンダムスチン ７０ｍｇ／ｍ^２およびフルダラビン ３０ｍｇ／ｍ^２を毎日、３日間、受け、その後、ＣＤ３０．ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された１６人の患者うち１３人が、臨床応答を示し（すなわち、ＣＲ＋ＰＲ；ＯＲＲ＝８１．３％）、これらの患者のうちの１２人が、完全応答を示した（ＣＲ＝７５％）。１６人の患者のうち２人だけが、進行した（ＰＤ＝１２．５％）。

その結果は、ｂｅｎｄａ／ｆｌｕ処置が、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞を用いる処置の方法に使用される有望な移植前リンパ球除去治療であることを証明している。
実施例２
研究ＴＥＳＳＣＡＲ００１（ＮＣＴ０４２６８７０６）：再発性または不応性ＣＤ３０陽性ｃＨＬを有する成人および小児科患者におけるＣＤ３０に向けられた遺伝子修飾型自家Ｔ細胞（ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ）の有効性および安全性を評価するためにデザインされた第２相、多施設、非盲検、単一アーム研究
２．１ 研究の理論的根拠
標準の利用可能な治療が不成功であった再発性または不応性ｃＨＬを有する患者についての予後は悪いため、この集団に新しい処置アプローチが緊急に必要とされる。実施例は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞治療が、耐容性が良いこと、およびそのような細胞が、再発性または不応性ｃＨＬを有する、激しく前処置された患者において有意な臨床活性を生じることを実証している。臨床応答のより高い率は、リンパ球除去化学療法なしでＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞を用いた治療（ＮＣＴ０１３１６１４６）についてのＲａｍｏｓら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．（２０１７） １２７（９）：３４６２～３４７１により報告された応答率に比べて、リンパ球除去化学療法の使用と関連があることが見出された。実施例１で実証された自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの都合良い毒性プロファイルおよび助長される抗腫瘍活性は、再発性または不応性ｃＨＬを有する患者におけるさらなる研究に対する強力な裏付けを与える。

２．２ 目的およびエンドポイント
２．２．１ 主要な目的
自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの抗腫瘍効果は、ＯＲＲ（応答評価のための改定判定基準：Ｌｕｇａｎｏ分類（Ｃｈｅｓｏｎら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（２０１４） ３２：３０５９～３０６８）によって独立放射線審査委員会（ＩＲＲＣ）により評価される場合）を用いて評価される。

ＯＲＲは、ＣＲまたはＰＲの最良総合効果（ＢＯＲ）を有する患者の割合として定義される。ＢＯＲは、進行かまたは新しい抗癌治療の開始かのいずれか早い方までのＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入から記録された最良総合効果として定義される。

２．２．２． 副次的目的
以下が評価される：
・自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの安全性
・以下を含む、自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの追加の抗腫瘍効果：
応答評価のための改定判定基準：Ｌｕｇａｎｏ分類（Ｃｈｅｓｏｎら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（２０１４） ３２：３０５９～３０６８）によって治験責任医師により評価される場合の客観的応答率（ＯＲＲ）
応答期間（ＤＯＲ）
無増悪生存期間（ＰＦＳ）
全応答期間（ＯＳ）
・健康関連の生活の質（ＨＲＱｏＬ）評価
全ての副次的有効性エンドポイントは、他に規定がない限り、フル・アナリシス・セット（ＦＡＳ）において分析される。

２．３ 研究集団
本研究集団は、以下の以前の少なくとも三次治療が不成功であった再発性または不応性ＣＤ３０陽性ｃＨＬを有する、１２～７５歳の成人および小児科患者を含む：
・化学療法
・^＊ＢＶ、および／または
・^＊ＰＤ－１阻害剤
患者は、以前、自家および／または同種異系幹細胞移植を受けた場合がある。
^＊ただし、ＢＶまたはＰＤ－１阻害剤が禁忌である場合を除く。

２．４ 研究デザイン
本研究は、再発性または不応性ＣＤ３０陽性ｃＨＬを有する成人および小児科患者におけるＣＤ３０に向けられた遺伝子修飾型自家Ｔ細胞（ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ）の有効性および安全性を評価するためにデザインされた第２相、非盲検、多施設研究である。

米国、カナダ、および欧州連合におけるおよそ３０個の調査場所で、およそ８２人の患者が登録された（６６人の評価可能な成人患者をもたらした）。およそ５人の１２歳以上の小児科患者が登録され、成人集団とは別々に分析される。

研究デザインおよび研究手順の概要は図３および４に提供されている。
２．５ 研究処置
２．５．１ リンパ球除去化学療法
患者は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入の５日前（すなわち、－５日目）に開始して、連続した３日間、ＩＶ注入を介して与えられるフルダラビン（３０ｍｇ／ｍ^２／日）（３０分間にわたってＩＶ注入）およびベンダムスチン（７０ｍｇ／ｍ^２／日）（３０分間にわたってＩＶ注入）を用いたＬＤ化学療法を受ける。

２．５．１ ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入
ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞は、２×１０^８細胞／ｍ^２の用量で単回ＩＶ注入として０日目に投与される。体重が５０ｋｇ未満である患者において、１ｋｇの体重あたり２．０～５．０×１０^６細胞の体重に基づいた投薬が用いられる。

実施例３
研究ＴＥＳＳＣＡＲ００２：再発性または不応性ＣＤ３０陽性非ホジキンリンパ腫を有する患者におけるＣＤ３０に向けられた遺伝子修飾型自家Ｔ細胞（ＣＤ３０．ＣＡＲＴ）の第１相研究
３．１ 研究の理論的根拠
ＣＤ３０は、ＣＤ３０陽性血液悪性腫瘍についての確証された標的である。これは、古典的ＨＬ、ならびに全身性および皮膚性ＡＬＣＬ、ＰＴＣＬ、および菌状息肉症を含むいくつかのＮＨＬサブタイプについての抗ＣＤ３０抗体薬物コンジュゲート、ブレンツキシマブベドチンの承認によりさらに支持されている。

ＣＤ３０は、ＮＨＬサブタイプ腫瘍細胞において広く発現しており、発現は、ＡＬＣＬ腫瘍細胞における１００％（Ｇｏｔｔｅｓｍａｎ、Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（２０１６） ８：２７～３６）からＰＭＢＣＬ腫瘍細胞における１９％（Ｈｏｅｌｌｅｒら、Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ（２０１０） ５６：２１７～２２８）までの範囲である。ＮＨＬ細胞におけるＣＤ３０陽性の高発現は、ＣＤ３０抗原を有するＮＨＬ悪性腫瘍のターゲティング候補をさらに支持している。

全サブタイプにわたるＮＨＬ悪性腫瘍についての標準治療は治癒的ではない。標準の利用可能な治療が不成功である再発性または不応性ＮＨＬを有する患者についての処置成績は良くない。この患者集団についての新しい処置ストラテジーが、満たされていない臨床的必要性を満たすために緊急に必要とされている。

実施例１に実証された自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの都合良い毒性プロファイルおよび助長される抗腫瘍活性が、重要な満たされていない臨床的必要性を満たすために本研究をＮＨＬ患者へ拡大するための強い理論的根拠を与えている。

３．２ 目的およびエンドポイント
３．２．１ 主要な目的
自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの安全性および用量制限毒性（ＤＬＴ）を評価し、かつ推奨第２相用量（ＲＰ２Ｄ）を決定すること。

３．２．２ 副次的目的
以下を評価することにより、自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの予備的な抗腫瘍効果および薬物動態を評価すること：
・客観的応答率（ＯＲＲ）
・血液における自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の薬物動態
・応答期間（ＤｏＲ）
・無増悪生存期間（ＰＦＳ）
・全生存期間（ＯＳ）
３．２．３ 探索的目的
以下を評価すること：
・血液におけるＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入後の抗ＣＤ３０ ｓｃＦｖ（一本鎖可変断片）に対する免疫原性
・血液におけるサイトカインプロファイリング
・血液における免疫学的パラメータ
・血液および腫瘍組織における腫瘍マーカー
・血液における循環腫瘍ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）
３．３ 研究集団
本研究集団は、標準治療が不成功であった、再発性または不応性Ｃ３０陽性ＮＨＬを有する１８～７５歳の成人患者を含む；患者は自家または同種異系ＨＳＣＴを受けていても、受けていなくてもよい。

評価され得るＣＤ３０陽性ＮＨＬサブタイプは以下を含む：
・ＡＬＣＬ
・ＰＴＣＬ－ＮＯＳ
・ＥＮＫＴＣＬ、鼻型
・ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ
・ＰＭＢＣＬ
プロトコール権利放棄または免除としても知られた、募集および登録基準からのプロトコール逸脱の見込み承認は許可されていない。

３．４ 研究デザイン
これは、再発性または不応性ＣＤ３０陽性ＮＨＬを有する成人患者におけるＣＤ３０に向けられた遺伝子修飾型自家Ｔ細胞（ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ）の安全性および予備的抗腫瘍効果を評価するために、ならびにＲ２ＰＤを決定するためにデザインされた第１相、非盲検、多施設の用量漸増研究である。標準治療が不成功であり、かつ自家または同種異系ＨＳＣＴを受けていても受けていなくてもよい患者が、登録される。最多４つまでの研究施設が本研究に参加する。

評価され得るＣＤ３０陽性ＮＨＬサブタイプは以下を含む：
・ＡＬＣＬ
・ＰＴＣＬ－ＮＯＳ
・ＥＮＫＴＣＬ、鼻型
・ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ
・ＰＭＢＣＬ
全体で、この研究はおよそ１２～２１人の患者を登録する。

ＣＤ３０陽性を決定し、かつ研究適格性を確認するために、スクリーニング時点で新鮮な腫瘍生検が必要とされる。生検が医学的に禁忌となり、かつＣＤ３０陽性を証明する最近の処置からのアーカイブの腫瘍生検が入手可能であるならば（最初の診断生検が唯一の入手可能な組織であるならば、その最初の診断生検を含む）、スポンサーまたは被指名人との議論後、容認される場合がある。ＣＤ３０陽性は、適格性についてその地方で確認される。ＣＤ３０陽性は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞製造のための血液収集前に確認されなければならない。

血液収集後で、かつＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの作製中、患者は、治験責任医師の選択に従って、ブリッジング療法を受けることが許される。ブリッジング療法が投与される場合には、ブリッジング療法の完了後、リンパ球除去化学療法の初回投与の開始前に毒性からの十分な回復を保証するために、休薬が必要とされる。休薬期間は、ブリッジング療法として用いられた作用物質の型に基づく。

全ての患者は、リンパ球除去化学療法前の７２時間以内に実施される安全性についてのベースライン評価を受ける。腫瘍評価のためのイメージングスキャンは、リンパ球除去化学療法前の７日以内に実施することができる。患者は、リンパ球除去化学療法およびＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入を開始する前にイメージングにより証明された活動性疾患（ＰＲ、ＳＤ、または進行した疾患（ＰＤ））を有しなければならない。ブリッジング療法後にＣＲの証拠を有する患者は、進行／活動性疾患が証明されるまで、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔで処置されない可能性がある。

リンパ球除去化学療法およびＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入は、外来患者に基づいて投与することができる。患者はまた、施設内ガイダンスによってリンパ球除去化学療法およびＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入の投与のために入院する場合がある。

リンパ球除去化学療法 － フルダラビン（３０ｍｇ／ｍ^２／日）およびベンダムスチン（７０ｍｇ／ｍ^２／日）からなる － ０日目における自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入前の－５日目～－３日目に開始される連続した３日間、投与される。

ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入前に、全ての患者は、Ｈ１アンタゴニスト（例えば、ジフェンヒドラミン、ヒドロキシジン）ＩＶで最高１ｍｇ／ｋｇまで（最大５０ｍｇ）およびアセトアミノフェン 経口で１０ｍｇ／ｋｇ（最大６５０ｍｇ）を前投薬される。代替の抗ヒスタミン剤、抗炎症剤、および制吐剤が施設内ガイダンスに従って処方される場合がある。グルココルチコイドなどのステロイドの使用は避けなければならない。

ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞は、０日目に単回ＩＶ注入として投与される。対象は、安全性モニタリングのために処置施設へ、注入後１４日間、毎日、ならびにその後、それ以降毎週、注入後３週間目、４週間目、および６週間目に戻る。

患者は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入後から２８日目までＤＬＴ評価のためにモニターされる。自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞と、おそらく関連する、ほぼ確実に関連する、または明確に関連すると評価される毒性のいずれもＤＬＴと見なされる。ＤＬＴ評価期間は、自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入から始まり、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞の注入後の２８日間、続く。ＤＬＴ評価期間に生じるＤＬＴは、用量漸増に関する決定に用いられる。ＲＰ２Ｄは本研究中に確立される。

全ての患者は、リンパ球除去化学療法後、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入へ、４２日目（ＥＯＴ）まで、処置期中のあらかじめ決定された時点において安全性について評価される。ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入後、患者は、安全性モニタリングのために、追加の４時間、処置施設に留まり、その後、１４日間（週末を除く）、毎日、戻り、続いて、２１日目および２８日目に毎週来院、その後、ＥＯＴとして４２日目の来院を要求される。施設内ガイダンスに従って、患者は、毒性モニタリングのためにＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入後、入院し続ける場合がある。入院の延長は、ＡＥと見なされない。

イメージングスキャンは、改定Ｌｕｇａｎｏ応答判定基準（Ｃｈｅｓｏｎら、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（２０１４） ３２：３０５９～３０６８）により評価される場合、治験責任医師によりその地方で再検討される。

患者は、薬物動態性質、加えて自家ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔの免疫原性および免疫学的性質を特徴づけるために探索的バイオマーカー評価を受ける。分析のために収集された血液試料の優先順位付けに関する詳細は、実験マニュアルに含まれている。研究処置前およびその間の様々な時点で、治験責任医師により評価される場合、臨床的に実行可能であれば、血液および組織生検試料が収集される。これらのデータは、治療成績を支配する機構をさらに分析するために、加えて、治療有効性および／または失敗と相関するバイオマーカー候補を同定するために、用いられる。

４２日目のＥＯＴ来院後、患者は、Ｍ１２に終わる、処置後フォローアップ期に入る。安全性、有効性、および生存期間についてのフォローアップは、３ヶ月ごとに、継続する。その後、患者は、長期フォローアップ（ＬＴＦＵ）へ入る；有効性についてのフォローアップは、３ヶ月ごと、Ｍ２４まで続く；安全性および生存期間についてのフォローアップは、６ヶ月ごと、Ｍ１３からＭ６０（５年目）まで、その後、毎年、最長１５年間、疾患進行、死亡、コンセントの取り消し、新しい抗癌治療の開始、または研究の終了まで、続く。

研究デザインおよび研究手順の概要は図４および５に提供されている。
３．５ 研究処置
３．５．１ リンパ球除去化学療法
患者は、ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入の５日前（すなわち、－５日目）に開始して、連続した３日間、ＩＶ注入を介して与えられるフルダラビン（３０ｍｇ／ｍ^２／日）（３０分間にわたってＩＶ注入）およびベンダムスチン（７０ｍｇ／ｍ^２／日）を用いたＬＤ化学療法を受ける。

３．５．２ ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ注入
ＣＤ３０．ＣＡＲ－Ｔ細胞は、以下における単回ＩＶ注入として０日目に投与される：
ＤＬ１：２×１０^８細胞／ｍ^２
ＤＬ２：４×１０^８細胞／ｍ^２
ＤＬ３：６×１０^８細胞／ｍ^２

Claims (26)

1. 対象においてＣＤ３０陽性癌を処置する方法であって、
   （ｉ）リンパ球除去化学療法を前記対象に投与するステップ、および
   （ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ
   を含む、方法。
2. ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための、ＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞の集団であって、前記方法が
   （ｉ）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および
   （ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ
   を含む、集団。
3. ＣＤ３０陽性癌を処置する方法における使用のための医薬の製造におけるＣＤ３０特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞の集団の使用であって、前記方法が
   （ｉ）リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップ、および
   （ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ－Ｔ細胞を前記対象に投与するステップ
   を含む、使用。
4. リンパ球除去化学療法を対象に投与するステップが、フルダラビンおよびベンダムスチンを投与することを含む、請求項１に記載の方法、請求項２に記載の使用のための集団、または請求項３に記載の使用。
5. 前記方法が、フルダラビンを１日あたり１５～６０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した２～６日間、投与するステップを含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
6. 前記方法が、フルダラビンを１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与するステップを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
7. 前記方法が、ベンダムスチンを１日あたり３５～１４０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した２～６日間、投与するステップを含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
8. 前記方法が、ベンダムスチンを１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、投与するステップを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
9. 前記方法が、５×１０^７個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２～１×１０^９個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２を対象に投与するステップを含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
10. 前記方法が、１×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２～６×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２を対象に投与するステップを含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
11. 前記方法が
    （ｉ）フルダラビンを１日あたり３０ｍｇ／ｍ^２の用量で、およびベンダムスチンを１日あたり７０ｍｇ／ｍ^２の用量で、連続した３日間、対象に投与するステップ、ならびに
    （ｉｉ）引き続いて、ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、２×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２～６×１０^８個のＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞／ｍ^２の用量で前記対象に投与するステップ
    を含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
12. ＣＤ３０陽性癌が、血液癌、固形癌、造血器悪性腫瘍、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型、Ｔ細胞白血病、Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型、ＥＢＶ陽性Ｂ細胞リンパ腫、ＥＢＶ陽性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫、進行性全身性マスト細胞腫、胚細胞性腫瘍、および精巣胎芽性癌から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
13. ＣＤ３０陽性癌が、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫非特定型、節外性ＮＫ／Ｔ細胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型、および原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫から選択される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
14. 対象が以前、ＣＤ３０陽性癌についての治療が不成功であった、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
15. ＣＤ３０陽性癌が再発性または不応性ＣＤ３０陽性癌である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
16. ＣＤ３０特異的ＣＡＲ発現Ｔ細胞が、（ｉ）ＣＤ３０と特異的に結合する抗原結合性ドメイン、（ｉｉ）膜貫通ドメイン、および（ｉｉｉ）シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲを含み、前記シグナル伝達ドメインが、（ａ）ＣＤ２８の細胞内ドメインに由来したアミノ酸配列および（ｂ）免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含むアミノ酸配列を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
17. 前記シグナル伝達ドメインが、配列番号２６と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６に記載の方法、使用のための集団、または使用。
18. 前記膜貫通ドメインが、ＣＤ２８の膜貫通ドメインに由来する、請求項１６または１７に記載の方法、使用のための集団、または使用。
19. 前記膜貫通ドメインが、配列番号２０と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６～１８のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
20. 前記抗原結合性ドメインが、配列番号１４と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列、および配列番号１５と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６～１９のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
21. 前記抗原結合性ドメインが、配列番号１８と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６～２０のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
22. 前記シグナル伝達ドメインが、（ａ）ＣＤ３ζの細胞内ドメインに由来したアミノ酸配列を含む、請求項１６～２１のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
23. 前記シグナル伝達ドメインが、配列番号２５と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６～２２のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
24. 前記ＣＡＲが、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に提供されるヒンジ領域を追加として含む、請求項１６～２３のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
25. 前記ヒンジ領域が、配列番号３３と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６～２４のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
26. 前記ＣＡＲが、配列番号３５または３６と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１６～２５のいずれか一項に記載の方法、使用のための集団、または使用。
    

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