JP2023523961A - キラルピペラジン－２－カルボン酸の調製のための方法 - Google Patents
キラルピペラジン－２－カルボン酸の調製のための方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023523961A JP2023523961A JP2022565589A JP2022565589A JP2023523961A JP 2023523961 A JP2023523961 A JP 2023523961A JP 2022565589 A JP2022565589 A JP 2022565589A JP 2022565589 A JP2022565589 A JP 2022565589A JP 2023523961 A JP2023523961 A JP 2023523961A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- formula
- piperazine
- carboxylic acid
- chiral
- hydrogen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- JSSXHAMIXJGYCS-UHFFFAOYSA-N piperazin-4-ium-2-carboxylate Chemical class OC(=O)C1CNCCN1 JSSXHAMIXJGYCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 29
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 20
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 19
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 18
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 17
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- BRYCUMKDWMEGMK-UHFFFAOYSA-N piperazine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1CNCCN1 BRYCUMKDWMEGMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 claims description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- -1 aliphatic alcohols Chemical class 0.000 claims description 13
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 13
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 12
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 11
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 11
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 9
- JSSXHAMIXJGYCS-BYPYZUCNSA-N (S)-piperazine-2-carboxylic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]1CNCC[NH2+]1 JSSXHAMIXJGYCS-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 8
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 5
- YRYAXQJXMBETAT-ZETCQYMHSA-N (2s)-4-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]piperazin-1-ium-2-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCN[C@H](C(O)=O)C1 YRYAXQJXMBETAT-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 4
- WJRBRSLFGCUECM-UHFFFAOYSA-N hydantoin Chemical compound O=C1CNC(=O)N1 WJRBRSLFGCUECM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940091173 hydantoin Drugs 0.000 claims description 4
- 125000006272 (C3-C7) cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 claims description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 claims description 3
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 2
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 claims 1
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 claims 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 abstract description 7
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical group [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 6
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 5
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 4
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 4
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- WNSDZBQLMGKPQS-FHNDMYTFSA-N (2s)-piperazine-1,4-diium-2-carboxylic acid;dichloride Chemical compound Cl.Cl.OC(=O)[C@@H]1CNCCN1 WNSDZBQLMGKPQS-FHNDMYTFSA-N 0.000 description 3
- AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 1-[6-[4-(5-chloro-6-methyl-1H-indazol-4-yl)-5-methyl-3-(1-methylindazol-5-yl)pyrazol-1-yl]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound ClC=1C(=C2C=NNC2=CC=1C)C=1C(=NN(C=1C)C1CC2(CN(C2)C(C=C)=O)C1)C=1C=C2C=NN(C2=CC=1)C AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004846 x-ray emission Methods 0.000 description 3
- JSSXHAMIXJGYCS-SCSAIBSYSA-N (R)-piperazine-2-carboxylic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@H]1CNCC[NH2+]1 JSSXHAMIXJGYCS-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 2
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 description 2
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 2
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-5-amino-2-[[2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LJCZNYWLQZZIOS-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl chloride Chemical compound ClC(=O)OCC(Cl)(Cl)Cl LJCZNYWLQZZIOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004217 4-methoxybenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1OC([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- ZMGMDXCADSRNCX-UHFFFAOYSA-N 5,6-dihydroxy-1,3-diazepan-2-one Chemical compound OC1CNC(=O)NCC1O ZMGMDXCADSRNCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010025188 Alcohol oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004092 Amidohydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000531 Amidohydrolases Proteins 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 241001453380 Burkholderia Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101710125058 Leucine aminopeptidase 2, chloroplastic Proteins 0.000 description 1
- 108010038049 Mating Factor Proteins 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 241000588756 Raoultella terrigena Species 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108010084455 Zeocin Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 229910001854 alkali hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- UWTDFICHZKXYAC-UHFFFAOYSA-N boron;oxolane Chemical compound [B].C1CCOC1 UWTDFICHZKXYAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical class OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 108010062049 chirobiotic T Proteins 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 150000001469 hydantoins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWCMIVBLVUHDHK-ZSNHEYEWSA-N phleomycin D1 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC[C@@H](N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCCNC(N)=N)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C CWCMIVBLVUHDHK-ZSNHEYEWSA-N 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- IPEHBUMCGVEMRF-SFIIULIVSA-N pyrazine-2-carboxamide Chemical group N[11C](=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-SFIIULIVSA-N 0.000 description 1
- QDIIJZMTCFEFKJ-UHFFFAOYSA-N pyrazine;hydrate Chemical compound O.C1=CN=CC=N1 QDIIJZMTCFEFKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- QQWYQAQQADNEIC-RVDMUPIBSA-N tert-butyl [(z)-[cyano(phenyl)methylidene]amino] carbonate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)O\N=C(/C#N)C1=CC=CC=C1 QQWYQAQQADNEIC-RVDMUPIBSA-N 0.000 description 1
- QQWYQAQQADNEIC-UHFFFAOYSA-N tert-butyl [[cyano(phenyl)methylidene]amino] carbonate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)ON=C(C#N)C1=CC=CC=C1 QQWYQAQQADNEIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004876 x-ray fluorescence Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000007222 ypd medium Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
- C07D295/02—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring hetero elements
- C07D295/023—Preparation; Separation; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
- C07D295/02—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring hetero elements
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
- C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
- C07D241/04—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
- C07D295/02—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring hetero elements
- C07D295/027—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring hetero elements containing only one hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
本発明は、式（Ｉ）TIFF2023523961000036.tif2643のキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の調製のための新規な方法に関する。式（Ｉ）のキラルピペラジン－２－カルボン酸誘導体は、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置および予防に有用な縮合ヘテロアリールジヒドロピリミジンの調製のための重要な中間体である。
Description
本発明は、式Ｉ
のキラルピペラジン－２－カルボン酸を調製のための新規な方法に関する。
式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸誘導体は、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置および予防に有用な縮合ヘテロアリールジヒドロピリミジンの調製のための重要な中間体である（ＰＣＴ公報国際公開第２０１５／１３２２７６号）。
キラルピペラジン－２－カルボン酸の調製のための方法は、Ｅｉｃｈｈｏｒｎ ｅｔ ａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．１５，ｐｐ．２５３３－２５３６，１９９７に記載されている。ラセミピペラジン－２－カルボキサミドは、クレブシエラ・テルリゲナ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ）およびバークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）種由来の細菌細胞で速度論的に分離されている。しかしながら、技術的規模の合成のためには、単離され、特徴付けられた酵素を使用して、より高い酵素濃度および基質濃度でプロセスを行うことが望ましいであろう。したがって、本発明の目的は、技術的規模で実行することができるプロセスを作成することであった。
目的は、以下に概説されるような方法で達成することができ、この方法は、
ａ）式ＩＩ
のピラジン－２－カルボキサミドの接触水素化によって、式ＩＩＩ
ピペラジン－２－カルボキサミドを形成する工程
および
ｂ）式ＩＩＩのピペラジン－２－カルボキサミドをヒドロラーゼで酵素変換して、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩を形成する工程
を含む。
ａ）式ＩＩ
および
ｂ）式ＩＩＩのピペラジン－２－カルボキサミドをヒドロラーゼで酵素変換して、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩を形成する工程
を含む。
以下の定義は、本明細書において本発明を説明するために使用される種々の用語の意味および範囲を例示し、定義するために記載されている。
「アミノ保護基」という用語は、アミノ基の反応性を妨げるために従来使用されている酸またはルイス酸感受性置換基を指す。適切な酸またはルイス酸感受性アミノ保護基は、Ｇｒｅｅｎ Ｔ．，「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，４ｔｈ Ｅｄ．ｂｙ Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００７，Ｃｈａｐｔｅｒ ７，６９６ ｆｆ．に記載されている。したがって、ＰＧに適したアミノ保護基は、Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）、ベンジル、４－メトキシベンジル、ベンズヒドリル、Ｆｍｏｃ（フルオレニルメトキシカルボニル）、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ｍｏｚ（ｐ－メトキシベンジルカルボニル）、Ｔｒｏｃ（２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル）、Ｔｅｏｃ（２－（トリメチルシリル）エトキシカルボニル）、Ａｄｏｃ（アダマントキシカルボニル）、ホルミル、アセチルまたはシクロブトキシカルボニルから選択することができる。好ましいアミノ保護基はＢｏｃである。
螺旋状結合
は
を表し、したがって分子のキラリティーを示す。
化学構造中にキラル炭素が存在する場合はいつでも、そのキラル炭素に関連する全ての立体異性体が、純粋な立体異性体およびそれらの混合物として構造中に包含されることが意図される。
工程ａ）
工程ａ）は、式ＩＩ
のピラジン－２－カルボキサミドの接触水素化によって、式ＩＩＩ
のピペラジン－２－カルボキサミドを形成する工程を必要とする。
工程ａ）は、式ＩＩ
ピラジン－２－カルボキサミドは、広く市販されている化合物である。
接触水素化は、典型的には、金属水素化触媒および溶媒の存在下で水素を用いて行われる。
金属水素化触媒中の適切な金属は、パラジウムまたは白金、好ましくはパラジウムである。
金属は、原則として、炭素または酸化アルミニウムから選択される不活性支持体、好ましくは炭素上に適用される。支持体上の通常の金属負荷（ｗ／ｗ）は、０．５％～２０％、好ましくは３％～１５％、より好ましくは８～１２％である。最も好ましい金属水素化触媒は、１０％の炭素上パラジウム（１０％Ｐｄ／Ｃ）である。
金属水素化触媒は、通常、ピラジン－２－カルボキサミド出発物質に対して３％～２０ｗ／ｗ％、典型的には１０ｗ／ｗ％の量で使用される。
溶媒は、メタノールもしくはエタノール等の脂肪族アルコールから選択される有機溶媒または水またはそれららの混合物であり得る。好ましい溶媒は水である。
前記接触水素化は、２０℃～溶媒の沸点、好ましくは３０℃～６０℃、より好ましくは３５℃～４５℃の反応温度にて、５ｂａｒ～５０ｂａｒ、好ましくは１５ｂａｒ～２５ｂａｒの水素圧で行われる。
最も好ましい実施形態では、接触水素化は、水中１０％ Ｐｄ／Ｃ １０ｗ／ｗ％触媒を用いて、４０℃の反応温度および２０ｂａｒの水素圧で実施される。
得られたピペラジン－２－カルボキサミドは、反応混合物からの触媒の分離およびその後の濾液からの溶媒の除去等の、当業者に公知の手順によって単離することができる。
しかし、好ましい実施形態では、ピペラジン－２－カルボキサミドは単離されず、反応混合物から触媒を分離した後、工程ｂ）でさらに処理される。
さらに好ましい実施形態では、触媒は、反応混合物から分離した後、性能を著しく低下させることなく、数回、典型的には少なくとも５回再使用することができる。適用可能であれば、触媒性能の低下は、新鮮な触媒を添加することによって補償することができる。
工程ｂ）
工程ｂ）は、式ＩＩＩのピペラジン－２－カルボキサミドをヒドロラーゼで酵素変換して、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸を形成することを必要とする。
工程ｂ）は、式ＩＩＩのピペラジン－２－カルボキサミドをヒドロラーゼで酵素変換して、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸を形成することを必要とする。
酵素変換に適したヒドロラーゼは、典型的にはペプチダーゼ、アミダーゼまたはそれらの混合物である。
好ましい実施形態において、式Ｉａ
の（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸を、少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９８％の鏡像体過剰率で形成する能力を有するヒドロラーゼが選択される。
式Ｉａの（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸を形成することができる好ましいヒドロラーゼの代表は、配列番号１のアミノ酸配列に少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％の同一であるアミノ酸配列を有する。
配列番号１
ＭＲＳＬＬＷＡＳＬＬ ＳＧＶＬＡＧＲＡＬＶ ＳＰＤＥＦＰＥＤＩＱ ＬＥＤＬＬＥＧＳＱＱ ＬＥＤＦＡＹＡＹＰＥ ＲＮＲＶＦＧＧＫＡＨ ６０
ＤＤＴＶＮＹＬＹＥＥ ＬＫＫＴＧＹＹＤＶＹ ＫＱＰＱＶＨＬＷＳＮ ＡＤＱＴＬＫＶＧＤＥ ＥＩＥＡＫＴＭＴＹＳ ＰＳＶＥＶＴＡＤＶＡ １２０
ＶＶＫＮＬＧＣＳＥＡ ＤＹＰＳＤＶＥＧＫＶ ＡＬＩＫＲＧＥＣＰＦ ＧＤＫＳＶＬＡＡＫＡ ＫＡＡＡＳＩＶＹＮＮ ＶＡＧＳＭＡＧＴＬＧ １８０
ＡＡＱＳＤＫＧＰＹＳ ＡＩＶＧＩＳＬＥＤＧ ＱＫＬＩＫＬＡＥＡＧ ＳＶＳＶＤＬＷＶＤＳ ＫＱＥＮＲＴＴＹＮＶ ＶＡＱＴＫＧＧＤＰＮ ２４０
ＮＶＶＡＬＧＧＨＴＤ ＳＶＥＡＧＰＧＩＮＤ ＤＧＳＧＩＩＳＮＬＶ ＩＡＫＡＬＴＱＹＳＶ ＫＮＡＶＲＦＬＦＷＴ ＡＥＥＦＧＬＬＧＳＮ ３００
ＹＹＶＳＨＬＮＡＴＥ ＬＮＫＩＲＬＹＬＮＦ ＤＭＩＡＳＰＮＹＡＬ ＭＩＹＤＧＤＧＳＡＦ ＮＱＳＧＰＡＧＳＡＱ ＩＥＫＬＦＥＤＹＹＤ ３６０
ＳＩＤＬＰＨＩＰＴＱ ＦＤＧＲＳＤＹＥＡＦ ＩＬＮＧＩＰＳＧＧＬ ＦＴＧＡＥＧＩＭＳＥ ＥＮＡＳＲＷＧＧＱＡ ＧＶＡＹＤＡＮＹＨＡ ４２０
ＡＧＤＮＭＴＮＬＮＨ ＥＡＦＬＩＮＳＫＡＴ ＡＦＡＶＡＴＹＡＮＤ ＬＳＳＩＰＫＲＮＴＴ ＳＳＬＨＲＲＡＲＴＭ ＲＰＦＧＫＲＡＰＫＴ ４８０
ＨＡＨＶＳＧＳＧＣＷ ＨＳＱＶＥＡ ４９６
ＭＲＳＬＬＷＡＳＬＬ ＳＧＶＬＡＧＲＡＬＶ ＳＰＤＥＦＰＥＤＩＱ ＬＥＤＬＬＥＧＳＱＱ ＬＥＤＦＡＹＡＹＰＥ ＲＮＲＶＦＧＧＫＡＨ ６０
ＤＤＴＶＮＹＬＹＥＥ ＬＫＫＴＧＹＹＤＶＹ ＫＱＰＱＶＨＬＷＳＮ ＡＤＱＴＬＫＶＧＤＥ ＥＩＥＡＫＴＭＴＹＳ ＰＳＶＥＶＴＡＤＶＡ １２０
ＶＶＫＮＬＧＣＳＥＡ ＤＹＰＳＤＶＥＧＫＶ ＡＬＩＫＲＧＥＣＰＦ ＧＤＫＳＶＬＡＡＫＡ ＫＡＡＡＳＩＶＹＮＮ ＶＡＧＳＭＡＧＴＬＧ １８０
ＡＡＱＳＤＫＧＰＹＳ ＡＩＶＧＩＳＬＥＤＧ ＱＫＬＩＫＬＡＥＡＧ ＳＶＳＶＤＬＷＶＤＳ ＫＱＥＮＲＴＴＹＮＶ ＶＡＱＴＫＧＧＤＰＮ ２４０
ＮＶＶＡＬＧＧＨＴＤ ＳＶＥＡＧＰＧＩＮＤ ＤＧＳＧＩＩＳＮＬＶ ＩＡＫＡＬＴＱＹＳＶ ＫＮＡＶＲＦＬＦＷＴ ＡＥＥＦＧＬＬＧＳＮ ３００
ＹＹＶＳＨＬＮＡＴＥ ＬＮＫＩＲＬＹＬＮＦ ＤＭＩＡＳＰＮＹＡＬ ＭＩＹＤＧＤＧＳＡＦ ＮＱＳＧＰＡＧＳＡＱ ＩＥＫＬＦＥＤＹＹＤ ３６０
ＳＩＤＬＰＨＩＰＴＱ ＦＤＧＲＳＤＹＥＡＦ ＩＬＮＧＩＰＳＧＧＬ ＦＴＧＡＥＧＩＭＳＥ ＥＮＡＳＲＷＧＧＱＡ ＧＶＡＹＤＡＮＹＨＡ ４２０
ＡＧＤＮＭＴＮＬＮＨ ＥＡＦＬＩＮＳＫＡＴ ＡＦＡＶＡＴＹＡＮＤ ＬＳＳＩＰＫＲＮＴＴ ＳＳＬＨＲＲＡＲＴＭ ＲＰＦＧＫＲＡＰＫＴ ４８０
ＨＡＨＶＳＧＳＧＣＷ ＨＳＱＶＥＡ ４９６
アスペルギルスオリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）由来のペプチダーゼ調製物であるＮｏｖｏｚｙｍｅｓ製のフラボウルザイム（登録商標）１０００Ｌ、Ａｍａｎｏ Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｎｃ製のＡｃｙｌａｓｅ Ａｍａｎｏ、およびＦｌｕｋａ製のペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属由来のＡｃｙｌａｓｅ等、いくつかの酵素または酵素混合物が市販されている。
好ましい実施形態では、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ製の酵素混合物フラボウルザイム（登録商標）１０００Ｌ、または上で定義した配列番号１の加水分解酵素を含有する酵素調製物を使用することができる。
別の好ましい実施形態では、配列番号１のヒドロラーゼは、例えばピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）等の適切な宿主で酵素を発現させ、発酵培地に分泌することによって得ることができる。
配列番号１のヒドロラーゼは、好ましくはロイシンアミドペプチダーゼ２（ＬＡＰ２）である。
あるいは、式Ｉｂ
の（Ｒ）－ピペラジン－２－カルボン酸を形成することができるヒドロラーゼを選択することができる。
（Ｒ）－エナンチオマーを形成する市販の酵素は、例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｅｎｚｙｍｅ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＡＤＤＺＹＭＥバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）プロテアーゼであり得る。
前記酵素変換は、１０℃～５０℃、好ましくは２０℃～３０°Ｃの反応温度で、前記水素化工程で使用される前記溶媒中、好ましくは水中で行われる。
基質負荷は、原則として３０ｗ／ｖ％未満、好ましくは１ｗ／ｖ％～２５ｗ／ｖ％に保たれる。
典型的には、アミノ酸が７．３～８．３の間の反応ｐＨを緩衝しているため、反応は余分な緩衝剤を必要としない。
配列番号１のヒドロラーゼのようないくつかの酵素は、適切な塩の形態で添加される亜鉛等の金属補因子の添加を必要とし得る。
酵素変換が完了すると、当業者に公知の手順にしたがって、式Ｉのピペラジン－２－カルボン酸を単離することができる。
しかしながら、好ましい実施形態において、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸との反応混合物は、反応混合物の温度が１０℃～３０℃、好ましくは１５℃～２５℃の範囲に維持されるように、１０％～３７％のＨＣｌ濃度を有する塩酸水溶液を反応混合物に添加することによって、その塩酸塩に変換される。
塩酸を添加する前に、３０ｍｂａｒ～１２０ｍｂａｒの減圧下、３０℃～５０℃の温度で反応混合物を濃縮することがさらに好ましい。
これらの条件下で、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸、好ましくは式Ｉａのピペラジン－２－カルボン酸は、通常、塩酸塩として沈殿し、フィルタにかけ、フィルタケーキを塩酸水溶液で洗浄し、乾燥した後、結晶形態で得ることができる。
工程ｃ）
工程ｃ）は、任意であり、アミノ保護基ＰＧを導入して式ＩＶ
（式中、ＰＧはアミノ保護基を表す）
のキラルピペラジン－２－カルボン酸を形成することを必要とする。
工程ｃ）は、任意であり、アミノ保護基ＰＧを導入して式ＩＶ
のキラルピペラジン－２－カルボン酸を形成することを必要とする。
適切なアミノ保護基は上に定義されるとおりであり、最も好ましいアミノ保護基ＰＧはＢｏｃ（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）である。
Ｂｏｃ基の導入には、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（Ｂｏｃ２Ｏ）または２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルオキシイミノ）－２－フェニルアセトニトリル（Ｂｏｃ ＯＮ）等の典型的なＢｏｃ化剤を使用することができるが、好ましくはＢｏｃ２Ｏを使用することができる。
前記反応は、通常、炭酸カリウム、炭酸ナトリウムまたは炭酸カルシウム等のアルカリ炭酸塩、炭酸水素ナトリウム等のアルカリ炭酸水素塩、水酸化ナトリウム等のアルカリ水酸化物またはトリエチルアミン等の第３級アミンから選択される塩基の存在下で行われる。好ましくは、炭酸アルカリ、より好ましくは炭酸カリウムが使用される。適切な溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトン、アセトニトリル、ジオキサンまたはそれらの混合物である。好ましい実施形態において、水とアセトンとの混合物が使用される。
反応は、－１５℃～３０℃、特に１５℃～３０℃の温度で行われる。
好ましい実施形態において、式ＩＶａ
の（２Ｓ）－４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－２－カルボン酸が形成される。
本発明のさらなる実施形態において、本発明の方法は、式Ｘ
（式中、
Ｒ１は、ハロゲンまたはＣ１－６－アルキルであり、
Ｒ２は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ４は、Ｃ１－６－アルキルであり；
Ｒ５は、水素またはカルボキシであり；
Ｒ６は、水素であり；
Ｒ７は、Ｃ１－６－アルキル、Ｃ３－７－シクロアルキル、－ＣｍＨ２ｍ－ＣＯＯＨ、－ＣｍＨ２ｍ－Ｃ３－７－シクロアルキル－ＣＯＯＨまたはカルボキシフェニルであり；
ｍは、１～６である）
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはエナンチオマーもしくはジアステレオマーの調製のための方法に適用し得る。式Ｘの化合物は、ｍおよびＲ１～Ｒ７の意味および定義ならびにそれらのプロセスと共に、ＰＣＴ公開国際公開第２０１５／１３２２７６号に開示されており、これは参照により本明細書に組み込まれる。式Ｘは、国際公開第２０１５／１３２２７６号（第２２頁）の式ＩＡＡに対応する。
Ｒ１は、ハロゲンまたはＣ１－６－アルキルであり、
Ｒ２は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ４は、Ｃ１－６－アルキルであり；
Ｒ５は、水素またはカルボキシであり；
Ｒ６は、水素であり；
Ｒ７は、Ｃ１－６－アルキル、Ｃ３－７－シクロアルキル、－ＣｍＨ２ｍ－ＣＯＯＨ、－ＣｍＨ２ｍ－Ｃ３－７－シクロアルキル－ＣＯＯＨまたはカルボキシフェニルであり；
ｍは、１～６である）
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはエナンチオマーもしくはジアステレオマーの調製のための方法に適用し得る。式Ｘの化合物は、ｍおよびＲ１～Ｒ７の意味および定義ならびにそれらのプロセスと共に、ＰＣＴ公開国際公開第２０１５／１３２２７６号に開示されており、これは参照により本明細書に組み込まれる。式Ｘは、国際公開第２０１５／１３２２７６号（第２２頁）の式ＩＡＡに対応する。
式ＸＸの化合物がより好ましく、
式中、Ｒ１～Ｒ４およびＲ７は上に定義されるとおりである。
式ＸＸの化合物の調製のための方法における必須の中間体は、中間体ＩＸまたはそのエナンチオマーもしくはジアステレオマーであり、
式中、Ｒ７は、上に概説されるとおりである。
式Ｘの化合物の調製は、
ｄ）式ＩＶ
（式中、ＰＧはアミノ保護基である）
のキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の変換工程であって、アミンＲ７－ＮＨ２（式中、Ｒ７は上記のとおりである）を用いて、カップリング剤および塩基の存在下で、式Ｖ
（式中、ＰＧおよびＲ７は上記のとおりである）
の混合尿素またはその塩を形成する、式ＩＶのキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の変換工程；
ｅ）式Ｖの混合尿素を環化して式ＶＩ
（式中、ＰＧおよびＲ７は上記のとおりである）
のヒダントインを形成する工程；
ｆ）式ＶＩのヒダントインを還元して式ＶＩＩ
（式中、ＰＧおよびＲ７は上記のとおりである）
の環状尿素を形成する工程；および
ｇ）脱保護および式ＩＸの化合物の形成の工程
をさらに含む。
ｄ）式ＩＶ
のキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の変換工程であって、アミンＲ７－ＮＨ２（式中、Ｒ７は上記のとおりである）を用いて、カップリング剤および塩基の存在下で、式Ｖ
の混合尿素またはその塩を形成する、式ＩＶのキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の変換工程；
ｅ）式Ｖの混合尿素を環化して式ＶＩ
のヒダントインを形成する工程；
ｆ）式ＶＩのヒダントインを還元して式ＶＩＩ
の環状尿素を形成する工程；および
ｇ）脱保護および式ＩＸの化合物の形成の工程
をさらに含む。
好ましい実施形態において、中間体ＩＸは式ＩＸａまたはＩＸｂ
（式中、Ｒ７は、本明細書において定義されるとおりである）
のものであってもよい。
のものであってもよい。
好ましい実施形態において、中間体ＩＸは、式ＩＸａのものであってもよい。
式ＩＶｂのキラルピペラジン－２－カルボン酸誘導体の塩は、当技術分野の当業者に公知の方法によって調製することができる。
ナトリウム塩は、例えば、Ｍ．Ｌａａｒｓ ｅｔ ａｌ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ ２１（２０１０）５６２－５６５の４．３．６の例と同様に、式ＩＶのキラルピペラジン－２－カルボン酸誘導体をメタノール水酸化ナトリウム水溶液と反応させることによって調製することができる。
スキーム１は、中間体ＩＸの形成をさらに示す。
スキーム１
混合尿素（Ｖ）は、アミンＲ７’－ＮＨ２塩から、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）等のカップリング剤およびトリエチルアミン等の適切な塩基の存在下で、キラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩（ＩＶｂ）とカップリングさせることによって調製することができる。適切なキラルピペラジン－２－カルボン酸塩（ＩＶｂ）は、ナトリウム塩もしくはカリウム塩のようなアルカリ金属塩またはトリエチルアンモニウム塩のようなアンモニウム塩である。混合尿素（Ｖ）を塩化オキサリルで適切に環化すると、ヒダントイン（ＶＩ）が得られる。ＢＦ３・ＴＨＦの存在下でのＢＨ３・ＴＨＦまたはＮａＢＨ４から選択される還元剤によるその後の還元により、環状尿素（ＶＩＩ）を得ることができる。Ｒ７’がエステル基である場合、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム水溶液による鹸化により、対応する酸（ＶＩＩＩ）が得られる。化合物（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）のＢｏｃ脱保護は、ＭＩＢＫ中の濃ＨＣｌを用いて達成して、化合物（ＩＸ）を形成することができる。絶対配置を有する化合物（ＩＸａ）または（ＩＸｂ）は、対応するキラル出発物質化合物（ＩＶｂ）を用いたスキーム１の合成にしたがって得ることができる。
略語：
ａ％＝面積％
ＡＯＸ Ｉ＝アルコールオキシダーゼＩ
ＢＭＭＹ＝緩衝メタノール複合培地（酵母抽出物あり）
ｄｆ＝膜厚
ＧＣ＝ガスクロマトグラフィー
ＩＤ＝内径
Ｌ＝長さ
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＭＩＢＫ＝メチルイソブチルケトン
ＯＤ＝光学濃度
ＲＣＦ＝相対遠心力
ＲＲＴ＝相対保持時間
ＸＲＦ＝蛍光Ｘ線
ＹＰＤ＝酵母抽出ペプトンデキストロース
ａ％＝面積％
ＡＯＸ Ｉ＝アルコールオキシダーゼＩ
ＢＭＭＹ＝緩衝メタノール複合培地（酵母抽出物あり）
ｄｆ＝膜厚
ＧＣ＝ガスクロマトグラフィー
ＩＤ＝内径
Ｌ＝長さ
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＭＩＢＫ＝メチルイソブチルケトン
ＯＤ＝光学濃度
ＲＣＦ＝相対遠心力
ＲＲＴ＝相対保持時間
ＸＲＦ＝蛍光Ｘ線
ＹＰＤ＝酵母抽出ペプトンデキストロース
実施例１
（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸
ａ）ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミドの調製
ピラジン－２－カルボキサミド（１００ｇ、８１２ｍｍｏｌ）を圧力容器中の３００ｍＬの水に懸濁し、次いでアルゴンで不活性化した。１０％ Ｐｄ／Ｃ（無水、１０．０ｇ）をさらに３０ｍＬの水と共に反応混合物に添加して、反応器の壁をすすいだ。反応器を密封し、雰囲気を水素に交換し、反応混合物を４０℃に加熱した。雰囲気を２０ｂａｒ Ｈ２に調整し、混合物を４０℃で１８時間撹拌しながら、容器内で２０ｂａｒの一定の水素圧を維持し、ガス消費を経時的に記録した。反応器を室温に冷却し、雰囲気をアルゴンに交換し、反応の進行をＧＣ分析（変換は９９ａ％超、９７ａ％表題化合物）によって確認した。混合物をさらに１７０ｍＬの水を用いてフィルタにかけて水溶液を得、次いで、その温度を２５℃未満に保ちながら、濃（３７％）ＨＣｌ水溶液（５５ｍＬ、６５５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加することによってそのｐＨを７．８に調整した。生成物を単離せずに、得られた溶液をそのまま次の工程に供した。
（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸
ａ）ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミドの調製
ピラジン－２－カルボキサミド（１００ｇ、８１２ｍｍｏｌ）を圧力容器中の３００ｍＬの水に懸濁し、次いでアルゴンで不活性化した。１０％ Ｐｄ／Ｃ（無水、１０．０ｇ）をさらに３０ｍＬの水と共に反応混合物に添加して、反応器の壁をすすいだ。反応器を密封し、雰囲気を水素に交換し、反応混合物を４０℃に加熱した。雰囲気を２０ｂａｒ Ｈ２に調整し、混合物を４０℃で１８時間撹拌しながら、容器内で２０ｂａｒの一定の水素圧を維持し、ガス消費を経時的に記録した。反応器を室温に冷却し、雰囲気をアルゴンに交換し、反応の進行をＧＣ分析（変換は９９ａ％超、９７ａ％表題化合物）によって確認した。混合物をさらに１７０ｍＬの水を用いてフィルタにかけて水溶液を得、次いで、その温度を２５℃未満に保ちながら、濃（３７％）ＨＣｌ水溶液（５５ｍＬ、６５５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加することによってそのｐＨを７．８に調整した。生成物を単離せずに、得られた溶液をそのまま次の工程に供した。
ＧＣ方法の説明：固定相Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰ－５（Ｌ＝３０ｍ、ＩＤ＝０．３２ｍｍ、ｄｆ＝０．２５μｍ、最大温度３５０℃）；温度プログラム：１００℃から開始し、１０℃／分の加熱速度で３５０℃まで、３５０℃で２分間保持し、次いで４０℃／分で１００℃まで冷却し、１００℃で０．７５分間保持；実行時間３４．０分；入口モード：定圧；入口初期圧力：５．０ｐｓｉ；入口初期流量１００℃（開始オーブン温度）で０．７２７ｍＬ／分；１００℃での初期速度１６．０５ｃｍ／秒（開始オーブン温度）；スプリット比、スプリットフロー１：３０、４１．３８ｍＬ／分；注入量１．０μＬ；入口温度２８０℃；検出器温度３２０℃；検出器Ｈ２流量（燃料流量）４０ｍＬ／分；検出器空気流量（酸化剤流用）４００ｍＬ／分；検出器Ｎ２流量（定数構成）３０ｍＬ／分；保持時間：ピラジン－２－カルボキサミド＝４．５６分（ＲＲＴ約＝０．７１）、ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミド＝６．４６分（ＲＲＴ＝１．０）。
ｂ）ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミドの調製（触媒再使用）
ピラジン－２－カルボキサミド（１０ｇ、８１．２ｍｍｏｌ）を、２μｍフリットを有する深管を備えた圧力容器中で水５０ｍＬに懸濁した。次いで、容器をアルゴンで不活性化した。１０％ Ｐｄ／Ｃ（無水、１．０ｇ）を反応混合物に添加し、反応器を密封し、雰囲気を水素に交換し、反応混合物を４０℃に加熱した。雰囲気を２０ｂａｒ Ｈ２に調整し、混合物を４０℃で１８時間撹拌しながら、容器内で２０ｂａｒの一定の水素圧を維持し、ガス消費を経時的に記録した。反応器を室温に冷却し、雰囲気をアルゴンに交換し、反応混合物をＡｒの過圧を使用して深層管を通して反応器から濾過した。得られた溶液をＧＣおよびＸＲＦ分光法によって分析して、微量のＰｄの存在を決定した。容器を減圧し、１０ｇのピラジン－２－カルボキサミドおよび水（５０ｍＬ）を再び満たし、フィルタにかけた触媒を再使用して水素化を繰り返した。この手順を５回繰り返し、常に９８ａ％超の変換および９２ａ％超の収率（ＧＣ分析によって判断）を達成し、溶液中のＰｄのレベルは常に２ｐｐｍ超（ＸＲＦ分光分析によって判断）であった。
ピラジン－２－カルボキサミド（１０ｇ、８１．２ｍｍｏｌ）を、２μｍフリットを有する深管を備えた圧力容器中で水５０ｍＬに懸濁した。次いで、容器をアルゴンで不活性化した。１０％ Ｐｄ／Ｃ（無水、１．０ｇ）を反応混合物に添加し、反応器を密封し、雰囲気を水素に交換し、反応混合物を４０℃に加熱した。雰囲気を２０ｂａｒ Ｈ２に調整し、混合物を４０℃で１８時間撹拌しながら、容器内で２０ｂａｒの一定の水素圧を維持し、ガス消費を経時的に記録した。反応器を室温に冷却し、雰囲気をアルゴンに交換し、反応混合物をＡｒの過圧を使用して深層管を通して反応器から濾過した。得られた溶液をＧＣおよびＸＲＦ分光法によって分析して、微量のＰｄの存在を決定した。容器を減圧し、１０ｇのピラジン－２－カルボキサミドおよび水（５０ｍＬ）を再び満たし、フィルタにかけた触媒を再使用して水素化を繰り返した。この手順を５回繰り返し、常に９８ａ％超の変換および９２ａ％超の収率（ＧＣ分析によって判断）を達成し、溶液中のＰｄのレベルは常に２ｐｐｍ超（ＸＲＦ分光分析によって判断）であった。
ｃ）（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸二塩酸塩の調製
実施例１ａのｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミド溶液（１０５ｇ；８１２ｍｍｏｌを約５５５ｍＬの水にｐＨ７．８で溶解）のｐＨ調整溶液に、酵素触媒（フラボウルザイム（登録商標）１０００Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅ）、５０ｍＬ）を添加し、反応物を室温で２２時間撹拌した。反応をＨＰＬＣでモニターし、２０時間後に４７ａ％の酸形成を示した。
実施例１ａのｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミド溶液（１０５ｇ；８１２ｍｍｏｌを約５５５ｍＬの水にｐＨ７．８で溶解）のｐＨ調整溶液に、酵素触媒（フラボウルザイム（登録商標）１０００Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅ）、５０ｍＬ）を添加し、反応物を室温で２２時間撹拌した。反応をＨＰＬＣでモニターし、２０時間後に４７ａ％の酸形成を示した。
得られた反応混合物を減圧下（３０～１２０ｍｂａｒ、４５℃）で約４００ｍＬに濃縮し、続いて濃（３７％）ＨＣｌ水溶液を反応混合物（１９０ｍＬ、２．２８ｍｏｌ）に４５分間にわたって添加し、（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸二塩酸塩を沈殿させ、完全な生成物沈殿を確実にするために４時間攪拌した。
得られた結晶を濾別し、ＨＣｌ（３Ｎ、１２０ｍＬ、３６０ｍｍｏｌ）で洗浄し、減圧下（５ｍｂａｒ、４５℃、２４時間）で乾燥させ、純度８７ａ％および９９％超ｅｅの所望の生成物が収率３８％（６２ｇ）で得られた。
ＬＣキラル法の説明（ｅｅ－決定用）－固定相：Ａｓｔｅｃ Ｃｈｉｒｏｂｉｏｔｉｃ Ｔ（Ｌ＝２５ｃｍ、ＩＤ＝４．６ｍｍ、粒径＝５μｍ）。
溶離液：Ａ）リン酸カリウム５０ｍＭ ｐＨ７．０ Ｂ）メタノール；ポンププログラム：アイソクラティック９０Ａ：１０Ｂ、実行時間１３分、流量：１．０ｍＬ／分；カラムオーブン温度：１０℃；注入量：２μＬ；検出：ＤＡＤ１９８ｎｍ。
保持時間：（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸＝４．４２分、（Ｒ）－ピペラジン－２－カルボン酸＝４．８２分、ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミド＝１０．４３分。
ｃ）（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸二塩酸塩のＮＭＲデータ
１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ｐｐｍ：４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．９ Ｈｚ，１ Ｈ），３．９１（ｄｄ，Ｊ＝１４．１，３．８ Ｈｚ，１ Ｈ），３．７３（ｄｔ，Ｊ＝１４．０，３．３ Ｈｚ，１ Ｈ），３．６９－３．６３（ｍ，１ Ｈ），３．４８－３．４１（ｍ，２ Ｈ），３．３９－３．３３（ｍ，１ Ｈ）．
ｃ）（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸二塩酸塩のＮＭＲデータ
１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ｐｐｍ：４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．９ Ｈｚ，１ Ｈ），３．９１（ｄｄ，Ｊ＝１４．１，３．８ Ｈｚ，１ Ｈ），３．７３（ｄｔ，Ｊ＝１４．０，３．３ Ｈｚ，１ Ｈ），３．６９－３．６３（ｍ，１ Ｈ），３．４８－３．４１（ｍ，２ Ｈ），３．３９－３．３３（ｍ，１ Ｈ）．
ｄ）配列番号１の分取を使用した（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸の調製。
ｄ１）配列番号１の酵素調製：
酵素ＤＮＡ配列をピキア・パストリス発現／組込みプラスミドに組み込み、線状化後、相同組換えによって配列をＡＯＸ Ｉ遺伝子座にＭｕｔ＋野生型ピキア・パストリス株のゲノムに安定に組み込んだ。ゼオシン抗生物質耐性マーカーを使用して、発現カセットが組み込まれた組換え株を選択した。標的タンパク質発現は、内因性誘導性ＡＯＸ Ｉプロモーターの制御下にあり、発現されたタンパク質は、Ｓ．セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）α接合因子分泌シグナルペプチドとの切断可能なＮ末端融合を介して培養上清に分泌された。
ｄ１）配列番号１の酵素調製：
酵素ＤＮＡ配列をピキア・パストリス発現／組込みプラスミドに組み込み、線状化後、相同組換えによって配列をＡＯＸ Ｉ遺伝子座にＭｕｔ＋野生型ピキア・パストリス株のゲノムに安定に組み込んだ。ゼオシン抗生物質耐性マーカーを使用して、発現カセットが組み込まれた組換え株を選択した。標的タンパク質発現は、内因性誘導性ＡＯＸ Ｉプロモーターの制御下にあり、発現されたタンパク質は、Ｓ．セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）α接合因子分泌シグナルペプチドとの切断可能なＮ末端融合を介して培養上清に分泌された。
組換え株の単一コロニーの一晩培養物を、抗生物質選択なしのＹＰＤ培地（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｙ１３７５、既製の媒体粉末）で増殖させた。
酵素を産生するために、ＢＭＭＹ培地（１１０ｍＬ）中の発現培養物に、対応するＹＰＤ一晩培養物を５００ｍＬ振盪フラスコを使用して最終ＯＤ６００が１になるまで接種した。培養物中の標的タンパク質発現を、１％ ＭｅＯＨ（ｖ／ｖ）の添加によるＡＯＸプロモーターの活性化によって誘導した。追加の１．５％（ｖ／ｖ）メタノールを発現の３日間の過程にわたって２４時間に２回（３日間で合計６×１．５ｍＬの１００％ ＭｅＯＨ）添加し、培養物を２８℃、１８０ｒｐｍで振盪した。
３日後、発現培養上清を遠心分離（ＲＣＦ １２０００ｘｇ、１５分）によって清澄化し、－８０℃で凍結し、その後、さらなる処理工程を行わずに凍結乾燥した（－８０℃／１００μｂａｒ）。
得られた凍結乾燥粉末を、さらなる精製工程を行わずに使用した。
ｄ２）（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸の調製
ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミド（２ｇ、１５ｍｍｏｌ）を２Ｎ ＨＣｌ（６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）に溶解し、水を添加して（２ｍＬ）、ｐＨ７．８のｒａｃ－２－ピペラジンカルボキサミドの２０％（ｗ／ｖ）溶液を得た。
ｒａｃ－ピペラジン－２－カルボキサミド（２ｇ、１５ｍｍｏｌ）を２Ｎ ＨＣｌ（６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）に溶解し、水を添加して（２ｍＬ）、ｐＨ７．８のｒａｃ－２－ピペラジンカルボキサミドの２０％（ｗ／ｖ）溶液を得た。
この溶液（１ｍＬ）のアリコートに、配列番号１を含有する酵素調製物（１００ｍｇ、凍結乾燥粉末）およびＺｎＣｌ２溶液（１Ｍ、２０μＬ）を添加した。
反応物を、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ＴｈｅｒｍｏＭｉｘｅｒ Ｃ中で振盪しながら室温で２日間インキュベートした。
反応混合物は、２２ａ％および９８％超ｅｅの所望の生成物（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸を形成した。
実施例２
（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩
ａ）（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩（フラボウルザイム）の調製
実施例１ａのｒａｃ－２－ピペラジンカルボキサミド溶液（１０５ｇ；８１２ｍｍｏｌを約５５５ｍＬの水にｐＨ７．８で溶解）のｐＨ調整溶液に、酵素触媒（１００ｇ、フラボウルザイム（登録商標）１０００Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ））を添加し、反応物を室温で２１時間撹拌した。反応をＨＰＬＣでモニターし、５２％の酸形成を示した。
（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩
ａ）（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩（フラボウルザイム）の調製
実施例１ａのｒａｃ－２－ピペラジンカルボキサミド溶液（１０５ｇ；８１２ｍｍｏｌを約５５５ｍＬの水にｐＨ７．８で溶解）のｐＨ調整溶液に、酵素触媒（１００ｇ、フラボウルザイム（登録商標）１０００Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ））を添加し、反応物を室温で２１時間撹拌した。反応をＨＰＬＣでモニターし、５２％の酸形成を示した。
得られた反応混合物を減圧下（３０～１２０ｍｂａｒ、４５℃）で約５３０ｇに濃縮し、続いて２０～２３℃に冷却（氷冷）した後、濃（３７％）ＨＣｌ水溶液（１９０ｍＬ、２．２８ｍｏｌ、２．８当量）を３０分間にわたって添加して、（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩を沈殿させた。さらに４．５時間撹拌することにより、室温での完全な生成物沈殿が保証される。
得られた結晶を濾別し、ＨＣｌ（３Ｎ、１２０ｍＬ、３６０ｍｍｏｌ）で洗浄し、高真空で一晩乾燥させると、純度９７ａ％および９９．１％ｅｅの所望の生成物が収率４０％（６９ｇ）で得られた。
ｂ１）ロイシンアミドペプチダーゼ２（ＬＡＰ２）の酵素調製
当技術分野の当業者に知られているように、１０Ｌ規模で発酵槽内で発現を行ったという変形を用いて、実施例１、ｄ１）と同様に酵素を産生した。
当技術分野の当業者に知られているように、１０Ｌ規模で発酵槽内で発現を行ったという変形を用いて、実施例１、ｄ１）と同様に酵素を産生した。
２並列培養１０ＬのＬＡＰ ２フェドバッチピキア・パストリスバイオリアクターを、グリセロールを炭素源として使用してフェドバッチモードで２６時間増殖させた。グリセロール供給物を枯渇させた後、培養体積の３％の１００％メタノールをパルス添加することによって組換えＬＡＰ２タンパク質発現を誘導し、これを前のパルスを枯渇させた後に約２６回繰り返し、合計９６時間のランタイムを行った。上清を合わせ、０．２μＭ ＰＥＳ Ｒｅｐｌｉｇｅｎ中空糸膜（１２Ｌ／分の供給流、０．０７ＭＰａの膜貫通圧）を用いてフィルタにかけ；残りの１．２Ｌの保持液を４×５００ｍＬのｄＨ２Ｏで洗浄し、次いで廃棄した。得られた濾液を、１０ｋＤａ ｍＰＥＳ Ｒｅｐｌｉｇｅｎ中空糸膜（１２Ｌ／分の供給流、０．１２ＭＰａの膜貫通圧）を用いて約２Ｌに濃縮した。濃縮物を、１０Ｌの２５ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液、１００ｍＭ ＮａＣｌ、０．５ｍＭ ＺｎＣｌ２、ｐＨ５．６緩衝液を使用して、１２Ｌ／分の供給流および０．１２ＭＰａの膜貫通圧で一定体積で緩衝液交換した。次いで、得られた溶液を約１．２５Ｌに濃縮し、０．２μｍ ｍＰＥＳボトルトップフィルタを用いてフィルタ滅菌した。
ｂ２）（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩（ＬＡＰ２）の調製
実施例１ａのｒａｃ－２－ピペラジンカルボキサミド溶液（１０５ｇ；８１２ｍｍｏｌを約５５５ｍＬの水にｐＨ７．８で溶解）のｐＨ調整溶液に、酵素触媒を添加し（２５ｍｌのロイシンアミドペプチダーゼ２（ＬＡＰ２）製剤；配列番号１）、反応物を室温で１９時間攪拌した。反応をＨＰＬＣでモニターし、２０時間後に５３％の酸形成を示した。得られた反応混合物を減圧下（３０～１２０ｍｂａｒ、４５℃）で約５００ｇに濃縮し、続いて２０～２３℃に冷却（氷冷）した後、濃（３７％）ＨＣｌ水溶液（１９０ｍＬ、２．２８ｍｏｌ、２．８当量）を３０分間にわたって添加して、（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩を沈殿させた。さらに４．５時間撹拌することにより、室温での完全な生成物沈殿が保証される。
実施例１ａのｒａｃ－２－ピペラジンカルボキサミド溶液（１０５ｇ；８１２ｍｍｏｌを約５５５ｍＬの水にｐＨ７．８で溶解）のｐＨ調整溶液に、酵素触媒を添加し（２５ｍｌのロイシンアミドペプチダーゼ２（ＬＡＰ２）製剤；配列番号１）、反応物を室温で１９時間攪拌した。反応をＨＰＬＣでモニターし、２０時間後に５３％の酸形成を示した。得られた反応混合物を減圧下（３０～１２０ｍｂａｒ、４５℃）で約５００ｇに濃縮し、続いて２０～２３℃に冷却（氷冷）した後、濃（３７％）ＨＣｌ水溶液（１９０ｍＬ、２．２８ｍｏｌ、２．８当量）を３０分間にわたって添加して、（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩を沈殿させた。さらに４．５時間撹拌することにより、室温での完全な生成物沈殿が保証される。
得られた結晶を濾別し、ＨＣｌ（３Ｎ、１２０ｍＬ、３６０ｍｍｏｌ）で洗浄し、高真空で一晩乾燥させると、純度９８ａ％および９９％超ｅｅの所望の生成物が収率４１％（６９ｇ）で得られた。
実施例３
ａ）（２Ｓ）－４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－２－カルボン酸の調製
（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸二塩酸塩（１０．８ｇ；５０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（７．３ｇ；５３ｍｍｏｌ）をアセトン水溶液（アセトン１７ｇおよび水８５ｇ）中で合わせた。得られた溶液をセライト（１ｇ）でフィルタにかけ、前の工程から残っている酵素残渣を除去した。アセトン（１７ｇ）中のＢｏｃ無水物（１２ｇ）の溶液を４時間にわたって溶液に投入し、その間に生成物が徐々に結晶化した。投入終了後、水（２ｇ）中重炭酸カリウム（０．４２ｇ）を用いて反応混合物のｐＨをｐＨ６からｐＨ７に戻した。撹拌を一晩続けて、完全な生成物沈殿を確実にした。残渣をフィルたにかけ、アセトン水溶液（アセトン１１ｇおよび水１ｇ）およびアセトン（１２ｇ）で洗浄し、湿潤ケーキを４５℃／１２ｍｂａｒで一晩乾燥させて、表題化合物８．８ｇを得た。
ａ）（２Ｓ）－４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－２－カルボン酸の調製
（Ｓ）－ピペラジン－２－カルボン酸二塩酸塩（１０．８ｇ；５０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（７．３ｇ；５３ｍｍｏｌ）をアセトン水溶液（アセトン１７ｇおよび水８５ｇ）中で合わせた。得られた溶液をセライト（１ｇ）でフィルタにかけ、前の工程から残っている酵素残渣を除去した。アセトン（１７ｇ）中のＢｏｃ無水物（１２ｇ）の溶液を４時間にわたって溶液に投入し、その間に生成物が徐々に結晶化した。投入終了後、水（２ｇ）中重炭酸カリウム（０．４２ｇ）を用いて反応混合物のｐＨをｐＨ６からｐＨ７に戻した。撹拌を一晩続けて、完全な生成物沈殿を確実にした。残渣をフィルたにかけ、アセトン水溶液（アセトン１１ｇおよび水１ｇ）およびアセトン（１２ｇ）で洗浄し、湿潤ケーキを４５℃／１２ｍｂａｒで一晩乾燥させて、表題化合物８．８ｇを得た。
（２Ｓ）－４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－２－カルボン酸のＮＭＲおよびＭＳデータ。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ｐｐｍ：４．３０（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６，４．１，１．０ Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．４５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．３３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．９，３．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．１５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．７，３．８ Ｈｚ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）
ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ ｍ／ｚ＝２２９．１にて。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ｐｐｍ：４．３０（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６，４．１，１．０ Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．４５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．３３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．９，３．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．１５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．７，３．８ Ｈｚ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）
ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ ｍ／ｚ＝２２９．１にて。
ｂ）（２Ｓ）－４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－２－カルボン酸の調製
（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩（５０ｇ；２４６ｍｍｏｌ）、アセトン（７７．９ｇ）および水（３４７ｇ）の混合物に、炭酸カリウム（３４ｇ；２４６ｍｍｏｌ）の水（４７．２ｇ）中溶液をゆっくり添加した。得られた溶液をセライト（５ｇ）と共に１０分間攪拌し、フィルタにかけ、前の工程から残っている酵素残渣を除去した。フィルタにかけた残渣をアセトン水溶液（アセトン１３ｇおよび水３４ｇ）で洗浄した。２０℃で、Ｂｏｃ無水物（５６．４ｇ、２５９ｍｍｏｌ）のアセトン（７７．９ｇ）中の溶液を４時間にわたって溶液に投入し、その間に生成物が徐々に結晶化した。投入終了後、重炭酸カリウム（１２．３ｇ）および水（５０ｇ）からなる調製溶液１５ｍｌを用いて、反応混合物のｐＨをｐＨ５．５からｐＨ７に調整した。撹拌を一晩続けて、完全な生成物沈殿を確実にした。残渣をフィルタにかけ、アセトン水溶液（アセトン４４ｇおよび水４ｇ）およびアセトン（４０ｇ）で洗浄し、湿潤ケーキを４３℃／５ｍｂａｒで６時間乾燥させて、表題化合物３８．２５ｇを得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ｐｐｍ：４．３０（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６，４．１，１．０ Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．４５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．３３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．９，３．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．１５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．７，３．８ Ｈｚ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）
ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ ｍ／ｚ＝２２９．１にて。
（Ｓ）－ピペラジンカルボン酸二塩酸塩（５０ｇ；２４６ｍｍｏｌ）、アセトン（７７．９ｇ）および水（３４７ｇ）の混合物に、炭酸カリウム（３４ｇ；２４６ｍｍｏｌ）の水（４７．２ｇ）中溶液をゆっくり添加した。得られた溶液をセライト（５ｇ）と共に１０分間攪拌し、フィルタにかけ、前の工程から残っている酵素残渣を除去した。フィルタにかけた残渣をアセトン水溶液（アセトン１３ｇおよび水３４ｇ）で洗浄した。２０℃で、Ｂｏｃ無水物（５６．４ｇ、２５９ｍｍｏｌ）のアセトン（７７．９ｇ）中の溶液を４時間にわたって溶液に投入し、その間に生成物が徐々に結晶化した。投入終了後、重炭酸カリウム（１２．３ｇ）および水（５０ｇ）からなる調製溶液１５ｍｌを用いて、反応混合物のｐＨをｐＨ５．５からｐＨ７に調整した。撹拌を一晩続けて、完全な生成物沈殿を確実にした。残渣をフィルタにかけ、アセトン水溶液（アセトン４４ｇおよび水４ｇ）およびアセトン（４０ｇ）で洗浄し、湿潤ケーキを４３℃／５ｍｂａｒで６時間乾燥させて、表題化合物３８．２５ｇを得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ ｐｐｍ：４．３０（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６，４．１，１．０ Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．４５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．３３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．９，３．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．１５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．７，３．８ Ｈｚ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）
ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ ｍ／ｚ＝２２９．１にて。
Claims (18)
- 式Ｉ
ａ）式ＩＩ
および
ｂ）式ＩＩＩのピペラジン－２－カルボキサミドをヒドロラーゼで酵素変換して、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩を形成する工程
を含む、方法。 - 結合
- 前記接触水素化が、金属水素化触媒および溶媒の存在下で水素を用いて行われる、請求項１または２に記載の方法。
- 前記金属水素化触媒が、ＰｄまたはＰｔ、好ましくはＰｄであり、０．５ｗ／ｗ％～２０ｗ／ｗ％、好ましくは３ｗ／ｗ％～１５％、より好ましくは８～１２ｗ／ｗ％の、支持体上の金属負荷、および、炭素または酸化アルミニウム、より好ましくは炭素から選択される不活性担体を有する、請求項３に記載の方法。
- 前記溶媒は、メタノールもしくはエタノール等の脂肪族アルコールから選択される有機溶媒または水またはそれらの混合物であるが、好ましくは水である、請求項３または４に記載の方法。
- 前記接触水素化が、２０℃～前記溶媒の沸点、好ましくは３０℃～６０℃の反応温度にて、５ｂａｒ～５０ｂａｒ、好ましくは１５ｂａｒ～２５ｂａｒの水素圧で行われる、請求項３～５のいずれか一項に記載の方法。
- 工程ａ）で得られた式ＩＩＩのピペラジン－２－カルボキサミドが単離されず、工程ｂ）でインサイチュでさらに処理される、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記水素化触媒が再使用される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
- 工程ｂ）の前記酵素変換に使用される前記ヒドロラーゼが、ペプチダーゼもしくはアミダーゼまたはそれらの混合物である、請求項１に記載の方法。
- 前記ヒドロラーゼが、式Ｉａ
- 前記ヒドロラーゼが、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を有する、請求項９または１０に記載の方法。
- 前記ヒドロラーゼが、酵素混合物フラボウルザイム（登録商標）または配列番号１のヒドロラーゼを含有する酵素調製物である、請求項９または１０に記載の方法。
- 前記酵素変換が、１０℃～５０℃、好ましくは２０℃～３０°Ｃの反応温度で、前記水素化工程ａ）で使用される前記溶媒中、好ましくは水中で行われる、請求項９～１２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記酵素変換の後、前記反応温度が－１５℃～３０℃の範囲に維持されるように塩酸水溶液を反応混合物に添加することによって、式Ｉのキラルピペラジン－２－カルボン酸がその塩酸塩に変換される、請求項９～１３のいずれか一項に記載の方法。
- ｃ）アミノ保護基ＰＧを導入して式ＩＶ
のキラルピペラジン－２－カルボン酸を形成する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。 - ＰＧがＢｏｃ（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）であり、式ＩＶのキラルピペラジン－２－カルボン酸が式ＩＶａ
- 式ＩＸ
の化合物、またはそのエナンチオマーもしくは立体異性体の形成をさらに含み、
ｄ）式ＩＶ
のキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の変換工程であって、アミンＲ７－ＮＨ２（式中、Ｒ７は上記のとおりである）を用いて、カップリング剤および塩基の存在下で、式Ｖ
の混合尿素またはその塩を形成する、式ＩＶのキラルピペラジン－２－カルボン酸またはその塩の変換工程；
ｅ）式Ｖの混合尿素を環化して式ＶＩ
のヒダントインを形成する工程；
ｆ）式ＶＩのヒダントインを還元して式ＶＩＩ
の環状尿素を形成する工程；および
ｇ）脱保護および式ＩＸの化合物の形成の工程
を含む、請求項１５または１６に記載の方法。 - 式Ｘ
Ｒ１は、ハロゲンまたはＣ１－６－アルキルであり、
Ｒ２は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ４は、Ｃ１－６－アルキルであり；
Ｒ５は、水素またはカルボキシであり；
Ｒ６は、水素であり；
Ｒ７は、Ｃ１－６－アルキル、Ｃ３－７－シクロアルキル、－ＣｍＨ２ｍ－ＣＯＯＨ、－ＣｍＨ２ｍ－Ｃ３－７－シクロアルキル－ＣＯＯＨまたはカルボキシフェニルであり；
ｍは、１～６である）
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはエナンチオマーもしくはジアステレオマーの調製のための、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法の使用。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP20171689.1 | 2020-04-28 | ||
| EP20171689 | 2020-04-28 | ||
| PCT/EP2021/060771 WO2021219523A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-04-26 | Process for the preparation of a chiral piperazine-2-carboxylic acid |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023523961A true JP2023523961A (ja) | 2023-06-08 |
Family
ID=70470952
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2022565589A Pending JP2023523961A (ja) | 2020-04-28 | 2021-04-26 | キラルピペラジン－２－カルボン酸の調製のための方法 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20230175026A1 (ja) |
| EP (1) | EP4143173A1 (ja) |
| JP (1) | JP2023523961A (ja) |
| KR (1) | KR20230005290A (ja) |
| CN (1) | CN115461333A (ja) |
| AU (1) | AU2021266084A1 (ja) |
| BR (1) | BR112022021928A2 (ja) |
| CA (1) | CA3179165A1 (ja) |
| IL (1) | IL297595A (ja) |
| MX (1) | MX2022013205A (ja) |
| WO (1) | WO2021219523A1 (ja) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6214604B1 (en) * | 1995-05-08 | 2001-04-10 | Lonza Ag | Biotechnical production process of piperazine R-α-carboxylic acids and piperazine S-α-carboxylic acid amide |
| CN101648915A (zh) * | 2008-08-15 | 2010-02-17 | 中国科学院成都有机化学有限公司 | 合成及分离哌嗪-2-羧酸的方法 |
| DK3114128T3 (en) | 2014-03-07 | 2019-03-25 | Hoffmann La Roche | New 6-fused heteroaryld dihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis B virus infection |
| AR107633A1 (es) * | 2016-02-19 | 2018-05-16 | Hoffmann La Roche | Procedimiento para la preparación del ácido 4-fenil-5-alcoxicarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il-[metil]-3-oxo-5,6,8,8a-tetrahidro-1h-imidazo[1,5a]pirazin-2-il-carboxílico |
-
2021
- 2021-04-26 JP JP2022565589A patent/JP2023523961A/ja active Pending
- 2021-04-26 KR KR1020227041188A patent/KR20230005290A/ko active Search and Examination
- 2021-04-26 AU AU2021266084A patent/AU2021266084A1/en active Pending
- 2021-04-26 MX MX2022013205A patent/MX2022013205A/es unknown
- 2021-04-26 CN CN202180031458.1A patent/CN115461333A/zh active Pending
- 2021-04-26 EP EP21720759.6A patent/EP4143173A1/en active Pending
- 2021-04-26 CA CA3179165A patent/CA3179165A1/en active Pending
- 2021-04-26 IL IL297595A patent/IL297595A/en unknown
- 2021-04-26 WO PCT/EP2021/060771 patent/WO2021219523A1/en unknown
- 2021-04-26 US US17/997,337 patent/US20230175026A1/en active Pending
- 2021-04-26 BR BR112022021928A patent/BR112022021928A2/pt unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2022013205A (es) | 2022-11-14 |
| EP4143173A1 (en) | 2023-03-08 |
| CA3179165A1 (en) | 2021-11-04 |
| KR20230005290A (ko) | 2023-01-09 |
| IL297595A (en) | 2022-12-01 |
| AU2021266084A1 (en) | 2022-10-20 |
| US20230175026A1 (en) | 2023-06-08 |
| CN115461333A (zh) | 2022-12-09 |
| WO2021219523A1 (en) | 2021-11-04 |
| BR112022021928A2 (pt) | 2022-12-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11124478B2 (en) | Process for making beta 3 agonists and intermediates | |
| US8420683B2 (en) | 5 substituted hydantoins | |
| EP2123769B1 (en) | Method for producing optically active 3-aminopiperidine or salt thereof | |
| CN101952453A (zh) | ((2s,4r)-4,6-二羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基羧酸酯及使用2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶的制备方法 | |
| KR101152899B1 (ko) | 디펩티딜 펩티다아제-ⅳ 저해제 및 중간체의 개량된 제조방법 | |
| KR101152898B1 (ko) | 디펩티딜 펩티다아제-ⅳ 저해제 및 중간체의 개량된 제조방법 | |
| US20210087592A1 (en) | Enzymatic processes for the preparation of (±)-2-(difluoromethyl)-1-(alkoxycarbonyl)-cyclopropanecarboxylic acid and (±)-2-(vinyl)-1-(alkoxycarbonyl)-cyclopropanecarboxylic acid | |
| JP2023523961A (ja) | キラルピペラジン－２－カルボン酸の調製のための方法 | |
| US20200024621A1 (en) | Enzymatic process for the preparation of (1s,2r)-2-(difluoromethyl)-1-(propoxycarbonyl)cyclopropanecarboxylic acid | |
| WO2009098251A1 (en) | NOVEL CYCLOALKANONE β-SUBSTITUTED ALANINE DERIVATIVES | |
| US20020120136A1 (en) | Method of preparing cephalosporins using 4-hydroxyphenylglycine derivatives | |
| US4777286A (en) | Certain aryl or hetero-hydroxamic acid esters useful as renin inhibitors | |
| CN109836475B (zh) | 一种雷米普利杂质d转化为雷米普利的方法 | |
| JP4712688B2 (ja) | エナンチオ純粋β−アミノ酸誘導体の製造方法、及びエナンチオ純粋β−アミノ酸誘導体 | |
| US20170121330A1 (en) | Process and intermediates for the synthesis of (r)-praziquantel | |
| KR100404685B1 (ko) | 4-히드록시페닐글리신 무수물을 이용한 세팔로스포린화합물의 제조방법 | |
| US20020151722A1 (en) | Production method of beta-amino-alpha-hydroxycarboxylic acid | |
| WO1988000939A1 (en) | Optically active amino alcohol derivatives and process for their preparation | |
| US20080027211A1 (en) | Enantiopure Heterocyclic Compound Useful for the Preparation of Peptides Which Can Be Potentially Used as Medicaments | |
| JPH09255666A (ja) | ピペラジンアミド化合物及びピペラジンアミド誘導体の製造方法 | |
| JPH0867663A (ja) | １，４−ジアミノブタン−２−オール誘導体の製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20240423 |