JP2023519243A

JP2023519243A - ラファヌス・サティウス抽出物とモンモリロナイトを含む色素

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Publication number: JP2023519243A
Application number: JP2022557762A
Authority: JP
Inventors: ポルテット，ベネディクトセッネリエー; マルティネー，ジェシ; クロヴィル，クレアー; ラヴォー，アレクシス; タルデュー，アンネ－ソフィー
Original assignee: ジボダンエスエー
Priority date: 2020-03-24
Filing date: 2021-03-24
Publication date: 2023-05-10
Also published as: US20230085721A1; KR20220158782A; ZA202209398B; BR112022016407A2; WO2021191243A1; CN115335030A; GB202103524D0; EP4125783A1; GB202004239D0

Abstract

完全に植物ベースで、可食で、天然由来であると同時に優れた色および安定特徴を示す、化粧品用途のための色素が提供される。

Description

本発明は、化粧品用途、とりわけリップをカラーリングする化粧品のための色素に関する。
化粧品は、顔の外観、身体の匂いまたは質感を向上または変更するために使用される製品である。それらは一般に、自然源（ココナッツオイルなど）に由来する化合物の混合物であるか、合成または人工の場合がある。ヒトの外観を良くするために顔に適用される化粧品はメイクアップとも呼ばれ、リップスティック、マスカラ、アイシャドウ、ファンデーション、チーク、ハイライター、ブロンザーおよびいくつかの他の製品などの物品が包含される。

米国では、化粧品を規制する食品医薬品局(FDA)が、化粧品を「身体の構造や機能に影響を与えることなく、クレンジング、美化、魅力の促進、または外観の変更のために人体に適用することを意図したもの」として定義している。この広い定義には、化粧品の成分としての使用を意図したあらゆる材料が包含される。

カラー化粧品またはメイクアップは、スキン、アイ、チーク、リップ用の異なるカテゴリの製品を包括する。消費者が常に自撮りできる状態を求める傾向が強まっているため、これは成長しつつある市場である。カラー化粧品は、全体的な身体的外観を向上させ、欠陥を隠したり、特色を際立たせたりして、より健康的に見せたり、より爽やかに見せたりし得る。消費者はまた、カラー化粧品が彼らに力を与え、彼らの自信を高めることで、彼らの精神的健康を改善するのに役立ったと述べている。

4つの主なカテゴリは：ファンデーション、ほお紅、イルミネーター、フェイスブロンジングローション、クリームとパウダー、ルースパウダーとプレストパウダー、ミネラルパウダーなどのフェイスメイクアップ;アイシャドウ、アイライナー、アイブロウペンシル、コール、マスカラ、ミネラルパウダーなどのアイメイクアップ;リップスティック、リップグロス、リップペンシル、リッププランパー、ポット、パレットなどのリップメイクアップ;マニキュア、ポリッシュ、硬化剤、強化剤、ベースコート、トップコートなどのネイルメイクアップ、である。

リップカラーは現在、最も活発なカラー化粧品カテゴリであり、新規発売の３２％を占め、毎年世界中で９億本以上のリップスティックが販売されている。消費者が求める主要なパフォーマンス属性は、色（９３％）、持続性または長期耐久性（９０％）、質感（９０％）、仕上がり（８９％）である。

今日、市場に出回っているほとんどのリップスティックに使用されている赤色色素は、合成、鉱物、または粉砕されたコチニール虫に由来する。既存のカラー処方のほとんどは、合成色素に依存している。
しかし、よりクリーンで、より健康的で、より自然で、より持続可能な美容製品に対する消費者の需要が増大している。消費者の３２％が、自然／オーガニックメイクアップが筆頭の選択肢であると述べており、６３％はそれを好むが、しかしそれを常に購入するわけではない。とりわけ若い消費者はヴィーガンの（ｖｅｇａｎ）代替品を探している。
しかし消費者は、たとえ１００％天然のリップスティックであってさえも、パフォーマンスに妥協する気はない。１５％未満しか、色、カバー力、および仕上げに関してパフォーマンスの低下を受け入れないであろう。とりわけ、長期耐久性は明らかに、満たされていない消費者のニーズである。
したがって、本発明の目的は、優れた色、カバー力、長期耐久性および仕上がり特性を示す、天然由来の植物ベースの色素を提供することである。

この問題は、本発明の色素および化粧品組成物によって解決された。
第１の様態において、本発明は、微粉化されたラファヌス・サティウス（Ｒａｐｈａｎｕｓｓａｔｉｖｕｓ）Ｌ．抽出物およびモンモリロナイトクレイを含む、化粧品用途に使用するための色素を提供する。色素は、唇の着色用途での適用にとりわけ適している。

ラファヌス・サティウスＬ．は、アブラナ科に属する。一般的な名前には、レッドラディッシュ（ｒｅｄｒａｄｉｓｈ）、ガーデンラディッシュ（ｇａｒｄｅｎｒａｄｉｓｈ）またはラディッシュ（英語）、ラディ（ｒａｄｉｓ）（フランス語）、またはルオボー（ｌｕｏｂｏ）（中国語からの転記）が包含される。ラディッシュ類と、ラファヌス・サティウスＬ．（ラディッシュ）の根と、その品種と栽培品種（アブラナ科）は、色、形、サイズが様々な一般的な野菜である。ラディッシュは、それらの球状、先細り、または円筒形であり得る膨らんだ主根のために栽培される一年生または二年生のアブラナ科の作物である。根の皮の色は、アントシアニンと呼ばれる具体的な色素のゆえに、白色からピンク色、赤色、紫色、黄色、緑色、黒色までの範囲に及ぶ。

ラディッシュは、その根のために世界中で栽培および消費されている一般的な野菜である。西洋諸国では、ラディッシュは通常、根が小さく、季節が短い野菜として知られているが、極東およびアジア諸国では、多種の、根が大きく、季節が長いラディッシュが広く栽培されている。ラディッシュの主根は、その高い栄養価のゆえに、ピクルス、サラダ、カレーの形で世界中で消費されている。また、やわらかい葉は加熱調理されて葉物野菜として使用される。また、ラディッシュ抽出物は、古くから民間療法においては胃の疾患、便秘、尿路感染症、肝臓の炎症、心臓の疾患、潰瘍の治療にも使用されてきた。

ラファヌス・サティウスＬ．の根の抽出物は、例えばYunnan Rainbow Bio-tech Corp., Ltd.から市販(例えば:「Deodorized Red Radish Extract(粉末)」)され入手可能である。この抽出物の詳細な説明は、以下の例１において提供される。この抽出物は、中国で栽培されているレッドラディッシュ種のラファヌス・ラファニストルム(Raphanus raphanistrum)subsp. sativus (L.) Dominから調製される。成熟期には、このレッドラディッシュ種は長さ約１５ｃｍ、幅３～６ｃｍの円筒形の膨らんだ主根を有する。皮の色（内と外と）は紫色で、果肉の色はピンク～紫色である。ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物の代替サプライヤーは、Yunnan Tonghai Yang Natural Products Co., Ltd (「Red radish extract」)である。

植物化学的研究は、レッドラディッシュ根抽出物がアシル化アントシアニンに富むことを実証した(Yonghong Liu et al., Stability to Light, Heat, and Hydrogen Peroxide at Different pH Values and DPPH Radical Scavening Activity of Acylated Anthocyanins from Red Radish Extract. J. Agric . Food Chem. 2007, 55:3692-3701. M. Monica GIUSTI et al., Journal of food science. Characterization of Red Radish Anthocyanins 1996,(61),2)。アシル化アントシアニンは、食品システムにおける合成着色料の有望な代替品であることが示されてきている(Anna B Kowska-Barczak, Acylated anthocyanins as stable, natural food colorants-a review. Pol. J. Food Nutr. Sci.2005,14/55,(2):107-116)。

使用された植物原料の信頼性は、肉眼検査、HPTLCフィンガープリント、HPLCアントシアニンプロファイル、および種のDNA認証によって確認された。レッドラディッシュの分類法(APGIII)は以下のとおりである:
-綱:Equisetopsida
-亜綱:Magnoliidae
-上目:Rosanae
-目:Brassicales
-科:Brassicaceae
-属:Rhaphanus
-種:ラファヌス・ラファニストルム(Raphanus raphanistrum) subsp. sativus (L.)Domin

本発明の色素に使用される抽出物は、根から調製される。これらの根は、長さ約１５ｃｍ、幅３～６ｃｍの円筒形の膨らんだ直根である。皮の色は紫色で、果肉はピンク～紫色である。

ＨＰＴＬＣフィンガープリント分析のためには、ＨＰＴＬＣプレートシリカゲル６０Ｆ２５４、２０ｘ１０ｃｍを固定相として使用し、１－ブタノール／水／ギ酸４５：１５：１０（ｖ／ｖ／ｖ）を移動相として使用した。試料は、新鮮なラディッシュの根１．０ｇを１０ｍｌのエタノール（７０％）に懸濁し、１０分間超音波処理し、ボルテックスし、０．４５μｍＲＣで濾過することによって調製した。０．５μＬ、１μＬ、および２μＬの試料をそれぞれ固定相に適用し、それぞれの量の参照試料と比較した。

HPTLCプレートを移動相で展開し、乾燥させ、NP(天然物試薬)とアニスアルデヒドで処理した。結果は、NP-アニスアルデヒド処理の前後に３６６ｎｍおよび可視光で検出された。参照試料との比較により、信頼性が確認された。クロマトグラフのプロファイルは非常に類似していることが見出された。Yunnan Rainbowからの新鮮なレッドラディッシュの試料は、Ｒｆ＝０．９でより強い青色のバンドを有し、乾燥したレッドラディッシュからの参照試料よりも高いアントシアニン含有量を有していた。テスト試料は、ラファヌス・ラファニストルムｓｕｂｓｐ．ｓａｔｉｖｕｓ（Ｌ．）Ｄｏｍｉｎ．レッドラディッシュの根のフィンガープリントと一致している。

新鮮なレッドラディッシュ試料の５２０ｎｍでのＨＰＬＣ－ＤＡＤクロマトグラフィーにより、アントシアニンのプロファイル（アントシアニジンおよびアントシアノシド）が明らかになった。異なるサプライヤーからの試料は、量的には類似しているが、量が異なることが見出された。ペラルゴニジンは主要なアントシアニジン部分であることが見出され、ほとんどのアントシアノシドはカフェイン酸、フェルラ酸、マレイン酸でエステル化されていた。

本発明の色素に使用されるラファヌス・サティウスＬ．根抽出物は微粉化されている。
微粉化とは、固体材料の粒子の平均直径をマイクロメートル範囲まで低減するプロセスである。微粉化の伝統的な技術は、製粉や粉砕などの機械的手段に重点を置いている。現代の技術は、超臨界流体の特性を活用し、溶解度の原理を操作する。

モンモリロナイトクレイは、非常に柔らかいフィロシリケート塩鉱物のグループである。それはフランスの町モンモリヨンにちなんで名付けられた。スメクタイトのグループのメンバーであるモンモリロナイトは、２：１のクレイであり、中央の八面体のアルミナシートを挟む２つの四面体のシリカシートを有している。粒子は、平均直径約１μｍ、厚さ０．９６ｎｍの板形状である。モンモリロナイトクレイの個々の結晶は堅固に結合されておらず、このゆえに水が介入してクレイが膨張する可能性がある。モンモリロナイトの含水量にはばらつきがあり、水分を吸収すると体積が大幅に増加する。化学的には、水和シリケートナトリウム・カルシウム・アルミニウム・マグネシウム・水酸化物（Ｎａ，Ｃａ）_０．３３（Ａｌ，Ｍｇ）_２（Ｓｉ_４Ｏ_１０）（ＯＨ）_２・ｎＨ_２Ｏである。カリウム、鉄、およびその他の陽イオンは一般的な代替物であり、陽イオンの正確な比率はソースによって変動する。モンモリロナイトクレイは、一般的な化粧品成分であり、様々な供給源から市販され入手可能である。１つの適切な製品は、フランスのArgile du Velayによって供給される「argile blanche-rosee」（CosWHITE（商標））である。

本発明の色素は、完全に植物ベースであり、可食であり、自然由来でありながら、優れた色および安定特徴を提供することが見出された。この高性能色素はヴィーガン適合である。合成色素に代わる持続可能な代替品を提案すると同時に、より健康的でよりクリーンな美しさを求める傾向の高まりに応える新たな可能性を創出する。

本発明の色素は、アントシアニンを含む。アントシアニンは水溶性の液胞色素で、それらのｐＨに応じて赤色、紫色、青色、または黒色に見えてよい。アントシアニンが豊富な食用植物には、なかでも、ブルーベリー、ラズベリー、黒米、および黒大豆が、そしてもちろん、本発明の色素に使用されるレッドラディッシュが包含される。
アントシアニンはｐＨに依存してそれらの色が変わることが知られている。酸性条件から塩基性条件への典型的なカラースキームは、赤色～紫色～青色～緑色である。この色の変化は、ここに例示されているように、プロトン化／脱プロトン化によって生じさせられる：

これらの特徴のおかげで、所望の用途のために本発明の色素を微調整することが可能である。とりわけ、ｐＨを調整することにより、色素を特定の所望の色、例えば赤色、紫色、または青色に調整することが可能である。

例えば、色素の生成中にｐＨを約２．８に調整すると（水中の色素１ｗｔ％のｐＨは約３．０になる）、赤色（パントン１８０５）が観察される；色素の生成中にｐＨを約５．５または６．５に調整すると（水中の色素１ｗｔ％につき、それぞれ約６．８および７．０のｐＨになる）、赤～紫色（パントン５１１）が観察される；色素の生成中にｐＨを約７．５に調整すると（水中の色素１ｗｔ％のｐＨは約７．７になりる）、紫色（パントン５１８）が観察される；色素の生成中にｐＨを約８．５または９．５に調整すると（水中１ｗｔ％の色素に対してそれぞれ約９．０および９．３のｐＨになる）、青色（パントン５３２）が観察される；色素の生成中にｐＨを約１１に調整すると（水中１ｗｔ％の色素に対して約１０．３のｐＨになる）、緑色（パントン４５１）が観察される。

ｐＨは、酸および／または塩基を添加することによって調整することができる。
例えば、本発明の色素は、パントン１８０５Ｃ（５２／３９／１８におけるＬ＊／ａ＊／ｂ＊）に対応する赤色の色調を提供する。色調、強度、安定性に関して優れた性能を有することがわかっている。例えば、合成色素のＲｅｄ３６Ｌａｋｅと比較すると、１０ｗｔ％の濃度でより優れた彩度（Ｃ＊＞６０）とより高いカバー力（コントラスト比＞２４％）を実現しながら、合成参照に類似した赤色の色調を提供する。

例えば、本発明の色素は、パントン５１８Ｃ（４２／１０／－７．５でのＬ＊／ａ＊／ｂ＊）に対応する紫色の色調を提供する。色調、強度、安定性に関して優れた性能を有することがわかっている。

驚くべきことに、これらの色は、約３から約８のｐＨ範囲で唇のカラーリング用途に安定していることがわかった。より高いｐＨを使用すると、唾液のｐＨがより低いゆえに唇への適用後にわずかな色の変化が観察されてもよい。約５．５から約７．５のｐＨ範囲で最良の色安定性が観察される。いずれにせよ、ｐＨは、化粧品用途、とりわけ唇のカラーリング用途に許容される範囲内に保たれるべきである。

したがって、一態様において、本発明は赤色色素を提供する。
別の態様では、本発明は紫色色素を提供する。
あるいは、本発明の色素は、ピンク色、青色または緑色、または前述のの間の任意の色調、例えば、赤～紫色または青～緑色であってもよい。
本出願を通じて、「ｗｔ％」という表示は、重量あたりの重量（ｗ／ｗ）濃度を示す。

本発明の色素は抗酸化特性もまた特色とし、壊れやすい唇の皮膚をフリーラジカルから保護する。さまざまな標準テスト（ＯＲＡＣおよびＣＡＴ）を介して、および、ヒト表皮角化細胞に対して評価した結果、ビタミンＣ、ＢＨＴ、レスベラトロールよりも優れた抗酸化結果が示された。
本発明の色素は、油中の単純な配合を可能にし、温度および光安定性を提供する。さらに、適用中の唇の滑り感を高めることが見出されている。

本発明の色素はまた、安全で、コスモス（Ｃｏｓｍｏｓ）認証に準拠および中国基準に適合しており、クルエルティフリーでありヴィーガンである。よりクリーンで、より健康的で、より天然で、より持続可能な美容製品に対する消費者の需要が高まっていることを考慮して、本発明の色素は、カラー化粧品の最も象徴的なカテゴリであるリップスティック、とりわけ赤色のリップスティックに、クリーンで、天然で、高性能な革新を提供する。

本発明の色素の有利な性能に関する詳細な結果は、以下の実施例において提供される。
好ましくは、本発明の色素は、微粉化されたラファヌス・ラファニストルム（Ｒａｐｈａｎｕｓｒａｐｈａｎｉｓｔｒｕｍ）ｓｕｂｓｐ．ｓａｔｉｖｕｓ（Ｌ．）Ｄｏｍｉｎ根抽出物を含む。この抽出物は、望ましい赤または紫の色を提供することが見出されている。

本発明の色素に使用されるラファヌス・サティウスＬ．根抽出物は微粉化されている。微粉化は、彩度とカバー力にプラスの影響を与えることが見出されている（以下の例５を参照）。

粒径分布を記述する際に最も一般的に使用される測定基準はＤ値である：Ｄ１０、Ｄ５０、Ｄ９０は、累積質量のそれぞれ１０％、５０％、９０％の切片である。Ｄ５０は、試料の質量の５０％がそれよりも小さく、試料の質量の５０％がそれよりも大きい、粒子の直径である。言い換えると：Ｄは粉末粒子の直径を表し、Ｄ５０は直径の累積の５０％ポイント（または５０％通過の粒径）を意味する；Ｄ１０は、直径の累積１０％ポイントを意味する。Ｄ５０はまた、平均粒径、メディアン径、質量メディアン径（ＭＭＤ）または対数正規分布質量中央径とも呼ばれる。

本発明の一態様では、微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物は、約１．０μｍ～約７．５μｍ、より好ましくは約１．５μｍ～約６．０μｍ、および最も好ましくは約２．０μｍ～約５．０μｍのメディアン粒径（Ｄ５０）を有する。
本発明の一態様では、微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物は、約４．０μｍ～約１６．０μｍ、より好ましくは約５．０μｍ～約１５．０μｍ、最も好ましくは約５．０μｍ～約１０．０μｍの９０％パーセンタイル（Ｄ９０）の粒径を有する。
本発明の一態様において、微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物のモンモリロナイトクレイに対する重量比は、約１：２～約２：１、より好ましくは約１：１．５～約１：１である。

例として、色素中の微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物の濃度は、約１０ｗｔ％～約９０ｗｔ％、より好ましくは約３０ｗｔ％～約８０ｗｔ％、最も好ましくは約５０ｗｔ％～約７０ｗｔ％；例えば約６２．５ｗｔ％の微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物であり得る。
例として、色素中のモンモリロナイトクレイの濃度は、約５％～約８０％、より好ましくは約１０％～約５０％、最も好ましくは約３０％～約４０％；例えば約３７．５％のモンモリロナイトクレイであり得る。

本発明の一態様において、本発明の色素は酸性ｐＨを有する。酸性ｐＨは、アントシアニンおよびアントシアニン誘導体の安定性を改善することが見出されている。
したがって、本発明の一態様では、色素のｐＨは、約２．０～約４．０、より好ましくは約２．５～約３．５、最も好ましくは約２．８である。これにより、赤色色素が得られる。

酸性ｐＨは、例として、色素に酸を包含することによって得ることができる。したがって、本発明の一態様では、本発明の色素は、酸、より好ましくは有機酸をさらに含む。クエン酸は、自然由来であり、化粧品における用途に適したｐＨを持っているため、とりわけ適していることが見出されている。別の態様では、色素のｐＨは、約７．２～約８．０、より好ましくは約７．４～約７．８、最も好ましくは約７．５である。これにより、紫色の色素が得られる。

塩基性ｐＨは、例として、色素に塩基を包含することによって得ることができる。
したがって、本発明の一態様では、本発明の色素は、塩基、より好ましくは塩基性塩をさらに含む。水酸化カリウムがとりわけ適していることが見出されているが、他の水酸化物塩も使用されてよい。
本発明の色素に酸と塩基の両方を包含することにより、緩衝効果を達成することができ、改善された色安定性につながる。

酸および／または塩基は、微粉化の前または後に添加してよい。好ましくは、微粉化の前に添加する。
酸および／または塩基は、乾燥工程の前または後に加えてよい。好ましくは、乾燥前に添加する。
本発明の色素は、適切な担体をさらに含んでもよい。
したがって、本発明の一態様では、本発明の色素は、多糖、より好ましくはマルトデキストリンをさらに含む。

特定の態様では、本発明の色素は、約１０ｗｔ％～約４０ｗｔ％の微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物、約２０ｗｔ％～約５０ｗｔ％のモンモリロナイトクレイ、約２ｗｔ％～約１５ｗｔ％のクエン酸、および約１０ｗｔ％～約４０ｗｔ％のマルトデキストリンを含む；より好ましくは、約２０ｗｔ％～約３０ｗｔ％の微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物、約３０ｗｔ％～約４０ｗｔ％のモンモリロナイトクレイ、約５ｗｔ％～約１０ｗｔ％のクエン酸、および約２０ｗｔ％～約３０ｗｔ％のマルトデキストリンを含む。

微粉化のプラスの効果については、上記で説明した。本発明の一態様では、ラファヌス・サティウスＬ．の根抽出物だけでなく、他の成分の１つまたは複数、とりわけ固体成分も微粉化される。好ましくは、固体成分のほとんどが微粉化される。より好ましくは、色素の少なくとも全ての固体成分が微粉化される。本発明の一態様では、色素全体が微粉化される。微粉化は、個別の成分、いくつかの部分的な混合物、または完全な組成物に対して遂行することができる。いくつかの微粉化ステップを実行することも可能である。

第２の様態において、本発明は、本発明による色素および化粧品として許容される賦形剤を含む化粧品組成物を提供する。
好ましくは、化粧品組成物は、上で概説した具体的な態様の１つまたは複数の色素を含む。

ヒトの皮膚に使用するための化粧料の調製に一般的に使用される任意の賦形剤を本発明で利用することができる。適切な賦形剤には、本発明の色素の官能特性、分散性、外観、および伸びに影響を与えることができる成分が包含されるが、これらに限定されない。より具体的には、これらは、液体、例えば、水、油、または、界面活性剤を包含し、例えばピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油、ヒマシ油、ポリソルベート、ソルビタンエステル、硫酸エーテル、硫酸塩、ベタイン、グリコシド、マルトシド、脂肪アルコール、ノノキシノール、ポロキサマー、ポリオキシエチレン、ポリエチレングリコール、デキストロース、グリセロール、ジギトニンなどであるがこれに限定されない、石油、動物、植物、または合成由来のものを包含する。

化粧品組成物は、任意の物理的形態をとることができ、適用に有用な任意の固体、液体、または半固体の形態で製造することができる。
一態様では、化粧品として許容される賦形剤はヒマシ油を含む。より好ましくは、化粧品として許容される賦形剤は、少なくとも本質的にヒマシ油からなる。ヒマシ油は自然由来であり、本発明の色素の良好な分散を提供することが見出されている（以下の例７も参照のこと）。

本発明の化粧品組成物は、典型的には、カラー化粧品またはメイクアップ組成物である。可能な製品形態は、上記の導入部分に記載されている。
一態様において、本発明の化粧品組成物は、リップスティック、リップバーム、リップオイル、リップグロス、リップスクラブ、メイクアップエマルション、メイクアップパウダー、化粧油ジェルおよび石鹸からなる群から選択される。
好ましい態様では、本発明の化粧品組成物はリップスティック組成物である。

本発明は、以下の非限定的な実施例によってさらに説明される：

例1:ラファヌス・サティウスＬ．根の抽出物
ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物は、いくつかの供給業者から市販され入手可能である。
本研究のために「Deodorized Red Radish Extract（粉末）」を、Yunnan Rainbow Bio-tech. Corp., Ltdから得た。この抽出物は、ラファヌス・ラファニストルム（Ｒａｐｈａｎｕｓｒａｐｈａｎｉｓｔｒｕｍ）ｓｕｂｓｐ．ｓａｔｉｖｕｓ（Ｌ．）Ｄｏｍｉｎ種のレッドラディッシュから得られる。
供給元によると、この市販の抽出物は以下の組成を有する：レッドラディッシュ抽出物４２％、マルトデキストリン４２％、クエン酸８％、水８％。これは以下のように調製される：
－水による抽出
－濾過
－エタノール（７０％）による吸着と脱着
－脱臭
－濃縮
－マルトデキストリンの添加
－ｐＨを調整するためのクエン酸および／またはＫＯＨの添加
－均質化
－噴霧乾燥
－微粉化

市販の抽出物は赤色の粉末の形である。
本研究では、Yunnan Rainbowからの「Deodorized Red Radish Extract (粉末)」の2つの異なるバッチ：ＬＴ１６０９０１およびＬＴ１５１１０２が使用された。
２つのバッチのアントシアニン含有量は、Ｃ_１８カラムでの分離の後、外部標準としてペルラゴニジン－３－Ｏ－グルコシドを使用し、ＬＣ－ＴＯＦ－ＭＳによる主要化合物の同定（主にペルラルゴニジンおよびアントシアニジン部分）後に分子量補正係数（ＭＷＣＦ）を適用して、５２０ｎｍにてＨＰＬＣ－ＵＶによって分析された。ＬＴ１６０９０１は２８．７２％の、ＬＴ１５１１０２は３０．８９％のアントシアニン含有量を有することが見出された。

例２：赤色色素の調製
例１のラファヌス・サティウスＬ．根抽出物を、水の存在下で５：３の重量比でモンモリロナイトクレイと混合した。例えば、１回分２５０ｋｇの赤色色素に対し、１５０ｋｇの水、60.3kgの「Deodorized Red Radish Extract(粉末)」、および３６．４ｋｇのモンモリロナイトクレイ（「argileblanche-rosee」、参照:フランスArgile du Velay社供給によるCosWHITE（商標））を混合し、均質になるまで室温で撹拌した。３．９ｋｇのクエン酸の添加によりｐＨを約２．８に調整した。
これによって得られた混合物を室温で撹拌することにより均質化し、次いで噴霧乾燥（ＧＥＡＮｉｒｏ噴霧乾燥機上で）およびエアジェット微粉化に供した。あるいは、得られる生成物に影響を全く与えることなく、オーブン乾燥を使用することも可能だったであろう。

1つの特定の試料について、微粉化の前後で粒径分布を測定した：微粉化前：Ｄ１０＝３．８９μｍ、Ｄ５０＝１９．７１μｍ、Ｄ９０＝５３．６８μｍ；微粉化後：Ｄ１０＝０．６６μｍ、Ｄ５０＝１．９１μｍ、Ｄ９０＝４．１９μｍ。
以下に記述する研究に使用された赤色色素は、上記のプロセスによって調製され、次の組成を有していた：

したがって、本発明の赤色色素は、ＩＳＯ１６１２８のアセスメントによれば、１００％の自然由来指数および５５～７０％の自然指数のものである。

例3:赤色色素の特徴
例２の赤色色素は赤色粉末である。それは約２μｍ～約５μｍの平均粒径（Ｄ５０）を有する。
アントシアニン含有量は、ＨＰＬＣで決定したところによれば、約１２ｗｔ％から約１８ｗｔ％までであった。
赤色色素は、蒸留水中１％にて約２．５～約３．５のｐＨを有する。
陽イオンモードにおけるＬＣ－ＴＯＦ－ＭＳによる粉末の分析により、主にペルラルゴニジン（２２）、デルフィニジン（２）、シアニジン（５）、およびマルビニジン（１）コアに基づく、少なくとも３０の異なるアントシアニンが明らかになった。
比色分析により、以下の結果が提供された（Ｅ１％は、溶媒１００ｍｌ中の生成物１ｇの所定の波長での吸光度である）：

したがって、本発明の赤色色素の色は、パントン１８０５Ｃに対応する。

例4:安定性研究
室温での安定性
例３の赤色色素の第１バッチの安定性を、光および湿気から保護して室温で試験した。結果は以下のとおりであった：

したがって、本発明の赤色色素は完全に安定であり、９ヶ月後でさえもなお化粧品成分の微生物学的要件（総プレート数＝ＴＰＣ；酵母およびカビ＝Ｙ＆Ｍ）に適合する。

熱安定性
例３の赤色色素の第１バッチの安定性もまた、上昇した温度にて試験した：

以上からわかるように、本発明の赤色色素は、高温でさえも良好な安定性を示す。これにより、必要に応じて熱除菌が可能になる：

サンテスト
例３の赤色色素の第２バッチの色安定性を４５０Ｗ／ｍ^２で試験した：

再度、本発明の赤色色素は良好な安定性を有することが見出された。

例５：微粉化とモンモリロナイトクレイの影響
微粉化および／またはモンモリロナイトクレイの影響を決定するために、１０ｗｔ％の赤色色素粉末を含有するリップスティックベースで一連の比較試験を行った。
次のリップスティックベースが使用された。

次の４つの赤色色素粉末が試験された。
－比較試料Ａ：例１に記載のYunnan Rainbowからの市販のラファヌス・サティウスＬ．根抽出物
－比較試料Ｂ：比較試料Ａと同じであるが、微粉化されている
－比較試料Ｃ：例２の赤色色素であるが、微粉化はしていない
－本発明の赤色色素：例２の赤色色素
Ａ相は、シアバター、ミツロウ、およびカプリル酸／カプリン酸トリグリセリドを７０℃の温度で均一になるまでブレンドすることによって調製した。Ｂ相を得るために、それぞれの赤色色素粉末とヒマシ油の混合物をturrax（商標）ブレンダーで室温で２分間均質化した。２つの相を７５℃で合わせ、turrax（商標）ブレンダーで２分間ブレンドした。これによって得られたリップスティック組成物を、磁気撹拌下で室温まで冷却した。最後にガラススラブの間で粉砕し、フィルムアプリケーター（膜厚：５０μｍ）を使用してコントラストカードに適用した。

Ｌ、ａ、ｂ測定は分光測色計Konica-Minolta3600d（Ｄ６５、Ｌ＊、ａ＊、ｂ＊、ｈ、Ｃ＊、Ｙ）で実行し、リップスティックのベース中の異なる赤色色素間の色と不透明度の相違を検証するためにＤｅｌｔａＥ（００）を測定した。不透明度はカバー力の尺度であり、１００％の不透明度は完全なカバー力を意味する。不透明度は、ＣＲ（％）＝（（Ｙ黒＊１００）／Ｙ白）として計算される。
結果を次の表に示す：

上記からわかるように、微粉化は彩度とカバー力の増加につながるが、モンモリロナイトクレイの追加はカバー力を改善するが、彩度と色相を低下させる。微粉化とモンモリロナイトクレイの両方を伴う本発明の赤色色素で最良の結果が観察され、彩度が大幅に増加し、色相とカバー力の両方が明らかに増加した。

例６：抗酸化活性（インビトロ）
ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物の抗酸化特性を、ヒト正常角化細胞（ＮＨＥＫ）を使用し酸化ストレス暴露後の活性酸素種（ＲＯＳ）の生成をジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート(DCFH-DA; ”Dichloro-dihydro-fluorescein diacetate (DCFH-DA) assay: a quantitative method for oxidative stress assessment of nanoparticle-treated cells”Aranda et al. Toxicol In Vitro. 2013, 27(2):954-63.)方法による定量化によって評価した。細胞との接触において、ＤＣＦＨ－ＤＡは細胞内で切断されてＤＣＦＨになり、酸化ストレス中に活性酸素種（ＲＯＳ）と相互作用することができ蛍光放射に至る。その結果、放出される蛍光は、試験化合物の抗酸化特性と相関している。

細胞培養と前処理
細胞培養は、生検から新たに単離された初代細胞で遂行された。
正常なヒト表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を、ガラス底の黒色プレートに、Ｉ型コラーゲンをプレコーティングした９６ウェルプレートにおいて１ウェルあたり２０，０００細胞で４連で播種した。細胞を完全培地（ＨＫＧＳを添加したEpilife（商標）培地）で３７℃にて、５％ＣＯ_２で２４時間インキュベートした。
培養の２４時間後、細胞をレスベラトロール（比較例）で、または完全培地中の異なる濃度の例１の市販のラファヌス・サティウスＬ．根抽出物で、または完全培地のみ（対照）で処理した。
次に、細胞を３７℃にて、５％ＣＯ_２でさらに２４時間インキュベートした。

ＲＯＳ測定
２４時間のインキュベーション後、２’，７’－ジクロロフルオレシンジアセテート（ＤＣＦＨ－ＤＡ）プローブを５０μＭで、３７℃にて少なくとも３０～４５分間、ウェルに加えた。
次いで、細胞をＰＢＳ緩衝液で２回洗浄し、ＰＢＳ緩衝液中５ｍＭのｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシド溶液（ＴＢＰ）で処理して酸化ストレスを生じさせた。比較のために、未処理の細胞をＰＢＳ緩衝液中に残した。
最後に、マイクロプレートリーダー（TECAN製）を使用して、４８８ｎｍの励起波長と５２５ｎｍの発光波長によって、暗所で放出された蛍光を測定した。
この研究は、ｎ＝４で２回実施された。

統計分析
データがガウスの法則に従っているかどうかを評価するために、Ｓｈａｐｉｒｏ－Ｗｉｌｋ正規性検定が実行された。結果はガウスの法則に従っていなかった。
結果として、ノンパラメトリック統計分析が、クラスカル＝ウォリス分散分析（Ｋｒｕｓｋａｌ－ＷａｌｌｉｓＡＮＯＶＡ）とそれに続くマン＝ホイットニーのＵ検定（ＭａｎｎＷｈｉｔｎｅｙＵｔｅｓｔ）によって実行された。

結果
結果が以下の表中にまとめられている：

酸化ストレスを誘発するために使用されたＴＢＰは、未処理の対照と比較して活性酸素種（ＲＯＳ）の量を有意に増加させることが確認された（ｐ＜０．００１）。
２００μＭのレスベラトロールでの処理を陽性対照として使用した。
同じ条件下で、ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物は、用量依存的にＲＯＳ生成を有意に減少させることが見出された。

例７：異なる溶媒中での分散
濃度１０ｗｔ％の例２の赤色色素の分散を、以下の溶媒中で試験した：
－クエン酸トリス（２－オクチルドデシル）(PELEMOL（登録商標）TGC)
－クエン酸トリイソステアリル(PELEMOL（登録商標）TISC)
－精製ヒマシ油(Radia6132)
－ジイソステアリン酸ポリグリセリル－３
－ドデカン(Parafol（登録商標）12-97)
－ホホバ種子油
－カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド
－ジカプリル酸プロパンジオール（DUB ZENOAT（登録商標））
－イソノナン酸イソノニル（DUB ININ 14031）
－オクチルドデカノール(EUTANOL G)
－ステアロイルステアリン酸イソセチル（DUB SSIC）
－ヒマワリ種子油
分散を判定するために、偏光なしで１０倍ズームで顕微鏡画像を撮影した。
赤色色素は、精製ヒマシ油、クエン酸トリス（２－オクチルドデシル）、クエン酸トリイソステアリル、およびジイソステアリン酸ポリグリセリル－３によく分散していることがわかった。これら４つのうち、クエン酸トリス（２－オクチルドデシル）のみが液体で、他の３つの溶媒は粘性である。さらに、ジイソステアリン酸ポリグリセリル－３は色素の色を修正し、それをより青みを帯びさせることが見出された。精製ヒマシ油の使用は、完全に天然であるため、とりわけ有利である。
ドデカン、ホホバ種子油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ジカプリル酸プロパンジオール、イソノナン酸イソノニル、オクチルドデカノール、およびヒマワリ種子油の使用は、不十分な凝集体の分散を導いた。分散はステアロイルステアリン酸イソセチル(isocetyl stearoyl stearate)についてわずかに良好であった。

例８：リップスティック製剤における微粉化の影響
例５に記述のように、第１のリップスティックベース製剤を調製した。これによって得られたリップスティック製剤を、黒白のコントラストカードに手作業で適用し；伸び、色相、彩度、不透明度は、分光測色計Konica-Minolta3600dを使用して測定した。結果は次のとおりである:

上記からわかるように、微粉化は色相と彩度を有意に改善するだけでなく、伸びにもまた非常に重要である。

例９：キャリアの比較
本発明の赤色色素は、モンモリロナイトクレイを含む。予備研究では、例１の市販のラファヌス・サティウスＬ．根抽出物を使用して、他のキャリアもまた試験されている。
－試料Ｄ：ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物１００ｗｔ％；非微粉化
－試料Ｅ：ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物５０ｗｔ％、セルロース２０ｗｔ％、アルン３０ｗｔ％；非微粉化；５０°Ｃに４時間加熱
－試料Ｆ：ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物５０ｗｔ％、セルロース１０ｗｔ％、アルン４０ｗｔ％；非微粉化；５０°Ｃに４時間加熱
－試料Ｇ：ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物５０ｗｔ％、炭酸カルシウム５０ｗｔ％；非微粉化
－試料Ｈ：ラファヌス・サティウスＬ．根抽出物６２．５ｗｔ％、モンモリロナイトクレイ３７．５ｗｔ％；非微粉化
－試料Ｊ：６２．５ｗｔ％のラファヌス・サティウスＬ．根抽出物、モンモリロナイトクレイ３７．５ｗｔ％；微粉化
上記の粉末試料を、例５に記載したのと同じ組み込みプロセスを使用して、例５の第１のリップスティックベース配合物に添加した。
これによって得られたリップスティック製剤の各２ｇを、Byko-driveＧ自動フィルムアプリケーター（膜厚：１０２μｍ）を使用して黒白のコントラストカードに適用した。伸び、色、色相、彩度、および不透明度を、分光測色計Konica-Minolta3600dを使用して測定した。
結果は次のとおりであった：

例１０：リップスティック製剤におけるモンモリロナイトクレイの影響
次の成分を使用して、第２のリップスティックベース製剤を調製した。
－シアバター３７．５ｗｔ％
－ミツロウ１０ｗｔ％
－カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド１０ｗｔ％
－ジリノール酸／プロパンジオール共重合体１０ｗｔ％
－ホホバエステル＆ヒマワリ種子ワックス＆フサアカシア花ロウ＆ポリグリセリン－３５ｗｔ％
－ヒマシ油１７．５ｗｔ％
－１０ｗｔ％の色素（モンモリロナイトクレイを含むもの、および含まないもの）
次の２つの色素が試験された。
ａ．上記例２に記述の本発明による赤色色素
ｂ．上記例５に記述の比較試料Ｂ、すなわちモンモリロナイトクレイを含まないもの
turrax（商標）ブレンダーを使用して、色素を最初に室温でヒマシ油と混合した。他の成分を混合し、ブレンドが均一になるまで７５℃に加熱した。次いで、色素／ヒマシ油混合物を添加し、均質になるまで混合した。得られた混合物を磁気撹拌下で冷却した。
このようにして得られたリップスティック製剤の各２ｇを、Byko-drive G自動フィルムアプリケーター（膜厚：１０２μｍ）を使用して黒白のコントラストカードに適用した。再度、分光測色計Konica-Minolta3600dを使用して伸び、色相、彩度および不透明度を測定した。
結果は次のとおりである。

上記からわかるように、モンモリロナイトクレイは、色相と彩度の両方にプラスの影響を与え、また、わずかに伸びを改善する。

例１１：家庭での使用テスト
家庭での使用試験において、フランスの７６人の女性ボランティア（１８～４５歳）が、本発明の赤色色素を２０％含むリップスティックを、１０日間の試験期間中に少なくとも４回使用するよう求められた。
リップスティックの組成は次のとおりであった：

ボランティアからのフィードバックは非常に良かった：
－ボランティアの６２％がリップスティックを好んだ（１８～３４歳の７８％）
－ボランティアの８１％が自分を美しいと感じた
－彼らの７５％がよりセクシーに感じた
－他の製品と比較して、それは質感、香り、味が優れていると判断された
－ボランティアの５３％（１８～３４歳の６３％）にとっては、色の持続性が期待どおりであった
－色は３～４時間耐久することが見出された

例１２：紫色色素の調製
例１のラファヌス・サティウスＬ．根抽出物を、水の存在下で５：３の重量比でモンモリロナイトクレイと混合した。例えば、紫色色素１ｋｇのバッチに対して、６２５ｇの「Deodorized Red Radish Extract（粉末）」および３７５ｇのモンモリロナイトクレイ（「argile blanche-rosee」、参照：CosWHITE（商標）、フランスArgile du Velayによって供給）を９００ｍｌの水に可溶化した。８５ｇの水酸化カリウムを添加してｐＨを約７．５に調整した。
このようにして得られた混合物を室温で撹拌することにより均質化し、次いで噴霧乾燥（GEA Niro噴霧乾燥機上で）およびエアジェット微粉化にかけた。あるいは、得られる生成物に影響を与えることなく、オーブン乾燥を使用することも可能であったであろう。
したがって、本発明の紫色色素は、１００％の自然由来指数である。

例１３：紫色色素の特徴
例１２の紫色色素は紫色粉末である。それは平均粒径（Ｄ５０）約２μｍ～約５μｍを有する。
アントシアニン含有量は、ＨＰＬＣで決定したところによれば、約１２ｗｔ％から約１８ｗｔ％であった。
紫色色素は、蒸留水中１％で約７．４から約７．８のｐＨを有する。
比色分析により、次の結果が提供された（リップスティックベース中１０％で）。

したがって、本発明の紫色色素の色は、パントン５１８Ｃに対応する。

例１４：安定性研究
室温での安定性
標準リップスティックベース中の例１３の紫色色素の第１バッチの安定性を、光および湿気から保護して室温（２０～２１℃）で試験した。結果は次のとおりであった：

したがって、本発明の紫色色素は完全に安定である。
また、１１ヶ月後でさえも、化粧品成分の微生物学的要件（総プレート数＝ＴＰＣ；酵母とカビ＝Ｙ＆Ｍ）に準拠していることも見出された。

４５°Ｃでの安定性
標準リップスティックベース中の例１３の紫色色素の第１バッチの安定性も、光および湿気から保護して４５℃で試験した。結果は次のとおりである。

熱安定性
例１３の紫色色素の最初のバッチの安定性もまた、上昇した温度で試験した：

上記からわかるように、本発明の紫色色素は、高温でさえも良好な安定性を示す。これにより、必要に応じて熱除菌が可能になる。

サンテスト
例１３の紫色色素の第２バッチの色安定性を４５０Ｗ／ｍ^２で試験した：

再度、本発明の紫色色素は良好な安定性を有することが見出された。

Claims

微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物およびモンモリロナイトクレイを含む、化粧品用途における使用のための色素。
微粉化されたラファヌス・ラファニストルムｓｕｂｓｐ．ｓａｔｉｖｕｓ（Ｌ．）Ｄｏｍｉｎ根抽出物を含む、請求項１に記載の色素。
微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物が約１．０μｍから約７．５μｍまでの、より好ましくは約１．５μｍから約６．０μｍまでの、および最も好ましくは約２．０μｍから約５．０μｍまでのメディアン粒径（Ｄ５０）を有する、請求項１または２に記載の色素。
微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物が、約４．０μｍから約１６．０μｍまで、より好ましくは約５．０μｍから約１５．０μｍまで、および最も好ましくは約５．０μｍから約１０．０μｍまでの９０％パーセンタイル（Ｄ９０）の粒径を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の色素。
微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物の対モンモリロナイトクレイの重量比が、約１：２から約２：１まで、より好ましくは約１：１．５から約１：１までである、請求項１～４のいずれか一項に記載の色素。
色素が赤色、ピンク色、紫色、青色または緑色を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の色素。
色素のｐＨが、約２．０から約４．０まで、より好ましくは約２．５から約３．５まで、および最も好ましくは約２．８である、請求項１～６のいずれか一項に記載の色素。
色素のｐＨが、約７．２から約８．０まで、より好ましくは約７．４から約７．８まで、および最も好ましくは約７．５である、請求項１～６のいずれか一項に記載の色素。
酸、より好ましくは有機酸、最も好ましくはクエン酸をさらに含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の色素。
塩基、より好ましくは塩基性の塩、最も好ましくは水酸化カリウムをさらに含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の色素。
多糖類、より好ましくはマルトデキストリンをさらに含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の色素。
約１０ｗｔ％から約４０ｗｔ％までの微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物、約２０ｗｔ％から約５０ｗｔ％までのモンモリロナイトクレイ、約２ｗｔ％から約１５ｗｔ％までのクエン酸、および約１０ｗｔ％から約４０ｗｔ％までのマルトデキストリンを含み；より好ましくは約２０ｗｔ％から約３０ｗｔ％までの微粉化されたラファヌス・サティウスＬ．根抽出物、約３０ｗｔ％から約４０ｗｔ％までのモンモリロナイトクレイ、約５ｗｔ％から約１０ｗｔ％までのクエン酸、および約２０ｗｔ％から約３０ｗｔ％までのマルトデキストリンを含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の色素。
少なくとも全ての固体の色素の構成要素が微粉化されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載の色素。
請求項１～１３のいずれか一項に記載の色素および美容上許容し得る賦形剤、とりわけヒマシ油を含む美容上許容し得る賦形剤を含む化粧品組成物。
メークアップ組成物、およびとりわけリップスティック組成物である、請求項１４に記載の化粧品組成物。