JP2023516706A - ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２阻害におけるジメチルベルバミン化合物の適用 - Google Patents

Abstract

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療するための、一般式Ｉで表される化合物、その幾何異性体、又はその薬学的に許容される塩、及び／若しくはその溶媒和物、及び／若しくはその水和物、ならびにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療するための製造物の調製における、一般式Ｉで表される化合物、その幾何異性体、又はその薬学的に許容される塩、及び／若しくはその溶媒和物、及び／若しくはその水和物の応用。【化１】JPEG2023516706000027.jpg4751

Description

本発明は、２０２０年３月３日に出願された中国出願第２０２０１０１４０３５６．０号に基づいており、その優先権の利益を主張する。その開示の全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本出願は、化学薬品の分野に属し、特に、式Ｉで表されるジメチルベルバミン化合物、その幾何異性体、又はその製薬上許容される塩及び／又は溶媒和物及び／又は水和物、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症の治療における上記化合物を含む医薬組成物の使用に関する。

式Ｉで表されるジメチルベルバミン化合物は、６，６’，７，１２－テトラメトキシ－２，２’－ジメチルベルバミンの化学名を有し、Ｓｔｅｐｈａｎｉａ ｔｅｔｒａｎｄｒａから抽出されたビスベンジルイソキノリンアルカロイドである。式Ｉの化合物はテトランドリンとも呼ばれ、降圧薬として使用され、主に軽度及び中等度の高血圧の治療に使用され、高血圧性クリーゼにも使用され得る。さらに、リウマチ、関節痛、神経痛にも使用できる。肺がんには低線量の放射線と併用して使用され、Ｉ期、ＩＩ期、又はＩＩＩ期の単純珪肺症、及び様々な病期の石炭珪肺症にも使用される。

コロナウイルスは、広範囲の動物宿主を有するエンベロープを有し、非セグメント化、一本鎖、ポジティブセンスＲＮＡウイルスである。人畜共通疾患に由来するＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びＭＥＲＳ－ＣｏＶは、ヒトにおいて死亡を引き起こす可能性があり、それぞれ２００２年及び２０１２年に発生した（Zaki et al., 2012; Zhong et al., 2003; Cui et al., 2019）。２０１９年の新規コロナウイルス（２０１９－ｎＣｏＶ）は、以前にヒトでは見られなかった新しいコロナウイルス株である。２０２０年２月１１日、国際分類ウイルス委員会（ＩＣＴＶ）は、２０１９年新型コロナウイルス（２０１９－ｎＣｏＶ）の正式名称を重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）と呼ぶことを発表した。同日、世界保健機関（ＷＨＯ）は、本ウイルスによる疾患の正式名称をＣＯＶＩＤ－１９と発表した。ＣＯＶＩＤ－１９の臨床症状は、患者の９０％以上が発熱、患者の８０％が乾性咳嗽、患者の２０％が息切れ、患者の１５％が呼吸困難であり、最も重要な症状は白血球及びリンパ球の減少であり、患者の肺は異なる程度の臓器障害を有し、肺線維症を発症する潜在的リスクがある。このウイルスは伝染性が高く、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症は日本、韓国、イタリア、米国など世界各国で発生しており、その動向は拡大を続けている。以前の研究では、レムデシビル及びリン酸クロロキンなどの薬物がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの複製を効果的に阻害できることが明らかにされており（Ｗａｎｇら、２０２０）、関連する臨床試験も実施されている。関連ワクチンも開発中である。しかしながら、現在、広く使用されるように承認されている薬剤やワクチンはない。

したがって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を効果的に阻害できる製品を開発することは依然として非常に緊急であり、必要である。

本発明の内容
本発明者らは、テトランドリンがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを効果的に阻害し、肺線維症を予防又は治療し、それによってＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる肺疾患又は症状の効果的な予防及び／又は治療のための新しい方法及び選択肢を提供することを見出した。以上の研究を踏まえ、本出願を完成する。

本出願は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状、又は高血圧を伴う無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、ＣＯＶＩＤ－１９、又は高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９の予防及び／又は治療に使用するための、あるいはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２阻害剤として使用するための、あるいは細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製又は再生の阻害に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスによって引き起こされる疾患又は感染の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患又は感染の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスによって引き起こされる疾患若しくは感染症、又はコロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患若しくは感染症の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスに関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるコロナウイルスの複製又は再生の阻害に使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルス阻害剤として使用するための、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスによって引き起こされる疾患又は感染を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾病又は感染を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスに関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状の予防及び／又は治療をするための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるコロナウイルスの複製又は再生を阻害するための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルス阻害剤としての製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状、又は高血圧を伴う無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、ＣＯＶＩＤ－１９若しくは高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９を予防及び／又は治療するための製造物の製造、あるいはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２阻害剤としての製造物の製造、あるいは細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製又は再生を阻害するための製造物の製造における、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用に関する。

本出願は、さらに、コロナウイルスによって引き起こされる疾患若しくは感染症、又はコロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患若しくは感染症を予防及び／又は治療する方法に関し、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的有効量を投与することを含む。

本出願は、さらに、コロナウイルスに関連する肺疾患若しくは症状、又はコロナウイルスに関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状を予防及び／又は治療する方法に関し、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的有効量を投与することを含む。

本出願は、さらに、それを必要とする宿主におけるコロナウイルスの複製又は再生を阻害する方法に関し、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的有効量を投与することを含む。

本出願はまた、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療する方法に関し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状を有する宿主、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を有する宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的有効量を投与することを含む。

本出願はまた、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状、又は高血圧を伴う無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療する方法に関し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状を有する宿主、又は高血圧を伴う無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を有する宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的有効量を投与することを含む。

本出願はまた、それを必要とする宿主におけるＣＯＶＩＤ－１９、若しくは高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９を治療及び／又は予防する方法、あるいはそれを必要とする宿主におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製又は再生を阻害する方法に関し、該方法は、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的有効量を投与することを含む。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるコロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるコロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるコロナウイルスによって引き起こされる疾患は、ＣＯＶＩＤ－１９である。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるコロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患は、高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９である。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるコロナウイルスに関連する肺疾患又は症状は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患又は症状である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される高血圧を伴うコロナウイルスに関連する肺疾患又は症状は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状である。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるコロナウイルスによって引き起こされる感染は、無症候性又は症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される高血圧を伴うコロナウイルスによって引き起こされる感染症は、高血圧を伴う無症候性又は症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される製造物は、ヒト薬物又は動物用の獣医薬物である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される製造物は、固体調製物、注射剤、スプレー剤、液体調製物、吸入調製物又は化合物調製物である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される宿主は、哺乳動物である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される哺乳動物は、ウシ、ウマ、ヤギ、イノシシ、イヌ、ネコ、げっ歯類、霊長類を含み、好ましい哺乳動物は、ヒト、イヌ又はブタである。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるＣＯＶＩＤ－１９は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされる疾患である。

一部の実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、薬学的に許容される担体又は賦形剤をさらに含む。具体的には、医薬組成物は、固体調製物、注射剤、吸入調製物、スプレー剤、液体調製物、又は化合物調製物であり得る。

本出願に記載された医薬組成物は、経口錠剤、カプセル、粉末、経口液体剤、注射剤及び経皮調製物などの、異なる投与経路に従って種々の形態に調製することができる。従来の医薬実務によれば、薬学的に許容される担体は、希釈剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、潤滑剤、着色剤、香味剤又は他の従来の添加剤を含む。典型的な薬学的に許容される担体には、例えば、微結晶性セルロース、デンプン、クロスポビドン、ポビドン、ポリビニルピロリドン、マルチトール、クエン酸、ラウリルスルホン酸ナトリウム又はステアリン酸マグネシウムなどが含まれる。

用途に応じて、医薬組成物は、以下の方法：経口投与、噴霧吸入、直腸投与、経鼻投与、口腔投与、経膣投与、局所投与、非経口投与、例えば、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、脳室内、胸骨内及び頭蓋内注射若しくは注入、又は外植されたリザーバーを介した投与のいずれかで投与され得る。これらのうち、経口、腹腔内又は静脈内投与が好ましい。

経口投与のためには、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物は、限定されないが、錠剤、カプセル、水溶液又は懸濁液を含むいずれかの経口的に許容される調製形態にすることができる。それらの中で、錠剤のために一般的に使用される担体は、ラクトース及びコーンスターチを含み、また、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤を加えることができる。カプセル製剤に一般的に使用される希釈剤には、ラクトース及び乾燥コーンスターチが含まれる。水性懸濁液は、通常、活性成分を適切な乳化剤及び懸濁剤と混合することによって調製される。必要に応じて、ある種の甘味剤、香味剤又は着色剤を上記の経口調製形態に加えてもよい。

直腸投与のためには、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物は、一般的に、適切な非刺激性賦形剤と薬物を混合することによって得られる坐剤形態にすることができる。賦形剤は、室温で固体であるが、直腸温度で融解して薬物を放出する。このような賦形剤には、カカオ脂、蜜ろう及びポリエチレングリコールが含まれる。

局所投与のために、特に、眼、皮膚又は下部腸管神経疾患のような局所適用により容易にアクセス可能な罹患表面又は臓器を処置する場合には、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物は、異なる罹患表面又は臓器に従って異なる局所調製形態にすることができ、具体的な説明は以下の通りである。

眼への局所投与のためには、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物は、適切な微粉化懸濁液又は溶液中に製造することができ、使用される担体は、あるｐＨを有する等張無菌生理食塩水であり、それに塩化ベンジルアルコキシドのような保存剤を添加することも添加しないこともできる。また、眼科用には、ワセリン軟膏などの軟膏剤にすることができる。

皮膚への局所投与のために、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物は、適切な軟膏、ローション又はクリーム調製形態に製造することができ、その場合、活性成分は、１以上の担体に懸濁又は溶解される。ここで軟膏に使用することができる担体には、限定されないが、鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、乳化ワックス、及び水が含まれる。ローション又はクリームに使用することができる担体には、限定されないが、鉱物油、モノステアリン酸ソルビタン、Ｔｗｅｅｎ ６０、セチルエステルワックス、ヘキサデセンアリールアルコール、２－オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、及び水が含まれる。

下部腸管への局所投与のために、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物は、上記直腸座薬調製物又は適切な浣腸調製物形態に作製することができる。さらに、局所経皮パッチを使用することもできる。

式Ｉで表される化合物、その幾何異性体、又は製薬上許容されるその塩及び／又は溶媒和物及び／又は水和物はまた、無菌注射用水若しくは油懸濁液、又は無菌注射用溶液を含む無菌注射用製剤の形態で投与することができる。それらの中で、使用可能な担体又は溶媒は、水、リンゲル溶液、及び生理食塩水である。さらに、モノ又はジグリセリドのような滅菌不揮発性油も溶媒又は懸濁媒体として使用することができる。

上記種々の剤形の薬剤は、医薬分野における従来の方法に従って調製することができる。

本明細書で使用される場合、「治療有効量」又は「予防有効量」とは、患者の疾患を治療又は予防するのに十分であるが、合理的な医学的判断の範囲内で（合理的な利益／リスク比で）重篤な副作用を回避するのに十分に低い量を指す。化合物の治療有効量は、選択された特定の化合物（例えば、化合物の効能、有効性及び半減期を考慮して）、選択された投与経路、治療される疾患、治療される疾患の重症度、治療される患者の年齢、サイズ、体重及び身体的疾患、治療される患者の病歴、治療期間、同時治療の性質、所望の治療効果などに依存するが、依然として日常的に当業者によって決定される。

さらに、異なる患者用の式Ｉで表される化合物、その幾何異性体、又は製薬上許容されるその塩及び／又は溶媒和物及び／又は水和物の具体的な投与量及び使用法は、多くの要因によって決定されることを指摘しておくべきであり、例えば、要因には、患者の年齢、体重、性別、自然な健康状態、栄養状態、薬物の活性強度、投与時間、代謝率、状態の重症度、及び診断と治療を行う医師の主観的判断が挙げられる。ここでは、０．００１～１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日の用量を使用することが好ましい。

図１は、実施例１におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の阻害に対するテトラドリン、レムデシビル及びリン酸クロロキンの用量－反応曲線を示す。青色の点は、異なる濃度における薬物の細胞毒性パーセンテージを表し、赤色の曲線は、異なる濃度における薬物のウイルス収率の阻害パーセンテージを表し、上図におけるウイルスの感染多重度（ＭＯＩ）は０．０１であり、下図におけるウイルスの感染多重度（ＭＯＩ）は０．０５である。 図２は、実施例２におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の阻害に対するテトラドリン、レムデシビル及びリン酸クロロキンの用量－反応曲線を示す。青色の点は、異なる濃度における薬物の細胞毒性パーセンテージを表し、赤色の曲線は、異なる濃度における薬物のウイルス収率の阻害パーセンテージを表し、上図におけるウイルスの感染多重度（ＭＯＩ）は０．０１であり、下図におけるウイルスの感染多重度（ＭＯＩ）は０．０５である。 図３は、Ｖｅｒｏ細胞上のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス感染の阻害に対するテトラドリンの定量的ＲＴ－ＰＣＲ検出結果を示す。

本発明を実施するための具体的なモデル
本出願の実質的な内容は、本出願の特定の実施例を参照して、以下にさらに説明される。以下の実施例は、本出願を例示するためにのみ使用されるが、本出願の保護範囲を限定することを意図するものではないことを理解されたい。以下の実施例で特定の条件が示されていない場合は、従来の条件又はメーカーの提案に従って実施する。製造業者の指示のない医薬品又は試薬は、市場から入手可能な従来品である。

以下の実施例で使用される材料及び操作方法の多くは、当該技術分野において公知であるが、本出願では、可能な限り詳細に説明されている。以下の実施例で使用される材料及び操作方法は、特に明記しない限り、当業者には周知であることが明らかである。

実施例１：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するテトラドリンの薬力学試験１
１．材料及び方法
１．１ 薬剤：テトランドリンは、Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｊｉｎｈｕａ ＣＯＮＢＡ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から入手した。そのバッチ番号はＹＧ１９１０００５であり、その含量は９９．３％である。参照薬剤のリン酸クロロキンは、Ｓｉｇｍａ社（Ｃａｔ番号Ｃ６６２８）から購入した；レムデシビルは、ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ社（Ｃａｔ番号Ｈｙ－１０４０７７）から購入した。テトランドリンをＤＭＳＯとともに１０ｍＭストック溶液中に調製し、レムデシビルをＤＭＳＯとともに１００ｍＭストック溶液中に調製し、リン酸クロロキンをＰＢＳとともに１００ｍＭストック溶液に調製した。実験中、２％ウシ胎児血清を含むＭＥＭ培地で、実験に必要な濃度まで希釈した。

１．２ 細胞：ＡＴＣＣ、Ｃａｔ番号１５８６から購入したＶｅｒｏ－Ｅ６細胞。

１．３ ウイルス：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス（ｎＣｏＶ－２０１９ＢｅｔａＣｏＶ／Ｗｕｈａｎ／ＷＩＶ０４／２０１９分離株、ＧＩＳＡＩＤ受託番号はＥＰＩ ＩＳＬ ４０２１２４であった）を分離し、中国科学院武漢ウイルス学研究所によって継代培養した。実験中、ウイルスを２％ウシ胎児血清を含むＭＥＭ培地で、実験に必要な濃度に希釈した。

１．４．試薬、実験用消耗品及び器具：
１．４．１ 試薬：ＭＥＭ乾燥粉末、ＧＩＢＣＯ、ＵＳＡ、Ｃａｔ番号１０３７００２１から購入；ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、ＧＩＢＣＯ、ＵＳＡ、Ｃａｔ番号１６００００４４から購入；重炭酸ナトリウム、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍから購入；ペニシリン、ストレプトマイシン及びカナマイシン：すべて北中国製薬会社から購入；ＰＢＳ、ＧＩＢＣＯ、Ｃａｔ番号Ｃ１００１０５００ＢＴから購入。
１．４．２ 実験用消耗品及び器具：培養フラスコ、Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、ＵＳＡから購入；９６ウェル培養プレート、Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、ＵＳＡから購入；二酸化炭素インキュベーター、米国Ｔｈｅｒｍｏ Ｃｏｍｐａｎｙ、ＵＳＡから購入。
１．４．３ 細胞培養液及び試薬の調製
細胞培養培地はＭＥＭ培地であり、その１００ｍｌ当たり１０％ウシ胎児血清、ペニシリン、ストレプトマイシン及びカナマイシン（各１００Ｕ／ｍｌ）、及び５％ＮａＨＣＯ_３を含有した。
細胞消化液：０．２５％トリプシン、Ｈａｎｋｓ溶液、０．０２％ＥＤＴＡで調製。

１．５．実験方法：
１．５．１ Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞培養物：０．２５％トリプシン（０．１ｍｌ）、０．０２％ＥＤＴＡ（５ｍｌ）を細胞で満たした培養フラスコに添加し、３７℃で５分間消化し、次に、消化溶液を捨て、細胞培養溶液を添加し、次に、ピペッティングの上下により混合した。細胞を１：３で継代培養し、３日以内にコンフルエンスに達し、１００，０００細胞／ｍｌに処方し、９６ウェル細胞培養プレートに接種し、１ウェル当たり０．１ｍｌで、３７℃、５％ＣＯ_２で２４時間培養し、細胞を実験に使用した。
１．５．２ 細胞に対する薬物細胞毒性試験：
薬物細胞毒性の検出は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて決定した。具体的には、以下の通りであった：
（１）１×１０^４個のＶｅｒｏ－Ｅ６細胞を９６ウェルプレートに接種し、３７℃で８時間培養した。
（２）薬物原液を２％ＦＢＳを含むＭＥＭ培地で希釈し、９６ウェルプレートの元の培地を捨て、薬物含有ＭＥＭ培地１００μＬを採取し、対応するウェルに加え、ウェル中の薬物の最終濃度をそれぞれ表１～３に示すようにし、各濃度について３つの複製ウェルを作製した。同時に、ビヒクル対照（ＤＭＳＯ又はＰＢＳ、及び薬物を含まない２％ＦＢＳ含有ＭＥＭ培地を細胞ウェルに加える）及びブランク対照（細胞を含まないウェルにＤＭＳＯ及び２％ＦＢＳ含有ＭＥＭ培地を加える）を設定した。薬物の添加後、細胞を３７℃で２４時間インキュベートした。
（３）１００μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ）を試験するウェルに添加し、２分間振盪して細胞を完全に溶解させ、室温で１０分間インキュベートし、マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、モデル：ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５から購入）上で化学発光シグナルＯＤ４５０の読み取り値を得た。細胞生存率は、以下の式に読み取り値を取り込んで計算した：
細胞生存率（％）＝（Ａ_{（薬物処置群）}－Ａ_{（ブランク対照）}）／（Ａ_{（ベヒクル対照）}－Ａ_{（ブランク対照）}）×１００％
ここで、Ａはマイクロプレートリーダー上の読み取を表した。

１．５．３ アンチウイルス実験：
（１）薬物処置
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を４８ウェルプレートに１ウェルあたり約１×１０^５細胞を接種し，翌日に実験を行った。まず、対応する濃度の薬物を含む１００μＬのＭＥＭ培地（２％ＦＢＳを含む）をプレートに添加し、細胞を１時間、前処理し、次に、２０μＬの希釈ウイルス（ウイルス量は１０００ ＴＣＩＤ_５０、すなわちＭＯＩ＝０．０１であり、ウイルス量は５０００ＴＣＩＤ_５０、すなわちＭＯＩ＝０．０５）を添加し、次に、細胞をインキュベーターに入れ、１時間インキュベートした。次に、ウイルス培養培地を廃棄し、未感染残存ウイルスをＰＢＳで洗浄し、次に、対応する濃度のテトラドリン、レムデシビル及びクロロキンリン酸を含有するＭＥＭ培養培地（２％ＦＢＳを含有する）をそれぞれ添加し、ウェル中の薬物の最終濃度をそれぞれ表４～表６に示すものとし、次に、細胞を３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター中に置き、次に、４８時間培養した。細胞対照群に、２％ＦＢＳを含有するＭＥＭ培地中の０．３％ＤＭＳＯ（最終濃度）、又は２％ＦＢＳを含有するＭＥＭ培地中の０．５％ＰＢＳを添加した。

（２）ＲＮＡ抽出
ＲＮＡ抽出は、ＴａＫａＲａ社（ＴａＫａＲａ ＭｉｎｉＢＥＳＴウイルスＲＮＡ／ＤＮＡ抽出キット、Ｃａｔ番号９７６６）が製造したキットを用いて行われた。特に指定のない限り、以下のＲＮＡ抽出工程に関与する消耗品及び試薬はキットの一部であった。キットの説明書では、以下の抽出手順をすべて推奨した。
１）試験プレートから上清１００μＬを採取し、ヌクレアーゼを含まないＥＰチューブ（Ａｘｙｇｅｎから購入、Ｃａｔ番号ｍｃｔ－１５０－ｃ）に加えた。次に、３２１μＬの溶解溶液（１００μＬのＰＢＳ、２００μＬの緩衝液ＶＧＢ、２μＬのプロテイナーゼＫ、１μＬのキャリアＲＮＡ）をウェルに加え、十分に混合し、次に、５６℃で１５分間消化した。
２）工程１）で得た混合物に無水エタノール２００μＬを加え、よく混合した。
３）工程２）で得られた混合物をＲＮａｓｅフリースピンカラムに移し、１２，０００ｒｐｍで１５秒間遠心分離し、廃液を捨てた。
４）５００μＬの緩衝液ＲＷ１を添加し、１２，０００ｒｐｍで１５秒間遠心分離してスピンカラムを洗浄し、廃液を捨てた。
５）６５０μＬの緩衝液ＲＷ２を添加し、１２０００ｒｐｍで１５秒間遠心分離してスピンカラムを洗浄し、廃液を捨てた。
６）６５０μＬの緩衝液ＲＷ２を添加し、１２，０００ｒｐｍで２分間遠心分離してスピンカラムを洗浄し、廃液を捨て、次に、全スピンカラムを、工程７において、新しいＲＮａｓｅを含まない２ｍｌ回収チューブに移した。
７）新しいＲＮａｓｅを含まない２ｍｌ回収チューブを交換に使用し、１２，０００ｒｐｍで１分間遠心分離を行い、スピンカラムを乾燥させ、次に、工程８において、全スピンカラムを１．５ｍｌ収集管に移した。
８）交換のために新しい１．５ｍｌの回収チューブを使用し、工程７）の乾燥スピンカラムをその中に置き、３０μＬのＲＮａｓｅ不含水を各スピンカラムに添加し、１２，０００ｒｐｍで２分間遠心分離を行い、得られた溶出液は対応するＲＮＡを含有した。

（３）ＲＮＡ逆転写
ＴａＫａＲａ社製の逆転写キット（ｇＤＮＡ Ｅｒａｓｅｒを含むＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（商標）ＲＴ試薬キット、Ｃａｔ番号ＲＲ０４７Ｑ）をＲＮＡ逆転写のために用いた。工程は、以下のとおりである。
１）ｇＤＮＡの除去：各実験群からＲＮＡ試料を採取し、３μＬのＲＮＡを逆転写のために採取した。まず、各実験群のＲＮＡ試料に５×ｇＤＮＡ消去緩衝液２μＬを加え、反応系にＲＮａｓｅを含まない水１０μＬを加え、よく混合し、４２℃で２分間水浴にかけ、試料中に存在する可能性のあるｇＤＮＡを除去した。
２）逆転写：工程１で得られた試料に適量の酵素、プライマー混合物及び反応緩衝液を添加し、ＲＮａｓｅフリー水を２０μＬの容量に補足するために添加し、反応を３７℃の水浴中で１５分間、次に８５℃の水浴中で５秒間行って、転写によりｃＤＮＡを得た。

（４）リアルタイムＰＣＲ
蛍光定量ＰＣＲ法を用いて、元のウイルス溶液１ミリリットル当たりのコピー数を検出した。反応系をＴＢ Ｇｒｅｅｎ Ｐｒｅｍｉｘ（Ｔａｋａｒａ、Ｃａｔ＃ＲＲ８２０Ａ）と混合し、増幅反応及び読み取りをＳｔｅｐＯｎｅ ＰｌｕｓリアルタイプＰＣＲ装置（ブランド：ＡＢＩ）を用いて行った。元のウイルス溶液１ミリリットルあたりのコピー数を計算した。手順は以下のとおりであった。
１）最初に，標準製品を確立した。プラスミドｐＭＴ－ＲＢＤをそれぞれ５×１０^８コピー／μＬ、５×１０^７コピー／μＬ、５×１０^６コピー／μＬ、５×１０^５コピー／μＬ、５×１０^４コピー／μＬ、５×１０^３コピー／μＬ、５×１０^２コピー／μＬに希釈した。２μＬの標準産物又はｃＤＮＡテンプレートをｑＰＣＲ反応のために採取した。
２）実験に用いたプライマー配列は以下の通りであった（すべて５’－３’方向に示した）：
ＲＢＤ－ｑＦ：ＣＡＡＴＧＧＴＴＴＡＡＣＡＧＧＣＡＣＡＧＧ（配列番号１）
ＲＢＤ－ｑＲ：ＣＴＣＡＡＧＴＧＴＣＴＧＴＧＧＡＴＣＡＣＧ（配列番号２）
３）反応手順は以下の通りであった。
変性前：９５℃、５分間；
サイクリングパラメータ：９５℃１５秒、５４℃１５秒、７２℃３０秒。計４０サイクル。

２．結果
２．１．Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるテトラドリン、クロロキンリン酸及びレムデシビルの毒性
細胞毒性の結果は、試験化合物の処理は、全ての試験濃度で細胞生存率を変化させなかったこと、すなわち、試験化合物は全ての濃度で細胞に毒性影響を及ぼさなかったことを示した（表１～３）。

２．２．テトラドリン、リン酸クロロキン及びレムデシビルの抗ウイルス活性
ウイルス増殖阻害実験の結果は、異なる濃度の試験化合物が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染細胞上清中のウイルスゲノムの複製を効果的に阻害することを示した（表４～６及び図１）。

算出後、０．０１のウイルス感染多重度（ＭＯＩ）の条件で、
テトランドリン：ＥＣ_５０＝１．７１μＭ、ＣＣ_５０＝２４．５１μＭ、ＳＩ＝１４．３３
レムデシビル：ＥＣ_５０＝０．３０μＭ、ＣＣ_５０＝１６０．３０μＭ、ＳＩ＝５３４．３３
リン酸クロロキン：ＥＣ_５０＝１．５４μＭ、ＣＣ_５０＝９２．９３μＭ、ＳＩ＝６０．３４
０．０５のウイルス感染多重度（ＭＯＩ）の条件下で、
テトランドリン：ＥＣ_５０＝２．８８μＭ、ＣＣ_５０＝２４．５１μＭ、ＳＩ＝８．５１
レムデシビル：ＥＣ_５０＝０．５９μＭ、ＣＣ_５０＝１６０．３０μＭ、ＳＩ＝２７１．６９
リン酸クロロキン：ＥＣ_５０＝３．７７μＭ、ＣＣ_５０＝９２．９３μＭ、ＳＩ＝２４．４９。

３．結論
テトランドリン（標準物質はリン酸クロロキン及びレムデシビル）は、異なる試験濃度でｉｎ ｖｉｔｒｏ試験細胞に対して良好な安全性を示した。テトランドリン、レムデシビル、及びリン酸クロロキンは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス分離株ｎＣｏＶ－２０１９ＢｅｔａＣｏＶ／Ｗｕｈａｎ／ＷＩＶ０４／２０１９に対して明らかな阻害効果があり、ウイルス感染のＭＯＩが０．０１の場合、そのＥＣ_５０値はそれぞれ１．７１μＭ、０．３０μＭ及び１．５４μＭであり、対応する選択性指数はそれぞれ１４．３３、５３４．３３及び６０．３４であり、ウイルス感染のＭＯＩが０．０５の場合、そのＥＣ_５０値はそれぞれ２．８８μＭ、０．５９μＭ及び３．７７μＭであり、対応する選択性指数はそれぞれ８．５１、２７１．６９及び２４．４９であった。

テトランドリン、リン酸クロロキン及びレムデシビルは、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対して阻害活性を示した。

実施例２：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するテトラドリンの薬力学試験２
実験材料及び方法は、実施例１と同じであった。具体的な相違点は、抗ウイルス実験では、実施例１の薬物処理工程が、まず、対応する濃度の薬物を含有する１００μＬのＭＥＭ培地（２％ＦＢＳを含有する）をプレートに添加する工程を含み、細胞を１時間前処理したが、この実施例では、薬物処理工程は、細胞を薬物で前処理する工程を含まず、具体的な工程は以下の通りであった。

Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を４８ウェルプレートに、ウェル当たり約１×１０^５細胞で接種し、次に、２０μＬの希釈ウイルスを添加し（ウイルス量は１０００ＴＣＩＤ_５０、すなわちＭＯＩ＝０．０１、ウイルス量は５０００ＴＣＩＤ_５０、すなわちＭＯＩ＝０．０５であった）、次に、細胞をインキュベーターに入れ、１時間インキュベートした。１時間後、ウイルス培養培地を廃棄し、未感染残存ウイルスをＰＢＳで洗浄し、対応する濃度のテトラドリン、レムデシビル及びリン酸クロロキンを含有するＭＥＭ培養培地（２％ＦＢＳを含有）をそれぞれ添加し、細胞中の薬物の最終濃度が実施例１の表４、５及び６に示される薬物濃度と同じであるようにし、次に、細胞を３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター中に置き、その後、４８時間培養した。細胞対照群に、２％ＦＢＳを含有する細胞培地中の最終濃度が０．３％のＤＭＳＯ、又は２％ＦＢＳを含有する細胞培地中の０．５％ＰＢＳを添加した。

その後のＲＮＡ抽出、ＲＮＡ逆転写及びリアルタイムＰＣＲの方法は、実施例１と同じであった。
算出後、０．０１のウイルス感染多重度（ＭＯＩ）の条件で、
テトランドリン：ＥＣ_５０＝１．６１μＭ、ＣＣ_５０＝２４．５１μＭ、ＳＩ＝１５．２２
レムデシビル：ＥＣ_５０＝０．２３μＭ、ＣＣ_５０＝１６０．３０μＭ、ＳＩ＝６９６．９６
リン酸クロロキン：ＥＣ_５０＝４．５２μＭ、ＣＣ_５０＝９２．９３μＭ、ＳＩ＝２０．５６
０．０５のウイルス感染多重度（ＭＯＩ）の条件で、
テトランドリン：ＥＣ_５０＝１．９５μＭ、ＣＣ_５０＝２４．５１μＭ、ＳＩ＝１２．５１
レムデシビル：ＥＣ_５０＝０．６２μＭ、ＣＣ_５０＝１６０．３０μＭ、ＳＩ＝２５８．５５
リン酸クロロキン：ＥＣ_５０＝３．６３μＭ、ＣＣ_５０＝９２．９３μＭ、ＳＩ＝２５．６０。

結論：
抗ウイルス実験の結果は、テトランドリン、レムデシビル、及びリン酸クロロキンは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス分離株ｎＣｏＶ－２０１９ＢｅｔａＣｏＶ／Ｗｕｈａｎ／ＷＩＶ０４／２０１９に対して明らかな阻害効果があり、ウイルス感染のＭＯＩが０．０１の場合、そのＥＣ_５０値はそれぞれ１．６１μＭ、０．２３μＭ及び４．５２μＭであり、対応する選択性指数はそれぞれ１５．２２、６９６．９６及び２０．５６であり、ウイルス感染のＭＯＩが０．０５の場合、そのＥＣ_５０値はそれぞれ１．９５μＭ、０．６２μＭ及び３．６３μＭであり、対応する選択指数はそれぞれ１２．５１、２５８．５５及び２５．６０であった（図２を参照されたい）。

テトランドリン、リン酸クロロキン及びレムデシビルは、細胞のウイルス感染後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対して阻害活性を示した。

実施例３：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するテトランドリンの半最大有効濃度（ＥＣ_５０）
薬物のＥＣ_５０は、核酸定量によって決定された。具体的な工程は以下の通りであった。Ｖｅｒｏ細胞を４８ウェルプレートに約１０，０００細胞／ウェルの濃度で１日前に接種した。薬物テトラドリンは、最終濃度が２０、１０、５、２．５、１．２５、０．６２５及び０．３１２５μＭになるように、２％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏから購入、Ｃａｔ番号１６０００００００４４）で調製し、細胞に添加した。細胞を３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター中に置き、１時間前処理した。次に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス（ｎＣｏＶ－２０１９ＢｅｔａＣｏＶ／Ｗｕｈａｎ／ＷＩＶ０４／２０１９分離株、ＧＩＳＡＩＤ登録番号はＥＰＩ ＩＳＬ ４０２１２４であり、中国科学院武漢ウイルス学研究所によって分離及び継代培養された）を、２％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で希釈し、ウイルス量が１００ＴＣＩＤ_５０となるように対応するウェルに加え、３７℃で２時間、吸着させ培養した後、ウイルス溶液を捨て、各ウェル（２００μＬ／ウェル）に、テトランドリンの最終濃度がウェルで２０、１０、５、２．５、１．２５、０．６２５及び０．３１２５μＭになるように添加した。薬剤濃度ごとに３連のウェルを設定し、ウイルス対照群と正常細胞対照群を設定し、培養は３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーターで行い、細胞変性効果（ＣＰＥ）を毎日観察した。感染の２日後、各ウェルから５０μＬの細胞上清を採取して核酸を抽出し、ウイルス量を定量的ＲＴ－ＰＣＲで検出した。

ＲＮＡ抽出、ＲＮＡ逆転写及びＲＴ－ＰＣＲの方法は実施例１と同じであった。
ウイルスＲＮＡコピー数とＣＴ値の換算式：ＲＮＡコピー数／ｍＬ＝ＣＴ＊（－０．３）＋１３．１７に従い、ウイルス量を算出した。式：（感染率（％）＝薬剤群のＲＮＡコピー数／ウイルス対照群のＲＮＡコピー数×１００％）を用いて、薬剤処置の異なる濃度でウイルス感染率（％）を算出し、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ７ソフトを用いてＳ－フィッティング分析を行い、そのフィッティング結果を図３に示し、ＥＣ_５０を算出した。
その結果は、テトラドリンが細胞レベルでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対して阻害作用を示し、ＥＣ_５０が８．９９μＭであることが示された（図３）。

本出願の具体的な実施形態を詳細に説明したが、当業者は、開示された全ての教示に基づいて、これらの詳細の様々な修飾及び置換を行うことができ、これらの変更はすべて本出願の保護範囲内であることを理解するであろう。本出願の全範囲は、添付の特許請求の範囲及びその同等物によって与えられる。

参考文献
Zaki AM, van Boheemen S, Bestebroer T M, et al. Isolation of a novel coronavirus from a man with pneumonia in Saudi Arabia[J]. N Engl J Med, 2012, 367(19): 1814-1820.
Zhong NS, Zheng BJ, Li YM, et al. Epidemiology and cause of severe acute respiratory syndrome (SARS) in Guangdong, People's Republic of China, in February, 2003[J]. The Lancet, 2003, 362(9393): 1353 -1358.
Cui J, Li F, Shi ZL. Origin and evolution of pathogenic coronaviruses[J]. Nat Rev Microbiol, 2019, 17(3): 181-192.
Wang M, Cao R, Zhang L, et al. Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recently emerged novel coronavirus (2019-nCoV) in vitro[J]. Cell Res, 2020, 0: 1-3.

Claims (33)

1. コロナウイルスによって引き起こされる疾患若しくは感染症、又はコロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患若しくは感染症を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉ：
   

   

   で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用。
2. コロナウイルスに関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉ：
   

   

   で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用。
3. 細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるコロナウイルスの複製若しくは再生を阻害するための製造物の製造、又はコロナウイルス阻害剤としての製造物の製造における、式Ｉ：
   

   

   で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用。
4. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉ：
   

   

   で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用。
5. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状、又は高血圧を伴う無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防及び／又は治療するための製造物の製造における、式Ｉ：
   

   

   で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用。
6. ＣＯＶＩＤ－１９若しくは高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９を予防及び／又は治療するための製造物の製造、あるいはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２阻害剤としての製造物の製造、あるいは細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製又は再生を阻害するための製造物の製造における、式Ｉ：
   

   

   で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の使用。
7. 製造物が、ヒト薬物又は動物用獣医薬である、請求項１～６のいずれか１項に記載の使用。
8. 製造物が、固体調製物、注射剤、スプレー剤、液体調製物、吸入調製物又は化合物調製物である、請求項７に記載の使用。
9. 哺乳動物が、ウシ、ウマ、ヤギ、イノシシ、イヌ、ネコ、げっ歯類、霊長類を含み、例えば、ヒト、イヌ、又はブタである、請求項３又は６に記載の使用。
10. 医薬組成物が、薬学的に許容される担体又は賦形剤をさらに含み、具体的には、医薬組成物が、固体調製物、注射剤、吸入調製物、スプレー剤、液体調製物、又は化合物調製物である、請求項１～６のいずれか１項に記載の使用。
11. コロナウイルスによって引き起こされる疾患若しくは感染症の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
12. コロナウイルスに関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
13. 細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるコロナウイルスの複製又は再生の阻害に使用するため、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
14. コロナウイルス阻害剤として使用するため、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
15. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患若しくは症状、又は無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
16. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患若しくは症状、又は高血圧を伴う無症候性若しくは症候性ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
17. ＣＯＶＩＤ－１９、又は高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９の予防及び／又は治療に使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
18. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２阻害剤として使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
19. 細胞（例えば、哺乳動物細胞）におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製又は再生の阻害に使用するための、式Ｉ：
    

    

    で表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは上記式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物。
20. コロナウイルスに引き起こされる疾患若しくは感染症、又はコロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患若しくは感染症を予防及び／又は治療する方法であって、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的に有効な量を投与することを含む、上記方法。
21. コロナウイルスに関連する肺疾患若しくは症状、又は高血圧を伴う肺疾患又は症状に関連する肺疾患若しくは症状を予防及び／又は治療する方法であって、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的に有効な量を投与することを含む、上記方法。
22. 必要とする宿主におけるコロナウイルスの複製又は再生を阻害する方法であって、それを必要とする宿主に、式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和物、あるいは式Ｉで表される化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくはその溶媒和物及び／若しくは水和物を含む医薬組成物の予防的及び／又は治療的に有効な量を投与することを含む、上記方法。
23. コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項２０～２２のいずれか１項に記載の方法。
24. コロナウイルスによって引き起こされる疾患がＣＯＶＩＤ－１９である、請求項２０に記載の方法。
25. コロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う疾患が、高血圧を伴うＣＯＶＩＤ－１９である、請求項２０に記載の方法。
26. コロナウイルスに関連する肺疾患又は症状が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する肺疾患又は症状である、請求項２１に記載の方法。
27. コロナウイルスに関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連し、高血圧を伴う肺疾患又は症状である、請求項２１に記載の方法。
28. コロナウイルスによって引き起こされる感染が、無症候性又は症候性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である、請求項２０に記載の方法。
29. コロナウイルスによって引き起こされ、高血圧を伴う感染が、高血圧を伴う無症候性又は症候性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である、請求項２０に記載の方法。
30. 宿主が哺乳動物である、請求項２０～２２のいずれか１項に記載の方法。
31. 哺乳動物が、ウシ、ウマ、ヤギ、イノシシ、イヌ、ネコ、げっ歯類、霊長類を含み、好ましくは、哺乳動物が、ヒト、イヌ又はブタである、請求項２０～２２のいずれか１項に記載の方法。
32. 哺乳動物が、ウシ、ウマ、ヤギ、イノシシ、イヌ、ネコ、げっ歯類、霊長類を含み、例えば、ヒト、イヌ又はブタである、請求項１３又は１９に記載の化合物、その幾何学的異性体、又はその薬学的に許容される塩及び／若しくは溶媒和物及び／若しくは水和。
33. 医薬組成物が、薬学的に許容される担体又は賦形剤をさらに含み、具体的には、医薬組成物が、固体調製物、注射剤、吸入調製物、スプレー剤、液体調製物、又は化合物調製物である、請求項１１～１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、又は請求項２０～２２のいずれか１項に記載の使用。

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