JP2023500321A - キメラ抗原受容体ｔ細胞療法 - Google Patents

Abstract

本明細書では、免疫療法又は細胞療法に適した細胞を調製、産生、処理、培養、単離、又は作製するための方法、及び、細胞療法におけるそれらの使用が提供される。

Description

本出願は、ＣＡＲ－Ｔ細胞、それらの作製方法、及びがんを治療するためのそれらの使用方法に関する。

ヒトがんは、その性質上、異常ながん細胞になるように遺伝的又は後成的変換をされた正常細胞から構成される。がん細胞は、正常細胞によって発現されるものとは異なるタンパク質及び他の抗原を発現する。これらの異常な腫瘍抗原は、がん細胞を特異的に標的化して死滅させるために身体の自然免疫系によって使用され得る。しかしながら、がん細胞は、Ｔリンパ球及びＢリンパ球などの免疫細胞ががん細胞をうまく標的化するのを防ぐために様々な機構を用いる。ヒトＴ細胞療法は、対象、例えば患者におけるがん細胞を標的化し、死滅させるための、エクスビボで濃縮した又は修飾したヒトＴ細胞に依存する。腫瘍抗原の標的化が可能な天然に存在するＴ細胞が豊富な濃度のＴ細胞集団を調製すること、循環腫瘍細胞を除去すること、及び／又は、既知のがん抗原を特異的に標的とするようにＴ細胞を遺伝子改変することにより、がん療法に対するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）－Ｔ細胞の集団を生成するための様々な技術が開発されてきた。これらの治療法のいくつかは、腫瘍サイズ及び患者生存率に有望な効果を示している。

本明細書に記載された任意の態様又は実施形態は、本明細書に開示された任意の他の態様又は実施形態と組み合わせることができる。本発明は、その詳細な説明と併せて説明されているが、この説明は、例示を意図しており、添付の特許請求の範囲によって部分的に規定される本発明の範囲を限定するものではない。他の態様、利点、及び変更は、以下の実施形態／請求項の範囲内である。

実施形態１．マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又はＢ細胞ＡＬＬの治療が必要な対象における、その方法であって、対象に、抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している自己Ｔ細胞を含む、治療有効量のＴ細胞製品を投与することを含む、方法。

実施形態２．ＭＣＬ及びＢ細胞ＡＬＬが、再発性又は難治性ＭＣＬ及びＢ細胞ＡＬＬであり、任意選択的に、ＭＣＬが、古典型、芽球様型、及び多形性型ＭＣＬである、実施形態１に記載の方法。

実施形態３．ＭＣＬ及びＢ細胞ＡＬＬが、化学療法、放射線療法、免疫療法（Ｔ細胞療法、及び／又は、抗体若しくは抗体薬物コンジュゲートによる治療を含む）、自家幹細胞移植、又はこれらの任意の組み合わせのうちの１つ以上に対して抵抗性であるか、又はその後に再発している、実施形態１及び２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４．対象が、１～５種類の先行治療を受けており、任意選択的に、先行治療のうちの少なくとも１つが、自家ＳＣＴ、抗ＣＤ２０抗体、アントラサイクリン若しくはベンダムスチンを含む化学療法、及び／又は、ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫｉ）から選択される、実施形態１～３のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５．ＢＴＫｉが、イブルチニブ又はアカラブルチニブである、実施形態４に記載の方法。

実施形態６．Ｒ／Ｒ Ｂ細胞ＡＬＬが、第１選択療法に対する抵抗性（すなわち、一次治療抵抗性）、初回寛解１２ヶ月以内の再発、２種類以上の先行全身療法後の再発若しくは抵抗性、又は同種幹細胞移植（ＳＣＴ）後の再発として定義され、任意選択的に、対象は、骨髄芽球５％以上、Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐのパフォーマンスステータスが０若しくは１、及び／又は、十分な腎、肝、及び心機能を有することが求められる、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。

実施形態７．Ｂ細胞 ＡＬＬの対象が先行ブリナツモマブを投与されている場合、対象は、ＣＤ１９発現が≧９０％である白血病性芽球を有することが求められる、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態８．対象が、白血球アフェレーシス後かつ前処置／リンパ球除去化学療法の前にブリッジング療法を受ける、実施形態１～７のいずれか１つに記載の方法。

実施形態９．ＭＣＬの対象が、静脈内シクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ２及び静脈内フルダラビン３０ｍｇ／ｍ２のリンパ球除去化学療法レジメンを受け、その両方がＴ細胞注入の５日前、４日前、及び３日前に各々投与される、実施形態１～８のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１０．Ｂ細胞ＡＬＬの対象が、Ｔ細胞注入の４日前、３日前、２日前の各々の静脈内（ＩＶ）フルダラビン２５ｍｇ／ｍ２／日と、注入の２日前のＩＶシクロホスファミド９００ｍｇ／ｍ２／日とのリンパ球除去レジメンを受ける、実施形態１～９のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１１．ＭＣＬブリッジング療法が、デキサメタゾン（例えば、ＰＯ又はＩＶ２０～４０ｍｇ当量、１日１回１～４日間）；メチルプレドニゾロン、イブルチニブ（例えば、ＰＯ５６０ｍｇ、１日１回）、及び／若しくはアカラブルチニブ（例えば、ＰＯ１００ｍｇ、１日２回）；免疫調節剤；Ｒ－ＣＨＯＰ、ベンダムスチン；アルキル化剤；並びに／又は、白金系薬剤から選択され、ブリッジング療法が、白血球アフェレーシス後に投与され、例えば、前処置化学療法前５日間以内に完了している、実施形態８～１０のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１２．Ｂ細胞ＡＬＬの対象が、次のブリッジング化学療法レジメンのうちのいずれか１つ以上を受け得る、実施形態８～１０のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１３．Ｔ細胞製品が、正の濃縮と、その結果生ずる循環がん細胞の部分的又は完全な枯渇によって、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から調製される、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋ＣＡＲ Ｔ細胞を含む、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１４．ＰＢＭＣが、ＣＤ４＋細胞及びＣＤ８＋細胞の正の選択によってＴ細胞について濃縮され、ＩＬ－２の存在下で抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体によって活性化され、次いで、抗ＣＤ１９単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、ＣＤ２８、及びＣＤ３ζドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲを含有する複製不全ウイルスベクターによって形質導入される、実施形態１３に記載の方法。

実施形態１５．Ｔ細胞製品が、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について正の選択がなされていない白血球アフェレーシス産物由来のＴ細胞を含むＴ細胞製品よりも少ないがん細胞を含む、実施形態１３及び１４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１６．Ｔ細胞製品が、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について正の選択／濃縮がなされていない白血球アフェレーシス産物由来のＴ細胞を含むＴ細胞製品に対して、他の優れた製品特性を有する、実施形態１３～１５のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１７．優れた製品特性が、ＣＤＲＡ４５＋ＣＣＲ７＋（ナイーブ様）Ｔ細胞の割合の増加、分化したＴ細胞の割合の減少、ＣＤ３＋細胞の割合の増加、ＩＦＮ－γ産生の減少、ＣＤ３－細胞の割合の減少から選択される、実施形態１６に記載の方法。

実施形態１８．ＭＣＬの対象は、体重１ｋｇ当たり１．８×１０６、１．９×１０６、又は２×１０６個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞、最大２×１０８個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞（１００ｋｇ以上の患者の場合）を１回以上投与され、Ｂ細胞ＡＬＬの対象は、体重１ｋｇ当たり０．５×１０６、１×１０６、又は２×１０６個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞、最大２×１０８個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞（１００ｋｇ以上の患者の場合）を投与される、実施形態１～１７のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１９．対象が、初回注入に対して完全奏功を達成した場合、対象は、２回目の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入を受けることができ、３ヶ月超の寛解後に増悪した場合、ＣＤ１９発現が保持され、ＣＡＲに対する中和抗体の疑いがないことを条件とし、応答は、Ｌｕｇａｎｏ分類を使用して評価される、実施形態１～１７のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２０．Ｔ細胞投与後、対象が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び神経毒性の徴候及び症状についてモニタリングされる、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２１．対象が、ＣＲＳ及び神経毒性の徴候及び症状について、注入後少なくとも７日間、好ましくは４週間毎日モニタリングされる、実施形態２０に記載の方法。

実施形態２２．ＣＲＳに関連する徴候又は症状が、発熱、悪寒、疲労、頻脈、悪心、低酸素症、及び低血圧を含み、神経学的事象に関連する徴候又は症状が、脳症、けいれん、意識レベルの変化、発話障害、振戦、及び錯乱を含む、実施形態２０及び２１のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２３．ＭＣＬの対象におけるサイトカイン放出症候群が、以下のプロトコルに従って管理される、実施形態２０～２２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２４．ＭＣＬの対象における神経毒性が、以下のプロトコルに従って管理される、実施形態２０～２３のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２５．ＭＣＬの対象が、Ｋｉ－６７腫瘍増殖指標が５０％以上、及び／又は、ＴＰ５３突然変異の存在によって決定される高リスク患者である、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２６．Ｂ細胞ＡＬＬの対象におけるＣＲＳが、以下のプロトコルに従って管理される、実施形態２０～２２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２７．Ｂ細胞ＡＬＬの対象における神経毒性が、以下の２つのプロトコルのうちの１つに従って管理される、実施形態２０～２２及び２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２８．Ｂ細胞ＡＬＬの対象が、次のブリッジング化学療法レジメンのうちのいずれか１つ以上を受け得る、実施形態１～２７のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２９．実施形態１～２８のいずれか１つに記載のマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又はＢ細胞ＡＬＬを治療するための方法で使用するための、抗ＣＤ１９ ＣＡＲを発現している自己Ｔ細胞。

実施形態３０．実施形態１～２８のいずれか１つに記載のマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又はＢ細胞ＡＬＬを治療するための薬剤の製造における、抗ＣＤ１９ ＣＡＲを発現している自己Ｔ細胞の使用。

実施形態３１．予測方法であって、
（ｉ）ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の方法による）に対する対象の客観的奏効率を予測する方法であって、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルを測定し、それらを参照標準と比較することを含み、客観的奏効率は、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルと正に関連し、客観的奏効率は、完全奏効及び部分奏効の両方を含み、全ての応答は、Ｌｕｇａｎｏ分類を使用して評価される、方法、
（ｉｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の方法による）に応答する微小残存病変（例えば、４週目）を予測する方法であって、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルを測定し、それらを参照標準と比較することを含み、陰性の微小残存病変が、より高いピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルと関連する、方法、
（ｉｉｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の方法による）を受けた対象における、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３の神経学的事象（ＮＥ）を予測する方法であって、治療後にピークＣＡＲ Ｔ細胞増殖を測定し、そのレベルを参照値と比較することを含み、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖が高いほど、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥ事象の可能性が高くなる、方法、
（ｉｖ） グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の方法による）後のＧＭ－ＣＳＦ及びＩＬ－６のピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含み、これらのサイトカインのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥの可能性が高くなる、方法、
（ｖ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の方法による）を受けた対象におけるグレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療後の血清フェリチンのピークレベルを測定し、それを参照レベルと比較することを含み、フェリチンのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＣＲＳの可能性が高くなる、方法、
（ｖｉ） グレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載）後の血清ＩＬ－２及びＩＦＮ－γのピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－２及びＩＦＮ－γのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＮＥの可能性が高くなる、方法、
（ｖｉｉ） グレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載）後のＣ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び／又は血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含み、Ｃ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び／又は血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルが高いほど、グレード≧３のＮＥの可能性が高くなる、方法、
（ｖｉｉｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つの方法による）後のグレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及び／又はパーフォリンのピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及び／又はパーフォリンのピーク血清レベルが、グレード≧３のＣＲＳと正に関連する、方法、
（ｉｘ） Ｂ細胞ＡＬＬのＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つの方法による）後のグレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－１５のピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－１５のピーク血清レベルがグレード≧３のＣＲＳと負に関連する、方法、
（ｘ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つの方法による）後のグレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを予測する方法であって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢのピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢのピーク血清レベルが、グレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥと正に関連する、方法、
（ｘｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、実施形態１～２８のいずれか１つに記載）４週間／１ヶ月後に患者がＭＲＤ（感度１０^－５）陰性になるかどうかを予測する方法であって、治療後のＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、及び／又はＩＬ－２のピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照標準と比較することを含み、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、及び／又はＩＬ－２のピーク血清レベルが、１ヶ月目のＭＲＤ陰性と正に関連する、方法。

実施形態３２．ＣＲＳ及びＮＥが、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２０１４；１２４：１８８－１９５に記載される方法に従ってグレード付けされる、実施形態２０～２４、２６、２７、及び３０～３１のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３３．参照標準が、既知の応答、毒性のグレード、及びＭＲＤレベルを有する患者集団の四分位分析など、バイオマーカー分野で一般的に使用される任意の方法によって確立される、実施形態３１に記載の方法。

実施形態３４．ＣＡＲ Ｔ細胞レベルが、血液中のＤＮＡマイクログラム当たりのＣＡＲ遺伝子コピー数によって測定される、実施形態３１に記載の方法。

実施形態３５．ＣＡＲ Ｔ細胞注入後のグレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥと正に関連するサイトカインのレベル／活性を低下させ、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを低下させることを更に含む、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３６．それを必要とする対象における、（例えば、古典型、芽球様型、及び多形性型ＭＣＬ、並びにＢ細胞ＡＬＬの）ＣＡＲ Ｔ細胞治療の有効性を改善する方法であって、対象に投与するＴ細胞製品のＴ細胞表現型を操作することを含み、任意選択的に、操作は、ＣＤ３＋Ｔ細胞の数を増加させること、ＣＤ３－細胞の数を減少させること、製造中のＴ細胞製品中のＣＤＲＡ４５＋ＣＣＲ７＋（ナイーブ様）Ｔ細胞の数／割合を増加させ、かつ／又は、分化した細胞の数／割合を減少させること、Ｔ細胞によるＩＦＮ－γ産生のレベルを減少させること、を含み、改善は、Ｔ細胞製品中のＣＤＲＡ４５＋ＣＣＲ７＋（ナイーブ様）Ｔ細胞の数／割合、及び／又は、分化した細胞の数／割合について意図的な操作を全く行わずに調製されたＴ細胞製品の有効性に対して観察される、方法。

Ｋｉ－６７増殖指数によって定義される予後群における同等の薬力学的プロファイル、及び変異ＴＰ５３を有する患者におけるサイトカインレベルの増加傾向。 Ｋｉ－６７増殖指数によって定義される予後群における同等の薬力学的プロファイル、及び変異ＴＰ５３を有する患者におけるサイトカインレベルの増加傾向。 Ｋｉ－６７増殖指数によって定義される予後群における同等の薬力学的プロファイル、及び変異ＴＰ５３を有する患者におけるサイトカインレベルの増加傾向。 Ｋｉ－６７増殖指数によって定義される予後群における同等の薬力学的プロファイル、及び変異ＴＰ５３を有する患者におけるサイトカインレベルの増加傾向。 Ｋｉ－６７増殖指数によって定義される予後群における同等の薬力学的プロファイル、及び変異ＴＰ５３を有する患者におけるサイトカインレベルの増加傾向。 Ｋｉ－６７増殖指数によって定義される予後群における同等の薬力学的プロファイル、及び変異ＴＰ５３を有する患者におけるサイトカインレベルの増加傾向。

ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。 ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加。

ＺＵＭＡ－３試験デザイン。ＣＡＲ、キメラ抗原受容体；ＤＬＴ、用量制限的毒性。

ＺＵＭＡ－３ ＣＯＮＳＯＲＴの略図。^＊ＡＥは、グレード３の肺腫瘤（ｎ＝１）、グレード１の硬膜下血腫（ｎ＝１）、及びグレード３の発熱性好中球減少症（ｎ＝１）であり、†ＡＥは、グレード４の敗血症（ｎ＝１）、及びグレード５の敗血症（ｎ＝１）であり、‡１例の患者は、試験除外基準である深部静脈血栓症のため適応外使用でＫＴＥ－Ｘ１９を投与された。ＡＥ、有害事象。

完全奏効率のサブグループ解析。ＢＭ、骨髄；ＯＲＲ、全寛解率；ＳＣＴ、幹細胞移植。

用量毎の奏効期間、無再発生存期間、及び全生存期間。

ピークＣＡＲ Ｔ細胞増殖及び応答、微小残存病変、及び毒性との関連性。

ＣＡＲ Ｔ細胞曲線下面積の応答、微小残存病変、及び毒性との関連性。ＡＥ、有害事象；ＡＵＣ、曲線下面積；ＣＡＲ、キメラ抗原受容体；ＣＲＳ、サイトカイン放出症候群；ＭＲＤ、微小残存病変。

経時的ピークサイトカインレベル。

ベースライン及び注入後ピークにおける血清サンプル中の炎症性マーカー。^＊値は、使用したアッセイにおける定量化の下限を表す。†値は、使用したアッセイにおける定量化の上限を表す。ＡＥ、有害事象；ＣＡＲ、キメラ抗原受容体；ＣＣＬ、Ｃ－Ｃモチーフリガンド；ＣＲＰ、Ｃ反応性タンパク質；ＣＸＣＬ、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカインリガンド；ＦＧＦＢＦ、線維芽細胞成長因子基本形態；ＦＬＴ－１、ｆｍｓ関連受容体チロシンキナーゼ１；ＧＭ－ＣＳＦ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子；ＩＣＡＭ－１、細胞間接着分子１；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＬ、インターロイキン；ＭＣＰ、単球走化性タンパク質－１；ＭＤＣ、マクロファージ由来ケモカイン；ＭＩＰ、マクロファージ炎症性タンパク質；ＰＤＬ１、プログラム死リガンド１；ＰＬＧＦ、胎盤増殖因子；Ｒα、受容体α；ＲＡ、受容体アンタゴニスト；ＳＡＡ、血清アミロイドＡ；ＳＦＡＳＬ、可溶性Ｆａｓリガンド；ＴＡＲＣ、胸腺及び活性化制御サイトカイン；ＴＮＦ、腫瘍壊死因子；ＶＣＡＭ、血管細胞接着タンパク質；ＶＥＧＦ、血管内皮成長因子；ＶＥＧＦＣ、血管内皮成長因子Ｃ；ＶＥＧＦＤ、血管内皮成長因子Ｄ。

血清バイオマーカーとサイトカイン放出症候群及び神経学的事象との関連。^＊値は、使用したアッセイにおける定量化の下限を表す。†値は、使用したアッセイにおける定量化の上限を表す。ＣＲＰ、Ｃ反応性タンパク質；ＣＸＣＬ、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカインリガンド；ＧＭ－ＣＳＦ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子；ＩＦＮγ、インターフェロンγ；ＩＬ、インターロイキン；ＩＰ、インターフェロンγ誘導タンパク質；ＭＣＰ、単球誘引性タンパク質；Ｒα、受容体α；ＲＡ、受容体アンタゴニスト；ＳＡＡ、血清アミロイドＡ。

ＭＣＬ形態サブグループ全体のＫＴＥ－Ｘ１９の薬力学的プロファイル。ＡＵＣ、曲線下面積；ＣＡＲ、キメラ抗原受容体；ＣＸＣＬ１０、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカインリガンド１０；ＩＦＮ－ｇ、インターフェロンγ；ＩＬ、インターロイキン；ＭＣＬ、マントル細胞リンパ腫；ＭＣＰ－１、単球走化性タンパク質－１；ＭＩＰ－１β、マクロファージ炎症性タンパク質－１β；ＰＤ－Ｌ１、プログラム死リガンド１；ＰＲＦ、パーフォリン；Ｒα、受容体α；ＴＮＦ－α、腫瘍壊死因子α。

ＭＣＬ形態サブグループ全体のＫＴＥ－Ｘ１９の薬理学的プロファイル。

ＢＴＫｉ先行治療サブグループ全体のＫＴＥ－Ｘ１９の薬力学的プロファイル。ＡＵＣ、曲線下面積；ＣＡＲ、キメラ抗原受容体；ＣＸＣＬ１０、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカインリガンド１０；ＩＦＮ－ｇ、インターフェロンγ；ＩＬ、インターロイキン；ＭＣＬ、マントル細胞リンパ腫；ＭＣＰ－１、単球走化性タンパク質－１；ＭＩＰ－１β、マクロファージ炎症性タンパク質－１β；ＰＤ－Ｌ１、プログラム死リガンド１；ＰＲＦ、パーフォリン；Ｒα、受容体α；ＴＮＦ－α、腫瘍壊死因子α。

ＢＴＫｉ先行治療サブグループ全体のＫＴＥ－Ｘ１９の薬理学的プロファイル。

サブグループ全体の継続中の奏功率。

本明細書で別途明示的に提供される場合を除いて、以下の用語の各々は、以下に記載される意味を有するものとする。追加の定義は、出願全体を通して記載されている。別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、当業者によって一般的に理解されている意味を有する。例えば、「Ｃｏｎｃｉｓｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」Ｊｕｏ，Ｐｅｉ－Ｓｈｏｗ，２ｎｄ ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、「Ｔｈｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」３ｒｄ ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、及び「Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓは、本出願で使用される用語の多くに関する一般的な辞書として当業者に提供されている。

単位、接頭辞及び記号は、Ｓｙｓｔｅｍｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｄｅ Ｕｎｉｔｅｓ（ＳＩ）で受け入れられている形式で提示される。数値範囲は、範囲を定義する数を含む。本明細書で提供される開示は、本出願の様々な態様の限定ではなく、本明細書全体を参照することによるものであり得る。他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が関連する当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Ｊｕｏ、「Ｔｈｅ Ｃｏｎｃｉｓｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」、第２版、（２００１）、ＣＲＣプレス；「Ｔｈｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ＆Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」、第５版、（２０１３）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；及び「Ｔｈｅ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ Ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」、Ｃａｍｍａｃｋら編、第２版、（２００６）、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓは、本開示で使用される用語の多くについて全般的な辞書を当業者に提供している。

冠詞「ａ」又は「ａｎ」は、任意の引用された又は列挙された構成要素の「１つ以上」を指す。

用語「約」又は「本質的に含む」は、当業者によって決定される特定の値又は組成について許容可能な誤差範囲内にある値又は組成を指し、これは、その値又は組成がどのように測定又は決定されるか、すなわち、測定系の限界にある程度依存する。例えば、「約」又は「本質的に含む」は、当技術分野の慣行によって１×以上の標準偏差の範囲内であることを意味し得る。あるいは、「約」又は「本質的に含む」は、最大１０％（すなわち、±１０％）の範囲を意味し得る。例えば、約３ｍｇは、２．７ｍｇ～３．３ｍｇ（１０％の場合）の任意の数を含み得る。生物学的システム又はプロセスに関して、この用語は、値の最大一桁、又は最大５倍を意味し得る。本出願において特定の値又は組成が提示される場合、特に明記しない限り、「約」又は「本質的に含む」の意味は、その値又は組成について許容可能な誤差範囲を含む。任意の濃度範囲、パーセンテージ（百分率）範囲、比の範囲、又は整数の範囲は、特に明記しない限り、列挙された範囲内の任意の整数の値、及び適宜その分数（整数の１／１０及び１００分の１など）を含む。

本明細書で使用される場合、特に明記されるか、又は文脈から明らかでない限り、「又は」という用語は包括的であると理解され、「又は」及び「及び」の両方を包含する。用語「及び／又は」は、他のものの有無にかかわらず、２つの指定された特徴又は構成要素の各々を指す。したがって、本明細書で、例えば、「Ａ及び／又はＢ」などの語句で使用される「及び／又は」という用語は、「Ａ及びＢ」、「Ａ又はＢ」、「Ａ」（単独）、及び「Ｂ」（単独）を含むことを意図している。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／又はＣ」などの語句で使用される「及び／又は」という用語は、次の態様、すなわち、Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；並びにＣ（単独）の各々を包含することを意図している。

「例えば」及び「すなわち」という用語は、単に例として使用され、限定を意図するものではなく、本明細書で明示的に列挙された項目のみを指すと解釈されない。

「以上」、「少なくとも」、「超」などの用語、例えば、「少なくとも１つ」は、限定するものではないが、少なくとも、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９ ２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、若しくは、１５０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、又は記載された値を超える値を含む。その間の任意のより大きい数又は分数も含まれる。「以下」という用語は、記載された値よりも小さい各値を含む。例えば、「１００個以下のヌクレオチド」には、１００、９９、９８、９７、９６、９５、９４、９３、９２、９１、９０、８９、８８、８７、８６、８５、８４、８３、８２、８１、８０、７９、７８、７７、７６、７５、７４、７３、７２、７１、７０、６９、６８、６７、６６、６５、６４、６３、６２、６１、６０、５９、５８、５７、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、及び０個のヌクレオチドが含まれる。その間の任意のより少ない数又は分数も含まれる。

「複数」、「少なくとも２つ」、「２つ以上」、「少なくとも２番目」などの用語は、限定するものではないが、少なくとも、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９ ２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、若しくは、１５０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、又はそれ以上を含む。その間の任意のより大きい数又は分数も含まれる。

本明細書全体を通して、「含む（comprising）」という語又は「含む（comprises）」若しくは「含む（comprising）」などの変化形は、記載された要素、整数若しくはステップ、又は要素、整数若しくはステップの群を含むことを意味するが、任意の他の要素、整数若しくはステップ、又は要素、整数若しくはステップの群を除外することを意味しないと理解される。態様が「含む（comprising）」という文言で本明細書に記載されている場合は常に、「からなる（consisting of）」及び／又は「から本質的になる（consisting essentially of）」という用語で記載されている他の類似の態様もまた提示されていることが理解される。「からなる」という用語は、特許請求の範囲において指定されていない任意の要素、工程、又は成分を除外する。Ｉｎ ｒｅ Ｇｒａｙ，５３ Ｆ．２ｄ ５２０，１１ ＵＳＰＱ ２５５（ＣＣＰＡ １９３１）、Ｅｘ ｐａｒｔｅ Ｄａｖｉｓ，８０ ＵＳＰＱ ４４８，４５０（Ｂｄ．Ａｐｐ．１９４８）（「からなる」は、「元から関連している不純物を除く、引用されたもの以外の材料を含めるようにクレームを閉鎖すること」として定義される）。「から本質的になる」という用語は、特定される材料又は工程、並びに、請求される特許の「基本的かつ新しい特徴に実質的に影響しないもの」に、特許請求の範囲を制限する。

本明細書で使用される場合、具体的に述べられているか、又は文脈から明らかである場合を除き、「約」という用語は、当業者によって決定される特定の値又は組成について許容可能な誤差範囲内にある値又は組成を指し、これは、その値又は組成がどのように測定又は決定されるか、すなわち測定系の限界にある程度依存する。例えば、「約」又は「およそ」は、当技術分野の慣行によって１×以上の標準偏差の範囲内であることを意味し得る。「約」又は「およそ」は、最大１０％（すなわち、±１０％）の範囲を意味し得る。したがって、「約」は、記載された値よりも、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、０．０１％、又は０．００１％大きいか又は小さいと理解し得る。例えば、約５ｍｇは、４．５ｍｇ～５．５ｍｇの任意の量を含み得る。更に、特に生物学的な系又はプロセスに関して、この用語は、最大で１桁違いの値又は最大で５倍の値を意味し得る。本開示において特定の値又は組成が提示される場合、特に明記しない限り、「約」又は「およそ」の意味は、その特定の値又は組成物について許容可能な誤差範囲内にあると想定すべきである。

本明細書に記載されるように、任意の濃度範囲、パーセンテージ（百分率）範囲、比の範囲、又は整数の範囲は、特に明記しない限り、列挙された範囲内の任意の整数の値、及び適宜その分数（整数の１／１０及び１００分の１など）を含むと理解されるべきである。

「活性化」、「活性化された」などの用語は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を非限定的に含む細胞の状態を指し、検出可能な細胞増殖を誘発するために十分に刺激されている。活性化は、誘導されたサイトカイン産生、及び検出可能なエフェクター機能に関連し得る。「活性化Ｔ細胞」という用語は、とりわけ、細胞分化を受けているＴ細胞を指す。Ｔ細胞活性化は、ＣＤ５７、ＰＤ１、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ１３７、ＣＤ６９、及び／又はＣＤ７１が挙げられるが、これらに限定されない、１つ以上のバイオマーカーのＴ細胞発現の増加によって特徴付けられ得る。Ｔ細胞を活性化及び増殖させるための方法は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第６，９０５，８７４号、同第６，８６７，０４１号、及び同第６，７９７，５１４号、並びに国際公開第２０１２／０７９０００号に記載されており、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。一般に、そのような方法は、特定のサイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－７、及び／又はＩＬ－１５など）を含む溶液（供給培地、培養培地、及び／又は成長培地など）中で、ビーズ又は他の表面に付着、コーティング、又は結合され得る活性化剤、刺激剤、又は共刺激剤（抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体など）と細胞（Ｔ細胞など）を接触させることを含む。同じビーズに付着した活性化剤（抗ＣＤ３抗体及び／又は抗ＣＤ２８抗体など）は、「代理」抗原提示細胞（ＡＰＣ）として機能する。一例は、ヒトＴ細胞の生理学的活性化のためのＣＤ３／ＣＤ２８活性化因子／刺激因子系であるＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）系である。一実施形態では、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，０４０，１７７号及び同第５，８２７，６４２号並びに国際公開第２０１２／１２９５１４号に記載されている方法を使用して、Ｔ細胞を活性化及び刺激して、特定の抗体及び／又はサイトカインと共に増殖させる。

用語「投与」、「投与する」などは、当業者に公知の様々な方法及び送達システムのいずれかを使用した、対象への薬剤の物理的導入を指す。本明細書に開示される方法によって調製される免疫細胞の例示的な投与経路としては、例えば、注射又は注入による、静脈内（ｉ．ｖ．又はＩＶ）、筋肉内、皮下、腹腔内、脊髄又は他の非経口投与経路が挙げられる。非経口投与は、経腸及び局所投与以外の、通常は注射による投与様式を指し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、リンパ内、病巣内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外、及び胸骨内の注射及び注入、並びにインビボ電気穿孔が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、本方法によって調製された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、注射又は注入を介して投与される。非経口でない経路としては、局所、表皮又は粘膜投与経路、例えば、鼻腔内、膣内、直腸、舌下、又は局所が挙げられる。投与はまた、例えば、１つ以上の期間にわたって１回、２回、又は複数回行われ得る。１つ以上の治療薬（例えば、細胞）が投与される場合、投与は、同時に又は逐次的に行われ得る。逐次投与は、１つ以上の他の薬剤の投与が完了した後にのみ１つの薬剤を投与することを含む。

「抗体」（Ａｂ）という用語は、抗原に特異的に結合する免疫グロブリンを含むが、これに限定されない。概して、抗体は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２本の重（Ｈ）鎖及び２本の軽（Ｌ）鎖を含み得る。各Ｈ鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと略す）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、３つ又は４つの定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及び／又はＣＨ４を含み得る。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと略す）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つの定常ドメインＣＬを含み得る。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域に組み入れられている、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域に更に細分することができる。各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置される３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む。免疫グロブリンは、ＩｇＡ、分泌型ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＭを含むがこれらに限定されない、一般的に既知のアイソタイプのうちのいずれかに由来し得る。ＩｇＧサブクラスはまた、当業者に周知であり、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４を含むが、これらに限定されない。「アイソタイプ」は、重鎖定常領域遺伝子によってコードされるＡｂクラス又はサブクラスを指す（例えば、ＩｇＭ又はＩｇＧ１）。「抗体」という用語は、例として、天然に存在する抗体及び天然に存在しない抗体の両方、モノクローナル及びポリクローナル抗体、キメラ及びヒト化抗体、ヒト又は非ヒト抗体、全合成抗体、並びに単鎖抗体を含む。非ヒト抗体は、ヒトにおけるその免疫原性を低減させる組換え法によってヒト化され得る。明示的に述べられていない場合、また文脈が別段の指示をしない限り、「抗体」という用語は、前述の免疫グロブリンのうちのいずれかの抗原結合フラグメント又は抗原結合部分、一価及び二価のフラグメント又は部分、並びに単鎖抗体も含む。

「抗原結合分子」、「抗体フラグメント」などは、全体より小さい抗体の任意の部分を指す。抗原結合分子は、抗原相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み得る。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖフラグメント、ｄＡｂ、線状抗体、ｓｃＦｖ抗体、及び抗原結合分子から形成された多重特異的抗体が挙げられるが、これらに限定されない。一態様では、ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物は、抗ＣＤ１９一本鎖ＦＶを含む。「一本鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」抗体結合フラグメントは、抗体の可変重鎖（Ｖ_Ｈ）ドメイン及び可変軽鎖（Ｖ_Ｌ）ドメインを含み、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖に存在する。概して、Ｆｖポリペプチドは、Ｖ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインとの間のポリペプチドリンカーを更に含み、それによって、ｓｃＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することが可能になる。本明細書で使用される全ての抗体関連用語は、当技術分野における慣用的な意味を持ち、当業者によって十分に理解されている。

「抗原」は、免疫応答を誘発するか、又は抗体若しくは抗原結合分子によって結合され得る任意の分子を指す。免疫応答は、抗体産生又は特定の免疫担当細胞の活性化のいずれか、又はその両方を含み得る。当業者は、実質的に全てのタンパク質又はペプチドを含む任意の巨大分子が抗原として機能し得ることを容易に理解するであろう。抗原は、内因的に、すなわちゲノムＤＮＡによって、発現され得、又は組換えによって発現され得る。抗原は、がん細胞などの特定の組織に特異的であり得、又は広く発現され得る。更に、より大きな分子のフラグメントが抗原として作用し得る。いくつかの実施形態では、抗原は、腫瘍抗原である。

「中和する」という用語は、リガンドに結合し、そのリガンドの生物学的作用を防止又は低減する抗原結合分子、ｓｃＦｖ、抗体、又はそのフラグメントを指す。いくつかの実施形態では、抗原結合分子、ｓｃＦｖ、抗体、又はそのフラグメントは、リガンド上の結合部位を直接遮断するか、さもなければ間接的手段（リガンドの構造的又はエネルギー的変化など）を介して結合するリガンドの能力を変化させる。いくつかの実施形態では、抗原結合分子、ｓｃＦｖ、抗体、又はそのフラグメントは、それが結合しているタンパク質が生物学的機能を果たすのを妨げる。

「自己」という用語は、後に再導入される同じ個体に由来する任意の材料を指す。例えば、本明細書に記載の操作された自己細胞療法の方法は、個体（ドナー又は患者など）からのリンパ球の採取を含み、その後、そのリンパ球は、ＣＡＲ構築物を発現するように操作され、次いで、同じ個体に投与される。

「同種異系」という用語は、１つの個体に由来し、次いで同じ種の別の個体に導入される任意の材料、例えば、同種異系Ｔ細胞移植を指す。

「がん」は、体内の異常細胞の制御されていない増殖を特徴とする様々な疾患の広範な群を指す。調節されない細胞分裂及び増殖は、隣接組織に侵入し、リンパ系又は血流を介して身体の遠位部分に転移することもある悪性腫瘍の形成をもたらす。「がん」又は「がん組織」は、様々なステージの腫瘍を含み得る。一実施形態では、がん又は腫瘍はステージ０であり、例えば、がん又は腫瘍は、発生の極めて初期段階であり、転移していない。別の実施形態では、がん又は腫瘍はステージＩであり、例えば、がん又は腫瘍は、比較的小さいサイズであり、近くの組織に広がっておらず、転移していない。他の実施形態では、がん又は腫瘍はステージＩＩ又はステージＩＩＩであり、例えば、がん又は腫瘍は、ステージ０又はステージＩよりも大きく、隣接組織内に成長しているが、リンパ節への可能性を除いて転移していない。追加の実施形態では、がん又は腫瘍はステージＩＶであり、例えば、がん又は腫瘍は転移している。ステージＩＶは、進行性又は転移性がんとも称され得る。

本明細書で使用される場合、「抗腫瘍効果」は、腫瘍体積の減少、腫瘍増殖の抑制、腫瘍細胞の数の減少、腫瘍細胞増殖の減少、転移の数／程度の減少、全生存期間又は無増悪生存期間の増加、平均余命の延長、及び／又は腫瘍に関連する様々な生理学的症状の改善として、非限定的に提示され得る生物学的効果を指す。抗腫瘍効果はまた、腫瘍の発生の予防、例えば、ワクチンを指し得る。

「無増悪生存期間」（ＰＦＳ）という用語は、治療日から疾患増悪日（悪性リンパ腫に対する改訂ＩＷＧ応答基準などの一般的なガイドラインによる）又はあらゆる原因による死亡までの期間を指す。「疾患増悪」という用語は、Ｘ線写真又は他の方法における悪性病変の測定によって評価され得、有害事象として報告されるべきではない。徴候及び症状がない場合の疾患増悪による死亡は、原発腫瘍型（例えば、ＤＬＢＣＬ）として報告され得る。「奏効期間」（ＤＯＲ）という用語は、対象の最初の客観的奏効から疾患増悪（悪性リンパ腫に対する改訂ＩＷＧ応答基準などの一般的なガイドラインによる）又は死亡が確認された日までの期間を指す。「全生存期間」（ＯＳ）という用語は、治療日から死亡日までの期間を指す。

「サイトカイン」は、免疫応答を伝播するために、マクロファージ、Ｂ細胞、Ｔ細胞、及びマスト細胞などの免疫細胞によって放出され得る、非抗体タンパク質を指す。一実施形態では、１つ以上のサイトカインが、治療に応答して放出される。他の実施形態では、治療に応答して分泌されたそれらのサイトカインは、有効な治療法であることを示すか、又は示唆し得る。一実施形態では、「サイトカイン」は、特定の抗原との接触に応答して１つの細胞によって放出される非抗体タンパク質を指し、サイトカインは第２の細胞と相互作用して第２の細胞における応答を媒介する。本明細書で使用される場合、「サイトカイン」は、細胞間メディエーターとして別の細胞に作用する１つの細胞集団によって放出されるタンパク質を指すことを意味する。サイトカインは、細胞によって内因的に発現され得、又は対象に投与され得る。サイトカインは、免疫応答を伝播するために、マクロファージ、Ｂ細胞、Ｔ細胞、及び肥満細胞などの免疫細胞によって放出され得る。サイトカインは、レシピエント細胞において様々な応答を誘導し得る。サイトカインには、恒常性サイトカイン、ケモカイン、炎症誘発性サイトカイン、エフェクター、及び急性期タンパク質が含まれ得る。例えば、インターロイキン（ＩＬ）７及びＩＬ－１５などの恒常性サイトカインは、免疫細胞の生存及び増殖を促進し、炎症誘発性サイトカインは、炎症応答を促進し得る。恒常性サイトカインの例としては、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２ｐ４０、ＩＬ－１２ｐ７０、ＩＬ－１５、及びインターフェロン（ＩＦＮ）ガンマが挙げられるが、これらに限定されない。炎症促進性サイトカインの例としては、ＩＬ－１ａ、ＩＬ－１ｂ、ＩＬ－６、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７ａ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）－アルファ、ＴＮＦ－ベータ、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）２、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、可溶性細胞間接着分子１（ｓＩＣＡＭ－１）、可溶性血管接着分子１（ｓＶＣＡＭ－１）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＶＥＧＦ－Ｄ、及び胎盤増殖因子（ＰＬＧＦ）が挙げられるが、これらに限定されない。エフェクターの例としては、グランザイムＡ、グランザイムＢ、可溶性Ｆａｓリガンド（soluble Fas ligand、ｓＦａｓＬ）、及びパーフォリンが挙げられるが、これらに限定されない。急性期タンパク質の例としては、Ｃ反応性タンパク質（C-reactive protein、ＣＲＰ）及び血清アミロイドＡ（serum amyloid A、ＳＡＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。

「ケモカイン」は、細胞の走化性又は方向性運動を媒介するサイトカインの一種である。ケモカインの例としては、ＩＬ－８、ＩＬ－１６、エオタキシン、エオタキシン－３、マクロファージ由来ケモカイン（ＭＤＣ又はＣＣＬ２２）、単球走化性タンパク質１（ＭＣＰ－１又はＣＣＬ２）、ＭＣＰ－４、マクロファージ炎症性タンパク質１α（ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１ａ）、ＭＩＰ－１β（ＭＩＰ－１ｂ）、ガンマ誘導性タンパク質１０（ＩＰ－１０）、並びに胸腺及び活性化制御ケモカイン（ＴＡＲＣ又はＣＣＬ１７）が挙げられるが、これらに限定されない。

「治療有効量」、「治療有効用量」などは、本方法（Ｔ細胞製品をもたらす）によって生成される細胞（免疫細胞又は操作されたＴ細胞など）の量を指し、単独で又は別の治療剤と組み合わせて使用されたときに、対象を疾患の発症について保護又は治療するか、あるいは、疾患症状の重症度の低下、疾患症状のない期間の頻度及び期間の増加、及び／又は疾患の罹患に起因する障害若しくは能力障害の予防によって証明される疾患の退縮を促進する。疾患の退縮を促進する能力は、例えば、臨床試験中の対象において、ヒトにおける有効性を予測する動物モデル系において、又はインビトロアッセイにおいて薬剤の活性をアッセイすることによって、当業者に公知の様々な方法を使用して評価され得る。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞療法に使用するためのドナーＴ細胞は、患者から得られる（例えば、自己Ｔ細胞療法のために）。他の実施形態では、Ｔ細胞療法に使用するためのドナーＴ細胞は、患者ではない対象から得られる。Ｔ細胞は、治療有効量で投与され得る。例えば、Ｔ細胞の治療有効量は、少なくとも約１０^４細胞、少なくとも約１０^５細胞、少なくとも約１０^６細胞、少なくとも約１０^７細胞、少なくとも約１０^８細胞、少なくとも約１０^９、又は少なくとも約１０^１０であり得る。別の実施形態では、Ｔ細胞の治療有効量は、約１０^４細胞、約１０^５細胞、約１０^６細胞、約１０^７細胞、又は約１０^８細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞の治療有効量は、約２×１０^６細胞／ｋｇ、約３×１０^６細胞／ｋｇ、約４×１０^６細胞／ｋｇ、約５×１０^６細胞／ｋｇ、約６×１０^６細胞／ｋｇ、約７×１０^６細胞／ｋｇ、約８×１０^６細胞／ｋｇ、約９×１０^６細胞／ｋｇ、約１×１０^７細胞／ｋｇ、約２×１０^７細胞／ｋｇ、約３×１０^７細胞／ｋｇ、約４×１０^７細胞／ｋｇ、約５×１０^７細胞／ｋｇ、約６×１０^７細胞／ｋｇ、約７×１０^７細胞／ｋｇ、約８×１０^７細胞／ｋｇ、又は約９×１０^７細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞の治療有効量は、体重１ｋｇ当たり約１×１０^６～約２×１０^６ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞であり、最大用量は、約１×１０^８ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞の治療有効量は、約０．４×１０^８～約２×１０^８ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞の治療有効量は、約０．４×１０^８、約０．５×１０^８、約０．６×１０^８、約０．７×１０^８、約０．８×１０^８、約０．９×１０^８、約１．０×１０^８、約１．１×１０^８、約１．２×１０^８、約１．３×１０^８、約１．４×１０^８、約１．５×１０^８、約１．６×１０^８、約１．７×１０^８、約１．８×１０^８、約１．９×１０^８、又は約２．０×１０^８ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞である。

本明細書で使用される場合、「リンパ球」という用語には、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、ＮＫ－Ｔ細胞、又はＢ細胞が含まれ得る。ＮＫ細胞は、遺伝免疫系の主要構成要素を代表する細胞傷害性（細胞毒性）リンパ球の一種である。ＮＫ細胞は、アポトーシス又はプログラム細胞死のプロセスを通じて、ウイルスに感染した腫瘍及び細胞を拒絶する。それらは、細胞を死滅させるために活性化を必要としないので、「ナチュラルキラー」と命名された。Ｔ細胞は、細胞媒介免疫（抗体の関与のない）において主要な役割を果たす。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、他のリンパ球型から分化する。免疫系の分化した器官である胸腺は、主にＴ細胞の成熟化を担う。

マクロファージ（例えば、腫瘍関連マクロファージ）、好中球、好塩基球、好酸球、顆粒球、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）、Ｂ細胞、Ｔ細胞、ＮＫ－Ｔ細胞、マスト細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、骨髄系由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）、及び樹状細胞を非限定的に含む、いくつかのタイプの「免疫細胞」がある。この用語は、これらの免疫細胞の前駆体も含む。造血幹細胞及び／又は前駆細胞は、当該技術分野で既知の方法によって、骨髄、臍帯血、サイトカイン動員後の成人末梢血などに由来し得る。いくつかの前駆細胞は、リンパ系、例えば、リンパ系の造血幹細胞又は前駆細胞に分化し得るものである。免疫療法に使用され得る免疫細胞の追加の例は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１８／０２７３６０１号に記載されている。

いくつかのタイプのＴ細胞、すなわち、ヘルパーＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋細胞、エフェクターＴ_ＥＦＦ細胞）、細胞傷害性Ｔ細胞（別名、ＴＣ、細胞傷害性Ｔリンパ球、ＣＴＬ、Ｔキラー細胞、細胞溶解性Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞又はキラーＴ細胞）、メモリーＴ細胞（（ｉ）幹メモリーＴ_ＳＣＭ細胞は、ナイーブ細胞と同様に、ＣＤ４５ＲＯ－、ＣＣＲ７＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ６２Ｌ＋（Ｌ－セレクチン）、ＣＤ２７＋、ＣＤ２８＋及びＩＬ－７Ｒα＋であるが、大量のＣＤ９５、ＩＬ－２Ｒβ、ＣＸＣＲ３及びＬＦＡ－１も発現し、メモリー細胞に特有の多数の機能的属性を示す。）、（ｉｉ）セントラルメモリーＴ_ＣＭ細胞は、Ｌ－セレクチンを発現し、ＣＣＲ７^＋かつＣＤ４５ＲＯ^＋であり、ＩＬ－２を分泌するが、ＩＦＮγ又はＩＬ－４を分泌せず、（ｉｉｉ）ただし、エフェクターメモリーＴ_ＥＭ細胞は、Ｌ－セレクチン又はＣＣＲ７を発現しないが、ＣＤ４５ＲＯを発現し、ＩＦＮγ及びＩＬ－４などのエフェクターサイトカインを産生する）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ、サプレッサーＴ細胞、又はＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞）、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫＴ）、及びγδＴ細胞も存在する。腫瘍内に見られるＴ細胞は、「腫瘍浸潤リンパ球」（ＴＩＬ）と呼ばれる。一方、Ｂ細胞は、体液性免疫（抗体の関与を伴う）において主要な役割を果たす。Ｂ細胞は、抗体及び抗原を産生し、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の役割を果たし、抗原相互作用による活性化後にメモリーＢ細胞に変わる。哺乳動物では、未成熟Ｂ細胞は骨髄で形成され、その名称はここに由来する。

「ナイーブ」Ｔ細胞は、免疫学的に未分化のままである成熟Ｔ細胞を指す。胸腺における正及び負の選択に続いて、Ｔ細胞はＣＤ４^＋又はＣＤ８^＋いずれかのナイーブＴ細胞として現れる。それらのナイーブな状態では、Ｔ細胞は、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ^＋）、ＩＬ－７受容体－α（ＩＬ－７Ｒ－α）、及びＣＤ１３２を発現するが、ＣＤ２５、ＣＤ４４、ＣＤ６９、又はＣＤ４５ＲＯを発現しない。本明細書で使用される場合、「未成熟」はまた、ナイーブＴ細胞又は未成熟Ｔ細胞のいずれかの表現型特徴を示すＴ細胞、例えばＴ_ＳＣＭ細胞又はＴ_ＣＭ細胞を指し得る。例えば、未成熟Ｔ細胞は、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ^＋）、ＩＬ－７Ｒα、ＣＤ１３２、ＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ９５、ＩＬ－２Ｒβ、ＣＸＣＲ３、及びＬＦＡ－１のうちの１つ以上を発現し得る。ナイーブ又は未成熟Ｔ細胞は、Ｔ_ＥＭ細胞及びＴ_ＥＦＦ細胞などの、最終分化したエフェクターＴ細胞と対比され得る。

本明細書で言及される「Ｔ細胞機能」は、健康なＴ細胞の正常な特徴を指す。Ｔ細胞機能は、Ｔ細胞増殖、Ｔ細胞活性、及び／又は細胞溶解活性を含み得る。一実施形態では、特定の酸素及び／又は圧力条件下でＴ細胞を調製する本出願の方法は、１つ以上のＴ細胞機能を増加させ、それによってＴ細胞を治療目的に対してより適合及び／又はより強力にする。いくつかの実施形態では、本方法に従って調製されるＴ細胞は、特定の酸素及び／又は圧力を欠く条件下のものと比較して、Ｔ細胞機能を増加させた。他の実施形態では、本方法に従って調製されるＴ細胞は、特定の酸素及び／又は圧力を欠く条件下で培養されたＴ細胞と比較して、Ｔ細胞増殖を増加させたであろう。追加の実施形態では、本方法に従って調製されるＴ細胞は、特定の酸素及び／又は圧力を欠く条件下で培養されたＴ細胞と比較して、Ｔ細胞活性を増加させた。更なる実施形態では、本方法に従って調製されるＴ細胞は、特定の酸素及び／又は圧力を欠く条件下で培養されたＴ細胞と比較して、細胞溶解活性を増加させた。

細胞の「増殖」、「増殖する」などの用語は、細胞分裂を介して細胞の数が増える能力を指す。増殖は、カルボキシフルオレセインサクシニミジルエステル（ＣＦＳＥ）で細胞を染色することによって測定できる。細胞増殖は、インビトロ、例えばＴ細胞培養中に、又はインビボ、例えば、免疫細胞療法（例えば、Ｔ細胞療法）の投与後に発生し得る。細胞増殖は、本明細書に記載の方法又は当該分野で既知の方法によって測定又は決定され得る。例えば、細胞増殖は、生存細胞密度（ＶＣＤ）又は全生存細胞数（ＴＶＣ）によって測定又は決定され得る。ＶＣＤ又はＴＶＣは、理論値（アリコート又はサンプルを、特定の時点において培養物から取り出し、細胞数を決定した後、試験の開始時の培養体積を用いて細胞数を倍数する）、又は実測値（アリコート又はサンプルを、特定の時点において培養物から取り出し、細胞数を決定した後、特定の時点の実際の培養体積を用いて細胞数を倍数する）であり得る。「Ｔ細胞活性」という用語は、健康なＴ細胞に共通の任意の活性を指す。一実施形態では、Ｔ細胞活性は、サイトカイン産生（例えば、ＩＮＦγ、ＩＬ－２、及び／又はＴＮＦα）を含む。他の実施形態では、Ｔ細胞活性は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ又はＩＦＮ－γ）、組織壊死因子α（ＴＮＦα又はＩＦＮα）、及びその両方から選択される１つ以上のサイトカインの産生を含む。「細胞溶解活性」、「細胞傷害性」などの用語は、Ｔ細胞が標的細胞を破壊する能力を指す。一実施形態では、標的細胞は、がん細胞、例えば、腫瘍細胞である。他の実施形態では、Ｔ細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現し、標的細胞は標的抗原を発現する。

「遺伝子操作された」、「遺伝子編集する」、又は「操作された」という用語は、限定するものではないが、コード領域若しくは非コード領域又はその一部を削除すること、又はコード領域若しくはその一部を挿入することなど、細胞のゲノムを改変する方法を指す。一実施形態では、改変された細胞は、リンパ球、例えば、Ｔ細胞であり、患者又はドナーのいずれかから得ることができる。細胞は、外因性構築物、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現するように改変され得、細胞のゲノムに組み込まれる。

用語「形質導入」及び「形質導入された」は、外来ＤＮＡがウイルスベクター（Ｊｏｎｅｓら、「Ｇｅｎｅｔｉｃｓ：ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ」、Ｂｏｓｔｏｎ：Ｊｏｎｅｓ＆Ｂａｒｔｌｅｔｔ Ｐｕｂｌ．（１９９８）を参照）を介して細胞に導入される過程を指す。いくつかの実施形態では、ベクターは、レトロウイルスベクター、ＤＮＡベクター、ＲＮＡベクター、アデノウイルスベクター、バキュロウイルスベクター、エプスタインバーウイルスベクター、パポバウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、単純ヘルペスウイルスベクター、アデノウイルス関連ベクター、レンチウイルスベクター、又はこれらの任意の組み合わせである。

本出願のキメラ抗原受容体（ＣＡＲ又はＣＡＲ－Ｔ）及びＴ細胞受容体（ＴＣＲ）は、遺伝子操作された受容体である。これらの操作された受容体は、当技術分野で公知の技術に従って、Ｔ細胞などの免疫細胞に容易に挿入され、免疫細胞によって発現され得る。ＣＡＲでは、単一の受容体は、特定の抗原を認識し、かつ、その抗原に結合した場合に、免疫細胞を活性化して、その抗原を有するか又は発現している細胞を攻撃し破壊するようにプログラムされ得る。これらの抗原が腫瘍細胞上に存在する場合、ＣＡＲを発現する免疫細胞は、腫瘍細胞を標的化して死滅させ得る。一実施形態では、本出願に従って調製される細胞は、抗原結合分子、共刺激ドメイン、及び活性化ドメインを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、又はＴ細胞受容体を有する細胞である。共刺激ドメインは、細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインを含み得る。一実施形態では、細胞外ドメインは、ヒンジ又は切断型ヒンジドメインを含む。

「免疫応答」は、免疫系の細胞（例えば、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好酸球、マスト細胞、樹状細胞及び好中球）及びこれらの細胞又は肝臓のいずれかによって産生される可溶性巨大分子（Ａｂ、サイトカイン及び補体を含む）の作用であって、侵入している病原体、病原体に感染した細胞若しくは組織、がん性若しくは他の異常な細胞、又は自己免疫若しくは病理学的炎症の場合には正常なヒト細胞若しくは組織の、選択的標的化、結合、損傷、破壊、及び／又は脊椎動物の体からの排除をもたらす作用を指す。

「免疫療法（ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ、ｉｍｍｕｎｅ ｔｈｅｒａｐｙなど）」という用語は、免疫応答を誘導する、増強する、抑制する又は他の様態で改変すること、を含む、方法による、疾患に罹患しているか、又は疾患に罹患するか若しくは再発するリスクがある対象の治療を指す。免疫療法の例としては、限定するものではないが、Ｔ細胞及びＮＫ細胞療法が挙げられる。Ｔ細胞療法は、養子Ｔ細胞療法、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）免疫療法、自己細胞療法、操作された自己細胞療法、及び同種Ｔ細胞移植を含み得る。当業者は、本明細書に開示される免疫細胞の調製方法が任意のがん又は移植Ｔ細胞療法の有効性を高めることを理解するであろう。Ｔ細胞療法の例は、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１４／０１５４２２８号及び同第２００２／０００６４０９号、米国特許第７，７４１，４６５号、同第６，３１９，４９４号、及び同第５，７２８，３８８号、並びに国際公開第２００８／０８１０３５号に記載されている。

養子細胞移入としても知られ「ｅＡＣＴ（商標）」と略され得る「操作された自己細胞療法」という用語は、患者自身のＴ細胞を採取し、続いて１つ以上の特定の腫瘍細胞又は悪性腫瘍の細胞表面に発現される１つ以上の抗原を認識して標的化するように遺伝子改変するプロセスである。Ｔ細胞は、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現するように操作され得る。ＣＡＲ陽性（＋）Ｔ細胞は、共刺激ドメイン及び活性化ドメインを含む細胞内シグナル伝達部分に連結された特定の腫瘍抗原に特異的な細胞外一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を発現するように操作される。共刺激ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＣＤ１６、ＯＸ－４０、４－１ＢＢ／ＣＤ１３７、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ３０、ＣＤ４０、プログラム死－１（ＰＤ－１）、プログラム死リガンド－１（ＰＤ－Ｌ１）、誘導性Ｔ細胞共刺激因子（ＩＣＯＳ）、ＩＣＯＳ－Ｌ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ２４７、ＣＤ２７６（Ｂ７－Ｈ３）、ＬＩＧＨＴ（腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４；ＴＮＦＳＦ１４）、ＮＫＧ２Ｃ、Ｉｇα（ＣＤ７９ａ）、ＤＡＰ－１０、Ｆｃγ受容体、ＭＨＣクラスＩ分子、ＴＮＦ受容体タンパク質、免疫グロブリン様タンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭタンパク質）、活性化ＮＫ細胞受容体、ＢＴＬＡ、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＩＣＡＭ－１、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＬＩＧＨＴ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＫＩＲＤＳ２、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴ ＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ，Ｌｙｌ０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＣＤ１９ａ、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、又はこれらの任意の組み合わせ由来のシグナル伝達領域であり得る。活性化ドメインは、例えば、ＣＤ３ζ、ε、δ、γなどのＣＤ３由来であり得る。一実施形態では、ＣＡＲは、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の共刺激ドメインを有するように設計されている。ＣＡＲ ｓｃＦｖは、ＮＨＬ、ＣＬＬ、及び非Ｔ細胞ＡＬＬを含むがこれらに限定されない、全ての正常Ｂ細胞及びＢ細胞悪性度を含む、Ｂ細胞系統の細胞によって発現される膜貫通タンパク質である、例えば、ＣＤ１９を標的とするように設計することができる。例示的なＣＡＲ Ｔ細胞療法及び構築物は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号、同第２０１４／０２２７２３７号、同第２０１４／００９９３０９号、及び同第２０１４／００５０７０８号に記載されており、これらは参照によりその全体が組み込まれる。

本明細書で使用される場合、「共刺激シグナル」は、ＴＣＲ／ＣＤ３ライゲーションなどの一次シグナルと組み合わせて、Ｔ細胞応答、例えば、限定するものではないが、重要な分子の増殖及び／又は上方制御又は下方制御をもたらすシグナルを指す。

本明細書で使用される場合、「共刺激リガンド」は、Ｔ細胞上の同族共刺激分子に特異的に結合する抗原提示細胞上の分子を含む。共刺激リガンドの結合は、限定するものではないが、増殖、活性化、分化などのＴ細胞応答を媒介するシグナルを提供する。共刺激リガンドは、刺激分子によって提供される一次シグナルに加えて、例えば、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）／ＣＤ３複合体と、ペプチドを負荷した主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子との結合によって、シグナルを誘導する。共刺激リガンドとしては、限定するものではないが、３／ＴＲ６、４－１ＢＢリガンド、Ｔｏｌｌリガンド受容体に結合するアゴニスト又は抗体、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、ＣＤ３０リガンド、ＣＤ４０、ＣＤ７、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭ）、ヒト白血球抗原Ｇ（ＨＬＡ－Ｇ）、ＩＬＴ４、免疫グロブリン様転写物（ＩＬＴ）３、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ－Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、Ｂ７－Ｈ３と特異的に結合するリガンド、リンホトキシンβ受容体、ＭＨＣクラスＩ鎖関連タンパク質Ａ（ＭＩＣＡ）、ＭＨＣクラスＩ鎖関連タンパク質Ｂ（ＭＩＣＢ）、ＯＸ４０リガンド、ＰＤ－Ｌ２、又はプログラム死（ＰＤ）Ｌ１を挙げることができる。共刺激リガンドとしては、限定するものではないが、Ｔ細胞上に存在する共刺激分子と特異的に結合する抗体、例えば、限定するものではないが、４－１ＢＢ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ７、ＩＣＯＳ、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ－１）、ナチュラルキラー細胞受容体Ｃ（ＮＫＧ２Ｃ）、ＯＸ４０、ＰＤ－１、又は腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４（ＴＮＦＳＦ１４又はＬＩＧＨＴ）が挙げられる。

「共刺激分子」は、共刺激リガンドと特異的に結合し、それによってＴ細胞による共刺激応答、例えば、限定するものではないが、増殖を媒介するＴ細胞上の同族結合パートナーである。共刺激分子には、それだけに限らないが、「共刺激分子」が、共刺激リガンドと特異的に結合し、それによってＴ細胞による共刺激応答、例えば限定するものではないが、増殖を媒介するＴ細胞上の同族結合パートナーであることが含まれる。共刺激分子としては、４－１ＢＢ／ＣＤ１３７、Ｂ７－Ｈ３、ＢＡＦＦＲ、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＢＴＬＡ、ＣＤ ３３、ＣＤ ４５、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ１０３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４、ＣＤ１６、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ１９ａ、ＣＤ２、ＣＤ２２、ＣＤ２４７、ＣＤ２７、ＣＤ２７６（Ｂ７－Ｈ３）、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３（α、β、δ、ε、γ、ζ）、ＣＤ３０、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９Ｄ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ５、ＣＤ６４、ＣＤ６９、ＣＤ７、ＣＤ８０、ＣＤ８３リガンド、ＣＤ８４、ＣＤ８６、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＣＤ９、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＤｌ－ｌａ、ＣＤｌ－ｌｂ、ＣＤｌ－ｌｃ、ＣＤｌ－ｌｄ、ＣＤＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴ ＡＭ、ＤＡＰ－１０、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、Ｆｃγ受容体、ＧＡＤＳ、ＧＩＴＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＩＡ４、ＩＣＡＭ－１、ＩＣＡＭ－１、ＩＣＯＳ、Ｉｇα（ＣＤ７９ａ）、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、インテグリン、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＤ、ＩＴＧＡＥ、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡＸ、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ７、ＩＴＧＢ１、ＫＩＲＤＳ２、ＬＡＴ、ＬＦＡ－１、ＬＦＡ－１、ＬＩＧＨＴ、ＬＩＧＨＴ（腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４、ＴＮＦＳＦ１４）、ＬＴＢＲ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＭＨＣクラスＩ分子、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＯＸ４０、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＰＤ－１、ＰＳＧＬ１、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、シグナル伝達リンパ球活性化分子、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙｌ０８）、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＰ－７６、ＴＮＦ、ＴＮＦｒ、ＴＮＦＲ２、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＶＬＡ１、又はＶＬＡ－６、又はフラグメント、切断、又はそれらの組み合わせが含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの態様では、本出願の細胞は、対象から得られたＴ細胞を介して得ることができる。一態様では、Ｔ細胞は、例えば、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹水、胸水、脾臓組織、及び腫瘍から得ることができる。更に、Ｔ細胞は、当技術分野で利用可能な１つ以上のＴ細胞株に由来し得る。Ｔ細胞はまた、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離及び／又はアフェレーシスなどの当業者に公知の様々な技術を使用して、対象から採取された血液単位から得ることができる。いくつかの態様では、アフェレーシスによって採取された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、その後の処理のために適切な緩衝液又は培地に入れる。いくつかの態様では、細胞は、任意の溶液（例えば、中性ＰＨ値を有する溶液又はＰＢＳ）又は培養培地で洗浄される。理解されるように、洗浄工程は、例えば、半自動化フロースルー遠心分離機、例えば、Ｃｏｂｅ（商標）２９９１細胞プロセッサ、Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅ（商標）などを用いて行ってもよい。いくつかの態様では、洗浄した細胞を、１つ以上の生体適合性緩衝液、又は緩衝液を含むか若しくは含まない他の生理食塩水に再懸濁する。いくつかの態様では、アフェレーシスの試料の望ましくない成分が除去される。Ｔ細胞療法のためにＴ細胞を単離する更なる方法は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）グラジエントによる遠心分離を使用して、赤血球を溶解し、単球を枯渇させることによってＰＢＭＣから単離される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、及びＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞などのＴ細胞の特異的亜集団は、当技術分野で公知の正又は負の選択技術によって更に単離される。例えば、負の選択によるＴ細胞集団の濃縮は、負に選択された細胞に固有の表面マーカーに対する抗体の組み合わせを用いて達成することができる。いくつかの実施形態では、負に選択された細胞上に存在する細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する、負の磁気免疫接着又はフローサイトメトリーによって細胞選別及び／又は選択を行ってもよい。例えば、負の選択によってＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的には、ＣＤ８、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ２０、及びＨＬＡ－ＤＲに対する抗体を含む。いくつかの実施形態では、フローサイトメトリー及び細胞選別を行って、本開示で使用するための目的の細胞集団を単離する。

一実施形態では、ＣＤ３＋Ｔ細胞は、抗ＣＤ３抗体でコーティングされたＤｙｎａｂｅａｄｓを使用してＰＢＭＣから単離される。ＣＤ８＋及びＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＣＤ８マイクロビーズ（例えば、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）又はＣＤ４マイクロビーズ（例えば、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用する正の選択によって更に別々に単離される。

いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣは、本明細書に記載の方法を使用する免疫細胞（ＣＡＲなど）の遺伝子改変に直接使用される。いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣを単離した後、Ｔリンパ球を更に単離し、細胞傷害性Ｔリンパ球とヘルパーＴリンパ球の両方を、遺伝子改変及び／又は増殖の前又は後に、ナイーブＴ細胞、メモリーＴ細胞、及びエフェクターＴ細胞の亜集団に選別する。

本明細書に記載の１つ以上の免疫細胞は、例えば、ヒトドナーを含む任意の供給源から得ることができる。ドナーは、抗がん治療、例えば、本明細書に記載の方法によって生成される１つの免疫細胞による治療を必要とする対象（すなわち、自己ドナー）であり得、又は、本明細書に記載の方法によって生成される細胞集団の生成時に、別の個体又はがん患者を治療するために使用されるリンパ球サンプルを提供する個体（すなわち、同種異系ドナー）であり得る。免疫細胞は、造血幹細胞集団からインビトロで分化させることができ、又は、免疫細胞は、ドナーから得ることができる。免疫細胞の集団は、当該技術分野で使用される任意の好適な方法によってドナーから得ることができる。例えば、リンパ球の集団は、任意の適切な体外的方法、静脈穿刺、又はリンパ球が存在する又は存在しない血液サンプルが得られる他の採血方法によって得ることができる。リンパ球の集団は、アフェレーシスによって得られる。１つ以上の免疫細胞は、腫瘍を含むがこれらに限定されない、１つ以上の免疫細胞を含む任意の組織から採取され得る。腫瘍又はその一部が対象から採取され、１つ以上の免疫細胞が腫瘍組織から単離される。本明細書に開示される方法において、Ｔ細胞療法に好適な任意の免疫細胞を含む、任意のＴ細胞を使用することができる。例えば、本出願に有用な１つ以上の細胞は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、細胞傷害性Ｔ細胞、ＣＡＲ Ｔ細胞、操作されたＴＣＲ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、樹状細胞、及び末梢血リンパ球からなる群から選択され得る。Ｔ細胞は、例えば、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹水、胸水、脾臓組織、及び腫瘍から得ることができる。更に、Ｔ細胞は、当技術分野で利用可能な１つ以上のＴ細胞株に由来し得る。Ｔ細胞はまた、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離及び／又はアフェレーシスなどの当業者に公知の様々な技術を使用して、対象から採取された血液単位から得ることができる。Ｔ細胞はまた、人工胸腺オルガノイド（ＡＴＯ）細胞培養系から得ることができ、ここでは、初代及び再プログラムされた多能性幹細胞由来のＴ細胞の効率的なエクスビボ分化を支持するために、ヒト胸腺環境が複製されている。Ｔ細胞療法のためにＴ細胞を単離する更なる方法は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号、国際公開第２０１５／１２００９６号、及び同第２０１７／０７０３９５号に開示されており、これらの全ては、これらの方法を説明する目的で、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態では、Ｔ細胞は腫瘍浸潤白血球である。特定の実施形態では、１つ以上のＴ細胞は、ＣＤ８を発現しており、例えば、ＣＤ８^＋Ｔ細胞である。他の実施形態では、１つ以上のＴ細胞は、ＣＤ４を発現しており、例えば、ＣＤ４^＋Ｔ細胞である。Ｔ細胞療法のためにＴ細胞を単離する更なる方法は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号、国際公開第２０１５／１２００９６号、及び同第２０１７／０７０３９５号に開示されており、これらの全ては、これらの方法を説明する目的で、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

免疫細胞及びそれらの前駆細胞は、利用可能な方法によって単離され得る（例えば、Ｒｏｗｌａｎｄ－Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９９）参照）。免疫細胞又はその前駆細胞の供給源には、末梢血、臍帯血、骨髄、又は他の造血細胞源が挙げられるが、これらに限定されない。負の選択方法を使用して、所望の免疫細胞ではない細胞を除去することができる。更に、正の選択方法は、所望の免疫細胞又はその前駆細胞を単離若しくは濃縮することができ、又は、正及び負の選択方法の組み合わせを用いてもよい。モノクローナル抗体（ＭＡｂ）は、正の選択及び負の選択の両方において、特定の細胞系統及び／又は分化の段階に関連するマーカーを特定するのに有用である。特定のタイプの細胞、例えば、特定のタイプのＴ細胞を単離する場合、当該技術分野で周知のように、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ３４（造血幹細胞及び前駆細胞について）などが挙げられるが、これらに限定されない様々な細胞表面マーカー、又はマーカーの組み合わせを用いて細胞を分離することができる（Ｋｅａｒｓｅ，Ｔ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ Ｎ．Ｊ．（２０００）、Ｄｅ Ｌｉｂｅｒｏ，Ｔ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｖｏｌ．５１４ ｏｆ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ Ｎ．Ｊ．（２００９）参照）。

ＰＢＭＣは、免疫細胞（ＣＡＲなど）による遺伝子修飾のために直接使用され得る。ＰＢＭＣを単離した後、Ｔリンパ球を更に単離し、細胞傷害性Ｔリンパ球とヘルパーＴリンパ球の両方を、遺伝子改変及び／又は増殖の前又は後に、ナイーブＴ細胞、メモリーＴ細胞、及びエフェクターＴ細胞の亜集団に選別する。一実施形態では、ＣＤ８＋細胞は、ＣＤ８＋細胞のこれらのタイプのそれぞれに関連する細胞表面抗原を識別することによって、ナイーブ細胞、セントラルメモリー細胞、及びエフェクター細胞に更に選別され得る。他の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の表現型マーカーの発現は、ＣＣＲ７、ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ６２Ｌ、及びＣＤ１２７を含み、グランザイムＢについて陰性である。いくつかの実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞は、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＯ＋、及びＣＤ６２Ｌ＋Ｔ細胞である。特定の実施形態では、エフェクターＴ細胞は、ＣＣＲ７、ＣＤ２８、ＣＤ６２Ｌ、及びＣＤ１２７について陰性であり、グランザイムＢ及びパーフォリンについて陽性である。追加の実施形態では、ＣＤ４＋Ｔ細胞は、亜集団に更に分類され得る。例えば、ＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞は、細胞表面抗原を有する細胞集団を識別することによって、ナイーブ細胞、セントラルメモリー細胞、及びエフェクター細胞に選別され得る。

本明細書に記載の方法は、ドナーから採取してから、ドナー対象から得られた１つ以上の細胞を曝露するまでの、ドナーから得られた免疫細胞の集団を濃縮又は調製することを更に含む。免疫細胞、例えば、１つ以上のＴ細胞の集団の濃縮は、分離培地（例えば、ＦＩＣＯＬＬ－ＰＡＱＵＥ（商標）、ＲＯＳＥＴＴＥＳＥＰ（商標）ＨＬＡ総リンパ球濃縮カクテル、リンパ球分離培地（ＬＳＡ）（ＭＰ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ、カタログＮｏ．０８５０４９４Ｘ）、細胞サイズ、濾過又は水簸による形状又は密度分離、免疫磁気分離（例えば、磁気活性化細胞選別システム、ＭＡＣＳ）、蛍光分離（例えば、蛍光活性化細胞選別システム、ＦＡＣＳ）、又はビーズによるカラム分離の使用が挙げられるが、これらに限定されない、任意の好適な分離方法によって達成され得る。

一実施形態では、Ｔ細胞は、ドナー対象から得られる。他の実施形態では、ドナー対象は、がん又は腫瘍に罹患しているヒト患者である。追加の実施形態では、ドナー対象は、がん又は腫瘍に罹患していないヒト患者である。本出願はまた、薬学的に許容される担体、希釈剤、可溶化剤、乳化剤、防腐剤及び／又は補助剤を含む組成物又は製剤を提供する。特定の実施形態では、組成物又は製剤は、賦形剤を含む。「粗製物」及び「製剤」という用語は、本明細書では互換的に使用される。組成物、治療用組成物、治療的に有効な組成物、医薬組成物、薬学的に有効な組成物、及び薬学的に許容される組成物は、本明細書では互換的に使用される。組成物は、非経口的送達、吸入、又は経口などの消化管を介する送達について選択され得る。組成物は、当業者によって既知の方法によって調製され得る。緩衝液を使用して、組成物を生理学的ｐＨ又はわずかに低いｐＨ、典型的には、約５～約８のｐＨ範囲内に維持する。非経口投与が企図される場合、組成物は、薬学的に許容されるビヒクル中に、追加の治療薬の有無にかかわらず、本明細書に記載の組成物を含むパイロジェンフリーの非経口的に許容される水溶液の形態である。例として、非経口注射用ビヒクルは、本明細書に記載の組成物が、少なくとも１つの追加の治療薬の有無にかかわらず、適切に保存された滅菌等張液として製剤化される滅菌蒸留水である。調製は、生成物の制御された又は持続的な放出を可能にするポリマー化合物（ポリ乳酸又はポリグリコール酸など）であるビーズ又はリポソームを用いて所望の薬剤を製剤化することを含み、これらはその後、デポ注射によって送達される。更に、埋め込み可能な薬物送達デバイスを使用して、所望の治療剤を導入することができる。

いくつかの実施形態では、Ｔ細胞療法に使用するためのドナーＴ細胞は、患者から得られる（例えば、自己Ｔ細胞療法のために）。他の実施形態では、Ｔ細胞療法に使用するためのドナーＴ細胞は、患者ではない対象から得られる。Ｔ細胞は、治療有効量で投与され得る。例えば、Ｔ細胞の治療有効量は、少なくとも約１０^４細胞、少なくとも約１０^５細胞、少なくとも約１０^６細胞、少なくとも約１０^７細胞、少なくとも約１０^８細胞、少なくとも約１０^９、又は少なくとも約１０^１０であり得る。別の実施形態では、Ｔ細胞の治療有効量は、約１０^４細胞、約１０^５細胞、約１０^６細胞、約１０^７細胞、又は約１０^８細胞である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞の治療有効量は、約２×１０^６細胞／ｋｇ、約３×１０^６細胞／ｋｇ、約４×１０^６細胞／ｋｇ、約５×１０^６細胞／ｋｇ、約６×１０^６細胞／ｋｇ、約７×１０^６細胞／ｋｇ、約８×１０^６細胞／ｋｇ、約９×１０^６細胞／ｋｇ、約１×１０^７細胞／ｋｇ、約２×１０^７細胞／ｋｇ、約３×１０^７細胞／ｋｇ、約４×１０^７細胞／ｋｇ、約５×１０^７細胞／ｋｇ、約６×１０^７細胞／ｋｇ、約７×１０^７細胞／ｋｇ、約８×１０^７細胞／ｋｇ、又は約９×１０^７細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞の治療有効量は、体重１ｋｇ当たり約１×１０^６～約２×１０^６ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞であり、最大用量は、約１×１０^８ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞である。

本明細書で使用される場合、「患者」は、がん（例えば、リンパ腫又は白血病）などの疾患又は障害に罹患している任意のヒトを含む。「対象」及び「患者」という用語は、本明細書では互換的に使用される。「ドナー対象」という用語は、本明細書では、更なるインビトロ操作のために細胞が採取されている対象を指す。ドナー対象は、本明細書に記載の方法によって生成される細胞の集団で治療されるがん患者（すなわち、自己ドナー）であり得、又は、本明細書に記載の方法によって生成される細胞集団の生成時に、別の個体又はがん患者を治療するために使用されるリンパ球サンプルを提供する個体（すなわち、同種異系ドナー）であり得る。本方法によって調製された細胞を受け取る対象は、「レシピエント対象」と称され得る。

「刺激」、「刺激する」などの用語は、刺激分子とその同族リガンドとの結合によって誘導される一次応答を指し、その結合はシグナル伝達事象を媒介する。「刺激分子」は、抗原存在細胞上に存在する同族刺激リガンドと特異的に結合する、Ｔ細胞上の分子、例えば、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）／ＣＤ３複合体である。「刺激リガンド」は、抗原提示細胞（例えば、人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）、樹状細胞、Ｂ細胞など）上に存在する場合、Ｔ細胞上の刺激分子と特異的に結合し、それによって、限定するものではないが、活性化、免疫応答の開始、増殖などの、Ｔ細胞による一次応答を媒介し得るリガンドである。刺激リガンドとして、ペプチドを負荷したＭＨＣクラスＩ分子、抗ＣＤ３抗体、スーパーアゴニスト抗ＣＤ２８抗体、及びスーパーアゴニスト抗ＣＤ２抗体が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、「活性化」又は「活性」は、刺激されているＴ細胞を指す。活性Ｔ細胞は、ＣＤ１３７、ＣＤ２５、ＣＤ７１、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ１５４、ＣＤ４０Ｌ、及びＣＤ１３４から選択された１つ以上のマーカーの発現によって特徴付けられ得る。

「外因性活性化物質」という用語は、外部源に由来する任意の活性化物質を指す。例えば、外因性抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体、ＩＬ－２、外因性ＩＬ－７、又は外因性ＩＬ－１５は、商業的に取得され得るか、又は組換えによって産生され得る。１つ以上のＴ細胞に添加されるか、又はそれと接触するとき、「外因性ＩＬ－２」、「外因性ＩＬ－７」、又は「外因性ＩＬ－１５」は、そのようなＩＬ－２、ＩＬ－７及び／又はＩＬ－１５がＴ細胞によって生成されないことを示す。「外因性」のＩＬ－２、ＩＬ－７又はＩＬ－１５と混合される前のＴ細胞は、Ｔ細胞によって生成された、又はＴ細胞を有する対象から単離された微量の分を含有し得る（すなわち、内因性の「外因性」ＩＬ－２、ＩＬ－７又はＩＬ－１５）。本明細書に記載の１つ以上のＴ細胞は、当該技術分野で既知の任意の手段によって、外因性抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体、「外因性」ＩＬ－２、ＩＬ－７及び／又はＩＬ－１５と接触せることができ、この手段として、単離された「外因性」ＩＬ－２、ＩＬ－７及び／若しくはＩＬ－１５の培養物への追加、培養培地中への抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体、「外因性」ＩＬ－２、ＩＬ－７及び／若しくはＩＬ－１５の添加、又は、フィーダー層などによる１つ以上のＴ細胞以外の培養物中の１つ以上の細胞による「外因性」ＩＬ－２、ＩＬ－７及び／若しくはＩＬ－１５の発現が挙げられる。

本明細書で使用される場合、「インビトロ細胞」という用語は、エクスビボで培養される任意の細胞を指す。一実施形態では、インビトロ細胞としてＴ細胞が挙げられる。

「持続性」という用語は、例えば、対象に投与された１つ以上の移植された免疫細胞、又はそれらの子孫（例えば、分化又は成熟したＴ細胞）を、一定期間検出可能なレベルで対象内に維持する能力を指す。本明細書で使用される場合、１つ以上の移植された免疫細胞又はそれらの子孫（例えば、分化又は成熟したＴ細胞）の持続性を増加させることは、移植された免疫細胞が投与後の対象において検出可能な期間を延長させることを指す。例えば、１つ以上の移植された免疫細胞のインビボでの持続性は、少なくとも約１日間、少なくとも約２日間、少なくとも約３日間、少なくとも約４日間、少なくとも約５日間、少なくとも約６日間、少なくとも約７日間、少なくとも約８日間、少なくとも約９日間、少なくとも約１０日間、少なくとも約１１日間、少なくとも約１２日間、少なくとも約１３日間、少なくとも約１４日間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、又は少なくとも約６ヶ月延長し得る。加えて、１つ以上の移植された免疫細胞のインビボでの持続性は、本明細書に開示される方法によって調製されなかった１つ以上の移植された免疫細胞と比較して、少なくとも約１．５倍、少なくとも約２倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約３倍、少なくとも約３．５倍、少なくとも約４倍、少なくとも約４．５倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、又は少なくとも約１０倍延長し得る。

「低減する」及び「減少する」という用語は、本明細書では互換的に使用され、元のものよりも小さい任意の変化を示す。「低減する」及び「減少する」は相対的な用語であり、前後の測定値の比較を必要とする。「低減する」及び「減少する」は、完全な枯渇を含む。Ｔ細胞成熟を「調節する」という用語は、本明細書で使用されるとき、Ｔ細胞などの１つ以上の細胞の成熟及び／又は分化を制御するための、本明細書に記載の任意の介入の使用を指す。例えば、調節は、Ｔ細胞成熟の不活化、遅延、又は阻害を指す。別の例では、調節は、Ｔ細胞成熟の加速又は促進を指す。「Ｔ細胞成熟の遅延又は阻害」という用語は、１つ以上のＴ細胞を未成熟又は未分化状態に維持することを指す。例えば、「Ｔ細胞成熟の遅延又は阻害」は、Ｔ細胞をナイーブ又はＴ_ＣＭ状態に維持することを指し得、Ｔ_ＥＭ又はＴ_ＥＦＦ状態に進むこととは対照的である。加えて、「Ｔ細胞成熟の遅延又は阻害」は、Ｔ細胞の混合集団内の未成熟又は未分化のＴ細胞（例えば、ナイーブＴ細胞及び／又はＴ_ＣＭ細胞）の全体的なパーセンテージを増加又は濃縮することを指し得る。Ｔ細胞の状態（例えば、成熟又は未成熟）は、例えば、様々な遺伝子の発現及びＴ細胞の表面上に発現される様々なタンパク質の存在をスクリーニングすることによって、決定され得る。例えば、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ＋）、ＩＬ－７Ｒ－α、ＣＤ１３２、ＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ９５、ＩＬ－２Ｒβ、ＣＸＣＲ３、ＬＦＡ－１、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される１つ以上のマーカーの存在は、成熟度がより低く、未分化のＴ細胞であることを示し得る。

対象／患者の「治療」又は「治療すること」は、症状、合併症若しくは状態、又は疾患に関連する生化学的徴候の発症、増悪、発展、重症度若しくは再発を回復、緩和、改善、阻害、減速又は予防することを目的として、対象／患者に対して行われる任意の種類の介入若しくはプロセス、又は対象／患者への本出願により調製された１つ以上のＴ細胞の投与を指す。一態様では、「治療」又は「治療すること」は、部分寛解を含む。別の態様では、「治療」又は「治療すること」は、完全寛解を含む。

本出願の様々な態様は、以下のサブセクションで更に詳細に説明される。

高レベルの循環ＣＤ１９発現腫瘍細胞を有するＢ細胞悪性腫瘍患者は、満たされていないニーズが非常に高い集団を代表する。例えば、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）は、再発性又は難治性の状態での治療が困難であり、依然として治療不能である。第２選択治療及びより高度の化学療法について、標準的治療が存在しない。治療選択肢としては、細胞毒性化学療法、プロテアソーム阻害剤、免疫調節薬、チロシンキナーゼ阻害剤、及び幹細胞移植（自家［ＡＳＣＴ］及び同種幹細胞移植［ａｌｌｏ－ＳＣＴ］）が挙げられる。レジメンの選択は、先行治療、併存症、及び腫瘍の化学療法剤感受性によって影響される。ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫ阻害剤）で観察された高い初期奏効率にもかかわらず、最終的には、ほとんどの患者は進行性疾患を発症する。化学免疫療法、幹細胞移植、及びＢＴＫ阻害剤により効果的に制御されていない、ｒ／ｒ ＭＣＬを有する患者の予後不良を改善するため、新しい治療戦略が必要である。

抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法又はＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔで使用される製品は、最終生成物中のＣＤ１９発現腫瘍細胞を最小限に抑えるため、循環腫瘍細胞量を有するＢ細胞悪性腫瘍に適した白血球アフェレーシスを介して、患者自身のＴ細胞から製造され得る。白血球アフェレーシス産物から採取された白血球由来のＴ細胞は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞の選択によって濃縮され、抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体で活性化され、かつ／又は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ遺伝子を含有するウイルスベクターで形質導入され得る。この方法の更なる詳細は、国際公開第２０１５／１２００９６号として公開された国際出願第ＵＳ２０１５／０１４５２０号及び国際公開第２０１７／０７０３９５号として公開された国際出願第ＵＳ２０１６／０５７９８３号に見出され得る。一実施形態では、細胞は、ＡＫＴ阻害剤、ＩＬ－７、及びＩＬ－１５で処理されない。これらの操作されたＴ細胞を増殖させ、治療効果を達成するのに十分な数の細胞を生成できる。そのようなプロセスにより、ＣＤ１９を発現している悪性及び正常なＢ細胞が除去され、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の活性化、増殖、及び枯渇を低減し得る。

免疫細胞の活性化、形質導入、及び／又は増殖は、（ｉ）患者に投与するための少なくとも１回の用量の操作された免疫細胞の集団における十分な数の細胞、（ｉｉ）典型的なより長いプロセスと比較して、好ましい割合の幼若細胞を有する操作された免疫細胞の集団、又は（ｉｉｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）の両方の産生を可能にする任意の好適な期間で行われ得る。好適な期間は、１つ以上の細胞の集団、免疫細胞によって発現される細胞表面受容体、使用されるベクター、治療効果を有するために必要な用量、及び／又は他の変数を含むいくつかのパラメータを要因とし得る。活性化の期間は、０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、又は２１日超であり得る。本出願の方法による活性化の期間は、当該技術分野で既知の増殖方法と比較して短縮される。例えば、活性化の期間は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％短くてもよく、又は７５％を超えて短くてもよい。更に、増殖の期間は、０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、又は２１日超であり得る。本出願の方法による増殖の期間は、当該技術分野で既知の増殖方法と比較して低減される。例えば、増殖の期間は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％短くてもよく、又は７５％を超えて短くてもよい。一実施形態では、細胞増殖の期間は約３日であり、細胞集団の濃縮から操作された免疫細胞の生成までの期間は約６日である。

１つ以上のＴ細胞又はＤＣ細胞の成熟又は分化の遅延又は阻害は、当該技術分野で既知の任意の方法によって測定され得る。例えば、１つ以上のＴ細胞又はＤＣ細胞の成熟又は分化の遅延又は阻害は、１つ又はバイオマーカーの存在を検出することによって測定され得る。１つ以上のバイオマーカーの存在は、免疫組織化学法、及び／又は蛍光活性化細胞選別法（ＦＡＣＳ）が挙げられるが、これらに限定されない、当該技術分野で既知の任意の方法によって検出され得る。１つ以上のバイオマーカーは、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ^＋）、ＩＬ－７Ｒα、ＣＤ１３２、ＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ９５、ＩＬ－２Ｒβ、ＣＸＣＲ３、ＬＦＡ－１、又はこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。特定の態様では、１つ以上のＴ細胞又はＤＣ細胞の成熟又は分化の遅延又は阻害は、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ^＋）、ＩＬ－７Ｒα、及びＣＤ１３２のうちの１つ以上の存在を検出することによって測定され得る。当業者は、本方法が、収集された細胞の集団における未成熟及び未分化のＴ細胞又はＤＣ細胞の相対的割合を増加させ得るが、いくつかの成熟かつ分化した細胞が依然として存在し得ることを認識するであろう。結果として、１つ以上のＴ細胞又はＤＣ細胞の成熟又は分化の遅延又は阻害は、大気圧を超える圧力の有無における低酸素培養条件に対象から得られた１つ以上の細胞を曝露する前後の、細胞集団における未成熟及び未分化細胞の総パーセントを計算することによって測定され得る。本明細書に開示される方法は、Ｔ細胞集団における未成熟及び未分化Ｔ細胞のパーセンテージを増加させ得る。

本明細書に記載の方法は、リンパ球などの細胞の集団を１つ以上のＴ細胞刺激剤で刺激して、適切な条件下で活性化Ｔ細胞の集団を生成することを更に含む。Ｔ細胞刺激分子若しくは共刺激分子を標的とする抗体若しくはその機能的フラグメント（例えば、抗ＣＤ２抗体、抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ－３など）、抗ＣＤ２８抗体、又はその機能的フラグメント）、又は、任意の他の適切なマイトジェン（例えば、テトラデカノイルホルボールアセテート（ＴＰＡ）、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）、コンカナバリンＡ（ｃｏｎＡ）、リポ多糖（ＬＰＳ）、ポークウィードマイトジェン（ＰＷＭ））、又は、Ｔ細胞刺激分子若しくは共刺激分子に対する天然リガンドが挙げられるが、これらに限定されない１つ以上の好適なＴ細胞刺激剤の任意の組み合わせを使用して、活性化Ｔ細胞の集団を生成することができる。

本明細書に記載される免疫細胞集団を刺激又は活性化するための好適な条件は、一定期間、及び／又はあるレベルのＣＯ_２の存在下での温度を更に含む。刺激のための温度は、約３４℃、約３５℃、約３６℃、約３７℃、又は約３８℃、約３４～３８℃、約３５～３７℃、約３６～３８℃、約３６～３７℃、又は約３７℃であり得る。

本明細書に記載される免疫細胞集団を刺激又は活性化するための別の条件は、刺激又は活性化の時間を更に含み得る。刺激のための時間は、約２４～７２時間、約２４～３６時間、約３０～４２時間、約３６～４８時間、約４０～５２時間、約４２～５４時間、約４４～５６時間、約４６～５８時間、約４８～６０時間、約５４～６６時間、約６０～７２時間、約４４～５２時間、約４０～４４時間、約４０～４８時間、約４０～５２時間、又は約４０～５６時間である。一実施形態では、刺激のための時間は、約４８時間又は少なくとも約４８時間である。

本明細書に記載される免疫細胞集団を刺激又は活性化するための他の条件は、ＣＯ_２レベルを更に含み得る。刺激のためのＣＯ_２のレベルは、約１．０～１０％ＣＯ_２、約１．０％、約２．０％、約３．０％、約４．０％、約５．０％、約６．０％、約７．０％、約８．０％、約９．０％、又は約１０．０％ＣＯ_２、約３～７％ＣＯ_２、約４～６％ＣＯ_２、約４．５～５．５％ＣＯ_２である。一実施形態では、刺激のためのＣＯ_２のレベルは、約５％ＣＯ_２である。

免疫細胞集団を刺激又は活性化するための条件は、いずれかの組み合わせにおける、温度、刺激のための一定期間、及び／又はあるレベルのＣＯ_２の存在を更に含み得る。例えば、免疫細胞の集団を刺激する工程は、約３６～３８℃の温度で、約４４～５２時間、かつＣＯ_２レベルが約４．５～５．５％ＣＯ_２の存在下で、免疫細胞の集団を１つ以上の免疫細胞刺激剤で刺激することを含み得る。本出願の１つ以上の免疫細胞は、免疫療法又は細胞療法における使用のために対象に投与され得る。したがって、１つ以上の免疫細胞は、免疫療法又は細胞療法を必要とする対象から採取され得る。採取されると、１つ以上の免疫細胞は、対象に投与される前に任意の好適な期間処理され得る。

本明細書の方法によって作製されたリンパ球又は結果として生じる生成物の濃度、量、又は集団は、約１．０～１０．０×１０^６細胞／ｍＬである。特定の態様では、濃度は、約１．０～２．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～３．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～４．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～５．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～６．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～７．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～８．０×１０^６細胞／ｍＬ、１．０～９．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～１０．０×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～１．２×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～１．４×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～１．６×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～１．８×１０^６細胞／ｍＬ、約１．０～２．０×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．０×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．１×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．２×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．３×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．４×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．５×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．６×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．７×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．８×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約１．９×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約２．０×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約４．０×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約６．０×１０^６細胞／ｍＬ、少なくとも約８．０×１０^６細胞／ｍＬ、又は少なくとも約１０．０×１０^６細胞／ｍＬである。

抗ＣＤ３抗体（又はその機能的フラグメント）、抗ＣＤ２８抗体（若しくはその機能的フラグメント）、又は抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体の組み合わせは、大気圧を超える圧力の有無における低酸素培養条件にドナー対象から得られた１つ以上の細胞を曝露することと共に、又は独立して、リンパ球の集団を刺激する工程に従って使用され得る。任意の可溶性又は固定化された抗ＣＤ２、抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体又はそれらの機能的フラグメント（例えば、クローンＯＫＴ３（抗ＣＤ３）、クローン１４５－２Ｃ１１（抗ＣＤ３）、クローンＵＣＨＴ１（抗ＣＤ３）、クローンＬ２９３（抗ＣＤ２８）、クローン１５Ｅ８（抗ＣＤ２８））が、使用され得る。いくつかの態様では、抗体は、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（例えば、ＭＡＣＳ ＧＭＰ ＣＤ３ ｐｕｒｅ １ｍｇ／ｍＬ、Ｐａｒｔ Ｎｏ．１７０－０７６－１１６）、及びｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．が挙げられるが、これらに限定されない、当該技術分野で既知の供給業者から商業的に購入することができる。更に、当業者は、標準的な方法によって抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体を生成する方法を理解するであろう。いくつかの態様では、リンパ球の集団を刺激する工程に従って使用される１つ以上のＴ細胞刺激剤は、Ｔ細胞サイトカインの存在下でＴ細胞刺激又は共刺激分子を標的とする抗体又はその機能的フラグメントを含む。一実施形態では、１つ以上のＴ細胞刺激剤は、抗ＣＤ３抗体及びＩＬ－２を含む。特定の実施形態では、Ｔ細胞刺激剤は、５０ｎｇ／ｍＬの濃度の抗ＣＤ３抗体を含む。抗ＣＤ３抗体の濃度は、約２０ｎｇ／ｍＬ～１００ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、又は約１００ｎｇ／ｍＬである。代替的な態様では、Ｔ細胞活性化は必要とされない。

本明細書に記載の方法は、活性化免疫細胞の集団を、単回サイクル以上のウイルス形質導入を使用して、細胞表面受容体をコードする核酸分子を含むウイルスベクターで形質導入し、形質導入された免疫細胞の集団を生成することを更に含む。遺伝物質を細胞に送達するために、いくつかの組換えウイルスがウイルスベクターとして使用されている。形質導入工程に従って使用され得るウイルスベクターは、組換えレトロウイルスベクター、組換えレンチウイルスベクター、組換えアデノウイルスベクター、及び組換えアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）ベクターが挙げられるが、これらに限定されない、任意のエコトロピック又はアンホトロピックウイルスベクターであり得る。この方法は、１つ以上の免疫細胞をレトロウイルスで形質導入することを更に含む。一態様では、活性化免疫細胞の集団を形質導入するために使用されるウイルスベクターは、ＭＳＧＶ１γレトロウイルスベクターである。一実施形態では、活性化免疫細胞の集団を形質導入するために使用されるウイルスベクターは、Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３２（７）：６８９－７０２（２００９）に記載されているＰＧ１３－ＣＤ１９－Ｈ３ベクターである。この態様の一態様によれば、ウイルスベクターは、本明細書ではウイルスベクター接種材料と呼ばれるウイルスベクター製造に特異的な培地中で懸濁培養において増殖される。ウイルスベクターを成長させるための任意の好適な成長培地及び／又はサプリメントは、本明細書に記載の方法に従ってウイルスベクター接種材料で使用され得る。いくつかの態様によれば、次に、ウイルスベクター接種材料は、形質導入工程中に以下に記載される無血清培養培地に添加される。いくつかの態様では、１つ以上の免疫細胞は、レトロウイルスで形質導入され得る。一実施形態では、レトロウイルスは、細胞表面受容体をコードする異種遺伝子を含む。別の実施形態では、細胞表面受容体は、標的細胞の表面上、例えば、腫瘍細胞の表面上の抗原に結合し得る。任意選択的に、大気圧を超える圧力の有無における低酸素培養条件にドナー対象から得られた１つ以上の細胞を曝露することに加えて、本明細書に記載される活性化免疫細胞の集団を形質導入するための条件は、特定の温度で、及び／又は特定のレベルのＣＯ_２の存在下での、特定の時間を含み得る。形質導入のための温度は、約３４℃、約３５℃、約３６℃、約３７℃、又は約３８℃、約３４～３８℃、約３５～３７℃、約３６～３８℃、約３６～３７℃である。一実施形態では、形質導入のための温度は、約３７℃である。形質導入のための所定の温度は、約３４℃、約３５℃、約３６℃、約３７℃、約３８℃、又は約３９℃、約３４～３９℃、約３５～３７℃であり得る。一実施形態では、形質導入のための所定の温度は、約３６～３８℃、約３６～３７℃、又は約３７℃であり得る。形質導入のための時間は、約１２～３６時間、約１２～１６時間、約１２～２０時間、約１２～２４時間、約１２～２８時間、約１２～３２時間、約２０時間、又は少なくとも約２０時間であり、約１６～２４時間、約１４時間、少なくとも約１６時間、少なくとも約１８時間、少なくとも約２０時間、少なくとも約２２時間、少なくとも約２４時間、又は少なくとも約２６時間である。形質導入のためのＣＯ_２のレベルは、約１．０～１０％ＣＯ_２、約１．０％、約２．０％、約３．０％、約４．０％、約５．０％、約６．０％、約７．０％、約８．０％、約９．０％、約１０．０％ＣＯ_２、約３～７％ＣＯ_２、約４～６％ＣＯ_２、約４．５～５．５％ＣＯ_２、又は約５％ＣＯ_２である。

本明細書に記載される活性化免疫細胞の集団を導入することは、ある期間、特定の温度で、及び／又は特定のレベルのＣＯ_２の存在下の任意の組み合わせで実施され得、約３６～３８℃の温度、約１６～２４時間、及びＣＯ_２のレベルが約４．５～５．５％ＣＯ_２の存在下である。免疫細胞は、本出願の方法のうち任意の１つを、これらの方法を説明する目的のために参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１５／１２００９６号及び同第２０１７／０７０３９５号に記載されているもの、アキシカブタゲンシロルユーセル又はＹｅｓｃａｒｔａ（登録商標）の調製に使用される任意かつ全ての方法、Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ／Ｋｙｍｒｉａｈ（商標）の調製に使用される任意かつ全ての方法、免疫療法のための「既製」Ｔ細胞の調製に使用される任意かつ全ての方法、及び、ヒトへの投与のためにリンパ球を調製する任意の他の方法を非限定的に含む、免疫療法のためにＴ細胞を調製する任意の製造方法と組み合わせることによって調製され得る。製造プロセスは、患者から得られた細胞から循環腫瘍細胞を除去するように適合され得る。

ＣＡＲ－Ｔ細胞は、他の分子を発現するように操作されてもよく、次の例示的な種類又は当該技術分野で利用可能な他のもの、すなわち、第１、第２、第３、第４、第５、又はそれ以上の世代のＣＡＲ－Ｔ細胞、Ａｒｍｏｒｅｄ ＣＡＲ－Ｔ細胞、Ｍｏｔｉｌｅ ＣＡＲ－Ｔ細胞、ＴＲＵＣＫ Ｔ細胞、スイッチ受容体ＣＡＲ－Ｔ細胞、遺伝子編集されたＣＡＲ Ｔ細胞、二重受容体ＣＡＲ Ｔ細胞、自殺ＣＡＲ Ｔ細胞、薬物誘導性ＣＡＲ－Ｔ細胞、ｓｙｎＮｏｔｃｈ誘導性ＣＡＲ Ｔ細胞、及び阻害性ＣＡＲ Ｔ細胞のうちのいずれか１つであってもよい。一態様では、Ｔ細胞は、自己Ｔ細胞である。一態様では、Ｔ細胞は、（自家幹細胞療法又はＡＳＣＴのための）自家幹細胞である。一態様では、Ｔ細胞は、非自己Ｔ細胞である。

細胞（免疫細胞又はＴ細胞など）は、既知の方法を使用して単離又は選択後に遺伝子改変されるか、又は遺伝子改変される前にインビトロで活性化及び／又は増殖される（又は前駆細胞の場合は分化される）。免疫細胞、例えば、Ｔ細胞は、本明細書に記載のキメラ抗原受容体（例えば、ＣＡＲをコードする１つ以上のヌクレオチド配列を含むウイルスベクターで形質導入される）で遺伝子改変され、インビトロで活性化され、かつ／又は増殖される。Ｔ細胞を活性化及び増殖するための方法は、米国特許第６，９０５，８７４号、同第６，８６７，０４１号、及び同第６，７９７，５１４号、並びに国際公開第２０１２／０７９０００号に見出すことができ、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。全般的に、かかる方法は、ＩＬ－２などの特定のサイトカインを含む培養培地中で、ＰＢＭＣ又は単離Ｔ細胞を、ビーズ又はその他の表面に結合し得る刺激剤及び共刺激剤、例えば、抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体と接触させることを含み得る。ヒトＴ細胞の生理学的活性化のためのＣＤ３／ＣＤ２８活性化因子／刺激因子系であるＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）系が使用され得る。Ｔ細胞を活性化及び刺激し、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，０４０，１７７号及び同第５，８２７，６４２号並びに国際公開第２０１２／１２９５１４号に記載されているように、好適な支持細胞、抗体、及び／又はサイトカインと共に増殖させ得る。

操作された免疫細胞によって発現される細胞表面受容体は、ＣＡＲによって標的化される任意の抗原又は分子例えば、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ、ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲ、又はＦＭＣ６３－ＣＤ８２８ＢＢＺ ＣＡＲ（Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２００９，３２（７）：６８９、Ｌｏｃｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２０１０，１１６（２０）：４０９９、その両方の主題は、参照により本明細書に組み込まれる）であってよい。特定の態様では、操作された免疫細胞の所定の用量は、約１００万個超～約３００万個未満の形質導入されたＴ細胞／ｋｇであり得る。一実施形態では、操作されたＴ細胞の所定の用量は、体重１キログラム当たり約１００万個～約２００万個の形質導入されたＴ細胞（細胞／ｋｇ）であり得る。操作されたＴ細胞の所定の用量は、体重１キログラム当たり１００万個～約２００万個、少なくとも約２００万個～約３００万個未満の形質導入されたＴ細胞（細胞／ｋｇ）であり得る。一実施形態では、操作されたＴ細胞の所定の用量は、約２００万個の形質導入されたＴ細胞／ｋｇであり得る。別の実施形態では、操作されたＴ細胞の所定の用量は、少なくとも約２００万個の形質導入されたＴ細胞／ｋｇであり得る。操作されたＴ細胞の所定の用量の例は、約２．０百万、約２．１百万、約２．２百万、約２．３百万、約２．４百万、約２．５百万、約２．６百万、約２．７百万、約２．８百万、又は約２．９百万個の形質導入された改変Ｔ細胞／ｋｇであり得る。

本明細書に記載の方法は、形質導入された１つ以上の免疫細胞の集団を一定期間増加又は濃縮して、操作された免疫細胞の集団を生成することを含む。増殖のための期間は、（ｉ）患者に投与するための少なくとも１回の用量の操作された免疫細胞の集団における十分な数の細胞、（ｉｉ）典型的なより長いプロセスと比較して、好ましい割合の幼若細胞を有する操作された免疫細胞の集団、又は（ｉｉｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）の両方の産生を可能にする任意の好適な期間であり得る。この期間は、免疫細胞によって発現される細胞表面受容体、使用されるベクター、治療効果を有するのに必要な用量、及び他の変数に依存する。増殖のための所定の期間は、０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、又は２１日超であり得る。一実施形態では、本方法の増殖のための期間は、当該技術分野で既知のものと比較して短縮される。例えば、所定の増殖の期間は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％短くてもよく、又は７５％を超えて短くてもよい。一例では、増殖の期間は約３日であり、リンパ球集団の濃縮から操作された免疫細胞の生成までの期間は約６日である。

形質導入された免疫細胞の集団を増殖するための条件は、温度及び／又はあるレベルのＣＯ_２の存在を含み得る。特定の態様では、温度は、約３４℃、約３５℃、約３６℃、約３７℃、又は約３８℃、約３５～３７℃、約３６～３７℃、又は約３７℃である。ＣＯ_２のレベルは、１．０～１０％ＣＯ_２、約１．０％、約２．０％、約３．０％、約４．０％、約５．０％、約６．０％、約７．０％、約８．０％、約９．０％、約１０．０％ＣＯ_２、約４．５～５．５％ＣＯ_２、約５％ＣＯ_２、約３．５％、約４．０％、約４．５％、約５．０％、約５．５％、又は約６．５％ＣＯ_２である。

本明細書に記載の方法の各工程は、閉鎖系で実行され得る。閉鎖系は、任意の好適な細胞培養バッグ（例えば、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ ＭＡＣＳ（登録商標）ＧＭＰ Ｃｅｌｌ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ Ｂａｇｓ、Ｏｒｉｇｅｎ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ ＰｅｒｍａＬｉｆｅ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ ｂａｇｓ）を使用する、閉鎖バッグ培養システムであり得る。閉鎖バッグ培養システムで使用される細胞培養バッグは、形質導入工程中に組換えヒトフィブロネクチンフラグメントでコーティングされ得る。組換えヒトフィブロネクチンフラグメントは、３つの機能ドメイン、すなわち、中心細胞結合ドメイン、ヘパリン結合ドメインＩＩ、及びＣＳ１配列を含み得る。組換えヒトフィブロネクチンフラグメントを用いて、標的細胞とウイルスベクターとの共局在を補助することによって、免疫細胞のレトロウイルス形質導入の遺伝子効率を増加させることができる。一実施形態では、組換えヒトフィブロネクチンフラグメントは、ＲＥＴＲＯＮＥＣＴＩＮ（登録商標）（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ、Ｊａｐａｎ）である。細胞培養バッグは、約１～６０μｇ／ｍＬ又は約１～４０μｇ／ｍＬ、約１～２０μｇ／ｍＬ、２０～４０μｇ／ｍＬ、４０～６０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ、約２μｇ／ｍＬ、約３μｇ／ｍＬ、約４μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ、約６μｇ／ｍＬ、約７μｇ／ｍＬ、約８μｇ／ｍＬ、約９μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約１１μｇ／ｍＬ、約１２μｇ／ｍＬ、約１３μｇ／ｍＬ、約１４μｇ／ｍＬ、約１５μｇ／ｍＬ、約１６μｇ／ｍＬ、約１７μｇ／ｍＬ、約１８μｇ／ｍＬ、約１９μｇ／ｍＬ、約２０μｇ／ｍＬ、約２～５μｇ／ｍＬ、約２～１０μｇ／ｍＬ、約２～２０μｇ／ｍＬ、約２～２５μｇ／ｍＬ、約２～３０μｇ／ｍＬ、約２～３５μｇ／ｍＬ、約２～４０μｇ／ｍＬ、約２～５０μｇ／ｍＬ、約２～６０μｇ／ｍＬ、少なくとも約２μｇ／ｍＬ、少なくとも約５μｇ／ｍＬ、少なくとも約１０μｇ／ｍＬ、少なくとも約１５μｇ／ｍＬ、少なくとも約２０μｇ／ｍＬ、少なくとも約２５μｇ／ｍＬ、少なくとも約３０μｇ／ｍＬ、少なくとも約４０μｇ／ｍＬ、少なくとも約５０μｇ／ｍＬ、又は少なくとも約６０μｇ／ｍＬの組換えヒトフィブロネクチンフラグメントの濃度で、組換えヒトフィブロネクチンフラグメントでコーティングされる。一実施形態では、細胞培養バッグは、少なくとも約１０μｇ／ｍＬの組換えヒトフィブロネクチンフラグメントでコーティングされる。閉鎖バッグ培養システムで使用される細胞培養バッグは、形質導入工程中に、ヒトアルブミン血清（ＨＳＡ）で任意選択的にブロッキングされ得る。別の実施形態では、細胞培養バッグは、形質導入工程中にＨＳＡでブロッキングされない。

上記の方法によって産生された操作された免疫細胞の集団は、細胞を後で使用できるように、任意選択的に凍結保存され得る。操作された免疫細胞の集団の凍結保存のための方法もまた、本明細書に提供される。そのような方法は、操作された免疫細胞の集団を希釈液で洗浄及び濃縮する工程を含み得る。例えば、希釈液は、生理食塩水、０．９％生理食塩水、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ（ＰＬ）、５％デキストロース／０．４５％ＮａＣｌ生理食塩水溶液（Ｄ５）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、又はそれらの組み合わせである。また、ＨＳＡは、解凍後の細胞生存率及び細胞回収率を改善するために、洗浄及び濃縮された細胞に添加され得る。別の態様では、洗浄溶液は生理食塩水であり、洗浄及び濃縮された細胞にＨＳＡ（５％）が補充される。この方法はまた、凍結保存混合物を生成する工程を含んでもよく、このとき凍結保存混合物は、希釈液中の希釈された細胞集団と、好適な凍結保存溶液と、を含む。凍結保存剤溶液は、ＣｒｙｏＳｔｏｒ１０（ＢｉｏＬｉｆｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）が挙げられるが、これらに限定されない任意の好適な凍結保存溶液であり得、操作された免疫細胞の希釈液と１：１又は２：１の比で混合される。ＨＳＡは、凍結保存された混合物中で、約１．０～１０％、約１．０％、約２．０％、約３．０％、約４．０％、約５．０％、約６．０％、約７．０％、約８．０％、約９．０％、約１０．０％、約１～３％ＨＳＡ、約１～４％ＨＳＡ、約１～５％ＨＳＡ、約１～７％ＨＳＡ、約２～４％ＨＳＡ、約２～５％ＨＳＡ、約２～６％ＨＳＡ、約２～７％ＨＳＡ、又は約２．５％ＨＳＡの最終濃度を提供するように添加され得る。操作された免疫細胞の集団の凍結保存は、０．９％の生理食塩水で細胞を洗浄することと、ＨＳＡを５％の最終濃度で洗浄された細胞に添加することと、細胞をＣｒｙｏＳｔｏｒ（商標）ＣＳ１０で１：１に希釈することと（最終凍結保存混合物中、２．５％ＨＳＡの最終濃度）と、を含み得る。いくつかの態様では、本方法はまた、凍結保存混合物を凍結する工程を含む。また、凍結保存混合物は、凍結保存混合物中約１×１０^６～約１．５×１０^７細胞／ｍＬの細胞濃度において、定義された凍結サイクルを使用して、制御速度冷凍庫で凍結される。この方法はまた、気相液体窒素中で凍結保存混合物を貯蔵する工程を含み得る。

本明細書に記載の方法によって産生された操作された免疫細胞の集団は、所定の用量で凍結保存され得る。所定の用量は、治療有効用量であり得、これは、以下に提供される任意の治療有効用量であり得る。操作された免疫細胞の所定の用量は、免疫細胞によって発現される細胞表面受容体（例えば、細胞上に発現される細胞表面受容体の親和性及び密度）、標的細胞の種類、治療される疾患又は病態の性質、又は両方の組み合わせに依存し得る。

一実施形態では、操作されたＴ細胞の集団は、体重１キログラム当たり約１００万個の操作されたＴ細胞（細胞／ｋｇ）の所定の用量で凍結保存され得る。特定の実施形態では、操作されたＴ細胞の集団は、約５００，０００～約１００万個の操作されたＴ細胞／ｋｇの所定の用量で凍結保存され得る。特定の実施形態では、操作されたＴ細胞の集団は、少なくとも約１００万、少なくとも約２００万、少なくとも約３００万、少なくとも約４００万、少なくとも約５００万、少なくとも約６００万、少なくとも約７００万、少なくとも約８００万、少なくとも約９００万、少なくとも約１０００万個の操作されたＴ細胞／ｋｇの所定の用量で凍結保存され得る。他の態様では、操作されたＴ細胞の集団は、１００万細胞／ｋｇ未満、１００万細胞／ｋｇ、２００万細胞／ｋｇ、３００万細胞／ｋｇ、４００万細胞／ｋｇ、５００万細胞／ｋｇ、６００万細胞／ｋｇ、７００万細胞／ｋｇ、８００万細胞／ｋｇ、９００万細胞／ｋｇ、１０００万細胞／ｋｇ、１０００万細胞／ｋｇ超、２０００万細胞／ｋｇ超、３０００万細胞／ｋｇ超、４０００万細胞／ｋｇ超、５０００万細胞／ｋｇ超、６０００万細胞／ｋｇ超、７０００万細胞／ｋｇ超、８０００万細胞／ｋｇ超、９０００万細胞／ｋｇ超、又は１億細胞／ｋｇ超の所定の用量で凍結保存され得る。特定の態様では、操作されたＴ細胞の集団は、約１００万～約２００万個の操作されたＴ細胞／ｋｇの所定の用量で凍結保存され得る。操作されたＴ細胞の集団は、約１００万細胞～約２００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約３００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約４００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約５００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約６００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約７００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約８００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約９００万細胞／ｋｇ、約１００万細胞～約１０００万細胞／ｋｇの所定の容量で凍結保存され得る。操作されたＴ細胞の集団の所定の用量は、対象の体重に基づいて計算され得る。一例では、操作されたＴ細胞の集団は、約０．５～２００ｍＬの凍結保存培地中で凍結保存され得る。更に、操作されたＴ細胞の集団は、約０．５ｍＬ、約１．０ｍＬ、約５．０ｍＬ、約１０．０ｍＬ、約２０ｍＬ、約３０ｍＬ、約４０ｍＬ、約５０ｍＬ、約６０ｍＬ、約７０ｍＬ、約８０ｍＬ、約９０ｍＬ、又は約１００ｍＬ、約１０～３０ｍＬ、約１０～５０ｍＬ、約１０～７０ｍＬ、約１０～９０ｍＬ、約５０～７０ｍＬ、約５０～９０ｍＬ、約５０～１１０ｍＬ、約５０～１５０ｍＬ、又は約１００～２００ｍＬの凍結保存培地中で凍結保存され得る。特定の態様では、操作されたＴ細胞の集団は、好ましくは、約５０～７０ｍＬの凍結保存培地中で凍結保存され得る。

一実施形態では、（ａ）免疫細胞の集団を外因性ＩＬ－２、外因性ＩＬ－７、外因性ＩＬ－１５、及び／又は他のサイトカインに接触させること、（ｂ）免疫細胞の集団を刺激すること、（ｃ）活性化された免疫細胞の集団を形質導入すること、並びに、（ｄ）形質導入された免疫細胞の集団を増殖すること、のうち少なくとも１つは、添加された血清を含まない無血清培養培地を使用して実施される。いくつかの態様では、（ａ）～（ｄ）の各々は、添加された血清を含まない無血清培養培地を使用して実施される。本明細書で言及されるように、「無血清培地」又は「無血清培養培地」という用語は、使用される成長培地に血清（例えば、ヒト血清又はウシ血清）が補充されないことを意味する。言い換えれば、培養細胞の生存率、活性化、及び成長を支持する目的で、血清が、個々に別々の異なる成分として培地に添加されない。本明細書に記載の方法に従って、懸濁液中の細胞を培養するために、任意の好適な免疫細胞増殖培地を使用することができる。例えば、免疫細胞増殖培地は、好適な量の緩衝液、マグネシウム、カルシウム、ピルビン酸ナトリウム、及び重炭酸ナトリウムを含む滅菌低グルコース溶液を挙げることができるが、これに限定されない。一態様では、Ｔ細胞成長培地は、ＯＰＴＭＩＺＥＲ（商標）（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）である。操作された免疫細胞を生成するための典型的な方法とは対照的に、本明細書に記載の方法は、血清（例えば、ヒト又はウシ）を補充しない培養培地を使用できる。

本出願は、Ｔ細胞を用いたがんの治療の様々な方法を提供する。一態様では、Ｔ細胞はＣＤ１９に対するＣＡＲ－Ｔ細胞であり、本出願の方法のうち任意の１つを、これらの方法を説明する目的のために両方が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１５／１２００９６号及び同第２０１７／０７０３９５号に記載されているもの、アキシカブタゲンシロルユーセル又はＹｅｓｃａｒｔａ（登録商標）の調製に使用される任意かつ全ての方法、Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ／Ｋｙｍｒｉａｈ（商標）の調製に使用される任意かつ全ての方法、免疫療法のための「既製」Ｔ細胞の調製に使用される任意かつ全ての方法、及び、ヒトへの投与のためにリンパ球を調製する任意の他の方法を非限定的に含む、免疫療法のためにＴ細胞を調製する製造方法の任意の工程と組み合わせることによって調製され得る。いくつかの態様では、製造プロセスは、患者から得られた細胞から循環腫瘍細胞を特異的に除去するように適合される。

一態様では、Ｔ細胞は、国際出願第ＵＳ２０１６／０５７９８３号に記載の方法によって調製されたＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞である。一実施形態では、循環腫瘍細胞が枯渇したＴ細胞の集団は、白血球アフェレーシス産物から調製される。これらの細胞は、国際出願第ＵＳ２０１６／０５７９８３号に記載されているように調製され得、本明細書ではＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞として更に記載されている。簡潔には、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔは、対象のＴ細胞が、ＣＤ１９発現細胞の除去をもたらすＣＤ２８及びＣＤ３ζ活性化ドメインに連結されたＣＤ１９に対する単鎖抗体フラグメントからなる受容体を発現するように操作された自己ＣＡＲ Ｔ細胞製品である。ＣＤ１９^＋標的細胞とのＣＡＲの会合後、ＣＤ３ζドメインが、Ｔ細胞の活性化、増殖、及び細胞傷害性などのエフェクター機能の獲得をもたらす下流シグナル伝達カスケードを活性化する。ＣＤ２８の細胞内シグナル伝達ドメインは、インターロイキン（ＩＬ）－２産生を含むＴ細胞機能を増強するために、初代ＣＤ３ζシグナルと機能する共刺激シグナルを提供する。合わせて、これらのシグナルは、ＣＡＲ Ｔ細胞の増殖を刺激し、標的細胞の死滅を誘導し得る。更に、活性化Ｔ細胞は、サイトカイン、ケモカイン、及び追加の抗腫瘍免疫細胞を動員して活性化することができる他の分子を分泌し得る。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞中の抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＦＭＣ６３－２８Ｚを含み得る。

特定のがんにおいて循環腫瘍細胞が存在するため、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔの製造は、ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋Ｔ細胞濃縮工程を含む。Ｔ細胞濃縮又は単離工程は、白血球アフェレーシス材料中の循環するＣＤ１９発現腫瘍細胞を低減することができ、製造中の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の活性化、増殖、及び枯渇に関連し得る。

本明細書に記載の方法は、免疫又は細胞療法の治療結果又は有効性を向上させることができ、これは、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）免疫療法、自己細胞療法、操作された自己細胞療法（ｅＡＣＴ（商標））、同種Ｔ細胞移植、非Ｔ細胞移植、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される養子Ｔ細胞療法であり得る。養子Ｔ細胞療法は、広くは、選択、インビトロ濃縮、及び、腫瘍細胞を認識し、結合することができる患者の自家又は同種Ｔ細胞の投与の任意の方法を含む。ＴＩＬ免疫療法は、一種の養子Ｔ細胞療法であり、腫瘍組織を浸潤させることができるリンパ球が単離され、インビトロ濃縮され、患者に投与される。ＴＩＬ細胞は、自己又は同種のいずれかであり得る。自己細胞療法は、腫瘍細胞を標的にすることができるＴ細胞を患者から単離すること、Ｔ細胞をインビトロで濃縮すること、及び、Ｔ細胞を同じ患者に戻して投与することを含む、養子Ｔ細胞療法である。同種Ｔ細胞移植は、エクスビボで増殖された自然発生Ｔ細胞、又は遺伝子操作されたＴ細胞の移植を含み得る。上記でより詳細に説明されるように、操作された自己細胞療法は、養子Ｔ細胞療法であり、このとき、患者自身のリンパ球は、単離され、腫瘍標的化分子を発現するように遺伝子改変され、インビトロで増殖され、患者に戻して投与される。非Ｔ細胞移植には、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞などであるがこれに限定されない非Ｔ細胞を用いた、自己又は同種療法が含まれ得る。

本出願の免疫細胞療法は、操作された自己細胞療法（ｅＡＣＴ（商標））である。この態様によれば、この方法は、ドナーから免疫細胞を採取することを含み得る。次いで、単離された免疫細胞を外因性活性化試薬（例えば、サイトカイン）と接触させ、増殖させ、キメラ抗原受容体（「操作されたＣＡＲ Ｔ細胞」）又はＴ細胞受容体（「操作されたＴＣＲ Ｔ細胞」）を発現させるように操作され得る。いくつかの態様では、操作された免疫細胞は、対象において腫瘍を治療する。例えば、１つ以上の免疫細胞は、細胞表面受容体をコードする異種遺伝子を含むレトロウイルスを用いて形質導入される。一実施形態では、細胞表面受容体は、標的細胞の表面上、例えば、腫瘍細胞の表面上の抗原への結合が可能である。いくつかの実施形態では、細胞表面受容体は、キメラ抗原受容体又はＴ細胞受容体である。別の実施形態では、１つ以上の免疫細胞は、キメラ抗原受容体を発現するように操作され得る。キメラ抗原受容体は、腫瘍抗原に対する結合分子を含み得る。結合分子は、抗体又はその抗原結合分子であり得る。例えば、抗原結合分子は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）２、及びｄＡｂ、並びにそれらの任意のフラグメント又は組み合わせから選択され得る。キメラ抗原受容体は、ヒンジ領域を更に含み得る。ヒンジ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＣＤ２８、又はＣＤ８αのヒンジ領域に由来し得る。一実施形態では、ヒンジ領域は、ＩｇＧ４のヒンジ領域に由来する。キメラ抗原受容体はまた、膜貫通ドメインも含み得る。膜貫通ドメインは、免疫細胞上の共受容体又は免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーの膜貫通ドメインである任意の膜貫通分子の膜貫通ドメインであり得る。特定の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８、ＣＤ２８Ｔ、ＣＤ８α、ＣＤ４又はＣＤ１９の膜貫通ドメインに由来する。別の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８膜貫通ドメインに由来するドメインを含む。別の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８Ｔ膜貫通ドメインに由来するドメインを含む。キメラ抗原受容体は、１つ以上の共刺激シグナル伝達領域を更に含み得る。例えば、共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８、ＣＤ２８Ｔ、ＯＸ－４０、４１ＢＢ、ＣＤ２７、誘導性Ｔ細胞共刺激分子（ＩＣＯＳ）、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ２４７、Ｉｇα（ＣＤ７９ａ）、又はＦｃγ受容体のシグナル伝達領域であり得る。更なる実施形態では、共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８シグナル伝達領域である。別の実施形態では、共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８Ｔシグナル伝達領域である。追加の実施形態では、キメラ抗原受容体は、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを更に含む。

いくつかの態様では、腫瘍抗原は、７０７－ＡＰ（７０７アラニンプロリン）、ＡＦＰ（α（ａ）－フェトタンパク質）、ＡＲＴ－４（Ｔ４細胞によって認識される腺がん抗原）、ＢＡＧＥ（Ｂ抗原、ｂ－カテニン／ｍ、ｂ－カテニン／変異型）、ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）、Ｂｃｒ－ａｂｌ（易切断領域－Ａｂｅｌｓｏｎ）、ＣＡＩＸ（炭酸脱水酵素ＩＸ）、ＣＤ１９（表面抗原分類１９）、ＣＤ２０（表面抗原分類２０）、ＣＤ２２（表面抗原分類２２）、ＣＤ３０（表面抗原分類３０）、ＣＤ３３（表面抗原分類３３）、ＣＤ４４ｖ７／８（表面抗原分類４４、エクソン７／８）、ＣＡＭＥＬ（黒色腫上のＣＴＬ認識抗原）、ＣＡＰ－１（がん胎児抗原ペプチド－１）、ＣＡＳＰ－８（カスパーゼ－８）、ＣＤＣ２７ｍ（細胞分裂周期２７、変異型）、ＣＤＫ４／ｍ（サイクリン依存性キナーゼ４、変異型）、ＣＥＡ（がん胎児抗原）、ＣＴ（がん／精巣（抗原））、Ｃｙｐ－Ｂ（シクロフィリンＢ）、ＤＡＭ（分化抗原、黒色腫）、ＥＧＦＲ（上皮増殖因子受容体）、ＥＧＦＲｖＩＩＩ（上皮増殖因子受容体、バリアントＩＩＩ）、ＥＧＰ－２（上皮糖タンパク質２）、ＥＧＰ－４０（上皮糖タンパク質４０）、Ｅｒｂｂ２、３、４（赤芽球性白血病ウイルスがん遺伝子ホモログ－２、－３、４）、ＥＬＦ２Ｍ（伸長因子２、変異型）、ＥＴＶ６－ＡＭＬ１（Ｅｔｓバリアント遺伝子６／急性骨髄性白血病１遺伝子ＥＴＳ）、ＦＢＰ（葉酸結合タンパク質）、ｆＡｃｈＲ（胎児アセチルコリン受容体）、Ｇ２５０（糖タンパク質２５０）、ＧＡＧＥ（Ｇ抗原）、ＧＤ２（ジシアロガングリオシド２）、ＧＤ３（ジシアロガングリオシド３）、ＧｎＴ－Ｖ（Ｎ－アセチルグルコサミン転移酵素Ｖ）、Ｇｐ１００（糖タンパク質１００ｋＤ）、ＨＡＧＥ（ヘリコース抗原）、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ（ヒト上皮受容体－２／神経性；ＥＧＦＲ２としても知られる）、ＨＬＡ－Ａ（ヒト白血球抗原－Ａ）、ＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）、ＨＳＰ７０－２Ｍ（熱ショックタンパク質７０－２、変異型）、ＨＳＴ－２（ヒト印環腫瘍－２）、ｈＴＥＲＴ又はｈＴＲＴ（ヒトテロメラーゼ逆転写酵素）、ｉＣＥ（腸管カルボキシルエステラーゼ）、ＩＬ－１３Ｒ－ａ２（インターロイキン－１３受容体サブユニットα－２）、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＤＲ（キナーゼ挿入ドメイン受容体）、κ－軽鎖、ＬＡＧＥ（Ｌ抗原）、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ（低密度脂質受容体／ＧＤＰ－Ｌ－フコース：ｂ－Ｄ－ガラクトシダーゼ２－ａ－Ｌフコシルトランスフェラーゼ）、ＬｅＹ（ルイス－Ｙ抗体）、Ｌ１ＣＡＭ（Ｌ１細胞接着分子）、ＭＡＧＥ（黒色腫抗原）、ＭＡＧＥ－Ａ１（黒色腫関連抗原１）、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＭＡＧＥ－Ａ６、メソセリン、マウスＣＭＶ感染細胞、ＭＡＲＴ－１／Ｍｅｌａｎ－Ａ（Ｔ細胞によって認識される黒色腫抗原－１／黒色腫抗原Ａ）、ＭＣ１Ｒ（メラノコルチン１受容体）、Ｍｙｏｓｉｎ／ｍ（ミオシン、変異型）、ＭＵＣ１（ムチン１）、ＭＵＭ－１、－２、－３（黒色腫遍在性、変異型１、２、３）、ＮＡ８８－Ａ（患者Ｍ８８のＮＡ ｃＤＮＡクローン）、ＮＫＧ２Ｄ（ナチュラルキラーグループ２、メンバーＤ）リガンド、ＮＹ－ＢＲ－１（ニューヨーク乳房分化抗原１）、ＮＹ－ＥＳＯ－１（ニューヨーク食道扁平細胞カルシノーマ－１）、がん胎児性抗原（ｈ５Ｔ４）、Ｐ１５（プロテイン１５）、ｐ１９０ ｍｉｎｏｒ ｂｃｒ－ａｂｌ（１９０ＫＤのｂｃｒ－ａｂｌタンパク質）、Ｐｍｌ／ＲＡＲａ（前骨髄球性白血病／レチノイン酸受容体ａ）、ＰＲＡＭＥ（黒色腫の優先的発現抗原）、ＰＳＡ（前立腺特異的抗原）、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原）、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、ＲＡＧＥ（腎抗原）、ＲＵ１又はＲＵ２（腎偏在性１又は２）、ＳＡＧＥ（肉腫抗原）、ＳＡＲＴ－１又はＳＡＲＴ－３（腫瘍を拒絶する扁平抗原１又は３）、ＳＳＸ１、－２、－３、４（滑膜肉腫Ｘ１、－２、－３、－４）、ＴＡＡ（腫瘍関連抗原）、ＴＡＧ－７２（腫瘍関連糖タンパク質７２）、ＴＥＬ／ＡＭＬ１（転座Ｅｔｓ－ファミリー白血病／急性骨髄性白血病１）、ＴＰＩ／ｍ（トリオースリン酸イソメラーゼ、変異型）、ＴＲＰ－１（チロシナーゼ関連タンパク質１、又はｇｐ７５）、ＴＲＰ－２（チロシナーゼ関連タンパク質２）、ＴＲＰ－２／ＩＮＴ２（ＴＲＰ－２／イントロン２）、ＶＥＧＦ－Ｒ２（血管内皮増殖因子受容体２）、ＷＴ１（ウィルムス腫瘍遺伝子）、及びこれらの任意の組み合わせから選択される。一実施形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。

Ｔ細胞療法は、Ｔ細胞受容体を発現する操作されたＴ細胞（「操作されたＴＣＲ Ｔ細胞」）を患者に投与することを含む。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、腫瘍抗原に結合分子を含み得る。いくつかの態様では、腫瘍抗原は、７０７－ＡＰ、ＡＦＰ、ＡＲＴ－４、ＢＡＧＥ、ＢＣＭＡ、Ｂｃｒ－ａｂｌ、ＣＡＩＸ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＡＭＥＬ、ＣＡＰ－１、ＣＡＳＰ－８、ＣＤＣ２７ｍ、ＣＤＫ４／ｍ、ＣＥＡ、ＣＴ、Ｃｙｐ－Ｂ、ＤＡＭ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＧＰ－２、ＥＧＰ－４０、Ｅｒｂｂ２、３、４、ＥＬＦ２Ｍ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ１、ＦＢＰ、ｆＡｃｈＲ、Ｇ２５０、ＧＡＧＥ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧｎＴ－Ｖ、Ｇｐ１００、ＨＡＧＥ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＨＬＡ－Ａ、ＨＰＶ、ＨＳＰ７０－２Ｍ、ＨＳＴ－２、ｈＴＥＲＴ又はｈＴＲＴ、ｉＣＥ、ＩＬ－１３Ｒ－ａ２、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＤＲ、κ－軽鎖、ＬＡＧＥ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、ＬｅＹ、Ｌ１ＣＡＭ、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ－Ａ１、メソセリン、マウスＣＭＶ感染細胞、ＭＡＲＴ－１／Ｍｅｌａｎ－Ａ、ＭＣ１Ｒ、Ｍｙｏｓｉｎ／ｍ、ＭＵＣ１、ＭＵＭ－１、－２、－３、ＮＡ８８－Ａ、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＹ－ＢＲ－１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、がん胎児性抗原、Ｐ１５、ｐ１９０ ｍｉｎｏｒ ｂｃｒ－ａｂｌ、Ｐｍｌ／ＲＡＲａ、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ、ＲＵ１又はＲＵ２、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ－１又はＳＡＲＴ－３、ＳＳＸ１、－２、－３、４、ＴＡＡ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、ＴＰＩ／ｍ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２／ＩＮＴ２、ＶＥＧＦ－Ｒ２、ＷＴ１、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

「ＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法」とは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）陽性免疫細胞の懸濁液を指す。そのような免疫療法の例は、循環腫瘍細胞を含まず、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞が濃縮したＣＡＲ－Ｔ細胞を使用する、Ｃｌｅａｒ ＣＡＲ－Ｔ療法である。別の例は、アキシカブタゲンシロルユーセル（Ａｘｉ－ｃｅｌ（商標）、ＹＥＳＣＡＲＴＡ（登録商標）としても知られる）である。Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ，ｅｔ ａｌ．，（Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ２００９；３２：６８９ ７０２）を参照されたい。他の非限定的な例としては、ＪＣＡＲ０１７、ＪＣＡＲ０１５、ＪＣＡＲ０１４、Ｋｙｍｒｉａｈ（チサゲンレクロイセル）、Ｕｐｐｓａｌａ Ｕ．抗ＣＤ１９ ＣＡＲ（ＮＣＴ０２１３２６２４）、及びＵＣＡＲＴ１９（Ｃｅｌｅｃｔｉｓ）が挙げられる。Ｓａｄｅｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ Ｖｏｌ．３（２００３）、Ｒｕｅｌｌａ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ Ｈｅｍａｔｏｌ Ｍａｌｉｇ Ｒｅｐ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，ＮＹ（２０１６）、及びＳａｄｅｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（Ａｐｒ ２０１３）を参照されたい。ＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法の準備のため、患者自身のＴ細胞を採取し、レトロウイルス形質導入によってエクスビボで遺伝子改変して、ＣＤ２８及びＣＤ３－ζ共刺激ドメインに連結されたマウス抗ＣＤ１９単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現させることができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、４－１ＢＢ及びＣＤ３－ζ共刺激ドメインに連結されたマウス抗ＣＤ１９単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を増殖させて、注入することで患者に戻すことができ、このとき、ＣＤ１９発現標的細胞を認識して排除することができる。

一態様では、ＴＣＲは、ウイルスがん遺伝子への結合分子を含む。一実施形態では、ウイルスがん遺伝子は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）、及びヒトＴリンパ球向性ウイルス（ＨＴＬＶ）から選択される。他の実施形態では、ＴＣＲは、精巣、胎盤、又は胎児腫瘍抗原への結合分子を含む。一実施形態では、精巣、胎盤、又は胎児腫瘍抗原は、ＮＹ－ＥＳＯ－１、滑膜肉腫Ｘブレークポイント２（ＳＳＸ２）、黒色腫抗原（ＭＡＧＥ）、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。別の実施形態では、ＴＣＲは、系列特異的抗原への結合分子を含む。追加の実施形態では、Ｔ細胞によって認識される黒色腫抗原－１（ＭＡＲＴ－１）、ｇｐ１００、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。特定の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＣＤ１９に結合するキメラ抗原受容体を発現しており、ＣＤ２８共刺激ドメイン及びＣＤ３－ζシグナル伝達領域を更に含む、操作されたＣＡＲ Ｔ細胞を患者に投与することを含む。追加の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＫＴＥ－Ｃ１９を患者に投与することを含む。一態様では、抗原性部分として更に、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）抗原（例えば、ＥＢＮＡ－１、ＥＢＮＡ－２、ＥＢＮＡ－３、ＬＭＰ－１、ＬＭＰ－２）、Ａ型肝炎ウイルス抗原（例えば、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３）、Ｂ型肝炎ウイルス抗原（例えば、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ）、Ｃ型肝炎ウイルス抗原（例えば、外被糖タンパク質Ｅ１及びＥ２）、単純ヘルペスウイルス１型、２型、又は８型（ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、又はＨＳＶ８）ウイルス抗原（例えば、糖タンパク質ｇＢ、ｇＣ、ｇＣ、ｇＥ、ｇＧ、ｇＨ、ｇＩ、ｇＪ、ｇＫ、ｇＬ、ｇＭ、ＵＬ２０、ＵＬ３２、ＵＳ４３、ＵＬ４５、ＵＬ４９Ａ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）ウイルス抗原（例えば、糖タンパク質ｇＢ、ｇＣ、ｇＣ、ｇＥ、ｇＧ、ｇＨ、ｇＩ、ｇＪ、ｇＫ、ｇＬ、ｇＭ又は他のエンベロープタンパク質）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルス抗原（糖タンパク質ｇｐ１２０、ｇｐ４１、又はｐ２４）、インフルエンザウイルス抗原（例えば、赤血球凝集素（ＨＡ）又はノイラミニダーゼ（ＮＡ））、麻疹又はムンプスウイルス抗原、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ウイルス抗原（例えば、Ｌ１、Ｌ２）、パラインフルエンザウイルスウイルス抗原、風疹ウイルスウイルス抗原、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）ウイルス抗原、又は水痘帯状疱疹ウイルスウイルス抗原も挙げられるが、これらに限定されない。そのような態様では、細胞表面受容体は、標的ウイルス感染細胞上の前述のウイルス抗原のいずれかを認識する、任意のＴＣＲ又は任意のＣＡＲであり得る。他の態様では、抗原性部分は、免疫又は炎症機能不全を有する細胞に関連している。そのような抗原性部分として、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、ミエリンプロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）、ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）、がん胎児抗原（ＣＥＡ）、プロインスリン、グルタミンデカルボキシラーゼ（ＧＡＤ６５、ＧＡＤ６７）、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）、又は、病原性自己免疫プロセスに関与するか、若しくはそれに関連している、任意の他の組織特異的抗原を挙げることができるが、これらに限定されない。

本明細書に開示される方法は、１つ以上のＴ細胞の患者への移植を含むＴ細胞療法を含み得る。Ｔ細胞は、治療有効量で投与され得る。例えば、Ｔ細胞、例えば、操作されたＣＡＲ＋Ｔ細胞又は操作されたＴＣＲ＋Ｔ細胞の治療有効量は、少なくとも約１０^４細胞、少なくとも約１０^５細胞、少なくとも約１０^６細胞、少なくとも約１０^７細胞、少なくとも約１０^８細胞、少なくとも約１０^９、又は少なくとも約１０^１０であり得る。別の態様では、Ｔ細胞、例えば、操作されたＣＡＲ＋Ｔ細胞又は操作されたＴＣＲ＋Ｔ細胞の治療有効量は、約１０^４細胞、約１０^５細胞、約１０^６細胞、約１０^７細胞、又は約１０^８細胞である。一実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞、例えば、操作されたＣＡＲ＋Ｔ細胞又は操作されたＴＣＲ＋Ｔ細胞の治療有効量は、約２×１０^６細胞／ｋｇ、約３×１０^６細胞／ｋｇ、約４×１０^６細胞／ｋｇ、約５×１０^６細胞／ｋｇ、約６×１０^６細胞／ｋｇ、約７×１０^６細胞／ｋｇ、約８×１０^６細胞／ｋｇ、約９×１０^６細胞／ｋｇ、約１×１０^７細胞／ｋｇ、約２×１０^７細胞／ｋｇ、約３×１０^７細胞／ｋｇ、約４×１０^７細胞／ｋｇ、約５×１０^７細胞／ｋｇ、約６×１０^７細胞／ｋｇ、約７×１０^７細胞／ｋｇ、約８×１０^７細胞／ｋｇ、又は約９×１０^７細胞／ｋｇである。一実施形態では、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の量は、２×１０^６細胞／ｋｇであり、≧１００ｋｇの対象について最大用量は２×１０^８細胞である。別の実施形態では、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の量は、０．５×１０^６細胞／ｋｇであり、≧１００ｋｇの対象について最大用量は０．５×１０^８細胞である。

患者は、Ｔ細胞療法の投与前にプレコンディショニング又はリンパ球除去され得る。患者は、１つ以上の化学療法薬及び／又は放射線療法による治療を含むがこれらに限定されない、当該技術分野で既知の任意の方法に従ってプレコンディショニングされ得る。いくつかの態様では、プレコンディショニングは、内因性リンパ球の数を減少させる、サイトカインシンクを排除する、１つ以上の恒常性サイトカイン又は炎症誘発性因子の血清レベルを増加させる、処置後に投与されたＴ細胞のエフェクター機能を増強する、抗原提示細胞の活性化及び／若しくは利用能を増強する、又は、Ｔ細胞療法前のこれらの任意の組み合わせである、任意の処置を含み得る。プレコンディショニングは、対象における１つ以上のサイトカインの血清レベルを増加させることを含み得る。方法は、化学療法剤を投与することを更に含む。化学療法剤は、リンパ球除去（プレコンディショニング）化学療法剤であり得る。有益なプレコンディショニング治療レジメンは、相関する有益なバイオマーカーと共に、米国特許第９，８５５，２９８号に記載されており、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。これらは、例えば、Ｔ細胞療法を必要とする患者を前処置する方法であって、指定された有益な用量のシクロホスファミド（２００ｍｇ／ｍ^２／日～２０００ｍｇ／ｍ^２／日）及び指定された用量のフルダラビン（２０ｍｇ／ｍ^２／日～９００ｍｇ／ｍ^２／日）を患者に投与すること、を含む、方法を記載する。そのような用量レジメンの一つは、患者に治療有効量の操作されたＴ細胞を投与する前に、患者に約５００ｍｇ／ｍ^２／日のシクロホスファミド、及び約６０ｍｇ／ｍ^２／日のフルダラビンを３日間毎日投与することからなる患者を治療することを含む。一態様では、前処置レジメンは、３日間にわたるシクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ^２＋フルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２を含む。それらは、－４日目、－３日目、及び－２日目、又は－５日目、－４日目、及び－３日目に投与され得る（０日目は、細胞の投与日である）。一実施形態では、前処置レジメンは、シクロホスファミド２００ｍｇ／ｍ^２、２５０ｍｇ／ｍ^２、３００ｍｇ／ｍ^２、４００ｖ、５００ｍｇ／ｍ^２を、２、３、又は４日間毎日、フルダラビン２０ｍｇ／ｍ^２、２５ｍｇ／ｍ^２、又は３０ｍｇ／ｍ^２を、２、３、又は４日間を含む。一実施形態では、白血球アフェレーシスの後、前処置化学療法（フルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２／日及びシクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ^２／日）を－５、－４、及び－３日目に投与し、その後、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の懸濁液を静脈内注入する。いくつかの実施形態では、静脈内注入時間は、１５～１２０分である。一実施形態では、静脈内注入時間は、１～２４０分である。いくつかの実施形態では、静脈内注入時間は、最大３０分である。いくつかの実施形態では、静脈内注入時間は、最大５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、又は最大１００分である。いくつかの実施形態では、注入量は、５０～１００ｍＬである。いくつかの実施形態では、注入量は、２０～１００ｍＬである。いくつかの実施形態では、注入量は、約３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、又は約６５ｍＬである。いくつかの実施形態では、注入量は、約６８ｍＬである。いくつかの実施形態では、懸濁液は凍結され、解凍の６、５、４、３、２、１時間以内に使用される。いくつかの実施形態では、懸濁液は凍結されていない。いくつかの実施形態では、免疫療法は、輸液バッグから注入される。いくつかの実施形態では、輸液バッグは、注入中に撹拌される。いくつかの実施形態では、免疫療法は、解凍後３時間以内に投与される。いくつかの実施形態では、懸濁液は、アルブミンを更に含む。いくつかの実施形態では、アルブミンは、約２～３容量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、アルブミンは、約２．５容量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、アルブミンは、約１％、２％、３％、４％、又は５％（ｖ／ｖ）の量で存在する。いくつかの実施形態では、アルブミンは、ヒトアルブミンである。いくつかの実施形態では、懸濁液は、ＤＭＳＯを更に含む。いくつかの実施形態では、ＤＭＳＯは、約４～６容量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、ＤＭＳＯは、約５容量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、ＤＭＳＯは、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、又は１０％（ｖ／ｖ）の量で存在する。

本明細書中に開示される方法は、対象におけるがんを治療するために、腫瘍のサイズを減少させるために、腫瘍細胞を死滅させるために、腫瘍細胞の増殖を防止するために、腫瘍の成長を防止するために、患者から腫瘍を排除するために、腫瘍の再発を防止するために、腫瘍の転移を防止するために、患者において寛解を誘導するために、又はそれらの任意の組み合わせのために使用され得る。特定の態様では、方法は、完全奏効を誘導できる。他の態様では、方法は、部分奏効を誘導できる。

治療され得るがんには、血管新生していない腫瘍、まだ実質的に血管新生していない腫瘍、又は血管新生している腫瘍が含まれる。がんはまた、固形又は非固形腫瘍を含み得る。

一実施形態では、方法を用いて、高レベルの循環ＣＤ１９発現腫瘍細胞を有するＢ細胞悪性腫瘍を治療することができ、満たされていないニーズが高い特徴のある患者集団に対する適応となるであろう。

ＭＣＬの例示的治療

いくつかの実施形態では、悪性腫瘍は、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）であり得る。ＭＣＬは、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の中悪性度サブタイプである。ＭＣＬは、米国（ＵＳ）におけるＮＨＬの全新規症例の約６％、及び西欧における悪性リンパ腫の５％～７％を占める。ＭＣＬの推定年間発生率は、米国及び欧州において１００，０００人当たり約１～２人である。ＭＣＬは女性よりも男性への影響の可能性が高く、診断時年齢の中央値は６８歳である。いくつかの実施形態では、ｒ／ｒ ＭＣＬは、同種幹細胞移植（ａｌｌｏ－ＳＣＴ）による治療に対してｒ／ｒであり、ａｌｌｏ－ＳＣＴは、疾患が移植前に化学療法剤感受性であることが示されている場合に再発性又は難治性耐久性（ｒ／ｒ）ＭＣＬ患者の約２５％に長期寛解をもたらすことができるが、これもまた、最大４０％の治療関連死亡率に関連する。

いくつかの実施形態では、ｒ／ｒ ＭＣＬは、それ自体は２２％～３２％の範囲のＯＲＲをもたらす、ボルテゾミブ、レナリドミド、及びテムシロリムスによる治療に対してｒ／ｒである。イブルチニブ及びアカラブルチニブなどのブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤は、ｒ／ｒ ＭＣＬ患者において、それぞれ６８％及び８１％のＯＲＲをもたらす。しかしながら、ほとんどの患者は、ＢＴＫ阻害剤治療後に増悪し、サルベージ療法に対する転帰は不良であり、ＯＲＲは２０％～４２％の範囲、奏功期間（ＤＯＲ）の中央値は３～５．４ヶ月、ＯＳの中央値は２．５～９ヶ月である。いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞による介入を用いて、Ｋｉ６７腫瘍増殖指数が高く（≧３０％又は≧５０％）、変異ＴＰ５３などの予後不良因子を有するがんを治療し得ることを提供する。いくつかの実施形態では、がんは、ＭＣＬである。いくつかの実施形態では、ＭＣＬの形態は、古典型、多形性型、又は芽球様型である。いくつかの実施形態では、Ｋｉ－６７指数は、５％～８０％であり得る。いくつかの実施形態では、Ｋｉ－６７指数は、約３８％である。いくつかの実施形態では、高リスク患者は、≧５０％のＫｉ－６７、かつ／又は、次世代配列決定によるＴＰ５３変異を有している。いくつかの実施形態では、患者は１８歳以上である。いくつかの実施形態では、ＭＣＬは、サイクリンＤ１の過剰発現及び／又はｔ（１１：１４）の存在のいずれかの証拠によって病理学的に確認されている。

いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞介入は、循環リンパ腫細胞を枯渇させ、ＩＬ－２の存在下で抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体で活性化された白血球アフェレーシス試料から単核細胞の正の選択によってＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞を濃縮し、次いで抗ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物を含む複製不全ウイルスベクターで形質導入された、Ｔ細胞集団から増殖されるＴ細胞を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ構築物は、ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲである。この方法を使用して生成されたＣＡＲ Ｔ細胞は、ＫＴＥ－Ｘ１９と称され得る。いくつかの実施形態では、細胞は、自己である。いくつかの実施形態では、細胞は、異種である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の用量は、２×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の用量は、１×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の用量は、１．６×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ、１．８×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ、又は１．９×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物は、ＣＤ３ζＴ細胞活性化ドメイン及びＣＤ２８シグナル伝達ドメインを含む。

いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞は、白血球アフェレーシス後、－５日目、－４日目、及び－３日目の２５ｍｇ／ｍ^２／日フルダラビン、並びに、－２日目の９００ｍｇ／ｍ^２／日シクロホスファミドの前処置に続き、０日目に単回注入として投与される。いくつかの実施形態では、前処置は、３００ｍｇ／ｍ^２／日シクロホスファミド、及び３日間の３０ｍｇ／ｍ^２／日フルダラビンを含む。いくつかの実施形態では、前処置化学療法は、３０ｍｇ／ｍ^２／日フルダラビン、並びに、－５、－４、及び－３日目の５００ｍｇ／ｍ^２／日シクロホスファミドを含む。いくつかの実施形態では、患者はまた、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入の約３０～６０分前に、アセトアミノフェン及びジフェンヒドラミン又は別のＨ１抗ヒスタミンを投与されていてもよい。いくつかの実施形態では、患者は、１回以上の追加用量の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を受ける。

いくつかの実施形態では、ＭＣＬがんは、再発性／難治性ＭＣＬ（ｒ／ｒ ＭＣＬ）である。いくつかの実施形態では、患者は、１種類以上の先行治療を受けている。いくつかの実施形態では、患者は、１～５種類の先行治療を受けている。いくつかの実施形態では、先行治療は、自家ＳＣＴ、抗ＣＤ２０抗体、アントラサイクリン若しくはベンダムスチン含有化学療法、及び／又はブルトンチロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫｉ）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、ＢＴＫｉは、イブルチニブ（Ｉｂｒ）である。いくつかの実施形態では、ＢＴＫｉは、アカラブルチニブ（Ａｃａｌａ）である。いくつかの実施形態では、本開示は、過去にアカラブルチニブ治療を受けた患者と比較して、過去にイブルチニブ治療を受けたＭＣＬ患者が、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法に対するより顕著な応答を有したことを提供する。したがって、本開示は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法でｒ／ｒ ＭＣＬを治療する方法を提供し、このとき、患者は、過去にイブルチニブ又はアカラブルチニブ治療を受けており、そのがんは、好ましくはその治療に対して再発性／難治性である。いくつかの実施形態では、ＢＴＫｉは、チラブルチニブ（ＯＮＯ－４０５９）、ザヌブルチニブ（ＢＧＢ－３１１１）、ＣＧＩ－１７４６、又はスペブルチニブ（ＡＶＬ－２９２、ＣＣ－２９２）である。

いくつかの実施形態では、本開示は、Ｉｂｒ、Ａｃａｌａ、又は両方による先行治療を受けた患者に対して、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値（範囲）が、それぞれ、９５．９（０．４～２５８９．５）、１３．７（０．２～１８２．４）、又は１１５．９（１７．２～１７５３．６）であったことを提供する。いくつかの実施形態では、ＭＣＬ患者における抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法に対するＯＲＲ／ＣＲ率は、Ｉｂｒ先行治療を受けた患者において９４％／６５％、Ａｃａｌａ先行治療を受けた患者において８０％／４０％、両ＢＴＫｉ治療を受けた患者において１００％／１００％であった。いくつかの実施形態では、Ｉｂｒ、Ａｃａｌａ、又はその両方の先行治療を受けた患者における１２ヶ月の生存率は、それぞれ８１％、８０％、又は１００％であった。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖は、Ｉｂｒ及び／又はＡｃａｌａで先行治療された患者におけるＯＲＲ／ＣＲ率に関連する。したがって、一実施形態では、患者は、Ｉｂｒ及びＡｃａｌａの両方で治療される。一実施形態では、本開示は、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルを測定し、それらを参照標準と比較することによって、Ｉｂｒ及び／又はＡｃａｌａで先行治療されたＭＣＬ患者におけるＯＲＲ／ＣＲを予測する方法を提供する。一実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞ピークレベル／ベースライン腫瘍量（ＣＥＮ及びＩＮＶ）の測定に基づいて、奏功継続を予測する方法を提供する。一実施形態では、比が高いほど、１２ヶ月時点／までの奏功継続の可能性が高くなる。一実施形態では、０．００００１～０．００５の比は、１２ヶ月時点／までに非応答であることを予測する。一実施形態では、０．００６～０．３の比は、１２ヶ月時点／までに再発することを予測する。一実施形態では、０．４～１の比は、１２ヶ月時点／までに奏功継続していることを予測する。一実施形態では、比は、当業者によって平均集団から決定され得る。

いくつかの実施形態では、追加の組み入れ基準は、実施例２に列挙されたものを含む。いくつかの実施形態では、追加の除外基準は、実施例２に列挙されたものを含む。

いくつかの実施形態では、患者は、白血球アフェレーシス後に、デキサメタゾン（例えば、２０～４０ｍｇ又は当量ＰＯ又はＩＶ、１～４日間毎日）、メチルプレドニゾロン、イブルチニブ（例えば、５６０ｍｇＰＯ毎日）、及び／又はアカラブルチニブ（例えば、１００ｍｇＰＯ１日２回）によるブリッジング療法（白血球アフェレーシス後、かつ化学療法前）を受けていてもよく、例えば、前処置化学療法前５日以内に完了している。いくつかの実施形態では、そのような患者は、高い疾患負荷を有し得る。いくつかの実施形態では、ブリッジング療法は、免疫調節剤、Ｒ－ＣＨＯＰ、ベンダムスチン、アルキル化剤、及び／又は白金系薬剤から選択される。

いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞注入に応答した全てのＭＣＬ患者がＴ細胞増殖を達成したが、非応答患者において増殖は観察されなかったことを提供する。いくつかの実施形態では、応答は客観的奏効率（完全奏効＋部分奏効）である。本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞レベルが、最初の２８日間のＯＲＲと相関し、０～２８日目の曲線下面積（ＡＵＣ_０－２８）及びピークレベルは、ノンレスポンダーに対してレスポンダーにおいて２００倍超高かったが、これは、微小残存病変（ＭＲＤ、感度１０^－５）陰性における、ＭＲＤ陽性患者（４週目）と比較して８０倍超高いピーク／ＡＵＣ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルによっても示されるように、より多く増殖すると、良好でおそらくより意味深い応答をもたらすことを示唆している。したがって、本開示は、ピーク／ＡＵＣ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルを測定し、それらを参照標準と比較することを含む、ＭＣＬのＣＡＲ Ｔ細胞治療に対する患者応答及びＭＲＤを予測する方法を提供する。いくつかの実施形態では、ピークＣＡＲ Ｔ細胞増殖は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後８～１５日目に観察される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞レベルは、ｑＰＣＲによって測定される。いくつかの実施形態では、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベル、ＡＵＣ_０－２８、及び／又はＭＲＤは、次世代配列決定によってモニタリングされる。いくつかの例では、ＣＡＲ Ｔ細胞数は、血液１マイクロリットル中の細胞数として測定される。いくつかの例では、ＣＡＲ Ｔ細胞数は、宿主ＤＮＡ１μｇ中のＣＡＲ遺伝子のコピー数によって測定される。いくつかの例では、ＣＡＲ Ｔ細胞数は、Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ Ｊ．Ｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５；３３：５４０－５４９に記載されるように測定される。一実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞レベルは、Ｌｏｃｋｅ ＦＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５（１）：２８５－２９５に記載されるように測定される。

いくつかの実施形態では、本開示は、レスポンダーとノンレスポンダーとの間のＴ細胞増殖に違いがあることを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、レスポンダー（完全寛解及び部分寛解を有するもの）におけるピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値が、１０２．４細胞／μＬ（範囲：０．２～２５８９．５細胞／μＬ、ｎ＝５１）であり、ノンレスポンダーでは、１２．０細胞／μＬ（範囲：０．２～１３６４．０細胞／μＬ、ｎ＝８）であったことを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、客観的奏効を有する患者における０～２８日のＡＵＣ（ＡＵＣ_０－２８）の中央値は、１４８７．０細胞／μＬ・日（範囲：３．８～２．７７×１０^４細胞／μＬ・日、ｎ＝５１）であり、ノンレスポンダーにおいて１６９．５細胞／μＬ・日（範囲：１．８～１．１７ １０×１０^４細胞／μＬ・日、ｎ＝８）であったことを提供する。コルチコステロイドもトシリズマブも投与されていない患者（ｎ＝１８）におけるピーク（２４．７細胞／μＬ）抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞（ピーク：及びＡＵＣ_０－２８レベル（３６０．４細胞／μＬ・日）の中央値は、コルチコステロイドのみを投与された患者（ｎ＝２）と同様であった（ピーク：２４．２細胞／μＬ、ＡＵＣ_０－２８：３６７．８細胞／μＬ・日）。トシリズマブのみを投与された患者（ｎ＝１０）では、平均ピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞は、８６．５細胞／μＬであり、ＡＵＣ_０－２８は、１１８８．９細胞／μＬ・日であった。コルチコステロイド及びトシリズマブの両方を投与された患者（ｎ＝３７）では、平均ピークは１６７．２細胞／μＬであり、ＡＵＣ_０－２８は、１９９６．０細胞／μＬ・日であった。ピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞値の中央値は、６５歳以上の患者（ｎ＝３９）において７４．１細胞／μＬであり、６５歳未満の患者（ｎ＝２８）において１１２．５細胞／μＬであった。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のＡＵＣ_０－２８値の中央値は、６５歳以上の患者において８７６．５細胞／μＬ・日であり、６５歳未満の患者において１６４０．２細胞／μＬ・日であった。性別は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のＡＵＣ_０－２８及びＣ_ｍａｘに有意な影響を及ぼさなかった。したがって、本開示は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲＴ治療後にＴ細胞増殖を測定し、そのレベルを参照標準と比較することを含む、ＭＣＬにおける応答を予測する方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本開示は、グレード≦３のＣＲＳ及びＮＥ事象を有するものよりも、グレード≧３のＭＣＬ患者においてＣＡＲ Ｔ細胞増殖がより高かったことを提供する。したがって、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞治療後にＣＡＲ Ｔ細胞増殖を測定し、そのレベルを参照値と比較することを含む、グレード≧３のＣＲＳ及びＮＥ事象を予測する方法を提供し、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖が高いほど、グレード≧３のＣＲＳ及びＮＥ事象の可能性が高くなる。

いくつかの実施形態では、サイトカインレベルは、タンパク質又はｍＲＮＡレベル（いずれも）によって測定される。いくつかの実施形態では、サイトカインレベルは、Ｌｏｃｋｅ ＦＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５（１）：２８５－２９５に記載されるように測定される。

いくつかの実施形態では、本開示は、血清ＧＭ－ＣＳＦ及びＩＬ－６ピークレベル（ＣＡＲ Ｔ細胞投与の約８日後に到達）が、ＭＣＬ患者におけるグレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥと正に関連していたことを提供する。したがって、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後のＧＭ－ＣＳＦ及びＩＬ－６のピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含む、グレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥを予測する方法を提供し、これらのサイトカインのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＣＲＳ及びＮＥの可能性が高くなる。

いくつかの実施形態では、本開示は、ＭＣＬ患者において、血清フェリチンがグレード≧３のＣＲＳと正に関連していたことを提供する。したがって、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後の血清フェリチンのピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含む、グレード≧３のＣＲＳを予測する方法を提供し、フェリチンのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＣＲＳの可能性が高くなる。

いくつかの実施形態では、本開示は、ＭＣＬ患者において、血清ＩＬ－２及びＩＦＮγがグレード≧３のＮＥと正に関連していたことを提供する。したがって、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後の血清ＩＬ－２及びＩＦＮγのピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含む、グレード≧３のＣＲＳを予測する方法を提供し、ＩＬ－２及びＩＦＮγのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＮＥの可能性が高くなる。

いくつかの実施形態では、本開示は、ＭＣＬ患者において、Ｃ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルが、グレード≧３のＮＥと正に関連していたことを提供する。したがって、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後のＣ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び／又は血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含む、グレード≧３のＣＲＳを予測する方法を提供し、Ｃ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び／又は血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルが高いほど、グレード≧３のＮＥの可能性が高くなる。いくつかの実施形態では、１つ以上の有害事象は、表１３及び／又は表１４に従って管理される。

いくつかの実施形態では、本開示は、グレード≧３のＣＲＳに正に関連するサイトカインのピーク血清レベルが、ＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及びパーフォリンを含んでいたことを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、グレード≧３のＮＥに関連するサイトカインのピーク血清レベルが、ＩＬ－２、ＩＬ－１ Ｒａ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１２ｐ４０、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１０、ＭＣＰ－４、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢを含んでいたことを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、グレード≧３のＣＲＳ及びＮＥの両方に関連するサイトカインが、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢを含んでいたことを提供する。いくつかの実施形態では、サイトカイン血清レベルは、ＣＡＲ Ｔ細胞投与の７日以内にピークに達する。したがって、本開示は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及び／又はパーフォリンのピーク血清レベルを測定し、それらのレベルを参照標準と比較することを含む、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後のグレード≧３のＣＲＳを予測する方法を提供する。したがって、本開示はまた、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢのピーク血清レベルを測定し、それらのレベルを参照標準と比較することを含む、ＭＣＬにおけるグレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥを予測する方法も提供する。

いくつかの実施形態では、本開示は、変異型ＴＰ５３対野生型ＴＰ５３を有するＭＣＬ患者において、増殖性（ＩＬ－１５、ＩＬ－２）及び炎症性（ＩＬ－６、ＩＬ－２Ｒα、ｓＰＤ－Ｌ１、及びＶＣＡＭ－１）のピークサイトカインレベルが増加する傾向があったことを提供する。したがって、いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後に増殖性及び／又は炎症性サイトカインのレベルを操作することを含む、ＭＣＬにおけるＣＡＲ Ｔ細胞治療に対する応答を改善する方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与１ヶ月後にＭＲＤ陰性であった患者について、１ヶ月後にＭＲＤ陽性であった患者と比較して、ＩＦＮ－γ及びＩＬ－６のピークレベルの増加、並びにＩＬ－２増加の傾向があったことを提供する。したがって、本開示は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、及び／又はＩＬ－２のピーク血清レベルを測定し、それらのレベルを参照標準と比較することを含む、ＭＣＬにおいて患者がＭＲＤ陰性であるかどうかを予測する方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本開示は、Ｔ細胞製品の表現型が、ＭＣＬの種類間で変化したことを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、製造された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ製品において、古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬを有する患者のＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞比の中央値（範囲）が、それぞれ０．７（０．０４～２．８）、０．６（０．２～１．１）、又は０．７（０．５～２．０）であったことを提供する。製品Ｔ細胞の表現型（中央値［範囲］）は、分化度が低いＣＣＲ７＋Ｔ細胞（古典型４０．０％［２．６～８８．８］、芽球様型３５．３％［１４．３～７３．４］、多形性型８０．８％［５７．３～８８．８］）と、エフェクター及びエフェクターメモリーＣＣＲ７－Ｔ細胞（古典型５９．９％［１１．１～９７．４］、芽球様型６４．８％［２６．６～８５．７］、多形性型１９．２％［１１．１～４２．７］）を含んでいた。いくつかの実施形態では、本開示は、古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬを有する患者における１２ヶ月生存率が、それぞれ８６．７％、６７．９％、又は１００％であったことを提供する。したがって、本開示は、患者に投与されたＴ細胞製品の表現型を操作することによって、古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬの治療を改善する方法を提供する。

Ｂ細胞ＡＬＬの例示的な治療

Ｂ－ＡＬＬ細胞は、典型的にはＣＤ１９を発現し、ＣＤ１９を標的とするＣＡＲ Ｔ細胞療法は、Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬにおける治療アプローチである。Ｐｅｈｌｉｖａｎ Ｋ．Ｃ．．ｅｔ ａｌ．Ｃｕｒｒ Ｈｅｍａｔｏｌ Ｍａｌｉｇ Ｒｅｐ．２０１８；１３（５）：３９６－４０６。Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅで開発されたＣＤ３ζ及びＣＤ２８共刺激ドメインを含有する抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法（Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ＪＮ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２００９；３２（７）：６８９－７０２、Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ＪＮ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１０；１１６（１９）：３８７５－３８８６）は、Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する小児及び３０歳以下の成人における第１相試験において、中央値１０ヶ月の経過観察後に７０％の全寛解率を示した。Ｌｅｅ ＤＷ ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ．２０１５；３８５（９９６７）：５１７－５２８。Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する成人における第１相試験で評価された同様のＣＡＲ構築物は、中央値２９ヶ月の経過観察において、８３％の完全寛解（ＣＲ）率及び中央値１２．９ヶ月のＯＳをもたらした。Ｐａｒｋ ＪＨ ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１８；３７８（５）：４４９－４５９。これらの試験では、ＣＡＲ Ｔ細胞は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞を濃縮しなかった白血球アフェレーシス試料から調製した。

いくつかの実施形態では、本開示は、循環リンパ腫細胞を枯渇させ、ＩＬ－２の存在下で抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体で活性化された白血球アフェレーシス試料から単核細胞の正の選択によってＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞を濃縮し、次いで抗ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物を含む複製不全ウイルスベクターで形質導入されたＴ細胞集団から、Ｔ細胞が増殖される、Ｔ細胞製品を目的とする。いくつかの実施形態では、そのようなＴ細胞製品は、ＡＬＬ、ＣＬＬ、ＡＭＬを治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ構築物は、ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲである。いくつかの実施形態では、細胞は、自己である。いくつかの実施形態では、細胞は、異種である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の用量は、２×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の用量は、１×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の用量は、１．６×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ、１．８×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ、又は１．９×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物は、ＣＤ３ζＴ細胞活性化ドメイン及びＣＤ２８シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞製品は、ＫＴＥ－Ｘ１９である。いくつかの実施形態では、本開示は、前段落に記載されるように調製された抗ＣＡＲ Ｔ細胞製品が、Ｂ細胞ＡＬＬ及びＢ細胞ＮＨＬで使用され得ることを提供する。一実施形態では、Ｔ細胞製品は、表２３の製品の特性を有する。いくつかの実施形態では、製品特性は、特定のサブセット（ナイーブ、セントラルメモリー、エフェクター、及びエフェクターメモリー）のＴ細胞のパーセンテージ、ＣＤ４＋細胞のパーセンテージ、ＣＤ８＋細胞のパーセンテージ及びＣＤ４／ＣＤ８比から選択され得る。いくつかの実施形態では、製品特性は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ製品細胞と１：１の比で混合された標的ＣＤ１９発現がん細胞（例えば、Ｔｏｌｅｄｏ）細胞を用いた共培養における、ＩＦＮγ産生（ｐｇ／ｍＬ）のレベルである。一実施形態では、ＩＦＮγは、適格なＥＬＩＳＡを使用して、インキュベーション２４時間後の細胞培養培地中で測定され得る。いくつかの実施形態では、これらの製品特性のうちの１つ以上は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋陽性細胞濃縮を行わない白血球アフェレーシスから調製された抗ＣＡＲ Ｔ細胞のものよりも優れている。いくつかの実施形態では、優れた製品特性は、ナイーブ表現型（ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋）を有する細胞のパーセンテージの増加、分化表現型（ＣＣＲ７－）を有する細胞のパーセンテージの減少、ＩＦＮγ産生細胞のレベルの減少、ＣＤ８＋細胞のレベルの増加から選択され得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９Ｔ細胞製品は、Ｔ_ＣＭ、セントラルメモリーＴ細胞（ＣＤ４５ＲＡ－ＣＣＲ７＋）、Ｔ_ＥＦＦ、エフェクターＴ細胞（ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７－）、Ｔ_ＥＭ、エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ４５ＲＡ－ＣＣＲ７－）、及び／又はＴ_Ｎ、ナイーブ様Ｔ細胞（ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋）を含む。いくつかの実施形態では、製品は、ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋であり、幹様メモリー細胞を含むＴ細胞を意味する、Ｔ_Ｎナイーブ様Ｔ細胞を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞製品は、ＫＴＥ－Ｘ１９である。いくつかの実施形態では、ＫＴＥ－Ｘ１９は、１９０ｐｇ／ｍＬ以上のＩＦＮγ産生を有する。特定の実施形態では、ＫＴＥ－Ｘ１９は、≧９０％のＣＤ３＋細胞を有する。いくつかの他の実施形態では、ＫＴＥ－Ｘ１９中のＮＫ細胞のパーセンテージは、０．１％（０．０％～２．８％の範囲）である。いくつかの追加の実施形態では、ＫＴＥ－Ｘ１９中のＣＤ３^－細胞不純物のパーセンテージは、０．５％（０．３％～３．９％の範囲）である。

いくつかの実施形態では、がんは、再発性／難治性Ｂ細胞ＡＬＬである。いくつかの実施形態では、患者は２１歳以下である。いくつかの実施形態では、患者は２１歳以下、≧１０ｋｇの体重であり、登録の少なくとも１００日前において、一次治療抵抗性、初回診断の１８ヶ月以内に再発、２種類以上の全身療法後のＲ／Ｒ、又は同種幹細胞移植後のＲ／Ｒである、Ｂ細胞ＡＬＬを有する。一実施形態では、がんは、低悪性度リンパ腫、又は白血病である。一実施形態では、がんは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、マントル細胞リンパ腫及びその芽球様型バリアント、並びにＢリンパ芽球性リンパ腫の多くのタイプ、サブタイプ、及びバリアントを含む、中悪性度Ｂ細胞リンパ腫である。ＤＬＢＣＬは、ＤＬＢＣＬ ＮＯＳ、Ｔ細胞／組織球に富む大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＣＮＳの原発性ＤＬＢＣＬ、原発性皮膚ＤＬＢＣＬ下肢型、高齢者のＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬであり得る。大細胞型Ｂ細胞の他のリンパ腫として、原発性縦隔（胸腺）ＬＢＣＬ、慢性炎症に関連するＤＬＢＣＬ、リンパ腫様肉芽腫症、ＡＬＫ陽性ＬＢＣＬ、形質芽球性リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病で生じる大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、及び原発性体腔液リンパ腫が挙げられる。他のタイプのリンパ腫として、ＤＬＢＣＬとバーキットリンパ腫の中間的特徴を伴うＢ細胞リンパ腫分類不能型、及びＤＬＢＣＬと古典的ホジキンリンパ腫の中間的特徴を伴うＢ細胞リンパ腫分類不能型、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、ＭＡＬＴ型節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯リンパ腫Ｂ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫（ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症）、及び原発性体腔液リンパ腫が挙げられる。がんは、ステージ１～ステージ４の任意のステージであり得る。

ＡＬＬは、一般的な小児悪性腫瘍であり、小児白血病の約８０％及び全ての小児がんの約２５％を構成する。小児患者の約２０％は、初期治療後の長期寛解を達成せず、５年ＯＳ率は約５５％である。Ｈｕｎｇｅｒ ＳＰ，ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１５；３７３：１５４１－１５５２、Ｓｕｎ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１８；３２：２３１６－２３２５、Ｒｈｅｉｎｇｏｌｄ ＳＲ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１９；３７（ｓｕｐｐｌ，ａｂｓｔｒ）：１０００８、及びＯｓｋａｒｓｓｏｎ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ．２０１６；１０１：６８－７６。初期治療後に早期に再発するか、又は原発性の難治性疾患を有する患者、幹細胞移植後のＲ／Ｒ疾患を有する患者、及び多重再発性患者は転帰が不良である。Ｓｕｎ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１８；３２：２３１６－２３２５、Ｒｈｅｉｎｇｏｌｄ ＳＲ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１９；３７（ｓｕｐｐｌ，ａｂｓｔｒ）：１０００８、Ｏｓｋａｒｓｓｏｎ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ．２０１６；１０１：６８－７６、Ｎｇｕｙｅｎ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２００８；２２：２１４２－２１５０、Ｃｒｏｔｔａ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｒｅｓ Ｏｐｉｎ．２０１８；３４：４３５－４４０、Ｓｃｈｒａｐｐｅ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１２；３６６：１３７１－１３８１。初期診断から１８ヶ月以内に再発する患者は、一般に、２１％～２８％の５年ＯＳ率を有する。Ｒｈｅｉｎｇｏｌｄ ＳＲ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１９；３７（ｓｕｐｐｌ，ａｂｓｔｒ）：１０００８、Ｎｇｕｙｅｎ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２００８；２２：２１４２－２１５０。寛解を達成する可能性及びＥＦＳの持続期間は、各々その後のサルベージ療法の種類と共に減少する。Ｓｕｎ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１８；３２：２３１６－２３２５。新規療法であるブリナツモマブ及びイノツズマブオゾガマイシンによる治療後に、Ｒ／Ｒ ＡＬＬを有する小児及び青年期患者における転帰は依然として不良で、１年ＯＳ率が約３６％であり、より効果的な治療選択肢の必要性を強調している。ｖｏｎ Ｓｔａｃｋｅｌｂｅｒｇ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１６；３４：４３８１－４３８９．１０、Ｂｈｏｊｗａｎｉ Ｄ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１９；３３：８８４－８９２。

いくつかの実施形態では、がんはＢ細胞ＮＨＬであり、主要登録基準は、１８歳未満、体重１０ｋｇ以上、組織学的に確認された１つ以上の測定可能な病変を有する、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型（ＤＬＢＣＬ ＮＯＳ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、バーキット様リンパ腫、又はＤＬＢＣＬとＢＬの中間型Ｂ細胞リンパ腫未分類型を含む。一実施形態では、ＮＨＬ治療のために、疾患は、登録の１００日以上前に、一次治療抵抗性、２種類以上の全身療法後のＲ／Ｒ、又は、自己若しくは同種幹細胞移植後のＲ／Ｒを有し得る。登録の４週間以内に治療を必要とする急性移植片対宿主病又は慢性移植片対宿主病を有する患者は、適格とすることはできない。

いくつかの実施形態では、これらのＢ細胞ＡＬＬ及び／又はＢ細胞ＮＨＬ患者は、－４日目、－３日目、及び－２日目のフルダラビン２５ｍｇ／ｍ^２／日、及び－２日目のシクロホスファミド９００ｍｇ／ｍ^２／日の前処置化学療法の後、０日目に、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋濃縮抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞（直前に記載したように調製）を、１×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの標的用量で単回注入される。

いくつかの実施形態では、本開示は、Ｂ細胞ＡＬＬの治療を成功させるためのＣＤ４＋／ＣＤ８＋濃縮／がん細胞枯渇抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の使用を提供し、このとき患者は、１８歳以上で、第１選択療法に対する抵抗性（すなわち、一次治療抵抗性）、初回寛解１２ヶ月以内の再発、２種類以上の先行全身療法後の再発若しくは抵抗性、又は同種幹細胞移植（ＳＣＴ）後の再発として定義された、Ｒ／Ｒ Ｂ細胞ＡＬＬを有する。いくつかの実施形態では、患者は、骨髄芽球５％以上、Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐのパフォーマンスステータスが０又は１、及び、十分な腎、肝、及び心機能を有することが求められた。先行ブリナツモマブで治療された患者の場合、ＣＤ１９発現が≧９０％である白血病性芽球が求められた。フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）疾患、骨髄外合併症、神経学的変化を伴わない中枢神経系（ＣＮＳ）－２疾患（脳脊髄液［ＣＳＦ］中に芽球、＜５個の白血球／ｍｍ^３）、及びダウン症候群を有する患者は適格であった。神経学的変化と無関係のＣＮＳ－３疾患（ＣＳＦ中に芽球、≧５個の白血球／ｍｍ^３）及びＣＮＳ障害の既往は除外した。いくつかの実施形態では、追加の組み入れ及び除外基準は実施例９に記載されている。

いくつかの実施形態では、患者は、一次治療抵抗性であるがんを有し得る。いくつかの実施形態では、患者は、ＳＣＴ後に再発したがんを有し得る。いくつかの実施形態では、患者は、ブリナツモマブの先行治療を受けていてもよく、これは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法前に使用された直近の療法であり得る。いくつかの実施形態では、患者ベースライン特性は、表１８に記載される患者のうちいずれか１つのものである。

いくつかの実施形態では、これらのＢ細胞ＡＬＬ患者に、２×１０^６、１×１０^６、又は０．５×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇが投与される。いくつかの実施形態では、０．５×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇは、４０ｍＬの総体積を有する製剤中で投与される。別の実施形態では、０．５×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇは、６８ｍＬの総体積を有する製剤中で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞製品は、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、２００、３００、４００、５００、５００、７００、８００、９００、又は１０００ｍＬの総体積で製剤化される。いくつかの実施形態では、４０ｍＬの製剤は、凍結／解凍プロセス中に細胞密度及び細胞生存率を維持することを意図している。
いくつかの実施形態では、治療は、有害事象に関連している。いくつかの実施形態では、１つ以上の有害事象は、表１３、１４、１６、又はそれらの組み合わせのうちいずれか１つに従って管理される。いくつかの実施形態では、１つ以上の有害事象は、表１６の元の管理ガイドラインに従って管理される。いくつかの実施形態では、１つ以上の有害事象は、表１６の改訂管理ガイドラインに従って管理される。いくつかの実施形態では、昇圧剤は、ＣＲＳを治療するために投与され得る。いくつかの実施形態では、ＣＲＳに関連する徴候又は症状には、発熱、悪寒、疲労、頻脈、悪心、低酸素症、及び低血圧が挙げられる。いくつかの実施形態では、神経学的事象に関連する徴候又は症状には、脳症、けいれん、意識レベルの変化、発話障害、振戦、及び錯乱が挙げられる。

いくつかの実施形態では、患者は、ベースラインにおいて高い疾患負荷を有し得、これは、施設での評価によって、（骨髄中＞２５％の白血病性芽球、又は末梢循環中≧１，０００芽球／ｍｍ^３を有すると定義される。いくつかの実施形態では、患者は、白血球アフェレーシス後かつ前処置化学療法の前にブリッジング化学療法を受けることができる。いくつかの実施形態では、ブリッジング化学療法は、表１７の所定のブリッジング化学療法レジメンのうちの１つに従う。

いくつかの実施形態では、前処置化学療法／リンパ球除去レジメンは、ブリッジング化学療法から、≧７日又は５×半減期（より短い場合）のウォッシュアウト後に投与される。いくつかの実施形態では、前処置化学療法／リンパ球除去レジメンは、－４日目、－３日目、及び－２日目のフルダラビン静脈内（ＩＶ）２５ｍｇ／ｍ^２／日、及び－２日目のシクロホスファミドＩＶ９００ｍｇ／ｍ^２／日からなる。０日目に、単回注入の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与することができる。いくつかの実施形態では、追加注入の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を、その後投与することができる。いくつかの実施形態では、初回注入に対して完全奏功を達成した患者は、３ヶ月超の寛解後に増悪した場合、ＣＤ１９発現が保持され、ＣＡＲに対する中和抗体の疑いがないという条件で、２回目の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入を受けることができる。

いくつかの実施形態では、ドロップレットデジタルポリメラーゼ連鎖反応を使用して、血液中の形質導入された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の存在、増殖、及び持続性を測定することができる。いくつかの実施形態では、手順は、Ｌｏｃｋｅ Ｆ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５（１）：２８５－２９５に記載されている。いくつかの実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞レベルが表２２に記載されるものである、治療の方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、再発時にＣＡＲ Ｔ細胞が検出不能であり得ることを提供する。ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値は、１×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで最も高い場合があり、元のＡＥ管理と改訂ＡＥ管理を受けた患者間で同様であり得る。いくつかの実施形態では、ＣＲ／ＣＲｉを達成する患者は、ノンレスポンダーよりも高いピーク増殖の中央値を有しており、検出不能対検出可能ＭＲＤを有する患者も同様であった。グレード≧３のＮＥ対グレード≦２ＮＥの患者における、より高いピーク増殖値も観察された。再発する一部の患者は、再発時に検出可能なＣＤ１９陽性細胞を有するか、又は検出可能なＣＤ１９陽性細胞を有さない場合がある。いくつかの実施形態では、１０，０００生細胞当たり＜１の白血病細胞として定義される検出不能ＭＲＤは、Ｂｏｒｏｗｉｔｚ ＭＪ，Ｗｏｏｄ ＢＬ，Ｄｅｖｉｄａｓ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１５；１２６（８）：９６４－９７１、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ Ａｄｖ．２０１７；１（２５）：２４５６－２４６６、又はＧｕｐｔａ Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１８；３２（６）：１３７０－１３７９に記載される方法に従って、フローサイトメトリー（ＮｅｏＧｅｎｏｍｉｃｓ（Ｆｏｒｔ Ｍｙｅｒｓ，ＦＬ））を使用して評価できる。

いくつかの実施形態では、本開示は、いくつかのサイトカイン、ケモカイン、及び炎症誘発性マーカーのピークレベルが７日目までに発生したことを提供する。いくつかの実施形態では、これらのうちいくつかは、２×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与された患者において、１×１０^６と比較して高くなる（ＩＬ－１５、ＣＲＰ、ＳＡＡ、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮγ）、又は、改訂ＡＥ管理を行ったものにおいて、元のＡＥ管理のものに対して低くなる（ＩＬ－６、フェリチン、ＩＬ－１ＲＡ、ＩＦＮγ、ＩＬ－８、ＣＸＣＬ１０、ＭＣＰ－１）傾向があった。いくつかの実施形態では、これらのタンパク質／バイオマーカーのレベルは、図９、図１０、図１１）に記載されるように変化する。したがって、いくつかの実施形態では、本開示は、グレード≧３及び／又はグレード０～２のＣＲＳのためのバイオマーカーとして、これらのタンパク質レベルを使用するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、図１１の値に従って、グレード≧３及び／又はグレード０～２のＣＲＳのためのバイオマーカーとして、これらのタンパク質レベルを使用するための方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本開示は、グレード≧３のＣＲＳを有する患者において、ピークＩＬ－１５血清レベルが低いことを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、いくつかの炎症誘発性マーカーのピークレベルの中央値が、図１１に記載されるように、グレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥを有する患者においてより高い傾向があったことを提供する（ＩＦＮγ、ＩＬ－８、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１ＲＡ、ＣＸＣＬ１０、ＭＣＰ－１、グランザイムＢ。したがって、いくつかの実施形態では、本開示は、血清ＩＬ－１５のピークレベルを測定し、参照標準と比較することによって、患者がグレード≧３のＣＲＳを有することになるかどうかを予測するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、ＩＦＮγ、ＩＬ－８、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１ＲＡ、ＣＸＣＬ１０、ＭＣＰ－１、及び／又はグランザイムＢのピークレベルを測定し、参照標準と比較することによって、患者がグレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを有することになるかどうかを予測するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、これらのバイオマーカーのうちの１つ以上のレベルを低下させる薬剤を投与することによって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を改善するための方法を提供する。

参照レベル／標準は、当業者によって既知の任意の方法によって確立され得る。それらは、閾値又は値の群（例えば、四分位数）を識別するように機能し、そこから、どの群が、又は上回る若しくは下回る閾値が、各対象が含まれる測定値（サイトカインレベル、ＣＡＲ Ｔ細胞数など）であるかを決定するように比較することができる。これらの群は、当技術分野で典型的であるように選択された異なる集団の比較から確立される。測定値が含まれる場所に応じて、客観的奏功、ＣＲＳグレード、ＮＥグレードなどといったいくつかの治療特性を予測することができる。

特定の実施形態において、がんは、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、腺様嚢胞がん、副腎皮質がん、ＡＩＤＳ関連のがん、肛門がん、虫垂がん、星状細胞腫、非定型奇形腫様／横紋筋肉腫様腫瘍、中枢神経系、Ｂ細胞白血病、リンパ腫又はその他Ｂ細胞悪性腫瘍、基底細胞がん、胆管がん、膀胱がん、骨がん、骨肉腫及び悪性線維性組織球腫、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、乳がん、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、中枢神経系がん、子宮頸がん、脊索腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄増殖性疾患、結腸がん、結腸直腸がん、頭蓋咽頭腫、皮膚ｔ細胞リンパ腫、胚芽腫、中枢神経系、子宮内膜がん、上衣芽腫、上衣腫、食道がん、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫ファミリーの腫瘍、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管がん、眼がん、骨の線維性組織球腫悪性型、及び骨肉腫、胆嚢がん、胃（胃部）がん、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、軟組織肉腫、生殖細胞腫瘍、妊娠性絨毛腫瘍、神経膠腫、有毛細胞白血病、頭頸部がん、心臓がん、肝細胞（肝）がん、組織球増殖症、ホジキンリンパ腫、下咽頭がん、眼球内黒色腫、島細胞腫瘍（膵島）、カポジ肉腫、腎がん、ランゲルハンス細胞組織球増殖症、喉頭がん、白血病、口唇及び口腔がん、肝がん（原発性）、非浸潤性小葉がん（ＬＣＩＳ）、肺がん、リンパ腫、マクログロブリン血症、男性乳がん、骨の悪性線維性組織球腫及び骨肉腫、髄芽腫、髄上皮腫、黒色腫、メルケル細胞がん、中皮腫、ＮＵＴ遺伝子に関連する潜在性原発正中線上がんを伴う転移性扁平上皮がん、口こうがん、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、骨髄性白血病、慢性（ＣＭＬ）、骨髄性白血病、急性（ＡＭＬ）、骨髄腫、多発性、骨髄増殖性疾患、鼻腔及び副鼻腔がん、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺がん、口がん、口腔がん、中咽頭がん、骨肉腫及び骨の悪性線維性組織球腫、卵巣がん、膵臓がん、乳頭腫、傍神経節腫、副鼻腔及び鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、咽頭がん、褐色細胞腫、中間型松果体実質腫瘍、松果体芽腫及びテント上原始神経外胚葉性腫瘍、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍／多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、妊娠及び乳がん、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、前立腺がん、直腸がん、腎細胞（腎）がん、腎盂及び尿管、移行上皮がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺がん、肉腫、セザリー症候群、小細胞肺がん、小腸がん、軟組織肉腫、扁平上皮がん、頸部扁平上皮がん、胃部（胃）がん、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、ｔ細胞リンパ腫、皮膚、精巣がん、咽頭がん、胸腺腫及び胸腺がん、甲状腺がん、腎盂及び尿管の移行上皮がん、絨毛性腫瘍、尿管及び腎盂がん、尿道がん、子宮がん、子宮肉腫、膣がん、外陰部がん、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、ウィルムス腫瘍由来の腫瘍から選択され得る。特定の実施形態では、がんは、ＫＴＥ－Ｘ１９で治療される。

一実施形態では、方法は、腫瘍を治療するために使用され得、腫瘍は、リンパ腫又は白血病である。リンパ腫及び白血病は、リンパ球に特異的に影響を及ぼす血液のがんである。血中の全ての白血球は、骨髄中の単一の種類の多能性造血幹細胞に由来する。この幹細胞は、骨髄系前駆細胞及びリンパ系前駆細胞の両方を産生し、次いで、体内に見られる様々なタイプの白血球を生じる。骨髄系前駆細胞から生じる白血球には、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）、Ｂリンパ球（Ｂ細胞）、ナチュラルキラー細胞、及び形質細胞が含まれる。リンパ系前駆細胞から生じる白血球には、巨核球、マスト細胞、好塩基球、好中球、好酸球、単球、及びマクロファージが含まれる。リンパ腫及び白血病は、患者のこれらの細胞種のうちの１つ以上に影響を及ぼし得る。特定の実施形態では、腫瘍は、ＫＴＥ－Ｘ１９で治療される。

一般に、リンパ腫は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫の少なくとも２つのサブグループに分けることができる。非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、Ｂリンパ球、Ｔリンパ球、又はナチュラルキラー細胞に由来する不均質ながんの群である。米国では、Ｂ細胞リンパ腫は、報告された症例の８０～８５％を占める。２０１３年には、約６９，７４０人のＮＨＬ新規症例と、１９，０００人を超える疾患関連死が発生したと推定された。非ホジキンリンパ腫は、最も一般的な血液悪性腫瘍であり、男性及び女性における新規がんの第７位の部位であり、新規がん症例の４％及びがん関連死の３％を占める。特定の実施形態では、リンパ腫は、ＫＴＥ－Ｘ１９で治療される。

びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）は、ＮＨＬの最も一般的なサブタイプであり、ＮＨＬ症例の約３０％を占める。米国では、毎年約２２，０００人がＤＬＢＣＬと新たに診断される。これは、患者の大部分が従来の化学療法で治癒する、中悪性度リンパ腫として分類される（ＮＣＣＮガイドライン、ＮＨＬ ２０１４）。ＤＬＢＣＬの第１選択療法は、典型的には、Ｒ－ＣＨＯＰ（リツキシマブ、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニゾン）などのリツキシマブを含むアントラサイクリン含有レジメンを含み、これは、約８０％の客観的奏効率及び約５０％の完全奏効率を有し、患者の約３分の１は、初期治療に対して抵抗性であるか、Ｒ－ＣＨＯＰ後に再発する。第１選択療法に応答した後に再発した患者に対して、約４０～６０％の患者は、追加の化学療法によって２回目の応答を達成し得る。自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）適格患者に対する第２選択療法としての標準的治療は、リツキシマブ、並びに併用化学療法、例えば、Ｒ－ＩＣＥ（リツキシマブ、イホスファミド、カルボプラチン、及びエトポシド）、及びＲ－ＤＨＡＰ（リツキシマブ、デキサメタゾン、シタラビン、及びシスプラチン）を含み、それぞれ約６３％の客観的奏効率及び約２６％の完全奏効率を有する。第２選択療法に応答し、かつ移植に十分適合すると見なされる患者は、高用量の化学療法及びＡＳＣＴによる地固め療法を受けるが、これは、移植患者の約半数において治癒的である。ＡＳＣＴに失敗した患者は、予後が非常に悪く、治癒可能な治療選択肢がない。原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）は、ＤＬＢＣＬと比較して、異なる臨床的、病理学的、及び分子的特性を有する。ＰＭＢＣＬは、胸腺（髄様）Ｂ細胞から生じると考えられ、ＤＬＢＣＬと診断された患者の約３％を占める。ＰＭＢＣＬは、典型的には、３０代の若年成人集団に見られ、女性でわずかに多い。遺伝子発現プロファイリングにより、ホジキンリンパ腫と重複するＰＭＢＣＬの脱調節経路が示唆されている。ＰＭＢＣＬの初期療法としては、一般に、領域照射療法併用又は非併用の、リツキシマブを含むアントラサイクリン含有レジメン、例えば、注入量を調整したエトポシド、ドキソルビシン、及びシクロホスファミドと、ビンクリスチン、プレドニゾン、及びリツキシマブ（ＤＡ－ＥＰＯＣＨ－Ｒ）が挙げられる。濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、Ｂ細胞リンパ腫は、ＮＨＬの最も一般的な低悪性度（増殖遅延）型であり、全てのＮＨＬの約２０％～３０％を占める。ＦＬを有する一部の患者は、ＤＬＢＣＬに組織学的に形質転換（ＴＦＬ）し、より悪性度が高く、転帰不良に関連する。ＤＬＢＣＬへの組織学的形質転換は、１５年間で年間約３％の割合で発生し、その後形質転換のリスクは下がり続ける。組織学的形質転換の生物学的メカニズムは不明である。ＴＦＬの初期治療は、濾胞性リンパ腫に対する先行治療の影響を受けるが、一般に、この疾患の中悪性度部分を排除するための、リツキシマブを有するアントラサイクリン含有レジメンが挙げられる。再発性／難治性ＰＭＢＣＬ及びＴＦＬに対する治療選択肢は、ＤＬＢＣＬのものと同様である。これらの疾患の有病率が低いことを考えると、これらの患者集団における大規模な前向き無作為化試験は行われていない。化学療法抵抗性疾患を有する患者は、難治性ＤＬＢＣＬを有するものに類似するか、より不良な予後を有する。例として、難治性中悪性度のＮＨＬ（例えば、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、及びＴＦＬ）を有する対象は、満たされていない高い医療ニーズを有し、新しい治療による更なる研究がこれらの集団において必要である。特定の実施形態では、ＤＬＢＣＬは、ＫＴＥ－Ｘ１９で治療される。

本開示のＣＡＲ Ｔ細胞治療は、第１選択療法又は第２選択以降の療法として投与され得る。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞治療は、第３選択治療、第４選択療法、第５選択療法などとして投与される。選択先行治療は、限定するものではないが、ブルトン型チロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫｉ）、チェックポイント阻害剤（例えば、抗ＰＤ１抗体、ペンブロリズマブ（キイトルーダ）、セミプリマブ（リブタヨ）、ニボルマブ（オプジーボ）；抗ＰＤ－Ｌ１抗体、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ）、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ）、デュルバルマブ（Ｉｍｆｉｎｚｉ）；抗ＣＴＬＡ－４抗体、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ））、抗ＣＤ１９抗体（例えば、ブリナツモマブ）、抗ＣＤ５２抗体（例えば、アレンツズマブ）；同種異系幹細胞移植、抗ＣＤ２０抗体（例えば、リツキシマブ）、全身化学療法、リツキシマブ、アントラサイクリン、オファツムマブ、及びそれらの組み合わせなどの任意の先行抗がん療法であり得る。先行治療はまた、本出願のＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ療法と組み合わせて行われ得る。一態様では、適格患者は、直近の治療に対して抵抗性の疾患を有しているか、自己造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ／ＡＳＣＴ）後１年以内に再発している場合がある。ＣＡＲ Ｔ細胞治療は、１種類以上の先行治療に対して抵抗性であるか、及び／又はその後再発したがんを有するか、又は有することが疑われる患者に投与され得る。がんは、第１選択療法に対して抵抗性（すなわち、一次治療抵抗性）であるか、１つ以上の治療選択肢に対して抵抗性であり得る。がんは、初回寛解の１２ヶ月後に再発、２種類以上の先行治療後に再発若しくは抵抗性、又は、ＨＳＣＴ／ＡＳＣＴ後に再発していてよい。いくつかの実施形態では、がんは、イブルチニブ又はアカラブルチニブに対して抵抗性である。いくつかの実施形態では、がんは、ＮＨＬであり、疾患は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法への登録の１００日以上前、かつ、免疫抑制薬治療を４週間以上やめている時点で、一次治療抵抗性、２種類以上の全身療法後のＲ／Ｒ、又は、自己若しくは同種幹細胞移植後のＲ／Ｒでなければならない。特定の実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞療法は、ＫＴＥ－Ｘ１９である。

したがって、この方法は、リンパ腫又は白血病を治療するために使用され得、リンパ腫又は白血病は、Ｂ細胞悪性腫瘍である。Ｂ細胞悪性腫瘍の例としては、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ／ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ＦＬ、辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）、節外性（ＭＡＬＴリンパ腫）、節性（単球様Ｂ細胞リンパ腫）、脾性、びまん性大細胞型リンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病／リンパ腫、バーキットリンパ腫、及びリンパ芽球性リンパ腫が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの態様では、リンパ腫又は白血病は、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病／小細胞型リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫（例えば、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症）、脾辺縁帯リンパ腫、有毛細胞白血病、形質細胞腫瘍（例えば、形質細胞骨髄腫（すなわち、多発性骨髄腫）、又は形質細胞腫）、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（例えば、ＭＡＬＴリンパ腫）、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫（ＴＦＬ）、原発性皮膚濾胞中心リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、エプスタインバーウイルス陽性ＤＬＢＣＬ、リンパ腫様肉芽腫症、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ＋大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質芽細胞性リンパ腫、原発性体腔液リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病で生じる大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫／白血病、Ｔ細胞前リンパ球性白血病、Ｔ細胞大顆粒リンパ球性白血病、急速進行性ＮＫ細胞白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、腸症関連Ｔ細胞リンパ腫、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫、菌状息肉症／セザリー症候群、原発性皮膚未分化大細胞型リンパ腫、リンパ腫様丘疹症、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、Ｂ－リンパ芽球性白血病／リンパ腫、反復性遺伝子異常を伴うＢ－リンパ芽球性白血病／リンパ腫、Ｔ－リンパ芽球性白血病／リンパ腫、及びホジキンリンパ腫．から選択される。いくつかの態様では、がんは、１種類以上の先行治療に対して抵抗性であり、及び／又は、がんは、１種類以上の先行治療後に再発している。特定の実施形態では、白血病又はリンパ腫は、ＫＴＥ－Ｘ１９で治療される。

一実施形態では、がんは、濾胞性リンパ腫、形質転換濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、及び原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫から選択される。他の実施形態では、がんは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫である。いくつかの実施形態では、がんは、化学療法、放射線療法、免疫療法（Ｔ細胞療法、及び／又は、抗体若しくは抗体薬物コンジュゲートによる治療を含む）、自家幹細胞移植、若しくはこれらの任意の組み合わせのうちの１つ以上に対して抵抗性であるか、又は、がんは、その後に再発している。一実施形態では、がんは、難治性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫である。特定の実施形態では、がんは、ＫＴＥ－Ｘ１９で治療される。

いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞治療は、ＫＴＥ－Ｘ１９であり、がんは、ＭＣＬ、ＡＬＬ、ＣＬＬ、及びＳＬＬから選択される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞治療は、ＫＴＥ－Ｘ１９であり、がんは、ＮＨＬである。いくつかの実施形態では、がんは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型（ＤＬＢＣＬ ＮＯＳ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、バーキット様リンパ腫、又はＤＬＢＣＬとＢＬの中間型Ｂ細胞リンパ腫未分類型から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、再発性／難治性である。いくつかの実施形態では、ＫＴＥ－Ｘ１９治療は、第１選択療法、第２選択療法として、又は１種類以上の先行治療後に投与される。いくつかの実施形態では、患者は、小児患者、青年期患者、成人患者、６５歳未満、６５歳超、又は任意の他の年齢群である。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される免疫細胞を含む組成物は、任意の数の追加の治療薬と組み合わせて投与され得る。一実施形態では、追加の治療薬は、Ｔ細胞療法と同時に投与される。一実施形態では、追加の治療薬は、Ｔ細胞療法の前、中、及び／又は後に投与される。一実施形態では、１つ以上の追加の治療薬は、予防的に投与される。一態様では、免疫細胞を含む組成物は、有害事象を管理するための薬剤（その多くは、実施例の項を含む本出願の他の箇所に記載されている）と共に投与される。これらの薬剤は、発熱、低血圧、頻脈、低酸素症、及び悪寒などの１つ以上の有害反応の徴候及び症状、例えば、心不整脈（心房細動及び心室頻脈を含む）、心停止、心不全、腎機能不全、毛細血管漏出症候群、低血圧、低酸素症、臓器毒性、血球貪食性リンパ組織球増加症／マクロファージ活性化症候群（ＨＬＨ／ＭＡＳ）、けいれん、脳症、頭痛、振戦、めまい、失語症、せん妄、不眠症、不安、アナフィラキシー、発熱性好中球減少症、血小板減少症、好中球減少症、及び貧血を管理できる。

このような薬剤の例として、トシリズマブ、ステロイド（例えば、メチルプレドニゾロン）、ウサギ抗胸腺細胞グロブリンが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの態様では、バンコマイシン及びアズトレオナム（各１ｇｍＩＶ、１日２回）が、非好中球性発熱に対して投与され得る。いくつかの態様は、方法は、けいれん予防のために非鎮静型抗けいれん薬を投与すること、エリスロポエチン、ダルベポエチンα、血小板輸血、フィルグラスチム、又はペグフィルグラスチムのうちの少なくとも１つを投与すること、及び／又は、トシリズマブ、シルツキシマブを投与すること、を更に含む。一態様では、薬剤は、ＧＭ－ＣＳＦ（ＣＳＦ２としても知られる顆粒球マクロファージコロニー刺激因子）などのＣＳＦファミリーメンバーである。ＧＭ－ＣＳＦは、刺激時にいくつかの造血細胞型及び非造血細胞型によって産生され得、骨髄集団を活性化／「プライミング」して、ＴＮＦ及びインターロイキン１β（ＩＬ１β）などの炎症性メディエーターを産生し得る。いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ阻害剤は、循環ＧＭ－ＣＳＦに結合してこれを中和する抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、レンジルマブ、ナミルマブ（ＡＭＧ２０３）、ＧＳＫ３１９６１６５／ＭＯＲ１０３／Ｏｔｉｌｉｍａｂ（ＧＳＫ／ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ）、ＫＢ００２とＫＢ００３（ＫａｌｏＢｉｏｓ）、ＭＴ２０３（Ｍｉｃｒｏｍｅｔ ａｎｄ Ｎｙｃｏｍｅｄ）、及びＭＯＲＡｂ－０２２／ｇｉｍｓｉｌｕｍａｂ（Ｍｏｒｐｈｏｔｅｋ）から選択される。いくつかの実施形態では、抗体は、そのバイオシミラーである。いくつかの実施形態では、アンタゴニストは、ＧＭ－ＣＳＦの機能に拮抗するＧＭ－ＣＳＦの修飾形態であるＥ２１Ｒである。いくつかの実施形態では、阻害剤／アンタゴニストは、小分子である。一実施形態では、ＣＳＦファミリーメンバーは、Ｍ－ＣＳＦ（マクロファージコロニー刺激因子又はＣＳＦ１としても知られる）である。ＣＳＦ１を阻害又は拮抗する薬剤の非限定的な例としては、小分子、抗体、キメラ抗原受容体、融合タンパク質、及び他の薬剤が挙げられる。一実施形態では、ＣＳＦ１阻害剤又はアンタゴニストは、抗ＣＳＦ１抗体である。一実施形態では、抗ＣＳＦ１抗体は、Ｒｏｃｈｅ（例えば、ＲＧ７１５５）、ファイザー（ＰＤ－０３６０３２４）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ（ＭＣＳ１１０／ラノツズマブ）、又はそれらのいずれか１つのバイオシミラーバージョンによって作製されたものから選択される。いくつかの実施形態では、阻害剤又はアンタゴニストは、ＧＭ－ＣＳＦ－Ｒ－アルファ（別名ＣＳＦ２Ｒ）又はＣＳＦ１Ｒ受容体のいずれかの活性を不活性化する。いくつかの実施形態では、阻害剤は、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．によって現在開発されている完全ヒトＧＭ－ＣＳＦ受容体αモノクローナル抗体であるマブリリムマブ（以前はＣＡＭ－３００１）；カビラリズマブ（Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＬＹ３０２２８５５（ＩＭＣ－ＣＳ４）（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、ＲＧ７１５５又はＲＯ５５０９５５４としても知られるＥｍａｃｔｕｚｕｍａｂ；ＦＰＡ００８、ヒト化ｍＡｂ（Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ／ＢＭＳ）；ＡＭＧ８２０（Ａｍｇｅｎ）；ＡＲＲＹ－３８２（Ａｒｒａｙ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）；ＭＣＳ１１０（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＰＬＸ３３９７（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ）；ＥＬＢ０４１／ＡＦＳ９８／ＴＧ３００３（ＥｌｓａＬｙｓ Ｂｉｏ、Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ）、ＳＮＤＸ－６３５２（Ｓｙｎｄａｘ）から選択される。いくつかの実施形態では、阻害剤又はアンタゴニストは、ＣＡＲ－Ｔ細胞において発現される。いくつかの実施形態では、阻害剤は、小分子（例えば、ヘテロアリールアミド、キノリノン系、ピリド－ピリミド系）；ＢＬＺ９４５Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＬＸ７４８６、ＡＲＲＹ－３８２、ペキシジルチニブ（別名ＰＬＸ３３９７）、又は５－（（５－クロロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－３－イル）メチル）－Ｎ－０６－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）メチル）ピリジン－２－アミン；ＧＷ ２５８０（ＣＡＳ ８７０４８３－８７－７）、Κｉ２０２２７（ＣＡＳ ６２３１４２－９６－１）、Ａｍｂｉｔ ＳｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓによるＡＣ７０８、又はＣａｎｎａｒｉｌｅら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｏ Ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ２０１７，５：５３及び米国特許出願公開第２０１８０３７１０９３号に列挙されている任意のＣＳＦ１Ｒ阻害剤（これらが開示する阻害剤について参照により本明細書に組み込まれる）である。ＧＭ－ＣＳＦ又はその受容体に対する追加の中和抗体は、例えば、「ＧＭ－ＣＳＦ ａｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ／ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ」Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ｊ．Ａ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１５；及び「Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＧＭ－ＣＳＦ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ」Ｗｉｃｋｓ，Ｉ．Ｐ．，Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ａ．Ｗ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．，２０１６に含まれる技術において説明されている。他の実施形態では、薬剤は、トシリズマブ及びシルツキシマブを含む抗ＩＬ６又は抗ＩＬ－６受容体遮断剤である。

一態様では、治療薬は、化学療法剤である。化学療法剤の例としては、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドパ、カルボコン、メトレドパ、ウレドパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファミド、トリメチロメラミンレジュームを含むエチレンイミン及びメチルアメラミン；ナイトロジェンマスタード類、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロフォスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトレビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）などの代謝拮抗剤；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキセート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフル、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５－ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗アドレナリン、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充剤、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミド配糖体；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルホルミチン；酢酸エリプチニウム；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’、２”－トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）及びドキセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；プラチナ；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（商標）（ベキサロテン）、Ｐａｎｒｅｔｉｎ（商標）（アリトレチノイン）などのレチノイン酸誘導体、ＯＮＴＡＫ（商標）（デニロイキンジフチトクス）、エスペラマイシン；カペシタビン；及び上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸又は誘導体が挙げられる。いくつかの態様では、本明細書中に開示されるＣＡＲ及び／又はＴＣＲ発現免疫エフェクター細胞を含む組成物は、腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）－イミダゾール、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン及びトレミフェン（フェアストン）などの抗エストロゲン；及び、抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン；並びに、上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸又は誘導体と併せて投与することができる。限定するものではないが、ＣＨＯＰ、すなわちシクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標））、ドキソルビシン（ヒドロキシドキソルビシン）、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））及びプレドニゾンを含む化学療法剤の組み合わせもまた適宜投与される。

（化学）療法剤は、操作された細胞又は核酸の投与と同時に、又は投与後１週間以内に投与され得る。他の態様では、（化学）療法剤は、操作された細胞又は核酸の投与後、１～４週間、又は１週間～１ヶ月、１週間～２ヶ月間、１週間～３ヶ月間、１週間～６ヶ月間、１週間～９ヶ月間、又は１週間～１２ヶ月間投与される。いくつかの態様では、（化学）療法剤は、細胞又は核酸を投与する少なくとも１ヶ月前に投与される。いくつかの態様では、方法は、２つ以上の化学療法剤を投与することを更に含む。

様々な追加の治療薬を、本明細書中に記載の組成物又は薬剤／治療と併用して／組み合わせて使用することができる。例えば、有用である可能性を有する追加の治療薬としては、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標））、ペンブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標））、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、及びアテゾリズマブ（Ｒｏｃｈｅ）、トシリズマブ（コルチコステロイド併用及び非併用）などのＰＤ－１阻害剤、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＳＦ１、ＧＭ－ＣＳＦＲ、又はＣＳＦ１Ｒ ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＳＦ１、ＧＭ－ＣＳＦＲ、又はＣＳＦ１Ｒの阻害剤（抗ＣＳＦ１抗体は、Ｒｏｃｈｅ（例えば、ＲＧ７１５５）、Ｐｆｉｚｅｒ（ＰＤ－０３６０３２４）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ（ＭＣＳ１１０／ラクノツズマブ）によって製造されるもの、マブリリムマブ（以前はＣＡＭ－３００１）、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．によって現在開発中の完全ヒト型ＧＭ－ＣＳＦ受容体αモノクローナル抗体；カビラリズマブ（Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＬＹ３０２２８５５（ＩＭＣ－ＣＳ４）（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、ＲＧ７１５５又はＲＯ５５０９５５４としても知られるＥｍａｃｔｕｚｕｍａｂ；ＦＰＡ００８、ヒト化ｍＡｂ（Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ／ＢＭＳ）；ＡＭＧ８２０（Ａｍｇｅｎ）；ＡＲＲＹ－３８２（Ａｒｒａｙ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）；ＭＣＳ１１０（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＰＬＸ３３９７（Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ）；ＥＬＢ０４１／ＡＦＳ９８／ＴＧ３００３（ＥｌｓａＬｙｓ Ｂｉｏ、Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ）、ＳＮＤＸ－６３５２（Ｓｙｎｄａｘ）が挙げられる。いくつかの態様では、阻害剤又はアンタゴニストは、ＣＡＲ－Ｔ細胞において発現される。いくつかの態様では、阻害剤は、小分子（例えば、ヘテロアリールアミド、キノリノン系、ピリド－ピリミド系）；ＢＬＺ９４５Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＬＸ７４８６、ＡＲＲＹ－３８２、ペキシジルチニブ（別名ＰＬＸ３３９７）、又は５－（（５－クロロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－３－イル）メチル）－Ｎ－０６－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）メチル）ピリジン－２－アミン；ＧＷ ２５８０（ＣＡＳ ８７０４８３－８７－７）、Κｉ２０２２７（ＣＡＳ ６２３１４２－９６－１）、Ａｍｂｉｔ ＳｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓによるＡＣ７０８、又はＣａｎｎａｒｉｌｅら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｏ Ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ２０１７，５：５３及び米国特許出願公開第２０１８０３７１０９３号に列挙されている任意のＣＳＦ１Ｒ阻害剤（これらが開示する阻害剤について参照により本明細書に組み込まれる）である。ＧＭ－ＣＳＦ又はその受容体に対する追加の中和抗体は、当該技術分野で記載されている）。本明細書に開示される組成物又は薬剤／治療及び方法と組み合わせて使用するのに適した追加の治療薬としては、イブルチニブ（ＩＭＢＲＵＶＩＣＡ（登録商標））、オファツムマブ（ＡＲＺＥＲＲＡ（登録商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、トラスツズマブエムタンシン（ＫＡＤＣＹＬＡ（登録商標））、イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、カツマキソマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、トシツモマブ、ブレンツキシマブ、アレムツズマブ、ゲムツズマブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、バンデタニブ、アファチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、レナリドミド、アキシチニブ、マシチニブ、パゾパニブ、スニチニブ、ソラフェニブ、トシリズマブ、トセラニブ、レスタウルチニブ、アキシチニブ、セジラニブ、レンバチニブ、ニンテダニブ、パゾパニブ、レゴラフェニブ、セマキサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、チボザニブ、トセラニブ、バンデタニブ、エントレクチニブ、カルボザンチニブ、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ポナチニブ、ラドチニブ、ボスチニブ、レスタウルチニブ、ルキソリチニブ、パクリチニブ、コビメチニブ、セルメチニブ、トラメチニブ、ビニメチニブ、アレクチニブ、セリチニブ、クリゾチニブ、アフリベルセプト、アディポチド、デニロイキンディフティトックス、エベロリムス及びテムシロリムスなどのｍＴＯＲ阻害剤、ソニデギブ及びビスモデギブなどのヘッジホッグ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤（パルボシクリブ）などのＣＤＫ阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。

免疫細胞を含む組成物又は薬剤／治療剤は、抗炎症剤と共に投与されるか、又は投与され得る。抗炎症剤又は薬物としては、ステロイド及びグルココルチコイド（ベタメタゾン、ブデソニド、デキサメタゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、コルチコステロイド、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロンを含む）、アスピリンを含む非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）、イブプロフェン、ナプロキセン、メトトレキサート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド及びミコフェノール酸が挙げられ得るが、これらに限定されない。例示的なＮＳＡＩＤとしては、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、Ｃｏｘ－２阻害剤、及びシアリレートが挙げられる。例示的な鎮痛剤としては、アセトアミノフェン、オキシコドン、プロポルキシフェン塩酸塩のトラマドールが挙げられる。例示的なグルココルチコイドとしては、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン又はプレドニゾンが挙げられる。例示的な生物学的応答調節剤としては、細胞表面マーカーに対する分子（例えば、ＣＤ４、ＣＤ５など）、サイトカイン阻害剤、例えば、ＴＮＦアンタゴニスト（例えば、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（登録商標））、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（登録商標））及びインフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標））、ケモカイン阻害剤、及び接着分子阻害剤が挙げられる。生物学的応答調節剤としては、モノクローナル抗体並びに分子の組換え形態が挙げられる。例示的なＤＭＡＲＤとしては、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキサート、ペニシラミン、レフルノミド、スルファサラジン、ヒドロキシクロロキン、Ｇｏｌｄ（経口（オーラノフィン）及び筋肉内）及びミノサイクリンが挙げられる。

本明細書に記載の組成物又は薬剤／治療剤は、追加の治療薬としてサイトカイン及び／又はサイトカイン調節剤と併せて投与され得る。サイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン、及び伝統的なポリペプチドホルモンである。サイトカインには、成長ホルモン、例えば、ヒト成長ホルモン、Ｎ－メチオニルヒト成長ホルモン、及びウシ成長ホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；糖タンパク質ホルモン、例えば、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）；肝成長因子（ＨＧＦ）；線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）；プロラクチン；胎盤ラクトゲン；ムレラン阻害物質；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；神経成長因子（ＮＧＦ）、例えば、ＮＧＦ－ベータ；血小板増殖因子；形質転換成長因子（ＴＧＦ）、例えば、ＴＧＦ－α及びＴＧＦ－β；インスリン様成長因子－Ｉ及び成長因子－ＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ、Ｅｐｏｇｅｎ（登録商標）、Ｐｒｏｃｒｉｔ（登録商標））；骨誘導因子；インターフェロン、例えば、インターフェロン－アルファ、ベータ、及び－ガンマ；コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、例えば、マクロファージ－ＣＳＦ（Ｍ－ＣＳＦ）；顆粒球・マクロファージＣＳＦ（ＧＭ－ＣＳＦ）；及び顆粒球ＣＳＦ（Ｇ－ＣＳＦ）；インターロイキン（ＩＬ）、例えば、ＩＬ－１、ＩＬ－１アルファ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２；ＩＬ－１５、腫瘍壊死因子、例えば、ＴＮＦ－アルファ又はＴＮＦ－ベータ；及びＬＩＦ及びキットリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子が含まれる。本明細書で使用される場合、サイトカインという用語には、天然源又は組換え細胞培養物由来のタンパク質、及び天然配列サイトカインの生物学的に活性な等価物が含まれる。一実施形態では、本明細書中に記載される組成物は、ステロイド又はコルチコステロイドと共に投与される。

コルチコステロイド治療は、有害事象の治療に使用され得る。コルチコステロイド（又は任意の他のステロイド、並びに有害事象のための任意の他の治療）は、任意の有害事象の症状が検出される前に予防的に、及び／又は、有害事象の検出後に使用され得る。それらは、Ｔ細胞投与の１日以上前、Ｔ細胞投与の日（Ｔ細胞投与前、後、及び／又はその最中）、及び／又は、Ｔ細胞投与後に投与され得る。それらは、前処置の前、最中、又は後に投与され得る。この使用には、任意のコルチコステロイドが適切であり得る。一実施形態では、コルチコステロイドは、デキサメタゾンである。いくつかの実施形態では、コルチコステロイドは、メチルプレドニゾロンである。いくつかの実施形態では、これら２つを組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、グルココルチコイドとしては、合成及び非合成グルココルチコイドが挙げられる。例示的なグルココルチコイドとしては、アルクロメタゾン、アルギン酸塩、ベクロメタゾン（例えば、ベクロメタゾンジプロピオネート）、ベタメタゾン（例えば、ベタメタゾン１７吉草酸エステル、ベタメタゾンナトリウムアセテート、ベタメタゾンナトリウムホスフェート、ベタメタゾン吉草酸エステル）、ブデソニド、クロベタゾール（例えば、プロピオン酸クロベタゾール）、クロベタゾン、クロコルトロン（例えば、クロコルトロンピバレート）、クロプレドノール、コルチコステロン、コルチゾン及びヒドロコルチゾン（例えば、酢酸ヒドロコルチゾン）、コルチバゾール、デフラザコール、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン（例えば、リン酸デキサメタゾン２１、酢酸デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム）、ジフロラゾン（例えば、ジフロラゾンジアセテート）、ジフルコルトラロン、ジフルプレドネート、エノキソロン、フラザコール、フルクロニド、フルドロコルチゾン（例えば、酢酸フルドロコルチゾン）、フルメタゾン（例えば、フルメタゾンピバレート）、フルニソリド、フルオシノロン（例えば、フルオシノロンアセトニド）、フルオシノニド、フルコルチン、フルトロロン、フルオロメトロン（例えば、酢酸フルオロメトロン）、フルペロロン（例えば、酢酸フルペロン）、フルプレドニデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、フルチカゾン（例えば、プロピオン酸フルチカゾン）、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロベタソル、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒドロコルタメート、ヒドロコルチゾン（例えば、ヒドロコルチゾン２１－ブチレート、ヒドロコルチゾンアセポネート、ヒドロコルチゾンアセテート、ヒドロコルチゾンブテプレート、ヒドロコルチゾンブチレート、ヒドロコルチゾンシピオネート、ヒドロコルチゾンヘミコハク酸、ヒドロコルチゾンプロブテート、ヒドロコルチゾンリン酸ナトリウム、ヒドロコルチゾンコハク酸ナトリウム、吉草酸ヒドロコルチゾン）、ロテプレドノールエタボネート、マジプレドン、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニソロン（メチルプレドニゾロンアセポネート、酢酸メチルプレドニゾロン、ヘミコハク酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム）、モメタゾン（例えば、フロ酸モメタゾン）、パラメタゾン（例えば、酢酸パラメタゾン）、プレドニカルベート、プレドニゾロン（例えば、プレドニゾロン２５－ジエチルアミノアセテート、プレドニゾロンリン酸ナトリウム、プレドニゾロン２１－ヘミコハク酸塩、プレドニゾロン酢酸塩；プレドニゾロンファルネシル酸塩、プレドニゾロンヘミコハク酸塩、プレドニゾロン－２１（ベータ－Ｄ－グルクロニド）、プレドニゾロンメタスルホ安息香酸、プレドニゾロンステアリン酸塩、プレドニゾロンテブト酸エステル、プレドニゾロンテトラヒドロフタレート）、プレドニゾン、プレドニバル、プレドニリデン、リメキソロン、チキソコルトール、トリアムシノロン（例えば、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンベネトニド、トリアムシノロンヘキサセトニド、トリアムシノロンアセトニド２１パルミテート、トリアムシノロンジアセテート）、が挙げられるが、これらに限定されない。これらのグルココルチコイド及びその塩は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ａ．Ｏｓｏｌ，ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１６ｔｈ ｅｄ．１９８０）、並びにＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．（２０１３）任意の他の版に詳述されており、参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、グルココルチコイドは、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、及びプレドニゾンの中から選択される。一実施形態では、グルココルチコイドは、デキサメタゾンである。他の実施形態では、ステロイドは、ミネラルコルチコイドである。任意の他のステロイドが、本明細書中に提供される方法で使用され得る。

１つ以上のコルチコステロイドは、有害事象の重症度／グレード（例えば、ＣＲＳ及びＮＥ）に適合し得る任意の用量及び投与頻度で投与され得る。表１３、１４及び１６は、ＣＲＳ及びＮＥを管理するための投与レジメンの例を提供する。別の実施形態では、コルチコステロイドの投与は、デキサメタゾン１０ｍｇの、１日当たり１～４回の経口又はＩＶ投与を含む。「高用量」コルチコステロイドと呼ばれることもある別の実施形態は、メチルプレドニゾン１ｇ／日を単独で、又はデキサメタゾンと組み合わせてＩＶ投与することを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のコルチコステロイドは、１日当たり１～２ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。

コルチコステロイドは、ＣＲＳ又は神経毒性などの有害事象に関連する１つ以上の症状を改善するのに有効な任意の量で投与され得る。コルチコステロイド、例えば、グルココルチコイドは、例えば、７０ｋｇの成人対象に対して、１用量当たり、約０．１～１００ｍｇ、０．１～８０ｍｇ、０．１～６０ｍｇ、０．１～４０ｍｇ、０．１～３０ｍｇ、０．１～２０ｍｇ、０．１～１５ｍｇ、０．１～１０ｍｇ、０．１～５ｍｇ、０．２～４０ｍｇ、０．２～３０ｍｇ、０．２～２０ｍｇ、０．２～１５ｍｇ、０．２～１０ｍｇ、０．２～５ｍｇ、０．４～４０ｍｇ、０．４～３０ｍｇ、０．４～２０ｍｇ、０．４～１５ｍｇ、０．４～１０ｍｇ、０．４～５ｍｇ、０．４～４ｍｇ、１～２０ｍｇ、１～１５ｍｇ、又は１～１０ｍｇの量で投与することができる。典型的には、グルココルチコイドなどのコルチコステロイドは、平均的成人のヒト対象に対して、１用量当たり、約０．４～２０ｍｇの量、例えば、約、０．４ｍｇ、０．５ｍｇ、０．６ｍｇ、０．７ｍｇ、０．７５ｍｇ、０．８ｍｇ、０．９ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、１０ｍｇ、１１ｍｇ、１２ｍｇ、１３ｍｇ、１４ｍｇ、１５ｍｇ、１６ｍｇ、１７ｍｇ、１８ｍｇ、１９ｍｇ、又は２０ｍｇの量で投与される。

いくつかの実施形態では、コルチコステロイドは、典型的には体重が約７０ｋｇ～７５ｋｇの平均的な成人対象に対して、例えば、０．００１若しくは約０．００１ｍｇ／（対象の）ｋｇ、０．００２ｍｇ／ｋｇ、０．００３ｍｇ／ｋｇ、０．００４ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．００６ｍｇ／ｋｇ、０．００７ｍｇ／ｋｇ、０．００８ｍｇ／ｋｇ、０．００９ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０３５ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０４５ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０５５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０６５ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．０７５ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０８５ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．０９５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．１５ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．３０ｍｇ／ｋｇ、０．３５ｍｇ／ｋｇ、０．４０ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．５０ｍｇ／ｋｇ、０．５５ｍｇ／ｋｇ、０．６０ｍｇ／ｋｇ、０．６５ｍｇ／ｋｇ、０．７０ｍｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ、０．８０ｍｇ／ｋｇ、０．８５ｍｇ／ｋｇ、０．９０ｍｇ／ｋｇ、０．９５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．０５ｍｇ／ｋｇ、１．１ｍｇ／ｋｇ、１．１５ｍｇ／ｋｇ、１．２０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．３５ｍｇ／ｋｇ、又は１．４ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され得る。

概して、異なるコルチコステロイド間に効力の差が存在するので、投与されるコルチコステロイドの用量は、個々のコルチコステロイドに依存する。典型的には、薬物は効力が異なるため、同等の効果を得るための用量が異なる場合があることが理解される。様々なグルココルチコイド及び投与経路に関する効力の点での当量は周知である。（非時間治療的な様式での）等価なステロイド投薬に関する情報は、英国国民医薬品集（ＢＮＦ）３７（１９９９年３月）に見出すことができる。

いくつかの実施形態では、有害事象／反応は、以下のうちの１つ以上から選択され得る。

他の有害反応として、胃腸障害：口渇、感染及び寄生障害：真菌感染症、代謝及び栄養障害：脱水症、神経系障害：運動失調、けいれん、頭蓋内圧亢進、呼吸器、胸部及び縦隔障害：呼吸不全、肺水腫、皮膚及び皮下組織障害：発疹、血管障害：出血、が挙げられる。

一実施形態では、サイトカイン放出症候群の症状には、発熱、硬直、疲労、食欲不振、筋痛、関節痛、悪心、嘔吐、頭痛、発疹、下痢、頻呼吸、低酸素症、頻脈、低血圧、脈圧拡大、心拍出量の早期増加、心拍出量の遅延低下、幻覚、振戦、歩行変化、けいれん及び死亡が含まれるが、これらに限定されない。一実施形態では、ＣＲＳのグレード付けをする方法は、Ｎｅｅｌａｐｕ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．１５（１）：４７－６２（２０１８） ａｎｄ Ｌｅｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２０１４；１２４：１８８－１９５に記載されている。一実施形態では、神経毒性／神経学的事象は、Ｌｅｅ，ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ ２０１４；１２４：１８８－１９５に記載される方法によってグレード付けされ得る。

いくつかの実施形態では、有害事象は、毒性予防のためのトシリズマブ（又は別の抗ＩＬ６／ＩＬ６Ｒ剤／アンタゴニスト）、コルチコステロイド療法、又は抗けいれん薬で管理される。いくつかの実施形態では、有害事象は、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＳＦ１、ＧＭ－ＣＳＦＲ、又はＣＳＦ１Ｒの阻害剤、抗胸腺細胞グロブリン、レンジルマブ、マブリリムマブ、サイトカイン、及び抗炎症剤から選択される１つ以上の薬剤によって管理される。

いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＴ細胞治療に対する有害反応の発生を予防するか、又は有害反応の重症度を低下させる方法を提供する。いくつかの実施形態では、細胞療法は、サイトカイン放出症候群及び神経毒性を含む、有害事象を予防する、発症を遅延する、症状を低減する、治療する、１つ以上の薬剤と共に投与される。一実施形態では、薬剤は上記で説明されている。他の実施形態では、薬剤は以下に記載される。いくつかの実施形態では、薬剤は、細胞の投与前、その後、又は同時に、本明細書の他の場所で説明される方法及び用量のうちの１つによって投与される。一実施形態では、薬剤は、疾患になりやすい傾向を有し得るが、まだ疾患であると診断されていない対象に投与される。

この点において、開示される方法は、毒性予防のために、「予防有効量」のトシリズマブ、コルチコステロイド療法、及び／又は抗けいれん薬の投与を含み得る。いくつかの実施形態では、方法は、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＳＦ１、ＧＭ－ＣＳＦＲ、又はＣＳＦ１Ｒの阻害剤、レンジルマブ、マブリリムマブ、サイトカイン、及び／又は抗炎症剤を投与することを含む。薬理学的及び／又は生理学的効果は、予防的であってよく、すなわち、効果は、疾患又はその症状を完全に又は部分的に予防する。「予防有効量」は、必要な投与量及び期間で所望の予防結果（例えば、有害反応の発症の予防）を達成するための有効量を指し得る。

いくつかの実施形態では、方法は、あらゆる対象における有害反応の管理を含む。いくつかの実施形態では、有害反応は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、神経毒性、過敏反応、重篤な感染症、血球減少症、及び低ガンマグロブリン血症からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、有害反応の徴候及び症状は、発熱、低血圧、頻脈、低酸素症、及び悪寒からなる群から選択され、心不整脈（心房細動及び心室頻脈を含む）、心停止、心不全、腎機能不全、毛細血管漏出症候群、低血圧、低酸素症、臓器毒性、血球貪食性リンパ組織球増加症／マクロファージ活性化症候群（ＨＬＨ／ＭＡＳ）、発作、脳症、頭痛、振戦、めまい、失語症、せん妄、不眠症不安、アナフィラキシー、発熱性好中球減少症、血小板減少症、好中球減少症、及び貧血を含む。いくつかの実施形態では、患者は、有害事象のバイオマーカーのうちの１つ以上に基づいて特定及び選択されている。いくつかの実施形態では、患者は、臨床症状（例えば、毒性症状の存在及びグレード）によって単に特定及び選択されている。いくつかの実施形態では、有害事象は、表１３、１４、１６、及び１７のプロトコルのうちのいずれか１つによって管理される。

いくつかの実施形態では、方法は、キメラ受容体治療におけるＣＲＳを予防、又はその重症度を低減することを含む。いくつかの実施形態では、操作されたＣＡＲ Ｔ細胞は、患者への投与後に不活化される。いくつかの実施形態では、方法は、臨床症状に基づいてＣＲＳを特定することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、発熱、低酸素症、及び低血圧症の他の原因を評価し、治療することを含む。グレード２以上のＣＲＳ（例えば、輸液に反応しない低血圧、又は補充酸素供給を必要とする低酸素症）を経る患者は、連続心臓テレメトリー及びパルスオキシメトリーでモニタリングする必要がある。いくつかの実施形態では、重度のＣＲＳを経ている患者について、心機能を評価するために心エコー図を実行することを検討する。重度又は生命を脅かすＣＲＳの場合、集中治療の支持療法が検討され得る。いくつかの実施形態では、本方法は、ＣＲＳの徴候及び症状について注入後に認定医療施設で少なくとも７日間毎日患者をモニタリングすることを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、注入後４週間、ＣＲＳの徴候又は症状について患者をモニタリングすることを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、ＣＲＳの徴候又は症状が発生した場合にはいつでも、直ちに病院で診察を受けるように患者に勧告することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＲＳの最初の徴候における適応として、支持療法、トシリズマブ、若しくはトシリズマブ及びコルチコステロイドによる治療を開始することを含む。

いくつかの実施形態では、方法は、神経毒性の徴候及び症状について患者をモニタリングすることを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、神経学的症状の他の原因を排除することを含む。グレード２以上の神経毒性を経る患者は、連続心臓テレメトリー及びパルスオキシメトリーでモニタリングする必要がある。重度又は生命を脅かす神経毒性の場合、集中治療の支持療法を提供する。いくつかの実施形態では、神経毒性の症状は、脳症、頭痛、振戦、めまい、失語症、せん妄、不眠症、及び不安から選択される。

いくつかの実施形態では、細胞治療は、有害事象の１つ以上の症状を治療するか、又は予防する（予防的である）１つ以上の薬剤の投与（例えば、ステロイド）又は治療（例えば、減量）の前、最中／同時、及び／又は後に投与される。「予防有効量」は、必要な投与量及び期間で所望の予防結果を達成するための有効量を指す。一実施形態では、予防有効量は、疾患に先立ち、又は早期の段階で対象において使用される。一実施形態では、予防有効量は、治療有効量未満であろう。一実施形態では、有害事象の治療又は予防は、細胞療法を受ける、受けている、又は受けたことがある任意の患者に投与される。いくつかの実施形態では、有害事象を管理する方法は、神経毒性の徴候及び症状について注入後に認定医療施設で少なくとも７日間毎日患者をモニタリングすることを含む。いくつかの実施形態では、方法は、注入後４週間、神経毒性及び／又はＣＲＳの徴候又は症状について患者をモニタリングすることを含む。

いくつかの実施形態では、本開示は、ステロイド及び抗ＩＬ６／抗ＩＬ－６Ｒ抗体によって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療を受ける対象において有害事象を管理する２つの方法を提供する。一実施形態では、本開示は、全てのグレード≧１の神経学的事象について３日後に改善が見られない場合、グレード１のＣＲＳの全ての症例の管理のためにコルチコステロイド療法が開始される、有害事象管理の方法を提供する。一実施形態では、本開示は、全てのグレード≧２の神経学的事象について３日後に改善が見られない場合、グレード１のＣＲＳの全ての症例の管理のためにトシリズマブが開始される。一実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後の有害事象管理を受けた患者における総ステロイド曝露量を減少させる方法を提供し、この方法は、全てのグレード≧１の神経学的事象について３日後に改善が見られない場合、グレード１のＣＲＳの全ての症例の管理のためのコルチコステロイド療法の開始、及び／又は、全てのグレード≧２の神経学的事象について３日後に改善が見られない場合、グレード１のＣＲＳの全ての症例に対するトシリズマブの開始を含む。一実施形態では、コルチコステロイド及びトシリズマブは、実施例の項に例示されるものから選択されるレジメンで投与される。一実施形態では、本開示は、早期のステロイドの使用が、重度感染のリスクの増加、ＣＡＲ Ｔ細胞の増殖の減少、又は腫瘍応答の減少に関連しないことを提供する。

一実施形態では、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞がん治療におけるレベチラセタム予防の安全性を支持する。一実施形態では、がんは、ＮＨＬである。一実施形態では、がんは、Ｒ／Ｒ ＬＢＣＬであり、患者はＫＴＥ－Ｘ１９を受ける。したがって、一実施形態では、本開示は、予防用量の抗けいれん薬を患者に投与することを含む、ＣＡＲ Ｔ細胞で治療された患者における有害事象を管理する方法を提供する。いくつかの実施形態では、患者は、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（前処置後）の０日目から開始し、また、予防的レベチラセタムの中止後に神経学的事象が発生する場合、グレード≧２の神経毒性の発症時に、レベチラセタム（例えば、７５０ｍｇ経口又は静脈内、１日２回）を投与される。一実施形態では、患者が何らかのグレード≧２の神経毒性を経験しない場合、臨床的に示されるようにレベチラセタムを減らし、中止する。一実施形態では、レベチラセタム予防は、任意の他の有害事象管理プロトコルと組み合わされる。

一実施形態では、患者は、０日目から開始するレベチラセタム（７５０ｍｇ経口又は静脈内、１日２回）を投与され得る。グレード≧２の神経学的事象の発症時に、レベチラセタム用量を１０００ｍｇ１日２回に増加させる。患者が何らかのグレード≧２の神経学的事象を経験しなかった場合、臨床的に示されるようにレベチラセタムを減らし、中止する。患者はまた、２日目にトシリズマブ（８ｍｇ／ｋｇ ＩＶを１時間かけて［８００ｍｇを超えない］）を投与される。更なるトシリズマブ（±コルチコステロイド）は、併存症若しくは高齢の患者においてグレード２のＣＲＳの発症時、又はそうでなければグレード≧３のＣＲＳの場合に推奨され得る。グレード≧２の神経学的事象を経験している患者に対してトシリズマブが開始され、併存症若しくは高齢の患者に対して、又は、トシリズマブの使用にもかかわらず症状が悪化しているグレード≧３の何らかの神経学的事象が存在する場合に、コルチコステロイドが追加される。

一実施形態では、本開示は、予防的ステロイドの使用が、初期ステロイド使用投与と同様の程度まで、重度のＣＲＳ及びＮＥの割合を低減するように思われることを提供する。したがって、本開示は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法における有害事象管理のための方法を提供し、このとき患者は、０日目（注入前）、１日目、及び２日目にデキサメタゾン１０ｍｇＰＯを投与される。ステロイドは、３日間の支持療法後に改善が認められないとき、グレード１のＮＥ及びグレード１のＣＲＳにおいて開始して投与され得る。トシリズマブは、２４時間の支持療法後に改善が認められないとき、グレード≧１のＣＲＳにおいて投与され得る。一実施形態では、本開示は、ＧＭ－ＣＳＦを中和及び／又は枯渇させる、治療された患者における治療関連ＣＲＳ及び／又はＮＥを予防又は低減する、抗体によるＣＡＲ Ｔ細胞療法の有害事象管理を提供する。一実施形態では、抗体は、レンジルマブである。

いくつかの実施形態では、有害事象は、ＩＬ－６又はＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）のアンタゴニスト又は阻害剤である薬剤の投与によって管理される。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬ－６活性を中和する抗体、例えば、ＩＬ－６又はＩＬ－６Ｒに結合する抗体又は抗原結合フラグメントである。例えば、いくつかの実施形態では、薬剤は、トシリズマブ（アトリズマブ）又はサリルマブである抗ＩＬ－６Ｒ抗体であり、又はそれらを含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、米国特許第８，５６２，９９１号に記載される抗ＩＬ－６Ｒ抗体である。場合によって、ＩＬ－６を標的化する薬剤は、抗ＴＬ－６抗体、例えば、シルツキシマブ、エルシリモマブ、ＡＬＤ５１８／ＢＭＳ－９４５４２９、シルクマブ（ＣＮＴＯ １３６）、ＣＰＳＩ－２６３４、ＡＲＧＸ １０９、ＦＥ３０１、ＦＭ１０１又はオロキズマブ（ＣＤＰ６０３８）、及びこれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、薬剤は、リガンド－受容体相互作用を阻害することによってＩＬ－６活性を中和し得る。いくつかの実施形態では、ＩＬ－６／ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト又は阻害剤は、ＩＬ－６ムテイン、例えば、米国特許第５５９１８２７号に記載されるものである。いくつかの実施形態では、ＩＬ－６／ＩＬ－６Ｒのアンタゴニスト又は阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質若しくはペプチド、又は核酸である。

いくつかの実施形態では、有害反応及びそれらの症状を管理するために使用することができる他の薬剤には、サイトカイン受容体又はサイトカインのアンタゴニスト又は阻害剤が含まれる。いくつかの実施形態では、サイトカイン又は受容体は、ＩＬ－１０、ＴＬ－６、ＴＬ－６受容体、ＩＦＮｙ、ＩＦＮＧＲ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５、ＭＣＰ－１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＭＩＰ１３、ＣＣＲ５、ＴＮＦアルファ、ＴＮＦＲ１、例えば、ＴＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＬ－２受容体（ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５）、ＭＣＰ－１（ＣＣＬ２）受容体（ＣＣＲ２又はＣＣＲ４）、ＴＧＦ－ベータ受容体（ＴＧＦ－βＩ、ＩＩ、又はＩＩＩ）、ＩＦＮ－ガンマ受容体（ＩＦＮＧＲ）、ＭＩＰ１Ｐ受容体（例えば、ＣＣＲ５）、ＴＮＦアルファ受容体（例えば、ＴＮＦＲ１）、ＩＬ－１受容体（ＩＬ１－Ｒａ／ＩＬ－１ＲＰ）又はＩＬ－１０受容体（ＩＬ－１０Ｒ）、ＩＬ－１及びＩＬ－１Ｒアルファ／ＩＬ－１ベータである。いくつかの実施形態では、薬剤は、シチュキシマブ、サリルマブ、オロキズマブ（ＣＤＰ６０３８）、エルシリモマブ、ＡＬＤ５１８／ＢＭＳ－９４５４２９、シルクマブ（ＣＮＴＯ １３６）、ＣＰＳＩ－２６３４、ＡＲＧＸ １０９、ＦＥ３０１、又はＦＭ１０１を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、サイトカインのアンタゴニスト又は阻害剤、例えば、トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ－ベータ）、インターロイキン６（ＴＬ－６）、インターロイキン１０（ＩＬ－１０）、ＩＬ－２、ＭＩＰ１３（ＣＣＬ４）、ＴＮＦアルファ、ＩＬ－１、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－ガンマ）又は単球走化性タンパク質－Ｉ（ＭＣＰ－１）である。いくつかの実施形態では、サイトカイン受容体を標的化する（例えば、阻害する、又はそのアンタゴニストである）もの、例えば、ＴＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＬ－２受容体（ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５）、ＭＣＰ－１（ＣＣＬ２）受容体（ＣＣＲ２又はＣＣＲ４）、ＴＧＦ－β受容体（ＴＧＦ－βＩ、ＩＩ、又はＩＩＩ）、ＩＦＮ－γ受容体（ＩＦＮＧＲ）、ＭＩＰ１Ｐ受容体（例えば、ＣＣＲ５）、ＴＮＦα受容体（例えば、ＴＮＦＲ１）、ＩＬ－１受容体（ＩＬ１－Ｒａ／ＩＬ－１ＲＰ）、又はＩＬ－１０受容体（ＩＬ－１０Ｒ）、及びこれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、薬剤は、細胞の投与前、その後、又は同時に、本明細書の他の場所で説明される方法及び用量のうちの１つによって投与される。

いくつかの実施形態では、薬剤は、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ（又は約１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ）、２ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ（又は約２ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ）、２ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ（又は約２ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ）、２ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ（又は約２ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ）、又は６ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ（又は約６ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ）の投与量（それぞれ包括的）で投与され、あるいは、薬剤は、少なくとも若しくは少なくとも約若しくは約、２ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、又は８ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。いくつかの実施形態では、約１ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、例えば、１０ｍｇ／ｋｇ、又は約１０ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。いくつかの実施形態では、薬剤は、静脈内注入によって投与される。一実施形態では、薬剤は、トシリズマブである。いくつかの実施形態では、薬剤、例えば特にトシリズマブは、細胞の投与前、その後、又は同時に、本明細書の他の場所で説明される方法及び用量のうちの１つによって投与される。

いくつかの実施形態では、方法は、臨床症状に基づいてＣＲＳを特定することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、発熱、低酸素症、及び低血圧症の他の原因を評価し、治療することを含む。ＣＲＳが観察されるか又は疑われる場合、プロトコルＡの推奨に従って管理することができ、これはまた、ＣＳＦ／ＣＳＦＲ１軸の中和又は低減などの本開示の他の治療と組み合わせて使用することができる。グレード２以上のＣＲＳ（例えば、輸液に反応しない低血圧、又は補充酸素供給を必要とする低酸素症）を経る患者は、連続心臓テレメトリー及びパルスオキシメトリーでモニタリングする必要がある。いくつかの実施形態では、重度のＣＲＳを経ている患者について、心機能を評価するために心エコー図を実行することを検討する。重度又は生命を脅かすＣＲＳの場合、集中治療の支持療法が検討され得る。いくつかの実施形態では、本明細書中に開示される方法において、トシリズマブの代わりに、トシリズマブのバイオシミラー又はその同等物が使用され得る。他の実施形態では、トシリズマブの代わりに別の抗ＩＬ６Ｒを使用してもよい。

いくつかの実施形態では、有害事象は、以下のプロトコル（プロトコルＡ）に従って管理される。

（ａ）Ｌｅｅ ＤＷら（２０１４）．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｂｌｏｏｄ．２０１４ Ｊｕｌ １０；１２４（２）：１８８－１９５．
（ｂ）神経毒性の管理については表２を参照されたい。
（ｃ）詳細については、ＡＣＥＭＴＲＡ（登録商標）（トシリズマブ）処方情報を参照されたい、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅ．ｃｏｍ／ｄｏｗｎｌｏａｄ／ｐｄｆ／ａｃｔｅｍｒａ＿ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ．ｐｄｆ（最終アクセス日２０１７年１０月１８日）。最初の米国の承認は２０１０年に示されている。
神経毒性

いくつかの実施形態では、方法は、神経毒性の徴候及び症状について患者をモニタリングすることを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、神経学的症状の他の原因を排除することを含む。グレード２以上の神経毒性を経る患者は、連続心臓テレメトリー及びパルスオキシメトリーでモニタリングする必要がある。重度又は生命を脅かす神経毒性の場合、集中治療の支持療法を提供する。あらゆるグレード２以上の神経毒性の発作予防のための非鎮静型抗発作薬（例えば、レベチラセタム）を検討する。以下の治療は、ＣＳＦ／ＣＳＦＲ１軸の中和又は低減などの本開示の他の治療と組み合わせて使用することができる。

いくつかの実施形態では、有害事象は、以下のプロトコル（プロトコルＢ）に従って管理される。

コルチコステロイドを用いた更なる安全性管理方法

グレード１におけるコルチコステロイド及び／又はトシリズマブの投与は予防的であると考えることができる。支持療法は、全てのＣＲＳ及びＮＥ重症度グレードの全てのプロトコルで提供され得る。ＣＲＳ、トシリズマブ及び／又はコルチコステロイドに関連する有害事象を管理するためのプロトコルの一実施形態では、以下のように投与される：グレード１のＣＲＳ：トシリズマブなし；コルチコステロイドなし；グレード２のＣＲＳ：トシリズマブ（併存症又は高齢の場合のみ）；及び／又はコルチコステロイド（併存症又は高齢の場合のみ）；グレード３のＣＲＳ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド；グレード４のＣＲＳ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド。ＣＲＳに関連する有害事象を管理するためのプロトコルの別の実施形態では、トシリズマブ及び／又はコルチコステロイドが以下のように投与される：グレード１のＣＲＳ：トシリズマブ（３日後に改善がない場合）；及び／又はコルチコステロイド（３日後に改善がない場合）；グレード２のＣＲＳ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド；グレード３のＣＲＳ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド；グレード４のＣＲＳ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド、高用量。

ＮＥ、トシリズマブ及び／又はコルチコステロイドに関連する有害事象を管理するためのプロトコルの一実施形態では、以下のように投与される：グレード１のＮＥ：トシリズマブなし；コルチコステロイドなし；グレード２のＮＥ：トシリズマブなし；コルチコステロイドなし；グレード３のＮＥ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド（トシリズマブに対する改善がない場合のみ、標準用量）；グレード４のＮＥ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド。ＮＥ、トシリズマブ及び／又はコルチコステロイドに関連する有害事象を管理するためのプロトコルの別の実施形態では、以下のように投与される：グレードの１ＮＥ：トシリズマブなし；及び／又はコルチコステロイド；グレード２のＮＥ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド；グレード３のＮＥ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド、高用量；グレード４のＮＥ：トシリズマブ；及び／又はコルチコステロイド、高用量。一実施形態では、コルチコステロイド治療は、グレード２以上のＣＲＳで開始され、トシリズマブ治療は、グレード２以上のＣＲＳで開始される。一実施形態では、コルチコステロイド治療は、グレード１以上のＣＲＳで開始され、トシリズマブ治療は、グレード１以上のＣＲＳで開始される。一実施形態では、コルチコステロイド治療は、グレード３以上のＮＥで開始され、トシリズマブ治療は、グレード３以上のＣＲＳで開始される。一実施形態では、コルチコステロイド治療は、グレード１以上のＣＲＳで開始され、トシリズマブ治療は、グレード２以上のＣＲＳで開始される。いくつかの実施形態では、２日目に投与されるトシリズマブの予防的使用は、グレード３以上のＣＲＳの割合を減少させ得る。１つ以上のコルチコステロイドは、有害事象の重症度／グレード（例えば、ＣＲＳ及びＮＥ）に適合し得る任意の用量及び投与頻度で投与され得る。表１及び表２は、それぞれＣＲＳ及びＮＥを管理するための投与レジメンの例を提供する。別の実施形態では、コルチコステロイドの投与は、デキサメタゾン１０ｍｇの、１日当たり１～４回の経口又はＩＶ投与を含む。「高用量」コルチコステロイドと呼ばれることもある別の実施形態は、メチルプレドニゾン１ｇ／日を単独で、又はデキサメタゾンと組み合わせてＩＶ投与することを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のコルチコステロイドは、１日当たり１～２ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一般に、投与されるコルチコステロイド投与の用量は、異なるコルチコステロイド間に効力の差が存在するため、特定のコルチコステロイドに依存する。典型的には、薬物は効力が異なるため、同等の効果を得るための用量が異なる場合があることが理解される。様々なグルココルチコイド及び投与経路に関する効力の点での当量は周知である。当量のステロイド用量（非時間治療的に）に関する情報は、Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ（ＢＮＦ） ３７，Ｍａｒｃｈ １９９９に見出され得る。本出願は、本出願の方法によって調製された細胞の用量及び投与を提供し、例えば、ＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法の注入バッグは、注入のための約６８ｍＬのキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）陽性Ｔ細胞の懸濁液を含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞は、注入のため約４０ｍＬに製剤化される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ Ｔ細胞製品は、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、２００、３００、４００、５００、５００、７００、８００、９００、１０００ｍＬの総体積で製剤化される。一態様では、本出願の方法によって調製された細胞の用量及び投与、例えば、ＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法の注入バッグは、約４０ｍＬ中に１×１０^６個のＣＡＲ－Ｔ陽性細胞の懸濁液を含む。目標用量は、体重１ｋｇ当たり約１×１０^６～約２×１０^６ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞であり得、最大で２×１０^８ＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞であり得る。

いくつかの実施形態では、剤形は、単回用患者特異的注入バッグ中の注入用細胞懸濁液を含み、投与経路は静脈内であり、各単回用患者特異的バッグの全内容物は、重力又は蠕動ポンプによって３０分かけて注入される。一実施形態では、投与レジメンは、２．０×１０^６個の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／体重ｋｇ（±２０％）、最大用量２×１０^８個の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞（≧１００ｋｇの対象に対して）からなる単回注入である。いくつかの実施形態では、用量を構成するＴ細胞は、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞である。

いくつかの実施形態では、ＣＤ１９指向性Ｔ細胞免疫療法は、ＫＴＥ－Ｘ１９であり、これは、本出願の他の箇所に記載されるように調製される。一実施形態では、ＫＴＥ－Ｘ１９は、ＭＣＬ、ＡＬＬ、ＣＬＬ、ＳＬＬ、及び任意の他のＢ細胞悪性腫瘍の治療に使用され得る。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法は、本出願の方法のうちの１つによって調製される、Ａｘｉ－ｃｅｌ（商標）（ＹＥＳＣＡＲＴＡ（登録商標）、アキシカブタゲンシロロイセル）である。これらの方法の範囲内にある、ＣＡＲ Ｔ細胞の量、投薬レジメン、投与方法、対象、がんは、本出願の他の箇所に、単独で、又は別の化学療法剤と組み合わせて、前処置の有無にかかわらず、本出願の他の箇所に記載されている患者のいずれかに対して記載されている。

以下の実施例は、本出願の様々な態様を例示することを意図している。したがって、考察される特定の態様は、本出願の範囲に対する限定として解釈されるべきではない。例えば、以下の実施例は、抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を形質導入したＴ細胞を対象とするが、当業者は、本明細書に記載の方法が、任意のＣＡＲを形質導入した免疫細胞に適用され得ることを理解するであろう。当業者には、本出願の範囲から逸脱することなく様々な等価物、変更、及び修正を行うことができ、そのような同等の態様が本明細書に含まれることが理解されるであろう。更に、本出願で引用された全ての参考文献は、本明細書に完全に記載されているように、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

本明細書で言及される特許及び科学文献は、当業者に利用可能な知識を確立する。本明細書で引用される全ての米国特許及び公開又は未公開米国特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で引用される全ての公開外国特許及び特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で引用される全ての他の公開された参考文献、辞書、文書、原稿、ゲノムデータベース配列、及び科学文献は、参照により本明細書に組み込まれる。

本開示の他の特徴及び利点は、図面と、実施例を含む以下の詳細な説明から明らかになるであろう。

実施例１

この試験では、ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫｉ）を含む１～５種類の先行治療を受けたＲ／Ｒ ＭＣＬ患者を、自己抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞で治療した。

Ｒ／Ｒ ＭＣＬを有する適格患者（１８歳以上）は、ＥＣＯＧスコアが０～１であり、化学療法、抗ＣＤ２０抗体、及びＢＴＫ阻害剤（ＢＴＫｉ）を含む、５種類以下の先行治療を受けていた。患者は、白血球アフェレーシス及び化学療法（シクロホスファミド３００ｍｇ／ｍ^２／ｄ及びフルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２／ｄ、３日間）を受けた後、２×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの標的用量でＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔの注入を受けた。患者は、白血球アフェレーシス後かつ化学療法前に、デキサメタゾン、イブルチニブ、又はアカラブルチニブによるブリッジング療法を受けていてもよい。主要評価項目は、Ｌｕｇａｎｏ分類による客観的奏効率（ＯＲＲ［完全奏効（ＣＲ）＋部分奏効（ＰＲ）］）とした。中間有効性評価項目は、悪性リンパ腫に対する改訂ＩＷＧ応答基準を使用する、治験責任医師の評価とした。主要な副次的評価項目は、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、ＯＳ、有害事象（ＡＥ）の頻度、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞のレベル、及び血清中のサイトカインのレベルとした。

２８人の患者に、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を投与し、１年以上経過観察した（中央値１３．２ヶ月［範囲、１１．５～１８．５］）。４３パーセントの患者はＥＣＯＧスコアが１であり、２１％は芽球様型形態を有し、８２％はステージＩＶであり、５０％は中間／高リスクのＭＩＰＩを有し、８６％は中央値で４種類（範囲、１～５）の先行治療を受けており、及び５７％は直近の先行治療に対して抵抗性であった。２０／２８人の患者において、Ｋｉ－６７指数の中央値は３８％（範囲、５％～８０％）であった。８人の患者がブリッジング療法を受け、全員が、ブリッジング後に疾患を有していた。ＯＲＲは８６％（９５％ＣＩ、６７％～９６％）であり、ＣＲ率は５７％（９５％ＣＩ、３７％～７６％）であった。レスポンダーの７５％は応答が継続しており、治療された患者の６４％は奏功継続を有した。ＤＯＲ、ＰＦＳ、及びＯＳの１２ヶ月の推定値は、それぞれ８３％（９５％ＣＩ、６０％～９３％）、７１％（９５％ＣＩ、５０％～８４％）、８６％（９５％ＣＩ、６６％～９４％）であり、中央値は達成しなかった。グレード≧３のＡＥ（患者の２０％以上）は、貧血（５４％）、血小板数減少（３９％）、好中球減少症（３６％）、好中球数減少（３２％）、白血球数減少（２９％）、脳症（２５％）、及び高血圧（２１％）であった。Ｌｅｅ ＤＷ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ ２０１４；１２４：１８８によって評価したグレード３／４のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は、患者の１８％で報告され、低血圧（１４％）、低酸素症（１４％）、及び発熱（１１％）として発現した。グレード３／４の神経学的事象（ＮＥ）は、患者の４６％で報告され、脳症（２５％）、錯乱状態（１４％）、及び失語症（１１％）を含んでいた。グレード５のＣＲＳ又はＮＥは発生しなかった。全てのＣＲＳ事象及びほとんどのＮＥ（１５／１７人の患者）は可逆的であった。ＣＲＳの発症及び回復までの期間の中央値は、それぞれ２日（範囲、１～７）、及び１３日（範囲、４～６０）であった。ＮＥの発症までの期間の中央値は６日（範囲、１～１５）であり、回復までの期間の中央値は２０日（範囲、９～９９）であった。ピーク及び曲線下面積によって測定したＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値は、それぞれ、９９細胞／μＬ（範囲、０．４～２５８９）及び１５４２細胞／μＬ（範囲、５．５～２７２３９）であった。ピークＣＡＲ Ｔ細胞増殖は、８～１５日目に観察され、経時的に減少した。
実施例２

この実施例により、上記の試験に対する追加の解析を提供した。適格患者は、１８歳以上で、サイクリンＤ１の過剰発現又はｔ（１１；１４）の存在のいずれかの証拠によって病理学的に確認されたＭＣＬを有し、ＭＣＬに対する１～５種類の先行レジメンに対して再発性／難治性であった。先行治療は、アントラサイクリン又はベンダムスチン含有化学療法、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びイブルチニブ又はアカラブルチニブを含んでいなければならない。全ての患者は、先行してＢＴＫｉを受けた。患者は、先行してＢＴＫｉ療法を受けていなければならないが、試験エントリー前の直近の治療法である必要はなく、患者は、ＢＴＫｉ療法に対して抵抗性である必要はなかった。適格患者は、絶対リンパ球数≧１００／μＬであった。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ注入の６週間以内に自家ＳＣＴを受けた患者、又はこれまでにＣＤ１９標的療法若しくは同種ＳＣＴを受けた患者は除外した。

追加の組み入れ基準には以下を含めた。少なくとも１つの測定可能な病変。以前に照射されている病変は、放射線療法の完了後に増悪の証拠がある場合にのみ測定可能と見なされた；唯一の測定可能な疾患がリンパ節疾患である場合、少なくとも１つのリンパ節は、２ｃｍ以上であるべきである；中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫の証拠を示さない脳の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）；全身性阻害性／刺激性免疫チェックポイント療法を除いて、患者が白血球アフェレーシスを予定している時点で、任意の先行する全身療法又はＢＴＫｉ（イブルチニブ又はアカラブルチニブ）から、少なくとも２週間又は５半減期のいずれか短い方を経過している必要がある；患者が白血球アフェレーシスを予定している時点で、任意の先行する全身性阻害性／刺激性免疫チェックポイント分子療法から、少なくとも３半減期を経過している必要がある（例えば、イピリムマブ、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、ＯＸ４０アゴニスト、４－１ＢＢアゴニスト）；先行治療による毒性は安定しており、グレード１以下に回復している必要がある（臨床的に関連しない毒性、例えば、脱毛症を除く）；Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス０又は１；絶対好中球数（ＡＮＣ）≧１０００／μＬ；血小板数≧７５０００／μＬ；絶対リンパ球数≧１００／μＬ；十分な腎、肝、肺、及び心機能は次のように定義される。クレアチニンクリアランス（コッククロフト・ゴールト式による推定）≧６０ｃｃ／分；血清アラニンアミノトランスフェラーゼ／アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ≦２．５正常上限（ＵＬＮ）；総ビリルビン≦１．５ｍｇ／ｄＬ、ジルベール症候群患者を除く；心駆出率≧５０％、心エコー図（ＥＣＨＯ）によって決定される心膜液貯留の証拠なし、臨床的に関連する心電図（ＥＣＧ）所見なし；臨床的に関連する胸水なし；室内空気中でのベースライン酸素飽和度＞９２％；妊娠可能な女性は、尿又は血清妊娠検査陰性でなければならない。不妊手術を受けた、又は少なくとも２年間の閉経後の女性は、妊娠可能性がないと見なした。

追加の除外基準には、以下を含めた。少なくとも３年の無病期間がない限り、非黒色腫性皮膚がん又は上皮内がん（例えば、子宮頸部、膀胱、乳房）以外の悪性腫瘍の既往歴；同種幹細胞移植の受療歴；先行するＣＡＲ療法又は他の遺伝子改変Ｔ細胞療法；アミノグリコシドに起因する重度の即時型過敏反応の既往歴；管理されていないか、又は管理のための静脈内（ＩＶ）抗菌剤を必要とする真菌、細菌、ウイルス、又は他の感染の存在。単純な尿路感染症（ＵＴＩ）及び合併症のない細菌性咽頭炎は、積極的治療に応答した場合は、メディカルモニターとの相談後に許可した；ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染又は急性若しくは慢性活動性Ｂ型肝炎又はＣ型肝炎感染の既往歴。肝炎感染の既往歴がある患者は、標準的な血清学的及び遺伝的検査によって判定されるとき、感染が除去されている必要がある；留置ライン又はドレインの存在（例えば、経皮的腎瘻管、留置フォーリーカテーテル、胆道ドレイン、又は胸膜／腹膜／心膜カテーテル）。Ｏｍｍａｙａリザーバ及び専用の中心静脈アクセスカテーテル、例えばＰｏｒｔ－ａ－Ｃａｔｈ又はＨｉｃｋｍａｎカテーテルは許可された。検出可能な脳脊髄液悪性細胞又は脳転移を有する患者、又はＣＮＳリンパ腫、脳脊髄液悪性細胞、若しくは脳転移の既往歴；ＣＮＳ障害、例えば、けいれん障害、脳血管虚血／出血、認知症、小脳疾患、脳浮腫、可逆性白質脳症、又はＣＮＳが関与する任意の自己免疫疾患の既往歴又は存在；登録１２ヶ月以内の心筋梗塞、心臓血管形成術又はステント留置、不安定狭心症、活動性不整脈、又は他の臨床的に関連する心疾患の既往歴；心房又は心室リンパ腫の関与がある患者；登録直近の６ヶ月以内の症候性深部静脈血栓症又は肺塞栓症の既往歴；進行中又は差し迫ったがん救急状態（例えば、腫瘍量効果、腫瘍溶解症候群）に起因する緊急治療が必要な可能性；原発性免疫不全症；試験治療の安全性又は有効性の評価に干渉する可能性が高いあらゆる医学的状態；この試験で使用される薬剤のいずれかに対する重度の即時型アレルギー反応の既往歴；計画された前処置レジメンの開始前６週間以内の生ワクチン；胎児又は乳児に対する予備化学療法の潜在的悪影響のため、妊娠又は授乳した妊娠の可能性がある女性；同意取得からＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療の完了後６ヶ月まで、避妊を実施する意思がない男性及び女性患者；治験責任医師の判断において、経過観察時の通院を含む、全てのプロトコルで必要とされる試験時の通院若しくは手順を完了する、又は参加の試験要件に準拠する可能性が低い患者；並びに、直近２年以内に、末端器官損傷をもたらすか、又は全身性免疫抑制／全身性疾患修飾剤を必要とするようになる自己免疫疾患（例えば、クローン病、関節リウマチ、全身紅はん性）の既往歴。

全ての患者は、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療剤の製造用の細胞を得るために白血球アフェレーシスを受けた。製造プロセスは、ＣＤ４^＋／ＣＤ８^＋細胞の正の濃縮によって循環リンパ腫細胞を除去するためのアキシカブタゲンシロロイセルに対して改変した。フルダラビン（３０ｍｇ／ｍ^２／日）及びシクロホスファミド（５００ｍｇ／ｍ^２／日）による前処置化学療法を、－５日目、－４日目、及び－３日目に投与した後、０日目に、２×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇのＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を単回静脈内注入した。用量は、大細胞型Ｂ細胞リンパ腫に対するアキシカブタゲンシロロイセルと、急性リンパ芽球性白血病に対するＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の試験から情報を得た。Ｎｅｅｌａｐｕ ＳＳ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１７；３７７：２５３１、Ｌｏｃｋｅ ＦＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ ２０１７；２５：２８５、Ｓｈａｈ ＢＤ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２０１９；３７：（ｓｕｐｐｌ；ａｂｓｔｒ ７００６）、及びＬｅｅ ＤＷ ｅｔ ａｌ．Ａｎｎａｌｓ ｏｆ ｏｎｃｏｌｏｇｙ：ｏｆｆｉｃｉａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ／ ＥＳＭＯ ２０１７；２８：１００８ＰＤ、これらの全てはその全体を参照することにより本明細書に組み込まれる。白血球アフェレーシス後かつ前処置の前に、高い疾患負荷を有する患者は、治験責任医師の裁量により、デキサメタゾン又は当量のコルチコステロイド、イブルチニブ、又はアカラブルチニブによるブリッジング療法を受けることが可能であり、その後、繰り返しのベースラインとなる陽電子放射断層撮影・コンピュータ断層撮影（ＰＥＴ－ＣＴ）スキャンを実施した。ブリッジング療法の目標は、治癒的ではないが、患者を製造期間の間安定に保つことであった。７日目まで、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後の入院を必要とした。

主要評価項目は、Ｌｕｇａｎｏ分類を使用して独立放射線審査委員会（ＩＲＲＣ）によって評価される、客観的奏効率（ＯＲＲ［完全奏効（ＣＲ）＋部分奏効］（ＰＲ））とした。Ｃｈｅｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１４；３２：３０５９－６８．ＣＲを確認するために、ＰＥＴ－ＣＴに加えて骨髄評価が必要であった。副次的評価項目は、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、ＯＳ、Ｃｈｅｓｏｎ，ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２００７；２５：５７９－８６による治験責任医師が評価したＯＲＲ、有害事象（ＡＥ）の発生率、血中のＣＡＲ Ｔ細胞レベル及び血清中のサイトカインレベル、並びに、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ－５ Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ５ ｌｅｖｅｌｓ ｐｅｒ ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ（ＥＱ－５Ｄ－５Ｌ）における経時的なスコアの変化を含めた。ＣＡＲ Ｔ細胞の存在、増殖、及び持続性及び血清サイトカイン、並びにそれらの臨床転帰との関連は、以前に報告されているように評価した。Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ＪＮ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１７；３５：１８０３－１３、Ｌｏｃｋｅ ＦＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ ２０１７；２５：２８５－９５、その両方が参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

ベースラインから６ヶ月目までのＥＱ－５Ｄ－５Ｌスコアの変化を評価した。サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は、その全体が参照することによって本明細書に組み込まれる、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ ２０１４；１２４：１８８に従ってグレード付けした。神経学的事象及びＣＲＳの症状を含むＡＥの重症度は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓのバージョン４．０３を使用してグレード付けした。微小残存病変（ＭＲＤ、感度１０^－５）は、ベースライン及び１、３、及び６か月目に凍結保存された末梢血単核細胞において評価された探索的分析であり、ｃｌｏｎｏＳＥＱアッセイ（Ａｄａｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）を用いる次世代配列決定によって解析した。

全ての患者について、疾患特異的部位の陽電子放射断層撮影・コンピュータ断層撮影（ＰＥＴ－ＣＴ）スキャンは、ベースライン、注入後４週間目、及び治療後期間中定期的に必要であった。骨髄液／生検は、ベースラインにおいて骨髄疾患が関与する患者、及びベースラインにおいて骨髄関与が確定できない患者において、完全奏功を確認するために必要とし、又はベースラインの骨髄生検が行われなかった場合、結果は利用できなかった。ＣＮＳ悪性腫瘍の症状を有する患者は、脳脊髄液（ＣＳＦ）の検査のため、スクリーニングにおいて腰椎穿刺を受けた。腰椎穿刺はまた、適用可能である場合、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入後に、グレード≧２の神経毒性を新たに発症した患者で実施した。更に、同意取得フォームの任意箇所に署名した患者について、ＣＳＦ採取のための腰椎穿刺を、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入前のベースライン及び抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入後（５日目±３日）に実施し、試料を中央実験室に提出して、サイトカインレベルの変化について分析した。

６０人の患者が登録され、治療され、プロトコルに要求されるように４週目の疾患評価後６ヶ月間の評価を行った後、有効性の主要解析を行った。この解析は、５０％の真の奏効率を有する実薬療法と２５％以下の奏効率を有する療法とを区別するために、９６％以上の検出力を有し、片側α水準を０．０２５とした。直接二項検定を使用して、ＯＲＲを解析した。カプランマイヤー推定値を使用して評価する際、全ての有効性評価項目、例えば事象までの時間の評価項目は、上記の６０人の有効性評価可能患者において解析した。安全性の解析は、全ての治療された患者において実施した（ｎ＝６８）。転帰とＣＡＲ Ｔ細胞及びサイトカインレベルとの間の関連性を、ウィルコクソン順位和検定を使用して測定し、Ｐ値は、Ｈｏｌｍ法を使用して調整した。最大の解析対象集団（Ｎ＝７４）：全ての登録され／白血球アフェレーシスを行った患者からなり、患者の内訳の要約に使用した。安全性解析対象集団（ｎ＝６８）：任意の用量の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞で治療された全ての患者として定義される。この解析対象集団を、人口統計学的特性及びベースライン特性の要約、並びに安全性の全解析に使用した。推理解析対象（有効性評価可能）集団（ｎ＝６０）：最初の６０例のＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療患者からなる。この解析対象集団を、主要解析、並びに全ての他の有効性解析の時点での、主要評価項目である客観的奏効率の仮説検定に使用した。主要評価項目の仮説は、中央評価を用いるＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞に対するＯＲＲが、直接二項検定を使用し、片側有意水準０．０２５で、事前に設定された歴史的対照群の率である２５％よりも大きいこととした。この仮説について、推理解析対象集団において検定を行った。ＯＲＲの歴史的対照群の率は、試験プロトコル作成時に公開されていた２つの後ろ向き試験に基づいて、事前に決定した。これらの２つの試験では、ＢＴＫｉによる治療（試験適格性のために必要な先行治療）後に増悪した再発性／難治性ＭＣＬの患者において、サルベージ療法後の転帰を評価した。これらの試験は、ＢＴＫｉを受ける前に３種類以上の先行治療を受けた再発性／難治性ＭＣＬの患者が、約２５％のサルベージ療法に対するＯＲＲを有することを示した。Ｗａｎｇ Ｍ ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１８；３９１：６５９、Ｍａｒｔｉｎ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ ２０１６；１２７：１５５９、その両方が参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

７４人の患者が登録され、７１人についてＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を製造し、６８人に投与した。６０人の患者が治療された後に行われた主要有効性解析により、９３％のＯＲＲ（６７％の完全奏効）が示された。１２．３ヶ月（範囲、７．０～３２．３）の経過観察の中央値において、５７％の患者が寛解したままであり、奏効期間の中央値に達しなかった。推定された１２ヶ月の無増悪生存期間及び全生存率は、それぞれ６１％及び８３％であった。一般的なグレード≧３の有害事象は、血球減少（９４％）及び感染症（３２％）であった。グレード≧３のサイトカイン放出症候群及び神経学的事象は、それぞれ、患者の１５％及び３１％で発生し、致死的なものはなかった。グレード５の感染症の有害事象が２件発生した。

ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を７１人（９６％）の患者について製造し、６８人（９２％）に投与した。白血球アフェレーシスからＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を試験部位に送達するまでの時間の中央値は、１６日（範囲、１１～１２８）であった。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を製造した１人の患者は、白血球アフェレーシス後の急速なＰＤのためベンダムスチン－リツキシマブで治療され、それによってその患者は試験に不適格となった。後にＰＤに進行した後、患者の元の製品を、初回白血球アフェレーシス日の１２７日後に製造施設から出荷し、１日後に治療部位に到達させた。製造について問題があった３人の患者は、ＡＥ（ｎ＝１、深部静脈血栓症）、進行性疾患による死亡（ＰＤ、ｎ＝１）、又は同意撤回（ｎ＝１）によって、追加のアフェレーシスに進まなかった。更に２人の患者は、ＰＤによる死亡のため前処置化学療法前に中止した。前処置化学療法を受けた後、試験除外基準である心房細動が継続している１人の患者は、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入に不適格であると見なされた。有効性評価可能患者の経過観察の中央値は１２．３ヶ月（範囲、７．０～３２．３）であり、２８人の患者は、２４ヶ月以上の経過観察期間であった。

年齢の中央値は６５歳（範囲、３８～７９）であり、５７人患者（８４％）が男性であった。（表１）６５％は、ＥＣＯＧパフォーマンスステータススコアが０であり、３５％は１であった。患者は、ステージＩＶ疾患（８５％）、芽球様型又は多形性型の形態（３１％）、Ｋｉ－６７増殖指数≧３０％（４０／４９［８２％］）（Ｗａｎｇ ＭＬ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２０１６；１７：４８）、及びＴＰ５３変異（６／３６［１７％］）などの、ベースラインにおいて高リスクの特徴を有していた。患者の８１パーセントは、３種類以上の先行治療を受けていた（中央値、３［範囲１～５］）。

^＊骨髄及び脾臓の関与を除外する。^†診断時。^††１人の患者は、治験責任医師により診断時にκ軽鎖制限ＭＣＬを有すると報告された。形態は、１０人の患者に対しては不明であると報告された。^§Ｋｉ－６７データは、診断時において４９人の患者について利用可能であった。^¶継続している完全奏効中に生じる導入＋地固め／維持及び／又は全ての治療を、１種類のレジメンとして数えた。ＢＴＫｉ、ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤；ＥＣＯＧ、Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ；ＭＣＬ、マントル細胞リンパ腫；ＭＩＰＩ、マントル細胞リンパ腫国際予後指標；ＳＣＴ、幹細胞移植。

全ての患者がＢＴＫｉ（イブルチニブｎ＝５８、アカラブルチニブｎ＝１６、両方ｎ＝６）で増悪しており、４３％は、先行自家ＳＣＴを受けていた（表２）。ブリッジングを除く最後のＢＴＫｉ療法の終了時からＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入までの時間の中央値は、８８日（範囲、２５～１０４７）であった。患者の４０パーセントは、直近の治療に対して抵抗性であり、直近の治療後に増悪が確認された３人のイブルチニブ不耐性患者を含む。２５人の患者（３７％）は、イブルチニブ（ｎ＝１４）、アカラブルチニブ（ｎ＝５）、デキサメタゾン（ｎ＝１２）、及び／又はメチルプレドニゾロン（ｎ＝２）によるブリッジング療法を受けた。ブリッジング後のスキャンにより、ほとんどの患者がスクリーニング時の中央値よりも高い腫瘍量を有していたことが示された。

ＢＴＫｉ、ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤。

最小経過観察期間７ヶ月において、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔで治療されたプロトコルで特定する６０人の患者におけるＩＲＲＣ評価によるＯＲＲは、９３％（９５％ＣＩ、８４～９８）であり、ＣＲ率は６７％、ＰＲ率は２７％であった。ＩＲＲＣ評価及び治験責任医師評価によるＯＲＲ間には、高い一致率（９５％）が見られた（表３）。

表３．Ｃｈｅｓｏｎ ＢＤ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２００７；２５：５７による治験責任医師評価に基づく有効性評価可能患者、及び、Ｌｕｇａｎｏ分類（２０１４）に基づくＩＲＲＣレビューによる治療意図患者における応答。

^＊解析時に評価なし。^†一致率は、ＩＲＲＣ評価による読み取り値が治験責任医師評価による読み取り値と一致する被験者のパーセンテージである。ＣＲ、完全奏功；ＩＲＲＣ、独立放射線審査委員会；Ｎ／Ａ、該当せず；ＯＲＲ、客観的奏効率。

全ての登録患者（ｎ＝７４）について、ＩＲＲＣ評価によるＯＲＲは、８５％（９５％ＣＩ、７５～９２）であり、ＣＲ率は５９％であった。ＯＲＲは、年齢、再発性／難治性サブグループ、先行治療の回数、ＭＣＬ形態、疾患ステージ、節外性病変、骨髄の関与、簡略化ＭＩＰＩ、ＣＤ１９陽性、腫瘍量、血清乳酸デヒドロゲナーゼレベル、ＴＰ５３変異状態、Ｋｉ－６７指数、ＡＥ管理のためのトシリズマブ又はステロイドの使用、及びブリッジング療法の使用を含む、主要なサブグループにわたって一貫していた。初期応答までの時間の中央値は、１．０ヶ月（範囲、０．８～３．１）であり、ＣＲまでの時間の中央値は、３．０ヶ月（範囲、０．９～９．３）であった。最初にＰＲ又はＳＤを達成した４２人の患者のうち、２４人の患者（５７％）は、２１人の初期応答ＰＲと３人の初期応答ＳＤを含み、続いて初期応答後、２．２ヶ月の中央値（範囲、１．８～８．３）の後、ＣＲに変換し、これら２４人の患者のうち１８人は寛解したままであった。ＭＲＤ分析を２９／６０人の患者（４８％）で行ったところ、２４／２９人の患者（８３％［１９ ＣＲ、５ ＰＲ）は４週目にＭＲＤ陰性であり、利用可能なデータを有する１５／１９人の患者（７９％）は、６ヶ月目においてＭＲＤ陰性を維持していた。ＭＲＤは、較正用のホルマリン固定パラフィン包埋腫瘍生検試料が利用できなかったため、全ての患者において評価することができず、較正はこの手法によって必要とされ、血液中で経時的に追跡される優勢な再編成されたＩｇＨ（ＶＤＪ又はＤＪ）、ＩｇＫ、又はＩｇＬ受容体遺伝子配列を確立するために使用された。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞に応答した後に増悪した２人の患者は、初回注入の約１年及び２．６年後に２回目の注入を受け、これらの患者の解析は実施中である。

ＤＯＲの中央値は、１２．３ヶ月の経過観察期間の中央値（中央値（９５％ＣＩ））後に到達しておらず、未到達であった（８．６、ＮＥ）。無増悪生存期間の中央値（９５％ＣＩ）は到達しなかった（９．２、ＮＥ）。全生存期間の中央値（９５％ＣＩ）もまた、到達しなかった（２４．０、ＮＥ）。全ての患者の５７パーセント及び７８％のＣＲ患者は、寛解が継続している。しかしながら、治療された最初の２８人の患者は、経過観察期間の中央値が２７．０ヶ月（範囲、２５．３～３２．３）であり、４３％は追加の治療なしで寛解が続いている。継続中の奏効率は、年齢、ＭＣＬ形態、再発性／難治性サブグループ、Ｋｉ－６７指数、疾患ステージ、節外性病変、骨髄の関与、簡略化ＭＩＰＩ、ＴＰ５３変異、ＣＤ１９陽性、ブリッジング療法、腫瘍量、及びトシリズマブ又はステロイドの使用を含む、主要な共変量にわたって一貫していた。ベースラインにおいてＣＤ１９腫瘍を有していた３人の患者はＣＲを達成し、データカットオフ時点で継続して応答し続けている。ＰＦＳ及びＯＳの中央値は到達せず、１２ヶ月の推定率は、それぞれ６１％（９５％ＣＩ、４５～７４）、８３％（９５％ＣＩ、７１～９１）であった。サンプルサイズが限定されているものの、ＰＦＳのサブグループ解析により、６ヶ月のＰＦＳ率が、芽球様型形態又は多形性型形態、ＴＰ５３変異、又はＫｉ－６７指数≧５０％の患者間で一貫していたことが示された。この解析時において、全患者の７６％が生存中である。応答を有した患者のうち、１４人はＰＤであった。ＰＲであった１人の患者は、同種ＳＣＴを受けた。

この試験は、再発性／難治性ＭＣＬを有するプロトコルで特定した６０人の患者において９３％のＯＲＲを示し、その全てがＢＴＫｉ療法後に再発したか、又はそれに対して抵抗性であった。このＯＲＲは、単回注入後の６７％のＣＲ率を含んでいた。１２．３ヶ月の平均経過観察期間の後、ＤＯＲの中央値には到達せず、全ての患者の５７％及びＣＲ患者の７８％が応答したままであった。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞で治療された２８人の患者は、２７ヶ月（範囲２５．３～３２．３）とより長い経過観察期間の中央値を有し、４３％は追加の療法なしに寛解が継続していた。応答継続を含む奏効率は、高リスク特徴を有する患者を含む主要なサブグループ間で一般に類似していた。Ｋｉ－６７≧５０％、並びに芽球様型／多形性型形態、又はＴＰ５３突然変異を有する患者は、全体集団と同様の高いＯＲＲ及び６ヶ月のＰＦＳ率を有し、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療は、典型的には予後が悪い患者に有益であることを示唆している。

ＣＡＲ Ｔ細胞注入後に応答した全ての患者は、Ｔ細胞増殖を達成した。この増殖は、非応答患者では観察されず、この応答が、十分なＣＡＲ Ｔ細胞増殖に関連し得ることを示唆している。従来の試験と同様に、ＣＡＲ Ｔ細胞レベルは、最初の２８日間においてＯＲＲと相関し、ＭＲＤ陰性患者では陽性患者と比較して、８０倍超高いピーク／ＡＵＣ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルによって示されるように、より高い増殖がより良好でおそらくより深い応答をもたらすことを示唆している。奏効率もまた、ブリッジング療法の投与の有無に関係なく同様であり、ブリッジング後にスキャンを受けたほとんどの患者（８７％）は、ブリッジング前スキャンと比較してＳＰＤの増加を有した。

全ての治療された患者は、あらゆるグレードの１つ以上のＡＥを経験し、９９％においてグレード３以上のＡＥであった（表２）。あらゆるグレードの最も一般的なＡＥは、発熱（９４％）、好中球減少症（８７％）、血小板減少症（７４％）、及び貧血（６８％）であった。最も一般的なグレード≧３のＡＥは、好中球減少症（８５％）、血小板減少症（５１％）、貧血（５０％）、及び感染症（３２％）であった。患者の２６パーセントは、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の９０日超後に存在する、好中球減少症（１６％）、血小板減少症（１６％）、及び貧血（１２％）を含むグレード≧３の細胞減少症を有していた。ＣＲＳは、患者の９１％で発生した（表４）。ＣＲＳによる患者の死亡はなかった。ほとんどの場合は、グレード１／２（７６％）であり、グレード≧３のＣＲＳは、患者の１５％で発生した。最も一般的なグレード≧３のＣＲＳ症状は、低血圧（２２％）、低酸素症（１８％）、及び発熱（１１％）であった。ＣＲＳ管理において、患者の５９％は、トシリズマブを投与され、２２％はステロイド、及び１６％は昇圧剤を必要とした。注入後、あらゆるグレード及びグレード≧３のＣＲＳの発症までの時間の中央値は、それぞれ、２日（範囲、１～１３）、４日（範囲、１～９）であり、全ての事象が、中央値１１日以内に解消された。

^＊患者の３０％以上で発症した有害事象、及び患者の１５％以上で発症したＣＲＳ及び神経学的事象の症状が含まれる。^†ＣＲＳの行のパーセンテージは、ＣＲＳを経験した６２人の患者について計算した。

患者の６３％が、ＮＥを経験した（表４）。ＮＥ由来の患者死亡はなかった。グレード１／２のＮＥは、患者の３２％で発症し、グレード≧３のＮＥは３１％であった。一般的なグレード≧３のＮＥは、脳症（１９％）、錯乱状態（１２％）、及び失語症（４％）であった。１人の患者は、グレード４の脳浮腫を発症し、脳室開窓術を含む積極的な集学的治療で完全に回復した。トシリズマブ及びステロイドを使用して、それぞれ患者の２６％及び３８％のＮＥを治療した。あらゆるグレード及びグレード≧３のＮＥの発症までの期間の中央値は、それぞれ７日（範囲、１～３２）、及び８日（範囲、５～２４）であった。ＮＥの継続期間中央値は１２日であり、事象は３７／４３人の患者（８６％）において完全に解消した。この解析時点で、４人の患者の事象は進行中であり、グレード１の振戦（ｎ＝３）、グレード２の集中力障害（ｎ＝１）、及びグレード１の異常感覚（ｎ＝１）を含む。重篤なＡＥは、患者の６８％で発生した（表５）。

３２パーセントの患者は、グレード≧３の感染症を経験した。最も一般的であるのは、肺炎（９％）であった（表６）。

^＊１人の患者は、ブドウ球菌性菌血症により死亡した。１人の患者は器質化肺炎により死亡した（感染状態で急性腎障害を発症し、剖検において、器質化肺炎に加えてこれまで診断されていない肺塞栓症を有することが見出された）。

グレード２のサイトメガロウイルス感染が２例に発症した（３％）。グレード３の低ガンマグロブリン血症及びグレード３の腫瘍溶解症候群が、それぞれ１名の患者で発症した（１％）。２２人の患者（３２％）は、静脈内免疫グロブリン療法を受けた。複製可能なレトロウイルス、ＥＢＶ関連リンパ球増殖、血球貪食性リンパ組織球増加症、又はＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞に関連する二次がんの症例は報告されなかった。ＥＱ－５Ｄスコアにより、４週目の患者報告健康関連の生活の質においてベースラインから減少したことが明らかになったが、運動性、自立性、日常活動、及び全体的な健康状態の改善（ＥＱ－５Ｄ視覚的アナログスケール）は３ヶ月目までに見られ、６ヶ月目までにほとんどの患者において、全体的な健康状態がベースラインに、又はより良好な状態に戻った（表７）。

^＊ＥＱ－５Ｄ視覚的アナログスケール（ＶＡＳ）は、０～１００のスケールで全体的な健康状態を評価し、スコアが高いほど、健康状態が良好であることを示す。ＥＱ－５Ｄ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ－５ Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎｓ；Ｎ／Ａ、該当せず；ＳＤ、標準偏差

ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を投与された１６人の患者（２４％）が、主にＰＤにより死亡した（ｎ＝１４［２１％］）。２人の患者はグレード５のＡＥ（３％）を有し、前処置化学療法に関連する器質化肺炎の１人の患者、及び前処置化学療法及びＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療に関連するブドウ球菌性菌血症の１人の患者を含む。

ピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルまでの時間の中央値は、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入の１５日後（範囲、８～３１）であり、正常なＢ細胞レベル中央値の存在下で、データカットオフの時点で評価可能な試料を有する一部の患者（６／１０［６０％］）において、２４ヶ月目に細胞は依然として検出可能であった。ｑＰＣＲによって測定される経時的な血液中ＣＡＲ Ｔ細胞持続性は、奏功継続している患者及び再発した患者において経時的な低下を示した。

急速な増殖、ベースラインへの回復、及び経時的なクリアランスは、ＣＤ２８及びＣＤ３ζ共刺激ドメインを有する抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の既知の作用機序と一致する。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療に応答しなかった４人の患者は全て、ベースラインにおいて検出可能なＢ細胞を有し、試験の任意の時点においてＢ細胞無形成症は見られなかった。ベースラインの腫瘍量との関連性は見られなかったが、増殖は応答に関連し（Ｐ＝０．００３６）、曲線下面積（ＡＵＣ）及びピークは、ノンレスポンダーに対してレスポンダーで２００倍超高く、４週目におけるＭＲＤ陰性対陽性患者で同様の傾向を有した。ＣＲＳ及びＮＥの両方について、増殖は、グレード≦２の事象を有する患者に対してグレード≧３の患者でより高く、最大ピーク及びＡＵＣは、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後にトシリズマブ±ステロイドを受けた患者において認められた。評価されたサイトカインのピークまでの時間の中央値は８日であり、ほとんどが２８日目までにベースラインレベルまで回復した。血清中の顆粒球マクロファージコロニー刺激因子及びインターロイキン（ＩＬ）－６は、グレード≧３のＣＲＳ及びＮＥに関連していた。血清フェリチンは、グレード≧３のＣＲＳでのみ関連していたが、血清ＩＬ－２及びインターフェロンγは、グレード≧３のＮＥでのみ関連していた。更に、脳脊髄液サイトカイン分析により、グレード≧３のＮＥの患者において、より高いレベルのＣ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び血管細胞接着分子１が明らかになった。抗ＣＡＲ抗体の誘導は、全ての患者において観察されなかった。

グレード≧３のＣＲＳ及びＮＥの割合は、中悪性度ＮＨＬにおける抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法で以前に報告されたものと同様であった。Ｎｅｅｌａｐｕ ＳＳ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１７；３７７：２５３１、Ｓｃｈｕｓｔｅｒ ＳＪ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１９；３８０：４５。ＣＲＳ又はＮＥに起因する死亡はなく、ほとんどの症状は治療の早期に発症し、一般に、日常生活動作を損なう長期臨床的続発症は伴わず、可逆的であった。ピーク血清サイトカインとグレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３の神経学的事象との間で観察された関連性は、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞の上昇及びピークレベルに相応することが観察された場合、これらの毒性におけるＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の役割を示している。ＣＡＲ及び骨髄細胞関連血清サイトカイン、ケモカイン、及びエフェクター分子のピークレベルの毒性との関連性は、ＮＨＬにおいて同様のＣＡＲ構築物を使用したこれまで公開されているデータと一致する^{１０、１３}。１例のグレード４の脳浮腫が発症したが、患者は完全に回復し、２４ヶ月の経過観察においてＣＲが継続しており、未回復の神経学的続発症はなかった。患者報告アウトカムは同様に、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法の後に長期の生活の質障害がないことを示唆している。
実施例３

この実施例により、上記の試験に対する追加の解析を提供した。Ｒ／Ｒ ＭＣＬを有する適格患者（１８歳以上）は、ＥＣＯＧスコアが０～１であり、化学療法、抗ＣＤ２０抗体、及びＢＴＫｉを含む、５種類以下の先行治療を受けていた。患者は、白血球アフェレーシス及び前処置化学療法（シクロホスファミド３００ｍｇ／ｍ２／ｄ及びフルダラビン３０ｍｇ／ｍ２／ｄ、－５日目、－４日目、－３日目の３日間）を受けた後、０日目の単回ＩＶ注入により、２×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの標的用量でＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔの単回注入を受けた。ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物は、ＣＤ３ζＴ細胞活性化ドメイン及びＣＤ２８シグナル伝達ドメインを含む。製造プロセスにより、白血球アフェレーシス産物から循環ＣＤ１９発現白血病細胞を除去した。Ｓａｂａｔｉｎｏ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ ２０１６；１２８：１２２７。

一部の患者は、白血球アフェレーシス後に投与される、デキサメタゾン（２０～４０ｍｇ又は当量のＰＯ又はＩＶ、１～４日間１日１回）、イブルチニブ（５６０ｍｇ ＰＯ、１日１回）、又はアカラブルチニブ（１００ｍｇ ＰＯ、１日２回）からなるブリッジング両方を受け、前処置化学療法の開始前５日以内に完了させ、ブリッジング後にＰＥＴ－ＣＴを必要とした。主要評価項目は、客観的奏効率（ＯＲＲ［完全奏効（ＣＲ）＋部分奏効］）とした。主要な副次的評価項目は、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、ＯＳ、有害事象（ＡＥ）の頻度、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞のレベル、及び血清中のサイトカインのレベルとした。有効性及び安全性解析には、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法を受けた全ての患者を含めた。

主要な組み入れ基準は以下の通りとした。直近のレジメン後の疾患増悪、又は直近のレジメンに対するＣＲ若しくはＰＲの未達として定義されるＲ／Ｒ ＭＣＬ；アントラサイクリン又はベンダムスチン含有化学療法、及び抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びイブルチニブ又はアカラブルチニブを含んでいなければならない、１～５種類の先行治療；１つ以上の測定可能な病変；１８歳以上；ＥＣＯＧが０又は１；並びに、十分な骨髄、腎、肝、肺、及び心機能。主要な除外基準は以下の通りとした。先行する自家幹細胞移植（同種ＳＣＴ）；先行するＣＤ１９標的化療法；先行するＣＡＲ－Ｔ細胞療法；臨床的に関連する感染症；及び、ＭＣＬによるＣＮＳ関与又は他のＣＮＳ障害の既往又は現症。

合計６８人の患者がＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法を受けた。本明細書に示されるのは、更新された安全性（６８人の患者）及び有効性（６０人の患者）の結果であり、経過観察の中央値は１２．３ヶ月［範囲７．０～３２．３］である。合計２８人の患者（４７％）は、≧２４ヶ月の経過観察期間を有した。初期応答までの時間の中央値は、１．０ヶ月［範囲０．８～３．１］であり、完全奏効までは３．０ヶ月［範囲０．９～９．３］であった。ＰＲ／ＳＤからＣＲに変換した合計２４人の患者（４０％）では、２１人（３５％）がＰＲからＣＲに変換し、３人の患者（５％）がＳＤからＣＲに変換した。

年齢の中央値は６５歳（範囲、３８～７９）であり、３９人患者（５７％）が男性であった。患者の１００パーセントは、ＥＣＯＧスコアが０／１であり、２５％が芽球様型形態を有し、８５％がステージＩＶ疾患を有し、５６％は中等度／高リスクＭＩＰＩを有し、８１％は３種類以上の先行治療を受けており、中央値は３（範囲、１～５）種類の先行治療であり、９９％は先行アントラサイクリン又はベンダムスチンを投与され、１００％は先行抗ＣＤ２０モノクローナル抗体を受けており、１００％は先行ＢＴＫｉ（イブルチニブ８５％、アカラブルチニブ２４％、及び両方９％）を受けていた。患者のうち４３人（４３％）は、自家ＳＣＴ後に再発し、５６％はイブルチニブに対して抵抗性であり、１２％はアカラブルチニブに対して抵抗性であった。利用可能なデータを有する患者の３４／４９人では、Ｋｉ－６７指数は≧５０％であった。患者のうち２５人（３７％）は、ブリッジング療法（イブルチニブ２１％、アカラブルチニブ７％、デキサメタゾン１８％、メチルプレドニゾロン３％、両ＢＴＫｉ及びステロイド９％、イブルチニブ及びステロイド６％、アカラブルチニブ及びステロイド３％）を受け、２３／２５人の患者は、ブリッジング後にＰＥＴ－ＣＴを受け手、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入前に測定可能な病変を確認し（２０／２３人は、スクリーニングからＳＰＤのｍｍ^２が増加しており；３／２３人は、スクリーニングからＳＰＤのｍｍ^２がわずかな減少していた）。

有効性評価可能及びＩＴＴ患者の両方において、高いＯＲＲが観察された。９５％がＯＲＲに一致し、９０％がＣＲに一致した。６０人の有効性評価可能患者における治験責任医師評価によるＯＲＲは、８８％（９５％ＣＩ、７７％～９５％）であり、ＣＲ率は７０％（９５％ＣＩ、５７％～８１％）、ＰＲ率は１８％（９５％ＣＩ、１０％～３０％）であった。ＩＲＲＣ評価による６０人の有効性評価可能患者のＯＲＲは、９３％（９５％ＣＩ、８４％～９８％）であり、ＣＲ率は６７％（９５％ＣＩ、５３％～７８％）、ＰＲ率は２７％（９５％ＣＩ、１６％～４０％）であった。ＯＲＲは、主要なサブグループ（年齢、ＭＣＬ形態、Ｋｉ－６７指数、疾患ステージ、簡略化ＭＩＰＩ、ＡＥ管理のためのステロイド使用、トシリズマブの使用、及びブリッジング療法の使用）にわたって一貫していた。ＩＴＴ患者における治験責任医師評価によるＯＲＲは、８０％（９５％ＣＩ、６９％～８８％）であり、ＣＲ率は５９％（９５％ＣＩ、４７％～７１％）、ＰＲ率は２０％（９５％ＣＩ、１２％～３１％）であった。ＩＲＲＣ評価によるＩＴＴ患者のＯＲＲは、８５％（９５％ＣＩ、７５％～９２％）であり、ＣＲ率は５９％（９５％ＣＩ、４７％～７１％）、ＰＲ率は２６％（９５％ＣＩ、１６％～３７％）であった。

ＤＯＲの中央値は、１２．３ヶ月の経過観察期間の中央値後に到達しなかった。全ての患者の５７パーセント及び７８％のＣＲ患者は、寛解が継続していた。治療された最初の２８人の患者は、経過観察期間の中央値が２７．０ヶ月（範囲、２５．３～３２．３）であり、そのうち４３％は追加の治療なしで寛解継続のままであった。ＰＦＳの中央値及びＯＳの中央値は、１２．３ヶ月の経過観察期間の中央値後に到達しなかった。１２ヶ月のＰＦＳ率（９５％ＣＩ）は、６１％（４５％～７４％）であった。１２ヶ月のＯＳ率（９５％ＣＩ）は８３％（７１％～９１％）であった。

患者の３５％超が治療下で発現した有害事象を有した（グレード１、０％；グレード２、１％；グレード３、１６％；グレード４、７６％；及びグレード５、３％）。最も一般的なグレード≧３のＡＥ（患者の２０％以上）は、好中球減少症（６９％、グレード４）、血小板減少症（３５％、グレード４）、貧血（５０％、グレード３）、低リン血症（２２％、グレード３）であった。サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）による患者の死亡はなかった。Ｌｅｅ ＤＷ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１４，１２４：１８８によって評価されるグレード≧３のＣＲＳは、患者の１５％で報告された。任意のグレードのＣＲＳの最も一般的な症状は、低血圧（５１％）、低酸素症（３４％）、及び発熱（９１％）であった。有害事象管理には、トシリズマブ（５９％）及びコルチコステロイド（２２％）が含まれた。発症までの時間の中央値は２日（範囲１～１３）であり、継続期間の中央値は１１日であり、任意のグレードのＣＲＳを有する患者の６２／６２人（１００％）は、事象が解消した。

任意のグレードの神経学的事象（ＮＥ）は、患者の６３％で報告され（３１％は、グレード≧３のＮＥを有した）、脳症（３１％）、錯乱状態（２１％）、及び振戦（３５％）を含んでいた。神経学的事象による死亡患者はいなかった。１人の患者は、脳室開窓術及びＩＶウサギ抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）を含む積極的な集学的治療で完全に回復した、グレード４の脳浮腫を有していた。全てのＣＲＳ事象及びほとんどのＮＥ（３７／４３人の患者）は可逆的であった。ＮＥの発症までの期間及び継続期間の中央値は、それぞれ７日（範囲、１～３２）、及び１２日であった。

より高いＣＡＲ Ｔ細胞のピークレベルは、ノンレスポンダーよりもレスポンダーと関連していた（客観的奏効）。より高いＣＡＲ Ｔ細胞のピークレベルは、４週目における陽性ＭＲＤよりも陰性に関連していた。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のピークレベルまでの時間の中央値は、１５日（範囲、８～３１）であった。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞は、評価可能な試料を有するほとんどの患者において２４ヶ月目において検出可能であった（６／１０［６０％］）。増殖は、応答及びＭＲＤ状態に関連していた。増殖は、≦２のＣＲＳ及び神経学的事象に対して、グレード≧３を有する患者においてより大きかった。

ピーク血清バイオマーカーレベルと毒性との間でいくつかの関連性が観察された。グレード≧３のＣＲＳと関連する測定対象には、ＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及びパーフォリンが含まれた。グレード≧３の神経学的事象と関連する測定対象には、ＩＬ－２、ＩＬ－１ Ｒａ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１２ｐ４０、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１０、ＭＣＰ－４、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢが含まれた。グレード≧３のＣＲＳ及び神経学的事象の両方と関連する測定対象には、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢが含まれた。

単回注入で投与される本明細書に記載のＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療は、Ｒ／Ｒ ＭＣＬにおいて高い割合の持続的応答を示した。６７％のＣＲ率を含む９３％のＯＲＲは、先行ＢＴＫｉが失敗した患者における疾患制御のうち、報告される最も高い割合である。治療された最初の２８人の患者のうち、４３％は、経過観察２４ヶ月以上後でも寛解したままであった。安全性プロファイルは、中悪性度ＮＨＬにおける抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法のこれまでの試験で報告されるものと一致しており、ＣＲＳ又は神経学的事象による死亡はなく、ほとんどの症状は治療の早期に発症し、一般的に可逆的であった。有効性、信頼性、迅速な製造、及び管理可能な毒性は、満たされていない医療ニーズを有するＲ／Ｒ ＭＣＬ患者の治療において、本明細書に記載のＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療の役割を明らかにする。
実施例４

この実施例により、上記の臨床試験に対する追加の解析を提供した。適格患者は、１８歳以上で、サイクリンＤ１の過剰発現又はｔ（１１；１４）の存在のいずれかの証拠によって病理学的に確認されたＭＣＬを有し、ＭＣＬに対する１～５種類の先行レジメンに対して再発性／難治性であった。先行治療は、アントラサイクリン又はベンダムスチン含有化学療法、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びイブルチニブ又はアカラブルチニブを含んでいなければならない。全ての患者は、先行してＢＴＫｉを受けた。患者は、先行してＢＴＫｉ療法を受けていなければならないが、試験エントリー前の直近の治療法である必要はなく、患者は、ＢＴＫｉ療法に対して抵抗性である必要はなかった。適格患者は、絶対リンパ球数≧１００／μＬであった。ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ注入の６週間以内に自家ＳＣＴを受けた患者、又はこれまでにＣＤ１９標的療法若しくは同種ＳＣＴを受けた患者は除外した。全ての患者は、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞治療剤の製造用の細胞を得るために白血球アフェレーシスを受けた。患者は、デキサメタゾン（２０～４０ｍｇ又は当量のＰＯ又はＩＶ、１～４日間毎日）、イブルチニブ（５６０ｍｇ、経口（ＰＯ）毎日）、又はアカラブルチニブ（１００ｍｇＰＯ、１日２回）を含む、任意のブリッジング療法を受けた。製造プロセスは、ＣＤ４^＋／ＣＤ８^＋細胞の正の濃縮によって循環リンパ腫細胞を除去するためのアキシカブタゲンシロロイセルに対して改変した。この製品は、本明細書では「ＣＡＲ Ｔ細胞」と称する。この製品は、ＫＴＥ－Ｘ１９としても特定され得る。フルダラビン（３０ｍｇ／ｍ^２／日）及びシクロホスファミド（５００ｍｇ／ｍ^２／日）による前処置化学療法を、－５日目、－４日目、及び－３日目に投与した後、０日目に、２×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇのＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を単回静脈内注入した。患者の治療に関してより詳細は、実施例２に見出すことができる。

この試験の目標は２つあった。１つ目は、ＴＰ５３、（腫瘍タンパク質ｐ５３）遺伝子の変異状態及びＫｉ－６７腫瘍増殖指標によって定義される、臨床試験ＺＵＭＡ－２の低リスク患者及び高リスク患者におけるＣＡＲ Ｔ製品の薬理学的プロファイルを比較することである。腫瘍タンパク質ｐ５３遺伝子（ＴＰ５３）変異及び高Ｋｉ－６７増殖指数を含む、高リスクＭＣＬ特性を有する患者は、典型的には、現在の標準療法について予後不良である。Ｃｈｅａｈ ＣＹ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１６；３４：１２５６－１２６９。この解析における低リスク患者は、＜５０％のＫｉ－６７増殖指数（中央評価による）又は野生型ＴＰ５３を有しており、高リスク患者は、≧５０％のＫｉ－６７又は次世代配列決定によるＴＰ５３変異を有していた。ＺＵＭＡ－２（Ｎ＝６０）の主要有効性解析では、ＯＲＲは、１２．３ヶ月の経過観察中央値後に９３％（６７％ＣＲ）であった。全ての患者の５７％及びＣＲの患者の７８％は、奏功が継続していた。ＯＲＲは、Ｋｉ－６７増殖指数が＜又は≧５０％、及び非変異対変異ＴＰ５３である患者を含む、ＺＵＭＡ－２における低リスク患者と高リスク患者との間で一般に同等であった。Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２。

２つ目の目標は、早期（２８日目）に微小残存病変（ＭＲＤ）陰性状態を達成した患者、及びグレード４の神経毒性を有する患者において、薬力学的プロファイルを確認することであった。ＺＵＭＡ－２の結果のこれまでの解析では、０～２８日目のピーク及び曲線下面積（ＡＵＣ）による血液中のＣＡＲ Ｔ細胞レベルは、ＯＲＲ（検出不可能なＭＲＤを含む）及びグレード≧３のＣＲＳ及び神経学的事象と関連付けられた。Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２。その解析では、ＣＲＳ及び神経学的事象は、主に可逆的であり（Ｎ＝６８、治療患者）、１５％はグレード≧３のＣＲＳを有し、３１％はグレード≧３の神経学的事象を有し、２人はグレード５のＡＥ（そのうちの１つがＣＡＲ Ｔ製品関連）を有した。ＭＲＤ（感度１０^－５）を、以前に報告されているように、次世代配列決定によって評価した。Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２。

この更新では、ＣＡＲ Ｔ細胞製品の特性、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞レベル、血清中のサイトカインレベル、及び臨床転帰とのそれらの関連性を、以前に記載された方法を使用して解析したＺＵＭＡ－２における全ての治療された６８人の患者についての薬理学データを報告する。Ｌｏｃｋｅ ＦＬ，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５：２８５－２９５。ウィルコクソン順位和検定を使用して、サブグループの転帰とＣＡＲ Ｔ細胞及びサイトカインレベルとの間の関連性を測定した。Ｐ値は、多重検定について補正しなかった。

ＣＡＲ Ｔ細胞製品の特性は、一般に、Ｋｉ－６７増殖指数及びＴＰ５３変異状態によって定義された予後群にわたって同等であった。高Ｋｉ－６７サブグループにおいてより分化した表現型、及びＴＰ５３変異患者においてＣＤ４系の表現型を呈する傾向があった。（表８）。

^ａ全ての６８人の治療患者のうち、製品特性データは、６５人の合計患者について利用可能であった。製品特性データは、Ｋｉ－６７データが利用可能な４８／４９人の合計患者について、及びＴＰ５３変異データが利用可能な３６人全ての患者について、利用可能であった。ＴＰ５３、腫瘍タンパク質ｐ５３遺伝子

Ｋｉ－６７増殖指数及びＴＰ５３変異状態によって定義された異なる予後因子を有する群においても、同等のＣＡＲ Ｔ細胞増殖が見られた。投与後の血液中のＣＡＲ Ｔ細胞のピークレベル及びＡＵＣの両方が、野生型対変異ＴＰ５３又はＫｉ－６７増殖指数が＜５０％対≧５０％の患者において同等であり、これらのサブグループにおける同等の有効性と一致した。主要評価項目である患者における客観的奏効率（ＯＲＲ）を、表９に示した。応答までの時間の中央値は２８日（範囲：２４～９２日）であり、１２．３ヶ月の経過観察時間の中央値を伴う。２８人の患者は、２４ヶ月以上の経過観察の可能性があり、これらの患者の１２人は寛解したままであった。有効性は、完全奏効及び奏効期間（ＤＯＲ）に基づいて確立された。

ＯＲＲは、Ｋｉ－６７増殖指数＜５０％対≧５０％の患者において１００％対９４％であり、ＣＲ率は、Ｋｉ－６７増殖指数＜５０％対≧５０％の患者で６４％対７８％であった。表９。Ｋｉ－６７増殖指数について利用可能なデータを有する患者の数は４９人であった。

ＯＲＲは、野生型対変異型ＴＰ５３の患者の両方で１００％であり、ＣＲ率は、野生型対変異型ＴＰ５３で６７％対１００％であった。表１０。ＴＰ５３について利用可能なデータを有する患者の数は３６人であった。ＴＰ５３変異を有する６人全ての患者、及び変異がない３０人の患者全てが応答した。ＴＰ５３変異を有する６人の患者において、３人が≧３の神経毒性を有し、２人はグレード≧３のＣＲＳを有した。

ＩＬ（インターロイキン）；ＩＮＦ－γ（インターフェロンγ）、ＭＣＰ－１（単球走化性タンパク質－１）、ＩＬ－２Ｒα（ＩＬ－２受容体α）、ｓＰＤ－Ｌ１（可溶性プログラム死リガンド１）及びｓＶＣＡＭ（可溶性血管細胞接着分子）を含む、血清中の最大４４個のバイオマーカーを、治療前、０日目、及びＣＡＲ Ｔ細胞注入後２８日目までの様々な時点で測定した。Ｋｉ－６７増殖指数＜５０％対≧５０％である２つの予後群の薬力学的プロファイルは、増殖性（ＩＬ－１５、ＩＬ－２）、炎症性（ＩＬ－６、ＩＬ－２Ｒα、ｓＰＤ－Ｌ１及びＶＣＡＭ－１）、免疫調節（ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１０）、ケモカイン（ＩＬ－８及びＭＣＰ－１）、及びエフェクターサイトカイン（グランザイムＢ）について同等であった。更に、変異型ＴＰ５３対野生型ＴＰ５３を有する患者において、増殖性（ＩＬ－１５、ＩＬ－２）及び炎症性（ＩＬ－６、ＩＬ－２Ｒα、ｓＰＤ－Ｌ１、及びＶＣＡＭ－１）サイトカインレベルが増加する傾向があった。図１Ａ～図１Ｆ。

また、ＭＲＤ陰性状態を達成した患者における、血清中の選択されたサイトカインのピークレベルの増加傾向もあった。６８人中２９人の患者（４３％）でＭＲＤを分析した。これらの患者のうち２４人（８３％［完全奏効を有する１９人の患者及び部分奏効を有する５人］）は、ＣＡＲ Ｔ細胞投与後１ヶ月でＭＲＤ陰性であった。ＣＡＲ Ｔ細胞投与の１ヶ月後、ＭＲＤ陰性（ｎ＝２４／２９）は、陽性患者（ｎ＝５／２９）に対して、インターフェロン（ＩＦＮ）－γ及びインターロイキン（ＩＬ）－６のピークレベル中央値が増加し、ＩＬ－２の増加傾向が見られた。サイトカインレベルは、治療の７日以内に血清中でピークになった。ＰＤ－Ｌ１及びグランザイムＢについても一貫した傾向が見られた。治療後１４日以内に測定したピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの増加も、１ヶ月目にＭＲＤ陰性であった患者において見られた。図２Ａ～図２Ｉ。

６人の患者は、１人の脳浮腫を含むグレード４の神経学的事象を発症した。３人の患者は、グレード４のＣＲＳを同時に有した。グレード４の神経学的事象を有する患者は、神経学的事象を有しない患者と比較して、炎症誘発性血清バイオマーカー（例えば、ＩＦＮγ、ＭＣＰ－１、ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、及びＩＬ－６）のピークレベルが増加した。

脳浮腫は、積極的な集学的治療後に完全に回復した。Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２。この患者において、ＣＡＲ Ｔ細胞の増殖及びＩＬ－２のピーク血清レベルが最も高く、複数のサイトカインの上昇は、他の試験／ＺＵＭＡ－２患者の中央値と比較して、この患者において数倍高かった。表１１。

^ａ利用可能なデータを有する６６人の患者のうち。

ＣＡＲ Ｔ細胞の薬物動態学的及び薬力学的プロファイルは、ＭＣＬ患者群にわたって同等であったが、異なる予後マーカーの状態（Ｋｉ－６７及び変異ＴＰ５３によって定義）はより低いリスク及びより高いリスクに関連し、同等の臨床奏効率と一致する。変異ＴＰ５３を有する患者において、より高いレベルの炎症誘発性マーカーの傾向を示した。

ＣＡＲ Ｔ細胞投与の薬力学的プロファイルは、有効性（１ヶ月目におけるＭＲＤ状態）及びグレード４の治療下で発現した神経学的事象と関連していた。脳浮腫を発症した患者は、最も高いピークＣＡＲ Ｔ細胞レベル及び血清ＩＬ－２、並びに治療後の炎症誘発性マーカーの上昇を有していた。
実施例５

１種類以上の先行治療（抗ＣＤ２０抗体、アントラサイクリン又はベンダムスチン含有化学療法、及び／又はイブルチニブ又はアカラブルチニブなどのブルトンチロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫｉ）を含み得る）を受けたことがある、再発性又は難治性マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）患者の治療に対するＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法について、第２相単群臨床試験を行った。適格患者はまた、過去の治療後の疾患増悪と、直近の治療に対する抵抗性疾患についても有していた。この試験は、活動性又は重篤な感染症、先行する同種造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）、検出可能な脳脊髄液悪性細胞又は脳転移、及び中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫又はＣＮＳ障害の任意の既往歴を有する患者を除外した。

患者の末梢血単核細胞を、白血球アフェレーシス法によって得た。単核細胞を、ＣＤ４＋細胞及びＣＤ８＋細胞の正の選択によってＴ細胞について濃縮し、ＩＬ－２の存在下で抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体によって活性化し、次いで、抗ＣＤ１９単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、ＣＤ２８、及びＣＤ３ζドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲを含有する複製不全ウイルスベクターによって形質導入した。いかなる仮説にも束縛されるものではないが、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋細胞についての選択は、エクスビボ製造プロセス中に、患者の白血球アフェレーシス材料の循環するＣＤ１９発現腫瘍細胞が含まれる可能性を低減し得る。このプロセスのＴ細胞製品は、ＫＴＥ－Ｘ１９として特定され得る。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を増殖させ、洗浄し、懸濁液中に配合し、凍結保存した。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を受ける前に、患者は、ＣＡＲ Ｔ細胞注入の、５日前、４日前、及び３日前の各々に、静脈内シクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ^２及び静脈内フルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２のリンパ球除去化学療法レジメンで治療された。患者はまた、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入の約３０～６０分前に、アセトアミノフェン及びジフェンヒドラミン又は別のＨ１抗ヒスタミンを投与されていてもよい。全身コルチコステロイドの予防的使用はＣＡＲ Ｔ細胞の活性を妨げる可能性があるため、回避された。

標的用量は、体重１ｋｇ当たり２×１０^６個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞又は抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞であり、最大２×１０^８個の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞（１００ｋｇ以上の患者の場合）とした。６８人の患者は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の単回注入（重力又は蠕動ポンプのいずれかによって約３０分間）を受け、これらの患者のうち６０人について、４週目の疾患評価後に少なくとも６ヶ月間経過観察して、この患者らを有効性評価可能として認定した。５６人の患者が２×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与され、１人患者が１×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの用量、１人の患者が１．６×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの用量、２人の患者が１．８×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの用量、及び－２人患者は１．９×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの用量で投与された。これら６０人の患者のうち、年齢の中央値は６５歳（範囲：３８～７９歳）であり、５１人は男性、５６人は白人であった。５０人の患者は、ステージＩＶの疾患を有していた。簡略化マントル細胞リンパ腫国際予後指標（ｓ－ＭＩＰＩ）に基づいて、２５人の患者は低リスクと分類され、２５人の患者は中等度リスクと分類され、８人の患者は高リスクと分類され、２人の患者はリスク状態不明であった。２０人の患者に、プロトコルに沿って実施されたベースライン骨髄検査を実施し、これらのうち、１０人は陰性、８人は陽性、２人は不確定であった。６０人の有効性評価可能患者全ての先行治療数の中央値は３（範囲：２～５）であった。２６人の患者は、自己ＨＳＣＴの後に再発したか、又はそれに対して抵抗性であった。２１人の患者は、ＭＣＬに対する直近の治療後に再発しており、３６人の患者は、ＭＣＬに対する直近の治療に対して抵抗性であった。１４人の患者は、芽球様型ＭＣＬを有していた。白血球アフェレーシスに続き、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入前に、２１人の患者はブリッジング療法を受けた。１９人はＢＴＫｉで治療し、１４人の患者はコルチコステロイドで治療し、６人の患者はＢＴＫｉ及びコルチコステロイドの両方で治療した。５３人の患者は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ療法（０日目）の５日前、４日前、及び３日前の各々に両方が投与される、静脈内シクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ^２及び静脈内フルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２のリンパ球除去化学療法レジメンを受けた。残りの７人の患者は、ＣＡＲＴ療法前に４日以上にわたって同じ投与量のリンパ球除去化学療法を受けた。主要評価項目である患者における客観的奏効率（ＯＲＲ）を、表１２に示した。応答までの時間の中央値は２８日（範囲：２４～９２日）であり、１２．３ヶ月の経過観察時間の中央値を伴う。２８人の患者は、２４ヶ月以上の経過観察の可能性があり、これらの患者の１２人は寛解したままであった。有効性は、完全奏効及び奏効期間（ＤＯＲ）に基づいて確立された。

ＣＩ、信頼区間；ＮＥ、推定不能；ＮＲ、未到達；ＰＲ、部分寛解。
ａ．全ての奏効者間。ＤＯＲは、最初の客観的奏効の日から、進行又は死亡の日まで測定される。
ｂ．打ち切り値。
ＣＲＳ（サイトカイン放出症候群）は、８２人の患者のうち７５人で観察され、８２人の患者のうち１５人における≧グレード３（Ｌｅｅグレード付けシステム１）のＣＲＳを含んだ。ＣＲＳの発症までの期間の中央値は３日（範囲、１～１３）であり、ＣＲＳの継続期間の中央値は１０日（範囲、１～５０）であった。ＣＲＳの患者のうち、主要な症状（すなわち、患者の１０％超で発現した症状）は、発熱（患者の９９％）、低血圧（患者の６０％）、低酸素症（患者の３７％）、悪寒（患者の３３％）、頻脈（患者の３７％）、頭痛（患者の２４％）、疲労（患者の１９％）、悪心（患者の１３％）、アラニンアミノトランスフェラーゼ増加（患者の１３％）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ増加（患者の１２％）、及び下痢（患者の１１％）を含んていた。ＣＲＳに関連する重篤な事象は、低血圧、発熱、低酸素症、急性腎障害、及び頻脈を含んでいた。ＣＲＳに応答して、患者には、表１３の適応症に従って、トシリズマブ及び／又はコルチコステロイドを投与し得る。

ａ． Ｌｅｅ ＤＷ ｅｔ ａｌ（２０１４）．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｂｌｏｏｄ．２０１４ Ｊｕｌ １０；１２４（２）：１８８－１９５。
ｂ． 神経毒性の管理については表１４を参照されたい。
ｃ． 詳細については、トシリズマブの処方情報を参照されたい。

神経学的事象は、５３人の患者で観察され、そのうち２０人は、グレード３以上（重度又は生命を脅かす）有害反応を経験した。神経学的事象の発症までの時間の中央値は、６日（範囲：１～３２日）であった。神経学的事象は、６６人の患者の内５２人において回復し、継続期間中央値は２１日（範囲：２～４５４日）であった。重篤な脳症であった１人の患者を含む、３人の患者は、死亡時に進行中の神経学的事象を有していた。残りの未回復の神経学的事象は、グレード１又はグレード２のいずれかであった。５４人の患者は、神経学的事象の発症によってＣＲＳを経験した。５人の患者は神経学的事象を伴うＣＲＳを経験しなかったが、８人の患者はＣＲＳの回復後に神経学的事象を発症した。５６人の患者は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入後の７日以内に、最初のＣＲＳ又は神経学的事象を経験した。

最も一般的な神経学的事象（患者の１０％超に発現）には、脳症（患者の５１％）、頭痛（患者の３５％）、振戦（患者の３８、失語症（患者の２３％）、及びせん妄（患者の１６％）が含まれていた。脳症、失語症、及びけいれんを含む重篤な事象は、治療後に発症した。治療された患者の少なくとも１０パーセントで観察されたいくつかの有害反応は、以下を含む。血液及びリンパ系障害（凝固障害、心臓障害、頻脈、徐脈、非心室性不整脈）；胃腸障害（悪心、便秘、下痢、腹痛、口腔内痛、嘔吐、嚥下障害）；全身障害及び投与部位症状（発熱、疲労、悪寒、浮腫、疼痛）；免疫系障害（サイトカイン放出症候群、低ガンマグロブリン血症）；感染及び寄生（感染症－病原体不特定、ウイルス感染、細菌感染）；代謝及び栄養障害（食欲減退）、筋骨格及び結合組織障害（筋骨格痛、運動機能障害）；神経系障害（脳症、振戦；頭痛、失語症、めまい、神経障害）；精神障害（不眠症、せん妄、不安）；腎及び泌尿器障害（腎不全、尿量減少）；呼吸器、胸部及び縦隔障害（低酸素症、咳、呼吸困難、胸水）；皮膚及び皮下組織障害（発疹）；及び血管障害（低血圧、高血圧、血栓症）。グレード２以上の神経毒性を経験した患者は、表１４に示される適応症に従って治療されている可能性がある。

ａ． Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓに基づく重症度。

抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入後、血液中のサイトカイン、ケモカイン及び他の分子の一時的な上昇を測定することにより、４週間にわたって薬力学的応答を評価した。ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１５、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及び／又はｓＩＬ２Ｒαのレベルを分析した。これらのサイトカインレベルのピーク上昇は、注入後４～８日で一般に観察され、レベルは一般に２８日以内にベースラインに戻った。Ｂ細胞無形成症の期間が予想された。注入後、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の初期増殖に続いて、３ヶ月までにベースラインレベル近くまで低下した。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のピークレベルは、注入後の初期７～１５日以内に発生した。結果は、血液中の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のレベルが客観的奏効率（すなわち、完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ））と関連していることを示した。レスポンダー（完全寛解及び部分寛解を有するもの）におけるピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値は、１０２．４細胞／μＬ（範囲：０．２～２５８９．５細胞／μＬ、ｎ＝５１）であり、ノンレスポンダーでは、１２．０細胞／μＬ（範囲：０．２～１３６４．０細胞／μＬ、ｎ＝８）であった。客観的奏効を有する患者における０～２８日のＡＵＣ（ＡＵＣ_０－２８）の中央値は、１４８７．０細胞／μＬ・日（範囲：３．８～２．７７×１０^４細胞／μＬ・日、ｎ＝５１）であり、ノンレスポンダーにおいて１６９．５細胞／μＬ・日（範囲：１．８～１．１７ １０×１０^４細胞／μＬ・日、ｎ＝８）であった。コルチコステロイドもトシリズマブも投与されていない患者（ｎ＝１８）におけるピーク（２４．７細胞／μＬ）抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞（ピーク：及びＡＵＣ_０－２８レベル（３６０．４細胞／μＬ・日）の中央値は、コルチコステロイドのみを投与された患者（ｎ＝２）と同様であった（ピーク：２４．２細胞／μＬ、ＡＵＣ_０－２８：３６７．８細胞／μＬ・日）。トシリズマブのみを投与された患者（ｎ＝１０）では、平均ピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞は、８６．５細胞／μＬであり、ＡＵＣ_０－２８は、１１８８．９細胞／μＬ・日であった。コルチコステロイド及びトシリズマブの両方を投与された患者（ｎ＝３７）では、平均ピークは１６７．２細胞／μＬであり、ＡＵＣ_０－２８は、１９９６．０細胞／μＬ・日であった。ピーク抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞値の中央値は、６５歳以上の患者（ｎ＝３９）において７４．１細胞／μＬであり、６５歳未満の患者（ｎ＝２８）において１１２．５細胞／μＬであった。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のＡＵＣ_０－２８値の中央値は、６５歳以上の患者において８７６．５細胞／μＬ・日であり、６５歳未満の患者において１６４０．２細胞／μＬ・日であった。性別は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のＡＵＣ_０－２８及びＣ_ｍａｘに有意な影響を及ぼさなかった。
実施例６

ＢＴＫｉ療法後に増悪したＭＣＬ患者は、サルベージ療法により、たった５．８ヶ月の全生存期間中央値を有する。ＺＵＭＡ－２（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別子：ＮＣＴ０２６０１３１３）は、ＢＴＫｉを含む１～５種類の先行治療後のＲ／Ｒ ＭＣＬ患者の第２相多施設治験である。患者に、実施例５に記載されるように調製され投与される、自己抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞療法を投与した。この抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞製品は、ＫＴＥ－Ｘ１９と称され得る。ＺＵＭＡ－２（Ｎ＝６０）の主要解析では、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞治療（経過観察の中央値１２．３ヶ月）による客観的奏効率（ＯＲＲ）は９３％であった（完全奏効［ＣＲ］率６７％）。この実施例は、基本的な製品特性と共に、実施例５に記載されるように調製された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞治療の薬理学的プロファイルの比較解析、並びにＭＣＬ形態及び先行するＢＴＫｉ曝露（イブルチニブ［Ｉｂｒ］及び／又はアカラブルチニブ［Ａｃａｌａ］）による転帰について記載する。

Ｒ／Ｒ ＭＣＬを有する適格患者は、白血球アフェレーシス及び前処置化学療法、その後の２×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの単回注入を受けた。製品特性（例えば、ＣＤ１９＋細胞との共培養における抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞によるＩＦＮγ産生）、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞レベル、及び血清中のサイトカインレベルを、前述の方法を使用して評価した（前の実施例を参照）。臨床転帰は、６０人の有効性評価可能患者で報告され、製品属性及び薬理学データは、６８人の治療された患者全てにおいて報告される。

ベースラインでは、治験責任医師によって評価されるとき、４０人の患者（５９％）は古典型ＭＣＬを有し、１７人（２５％）は芽球様型ＭＣＬを有し、４人（６％）は多形性型ＭＣＬを有した。試験エントリーの前に、５２人の患者（７６％）は、先行Ｉｂｒ、１０人（１５％）は先行Ａｃａｌａ、６人（９％）はその両方を受けており、８８％はＢＴＫｉ抵抗性疾患を有していた。製造された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ製品において、古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬを有する患者のＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞比の中央値（範囲）は、それぞれ０．７（０．０４～２．８）、０．６（０．２～１．１）、又は０．７（０．５～２．０）であった。製品Ｔ細胞の表現型（中央値［範囲］）は、分化度が低いＣＣＲ７＋Ｔ細胞（古典型４０．０％［２．６～８８．８］、芽球様型３５．３％［１４．３～７３．４］、多形性型８０．８％［５７．３～８８．８］）と、エフェクター及びエフェクターメモリーＣＣＲ７－Ｔ細胞（古典型５９．９％［１１．１～９７．４］、芽球様型６４．８％［２６．６～８５．７］、多形性型１９．２％［１１．１～４２．７］）を含んでいた。古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬ患者における共培養によるインターフェロン（ＩＦＮ）－γレベルの中央値（範囲）は、それぞれ、６３０９．５ｐｇ／ｍＬ（４２４．０～２０，０００）、６５１０．０ｐｇ／ｍＬ（２７０９．０～１８，０００）、又は７６８７．５ｐｇ／ｍＬ（４２４．０～１２，０００）であった。古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬの患者では、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値（範囲）は、それぞれ、７７．６細胞／μＬ（０．２～２２４１．６）、３５．０細胞／μＬ（０．２～２５８９．５）、又は１４４．９細胞／μＬ（３９．２～４３１．３）であった。ＯＲＲ／ＣＲ率は、古典型ＭＣＬ患者において９３％／６５％、芽球様型ＭＣＬで８８％／５３％、及び多形性型ＭＣＬで１００％／７５％であった。古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬを有する患者における１２ヶ月生存率は、それぞれ８６．７％、６７．９％、又は１００％であった。グレード≧３のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び神経学的事象は、古典型ＭＣＬ患者の１５％及び３８％、芽球様型ＭＣＬ患者の６％及び８％、並びに多形性型ＭＣＬ患者の２５％及び５０％で発症した。

先行Ｉｂｒ、Ａｃａｌａ、又はその両方を受けた患者について、製造された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞製品におけるＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞比の中央値は、それぞれ、０．７（範囲、０．０４～３．７）、０．６（範囲、０．３～１．２）、又は１．０（範囲、０．７～１．９）であった。製品Ｔ細胞の表現型（中央値［範囲］）は、分化度が低いＣＣＲ７＋Ｔ細胞（Ｉｂｒ３９．３％［２．６～８６．４］、Ａｃａｌａ４２．７％［１６．３～８８．８］、両方４９．５％［１４．３～８３．０］）と、ＣＣＲ７－エフェクター及びエフェクターメモリーＴ細胞（Ｉｂｒ６０．６％［１３．７～９７．４］、Ａｃａｌａ５７．３％［１１．１～８３．８］、両方５０．６％［１７．０～８５．７］）を含んでいた。先行Ｉｂｒ、Ａｃａｌａ、又は両方の患者における共培養によるＩＦＮ－γレベルの中央値（範囲）は、それぞれ、６４９６．０ｐｇ／ｍＬ（４２４．０～２０，０００）、５９７２．５ｐｇ／ｍＬ（２５０２．０～１８，０００）、又は７９８５．５ｐｇ／ｍＬ（２７０９．０～１２，０００）であった。Ｉｂｒ、Ａｃａｌａ、又は両方による先行治療を受けた患者に対して、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値（範囲）は、それぞれ、９５．９（０．４～２５８９．５）、１３．７（０．２～１８２．４）、又は１１５．９（１７．２～１７５３．６）であった。ＯＲＲ／ＣＲ率は、Ｉｂｒ先行治療を受けた患者において９４％／６５％、Ａｃａｌａ先行治療を受けた患者において８０％／４０％、両ＢＴＫｉ治療を受けた患者において１００％／１００％であった。Ｉｂｒ、Ａｃａｌａ、又はその両方の先行治療を受けた患者における１２ヶ月の生存率は、それぞれ８１％、８０％、又は１００％であった。グレード≧３のＣＲＳ及び神経学的事象は、先行Ｉｂｒ患者の１７％及び３１％、Ａｃａｒａ患者の１０％及び１０％、並びに両ＢＴＫｉ患者の０及び６７％で発症した。治療後のＣＡＲ Ｔ細胞レベルは、芽球様型形態を有する、又はＡｃａｌａ単独の先行治療患者では低いが、臨床転帰における同様の傾向はよく似ており、ＭＣＬ形態又は先行ＢＴＫｉによって定義される全てのサブグループは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞治療による臨床的利益を得た。
実施例７

この実施例は、最短で１年間の経過観察を有する、ＺＵＭＡ－２における全ての患者についての有効性、安全性、及び薬理学的効果の更新された解析を提供する。Ｒ／Ｒ ＭＣＬを有する適格患者は、前の実施例に記載されているように、白血球アフェレーシス及び前処置化学療法、その後の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法の単回注入（２×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ）を受けた。主要評価項目は、Ｌｕｇａｎｏ分類に従って独立審査委員会によって評価されるＯＲＲ（ＣＲ＋部分奏功）とした。有効性データは、１年以上の経過観察を有する６０人の治療患者について報告され、全６８人の治療患者について安全データを提示する。

経過観察の中央値は１７．５ヶ月（範囲、１２．３～３７．６）であった。ＯＲＲは９２％（９５％ＣＩ、８１．６～９７．２）であり、ＣＲ率は６７％（９５％ＣＩ、５３．３～７８．３）であった。全ての有効性評価可能患者のうち、４８％は、データカットオフ時点で奏功継続を有していた。奏効期間、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、又は全生存期間について中央値には到達せず、１５ヶ月の推定値は、それぞれ５８．６％（９５％ＣＩ、４２．５～７１．７）、５９．２％（９５％ＣＩ、４４．６～７１．２）、又は７６．０％（９５％ＣＩ、６２．８～８５．１）であった。ＣＲを達成した患者では、ＰＦＳの中央値に到達せず（１５ヶ月の率、７５．１％［９５％ＣＩ、５６．８～８６．５］）、部分奏効を達成したものでは、ＰＦＳの中央値は３．１ヶ月（９５％ＣＩ、２．３～５．２）であった。ノンレスポンダー患者において、ＰＦＳの中央値は１．１ヶ月（９５％ＣＩ、０．９～３．０）であった。治療された最初の２８人の患者は、３２．３ヶ月（範囲、３０．６～３７．６）の経過観察中央値を有した。これらの患者の３９．３％は、更なる治療を行わずに継続的に寛解したままであった。

一般的なグレード≧３の有害事象は、好中球減少症（８５％）、血小板減少症（５３％）、貧血（５３％）、及び感染症（３４％）であった。注入後３０日以上の患者の６０％で、グレード≧３の細胞減少症を報告した。グレード≧３のサイトカイン放出症候群は、患者の１５％で生じ、５９％は、ＣＲＳの管理のためにトシリズマブを投与された。グレード≧３の神経学的事象（ＮＥ）は、患者の３１％で報告され、３８％は、ＮＥ管理のためにステロイドを投与された。全てのＣＲＳ事象及びほとんどのＮＥ（３７／４３）が回復した。グレード５のＣＲＳ事象又はＮＥはなく、更なる経過観察において新規グレード５事象は発症しなかった。グレード２のサイトメガロウイルス感染症が２症例、グレード≧３の低ガンマグロブリン血症及びグレード≧３の腫瘍溶解症候群が１症例あり、エプスタインバーウイルス関連リンパ球増殖、複製可能なレトロウイルス、血球貪食性リンパ組織球増加症、又は抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞関連二次がんの症例はなかった。

ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値及び曲線下面積（０～２８日目）の中央値は、１２ヶ月時点で奏功継続している患者において９８．９細胞／μＬ（範囲、０．２～２５６５．８）及び１３９４．９細胞／μＬ（範囲、３．８～２７，７００）、１２ヶ月時点で再発した患者において２０２．６細胞／μＬ（範囲、１．６～２５８９．５）及び２３１２．３細胞／μＬ（範囲、１９．０～２７，２００）、並びに、ノンレスポンダーにおいて０．４細胞／μＬ（範囲、０．２～９５．９）及び５．５細胞／μＬ（範囲、１．８～１０８９．１）であった。利用可能なデータを有する５７人の有効性評価可能患者のうち、８４％は、ベースラインにおいてフローサイトメトリーによって検出可能なＢ細胞を有した。１２ヶ月時点で奏功継続しているものうち、評価可能な試料を有する２６人中１０人の患者（３８％）は、３ヶ月時点で検出可能なＢ細胞を有し、１８人人中１０人（５６％）は、１２ヶ月時点で検出可能なＢ細胞を有し、２８人の評価可能患者のうち５人（１７％）において、１２ヶ月時点で遺伝子マーキングされたＣＡＲ Ｔ細胞は既に検出できなかった。ＺＵＭＡ－２試験は、Ｒ／Ｒ ＭＣＬ患者において、管理可能な安全性を有する抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法の実質的かつ継続的な臨床的利益を示し続けている。治癒的治療の選択肢がなかったこの患者集団において、ほとんどの患者は持続性ＣＲを達成し、新たな安全性の警告は報告されなかった。客観的奏効を達成した患者において早期のＣＡＲ Ｔ細胞増殖はより高かったが、後に再発した患者ではＣＡＲ Ｔ細胞レベルの上昇が示され、ＭＣＬにおける二次治療失敗の代替機構を示している。
実施例８

ＡＬＬ患者の約８０～８５％が初期治療後に継続的な完全寛解（ＣＲ）を達成したが、再発性又は難治性（Ｒ／Ｒ）ＡＬＬを有する残りの１５～２０％の患者は、再発性疾患を有する患者の２年無イベント生存リルが≦４０％と、転帰は望ましくない。上記のように調製された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法は、Ｒ／Ｒ Ｂ細胞リンパ腫を有する成人患者において、管理可能な安全性プロファイルを伴う高い完全奏効率を示した（前の実施例を参照）。特に、例えば、実施例５参照）。ＺＵＭＡ－４（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別子：ＮＣＴ０２６２５４８０）は、Ｒ／Ｒ Ｂ細胞ＡＬＬ又はＮＨＬを有する小児及び青年期患者におけるこの抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を評価する第１／２相試験である。ＺＵＭＡ－４の第１相後中間解析により、Ｒ／Ｒ ＡＬＬを有する小児患者の治療のための最適用量と有害事象（ＡＥ）管理戦略による抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法の実現可能性が示された。ＺＵＭＡ－４の第２相のプロトコルは、より幅広いＢ細胞ＡＬＬ登録基準を含むように変更されており、不良な転帰に関連する早期再発を有する患者に焦点を合わせ、ＮＨＬコホートを追加した。

主要なＢ細胞ＡＬＬ登録基準は、２１歳以下、≧１０ｋｇの体重、登録の少なくとも１００日前において、一次治療抵抗性、初回診断の１８ヶ月以内に再発、２種類以上の全身療法後のＲ／Ｒ、又は同種幹細胞移植後のＲ／ＲであったＢ細胞ＡＬＬを含めた。Ｂ細胞ＡＬＬはまた、登録の少なくとも１００日前、かつ、免疫抑制薬治療を４週間以上やめている時点で、自家幹細胞移植後にＢ前駆細胞ＡＬＬ Ｒ／Ｒであった。Ｌａｎｓｋｙ（＜１６歳）又はＫａｒｎｏｆｓｋｙ（≧１６歳）パフォーマンスステータスは、ＰＳ≧８０、体重≧６ｋｇとした。適格患者には、ＣＮＳ－１疾患患者、臨床的に明らかな神経学的変化を伴わないＣＮＳ－２疾患患者、及び＞５％ＢＭ芽球又はＭＲＤ陽性疾患（フロー又はＰＣＲによる閾値１０^－４）を有する患者を含めた。ＣＮＳ－１疾患は、ＣＳＦ中に検出可能なリンパ芽球がないことによって定義し、ＣＮＳ－２疾患は、検出可能な疾患があり、かつＣＳＦ中白血球数が＜５／μＬによって定義した。ＣＮＳ－３疾患は、ＣＳＦ中ＷＢＣ≧５／μＬによって定義した。疾患負荷の基準は、登録時に微小残存病変陽性疾患を有する患者も含むように変更された。フィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬを有する患者は、チロシンキナーゼ阻害剤療法に対して不耐性である場合、又は２種類以上のチロシンキナーゼ阻害剤療法後のＲ／Ｒの場合に適格とした。先行ブリナツモマブの患者も含めた。慢性骨髄性白血病の急性転化又は臨床的に重要な感染症を有する患者は非適格とした。バーキット白血病／リンパ腫を有する患者も非適格とした。

Ｂ細胞ＮＨＬの場合、主要登録基準として、１８歳未満、体重１０ｋｇ以上、組織学的に確認された１つ以上の測定可能な病変を有する、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫非特定型（ＤＬＢＣＬ ＮＯＳ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、バーキット様リンパ腫、又はＤＬＢＣＬとＢＬの中間型Ｂ細胞リンパ腫未分類型を含めた。ＮＨＬの場合、疾患は、登録の１００日以上前に、一次治療抵抗性、２種類以上の全身療法後のＲ／Ｒ、又は、自己若しくは同種幹細胞移植後のＲ／Ｒを有しなければならない。患者は、免疫抑制薬治療を４週間以上やめている必要がある。Ｌａｎｓｋｙ（＜１６歳）又はＫａｒｎｏｆｓｋｙ（≧１６歳）パフォーマンスステータスは、ＰＳ≧８０、体重≧６ｋｇとした。先行ブリナツモマブの患者も含めた。患者は、適切な先行治療、最低限は抗ＣＤ２０ｍＡｂ及びアントラサイクリン含有化学療法を受けている必要があり、１つ以上の測定可能な病変を有する。登録の４週間以内に治療を必要とする急性移植片対宿主病又は慢性移植片対宿主病を有する患者は、適格としなかった。先行ＣＡＲ Ｔ細胞療法又は他の遺伝子改変Ｔ細胞療法を受けた患者は除外されたが、この試験においてＫＴＥ－Ｘ１９を投与された患者は再治療として適格とした。心臓リンパ腫の関与がある患者、又は腫瘍量効果による緊急治療を必要とした患者も除外された。ＡＬＬ及びＮＨＬコホートに対する更なる除外は、以下を含む。臨床的に重要な感染症を有する患者；登録の４週間以内に治療を必要とする急性又は慢性ＧＶＨＤ、過去６ヶ月以内のアレムツズマブ（又は他の抗ＣＤ５２抗体）、過去３ヶ月以内のクロファラビン又はクラドリビン、過去３週間以内のＰＥＧ－アスパラギナーゼ、又は過去２８日以内のドナー白血球輸注（ＤＬＩ）を有する患者。

ＣＮＳの関与及び特定の異常を有する患者は除外した。先行ブリナツモマブ治療を受けた、リンパ芽球が存在し、神経学的症状を有し、かつ、臨床的に明らかな神経学的変化を伴わない、中枢神経系－１疾患（脳脊髄液中に検出可能なリンパ芽球なし）、中枢神経系－２疾患（検出可能な疾患であるが、脳脊髄液中白血球数＜５／μＬ）は、ＡＬＬ及びＮＨＬコホートに含まれ得る。リンパ芽球が存在し、神経学的症状を有する患者、リンパ芽球が存在し、神経学的症状の有無にかかわらない中枢神経系－３疾患（ＣＳＦ中ＷＢＣ≧５／μＬ）、画像診断による任意のＣＮＳ腫瘍塊及び／又は髄膜周囲の塊を有する患者、任意のＣＮＳ障害、例えば、脳血管虚血／出血、認知症、小脳疾患、又はＣＮＳが関与する任意の自己免疫疾患、可逆性白質脳症、構造的欠陥を伴う脳浮腫の既往歴又は存在、過去１２ヶ月以内の脳卒中又は一過性脳虚血発作の既往歴、並びに、実施中の抗けいれん療法を必要とするけいれんは除外した。ブリナツモマブを除く先行ＣＤ１９指向療法を受けた患者は除外した。

患者は、－４日目、－３日目、及び－２日目のフルダラビン２５ｍｇ／ｍ^２、及び－２日目のシクロホスファミド９００ｍｇ／ｍ^２の前処置化学療法の後、０日目に、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を、１×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの標的用量の単回注入を受けた。ＡＬＬの場合、第２相の主要目的は、全ＣＲ率（ＣＲ及び不完全な血液学的回復を伴うＣＲ）によって評価される、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の有効性を評価することとした。ＮＨＬでは、第２相の主要目的は、客観的奏効率（ＣＲ＋部分奏功）による抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法の効果を評価することとした。ＡＬＬ及びＮＨＬコホートに対する第２相の副次的目的には、安全性及び忍容性、追加の有効性評価項目、並びに患者報告転帰スコアの変化を含めた。

この試験で使用したＣＡＲ Ｔ細胞治療は、Ｒ／Ｒマントル細胞リンパ腫及び他のＲ／Ｒ血液悪性腫瘍の治療に対する自己抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法である、実施例５などの前の実施例に記載した（ＫＴＥ－Ｘ１９としても知られる）。アフェレーシス産物由来のＰＢＭＣは、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋の正の選択によってＴ細胞について濃縮され、悪性細胞の除去をもたらす。得られたＴ細胞をＩＬ－２の存在下で抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体で活性化し、抗ＣＡＲ遺伝子構築物（ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲ）を導入するためにレトロウイルスにより形質導入し、所望の用量まで増殖させる。増殖したＴ細胞は、輸送のために凍結され、患者への注入のために戻され得る。アキシカブタゲンシロロイセルは、例えば、Ｐａｒｋ Ｊ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１８；３７８（５）：４４９－４５９、及びＬｅｅ Ｄ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ．２０１５；３８５（９９６７）：５１７－５２８に記載されるような異なる方法によって作製される。Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する成人患者では、ＫＴＥ－Ｘ１９治療は、第１相においてＣＲ率、ＣＲｉ率、又は安全性プロファイルを改善した。Ｓｈａｈ ＢＤ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１９；３７（ｓｕｐｐｌ，ａｂｓｔｒ）：７００６。

第１相のＤＬＴ評価中、開始用量は２×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇとした。ＤＬＴは、７日超続くグレード３の非血液学的ＡＥ及び継続期間に関係なくグレード４の非血液学的ＡＥ、プロトコルで指定する例外として、又は、３０日超続くグレード４の血液学的ＡＥとして定義した。体積６８ｍＬ又は体積４０ｍＬ中の１×１０^６ＣＡＲ－Ｔ細胞の用量も調べた。４０ｍＬの１×１０^６を受けた患者コホートは、改訂ＡＥ管理を受けた。利用可能なデータに基づいて、４０ｍＬ中１×１０^６細胞／ｋｇを第２相で使用した。第１相試験の結果は、９４％のＭＲＤ陰性を示し、Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する小児及び青年期患者において、７３％のＣＲ＋Ｃｒｉを観察した。結果はまた、既知の毒性と一致する管理可能なＡＥプロファイル、並びに、最適化された用量配合物及び改訂された安全管理によるＮＥのより低い発生率及び重症度を示した。Ｗａｙｎｅ ＡＳ，ｅｔ ａｌ．Ｐｅｄｉａｔｒ Ｂｌｏｏｄ Ｃａｎｃｅｒ．２０１９；６６（ｓｕｐｐｌ）：Ｓ２４。

第２相では、患者をスクリーニングし、白血球アフェレーシスに続いて、－４日目に開始する前処置化学療法に供した。ブリッジング療法は、治験責任医師の裁量で白血球アフェレーシス後に投与してよく、前処置化学療法の前に７日以上又は５半減期を経過する必要があった。ＫＴＥ－Ｘ１９を０日目に注入した。初回疾患評価は２８日目に行った。安全性及び有効性の治療後評価は、２週目、４週目、２ヶ月目、及び３ヶ月目に実施した。患者は、１８ヶ月目まで３ヶ月毎、及び２４ヶ月目～６０ヶ月目に６ヶ月毎に、経過観察を行う。６年目から１５年目までは、患者は年に１回通院する。Ｒ／Ｒ ＡＬＬ患者の５０人及びＲ／Ｒ ＮＨＬ患者の１６人の合計を、１×１０^６ＫＴＥ－Ｘ１９細胞／ｋｇの４０ｍＬ配合物に登録した。この試験の第２相の患者には、ＮＨＬコホート及び、転帰不良と関連した早期初回再発を有する患者を含めるためのＲ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬの拡大登録基準、並びに、ＭＲＤ陽性疾患を有する患者も含まれた。主要目的は、ＡＬＬに対する全ＣＲ率（ＣＲ及びＣｒｉ）、及びＮＨＬに対するＯＲＲ（ＣＲ＋ＰＲ）によって評価される有効性とした。副次的目的には、安全性、忍容性、ＤＯＲ、ＯＳ、無再発生存期間（ＲＦＳ）／無増悪生存期間（ＰＦＳ）、及び患者報告アウトカム（ＰＲＯ）の評価を含めた。ＡＬＬの場合、追加の副次的目的として、ＭＲＤ陰性率及びａｌｌｏ－ＳＣＴ率の評価を含めた。全ＣＲ率（ＡＬＬコホートのみ）について、発生率及び直接両側９５％ＣＩが決定される。直接二項検定を使用し、０．０２５の片側α水準で３５％の奏効率と比較する。ＭＲＤ陰性率（ＡＬＬコホートのみ）について、発生率及び直接両側９５％ＣＩが決定される。全ＣＲ率の統計検定が有意である場合、ＭＲＤ陰性率を、直接二項検定を使用し、０．０２５の片側α水準で３０％の率と比較する。ＤＯＲ及びＯＳの場合、カプランマイヤー推定値及び両側９５％ＣＩが決定される。ＡｌｌｏＳＣＴ率（ＡＬＬコホートのみ）について、ｍＩＴＴ集団における発生率、及び直接両側９５％ＣＩが決定される。安全性に関して、全、重篤、致死的、ＣＴＣＡＥバージョン４．０３のグレード≧３を含むＡＥの発生率、及び注入日又はその後に発生した治療関連ＡＥが決定される。ＮＨＬコホートについて特定の仮説検定は行わない。このコホートにおける計画されたサンプルサイズでは、観察されるＯＲＲを６３％（１０／１６人の患者）、６９％（１１／１６）、
７５％（１２／１６）、及び８１％（１３／１６）と仮定すると、推定されるＯＲＲの９５％直接ＣＩの下限は、それぞれ、３５％、４１％、４８％、及び５４％である。
実施例９

この実施例は、再発性／難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ細胞ＡＬＬを有する成人における、ＣＤ３ζ及びＣＤ２８共刺激ドメインを含み、前の実施例に記載されるように調製される、自己抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞療法（ＣＤ４＋／ＣＤ８＋濃縮／悪性細胞の除去）を評価する第１／２相試験である、ＺＵＭＡ－３（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別子：ＮＣＴ０２６１４０６６）の第１相結果について報告する。がん細胞を除去した抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を調製するためのこのプロトコルは、エクスビボ製造中の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の活性化及び枯渇の可能性を低減する。末梢血中の白血病性芽球が存在することにより、ＣＡＲ Ｔ細胞製品の製造に利用可能なＴ細胞の数を制限する可能性があり、潜在的に製造不良につながる。Ｓａｂａｔｉｎｏ Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１６；１２８（２２）：１２２７。この試験で使用された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞製品は、ＭＣＬでの使用について、Ｗａｎｇ Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２（１４）：１３３１－１３４２に記載されている。それは、Ｓａｂａｔｉｎｏ Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１６；１２８（２２）：１２２７、Ｐａｒｋ Ｊ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１８；３７８（５）：４４９－４５９、及びＬｅｅ Ｄ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ．２０１５；３８５（９９６７）：５１７－５２８で使用されたものとは異なっている。この抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞製品は、前述の方法によって作製されたものよりもＴ細胞表現型に関して異なる製品特性を有する。この抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、この実施例及び本出願の他の場所でＫＴＥ－Ｘ１９とも称した。

フルダラビン／シクロホスファミドのリンパ球除去に続いて、患者は、２、１、又は０．５×１０^６細胞／ｋｇで抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。ＣＡＲ Ｔ細胞注入後２８日以内の用量制限的毒性（ＤＬＴ）の率を、主要評価項目とした。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を５４人の登録患者について製造し、４５人に投与した（中央値４６歳［範囲、１８～７７］）。ＤＬＴは、ＤＬＴ評価可能コホートにおいて発現しなかった。グレード≧３のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び神経学的事象（ＮＥ）は、それぞれ、患者の３１％及び３８％で発生した。リスクベネフィット比を最適化するために、ＣＲＳ及びＮＥに対する改訂有害事象（ＡＥ）管理法（ＮＥに対する早期ステロイド使用及びＣＲＳに対してのみトシリズマブ）を、１×１０^６細胞／ｋｇ抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞で評価した。改訂ＡＥ管理下で治療された９人の患者において、３３％はグレード３のＣＲＳを有し、１１％はグレード３のＮＥを有し、グレード４／５のＮＥはなかった。全完全寛解率は、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖と相関しており、１×１０^６細胞／ｋｇで治療された患者において８３％、全ての患者において６９％であった。微小残存病変は、全ての応答した患者において検出不能であった。２２．１ヶ月（範囲、７．１～３６．１）経過観察中央値において、１×１０^６細胞／ｋｇで治療された患者においてＤＯＲ中央値は１７．６ヶ月（範囲、５．８～１７．６）であり、全ての患者において１４．５ヶ月（範囲、５．８～１８．１）であった。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞治療は、Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する成人において高い奏効率及び認容可能な安全性を提供した。第２相は、改訂ＡＥ管理と共に、１×１０^６細胞／ｋｇで進めた。

患者

適格患者は、第１選択療法に対する抵抗性（すなわち、一次治療抵抗性）、初回寛解１２ヶ月以内の再発、２種類以上の先行全身療法後の再発若しくは抵抗性、又は同種幹細胞移植（ＳＣＴ）後の再発として定義される、Ｒ／Ｒ Ｂ細胞ＡＬＬを有する、１８歳以上とした。患者は、骨髄芽球５％以上、Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐのパフォーマンスステータスが０又は１、及び、十分な腎、肝、及び心機能を有することが求められた。登録された最初の６人の患者は、骨髄中に≧２５％の芽球を有することが求められた。先行ブリナツモマブで治療された患者の場合、ＣＤ１９発現が≧９０％である白血病性芽球が求められた。フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）疾患、骨髄外合併症、神経学的変化を伴わない中枢神経系（ＣＮＳ）－２疾患（脳脊髄液［ＣＳＦ］中に芽球、＜５個の白血球／ｍｍ^３）、及びダウン症候群を有する患者は適格であった。神経学的変化と無関係のＣＮＳ－３疾患（ＣＳＦ中に芽球、≧５個の白血球／ｍｍ^３）及びＣＮＳ障害の既往は除外した。

追加の適格性基準は、以下を含む：チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法に対して不耐性であるか、又は２種類以上の異なるＴＫＩでの治療にもかかわらず再発性／難治性疾患を有した場合に、フィラデルフィア染色体（Ｐｈ）＋疾患を有する被験者を適格とした；治験責任医師の意見がない限り、絶対好中球数≧５００／μＬ、細胞減少症は、潜在的な白血病に起因し、白血病の治療によって潜在的に可逆的である；治験責任医師の意見がない限り、血小板数≧５０，０００／μＬ、細胞減少症は、潜在的な白血病に起因し、白血病の治療によって潜在的に可逆的である；絶対リンパ球数≧１００／μＬ；十分な腎、肝、肺、及び心機能は、クレアチニンクリアランス（コッククロフト・ゴールト式による推定）≧６０ｃｃ／分と定義した；血清アラニンアミノトランスフェラーゼ／アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ≦２．５正常上限；総ビリルビン≦１．５ｍｇ／ｄＬ、ジルベール症候群の被験者を除く；左室駆出率≧５０％、心エコー図によって決定される心膜液貯留の証拠なし、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ｈｅａｒｔ ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎクラスＩＩＩ又はクラスＩＶの機能分類なし、臨床的に重要な不整脈なし；臨床的に重要な胸水なし；室内空気中のベースライン酸素飽和度＞９２％］；妊娠可能な女性は、尿又は血清妊娠検査陰性でなければならない；妊娠可能な女性は、尿又は血清妊娠検査陰性でなければならない。

追加の除外基準は、以下を含めた。世界保健機関分類によるバーキット白血病／リンパ腫の診断、又は慢性骨髄性白血病の急性転化；３年以上の無病期間がない限り、非黒色腫性皮膚がん又は上皮内がん（例えば、子宮頸部、膀胱、乳房）以外の悪性腫瘍の既往歴；アミノグリコシド又はこの試験で使用される薬剤のいずれかに対する重度の過敏症反応の既往歴；中枢神経系（ＣＮＳ）異常［１ｍｍ^３当たり５つ以上の白血球（ＷＢＣ）を伴い、神経学的変化の有無にかかわらない、脳脊髄液（ＣＳＦ）試料中の検出可能な脳脊髄芽球として定義されるＣＮＳ－３疾患の存在、及び；１ｍｍ^３当たり５つ未満のＷＢＣを伴い、神経学的変化を伴う、ＣＳＦ試料中の検出可能な脳脊髄芽球として定義されるＣＮＳ－２疾患の存在。注：ＣＮＳ－１（ＣＳＦ中に検出可能な白血病なし）及び臨床的に明らかな神経学的変化を伴わないＣＮＳ－２を有する被験者は、試験の参加に適格である；任意のＣＮＳ障害、例えば、けいれん障害、脳血管虚血／出血、認知症、小脳疾患、ＣＮＳが関与する任意の自己免疫疾患、可逆性白質脳症、又は脳浮腫の既往歴又は存在］；アミノグリコシド又はこの試験で使用される薬剤のいずれかに対する重度の過敏症反応の既往歴；骨髄不全に関連する随伴性遺伝的症候群の既往歴；登録１２ヶ月以内の臨床的に重大な心疾患の既往歴；登録６ヶ月以内の症候性深部静脈血栓症又は肺塞栓症の既往歴；原発性免疫不全症；ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、又はＣ型肝炎ウイルスによる既知の感染。Ｂ型肝炎又はＣ型肝炎の既往歴は、定量的ポリメラーゼ連鎖反応及び／又は核酸試験によってウイルス負荷が検出不能である場合に許可される；単純な尿路感染症及び合併症のない細菌性咽頭炎は、積極的治療に応答した場合は、Ｋｉｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｏｎｉｔｏｒとの相談後に許可される；Ｇｌｕｃｋｓｂｅｒｇ基準によるグレードＩＩ～ＩＶ、又はＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ指標による重症度Ｂ～Ｄの急性移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）；登録前４週間以内に全身治療を必要とする急性又は慢性ＧＶＨＤ；先行治療薬［サルベージ全身療法（化学療法、Ｐｈ＋疾患のためのＴＫＩ、及びブリナツモマブを含む）≦１ブリナツモマブ；先行ＣＤ１９指向性療法によるＣｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓグレード４の神経学的事象又はグレード４のサイトカイン放出症候群の既往歴；登録前６ヶ月以下のアレムツズマブ、登録前３ヶ月以下のクロファラビン若しくはクラドリビン、又は登録前３ヶ月以下のＰＥＧ－アスパラギナーゼによる治療；登録前４週間以内のドナーリンパ球注入；登録前４週間のＧＶＨＤに対する任意の薬物及び任意の免疫抑制抗体による治療；登録前に、任意の先行全身抑制性／刺激性免疫チェックポイント分子療法から少なくとも３半減期経過している必要がある；薬理学的用量のコルチコステロイド療法（＞５ｍｇ／日のプレドニゾン又は当量の他のコルチコステロイド）及び他の免疫抑制薬は、登録前に１週間は回避しなければならない］；任意の留置ライン又はドレインの存在。Ｏｍｍａｙａリザーバ及び専用の中心静脈アクセスカテーテルは許可される；登録前４週間以内の生ワクチン；胎児又は乳児に対する予備化学療法の潜在的悪影響のため、妊娠又は授乳している妊娠の可能性がある女性；同意取得から抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法の完了後６ヶ月まで、避妊を実施する意思がない子供をもうける可能性がある男性及び女性の被験者；治験責任医師の判断において、全てのプロトコルで必要とされる試験時の通院若しくは手順を完了する、又は参加の試験要件に準拠する可能性が低い被験者［直近２年以内に、末端器官損傷をもたらすか、又は全身性免疫抑制若しくは全身性疾患修飾剤を必要とするようになる自己免疫疾患の既往歴］。

試験デザイン及び治療

第１相の目的は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞治療の安全性を評価し、用量制限的毒性（ＤＬＴ）の発生率及び全体的な安全性プロファイルに基づいて最適な第２相の用量を決定することであった。ＤＬＴは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入の当初２８日以内に発生する抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞関連有害事象（ＡＥ）と定義され、７日間超続くグレード３の非血液学的ＡＥ、予め指定された予想される事象（例えば、腫瘍溶解症候群）を除く持続期間に関係ないグレード４の非血液学的ＡＥ、及び、リンパ球減少症を除いて３０日超続くグレード４の血液学的ＡＥを含む（表１５）。

ＣＲＳ、サイトカイン放出症候群；ＤＬＴ、用量制限的毒性；ＴＬＳ、腫瘍溶解症候群

最初の患者は、２×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの開始用量で登録した（図３）。全体的な安全性プロファイルに基づいて、後続の患者には、２×１０^６、１×１０^６、又は０．５×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与した。０．５×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇにて。低用量である０．５×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与された患者について、１つは体積４０ｍＬ、他方は体積６８ｍＬで、２つの配合物を調査した。４０ｍＬの製剤は、凍結／解凍プロセス中に細胞密度及び細胞生存率を維持することを意図していた）。

サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び神経学的事象（ＮＥ）のリスクを軽減するために、ＡＥ管理ガイドラインを改訂して、トシリズマブをＣＲＳ（及び分離されていない神経毒性）の治療に限定し、グレード３ではなくグレード２のＮＥ発生時にコルチコステロイド治療を開始した（表１６）。

改訂ＡＥ管理ガイドラインは、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療された患者の追加コホートにおいて実施された。安全性評価チーム（ＳＲＴ）により、進行中の安全性及び有効性のデータが評価され、プロトコル及びＳＲＴチャーターで定義されたマイルストーンにおいて、第１相への更なる登録と、推奨される第２相用量（ＲＰ２Ｄ）に関する推奨が行われた。

患者は、登録時に白血球アフェレーシスを受け、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の製造のため標的５～１０×１０^９個の単核細胞を得た。事前定義されたブリッジング化学療法（表１７）は、白血球アフェレーシス後、特にベースラインでの疾患負荷が高い患者（施設での評価によって、骨髄中の２５％超の白血病性芽球又は末梢循環中≧１，０００芽球／ｍｍ^３）に対して推奨された。

ＢＩＤ、１日２回；ＣＶＡＤ、シクロホスファミド、ビンクリスチン、ドキソルビシン、及びデキサメタゾン；ＤＯＭＰ、デキサメタゾン、６－メルカプトプリン、メトトレキサート、及びビンクリスチン；ＦＬＡＧ、フルダラビン、高用量シタラビン、及びＧ－ＣＳＦ；Ｇ－ＣＳＦ、顆粒球コロニー刺激因子；ＩＤＡ、イダルビシン；ＩＶ、静脈内；ＭＰ、６－メルカプトプリン；ＰＯ、経口；ＳＣ、皮下；ＶＡＤ、ビンクリスチン、ドキソルビシン、及びデキサメタゾン。

ブリッジング化学療法から７日以上又は５半減期（短い場合）のウォッシュアウト後、患者は、－４日目、－３日目、及び－２日目のフルダラビン静脈内（ＩＶ）２５ｍｇ／ｍ^２／日、及び－２日目のシクロホスファミドＩＶ９００ｍｇ／ｍ^２／日のリンパ球除去レジメンを受けた。０日目に、単回注入の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与した。

結果と評価

第１相の主要評価項目は、ＤＬＴ評価可能患者におけるＤＬＴの発生率とした。副次的評価項目としては、安全性、治験責任医師評価による全体的寛解率（ＣＲ＋不完全な血液学的回復を伴うＣＲ［ＣＲｉ］）、寛解期間（ＤＯＲ）、無再発生存期間、ＯＳ、及び骨髄中の検出不能微小残存病変（ＭＲＤ）の率を含めた。血液中のＣＡＲ Ｔ細胞及びサイトカインのレベルは探索的評価項目とした。ＣＲＳ及びＮＥの症状を含むＡＥは、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ＡＥのバージョン４．０３に従ってグレード付けした。ＣＲＳは、Ｌｅｅ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１４；１２４（２）：１８８－１９５の基準に従ってグレード付けした。骨髄外疾患を有する患者について、改訂された悪性リンパ腫のＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐの基準における骨髄外及びＣＮＳ疾患の応答基準に従って応答を評価した。Ｃｈｅｓｏｎ ＢＤ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２００７；２５（５）：５７９－５８６。１０，０００個の生細胞当たり＜１個の白血病細胞として定義される検出不能ＭＲＤは、フローサイトメトリー（ＮｅｏＧｅｎｏｍｉｃｓ（Ｆｏｒｔ Ｍｙｅｒｓ、ＦＬ））を使用して中央で評価した。Ｂｏｒｏｗｉｔｚ ＭＪ ｅｔ ａｌ Ｂｌｏｏｄ．２０１５；１２６（８）：９６４－９７１、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ Ａｄｖ．２０１７；１（２５）：２４５６－２４６６、及びＧｕｐｔａ Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１８；３２（６）：１３７０－１３７９。

注入後７日以上の入院が必要であった。患者は、理学的検査、バイタルサイン測定、及び神経学的及び検査値評価によって、１４日目、２８日目、２ヶ月目及び３ヶ月目に評価した。骨髄評価及び応答評価は、７～１４日目（任意選択的）及び２８日目、並びに２ヶ月目及び３ヶ月目に行った。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入後にＳＣＴを受けた患者について、ＳＣＴ後の当初１００日間は骨髄評価を必要としなかった。ＣＳＦの採取及び分析は、ベースラインのＣＮＳ－２疾患を有する患者のＣＲを確認するために必要であった。３ヶ月目の治療後評価を完了した患者は、１８ヶ月目まで３ヶ月毎、２４～６０ヶ月目は６ヶ月毎、１５年目までは毎年１回、生存及び疾患状態について経過観察を行った。ＣＲを達成した患者は、３ヶ月超の寛解後に増悪した場合、ＣＤ１９発現が保持され、ＣＡＲに対する中和抗体の疑いがないという条件で、２回目の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入を受けることができた。

バイオマーカー分析を血液及び血清試料に対して行い、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の予測される薬物動態学的及び薬力学的マーカーを評価した。前述のように、ドロップレットデジタルポリメラーゼ連鎖反応を使用して、血液中の形質導入されたＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の存在、増殖、及び持続性を測定した。Ｌｏｃｋｅ ＦＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５（１）：２８５－２９５。以前に報告された方法を使用して、サイトカイン、ケモカイン、免疫エフェクター分子、及びマクロファージ活性化症候群のマーカーについて血清を評価した。Ｌｏｃｋｅ ＦＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５（１）：２８５－２９５。

統計解析

ＤＬＴ評価可能コホートには、２×１０^６の用量レベルで治療された最初の３人の患者を含めた。安全性及び有効性解析には、任意の用量の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞で治療された全ての患者が含まれた。カプランマイヤー推定値及び両側９５％信頼区間を、事象までの時間の評価項目について生成した。ＤＯＲは、ＣＲから、再発又は再発の証拠がなく死亡するまでの時間として定義した。寛解している間に同種ＳＣＴを受けた患者のＤＯＲは、移植日で打ち切った。ＯＳは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入から、あらゆる原因による死亡日までの時間として定義した。データは、２０１９年４月１日時点のものを示す。全ての統計解析をＳＡＳ（バージョン９．４）で行った。

結果

患者

２０１６年３月９日～２０１８年７月１２日に、５４人の患者が登録され、第１相において白血球アフェレーシスを受けた（図４）。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞製品は、５４人の患者全てにおいて製造が成功した。製品製造のため、１人の患者は２回の白血球アフェレーシス手技を、１人の患者は３回の手技を必要とした。白血球アフェレーシスから抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を試験部位に送達するまでの時間の中央値は、１５日であった。ＡＥ（ｎ＝３；図４）、同意の撤回（ｎ＝１）、又は白血球アフェレーシス後の不適格（ｎ＝１）によって、リンパ球除去前に５人の患者が中止された。リンパ球除去後に更に４人の患者が中止された。３人は、グレード４の敗血症（ｎ＝１）、新規治療の開始（ｎ＝１）、及びグレード５の敗血症による死亡（ｎ＝１）のため、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与されなかった。１人の患者は、深部静脈血栓症（除外基準）によって注入前に中止したが、適応外使用で抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。５４人の患者の４５人（８３％）は、２×１０^６（ｎ＝６）、１×１０^６（ｎ＝２３）、又は０．５×１０^６（ｎ＝１６）のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの用量で抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇコホートの２３人の患者のうち９人は、ＮＥのためステロイドの早期使用を必要とし、ＣＲＳ治療にのみトシリズマブを用意する、改訂ＡＥ管理ガイドラインで治療された。４４人の患者は、標的用量の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を受け、１×１０^６抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇと改訂ＡＥ管理を受けるために登録された１人の患者は、０．５×１０^６細胞／ｋｇで治療されたが、１×１０^６用量レベルの解析に含めた。

全ての治療患者の年齢の中央値は、４６歳（範囲、１８～７７）であり、６７％は、３種類以上の先行治療を受けていた（表１８）。登録前に、１６人の患者（４０％）は一次治療抵抗性であり、１３人（２９％）がＳＣＴ後に再発し、２１人（４７％）は先行ブリナツモマブを受けていた。ブリナツモマブは、８人の患者（１８％）における試験登録前に使用された直近の治療であり、そのうち１人のみがブリナツモマブに対する応答（ＣＲ）を達成した。

ＢＭ、骨髄；ＣＮＳ、中枢神経系；ＥＣＯＧ、Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ；ＳＣＴ、幹細胞移植

安全性

ＤＬＴ評価可能集団において、ＤＬＴは観察されなかった（ｎ＝３）。患者の９８パーセントが、グレード≧３のＡＥを経験した（表１９）。最も一般的な任意のグレードのＡＥは、発熱（８９％）、低血圧（６９％）、下痢（４２％）、及び悪寒（４２％）であった。一般的なグレード≧３のＡＥ（患者の２０％以上）は、発熱（４２％）、低血圧（４０％）、血小板数減少（３３％）、貧血（３１％）、低リン血症（３１％）、低酸素症（２４％）、脳症（２２％）、発熱性好中球減少症（２２％）、及び好中球数減少（２２％）であった。任意のグレードの重篤なＡＥは、患者の８４％で発現した。

^＊表には、全ての患者の２５％以上で発現した任意のグレードの有害事象が含まれる。

ＣＲＳは４２人の患者（９３％）で報告され、１４人の患者（３１％）は、グレード≧３のＣＲＳを経験した（表１９）。ＣＲＳの一般的なグレード≧３の症状は、発熱（４５％）、低血圧（３６％）、及び低酸素症（１７％）であった。昇圧剤は、１２人の患者（２７％）のＣＲＳの治療に使用した。注入後のＣＲＳ発現までの時間の中央値は２日（範囲、１～１２）であり、任意のグレード及びグレード≧３のＣＲＳの期間の中央値は、それぞれ９日及び４．５日であった。ＣＲＳ関連事象は、グレード５の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞関連ＡＥを経験した２人の患者以外は、全て解消した。２×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療された１人の患者は、ＣＲＳに続発した多臓器不全を有した（６日目）。０．５×１０^６細胞／ｋｇで治療された１人の患者は、ＣＲＳ及びＮＥと関連して脳血管障害（脳卒中）が発生した（７日目）。他の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞関連のグレード５のＡＥは報告されなかった。

ＮＥは３５人の患者（７８％）で報告され、グレード≧３の事象が１７人の患者で発現した（３８％、表１９）。患者の５％以上で発現したグレード≧３のＮＥは、脳症（２２％）、失語症（１６％）、及び錯乱状態（９％）であった。脳浮腫の症例はなく、グレード５のＮＥはなかった。注入後のＮＥ発現までの時間の中央値は６日（範囲、１～３１）であり、任意のグレード及びグレード≧３のＮＥの期間の中央値は、それぞれ１２日及び９日であった。ＮＥは、３１／３５人の患者（８９％）で解消し、神経学的事象が解消する前に、１人の患者は進行性疾患により死亡し、３人の患者は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞とは無関係であると考えられるＡＥにより死亡した（敗血症［ｎ＝１］、脳血管障害［ｎ＝１］、単純ヘルペスウイルス血症［ｎ＝１］）。

全ての患者の５３パーセントがトシリズマブを投与され、３６％はＣＲＳの管理のためにステロイドも投与され、ＮＥについて、３１％及び４４％は、それぞれトシリズマブ及びステロイドが投与された。元のガイドライン下で同じ用量で治療された１４人の患者と比較して、改訂ＡＥ管理ガイドライン下で治療された９人の患者では、全体的な安全性の改善が観察された（表２０）。元のガイドライン下で１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇにて治療された１４人の患者のうちの４人は、グレード３又は４のＣＲＳを有していた。改訂ＡＥ管理により、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療された３／９人の患者は、グレード３のＣＲＳを有し、グレード４のＣＲＳは報告されなかった。これらの患者はまた、元のＡＥガイドライン下で１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与された患者よりも、グレード≧３のＣＲＳ期間の中央値が短く（４日対７日）、グレード≧３の症状の発現までの時間が長かった（それぞれ、６日対４．５日）。特に、元のガイドラインで管理された１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ用量コホートの患者９／１４人は、グレード３／４のＮＥを経験し、対して、改訂された管理ガイドライン下で同用量を投与された患者においては、グレード３が１人、グレード４の事象はなかった（表２０）。利用可能な全ての安全性及び有効性データの評価に基づいて、リスクベネフィット比は、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの用量で最も好ましいと考えられ、その結果、この用量をＲＰ２Ｄとした。第２相患者の全ては、改訂ＡＥ管理ガイドライン下で治療した。

ＡＥ、有害事象；ＣＲＳ、サイトカイン放出症候群；ＮＥ、神経学的事象

２６人の治療患者（５８％）は、１９人（４２％）の疾患増悪と、２件の上述した治療関連死を含む７人（１６％）のＡＥを含む原因によって、死亡した。残りの５件のＡＥ関連死は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入後、６３日の中央値（範囲、４８～５７９）で発生し、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞とは無関係であると考えられた。それらは、敗血症（ｎ＝２）、脳血管障害（ｎ＝１）、単純ヘルペスウイルス血症（ｎ＝１）、及び菌血症（ｎ＝１）を含んでいた。

有効性

４５人の全治療患者は、有効性解析に適格であった。２２．１ヶ月（範囲、７．１～３６．１）の経過観察の中央値において、全体的寛解率（ＯＲＲ）は６９％であり、患者の５１％はＣＲを、１８％はＣＲｉを達成した（表２１）。１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療された２３人の患者のうち、ＯＲＲは８３％であり、１４人はＣＲ（６１％）を、５人（２２％）はＣＲｉを達成した。改訂ＡＥ管理を受けた９人の患者のうち６人が、ＣＲ／ＣＲｉ（ＣＲ４人、ＣＲｉ２人）を達成した。用量レベル全体におけるＣＲ／ＣＲｉまでの時間の中央値は、３０日（範囲、２６～１９２）であり、これは、６ヶ月目までのＣＲ基準を満たさなかった、２８日目において無芽球低形成性／無形成性骨髄（ＢＦＢＭ）を有した患者１人を含んでいた。ＯＲＲは、一般に、難治性患者（５６％）、先行移植（７７％）、先行ブリナツモマブ（５７％）又はイノツズマブオゾガマイシン（５０％）、及びＰｈ＋疾患患者（１００％）を含む、主要な共変量にわたって一貫していた（図５）。ＣＲ／ＣＲｉの３１人の患者、部分奏効の１人の患者、及びＢＦＢＭの１人を含み、レスポンダーの１００％において２８日目に検出不能な骨髄ＭＲＤが達成された。残存病変評価は、ＢＦＢＭの患者１人において利用できなかった。７～１４日目に任意選択の骨髄評価を受けた６人の患者のうちの２人は、検出不能ＭＲＤを有し、３０日目に利用可能なデータを有する５人の患者は、検出不能ＭＲＤであった。

^＊患者は、応答評価時点で骨髄外疾患を有した。
^†患者は、ＣＲＳに続発した多臓器不全のため６日目に死亡した。
^‡患者は、ＣＲＳ及び神経学的事象と関連する脳血管障害（脳卒中）のため７日目に死亡した

ＣＲ／ＣＲｉを達成した３１人の患者のＤＯＲ中央値は１４．５ヶ月（９５％ＣＩ、５．８～１８．１；図６Ａ）、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療された患者において１７．６ヶ月（９５％ＣＩ、５．８～１７．６）であった。ＤＯＲの中央値は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞後のＳＣＴについての打ち切りに関係なく類似していた（図６Ｂ）。データカットオフ時点で、８人の患者（２６％）はＣＲが継続しており、０．５×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを受けた２人、及び１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを受けた６人を含み、経過観察の中央値は３．６ヶ月（範囲、５．９～１８．２）であった。６人の患者（１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療された２人のＣＲ、１人の部分奏効；０．５×１０^６細胞／ｋｇで治療された３人のＣＲ）は、注入後２．７ヶ月の中央値（範囲、１．７～４．３）でＳＣＴを受けた。この解析時点で、これらのうち３人はＣＲに留まっていた（１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで治療した２人と、０．５×１０^６細胞／ｋｇで治療した１人）。全ての用量レベルにわたって、無再発生存期間の中央値は、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与された患者において、７．３ヶ月（９５％ＣＩ、２．７～１８．７）対７．７ヶ月（９５％ＣＩ、３．２～１８．７）であった（図６Ｃ）。全ての用量レベルにおいてＯＳの中央値は１２．１ヶ月（９５％ＣＩ、６．１～１９．１）であり、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇでは１６．１ヶ月（９５％ＣＩ、１０．２～推定不可能）であった（図６Ｄ）。

データカットオフ時点で、１人の患者（２％）は同意を撤回し、１人（２％）は経過観察が喪失し、１×１０^６細胞／ｋｇで治療された１１／２３人（５０％）を含む、１７人（３８％）は生存していた。４人の患者が、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の２回目の注入を受け、１人は再投与後１５ヶ月時点でＣＲであり、２人は３ヶ月目評価によって再発しており、１人は初回応答評価の前に同意を撤回した。

臨床薬理学

血液中の１μｇＤＮＡ当たりのＣＡＲ遺伝子コピー数によって測定したＣＡＲ Ｔ細胞レベルは、ほとんどの患者において抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞注入７～１４日後にピークに達し、１２ヶ月目において２／１２人の評価可能患者において検出可能なままであり、その両者がＣＲであった（図７Ａ；表２２）。

ＡＥ、有害事象；ＣＡＲ、キメラ抗原受容体

ＣＡＲ Ｔ細胞は、再発時に利用可能なデータを有する５人の患者において検出不能であった。ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルの中央値は、１×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇで最も高く、元のＡＥ管理と改訂ＡＥ管理を受けた患者間で同様であった（図７Ｂ、図８）。ＣＲ／ＣＲｉを達成した患者は、ノンレスポンダーよりも高いピーク増殖の中央値を有しており、検出不能対検出可能ＭＲＤを有する患者も同様であった（図７Ｃ～図７Ｄ、図８４Ｂ～図８４Ｃ）。グレード≧３対グレード≦２ＮＥの患者における、より高いピーク増殖値も観察された（図７Ｅ～図７Ｆ、図８Ｄ～図８Ｅ）。再発した１３人の患者のうち、７人は、再発時に検出可能なＣＤ１９陽性細胞を有しており、３人は、検出可能なＣＤ１９陽性細胞を有さず、３人は、データが入手できなかった。

主要なサイトカイン、ケモカイン、及び炎症誘発性マーカーのピークレベルは７日目までに発生し、いくつかは、２×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与された患者において、１×１０^６と比較して高くなる（ＩＬ－１５、ＣＲＰ、ＳＡＡ、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮγ）、又は、改訂ＡＥ管理を行ったものにおいて、元のＡＥ管理のものに対して低くなる（ＩＬ－６、フェリチン、ＩＬ－１ＲＡ、ＩＦＮγ、ＩＬ－８、ＣＸＣＬ１０、ＭＣＰ－１）傾向があった図９；図１０）。ＩＬ－１５のピーク血清レベルがグレード≧３のＣＲＳを有する患者において驚くほど低い一方で、いくつかの炎症誘発性マーカーのピークレベルの中央値は、グレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥを有する患者においてより高い傾向があった（ＩＦＮγ、ＩＬ－８、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１ＲＡ、ＣＸＣＬ１０、ＭＣＰ－１、グランザイムＢ；図１１）。

４人の患者は、抗ＣＡＲ抗体のスクリーニングアッセイ中に陽性であったが、全員が白血球アフェレーシスでの確認アッセイにおいて陰性であった。製造されたＣＡＲ Ｔ細胞製品の特徴は、予想され、以前に報告されたとおりであった（表２３）。

^＊共培養実験は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞製品と１：１の比率で混合したＴｏｌｅｄｏ細胞を使用して行った。ＩＦＮγを、適格なＥＬＩＳＡを使用して、インキュベーション２４時間後の細胞培養培地中で測定した。
ＡＥ、有害事象；ＩＦＮγ、インターフェロンγ

ＺＵＭＡ－３は、第１相を完了するための成人Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬにおけるＣＡＲ Ｔ細胞療法を評価する最初の多施設試験である。第１相の部分では、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞によりプロトコルで定義したＤＬＴは観察されず、報告されたＡＥは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法の従来の試験と一致していた。Ｎｅｅｌａｐｕ ＳＳ．ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１７；３７７（２６）：２５３１－２５４４、Ｍａｕｄｅ ＳＬ ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１８；３７８（５）：４３９－４４８。改訂ＡＥ管理ガイドラインと組み合わせた１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ用量は、活性を損なうことなく、最も好ましいリスクベネフィット比を有していた。患者は高い疾患負荷を有し、強い前治療を受けていたが、高い寛解率と骨髄ＭＲＤの未検出が、特に１×１０^６用量レベルで治療されたものにおいて達成され、６１％のＣＲと２２％のＣＲｉを含むＯＲＲは８３％であり、その全てが検出不能なＭＲＤを有した。抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞が安全であり、有望な有効性を有することを示しているこれらの結果に基づいて、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ用量が、第２相のＺＵＭＡ－３での更なる評価のために選択された。

成人Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを治療するための抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の使用は、この疾患の高い増殖性と、治療関連ＡＥへの認容不能によって困難であることが証明されている。この集団におけるこれまでのＣＡＲ Ｔ細胞試験は、脳浮腫の５症例を含む、致死的なＮＥのために早期に終了した。ＤｅＡｎｇｅｌｏ ＤＪ，Ｇｈｏｂａｄｉ Ａ，Ｐａｒｋ ＪＨ，ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｆｏｒ ＩｍｍｕｎｏＴｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ．２０１７；５（Ｓｕｐｐｌ ２）：Ｐ２１７。ＺＵＭＡ－３における元のＡＥ管理ガイドライン下で、２人の患者はグレード５のＡＥにより死亡したが、これは、ＤＬＴ評価時間枠外で、ＣＲＳの続発か、又はＣＲＳとＮＥとの関連のいずれかにおいて、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞に関連すると考えられた。最も管理可能な毒性を伴う用量を特定するために、複数回用量を評価することに加えて、神経毒性に早期のステロイド介入を必要とし、ＣＲＳに対してのみトシリズマブを使用する改訂ＡＥ管理ガイドラインを、１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ用量レベルに登録された９人の患者で実施した。これにより、元のガイドライン下で同用量で治療した１４人の患者と比較して、ＣＲＳ事象の持続時間が短く、ＮＥの発生率、重症度、及び持続時間が短くなった。

２２．１ヶ月の経過観察の中央値において、応答は、患者の２６％で継続中であり、患者のほとんどは１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇを投与されていた（３２％が継続中のＣＲ／ＣＲｉ）。応答は、治療後早期に起こる傾向があった。ほとんどが最初の月に発生したが、骨髄外疾患を有する１人の患者は、６ヶ月目にＣＲを達成した。Ｐｈ＋疾患患者における１００％ＣＲ率を含む、高い奏効率が、全ての事前に設定されたサブグループにわたって観察された。応答（ＣＲ／ＣＲｉ）は、治療後２週間以内に測定されたＣＡＲ Ｔ細胞のより高い増殖と関連していた。同様に、これもＣＤ３ζ及びＣＤ２８共刺激ドメインを含む抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を使用した単施設第１相試験（Ｐａｒｋ ＪＨ ｅｔ ａ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１８；３７８（５）：４４９－４５９）では、全ＣＲ率は８３％であり、ブリッジング療法後であっても、患者の半分のみが骨髄中≧５％の芽球を有し、２８％はＭＲＤを有し、１１％は検出不能ＭＲＤであった。それにもかかわらず、これらの試験結果は、本試験のものとほぼ類似しており、成人Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬにおいてＣＤ３ζ及びＣＤ２８共刺激ドメインを使用した抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法の潜在的な有用性を更に支持している。

ＣＤ３ζＴ細胞活性化ドメイン及び４－１ＢＢ共刺激ドメインを含む抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法であるチサゲンレクロイセルは、小児及び若年成人（≦２５歳）におけるＲ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬの治療に対して承認されている。Ｍａｕｄｅ ＳＬ ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１８；３７８（５）：４３９－４４８；ＫＹＭＲＩＡＨ（チサゲンレクロイセル）［添付文書］。Ｎｏｖａｒｔｉｓ．Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ、ＮＪ；２０１８。しかしながら、より若い患者におけるチサゲンレクロイセルの投与レジメンは、Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する成人において実質的な毒性及びＣＲＳ関連死をもたらした。Ｆｒｅｙ ＮＶ．ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０２０；３８（５）：４１５－４２２。２つの臨床試験にわたる成人Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬにおける単施設試験では、用量を分割して投与することにより、管理可能なＣＲＳ及び９０％ＣＲ率が得られた。Ｆｒｅｙ ＮＶ ｅｔ ａｌ．．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０２０；３８（５）：４１５－４２２。ＺＵＭＡ－３での観察結果と同様に、最適化された投与と毒性管理戦略は、患者を、ＣＡＲ Ｔ細胞療法による利益を得るために生命を脅かす治療関連毒性を受けやすくし得る。

試験デザイン、患者集団、及びＯＳの方法の違いにもかかわらず、本試験における１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇのＯＳ中央値は１６．１ヶ月であったが、こちらもＣＤ１９を標的とするブリナツモマブでこれまでに報告されているＯＳ中央値は、成人Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬで６．１～７．７ヶ月であった。Ｔｏｐｐ ＭＳ ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．２０１５；１６（１）：５７－６６、Ｋａｎｔａｒｊｉａｎ Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１７；３７６（９）：８３６－８４７。ＣＤ１９芽球発現について再発時に評価可能な１０人の患者のうち、３人はＣＤ１９発現が欠如しており、エクソンスプライスバリアント及び変異の選択に対する標的損失を要因とする他の報告を思い起こさせる。Ｓｏｔｉｌｌｏ Ｅ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖ．２０１５；５（１２）：１２８２－１２９５。本試験では、直近の先行治療がブリナツモマブである１／８人患者（１３％）のみが、ブリナツモマブに応答した。これは、Ｒ／Ｒ ＡＬＬを有する一部の患者において未操作Ｔ細胞における免疫不適格性を示唆することができ、二重特異性Ｔ細胞誘導因子療法の有用性を制限する可能性がある。任意の治療法で先行ブリナツモマブを受けた２１人の患者のうち、１２人（５７％）は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法後にＣＲ／ＣＲｉを達成した。これまで報告されたように（Ｓｈａｈ ＢＤ．ｅｔ ａｌ．．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１８；３６（ｓｕｐｐｌ）：ａｂｓｔｒ ７００６）、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞に対する応答は、ＣＤ１９陽性を持続している患者において先行ブリナツモマブ曝露に関係なく類似していた。更に、ＣＲを達成した６人の患者がＳＣＴを受け、ＳＣＴの時点で打ち切ったが、３人は寛解したままであった。

Ｒ／Ｒ Ｂ－ＡＬＬを有する成人は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞による治療後に、認容可能な安全性プロファイルを伴って高いＣＲ率及び検出不能な骨髄ＭＲＤを達成した。全ての登録された患者について製造が成功したことと、比較的迅速な回復時間により、迅速な治療を必要とする急速に進行する疾患有する患者に、この細胞療法による治療を提供する実現可能性を支持した。用量の範囲を注意深く評価し、ＡＥを管理するために投与しなければならないトシリズマブ又はステロイドの使用及び条件を含む安全性戦略を採用することにより、第１相から第２相国際試験に移行することが可能であった。この集団におけるこれまでの試験を制限していた致死的な脳浮腫症例は、第１相において見られなかった。ＺＵＭＡ－３の第２相は、改訂ＡＥ管理ガイドラインを用いて１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇ用量で継続中であった。
実施例１０

この実施例は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法治療に対する抵抗性に関連するＢ－ＡＬＬにおけるＣＤ１９中ＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０の結果を記載した。ＫＴＥ－Ｘ１９に先行するブリナツモマブを含むいくつかの療法が失敗した後、Ｂ－ＡＬＬ患者は１×１０^６ＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの標的用量を投与された。患者は臨床的に応答せず、ＣＡＲＴ及びＣＤ１９発現リンパ球は、２８日目に検出可能であった。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、ＫＴＥ－Ｘ１９注入前後の様々な時点で、Ｂ－ＡＬＬ患者から採取した。マルチカラーフローサイトメトリーを使用して、患者のＰＢＭＣと、ＣＤ１９－野生型（ＷＴ）又はＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０を発現するであるように操作されたジャーカット細胞株上のＣＤ１９（クローンＦＭＣ６３、ＨＩＢ１９、ＳＪ２５Ｃ１）表面発現について調べた。遺伝子変異体の存在は、強化された全ゲノム及びＲＮＡ配列決定（ＴｒｕＳｅｑ Ｓｔｒａｎｄｅｄ Ｔｏｔａｌ ＲＮＡ）を使用して評価した。細胞タンパク質発現の場所を、脱グリコシル化酵素の有無において、ウエスタンブロットを使用して評価した。

局所的な病理学的検査で、注入前のＢリンパ芽球は均一なＣＤ１９^ｄｉｍであると結論付けられたが、ＦＭＣ６３（ＫＴＥ－Ｘ１９の単鎖可変フラグメント）を有する同じ試料の追加分析により、ＣＤ１９が注入前Ｂリンパ芽球において検出できないことが明らかになった。ＲＮＡ配列決定の結果は、循環白血病性芽球中の、ＣＤ１９の細胞内ドメイン内のＴｙｒ２６０におけるインフレーム欠失（ＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０）を示した。フローサイトメトリーを使用した追加分析により、ＣＤ１９発現はジャーカットＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０細胞では検出されなかったが、ジャーカットＣＤ１９－ＷＴ細胞上に存在したことが示され、この点変異を有する細胞の視覚化の欠如と、ＣＡＲ Ｔ細胞療法に対する抵抗性を示唆した。縦断的ＲＮＡ及びＤＮＡ配列分析は、ＣＡＲ－Ｔ療法の注入前に変異が発生したことを示した。分画した細胞溶解物は、高分子量バンド及び低分子量バンドを有するＷＴ ＣＤ１９が細胞膜中に、並びに単一の低分子量バンドを有するＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０が表面上に、発現されたことを示した。脱グリコシル化条件下では、ＷＴ ＣＤ１９及びＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０細胞画分の両方にバンドが１本のみが存在した。任意の科学理論又は仮説に拘束されることなく、ＣＤ１９ΔＴｙｒ２６０突然変異は、適切な又は機能的なＣＤ１９グリコシル化の欠如及び／又は検出阻害をもたらし得る可能性がある。Ｂ－ＡＬＬ悪性細胞の変異は、他の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ又は非ＣＤ１９ ＣＡＲ細胞療法についての潜在的な影響を有し得る。
実施例１１

ＢＴＫｉ療法後に増悪したＭＣＬ患者は、典型的には予後不良であり、サルベージ療法により、たった５．８ヶ月の全生存期間を有する。Ｍａｒｔｉｎ Ｐ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１６；１２７：１５５９－１５６３。第２相ＺＵＭＡ－２試験では、ＫＴＥ－Ｘ１９を、ＢＴＫＫｉを含む１～５種類の先行治療に対してＲ／ＲであったＭＣＬを有する患者において評価した。Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２。１２．３ヶ月の経過観察の中央値において、ＺＵＭＡ－２（Ｎ＝６０）の主要有効性解析ではＯＲＲは９３％（６７％の完全奏効）であった。芽球様型又は多形性型ＭＣＬを含む中悪性度の疾患変異型は、一般に、臨床転帰不良に関連しているが、ＺＵＭＡ－２においては、ＯＲＲは様々な組織型を有する患者にわたって同等であった。Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２、Ｊａｉｎ Ｐ ａｎｄ Ｗａｎｇ Ｍ．Ａｍ Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ．２０１９；９４：７１０－７２５。この試験では、ＺＵＭＡ－２でのＭＣＬ形態及び先行ＢＴＫｉ曝露によって定義される患者サブグループにおける薬理学的プロファイル及び臨床転帰を、製品属性及び他の治療前因子の特徴と共に比較した。患者は、白血球アフェレーシス及び前処置化学療法を受けた後、０日目の単回ＩＶ注入により、２×１０^６個のＣＡＲ Ｔ細胞／ｋｇの標的用量でＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔの単回注入を受けた。一部の患者は、白血球アフェレーシス後に投与される、デキサメタゾン（２０～４０ｍｇ又は当量のＰＯ又はＩＶ、１～４日間１日１回）、イブルチニブ（５６０ｍｇ ＰＯ、１日１回）、又はアカラブルチニブ（１００ｍｇ ＰＯ、１日２回）からなるブリッジング両方を受け、前処置化学療法の開始前５日以内に完了させ、ブリッジング後にＰＥＴ－ＣＴを必要とした。主要評価項目は、客観的奏効率（ＯＲＲ［完全奏効（ＣＲ）＋部分奏効］）とした。副次的評価項目は、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、ＯＳ、有害事象（ＡＥ）の頻度、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞のレベル、及び血清中のサイトカインのレベルとした。有効性及び安全性解析には、ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法を受けた全ての患者を含めた。初回の腫瘍評価を２８日目に行った。骨髄生検は、スクリーニング時に行われ、陽性、未実施、又は不確定であった場合、ＣＲを確認するために生検を必要とした。

１２．３ヶ月の経過観察の中央値を有するＫＴＥ－Ｘ１９で治療したＭＣＬを有するＺＵＭＡ－２における６０人の患者のうち、ＯＲＲは９３％、ＣＲ率は６７％であり、全患者の５７％及びＣＲ患者の７８％が奏功継続を有した。ＣＲＳ及び神経学的事象は、ほとんどが可逆的であった（Ｎ＝６８、治療患者）。約１５％は、グレード≧３のＣＲＳ、３１％はグレード≧３の神経学的事象、及び２名はグレード５のＡＥ（１名はＫＴＥ－Ｘ１９関連）を有した。患者のサブグループは、形態学的特徴（古典型、芽球様型、又は多形性型ＭＣＬ）、並びに、イブルチニブのみ、アカラブルチニブのみ、又はイブルチニブ及びアカラブルチニブの両方への先行曝露によって定義した。表２４。ベースライン特性は、これらの群にわたって一般に同等であった。イブルチニブで先行治療された患者において、治療前の腫瘍負荷が高い傾向があった。製品特性、血液中のＣＡＲ Ｔ細胞レベル、及び血清中のサイトカインレベルを、前述の方法を使用して分析した。Ｌｏｃｋｅ ＦＬ，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１７；２５：２８５－２９５。製品のＴ細胞属性は、ＭＣＬ形態サブグループにわたって一般に同等であった。多形性型形態を有する患者由来の製品において、共培養のＩＦＮ－γ生成物及びＣＣＲ７＋細胞の割合が増加する傾向があった。表２５。製品のＴ細胞属性もまた、先行ＢＴＫｉサブグループにわたって一般に同等であった。イブルチニブで先行治療された患者において、共培養のＩＦＮ－γ生成物が増加する傾向があった。表２６。

^ａベースラインにおいて、全ての標的病変の積和寸法によって測定。ブリッジング療法を行った被験者では、ブリッジング療法後の測定値をベースラインとして使用する。

^ａ利用可能なデータに基づく：古典型、ｎ＝３８；芽球様型、ｎ＝１６

^ａ利用可能なデータに基づく：イブルチニブ、ｎ＝４９

高い奏効率は、ＭＣＬ形態及び先行ＢＴＫｉサブグループにわたって達成された。表２７。ＫＴＥ－Ｘ１９治療による臨床的利益は、ＭＣＬ形態又は先行ＢＴＫｉによって定義される全てのサブグループで観察された。イブルチニブで先行治療された患者において、６ヶ月目で継続中の奏効率がより高い傾向が観察された。表２７。ＣＲＳ及び神経学的事象は、一般に、ＭＣＬ形態及び先行ＢＴＫｉサブグループにわたって同等であった。表２８。非芽球様型形態又はイブルチニブで先行治療された患者において、グレード≧３の神経学的事象の割合の増加傾向が観察された。表２８。

^１Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０２０；３８２：１３３１－１３４２。ＣＲ、完全奏功；ＭＣＬ、マントル細胞リンパ腫；ＮＥ、評価不能；ＯＲＲ、客観的奏効率；ＯＳ、全生存期間

サブグループにわたる比較は、クラスカルワリス検定を使用して行い、Ｄｕｎｎの事後検定を使用して、群間を比較した。ＫＴＥ－Ｘ１９（２×１０^６細胞／ｋｇ）で治療された６８人の患者全てについて、薬理学的プロファイル、製品属性、及び安全性データが報告された。ＭＣＬ形態サブグループにわたるＫＴＥ－Ｘ１９の薬理学的及び薬力学的プロファイルは、芽球様型形態の患者と比較して、古典型形態を有する患者において（図１２及び１３）、又はアカラブルチニブ単独と比較してイブルチニブで先行治療された患者において図１４及び１５）、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖の増加と炎症誘発性サイトカインの選択を示唆した。治療前の患者及び製品特性は、一般に、ＭＣＬ形態及び異なる先行治療を有するサブセットにわたって同等であった。芽球様型形態の患者は、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖、循環骨髄関連サイトカイン及びケモカイン、並びにグレード≧３のＣＲＳ及び神経学的事象の割合の減少を示したが、臨床的有効性は、古典型形態を有する患者のものと同等であった。芽球様型形態を有する患者における改善された安全性プロファイルの傾向は、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖のより低いピークと、骨髄関連炎症に関与するサイトカインのピークレベル減少と相応していた。イブルチニブで先行治療された患者は、アカラブルチニブ単独で先行治療された患者と同等の、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖、循環炎症性サイトカイン及びケモカイン、並びにグレード≧３の神経学的事象の割合の増加と、並びに、６ヶ月目において継続中の奏効率及びＯＲＲの増加を示した。アカラブルチニブで先行治療された患者は、改善された安全性プロファイルと一致する、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖及び循環Ｔ１関連サイトカイン及びケモカインの減少を示した。
実施例１２

この実施例では、実施例５に従って調製されるＫＴＥ－Ｘ１９とアキシカブタゲンシロロイセルの２種類の抗ＣＤ１９ ＣＡＲＴ療法の特徴を確認した。細胞を、ＣＤ３（汎Ｔ細胞マーカー）、ＣＤ１４、ＣＤ１９（Ｂ細胞マーカー）、ＣＤ４５（汎白血球マーカー）、及びＣＤ５６（活性化及びＮＫマーカー）に対する蛍光結合抗体で標識し、フローサイトメトリーによって評価した。細胞生存率を、ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｄｙｅ（ＳＹＴＯＸ、近ＩＲ）の死細胞染色を使用して評価した。アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）は０．２％であり、ＮＫ細胞及び単球については５％であった。ＮＫ細胞のパーセンテージを決定した（ＮＫ細胞は、ＣＤ４５^＋、ＣＤ１４^－、ＣＤ３^－、及びＣＤ５６^＋であり、Ｔ細胞は、ＣＤ４５^＋、ＣＤ１４^－、及びＣＤ３^－であった）。２３ロットのアキシカブタゲンシロロイセル及び９７ロットのＫＴＥ－Ｘ１９のＮＫ細胞のパーセンテージの中央値は、それぞれ、１．９％（範囲、０．８％～３．２％）及び０．１％（範囲、０．０％～２．８％）であった。同じロットのアキシカブタゲンシロロイセル及びＫＴＥ－Ｘ１９のＣＤ３^－細胞不純物の中央値は、それぞれ、２．４％（範囲、０．９％～４．６％）及び０．５％（範囲、０．３％～３．９％）であった。細胞生存率におけるＫＴＥ－Ｘ１９及びアキシカブタゲンシロロイセルの結果は、それぞれ、≧７２％及び≧８０％であり、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現は、それぞれ、≧２４％及び≧１５％であり、ＩＦＮ－γ産生は、それぞれ、≧１９０ｐｇ／ｍＬ及び≧５２０ｐｇ／ｍＬであり、ＣＤ３^＋細胞のパーセンテージは、それぞれ、≧９０％及び≧８５％であった。
実施例１３

実施例２及び実施例７を含むこれまでの実施例において、２×１０^６ＫＴＥ－Ｘ１９細胞／ｋｇを単回注入で投与された患者の追加の結果を提供した。ＩＲＲＣ評価によるＯＲＲは９２％（９５％ＣＩ、８２～９７）であり、ＣＲ率は６７％（９５％ＣＩ、５３～７８）であった。１７．５ヶ月（範囲、１２．３～３７．６）の経過観察の中央値では、２９人の患者は奏功継続のままであった。継続的な奏効率は、高リスク疾患特性を有する患者間で主に一貫していた。治療された最初の２８人の患者は、３２．３ヶ月（範囲、３０．６～３７．６）の経過観察中央値を有した。患者の３９％は、更なる治療を行わずに継続的に寛解したままであった。全ての登録患者（Ｎ＝７４）では、ＯＲＲは８４％（５９％ＣＲ率）であった。ＤＯＲ、ＰＦＳ、及びＯＳの中央値は、１７．５ヶ月の経過観察中央値後に到達しなかった。表２９。継続中の奏効率は、予後不良群にわたって一貫していた。図１６。１７．５ヶ月の経過観察の中央値において、ＺＵＭＡ－２試験は、Ｒ／Ｒ ＭＣＬ患者におけるＫＴＥ－Ｘ１９療法の実質的かつ持続性のある臨床的利益を示し続けていた。更なる経過観察において新たな安全性の警告は観察されなかった。前回の報告以降、新たなＣＲＳ又は新たなグレード５の事象は発生しなかった。表３０。ＡＥ率は経時的に減少した。ＫＴＥ－Ｘ１９療法は、延長する経過観察期間を伴い管理可能な安全性プロファイルを示した。

^ａ５５人の合計応答患者のうち。

^ａ患者の≧１０％で発生した任意のグレードのＡＥを含む。

利用可能なデータを有する５７人の有効性評価可能患者のうち、４８人（８４％）は、ベースラインにおいて検出可能なＢ細胞を有した。１２ヶ月目において奏功継続を有する患者のうち、評価可能患者の５０％超が、６、１２、１５、及び２４ヶ月目に検出可能なＢ細胞及び遺伝子マーキングされたＣＡＲ Ｔ細胞を有していた。１２ヶ月目において奏功継続している患者のうち、遺伝子マーキングされたＣＡＲ Ｔ細胞を有する患者のパーセンテージは、一般に経時的に減少し、３、６、１２、１５、１８、及び２４ヶ月目において、それぞれ、１００％、９３％、８２％、８９％、８０％、及び５６％であった。ＫＴＥ－Ｘ１９に応答できなかった患者においては、ＣＡＲ Ｔ細胞ピーク増殖が減少していた。ピークＣＡＲ Ｔ細胞増殖は、ノンレスポンダー患者と比較して、１２ヶ月目に奏功継続している、又は１２ヶ月目で再発した患者において増加した。後に再発した患者において、当初はＣＡＲ Ｔ細胞レベルの上昇が観察されたため、二次治療失敗の代替機構を示していると思われる。１２ヶ月目データカットでのベースラインの腫瘍量によって補正したＣＡＲ Ｔ細胞ピークレベルと継続的な応答を、図１７Ａ（ＩＮＶ）及び１７Ｂ（ＣＥＮ）に示す。

本出願で引用されている全ての刊行物、特許、特許出願、及び他の文書は、各個々の刊行物、特許、特許出願、又は他の文書が全ての目的のために参照により組み込まれることが個別に示されている場合と同じ程度に、全ての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

様々な特定の実施形態が例示及び説明されてきたが、本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々な変更を行うことができることが理解されよう。

Claims (36)

1. マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又はＢ細胞ＡＬＬの治療が必要な対象における、その方法であって、前記対象に、抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現している自己Ｔ細胞を含む、治療有効量のＴ細胞製品を投与することを含む、方法。
2. 前記ＭＣＬ及びＢ細胞ＡＬＬが、再発性又は難治性ＭＣＬ及びＢ細胞ＡＬＬであり、任意選択的に、前記ＭＣＬが、古典型、芽球様型、及び多形性型ＭＣＬである、請求項１に記載の方法。
3. 前記ＭＣＬ及びＢ細胞ＡＬＬが、化学療法、放射線療法、免疫療法（Ｔ細胞療法、及び／又は、抗体若しくは抗体薬物コンジュゲートによる治療を含む）、自家幹細胞移植、又はこれらの任意の組み合わせのうちの１つ以上に対して抵抗性であるか、又はその後に再発している、請求項１及び２のいずれか一項に記載の方法。
4. 前記対象が、１～５種類の先行治療を受けており、任意選択的に、前記先行治療のうちの少なくとも１つが、自家ＳＣＴ、抗ＣＤ２０抗体、アントラサイクリン若しくはベンダムスチンを含む化学療法、及び／又は、ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤（ＢＴＫｉ）から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
5. 前記ＢＴＫｉが、イブルチニブ又はアカラブルチニブである、請求項４に記載の方法。
6. Ｒ／Ｒ Ｂ細胞ＡＬＬが、第１選択療法に対する抵抗性（すなわち、一次治療抵抗性）、初回寛解１２ヶ月以内の再発、２種類以上の先行全身療法後の再発若しくは抵抗性、又は同種幹細胞移植（ＳＣＴ）後の再発として定義され、任意選択的に、前記対象は、骨髄芽球５％以上、Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐのパフォーマンスステータスが０若しくは１、及び／又は、十分な腎、肝、及び心機能を有することが求められる、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記Ｂ細胞 ＡＬＬの対象が先行ブリナツモマブを投与されている場合、前記対象は、ＣＤ１９発現が≧９０％である白血病性芽球を有することが求められる、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記対象が、白血球アフェレーシス後かつ前処置／リンパ球除去化学療法の前にブリッジング療法を受ける、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
9. 前記ＭＣＬの対象が、静脈内シクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ^２及び静脈内フルダラビン３０ｍｇ／ｍ^２のリンパ球除去化学療法レジメンを受け、その両方がＴ細胞注入の５日前、４日前、及び３日前に各々投与される、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記Ｂ細胞ＡＬＬの対象が、Ｔ細胞注入の４日前、３日前、２日前の各々の静脈内（ＩＶ）フルダラビン２５ｍｇ／ｍ^２／日と、注入の２日前のＩＶシクロホスファミド９００ｍｇ／ｍ^２／日とのリンパ球除去レジメンを受ける、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記ＭＣＬブリッジング療法が、デキサメタゾン（例えば、ＰＯ又はＩＶ２０～４０ｍｇ当量、１日１回１～４日間）；メチルプレドニゾロン、イブルチニブ（例えば、ＰＯ５６０ｍｇ、１日１回）、及び／若しくはアカラブルチニブ（例えば、ＰＯ１００ｍｇ、１日２回）；免疫調節剤；Ｒ－ＣＨＯＰ、ベンダムスチン；アルキル化剤；並びに／又は、白金系薬剤から選択され、前記ブリッジング療法が、白血球アフェレーシス後に投与され、例えば、前処置化学療法前５日間以内に完了している、請求項８～１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記Ｂ細胞ＡＬＬの対象が、次のブリッジング化学療法レジメンのうちのいずれか１つ以上を受け得る、請求項８～１０のいずれか一項に記載の方法。
    

    
13. 前記Ｔ細胞製品が、正の濃縮と、その結果生ずる循環がん細胞の部分的又は完全な枯渇によって、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から調製される、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋ＣＡＲ Ｔ細胞を含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記ＰＢＭＣが、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋細胞の正の選択によってＴ細胞について濃縮され、ＩＬ－２の存在下で抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体によって活性化され、次いで、抗ＣＤ１９単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、ＣＤ２８、及びＣＤ３ζドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、ＦＭＣ６３－２８Ｚ ＣＡＲを含有する複製不全ウイルスベクターによって形質導入される、請求項１３に記載の方法。
15. 前記Ｔ細胞製品が、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について正の選択がなされていない白血球アフェレーシス産物由来のＴ細胞を含むＴ細胞製品よりも少ないがん細胞を含む、請求項１３及び１４のいずれか一項に記載の方法。
16. 前記Ｔ細胞製品が、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について正の選択／濃縮がなされていない白血球アフェレーシス産物由来のＴ細胞を含むＴ細胞製品に対して、他の優れた製品特性を有する、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。
17. 前記優れた製品特性が、ＣＤＲＡ４５＋ＣＣＲ７＋（ナイーブ様）Ｔ細胞の割合の増加、分化したＴ細胞の割合の減少、ＣＤ３＋細胞の割合の増加、ＩＦＮ－γ産生の減少、ＣＤ３－細胞の割合の減少から選択される、請求項１６に記載の方法。
18. 前記ＭＣＬの対象は、体重１ｋｇ当たり１．８×１０^６、１．９×１０^６、又は２×１０^６個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞、最大２×１０^８個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞（１００ｋｇ以上の患者の場合）を１回以上投与され、前記Ｂ細胞ＡＬＬの対象は、体重１ｋｇ当たり０．５×１０^６、１×１０^６、又は２×１０^６個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞、最大２×１０^８個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞（１００ｋｇ以上の患者の場合）を投与される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記対象が、初回注入に対して完全奏功を達成した場合、前記対象は、２回目の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入を受けることができ、３ヶ月超の寛解後に増悪した場合、ＣＤ１９発現が保持され、ＣＡＲに対する中和抗体の疑いがないことを条件とし、応答は、Ｌｕｇａｎｏ分類を使用して評価される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
20. Ｔ細胞投与後、前記対象が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び神経毒性の徴候及び症状についてモニタリングされる、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記対象が、ＣＲＳ及び神経毒性の徴候及び症状について、注入後少なくとも７日間、好ましくは４週間毎日モニタリングされる、請求項２０に記載の方法。
22. ＣＲＳに関連する前記徴候又は症状が、発熱、悪寒、疲労、頻脈、悪心、低酸素症、及び低血圧を含み、神経学的事象に関連する前記徴候又は症状が、脳症、けいれん、意識レベルの変化、発話障害、振戦、及び錯乱を含む、請求項２０及び２１のいずれか一項に記載の方法。
23. ＭＣＬの対象におけるサイトカイン放出症候群が、以下のプロトコルに従って管理される、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の方法。
    

    
24. ＭＣＬの対象における神経毒性が、以下のプロトコルに従って管理される、請求項２０～２３のいずれか一項に記載の方法。
    

    
25. 前記ＭＣＬの対象が、Ｋｉ－６７腫瘍増殖指標が５０％以上、及び／又は、ＴＰ５３突然変異の存在によって決定される高リスク患者である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。
26. Ｂ細胞ＡＬＬの対象におけるＣＲＳが、以下のプロトコルに従って管理される、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の方法。
    

    
27. Ｂ細胞ＡＬＬの対象における神経毒性が、以下の２つのプロトコルのうちの１つに従って管理される、請求項２０～２２及び２６のいずれか一項に記載の方法。
    

    
28. 前記Ｂ細胞ＡＬＬの対象が、次のブリッジング化学療法レジメンのうちのいずれか１つ以上を受け得る、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
    

    
29. 請求項１～２８のいずれか一項に記載のマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又はＢ細胞ＡＬＬを治療するための方法で使用するための、抗ＣＤ１９ ＣＡＲを発現している自己Ｔ細胞。
30. 請求項１～２８のいずれか一項に記載のマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）又はＢ細胞ＡＬＬを治療するための薬剤の製造における、抗ＣＤ１９ ＣＡＲを発現している自己Ｔ細胞の使用。
31. 予測方法であって、
    （ｉ）ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）に対する対象の客観的奏効率を予測する方法であって、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルを測定し、それらを参照標準と比較することを含み、客観的奏効率は、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルと正に関連し、客観的奏効率は、完全奏効及び部分奏効の両方を含み、全ての応答は、Ｌｕｇａｎｏ分類を使用して評価される、方法、
    （ｘｉｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）に応答する微小残存病変（例えば、４週目）を予測する方法であって、ピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルを測定し、それらを参照標準と比較することを含み、陰性の微小残存病変が、より高いピークＣＡＲ Ｔ細胞レベルと関連する、方法、
    （ｘｉｉｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）を受けた対象における、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３の神経学的事象（ＮＥ）を予測する方法であって、治療後にピークＣＡＲ Ｔ細胞増殖を測定し、そのレベルを参照値と比較することを含み、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖が高いほど、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥ事象の可能性が高くなる、方法、
    （ｘｉｖ） グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）後のＧＭ－ＣＳＦ及びＩＬ－６のピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含み、これらのサイトカインのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥの可能性が高くなる、方法、
    （ｘｖ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）を受けた対象におけるグレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療後の血清フェリチンのピークレベルを測定し、それを参照レベルと比較することを含み、フェリチンのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＣＲＳの可能性が高くなる、方法、
    （ｘｖｉ） グレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載）後の血清ＩＬ－２及びＩＦＮ－γのピークレベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－２及びＩＦＮ－γのピークレベルが高いほど、グレード≧３のＮＥの可能性が高くなる、方法、
    （ｘｖｉｉ） グレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載）後のＣ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び／又は血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルを測定し、それらを参照レベルと比較することを含み、Ｃ反応性タンパク質、フェリチン、ＩＬ－６、ＩＬ－８、及び／又は血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）の脳脊髄液レベルが高いほど、グレード≧３のＮＥの可能性が高くなる、方法、
    （ｘｖｉｉｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）後のグレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及び／又はパーフォリンのピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－１５、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、フェリチン、ＩＬ－１０、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１ａ、ＭＩＰ－１ｂ、グランザイムＡ、グランザイムＢ、及び／又はパーフォリンのピーク血清レベルが、グレード≧３のＣＲＳと正に関連する、方法、
    （ｘｉｘ） Ｂ細胞ＡＬＬのＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）後のグレード≧３のＣＲＳを予測する方法であって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－１５のピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－１５のピーク血清レベルがグレード≧３のＣＲＳと負に関連する、方法、
    （ｘｘ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法による）後のグレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを予測する方法であって、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ治療後のＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢのピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照レベルと比較することを含み、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１ｂ、及びグランザイムＢのピーク血清レベルが、グレード≧３のＣＲＳ及びグレード≧３のＮＥと正に関連する、方法、
    （ｘｘｉ） ＣＡＲ Ｔ細胞治療（任意選択的に、請求項１～２８のいずれか一項に記載）４週間／１ヶ月後に患者がＭＲＤ（感度１０^－５）陰性になるかどうかを予測する方法であって、治療後のＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、及び／又はＩＬ－２のピーク血清レベルを測定し、そのレベルを参照標準と比較することを含み、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、及び／又はＩＬ－２のピーク血清レベルが、１ヶ月目のＭＲＤ陰性と正に関連する、方法。
32. ＣＲＳ及びＮＥが、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２０１４；１２４：１８８－１９５に記載される方法に従ってグレード付けされる、請求項２０～２４、２６、２７、及び３０～３１のいずれか一項に記載の方法。
33. 前記参照標準が、既知の応答、毒性のグレード、及びＭＲＤレベルを有する患者集団の四分位分析など、バイオマーカー分野で一般的に使用される任意の方法によって確立される、請求項３１に記載の方法。
34. ＣＡＲ Ｔ細胞レベルが、血液中のＤＮＡマイクログラム当たりのＣＡＲ遺伝子コピー数によって測定される、請求項３１に記載の方法。
35. ＣＡＲ Ｔ細胞注入後のグレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥと正に関連するサイトカインのレベル／活性を低下させ、グレード≧３のＣＲＳ及び／又はグレード≧３のＮＥを低下させることを更に含む、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
36. ＣＡＲ Ｔ細胞治療を必要とする対象における、（例えば、古典型、芽球様型、及び多形性型ＭＣＬ、並びにＢ細胞ＡＬＬの）ＣＡＲ Ｔ細胞治療の有効性を改善する方法であって、前記対象に投与するＴ細胞製品のＴ細胞表現型を操作することを含み、任意選択的に、前記操作は、ＣＤ３＋Ｔ細胞の数を増加させること、ＣＤ３－細胞の数を減少させること、製造中のＴ細胞製品中のＣＤＲＡ４５＋ＣＣＲ７＋（ナイーブ様）Ｔ細胞の数／割合を増加させ、かつ／又は、分化した細胞の数／割合を減少させること、Ｔ細胞によるＩＦＮ－γ産生のレベルを減少させること、を含み、前記改善は、Ｔ細胞製品中のＣＤＲＡ４５＋ＣＣＲ７＋（ナイーブ様）Ｔ細胞の数／割合、及び／又は、分化した細胞の数／割合について意図的な操作を全く行わずに調製されたＴ細胞製品の有効性に対して観察される、方法。

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