JP2023129314A

JP2023129314A - コレステロール吸収阻害剤

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Publication number: JP2023129314A
Application number: JP2023027002A
Authority: JP
Inventors: 正樹加藤; Masaki Kato; 勉野崎; Tsutomu Nozaki; 洋一松浦; Yoichi Matsuura; 裕之藤田; Hiroyuki Fujita
Original assignee: BHN Co Ltd
Current assignee: BHN Co Ltd
Priority date: 2022-03-04
Filing date: 2023-02-24
Publication date: 2023-09-14

Abstract

【課題】コレステロール含有胆汁酸ミセルを強力に崩壊しコレステロールの吸収を阻害することで、高コレステロール血症及びこれが危険因子となる疾病の予防と治療に有効利用できる天然物由来のコレステロール吸収阻害剤を提供する。【解決手段】フトモモ科クンゼア属に属する植物であるカヌカの葉及び／又は樹皮の抽出物又は精製物、より好適には水若しくは含水溶媒による抽出物を含有してなるコレステロール吸収阻害剤。又は、これを配合してなる経口組成物。【選択図】なし

Description

本発明は、特定の植物を原料として使用したコレステロール吸収阻害剤に関するものである。より詳細には、フトモモ科クンゼア属に属するカヌカ（Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ）等の植物の抽出物を含有してなるコレステロール吸収阻害剤及びこれを配合した飲食品、医薬品、飼料、ペットフード等の経口用組成物に関する。

日本では、食生活の欧米化が進むとともに、肉類や油脂類の摂取量が増え、高コレステロール血症の患者が増加している。令和元年「国民健康・栄養調査」では、総コレステロール値が２４０ｍｇ／ｄＬ以上の人の割合は男性１２．９％、女性２２．４％であり、１０年前の平成２１年（男性：１０．０％、女性：１３．９％）と比べて増加していると報告されている。「健康日本２１（第二次）」の目標値は男性：１０％、女性：１７％であり、目標を達成できていないのが現状である。高コレステロール血症は動脈硬化のリスクを高め、脳卒中や心筋梗塞を引き起こす可能性があることから、その予防は非常に重要である。

消化管内に存在するコレステロールは胆汁酸ミセルに取り込まれた後、小腸上皮細胞に到達し、単分子として放出される。放出されたコレステロールは、カイロミクロンに組み込まれ、血中へと輸送される。そのため、コレステロールが体内に吸収されるためには、小腸内腔で胆汁酸ミセルへ溶解することが必須である。

高コレステロール血症等の脂質異常症の予防及び治療のためには主に食事療法や運動療法が用いられているが、効果が得られるまでに長期間を要することや、強固な意思を要するために、多忙な現代においてはその実行と継続は困難を伴い、一過性に終わることが多い。

薬物投与による治療は主に重症の高コレステロール血症患者や脂質異常症患者に対して適用され、薬物の副作用の懸念もあり、いずれも汎用的な方法とは言い難い。したがって、より安全かつ容易に高コレステロール血症を予防及び改善する方法を提供することが求められている。

高コレステロール血症を予防するための観点から、過剰なコレステロール吸収を抑制するためにコレステロールから変換される胆汁酸の吸収を阻害する物質や小腸でのコレステロール輸送体を阻害する物質が開発されている。胆汁酸ミセルの形成は小腸からコレステロールを吸収するために必須な過程である。したがって、コレステロール含有胆汁酸ミセルの形成を阻害する又は胆汁酸ミセルの崩壊を促進する物質は、高コレステロール血症及びこれに伴う前記疾病の予防と治療に有効である。

これらの観点から、コレステロール吸収を阻害する天然成分やこれを含む様々な供給源、加工物が提案されており、例えば、緑茶の成分であるエピガロカテキンガレート等のガレート型カテキン（特許文献１）、卵白タンパク質（特許文献２）、塩基性アミノ酸残基を含むペプチド（特許文献３）、植物ステロール、植物スタノール（非特許文献１）、テアフラビン（非特許文献２）、ニガウリ水性抽出物（非特許文献３）、乳酸菌（非特許文献４）、Ｓａｐｉｎｄｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔｕｓ由来Ｓａｐｉｎｄｉｎ（非特許文献５）等を挙げることができる。

なお、本発明において使用するカヌカ（学名：Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ）はフトモモ科クンゼア属に属する植物であり、ニュージーランドを原産地とし当該国のみに自生する。一般的にはカヌカ、ホワイトマヌカ、ホワイトティーツリー等と呼ばれている。ニュージーランド先住民のマオリ族はカヌカを伝統的な治療及び儀式に用いてきた。葉の煎薬は排尿障害の治療や解熱剤として使用されてきたほか、葉を煮たときに生じる蒸気を吸い込むことによる咳や風邪の治療に用いられた。種子を煎じた薬は外用として炎症を抑え、下痢のときには飲用されていた。又、葉や種子はそのまま噛んで赤痢症状の改善にも用いられた。樹脂滲出物による火傷の治療、種子や葉や樹皮を煎じた薬による炎症の治療、樹皮を煎じた薬は外用薬として鎮静剤や口腔、目の病気の治療、殺菌剤として使用されてきた（非特許文献６、非特許文献７）。

カヌカの葉の抽出物には、微量成分としてグロビュロール、スパチュレノール、ビリジフロロール、ベツリン酸、オレアノール酸、ウルソール酸等のテルペン類、５，７－ジヒドロキシ－６－メチルフラバノン等のフラボノイド類が含まれていることが知られており、これらの成分等により前述の薬理作用が発現すると言われている（非特許文献６）。

又、カヌカの葉を亜臨界水抽出法にて抽出した抽出物には、没食子酸、ケルセチン、カテキン等が主要な成分として検出されたという報告がある（非特許文献８）。

又、カヌカを加工して得られるオイルを産業的に利用する試みとして、カヌカオイルを含む殺真菌性エマルジョン（特許文献４）等が提案されている。しかしながらカヌカの葉の抽出物とコレステロール吸収阻害との関連について言及するものは見当たらない。

特開２００４－２６２９２７号公報特開２０１３－０２７３３４号公報特開２０２１－０５２５９７号公報特表２００５－５３８１５７号公報

ＩｋｅｄａＩ．ＪＯｌｅｏＳｃｉ．第６４巻、第９－１８頁、２０１５年ＶｅｒｍｅｅｒＭＡ，ＭｕｌｄｅｒＴＰ，ＭｏｌｈｕｉｚｅｎＨＯ．ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ．第５６巻、第１２０３１－１２０３６頁、２００８年ＳｕＪ，ＷａｎｇＨ等、ＩｎｔＪＦｏｏｄＳｃｉＮｕｔｒ．第６７巻、第２０－２８頁、２０１６年ＴｓａｉＣＣ，ＬｉｎＰＰ等、ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌ．第２０１４巻、第６９０７５２頁、２０１４年ＶｉｎａｒｏｖａＬ，ＶｉｎａｒｏｖＺ等、ＦｏｏｄＦｕｎｃｔ．第６巻、第５０１－５１２頁、２０１５年ＲｅｂｅｃｃａＭ．Ｗｙａｔｔ等、Ｐｈｙｔｏｔｈｅｒ．Ｒｅｓ．、第１９巻、第９６３―９７０頁、２００５年ＭａｒｉａＬｉｓ－Ｂａｌｃｈｉｎ、ＡｒｏｍａｔｈｅｒａｐｙＳｃｉｅｎｃｅ：ＡＧｕｉｄｅｆｏｒＨｅａｌｔｈｃａｒｅＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ、第２１７－２１８頁、２００６年ＳｉｎｅｍｏｂｏｎｇＥｓｓｉｅｎ等、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＦｌｕｉｄｓ、第１５８巻、第１０４７２１頁、２０２０年

これまでに提案されたコレステロール吸収阻害物は、薬剤として使用されるものは優れた効果を有するものの副作用があったり、医師の指導のもとに用法用量を守らなければならない等の制限があった。このため、効果・効能の認められた有効成分が含まれており、且つ作用が穏やかで、長期間にわたって摂取しても安全性の高いコレステロール吸収阻害剤の提供が求められている。又、食品原材料から分離した抽出物や成分は、薬剤よりも副作用が少ない等の利点を有するが、実際的には効果が低かったり、実用的ではない摂取条件下での実験結果に基づくものであったり、あるいは通常の食事形態において大量に摂取しなければならず、いずれも十分に満足できる効果を発揮するものではなかった。よって本発明は、コレステロール含有胆汁酸ミセルを強力に崩壊することで、コレステロールの吸収を阻害し、高コレステロール血症及びこれが危険因子となる各種疾病の予防や治療に有効利用でき、副作用の恐れの殆どない、安全性の高い、コレステロール吸収阻害剤及びこれを配合した飲食品、医薬品、医薬部外品、家畜用飼料、ペットフード等の経口用組成物を提供することを課題とした。

前記課題を解決するために、本発明者らは、安全性に優れ、強力なコレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊阻害作用を発現し、高コレステロール血症やこれに関連する様々な疾患の予防及び治療に有効利用することができるコレステロール吸収阻害剤を提供するために鋭意検討を重ねた結果、特定の植物を用いると極めて高いコレステロール含有胆汁酸ミセルの崩壊作用が発現されること、又、これを飲食品、医薬品、医薬部外品、家畜用飼料、ペットフード等の産業分野において有効活用し得ることを見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明の特徴は次の点にある。
（１）本発明のコレステロール吸収阻害剤は、フトモモ科クンゼア（Ｋｕｎｚｅａ）属に属する植物又はその加工物を有効成分として含むものである。
（２）前記阻害剤は、カヌカ（Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ）の葉及び／又は樹皮の乾燥粉末、その抽出物又は精製物を有効成分として含むものであることが望ましい。
（３）前記阻害剤において、抽出物は水及び／又は親水性有機溶媒を用いて抽出されたものであることが望ましい。
（４）前記阻害剤において、親水性有機溶媒はエタノール又はこの含水物（含水率３０～９９質量％）であることが望ましい。
（５）本発明の経口用組成物は、前記コレステロール吸収阻害剤を配合してなるものである。
（６）前記経口用組成物は、飲食品又は医薬品の態様が望ましい。
（７）又、本発明は、前記コレステロール吸収阻害剤を経口摂取する高コレステロール血症の予防又は改善方法（但し、医療行為を除く）を特徴とする。

本発明によりコレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊効果を有する剤が提供され、これを含む飲食品、医薬品、医薬部外品、飼料等の分野において、前記剤の態様のまま又は前記分野の従来の各種製品に配合した形態で有効利用することが可能となる。より具体的には、食事性コレステロールの腸管吸収の抑制・高コレステロール血症等の予防、アイスクリームやホイップクリーム等の口溶け・食感改良、水と油の乳化分離剤、乳の凝固剤または凝固促進剤等に利用することが可能である。

先ず、本発明のコレステロール吸収阻害剤は、クンゼア属に属する植物ないしはその加工物を含有してなることを特徴とするものである。クンゼア（Ｋｕｎｚｅａ）属に属する植物は、前述のように、フトモモ科に分類され、本発明に係るものの例は後述するように種々あるが、代表例としてカヌカ（学名：Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ）を挙げることができる。カヌカはニュージーランドを原産地とし当該国のみに自生する。ニュージーランド先住民のマオリ族はカヌカを伝統的な治療及び儀式に用いてきた。その後、入植した初期のヨーロッパ人も、薬用植物として筋肉痛及び関節リウマチ等に用いてきた。

クンゼア属の植物の例としてＫｕｎｚｅａａｃｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｋｕｎｚｅａａｃｕｍｉｎａｔａ、Ｋｕｎｚｅａａｆｆｉｎｉｓ（クンゼア・アフィニス）、Ｋｕｎｚｅａａｍｂｉｇｕａ（クンゼア・アンビグア）、Ｋｕｎｚｅａｂａｘｔｅｒｉ（クンゼア・バクステリ）、Ｋｕｎｚｅａｂｒａｃｔｅｏｌａｔａ、Ｋｕｎｚｅａｃａｌｉｄａ、Ｋｕｎｚｅａｃａｍｂａｇｅｉ、Ｋｕｎｚｅａｃａｐｉｔａｔａ（クンゼア・カピタータ）、Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｉｆｏｌｉａ、Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ（カヌカ、クンゼア・エリコイデス）、Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｏｃａｌｙｘ、Ｋｕｎｚｅａｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｋｕｎｚｅａｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ、Ｋｕｎｚｅａｇｒａｎｉｔｉｃｏｌａ、Ｋｕｎｚｅａｊｕｃｕｎｄａ（クンゼア・ジュクンダ）、Ｋｕｎｚｅａｍｉｃｒａｎｔｈａ、Ｋｕｎｚｅａｍｉｃｒｏｍｅｒａ（クンゼア・ミクロメラ）、Ｋｕｎｚｅａｍｏｎｔａｎａ、Ｋｕｎｚｅａｍｕｅｌｌｅｒｉ、Ｋｕｎｚｅａｎｅｗｂｙｉ、Ｋｕｎｚｅａｏｂｏｖａｔａ、Ｋｕｎｚｅａｏｐｐｏｓｉｔａ、Ｋｕｎｚｅａｐａｒｖｉｆｏｌｉａ（クンゼア・パルビフォーリア）、Ｋｕｎｚｅａｐａｕｃｉｆｌｏｒａ（クンゼア・パウキフロラ）、Ｋｕｎｚｅａｐｏｍｉｆｅｒａ（ムントリー）、Ｋｕｎｚｅａｐｒｅｉｓｓｉａｎａ、Ｋｕｎｚｅａｐｕｌｃｈｅｌｌａ（クンゼア・プルケラ）、Ｋｕｎｚｅａｒｅｃｕｒｖａ、Ｋｕｎｚｅａｒｕｐｅｓｔｒｉｓ、Ｋｕｎｚｅａｓｐｉｃａｔａ、Ｋｕｎｚｅａｓｔｒｉｇｏｓａ、Ｋｕｎｚｅａｖｉｌｌｉｃｅｐｓ等を挙げることができる。

本発明で用いるカヌカ等のクンゼア属に属する植物の態様は、前記植物の葉部や樹皮部が望ましく、葉及び／又は樹皮そのもの、これに乾燥、細断あるいは粉砕等の加工処理を施したもの、これらを溶媒で抽出した抽出液、該抽出液から溶媒を除いた抽出物、該抽出物にシリカゲル、ケイ酸マグネシウム、イオン交換樹脂、活性アルミナ、セルロース、活性炭等の吸着剤を用いたカラムクロマトグラフィーや溶剤分別等の精製処理を施した精製物のいずれでも良い。食品用途に使用する場合は、前記植物の葉及び／又は樹皮を乾燥し適宜に粉砕した粉末、該乾燥物の細断片や粉末を水又は親水性有機溶媒で抽出した抽出物とするのが利便性や製造コストの点から望ましい。又、医薬品用途に使用する場合は、前記の抽出液、抽出物、あるいは高純度の精製物が望ましい。

上記の植物から抽出物を得る抽出溶媒としては、水及び／又は低級アルコールを挙げることができる。低級アルコールは、その炭素数が大きくなるとカヌカ等のクンゼア属に属する植物の油性物質が抽出される傾向が大きくなるため、炭素数が５程度までのものが望ましく、メタノール、エタノール、ノルマルプロパノール、イソプロパノール、ノルマルブタノール、イソブタノール等を例示できる。炭素数が大きい低級アルコールを使用する場合は、脱脂粕中の油性成分の抽出を抑制するために含水率を高めるのがよい。例えば、ｎ－プロパノールの場合の含水率は約２０質量％～約５０質量％とし、ｎ－ブタノールの場合の含水率は約４０質量％～約７０質量％とする。望ましい抽出溶媒は水、メタノール及びエタノール、及び、これらの含水アルコール（含水率：０～１００質量％）である。親水性有機溶媒が含水物の場合の水分含量は、例えば含水エタノールのときは３０～９９質量％、より好ましくは５０～９９質量％である。この範囲を外れると本発明の所望の効果が減少する。

上記の植物から抽出物を得るときの加熱温度は、抽出溶媒に水を用いた場合は常圧下１～９０℃又は高圧下１～１２１℃が好ましく、抽出溶媒にエタノール等を使用した親水性有機溶媒を用いた場合は常圧下１～７０℃が好ましい。

本発明に係る抽出物を簡便かつ効率的に得るには、水又は含水エタノールで抽出するのが良い。抽出処理は該抽出原料に対して１～２０質量倍程度の前記抽出溶媒を加え、常圧若しくは加圧下、常温又は加熱状態で、適宜に撹拌して１０分～１時間抽出処理する。不溶物を濾過又は遠心分離して除き、必要であれば前記方法で再度抽出操作を行い、抽出液を得る。さらに該抽出液から減圧蒸留、凍結乾燥、噴霧乾燥等の公知の手段で溶媒を除去することによって本発明に係る抽出物を得ることができる。

前述のように、本発明によれば、クンゼア属に属する植物であるカヌカの加工物を含むコレステロール吸収阻害剤が提供される。本コレステロール吸収阻害剤は、コレステロール含有胆汁酸ミセルを崩壊する作用に優れるため、小腸からのコレステロールの体内吸収を低減させ、血中コレステロールの代謝改善を促し、高コレステロール血症やこれに関連する各種疾病の予防を可能にする。よって、本発明に係るコレステロール吸収阻害剤はそのまま本発明の所望の目的のために使用しても差し支えないが、本発明ではこれを配合してなる組成物も提供される。該組成物の態様としては飲食物、食品添加物、家畜用飼料、ペットフード等の種々のものがあり、食用組成物又は医薬用組成物が好適である。

なお、本発明のコレステロール吸収阻害剤は、本発明の趣旨に反しないかぎり種々の原料や成分を併用して配合することができる。例えば、通常の食品や医薬品に使用される賦形剤、防湿剤、防腐剤、強化剤、増粘剤、乳化剤、酸化防止剤、甘味料、酸味料、調味料、着色料、香料等がある。又、コレステロール吸収抑制作用をもつ公知の素材であって前記以外のものを併用することも本発明の望ましい態様のひとつである。

本発明の食用組成物は、前述のコレステロール吸収阻害剤を配合してなることを特徴とする。該コレステロール吸収阻害剤は、カヌカ等のクンゼア属に属する植物であって、この形態が望ましくは葉及び／樹皮の抽出物又は精製物を必須原料として含有してなるものである。

この食用組成物の態様としては、前記の乾燥粉末、抽出物若しくは精製物をそのまま又は前記コレステロール吸収阻害剤を液状、ゲル状、粉末状あるいは固形状の食品、例えば、野菜ジュース、果汁飲料、清涼飲料、茶等の飲料類、即席麺、スープ、ゼリー、プリン、ヨーグルト、ケーキプレミックス製品、菓子類、ふりかけ、味噌、醤油、ソース、ドレッシング、マヨネーズ、植物性クリーム、焼肉用たれや麺つゆ等の調味料、麺類、うどん、蕎麦、スパゲッティ、ハムやソーセージ等の畜肉魚肉加工食品、ハンバーグ、コロッケ、ふりかけ、佃煮、ジャム、牛乳、クリーム、バター、スプレッドやチーズ等の粉末状、固形状又は液状の乳製品、マーガリン、パン、ケーキ、クッキー、チョコレート、キャンディー、グミ、ガム、ゼリー等の各種一般加工食品のほか、粉末状、顆粒状、丸剤状、錠剤状、ソフトカプセル状、ハードカプセル状、ペースト状又は液体状の栄養補助食品、特定保健用食品、機能性表示食品、健康食品、濃厚流動食や嚥下障害用食品の治療食等に添加した形態となすことができる。

又、必要に応じてグルコース（ブドウ糖）、デキストリン、乳糖、澱粉又はその加工物、セルロース粉末等の賦形剤、ビタミン、ミネラル、動植物や魚介類の油脂、たん白（動植物や酵母由来の蛋白質、その加水分解物等を含む）、糖質、色素、香料、酸化防止剤、界面活性剤、その他の食用添加物、各種栄養機能成分を含む粉末やエキス類等の食用素材とともに混合して粉末、顆粒、ペレット、錠剤等の形状に加工したり、常法により前記例の一般加工食品に加工処理したり、これらを混合した液状物をゼラチン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース等の被覆剤で被覆してカプセルに成形したり、飲料（ドリンク類）の形態に加工して、栄養補助食品や健康食品として利用することは好適である。とりわけ錠剤、カプセル剤やドリンク剤が望ましい。

前記の食品類や食用組成物における本発明のコレステロール吸収阻害剤の配合量は、当該食用組成物や剤、他の配合原料の種類、配合量、形熊、利用目的により一律に規定し難いが、一般の加工食品類に添加する場合では、飲食品中の前記抽出物の含量が約０．０１質量％～約９０質量％、より望ましくは約１質量％～約６０質量％となるように、本発明のコレステロール吸収阻害剤をその他の飲食品製造用公知原料と適宜に組み合わせて処方を設計し、常法に従い目的とする飲食品を調製すればよい。本発明の飲食品は、ヒト成人の場合１日あたりの前記加工物の摂取量の目安を約１０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、望ましくは約３０ｍｇ～約５００ｍｇ、更に望ましくは約５０ｍｇ～約３００ｍｇとして任意の方法、例えば、食事の摂取と同時又は前後に、経口摂取、経管投与等の方法で体内に取り込むことができる。なお、本発明のコレステロール吸収阻害剤はそのまま食用に供しても差し支えない。

本発明のコレステロール吸収阻害剤を用いる医薬品は、前記のコレステロール吸収阻害剤に本発明の趣旨に反しない公知の賦形剤や添加物を適宜加え、常法により加工して錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等の製剤となすことができる。経口あるいは経腸投与して、コレステロール吸収の阻害あるいは前記諸症状の予防又は治療のために適用する。本発明のコレステロール吸収阻害剤の配合量はその形態や前記医薬製剤の種類、形態、用法及び用量等により一律に設定し難いが、前記抽出物の含量として概ね０．００１質量％～６０質量％である。経口投与する場合の摂取量はとくに限定されるものではないが、例えば、前記抽出物をベースにして、ヒト成人１日あたり約０．１ｍｇ～約１，０００ｍｇ、望ましくは約１ｍｇ～約５００ｍｇ、更に望ましくは約１０ｍｇ～約３００ｍｇである。

又、本発明のコレステロール吸収阻害剤を家畜用飼料やペットフードに適用するには、前記飲食品の場合と同様に、公知の各種飼料や飲用水に配合したり、公知の原材料、添加物とともに錠剤状、顆粒状、カプセル状等の製剤形態のものに加工することができる。これらの場合、本発明のコレステロール吸収阻害剤の配合量及び摂取量は、前記抽出物の含量として約０．０１質量％～約９０質量％、より望ましくは約１質量％～約６０質量％であり、１日あたりの摂取量の目安は、前記抽出物を基準として、適用動物の体重（ｋｇ）あたり約０．１ｍｇ～約１００ｍｇ、より望ましくは約０．５ｍｇ～約５０ｍｇである。

次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、これによって本発明が制限や限定を受けることはない。各例において、％、部及び比率はいずれも質量基準である。

製造例１
カヌカの葉又は樹皮を天日で半乾燥し、細断ないしは粉砕処理を施してカヌカの葉又は樹皮の各乾燥物を製造した。

製造例２
製造例１に記載のカヌカ葉（乾燥物）３０ｇに水３３０ｍＬを加え、１２１℃にて１時間加圧下で抽出処理した後、室温まで冷却し、濾過して濾液を分離した。この濾過残渣に再度水２４０ｍＬを加えて同様に加熱し、冷却後、濾過して濾液を採取した。両濾液を合わせて減圧下で濃縮し、凍結乾燥及び粉砕して本発明に係る抽出物（試料Ａ－１）８．４ｇを得た。これは、ストリクチニン、イソストリクチニン、クンゼアクロモンF等の成分を含有していた。

製造例３
製造例１に記載のカヌカ葉（乾燥物）２０ｇに水２２０ｍＬを加え、８５～９０℃にて１時間抽出処理した後、室温まで冷却し、濾過して濾液を分離した。この濾過残渣に再度水１６０ｍＬを加えて同様に加熱し、冷却後、濾過して濾液を採取した。両濾液を合わせて減圧下で濃縮し、凍結乾燥及び粉砕して本発明に係る抽出物（試料Ａ－２）３．５ｇを得た。

製造例４
製造例１に記載のカヌカ葉（乾燥物）２０ｇに５０％エタノール（含水率：５０％）１６０ｍＬを加え、７０℃にて１時間抽出処理した後、室温まで冷却し、濾過して濾液を分離した。この濾過残渣に再度５０％含水エタノール１２０ｍＬを加えて同様に加熱し、冷却後、濾過して濾液を採取した。両濾液を合わせて減圧下で濃縮し、凍結乾燥及び粉砕して本発明に係る抽出物（試料Ａ－３）５．５ｇを得た。

製造例５
製造例１に記載のカヌカ葉（乾燥物）２０ｇに７０％エタノール（含水率：３０％）１６０ｍＬを加え、７０℃にて１時間抽出処理した後、室温まで冷却し、濾過して濾液を分離した。この濾過残渣に再度７０％含水エタノール１２０ｍＬを加えて同様に加熱し、冷却後、濾過して濾液を採取した。両濾液を合わせて減圧下で濃縮し、凍結乾燥及び粉砕して本発明に係る抽出物（試料Ａ－４）５．９ｇを得た。

製造例６
製造例１に記載のカヌカ樹皮（乾燥物）５０ｇに水６００ｍＬを加え、１２１℃にて１時間加圧下で抽出処理した後、室温まで冷却し、濾過して濾液を分離した。この濾過残渣に再度水４００ｍＬを加えて同様に加熱し、冷却後、濾過して濾液を採取した。両濾液を合わせて減圧下で濃縮し、凍結乾燥及び粉砕して本発明に係る抽出物（試料Ａ－５）７．５ｇを得た。

試験例１：コレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊活性の検討
本発明に係るカヌカの加工処理物について、以下に述べる方法を用いてコレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊活性に及ぼす影響を調べた。

コレステロール含有胆汁酸ミセル形成
卵黄レシチン５００ μＬをメタノール５ｍＬで溶解し、コレステロール９．７ｍｇ、卵黄レシチンメタノール溶液２３０ μＬをクロロホルム１ｍＬ溶解した後ナスフラスコに移し、エバポレーターを使用し減圧濃縮した。タウロコール酸ナトリウム０．１８ｇを溶解した１５ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７．３）５０ｍＬを減圧濃縮後のナスフラスコに加え、超音波発生装置にかけ乳化（２分、７５Ｗ）し、コレステロール含有胆汁酸ミセル溶液を作製した。

試料Ａ－１又は各原料の乾燥物を試料Ａ－１と同様の手順で加圧熱水抽出したマテ茶熱水抽出物（比較試料１）、グァバ茶熱水抽出物（比較試料２）、ケルナー熱水抽出物（比較試料３）、ホームベル熱水抽出物（比較試料４）を５、２．５、５、１０ｍｇ／ｍＬの濃度で調製し、それぞれ１００ μＬに胆汁酸ミセル溶液１．９ｍＬを加え、インキュベート（３７℃、１ｈ）した。その後、メンブレンフィルターを通し、酸化アルミニウムを加え１０，０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清５００ μｌに発色剤（コレステロールＥ－テストワコー）５００ μＬと混合させインキュベート（３７℃、１ｈ）した。６００ｎｍの吸光度を測定し、５０％阻害を算出した。

コレステロール含有胆汁酸ミセルの５０％崩壊濃度としてＩＣ_５０（ｇ／Ｌ）値を求めた。尚、試験例１で得られた結果から、常法に従って、上清のコレステロール量が５０％となる場合の試料Ａ－１及び比較試料１～４の濃度を算出し、得られた値を５０％崩壊濃度とした。この結果を表１に示す。

表１コレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊作用

表１のデータから、カヌカの葉由来の試験物質（試料Ａ－１）は比較試料と比べて非常に強力にコレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊作用を有することが明らかになった。

試験例２：マウスにおけるコレステロール吸収阻害作用の検討
本発明に係るカヌカの加工処理物について、以下に述べる方法を用いてコレステロール吸収阻害作用に及ぼす影響を調べた。

４週齢ｄｄｙ系雄マウス（日本クレア（株））を１週間予備飼育した後、１群６～８匹とし、ＡＩＮ－９３Ｍを基準とした高脂肪食を摂取させる対照群または試料Ａ－１を１％添加した高脂肪食を摂取させるＡ－１群に群分けした。各々の飼料を１２週間自由摂取させ、飼育最終日に屠殺を行い、血漿を得た。得られた血漿を発色剤（コレステロールＥ－テストワコー）と混合させインキュベート（３７℃、５分）した。その後、６００ｎｍの吸光度を測定し、血漿中総コレステロール濃度を算出した。データは平均値±標準誤差で表わした。

この結果を表２に示す。表２のデータから、本発明に係るカヌカの葉由来の試験物質（試料Ａ－１）を経口摂取することにより、血漿中総コレステロール濃度が顕著に低下することを確認した。この結果は、試験例１で示されたコレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊作用に起因するものと考えられた。

表２血漿中総コレステロール濃度（マウス）

なお、ほとんど全ての植物体（組織）やその抽出物、精製物にはタンニン類、プロアントシアニジン類、カテキン類等が含まれていることが一般に知られており、本発明に係るカヌカの植物体やその加工物もかかる公知成分を含有することが当然に予想されるが、同時に多種多様なその他成分や未知成分も含まれており、これらの含有成分を解明し本発明に係る活性成分を個々に特定することは、煩雑な作業や長期間にわたる労力、多大なコストを要するため、現実的ではない。

試作例１（錠剤）
試料Ａ－１からなる本発明のコレステロール吸収阻害剤５．０ｋｇを化工澱粉（松谷化学工業（株）製、商品名：パインフロー、登録商標）３．５Ｋｇ、第３リン酸カルシウム０．３Ｋｇ、ビタミンＢ_１０．３Ｋｇ、ビタミンＢ_２０．２Ｋｇ、ビタミンＢ_６０．３Ｋｇ及びビタミンＣ０．４Ｋｇと共に配合機に仕込み１０分間撹拌混合した。該混合物を直打式打錠機に供給して直径７ｍｍ、高さ４ｍｍ、重量１５０ｍｇのタブレットを作成した後、コーティング機でシェラック薄膜をコ－ティングして錠剤形状の食品を試作した。

試作例２（クッキー）
家庭用ホイッパーにバター１２０ｇ、ショートニング１００ｇ、上白糖９０ｇ及び牛乳１００ｍＬを入れ、撹拌しながら鶏卵１個を加えて充分に混合した後、薄力粉１９０ｇ、ベーキングパウダー１ｇとともに試料Ａ－１からなる本発明のコレステロール吸収阻害剤１０ｇを添加して十分に捏ねあわせた。これを３０分間ねかせた後、金型で５０個に分割し、オーブンで焼いてバタークッキーを試作した。

試作例３（ジュース）
市販のオレンジジュース１Ｌに、試料Ａ－１からなる本発明のコレステロール吸収阻害剤５ｇを加えて混合しコレステロール吸収防止オレンジジュースを試作した。これは元のオレンジジュースと比較して何ら遜色ないものであった。

試作例４（ペットフード）
小麦粉６．２ｋｇ、脱脂大豆１ｋｇ、牛脂５００ｇ、ミートミール３６０ｇ、ビタミン・ミネラル類２００ｇ、試料Ａ－１からなる本発明のコレステロール吸収阻害剤２００ｇを添加して十分に混合した後、水２ｋｇを添加し十分に捏ねあわせた。成形後、焼成して、ビスケットタイプのペットフードを試作した。

本発明の、カヌカをはじめとするクンゼア属に属する植物又はその加工物を含有してなることを特徴とするコレステロール吸収阻害剤は、これを経口摂取することにより、消化管内でのコレステロール含有胆汁酸ミセルの崩壊を促し、食事等由来のコレステロールの吸収を強力に抑制することで、高コレステロール血症を予防し、動脈硬化等の改善に役立ち、健康維持・増進の分野で有用に利用することが可能となる。又、前記コレステロール吸収阻害剤を含む飲食品は、エゼチミブ等の既存のコレステロール吸収阻害薬に比べて効き目が穏やかであり、又ニュージーランドで古くから薬用として用いられている生物資源の抽出物のため安全性が高いことから、飲用品として日常的に摂取することができる。

Claims

フトモモ科クンゼア属に属するカヌカ（Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ）の葉の抽出物を含有してなるコレステロール吸収阻害剤。
前記抽出物が水を用いて抽出されたものである請求項１に記載のコレステロール吸収阻害剤。
前記コレステロール吸収阻害がコレステロール含有胆汁酸ミセルの崩壊作用に基づくものである請求項１又は２に記載のコレステロール吸収阻害剤。
請求項１～３のいずれか一項に記載のコレステロール吸収阻害剤を含む経口組成物。
食事性コレステロールの腸管吸収を阻害するためのものである請求項４の経口組成物。
飲食品又はペットフードである請求項４～５に記載の経口組成物。
フトモモ科クンゼア属に属するカヌカ（Ｋｕｎｚｅａｅｒｉｃｏｉｄｅｓ）の葉の抽出物によりコレステロール含有胆汁酸ミセル崩壊及び／又はコレステロールの腸管吸収を阻害する方法。