JP2023067832A - インターロイキン－３４を標的とする化合物及び方法 - Google Patents

インターロイキン－３４を標的とする化合物及び方法 Download PDF

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Abstract

【課題】アルツハイマー病又はタウオパチー疾患などの免疫介在性疾患を治療するための抗体、化合物、医薬組成物及び方法を提供する。【解決手段】ヒトＩＬ－３４に結合する抗体であって、前記抗体が、重鎖可変領域（ＶＨ）と、軽鎖可変領域（ＶＬ）と、を含み、前記ＶＨが、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含む、抗体を提供する。また、前記抗体を含む、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される免疫介在性疾患の治療剤を提供する。【選択図】なし

Description

発明の詳細な説明
本開示は、神経炎症及び急性又は慢性炎症性疾患の分野で有用であると期待される、ヒトインターロイキン－３４（ＩＬ－３４）に対する抗体を含む、化合物、医薬組成物、及び方法に関する。特に、実施形態は、アルツハイマー病、並びに他のタウオパチーに関連する治療及び／又は診断用途に有用であると期待される。
認知症の主な原因であるアルツハイマー病（ＡＤ）は、６５歳から６９歳までの人口の１％で発症し、９５歳以上では４０％～５０％に増加する。ＡＤ患者は、認知機能障害及び記憶機能の欠損を含む明白な臨床症状を示す。これらの患者では、ＡＤの存在は、死後の組織病理学的検査で大脳皮質に見られる重度の老人プラーク負荷及び神経原線維変化（ＮＦＴ）によって確認される。成熟老人プラークは、アミロイド前駆体タンパク質の酵素処理に由来する細胞外β－アミロイドペプチド、及び過剰リン酸化タウタンパク質のフィラメントに由来する細胞内神経原線維変化（ＮＦＴ）から構成されている。神経原線維変化などの過剰リン酸化タウの凝集体は、アルツハイマー病における認知機能障害の程度に関連している。ＡＤ及びその他の様々なタウオパチーでは、タウ凝集体は、疾患のリスク、発症、及び／又は進行に関連する特定の脳領域及びパターンに現れ、これらの領域及びパターンは、当業者に知られている。
サイトカインは正常な恒常性組織機能を調節し、これらのサイトカインネットワークの調節不全は病的状態に関連している。血液由来の免疫細胞がほとんど循環しない中枢神経系（ＣＮＳ）は、調節不全のサイトカインネットワークに対して特に脆弱であると思われる。神経変性疾患では、ＣＮＳ常駐細胞が炎症誘発性サイトカインの主要な産生因子であり、調節不全のサイトカインネットワーク及び神経炎症に寄与し得る。中枢神経系の損傷には、常在ミクログリア、末梢由来単球、マクロファージ、及び樹状細胞からなる自然免疫応答をもたらす循環する免疫細胞の動員が関与し得る。ミクログリア及びマクロファージの活性化状態は、厳密には炎症促進性又は抗炎症性ではなく、それよりも様々な機能状態を有し得る。ミクログリア及び／又は末梢由来単球及びマクロファージは、壊死組織片を取り除き、再生と恒常性を促進する抗炎症表現型を獲得する可能性がある。神経機能障害若しくは損傷は、ミクログリアを活性化して炎症誘発性サイトカインを産生し、血流から白血球を動員することもあり得る。アルツハイマー病（ＡＤ）などの神経変性状態では、ミクログリアの活性化が頻繁に見られ、細胞外のベータアミロイドプラーク及び過剰リン酸化タウ凝集体の蓄積に対する組織反応を反映している。神経炎症は、神経変性疾患の重要な要素であり、ＣＮＳ細胞による炎症誘発性サイトカインの産生の上昇を特徴としている（Ｂｅｃｈｅｒ，Ｂ．，Ｓｐａｔｈ，Ｓ．＆Ｇｏｖｅｒｍａｎ，Ｊ．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ｉｎ ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １７，４９－５９（２０１７））。神経炎症及びミクログリオーシスは、アルツハイマー病におけるプラーク蓄積、パーキンソン病及びハンチントン病における神経細胞死及び機能障害などの神経変性疾患の根底にあるメカニズムであると考えられている。
ミクログリオーシスには、炎症シグナルに応答したミクログリアの異常な増殖及び／又は肥大が含まれる。概して、ＩＬ－３４は、炎症及び免疫プロセスの調節において強力で多面的なサイトカインとして作用し、正常組織の恒常性におけるＣＮＳ常在ミクログリアの増殖の重要な調節サイトカインである。ＩＬ－３４は、皮質、前嗅核、及び海馬のニューロンによって発現される。ＩＬ－３４は、ＣＳＦ－１と低い配列相同性を示すが、同様の一般構造を有し、両方のサイトカインが共通の受容体ＣＳＦ－１Ｒに結合し、受容体の自己リン酸化及び二量体化を引き起こし、その後複数のシグナル伝達経路が活性化される（Ａ．Ｆｒｅｕｃｈｅｔ，ｅｔ ａｌ Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２０２１ Ｏｃｔ；１１０（４）：７７１－７９６）。ＩＬ－３４は、分泌型ホモ二量体サイトカインであり、ＣＳＦ１Ｒの２つの活性化リガンドの１つとして作用し、受容体の自己リン酸化及び二量体化を引き起こし、その後複数のシグナル伝達経路が活性化される（例えば、ＣＳＦ－１ＲによるヘリカルサイトカインＩＬ－３４及びＣＳＦ－１の二重認識の構造的基礎、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ２０，６７６－６８７，ａｎｄ Ｆｅｌｉｘ Ｊ，Ｄｅ Ｍｕｎｃｋ Ｓ，Ｖｅｒｓｔｒａｅｔｅ Ｋ，Ｍｅｕｒｉｓ Ｌ，Ｃａｌｌｅｗａｅｒｔ Ｎ，Ｅｌｅｇｈｅｅｒｔ Ｊ．ｅｔ ａｌ．を参照）。ヒトＩＬ－３４ポリペプチドは、例えば、米国特許第９，７７０，４８６号に開示されており、リーダー配列を有する２４２アミノ酸、及び成熟型の２２２アミノ酸からなる（配列番号３１）。
抗ＩＬ－３４抗体は、当技術分野で説明されており、例えば、ＷＯ２０１６／１９６６７９は、様々な抗ＩＬ－３４抗体及びその潜在的使用について詳述している。しかしながら、現在まで、ＩＬ－３４を標的とするいかなる抗体も、治療的使用には承認されていない。
したがって、代替及び／又は改善された抗ＩＬ－３４抗体、その医薬組成物、並びにＩＬ－３４が関与する免疫介在性疾患、及び／若しくは神経炎症性障害などの抗ＩＬ－３４抗体で治療可能な疾患、及び／若しくはアルツハイマー病に関連する治療及び／又は診断適用のためにそれらを使用する方法に対する満たされていない必要性が依然として存在する。
本開示発明の実施形態は、新規の抗ヒトＩＬ－３４抗体を提供する。いくつかの実施形態によれば、本開示は、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と、を含む抗体を提供し、ＬＣＶＲは、相補性決定領域（ＣＤＲ）、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＶＲは、ＣＤＲ、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、これらは、表１に提供されるＣＤＲの組み合わせの集団から選択される。本明細書で使用される配列識別子は、表１及び明細書全体に列挙され、配列は、本明細書に提供されるアミノ酸及びヌクレオチド配列表に示す。
Figure 2023067832000001
したがって、本開示の実施形態は、ヒトＩＬ－３４に結合する抗体を提供し、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨは、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬは、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１は、配列番号５を含み、ＨＣＤＲ２は、配列番号６を含み、ＨＣＤＲ３は、配列番号７を含み、ＬＣＤＲ１は、配列番号８を含み、ＬＣＤＲ２は、配列番号９を含み、ＬＣＤＲ３は、配列番号１０を含む。
したがって、本開示の実施形態は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＬＣＶＲ、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＶＲも提供する。
したがって、本開示の実施形態は、ヒトＩＬ－３４に結合する抗体を更に提供し、抗体は、配列番号１を含む重鎖（ＨＣ）と、配列番号２を含む軽鎖（ＬＣ）と、を含む。
他の実施形態によれば、本開示はまた、配列番号４のアミノ酸配列を有するＬＣＶＲと、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＶＲと、を含み、ヒンジ領域及びＦｃ領域は、配列番号３２及び配列番号３３から選択される、抗体を提供する。
本明細書で使用される場合、「抗体１」とは、配列番号５のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号６のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号７のＨＣＤＲ３アミノ酸配列と、配列番号８のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号９のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号１０のＬＣＤＲ３アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＶＲアミノ酸配列と、配列番号４のＬＣＶＲアミノ酸配列と、配列番号１のＨＣアミノ酸配列と、配列番号２のＬＣアミノ酸配列と、を有する抗体を指す。抗体１は、配列番号１１のＨＣ ＤＮＡ配列、及び配列番号１２のＬＣ ＤＮＡ配列によってコードされ得る。本明細書で配列が示される抗体の各々におけるフレームワーク及びＣＤＲ配列は、特に明記しない限り、Ｎｏｒｔｈ，ｅｔ ａｌ．．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０１１：４０６：２２８－２５６の方法と一致する注釈規則を使用して注釈が付けられている。
他の実施形態によれば、本開示は、配列番号２と少なくとも９５％の配列相同性を有するアミノ酸配列を有するＬＣと、配列番号１と少なくとも９５％の配列相同性を有するアミノ酸配列を有するＨＣと、を含む抗体も提供する。
他の実施形態によれば、本開示は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＬＣと、配列番号３５のアミノ酸配列を有するＨＣと、を含む抗体も提供し、本明細書では更に抗体２と呼ぶ。
他の実施形態によれば、本開示は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＬＣと、配列番号３６のアミノ酸配列を有するＨＣと、を含む抗体も提供し、本明細書では更に抗体３と呼ぶ。
他の実施形態によれば、本開示は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＬＣと、配列番号３７のアミノ酸配列を有するＨＣと、を含む抗体も提供し、本明細書では更に抗体４と呼ぶ。
各ＨＣのカルボキシ末端部分は、エフェクター機能を主に担う定常領域を定義し、本開示のいくつかの実施形態では、抗体は、エフェクター機能を低下させる各ＨＣの定常領域に１つ以上の改変を有する。好ましくは、本開示の実施形態は、ＩｇＧ４抗体であり、したがって、ＩｇＧ４ Ｆｃ領域、又はヒトＩｇＧ４由来のＦｃ領域、例えば改変ＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む。
いくつかの実施形態によれば、エフェクター機能を低下させる両方のＨＣの定常領域における改変、及びアミノ酸置換が、ＩｇＧ４ヒンジ及びＦｃ領域に導入される。したがって、いくつかの実施形態は、残基２３０及び２３１の両方にアミノ酸アラニンを含む両方のＨＣの定常領域における改変（抗体１のＨＣ及び配列番号３３にそれぞれ例示される）と、残基２２４にアミノ酸プロリンを含み、安定性を促進する両方のＨＣの定常領域における更なる改変（抗体１のＨＣ、及び例えば配列番号：３２に例示される）と、残基４４３のアミノ酸リジンの欠失（ＨＣと配列番号１に例示される）と、を有する。
本開示の抗体は、先行技術の抗ＩＬ－３４抗体よりも特に有利な特性の組み合わせを有することが考えられ、例えば以下の特性のうちの１つ以上を含むがこれらに限定されない：１）望ましい結合及び解離速度、２）抗神経炎症応答及びインビボ有効性を達成するためのヒトＩＬ－３４の中和における効力、３）免疫介在性及び／又は炎症性障害の治療及び／又は予防のための単剤療法としての十分な効力、４）作用期間の持続、５）望ましくないサイトカイン放出の誘導を十分に制限すること、６）免疫原性の許容される低さ（すなわち、ヒトにおける非免疫原性が十分である）、７）有害な免疫不全の回避；及び／又は８）熱安定性、溶解性、低自己会合性、並びに炎症性又は神経炎症性障害、例えばＡＤの治療における開発及び／又は使用に許容される薬物動態特性を含むがこれらに限定されない、望ましいインビボ安定性、物理的及び化学的安定性。
本開示の実施形態は、本明細書に記載の実施形態で提供されるような薬理学的に有利な抗ヒトＩＬ－３４抗体を使用して、ＩＬ－３４の中和を介して、炎症性及び／又は神経炎症性関連障害の予防、ダウンレギュレーション、又は改善に有用な組成物及び方法を提供することによって、先行技術に対して有意な進歩をもたらす。本開示の抗ヒトＩＬ－３４抗体は、好ましくは、免疫応答の先天性アームの阻害、及び／又はミクログリオーシス若しくは他の単球の抑止を通じて、免疫及び／又は炎症病理を改善する、又は免疫ホメオスタシスを回復することができる。マクロファージ系統の細胞の活性化及び／又は増殖により、根底にある疾患の病理を直接変更する。そのような抗体の臨床的使用は、治療される疾患の長期持続性につながる可能性がある。
更に、ヒトＩＬ－３４に特異的であり、改善された結合親和性を有し、かつヒトＩＬ－３４測定において感度の向上を示す、診断用抗ヒトＩＬ－３４抗体、並びに最小限の干渉及び広い希釈直線性をもたらす改善された酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）アッセイ条件に対する必要性が存在する。本開示のいくつかの局面によれば、配列番号３１によって与えられるヒトＩＬ－３４に結合する、ヒトＩＬ－３４中和抗体を含む抗ヒトＩＬ－３４抗体が提供される。インターロイキン３４（ＩＬ－３４；未同定タンパク質Ｃ１６ｏｒｆ７７としても知られる）は、３９ｋＤａの単量体からなるホモ二量体として分泌される。既知のサイトカインファミリーには属していない。ヒトＩＬ－３４は、２０個のＡＡシグナル配列を含む２４２個のアミノ酸（ＡＡ）前駆体として合成され、２２２個のＡＡ成熟鎖をもたらす。本明細書で使用される場合、ＩＬ－３４は成熟鎖を指す。成熟した鎖には、Ｎ結合グリコシル化の可能性のある部位が１つ含まれている。ＩＬ－３４は、心臓、脳、肝臓、腎臓、脾臓、胸腺、精巣、卵巣、小腸、前立腺、結腸などの様々な組織で発現しており、脾臓で最も豊富である。「ｈ ＩＬ－３４」又は「ヒトＩＬ－３４」は、ＩＬ－３４ポリペプチドに関して本明細書で使用される場合、別段の記載がない限り、野生型ヒトＩＬ－３４を指し、好ましくは配列番号３１に示されるアミノ酸配列を有し、これは、リーダー配列が除去された成熟ＩＬ－３４である。（例えば、Ｌｉｎ ｅｔ．ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００８）Ｖｏｌ．３２０，Ｉｓｓｕｅ ５８７７，ｐｐ．８０７－８１１を参照）。
例示的なヒトＩＬ－３４（配列番号３１）は、アミノ酸配列を有する：
ＮＥＰＬＥＭＷＰＬＴＱＮＥＥＣＴＶＴＧＦＬＲＤＫＬＱＹＲＳＲＬＱＹＭＫＨＹＦＰＩＮＹＫＩＳＶＰＹＥＧＶＦＲＩＡＮＶＴＲＬＱＲＡＱＶＳＥＲＥＬＲＹＬＷＶＬＶＳＬＳＡＴＥＳＶＱＤＶＬＬＥＧＨＰＳＷＫＹＬＱＥＶＥＴＬＬＬＮＶＱＱＧＬＴＤＶＥＶＳＰＫＶＥＳＶＬＳＬＬＮＡＰＧＰＮＬＫＬＶＲＰＫＡＬＬＤＮＣＦＲＶＭＥＬＬＹＣＳＣＣＫＱＳＳＶＬＮＷＱＤＣＥＶＰＳＰＱＳＣＳＰＥＰＳＬＱＹＡＡＴＱＬＹＰＰＰＰＷＳＰＳＳＰＰＨＳＴＧＳＶＲＰＶＲＡＱＧＥＧＬＬＰ。
本明細書で使用される場合、「ヒト抗ＩＬ３４抗体」又は「抗ヒトＩＬ－３４抗体」とは、ヒトＩＬ－３４に結合する抗体を指す。好ましくは、インビトロ又はインビボで投与された「ヒト抗ＩＬ３４抗体」又は「抗ヒトＩＬ－３４抗体」は、ＩＬ－３４活性中和及び／又は応答ブロック、例えば、少なくとも１つの有意に低下した所望の活性、例えば、ＩＬ－３４反応性分子又は細胞エンドポイントの変化によって証明されるように、ＩＬ－３４シグナル伝達の望ましい減少をもたらす。例えば、中枢神経系におけるミクログリアの数、密度、又は表現型は、ＩＬ－３４反応性分子又は細胞効果の可能性の例である。本明細書で使用される場合、「シグナリング」及び「シグナル伝達」及び「ＩＬ－３４介在」という用語は、ＩＬ－３４に関連する場合、ＩＬ－３４の活性に起因する細胞及び／又は細胞間反応を指す。
本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、抗原に結合する免疫グロブリン分子を指す。抗体の実施形態には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、又はコンジュゲート抗体が含まれる。抗体は、任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ）、及び任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）のものであってもよい。例示的な抗体は、４つのポリペプチド鎖：鎖間ジスルフィド結合を介して架橋される２つの重鎖（ＨＣ）及び２つの軽鎖（ＬＣ）から構成された免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）型抗体である。ＬＣは、カッパ又はラムダとして分類され、これらは各々、特定の定常領域を特徴とする。本開示の実施形態は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ４抗体を含み得、カッパ軽鎖又はラムダ軽鎖を更に含み得る。好ましくは、本開示の抗体は、κ定常領域である軽鎖定常領域を含む。
ＨＣは、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、又はイプシロンとして分類され、それぞれ抗体のアイソタイプをＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、又はＩｇＥとして定義する。４つのポリペプチド鎖の各々のアミノ末端部分は、抗原認識に主に関与する約１００～１２５個以上のアミノ酸の可変領域を含む。４つのポリペプチド鎖の各々のカルボキシ末端部分は、主にエフェクター機能に関与する定常領域を含有する。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域から構成される。重鎖の定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメインを含む。ＣＨ１は、ＨＣＶＲの後にあり、ＣＨ１及びＨＣＶＲは、抗原に結合する抗体の一部である抗原結合（Ｆａｂ）フラグメントの重鎖部分を形成する。ＣＨ２は、ヒンジ領域の後にあり、ＣＨ３の前にある。ＣＨ３は、ＣＨ２の後にあり、重鎖のカルボキシ末端にある。軽鎖の定常領域は、１つのドメインＣＬを含む。ＣＬは、ＬＣＶＲの後にあり、ＣＬ及びＬＣＶＲは、Ｆａｂの軽鎖部分を形成する。
本開示の抗体は、サブクラス、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４に更に分類することができるＩｇＧ ＨＣを含み、本開示の実施形態は、例えば、エフェクター機能を増強するか、又は低減する、各ＨＣの定常領域に１つ以上の改変を含み得る。本明細書で使用される「Ｆｃ領域」という用語は、抗体重鎖のＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む抗体の領域を指す。任意選択により、Ｆｃ領域は、抗体重鎖のヒンジ領域の一部分又はヒンジ領域全体を含み得る。ＩｇＧ１は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導することが知られており、本明細書に記載のＦｃ変異は、凝集を低減し、ＡＤＣＣ又はＣＤＣ活性（又は他の機能）を低減若しくは増強し、及び／又は抗体の薬物動態を改変し得る。本明細書に記載の抗ヒトＩＬ－３４抗体の実施形態は、ＦｃγＲ及びＣ１ｑ受容体への結合を低減し、それにより、野生型ＩｇＧ Ｆｃ領域を有する抗体によって誘導され得る細胞傷害性を低減又は除去する。したがって、いくつかの実施形態によれば、変異は、本明細書に記載の位置でＦｃ領域に導入される。改変Ｆｃ領域を含むそのような抗ヒトＩＬ－３４抗体のエフェクター機能を十分に低減又は除去することにより、患者の安全性を改善することができ、本明細書に記載の他の特性と組み合わせて、望ましくない活性を回避しながら有用な活性の改善されたプロファイルを有する治療薬を提供することができる。
特定の生物学的系において発現する場合、抗体は、Ｆｃ領域においてグリコシル化される。典型的には、グリコシル化は、高度に保存されたＮ－グリコシル化部位の抗体のＦｃ領域に生じる。Ｎ－グリカンは、典型的には、アスパラギンに結合する。抗体は、他の位置でもグリコシル化され得る。本開示の抗体は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体は、単一のコピー又はクローン（例えば、任意の真核生物、原核生物、又はファージクローンを含む）に由来する抗体であり、それが産生される方法ではない。モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ技術、組換え技術、ファージ提示技術、合成技術、例えばＣＤＲ移植、又はそのような技術又は当該技術分野で既知の他の技術の組み合わせにより産生することができる。本開示は、本開示の抗体がヒト又はヒト化抗体であることを企図する。モノクローナル抗体の文脈において、「ヒト」及び「ヒト化」という用語は、当業者によく知られている（Ｗｅｉｎｅｒ ＬＪ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２００６；２９：１－９；Ｍａｌｌｂｒｉｓ Ｌ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ａｅｓｔｈｅｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１６；９：１３－１５）。本開示の抗体の例示的な実施形態はまた、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ｓｃＦｖ抗体フラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、Ｆｄフラグメント及び線状抗体などの、抗原と特異的に相互作用する能力を保持する抗体の少なくとも一部分を含む、抗体フラグメント又は抗原結合フラグメントを含む。
各ＬＣ及びＨＣのアミノ末端部分は、その中に含まれるＣＤＲを介した抗原認識を主に担う約１００～１２０アミノ酸の可変領域を含む。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存されている領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる、超可変領域に更に細分され得る。ＣＤＲはタンパク質の表面上に露出しており、抗原結合特異性のための抗体の重要な領域である。各ＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成されており、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置される。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原との特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。抗体が特定の抗原に結合する機能的能力は、６つのＣＤＲによって大きく影響される。アミノ酸残基のＣＤＲへの割り当ては、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，“Ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９６，９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２７３，９２７－９４８（１９９７））、Ｎｏｒｔｈ（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８－２５６（２０１１））、又はＩＭＧＴ（ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇで利用可能な国際的なＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓデータベース；Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９９；２７：２０９－２１２を参照のこと）に記載されているものを含む、周知のスキームに従って行われ得る。
本開示の目的のために、別段の指定がある場合を除き、本明細書に記載の抗ＩＬ－３４抗体、及びＬＣＶＲ領域及びＨＣＶＲ領域内のＣＤＲドメインへのアミノ酸の割り当てには、ＮｏｒｔｈのＣＤＲ定義が使用される。以下の表２は、Ｂｅｎｃｈｌｉｎｇ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ｓｏｆｔｗａｒｅを使用して生成された、それぞれＮｏｒｔｈ、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、及び／又はＩＭＧＴの規則に基づく、抗体１及び／又は本開示の抗体のＣＤＲ配列を提供する。
Figure 2023067832000002
本開示の抗体の実施形態は、薬理学的に有用かつ重要な活性及び特性の組み合わせを有し、ある点では、ヒトＩＬ－３４に高い親和性及び高い特異性で結合することができ、並びに他の有用な特性を有する。本明細書で使用される「結合する」という用語は、別段の定めがない限り、別のタンパク質又は分子との引力相互作用を形成するタンパク質又は分子の能力を意味し、当該分野で既知である一般的な方法によって決定されるように、２つのタンパク質又は分子の近接をもたらす。ヒトＩＬ－３４に対する抗ＩＬ－３４抗体の親和性に関して本明細書で使用される「特異的に結合する」という語句は、別段の指示がない限り、本質的に本明細書に記載されるように、ＳＰＲ（表面プラズモン共鳴）バイオセンサー、及び／又はＭＳＤ（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）機器によって測定される溶液平衡滴定（ＳＥＴ）の使用によるものを含む、当技術分野で知られている一般的な方法によって決定されるように、好ましくは約１×１０－１０Ｍ以下、更により好ましくは、約１×１０－１０Ｍ～約１×１０－１２ＭのＫＤを意味することを意図する。「特異的に結合する」という語句はまた、他の抗原と比較して、ヒトＩＬ－３４に対する抗ＩＬ－３４抗体の相対的な親和性を示し、ヒトＩＬ－３４に対する親和性は、ヒトＩＬ－３４の特異的認識をもたらす。
本開示の抗体の実施形態は、本実施形態の配列を含む構築物から、当技術分野で知られている様々な技術によって発現及び生成され得る。「核酸」又は「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書で互換的に使用される場合、天然ヌクレオチド、改変ヌクレオチド、及び／又はヌクレオチドの類似体を組み込んだＤＮＡ、ｃＤＮＡ、及びＲＮＡ分子等の一本鎖及び／又は二本鎖ヌクレオチド含有分子を含むヌクレオチドのポリマーを指す。本開示のポリヌクレオチドはまた、例えばＤＮＡ又はＲＮＡポリメラーゼ反応又は合成反応によってその中に組み込まれた基質も含み得る。本開示のＤＮＡ分子は、本開示の抗体中のポリペプチド（例えば、重鎖、軽鎖、可変重鎖、及び可変軽鎖）のうちの少なくとも１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする天然に存在しないポリヌクレオチド配列を含む、ＤＮＡ分子である。
ＨＣＶＲ又はＬＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、それぞれ重鎖又は軽鎖を形成するために、それぞれＨＣＶＲ又はＬＣＶＲをコードするＤＮＡを、重鎖又は軽鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長重鎖遺伝子に変換され得る。ヒト及び他の哺乳動物の重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、例えば、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。
本開示のポリヌクレオチドは、配列が発現制御配列に作動可能に連結された後に宿主細胞において発現し得る。発現ベクターは、典型的には、エピソーム、又は宿主染色体ＤＮＡの一体化した部分のいずれかとして、宿主生物中で複製可能である。一般に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にするために、選択マーカー、例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、及びジヒドロ葉酸レダクターゼを含む。目的のポリヌクレオチド配列（例えば、抗体のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド及び発現制御配列）を含むベクターは、細胞宿主のタイプに応じて異なる周知の方法によって宿主細胞に導入され得る。
本開示の抗体は、哺乳動物細胞において容易に産生することができ、この非限定的な例は、ＣＨＯ、ＮＳ０、ＨＥＫ２９３、又はＣＯＳ細胞を含む。宿主細胞は、当該技術分野において周知の技術を使用して培養される。哺乳動物の抗体発現は、典型的にグリコシル化をもたらす。抗体のグリコシル化は、通常、Ｎ結合又はＯ結合のいずれかである。Ｎ結合グリコシル化とは、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を指す。Ｏ結合グリコシル化とは、ヒドロキシアミノ酸への糖、例えばＮ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、又はキシロースの結合を指す。典型的には、グリコシル化は、高度に保存されたＮ－グリコシル化部位（例えば、ＩＭＧＴ又はＥＵインデックスナンバリングによると、ＩｇＧ１における２９７位）での抗体のＦｃ領域に生じる。グリコシル化部位は、グリコシル化を変更するために改変することができる（例えば、グリコシル化をブロック若しくは低減するか、又はアミノ酸配列を変更して追加若しくは多様なグリコシル化を生成する）。
哺乳動物でのＩｇＧサブクラスからの抗体の発現は、重鎖の一方又は両方からＣ末端アミノ酸のクリッピングを引き起こすことがあり得、例えば、ＩｇＧ１抗体では、１つ又は２つのＣ末端アミノ酸を除去し得る。ＩｇＧ１抗体の場合、Ｃ末端リジンが存在する場合、発現中に重鎖から切り詰められるか、又は切り取られ得る。追加的に、最後から２番目のグリシンも、同様に重鎖から切り詰められるか、切り取られ得る。
哺乳動物での抗体の発現も、Ｎ末端アミノ酸の改変をもたらし得る。例えば、重鎖又は軽鎖の最もＮ末端のアミノ酸がグルタミンである場合、ピログルタミン酸に改変され得る。
本開示の抗体、又はそれを含む医薬組成物は、非経口経路によって投与されることができ、この非限定的な例は、皮下投与及び静脈内投与である。本開示の抗体は、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤とともに単回投与又は複数回投与で患者に投与され得る。本開示の医薬組成物は、当該技術分野で周知の方法によって調製することができ（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ ｅｄ．（２０１２），Ａ．Ｌｏｙｄ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ）、本明細書に開示される抗体、及び１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を含む。
本発明の抗体実施形態の使用：
いくつかの実施形態によれば、本開示の抗ＩＬ－３４抗体は、免疫介在性疾患の治療に有用である。本明細書で使用する場合、用語「免疫介在性疾患」又は「炎症性疾患又は障害」は、互換的に使用され、ＩＬ－３４阻害により恒常性が高まり、病的反応が少なくなる不適切又は過剰な免疫応答から生じる望ましくない状態を指す。「免疫介在性疾患」又は「炎症性障害」という用語は、ミクログリア又はマクロファージの細胞性免疫応答によって媒介されるか、又は組織球、クッパー細胞、肺胞マクロファージ、腸管マクロファージ、マクロファージ様滑膜細胞、又はランゲルハンス細胞などの同様の組織常在細胞型の症状によって媒介されるかに関係なく、そのような状態を含むことを意味する。本明細書に記載される開示の抗体によって治療されることが意図される例示的な疾患には、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）が挙げられる。
いくつかのより具体的な実施形態では、免疫介在性疾患は、アルツハイマー病（ＡＤ）である。本開示の他の実施形態によれば、抗ＩＬ－３４抗体は、免疫介在性疾患の診断用途に有用である。いくつかの実施形態では、免疫介在性疾患は、ＡＤ、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）のうちの少なくとも１つである。
本開示は、本開示の抗ＩＬ－３４抗体と、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤と、を含む、医薬組成物を更に提供する。更に、本開示は、ＡＤ、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）などの免疫介在性疾患を治療する方法であって、治療を必要とする患者に本開示の医薬組成物を投与することを含む、方法を提供する。
加えて、本開示は、免疫介在性疾患を治療する方法を提供する。より具体的には、本開示は、ＡＤ、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）などの免疫介在性疾患を治療する方法であって、治療を必要とする患者に有効量の本開示の抗ＩＬ－３４抗体を投与することを含む、方法を提供する。
本開示はまた、治療に使用するための本開示の抗ＩＬ－３４抗体を提供する。より具体的には、本開示は、ＡＤ、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を含む免疫介在性疾患の治療に使用するための本開示の抗ＩＬ－３４抗体を提供する。
特定の実施形態では、本開示は、ＡＤ、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を含む１つ以上の免疫介在性疾患の治療のための薬剤の製造における本開示の抗ＩＬ－３４抗体の使用を提供する。
本開示の抗体は、ＩＬ－３４が障害の病因に寄与している可能性がある免疫介在性障害の同定に有用である。更なる実施形態では、本開示は、患者の免疫介在性疾患を治療する方法を提供する。そのような方法は、患者試料をＩＬ－３４抗体と接触させ、患者試料中のヒトＩＬ－３４と抗体との間の結合を検出するステップと、患者試料中のＩＬ－３４の存在が健常人において観察される基準値を超えて検出された場合、患者を、免疫介在性疾患を有する、そのリスクがある、そのための治療が必要である、及び／又はそれに関連する症状のリスクがある、と診断するステップと、を含む（例えば、Ｘｉｅ，Ｈ．Ｈ．，ｅｔ ａｌ．Ｅｌｅｖａｔｅｄ Ｓｅｒｕｍ Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－３４ Ｌｅｖｅｌ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ Ｉｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ ８，３４６２（２０１８を参照）。本明細書に提供される治療方法のいくつかのより具体的な実施形態によれば、そのような方法は、対照標準を、患者試料を接触させる際に使用されるのと同じＩＬ－３４の第１のエピトープ領域に結合する第１の抗体と接触させるステップと、対照標準を、検出可能な標識を有し、患者試料を接触させる際に使用されるのと同じＩＬ－３４の第２のエピトープ領域に結合する第２の抗体と接触させるステップと、検出可能なシグナルにより提供されたシグナルを検出するステップと、を更に含む、基準値を決定するステップを更に含む。いくつかの具体的な実施形態では、抗ＩＬ－３４抗体は、表１に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。更なる実施形態では、第２の抗体は、表１に提供されるＬＣＶＲ及びＨＣＶＲの組み合わせを含む。いくつかの実施形態によれば、基準値は、例えばＣＮＳ組織ライセートからの、約１０～３０ｐｇ／ｍＬである。特定の実施形態では、免疫介在性疾患は、ＡＤ、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）のうちの１つである。いくつかの実施形態では、患者試料は、ＣＳＦ、血液、血清、組織ライセート、又は血漿のうちの１つである。いくつかの実施形態によれば、本方法は、患者試料を、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域に結合し、検出可能な標識を有する第２の抗ＩＬ－３４抗体と接触させるステップと、検出可能なシグナルにより提供されるシグナルを検出するステップとを更に含む。更なる実施形態では、第２の抗体は、表１に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。更なる実施形態では、第２の抗体は、表１に提供されるＬＣＶＲ及びＨＣＶＲの組み合わせを含む。特定の実施形態によれば、第１及び第２の抗ＩＬ－３４抗体は、一緒にビンに入れられない。
いくつかの実施形態によれば、本開示は、患者試料を、ＩＬ－３４の第１のエピトープ領域に結合する第１の抗体と接触させるステップと、患者試料を、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域に結合し、検出可能な標識を有する第２の抗体と接触させるステップと、当該検出可能な標識により提供されたシグナルを検出するステップとを含む、患者試料中のＩＬ－３４を検出する方法を提供する。いくつかの実施形態では、患者試料は、血液、血清、組織ライセート、又は血漿のうちの１つである。いくつかのより具体的な実施形態によれば、ＩＬ－３４の第１のエピトープ領域は、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域と部分的に重複する。更に、いくつかの実施形態では、第１及び第２の抗体と接触させる当該ステップは、同時に起こる。いくつかの具体的な実施形態では、第１の抗体は、表１に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。更なる実施形態では、第１の抗体は、表１に提供されるＬＣＶＲ及びＨＣＶＲの組み合わせを含む。
本開示のいくつかの実施形態によれば、患者試料中のＩＬ－３４を定量化する方法が提供される。そのような方法は、患者試料を、ＩＬ－３４の第１のエピトープ領域に結合する第１の抗体と接触させるステップと、患者試料を、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域に結合し、検出可能な標識を有する第２の抗体と接触させるステップと、当該検出可能な標識によって提供されるシグナルを検出するステップと、対照標準を、ＩＬ－３４の同じ第１のエピトープ領域に結合する第１の抗体と接触させる（患者試料との接触に使用される）ステップと、対照標準を、ＩＬ－３４の同じ第２のエピトープ領域に結合し（患者試料との接触に使用される）、検出可能な標識を有する第２の抗体と接触させるステップと、当該検出可能なシグナルによって提供されるシグナルを検出するステップと、を含む。いくつかの実施形態では、患者試料は、血液、血清若しくは血漿、又は組織ライセートのうちの１つである。いくつかのより具体的な実施形態によれば、ＩＬ－３４の第１のエピトープ領域は、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域と部分的に重複する。更に、いくつかの実施形態では、第１及び第２の抗体と接触させる当該ステップは、同時に起こる。いくつかの具体的な実施形態では、第１の抗体は、表１に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。更なる実施形態では、第１の抗体は、表１に提供されるＬＣＶＲ及びＨＣＶＲの組み合わせを含む。いくつかの具体的な実施形態では、第２の抗体は、表１又は本明細書に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。更なる実施形態では、第２の抗体は、表１に提供されるＬＣＶＲ及びＨＣＶＲの組み合わせを含む。
いくつかの実施形態によれば、免疫介在性疾患を診断する方法が提供される。このような方法は、患者試料を抗ＩＬ－３４抗体と接触させ、患者試料中のＩＬ－３４と抗体との間の結合を検出するステップを含む。いくつかの具体的な実施形態によれば、診断方法は、患者試料中のＩＬ－３４の存在が基準値を超えて検出された場合、患者を、免疫介在性疾患を有する、そのリスクがある、そのための治療が必要である、及び／又はそれに関連する症状のリスクがある、と診断することを含む。いくつかのより具体的な実施形態によれば、そのような方法は、対照標準を、患者試料を接触させる際に使用されるのと同じＩＬ－３４の第１のエピトープ領域に結合する第１の抗体と接触させるステップと、対照標準を、検出可能な標識を有し、患者試料を接触させる際に使用されるのと同じＩＬ－３４の第２のエピトープ領域に結合する第２の抗体と接触させるステップと、検出可能なシグナルにより提供されるシグナルを検出するステップと、を更に含む、基準値を決定するステップを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の抗体は、表１に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。いくつかの実施形態によれば、本方法は、患者試料を、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域に結合し、検出可能な標識を有する第２の抗ＩＬ－３４抗体と接触させるステップと、検出可能なシグナルにより提供されるシグナルを検出するステップとを更に含む。いくつかの具体的な実施形態では、抗ＩＬ－３４抗体は、表１に提供されるＬＣ及びＨＣ ＣＤＲの組み合わせを含む。更なる実施形態では、抗体は、表１に提供されるＬＣＶＲ及びＨＣＶＲの組み合わせを含む。より具体的な実施形態によれば、ＩＬ－３４の第１のエピトープ領域は、ＩＬ－３４の第２のエピトープ領域と部分的に重複する。特定の実施形態によれば、第１及び第２の抗体は、一緒にビンに入れられない。更なる実施形態によれば、基準値は、ＣＮＳ組織ライセートからの約１０～３０ｐｇ／ｍＬのおおよその範囲であり、及び／又は適切な基準群及び試料源について当業者によって決定される。更なる実施形態では、免疫介在性疾患は、ＡＤ、タウオパチー、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）のうちの１つである。
一実施形態では、本開示は、体液中のヒトＩＬ－３４レベルを決定する方法であって、（ａ）体液を抗ヒトＩＬ－３４診断用モノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントであって、配列番号３１のアミノ酸配列、抗体、又はその抗原結合フラグメント（アミノ酸配列（配列番号８）、（配列番号９）、及び（配列番号１０）をそれぞれ含む軽鎖相補性決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、並びにアミノ酸配列（配列番号５）（配列番号６）、及び（配列番号７）をそれぞれ含む重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含む）からなるヒトＩＬ－３４に特異的に結合する、抗原結合フラグメントと接触させることと、（ｂ）任意選択で、非特異的に結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントを除去することと、（ｃ）ヒトＩＬ－３４に特異的に結合したモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントの量を検出及び／又は定量化することと、を含む、方法を提供する。好ましくは、当該体液は、血液、血清若しくは血漿、又は脳脊髄液であり、当該接触は、エクスビボで起こる。
タウオパチー疾患には、アルツハイマー病（ＡＤ）、ピック病（ＰｉＤ）、進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、皮質基底核変性症（ＣＢＤ）、嗜銀顆粒性認知症、ダウン症候群、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、１７番染色体に関連するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＦＴＤＰ－１７）、グアムのパーキンソニズム－認知症複合体、ニーマン－ピック病Ｃ型、筋強直性ジストロフィーが含まれるが、これらに限定されない（Ｌｉ，Ｃ．，Ｇｏｔｚ，Ｊ．Ｔａｕ－ｂａｓｅｄ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ：ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ａｎｄ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ １６、８６３－８８３（２０１７）を参照）。
本開示の実施形態では、患者は、本明細書に記載の抗体による治療を必要とする、本明細書に記載の疾患又は障害のうちの１つなどの医学的リスク、状態又は障害を有することが診断されたヒトである。本開示の方法によって治療することができる障害が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）などによって確立され、受け入れられている分類によって知られている場合において、それらの分類は、様々なよく知られた医学書に記載されている。例えば、現在、Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｎｄ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｍｅｎｔａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓの第５版（ＤＳＭ－５）は、本明細書に記載の特定の障害を同定するための診断ツールを提供する。また、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅｓ第１０版（ＩＣＤ－１０）は、本明細書に記載の特定の障害についての分類を提供する。当業者は、ＤＳＭ－５及びＩＣＤ－１０に記載のものを含む、本明細書に記載の疾患及び障害についての代替の命名法、疾病分類学、及び分類システムがあり、用語及び分類システムが医科学の進歩とともに進化することを認識するであろう。
「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」（又は「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」）という用語は、対象における既存の症状、障害、状態、又は疾患の進行又は重症度を遅延、妨害、阻止、緩和、停止、軽減、又は反転させることを指す。「対象」という用語は、ヒトを指す。「ヒト対象」及び「患者」という用語は、本開示において互換的に使用される。
本明細書で使用される場合、「治療方法」とは、本明細書に記載の疾患又は障害を治療するための組成物の使用、及び／又は本明細書に記載の疾患又は障害を治療するための薬剤の製造における使用及び／又は使用のための組成物の使用に等しく適用可能である。
「予防する」又は「予防」という用語は、アルツハイマー病の発症又は進行を予防するために、無症候性対象又は前臨床期アルツハイマー病に罹患している対象への本開示の抗体の予防上の投与を意味する。
本明細書で使用される「進行を遅らせる」という用語は、対象における疾患又はその症状の進行を遅らせる又は抑えることを意味する。
「Ａβの沈着を特徴とする疾患」又は「Ａβ沈着物を特徴とする疾患」という用語は、脳内又は脳脈管構造内のＡβ沈着物を病理学的に特徴とする疾患である。これには、アルツハイマー病、ダウン症候群、脳アミロイド血管障害などの疾患が含まれる。アルツハイマー病の臨床診断、病期分類又は進行は、既知の技術を使用し、結果を観察することにより、当業者のような担当診断医又は医療専門家によって容易に決定され得る。これは、一般に、の脳プラークイメージング、精神若しくは認知評価（例えば、臨床的認知症評定－ボックスの要約（ＣＤＲ－ＳＢ）、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）若しくはアルツハイマー病評価スケール－認知（ＡＤＡＳ－Ｃｏｇ））、又は機能評価（例えば、アルツハイマー病共同研究－日常生活の活動（ＡＤＣＳ－ＡＤＬ）を含む。認知及び機能評価を使用して、患者の認知（例えば、認知低下）及び機能（例えば、機能低下）の変化を決定することができる。したがって、対象は、本明細書に記載の技術に従って、「進行が遅い」認知機能低下を有することが決定され得る。例示的な実施形態において、「進行が遅い」認知機能の低下は、対象のｉＡＤＲが、例えば所定の期間（例えば、６、１２、１８又は２４ヶ月）にわたって約２０未満低下したｉＡＤＲＳによって識別され得る。別の例示的な実施形態では、「進行が遅い」認知機能の低下は、対象がＡＰＯＥ－４ホモ接合型陰性又はＡＰＯＥ－４ヘテロ接合型であるＡＰＯＥ－４ジェノタイピングによって同定することができる。別の例示的な実施形態では、「進行が遅い」認知機能の低下は、ＭＭＳＥによって特定することができ、対象は、約２７のＭＭＳＥ、又は所与の期間（例えば、６、１２、１８又は２４ヶ月）にわたって約３未満のＭＭＳＥ低下を有することが決定されている。本明細書で使用される「臨床的アルツハイマー病」は、アルツハイマー病の診断された段階である。これには、前駆期アルツハイマー病、軽度アルツハイマー病、中等度アルツハイマー病及び重度アルツハイマー病と診断された状態が含まれる。「前臨床期アルツハイマー病」という用語は、臨床的アルツハイマー病に先行する段階であり、バイオマーカーの測定可能な変化（アミロイドＰＥＴによるＣＳＦ Ａβ４２レベル又は蓄積した脳プラークなど）は、臨床的アルツハイマー病に進行する、アルツハイマー病の患者の最も初期の徴候を示す。これは通常、記憶喪失及び混乱のような症状が顕著となる前である。前臨床期アルツハイマー病には、１つ又は２つのＡＰＯＥ ｅ４対立遺伝子を保持するためにＡＤを発症するリスクが高い患者だけでなく、発症前の常染色体優性保因者も含まれる。
認知機能低下の低減又は緩徐化は、臨床認知症評価－ボックスの要約、ミニメンタルステート検査、又はアルツハイマー病評価スケール－認知などの認知評価によって測定できる。機能低下の低減又は緩徐化は、ＡＤＣＳ－ＡＤＬなどの機能評価によって測定することができる。
本明細書で使用される場合、「ｍｇ／ｋｇ」とは、キログラム単位の体重に基づいて、対象に投与される抗体又は薬物のミリグラム単位の量を意味する。用量は、一度に与えられる。例えば、体重７０ｋｇの対象に対する抗体の１０ｍｇ／ｋｇ用量は、単回投与で投与される抗体の単回７００ｍｇ用量である。同様に、体重７０ｋｇの対象に対する２０ｍｇ／ｋｇ用量の抗体は、単回投与で投与される抗体の１４００ｍｇ用量となる。
本明細書で使用される場合、１８Ｆ－ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒベースの定量分析を用いて、タウ負荷が１．１０ＳＵＶｒ（＜１．１０ＳＵＶｒ）未満である場合、ヒト対象は、「非常に低いタウ」負荷を有する。定量分析は、ＳＵＶｒの計算を指し、ＳＵＶｒは、参照領域と比較した場合（参照シグナル強度のパラメトリック評価又はＰＥＲＳＩ、Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ １８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－９５１（２０１８）を参照）、脳内の関心のある特定の標的領域内のカウントを表す（マルチブロック重心判別分析又はＭＵＢＡＤＡ、Ｄｅｖｏｕｓ ｅｔ ａｌ，“Ｔｅｓｔ－Ｒｅｔｅｓｔ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔａｕ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８，”Ｊ．Ｎｕｃｌ． Ｍｅｄ．５９：９３７－９４３（２０１８）を参照）。本明細書で使用される場合、タウ負荷が１８Ｆ－ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒベースの定量分析を用いて１．４６ＳＵＶｒ以下（すなわち、１．４６ＳＵＶｒ以下）である場合、ヒト対象は、「非常に低いタウから中等度のタウ」負荷を有する。定量分析は、ＳＵＶｒの計算を指し、ＳＵＶｒは、参照領域と比較した場合（ＰＥＲＳＩ、Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ １８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－９５１（２０１８））、脳内の関心のある特定の標的領域内のカウントを表す（ＭＵＢＡＤＡ、Ｄｅｖｏｕｓ ｅｔ ａｌ，“Ｔｅｓｔ－Ｒｅｔｅｓｔ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔａｕ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９３７－９４３（２０１８）参照）。
本明細書で使用される場合、１８Ｆ－ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒベースの定量分析を用いて、タウ負荷が１．１０以上～１．４６以下（すなわち、１．１０ＳＵＶｒ以下～１．４６ＳＵＶｒ以下）である場合、ヒト対象は、「低いタウから中等度のタウ」負荷を有する。定量分析は、ＳＵＶｒの計算を指し、ＳＵＶｒは、参照領域と比較した場合（ＰＥＲＳＩ、Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ １８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－９５１（２０１８）参照）、脳内の関心のある特定の標的領域内のカウントを表す（ＭＵＢＡＤＡ、Ｄｅｖｏｕｓ ｅｔ ａｌ，“Ｔｅｓｔ－Ｒｅｔｅｓｔ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔａｕ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９３７－９４３（２０１８）参照）。「低いタウから中等度のタウ」負荷を有するヒト対象は、「中間」タウ負荷を有することが呼ぶこともできる。
本明細書で使用される場合、１８Ｆ－ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒベースの定量分析を用いて、タウ負荷が１．４６ＳＵＶｒより大きい（すなわち、＞１．４６ＳＵＶｒ）場合、ヒト対象は、「高度のタウ」負荷を有する。定量分析は、ＳＵＶｒの計算を指し、ＳＵＶｒは、参照領域と比較した場合（ＰＥＲＳＩ、Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ １８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－９５１（２０１８）参照）、脳内の関心のある特定の対象領域内のカウントを表す（ＭＵＢＡＤＡ、Ｄｅｖｏｕｓ ｅｔ ａｌ，“Ｔｅｓｔ－Ｒｅｔｅｓｔ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔａｕ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９３７－９４３（２０１８）参照）。
本明細書で使用される「約」という用語は、最長±１０％を意味する。
本明細書で使用される場合、「自然免疫」という用語は、免疫応答の適応性アームとは対照的に、適応免疫応答（抗体及びＴ細胞応答）を開始及び維持するために必要とされる免疫応答のアームを含む。
「有効量」とは、治療医療専門家によって求められている組織、系、又はヒトの生物学的若しくは医学的応答、又は所望の治療効果を誘発するであろう本開示の抗ヒトＩＬ－３４抗体、又はそのような抗体を含む医薬組成物の量を意味する。本明細書で使用される場合、患者の「有効応答」、又は治療に対する患者の応答性という用語は、本開示の抗体の投与の際に患者に付与される臨床上又は治療上の利点を指す。抗体の有効量は、個体の病状、年齢、性別、及び体重、並びに個体における所望の応答を誘発する抗体の能力などの因子に応じて変動し得る。有効量はまた、抗体の任意の毒性効果又は有害効果よりも治療的に有益な効果が上回る量である。そのような利点には、炎症又は免疫活性化のレベルの低下、免疫介在性疾患又は障害の安定化、又は免疫介在性障害の徴候若しくは症状の改善のうちのいずれか１つ以上を含む。代替的に、そのような利点には、移植臓器の免疫寛容の増加、安定した自己免疫疾患若しくは障害、又は自己免疫障害の徴候若しくは症状の改善などのうちのいずれか１つ以上を含む。
本明細書に開示される方法の潜在的な利点は、免疫介在性障害又は神経炎症性障害に罹患している患者において、許容される忍容性、毒性、及び／又は有害事象を含む許容される安全性プロファイルで、著しい及び／又は長期にわたる軽減をもたらす可能性であり、したがって患者は、全体的な治療方法から利点を得る。本開示の治療の有効性は、様々な免疫介在性障害の治療を評価する際に一般的に使用される様々なエンドポイントによって測定することができる。例えば、免疫細胞活性化マーカー、炎症の尺度、細胞周期依存性バイオマーカーの測定と視覚化、及び／又は様々な炎症又は免疫による反応の測定、又は組織特異的ビオマーカー評価を含む、本開示の任意の特定の療法の有効性を決定することへの他のアプローチを任意選択で使用することができる。
有効量は、既知技術の使用によって、及び同様の状況下で得られた結果を観察することによって、当業者により容易に決定されることができる。本開示の抗ヒトＩＬ－３４抗体の有効量は、単回用量又は複数回用量で投与され得る。更に、本開示の抗体の有効量は、一度だけ投与される場合、有効量未満である量の複数回用量で投与され得る。患者のための有効量を決定する際には、これらに限定されないが、患者のサイズ（例えば、重量又は質量）、体表面積、年齢、及び全体的な健康状態；関与する特定の疾患又は障害；疾患又は障害の程度、又は関与、又は重症度；個々の患者の応答；投与される特定の化合物；投与の様式；投与される調製物の生物学的利用能特性；選択される投薬計画；付随する医薬品の使用；並びに診断医に既知の他の関連する状況を含む、多数の因子が担当診断医によって考慮される。
毎週、隔週ごと、毎月、又は四半期ごとの非経口（皮下、筋肉内、及び／又は静脈内を含むがこれらに限定されない）用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇであり得る。本明細書で使用される場合、「１ヶ月」又はその派生語は、２８～３１の連続した日を含む期間を指す。
本明細書に開示される方法の潜在的な利点は、免疫介在性障害又は神経炎症性障害に罹患している患者において、許容できる忍容性、毒性、及び／又は有害事象を含む許容できる安全性プロファイルで、著しい及び／又は長期にわたる軽減をもたらす可能性であり、したがって患者は、治療方法全体から利益を得る、より具体的には、本開示の抗体が、臨床的に望ましくない免疫抑制及び／又は「サイトカインストーム」又は有意なサイトカイン放出などの免疫関連の有害事象を回避しながら、効果的な治療を提供する。本開示の抗体は、サイトカインストーム、又はサイトカインの有害な放出の治療に有用であり得る。本明細書で使用される場合、「著しいサイトカイン放出」は、当業者に知られている方法によって検出することができる測定可能なサイトカインの著しい増加を指す。例えば、著しいサイトカイン放出は、ＥＬＩＳＡによってヒト血液サンプルで検出され得、ここで、刺激されていない血液からのサイトカインレベルは、抗体とともにインキュベートされた血液を伴うサイトカインレベルと比較される。いくつかのそのような試験では、例えば、ＩＬ－６、若しくはＩＬ－８、又はＩＦＮ－γのレベルが、刺激されていない血液のレベルと比較して、抗体とともにインキュベートされた血液中で少なくとも３倍高い場合、著しいサイトカイン放出が検出され得る。好ましくは、本明細書の実施形態に記載の免疫介在性障害の治療は、患者が有意なサイトカイン放出を経験しない場合に行われる。
本開示の抗体の組み合わせ使用：
本開示は更に、本開示の抗体の同時、別々、又は順次組み合わせ、特に抗体１、及び抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を提供し、ＡＤなどのアミロイドベータ（Ａβ）の沈着を特徴とする疾患を治療するための組み合わせの使用方法に関する。本組み合わせに有用ないくつかの既知の抗Ａβ抗体には、ドナネマブ、バピヌズマブ、ガンテネルマブ、アデュカヌマブ、ＧＳＫ９３３７７６、ソラネズマブ、クレネズマブ、ポネズマブ、及びレカネマブ（ＢＡＮ２４０１）が挙げられる。本開示は更に、抗体１及びドナネマブ（ＣＡＳ番号１９３１９４４－８０－７、配列番号３８及び３９）の同時、別々、又は順次組み合わせ、並びにアミロイドベータ（Ａβ）の沈着を特徴とする疾患、例えばＡＤを治療するためにこれらの組み合わせを使用する方法を提供する（早期アルツハイマー病におけるドナネマブ、Ｍｉｎｔｕｎ，Ｍ．Ａ．ｅｔ ａｌ，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（２０２１），３８４（１８），１６９１－１７０４）。好ましくは、組み合わせは、ドナネマブによる一連の治療の後に、順次抗体１の使用を提供する。
本明細書で使用される場合、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、「抗Ｎ３ｐＧ抗体」、又は「抗Ｎ３ｐＥ抗体」は、互換的に使用され、Ａβ１－４０又はＡβ１－４２よりもＮ３ｐＧｌｕ Ａβに優先的に結合する抗体を指す。当業者は、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、並びに「ｈＥ８Ｌ」、「Ｂ１２Ｌ」及び「Ｒ１７Ｌ」を含むいくつかの特異的抗体が、米国特許第８，６７９，４９８ Ｂ２号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に特定され、開示されている（作製及び使用方法とともに）ことを理解し、認識するであろう。例えば、米国特許第８，６７９，４９８Ｂ２号の表１を参照されたい。「ｈＥ８Ｌ」、「Ｂ１２Ｌ」及び「Ｒ１７Ｌ」抗体を含む、米国特許第８，６７９，４９８Ｂ２号に開示されている抗体の各々を、本開示の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体として、又は本発明の様々な態様に記載されている抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の代わりに使用することができる。本組み合わせ方法の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、それぞれ配列番号４０及び４１のＨＣ及びＬＣを含む抗体である。
抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の他の代表的な種には、米国特許第８，９６１，９７２号、米国特許第１０，６４７，７５９号、米国特許第９，９４４，６９６号、ＷＯ２０１０／００９９８７Ａ２、ＷＯ２０１１／１５１０７６Ａ２、ＷＯ２０１２／１３６５５２Ａ１及びその均等物、例えば、米国特許法第１１２条（ｆ）の下に開示された抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
当業者は、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、及びいくつかの特異的抗体が、米国特許第８，９６１，９７２号（これによりその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、米国特許第１０，６４７，７５９号（これによりその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、及び米国特許第９，９４４，６９６号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）において特定され、開示されている（そのような抗体を作製及び使用する方法とともに）ことを理解し、認識するであろう。米国特許第８，９６１，９７２号、第９，９４４，６９６号、及び同第１０，６４７，７５９号に開示されている抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のいずれも、本開示の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体として、又は本発明の様々な態様に記載される抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の代わりに使用され得る。
当業者は、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、並びに「抗体ＶＩ」、「抗体ＶＩＩ」、「抗体ＶＩＩＩ」、及び「抗体ＩＸ」を含むいくつかの特異的抗体が、ＷＯ２０１０／００９９８７Ａ２（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に特定され、開示されている（そのような抗体を作製及び使用する方法とともに）ことを理解し、認識するであろう。これらの４つの抗体（例えば、「抗体ＶＩ」、「抗体ＶＩＩ」、「抗体ＶＩＩＩ」、及び「抗体ＩＸ」）のそれぞれを、本開示の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体として、又は抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の代わりに使用することができる。Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、本発明の様々な態様に記載されている。
当業者は、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、及び「抗体Ｘ」及び「抗体ＸＩ」を含むいくつかの特異的抗体が、ＷＯ２０１１／１５１０７６Ａ２（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に特定され、開示されている（そのような抗体を作製及び使用する方法とともに）ことを理解し、認識するであろう。これらの２つの抗体（例えば、「抗体Ｘ」及び「抗体ＸＩ」）の各々は、本開示の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体として、又は本発明の様々な態様に記載される抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の代わりに使用され得る。
当業者は、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、並びに「抗体ＸＩＩ」及び「抗体ＸＩＩＩ」を含むいくつかの特異的抗体が、ＷＯ２０１２／１３６５５２Ａ１（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）において特定され、開示されている（当該抗体を作製及び使用するための方法とともに）ことを理解し、認識するであろう。これらの２つの抗体（例えば、「抗体ＸＩＩ」及び「抗体ＸＩＩＩ」）の各々は、本開示の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体として、又は本開示の様々な態様に記載される抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の代わりに使用され得る。
本開示の態様は、対象におけるＡβの沈着を特徴とする疾患を治療する方法のための、本開示の抗体、特に抗体１、及び抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体、特にドナネマブの組み合わせの使用を提供し、対象は、ｉ）脳全体におけるタウレベル／負荷（グローバルタウ）、ｉｉ）脳の領域（例えば、脳の異なる葉）におけるタウレベル／負荷、及び／又は対象のゲノムにおけるＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子の存在に基づいて選択される。本明細書に開示される組み合わせ方法を使用して治療又は予防され得る疾患には、例えば、アルツハイマー病（ＡＤ）、ダウン症候群、及び脳アミロイド血管障害（ＣＡＡ）が含まれる。本開示はまた、中間脳タウ負荷の存在下で早期症候性アルツハイマー病（ＡＤ）を有する対象における疾患の進行を遅らせるための、本明細書において提供される組み合わせの使用に関する。
Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβに対する抗体は、当技術分野で知られている。例えば、米国特許第８，６７９，４９８号（その中に開示された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含め、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体、及びアルツハイマー病などの疾患を抗体で治療する方法を開示している。沈着物に見られる、Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβを含むＡβに対する抗体の長期慢性投与による受動免疫は、様々な動物モデルにおける脳内のＡβ凝集体を破壊し、プラークのクリアランスを促進することが示されている。ドナネマブ（米国特許第８，６７９，４９８号に開示されている。ＣＡＳ番号１９３１９４４－８０－７も参照）は、脳内のアミロイドプラークにのみ存在するアミロイドベータ（Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ）エピトープの３番目のアミノ酸のピログルタミン酸改変に対する抗体である。ドナネマブの作用機序は、ＡＤの重要な病理学的特徴である既存のアミロイドプラークの標的化及び除去である。ＡＤの第２の神経病理学的特徴は、過剰リン酸化タウタンパク質を含む細胞内神経原線維変化の存在である。Ａβがタウの病状を引き起こし、Ａβとタウの間のより複雑で相乗的な相互作用が後の段階で現れ、疾患の進行を促進する可能性がある（Ｂｕｓｃｈｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｂｅｔｗｅｅｎ Ａｍｙｌｏｉｄ－β ａｎｄ Ｔａｕ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｎａｔｕｒｅ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ２３：１１８３－９３（２０２０））。
Ａβ抗体の投与は、アミロイド関連の画像異常（ＡＲＩＡ）、血管原性浮腫及び溝浸出液（ＡＲＩＡ－Ｅ）を示唆するもの、微小出血及びヘモジデリン沈着物（ＡＲＩＡ－Ｈ）、注入部位反応、及び免疫原性のリスクなどの有害事象をヒトにもたらした。例えば、Ｐｉａｚｚａ ａｎｄ Ｗｉｎｂｌａｄ，“Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ（ＡＲＩＡ）ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｎｅｅｄ ｆｏｒ Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ？”Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，５２：４１７－４２０（２０１６）；Ｓｐｅｒｌｉｎｇ，ｅｔ ａｌ．，“Ａｍｙｌｏｉｄ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ：Ａ Ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ，”Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ １１．３：２４１－２４９（２０１２）；Ｂｒａｓｈｅａｒ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｍｙｌｏｉｄ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ Ｐｈａｓｅ ＩＩＩ Ｓｔｕｄｉｅｓ，”Ｊ．ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ６６．４：１４０９－１４２４（２０１８）；Ｂｕｄｄ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ａｄｕｃａｎｕｍａｂ，ａｎ Ａｎｔｉ－Ａβ Ｈｕｍａｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｂｅｉｎｇ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅａｒｌｙ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ４．４：２５５（２０１７）を参照。
ドナネマブ及び抗体１についての本開示の併用治療戦略は、既存の脳アミロイド負荷を有する早期症候性ＡＤ患者の集団におけるアミロイドプラークに特異的なＮ３ｐＧｌｕ Ａβを標的とすること、及びこれらの患者における神経炎症を標的とすることを含む。この理論的根拠は、Ａβの産生及び沈着がＡＤの病因における初期の必要な事象であると述べているＡＤのアミロイド仮説に基づいている。例えば、Ｓｅｌｋｏｅ，“Ｔｈｅ Ｏｒｉｇｉｎｓ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ａ ｉｓ ｆｏｒ Ａｍｙｌｏｉｄ，”ＪＡＭＡ ２８３：１６１５－１６１７（２０００）を参照。この仮説の臨床的支持は、ＡＤの症状が現れる前に実質Ａβレベルが上昇し、脳Ａβを過剰生産するＡＤの遺伝的変異体とＡβ産生を防ぐ遺伝的変異体によって支持されるという実証から得られる。例えば、Ｊｏｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｍｕｔａｔｉｏｎ ｉｎ ＡＰＰ Ｐｒｏｔｅｃｔｓ Ａｇａｉｎｓｔ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ａｇｅ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｄｅｃｌｉｎｅ，”Ｎａｔｕｒｅ ４８８（７４０９）：９６－９９（２０１２）及びＦｌｅｉｓｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ Ｂｅｔｗｅｅｎ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ Ａｇｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ １ Ｅ２８０Ａ Ａｕｔｏｓｏｍａｌ Ｄｏｍｉｎａｎｔ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｋｉｎｄｒｅｄ：Ａ Ｃｒｏｓｓ－ｓｅｃｔｉｏｎａｌ Ｓｔｕｄｙ，”ＪＡＭＡ Ｎｅｕｒｏｌ．７２：３１６－２４（２０１５）を参照。したがって、問題のある有害事象を引き起こしたり、増加させたりすることなく、対象を治療するための薬剤の組み合わせの改善が必要とされている。神経炎症は、神経変性疾患の重要な要素であり、ＣＮＳ細胞による炎症誘発性サイトカインの産生増加を特徴とする。神経炎症及びミクログリオーシスは、アルツハイマー病、及び／又は神経細胞死及び機能障害の根底にある機序であると考えられている。ミクログリオーシスには、炎症シグナルに応答したミクログリアの異常な増殖及び／又は肥大が含まれる。ＩＬ－３４は、炎症及び免疫プロセスの調節において強力で多面的なサイトカインとして作用し、皮質、前嗅核、及び海馬のニューロンによって発現される。Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体、特にドナネマブによる治療に続いて抗体１による同時、別々、又は好ましくは順次治療は、神経炎症及び／又はミクログリオーシスのＡＤ病因への寄与を改善し、これらの患者の神経変性プロセスの進行を遅らせるか又は予防すると考えられる。
本開示の一態様は、タウが低い若しくは中等度、タウが非常に低いから中等度、又はタウが高くないアルツハイマー病患者が、ドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体及び抗体１などの本開示の抗体を用いる併用療法に反応する。本開示の別の態様は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有するアルツハイマー病患者が、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体による治療に反応するという概念に基づく。本開示の更に別の態様は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子及び低い又は中等度のタウを有する、非常に低いから中等度のタウ、若しくは高いタウを有しないアルツハイマー病患者が、ドナネマブ及び抗体１などの本開示の抗体などの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体による併用治療に反応する。本開示のいくつかの態様は、患者の脳病理に基づいて患者を診断及び治療することを対象とする。脳の病理に基づいて患者を選択することで、臨床試験でより均質な集団が得られるだけでなく、ＡＤの病期とその進行を適切に特定することができる。ＡＤの病期を適切に特定することで、例えば、メモリークリニックへのタイムリーな紹介、正確かつ早期のＡＤ診断、対症療法の開始、将来の計画、ドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体、及び抗体１などの本開示の抗体の併用療法による疾患改変治療の開始も可能になる。
本開示のいくつかの態様は、脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患に罹患しているヒト対象を治療するための組み合わせ実施形態を提供し、対象は、最初にドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を投与され、抗体１などの本開示の抗体を用いた同時、別々、又は順次治療と組み合わせて、２段階で投与される。第１の段階では、ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を投与し、各第１の用量は、約４週間に１回投与される。第１の用量を１回以上投与してから約４週間後、第２のステップにおいて、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量をヒト対象に投与し、各第２の用量は４週間に１回投与される。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、ドナネマブである。抗体１は、ドナネマブによる一連の治療の後に、同時に、別々に、又は順次投与される。好ましくは、抗体１は、ドナネマブによる一連の治療の後に順次投与される。
治療の組み合わせ方法のいくつかの態様は、ｉ）ヒト対象の脳内の全体的又は全体的なタウ負荷、又はｉｉ）対象の脳又はその領域若しくは部分におけるタウの広がり基づいて患者におけるＡＤの段階／進行を特定することに関する。
いくつかの実施形態では、患者は、対象の脳内（例えば、脳全体又は脳の一部）に存在するタウの量に基づいて層別化／特定／選択／治療することができる。いくつかの実施形態では、患者は、対象の脳内（例えば、脳全体又は脳の一部）に存在するタウの量、及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子の存在に基づいて、層別化／特定／選択／治療することができる。
他の実施形態では、患者は、ＡＤ進行の段階（例えば、脳内のタウの広がりに基づいて）層別化／特定／選択／治療される。例えば、いくつかの段階では、ＡＤ患者におけるタウ負荷は、前頭葉又は後外側側頭領域（ＰＬＴ）を含まない側頭葉の領域に分離される。ＡＤの別の段階は、ＡＤ患者におけるタウ負荷が後外側側頭（ＰＬＴ）又は後頭部領域に限定される。ＡＤの更に別の段階は、ＡＤ患者におけるタウ負荷が、ＰＬＴ又は後頭領域におけるタウ負荷とともに頭頂若しくは楔前若しくは前頭領域に存在する。いくつかの実施形態では、患者は、ＡＤ進行の段階に基づいて（例えば、脳内のタウの広がりに基づいて）、及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子の存在に基づいて、層別化／特定／選択／治療され得る。
脳内のタウの量、脳の一部におけるＡＤの進行、及び／又はＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子の存在に基づく患者の層別化を使用して、例えば、患者がドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体と、抗体１などの本開示の抗体との併用療法に反応するかどうかを決定することができる。脳内のタウの量、脳の一部におけるＡＤの進行、及び／又はＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子の存在に基づく患者集団の層別化／選択は、治療に加えて、臨床試験の設計及び実施中に直面する患者の不均質性及び反復可能性の問題を解決するのにも役立つ。
本開示の他の態様は、ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患のために、ドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体と、抗体１などの本開示の抗体との併用療法又は予防に反応するヒト対象に提供する。本開示のこの態様のいくつかの実施形態では、反応するヒト対象には、低いから中等度のタウ負荷、非常に低いから中等度のタウ負荷、及び／又はＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有するヒト対象が含まれる。本開示のこの態様のいくつかの実施形態では、反応するヒト対象は、高いタウ負荷を有するヒト対象を除外する。本開示のこの態様のいくつかの実施形態では、反応するヒト対象は、高いタウ負担及び／又はＡＰＯＥ ｅ４の１つ若しくは２つの対立遺伝子を有するヒト対象を除外する。いくつかの実施形態では、ドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体と、抗体１などの本開示の抗体との組み合わせは、アミロイドベータ（Ａβ）の沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のために、反応するヒト対象に投与される。
一態様では、本開示は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体、特にドナネマブ、及び本開示の抗体、特に抗体１を使用した、ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患に対する同時、別々、又は順次組み合わせる治療又は予防に関し、ｉ）ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を投与することであって、各第１の用量は約４週間に１回投与される、投与することと、ｉｉ）１回以上の第１の用量を投与してから約４週間後に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体をヒト対象に投与することであって、各第２の用量は約４週間に１回投与され、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体はドナネマブを含み、ヒト対象に本開示の抗体、特に抗体１をヒト対象に投与する、投与することと、を含む。好ましくは、抗体１は、ドナネマブによる一連の治療の後に順次投与される。
今日まで、ドナネマブによる治療の臨床的焦点は、既存の脳アミロイド負荷を伴う早期症候性ＡＤ患者に限定されてきた。しかしながら、ＡＤの第２の神経病理学的特徴は、過剰リン酸化タウタンパク質を含む細胞内神経原線維変化の存在である。現在の疾患モデルは、Ａβがタウの病理を引き起こし、Ａβとタウの間のより複雑で相乗的な相互作用が後期段階で現れ、疾患の進行を促進することを示唆している（Ｂｕｓｃｈｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｂｅｔｗｅｅｎ Ａｍｙｌｏｉｄ－β ａｎｄ Ｔａｕ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｎａｔｕｒｅ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ２３：１１８３－９３（２０２０））。
現在、ＡＤの疾患改変治療は存在していない。したがって、ヒト対象におけるＡβの沈着を特徴とする、ＡＤを含む疾患を治療する改善された方法に対する必要性が存在する。そのような方法は、そのような患者がそのような治療から治療的有用性を有し得るかどうかに基づいて患者を識別するのに役立つはずである。更に、そのような治療及び方法は、細胞傷害性の増加又は他の既知の有害事象に付随してはならない。本開示は、これらの必要性のうちの１つ以上を満たす。
Ｄｏｏｄｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｈａｓｅ ３ Ｔｒｉａｌｓ ｏｆ Ｓｏｌａｎｅｚｕｍａｂ ｆｏｒ Ｍｉｌｄ－ｔｏ－Ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，”ＮＥＪＭ，３７０；４，３１１－３２１（２０１４）は、「ＡＰＯＥ ε４保因者と非保因者の間で、有効性測定値に対する明確な異なる治療効果は観察されなかった」ことを示している。抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を本開示の抗体と組み合わせて、１つ又は２つのＡＰＯＥ ｅ４の対立遺伝子を有するヒト対象（例えば、ＡＰＯＥ ｅ４の保因者）に投与すると、１つ以上のそれらの対立遺伝子の非保因者と比較した場合に予想外の有効性が得られると考えられる。したがって、本実施形態は、本開示の抗体、特に抗体１と組み合わせて、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体、特にドナネマブの同時、別々、又は順次投与を、１つ又は２つのＡＰＯＥ ｅ４対立遺伝子を有する患者にそれらの患者の認知機能低下を遅らせる手段として、投与することを含む。
特定の実施形態によれば、本開示は、高い神経学的タウ負荷を有することが決定されたヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、同時、別々、又は順次用量で、治療有効量の抗Ａβ抗体、特にドナネマブと、治療有効量の本開示の抗体、特に抗体１と、を投与することを含む、方法を提供する。追加的に、特定の実施形態によれば、本開示は、後外側側頭葉タウ負荷を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する組み合わせ方法であって、同時、別々、又は順次用量で、治療有効量の抗Ａβ抗体、特にドナネマブと、治療有効量の本開示の抗体、特に抗体１と、を投与することを含む、方法を提供する。
特定の実施形態によれば、本開示は、高い神経学的タウ負荷を有し、かつアポリポタンパク質Ｅのイプシロン４対立遺伝子（本明細書ではＡＰＯＥ ｅ４又はＡＰＯＥ４と称する）の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する組み合わせ方法であって、同時、別々、又は順次用量で、治療有効量の抗Ａβ抗体、特にドナネマブと、治療有効量の本開示の抗体、特に抗体１と、を投与することを含む、方法を提供する。追加的に、特定の実施形態によれば、本開示は、後外側側頭葉タウ負荷を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、同時、別々、又は順次用量で、治療有効量の抗Ａβ抗体、特にドナネマブと、治療有効量の本開示の抗体、特に抗体１と、を投与することを含む、方法を提供する。
いくつかの実施形態によれば、本開示は、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次使用するための抗Ａβ抗体、特にドナネマブと、を高い神経学的タウ負荷を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のために提供することであって、治療有効量の抗Ａβの同時、別々、又は順次用量で、治療有効量の抗Ａβ抗体、特にドナネマブと、治療有効量の本開示の抗体、特に抗体１と、を投与することを含む、提供する。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、高い神経学的タウ負荷を有する、並びにＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている。
いくつかの実施形態では、本開示は、後外側側頭葉タウ負荷を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のために、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次使用するための抗Ａβ抗体、特にドナネマブを提供する。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉タウ負荷を有する、並びにＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている。
追加的に、いくつかの実施形態では、本開示は、アルツハイマー病（ＡＤ）を治療、予防する、又はその進行を遅らせるために、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次使用するための抗Ａβ抗体、特にドナネマブを提供する。追加的に、いくつかの実施形態では、本開示は、ＡＤ認知機能低下がゆっくり進行していると決定されたヒト対象において、アルツハイマー病（ＡＤ）を治療、予防する、又は進行を遅らせるために、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次使用するための抗Ａβ抗体、特にドナネマブを提供する。本開示のいくつかの実施形態は、ＡＤ認知機能低下がゆっくり進行しており、かつＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されたヒト対象において、アルツハイマー病（ＡＤ）を治療、予防する、又はその進行を遅らせるために、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次使用するための抗Ａβ抗体、特にドナネマブを提供する。
更に、いくつかの実施形態によれば、本開示は、アルツハイマー病の治療又は予防のための薬剤の製造における、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次組み合わせた、抗Ａβ抗体、特にドナネマブの使用を提供する。更に、いくつかの実施形態によれば、本開示は、ｉ）高い神経学的タウ負荷、又はｉｉ）高い神経学的タウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のための薬剤の製造における、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次組み合わせた、抗Ａβ抗体、特にドナネマブの使用を提供する。
いくつかの実施形態では、本開示は、ｉ）後外側側頭葉タウ負荷、又はｉｉ）後外側側頭葉タウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されたヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のための薬剤の製造における、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次組み合わせた、抗Ａβ抗体、特にドナネマブの使用を提供する。更なる実施形態では、本開示は、ｉ）ＡＤ認知機能低下がゆっくりと進行している、又はｉｉ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有し、かつＡＤ認知機能低下がゆっくりと進行していると決定されたヒト対象において、アルツハイマー病（ＡＤ）を治療、予防する、又はその進行を遅らせるための薬剤の製造における、本開示の抗体、特に抗体１と同時、別々、又は順次組み合わせた、抗Ａβ抗体、特にドナネマブの使用を提供する。
本明細書で提供されるいくつかの実施形態によれば、ヒト対象は、後外側側頭葉及び後頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉、後頭葉、及び頭頂葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉、及び前頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び／又は前頭葉のタウ負荷のうちの１つ以上を有することが神経学的ＰＥＴイメージングによって決定されている。いくつかの実施形態では、後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び／又は前頭葉のタウ負荷のうちの１つ以上は、１．４６ＳＵＶｒを超える神経学的タウ負荷に対応する。
本明細書で提供されるいくつかの実施形態によれば、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子並びに後外側側頭葉及び後頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子並びに後外側側頭葉、後頭葉及び頭頂葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子並びに後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び前頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び／又は前頭葉タウ負荷のうちの１つ以上を、神経学的ＰＥＴイメージングによって、並びにＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び／又は前頭葉のタウ負荷のうちの１つ以上は、１．４６ＳＵＶｒを超える神経学的タウ負荷に対応する。
追加の実施形態によれば、本開示は、アルツハイマー病（ＡＤ）認知機能低下がゆっくりと進行していると決定されたヒト対象においてアルツハイマー病（ＡＤ）の進行を治療、予防する、又はそれを遅らせる方法を提供し、同時、別々、又は順次用量を投与することを含む、治療有効量の抗Ａβ抗体、特にドナネマブ、及び治療有効量の本開示の抗体、特に抗体１を含む。いくつかの実施形態によれば、ヒト対象は、高い神経学的タウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態によれば、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉タウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉及び後頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉、後頭葉、及び頭頂葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉、及び前頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、後外側側頭葉タウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子並びに後外側側頭葉及び後頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子並びに後外側側頭葉、後頭葉及び頭頂葉のタウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子並びに後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び前頭葉のタウ負荷を有することが決定されている。
本明細書で提供される本開示の実施形態によれば、ヒト対象は、ＡＤＡＳ－Ｃｏｇ、ｉＡＤＬ、ＣＤＲ－ＳＢ、ＭＭＳＥ、ＡＰＯＥ－４遺伝子型決定及び／又はｉＡＤＲＳのうちの１つ以上によって、ＡＤ認知機能低下がゆっくりと進行することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ｉＡＤＲＳによってＡＤ認知機能低下がゆっくりと進行することが決定されている。いくつかの実施形態では、ｉＡＤＲＳは２０未満減少した。いくつかの実施形態では、ｉＡＤＲＳは、６ヶ月間にわたり２０未満減少した。いくつかの実施形態では、ｉＡＤＲＳは、１２ヶ月間にわたり２０未満減少した。いくつかの実施形態では、ｉＡＤＲＳは、１８ヶ月間にわたり２０未満減少した。いくつかの実施形態では、ｉＡＤＲＳは、２４ヶ月間にわたり２０未満減少した。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ－４遺伝子型決定により、ＡＤ認知機能低下がゆっくりと進行することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ－４ヘテロ接合体であると決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＡＰＯＥ－４ホモ接合体陰性であると決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＭＭＳＥによって進行の遅いＡＤ認知機能低下を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、２７を超えるＭＭＳＥを有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ＭＭＳＥは、３未満減少した。いくつかの実施形態では、ＭＭＳＥは、６ヶ月間にわたり３未満減少した。いくつかの実施形態では、ＭＭＳＥは、１２ヶ月間にわたり３未満減少した。いくつかの実施形態では、ＭＭＳＥは、１８ヶ月間にわたり３未満減少した。いくつかの実施形態では、ＭＭＳＥは、２４ヶ月間にわたり３未満減少した。
本明細書で提供される本開示の実施形態によれば、ヒト対象は、神経学的ＰＥＴイメージングによって高い神経学的タウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、神経学的ＰＥＴイメージングによって、１．４６ＳＵＶｒを超える高い神経学的タウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、残基２１７のスレオニンでリン酸化されたヒトタウ（「ｈＴａｕ－ｐＴ２１７」）の定量化によって、高い神経学的タウ負荷を有することが決定されている。いくつかの実施形態では、ｈＴａｕ－ｐＴ２１７は、ヒト対象の生物学的試料において定量化される。いくつかの実施形態では、生物学的試料は、脳脊髄液である。いくつかの実施形態では、生物学的試料は、血液、血漿又は血清のうちの１つである。
本発明の目的のために、ヒト対象のタウレベル又は負荷（本明細書において互換的に使用される）は、例えば、ｉ）神経学的若しくは脳のタウ沈着、ｉｉ）血液、血清及び／若しくは血漿中のタウ、又はｉｉｉ）脳脊髄液中のタウを検出又は定量化する技術若しくは方法を使用して決定することができる。いくつかの実施形態では、神経学的タウ負荷（ＰＥＴを介して、又は血液、血清、血漿又は脳脊髄液アッセイを介して決定されるかどうかにかかわらず）を使用して、神経学的タウ負荷（例えば、低い、中等度、又は高い神経学的タウ負荷）に基づいて対象を層別化することができる。
神経学的タウ負荷は、放射標識されたＰＥＴ化合物を用いたタウイメージングなどの方法を使用して決定できる（Ｌｅｕｚｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ＲＯ９４８ Ｆ１８ Ｔａｕ Ｐｏｓｉｔｒｏｎ Ｅｍｉｓｓｉｏｎ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ ｉｎ ｔｈｅ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ｆｒｏｍ Ｏｔｈｅｒ Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，”ＪＡＭＡ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ７７．８：９５５－９６５（２０２０）；Ｏｓｓｅｎｋｏｐｐｅｌｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｖｅ Ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ［１８Ｆ］－ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｐｏｓｉｔｒｏｎ Ｅｍｉｓｓｉｏｎ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ ｆｏｒ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ｖｓ Ｏｔｈｅｒ Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，”ＪＡＭＡ ３２０，１１５１－１１６２，ｄｏｉ：１０．１００１／ｊａｍａ．２０１８．１２９１７（２０１８）、ＰＥＴリガンドである［１８Ｆ］－ｆｌｏｒｂｔａｕｃｉｐｉｒを含む）（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＰＥＴタウ画像は、例えば、公開された方法によってＳＵＶｒ（標準化取込値）を推定するため、（Ｐｏｎｔｅｃｏｒｖｏ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ（１８Ｆ）ｉｎ Ｎｏｒｍａｌ Ａｇｅｉｎｇ，Ｍｉｌｄ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ａｎｄ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｄｅｍｅｎｔｉａ，”Ｂｒａｉｎ １４２：１７２３－３５（２０１９）；Ｄｅｖｏｕｓ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｅｓｔ－Ｒｅｔｅｓｔ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔａｕ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８，”Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５９：９３７－４３（２０１８）；Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－５１（２０１８）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）、及び／又は患者を視覚的に評価するため、例えば、患者がＡＤパターンを有するかどうかを決定するため定量的に評価することができる（Ｆｌｅｉｓｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｏｓｉｔｒｏｎ Ｅｍｉｓｓｉｏｎ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｗｉｔｈ［１８Ｆ］－ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ ａｎｄ Ｐｏｓｔｍｏｒｔｅｍ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ Ｃｈａｎｇｅｓ，”ＪＡＭＡ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ７７：８２９－３９（２０２０）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ＳＵＶｒ値が低いほどタウ負荷が少ないことを示し、ＳＵＶｒ値が高いほどタウ負荷が高いことを示す。一実施形態では、ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒスキャンによる定量的評価は、以下に記載される自動画像処理パイプラインによって達成される（Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－９５１（２０１８）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態では、脳内の特定の標的領域内のカウントは（例えば、マルチブロック重心判別分析又は ＭＵＢＡＤＡ、Ｄｅｖｏｕｓ ｅｔ ａｌ，“Ｔｅｓｔ－Ｒｅｔｅｓｔ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔａｕ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９３７－９４３（２０１８）を参照）（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）、を参照領域と比較し、参照領域は、例えば、小脳全体（ｗｈｏｌｅＣｅｒｅ）、小脳ＧＭ（ｃｅｒｅＣｒｕｓ）、アトラス－ベースの白質（ａｔｌａｓＷＭ）、対象固有のＷＭ（ｓｓＷＭ、例えば、参照シグナル強度のパラメトリック推定（ＰＥＲＳＩ）を使用）、Ｓｏｕｔｈｅｋａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｆｌｏｒｔａｕｃｉｐｉｒ Ｆ１８ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，”Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．５９：９４４－９５１（２０１８）を参照、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。タウ負荷を決定する例示的な方法は、標準化取込値比（ＳＵＶｒ）として報告される定量分析である。これは、参照領域（例えば、ＰＥＲＳＩを使用）と比較した場合、脳内の関心のある特定の標的領域内のカウント（例えば、ＭＵＢＡＤＡ）を表す。
いくつかの実施形態では、リン酸化タウ（Ｐ－タウ、スレオニン１８１若しくは２１７でリン酸化されたもの、又はそれらの組み合わせ）を使用して、本開示の目的でタウロード／負荷を測定することができる（Ｂａｒｔｈｅｌｅｍｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ Ｆｌｕｉｄ Ｐｈｏｓｐｈｏ－ｔａｕ Ｔ２１７ Ｏｕｔｐｅｒｆｏｒｍｓ Ｔ１８１ ａｓ ａ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ＰＥＴ Ａｍｙｌｏｉｄ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｐａｔｉｅｎｔ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，”Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｒｅｓ．Ｔｈｅｒ．１２，２６，ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１３１９５－０２０－００５９６－４（２０２０）；Ｍａｔｔｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ａβ Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｉｎ Ｓｏｌｕｂｌｅ ａｎｄ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ Ｔａｕ ｔｈａｔ Ｐｒｅｃｅｄｅ ａ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｔａｕ ＰＥＴ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｄｖａｎｃｅｓ ６，ｅａａｚ２３８７（２０２０）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。特定の実施形態では、残基２１７のスレオニンでリン酸化されたヒトタウに対する抗体を使用して、対象におけるタウロード／負荷を測定することができる（参照によりその全体が組み込まれる国際特許出願公開第２０２０／２４２９６３号を参照）。本開示は、いくつかの実施形態では、ＷＯ２０２０／２４２９６３に開示された抗タウ抗体を使用して、対象におけるタウロード／負荷を測定することを含む。ＷＯ２０２０／２４２９６３に開示された抗タウ抗体は、ＣＮＳにおいて発現されるヒトタウのアイソフォームに対して作られる（例えば、ＣＮＳにおいて発現されるアイソフォームを認識し、もっぱらＣＮＳの外側で発現されるヒトタウのアイソフォームを認識しない）。
放射性標識ＰＥＴ化合物を用いたアミロイドイメージング、又はＡβ若しくはＡβのバイオマーカーを検出する診断法を使用するなどの方法によって脳内でアミロイドが検出された場合、対象はアミロイド沈着物が陽性である。脳アミロイドロード／負荷を測定するために使用できる例示的な方法には、例えば、フロルベタピル（Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ，ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ Ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙ ＩＮＤ ｉｎ ｔｈｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ １８Ｆ－ＰＥＴ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ａｍｙｌｏｉｄ Ｉｍａｇｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ Ｂｒａｉｎ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｏｎｅ Ｃｏｍｐａｎｙ’ｓ Ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ」、Ｔｈｅ Ｑｕａｒｔｅｒｌｙ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ ５３．４：３８７（２００９）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）；フロルベタベン（Ｓｙｅｄ ｅｔ ａｌ．，“［１８Ｆ］Ｆｌｏｒｂｅｔａｂｅｎ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ ｉｎ β－Ａｍｙｌｏｉｄ ＰＥＴ Ｉｍａｇｉｎｇ ｉｎ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ，”ＣＮＳ Ｄｒｕｇｓ ２９，６０５－６１３（２０１５），参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）；及びフルテメタモル（Ｈｅｕｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，“Ｉｍａｇｉｎｇ β－ａｍｙｌｏｉｄ Ｕｓｉｎｇ［１８Ｆ］Ｆｌｕｔｅｍｅｔａｍｏｌ Ｐｏｓｉｔｒｏｎ Ｅｍｉｓｓｉｏｎ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：Ｆｒｏｍ Ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ ｔｏ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，”Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ ４３．２：３６２－３７３（２０１６）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。［１８Ｆ］－フロルベタピルは、前駆期ＡＤ又は軽度ＡＤ認知症の患者を含む患者の脳プラーク負荷の定性的及び定量的測定を提供し、脳からのアミロイドプラークの低減を評価するためにも使用できる。
追加的に、β－アミロイドの脳脊髄液又は血漿ベースの分析を使用して、アミロイドロード／負荷を測定することもできる。例えば、Ａβ４２を使用して脳のアミロイドを測定することができる（Ｐａｌｍｑｖｉｓｔ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，“Ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ Ｂｒａｉｎ Ａｍｙｌｏｉｄ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｕｓｉｎｇ Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ Ｆｌｕｉｄ Ｂｅｔａ－ａｍｙｌｏｉｄ ４２：ａ Ｃｒｏｓｓ－ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ Ｓｔｕｄｙ Ａｇａｉｎｓｔ Ａｍｙｌｏｉｄ Ｐｏｓｉｔｒｏｎ Ｅｍｉｓｓｉｏｎ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ．ＪＡＭＡ Ｎｅｕｒｏｌ ７１，１２８２－１２８９（２０１４）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態では、Ａβ４２／Ａβ４０又はＡβ４２／Ａβ３８の比は、アミロイドベータのバイオマーカーとして使用することができる（Ｊａｎｅｌｉｄｚｅ ｅｔ ａｌ．，“ＣＳＦ Ａｂｅｔａ４２／Ａｂｅｔａ４０ ａｎｄ Ａｂｅｔａ４２／Ａｂｅｔａ３８ Ｒａｔｉｏｓ：Ｂｅｔｔｅｒ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ａｎｎ Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｎｅｕｒｏｌ ３，１５４－１６５（２０１６）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態では、ＣＳＦ又は血漿中に沈着した脳アミロイドプラーク又はＡβを使用して、アミロイドロード／負荷に基づいて対象をグループに層別化することができる。
ＡＲＩＡの治療又は予防のための抗体１の使用：
いくつかの実施形態では、本開示は、ＡＲＩＡの治療又は予防のための抗体１の使用を提供する。いくつかの治療用アミロイド標的抗体は、ＡＲＩＡ－Ｅの用量反応関連の増加を示している。例えば、Ｂｒａｓｈｅａｒ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｍｙｌｏｉｄ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ Ｐｈａｓｅ ＩＩＩ Ｓｔｕｄｉｅｓ，”Ｊ．ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ６６．４：１４０９－１４２４（２０１８）；Ｂｕｄｄ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ａｄｕｃａｎｕｍａｂ，ａｎ Ａｎｔｉ－Ａβ Ｈｕｍａｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｂｅｉｎｇ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅａｒｌｙ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ４．４：２５５（２０１７）を参照。ＡＲＩＡ－Ｅ及びＡＲＩＡ－Ｈは、アミロイドプラーク除去治療と関連付けられている Ｓｐｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，“Ａｍｙｌｏｉｄ－ｒｅｌａｔｅｄ ｉｍａｇｉｎｇ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ａｍｙｌｏｉｄ－ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔｒｉａｌｓ：Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｒｏｕｎｄｔａｂｌｅ Ｗｏｒｋｇｒｏｕｐ，”Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ＆ Ｄｅｍｅｎｔｉａ ７：３６７－８５（２０１１）；Ｓｅｖｉｇｎｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ａｄｕｃａｎｕｍａｂ Ｒｅｄｕｃｅｓ Ａβ Ｐｌａｑｕｅｓ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｎａｔｕｒｅ ５３７：５０－６（２０１６）；Ｏｓｔｒｏｗｉｔｚｋｉ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ Ａｍｙｌｏｉｄ Ｒｅｍｏｖａｌ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｒｅａｔｅｄ Ｗｉｔｈ Ｇａｎｔｅｎｅｒｕｍａｂ，”Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６９：１９８－２０７（２０１２）；Ｓａｌｌｏｗａｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｗｏ Ｐｈａｓｅ ３ Ｔｒｉａｌｓ ｏｆ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ ｉｎ Ｍｉｌｄ－ｔｏ－Ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７０：３２２－３３（２０１４）；Ｓａｌｌｏｗａｙ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｐｈａｓｅ ２ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ａｓｃｅｎｄｉｎｇ Ｄｏｓｅ Ｔｒｉａｌ ｏｆ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ ｉｎ Ｍｉｌｄ ｔｏ Ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ７３：２０６１－７０（２００９）及びＳｐｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，“Ａｍｙｌｏｉｄ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ：Ａ Ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ，”Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ．１１：２４１－９（２０１２）、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
本明細書で使用される「アミロイド関連画像異常」及び「ＡＲＩＡ」は互換的であり、血管原性浮腫及び溝浸出液（ＡＲＩＡ－Ｅ）及び微小出血及びヘモジデリン沈着物（ＡＲＩＡ－Ｈ）を含み、当業者によって認識される根本的な病理学的状態を表す（例えば、Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ａｎｄ β－Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗ，Ｍａｓｓｉｍｏ Ｆｉｌｉｐｐｉ，ＭＤ；ｅｔ ａｌ．，ＪＡＭＡ Ｎｅｕｒｏｌ．２０２２；７９（３）：２９１－３０４、及びＡｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｐ．Ｍ． Ｃｏｇｓｗｅｌｌ，ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌ ４３：Ｅ１９－Ｅ３５ Ｓｅｐ ２０２２）を参照）。ＡＲＩＡは、０～５のスケールでスコア化できる。このような有害事象の正確な原因は、分からないが、一般に、抗アミロイド抗体治療が脳血管アミロイドとの相互作用を通して血液脳関門を破壊し、この破壊が漏出障壁及び患者の浮腫の発現につながると考えられている。いくつかの可能な作用機序が仮定されており、例えば、血管壁からのアミロイドの除去が神経血管単位を不安定にし、神経血管単位の炎症／浸潤物を局在化し、間質可溶性Ａβのレベルが高くなることによる脳血管アミロイドレベルの増加など、実質プラーククリアランス又は神経血管単位の星状細胞末端足突起におけるＡＱＰ－４の局在変化がある。
血管壁（ＣＡＡ）にアミロイドが沈着すると、血管の完全性が失われ、血管周囲のクリアランスが低減することがあり得、自発的に微小出血に関連し得る。抗アミロイドモノクローナル抗体療法が開始されると、抗体を介したアミロイドプラークの分解と、実質及び血管のＡβの動員により、血管周囲ドレナージの負荷が増加する。血管周囲ドレナージ経路の過負荷により、動脈壁へのアミロイド沈着が一時的に増加し得る。同時に、抗体を介した炎症及びアミロイドの分解も血管壁内で起こる。これらのプロセスにより、血管の完全性が更に失われ、血液脳関門が崩壊する。その結果、タンパク性液体及び／又は赤血球が実質及び／又は軟膜腔に漏れ出し、浮腫／浸出液（ＡＲＩＡ－Ｅ）又は微小出血／表在性鉄沈着症（ＡＲＩＡ－Ｈ）を引き起こす。
ＡＲＩＡの治療又は予防を必要とする患者を特定する方法は、当業者に知られており、例えば、Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｐ．Ｍ． Ｃｏｇｓｗｅｌｌ，ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌ ４３：Ｅ１９－Ｅ３５ Ｓｅｐ ２０２２，Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ａｎｔｉ－Ａｍｙｌｏｉｄ Ｂｅｔａ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｊ．Ｂａｒａｋｏｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｐｒｅｖ Ａｌｚ Ｄｉｓ ２０２２；２（９）：２１１－２２０（参照により本明細書に組み込まれる）、及び本明細書の他の先行する参考文献に記載されている。
ＡＲＩＡ－Ｅは、臨床的に無症候性である患者の定期的なプロトコル指定のサーベイランスＭＲＩで最も頻繁に検出される。ＡＲＩＡ－Ｅが症候性である場合、その症状は、頭痛又は錯乱などの非局在化が最も一般的であるが、ＡＲＩＡ－Ｅの後方への関与が相対的に好まれることを考慮して、視覚障害、視空間障害、又は実行困難を追加で含めることができる。ＡＲＩＡ－ＥのＥは、浮腫、浸出液、滲出液を表する。実質へのタンパク性液体の漏出は浮腫を引き起こし、画像の外観は血管原性浮腫に似ており、Ｔ２－ＦＬＡＩＲシーケンスで最もよく視覚化される。Ｔ２高強度シグナルは、白質、灰白質、又はその両方で発生する。関連する局所腫瘤効果及び脳回転腫脹が存在する可能性がある。所見は、拡散制限がないことにより、細胞障害性浮腫と区別される場合があり、急性梗塞に関連する激しい拡散制限は、ＡＲＩＡの特徴ではない。漏出が軟膜腔で発生すると、結果は、タンパク性コンテンツに関連するＴ１短縮のため、Ｔ２－ＦＬＡＩＲシーケンスでのみ認識される溝浸出液又は滲出液になる。ＡＲＩＡ－Ｅは、実質浮腫又は溝浸出液のいずれかとして現れるか、又は両方が一緒に発生する可能性がある。いくつかの抗体試験分析では、溝浸出液がＡＲＩＡ－Ｅの最も一般的な症状であり、他の分析では実質浮腫であった。ＡＲＩＡ－Ｅは、最も一般的には後頭葉に影響を与え、次に頭頂葉、前頭葉、及び側頭葉に影響を与え、最も少ない頻度で小脳に影響を与える。シグナル異常の強度及びサイズは、皮質－皮質下異常の微妙に小さな１～２ｃｍゾーンから、多発性から半球近くのシグナルＴ２－高強度シグナルの変化まで、様々である。シグナル異常のこれらの領域は、一般に不明確なマージンを持っているが、まれにマージンを制限し、腫瘍性病変を模倣する場合がある。（例えば、Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｐ．Ｍ．Ｃｏｇｓｗｅｌｌ，ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌ ４３：Ｅ１９－Ｅ３５ Ｓｅｐ ２０２２を参照）。
ＡＲＩＡ－Ｈ、出血には、微小出血と表在性鉄沈着症と、が含まれる。ヘム生成物の漏出が実質で発生すると、微小出血が発生する。微小出血は、直径が１０ｍｍ未満の、Ｔ２シーケンスの脳実質内の点状で丸みを帯びた、著しく低強度の病巣である。軟髄膜又は軟膜下腔へのヘム生成物の漏出は、脳表面に沿った曲線状の低強度として現れる表在性シデローシスをもたらする。大葉性大出血（Ｔ１又はＴ２強調画像で識別可能な出血の病巣、通常はグラジエントリコールエコー［ＧＲＥ］で直径が１０ｍｍを超える）は、抗アミロイド剤ではめったに発生せず、発生した場合はＣＡＡなどの基礎疾患プロセスの結果であり得る。（例えば、Ａｍｙｌｏｉｄ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｐ．Ｍ．Ｃｏｇｓｗｅｌｌ，ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌ ４３：Ｅ１９－Ｅ３５ Ｓｅｐ ２０２２を参照）。
場合によっては、アポリポタンパク質Ｅのイプシロン４対立遺伝子（本明細書ではＡＰＯＥ ｅ４又はＡＰＯＥ４と呼ばれる）を有する患者では、ＡＲＩＡ－Ｅの発生率が高くなる。ＡＰＯＥ４の１つ以上のコピーを有する対象は、リスクが高く、予防及び／又は治療の必要性が高い可能性がある。予防又は治療の必要性のモニタリングには、ジェノタイピング、家族歴、並びに上記のＭＲＩ若しくはＣＴイメージング、及びＡＲＩＡと一致する既知の症状のモニタリングが含まれる。血管又は脳実質のアミロイド疾患を有する患者は、ＡＲＩＡのリスクがあり得、ＡＲＩＡの予防又は治療のために抗体１を必要とする対象である。
したがって、ＡＤ患者などの患者においてＡＲＩＡを治療又は予防する改善された方法が必要とされ、治療用アミロイド標的抗体で治療される。特に、本開示の抗体、特に抗体１と、１つ以上の治療用アミロイド標的抗体との同時、別々、又は順次組み合わせの必要性が存在し、抗体１は、ＡＲＩＡを予防又は治療するために使用される。アミロイド標的治療がＡＲＩＡを引き起こし得る既知の抗Ａβ抗体には、ドナネマブ、バピヌズマブ、ガンテネルマブ、アデュカヌマブ、ＧＳＫ９３３７７６、ソラネズマブ、クレネズマブ、ポネズマブ、及びレカネマブ（ＢＡＮ２４０１）、又は抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が含まれる。
本開示は更に、ＡＲＩＡを予防又は治療するための、抗体１及び１つ以上の治療用アミロイド標的抗体の同時、別々、又は順次組み合わせを提供する。いくつかの実施形態では、治療がＡＲＩＡに関連し得る治療用アミロイド標的抗体には、ドナネマブ、バピヌズマブ、ガンテネルマブ、アデュカヌマブ、ＧＳＫ９３３７７６、ソラネズマブ、クレネズマブ、ポネズマブ、及びレカネマブ（ＢＡＮ２４０１）、又は抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が含まれる。
これらの実施形態では、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、「抗Ｎ３ｐＧ抗体」、又は「抗Ｎ３ｐＥ抗体」は互換的に使用することができ、Ａβ１－４０又はＡβ１－４２よりもＮ３ｐＧｌｕ Ａβに優先的に結合する抗体を指す。当業者は、「抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体」、並びに「ｈＥ８Ｌ」、「Ｂ１２Ｌ」及び「Ｒ１７Ｌ」を含むいくつかの特異的抗体が、米国特許第８，６７９，４９８Ｂ２号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に特定され、開示されている（作製及び使用方法とともに）ことを理解し、認識するであろう。例えば、米国特許第８，６７９，４９８Ｂ２号の表１を参照されたい。「ｈＥ８Ｌ」、「Ｂ１２Ｌ」及び「Ｒ１７Ｌ」抗体を含む、米国特許第８，６７９，４９８Ｂ２号に開示されている抗体の各々を、本開示の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体として、又は本発明の様々な態様に記載されている抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の代わりに使用することができる。本組み合わせ方法の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、それぞれ配列番号４０及び４１のＨＣ及びＬＣを含む抗体である。抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の他の代表的な種には、米国特許第８，９６１，９７２号、米国特許第１０，６４７，７５９号、米国特許第９，９４４，６９６号、ＷＯ２０１０／００９９８７Ａ２、ＷＯ２０１１／１５１０７６Ａ２、ＷＯ２０１２／１３６５５２Ａ１及びその均等物、例えば、米国特許法第１１２条（ｆ）の下に開示された抗体が挙げられるが、これらに限定されない。本開示の一態様は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を受けている患者において観察されたＡＲＩＡの予防又は治療のための抗体１の使用を提供する。
本開示の一態様は、沈着したアミロイドに結合する治療用抗体を受けている患者で観察され、いくつかの臨床開発プログラムで用量制限されているＡＲＩＡの予防又は治療のための抗体１の使用を提供する。
一実施形態において、本開示は、有効量の本開示の抗ＩＬ－３４抗体を、それを必要としている患者に投与することを含む、ＡＲＩＡを予防する方法を提供する。一実施形態では、本開示は、有効量の抗体１をそれを、必要とする患者に投与することを含む、ＡＲＩＡを予防する方法を提供する。一実施形態では、本開示は、ＡＲＩＡを治療する方法を提供し、有効量の本開示の抗体を、それを必要としている抗ＩＬ－３４抗体を患者に投与することを含む。一実施形態では、本開示は、ＡＲＩＡを治療する方法を提供し、有効量の本開示の抗体を、それを必要としている患者に投与することを含む。
本開示はまた、ＡＲＩＡの予防又は治療に使用するための本開示の抗ＩＬ－３４抗体を提供する。本開示は、ＡＲＩＡの予防又は治療に使用するための抗体１も提供する。
特定の実施形態では、本開示は、ＡＲＩＡの予防又は治療のための薬剤の製造における本開示の抗ＩＬ－３４抗体の使用を提供する。
本開示の抗体を使用する組み合わせ使用及び方法の更なる実施形態を以下に示す。組み合わせの実施形態は、抗体１に言及し得るが、実施形態は、本明細書に記載される本開示の抗体について本明細書に記載される類似の方法、使用、及びすべての制限を更に含む。組み合わせの実施形態は、本明細書に記載の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体の各々を指す「抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体」を指し得るが、しかし明確にするために、これらの実施形態は、類似の方法、使用、及び抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体の各々について個別に本明細書に記載するすべての限定を更に含み、例えば、ドナネマブと組み合わせて使用するのが好ましい。番号付けされた本開示の更なる実施形態、他の番号付けされた実施形態への内部基準を含む本開示の更なる実施形態を以下に示す。明確にするために、これらの実施形態は、それらが参照する番号付けされた実施形態と一緒に、個別に及び／又は集合的に読まれるべきである。以下に記載する実施形態は、２６番から始まる。「一連の治療」という用語は、特定の患者又は対象、言及された抗体、言及された用量、言及された頻度及び／又は期間、言及された順序、及びその他の制限を、それぞれの場合に記載されている範囲で指す。
本開示の更なる組み合わせ実施形態は、以下を含む。
２６．ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、その治療又は予防を必要とするヒト対象に、有効量の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を、有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせて投与することを含む、方法。
２７．抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体がドナネマブである、実施形態２６に記載の方法。
２８．疾患がアルツハイマー病である、実施形態２６に記載の方法。
２９．抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体がドナネマブであり、疾患がアルツハイマー病である、実施形態２６の方法。
３０．抗体１が、ドナネマブによる一連の治療の後に順次投与される、実施形態２９に記載の方法。
３１．ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、
ｉ）ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を投与することであって、各第１の用量が、約４週間ごとに１回投与されることと、
ｉｉ）１回以上の第１の用量を投与してから約４週間後に、ヒト対象に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を投与することであって、各第２の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブであり、
ｉｉｉ）ヒト対象に、有効量の抗体１を同時に、別々に、又は順次投与することと、を含む、方法。
３２．ヒト対象に、第２の用量を投与する前に第１の用量のドナネマブを１回、２回、又は３回投与される、実施形態３１に記載の方法。
３３．ヒト対象に、約７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを投与する、実施形態３１又は３２に記載の方法。
３４．ヒト対象に、１回以上の約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、又は約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与する、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の方法。
３５．ヒト対象に、１回以上の約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与する、実施形態３１～３４のいずれか１つに記載の方法。
３６．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、最長７２週間の一連の治療期間にわたって、又はアミロイドの正常レベルが達成されるまで、ヒト対象に投与される、実施形態３１～３５のいずれか１つに記載の方法。
３７．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、患者のアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象に投与される、実施形態３１～３６のいずれか１つに記載の方法。
３８．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ヒト対象におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、一連の治療のためにヒト対象に投与され、適宜、２つの連続ＰＥＴイメージングスキャンが、少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下である、実施形態３１～３６のいずれか１つに記載の方法。
３９．ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回、最長７２週間の一連の治療期間にわたって投与される、実施形態３１～３６のいずれか１つに記載の方法。
４０．対象のアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量を４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回投与される、実施形態３１～３６のいずれか１つに記載の方法。
４１．対象のアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回投与され、適宜、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下である、実施形態３１～３６のいずれか１つに記載の方法。
４２．疾患を治療又は予防するのに十分な一連の治療期間にわたって、ヒト対象にドナネマブの第２の用量を投与する、実施形態３１～４１のいずれか１つに記載の方法。
４３．疾患の治療又は予防が、ｉ）ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減、及び／又はｉｉ）ヒト対象の認知又は機能低下の遅延を引き起こす、実施形態３１～４２のいずれか１つに記載の方法。
４４．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減が、アミロイドＰＥＴ脳イメージング又はＡβのバイオマーカーを検出する診断法によって決定される、実施形態４３に記載の方法。
４５．第２の用量は、ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が約２０～１００％減少するまで、ヒト対象に投与される、実施形態４３又は４４に記載の方法。
４６．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、又は約１００％低減する、実施形態４５に記載の方法。
４７．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、ｉ）およその平均で約２５センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉ）およその平均で約５０センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉｉ）約１００センチロイド、又はｉｖ）約８４センチロイド低減するまで、ドナネマブの第２の用量をヒト対象に投与する、実施形態３１～４４のいずれか１つに記載の方法。
４８．ヒト対象の脳内のＡβ沈着を特徴とする疾患が、前臨床アルツハイマー病（ＡＤ）、臨床ＡＤ、前駆期ＡＤ、軽度ＡＤ、中等度ＡＤ、重度ＡＤ、ダウン症候群、臨床的脳アミロイド血管症、又は前臨床的脳アミロイド血管症から選択される、実施形態３１～４７のいずれか１つに記載の方法。
４９．ヒト対象が、早期症候性ＡＤ患者である、実施形態３１～４８のいずれか１つに記載の方法。
５０．ヒト対象が、前駆期ＡＤ及びＡＤによる軽度の認知症を有する、実施形態４９に記載の方法。
５１．ヒト対象が、ｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、ｉｖ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、又はｖ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有する、実施形態２６～５０のいずれか１つに記載の方法。
５２．ヒト対象が、ｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒ以下である場合、非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．１０ＳＵＶｒ～１．４６ＳＵＶｒである場合、低いから中等度のタウ負荷を有する、実施形態５１に記載の方法。
５３．ヒト対象が、ｉ）高いタウ負荷を有していないか、若しくは高いタウ負荷を有していないと決定されているか、又はｉｉ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を保有し、高いタウ負荷を有していないか、若しくは有していないと決定されている、実施形態２６～５０のいずれか１つに記載の方法。
５４．ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が、１．４６ＳＵＶｒを超える場合、ヒト対象は、高いタウ負荷を有する、実施形態５３に記載の方法。
５５．ヒト対象のタウ負荷が、ＰＥＴ脳イメージング又はタウのバイオマーカーを検出する診断法を使用して決定される、実施形態５１又は５３に記載の方法。
５６．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のための薬剤の製造における、抗体１と同時、別々、若しくは順次組み合わせた、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の使用であって、
１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が投与され、各第１の用量が、約４週間ごとに１回投与され、続いて１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量が、１回以上の第１の用量の投与の４週間後に投与され、各第２の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、約４週間ごとに１回投与され、
抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブである、使用。
５７．ヒト対象に、ドナネマブの第２の用量を投与する前に、ドナネマブの第１の用量を１回、２回、又は３回投与する、実施形態５６に記載の使用。
５８．ヒト対象に、約７００ｍｇのドナネマブの第１の用量を３回投与する、実施形態５６又は５７に記載の使用。
５９．ヒト対象に、１回以上の約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、又は約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与する、実施形態５６～５８のいずれか１つに記載の使用。
６０．ヒト対象に、１回以上の約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与する、実施形態５６～５９のいずれか１つに記載の使用。
６１．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、最長７２週間の一連の治療期間にわたって、又はアミロイドの正常レベルが達成されるまで、ヒト対象に投与される、実施形態５６～６０のいずれか１つに記載の使用。
６２．患者におけるアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ヒト対象に投与される、実施形態５６～６１のいずれか１つに記載の使用。
６３．患者におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ヒト対象に投与され、適宜、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが、少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下である、実施形態５６～６１のいずれか１つに記載の使用。
６４．ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、最長７２週間の期間にわたって投与される、実施形態５６～６１のいずれか１つに記載の使用。
６５．患者におけるアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを４週間ごとに１回投与される、実施形態５６～６１のいずれか１つに記載の使用。
６６．患者におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを４週間ごとに１回投与され、適宜、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下である、実施形態５６～６１のいずれか１つに記載の使用。
６７．ヒト対象に、疾患を治療又は予防するのに十分な一連の治療期間にわたってドナネマブの第２の用量を投与する、実施形態５６～６６のいずれか１つに記載の使用。
６８．疾患の治療又は予防が、ｉ）ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減、及び／又はｉｉ）ヒト対象における認知若しくは機能低下の遅延を引き起こす、実施形態５６～６７のいずれか１つに記載の使用。
６９．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減が、アミロイドＰＥＴ脳イメージング又はＡβのバイオマーカーを検出する診断法によって決定される、実施形態６８に記載の使用。
７０．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が約２０～１００％低減するまで、ドナネマブの第２の用量をヒト対象に投与する、実施形態６８又は６９に記載の使用。
７１．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、又は約１００％低減する、実施形態７０に記載の使用。
７２．患者における脳内のＡβ沈着物が１００％低減する、実施形態７０又は７１に記載の使用。
７３．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、ｉ）およその平均で約２５センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉ）およその平均で約５０センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉｉ）約１００センチロイド、又はｉｖ）約８４センチロイド低減するまで、ドナネマブの第２の用量がヒト対象に投与される、実施形態５６～７２のいずれか１つに記載の使用。
７４．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患が、前臨床アルツハイマー病、臨床ＡＤ、前駆期ＡＤ、軽度ＡＤ、中等度ＡＤ、重度ＡＤ、ダウン症候群、臨床的脳アミロイド血管症、又は前臨床的脳アミロイド血管症から選択される、実施形態５６～７３のいずれか１つに記載の使用。
７５．ヒト対象が、早期症候性ＡＤ患者であるか、又はヒト対象が、前駆期ＡＤ若しくはＡＤによる軽度の認知症を有する、実施形態５６～７４のいずれか１つに記載の使用。
７６．ヒト対象が、ｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、ｉｖ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、又はｖ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有する、実施形態５６～７５のいずれか１つに記載の使用。
７７．ヒト対象が、ｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒ以下である場合、非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．１０ＳＵＶｒ～１．４６ＳＵＶｒである場合、低いから中等度のタウ負荷を有する、実施形態７６の使用。
７８．ヒト対象が、ｉ）高いタウ負荷を有していないか、若しくは高いタウ負荷を有していないと決定されているか、又はｉｉ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を保有し、高いタウ負荷を有していないか、若しくは高いタウ負荷を有していないと決定されている、実施形態５６～７５のいずれか１つに記載の使用。
７９．ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒを超える場合、ヒト対象は、高いタウ負荷を有する、実施形態７８に記載の使用。
８０．ヒト対象のタウ負荷が、タウＰＥＴ脳イメージング又はタウのバイオマーカーを検出する診断法を使用して決定される、実施形態７６又は７８に記載の使用。
８１．非常に低いから中等度のタウ負荷、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷、若しくは低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されているヒト対象の脳内アミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、
ｉ）ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを投与すること、ここで、ドナネマブの各第１の用量が約４週間ごとに１回投与され、
ｉｉ）１回以上の第１の用量を投与した４週間後に、ヒト対象に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与することを含み、ここで、各第２の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせる、方法。
８２．ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、
ヒト対象が側頭葉、後頭葉、頭頂葉、又は前頭葉にタウ負荷を有する場合、ヒト対象が、脳の側頭葉、後頭葉、頭頂葉、又は前頭葉にタウ負荷を有しているかどうかを決定し、次いで
ｉ）ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を投与すること、ここで、各第１の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
ｉｉ）１回以上の第１の用量を投与した約４週間後に、ヒト対象に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を投与することを含み、ここで、各第２の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせる、方法。
８３．ヒト対象が、脳の後外側側頭葉又は側頭葉にタウ負荷を有する、実施形態８２に記載の方法。
８４．ヒト対象が、脳の後頭葉にタウ負荷を有する、実施形態８２に記載の方法。
８５．ヒト対象が、脳の頭頂葉にタウ負荷を有する、実施形態８２に記載の方法。
８６．ヒト対象が、脳の前頭葉にタウ負荷を有する、実施形態８２に記載の方法。
８７．ヒト対象が、脳の後外側側頭葉（ＰＬＴ）及び／又は後頭葉にタウ負荷を有する、実施形態８２に記載の方法。
８８．ヒト対象が、脳のＰＬＴ若しくは後頭部領域におけるタウ負荷とともに、ｉ）頭頂若しくは楔前領域、又はｉｉ）前頭領域におけるタウ負荷を有する、実施形態８２～８７のいずれか１つに記載の方法。
８９．ヒト対象が、ｉ）前頭葉に隔離されたタウ負荷、又はｉｉ）脳の後外側側頭領域（ＰＬＴ）を含まない側頭葉の領域にタウ負荷を有する、実施形態８２～８６のいずれか１つに記載の方法。
９０．ヒト対象が、脳の後外側側頭葉、後頭葉、及び頭頂葉にタウ負荷を有する、実施形態８２～８８のいずれか１つに記載の方法。
９１．ヒト対象が、脳の後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉、及び前頭葉にタウ負荷を有する、実施形態８２～８８のいずれか１つに記載の方法。
９２．ヒト対象が、脳の後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び／又は前頭葉にタウ負荷を有する、実施形態８２～８８のいずれか１つに記載の方法。
９３．ヒト対象に、第２の用量を投与する前に第１の用量を１回、２回、又は３回投与する、実施形態８２～９２のいずれか１つに記載の方法。
９４．ヒト対象に、約７００ｍｇの第１の用量を投与する、実施形態８２～９３のいずれか１つに記載の方法。
９５．ヒト対象に、１回又は複数回の約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、又は約１４００ｍｇの第２の用量を投与する、実施形態８２～９４のいずれか１つに記載の方法。
９６．ヒト対象に、１回以上の約１４００ｍｇの第２の用量を投与する、実施形態８２～９５のいずれか１つに記載の方法。
９７．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、最長７２週間の期間、又はアミロイドの正常レベルが達成されるまで、ヒト対象に投与される、実施形態８２～９６のいずれか１つに記載の方法。
９８．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、患者のアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象に投与される、実施形態８２～９７のいずれか１つの方法。
９９．ヒト対象におけるアミロイドプラークレベルが、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ヒト対象に投与され、適宜、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが、少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下である、実施形態８２～９８のいずれか１つに記載の方法。
１００．ヒト対象に、７００ｍｇの第１用量を４週間ごとに１回で３回投与し、次いで、１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回、最長７２週間投与する、実施形態８２～９９のいずれか１つに記載の方法。
１０１．対象におけるアミロイドプラークレベルが、約２５センチロイド以下になるまで、ヒト対象に、４週間ごとに１回７００ｍｇの第１の用量を３回投与し、次いで、４週間ごとに１回１４００ｍｇの第２の用量を投与する、実施形態８２～１００のいずれか１つに記載の方法。
１０２．対象におけるアミロイドプラークレベルが、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイドになるまで、ヒト対象に、４週間ごとに１回７００ｍｇの第１の用量を３回投与し、次いで、４週間ごとに１回１４００ｍｇの第２の用量を投与し、適宜、２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが、少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下である、実施形態８２～１０１のいずれか１つに記載の方法。
１０３．疾患を治療又は予防するのに十分な期間、ヒト対象に第２の用量を投与する、実施形態８２～１０２のいずれか１つに記載の方法。
１０４．疾患の治療又は予防が、ｉ）ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減、及び／又はｉｉ）ヒト対象の認知又は機能低下の遅延を引き起こす、実施形態８２～１０３のいずれか１つに記載の方法。
１０５．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減が、アミロイドＰＥＴ脳イメージング又はＡβのバイオマーカーを検出する診断法によって決定される、実施形態９７に記載の方法。
１０６．第２の用量は、ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が約２０～１００％低減するまで、ヒト対象に投与される、実施形態９７又は９８に記載の方法。
１０７．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、又は約１００％低減する、実施形態１０６に記載の方法。
１０８．第２の用量は、ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、ｉ）およその平均で約２５センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉ）およその平均で約５０センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉｉ）約１００センチロイド、又はｉｖ）約８４センチロイド低減するまで、ヒト対象に投与される、実施形態８２～１０７のいずれか１つに記載の方法。
１０９．ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患が、前臨床アルツハイマー病（ＡＤ）、臨床ＡＤ、前駆期ＡＤ、軽度ＡＤ、中等度ＡＤ、重度ＡＤ、ダウン症候群、臨床的脳アミロイド血管症、又は前臨床的脳アミロイド血管症から選択される、実施形態８２～１０８のいずれか１つに記載の方法。
１１０．ヒト対象が、早期症候性ＡＤ患者である、実施形態８２～１０９のいずれか１つに記載の方法。
１１１．ヒト対象が、前駆期ＡＤ及びＡＤによる軽度の認知症を有する、実施形態１０９に記載の方法。
１１２．ヒト対象が、ｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されているか、又はｉｉ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、実施形態８２～１１１のいずれか１つに記載の方法。
１１３．ヒト対象が、ｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が、１．４６ＳＵＶｒ以下である場合、非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が、１．１０ＳＵＶｒ～１．４６ＳＵＶｒである場合、低いから中等度のタウ負荷を有する、実施形態１１２に記載の方法。
１１４．ヒト対象が、高いタウ負荷を有していないか、又は高いタウ負荷を有していないと決定されている、実施形態８２～１１３のいずれか１つに記載の方法。
１１５．ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が、１．４６ＳＵＶｒを超える場合、ヒト対象は、高いタウ負荷を有する、実施形態１１４に記載の方法。
１１６．ヒト対象のタウ負荷が、ＰＥＴ脳イメージング又はタウのバイオマーカーを検出する診断法を使用して決定される、実施形態１１４又は１１５に記載の方法。
１１７．抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブを含む、実施形態８２～１１６のいずれか１つに記載の方法。
１１８．患者が、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有する、実施形態８２～１１７のいずれか１つに記載の方法。
１１９．タウ負荷の更なる増加を減少させる／予防する、又はヒト脳の側頭葉、後頭葉、頭頂葉、又は前頭葉におけるタウ蓄積速度を遅らせる方法であって、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体をヒト対象に有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせて投与することを含む、方法。
１２０．ＡＲＩＡの治療を必要とする対象において、それを治療する方法であって、治療有効量の抗体１又はその医薬組成物を対象に投与することを含む、方法。
１２１．ＡＲＩＡの予防を必要とする対象において、それを予防する方法であって、治療有効量の抗体１又はその医薬組成物を対象に投与することを含む、方法。
ｈＣＳＦ１Ｒ発現２９３ＳＲＥ細胞におけるヒトＩＬ－３４誘導ルシフェラーゼレポーター活性の抗体１中和を示す。 ＮＩＨ－３Ｔ３／ＣＳＦ１Ｒ細胞のＥＲＫリン酸化を阻害する抗体１の能力を示す。三角形は、アイソタイプ対照抗体で処理した細胞を表し、丸は、抗体１で処理した細胞を表し、星印は、アッセイにＩＬ－３４を添加していないこと（アッセイベースライン）を表す。
以下の実施例は、特許請求された発明を説明するために提供され、これを限定するものではない。以下のアッセイの結果は、本開示の抗体１などの例示されるモノクローナル抗体がＩＬ－３４に結合及び／又は中和し、したがって、本明細書に記載の免疫介在性及び炎症性疾患を治療するために使用し得ることを示している。
実施例１：抗体の生成、発現及び精製
ヒト抗ＩＬ－３４抗体のパネルを、完全ヒト酵母ディスプレイライブラリーを使用して取得し、効果的なヒトＩＬ－３４中和抗体であり得る試薬を特定するためにスクリーニングされる。親和性が改善されたクローンを単離するために、変異を各抗体の個々の相補性決定領域（ＣＤＲ）に体系的に導入し、得られたライブラリーを、抗原濃度を低下させ、かつ／又は解離の時間の増やしながら、複数ラウンドの選択にかける。個々のバリアントの配列を決定し、使用して、コンビナトリアルライブラリーを構築し、それを、ストリンジェンシーを高めながら追加ラウンドの選択にかけて、個々のＣＤＲ領域間の相加的又は相乗的な変異のペアリングを特定する。個々のコンビナトリアルクローンを、配列決定し、結合特性を決定する。ＩＬ－３４に対する親和性を更に高めるために、これらのコンビナトリアルクローンを追加ラウンドの単一及びコンビナトリアル突然変異誘発にかけてもよい。このスクリーニングをヒト又はカニクイザルＩＬ－３４に対して行い、選択した種に対する親和性を高めることができる。選択した抗体を変異誘発して、ＩＬ－３４に対する結合親和性を維持しながら、異性化などの翻訳後改変を修復することもできる。追加的に、潜在的な免疫原性リスクを低減するために、フレームワーク（ＦＷ）又はＣＤＲ置換を抗体に対して行って、配列をそれらの生殖系列状態に戻すことができる。
例えば、本明細書で抗体１と呼ばれる、改変及び／又は最適化された抗ＩＬ－３４抗体が得られ、重鎖及び軽鎖の可変領域のアミノ酸配列と、完全な重鎖及び軽鎖アミノ酸配列と、以下の「アミノ酸及びヌクレオチド配列のリスト」と題するセクションにリストされているものと同じものをコードするヌクレオチド配列と、を有する。これらの配列に対応する配列番号、並びに軽鎖及び重鎖のＣＤＲアミノ酸配列を表１に示す。
本開示の例示される抗ＩＬ－３４抗体は、本質的に以下のとおりに発現及び精製され得る。ＨＥＫ２９３、ＮＳ０又はＣＨＯなどの適切な宿主細胞を、最適な所定のＨＣ：ＬＣベクター比（１：３又は１：２又は１：１など）又はＨＣ及びＬＣの両方をコードする単一のベクター系を使用して抗体を分泌するための発現系で、一時的に又は安定的にトランスフェクトすることができる。
発現プラスミドは、例えば、抗体１のＬＣ及びＨＣをコードするＤＮＡ（例示される抗体１のＨＣをコードする配列番号１１のＤＮＡ配列、及び例示される抗体１のＬＣアミノ酸配列をコードする配列番号１２のＤＮＡ配列）を含み、一般的に使用され、かつこの目的のための適切な構築物から表現される。クローン由来の細胞株を増殖させ、抗体１産生についてスクリーニングし、クローン由来の細胞株を選択して確立する。この細胞株は、動物成分を含む材料を一切使用せずに生成され、生産に使用される。
抗体が分泌される浄化された培地は、イオン交換及び疎水性相互作用クロマトグラフィーの混合モード法などの従来の技術によって精製され得る。例えば、培地は、従来の方法を使用して、プロテインＡ又はプロテインＧカラムに適用され、そこから溶離することができ、イオン交換及び疎水性相互作用クロマトグラフィーの混合モード法も使用してよい。可溶性凝集体及び多量体を、サイズ排除、疎水性相互作用、イオン交換、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーを含む一般的な技術によって効果的に除去し得る。本開示の例示されるＩＬ－３４抗体は、一般的な技術を使用して濃縮及び／又は滅菌濾過される。これらのクロマトグラフィーステップ後の例示される抗体の純度は、９５％超である。本開示の例示される抗ＩＬ－３４抗体は、－７０℃で直ちに凍結され得るか、又は４℃で数ヶ月間保存され得る。
実施例２：抗ＩＬ－３４抗体の特徴付け
ヒト及びカニクイザルＩＬ－３４に対する結合親和性
ヒト及び／又はカニクイザル（ｃｙｎｏ）ＩＬ－３４に対する本開示の抗ＩＬ－３４モノクローナル抗体の結合親和性は、当技術分野で公知の方法によって決定することができる。手短に言うと、抗体の結合親和性及び動態学は、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）８Ｋ（Ｃｙｔｉｖａ）を３７℃で使用して表面プラズモン共鳴によって評価される。結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ（Ｃｙｔｉｖａ）に抗ＩＬ－３４抗体を固定化し、ＨＢＳ－ＥＰ＋緩衝液（Ｔｅｋｎｏｖａ）で２倍連続希釈した２５ｎＭ又は１２．５ｎＭから開始して、ヒト又はカニクイザルＩＬ－３４を流すことによって測定される。各サイクルで、２００μＬのＩＬ－３４を固定化抗体上に１００μＬ／分で流し、次いで２０分間解離させる。チップ表面は、ｐＨ１．５のグリシン緩衝液５０μＬで流速１００μＬ／分で再生される。データを１：１のＬａｎｇｍｉｕｒ結合モデルに適合させてｋｏｎ、ｋｏｆｆを導き出して、ＫＤを計算する。表３は、例示される抗体１についてヒト及びカニクイザルＩＬ－３４のための少なくとも３回の実験の平均を示す。
Figure 2023067832000003
実施例３：抗ヒトＩＬ－３４抗体のインビトロでの機能的特徴付け
本開示の抗体を、ＩＬ－３４結合及び／又は活性を中和する能力について試験する。本開示の抗体によるＩＬ－３４結合及び／又は活性の中和は、例えば、以下に記載のように、１つ以上のＩＬ－３４／ＣＳＦ１Ｒ受容体結合アッセイフォーマット、並びにＩＬ－３４細胞ベースの活性アッセイによって評価され得る。
ＣＳＦ１ＲからＩＬ－３４を置換する抗体１の能力
ＩＬ－３４／ＣＳＦ１Ｒ結合の中和抗体のアッセイは、酵素アッセイを使用して行うことができる。そのようなアッセイは、ＩＬ－３４に結合することができる組換え発現ＣＳＦ１Ｒ細胞外ドメインタンパク質を使用することができる。可溶性ＩＬ－３４を捕捉するために、これらのタンパク質をＥＬＩＳＡプレートに結合させることができる。次いで、ＩＬ－３４は、抗原のビオチン化、及びストレプトアビジン／ニュートラアビジン結合ペルオキシダーゼ又はホスファターゼ酵素による検出のいずれかによって検出されることができる。そのような中和アッセイは、結合アッセイに添加する前に、標識されたＩＬ－３４（並びにＩＬ－３４を標的とする抗体が関与しない対照試料）で評価される抗体のプレインキュベーション（例えば１時間）を含む。
ＣＳＦ１Ｒ細胞外ドメインタンパク質（ｈＣＳＦ１Ｒ＿Ｆｃ、Ｒ＆Ｄから市販されている、カタログ番号３２９－ＭＲ、カニクイザルＣＳＦ１Ｒ ＥＣＤ－Ｆｃ（ＡＡＡはＣＳＦ１Ｒ細胞外ドメインとＦｃとの間のリンカーである）（配列番号３４））は、可溶性ビオチン化ＩＬ－３４を捕捉するために３０ｎＭの濃度でＥＬＩＳＡプレートに結合することができ、１時間結合させた。プレートを洗浄してブロッキングした後、ビオチン化ＩＬ－３４を加え、次いでストレプトアビジン結合ペルオキシダーゼで検出し得る。ＣＳＦ１ＲからＩＬ－３４を置換するのに必要な抗体の濃度を決定するために、８０％結合レベル（ＥＣ８０）（３．７ｎＭ）に近い標識ＩＬ－３４の濃度を様々な抗体濃度（０～１００ｎＭ）と組み合わせて使用することができる。１時間のインキュベーション後、ＣＳＦ１Ｒに結合したＩＬ－３４は、ストレプトアビジン結合ペルオキシダーゼを介して検出される。抗体をアッセイし（ｎ＝２）、各濃度での平均及び標準偏差を計算する。ＣＳＦ１ＲからＩＬ－３４を置換する抗体の効力は、ＩＣ５０（ｎＭ）として報告され、計算された信頼区間（ＣＩ）を表４及び表５に示す。
Figure 2023067832000004
Figure 2023067832000005
ＩＬ－３４は、約５０～１００ｐＭの親和性でヒトＣＳＦ１Ｒに結合するため、ＣＮＳでこのサイトカインを効果的に中和するには高親和性抗体を必要とする。表４の結果は、抗体１がヒトＩＬ－３４に対して高い親和性を有し、０．０７８８２ｎＭのＩＣ５０でヒトＣＳＦ１ＲからＩＬ－３４を置換できることを示している。表４の結果は、抗体１がヒトＩＬ－３４に対して高い親和性を有し、特に抗体１がヒトＩＬ－３４に対してｈＣＳＦ１Ｒに匹敵する親和性を示し、したがってそれらがインビボでＩＬ－３４を効果的に中和することを可能にする結合特性を有することを示している。ＩＬ－３４をブロックすることは、いくつかの既存の免疫調節療法に関連する安全性の懸念を回避しながら、疾患改変のための有用な手段を提供すると考えられている。したがって、ＩＬ－３４を介したシグナル伝達の中和は、神経炎症、ミクログリオーシス、並びにアルツハイマー病、及び他のタウオパチーと炎症性疾患などの神経変性疾患の管理のための治療的なアプローチとなる。（例えば、Ｌｅｌｉｏｓ，Ｉ．ｅｔ ａｌ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｒｏｌｅ ｏｆ ＩＬ－３４ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ（２０２０）２１７（３）：ｅ２０１９０２９０を参照）。
ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）ｅＸｐｒｅｓｓ Ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ＡｓｓａｙにおけるＣＳＦ１Ｒの二量体化を中和する抗体１の能力：
ヒトＩＬ－３４中和は、Ｕ２ＯＳ ＣＳＦ１Ｒ／ＣＳＦ１Ｒ細胞（Ｐａｔｈ Ｈｕｎｔｅｒ（登録商標）ｅＸｐｒｅｓｓ Ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ、ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）を９６ウェルプレートに播種して、抗ＩＬ－３４抗体がＣＳＦ１Ｒの二量体化を阻害する能力を評価することによって更に評価できる。これらのアッセイは、ｂ－ガラクトシダーゼ（ｂ－ｇａｌ）酵素がＰｒｏＬｉｎｋ（ＰＫ）とＥｎｚｙｍｅ Ａｃｃｅｐｔｏｒ（ＥＡ）との２つのフラグメントに分割されるＥｎｚｙｍｅ Ｆｒａｇｍｅｎｔ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ（ＥＦＣ）技術を利用している。独立的に、これらのフラグメントにはｂ－ｇａｌ活性がないが、しかしタンパク質間相互作用によって補完を強いられると、それらは活性なｂ－ｇａｌ酵素を形成する。ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）ｅＸｐｒｅｓｓ Ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎアッセイは、ＣＳＦ１Ｒ受容体－二量体対の２つのサブユニットのリガンド誘導性二量体化を検出する。細胞は、酵素ドナー（ＥＤ）に融合した１つのＣＳＦ１Ｒ受容体サブユニットと、酵素アクセプター（ＥＡ）に融合した第２の二量体パートナーを共発現するように設計されている。ヒトＩＬ－３４が受容体サブユニットの１つに結合すると、その二量体パートナーとの相互作用が誘導され、２つの酵素フラグメントの補完が強いられる。これにより、基質を加水分解して化学発光シグナルを生成する機能酵素が形成される。表６に示す相対蛍光単位（ＲＦＵ）の低減は、抗体１がヒトＩＬ－３４を中和し、化学発光を低減する能力を反映している。抗体１の半最大阻害濃度（ＩＣ５０）値は、１．０３５ｎＭである。ヒトＣＳＦ１Ｒ－Ｆｃは、このアッセイにおいて陽性対照として使用され、１．０２５ｎＭのＩＣ５０でＲＦＵ単位を阻害する。表６のデータは、抗体１がヒトＩＬ－３４とＣＳＦ１Ｒとの相互作用をブロックする能力を支持し、その能力によりこのアッセイにおいてＣＳＦ１Ｒの二量体化が阻害される。このデータは、ヒトＩＬ－３４を中和するための本開示の抗体の使用を支持する。
Figure 2023067832000006
インビトロでのＩＬ－３４誘導応答の阻害
本開示の抗体によるＩＬ－３４活性の中和は、例えば以下に記載するように、１つ以上のＩＬ－３４細胞ベースのアッセイによって評価することができる。ヒトＩＬ－３４誘導性ルシフェラーゼレポーター活性を中和する本開示の抗体の能力は、ヒトＣＳＦ１Ｒを発現するｃＤＮＡでトランスフェクトされた２９３ ｈＣＳＦ１Ｒ ＳＲＥ細胞で評価することができる（受入：ＮＰ＿００１２７５６３４．１）。例えば、ヒトＣＳＦ１Ｒ（ｈＣＳＦ１Ｒ）を安定的に過剰発現する２９３／ＳＲＥ細胞を０．０５％トリプシン－ＰＢＳ中で解離させ、組織培養処理した９６ウェルプレートに１００ｕｌ当たり７０，０００細胞で播種する。翌日、増殖培地を除去し、熱不活化１％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）を添加したＤＭＥＭ－Ｆ１２（ダルベッコ改変イーグル培地：栄養混合物Ｆ－１２）で細胞を飢餓状態にする。飢餓の２４時間後、細胞を１００ｎｇ／ｍｌのヒトＩＬ－３４及び複数濃度のｈＣＳＦ１Ｒ－Ｆｃ又は抗体１のいずれかで６時間処理する。インキュベーション後、細胞を５０ｕｌのＰｒｏｍｅｇａ（商標）Ｇｌｏ（商標）溶解緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａ（商標）Ｅ２６６Ａ）で５分間穏やかに撹拌しながら溶解する。５０ｍｌのＢｒｉｇｈｔＧｌｏ（商標）発光試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ（商標）Ｅ２６２０）を添加し、溶解細胞上で２分間インキュベートする。発光を、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｗａｌｌａｃ １４２０ Ｖｉｃｔｏｒ２（商標）マイクロプレートリーダーで読み取る。表７及び図１に示す相対蛍光単位（ＲＦＵ）の低減は、ヒトＩＬ－３４誘導ルシフェラーゼ活性を中和する抗体１の能力を反映している。ｈＩＬ－３４の中和について、抗体１の半最大阻害濃度（ＩＣ５０）値は、０．０５０３７ｕｇ／ｍｌである。ヒトＣＳＦ１Ｒ－Ｆｃは、このアッセイにおいて陽性対照として使用され、０．０９６０３ｕｇ／ｍｌのＩＣ５０でルシフェラーゼ活性を阻害する。
Figure 2023067832000007
ＮＩＨ－３Ｔ３／ＣＳＦ１Ｒ細胞におけるＥＲＫリン酸化を阻害する抗ＩＬ－３４抗体の能力：
ＩＬ－３４の中和は、ＮＩＨ－３Ｔ３／ＣＳＦ１Ｒにおける細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）リン酸化を阻害する抗ＩＬ－３４抗体の能力を評価することによって決定し得る。このアッセイでは、１日目に１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭに細胞を播種し、３７℃で一晩インキュベートする。２日目に、培地を除去し、細胞を無血清ＤＭＥＭで洗浄し、更に２４時間インキュベートする。３日目に、培地を、抗ＩＬ－３４抗体を含む無血清ＤＭＥＭに交換する。ヒト又はカニクイザルＩＬ－３４を５分間添加して、最終濃度１ｕｇ／ｍｌにする。ヒト又はカニクイザルＩＬ－３４及びアイソタイプ対照抗体のいずれかが、それぞれ陽性及び陰性対照として機能する。リン／全ＥＲＫ１／２レベルは、Ｗｈｏｌｅ Ｃｅｌｌ Ｌｙｓａｔｅ Ｋｉｔ（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、カタログ番号Ｋ１５１０７Ｄ）を使用して電気化学発光シグナルを測定することによって評価する。データを、リン－ＥＲＫ１／２対全ＥＲＫ１／２タンパク質の電気化学発光シグナルの比として計算される。表８及び／又は図２に示されるシグナル比の低下は、ＩＬ－３４活性を中和する抗体１の能力を反映している。ヒトＩＬ－３４に対する抗体１の半最大阻害濃度（ＩＣ５０）値は２６ｎＭであり、カニクイザルＩＬ－３４に対しては５３ｎＭである。
Figure 2023067832000008
Figure 2023067832000009
フローサイトメトリーによる、抗ＩＬ３４抗体のヒト単球におけるＣＤ１６３のＩＬ－３４誘導発現を阻害する能力：
ＩＬ－３４の中和は、フローサイトメトリーによってＩＬ－３４で処理した後のヒト単球における細胞表面抗原ＣＤ１６３の発現を測定することによっても評価し得る（例えば、Ｂｏｕｌａｋｉｒｂａ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．による、ＩＬ－３４及びＣＳＦ－１は、同等のマクロファージ分化能力を示すが、分極電位は異なる。Ｓｃｉ Ｒｅｐ ８、２５６（２０１８を参照されたい）。ＣＤ１４陽性単球をＩＬ－３４で６日間処理し、ＣＤ１６３について抗体を染色した後、フローサイトメトリーでＣＤ１６３の発現を評価する。実験では、ＣＤ１６３を発現する細胞数の変化は、ＩＬ－３４処理が単球におけるこの抗原の発現を増加させることを示している。抗体１の添加により、ＣＤ１６３の発現上昇が抑制される。この実験では、アイソタイプが一致したＩｇＧ４抗体を陰性対照として使用する。結果を、表１０に示す。
ＣＤ１４＋ヒト単球は、ＩＬ－３４（１００ｎｇ／ｍｌ）の添加によりマクロファージに分化し得る。マクロファージマーカーＣＤ１６３は、分化の程度をモニターするために使用できる。このマクロファージへの分化は、抗ＩＬ－３４抗体の添加によって阻害され得る。ＣＤ１４＋ヒト単球を、ＩＬ－３４を含む又は含まない６ウェルプレートに播種する。細胞を抗ＩＬ－３４抗体、例えば抗体１、又は１５ｕｇ／ｍｌのＩｇＧ４ ＰＡＡで合計６日間処理し、３日目に処理をリフレッシュする。６日目に非酵素的細胞解離緩衝液でプレートから除去し多細胞を収集し、ＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ＋２％ＦＢＳ＋０．１％アジ化ナトリウム＋２％ＥＤＴＡ）で洗浄する。製造元の推奨に従って、細胞をＴｒｕＳｔａｉｎ ＦｃＸ（カタログ番号４２２３０２）で３０分間ブロックする。ブロッキング後、細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、抗ＣＤ１６３－ＰＥ又はＩｇＧｋアイソタイプ対照－ＰＥで４Ｃで１時間染色する。インキュベーションの最後に、細胞を洗浄し、最小１０，０００イベントを使用してＡｃｃｕｒｉでフロー分析を行う。処理ごとに中央値－ＰＥ－Ａレベルを収集する。
Figure 2023067832000010
ＩＬ－３４に応答した、ヒト単球におけるＣＤ１６３発現の抗体１による阻害は、ＩＬ－３４に対する単球／マクロファージ数及び／又は表現型分化応答を調節する本開示の抗体の能力を実証し、神経炎症及び他の炎症状態などの免疫介在性疾患を治療するための本抗体の使用を支持する（例えば、Ｌｅｌｉｏｓ，Ｉ．ｅｔ ａｌ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｒｏｌｅ ｏｆ ＩＬ－３４ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ（２０２０）２１７（３）：ｅ２０１９０２９０を参照）。
実施例４：抗体１の免疫原性の可能性の特徴付け
樹状細胞（ＤＣ）内在化アッセイ
単球由来ＤＣ培養（ＭＤＤＣ）
標準プロトコルに従って、ＣＤ１４＋単球を末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から分離させ、培養し、ＤＣに分化させる。手短に言うと、ＬＲＳ－ＷＢＣからＦｉｃｏｌｌ（＃１７－１４４０－０２、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）及びＳｅｐｍａｔｅ ５０（＃１５４５０、ＳＴＥＭＣＥＬＬ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）による密度勾配遠心分離を使用してＰＢＭＣを分離する。製造元のマニュアルに従って、ＣＤ１４＋マイクロビーズキット（＃１３０－０５０－２０１、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）による陽性対照を使用してＣＤ１４＋単球を分離する。次いで、１０００単位／ｍｌのＧＭ－ＣＳＦ及び６００単位／ｍｌのＩＬ－４とともに、細胞を１００万／ｍｌで６日間培養して、Ｌ－グルタミン及び２５ｍＭのＨＥＰＥＳを添加し、１０％ＦＢＳ、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１×ペニシリン－ストレプトマイシン、１×非必須アミノ酸、及び５５μＭの２－メルカプトエタノールを補充したＲＰＭＩ培地（以下、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから購入した完全ＲＰＭＩ培地又は培地と呼ぶ）中で未成熟樹状細胞（ＭＤＤＣ）に誘導する。培地を２日目及び５日目の２回変える。６日目に、セルスクレーパーで細胞を静かに収集し、実験に使用する。ＭＤＤＣを、顕微鏡による樹状形態、及びフローサイトメトリーによるＣＤ１４、ＣＤ１１ｃ、及びＨＬＡ－ＤＲの発現について視覚的に特徴付ける。ＬＰＳ治療に応答する能力は、フローサイトメトリーを使用してＣＤ８０、ＣＤ８３、及びＣＤ８６の増加を測定することによって確認される。
Ｆａｂ－ＴＡＭＲＡ－ＱＳＹ７の結合
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）をＱＳＹ７－ＮＨＳ及びＴＡＭＲＡ－ＳＥ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）で二重標識して、試験品の内在化を追跡するためのユニバーサルプローブとして使用するＦａｂ－ＴＡＭＲＡ－ＱＳＹ７を取得する。Ｆ（ａｂ’）２（１．３ｍｇ／ｍｌで約１ｍｌ）の各バイアルを、Ａｍｉｃｏ Ｕｌｔｒａ－０．５遠心フィルター装置（＃ＵＦＣ５０１０９６、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を使用して１４，０００ｒｃｆで２分間遠心分離することにより、約２ｍｇ／ｍｌに濃縮する。ｐＨを１０％（ｖ／ｖ）１Ｍ重炭酸ナトリウムで塩基性（＞ｐＨ８）に調整し、ＤＭＳＯ中１０ｍＭのＱＳＹ－ＮＨＳ保存液６．８μｌを加えて混合する。反応バイアルを室温で３０分間暗所に保つ。中間生成物であるＦａｂ－ＱＳＹ７を、Ｚｅｂａ Ｓｐｉｎ脱塩カラム（＃８９８９０、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて、相対遠心力（ＲＣＦ）１０００で２分間遠心分離することにより精製する。ＮａｎｏＤｒｏｐ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で２８０ｎｍ及び５６０ｎｍの吸光度を測定することにより、濃度及び標識度（ＤＯＬ）を計算する。次いで、再びＡｍｉｃｏ Ｕｌｔｒａ－０．５遠心フィルター装置を用いて１４，０００ｒｃｆで２分間遠心分離することにより、Ｆａｂ－ＱＳＹ７を約２ｍｇ／ｍｌに濃縮する。１０％（ｖ／ｖ）１Ｍ重炭酸ナトリウムでｐＨを調整した後、ＤＭＳＯ中の１５ｍＭのＴＡＭＲＡ－ＳＥ保存液４．３μｌを加えて混合する。暗所で室温で３０分後に、最終生成物Ｆａｂ－ＴＡＭＲＡ－ＱＳＹ７を精製し、１０００ｒｃｆで２分間遠心分離することによりＺｅｂａ Ｓｐｉｎ脱塩カラムを使用して収集する。ＮａｎｏＤｒｏｐ分光光度計で２８０ｎｍ、５５５ｎｍ、及び５６０ｎｍの吸光度を読み取ることにより、濃度及びＤＯＬを再度定量化する。このプロトコルを使用すると、Ｆ（ａｂ’）２当たり約２つのＱＳＹ７と２つのＴＡＭＲＡと、を含む約１．５ｍｇ／ｍｌのＦａｂ－ＴＡＭＲＡ－ＱＳＹ７を約３００μｌが得られる。
ＦＡＣＳによる標準化内在化試験
個々の試験分子をＰＢＳで１ｍｇ／ｍｌに正規化し、次いで完全ＲＰＭＩ培地で更に８μｇ／ｍｌに希釈する。Ｆａｂ－ＴＡＭＲＡ－ＱＳＹ７を完全ＲＰＭＩ培地で５．３３μｇ／ｍｌに希釈する。抗体とＦａｂ－ＴＡＭＲＡ－ＱＳＹ７とを等量で混合し、複合体形成のために暗所で、４℃で３０分間インキュベートする。ＭＤＤＣを完全ＲＰＭＩ培地に４００万／ｍｌで再懸濁し、抗体／プローブ複合体５０μｌを加えた９６ウェル丸底プレートにウェル当たり５０μｌで播種する。細胞をＣＯ２インキュベーターで、３７℃で２４時間インキュベートする。細胞を２％ＦＢＳ ＰＢＳで洗浄し、Ｃｙｔｏｘ Ｇｒｅｅｎのｌｉｖｅ／ｄｅａｄ色素を含む１００μｌの２％ＦＢＳ ＰＢＳに再懸濁する。ＢＤ ＬＳＲ Ｆｏｒｔｅｓｓａ Ｘ－２０でデータを収集し、ＦｌｏｗＪｏで分析する。生単一細胞をゲーティングし、ＴＡＭＲＡ蛍光陽性細胞の割合を読み出しとして記録する。
データ表示及び統計分析
分子は、２連又は３連で３人以上のドナーで試験する。各ドナーについて、ＴＡＭＲＡ陽性集団の割合を考慮する。異なるドナーから生成されたデータと分子の比較を可能にするために、正規化された内在化指数（ＮＩＩ）が使用される。内在化シグナルは、次の式を使用してＩｇＧ１アイソタイプ（ＮＩＩ＝０）及び内部陽性対照ＰＣ（ＮＩＩ＝１００）に対して正規化する。
Figure 2023067832000011
 ここで、ＸＴＡＭＲＡ、ＩｇＧ１アイソタイプＴＡＭＲＡ、及びＰＣＴＡＭＲＡは、それぞれ試験分子Ｘ、ＩｇＧ１アイソタイプ、及びＰＣのＴＡＭＲＡ陽性集団のパーセントである。データは、ＪＭＰ（登録商標）１４．１．０又はＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ８．１．２で分析する。ＴＡＭＲＡ陽性集団の平均パーセント及びＮＩＩを計算し、報告する。ＤＣなどの抗原提示細胞における内在化の増加は、免疫原性のリスクの増加と関連している。抗体１の二重実験の幾何平均を表１１に示す。
Figure 2023067832000012
 （例えば、Ｗｅｎ，Ｙ．，Ｃａｈｙａ，Ｓ．，Ｚｅｎｇ，Ｗ．ｅｔ ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ＦＲＥＴ－Ｂａｓｅｄ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍＡｂｓ Ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｂｙ Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ Ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ Ｒｉｓｋ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ． ＡＡＰＳ Ｊ ２２，６８（２０２０）を参照）。
ＭＡＰＰｓアッセイ（ＭＨＣ関連ペプチドプロテオミクス）
１０人の正常なヒトドナーからの初代ヒト樹状細胞は、以下に記載のように、ＣＤ－１４陽性細胞の分離によるバフィーコートから調製され、５％血清代替物（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号Ａ２５９６１０１）を含む完全ＲＰＭＩ培地で２０ｎｇ／ｍｌ ＩＬ－４及び４０ｎｇ／ｍｌ ＧＭ－ＣＳＦとともに３７℃、５％ ＣＯ２で３日間インキュベートすることによって未成熟樹状細胞に分化させた（Ｋｎｉｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｃｌａｓｓ ＩＩ Ｉｍｍｕｎｏｐｅｐｔｉｄｏｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｓｐｉｋｅ Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ”，Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ，３３，１０８４５４（２０２０））。４日目に３マイクロモルの試験抗体を約５×１０６細胞に添加し、細胞を成熟樹状細胞に形質転換するために５μｇ／ｍｌのＬＰＳを含む新鮮な培地を５時間のインキュベーション後に交換する。翌日、成熟細胞をプロテアーゼ阻害剤及びＤＮＡｓｅを含む１ｍｌのＲＩＰＡ緩衝液中で溶解する。ライセートを、サンプル分析まで－８０℃で保存する。
自動液体処理システムを使用して、ビオチン化抗汎ＨＬＡクラスＩＩ抗体（クローンＴｕ３９）を使用し、解凍したライセートからＨＬＡ－ＩＩ分子を分離する。結合した受容体－ペプチド複合体を、５％酢酸、０．１％ＴＦＡで溶出する。溶出したＭＨＣ－ＩＩペプチドを、高分子量タンパク質を除去するために、事前に洗浄した１０ｋ ＭＷＣＯフィルターに通す。分離されたＭＨＣ－ＩＩペプチドは、Ｔｈｅｒｍｏ ＬＵＭＯＳ質量分析計を備えたＴｈｅｒｍｏ ｅａｓｙ １２００ ｎＬＣ－ＨＰＬＣシステムを使用して、ナノＬＣ／ＭＳによって分析する。この分離では、７５μｍ×７ｃｍのＹＭＣ－ＯＤＳ Ｃ１８カラムを使用し、流速２５０ｎＬ／分、Ａ溶媒として０．１％ギ酸水溶液、Ｂ溶媒として０．１％ギ酸を含む８０％アセトニトリルで６５分間のグラジエントを行った。質量分析は、解像度２４０，０００のフルスキャンモードで実行し、続いて、ＨＣＤ及びＥＴｈｃＤフラグメンテーションによるイオントラップ型ラピッドスキャンで構成される３秒のデータ依存型ＭＳ／ＭＳサイクルを実行する。
ペプチドの同定は、テスト抗体配列を含むウシ／ヒトデータベースに対する酵素検索パラメータのない複数の検索アルゴリズムを使用し、内部プロテオミクスパイプライン（Ｈｉｇｇｓ ｅｔ ａｌ．，“Ｌａｂｅｌ－ｆｒｅｅ ＬＣ－ＭＳ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ”，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４２８，２０９－２３０（２００８））によって生成される。ＫＮＩＭＥワークフローは、試料の識別ファイルを処理するために使用される。試験品から同定されたペプチドは、親配列に対して整列される。非生殖細胞残基を表示するドナーの割合、非生殖細胞残基を含むペプチドを表示する異なる領域の数、及び非生殖細胞残基を含む各領域でのペプチド表示の深さを注釈するすべてのドナーの要約を作成する。非生殖細胞系ペプチドの表示の程度の増加は、免疫原性のリスクの増加と関連している。抗体１の結果を表１２に示す。
Figure 2023067832000013
Ｔ細胞増殖アッセイ
このアッセイは、試験候補又は試験候補のＭＡＰＰｓ由来ペプチドクラスターの、以下に記載のように細胞増殖を誘導することによるＣＤ４＋Ｔ細胞を活性化する能力を評価する（Ｗａｌｓｈ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｏｓｔ－ｈｏｃ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｒｅｖｅａｌｓ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｉｍｍｕｎｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ”，ｍＡｂｓ，１２，１７６４８２９（２０２０））。１０人の健康なドナーからの凍結保存したＰＢＭＣを使用し、ＰＢＭＣからＣＤ８＋Ｔ細胞を枯渇させ、１μＭカルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）で標識した。ＰＢＭＣを、５％ＣＴＳ（商標）Ｉｍｍｕｎｅ Ｃｅｌｌ ＳＲ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号Ａ２５９６１０１）を含むＡＩＭ－Ｖ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１２０５５－０８３）に４×１０６細胞／ｍｌ／ウェルで播種し、様々な試験物質、ＤＭＳＯ対照、培地対照、及びキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ；陽性対照）を含む２．０ｍＬで、３連で試験した。細胞を培養し、ＣＯ２５％、３７℃で７日間インキュベートした。７日目に、ハイスループットサンプラー（ＨＴＳ）を装備したＢＤ ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ（商標）を使用したフローサイトメトリーによる生存率検出のために、試料を次の細胞表面マーカーで染色した：抗ＣＤ３、抗ＣＤ４、抗ＣＤ１４、抗ＣＤ１９、及びＤＡＰＩ。ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェア（ＦｌｏｗＪｏ、ＬＬＣ、ＴｒｅｅＳｔａｒ）を使用してデータを分析し、細胞分裂指数（ＣＤＩ）を計算した。手短に言うと、各試験分子のＣＤＩは、刺激されたウェルで増殖しているＣＦＳＥｄｉｍＣＤ４＋Ｔ細胞のパーセントを、刺激されていないウェルで増殖しているＣＦＳＥｄｉｍＣＤ４＋Ｔ細胞のパーセントで割ることによって計算した。２．５以上のＣＤＩは、陽性反応を表すとみなした。すべてのドナーにわたるドナー頻度の割合を評価した。抗体１の結果を表１３に示す。
Figure 2023067832000014
実施例５：カニクイザルにおける抗体薬物動態
カニクイザルに、１ｍＬ／ｋｇの容量のＰＢＳ（ｐＨ７．４）中の抗体１の３ｍｇ／ｋｇの単回静脈内（ＩＶ）用量を投与する。薬物動態学的特徴付けのために、投与後１、３、６、２４、４８、７２、９６、１２０、１６８、２４０、３３６、４０８、５０４及び６７２時間後に２匹の動物／時点から血液を採取し、血清に処理する。抗体１の血清濃度は、適格な免疫親和性液体クロマトグラフィー質量分析法によって決定される。抗体１及びヒト抗体内部標準（安定同位体標識ヒトＩｇＧ）を、ビオチン化ヤギ抗ヒトＩｇＧ抗体を使用して１００％カニクイザル血清から抽出し、続いてＱ－Ｅｘａｃｔｉｖｅ（商標）Ｏｒｂｉｔｒａｐ（登録商標）質量分析計を使用してトリプシンサロゲートペプチドを定量化する。薬物動態パラメータを、各動物（Ｎ＝２）について非コンパートメント分析（ＮＣＡ）を使用して計算し、パラメータを平均値によって要約する。ＮＣＡ及び要約統計計算は、Ｐｈｏｅｎｉｘを使用して行う。表１４に示すように、抗体１は、カニクイザルにおいて薬物動態プロファイルの拡張を示す。
Figure 2023067832000015
アミノ酸及びヌクレオチド配列
抗体１の重鎖（配列番号１）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＡＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧ
抗体１の軽鎖（配列番号２）
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＬＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＶＶＧＳＳＰＰＦＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
抗体１のＨＣＶＲ（配列番号３）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＡＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨ
抗体１のＬＣＶＲ（配列番号４）
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＬＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＶＶＧＳＳＰＰＦＴ
抗体１のＨＣＤＲ１（配列番号５）
ＡＡＳＧＦＡＦＳＮＹＡＭＳ
抗体１のＨＣＤＲ２（配列番号６）
ＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹ
抗体１のＨＣＤＲ３（配列番号７）
ＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨ
抗体１のＬＣＤＲ１（配列番号８）
ＲＡＳＱＳＶＳＳＬＹＬＡ
抗体１のＬＣＤＲ２（配列番号９）
ＹＧＡＳＳＲＡＴ
抗体１のＬＣＤＲ３（配列番号１０）
ＱＶＶＧＳＳＰＰＦＴ
抗体１の重鎖をコードするＤＮＡ（配列番号１１）
ｇａａｇｔｃｃａｇｔｔｇｃｔｇｇａａｔｃｔｇｇｃｇｇｃｇｇｔｃｔｃｇｔｔｃａｇｃｃａｇｇｇｇｇｃａｇｃｔｔｇｃｇｔｃｔｔａｇｔｔｇｔｇｃａｇｃａｔｃｃｇｇｇｔｔｔｇｃｃｔｔｔｔｃｃａａｔｔａｃｇｃｔａｔｇｔｃａｔｇｇｇｔａａｇｇｃａａｇｃｃｃｃａｇｇｃａａａｇｇａｃｔｃｇａａｔｇｇｇｔｔｔｃｃｇｃｃａｔｔａｇｔｇｃｃｔｃａｇｇａｇｇｃａａｇａｃａｔａｃｔａｔｇｃｃｇａｔｔｃｔｇｔａａａｇｇｇｃａｇａｔｔｔａｃｔａｔａｔｃｔｃｇｇｇａｃａａｔｔｃｔａａａａａｔａｃａｃｔｃｔａｔｃｔｔｃａｇａｔｇａａｔａｇｃｃｔｔａｇａｇｃｔｇａａｇａｔａｃｃｇｃｔｇｔｃｔａｃｔａｃｔｇｔｇｃｃａａａｃｇｔｇｇｃｔａｃｃｔｔｔｇｇｃａｃｇｃｃｔｔｔｇａｔｃａｃｔｇｇｇｇｔｃｇｇｇｇｔａｃｔｃｔｃｇｔａａｃｔｇｔａａｇｃｔｃｃｇｃｃｔｃｃａｃｃａａｇｇｇｃｃｃａｔｃｇｇｔｃｔｔｃｃｃｇｃｔａｇｃｇｃｃｃｔｇｃｔｃｃａｇｇａｇｃａｃｃｔｃｃｇａｇａｇｃａｃａｇｃｃｇｃｃｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｃｔａｃｔｔｃｃｃｃｇａａｃｃｇｇｔｇａｃｇｇｔｇｔｃｇｔｇｇａａｃｔｃａｇｇｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃｔｇｔｃｃｔａｃａｇｔｃｃｔｃａｇｇａｃｔｃｔａｃｔｃｃｃｔｃａｇｃａｇｃｇｔｇｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｃｔｃｃａｇｃａｇｃｔｔｇｇｇｃａｃｇａａｇａｃｃｔａｃａｃｃｔｇｃａａｃｇｔａｇａｔｃａｃａａｇｃｃｃａｇｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇａｇａｇｔｔｇａｇｔｃｃａａａｔａｔｇｇｔｃｃｃｃｃａｔｇｃｃｃａｃｃｃｔｇｃｃｃａｇｃａｃｃｔｇａｇｇｃｃｇｃｃｇｇｇｇｇａｃｃａｔｃａｇｔｃｔｔｃｃｔｇｔｔｃｃｃｃｃｃａａａａｃｃｃａａｇｇａｃａｃｔｃｔｃａｔｇａｔｃｔｃｃｃｇｇａｃｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａｃｇｔｇｃｇｔｇｇｔｇｇｔｇｇａｃｇｔｇａｇｃｃａｇｇａａｇａｃｃｃｃｇａｇｇｔｃｃａｇｔｔｃａａｃｔｇｇｔａｃｇｔｇｇａｔｇｇｃｇｔｇｇａｇｇｔｇｃａｔａａｔｇｃｃａａｇａｃａａａｇｃｃｇｃｇｇｇａｇｇａｇｃａｇｔｔｃａａｃａｇｃａｃｇｔａｃｃｇｔｇｔｇｇｔｃａｇｃｇｔｃｃｔｃａｃｃｇｔｃｃｔｇｃａｃｃａｇｇａｃｔｇｇｃｔｇａａｃｇｇｃａａｇｇａｇｔａｃａａｇｔｇｃａａｇｇｔｃｔｃｃａａｃａａａｇｇｃｃｔｃｃｃｇｔｃｃｔｃｃａｔｃｇａｇａａａａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇｃｃａａａｇｇｇｃａｇｃｃｃｃｇａｇａｇｃｃａｃａｇｇｔｇｔａｃａｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃａｔｃｃｃａｇｇａｇｇａｇａｔｇａｃｃａａｇａａｃｃａｇｇｔｃａｇｃｃｔｇａｃｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａａｇｇｃｔｔｃｔａｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｔｃｇｃｃｇｔｇｇａｇｔｇｇｇａａａｇｃａａｔｇｇｇｃａｇｃｃｇｇａｇａａｃａａｃｔａｃａａｇａｃｃａｃｇｃｃｔｃｃｃｇｔｇｃｔｇｇａｃｔｃｃｇａｃｇｇｃｔｃｃｔｔｃｔｔｃｃｔｃｔａｃａｇｃａｇｇｃｔａａｃｃｇｔｇｇａｃａａｇａｇｃａｇｇｔｇｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｔｇｔｃｔｔｃｔｃａｔｇｃｔｃｃｇｔｇａｔｇｃａｔｇａｇｇｃｔｃｔｇｃａｃａａｃｃａｃｔａｃａｃａｃａｇａａｇａｇｃｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｇｔ
抗体１の軽鎖をコードするＤＮＡ（配列番号１２）
ｇａａａｔａｇｔｔｃｔｃａｃｔｃａｇｔｃｃｃｃｔｇｇｇａｃａｃｔｃｔｃｃｃｔｇａｇｔｃｃａｇｇａｇａａｃｇｔｇｃａａｃａｃｔｃａｇｔｔｇｃｃｇｔｇｃａａｇｃｃａｇｔｃｃｇｔｃｔｃａｔｃｃｔｔｇｔａｔｃｔｔｇｃｔｔｇｇｔａｃｃａａｃａａａａａｃｃｔｇｇａｃａｇｇｃｃｃｃｃｃｇｔｃｔｔｃｔｔａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃｃｔｃｃａｇｔｃｇｃｇｃａａｃｔｇｇｔａｔｔｃｃｃｇａｃｃｇｇｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｃｇｇｃａｃｔｇａｃｔｔｃａｃｃｃｔｇａｃｔａｔａａｇｔｃｇｇｔｔｇｇａｇｃｃａｇａｇｇａｃｔｔｔｇｃｃｇｔｇｔａｃｔａｔｔｇｃｃａａｇｔｇｇｔｇｇｇａａｇｃｔｃｃｃｃｔｃｃｃｔｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔａｇａａａｔｃａａａａｇａａｃｔｇｔｇｇｃｇｇｃｇｃｃａｔｃｔｇｔｃｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃｇｃｃａｔｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｔｔｇａａａｔｃｃｇｇａａｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｔｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｔａａｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇａｇａｇｇｃｃａａａｇｔａｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｔａａｃｇｃｃｃｔｃｃａａｔｃｇｇｇｔａａｃｔｃｃｃａｇｇａｇａｇｔｇｔｃａｃａｇａｇｃａｇｇａｃａｇｃａａｇｇａｃａｇｃａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｃａｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａｃｇｃｔｇａｇｃａａａｇｃａｇａｃｔａｃｇａｇａａａｃａｃａａａｇｔｃｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｃａｃｃｃａｔｃａｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔｃｇｃｃｃｇｔｃａｃａａａｇａｇｃｔｔｃａａｃａｇｇｇｇａｇａｇｔｇｃ
抗体１（Ｋａｂａｔ）のＨＣＤＲ１（配列番号１３）
ＮＹＡＭＳ
抗体１（Ｋａｂａｔ）のＨＣＤＲ２（配列番号１４）
ＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹＹＡＤＳＶＫＧ
抗体１（Ｋａｂａｔ）のＨＣＤＲ３（配列番号１５）
ＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨ
抗体１（Ｋａｂａｔ）のＬＣＤＲ１（配列番号１６）
ＲＡＳＱＳＶＳＳＬＹＬＡ
抗体１（Ｋａｂａｔ）のＬＣＤＲ２（配列番号１７）
ＧＡＳＳＲＡＴ
抗体１（Ｋａｂａｔ）のＬＣＤＲ３（配列番号１８）
ＱＶＶＧＳＳＰＰＦＴ
抗体１（Ｃｈｏｔｈｉａ）のＨＣＤＲ１（配列番号１９）
ＧＦＡＦＳＮＹ
抗体１（Ｃｈｏｔｈｉａ）のＨＣＤＲ２（配列番号２０）
ＳＡＳＧＧＫ
抗体１（Ｃｈｏｔｈｉａ）のＨＣＤＲ３（配列番号２１）
ＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨ
抗体１（Ｃｈｏｔｈｉａ）のＬＣＤＲ１（配列番号２２）
ＲＡＳＱＳＶＳＳＬＹＬＡ
抗体１（Ｃｈｏｔｈｉａ）のＬＣＤＲ２（配列番号２３）
ＧＡＳＳＲＡＴ
抗体１（Ｃｈｏｔｈｉａ）のＬＣＤＲ３（配列番号２４）
ＱＶＶＧＳＳＰＰＦＴ
抗体１（ＩＭＧＴ）のＨＣＤＲ１（配列番号２５）
ＧＦＡＦＳＮＹＡ
抗体１（ＩＭＧＴ）のＨＣＤＲ２（配列番号２６）
ＩＳＡＳＧＧＫＴ
抗体１（ＩＭＧＴ）のＨＣＤＲ３（配列番号２７）
ＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨ
抗体１（ＩＭＧＴ）のＬＣＤＲ１（配列番号２８）
ＱＳＶＳＳＬＹ
抗体１（ＩＭＧＴ）のＬＣＤＲ２（配列番号２９）
ＧＡＳ
抗体１（ＩＭＧＴ）のＬＣＤＲ３（配列番号３０）
ＱＶＶＧＳＳＰＰＦＴ
ヒトＩＬ－３４（配列番号：３１）
ＮＥＰＬＥＭＷＰＬＴＱＮＥＥＣＴＶＴＧＦＬＲＤＫＬＱＹＲＳＲＬＱＹＭＫＨＹＦＰＩＮＹＫＩＳＶＰＹＥＧＶＦＲＩＡＮＶＴＲＬＱＲＡＱＶＳＥＲＥＬＲＹＬＷＶＬＶＳＬＳＡＴＥＳＶＱＤＶＬＬＥＧＨＰＳＷＫＹＬＱＥＶＥＴＬＬＬＮＶＱＱＧＬＴＤＶＥＶＳＰＫＶＥＳＶＬＳＬＬＮＡＰＧＰＮＬＫＬＶＲＰＫＡＬＬＤＮＣＦＲＶＭＥＬＬＹＣＳＣＣＫＱＳＳＶＬＮＷＱＤＣＥＶＰＳＰＱＳＣＳＰＥＰＳＬＱＹＡＡＴＱＬＹＰＰＰＰＷＳＰＳＳＰＰＨＳＴＧＳＶＲＰＶＲＡＱＧＥＧＬＬＰ
ＩｇＧ４ＰＡＡヒンジ領域（配列番号３２）
ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ
ＩｇＧ４ＰＡＡ Ｆｃ領域（配列番号３３）
ＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧ
カニクイザルＣＳＦ１Ｒ ＥＣＤ－Ｆｃの配列（配列番号３４）
ＩＰＶＩＥＰＳＧＰＥＬＶＶＫＰＧＥＴＶＴＬＲＣＶＧＮＧＳＶＥＷＤＧＰＩＳＰＨＷＴＬＹＳＤＧＰＳＳＶＬＴＴＮＮＡＴＦＱＮＴＲＴＹＲＣＴＥＰＧＤＰＬＧＧＳＡＡＩＨＬＹＶＫＤＰＡＲＰＷＮＶＬＡＫＥＶＶＶＦＥＤＱＤＡＬＬＰＣＬＬＴＤＰＶＬＥＡＧＶＳＬＶＲＬＲＧＲＰＬＬＲＨＴＮＹＳＦＳＰＷＨＧＦＩＩＨＲＡＫＦＩＱＧＱＤＹＱＣＳＡＬＭＧＧＲＫＶＭＳＩＳＩＲＬＫＶＱＫＶＩＰＧＰＰＡＬＴＬＶＰＡＥＬＶＲＩＲＧＥＡＡＱＩＶＣＳＡＳＮＩＤＶＤＦＤＶＦＬＱＨＮＴＴＫＬＡＩＰＱＲＳＤＦＨＤＮＲＹＱＫＶＬＴＬＳＬＧＱＶＤＦＱＨＡＧＮＹＳＣＶＡＳＮＶＱＧＫＨＳＴＳＭＦＦＲＶＶＥＳＡＹＬＤＬＳＳＥＱＮＬＩＱＥＶＴＶＧＥＧＬＮＬＫＶＭＶＥＡＹＰＧＬＱＧＦＮＷＴＹＬＧＰＦＳＤＨＱＰＥＰＫＬＡＮＡＴＴＫＤＴＹＲＨＴＦＴＬＳＬＰＲＬＫＰＳＥＡＧＲＹＳＦＬＡＲＮＰＧＧＷＲＡＬＴＦＥＬＴＬＲＹＰＰＥＶＳＶＩＷＴＳＩＮＧＳＧＴＬＬＣＡＡＳＧＹＰＱＰＮＶＴＷＬＱＣＡＧＨＴＤＲＣＤＥＡＱＶＬＱＶＷＶＤＰＨＰＥＶＬＳＱＥＰＦＱＫＶＴＶＱＳＬＬＴＡＥＴＬＥＨＮＱＴＹＥＣＲＡＨＮＳＶＧＳＧＳＷＡＦＩＰＩＳＡＧＡＲＴＨＰＰＤＥＡＡＡＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰ
抗体２の重鎖（配列番号３５）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＡＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＥＧＡＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
抗体３の重鎖（配列番号３６）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＡＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
抗体４の重鎖（配列番号３７）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＡＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＡＳＧＧＫＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＧＹＬＷＨＡＦＤＨＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＦＲＶＶＳＶＬＴＶＶＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＴＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
ドナネマブの重鎖（配列番号３８）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
ドナネマブの軽鎖（配列番号：３９）
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
抗Ｎ３ｐＧ抗体の重鎖（配列番号４０）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
抗Ｎ３ｐＧ抗体の軽鎖（配列番号４１）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
１．ヒトＩＬ－３４に結合する抗体であって、前記抗体が、重鎖可変領域（ＶＨ）と、軽鎖可変領域（ＶＬ）と、を含み、前記ＶＨが、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、
前記ＨＣＤＲ１が、配列番号５を含み、
前記ＨＣＤＲ２が、配列番号６を含み、
前記ＨＣＤＲ３が、配列番号７を含み、
前記ＬＣＤＲ１が、配列番号８を含み、
前記ＬＣＤＲ２が、配列番号９を含み、及び
前記ＬＣＤＲ３が、配列番号１０を含む、抗体。

２．前記ＶＨが、配列番号３を含み、前記ＶＬが、配列番号４を含む、実施形態１に記載の抗体。

３．前記抗体が、配列番号１を含む重鎖（ＨＣ）と、配列番号２を含む軽鎖（ＬＣ）と、を含む、実施形態１又は２に記載の抗体。

４．配列番号１１又は１２をコードする配列を含む、核酸。

５．実施形態４に記載の核酸を含む、ベクター。

６．前記ベクターが、配列番号１１をコードする第１の核酸配列と、配列番号１２をコードする第２の核酸配列と、を含む、実施形態５に記載のベクター。

７．配列番号１１をコードする核酸配列を含む第１のベクターと、配列番号１２をコードする核酸配列を含む第２のベクターと、を含む、組成物。

８．実施形態５又は６に記載のベクターを含む、細胞。

９．配列番号１１をコードする核酸配列を含む第１のベクターと、配列番号１２をコードする核酸配列を含む第２のベクターと、を含む、細胞。

１０．前記細胞が、哺乳動物細胞である、実施形態８又は９に記載の細胞。

１１．抗体を産生するプロセスであって、前記抗体が発現するような条件下で、実施形態８～１０のいずれか一項に記載の細胞を培養することと、発現した抗体を培養培地から回収することと、を含む、プロセス。

１２．実施形態１１に記載のプロセスによって産生される、抗体。

１３．実施形態１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、又は担体と、を含む、医薬組成物。

１４．免疫介在性疾患の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、前記対象に、治療有効量の実施形態１～３若しくは１２のいずれか一項に記載の抗体、又は実施形態１３に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。

１５．前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される、実施形態１４に記載の方法。

１６．前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病である、実施形態１５に記載の方法。

１７．療法に使用するための、実施形態１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体。

１８．免疫介在性疾患の治療における使用のための、実施形態１～３若しくは１２のいずれか一項に記載の抗体、又は実施形態１３に記載の医薬組成物。

１９．前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される、実施形態１８に記載の抗体又は医薬組成物。

２０．前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病である、実施形態１８に記載の抗体又は医薬組成物。

２１．免疫介在性疾患の治療のための薬剤の製造における、実施形態１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体の使用。

２２．前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される、実施形態２１に記載の使用。

２３．前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病である、実施形態２１に記載の使用。

２４．体液中のヒトＩＬ－３４レベルを決定する方法であって、
（ａ）前記体液を、配列番号３１のアミノ酸配列からなるヒトＩＬ－３４に特異的に結合する抗ヒトＩＬ－３４診断用モノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントと接触させること、ここで、前記抗体、又はその抗原結合フラグメントが、アミノ酸配列（配列番号８）、（配列番号９）、及び（配列番号１０）をそれぞれ含む軽鎖相補性決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３と、アミノ酸配列（配列番号５）、（配列番号６）、及び（配列番号７）をそれぞれ含む重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、を含み、
（ｂ）適宜、非特異的に結合した任意のモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントを除去することと、
（ｃ）ヒトＩＬ－３４に特異的に結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントの量を検出及び／又は定量化することと、を含む、方法。

２５．前記体液が、血液、血清若しくは血漿、又は脳脊髄液であり、前記接触がエクスビボで起こる、実施形態２４に記載の方法。

２６．ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、その治療又は予防を必要とするヒト対象に、有効量の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を、有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせて投与することを含む、方法。

Claims (121)

  1. ヒトＩＬ－３４に結合する抗体であって、前記抗体が、重鎖可変領域（ＶＨ）と、軽鎖可変領域（ＶＬ）と、を含み、前記ＶＨが、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、
    前記ＨＣＤＲ１が、配列番号５を含み、
    前記ＨＣＤＲ２が、配列番号６を含み、
    前記ＨＣＤＲ３が、配列番号７を含み、
    前記ＬＣＤＲ１が、配列番号８を含み、
    前記ＬＣＤＲ２が、配列番号９を含み、及び
    前記ＬＣＤＲ３が、配列番号１０を含む、抗体。
  2. 前記ＶＨが、配列番号３を含み、前記ＶＬが、配列番号４を含む、請求項１に記載の抗体。
  3. 前記抗体が、配列番号１を含む重鎖（ＨＣ）と、配列番号２を含む軽鎖（ＬＣ）と、を含む、請求項１又は２に記載の抗体。
  4. 配列番号１１又は１２をコードする配列を含む、核酸。
  5. 請求項４に記載の核酸を含む、ベクター。
  6. 前記ベクターが、配列番号１１をコードする第１の核酸配列と、配列番号１２をコードする第２の核酸配列と、を含む、請求項５に記載のベクター。
  7. 配列番号１１をコードする核酸配列を含む第１のベクターと、配列番号１２をコードする核酸配列を含む第２のベクターと、を含む、組成物。
  8. 請求項５又は６に記載のベクターを含む、細胞。
  9. 配列番号１１をコードする核酸配列を含む第１のベクターと、配列番号１２をコードする核酸配列を含む第２のベクターと、を含む、細胞。
  10. 前記細胞が、哺乳動物細胞である、請求項８又は９に記載の細胞。
  11. 抗体を産生するプロセスであって、前記抗体が発現するような条件下で、請求項８～１０のいずれか一項に記載の細胞を培養することと、発現した抗体を培養培地から回収することと、を含む、プロセス。
  12. 請求項１１に記載のプロセスによって産生される、抗体。
  13. 請求項１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、又は担体と、を含む、医薬組成物。
  14. 免疫介在性疾患の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１～３若しくは１２のいずれか一項に記載の抗体、又は請求項１３に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
  15. 前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
  16. 前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病である、請求項１５に記載の方法。
  17. 療法に使用するための、請求項１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体。
  18. 免疫介在性疾患の治療における使用のための、請求項１～３若しくは１２のいずれか一項に記載の抗体、又は請求項１３に記載の医薬組成物。
  19. 前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される、請求項１８に記載の抗体又は医薬組成物。
  20. 前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病である、請求項１８に記載の抗体又は医薬組成物。
  21. 免疫介在性疾患の治療のための薬剤の製造における、請求項１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体の使用。
  22. 前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病、タウオパチー病、シェーグレン症候群（ＳＳ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、アトピー性皮膚炎、腎疾患、敗血症、及び／又は非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）からなる群から選択される、請求項２１に記載の使用。
  23. 前記免疫介在性疾患が、アルツハイマー病である、請求項２１に記載の使用。
  24. 体液中のヒトＩＬ－３４レベルを決定する方法であって、
    （ａ）前記体液を、配列番号３１のアミノ酸配列からなるヒトＩＬ－３４に特異的に結合する抗ヒトＩＬ－３４診断用モノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントと接触させること、ここで、前記抗体、又はその抗原結合フラグメントが、アミノ酸配列（配列番号８）、（配列番号９）、及び（配列番号１０）をそれぞれ含む軽鎖相補性決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３と、アミノ酸配列（配列番号５）、（配列番号６）、及び（配列番号７）をそれぞれ含む重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、を含み、
    （ｂ）適宜、非特異的に結合した任意のモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントを除去することと、
    （ｃ）ヒトＩＬ－３４に特異的に結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントの量を検出及び／又は定量化することと、を含む、方法。
  25. 前記体液が、血液、血清若しくは血漿、又は脳脊髄液であり、前記接触がエクスビボで起こる、請求項２４に記載の方法。
  26. ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、その治療又は予防を必要とする前記ヒト対象に、有効量の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を、有効量の請求項１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体と同時に、別々に、又は順次組み合わせて投与することを含む、方法。
  27. 前記抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体が、ドナネマブであり、請求項１～３又は１２のいずれか一項に記載の抗体が、抗体１である、請求項２６に記載の方法。
  28. 前記疾患が、アルツハイマー病である、請求項２６に記載の方法。
  29. 前記抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体が、ドナネマブであり、前記疾患が、アルツハイマー病である、請求項２６に記載の方法。
  30. 抗体１が、ドナネマブによる一連の治療の後に順次投与される、請求項２９に記載の方法。
  31. ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、
    ｉ）前記ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を投与すること、ここで、各第１の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
    ｉｉ）前記１回以上の第１の用量を投与してから約４週間後に、前記ヒト対象に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量の前記抗Ｎ３ｐＧ Ａβ抗体を投与すること、ここで、各第２の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
    前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブであり、
    ｉｉｉ）前記ヒト対象に、有効量の抗体１を同時に、別々に、又は順次投与することと、を含む、方法。
  32. 前記ヒト対象が、前記第２の用量を投与する前に前記第１の用量のドナネマブを１回、２回、又は３回投与される、請求項３１に記載の方法。
  33. 前記ヒト対象が、約７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを投与される、請求項３１又は３２に記載の方法。
  34. 前記ヒト対象が、１回以上の約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、又は約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与される、請求項３１～３３のいずれか一項に記載の方法。
  35. 前記ヒト対象が、１回以上の約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与される、請求項３１～３４のいずれか一項に記載の方法。
  36. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、最長７２週間の一連の治療期間にわたって、又はアミロイドの正常レベルが達成されるまで、前記ヒト対象に投与される、請求項３１～３５のいずれか一項に記載の方法。
  37. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、患者におけるアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、前記ヒト対象に投与される、請求項３１～３６のいずれか一項に記載の方法。
  38. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、前記ヒト対象におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、前記ヒト対象への一連の治療のために投与され、適宜、前記２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが、少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下となる、請求項３１～３６のいずれか一項に記載の方法。
  39. 前記ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回、最長７２週間の一連の治療期間にわたって投与される、請求項３１～３６のいずれか一項に記の載の方法。
  40. 前記ヒト対象は、前記対象におけるアミロイドプラークレベルが約２５センチロイド以下になるまで、３回の７００ｍｇの第１の用量を４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回投与される、請求項３１～３６のいずれか一項に記載の方法。
  41. 前記ヒト対象は、前記対象におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回投与され、適宜、前記２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下となる、請求項３１～３６のいずれか一項に記載の方法。
  42. 前記ヒト対象が、前記疾患を治療又は予防するのに十分な一連の治療期間にわたって、前記第２の用量のドナネマブを投与される、請求項３１～４１のいずれか一項に記載の方法。
  43. 前記疾患の治療又は予防が、ｉ）前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減、及び／又はｉｉ）前記ヒト対象の認知若しくは機能低下の遅延を引き起こす、請求項３１～４２のいずれか一項に記載の方法。
  44. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減が、アミロイドＰＥＴ脳イメージング又はＡβのバイオマーカーを検出する診断法によって決定される、請求項４３に記載の方法。
  45. 前記第２の用量は、前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が約２０～１００％低減するまで、前記ヒト対象に投与される、請求項４３又は４４に記載の方法。
  46. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、又は約１００％低減する、請求項４５に記載の方法。
  47. 前記第２の用量のドナネマブは、前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、ｉ）およその平均で約２５センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉ）およその平均で約５０センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉｉ）約１００センチロイド、又はｉｖ）約８４センチロイド低減するまで、前記ヒト対象に投与される、請求項３１～４４のいずれか一項に記載の方法。
  48. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着を特徴とする疾患が、前臨床アルツハイマー病（ＡＤ）、臨床ＡＤ、前駆期ＡＤ、軽度ＡＤ、中等度ＡＤ、重度ＡＤ、ダウン症候群、臨床的脳アミロイド血管症、又は前臨床的脳アミロイド血管症から選択される、請求項３１～４７のいずれか一項に記載の方法。
  49. 前記ヒト対象が、早期症候性ＡＤ患者である、請求項３１～４８のいずれか一項に記載の方法。
  50. 前記ヒト対象が、前駆期ＡＤ及びＡＤによる軽度の認知症を有する、請求項４９に記載の方法。
  51. 前記ヒト対象が、ｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、ｉｖ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、又はｖ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有する、請求項２６～５０のいずれか一項に記載の方法。
  52. 前記ヒト対象は、ｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒ以下である場合、非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．１０ＳＵＶｒ～１．４６ＳＵＶｒである場合、低いから中等度のタウ負荷を有する、請求項５１に記載の方法。
  53. 前記ヒト対象が、ｉ）高いタウ負荷を有していないか、若しくは高いタウ負荷を有していないと決定されているか、又はｉｉ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を保有し、高いタウ負荷を有していないか、若しくは有していないと決定されている、請求項２６～５０のいずれか一項に記載の方法。
  54. 前記ヒト対象は、ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒを超える場合、高いタウ負荷を有する、請求項５３に記載の方法。
  55. 前記ヒト対象の前記タウ負荷が、ＰＥＴ脳イメージング又はタウのバイオマーカーを検出する診断法を使用して決定される、請求項５１又は５３に記載の方法。
  56. ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患の治療又は予防のための薬剤の製造における、抗体１と同時、別々、若しくは順次組み合わせた、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の使用であって、
    １回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が投与され、各第１の用量が、約４週間ごとに１回投与され、続いて１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量が、前記１回以上の第１の用量の投与の４週間後に投与され、各第２の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕＡβ抗体が、約４週間ごとに１回投与され、
    前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブである、使用。
  57. 前記ヒト対象が、ドナネマブの前記第２の用量を投与する前に、ドナネマブの前記第１の用量を１回、２回、又は３回投与される、請求項５６に記載の使用。
  58. 前記ヒト対象が、約７００ｍｇのドナネマブの第１の用量を３回投与される、請求項５６又は５７に記載の使用。
  59. 前記ヒト対象が、１回以上の約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、又は約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与される、請求項５６～５８のいずれか一項に記載の方法。
  60. 前記ヒト対象が、１回以上の約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与される、請求項５６～５９のいずれか一項に記載の使用。
  61. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、最長７２週間の一連の治療期間にわたって、又はアミロイドの正常レベルが達成されるまで、前記ヒト対象に投与される、請求項５６～６０のいずれか一項に記載の使用。
  62. 患者におけるアミロイドプラークレベルが、約２５センチロイド以下になるまで、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、前記ヒト対象に投与される、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の使用。
  63. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、患者における前記アミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、前記ヒト対象に投与され、適宜、前記２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが、少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下となる、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の使用。
  64. 前記ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、最長７２週間の期間にわたって投与される、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の使用。
  65. 患者における前記アミロイドプラークレベルが、約２５センチロイド以下になるまで、前記ヒト対象が、７００ｍｇのドナネマブの第１の用量を４週間ごとに１回で３回投与され、次いで、１４００ｍｇのドナネマブの第２の用量を４週間ごとに１回投与される、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の使用。
  66. 前記ヒト対象は、患者におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、３回の７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを４週間ごとに１回投与され、適宜、前記２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下となる、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の使用。
  67. 前記ヒト対象が、前記疾患を治療又は予防するのに十分な一連の治療期間にわたってドナネマブの前記第２の用量を投与される、請求項５６～６６のいずれか一項に記載の使用。
  68. 前記疾患の治療又は予防が、ｉ）前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減、及び／又はｉｉ）前記ヒト対象における認知若しくは機能低下の遅延を引き起こす、請求項５６～６７のいずれか一項に記載の使用。
  69. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減が、アミロイドＰＥＴ脳イメージング又はＡβのバイオマーカーを検出する診断法によって決定される、請求項６８に記載の使用。
  70. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、約２０～１００％低減するまで、ドナネマブの前記第２の用量が、前記ヒト対象に投与される、請求項６８又は６９に記載の使用。
  71. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％又は約１００％低減される、請求項７０に記載の使用。
  72. 前記患者における脳内のＡβ沈着物が、１００％低減する、請求項７０又は７１に記載の使用。
  73. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、ｉ）およその平均で約２５センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉ）およその平均で約５０センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉｉ）約１００センチロイド、又はｉｖ）約８４センチロイド低減されるまで、ドナネマブの前記第２の用量が、前記ヒト対象に投与される、請求項５６～７２のいずれか一項に記載の使用。
  74. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患が、前臨床アルツハイマー病、臨床的ＡＤ、前駆期ＡＤ、軽度ＡＤ、中等度ＡＤ、重度ＡＤ、ダウン症候群、臨床的脳アミロイド血管症、又は前臨床的脳アミロイド血管症から選択される、請求項５６～７３のいずれか一項に記載の使用。
  75. 前記ヒト対象が、早期症候性ＡＤ患者であるか、又は前記ヒト対象が、前駆期ＡＤ若しくはＡＤによる軽度の認知症を有する、請求項５６～７４のいずれか一項に記載の使用。
  76. 前記ヒト対象が、ｉ）非常に低いから中等度のタウ負担を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、ｉｉｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、ｉｖ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されている、又はｖ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有する、請求項５６～７５のいずれか一項に記載の使用。
  77. 前記ヒト対象が、ｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒ以下である場合、非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．１０ＳＵＶｒ～１．４６ＳＵＶｒである場合、低いから中等度のタウ負荷を有する、請求項７６に記載の使用。
  78. 前記ヒト対象が、ｉ）高いタウ負荷を有していないか、若しくは高いタウ負荷を有していないと決定されているか、又はｉｉ）ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を保有し、高いタウ負荷を有していないか、若しくは高いタウ負荷を有していないと決定されている、請求項５６～７５のいずれか一項に記載の使用。
  79. ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒを超える場合、前記ヒト対象が、高いタウ負荷を有する、請求項７８に記載の使用。
  80. 前記ヒト対象のタウ負荷が、タウＰＥＴ脳イメージング又はタウのバイオマーカーを検出する診断法を使用して決定される、請求項７６又は７８に記載の使用。
  81. ｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷、若しくは低いから中等度のタウ負荷及びＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有することが決定されているヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、
    ｉ）前記ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量のドナネマブを投与すること、ここで、ドナネマブの各第１の用量が約４週間ごとに１回投与され、
    ｉｉ）前記１回以上の第１の用量を投与した４週間後に、前記ヒト対象に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量のドナネマブを投与することを含み、ここで、各第２の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
    有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせる、方法。
  82. ヒト対象の脳内のアミロイドベータ（Ａβ）沈着物を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、
    前記ヒト対象が脳の側頭葉、後頭葉、頭頂葉、又は前頭葉にタウ負荷を有する場合、前記ヒト対象が、脳の側頭葉、後頭葉、頭頂葉、又は前頭葉にタウ負荷を有するかどうかを決定し、次いで
    ｉ）前記ヒト対象に、１回以上の約１００ｍｇ～約７００ｍｇの第１の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を投与すること、ここで、各第１の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
    ｉｉ）前記１回以上の第１の用量を投与した約４週間後に、１回以上の７００ｍｇ超～約１４００ｍｇの第２の用量の抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を前記ヒト対象に投与することを含み、ここで、各第２の用量が、約４週間ごとに１回投与され、
    有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせる、方法。
  83. 前記ヒト対象が、脳の後外側側頭葉又は側頭葉にタウ負荷を有する、請求項８２に記載の方法。
  84. 前記ヒト対象が、脳の後頭葉にタウ負荷を有する、請求項８２に記載の方法。
  85. 前記ヒト対象が、脳の頭頂葉にタウ負荷を有する、請求項８２に記載の方法。
  86. ヒト対象が脳の前頭葉にタウ負荷を有する、請求項８２に記載の方法。
  87. 前記ヒト対象が、脳の後外側側頭葉（ＰＬＴ）及び／又は後頭葉にタウ負荷を有する、請求項８２に記載の方法。
  88. 前記ヒト対象が、脳のＰＬＴ若しくは後頭領域におけるタウ負荷とともに、ｉ）頭頂若しくは楔前領域、又はｉｉ）前頭領域にタウ負荷を有する、請求項８２～８７のいずれか一項に記載の方法。
  89. 前記ヒト対象が、脳のｉ）前頭葉に隔離されたタウ負荷、又はｉｉ）後外側側頭領域（ＰＬＴ）を含まない側頭葉の領域にタウ負荷を有する、請求項８２～８６のいずれか一項に記載の方法。
  90. 前記ヒト対象が、脳の後外側側頭葉、後頭葉、及び頭頂葉にタウ負荷を有する、請求項８２～８８のいずれか一項に記載の方法。
  91. 前記ヒト対象が、脳の後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉、及び前頭葉にタウ負荷を有する、請求項８２～８８のいずれか一項に記載の方法。
  92. 前記ヒト対象が、脳の後外側側頭葉、後頭葉、頭頂葉及び／又は前頭葉にタウ負荷を有する、請求項８２～８８のいずれか一項に記載の方法。
  93. 前記ヒト対象が、前記第２の用量を投与される前に、前記第１の用量を１回、２回、又は３回投与される、請求項８２～９２のいずれか一項に記載の方法。
  94. 前記ヒト対象が、約７００ｍｇの第１の用量を投与される、請求項８２～９３のいずれか一項に記載の方法。
  95. 前記ヒト対象が、１回以上の約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、又は約１４００ｍｇの第２の用量を投与される、請求項８２～９４のいずれか一項に記載の方法。
  96. 前記ヒト対象が、１回以上の約１４００ｍｇの第２の用量を投与される、請求項８２～９５のいずれか一項に記載の方法。
  97. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、最長７２週間の期間、又はアミロイドの正常レベルが達成されるまで、前記ヒト対象に投与される、請求項８２～９６のいずれか一項に記載の方法。
  98. 患者におけるアミロイドプラークレベルが、約２５センチロイド以下になるまで、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、前記ヒト対象に投与される、請求項８２～９７のいずれか一項に記載の方法。
  99. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、前記ヒト対象におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、前記ヒト対象に投与され、適宜、前記２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下となる、請求項８２～９８のいずれか一項に記載の方法。
  100. 前記ヒト対象が、３回の７００ｍｇの第１の用量を４週間ごとに１回投与され、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回、最長７２週間投与される、請求項８２～９９のいずれか一項に記載の方法。
  101. 対象におけるアミロイドプラークレベルが、約２５センチロイド以下になるまで、前記ヒト対象は、３回の７００ｍｇの第１の用量を４週間ごとに１回投与され、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回投与される、請求項８２～１００のいずれか一項に記載の方法。
  102. 前記ヒト対象は、対象におけるアミロイドプラークレベルが２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンで約２５センチロイド以下になるまで、３回の７００ｍｇの第１の用量を４週間ごとに１回、次いで１４００ｍｇの第２の用量を４週間ごとに１回投与され、適宜、前記２回の連続ＰＥＴイメージングスキャンが少なくとも６ヶ月間隔があるか、又は１回のＰＥＴイメージングスキャンで約１１センチロイド以下となる、請求項８２～１０１のいずれか一項に記載の方法。
  103. 前記ヒト対象が、前記疾患を治療又は予防するのに十分な期間、第２の用量を投与される、請求項８２～１０２のいずれか一項に記載の方法。
  104. 疾患の治療又は予防が、ｉ）前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物の低減、及び／又はｉｉ）前記ヒト対象の認知若しくは機能低下の遅延を引き起こす、請求項８２～１０３のいずれか一項に記載の方法。
  105. 前記ヒト対象における脳内のＡβ沈着物の低減が、アミロイドＰＥＴ脳イメージング又はＡβのバイオマーカーを検出する診断法によって決定される、請求項９７に記載の方法。
  106. 前記第２の用量は、前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が約２０～１００％低減するまで、前記ヒト対象に投与される、請求項９７又は９８に記載の方法。
  107. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、又は約１００％低減される、請求項１０６に記載の方法。
  108. 前記第２の用量は、前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物が、ｉ）およその平均で約２５センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉ）およその平均で約５０センチロイド～約１００センチロイド、ｉｉｉ）約１００センチロイド、又はｉｖ）約８４センチロイド低減されるまで、前記ヒト対象に投与される、請求項８２～１０７のいずれか一項に記載の方法。
  109. 前記ヒト対象の脳内のＡβ沈着物を特徴とする疾患が、前臨床アルツハイマー病（ＡＤ）、臨床ＡＤ、前駆期ＡＤ、軽度ＡＤ、中等度ＡＤ、重度ＡＤ、ダウン症候群、臨床的脳アミロイド血管症、又は前臨床的脳アミロイド血管症から選択される、請求項８２～１０８のいずれか一項に記載の方法。
  110. 前記ヒト対象が、早期症候性ＡＤ患者である、請求項８２～１０９のいずれか一項に記載の方法。
  111. 前記ヒト対象が、前駆期ＡＤ及びＡＤによる軽度の認知症を有する、請求項１０９に記載の方法。
  112. 前記ヒト対象が、ｉ）非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは非常に低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されているか、又はｉｉ）低いから中等度のタウ負荷を有するか、若しくは低いから中等度のタウ負荷を有することが決定されている、請求項８２～１１１のいずれか一項に記載の方法。
  113. 前記ヒト対象は、ｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒ以下である場合、非常に低いから中等度のタウ負荷を有するか、又はｉｉ）ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．１０ＳＵＶｒ～１．４６ＳＵＶｒである場合、低いから中等度のタウ負荷を有する、請求項１１２に記載の方法。
  114. 前記ヒト対象が、高いタウ負荷を有していないか、又は高いタウ負荷を有していないと決定されている、請求項８２～１１３のいずれか一項に記載の方法。
  115. 前記ヒト対象は、ＰＥＴ脳イメージングによって測定されるタウ負荷が１．４６ＳＵＶｒを超える場合、高いタウ負荷を有する、請求項１１４に記載の方法。
  116. 前記ヒト対象のタウ負荷が、ＰＥＴ脳イメージング又はタウのバイオマーカーを検出する診断法を使用して決定される、請求項１１４又は１１５に記載の方法。
  117. 前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブを含む、請求項８２～１１６のいずれか一項に記載の方法。
  118. 前記患者が、ＡＰＯＥ ｅ４の１つ又は２つの対立遺伝子を有する、請求項８２～１１７のいずれか一項に記載の方法。
  119. タウ負荷の更なる増加を減少させる／予防する、又はヒト脳の側頭葉、後頭葉、頭頂葉、又は前頭葉におけるタウ蓄積速度を遅らせる方法であって、ヒト対象に、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を、有効量の抗体１と同時に、別々に、又は順次組み合わせて投与することを含む、方法。
  120. 必要とする対象においてＡＲＩＡを治療する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１～３若しくは１２のいずれか一項に記載の抗体又は請求項１３に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
  121. 必要とする対象においてＡＲＩＡを予防する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１～３若しくは１２のいずれか一項に記載の抗体又は請求項１３に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
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