JP2022514642A

JP2022514642A - 乳児用飲用組成物

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Publication number: JP2022514642A
Application number: JP2021535828A
Authority: JP
Inventors: ナタリージェクライン，; マルティナスクスリス，; ソフィーエレーヌヌッテン，; アンセヴェニエ，
Original assignee: ソシエテ・デ・プロデュイ・ネスレ・エス・アー
Priority date: 2018-12-21
Filing date: 2019-12-20
Publication date: 2022-02-14
Also published as: CN113194731A; CA3124282A1; AU2019410757A1; BR112021011988A2; MX2021007316A; US20220071899A1; EP3897170A1; WO2020128063A1

Abstract

２種以上の食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物であって、当該食物アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、乳児用飲用組成物。【選択図】なし

Description

本発明は、食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物に関する。本発明はまた、食物アレルゲンに対する感受性を低減するための乳児用飲用組成物の製造方法及びその使用に関する。

欧州及び北米では、食物アレルギーが、成人のほぼ５％及び小児の８％に影響していると推定される（Ｓｉｃｈｅｒｅｒ，Ｓ．Ｈ．ａｎｄＳａｍｐｓｏｎ，Ｈ．Ａ．，２０１４．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３３（２），ｐｐ．２９１－３０７）。豪州における集団ベースの研究では、抗原投与により証明される食物アレルギーの有病率が１０％を超えることが判明しており、この有病率は世界で最も高い（Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｎ．Ｊ．，ｅｔａｌ．，２０１１．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１２７（３），ｐｐ．６６８－６７６）。全体的に、食物アレルギー及びアナフィラキシーの有病率は明らかに一貫して増加しており、乳児における食物アレルギー又はアトピー性湿疹の増加が最も大きい（Ｋｏｐｌｉｎ，Ｊ．Ｊ．，ｅｔａｌ．，２０１５．Ｃｕｒｒｅｎｔｏｐｉｎｉｏｎｉｎａｌｌｅｒｇｙａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１５（５），ｐｐ．４０９－４１６）。したがって、有効なアレルギー予防、特に乳児のための予防は、世界的に公衆衛生上の優先事項となっている（Ｒｉｎｇ，Ｊ．，２０１２．Ａｌｌｅｒｇｙ，６７（２），ｐｐ．１４１－１４３）。

栄養介入は、食物アレルギーの予防及び治療において中心的な役割を果たす。近年、臨床的アプローチは大きく変化しており、乳児期における補完食の早期導入が強い関心を集めるようになっている（ＤｕＴｏｉｔ，Ｇ．，ｅｔａｌ．，２０１６．ＡｌｌｅｒｇｏｌｏｇｙＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，６５（４），ｐｐ．３７０－３７７）。例えば、欧州小児栄養消化器肝臓学会（ＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＰａｅｄｉａｔｒｉｃＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ、ＥＳＰＧＨＡＮ）の栄養委員会は、現在では、４ケ月齢以降の任意の時点で補完的な栄養補給を開始するときに、アレルゲン性食品を導入してもよいと推奨している（Ｆｅｗｔｒｅｌｌ，Ｍ．，ｅｔａｌ．，２０１７．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆｐｅｄｉａｔｒｉｃｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，６４（１），ｐｐ．１１９－１３２）。例えば、ピーナッツアレルギー（重度の湿疹、卵アレルギー、又はこれらの両方を有するもの）のリスクが高い乳児は、４ヶ月齢～１１ヶ月齢の間にピーナッツの摂取を導入する必要があると勧められている。したがって、多くの科学者は、食物アレルゲンの早期導入の原則を受け入れている。

生後早期の齢で、例えば４ヶ月齢より前に食物アレルゲンを導入することには、形式及び安全性に関連して課題がある。

例えば、卵、ピーナッツ、種実類、魚、甲殻類、貝類及びゴマなどの一般的な食物アレルゲンは、典型的には、安全性の観点から乳児に好適ではない固形食品の形態である。しかしながら、生後早期の乳児は、固形食品を食べることが不可能である。免疫寛容調査（ＥＡＴ）研究において、３ケ月齢以降の乳児に、６種の一般的な食物アレルゲンを固形食品の形態で母乳栄養と共に導入した報告がある（Ｐｅｒｋｉｎ，Ｍ．Ｒ．，ｅｔａｌ．，２０１６．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３７（５），ｐｐ．１４７７－１４８６）。この研究によりプロトコル当たりの保護効果が実証されたが、試験は、アレルゲンの形式がある程度の原因となり、ほとんどの参加者で試験レジメンを遵守できなかったことにより、治療企図解析に全体として失敗した。したがって、食物アレルゲンを液体形式で摂取することは有利である。

液体形式は、乳児用フォーミュラに有効な安全性要件を満たす。主な懸念は、微生物学的な質及び夾雑物である。乳児用飲用組成物の殺菌又は滅菌中の熱変性は、アレルゲンの免疫原性に影響を及ぼすことがある。

したがって、幼い乳児に投与することができる、食物アレルゲンを含む市販の乳児用飲用組成物に対する需要がある。

ホエイタンパク質の変性－Ｒｏｗｌａｎｄを示す図。 β－Ｌｇアレルゲン性の残存についてのヒト化ＲＢＬ脱顆粒アッセイを示す図。還元サンプルを示す図。

［発明の概要］
本発明によると、２種以上の食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物であって、当該食物アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、乳児用飲用組成物が提供される。

乳児用飲用組成物は、液体形式で摂取することができる。したがって、いくつかの好ましい実施形態では、組成物は粉末形態であり、好ましくはこの粉末形態を水で再構成することができる。他の好ましい実施形態では、組成物はレディー・トウ・ドリンクの形態である。

穏やかな殺菌及び／又は滅菌を使用して、食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物を提供することができる。加熱処理中に用いる保持温度及び／又は保持時間を低減することで、アレルゲンの熱分解を低減すること又は最小限に抑えることができる。

一実施形態では、乳児用飲用組成物は殺菌されている。いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、６１．９℃～６５℃、好ましくは６２℃～６４℃の温度での殺菌を経たものであり、好ましくは、当該殺菌は、少なくとも３０分間又は少なくとも３５分間行われる。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は滅菌されている。滅菌は、間接的又は直接的超高温加熱処理によるものでもよい。いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、好ましくは１２５℃～１３５℃、又は１３０℃～１３４℃、又は１３１℃～１３３℃、例えば約１３２℃の温度での、間接的超高温加熱処理を経たものである。滅菌は、少なくとも３０秒間、又は少なくとも６０秒間、例えば３０～８０秒間、又は６０～７０秒間行うことができる。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、好ましくは１３６℃～１４０℃の温度で約１５～２５秒間、例えば約２０秒間、又は１４０℃～１４４℃の温度で約５～１５秒間、例えば１０秒間の、直接的超高温加熱処理を経たものである。別の実施形態では、直接的ＵＨＴ加熱処理は、１５０℃～１５４℃の温度で約２～４秒間であってもよい。

いくつかの実施形態では、滅菌は、超短時間滅菌（ＵＳＳ）であってもよい。いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、１５５℃～１７０℃の温度で１秒未満の超短時間滅菌（ＵＳＳ）加熱処理を経たものである。

いくつかの実施形態では、穏やかな加熱処理は、７２℃～９０℃、例えば７２℃～８０℃の温度で１０～３０秒間、又は８０℃～８９℃で２～２０秒間、例えば８０℃～８４℃で４～２０秒間、又は８５℃～８９℃で１～１０秒間行うことができる。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用フォーミュラ組成物、又は乳児用フォーミュラ組成物の乳タンパク質含有成分には、精密濾過工程を経た後に穏やかな加熱処理をすることができる。

組成物は、例えば、０．０１～０．０３ｇ／ｍＬの当該食物アレルゲンを含有してもよい。いくつかの実施形態では、組成物中の当該食物アレルゲンの総量は、１食当たり０．５～５グラムであり、好ましくは、１食分量は１５～２５０ｍＬである。

食物アレルゲンは、任意の既知の食物アレルゲンであってもよい。好ましくは、食物アレルゲンは、乳、卵、穀物（小麦、ライ麦、大麦、オート麦）タンパク質、大豆、ピーナッツ、種実類（アーモンド、ヘーゼルナッツ、クルミ、カシュー、ペカンナッツ、ブラジルナッツ、松果、ピスタチオナッツ、マカダミナッツなど）、魚、甲殻類、貝類、セロリ及び根セロリ、カラシ及びゴマからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組成物は、当該食物アレルゲンのうちの３種以上、又は４種以上、又は５種以上、又は６種以上、又は７種以上、又は８種以上、又は９種以上、又は全てを含む。一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び卵タンパク質を含む。

組成物は、０ヶ月齢～１２ヶ月齢、６週齢～１２ヶ月齢、０ヶ月齢～６ヶ月齢、６週齢～６ヶ月齢、０ヶ月齢～４ヶ月齢、又は６週齢～４ヶ月齢の乳児に使用するためのものであってもよい。一実施形態では、組成物は、約１ヶ月齢～約８ヶ月齢、例えば約１ヶ月齢～約７ヶ月齢、又は約１ヶ月齢～約６ヶ月齢の乳児に使用するためのものである。一実施形態では、組成物は、約１ヶ月齢～約４ヶ月齢、又は約１ヶ月齢～約３ヶ月齢の乳児に使用するためのものである。

乳児用飲用組成物は、１種以上の担体を更に含んでもよく、好ましくは、担体は脱脂粉乳及び／又はラクトースである。

乳児用飲用組成物は、プロバイオティクス及び／又はヒトミルクオリゴ糖を更に含んでもよい。

一実施形態では、食物アレルゲンのうちの少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％は未変性である。

一態様では、本発明は、乳児において当該食物アレルゲンに対するアレルギーの低減又は予防に使用するための、本明細書で規定される乳児用飲用組成物を提供する。

別の態様では、本発明は、有効量の本明細書で規定される乳児用飲用組成物を投与することによって、乳児におけるアレルギーを低減又は予防する方法を提供する。

別の態様では、本発明は、本明細書で規定される乳児用飲用組成物の製造方法であって、
ｉ）２種以上の食物アレルゲンをブレンドして混合物を形成する工程であって、当該アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、工程と、
ｉｉ）当該混合物を均質化する工程と、
ｉｉｉ）当該混合物を殺菌する工程と、
ｉｖ）任意選択で、当該混合物を噴霧乾燥する工程と、を含み、
好ましくは、殺菌が、６１．９℃～６５℃、好ましくは６２℃～６４℃の温度で行われ、好ましくは、当該殺菌は、少なくとも３０分間又は少なくとも３５分間行われる、方法を提供する。

別の態様では、本発明は、本明細書で規定される乳児用飲用組成物の製造方法であって、
ｉ）２種以上の食物アレルゲンをブレンドして混合物を形成する工程であって、当該アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、工程と、
ｉｉ）当該混合物を均質化する工程と、
ｉｉｉ）当該混合物を滅菌する工程と、
ｉｖ）任意選択で、当該混合物を噴霧乾燥する工程と、を含む、方法を提供する。
滅菌は、本明細書に記載の間接的超高温加熱処理であってもよい。滅菌は、本明細書に記載の直接的超高温加熱処理であってもよい。

本明細書で使用する場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「から構成される（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄｏｆ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」又は「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」と同義であり、他を包含し得るものであり、すなわちオープンエンドであり、かつ追加の、列挙されていない構成、要素、又は工程を除外しない。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「から構成される（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄｏｆ）」はまた、用語「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆ）」を含む。

乳児用飲用組成物
本明細書で使用するとき、用語「乳児用飲用組成物」とは、乳児による摂取に好適な組成物を意味する。乳児用飲用組成物の例としては、乳児用栄養栄養補助食品及び乳児用フォーミュラが挙げられるが、これらに限定されない。

生後４ヶ月齢までの乳児は、通常、固形食品を摂取することが不可能である。したがって、固形食品による食物アレルゲンの導入は不可能であり、液体形式で食物アレルゲンを摂取することが有利である。したがって、好ましい実施形態では、乳児用飲用組成物は、液体形式で準備及び／又は摂取することができる。いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、固形食品を食べることができない乳児に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳児用栄養補助食品である。栄養補助食品は、母乳及び／又は乳児用フォーミュラに加えて提供することができる。したがって、好ましい実施形態では、乳児用飲用組成物は、０ヶ月齢～１２ヶ月齢、６週齢～１２ヶ月齢、０ヶ月齢～６ヶ月齢、６週齢～６ヶ月齢、４ヶ月齢～６ヶ月齢、好ましくは０ヶ月齢～４ヶ月齢又は６週齢～４ヶ月齢の乳児による摂取に好適な乳児用栄養補助食品である。一実施形態では、組成物は、約１ヶ月齢～約８ヶ月齢、例えば約１ヶ月齢～約７ヶ月齢、又は約１ヶ月齢～約６ヶ月齢の乳児に使用するためのものである。一実施形態では、組成物は、約１ヶ月齢～約４ヶ月齢、又は約１ヶ月齢～約３ヶ月齢の乳児に使用するためのものである。

乳児用栄養補助食品は、（食物アレルゲンの供給源によって提供されるものに加えて）：タンパク質；脂肪（脂質）：炭水化物；並びに必須ビタミン及びミネラルのうちの１種以上を更に含んでもよい。乳児用栄養補助食品は、甘味剤、香味剤、及び／又は着色剤を更に含んでもよい。

他の実施形態では、乳児用飲用組成物は、追加のタンパク質；脂肪；炭水化物、及び／又は必須ビタミン及びミネラルを含まない。例えば、いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、食物アレルゲンの供給源、及び含まれる場合、任意選択で１種以上の担体によって提供されるもの、以外の成分を全く含まない。

他の実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳児用フォーミュラ又はフォローオンフォーミュラである。表現「乳児用フォーミュラ」とは、特に生後４ヶ月～６ヶ月の乳児における栄養摂取を目的とした食品であって、当該食品そのものがこの時期の乳児の栄養所要量を満たすものである、食品を意味する。表現「フォローオンフォーミュラ」とは、特に生後４ヵ月以降の乳児における栄養摂取を目的とした食品であって、この対象者の次第に多様化する食事における主な液体要素を構成する食品を意味する。

乳児用フォーミュラの要件は、当業者に公知である。例えば、推奨及び要件は、欧州小児栄養消化器肝臓学会（ＥＳＰＧＨＡＮ）によって、例えば、Ｋｏｌｅｔｚｋｏ，Ｂ．，ｅｔａｌ．，２００５．「Ｇｌｏｂａｌｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒｔｈｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａ：ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓｏｆａｎＥＳＰＧＨＡＮｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｄｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｅｘｐｅｒｔｇｒｏｕｐ」Ｊｏｕｒｎａｌｏｆｐｅｄｉａｔｒｉｃｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，４１（５），ｐｐ．５８４－５９９で提示されている。典型的には、すぐに摂取できる状態の液体形態の乳児用フォーミュラ（例えば、粉末から再構成されたもの）は、６０ｋｃａｌ／１００ｍＬ～７０ｋｃａｌ／１００ｍＬを提供する。乳児用フォーミュラは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり、約１．８～４．５ｇのタンパク質；約３．３～６．０ｇの脂肪（脂質）；約３００～１２００ｍｇのリノール酸；ラクトース、スクロース、グルコース、グルコースシロップ、デンプン、マルトデキストリン及びマルトース、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される約９～１４ｇの炭水化物；並びに必須ビタミン及びミネラルを含む。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、１種以上の担体を更に含む。本明細書で使用するとき、用語「担体」は、賦形剤、充填剤、増量剤、希釈剤、着色剤、安定剤、増粘剤、結合剤、香味剤などのような有用な任意の物質である。好ましくは、１種以上の担体には、脱脂粉乳及び／又はラクトースが含まれる。最も好ましくは、担体は、脱脂粉乳及び／又はラクトースである。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、プロバイオティクス及び／又はヒトミルクオリゴ糖（例えばプレバイオティクス）及び／又はポストバイオティクスを更に含む。

用語「プロバイオティクス」は、宿主の健康又はウェル・ビーイングに有益な効果を有する微生物細胞調製物又は微生物細胞の成分を指す（Ｓａｌｍｉｎｅｎ，Ｓ．ｅｔａｌ．（１９９９）ＴｒｅｎｄｓＦｏｏｄＳｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．１０：１０７－１０）。

具体的には、プロバイオティクスは、腸内バリア機能を改善することができる（Ｒａｏ，Ｒ．Ｋ．（２０１３）Ｃｕｒｒ．Ｎｕｔｒ．ＦｏｏｄＳｃｉ．９：９９－１０７）。

本発明の組成物に使用するためのプロバイオティクス微生物の例としては、酵母、例えばサッカロマイセス、デバリオマイセス、カンジダ、ピキア及びトルロプシス、並びに細菌、例えばビフィドバクテリム属、バクテロイデス属、クロストリジウム属、フソバクテリウム属、メリソコッカス属、プロピオニバクテリウム属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、ラクトコッカス属、スタフィロコッカス属、ペプトストレプトコッカス属、バチルス属、ペディオコッカス属、ミクロコッカス属、ロイコノストック属、ワイセラ属、アエロコッカス属、オエノコッカス属及びラクトバチルス属が挙げられる。

好適なプロバイオティクス微生物の具体例は、サッカロマイセス・セレビシエ、バチルス・コアグランス、バチルス・リケニフォルミス、バチルス・スブチリス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロコッカス・フェカリス、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバシラス・アリメンタリウス、ラクトバシラス・カゼイ亜種カゼイ、ラクトバチルス・カゼイ・シロタ、ラクトバチルス・カルバタス、ラクトバシラス・デルブリッキー亜種ラクティス、ラクトバチルス・ファルシミナス、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・ジョンソニ、ラクトバチルス・ラムノーサス（ラクトバチルスＧＧ）、ラクトバチルス・サケ、ラクトバチルス・ラクティス、ミクロコッカス・バリアンス、ペディオコッカス・アシディラクティシ、ペディオコッカス・ペントサス、ペディオコッカス・アシディラクティシ、ペディオコッカス・ハロフィルス、ストレプトコッカス・フェカリス、ストレプトコッカス・サーモフィルス、スタフィロコッカス・カルノーシス及びスタフィロコッカス・キシローサスである。

例示的なプロバイオティクス細菌株としては、ラクトバチルス・ラムノーサス；ラクトバチルス・ラムノーサスＬＰＲ（ＣＧＭＣＣ１．３７２４）；とりわけＣｈｒｉｓｔｉａｎＨａｎｓｅｎ（Ｄｅｎｍａｒｋ）が商標名ＢＢ１２で販売するビフィドバクテリウム・ラクティスＢＬ８１８（ＣＮＣＭ１－３４４６）、及び森永乳業が商品名ＢＢ５３６で販売するビフィドバクテリウム・ロンガムＢＬ９９９（ＡＴＣＣＢＡＡ－９９９）が挙げられる。

プレバイオティクスは通常、胃又は小腸において分解されず吸収されないという意味で難消化性である。したがって、プレバイオティクスは大腸に入る際にインタクトのままであり、大腸で有益な細菌により選択的に発酵される。プレバイオティクスの例としては、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、イヌリン、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ポリデキストロース、又はこれらの任意の混合物といったある種のオリゴ糖が挙げられる。特定の実施形態では、プレバイオティクスは、フラクトオリゴ糖及び／又はイヌリンであってもよい。一例は、短鎖フラクトオリゴ糖７０％とイヌリン３０％との組み合わせであり、これはＮｅｓｔｅにより商標「Ｐｒｅｂｉｏ１」で登録されている。

特定の実施形態では、プレバイオティクスは、ヒトミルクオリゴ糖であってもよい。ヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）は、総じてヒト母乳において乳糖及び脂肪に続き３番目に多い固形成分である。ＨＭＯは、通常、炭水化物コアの還元末端にラクトースを含み、非還元末端には多くの場合フコース又はシアル酸を含有する。約１００種のミルクオリゴ糖が単離され特定されている。多くの乳児用フォーミュラが、異なる目的のために、フコシル化オリゴ糖、ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、又はシアリル化オリゴ糖などのＨＭＯ成分を使用して開発されてきた。

ポストバイオティクスは、宿主において生物学的活性を有する、プロバイオティクス微生物由来であって生存活性のない細菌産物又は代謝副産物である。例示的なポストバイオティクスとしては、短鎖脂肪酸、酵素、ペプチド、多糖類、細胞表面タンパク質、又はビタミンなどの発酵中に産生される生理活性成分が挙げられる。ポストバイオティクスは、腸を通して免疫機能を支援することができる。

乳児用飲用組成物は、粉末形態であってもよく、この粉末形態は、液体形式に再構成した後、摂取することができる。好ましい実施形態では、乳児用飲用組成物は、水で再構成された後に摂取される。好ましくは、組成物は、水で再構成され、１食分を提供することができる。

他の好ましい実施形態では、組成物はレディー・トウ・ドリンクの形態である。レディー・トウ・ドリンク組成物は、ボトルで提供することができる。好ましくは、ボトルは、１食分の食物アレルゲンを提供する。

本明細書で使用するとき、用語「１食分」とは、１名の乳児によって１回の補給において摂取されることが推奨される分を意味する。当業者であれば、具体的な１食分又は用量のサイズは、年齢、体重、全身の健康状態、食生活、及び投与時間などの様々な因子に応じて異なることを認識する。したがって、いくつかの実施形態では、１食分は、０．５～５ｇ、１～４ｇ、又は２～３ｇの総食物アレルゲンを提供することができる。１食分は、例えば、１５～２５０ｍＬ、３５～２００ｍＬ、５０～１５０ｍＬ、７５～１２５ｍＬ、１０～１００ｍＬ、５０～９０ｍＬ、６０～８０ｍＬ、又は約７０ｍＬの乳児用飲用組成物を含んでもよい。一実施形態では、１食分は、１５～２５０ｍＬ、又は５０～１５０ｍＬ中に、０．５～５ｇの総食物アレルゲンを提供する。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、０．０１～０．１ｇ／ｍＬ、好ましくは０．０１～０．０５ｇ／ｍＬ、又は最も好ましくは０．０１～０．０３ｇ／ｍＬの総食物アレルゲンを含有する。

食物アレルゲン
本明細書で使用するとき、用語「食物アレルゲン」は、異常な免疫応答を引き起こすタンパク質又はその誘導体を指す。精製された食物アレルゲンは、世界保健機関及び国際免疫学会連合のＡｌｌｅｒｇｅｎＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅＳｕｂ－Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅの体系的な命名法を使用して命名することができる。アレルゲン名は、その供給源の学名の省略表記（属名：３～４文字；種名：１～２文字）及びアラビア数字で構成されており、例えば、Ｄｅｒｐ１は、イエダニＤｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓｐｔｅｒｏｎｙｓｓｉｎｕｓから報告された最初のアレルゲンである。食物アレルゲンは、プロテアーゼ、リガンド結合タンパク質、構造タンパク質、病因関連タンパク質、脂質伝達タンパク質、プロフィリン、及びカルシウム結合タンパク質を含む様々な生物学的機能を有するタンパク質から誘導される。

食物アレルゲンのリストは、ＷＨＯ／ＩＵＩＳＡｌｌｅｒｇｅｎＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅＤａｔａｂａｓｅ，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｌｌｅｒｇｅｎ．ｏｒｇ／ｉｎｄｅｘ．ｐｈｐ．（Ｒａｄａｕｅｒ，Ｃ．，ｅｔａｌ．，２０１４．Ａｌｌｅｒｇｙ，６９（４），ｐｐ．４１３－４１９ａｎｄＰｏｍｅｓ，Ａ．，ｅｔａｌ．，２０１８．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）の公式ウェブサイトに提供されている。

本発明は、異なる食物素材に由来する２種以上の食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物であって、当該食物アレルゲンのうちの１種が乳である、乳児用飲用組成物を提供する。好ましくは、１種以上の他の食物アレルゲンは、卵、穀物（小麦、ライ麦、大麦、オート麦）タンパク質、大豆、ピーナッツ、種実類（アーモンド、ヘーゼルナッツ、クルミ、カシュー、ペカンナッツ、ブラジルナッツ、松果、ピスタチオナッツ、マカダミナッツなど）、魚、甲殻類、貝類、セロリ及び根セロリ、カラシ及びゴマからなる群から選択される。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、当該食物アレルゲンのうちの３種以上（すなわち、乳タンパク質、卵タンパク質、小麦タンパク質、大豆タンパク質、ピーナッツタンパク質、種実類タンパク質、魚タンパク質、甲殻類タンパク質、貝類タンパク質及びゴマタンパク質からなる群から選択される３種以上）、又は４種以上、又は５種以上、又は６種以上、又は７種以上、又は８種以上、又は９種以上、又は１０種以上を含む。

一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び卵タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及びピーナッツタンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び種実類タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び小麦タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び魚タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び大豆タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び甲殻類タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及び貝類タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質及びゴマタンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質、卵タンパク質及びピーナッツタンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質、卵タンパク質、ピーナッツタンパク質及び種実類タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質、卵タンパク質及び魚タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、乳タンパク質、卵タンパク質、ピーナッツタンパク質、種実類タンパク質及び魚タンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、卵タンパク質、小麦タンパク質、大豆タンパク質、ピーナッツタンパク質、種実類タンパク質、魚タンパク質、甲殻類タンパク質、貝類タンパク質及びゴマタンパク質を含む。
一実施形態では、乳児用飲用組成物は、本明細書で言及されるもの以外の更なる食物アレルゲンを全く含まない。

いくつかの実施形態では、各食物アレルゲンの量は、ほぼ同じである。例えば、１食分の乳児用飲用組成物は、各食物アレルゲンを、約０．０１ｇ～約１ｇ、約０．０５ｇ～約０．５ｇ、又は約０．１ｇ～約０．５ｇ含んでもよい。

食物アレルゲン、例えば、ピーナッツアレルゲンなどは、タンパク質の混合物であってもよい。いくつかの実施形態では、食物アレルゲンは、前記食品製品のアレルゲン性成分を、１種以上、２種以上、３種以上、４種以上、実質的に全て、又は全て含む。例えば、いくつかの実施形態では、乳タンパク質は、乳由来のアレルゲン性タンパク質を、１種以上、２種以上、３種以上、４種以上、実質的に全て、又は全て含む。特定の食品製品の既知のアレルゲン性タンパク質の例は、当業者に公知である。

乳タンパク質
牛乳は、乳児の食物アレルギーにおける最も一般的なアレルギー源であり、乳幼児の１．４％～３．８％に影響している（ＤｕＴｏｉｔ，Ｇ．，ｅｔａｌ．，２０１６．ＡｌｌｅｒｇｏｌｏｇｙＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，６５（４），ｐｐ．３７０－３７７．）。このアレルギーは、じんましん、血管性浮腫及び／又はアナフィラキシーなどの即時型の反応を伴うＩｇＥ介在性のものであり得、あるいは、多くの場合皮膚又は胃腸症状を伴って現れる、非ＩｇＥ介在性のものであり得る（ＤｕＴｏｉｔ，ｅｔａｌ．）。

牛乳タンパク質に早期暴露することは、ＩｇＥ介在性の牛乳タンパク質アレルギーに対する防御になることが示されている（Ｋａｔｚ，Ｙ．，ｅｔａｌ．，２０１０．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１２６（１），ｐｐ．７７－８２）。

乳アレルゲン（ＩｇＥ介在性応答を示すものなど）は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｗａｌ，Ｊ．Ｍ．，２００２．ＡｎｎａｌｓｏｆＡｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８９（６），ｐｐ．３－１０ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｄｂｙｔｈｅＷＨＯ／ＩＵＩＳＡｌｌｅｒｇｅｎＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅＤａｔａｂａｓｅに記載されている。

乳タンパク質は、好ましくは牛乳タンパク質である。いくつかの実施形態では、乳タンパク質は、α－ラクトアルブミン（Ｂｏｓｄ４）、β－ラクトグロブリン（Ｂｏｓｄ５）、ウシ血清アルブミン（Ｂｏｓｄ６）、免疫グロブリン（Ｂｏｓｄ７）、カゼイン（Ｂｏｓｄ８）、例えばαＳ１－カゼイン（Ｂｏｓｄ９）、αＳ２－カゼイン（Ｂｏｓｄ１０）、β－カゼイン（Ｂｏｓｄ１１）及びκ－カゼイン（Ｂｏｓｄ１１）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

卵タンパク質
卵アレルギーは、２番目に一般的な食物アレルギーであり、その有病率は約２．５％である（ＤｕＴｏｉｔ，ｅｔａｌ．）。卵を早期導入すると、卵アレルギーの有病率が低減されることが示されている（Ｐｅｒｋｉｎ，Ｍ．Ｒ．，ｅｔａｌ．，２０１６．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３７（５），ｐｐ．１４７７－１４８６．）。免疫寛容調査（ＥｎｑｕｉｒｉｎｇＡｂｏｕｔＴｏｌｅｒａｎｃｅ、ＥＡＴ）研究により、卵アレルギーの発症は、標準的な導入群では５．４％であったのに対し、早期導入群では３．７％であったことが判明した（相対的な低減率３１％）。

卵アレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ａｍｏ，Ａ．，ｅｔａｌ．，２０１０．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄｆｗｏｏｄｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５８（１２），ｐｐ．７４５３－７４５７に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

卵タンパク質は鶏卵タンパク質であってもよい。いくつかの実施形態では、卵タンパク質は、オボムコイド（Ｇａｌｄ１）、オボアルブミン（Ｇａｌｄ２）、オボトランスフェリン（Ｇａｌｄ３）、リゾチームＣ（Ｇａｌｄ４）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。いくつかの実施形態では、卵タンパク質は、オボムコイド（Ｇａｌｄ１）、オボアルブミン（Ｇａｌｄ２）、オボトランスフェリン（Ｇａｌｄ３）、リゾチームＣ（Ｇａｌｄ４）、α－リベチン／血清アルブミン（Ｇａｌｄ５）、卵黄糖タンパク質４２（ＹＧＰ４２Ｇａｌｄ６）、ミオシン軽鎖１ｆ（Ｇａｌｄ７）、α－パルブアルブミン（Ｇａｌｄ８）、β－エノラーゼ（Ｇａｌｄ９）、アルドラーゼ（Ｇａｌｄ１０）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

ピーナッツタンパク質
ピーナッツアレルギーは、有病率が乳又は卵アレルギーほど一般的ではないものの、生命を脅かすアナフィラキシーを誘導する場合がある。ピーナッツアレルギーの危険性が高い乳児の同定（ＬＥＡＰ）研究からの結果は、このリスクが高いアトピーの小児のコホートにおいて、早期の導入及びピーナッツの定期的に進める摂取により、ピーナッツアレルギーを有する６０ケ月齢の小児の人数の、ピーナッツを回避した小児に対する有意な低減（８１％の相対的減少、治療分析の意図）がもたらされることを実証した（ＤｕＴｏｉｔ，Ｇ．，ｅｔａｌ．，２０１３．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３１（１），ｐｐ．１３５－１４３）。ＥＡＴ試験はまた、早期導入群では、ピーナッツアレルギーの有病率が標準導入群と比較して少なかったこと（０％対２．５％、ｐ＝０．００３）も実証した。

ピーナッツアレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、これらはＫｒａｕｓｅ，Ｓ．，ｅｔａｌ．，２００９．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１２４（４），ｐｐ．７７１－７７８に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

いくつかの実施形態では、ピーナッツの種はアラキス・ヒポゲアである。いくつかの実施形態では、ピーナッツタンパク質は、キュピン（ビシリン型、７Ｓグロブリン、Ａｒａｈ１、及びレグミン型、１１Ｓグロブリン、グリシン、Ａｒａｈ３）、２Ｓアルブミン（Ａｒａｈ２６７）、プロフィリン（Ａｒａｈ５）、病因関連タンパク質、ＰＲ－１０（Ａｒａｈ８）、非特異的脂質輸送タンパク質１型（Ａｒａｈ９、Ａｒａｈ１６、Ａｒａｈ１７）、オレオシン（Ａｒａｈ１０、Ａｒａｈ１１、Ａｒａｈ１４及び１５）、ディフェンシン（Ａｒａｈ１２及び１３））からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

小麦タンパク質
穀物粒への初期暴露が生後６ヶ月以降に遅れると、小麦アレルギーを発症するリスクが増大し得ることが報告されている（Ｐｏｏｌｅ，Ｊ．Ａ．，ｅｔａｌ．，２００６．Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，１１７（６），ｐｐ．２１７５－２１８２．）。Ｐｏｏｌｅらによる研究では、親から報告される小麦アレルギーの有病率は１％であり、調査の対象となった小児のうちの４名（０．２５％）は検出可能な小麦特異的ＩｇＥ抗体を有していた。これらの４名の小児の全員で、穀物粒への初回暴露が生後６ヶ月以降であった。したがって、小麦を早期導入すると、小麦アレルギーの発症のリスクを低減することができる。

小麦アレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ｔａｔｈａｍ，Ａ．Ｓ．ａｎｄＳｈｅｗｒｙ，Ｐ．Ｒ．，２００８．Ｃｌｉｎｉｃａｌ＆ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＡｌｌｅｒｇｙ，３８（１１），ｐｐ．１７１２－１７２６に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

いくつかの実施形態では、小麦の種は、トリチクム・アエスチバムである。いくつかの実施形態では、小麦タンパク質は、非特異的脂質輸送タンパク質１（Ｔｒｉａ１４）、β－アミラーゼ（Ｔｒｉａ１７）、アグルチニンイソレクチン１（Ｔｒｉａ１８）、ω－５グリアジン（Ｔｒｉａ１９）、γグリアジン（Ｔｒｉａ２０）、チオレドキシン（Ｔｒｉａ２５）、高分子量グルテニン（Ｔｒｉａ２６）、低分子量グルテニンＧｌｕＢ３－２３（Ｔｒｉａ３６）、αプロチオニン（Ｔｒｉａ３７）、ＮＦＫＢ１のミトコンドリアユビキチンリパーゼ活性化因子（Ｔｒｉａ４１）、Ｔｒｉａ４２及びＴｒｉａ４３（ｃＤＮＡからの仮想的なタンパク質）、胚乳輸送細胞特異的ＰＲ６０前駆体（Ｔｒｉａ４４）、伸長因子１（Ｔｒｉａ４５）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

大豆タンパク質
米国では乳幼児の約０．４％が大豆アレルギーの影響を受けている（Ｋａｔｔａｎ，Ｊ．Ｄ．ａｎｄＳａｍｐｓｏｎ，Ｈ．Ａ．，２０１５．ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ：ＩｎＰｒａｃｔｉｃｅ，３（６），ｐｐ．９７０－９７２）。大豆を早期導入すると、大豆アレルギーの発症のリスクを低減することができる。

大豆アレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ｋａｔｔａｎ，Ｊ．Ｄ．ａｎｄＳａｍｐｓｏｎ，Ｈ．Ａ．，２０１５．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ：ＩｎＰｒａｃｔｉｃｅ，３（６），ｐｐ．９７０－９７２に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

いくつかの実施形態では、大豆の種は、グリシン・マックスである。いくつかの実施形態では、大豆タンパク質は、プロフィリン（Ｇｌｙｍ３）、病因関連タンパク質ＰＲ－１０（Ｇｌｙｍ４）、β－コングリシニン（Ｇｌｙｍ５）、グリシニン（Ｇｌｙｍ６）、種子ビオチニル化タンパク質（Ｇｌｙｍ７）及び２Ｓアルブミン（Ｇｌｙｍ８）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

種実類タンパク質
種実類を早期導入すると、種実類アレルギーの発症のリスクを低減することができる（Ｆｒａｚｉｅｒ，Ａ．Ｌ．，ｅｔａｌ．，２０１４．ＪＡＭＡｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，１６８（２），ｐｐ．１５６－１６２．）。例えば、Ｆｒａｚｉｅｒらは、種実類アレルギーのない母親のうち、妊娠中の種実類の摂取が多かった母親の子供では、種実類アレルギーのリスクが低くなることを報告している。この報告により、早期のアレルゲン暴露が寛容性を増大させ、小児期の食物アレルギーのリスクを低下させるという仮説の裏付けが示された。

種実類アレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ｒｏｕｘ，Ｋ．Ｈ．，ｅｔａｌ．，２００３．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌａｒｃｈｉｖｅｓｏｆａｌｌｅｒｇｙａｎｄｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３１（４），ｐｐ．２３４－２４４に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。
いくつかの実施形態では、種実類の種は、ヘーゼルナッツ、クルミ、カシュー、アーモンド、ペカン、栗、ブラジルナッツ、松果、マカダミアナッツ、ピスタチオ、ココナッツ、ナンガイナッツ及びドングリからなる群のうちの１種以上から選択される。いくつかの実施形態では、種実類の種は、ヘーゼルナッツ、クルミ、カシュー、及びアーモンドである。いくつかの実施形態では、種実類タンパク質は、脂質輸送タンパク質、プロフィリン、Ｂｅｔｖ１関連ファミリーのメンバー、レグミン、ビシリン、アルブミンからなるリストから選択される１種以上のタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、種実類タンパク質は、Ｃｏｒａ１、２、８、９、１１～１４（ヘーゼルナッツ）；Ｊｕｇｎ１、２、４（クログルミ）；Ｊｕｇｒ１～８（セイヨウグルミ）；Ａｎａｏ１～３（カシュー）；Ｐｒｕｄｕ３～６及びＰｒｕｄｕ８（アーモンド）；Ｃａｒｉ１、２、４（ペカン）；Ｃａｓｓ５、８、９（栗）；Ｂｅｒｅ１、２（ブラジルナッツ）；並びにＰｉｓｖ１～５（ピスタチオ）からなるリストから選択される１種以上のタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、種実類タンパク質は、Ｃｏｒａ１、２、８、９、１１～１４；Ｊｕｇｎ１、２、４；Ｊｕｇｒ１～８；Ａｎａｏ１～３；Ｐｒｕｄｕ３～６からなるリストから選択される１種以上のタンパク質を含む。

魚タンパク質
魚を早期導入すると、魚アレルギーの発症のリスクを低減することができる（Ｋｕｌｌ，Ｉ．，ｅｔａｌ．，２００６．Ａｌｌｅｒｇｙ，６１（８），ｐｐ．１００９－１０１５．）。例えば、Ｋｕｌｌらは、１歳までの定期的な魚の摂取が、生後４年間の食物アレルゲン及び吸入性アレルゲンに対するアレルギー疾患及び感作のリスク低減と関連していると見られることについて報告している。

魚アレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ｐｏｕｌｓｅｎ，Ｌ．Ｋ．，ｅｔａｌ．，２００１．Ａｌｌｅｒｇｙ，５６，ｐｐ．３９－４２に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

いくつかの実施形態では、魚の種は、タラ、ニシン、マス、マグロ、サケ、コダラ、マサバ、サバ、ウナギ、シー・パーチ（ｓｅａｐｅｒｃｈ）、アジ、イワシ、スズキ（ｐｅｒｃｈ）、プレイス、ヒラメ、カレイ、コウイカ、オヒョウ、メルルーサ、メグリム、カジキ、カタクチイワシ、パイク及びコイからなる群のうちの１種以上から選択される。いくつかの実施形態では、魚の種は、タラ、ニシン、プレイス及びサバからなる群のうちの１つ以上から選択される。いくつかの実施形態では、魚の種は、タラである。いくつかの実施形態では、魚タンパク質は、Ｇａｄｃ１、Ｃｌｕｈ１、及びＲａｓｋ１からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

甲殻類及び貝類タンパク質
アジアでの有病率に関する最新のデータでは、小児で４０％及び成人で３３％にも及ぶ顕著な感作因子として、海産食品が際立っている（Ｌｏｐａｔａ，Ａ．Ｌ．ａｎｄＬｅｈｒｅｒ，Ｓ．Ｂ．，２００９．Ｃｕｒｒｅｎｔｏｐｉｎｉｏｎｉｎａｌｌｅｒｇｙａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，９（３），ｐｐ．２７０－２７７．）。甲殻類又は貝類を早期導入すると、甲殻類アレルギー又は貝類アレルギーの発症のリスクを低減することができる（Ｆｌｅｉｓｃｈｅｒ，Ｄ．Ｍ．，ｅｔａｌ．，２０１３．ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ：ＩｎＰｒａｃｔｉｃｅ，１（１），ｐｐ．２９－３６）。

甲殻類及び貝類アレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ｌｏｐａｔａ，Ａ．Ｌ．，ｅｔａｌ．，２０１０．Ｃｌｉｎｉｃａｌ＆ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＡｌｌｅｒｇｙ，４０（６），ｐｐ．８５０－８５８に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

いくつかの実施形態では、甲殻類の種は、カニ、ロブスター、エビ及び小エビからなる群のうちの１種以上から選択される。いくつかの実施形態では、貝類の種は、アワビ、カタツムリ、ウェルク（ツブ貝）、アサリ、カキ、ホタテ、ムール貝、ザルガイ、イカ、タコからなる群のうちの１つ以上から選択される。いくつかの実施形態では、甲殻類タンパク質は、トロポミオシン（Ｃｈａｆ１、Ｃｒａｃ１、Ｅｘｏｅ１、Ｈｏｍａ１、Ｌｉｔｖ１、Ｐａｎｓ１、Ｍａｃｒ１、Ｍｅｌｌ１、Ｍｅｔｅ１、Ｐａｎｂ１、Ｐｅｎｉ１、Ｐｅｎｍ１、Ｐｏｒｐ１、Ｐｒｏｃ１）、ミオシン軽鎖２（Ｈｏｍａ３）、トロポニンＣ（Ｈｏｍａ６）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。いくつかの実施形態では、貝類タンパク質は、Ｈａｌｍ１、及びトロポミオシン（Ｈｅｌａｓ１、Ｃｒａｇ１、Ｓａｃｇ１、Ｔｏｄｐ１）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

ゴマタンパク質
多くの場合、最近になってアレルゲンとしてみなされるようになっているゴマに対するアレルギーは、米国外の研究によると、小児の０．１０～０．７９％に影響していると推定されている（Ｓｉｃｈｅｒｅｒ，Ｓ．Ｈ．，ｅｔａｌ．，２０１０．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１２５（６），ｐｐ．１３２２－１３２６）。ゴマを早期導入すると、ゴマアレルギーの発症のリスクを低減することができる。例えば、ゴマは、ＥＡＴ試験中にアレルゲンとして選択されている（Ｐｅｒｋｉｎ，Ｍ．Ｒ．，ｅｔａｌ．，２０１６．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３７（５），ｐｐ．１４７７－１４８６）。

ゴマアレルゲンは当該技術分野において既知であり、例えば、Ｂｅｙｅｒ，Ｋ．，ｅｔａｌ．，２００２．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｒｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１１０（１），ｐｐ．１５４－１５９に記載されており、ＷＨＯ／ＩＵＩＳのアレルゲン命名法データベースで提示されている。

いくつかの実施形態では、ゴマの種は、Ｓｅｓａｍｕｍｉｎｄｉｃｕｍである。いくつかの実施形態では、ゴマタンパク質は、２ｓアルブミン（Ｓｅｓｉ１、２）；、７Ｓビシリン様グロブリン（Ｓｅｓｉ３）、オレオシン（Ｓｅｓｉ４、５）、及び１１Ｓグロブリン（Ｓｅｓｉ６、７）からなるリストから選択されるタンパク質のうちの１種以上を含む。

加熱処理
本発明の組成物は、好ましくは、穏やかな加熱処理、例えば穏やかな殺菌及び／又は滅菌を経たものである。加熱処理中の保持温度及び／又は保持時間を減じると、アレルゲンの変性の程度を低減することができる。

「殺菌」は、物質、特に液体（乳など）の部分的滅菌を指す。標準的な殺菌条件は、当業者に公知であり、例えば、乳の殺菌の場合、典型的には、約７２℃の温度で１５秒間の標準的な高温短時間（ＨＴＳＴ）殺菌が用いられる。殺菌の温度はまた保持温度とも呼ばれ、この温度は保持時間にわたって一定である。

好ましい実施形態では、乳児用飲用組成物は穏やかな殺菌を経たものであり、この穏やかな殺菌により殺菌中の熱損傷、例えば、アレルゲンの変性が低減している。穏やかな殺菌は、保持温度及び／又は保持時間を減じることにより達成することができる。したがって、いくつかの実施形態では、殺菌は、保持温度が７２℃～６１．９℃、７０℃～６１．９℃、６８℃～６１．９℃、６６℃～６１．９℃、６５℃～６１．９℃、６４℃～６１．９℃、例えば約６３℃であるものである。

好適な保持時間は、少なくとも１５分間、２０分間、２５分間、３０分間、又は３５分間であってもよい。例えば、殺菌は、７２℃～６１．９℃で１５～４５分間、又は６５℃～６１．９℃で２０～４０分間、好ましくは約６３℃で約３５分間行うことができる。

いくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物又は乳タンパク質含有成分には、穏やかな加熱処理、例えば穏やかな殺菌の前に、任意選択で精密濾過が行われる。好適な精密濾過技術は、当該技術分野において公知である。精密濾過工程を使用すると、殺菌工程の前に細菌量を有利に低減することができ、温度の低減及び／又は保持時間の短縮が可能になる。本発明のいくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、超高温（ＵＨＴ）加熱処理による滅菌を経たものである。好ましい実施形態では、滅菌条件は、熱損傷（例えば、アレルゲンの変性）を最小限に抑えるように選択される。このような滅菌は、低減された保持温度及び／又は短縮された保持時間を用いることによって達成することができる。

本発明のいくつかの実施形態では、ＵＨＴ加熱処理は、間接的加熱処理である。間接的加熱処理では、熱交換器を使用して、滅菌されている液体の温度を保持温度まで上げる。間接的ＵＨＴ加熱処理を使用して、例えば米国特許第４５３４９８６（Ａ）号に記載されているように、保持温度を低減させることによって熱損傷を最小限に抑えることができる。間接的ＵＨＴ加熱処理のいくつかの実施形態では、保持温度は、１２５℃～１３５℃、又は１３０℃～１３４℃、又は１３１℃～１３３℃である。間接的ＵＨＴ加熱処理のいくつかの実施形態では、保持時間は、少なくとも３０秒間、又は少なくとも６０秒間、例えば３０～８０秒間、又は６０～７５秒間である。例えば、間接的ＵＨＴ加熱処理は、１３１℃～１３３℃で約６０～７５秒間行われる。

本発明のいくつかの実施形態では、ＵＨＴ加熱処理は、直接的加熱処理である。直接的加熱処理では、過熱蒸気を液体に直接混合（例えば注入）する。直接的加熱は、より短時間でなされてもよく、これによっても熱損傷を最小限に抑えることができる。いくつかの実施形態では、直接的ＵＨＴ加熱処理は、１３６℃～１４０℃の温度で約１５～２５秒間、又は１４０℃～１４４℃の温度で約５～１０秒間、又は１５０℃～１５４℃の温度で約２～４秒間である。

いくつかの実施形態では、滅菌は、１５５℃～１７０℃の温度で１秒間未満の超短時間滅菌（ＵＳＳ）加熱処理である。

本発明のいくつかの実施形態では、乳児用飲用組成物は、熱滅菌した後、無菌充填される。

本発明のいくつかの実施形態では、本発明による殺菌済みの栄養組成物中の２種以上の食物アレルゲンの少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％は未変性である。未変性の食物アレルゲンの割合が高いことは、本明細書に記載される、保持温度を低減する及び／又は保持時間を短縮する加熱処理の結果としてのものであってもよい。

本発明のいくつかの実施形態では、乳タンパク質の少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％は未変性である。本発明のいくつかの実施形態では、乳タンパク質の少なくとも４０％は未変性である。本発明のいくつかの実施形態では、乳タンパク質の少なくとも５０％は未変性である。

いくつかの実施形態では、２つ以上の食物アレルゲンの各々の少なくとも３０％は未変性である。例えば、食物アレルゲンの３０％～１００％、又は３０％～９５％、又は３０％～９０％、又は４０％～８０％、又は５０％～６０％は未変性である。

本発明によると、「変性」タンパク質は、タンパク質の立体構造が攪乱又は破壊されているタンパク質である。したがって、典型的には変性タンパク質において、水素結合、塩架橋、ジスルフィド結合、及び非極性疎水性相互作用からなる相互作用のうちの１つ以上が攪乱されている。「変性」タンパク質は、典型的には、一次構造（すなわち、ペプチド結合）はインタクトなままである。

未変性の食物アレルゲンの比率は、当業者に公知の任意の方法、例えば、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、高速タンパク質液体クロマトグラフィー（ＦＰＬＣ）、ビシンコニン酸アッセイ（ＢＣＡ）、ケルダール窒素（ＫＮ）、円偏光二色性分析（ＣＤ）、未変性ポリアシルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）、キャピラリー電気泳動（ＣＥ）、フーリエ変換赤外線スペクトル分光法（ＦＴＩＲ）、又は蛍光分光法によって求めることができる。

栄養組成物が２種以上の食物アレルゲンを含有する場合、各食物アレルゲンは、個別に分離及び分析することができる。食物アレルゲンを分離して、一緒に分析することもできる。いくつかの実施形態では、全ての食物アレルゲンを平均（平均値）すると、本明細書で指定の程度に未変性である。

当業者に公知の任意の方法を使用して、食物アレルゲンを栄養組成物から分離することができる。例えば、ＨＰＬＣ、ＦＰＬＣ、サイズ排除クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、自由流動電気泳動、アフィニティークロマトグラフィーが挙げられる。これらは、例えば、Ｓｃｏｐｅｓ，Ｒ．Ｋ．，２０１３．Ｐｒｏｔｅｉｎｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄｐｒａｃｔｉｃｅ．ＳｐｒｉｎｇｅｒＳｃｉｅｎｃｅ＆ＢｕｓｉｎｅｓｓＭｅｄｉａに記載されている。ＨＰＬＣでは、化合物の分離は、かかる化合物と固定相との相互作用に基づくことで可能である。一般的なＨＰＬＣ法としては、逆相分配ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）及びサイズ排除ＨＰＬＣが挙げられる。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｒｏｗｌａｎｄ法を使用して、未変性の食物アレルゲンの割合を求める。好ましくは、かかる食物アレルゲンは乳アレルゲンである。

Ｒｏｗｌａｎｄ法では、未変性のホエイタンパク質窒素（血清タンパク質窒素、ＳＰＮ）は、酢酸及び酢酸ナトリウムによって沈殿していない窒素（非カゼイン窒素、ＮＣＮ）から非タンパク質窒素（ＮＰＮ）を差し引いた窒素として規定され、ＳＰＮ＝ＮＣＮ－ＮＰＮである（Ｒｏｗｌａｎｄ，Ｓ．Ｊ．，１９３８．１７５．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＲｅｓｅａｒｃｈ，９（１），ｐｐ．３０－４６、及びＲｏｗｌａｎｄ，Ｓ．Ｊ．，１９３８．１７６）。ＮＣＮ及び総窒素（ＴＮ）については、ケルダール法によって求める。ＮＣＮは、ＳＰＮの沈殿後の濾液から求められる。

したがって、乳アレルゲンの場合、未変性の乳アレルゲンタンパク質の量は、総タンパク質のうちの血清タンパク質窒素（変性していないホエイタンパク質窒素）「ＳＰＮ」の割合として表すことができる。ＳＰＮ（総タンパク質中％）＝（（ＮＣＮ－ＮＰＮ）／（ＴＮ－ＮＰＮ））×１００。

本発明のいくつかの実施形態では、ケルダール窒素を使用して、未変性の食物アレルゲンの割合を求める。ケルダール窒素は、タンパク質の変性度を求める公知の方法である（Ｐａｒｒｉｓ，Ｎ．ａｎｄＢａｇｉｎｓｋｉ，Ｍ．Ａ．，１９９１．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，７４（１），ｐｐ．５８－６４）。

本発明のいくつかの実施形態では、乳タンパク質の少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％は未変性である。

食物アレルギーの予防
本発明は、乳児における食物アレルギー、特に乳タンパク質、卵タンパク質、小麦タンパク質、大豆タンパク質、ピーナッツタンパク質、種実類タンパク質、魚タンパク質、甲殻類タンパク質、貝類タンパク質及びゴマタンパク質に対するアレルギーの低減又は予防に使用するための、本明細書に記載の乳児用飲用組成物を提供する。

本発明はまた、有効量の本明細書に記載の乳児用飲用組成物を投与することによって、乳児における食物アレルギーを低減又は予防する方法を提供する。

いくつかの実施形態では、アレルギー反応は、特異的ＩｇＥ関連の免疫応答及び／又はＴ細胞依存性過敏性応答である。したがって、一部の実施形態では、アレルギーを低減又は予防することは、特異的ＩｇＥ関連の免疫応答及び／又はＴ細胞依存性過敏性応答を低減又は予防することを含む。

乳児用飲用組成物は、乳に対するアレルギーを予防又は低減するため、乳タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、卵に対するアレルギーを予防又は低減するため、卵タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、小麦に対するアレルギーを予防又は低減するため、小麦タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、大豆に対するアレルギーを予防又は低減するため、大豆タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、ピーナッツに対するアレルギーを予防又は低減するため、ピーナッツタンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、種実類に対するアレルギーを予防又は低減するため、種実類タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、魚に対するアレルギーを予防又は低減するため、魚のタンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、甲殻類に対するアレルギーを予防又は低減するため、甲殻類タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、貝類に対するアレルギーを予防又は低減するため、貝類タンパク質を含んでもよい。
乳児用飲用組成物は、ゴマに対するアレルギーを予防又は低減するため、ゴマタンパク質を含んでもよい。

一実施形態では、乳児における食物アレルギーの予防又は低減はまた、交差寛容（ｃｒｏｓｓ－ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）の誘導も含み、乳児用飲用組成物に含まれるアレルゲン以外の食物アレルゲンに対するアレルギーの発症を低減又は予防することができる。

本発明の組成物を投与する前に、当該食物アレルギーを乳児が発症するリスクを評価する工程を実施してもよい。この工程は、親族の皮膚に対する少量のアレルゲンの投与、及び／又は親族についての質問票を含んでもよい。例えば、食物アレルギーを有する親又は兄姉がいる乳児は、食物アレルギーを発症するリスクがより高い可能性があるので、当該食物アレルギーを予防又は治療するために、当該食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物を投与することができる。

プロセス
本発明による乳児用飲用組成物は、任意の好適な方法で調製することができる。例えば、組成物は、適切な分量の食物アレルゲンを一緒にブレンドし、所望によりアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラなどの１種以上の担体とブレンドして、この乾式ブレンドした混合物を水と混合して液体混合物を形成することにより調製することもできる。次いで、液体混合物を均質に撹拌する。次いで、温度を徐々に上昇させ、殺菌を行う。最終製品を粉末とする場合、次いで液体混合物を任意選択で噴霧乾燥する。組成物は、殺菌前又は殺菌後に均質化されてもよい。

一態様では、本発明は、乳児用飲用組成物の製造方法であって、
ｉ）２種以上の食物アレルゲンをブレンドして混合物を形成する工程であって、当該アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、工程と、
ｉｉ）当該混合物を均質化する工程と、
ｉｉｉ）当該混合物を殺菌する工程と、
ｉｖ）任意選択で、当該混合物を噴霧乾燥する工程と、を含み、
好ましくは、殺菌は、本明細書で論じた穏やかな殺菌である、方法を提供する。

好ましい実施形態では、殺菌は、６１．９℃～６５℃、好ましくは６２℃～６４℃の温度で行われ、好ましくは、当該殺菌は、少なくとも３０分間又は少なくとも３５分間行われる。一実施形態では、殺菌は、約６３℃で３０分間～３５分間行われる。

いくつかの実施形態では、液体混合物を均質化し、次いで殺菌する。他の実施形態では、液体混合物を殺菌し、次いで均質化する。

一態様では、本発明は、乳児用飲用組成物の製造方法であって、
ｉ）２種以上の食物アレルゲンをブレンドして混合物を形成する工程であって、当該アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、工程と、
ｉｉ）当該混合物を均質化する工程と、
ｉｉｉ）当該混合物を滅菌する工程と、
ｉｖ）任意選択で、当該混合物を噴霧乾燥する工程と、を含み、
好ましくは、滅菌は、本明細書で論じられるとおりである、方法を提供する。
好ましくは、乳児用飲用組成物が粉末形態である場合には、均質化された液体混合物を、乾燥、例えば噴霧乾燥する。

上記明細書で言及した全ての刊行物は、本明細書に参照により組み込まれる。本発明で論じられる方法、プロセス及び組成物の様々な改変及び変更は、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく、当業者には明白である。本発明は、特定の好ましい実施形態に関連して開示されているが、特許請求される本発明は、このような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。実際、当業者には自明であり、本発明を実施するために開示された様式の種々の改変は以下の特許請求の範囲の範囲内であることを意図している。

本発明の好ましい特徴及び実施形態を、非限定的な例によってこれより記述する。

実施例１．乳児用栄養補助食品
臨床試験を目的として乳児用飲用栄養補助食品を準備する。この実施例では、栄養補助食品は、乳タンパク質及び卵白タンパク質をアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ（Ａｌｆａｍｉｎｏ乳児用フォーミュラ（Ｎｅｓｔｌｅ））と組み合わせて含有する。

栄養補助食品組成物は（最終製品中水分３．１重量％に基づく）、
脱脂粉乳４３．２重量％、
Ａｌｆａｍｉｎｏ（アミノ酸ベースの低アレルゲン性乳児用フォーミュラ）３７．３重量％、
卵白粉末１６．４重量％である。

組成物の加工は、１２０／３０バールでの均質化、穏やかな殺菌を含む標準的な加工工程によって行われる。任意選択で、プロセスは噴霧乾燥を含み、再構成の準備が整った粉末組成物を提供することができる。

殺菌を、６３℃の保持温度で２１００秒間の保持時間にわたって行い、卵タンパク質があまり損傷を受けないことを確保する。限界値（ｃｒｉｔｉｃａｌｌｉｍｉｔ）（すなわち、最小保持温度）を６１．９℃に設定して、安全性を確保する。

実施例２．穏やかな殺菌
乳タンパク質を含有する栄養補助食品に対し、上記で定義した穏やかな殺菌を行った。変性度合いを、Ｒｏｗｌａｎｄ法を使用して測定した。

変性度合いを、総タンパク質のうちの血清タンパク質窒素（未変性のホエイタンパク質窒素）「ＳＰＮ」の割合＝（（ＮＣＮ－ＮＰＮ）／（ＴＮ－ＮＰＮ））×１００として表す。

ＮＣＮ＝非カゼイン窒素；ＮＰＮ＝非タンパク質窒素、ＴＮ＝全窒素である。
加熱処理前に、未変性の乳タンパク質の割合は４５％であった。
穏やかな殺菌後、未変性のタンパク質の割合は３６％に下がった。したがって、顕著な量の未変性乳タンパク質が残っていた。

実施例３．加熱処理のタンパク質分解に対する影響
未処理の脱脂粉乳（２４％の総全固形分）に、次の工程を行った：（ｉ）温精密濾過（５２℃で１４μｍのフィルタ）し、透過液を、直接蒸気注入（ＤＳＩ）によって８３℃で６秒間加熱処理し、続いて噴霧乾燥して粉末「プロトタイプＡ」を形成する工程、（ｉｉ）低温精密濾過（１５℃で１４μｍのフィルタ）し、透過液を、直接蒸気注入（ＤＳＩ）によって８３℃で６秒間加熱処理し、続いて噴霧乾燥して粉末「プロトタイプＢ」を形成する工程、（ｉｉｉ）６３℃で３５分間穏やかに殺菌（実施例１で規定のとおり）し、続いて「プロトタイプＣ」を噴霧乾燥する工程。

加熱処理サンプル１～１６（表１）の生（未加工）乳（９～１０％、ＴＳ）に、加熱処理前の均質化を行い又は行わずに、表１に記載されるように選択された加熱処理に供した。均質化した乳サンプル（１５０／３０バールで均質化）を噴霧乾燥して、最終乳粉末を得た。

Ｒｏｗｌａｎｄ法を使用して、プロトタイプＡ、プロトタイプＢ及びプロトタイプＣ、並びに加熱処理した乳サンプル（表１に示す加熱処理）の、タンパク質変性の度合いを測定した。変性の度合いを、実施例２と同様に総タンパク質のうちの血清タンパク質窒素（未変性のホエイタンパク質窒素）「ＳＰＮ」の割合として表す。変性率を、総タンパク質中の変性ホエイタンパク質の割合として表す。

未変性ホエイタンパク質（ＳＰＮ）％＝（（ＮＣＮ－ＮＰＮ）／ＴＮ）×１００
ホエイタンパク質の変性率（％）＝１００－［１００×ＳＰＮ］／［（ＴＮ－ＮＰＮ）×０．２］
［式中、［（ＴＮ－ＮＰＮ）×０．２］は、乳中のホエイ：カゼインの重量比を１：４としてのホエイタンパク質窒素の総量である］。
結果を図１に示す。

図１から、高温長時間処理（８０℃、９０℃／２０分）及びＵＨＴ処理が、最も高い度合いのホエイタンパク質変性をもたらしたことが見てとれる。低温殺菌乳サンプル、ＨＴＳＴ（高温短時間）殺菌乳サンプル及びプロトタイプＡ～Ｃの有する変性プロファイルは同様であった。

実施例４．免疫活性
実施例４の乳サンプルの免疫学的活性を、ヒト化ラットの好塩基球性白血病（ＲＢＬ）の脱顆粒アッセイ（ＢｉｏｃｅｒｏｓＨｏｌｄｉｎｇＢＶ）を使用して評価した。

高親和性のヒトＦｃεＲＩα鎖を発現しているＲＢＬ細胞を、抗ＢＬＧ－キメラ型ヒトＩｇＥ抗体（すなわち、Ｋｎｉｐｐｉｎｇ＆Ｓｉｍｏｎｓ，ＰＬｏＳＯＮＥ２０１４；９（８）：ｅ１０６０２５に記載されている、マウスＩｇＧ重鎖及び軽鎖可変領域をヒトＩｇＥ重鎖及び軽鎖定常領域と組み合わせたもの）のオリゴクローナルプールで感作させた後、濃度の異なる（０μｇ／ｍＬ、０．００３２μｇ／ｍＬ、０．０１６μｇ／ｍＬ、０．０８μｇ／ｍＬ、０．４μｇ／ｍＬ、２μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、１０００μｇ／ｍＬ、１００００μｇ／ｍＬのタンパク質）牛乳サンプル（ＢＬＧ含有）のいずれかに暴露した。細胞外β－ヘキソサミニダーゼ活性を測定することによってＲＢＬの脱顆粒を判定した。
結果を図２及び表２に示す。

「残存ＢＬＧ％／初期ＢＬＧ％」は、各乳サンプルの残存ＢＬＧ濃度（測定値）（μｇ／ｇタンパク質単位）を初期（理論値）ＢＬＧ濃度（μｇ／ｇタンパク質単位）で除算した比率を指す。初期（理論値）ＢＬＧ濃度の計算のため、乳中の総ホエイタンパク質のホエイ：カゼイン重量比＝１：４、及びＢＬＧ＝５０％と仮定した。

８０℃／２０分の加熱処理は、他の加熱処理と比較して残存するアレルゲン性が最も高く、ＨＴＳＴ殺菌及びプロトタイプＣでは残存しているアレルゲン性が非常に低いことが示された。生乳は、検出可能な残存β－Ｌｇアレルゲン性を全く示さなかった。

実施例５．免疫原性の維持
Ａ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ
実施例１の乳児用栄養補助食品「ＰＲＥＭＥＡ」を、ゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）により分析した。４℃、２５℃、３７℃で６ヶ月間保存した。ゲル電気泳動を、ＮｏｖｅｘＮｕＰＡＧＥ（登録商標）システム（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、製造業者によって提示されている方法プロトコルに従って実施した。分離ゲルには、プレキャストのＮｕＰＡＧＥ（登録商標）４～１２％ビス－トリスゲルをＭＥＳＳＤＳ泳動バッファと組み合わせて使用した。

結果を図３に示す。図３におけるバンド割り当て（バンド１～９）により、以下のタンパク質バンドを特定した。
卵白粉末
１．オボムシン（１００ｋＤａ未満）
２．コンアルブミン（７７．７ｋＤａ）
３．オボアルブミン（４４．５ｋＤａ）
４．オボムコイド（３０～４０ｋＤａ）
５．リゾチーム（１４．３ｋＤａ）
脱脂粉乳
６．血清アルブミン（６６ｋＤａ）
７．カゼイン（２８～３５ｋＤａ）
８．β－ラクトグロブリン（１８．８ｋＤａ）
９．α－ラクトアルブミン（１４．４ｋＤａ）

結論：卵及び牛乳に由来するタンパク質バンドがプロトタイプに見られる。これらの結果は、主要な乳ンパク質及び卵タンパク質（オボムコイド又はβ－ラクトグロブリンなどの最もアレルゲン性の高いものを含む）が、最終製品の製造加工によっては分解されないことを示している。プロトタイプの乳アレルゲン及び卵アレルゲンのバンド強度は、プロトタイプにおいてそれらの量が顕著であることを示している。

Ｂ．オボムコイドの定量
卵白は、２３種類の異なる糖タンパク質を含有する。これらのなかでも、オボムコイド（Ｇａｌｄ１）は、総卵白タンパク質の約１１％を構成しており、卵の主要なアレルゲンであることが示されている（１、２）。加工後に乳児用栄養補助食品中に存在するタンパク質の免疫原性を、使用する原材料のものと比較するために、オボムコイドを卵の代表的なアレルゲンとして定量した。

方法：
市販のＥＬＩＳＡキット（ＢｉｏＫｉｔｓＥｇｇＡｓｓａｙＫｉｔ；Ｎｅｏｇｅｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＵＳＡ），ｒｅｆ９０２０７２Ｔ）を製造元による使用説明に従って使用して、オボムコイドを検出及び定量した。このキットで使用されるポリクローナル抗体（個々のエピトープに関し、変性、多型、又は立体構造におけるの変化などのわずかな変化を示すタンパク質をアッセイする際、より顕著にロバストである）は、オボムコイド（Ｇａｌｄ１）を特異的に検出する。

プロトタイプの製造に使用した生の卵白材料、並びにプロトタイプを、異なる温度（４℃、２５℃及び３７℃）で６ヶ月間保存して分析した。次いで、プロトタイプで測定されたオボムコイドの量を、プロトタイプ中に存在する卵材料の割合％から逆算して、生の材料と最終製品との直接比較を可能にした。

結果：
卵白中のオボムコイド含有量は、２０５．９±２４．７ｍｇ／ｇタンパク質である。同様のオボムコイド含有量を、４℃、２５℃及び３７℃で保存したプロトタイプで定量した（それぞれ、１５８．３±４３．５ｍｇ／ｍＬ；１７５．８±４２．７ｍｇ／ｍＬ及び２２２．１±２０．９ｍｇ／ｍＬ）。

結論：
４℃、２５℃、及び３７℃で６ヶ月間保存した、卵白の生の材料と最終的な加工製品とには、免疫原性（抗オボムコイドポリクローナル抗体によって認識されるエピトープ）にあまり差異がないことが定量法により観察された。これらの結果は、サンプル中のオボムコイドが保存時に分解されなかったことを実証している。

実施例６．β－ラクトグロブリン及びオボアルブミンの定量
３通りの量の乳を１通りの量の卵白と混合することにより、生乳（未加工乳）と生の卵白との混合物のサンプルを３通り調製した。タンパク質含有量は、卵白タンパク質については１００ｇ／Ｌ、乳タンパク質については３３ｇ／Ｌであるとして計算した。サンプルを５５℃で５分間前処理した後、異なる条件で、すなわち（ｉ）６３℃で３０分間；（ｉｉ）７０℃で３分間；（ｉｉｉ）７０℃で２０分間、穏やかな殺菌を行った。サンプルはｐＨ６．７を有していた。

実施例１の乳児用栄養補助食品「ＰＲＥＭＥＡ」及び乳／卵白サンプル（ｉ）～（ｉｉｉ）のｐＨ６．７のサンプル１セットを、凝集タンパク質を除去するため超遠心分離（１００００ｇ／１時間）に供した。実施例５のゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）によるタンパク質分離、続いて、電気泳動バンドの染色強度をスキャンして濃度を測定するタンパク質定量によって、未変性のタンパク質及び可溶性変性タンパク質を定量した。

実施例１の乳児用栄養補助食品「ＰＲＥＭＥＡ」及び乳／卵白サンプル（ｉ）～（ｉｉｉ）の第２のサンプルセットを、ｐＨ４．６に酸性化し、続いて沈殿物（変性タンパク質及び凝集タンパク質）を除去するために１４０００ｇ／１０分で遠心分離した。未変性タンパク質の定量を上記のように行った。

β－ラクトグロブリン及びオボアルブミンの変性度合いの定量を、変性率（％）＝［１－（Ｉ_{ｐＨ４．６}／Ｉ_{ｐＨ６．７}）］［式中、Ｉ_{ｐＨ４．６}は未変性タンパク質の濃度であり、Ｉ_{ｐＨ６．７}は総タンパク質の濃度（未変性タンパク質＋可溶性変性タンパク質）である］として表す。
結果を表３、表４及び表５に示す。
乳／卵白タンパク質の変性

乳／卵白タンパク質の変性

Claims

異なる食物に由来する２種以上の食物アレルゲンを含む乳児用飲用組成物であって、前記食物アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、乳児用飲用組成物。
投与前に液体、好ましくは水で再構成するための、粉末である、請求項１に記載の乳児用飲用組成物。
レディー・トウ・ドリンクの形態である、請求項１に記載の乳児用飲用組成物。
前記組成物が、６１．９℃～６５℃、好ましくは６２℃～６４℃の温度での殺菌を経たものであり、好ましくは、前記殺菌は、少なくとも３０分間行われる、請求項１～３のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
熱滅菌を経たものである、請求項１～４のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
前記熱滅菌が、間接的超高温加熱処理、好ましくは１２５℃～１３５℃、又は１３０℃～１３４℃、又は１３１℃～１３３℃の温度での間接的超高温加熱処理であり、好ましくは、前記滅菌は、少なくとも３０秒間、又は少なくとも６０秒間行われる、あるいは前記熱滅菌が、直接的超高温加熱処理であり、好ましくは、１３６℃～１４０℃の温度で約１５～２５秒間、又は１４０℃～１４４℃の温度で約５～１０秒間、又は１５０℃～１５４℃の温度で約２～４秒間での直接的超高温加熱処理である、あるいは前記滅菌が、１５５℃～１７０℃の温度で１秒未満の超短時間滅菌（ＵＳＳ）加熱処理である、請求項５に記載の乳児用飲用組成物。
前記食物アレルゲンが、卵タンパク質、小麦タンパク質、大豆タンパク質、ピーナッツタンパク質、種実類タンパク質、魚タンパク質、甲殻類タンパク質、貝類タンパク質及びゴマタンパク質からなる群から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
前記食物アレルゲンのうちの３種以上、又は４種以上、又は５種以上、又は６種以上、又は７種以上、又は８種以上、又は９種以上、又は全てを含む、請求項７に記載の乳児用飲用組成物。
乳タンパク質及び卵タンパク質を含む、請求項７又は８に記載の乳児用飲用組成物。
０～１２ヶ月齢、６週齢～１２ヶ月齢、０～６ヶ月齢、６週齢～６ヶ月齢、０～４ヶ月齢、又は６週齢～４ヶ月齢の乳児に使用するための、請求項１～９のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
前記組成物中の前記食物アレルゲンの総量が、１食当たり０．５～５グラムであり、好ましくは、１食分量が１５～２５０ｍＬである、請求項１～１０のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
前記乳アレルゲンの少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％が未変性のものである、請求項１～１１のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
乳児において前記食物アレルゲンに対するアレルギーの低減又は予防に使用するための、請求項１～１２のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物。
請求項１～１３のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物の製造方法であって、
ｉ）２種以上の食物アレルゲンをブレンドして混合物を形成する工程であって、前記アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、工程と、
ｉｉ）前記混合物を均質化する工程と、
ｉｉｉ）前記混合物を殺菌する工程と、
ｉｖ）任意選択で、前記混合物を噴霧乾燥する工程と、を含み、
好ましくは、殺菌が、６１．９℃～６５℃、好ましくは６２℃～６４℃の温度で行われ、好ましくは、前記殺菌は、少なくとも３０分間又は少なくとも３５分間行われる、方法。
請求項１～１３のいずれか一項に記載の乳児用飲用組成物の製造方法であって、
ｉ）２種以上の食物アレルゲンをブレンドして混合物を形成する工程であって、前記アレルゲンのうちの１種が乳タンパク質である、工程と、
ｉｉ）前記混合物を均質化する工程と、
ｉｉｉ）前記混合物を滅菌する工程と、
ｉｖ）任意選択で、前記混合物を噴霧乾燥する工程と、を含み、
好ましくは、前記滅菌が、１２５℃～１３５℃、又は１３０℃～１３４℃、又は１３１℃～１３３℃の温度で、３０～８０秒間、又は６０～７５秒間の間接的ＵＨＴ加熱処理である、
あるいは、前記滅菌が、１３６℃～１４０℃の温度で約１５～２５秒、又は１４０℃～１４４℃の温度で約５～１０秒、又は１５０℃～１５４℃の温度で約２～４秒間での直接的ＵＨＴ加熱処理である、
あるいは、前記滅菌が、１５５℃～１７０℃の温度で１秒未満の超短時間滅菌（ＵＳＳ）加熱処理である、方法。