JP2022502010A - Cd3およびcd137に結合することができるが、同時には結合しない、抗原結合分子 - Google Patents
Cd3およびcd137に結合することができるが、同時には結合しない、抗原結合分子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2022502010A JP2022502010A JP2021512587A JP2021512587A JP2022502010A JP 2022502010 A JP2022502010 A JP 2022502010A JP 2021512587 A JP2021512587 A JP 2021512587A JP 2021512587 A JP2021512587 A JP 2021512587A JP 2022502010 A JP2022502010 A JP 2022502010A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amino acid
- seq
- acid sequence
- determining regions
- antigen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 346
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 346
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 345
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims abstract description 327
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 title claims abstract description 34
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 title claims abstract description 21
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 claims abstract 16
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 claims abstract 16
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 676
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 204
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 claims description 174
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 claims description 174
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 167
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 162
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 144
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 132
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 130
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 78
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 68
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 64
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 56
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 48
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 46
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 28
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 22
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 16
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 16
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 16
- 102000050327 human TNFRSF9 Human genes 0.000 claims description 13
- 239000007991 ACES buffer Substances 0.000 claims description 12
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 11
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 11
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 11
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 11
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 11
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 10
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 91
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 50
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract description 30
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 327
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 135
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 58
- -1 FcγRIa Proteins 0.000 description 56
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 41
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 41
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 41
- 102000010956 Glypican Human genes 0.000 description 40
- 108050001154 Glypican Proteins 0.000 description 40
- 108050007237 Glypican-3 Proteins 0.000 description 40
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 39
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 39
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 38
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 37
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 33
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 32
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 32
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 32
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 24
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 23
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 21
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 20
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 20
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 20
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 17
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 17
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 16
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 16
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 16
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 15
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 15
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 15
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 15
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 15
- 108010021472 Fc gamma receptor IIB Proteins 0.000 description 14
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 14
- 102100029205 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Human genes 0.000 description 14
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 14
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 13
- 230000004044 response Effects 0.000 description 13
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 12
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 12
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 11
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 11
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 11
- 230000008859 change Effects 0.000 description 11
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 description 10
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 10
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 10
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 10
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 9
- 102100029100 Hematopoietic prostaglandin D synthase Human genes 0.000 description 9
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 9
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 9
- 102100024598 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 10 Human genes 0.000 description 9
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 9
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 8
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 8
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 8
- 102100022203 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Human genes 0.000 description 8
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 8
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 8
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 8
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 7
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 7
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 7
- 108700012411 TNFSF10 Proteins 0.000 description 7
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 7
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 6
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000679903 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Proteins 0.000 description 6
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 6
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 6
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 6
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 6
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 6
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 6
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 6
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 6
- 238000003016 alphascreen Methods 0.000 description 6
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 6
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 6
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 6
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 6
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 229940116741 CD137 agonist Drugs 0.000 description 5
- 101000868215 Homo sapiens CD40 ligand Proteins 0.000 description 5
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 5
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 5
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 102100026890 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Human genes 0.000 description 5
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 5
- 102100040403 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Human genes 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 5
- 229960000419 catumaxomab Drugs 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 5
- 102000027596 immune receptors Human genes 0.000 description 5
- 108091008915 immune receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 4
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 4
- 102400001282 Atrial natriuretic peptide Human genes 0.000 description 4
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 4
- 238000012492 Biacore method Methods 0.000 description 4
- 102100023701 C-C motif chemokine 18 Human genes 0.000 description 4
- 102100032366 C-C motif chemokine 7 Human genes 0.000 description 4
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 4
- 102100025277 C-X-C motif chemokine 13 Human genes 0.000 description 4
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 4
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 4
- 102100020997 Fractalkine Human genes 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 description 4
- 101000858064 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 13 Proteins 0.000 description 4
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 4
- 101000798130 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11B Proteins 0.000 description 4
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 4
- 101000597785 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6B Proteins 0.000 description 4
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 4
- 102100039064 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 4
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 102100026894 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 description 4
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 102100036154 Platelet basic protein Human genes 0.000 description 4
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 4
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 4
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 4
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 4
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 4
- 102100024584 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12 Human genes 0.000 description 4
- 102100024587 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Human genes 0.000 description 4
- 102100032236 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11B Human genes 0.000 description 4
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 description 4
- 102100035284 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6B Human genes 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 4
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 4
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 4
- 150000003457 sulfones Chemical class 0.000 description 4
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 4
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 4
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 3
- 102100023702 C-C motif chemokine 13 Human genes 0.000 description 3
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 3
- 102100036846 C-C motif chemokine 21 Human genes 0.000 description 3
- 102100021933 C-C motif chemokine 25 Human genes 0.000 description 3
- 102100021936 C-C motif chemokine 27 Human genes 0.000 description 3
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 3
- 102100034871 C-C motif chemokine 8 Human genes 0.000 description 3
- 102100025279 C-X-C motif chemokine 11 Human genes 0.000 description 3
- 102100039398 C-X-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 3
- 102100036189 C-X-C motif chemokine 3 Human genes 0.000 description 3
- 102100036150 C-X-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 3
- 102100036153 C-X-C motif chemokine 6 Human genes 0.000 description 3
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 description 3
- 102100023126 Cell surface glycoprotein MUC18 Human genes 0.000 description 3
- 102100031111 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17 Human genes 0.000 description 3
- 102100037354 Ectodysplasin-A Human genes 0.000 description 3
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 3
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 3
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 description 3
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 3
- 108090000385 Fibroblast growth factor 7 Proteins 0.000 description 3
- 102000003972 Fibroblast growth factor 7 Human genes 0.000 description 3
- 102100034221 Growth-regulated alpha protein Human genes 0.000 description 3
- 102100035379 Growth/differentiation factor 5 Human genes 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 101000978371 Homo sapiens C-C motif chemokine 18 Proteins 0.000 description 3
- 101000713085 Homo sapiens C-C motif chemokine 21 Proteins 0.000 description 3
- 101000897486 Homo sapiens C-C motif chemokine 25 Proteins 0.000 description 3
- 101000889128 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 3
- 101000947193 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 3 Proteins 0.000 description 3
- 101000947186 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 3
- 101000623903 Homo sapiens Cell surface glycoprotein MUC18 Proteins 0.000 description 3
- 101000880080 Homo sapiens Ectodysplasin-A Proteins 0.000 description 3
- 101000764294 Homo sapiens Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 description 3
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 3
- 101000947178 Homo sapiens Platelet basic protein Proteins 0.000 description 3
- 101000830596 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Proteins 0.000 description 3
- 101000764263 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Proteins 0.000 description 3
- 101000610604 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Proteins 0.000 description 3
- 101000610602 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10C Proteins 0.000 description 3
- 101000610609 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10D Proteins 0.000 description 3
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 3
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 description 3
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 3
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 3
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 3
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 3
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 3
- 102100032818 Integrin alpha-4 Human genes 0.000 description 3
- 102100022337 Integrin alpha-V Human genes 0.000 description 3
- 108010041012 Integrin alpha4 Proteins 0.000 description 3
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 3
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 3
- 108010020950 Integrin beta3 Proteins 0.000 description 3
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 102100020880 Kit ligand Human genes 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 3
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 3
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 3
- 108090000630 Oncostatin M Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 102100030304 Platelet factor 4 Human genes 0.000 description 3
- 101710138747 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 3
- 108010039445 Stem Cell Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100021669 Stromal cell-derived factor 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 3
- 102100030859 Tissue factor Human genes 0.000 description 3
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 3
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 3
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- 102100024568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11 Human genes 0.000 description 3
- 101710097155 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12 Proteins 0.000 description 3
- 102100032100 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8 Human genes 0.000 description 3
- 102100040113 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Human genes 0.000 description 3
- 102100040112 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Human genes 0.000 description 3
- 102100040115 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10C Human genes 0.000 description 3
- 102100040110 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10D Human genes 0.000 description 3
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 3
- 102100033725 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 16 Human genes 0.000 description 3
- 102100033726 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Human genes 0.000 description 3
- 102100033760 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 19 Human genes 0.000 description 3
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 3
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 3
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 3
- 230000009827 complement-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 101150026046 iga gene Proteins 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000000893 inhibin Substances 0.000 description 3
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 3
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 2
- 108050009514 Antigen peptide transporter 1 Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CJLHTKGWEUGORV-UHFFFAOYSA-N Artemin Chemical compound C1CC2(C)C(O)CCC(=C)C2(O)C2C1C(C)C(=O)O2 CJLHTKGWEUGORV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022718 Atypical chemokine receptor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 description 2
- PCLCDPVEEFVAAQ-UHFFFAOYSA-N BCA 1 Chemical compound CC(CO)CCCC(C)C1=CCC(C)(O)C1CC2=C(O)C(O)CCC2=O PCLCDPVEEFVAAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 2
- 108010049951 Bone Morphogenetic Protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 108010049870 Bone Morphogenetic Protein 7 Proteins 0.000 description 2
- 102100024504 Bone morphogenetic protein 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100022544 Bone morphogenetic protein 7 Human genes 0.000 description 2
- 102100022545 Bone morphogenetic protein 8B Human genes 0.000 description 2
- 101710112613 C-C motif chemokine 13 Proteins 0.000 description 2
- 102100023705 C-C motif chemokine 14 Human genes 0.000 description 2
- 102100023703 C-C motif chemokine 15 Human genes 0.000 description 2
- 102100023700 C-C motif chemokine 16 Human genes 0.000 description 2
- 102100023698 C-C motif chemokine 17 Human genes 0.000 description 2
- 102100036842 C-C motif chemokine 19 Human genes 0.000 description 2
- 102100036848 C-C motif chemokine 20 Human genes 0.000 description 2
- 102100036850 C-C motif chemokine 23 Human genes 0.000 description 2
- 102100036849 C-C motif chemokine 24 Human genes 0.000 description 2
- 101710112538 C-C motif chemokine 27 Proteins 0.000 description 2
- 102100021942 C-C motif chemokine 28 Human genes 0.000 description 2
- 101710155834 C-C motif chemokine 7 Proteins 0.000 description 2
- 101710155833 C-C motif chemokine 8 Proteins 0.000 description 2
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 2
- 101710098272 C-X-C motif chemokine 11 Proteins 0.000 description 2
- 102100025250 C-X-C motif chemokine 14 Human genes 0.000 description 2
- 102100039396 C-X-C motif chemokine 16 Human genes 0.000 description 2
- 101710085504 C-X-C motif chemokine 6 Proteins 0.000 description 2
- 102100036170 C-X-C motif chemokine 9 Human genes 0.000 description 2
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 2
- 229940122738 CD3 agonist Drugs 0.000 description 2
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 2
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 2
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102100028892 Cardiotrophin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010059081 Cathepsin A Proteins 0.000 description 2
- 102000005572 Cathepsin A Human genes 0.000 description 2
- 102100024940 Cathepsin K Human genes 0.000 description 2
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 2
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 2
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 2
- 108010078239 Chemokine CX3CL1 Proteins 0.000 description 2
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 2
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100037241 Endoglin Human genes 0.000 description 2
- 102100038083 Endosialin Human genes 0.000 description 2
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 2
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 2
- 108090001047 Fibroblast growth factor 10 Proteins 0.000 description 2
- 102000004864 Fibroblast growth factor 10 Human genes 0.000 description 2
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108090000368 Fibroblast growth factor 8 Proteins 0.000 description 2
- 102100028461 Frizzled-9 Human genes 0.000 description 2
- 101710115997 Gamma-tubulin complex component 2 Proteins 0.000 description 2
- 108010090254 Growth Differentiation Factor 5 Proteins 0.000 description 2
- 102100040896 Growth/differentiation factor 15 Human genes 0.000 description 2
- 102100035368 Growth/differentiation factor 6 Human genes 0.000 description 2
- 102100039939 Growth/differentiation factor 8 Human genes 0.000 description 2
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102100024025 Heparanase Human genes 0.000 description 2
- 101000678892 Homo sapiens Atypical chemokine receptor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000978381 Homo sapiens C-C motif chemokine 14 Proteins 0.000 description 2
- 101000978376 Homo sapiens C-C motif chemokine 15 Proteins 0.000 description 2
- 101000978375 Homo sapiens C-C motif chemokine 16 Proteins 0.000 description 2
- 101000978362 Homo sapiens C-C motif chemokine 17 Proteins 0.000 description 2
- 101000897480 Homo sapiens C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000713081 Homo sapiens C-C motif chemokine 23 Proteins 0.000 description 2
- 101000897477 Homo sapiens C-C motif chemokine 28 Proteins 0.000 description 2
- 101000797758 Homo sapiens C-C motif chemokine 7 Proteins 0.000 description 2
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 2
- 101000858068 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 14 Proteins 0.000 description 2
- 101000889133 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 16 Proteins 0.000 description 2
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000914324 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Proteins 0.000 description 2
- 101000856395 Homo sapiens Cullin-9 Proteins 0.000 description 2
- 101000908391 Homo sapiens Dipeptidyl peptidase 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000777461 Homo sapiens Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17 Proteins 0.000 description 2
- 101000881679 Homo sapiens Endoglin Proteins 0.000 description 2
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 2
- 101000854520 Homo sapiens Fractalkine Proteins 0.000 description 2
- 101001061405 Homo sapiens Frizzled-9 Proteins 0.000 description 2
- 101001069921 Homo sapiens Growth-regulated alpha protein Proteins 0.000 description 2
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 2
- 101000973997 Homo sapiens Nucleosome assembly protein 1-like 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000595923 Homo sapiens Placenta growth factor Proteins 0.000 description 2
- 101000582950 Homo sapiens Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000914496 Homo sapiens T-cell antigen CD7 Proteins 0.000 description 2
- 101100369992 Homo sapiens TNFSF10 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- 101000830565 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 10 Proteins 0.000 description 2
- 101000851434 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 2
- 101000597779 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18 Proteins 0.000 description 2
- 101000638255 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8 Proteins 0.000 description 2
- 101000610605 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Proteins 0.000 description 2
- 101000648505 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A Proteins 0.000 description 2
- 101000648507 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Proteins 0.000 description 2
- 101000801254 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 16 Proteins 0.000 description 2
- 101000801227 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 19 Proteins 0.000 description 2
- 101000801228 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 2
- 101000801232 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 2
- 101000679921 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 21 Proteins 0.000 description 2
- 101000679851 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000894590 Homo sapiens Uncharacterized protein C20orf85 Proteins 0.000 description 2
- 102000009438 IgE Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 2
- 102100025323 Integrin alpha-1 Human genes 0.000 description 2
- 102100033011 Integrin beta-6 Human genes 0.000 description 2
- 102000012355 Integrin beta1 Human genes 0.000 description 2
- 108010022222 Integrin beta1 Proteins 0.000 description 2
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100040019 Interferon alpha-1/13 Human genes 0.000 description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 108010017531 Interleukin-16 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000004554 Interleukin-17 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102000004527 Interleukin-21 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038452 Interleukin-3 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000010790 Interleukin-3 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102100021596 Interleukin-31 Human genes 0.000 description 2
- 101710181613 Interleukin-31 Proteins 0.000 description 2
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102100039897 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-L L-tartrate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-L 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102100039373 Membrane cofactor protein Human genes 0.000 description 2
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 2
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 102100023174 Methionine aminopeptidase 2 Human genes 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 108010056852 Myostatin Proteins 0.000 description 2
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 2
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 2
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 2
- 108090000742 Neurotrophin 3 Proteins 0.000 description 2
- 102100029268 Neurotrophin-3 Human genes 0.000 description 2
- 102000003683 Neurotrophin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000099 Neurotrophin-4 Proteins 0.000 description 2
- 108010077641 Nogo Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 102100031942 Oncostatin-M Human genes 0.000 description 2
- 102100040557 Osteopontin Human genes 0.000 description 2
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 description 2
- 102100032543 Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase and dual-specificity protein phosphatase PTEN Human genes 0.000 description 2
- 102100035194 Placenta growth factor Human genes 0.000 description 2
- 102100022661 Pro-neuregulin-1, membrane-bound isoform Human genes 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102100038955 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Human genes 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108010038036 Receptor Activator of Nuclear Factor-kappa B Proteins 0.000 description 2
- 102000010498 Receptor Activator of Nuclear Factor-kappa B Human genes 0.000 description 2
- 102000004278 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108090000873 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 101710088580 Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100027208 T-cell antigen CD7 Human genes 0.000 description 2
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 2
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 2
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 2
- 108050006955 Tissue-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 2
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 2
- 102400001320 Transforming growth factor alpha Human genes 0.000 description 2
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 2
- 101710097161 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11 Proteins 0.000 description 2
- 102100024585 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13 Human genes 0.000 description 2
- 101710181056 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 2
- 102100024586 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 14 Human genes 0.000 description 2
- 102100035283 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18 Human genes 0.000 description 2
- 102100031988 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Human genes 0.000 description 2
- 102100032101 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Human genes 0.000 description 2
- 102100028786 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A Human genes 0.000 description 2
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 description 2
- 102100022205 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 21 Human genes 0.000 description 2
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100021442 Uncharacterized protein C20orf85 Human genes 0.000 description 2
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 2
- 108010053100 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-3 Proteins 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102100039037 Vascular endothelial growth factor A Human genes 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 108010041776 cardiotrophin 1 Proteins 0.000 description 2
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 2
- BFPSDSIWYFKGBC-UHFFFAOYSA-N chlorotrianisene Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(Cl)=C(C=1C=CC(OC)=CC=1)C1=CC=C(OC)C=C1 BFPSDSIWYFKGBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 102000006815 folate receptor Human genes 0.000 description 2
- 108020005243 folate receptor Proteins 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 2
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 2
- 108010021309 integrin beta6 Proteins 0.000 description 2
- 238000012482 interaction analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 2
- AEUKDPKXTPNBNY-XEYRWQBLSA-N mcp 2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 AEUKDPKXTPNBNY-XEYRWQBLSA-N 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 150000003668 tyrosines Chemical group 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 2
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 2
- ARLKVQYMFRECLV-JSGCOSHPSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanamide Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)=CNC2=C1 ARLKVQYMFRECLV-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- PXGPLTODNUVGFL-BRIYLRKRSA-N (E,Z)-(1R,2R,3R,5S)-7-(3,5-Dihydroxy-2-((3S)-(3-hydroxy-1-octenyl))cyclopentyl)-5-heptenoic acid Chemical compound CCCCC[C@H](O)C=C[C@H]1[C@H](O)C[C@H](O)[C@@H]1CC=CCCCC(O)=O PXGPLTODNUVGFL-BRIYLRKRSA-N 0.000 description 1
- PJOHVEQSYPOERL-SHEAVXILSA-N (e)-n-[(4r,4as,7ar,12br)-3-(cyclopropylmethyl)-9-hydroxy-7-oxo-2,4,5,6,7a,13-hexahydro-1h-4,12-methanobenzofuro[3,2-e]isoquinoline-4a-yl]-3-(4-methylphenyl)prop-2-enamide Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1\C=C\C(=O)N[C@]1(CCC(=O)[C@@H]2O3)[C@H]4CC5=CC=C(O)C3=C5[C@]12CCN4CC1CC1 PJOHVEQSYPOERL-SHEAVXILSA-N 0.000 description 1
- JRRDISHSXWGFRF-UHFFFAOYSA-N 1-[2-(2-ethoxyethoxy)ethoxy]-2-methoxyethane Chemical compound CCOCCOCCOCCOC JRRDISHSXWGFRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 2-[benzyl-(4-methoxyphenyl)sulfonylamino]-n-hydroxy-4-methylpentanamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1S(=O)(=O)N(C(CC(C)C)C(=O)NO)CC1=CC=CC=C1 VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 102100021834 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010082808 4-1BB Ligand Proteins 0.000 description 1
- AVPYQKSLYISFPO-UHFFFAOYSA-N 4-chlorobenzaldehyde Chemical compound ClC1=CC=C(C=O)C=C1 AVPYQKSLYISFPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 description 1
- 101710163881 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical group OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KFGOFTHODYBSGM-IJCBKZNRSA-N 6-Keto-prostaglandin F1a Chemical compound CCCCC[C@H](O)C=C[C@H]1[C@H](O)C[C@H](O)[C@@H]1CC(=O)CCCCC(O)=O KFGOFTHODYBSGM-IJCBKZNRSA-N 0.000 description 1
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 8-Oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2NC(=O)N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 9-(5-phosphoribofuranosyl)-6-mercaptopurine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC=NC2=S)=C2N=C1 ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102100027400 A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4 Human genes 0.000 description 1
- 102000029791 ADAM Human genes 0.000 description 1
- 108091022885 ADAM Proteins 0.000 description 1
- 108091007504 ADAM10 Proteins 0.000 description 1
- 108091007507 ADAM12 Proteins 0.000 description 1
- 108091007505 ADAM17 Proteins 0.000 description 1
- 108091022879 ADAMTS Proteins 0.000 description 1
- 102000029750 ADAMTS Human genes 0.000 description 1
- 108091005664 ADAMTS4 Proteins 0.000 description 1
- 102000051389 ADAMTS5 Human genes 0.000 description 1
- 108091005663 ADAMTS5 Proteins 0.000 description 1
- 101150007969 ADORA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010027122 ADP-ribosyl Cyclase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000018667 ADP-ribosyl Cyclase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033793 ALK tyrosine kinase receptor Human genes 0.000 description 1
- 101100192359 Acinetobacter johnsonii ptk gene Proteins 0.000 description 1
- 108010075348 Activated-Leukocyte Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 1
- 102100034111 Activin receptor type-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100034134 Activin receptor type-1B Human genes 0.000 description 1
- 101710173011 Activin receptor type-1B Proteins 0.000 description 1
- 102100034135 Activin receptor type-1C Human genes 0.000 description 1
- 101710173005 Activin receptor type-1C Proteins 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Natural products C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010054404 Adenylyl-sulfate kinase Proteins 0.000 description 1
- 102100040149 Adenylyl-sulfate kinase Human genes 0.000 description 1
- 102100024439 Adhesion G protein-coupled receptor A2 Human genes 0.000 description 1
- 108010076365 Adiponectin Proteins 0.000 description 1
- 102100031786 Adiponectin Human genes 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102100025677 Alkaline phosphatase, germ cell type Human genes 0.000 description 1
- 102100035248 Alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100034452 Alternative prion protein Human genes 0.000 description 1
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004881 Angiotensinogen Human genes 0.000 description 1
- 108090001067 Angiotensinogen Proteins 0.000 description 1
- 102100031323 Anthrax toxin receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100021253 Antileukoproteinase Human genes 0.000 description 1
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 description 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 102100030949 Apelin receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 description 1
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 description 1
- 108010062544 Apoptotic Protease-Activating Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034524 Apoptotic protease-activating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026376 Artemin Human genes 0.000 description 1
- 101710205806 Artemin Proteins 0.000 description 1
- 101000605172 Aspergillus niger (strain CBS 513.88 / FGSC A1513) Probable endopolygalacturonase E Proteins 0.000 description 1
- 101000605171 Aspergillus niger Endopolygalacturonase E Proteins 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 101710187595 B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 101150033765 BAG1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091007065 BIRCs Proteins 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100021676 Baculoviral IAP repeat-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100028239 Basal cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 108010064528 Basigin Proteins 0.000 description 1
- 102000015279 Basigin Human genes 0.000 description 1
- 102100032412 Basigin Human genes 0.000 description 1
- 102100032305 Bcl-2 homologous antagonist/killer Human genes 0.000 description 1
- 108010081589 Becaplermin Proteins 0.000 description 1
- 102100027314 Beta-2-microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 102100025142 Beta-microseminoprotein Human genes 0.000 description 1
- 102100021257 Beta-secretase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010049931 Bone Morphogenetic Protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010049955 Bone Morphogenetic Protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 108010049976 Bone Morphogenetic Protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 108010049974 Bone Morphogenetic Protein 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100037086 Bone marrow stromal antigen 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100024506 Bone morphogenetic protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100024505 Bone morphogenetic protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100022526 Bone morphogenetic protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100022525 Bone morphogenetic protein 6 Human genes 0.000 description 1
- 101710117973 Bone morphogenetic protein 8A Proteins 0.000 description 1
- 102100025423 Bone morphogenetic protein receptor type-1A Human genes 0.000 description 1
- 101710120270 Bone morphogenetic protein receptor type-1A Proteins 0.000 description 1
- 102100025422 Bone morphogenetic protein receptor type-2 Human genes 0.000 description 1
- 108050008407 Bone morphogenetic protein receptor type-2 Proteins 0.000 description 1
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 description 1
- 101000941281 Bos taurus Gastric triacylglycerol lipase Proteins 0.000 description 1
- 101001069912 Bos taurus Growth-regulated protein homolog gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 102100031172 C-C chemokine receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710149814 C-C chemokine receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100031151 C-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710149815 C-C chemokine receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024167 C-C chemokine receptor type 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710149862 C-C chemokine receptor type 3 Proteins 0.000 description 1
- 101710149863 C-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100035875 C-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710149870 C-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 description 1
- 102100036305 C-C chemokine receptor type 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100025074 C-C chemokine receptor-like 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036841 C-C motif chemokine 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710112622 C-C motif chemokine 19 Proteins 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100021935 C-C motif chemokine 26 Human genes 0.000 description 1
- 102100036166 C-X-C chemokine receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100028989 C-X-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100028990 C-X-C chemokine receptor type 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100031658 C-X-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100025618 C-X-C chemokine receptor type 6 Human genes 0.000 description 1
- 101710085500 C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 1
- 102100032528 C-type lectin domain family 11 member A Human genes 0.000 description 1
- 108010008629 CA-125 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000007269 CA-125 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108091005932 CCKBR Proteins 0.000 description 1
- 108700012434 CCL3 Proteins 0.000 description 1
- 101150049756 CCL6 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150011672 CCL9 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100031168 CCN family member 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100032976 CCR4-NOT transcription complex subunit 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100024210 CD166 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010059108 CD18 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102100038077 CD226 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010046080 CD27 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010084313 CD58 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 108090000835 CX3C Chemokine Receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100039196 CX3C chemokine receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100036364 Cadherin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036360 Cadherin-3 Human genes 0.000 description 1
- 101100381481 Caenorhabditis elegans baz-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100123850 Caenorhabditis elegans her-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100289995 Caenorhabditis elegans mac-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100504320 Caenorhabditis elegans mcp-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102400000113 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 108010078311 Calcitonin Gene-Related Peptide Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 102000003902 Cathepsin C Human genes 0.000 description 1
- 108090000267 Cathepsin C Proteins 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 102000004178 Cathepsin E Human genes 0.000 description 1
- 108090000611 Cathepsin E Proteins 0.000 description 1
- 108090000619 Cathepsin H Proteins 0.000 description 1
- 108090000624 Cathepsin L Proteins 0.000 description 1
- 102400001321 Cathepsin L Human genes 0.000 description 1
- 102100026540 Cathepsin L2 Human genes 0.000 description 1
- 101710177066 Cathepsin O Proteins 0.000 description 1
- 108090000613 Cathepsin S Proteins 0.000 description 1
- 102100035654 Cathepsin S Human genes 0.000 description 1
- 102100026657 Cathepsin Z Human genes 0.000 description 1
- 108010061117 Cathepsin Z Proteins 0.000 description 1
- 101150075117 Ccl12 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 1
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010082155 Chemokine CCL18 Proteins 0.000 description 1
- 108010082161 Chemokine CCL19 Proteins 0.000 description 1
- 102000003805 Chemokine CCL19 Human genes 0.000 description 1
- 108010083700 Chemokine CCL20 Proteins 0.000 description 1
- 108010083647 Chemokine CCL24 Proteins 0.000 description 1
- 102000000013 Chemokine CCL3 Human genes 0.000 description 1
- 108010055165 Chemokine CCL4 Proteins 0.000 description 1
- 102000001326 Chemokine CCL4 Human genes 0.000 description 1
- 102000016950 Chemokine CXCL1 Human genes 0.000 description 1
- 108010014419 Chemokine CXCL1 Proteins 0.000 description 1
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100021809 Chorionic somatomammotropin hormone 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 101000862089 Clarkia lewisii Glucose-6-phosphate isomerase, cytosolic 1A Proteins 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000193155 Clostridium botulinum Species 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- 108010048623 Collagen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100027995 Collagenase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108050005238 Collagenase 3 Proteins 0.000 description 1
- 108700040183 Complement C1 Inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 102000055157 Complement C1 Inhibitor Human genes 0.000 description 1
- 108010078546 Complement C5a Proteins 0.000 description 1
- 102100025680 Complement decay-accelerating factor Human genes 0.000 description 1
- 102100035436 Complement factor D Human genes 0.000 description 1
- 108090000059 Complement factor D Proteins 0.000 description 1
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 1
- 102000012192 Cystatin C Human genes 0.000 description 1
- 108010061642 Cystatin C Proteins 0.000 description 1
- 108010079245 Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Proteins 0.000 description 1
- 206010050685 Cytokine storm Diseases 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010037897 DC-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin Proteins 0.000 description 1
- 101150082208 DIABLO gene Proteins 0.000 description 1
- 102100033215 DNA nucleotidylexotransferase Human genes 0.000 description 1
- 102100035619 DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase Human genes 0.000 description 1
- 102100027700 DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA2 Human genes 0.000 description 1
- 101100203200 Danio rerio shha gene Proteins 0.000 description 1
- 101100317380 Danio rerio wnt4a gene Proteins 0.000 description 1
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 102100033189 Diablo IAP-binding mitochondrial protein Human genes 0.000 description 1
- 102100030074 Dickkopf-related protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710099518 Dickkopf-related protein 1 Proteins 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100029921 Dipeptidyl peptidase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710087078 Dipeptidyl peptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100039673 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10 Human genes 0.000 description 1
- 102100031112 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12 Human genes 0.000 description 1
- 102100031113 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 15 Human genes 0.000 description 1
- 102100024364 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100024361 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9 Human genes 0.000 description 1
- 101100017049 Drosophila melanogaster Hira gene Proteins 0.000 description 1
- 101000708615 Drosophila melanogaster Protein smoothened Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 1
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 1
- 102000012545 EGF-like domains Human genes 0.000 description 1
- 108050002150 EGF-like domains Proteins 0.000 description 1
- 108010059397 ENA-VASP proteins Proteins 0.000 description 1
- 101150039808 Egfr gene Proteins 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 102100040897 Embryonic growth/differentiation factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710144543 Endosialin Proteins 0.000 description 1
- 102400000686 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101800004490 Endothelin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101710181478 Envelope glycoprotein GP350 Proteins 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 108010055196 EphA2 Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100031983 Ephrin type-B receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 241000402754 Erythranthe moschata Species 0.000 description 1
- 101001039702 Escherichia coli (strain K12) Methyl-accepting chemotaxis protein I Proteins 0.000 description 1
- 101000617478 Escherichia coli (strain K12) PTS system fructose-like EIIA component Proteins 0.000 description 1
- 101100172469 Escherichia coli (strain K12) envZ gene Proteins 0.000 description 1
- 101000759376 Escherichia phage Mu Tail sheath protein Proteins 0.000 description 1
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 description 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 1
- 108010021470 Fc gamma receptor IIC Proteins 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100031706 Fibroblast growth factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100031734 Fibroblast growth factor 19 Human genes 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000378 Fibroblast growth factor 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100028043 Fibroblast growth factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100037680 Fibroblast growth factor 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 108090000270 Ficain Proteins 0.000 description 1
- 108090000652 Flap endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004150 Flap endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 102100021259 Frizzled-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100021261 Frizzled-10 Human genes 0.000 description 1
- 102100021265 Frizzled-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100039820 Frizzled-4 Human genes 0.000 description 1
- 102100039818 Frizzled-5 Human genes 0.000 description 1
- 102100039799 Frizzled-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100039676 Frizzled-7 Human genes 0.000 description 1
- 102100028466 Frizzled-8 Human genes 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004878 Gelsolin Human genes 0.000 description 1
- 108090001064 Gelsolin Proteins 0.000 description 1
- 101000930822 Giardia intestinalis Dipeptidyl-peptidase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100036769 Girdin Human genes 0.000 description 1
- 101710199302 Girdin Proteins 0.000 description 1
- 102000034615 Glial cell line-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108091010837 Glial cell line-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039289 Glial fibrillary acidic protein Human genes 0.000 description 1
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 108010063919 Glucagon Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100040890 Glucagon receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010086246 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100032882 Glucagon-like peptide 1 receptor Human genes 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000017357 Glycoprotein hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050005395 Glycoprotein hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010054017 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 102100039622 Granulocyte colony-stimulating factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000016355 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010092372 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 108010090296 Growth Differentiation Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010041834 Growth Differentiation Factor 15 Proteins 0.000 description 1
- 108010090293 Growth Differentiation Factor 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010090250 Growth Differentiation Factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000004858 Growth differentiation factor-9 Human genes 0.000 description 1
- 108090001086 Growth differentiation factor-9 Proteins 0.000 description 1
- 101710194460 Growth/differentiation factor 15 Proteins 0.000 description 1
- 102100035364 Growth/differentiation factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710204282 Growth/differentiation factor 5 Proteins 0.000 description 1
- 101710204281 Growth/differentiation factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100035363 Growth/differentiation factor 7 Human genes 0.000 description 1
- 101710204283 Growth/differentiation factor 7 Proteins 0.000 description 1
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 1
- 102100030595 HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Human genes 0.000 description 1
- 101000691214 Haloarcula marismortui (strain ATCC 43049 / DSM 3752 / JCM 8966 / VKM B-1809) 50S ribosomal protein L44e Proteins 0.000 description 1
- 102100034051 Heat shock protein HSP 90-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 108090000481 Heparin Cofactor II Proteins 0.000 description 1
- 102100030500 Heparin cofactor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102400001369 Heparin-binding EGF-like growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800001649 Heparin-binding EGF-like growth factor Proteins 0.000 description 1
- 108010073141 Hepatitis C virus glycoprotein E2 Proteins 0.000 description 1
- 102100031465 Hepatocyte growth factor activator Human genes 0.000 description 1
- 101710085796 Hepatocyte growth factor activator Proteins 0.000 description 1
- 101710086591 Hepatocyte growth factor-like protein Proteins 0.000 description 1
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101710121996 Hexon protein p72 Proteins 0.000 description 1
- 101000728693 Homo sapiens 28S ribosomal protein S11, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000779641 Homo sapiens ALK tyrosine kinase receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000799140 Homo sapiens Activin receptor type-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000833358 Homo sapiens Adhesion G protein-coupled receptor A2 Proteins 0.000 description 1
- 101000574440 Homo sapiens Alkaline phosphatase, germ cell type Proteins 0.000 description 1
- 101001022185 Homo sapiens Alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 1
- 101000796095 Homo sapiens Anthrax toxin receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000615334 Homo sapiens Antileukoproteinase Proteins 0.000 description 1
- 101000793362 Homo sapiens Apelin receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101100325746 Homo sapiens BAK1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000935638 Homo sapiens Basal cell adhesion molecule Proteins 0.000 description 1
- 101000798441 Homo sapiens Basigin Proteins 0.000 description 1
- 101000894895 Homo sapiens Beta-secretase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000740785 Homo sapiens Bone marrow stromal antigen 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000899368 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 8B Proteins 0.000 description 1
- 101000766294 Homo sapiens Branched-chain-amino-acid aminotransferase, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101000777558 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 10 Proteins 0.000 description 1
- 101000716068 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000716063 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000716070 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000978379 Homo sapiens C-C motif chemokine 13 Proteins 0.000 description 1
- 101000713106 Homo sapiens C-C motif chemokine 19 Proteins 0.000 description 1
- 101000713099 Homo sapiens C-C motif chemokine 20 Proteins 0.000 description 1
- 101000713078 Homo sapiens C-C motif chemokine 24 Proteins 0.000 description 1
- 101000897493 Homo sapiens C-C motif chemokine 26 Proteins 0.000 description 1
- 101000897494 Homo sapiens C-C motif chemokine 27 Proteins 0.000 description 1
- 101000797762 Homo sapiens C-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000946794 Homo sapiens C-C motif chemokine 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000947174 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000916050 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000922405 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000856683 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000858060 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000947177 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000947172 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000942297 Homo sapiens C-type lectin domain family 11 member A Proteins 0.000 description 1
- 101100165850 Homo sapiens CA9 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000914211 Homo sapiens CASP8 and FADD-like apoptosis regulator Proteins 0.000 description 1
- 101000777550 Homo sapiens CCN family member 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000884298 Homo sapiens CD226 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000714537 Homo sapiens Cadherin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000714553 Homo sapiens Cadherin-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000761509 Homo sapiens Cathepsin K Proteins 0.000 description 1
- 101000983577 Homo sapiens Cathepsin L2 Proteins 0.000 description 1
- 101000910979 Homo sapiens Cathepsin Z Proteins 0.000 description 1
- 101000895818 Homo sapiens Chorionic somatomammotropin hormone 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000956228 Homo sapiens Chorionic somatomammotropin hormone 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000856022 Homo sapiens Complement decay-accelerating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001137256 Homo sapiens DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase Proteins 0.000 description 1
- 101000650600 Homo sapiens DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA2 Proteins 0.000 description 1
- 101000777455 Homo sapiens Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 15 Proteins 0.000 description 1
- 101000832767 Homo sapiens Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000832769 Homo sapiens Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9 Proteins 0.000 description 1
- 101001010541 Homo sapiens Electron transfer flavoprotein subunit alpha, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101000884275 Homo sapiens Endosialin Proteins 0.000 description 1
- 101000978392 Homo sapiens Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 101000846394 Homo sapiens Fibroblast growth factor 19 Proteins 0.000 description 1
- 101000819438 Homo sapiens Frizzled-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000819451 Homo sapiens Frizzled-10 Proteins 0.000 description 1
- 101000819477 Homo sapiens Frizzled-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000819458 Homo sapiens Frizzled-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000885581 Homo sapiens Frizzled-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000885585 Homo sapiens Frizzled-5 Proteins 0.000 description 1
- 101000885673 Homo sapiens Frizzled-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000885797 Homo sapiens Frizzled-7 Proteins 0.000 description 1
- 101001061408 Homo sapiens Frizzled-8 Proteins 0.000 description 1
- 101000876511 Homo sapiens General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit XPD Proteins 0.000 description 1
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101001082627 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Proteins 0.000 description 1
- 101001016865 Homo sapiens Heat shock protein HSP 90-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101001045123 Homo sapiens Hyccin Proteins 0.000 description 1
- 101000878602 Homo sapiens Immunoglobulin alpha Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000998953 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 1-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001008255 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 1D-8 Proteins 0.000 description 1
- 101001047628 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 2-29 Proteins 0.000 description 1
- 101001008321 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 2D-26 Proteins 0.000 description 1
- 101001047619 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 3-20 Proteins 0.000 description 1
- 101001008263 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 3D-15 Proteins 0.000 description 1
- 101001034652 Homo sapiens Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001076292 Homo sapiens Insulin-like growth factor II Proteins 0.000 description 1
- 101001078158 Homo sapiens Integrin alpha-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001078133 Homo sapiens Integrin alpha-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 1
- 101001046677 Homo sapiens Integrin alpha-V Proteins 0.000 description 1
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000935040 Homo sapiens Integrin beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001015004 Homo sapiens Integrin beta-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001002634 Homo sapiens Interleukin-1 alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000960954 Homo sapiens Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001055222 Homo sapiens Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 101001034314 Homo sapiens Lactadherin Proteins 0.000 description 1
- 101000777628 Homo sapiens Leukocyte antigen CD37 Proteins 0.000 description 1
- 101000945751 Homo sapiens Leukocyte cell-derived chemotaxin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000764535 Homo sapiens Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000916644 Homo sapiens Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000961414 Homo sapiens Membrane cofactor protein Proteins 0.000 description 1
- 101000669513 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000628547 Homo sapiens Metalloreductase STEAP1 Proteins 0.000 description 1
- 101000979001 Homo sapiens Methionine aminopeptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000969087 Homo sapiens Microtubule-associated protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 101000623901 Homo sapiens Mucin-16 Proteins 0.000 description 1
- 101000616778 Homo sapiens Myelin-associated glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101100405240 Homo sapiens NRG1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001108441 Homo sapiens Neurturin Proteins 0.000 description 1
- 101000979342 Homo sapiens Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Proteins 0.000 description 1
- 101000613820 Homo sapiens Osteopontin Proteins 0.000 description 1
- 101001001487 Homo sapiens Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class F protein Proteins 0.000 description 1
- 101001126417 Homo sapiens Platelet-derived growth factor receptor alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001096065 Homo sapiens Plexin domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001056707 Homo sapiens Proepiregulin Proteins 0.000 description 1
- 101000684208 Homo sapiens Prolyl endopeptidase FAP Proteins 0.000 description 1
- 101001098868 Homo sapiens Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 1
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000814371 Homo sapiens Protein Wnt-10a Proteins 0.000 description 1
- 101000770799 Homo sapiens Protein Wnt-10b Proteins 0.000 description 1
- 101000781981 Homo sapiens Protein Wnt-11 Proteins 0.000 description 1
- 101000781950 Homo sapiens Protein Wnt-16 Proteins 0.000 description 1
- 101000804728 Homo sapiens Protein Wnt-2b Proteins 0.000 description 1
- 101000804792 Homo sapiens Protein Wnt-5a Proteins 0.000 description 1
- 101000804804 Homo sapiens Protein Wnt-5b Proteins 0.000 description 1
- 101000855002 Homo sapiens Protein Wnt-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000855004 Homo sapiens Protein Wnt-7a Proteins 0.000 description 1
- 101000814380 Homo sapiens Protein Wnt-7b Proteins 0.000 description 1
- 101000781955 Homo sapiens Proto-oncogene Wnt-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000954762 Homo sapiens Proto-oncogene Wnt-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000668165 Homo sapiens RNA-binding motif, single-stranded-interacting protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000620814 Homo sapiens Ras and EF-hand domain-containing protein Proteins 0.000 description 1
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 1
- 101000606506 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase eta Proteins 0.000 description 1
- 101001092206 Homo sapiens Replication protein A 32 kDa subunit Proteins 0.000 description 1
- 101000685956 Homo sapiens SAP domain-containing ribonucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101000709238 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase SIK1 Proteins 0.000 description 1
- 101000836383 Homo sapiens Serpin H1 Proteins 0.000 description 1
- 101001133085 Homo sapiens Sialomucin core protein 24 Proteins 0.000 description 1
- 101000652846 Homo sapiens Single Ig IL-1-related receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000708614 Homo sapiens Smoothened homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000617130 Homo sapiens Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000874179 Homo sapiens Syndecan-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000934376 Homo sapiens T-cell differentiation antigen CD6 Proteins 0.000 description 1
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 101000980827 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1a Proteins 0.000 description 1
- 101000716149 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1b Proteins 0.000 description 1
- 101000716124 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1c Proteins 0.000 description 1
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 1
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101100369999 Homo sapiens TNFSF13 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100207070 Homo sapiens TNFSF8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000845170 Homo sapiens Thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 description 1
- 101000834948 Homo sapiens Tomoregulin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000638154 Homo sapiens Transmembrane protease serine 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000830603 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000830598 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12 Proteins 0.000 description 1
- 101000830600 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13 Proteins 0.000 description 1
- 101000638161 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000638251 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000795169 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 description 1
- 101000801255 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 description 1
- 101000762805 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 19L Proteins 0.000 description 1
- 101000679857 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000611185 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000920026 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member EDAR Proteins 0.000 description 1
- 101000772122 Homo sapiens Twisted gastrulation protein homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000984551 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase Blk Proteins 0.000 description 1
- 101150028113 Hrk gene Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102100022652 Hyccin Human genes 0.000 description 1
- 108010042653 IgA receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010073816 IgE Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102100038005 Immunoglobulin alpha Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100036887 Immunoglobulin heavy variable 1-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100022964 Immunoglobulin kappa variable 3-20 Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102100039688 Insulin-like growth factor 1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 description 1
- 102100025305 Integrin alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100032817 Integrin alpha-5 Human genes 0.000 description 1
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 1
- 101710123022 Integrin alpha-V Proteins 0.000 description 1
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 1
- 108010041341 Integrin alpha1 Proteins 0.000 description 1
- 108010055795 Integrin alpha1beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000507 Integrin alpha2 Human genes 0.000 description 1
- 102000000510 Integrin alpha3 Human genes 0.000 description 1
- 108010041357 Integrin alpha3 Proteins 0.000 description 1
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 1
- 108010041014 Integrin alpha5 Proteins 0.000 description 1
- 108010042918 Integrin alpha5beta1 Proteins 0.000 description 1
- 108010047852 Integrin alphaVbeta3 Proteins 0.000 description 1
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100032999 Integrin beta-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100033016 Integrin beta-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010064600 Intercellular Adhesion Molecule-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100037871 Intercellular adhesion molecule 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102100020881 Interleukin-1 alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108010017550 Interleukin-10 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004551 Interleukin-10 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 108010017521 Interleukin-11 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004553 Interleukin-11 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108010017515 Interleukin-12 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004560 Interleukin-12 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 1
- 108010017511 Interleukin-13 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004559 Interleukin-13 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017525 Interleukin-17 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 102100039898 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108010017537 Interleukin-18 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004557 Interleukin-18 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010017411 Interleukin-21 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 1
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 1
- 102100036672 Interleukin-23 receptor Human genes 0.000 description 1
- 101710195550 Interleukin-23 receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010038484 Interleukin-5 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010786 Interleukin-5 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100037795 Interleukin-6 receptor subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 101710152369 Interleukin-6 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010038498 Interleukin-7 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010782 Interleukin-7 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100026236 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 108010018951 Interleukin-8B Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100026871 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 108010038414 Interleukin-9 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010682 Interleukin-9 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 102000002698 KIR Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010043610 KIR Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100027612 Kallikrein-11 Human genes 0.000 description 1
- 101710115807 Kallikrein-11 Proteins 0.000 description 1
- 102100038318 Kallikrein-12 Human genes 0.000 description 1
- 101710115809 Kallikrein-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 125000000773 L-serino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])*)C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100039648 Lactadherin Human genes 0.000 description 1
- 102100027000 Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710178954 Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100023487 Lens fiber major intrinsic protein Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 102100031586 Leukocyte antigen CD37 Human genes 0.000 description 1
- 102100034762 Leukocyte cell-derived chemotaxin-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710089435 Lipopolysaccharide-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100029206 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-c Human genes 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100026238 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102000006305 Lysosphingolipid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083351 Lysosphingolipid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000034655 MIF Human genes 0.000 description 1
- 108060004872 MIF Proteins 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100027998 Macrophage metalloelastase Human genes 0.000 description 1
- 101710187853 Macrophage metalloelastase Proteins 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 206010025538 Malignant ascites Diseases 0.000 description 1
- 102100030417 Matrilysin Human genes 0.000 description 1
- 108090000855 Matrilysin Proteins 0.000 description 1
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010076557 Matrix Metalloproteinase 14 Proteins 0.000 description 1
- 102100030216 Matrix metalloproteinase-14 Human genes 0.000 description 1
- 102100030201 Matrix metalloproteinase-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000560 Matrix metalloproteinase-15 Proteins 0.000 description 1
- 102100024129 Matrix metalloproteinase-24 Human genes 0.000 description 1
- 108050005214 Matrix metalloproteinase-24 Proteins 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 108010060408 Member 25 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100027159 Membrane primary amine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 101710132836 Membrane primary amine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 101100366137 Mesembryanthemum crystallinum SODCC.1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026712 Metalloreductase STEAP1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000192 Methionyl aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102100025825 Methylated-DNA-protein-cysteine methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010047660 Mitochondrial intermediate peptidase Proteins 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 102100023123 Mucin-16 Human genes 0.000 description 1
- 101100437777 Mus musculus Bmpr1a gene Proteins 0.000 description 1
- 101000713102 Mus musculus C-C motif chemokine 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000978374 Mus musculus C-C motif chemokine 12 Proteins 0.000 description 1
- 101000898293 Mus musculus Cathepsin 8 Proteins 0.000 description 1
- 101100222387 Mus musculus Cxcl15 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100335081 Mus musculus Flt3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100175313 Mus musculus Gdf3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100288960 Mus musculus Lefty1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100153533 Mus musculus Ltbr gene Proteins 0.000 description 1
- 101100153523 Mus musculus Tnfrsf22 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100153524 Mus musculus Tnfrsf23 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100153526 Mus musculus Tnfrsf26 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100207071 Mus musculus Tnfsf8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000866339 Mus musculus Transcription factor E2F6 Proteins 0.000 description 1
- 101000597780 Mus musculus Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18 Proteins 0.000 description 1
- 101100264116 Mus musculus Xcl1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 1
- 102100021831 Myelin-associated glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 101001055320 Myxine glutinosa Insulin-like growth factor Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050000637 N-cadherin Proteins 0.000 description 1
- 108010032605 Nerve Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010069196 Neural Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 1
- 102400000054 Neuregulin-3 Human genes 0.000 description 1
- 101800000673 Neuregulin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108010006696 Neuronal Apoptosis-Inhibitory Protein Proteins 0.000 description 1
- 108090000095 Neurotrophin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102100030411 Neutrophil collagenase Human genes 0.000 description 1
- 101710118230 Neutrophil collagenase Proteins 0.000 description 1
- 102100022397 Nitric oxide synthase, brain Human genes 0.000 description 1
- 101710111444 Nitric oxide synthase, brain Proteins 0.000 description 1
- 101710090055 Nitric oxide synthase, endothelial Proteins 0.000 description 1
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 1
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 102000010410 Nogo Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000005781 Nogo Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020003872 Nogo receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100023050 Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Human genes 0.000 description 1
- 108010042215 OX40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102000004140 Oncostatin M Human genes 0.000 description 1
- 108010081689 Osteopontin Proteins 0.000 description 1
- 101710195703 Oxygen-dependent coproporphyrinogen-III oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100036201 Oxygen-dependent coproporphyrinogen-III oxidase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101710200437 Oxygen-dependent coproporphyrinogen-III oxidase, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 102100034925 P-selectin glycoprotein ligand 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010054395 P-selectin ligand protein Proteins 0.000 description 1
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 101150044441 PECAM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150071808 PTHLH gene Proteins 0.000 description 1
- 101100096142 Panax ginseng SODCC gene Proteins 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- FQYUMYWMJTYZTK-UHFFFAOYSA-N Phenyl glycidyl ether Chemical compound C1OC1COC1=CC=CC=C1 FQYUMYWMJTYZTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026918 Phospholipase A2 Human genes 0.000 description 1
- 101710096328 Phospholipase A2 Proteins 0.000 description 1
- 101710201137 Photosystem II manganese-stabilizing polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 102100035846 Pigment epithelium-derived factor Human genes 0.000 description 1
- 108010082093 Placenta Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000003666 Placenta Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010022233 Plasminogen Activator Inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 102100039418 Plasminogen activator inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010035030 Platelet Membrane Glycoprotein IIb Proteins 0.000 description 1
- 108090000778 Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000011653 Platelet-Derived Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100040682 Platelet-derived growth factor D Human genes 0.000 description 1
- 101710170209 Platelet-derived growth factor D Proteins 0.000 description 1
- 102100030485 Platelet-derived growth factor receptor alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100037891 Plexin domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 101710179684 Poly [ADP-ribose] polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 description 1
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 102100025974 Pro-cathepsin H Human genes 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101710189650 Probable AP endonuclease Proteins 0.000 description 1
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 description 1
- 102100025498 Proepiregulin Human genes 0.000 description 1
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 102100024819 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 102100036691 Proliferating cell nuclear antigen Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010044159 Proprotein Convertases Proteins 0.000 description 1
- 102000006437 Proprotein Convertases Human genes 0.000 description 1
- 101710180553 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 1
- 108050000258 Prostaglandin D receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100024218 Prostaglandin D2 receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 1
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 description 1
- 108010066124 Protein S Proteins 0.000 description 1
- 102100039461 Protein Wnt-10a Human genes 0.000 description 1
- 102100029062 Protein Wnt-10b Human genes 0.000 description 1
- 102100036567 Protein Wnt-11 Human genes 0.000 description 1
- 102100036587 Protein Wnt-16 Human genes 0.000 description 1
- 102100035289 Protein Wnt-2b Human genes 0.000 description 1
- 102100035331 Protein Wnt-5b Human genes 0.000 description 1
- 102100020732 Protein Wnt-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100020729 Protein Wnt-7a Human genes 0.000 description 1
- 102100039470 Protein Wnt-7b Human genes 0.000 description 1
- 102100039453 Protein Wnt-8a Human genes 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102100036385 Protocadherin-12 Human genes 0.000 description 1
- 101710158929 Protocadherin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102100031269 Putative peripheral benzodiazepine receptor-related protein Human genes 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 108010052562 RELT Proteins 0.000 description 1
- 102000018795 RELT Human genes 0.000 description 1
- 102100022869 Ras and EF-hand domain-containing protein Human genes 0.000 description 1
- 101100372762 Rattus norvegicus Flt1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710100968 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 1
- 102100039808 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase eta Human genes 0.000 description 1
- 102000003743 Relaxin Human genes 0.000 description 1
- 108090000103 Relaxin Proteins 0.000 description 1
- 102400000834 Relaxin A chain Human genes 0.000 description 1
- 101800000074 Relaxin A chain Proteins 0.000 description 1
- 102400000610 Relaxin B chain Human genes 0.000 description 1
- 101710109558 Relaxin B chain Proteins 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 1
- 102100029831 Reticulon-4 Human genes 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 102100023361 SAP domain-containing ribonucleoprotein Human genes 0.000 description 1
- 108091007602 SLC58A1 Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 101001117144 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) [Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase 1, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 102100036546 Salivary acidic proline-rich phosphoprotein 1/2 Human genes 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102100034201 Sclerostin Human genes 0.000 description 1
- 108050006698 Sclerostin Proteins 0.000 description 1
- 102100030053 Secreted frizzled-related protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 108050007990 Secreted frizzled-related protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 1
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 1
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100032771 Serine/threonine-protein kinase SIK1 Human genes 0.000 description 1
- 102100034136 Serine/threonine-protein kinase receptor R3 Human genes 0.000 description 1
- 101710082813 Serine/threonine-protein kinase receptor R3 Proteins 0.000 description 1
- 102100036400 Serpin A12 Human genes 0.000 description 1
- 101710168285 Serpin A12 Proteins 0.000 description 1
- 102100025521 Serpin B7 Human genes 0.000 description 1
- 101710156145 Serpin B7 Proteins 0.000 description 1
- 102100027287 Serpin H1 Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 1
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 1
- 108010090763 Shiga Toxin 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010029157 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100034258 Sialomucin core protein 24 Human genes 0.000 description 1
- 108010074687 Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family Member 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100029215 Signaling lymphocytic activation molecule Human genes 0.000 description 1
- 102100030929 Single Ig IL-1-related receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100032799 Smoothened homolog Human genes 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 102000011011 Sphingosine 1-phosphate receptors Human genes 0.000 description 1
- 108050001083 Sphingosine 1-phosphate receptors Proteins 0.000 description 1
- 101000879712 Streptomyces lividans Protease inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101710108790 Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100028847 Stromelysin-3 Human genes 0.000 description 1
- 108050005271 Stromelysin-3 Proteins 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 description 1
- 101100342402 Synechocystis sp. (strain PCC 6803 / Kazusa) prk gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025131 T-cell differentiation antigen CD6 Human genes 0.000 description 1
- 101710165202 T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024219 T-cell surface glycoprotein CD1a Human genes 0.000 description 1
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 1
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 101150081494 TMPO gene Proteins 0.000 description 1
- 108091007178 TNFRSF10A Proteins 0.000 description 1
- 101150077103 TPO gene Proteins 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 1
- 102100034195 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 1
- 102100031294 Thymic stromal lymphopoietin Human genes 0.000 description 1
- 102100026160 Tomoregulin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102000014034 Transcortin Human genes 0.000 description 1
- 108010011095 Transcortin Proteins 0.000 description 1
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108050003222 Transferrin receptor protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 1
- 102000011117 Transforming Growth Factor beta2 Human genes 0.000 description 1
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101800000304 Transforming growth factor beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000097 Transforming growth factor beta-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000056172 Transforming growth factor beta-3 Human genes 0.000 description 1
- 108050005134 Translocation protein Sec62 Proteins 0.000 description 1
- 101710166801 Translocator protein Proteins 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 101710170091 Transmembrane glycoprotein NMB Proteins 0.000 description 1
- 102100031989 Transmembrane protease serine 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710090322 Truncated surface protein Proteins 0.000 description 1
- 108010065158 Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily Member 14 Proteins 0.000 description 1
- 108090000138 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Proteins 0.000 description 1
- 108050002568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101710178300 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 description 1
- 101710187887 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 19 Proteins 0.000 description 1
- 102100026716 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 19L Human genes 0.000 description 1
- 101710187743 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- 102100022156 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100030810 Tumor necrosis factor receptor superfamily member EDAR Human genes 0.000 description 1
- 208000035896 Twin-reversed arterial perfusion sequence Diseases 0.000 description 1
- 208000006391 Type 1 Hyper-IgM Immunodeficiency Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100027053 Tyrosine-protein kinase Blk Human genes 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- 102000008790 VE-cadherin Human genes 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010000134 Vascular Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000016663 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100023543 Vascular cell adhesion protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033179 Vascular endothelial growth factor receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100028885 Vitamin K-dependent protein S Human genes 0.000 description 1
- 101150010310 WNT-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150019524 WNT2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710194167 Wnt inhibitory factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100038258 Wnt inhibitory factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000052547 Wnt-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000052556 Wnt-2 Human genes 0.000 description 1
- 108700020986 Wnt-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000052549 Wnt-3 Human genes 0.000 description 1
- 102000052548 Wnt-4 Human genes 0.000 description 1
- 108700020984 Wnt-4 Proteins 0.000 description 1
- 102000043366 Wnt-5a Human genes 0.000 description 1
- 102000044880 Wnt3A Human genes 0.000 description 1
- 108700013515 Wnt3A Proteins 0.000 description 1
- 201000001696 X-linked hyper IgM syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101100485099 Xenopus laevis wnt2b-b gene Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 229940024142 alpha 1-antitrypsin Drugs 0.000 description 1
- SRHNADOZAAWYLV-XLMUYGLTSA-N alpha-L-Fucp-(1->2)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](NC(C)=O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)O[C@H]2[C@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O2)O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O SRHNADOZAAWYLV-XLMUYGLTSA-N 0.000 description 1
- MXKCYTKUIDTFLY-ZNNSSXPHSA-N alpha-L-Fucp-(1->2)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-D-Galp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](CO)OC(O)[C@@H]3O)O)O[C@@H]2CO)O[C@H]2[C@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O2)O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MXKCYTKUIDTFLY-ZNNSSXPHSA-N 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 108010026054 apolipoprotein SAA Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940065181 bacillus anthracis Drugs 0.000 description 1
- 238000002819 bacterial display Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 102000055102 bcl-2-Associated X Human genes 0.000 description 1
- 108700000707 bcl-2-Associated X Proteins 0.000 description 1
- DQEPMTIXHXSFOR-UHFFFAOYSA-N benzo[a]pyrene diol epoxide I Chemical compound C1=C2C(C3OC3C(C3O)O)=C3C=C(C=C3)C2=C2C3=CC=CC2=C1 DQEPMTIXHXSFOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000009141 biological interaction Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 108010018828 cadherin 5 Proteins 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 102000008323 calcitonin gene-related peptide receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010027904 cartilage-derived-morphogenetic protein-2 Proteins 0.000 description 1
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 108040004564 crotonyl-CoA reductase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 108700041286 delta Proteins 0.000 description 1
- 108700001680 des-(1-3)- insulin-like growth factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101150042351 dhh gene Proteins 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 101150007302 dntt gene Proteins 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 108010027836 endotoxin receptor Proteins 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000008472 epithelial growth Effects 0.000 description 1
- 230000005281 excited state Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N ficin Chemical compound FI=CI=N POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019836 ficin Nutrition 0.000 description 1
- 108700014844 flt3 ligand Proteins 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 101150034785 gamma gene Proteins 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 108010037536 heparanase Proteins 0.000 description 1
- 201000010284 hepatitis E Diseases 0.000 description 1
- 231100000334 hepatotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003082 hepatotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 108010044853 histidine-rich proteins Proteins 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026095 hyper-IgM syndrome type 1 Diseases 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000005931 immune cell recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229940068935 insulin-like growth factor 2 Drugs 0.000 description 1
- 108010021315 integrin beta7 Proteins 0.000 description 1
- 108090000681 interleukin 20 Proteins 0.000 description 1
- 102000004114 interleukin 20 Human genes 0.000 description 1
- 108010001618 interleukin-20 receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010038415 interleukin-8 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010681 interleukin-8 receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000008371 intracellularly ATP-gated chloride channel activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 108010028309 kalinin Proteins 0.000 description 1
- 108010012808 leiomyoma-derived growth factor Proteins 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- VNYSSYRCGWBHLG-AMOLWHMGSA-N leukotriene B4 Chemical compound CCCCC\C=C/C[C@@H](O)\C=C\C=C\C=C/[C@@H](O)CCCC(O)=O VNYSSYRCGWBHLG-AMOLWHMGSA-N 0.000 description 1
- 238000002796 luminescence method Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000002824 mRNA display Methods 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 108040008770 methylated-DNA-[protein]-cysteine S-methyltransferase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010807 negative regulation of binding Effects 0.000 description 1
- 238000007857 nested PCR Methods 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 229940032018 neurotrophin 3 Drugs 0.000 description 1
- 229940097998 neurotrophin 4 Drugs 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 102000044158 nucleic acid binding protein Human genes 0.000 description 1
- 108700020942 nucleic acid binding protein Proteins 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 108010071584 oxidized low density lipoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- SVHOVVJFOWGYJO-UHFFFAOYSA-N pentabromophenol Chemical compound OC1=C(Br)C(Br)=C(Br)C(Br)=C1Br SVHOVVJFOWGYJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- LUYQYZLEHLTPBH-UHFFFAOYSA-N perfluorobutanesulfonyl fluoride Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)S(F)(=O)=O LUYQYZLEHLTPBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 108090000102 pigment epithelium-derived factor Proteins 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 108010025221 plasma protein Z Proteins 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 108010017843 platelet-derived growth factor A Proteins 0.000 description 1
- 108010000685 platelet-derived growth factor AB Proteins 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000151 polyglycol Chemical group 0.000 description 1
- 239000010695 polyglycol Chemical group 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N prostaglandin I2 Chemical compound O1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N 0.000 description 1
- UQOQENZZLBSFKO-POPPZSFYSA-N prostaglandin J2 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)C=CC1=O UQOQENZZLBSFKO-POPPZSFYSA-N 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 238000002818 protein evolution Methods 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- GPTFURBXHJWNHR-UHFFFAOYSA-N protopine Chemical compound C1=C2C(=O)CC3=CC=C4OCOC4=C3CN(C)CCC2=CC2=C1OCO2 GPTFURBXHJWNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical group CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 101150088976 shh gene Proteins 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 101150017120 sod gene Proteins 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- IWOKCMBOJXYDEE-UHFFFAOYSA-N sulfinylmethane Chemical compound C=S=O IWOKCMBOJXYDEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- XNRNNGPBEPRNAR-JQBLCGNGSA-N thromboxane B2 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1OC(O)C[C@H](O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XNRNNGPBEPRNAR-JQBLCGNGSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 108010042974 transforming growth factor beta4 Proteins 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 102000009816 urokinase plasminogen activator receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040001269 urokinase plasminogen activator receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150068520 wnt3a gene Proteins 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
- C07K16/303—Liver or Pancreas
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/563—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving antibody fragments
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
- G01N33/6857—Antibody fragments
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/526—CH3 domain
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/66—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a swap of domains, e.g. CH3-CH2, VH-CL or VL-CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/75—Agonist effect on antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
従来技術の二重特異性抗体は、両方の抗原、すなわち、第1の抗原であるがん抗原(EpCAM)および第2の抗原であるCD3εに、FcγRへの結合と同時に結合し得るため、FcγRおよび第2の抗原であるCD3εに同時に結合することによって引き起こされるこのような有害反応は、その分子構造的に回避することができない。
近年、FcγRに対する結合活性を低下させたFc領域を用いることで、有害反応を回避しつつ、T細胞によって媒介される細胞傷害活性を引き起こす改良型抗体が提供されている(WO2012/073985)。
しかしながら、このような抗体であっても、その分子構造を踏まえると、がん抗原に結合しつつ2つの免疫受容体、すなわち、CD3εおよびFcγRに作用することはできない。
有害反応を回避しつつ、がん抗原特異的な様式で、T細胞によって媒介される細胞傷害活性と、T細胞以外の細胞によって媒介される細胞傷害活性との両方を発揮する抗体は、まだ知られていない。
さらに、CD8およびCD3εに対する二重特異性抗体は、それらを架橋するため、CD8陽性T細胞同士の間で相互の細胞傷害活性を誘導することが既に報告されている(Wong, Clin. Immunol. Immunopathol. 1991, 58(2), 236-250)。したがって、本発明者らは、T細胞上で発現している分子およびCD3εに対する二重特異性抗体もまた、該分子を発現する細胞とCD3εを発現する細胞とを架橋するため、T細胞同士の間で相互の細胞傷害活性を誘導するであろうと推測した。
[1]CD3およびCD137に結合することができるがCD3とCD137に同時には結合しない抗体可変領域を含む、抗原結合分子であって、好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、5×10-6 M未満、5×10-7 M未満、5×10-8 M未満、または3×10-8 M未満の平衡解離定数(KD)でCD137に結合する、前記抗原結合分子。
[1A]好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、5×10-6 M〜3×10-8 Mの平衡解離定数(KD)でCD137に結合する、[1]の抗原結合分子。
[1B]好ましくはSPRによって以下の条件:
25℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、2×10-6 M〜1×10-8 Mの平衡解離定数(KD)でCD3に結合する、[1]〜[1A]の抗原結合分子。
[2](a)配列番号:159のアミノ酸配列を含むCD3ε(CD3イプシロン)の細胞外ドメインの、少なくとも1個、2個、3個、もしくはそれよりも多いアミノ酸残基;ならびに/または
(b)ヒトCD137のLQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAEC(配列番号:152)、好ましくはLQDPCSN、NNRNQI、および/もしくはGQRTCDIのアミノ酸配列を含むCD137のN末端領域の、少なくとも1個、2個、3個、もしくはそれよりも多いアミノ酸残基
に結合する、[1]〜[1B]の抗原結合分子。
[3]前記抗体可変領域が、1〜25アミノ酸の改変を有する抗体可変領域であり、改変されるアミノ酸が、ループ中のアミノ酸、FR3領域中のアミノ酸、または、抗体H鎖可変ドメイン中のKabatナンバリング31〜35位、50〜65位、71〜74位、および95〜102位、ならびにL鎖可変ドメイン中のKabatナンバリング24〜34位、50〜56位、および89〜97位から選択されるアミノ酸である、[1]〜[2]の抗原結合分子。
[3A]重鎖可変ドメイン(VH)および/または軽鎖可変ドメイン(VL)が、表1.3(a)〜表1.3(d)から選択される1個または複数個のアミノ酸置換を含み、該1個または複数個のアミノ酸置換が、表1.3(a)〜表1.3(d)に示されるようにCD3および/またはCD137に対して少なくとも0.2、0.3、0.5、0.8、1、1.5、または2倍の結合親和性の増加を示す、 [1]〜[3]のいずれかの抗原結合分子。いくつかの態様において、抗体可変領域は、
(a)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、重鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸26位のA、D、E、I、G、K、L、M、N、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27位のD、F、G、I、M、もしくはL;
アミノ酸28位のD、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸29位のFもしくはW;
アミノ酸30位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のF、I、N、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のA、H、I、K、L、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸33位のW;
アミノ酸34位のF、I、L、M、もしくはV;
アミノ酸35位のF、H、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸50位のE、F、H、I、K、L、M、N、Q、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸51位のI、K、もしくはV;
アミノ酸52位のK、M、R、もしくはT;
アミノ酸52b位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸52c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のE、F、G、H、L、M、N、Q、W、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸57位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸58位のA、F、H、K、N、P、R、もしくはY;
アミノ酸59位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸60位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸61位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸62位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸63位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸64位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸65位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸93位のHもしくはR;
アミノ酸94位のF、G、H、L、M、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸95位のIもしくはV;
アミノ酸96位のF、H、I、K、L、M、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸97位のF、Y、もしくはW;
アミノ酸98位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸99位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100b位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100d位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100f位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100g位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100h位のA、D、E、G、H、I、L、M、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸100i位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸101位のA、D、F、I、L、M、N、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸102位のA、D、E、F、G、H、I K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
ならびに/または
(b)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、軽鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸24位のA、D、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸25位のA、G、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸26位のA、D、E、F、G、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸27位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27b位のA、I、L、M、P、T、もしくはV;
アミノ酸27c位のA、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27d位のA、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸28位のG、N、S、もしくはT;
アミノ酸29位のA、F、G、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸30位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のI、L、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のF、W、もしくはY;
アミノ酸33位のA、F、H、L、M、Q、もしくはV;
アミノ酸34位のA、H、もしくはS;
アミノ酸50位のI、K、L、M、もしくはR;
アミノ酸51位のA、E、I、K、L、M、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸52位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、G、H、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸89位のA、G、K、S、もしくはY;
アミノ酸90位のQ;
アミノ酸91位のG;
アミノ酸92位のA、D、H、K、N、Q、R、S、もしくはT;
アミノ酸93位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸94位のA、D、H、I、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸95位のP;
アミノ酸96位のFもしくはY;および
アミノ酸97位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV
を含むことが好ましい。
[4]前記抗体可変領域が、以下のうちのいずれか1つを含む、[1]〜[3A]のいずれかに記載の抗原結合分子:
(a1)配列番号:16に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:30に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:44に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a2)配列番号:17に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:31に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:45に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:64に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:69に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:74に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a3)配列番号:18に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:32に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:46に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a4)配列番号:19に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:33に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:47に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a5)配列番号:19に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:33に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:47に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:65に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:70に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:75に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a6)配列番号:20に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:34に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:48に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a7)配列番号:22に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:36に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:50に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a8)配列番号:23に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:37に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:51に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a9)配列番号:23に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:37に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:51に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a10)配列番号:24に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:38に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:52に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a11)配列番号:25に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:39に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:53に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a12)配列番号:26に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:40に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:54に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a13)配列番号:26に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:40に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:54に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a14)配列番号:27に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:41に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:55に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a15)配列番号:28に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:42に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:56に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(b1)配列番号:16のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:30のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:44のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b2)配列番号:17のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:31のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:45のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:64のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:69のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:74のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b3)配列番号:18のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:32のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:46のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b4)配列番号:19のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:33のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:47のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b5)配列番号:19のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:33のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:47のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:65のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:70のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:75のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b6)配列番号:20のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:34のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:48のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b7)配列番号:22のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:36のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:50のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b8)配列番号:23のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:37のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:51のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b9)配列番号:23のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:37のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:51のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b10)配列番号:24のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:38のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:52のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b11)配列番号:25のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:39のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:53のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b12)配列番号:26のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:40のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:54のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b13)配列番号:26のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:40のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:54のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b14)配列番号:27のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:41のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:55のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b15)配列番号:28のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:42のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:56のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(c1)配列番号:2に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c2)配列番号:3に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:59に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c3)配列番号:4に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c4)配列番号:5に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c5)配列番号:5に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:60に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c6)配列番号:6に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c7)配列番号:8に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c8)配列番号:9に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c9)配列番号:9に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c10)配列番号:10に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c11)配列番号:11に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c12)配列番号:12に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c13)配列番号:12に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c14)配列番号:13に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c15)配列番号:14に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(d1)配列番号:2の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d2)配列番号:3の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:59の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d3)配列番号:4の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d4)配列番号:5の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d5)配列番号:5の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:60の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d6)配列番号:6の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d7)配列番号:8の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d8)配列番号:9の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d9)配列番号:9の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d10)配列番号:10の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d11)配列番号:11の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d12)配列番号:12の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d13)配列番号:12の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d14)配列番号:13の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d15)配列番号:14の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(e)CD3に対する結合について、(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと競合する、抗体可変領域;
(f)CD137に対する結合について、(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと競合する、抗体可変領域;
(g)(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと同じCD3上のエピトープに結合する、抗体可変領域;
(h)(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと同じCD137上のエピトープに結合する、抗体可変領域。
[4A]重鎖可変ドメイン(VH)および/または軽鎖可変ドメイン(VL)が、表1.3(a)〜表1.3(d)から選択される1個または複数個のアミノ酸置換を含み、該1個または複数個のアミノ酸置換が、表1.3(a)〜表1.3(d)に示されるようにCD3および/またはCD137に対して少なくとも0.2、0.3、0.5、0.8、1、1.5、または2倍の結合親和性の増加を示す、 [4][c1]〜[c15]の抗原結合分子。
[4B]前記抗体可変領域が、
(a)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、重鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸26位のA、D、E、I、G、K、L、M、N、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27位のD、F、G、I、M、もしくはL;
アミノ酸28位のD、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸29位のFもしくはW;
アミノ酸30位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のF、I、N、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のA、H、I、K、L、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸33位のW;
アミノ酸34位のF、I、L、M、もしくはV;
アミノ酸35位のF、H、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸50位のE、F、H、I、K、L、M、N、Q、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸51位のI、K、もしくはV;
アミノ酸52位のK、M、R、もしくはT;
アミノ酸52b位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸52c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のE、F、G、H、L、M、N、Q、W、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸57位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸58位のA、F、H、K、N、P、R、もしくはY;
アミノ酸59位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸60位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸61位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸62位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸63位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸64位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸65位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸93位のHもしくはR;
アミノ酸94位のF、G、H、L、M、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸95位のIもしくはV;
アミノ酸96位のF、H、I、K、L、M、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸97位のF、Y、もしくはW;
アミノ酸98位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸99位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100b位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100d位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100f位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100g位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100h位のA、D、E、G、H、I、L、M、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸100i位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸101位のA、D、F、I、L、M、N、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸102位のA、D、E、F、G、H、I K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
ならびに/または
(b)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、軽鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸24位のA、D、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸25位のA、G、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸26位のA、D、E、F、G、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸27位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27b位のA、I、L、M、P、T、もしくはV;
アミノ酸27c位のA、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27d位のA、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸28位のG、N、S、もしくはT;
アミノ酸29位のA、F、G、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸30位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のI、L、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のF、W、もしくはY;
アミノ酸33位のA、F、H、L、M、Q、もしくはV;
アミノ酸34位のA、H、もしくはS;
アミノ酸50位のI、K、L、M、もしくはR;
アミノ酸51位のA、E、I、K、L、M、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸52位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、G、H、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸89位のA、G、K、S、もしくはY;
アミノ酸90位のQ;
アミノ酸91位のG;
アミノ酸92位のA、D、H、K、N、Q、R、S、もしくはT;
アミノ酸93位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸94位のA、D、H、I、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸95位のP;
アミノ酸96位のFもしくはY;および
アミノ酸97位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV
を含む、[4A]の抗原結合分子。
[5] 以下の(1)〜(3)からなる群より選択される少なくとも1つの特徴を有する、[1]〜[4B]のいずれかの抗原結合分子:
(1)抗原結合分子が、各々が異なる細胞上で発現しているCD3とCD137に同時には結合しない;
(2)抗原結合分子が、CD137に対するアゴニスト活性を有する;ならびに
(3)抗原結合分子が、配列番号:1のVH配列および配列番号:57のVL配列を含む参照抗体と比較して、同等のまたは10倍、20倍、50倍、100倍低い、ヒトCD137に対する結合についてのKD値を有し、ここで、該KD値は、好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定される。
[6]CD3およびCD137とは異なる第3の抗原に結合することができる抗体可変領域をさらに含む、[1]〜[5]のいずれか1つの抗原結合分子。
[7]第3の抗原が、がん組織において特異的に発現している分子である、[6]の抗原結合分子。
[7A]第3の抗原が、グリピカン-3(GPC3)である、[6]〜[7]のいずれか1つの抗原結合分子。
[7B]グリピカン-3(GPC3)に結合することができる抗体可変領域が、配列番号:206のアミノ酸配列を有するVH配列および配列番号:207のアミノ酸配列を有するVL配列を含む、[7A]の抗原結合分子。
[7C]以下の(1)〜(5)からなる群より選択される少なくとも1つの特徴を有する、[6]〜[7B]のいずれか1つの抗原結合分子:
(1)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞のCD3活性化を誘導するが、CD137を発現する細胞に対するT細胞のCD3活性化は誘導しない;
(2)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞の細胞傷害活性を誘導するが、CD137を発現する細胞に対するT細胞の細胞傷害活性は誘導しない;
(3)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞の非存在下では、PBMCからのサイトカインの放出を誘導しない;
(4)抗原結合分子が、配列番号:1のVH配列および配列番号:57のVL配列を含む参照抗体と比較して、同等のまたは2倍、5倍、10倍、20倍、もしくは100倍高い、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞のCD137活性化および/または細胞傷害活性を誘導する;ならびに/または
(5)抗原結合分子が、第3の抗原およびCD3を標的とする参照二重特異性抗体と比較して、2倍、5倍、10倍、20倍、もしくは100倍高い、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞の細胞傷害活性を誘導し、一方、PBMCからのサイトカイン(IL-6)放出は誘導しない。
[8]抗体Fc領域をさらに含む、[1]〜[7C]のいずれか1つの抗原結合分子。
[9]前記Fc領域が、天然型ヒトIgG1抗体のFc領域と比較してFcγRに対する結合活性が低下しているFc領域である、[8]の抗原結合分子。
[10][1]〜[9]のいずれかに記載の抗原結合分子と、薬学的に許容し得る担体とを含む、医薬組成物。
[10A]がんの処置における使用のための、[10]の医薬組成物または[1]〜[9]の抗原結合分子。
[10B]がんの処置における使用に向けた薬の製造のための、[10]の医薬組成物または[1]〜[9]の抗原結合分子の使用。
[10C][10]の医薬組成物または[5]〜[9]の抗原結合分子を、がんに罹患している哺乳動物対象に投与する工程を含む、がんを予防する、処置する、または抑制するための方法。
[10D][10]の医薬組成物または[5]〜[9]の抗原結合分子を、がんに罹患している哺乳動物対象に投与する工程を含む、対象において細胞傷害活性、好ましくはT細胞依存性細胞傷害活性を誘導するための方法。
[10E][10]の医薬組成物または[5]〜[9]の抗原結合分子を、がんに罹患している哺乳動物対象に投与する工程を含む、対象のがん細胞を低減させるかまたは死滅させるための方法。
[10F][10]の医薬組成物または[5]〜[9]の抗原結合分子を、がんに罹患している哺乳動物対象に投与する工程を含む、がん患者の寿命または生存率を延ばすための方法。
[10G]前記がんが、第3の抗原、好ましくはグリピカン-3(GPC3)の発現または上方制御された発現を特徴とする、[10A]〜[10F]のいずれかに記載の使用のための医薬組成物もしくは抗原結合分子、使用、または方法。
[11][1]〜[9]のいずれかの抗原結合分子をコードするヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
[12][11]に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
[13][11]に記載のポリヌクレオチドまたは[12]に記載の発現ベクターで形質転換されたかまたはそれをトランスフェクトされた、宿主細胞。
[14][13]の宿主細胞を培養する工程を含む、多重特異性抗原結合分子または多重特異性抗体を作製する方法。
[15][14]の方法によって作製された、多重特異性抗原結合分子または多重特異性抗体。
[16]以下の工程を含む、CD3およびCD137に結合することができるが、CD3とCD137に同時には結合しない抗体可変領域を取得するかまたはスクリーニングする方法:
(a)複数の抗体可変領域を含むライブラリーを提供する工程、
(b)工程(a)において提供されたライブラリーを、第1の抗原としてのCD3またはCD137のいずれかと接触させ、第1の抗原に結合した抗体可変領域を収集する工程、
(c)工程(b)において収集された抗体可変領域を、CD3およびCD137のうちの第2の抗原と接触させ、第2の抗原に結合した抗体可変領域を収集する工程、ならびに
(d)以下の抗体可変領域:
(1)好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、約5×10-6 M未満もしくは5×10-6 M〜3×10-8 Mの平衡解離定数(KD)でCD137に結合する、抗体可変領域;および/または
(2)好ましくはSPRによって以下の条件:
25℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、2×10-6 M〜1×10-8 Mの平衡解離定数(KD)でCD3に結合する、抗体可変領域
を選択する工程。
[16A]工程(c)から(d)までに、工程(c)において収集された抗体可変領域に対して1個または複数個のアミノ酸改変を導入する工程をさらに含む、[16]の方法。
[17]工程(a)または工程(c)から(d)までにおける抗体可変領域が、1〜25アミノ酸の改変を有する抗体可変領域であり、改変されるアミノ酸が、ループ中のアミノ酸、FR3領域中のアミノ酸、または、抗体H鎖可変ドメイン中のKabatナンバリング31〜35位、50〜65位、71〜74位、および95〜102位、ならびにL鎖可変ドメイン中のKabatナンバリング24〜34位、50〜56位、および89〜97位から選択されるアミノ酸である、[16]または[16A]のいずれかの方法。
[18]重鎖可変ドメイン(VH)および/または軽鎖可変ドメイン(VL)が、表1.3(a)〜表1.3(d)から選択される1個または複数個のアミノ酸置換を含み、該1個または複数個のアミノ酸置換が、表1.3(a)〜表1.3(d)に示されるようにCD3および/またはCD137に対して少なくとも0.2、0.3、0.5、0.8、1、1.5、または2倍の結合親和性の増加を示す、 [17]の方法。いくつかの態様において、抗体可変領域は、
(a)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、重鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸26位のA、D、E、I、G、K、L、M、N、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27位のD、F、G、I、M、もしくはL;
アミノ酸28位のD、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸29位のFもしくはW;
アミノ酸30位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のF、I、N、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のA、H、I、K、L、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸33位のW;
アミノ酸34位のF、I、L、M、もしくはV;
アミノ酸35位のF、H、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸50位のE、F、H、I、K、L、M、N、Q、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸51位のI、K、もしくはV;
アミノ酸52位のK、M、R、もしくはT;
アミノ酸52b位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸52c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のE、F、G、H、L、M、N、Q、W、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸57位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸58位のA、F、H、K、N、P、R、もしくはY;
アミノ酸59位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸60位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸61位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸62位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸63位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸64位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸65位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸93位のHもしくはR;
アミノ酸94位のF、G、H、L、M、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸95位のIもしくはV;
アミノ酸96位のF、H、I、K、L、M、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸97位のF、Y、もしくはW;
アミノ酸98位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸99位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100b位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100d位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100f位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100g位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100h位のA、D、E、G、H、I、L、M、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸100i位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸101位のA、D、F、I、L、M、N、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸102位のA、D、E、F、G、H、I K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
ならびに/または
(b)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、軽鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸24位のA、D、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸25位のA、G、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸26位のA、D、E、F、G、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸27位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27b位のA、I、L、M、P、T、もしくはV;
アミノ酸27c位のA、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27d位のA、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸28位のG、N、S、もしくはT;
アミノ酸29位のA、F、G、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸30位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のI、L、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のF、W、もしくはY;
アミノ酸33位のA、F、H、L、M、Q、もしくはV;
アミノ酸34位のA、H、もしくはS;
アミノ酸50位のI、K、L、M、もしくはR;
アミノ酸51位のA、E、I、K、L、M、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸52位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、G、H、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸89位のA、G、K、S、もしくはY;
アミノ酸90位のQ;
アミノ酸91位のG;
アミノ酸92位のA、D、H、K、N、Q、R、S、もしくはT;
アミノ酸93位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸94位のA、D、H、I、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸95位のP;
アミノ酸96位のFもしくはY;および
アミノ酸97位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV
を含むことが好ましい。
別の局面において、本発明は、ヒトCD137のLQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAEC(配列番号:152)、好ましくはLQDPCSN、NNRNQI、および/またはGQRTCDIのアミノ酸配列を含む、CD137のN末端領域の少なくとも1個、2個、3個、またはそれよりも多いアミノ酸残基に結合する抗原結合分子、例えば抗体に関する。
本発明において、「抗体可変領域」とは、通常、4つのフレームワーク領域(FR)およびそれが隣接する3つの相補性決定領域(CDR)によって構成されるドメインを含む領域を意味し、またその部分配列も、その部分配列が抗原の一部または全部に結合する活性を有する限り含む。特に、抗体軽鎖可変ドメイン(VL)および抗体重鎖可変ドメイン(VH)を含む領域が好ましい。本発明の抗体可変領域は、任意の配列を有してもよく、マウス抗体、ラット抗体、ウサギ抗体、ヤギ抗体、ラクダ抗体、およびこれらの非ヒト抗体のいずれかのヒト化によって得られたヒト化抗体、およびヒト抗体などの、任意の抗体に由来する可変領域であってもよい。「ヒト化抗体」は、再構成(reshaped)ヒト抗体とも呼ばれ、非ヒト哺乳動物由来の抗体、例えばマウス抗体の相補性決定領域(CDR)をヒト抗体のCDRへ移植することによって取得される。CDRを同定するための方法は、当技術分野において公知である(Kabat et al., Sequence of Proteins of Immunological Interest (1987), National Institute of Health, Bethesda, Md.;およびChothia et al., Nature (1989) 342: 877)。そのための一般的な遺伝子組換え手法もまた、当技術分野において公知である(欧州特許出願公開番号EP 125023およびWO 96/02576参照)。
ここで、「異なる細胞上で発現している」という句は、単に、抗原が別々の細胞上で発現していることを意味する。そのような細胞の組み合わせは、例えば、T細胞と別のT細胞のように同じ種類の細胞であってもよいし、またはT細胞とNK細胞のように異なる種類の細胞であってもよい。
複数のアミノ酸改変を組み合わせて用いる場合、組み合わせる改変の数は、特に限定されず、発明の目的を達成できる範囲内で適宜設定することができる。組み合わせる改変の数は、例えば、2個以上30個以下、好ましくは2個以上25個以下、2個以上22個以下、2個以上20個以下、2個以上15個以下、2個以上10個以下、2個以上5個以下、または2個以上3個以下である。
組み合わせる複数のアミノ酸改変は、抗体の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインのみに加えられてもよく、または重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインの両方に適宜分配されてもよい。
(a)アミノ酸残基26〜32(L1)、50〜52(L2)、91〜96(L3)、26〜32(H1)、53〜55(H2)、および96〜101(H3)に存在する超可変ループ(Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987));
(b)アミノ酸残基24〜34(L1)、50〜56(L2)、89〜97(L3)、31〜35b(H1)、50〜65(H2)、および95〜102(H3)に存在するCDR(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991));
(c)アミノ酸残基27c〜36(L1)、46〜55(L2)、89〜96(L3)、30〜35b(H1)、47〜58(H2)、および93〜101(H3)に存在する抗原接触部(MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996));ならびに
(d)HVRアミノ酸残基46〜56(L2)、47〜56(L2)、48〜56(L2)、49〜56(L2)、26〜35(H1)、26〜35b(H1)、49〜65(H2)、93〜102(H3)、および94〜102(H3)を含む、(a)、(b)、および/または(c)の組み合わせ。
特に示されない限り、HVR残基および可変ドメイン中の他の残基(例えば、FR残基)は、上記のKabat et al.に従って、本明細書においてナンバリングされる。
本発明において、アミノ酸改変とは、置換、欠失、付加、挿入、もしくは修飾、またはそれらの組み合わせを意味する。本発明において、アミノ酸改変は、アミノ酸変異と互換的に用いられ、それと同じ意味で用いられ得る。
アミノ酸残基は、一般的な側鎖の性質に基づいて以下のグループに分類される:(1)疎水性残基:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、およびIle;(2)中性親水性残基:Cys、Ser、Thr、Asn、およびGln;(3)酸性残基:AspおよびGlu;(4)塩基性残基:His、Lys、およびArg;(5)鎖の配向に影響する残基:GlyおよびPro;ならびに(6)芳香族残基:Trp、Tyr、およびPhe。
本発明による置換は、保存的置換であってもよく、または非保存的置換であってもよい。あるいは、保存的置換と非保存的置換とが組み合わされてもよい。
これは、例えば、電気化学発光法(ECL法)によって判定することができる(BMC Research Notes 2011, 4:281)。
具体的には、例えば、ビオチン標識された被験抗原結合分子の、CD3およびCD137に結合することができる領域、例えば、Fab領域から構成される低分子抗体、またはその一価抗体(通常の抗体が有する2つのFab領域のうち1つが欠けている抗体)を、sulfo-tag(Ru錯体)で標識されたCD3またはCD137と混合し、混合物をストレプトアビジン固定化プレート上に添加する。この操作において、ビオチン標識された被験抗原結合分子は、プレート上のストレプトアビジンに結合する。sulfo-tagから光を発生させ、その発光シグナルを、Sector Imager 600または2400(MSD K.K.)などを用いて検出し、それによって、CD3またはCD137に対する被験抗原結合分子の上述の領域の結合を確認することができる。
あるいは、このアッセイは、ELISA、FACS(蛍光活性化細胞選別)、ALPHAScreen(増幅発光近接ホモジニアスアッセイスクリーン)、表面プラズモン共鳴(SPR)現象に基づくBIACORE法などによって実施されてもよい(Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2006) 103 (11), 4005-4010)。
いくつかの態様において、アナライトとしてインジェクトされる抗原の濃度は、固定化される他の抗原の濃度よりも少なくとも1倍、2倍、5倍、10倍、30倍、50倍、または100倍高い。
好ましい様式において、アナライトとしてインジェクトされる抗原の濃度は、固定化される他の抗原の濃度よりも100倍高く、結合は、少なくとも80%阻害される。
1つの態様において、抗原結合分子のCD137(固定化)結合活性についてのKD値に対する抗原結合分子のCD3(アナライト)結合活性についてのKD値の比(KD(CD3)/ KD(CD137))を算出し、CD137(固定化)濃度よりもKD値の比(KD(CD3)/ KD(CD137))の10倍、50倍、100倍、または200倍高い、CD3(アナライト)濃度を、上記の競合測定のために用いることができる。(例えば、KD値の比が0.1である場合は、1倍、5倍、10倍、または20倍高い濃度を選択することができる。さらに、KD値の比が10である場合は、100倍、500倍、1000倍、または2000倍高い濃度を選択することができる。)
いくつかの態様において、アナライトとしてインジェクトされる抗原の濃度は、固定化される他の抗原の濃度よりも少なくとも1倍、2倍、5倍、10倍、30倍、50倍、または100倍高い。
好ましい様式において、アナライトとしてインジェクトされる抗原の濃度は、固定化される他の抗原の濃度よりも100倍高く、結合は、少なくとも80%阻害される。
1つの態様において、抗原結合分子のCD137(固定化)結合活性についてのKD値に対する抗原結合分子のCD3(アナライト)結合活性についてのKD値の比(KD(CD3)/ KD(CD137))を算出し、CD137(固定化)濃度よりもKD値の比(KD(CD3)/ KD(CD137))の10倍、50倍、100倍、または200倍高い、CD3(アナライト)濃度を、上記の測定のために用いることができる。(例えば、KD値の比が0.1である場合は、1倍、5倍、10倍、または20倍高い濃度を選択することができる。さらに、KD値の比が10である場合は、100倍、500倍、1000倍、または2000倍高い濃度を選択することができる。)
あるいは、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)を用いた方法が用いられてもよい。FRETとは、励起エネルギーが、近接して位置する2つの蛍光分子の間で互いに、電子共鳴によって直接移動する現象である。FRETが起こると、ドナー(励起状態を有する蛍光分子)の励起エネルギーがアクセプター(ドナーの近くに位置するもう1つの蛍光分子)に移動するため、ドナーから放射される蛍光が消失し(正確には、蛍光の寿命が短縮し)、代わりにアクセプターから蛍光が放射される。この現象の使用によって、CD3とCD137に同時に結合するか否かを解析することができる。例えば、蛍光ドナーを有するCD3および蛍光アクセプターを有するCD137が、被験抗原結合分子に同時に結合すると、ドナーの蛍光は消失し、一方、アクセプターから蛍光が放射される。そのため、蛍光波長の変化が観察される。そのような抗体は、CD3とCD137に同時に結合するものと確認される。他方で、CD3、CD137、および被験抗原結合分子の混合が、CD3と結合した蛍光ドナーの蛍光波長を変化させないならば、この被験抗原結合分子は、CD3およびCD137に結合することができるが、CD3とCD137に同時には結合しない抗原結合ドメインとみなすことができる。
具体的には、CD3およびCD137に対する同時の結合を検出するためのECL-ELISAにおいて陽性であると確認されている被験抗原結合分子をまた、CD3を発現する細胞およびCD137を発現する細胞と混合する。被験抗原結合分子は、抗原結合分子およびこれらの細胞が互いに同時に結合しない限り、異なる細胞上で発現しているCD3およびCD137に同時には結合できないことが示され得る。このアッセイは、例えば、細胞ベースのECL-ELISAによって実施することができる。CD3を発現する細胞を、予めプレート上に固定化する。被験抗原結合分子をそれに結合させた後に、CD137を発現する細胞をプレートに添加する。CD137を発現する細胞上でのみ発現している異なる抗原は、この抗原に対するsulfo-tagで標識された抗体を用いて検出される。抗原結合分子が、それぞれ2つの細胞上で発現している2つの抗原に同時に結合する場合は、シグナルが観察される。抗原結合分子がこれらの抗原に同時には結合しない場合は、いかなるシグナルも観察されない。
あるいは、このアッセイは、ALPHAScreen法によって実施されてもよい。被験抗原結合分子を、ドナービーズに結合したCD3を発現する細胞およびアクセプタービーズに結合したCD137を発現する細胞と混合する。抗原結合分子が、それぞれ2つの細胞上で発現している2つの抗原に同時に結合する場合は、シグナルが観察される。抗原結合分子がこれらの抗原に同時には結合しない場合は、シグナルは観察されない。
あるいは、このアッセイは、Octet相互作用解析法によって実施されてもよい。最初に、ぺプチドタグを付加したCD3を発現する細胞を、ペプチドタグを認識するバイオセンサーに結合させる。CD137を発現する細胞および被験抗原結合分子を、ウェルに入れて、相互作用について解析する。抗原結合分子が、それぞれ2つの細胞上で発現している2つの抗原に同時に結合する場合は、被験抗原結合分子およびCD137を発現する細胞のバイオセンサーへの結合によって引き起こされる大きな波長シフトが観察される。抗原結合分子がこれらの抗原に同時には結合しない場合は、被験抗原結合分子のみのバイオセンサーへの結合によって引き起こされる小さな波長シフトが観察される。
FcγRIのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれNM_000566.3およびNP_000557.1に記載されている;FcγRIIaのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれBC020823.1およびAAH20823.1に記載されている;FcγRIIbのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれBC146678.1およびAAI46679.1に記載されている;FcγRIIIaのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれBC033678.1およびAAH33678.1に記載されている;ならびにFcγRIIIbのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれBC128562.1およびAAI28563.1に記載されている(RefSeq登録番号)。FcγRIIaには、FcγRIIaの131番目のアミノ酸がヒスチジン(H型)またはアルギニン(R型)によって置換された2種類の遺伝子多型が存在する(J. Exp. Med, 172, 19-25, 1990)。FcγRIIbには、FcγRIIbの232番目のアミノ酸がイソロイシン(I型)またはスレオニン(T型)によって置換された2種類の遺伝子多型が存在する(Arthritis. Rheum. 46: 1242-1254 (2002))。FcγRIIIaには、FcγRIIIaの158番目のアミノ酸がバリン(V型)またはフェニルアラニン(F型)によって置換された2種類の遺伝子多型が存在する(J. Clin. Invest. 100(5): 1059-1070 (1997))。FcγRIIIbには、2種類の遺伝子多型(NA1型およびNA2型)が存在する(J. Clin. Invest. 85: 1287-1295 (1990))。
ALPHAScreen法は、2種類のビーズ(ドナーおよびアクセプター)を用いるALPHAテクノロジーによって、以下の原理に基づいて実施される:ドナービーズに結合した分子とアクセプタービーズに結合した分子との間の生物学的相互作用によりこれら2つのビーズが近接して位置する時にのみ、発光シグナルが検出される。レーザーによって励起されたドナービーズ中のフォトセンシタイザーは、周辺の酸素を励起状態の一重項酸素に変換する。一重項酸素は、ドナービーズ周辺に拡散し、それに近接して位置するアクセプタービーズに到達すると、それによってビーズにおける化学発光反応を引き起こし、最終的に光が放出される。ドナービーズに結合した分子とアクセプタービーズに結合した分子との間の相互作用がない場合には、ドナービーズによって産生される一重項酸素がアクセプタービーズに到達しない。したがって、化学発光反応は起きない。
IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4モノクローナル抗体のFc領域を有する抗原結合分子を、対照抗原結合分子として適宜用いることができる。Fc領域の構造は、配列番号:212(RefSeq登録番号AAC82527.1のN末にA付加)、配列番号:213(RefSeq登録番号AAB59393.1のN末にA付加)、配列番号:214(RefSeq登録番号CAA27268.1のN末にA付加)、または配列番号:215(RefSeq登録番号AAB59394.1のN末にA付加)に記載されている。ある特定のアイソタイプの抗体のFc領域のバリアントを有する抗原結合分子を試験物質として用いる場合には、このある特定のアイソタイプの抗体のFc領域を有する抗原結合分子を対照として用いて、バリアントにおける変異の、Fcγ受容体に対する結合活性への効果を試験する。Fcγ受容体に対する結合活性が低下していることがこのように確認されたFc領域バリアントを有する抗原結合分子が、適宜調製される。
その好ましい例には、以下の構成アミノ酸:EUナンバリングに従って定義される220位、226位、229位、231位、232位、233位、234位、235位、236位、237位、238位、239位、240位、264位、265位、266位、267位、269位、270位、295位、296位、297位、298位、299位、300位、325位、327位、328位、329位、330位、331位、および332位のアミノ酸のいずれかの置換による、ある特定のアイソタイプの抗体のFc領域に由来するFc領域を有する抗原結合分子が含まれる。Fc領域の起源である抗体のアイソタイプは、特に限定されず、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4モノクローナル抗体を起源とするFc領域が、適宜用いられ得る。天然型ヒトIgG1抗体を起源とするFc領域が、好適に用いられる。
例えば、EUナンバリングに従って定義される、構成アミノ酸の以下の置換群(数字は、EUナンバリングに従って定義されるアミノ酸残基の位置を表し;数字の前に位置する一文字アミノ酸表記は、置換前のアミノ酸残基を表し;および数字の後に位置する一文字アミノ酸表記は、置換前のアミノ酸残基を表す):
(a)L234F、L235E、およびP331S、
(b)C226S、C229S、およびP238S、
(c)C226SおよびC229S、ならびに
(d)C226S、C229S、E233P、L234V、およびL235A
のいずれかによる、または231〜238位のアミノ酸配列の欠失による、IgG1抗体Fc領域に由来するFc領域を有する抗原結合分子もまた、適宜用いられ得る。
(e)H268Q、V309L、A330S、およびP331S、
(f)V234A、
(g)G237A、
(h)V234AおよびG237A、
(i)A235EおよびG237A、ならびに
(j)V234A、A235E、およびG237A
のいずれかによる、IgG2抗体Fc領域に由来するFc領域を有する抗原結合分子もまた、適宜用いられ得る。
(k)F241A、
(l)D265A、および
(m)V264A
のいずれかによる、IgG3抗体Fc領域に由来するFc領域を有する抗原結合分子もまた、適宜用いられ得る。
(n)L235A、G237A、およびE318A、
(o)L235E、ならびに
(p)F234AおよびL235A
のいずれかによる、IgG4抗体Fc領域に由来するFc領域を有する抗原結合分子もまた、適宜用いられ得る。
CH2またはCH3の界面に電荷反発を導入することによって意図されないH鎖間の会合を抑制する技術において、H鎖定常ドメイン間の界面で互いに接触するアミノ酸残基の例には、1つのCH3ドメインにおけるEUナンバリング356位の残基、EUナンバリング439位の残基、EUナンバリング357位の残基、EUナンバリング370位の残基、EUナンバリング399位の残基、およびEUナンバリング409位の残基、ならびにもう1つのCH3ドメインにおけるそれらのパートナー残基が含まれ得る。
(a)グルタミン酸(E)およびアスパラギン酸(D);ならびに
(b)リジン(K)、アルギニン(R)、およびヒスチジン(H)。
本発明に従って改変されるアミノ酸残基は、上述の抗体可変領域または抗体定常領域におけるアミノ酸残基に限定されない。当業者は、ポリペプチドバリアントまたは異種多量体について、市販のソフトウェアを用いたホモロジーモデリングなどに従い、界面を構成するアミノ酸残基を見出すことができ、会合を制御するように、その位置のアミノ酸残基を改変することができる。
この短いリンカーのために、同じポリペプチド鎖上にコードされるVLおよびVHは、一本鎖Fvを形成することができず、その代わりに、別のポリペプチド鎖上のVHおよびVLとそれぞれ二量体化して、2つの抗原結合部位を形成する。
[VL]-リンカー-[VH]-リンカー-[VH]-リンカー-[VL]、
[VH]-リンカー-[VL]-リンカー-[VL]-リンカー-[VH]、
[VH]-リンカー-[VH]-リンカー-[VL]-リンカー-[VL]、
[VL]-リンカー-[VL]-リンカー-[VH]-リンカー-[VH]、および
[VL]-リンカー-[VH]-リンカー-[VL]-リンカー-[VH]。
Ser、
Gly-Ser、
Gly-Gly-Ser、
Ser-Gly-Gly、
Gly-Gly-Gly-Ser(配列番号:216)、
Ser-Gly-Gly-Gly(配列番号:217)、
Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(配列番号:218)、
Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(配列番号:219)、
Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(配列番号:220)、
Ser-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly(配列番号:221)、
Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(配列番号:222)、
Ser-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly(配列番号:223)、
(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(配列番号:218))n、および
(Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(配列番号:219))n、
(ここで、nは1以上の整数である)が含まれ得る。
しかし、ペプチドリンカーの長さまたは配列は、目的に応じて当業者が適宜選択することができる。
これらの架橋剤は、市販されている。
4つの抗体可変ドメインを連結するためには、3つのリンカーが通常必要である。用いられるこれらのリンカーのすべては、同じリンカーであってもよく、または異なるリンカーであってもよい。
例えば、本発明の抗原結合分子は、分子の意図される機能を実質的に変化させることなく、さらに任意に改変することができる。そのような変異は、例えば、アミノ酸残基の保存的置換によって行うことができる。あるいは、本発明の抗原結合分子の意図される機能を変化させる改変であっても、そのような改変によって変化した機能が本発明の目的の範囲内である限り、実施されてもよい。
哺乳動物の抗体産生細胞;および
抗体をコードするDNAを含む発現ベクターで形質転換された真核細胞。
ここで、真核細胞には、酵母および動物細胞が含まれる。例えば、CHO細胞またはHEK293H細胞は、抗体をコードするDNAを含む発現ベクターでの形質転換のための典型的な動物細胞である。他方、本発明の抗体には、その位置に糖鎖修飾がない抗体も含まれる。糖鎖で修飾されていない定常領域を有する抗体は、これらの抗体をコードする遺伝子の、大腸菌などの原核細胞における発現によって取得することができる。
ニン、プログラム細胞死タンパク質1、プロインスリン、プロラクチン、プロタンパク質転換酵素PC9、プロリラキシン、前立腺特異的膜抗原(PSMA)、プロテインA、プロテインC、プロテインD、プロテインS、プロテインZ、PS、PSA、PSCA、PsmAr、PTEN、PTHrp、Ptk、PTN、P-セレクチン糖タンパク質リガンド-1、R51、RAGE、RANK、RANKL、RANTES、リラキシン、リラキシンA鎖、リラキシンB鎖、レニン、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)F、Ret、レチキュロン(reticulon)4、リウマチ因子、RLI P76、RPA2、RPK-1、RSK、RSV Fgp、S100、RON-8、SCF/KL、SCGF、スクレロスチン、SDF-1、SDF1α、SDF1β、SERINE、血清アミロイドP、血清アルブミン、sFRP-3、Shh、志賀様毒素II、SIGIRR、SK-1、SLAM、SLPI、SMAC、SMDF、SMOH、SOD、SPARC、スフィンゴシン1-リン酸受容体1、ブドウ球菌リポテイコ酸、Stat、STEAP、STEAP-II、幹細胞因子(SCF)、ストレプトキナーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、シンデカン-1、TACE、TACI、TAG-72(腫瘍関連糖タンパク質-72)、TARC、TB、TCA-3、T-細胞受容体α/β、TdT、TECK、TEM1、TEM5、TEM7、TEM8、テネイシン、TERT、精巣PLAP様アルカリホスファターゼ、TfR、TGF、TGF-α、TGF-β、Pan特異的TGF-β、TGF-βRII、TGF-βRIIb、TGF-βRIII、TGF-βRl(ALK-5)、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β4、TGF-β5、TGF-I、トロンビン、トロンボポエチン(TPO)、胸腺間質性リンホプロテイン(Thymic stromal lymphoprotein)受容体、胸腺Ck-1、甲状腺刺激ホルモン(TSH)、チロキシン、チロキシン結合グロブリン、Tie、TIMP、TIQ、組織因子、組織因子プロテアーゼインヒビター、組織因子タンパク質、TMEFF2、Tmpo、TMPRSS2、TNF受容体I、TNF受容体II、TNF-α、TNF-β、TNF-β2、TNFc、TNF-RI、TNF-RII、TNFRSF10A(TRAIL R1 Apo-2/DR4)、TNFRSF10B(TRAIL R2 DR5/KILLER/TRICK-2A/TRICK-B)、TNFRSF10C(TRAIL R3 DcR1/LIT/TRID)、TNFRSF10D(TRAIL R4 DcR2/TRUNDD)、TNFRSF11A(RANK ODF R/TRANCE R)、TNFRSF11B(OPG OCIF/TR1)、TNFRSF12(TWEAK R FN14)、TNFRSF12A、TNFRSF13B(TACI)、TNFRSF13C(BAFF R)、TNFRSF14(HVEM ATAR/HveA/LIGHT R/TR2)、TNFRSF16(NGFR p75NTR)、TNFRSF17(BCMA)、TNFRSF18(GITR AITR)、TNFRSF19(TROY TAJ/TRADE)、TNFRSF19L(RELT)、TNFRSF1A(TNF Rl CD120a/p55-60)、TNFRSF1B(TNF RII CD120b/p75-80)、TNFRSF21(DR6)、TNFRSF22(DcTRAIL R2 TNFRH2)、TNFRSF25(DR3 Apo-3/LARD/TR-3/TRAMP/WSL-1)、TNFRSF26(TNFRH3)、TNFRSF3(LTbR TNF RIII/TNFC R)、TNFRSF4(OX40 ACT35/TXGP1 R)、TNFRSF5(CD40 p50)、TNFRSF6 (Fas Apo-1/APT1/CD95)、TNFRSF6B(DcR3 M68/TR6)、TNFRSF7(CD27)、TNFRSF8 (CD30)、TNFRSF9(4-1 BB CD137/ILA)、TNFRST23(DcTRAIL R1 TNFRH1)、TNFSF10 (TRAIL Apo-2リガンド/TL2)、TNFSF11(TRANCE/RANKリガンドODF/OPGリガンド)、TNFSF12(TWEAK Apo-3リガンド/DR3リガンド)、TNFSF13(APRIL TALL2)、TNFSF13B(BAFF BLYS/TALL1/THANK/TNFSF20)、TNFSF14(LIGHT HVEMリガンド/LTg)、TNFSF15(TL1A/VEGI)、TNFSF18(GITRリガンドAITRリガンド/TL6)、TNFSF1A(TNF-aコネクチン(Conectin)/DIF/TNFSF2)、TNFSF1B(TNF-b LTa/TNFSF1)、TNFSF3(LTb TNFC/p33)、TNFSF4(OX40リガンドgp34/TXGP1)、TNFSF5(CD40リガンドCD154/gp39/HIGM1/IMD3/TRAP)、TNFSF6(FasリガンドApo-1リガンド/APT1リガンド)、TNFSF7(CD27リガンドCD70)、TNFSF8(CD30リガンドCD153)、TNFSF9(4-1 BBリガンドCD137リガンド)、TNF-α、TNF-β、TNIL-I、毒性代謝産物、TP-1、t-PA、Tpo、TRAIL、TRAIL R、TRAIL-R1、TRAIL-R2、TRANCE、トランスフェリン受容体、トランスフォーミング成長因子(TGF)、例えばTGF-αおよびTGF-β、膜貫通糖タンパク質NMB、トランスサイレチン、TRF、Trk、TROP-2、栄養膜糖タンパク質、TSG、TSLP、腫瘍壊死因子(TNF)、腫瘍関連抗原CA 125、ルイスY関連糖質を発現する腫瘍関連抗原、TWEAK、TXB2、Ung、uPAR、uPAR-1、ウロキナーゼ、VAP-1、血管内皮増殖因子(VEGF)、バスピン(vaspin)、VCAM、VCAM-1、VECAD、VE-カドヘリン、VE-カドヘリン-2、VEFGR-1(flt-1)、VEFGR-2、VEGF受容体(VEGFR)、VEGFR-3(flt-4)、VEGI、VIM、ウイルス抗原、VitB12受容体、ビトロネクチン受容体、VLA、VLA-1、VLA-4、VNRインテグリン、フォン・ウィルブランド因子(vWF)、WIF-1、WNT1、WNT10A、WNT10B、WNT11、WNT16、WNT2、WNT2B/13、WNT3、WNT3A、WNT4、WNT5A、WNT5B、WNT6、WNT7A、WNT7B、WNT8A、WNT8B、WNT9A、WNT9B、XCL1、XCL2/SCM-l-β、XCLl/リンホタクチン、XCR1、XEDAR、XIAP、ならびにXPD含まれる。
(1)可変領域が、配列番号:159のアミノ酸配列を含むCD3ε(イプシロン)の細胞外ドメインに結合する、
(2)抗原結合分子が、CD137に対するアゴニスト活性を有する、
(3)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞のCD3活性化を誘導するが、CD137を発現する細胞に対するT細胞の活性化は誘導しない、および
(4)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞の非存在下では、PBMCからのサイトカインの放出を誘導しない。
(1)可変領域が、配列番号:159のアミノ酸配列を含むCD3ε(イプシロン)の細胞外ドメインに結合する、
(2)抗原結合分子が、CD137に対するアゴニスト活性を有する、
(3)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞の細胞傷害活性を誘導するが、CD137を発現する細胞に対するT細胞の活性化は誘導しない、および
(4)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞の非存在下では、PBMCからのサイトカインの放出を誘導しない。
いくつかの態様において、本発明の抗原結合分子は、以下の(1)〜(2)からなる群より選択される少なくとも1つの特徴を有する:
(1)抗原結合分子が、CD137に対する結合についてCD137リガンドと競合しない、および
(2)抗原結合分子が、第3の抗原の分子を発現する細胞に対するT細胞の細胞傷害活性を誘導するが、CD137を発現する細胞に対するT細胞の細胞傷害活性は誘導しない。
1つの局面において、本発明の「CD137アゴニスト抗体」または「CD137に対するアゴニスト活性を有する抗原結合分子」とはまた、CD137を発現する細胞、組織、または生体に添加された時に、CD137を発現する細胞を少なくとも約5%、具体的には少なくとも約10%、またはより具体的には少なくとも約15%活性化する抗体または抗原結合分子を指し、ここで100%の活性化とは、生理学的条件下で等モル量の結合パートナーによって達成される活性化のレベルである。様々な具体例において、本発明の医薬組成物としての使用のためのCD137アゴニスト抗体は、細胞の活性を少なくとも約5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、125%、150%、175%、200%、250%、300%、350%、400%、450%、500%、750%、または1000%活性化することができる。いくつかの態様において、本明細書において用いられる「結合パートナー」とは、CD137に結合し、かつCD137を発現する細胞の活性化を誘導することが知られている分子である。さらなる態様において、結合パートナーの例には、WO2005/035584A1に記載されているウレルマブ(Urelumab)(CAS登録番号934823-49-1)およびそのバリアント、WO2012/032433A1に記載されているウトミルマブ(Utomilumab)(CAS登録番号1417318-27-4)およびそのバリアント、ならびに様々な公知のCD137アゴニスト抗体が含まれる。ある特定の態様において、結合パートナーの例には、CD137リガンドが含まれる。さらなる態様において、抗CD137アゴニスト抗体による、CD137を発現する細胞の活性化は、IL6分泌を特徴決定するELISAを用いて判定されてもよい(例えば、本明細書における参考実施例5−2参照)。結合パートナーとして用いられる抗CD137抗体および測定のための抗体濃度は、参考実施例5−2を参照とすることができ、ここで100%の活性化とは、抗体によって達成される活性化のレベルである。さらなる態様において、配列番号:142の重鎖アミノ酸配列および配列番号:144の軽鎖アミノ酸配列を含む抗体を、結合パートナーとして測定のために30μg/mLで用いることができる(例えば、本明細書における参考実施例5−2参照)。いくつかの態様において、抗CD137アゴニスト抗体によるCD137を発現する細胞の活性化は、例えば、CD137シグナル伝達に応答してレポーター遺伝子(例えば、ルシフェラーゼ)を発現する組換えT細胞を用いること、および、T細胞の活性化の指標としてレポーター遺伝子の発現またはレポーター遺伝子産物の活性を検出することによって、判定されてもよい。CD137シグナル伝達に応答してレポーター遺伝子を発現する組換えT細胞を抗原結合分子と共培養した時に、レポーター遺伝子の発現またはレポーター遺伝子産物の活性が、陰性対照のものより10%、20%、30%、40%、50%、90%、100%、またはそれよりも大きく上回っているならば、抗原結合分子は、CD137を発現する細胞に対するT細胞の活性化を誘導すると判定される(例えば、本明細書における実施例2.2参照)。
(a1)配列番号:16に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:30に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:44に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a2)配列番号:17に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:31に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:45に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:64に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:69に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:74に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a3)配列番号:18に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:32に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:46に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a4)配列番号:19に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:33に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:47に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a5)配列番号:19に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:33に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:47に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:65に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:70に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:75に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a6)配列番号:20に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:34に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:48に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a7)配列番号:22に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:36に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:50に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a8)配列番号:23に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:37に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:51に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a9)配列番号:23に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:37に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:51に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a10)配列番号:24に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:38に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:52に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a11)配列番号:25に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:39に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:53に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a12)配列番号:26に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:40に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:54に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a13)配列番号:26に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:40に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:54に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a14)配列番号:27に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:41に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:55に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a15)配列番号:28に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:42に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:56に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(b1)配列番号:16のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:30のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:44のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b2)配列番号:17のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:31のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:45のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:64のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:69のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:74のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b3)配列番号:18のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:32のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:46のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b4)配列番号:19のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:33のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:47のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b5)配列番号:19のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:33のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:47のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:65のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:70のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:75のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b6)配列番号:20のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:34のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:48のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b7)配列番号:22のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:36のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:50のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b8)配列番号:23のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:37のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:51のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b9)配列番号:23のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:37のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:51のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b10)配列番号:24のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:38のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:52のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b11)配列番号:25のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:39のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:53のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b12)配列番号:26のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:40のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:54のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b13)配列番号:26のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:40のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:54のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b14)配列番号:27のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:41のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:55のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b15)配列番号:28のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:42のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:56のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(c1)配列番号:2に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c2)配列番号:3に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:59に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c3)配列番号:4に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c4)配列番号:5に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c5)配列番号:5に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:60に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c6)配列番号:6に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c7)配列番号:8に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c8)配列番号:9に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c9)配列番号:9に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c10)配列番号:10に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c11)配列番号:11に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c12)配列番号:12に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c13)配列番号:12に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c14)配列番号:13に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c15)配列番号:14に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(d1)配列番号:2の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d2)配列番号:3の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:59の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d3)配列番号:4の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d4)配列番号:5の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d5)配列番号:5の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:60の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d6)配列番号:6の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d7)配列番号:8の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d8)配列番号:9の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d9)配列番号:9の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d10)配列番号:10の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d11)配列番号:11の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d12)配列番号:12の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d13)配列番号:12の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d14)配列番号:13の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d15)配列番号:14の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL)。
ヒトCD137タンパク質における
SPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAECDCTPGFHCLGAGCSMCEQDCKQGQELTKKGC配列(配列番号:154)を含む領域を認識する抗体、
DCTPGFHCLGAGCSMCEQDCKQGQELTKKGC配列(配列番号:149)を含む領域を認識する抗体、
LQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAEC配列(配列番号:152)を含む領域を認識する抗体、および
LQDPCSNCPAGTFCDNNRNQIC配列(配列番号:147)を含む領域を認識する抗体。
FACSCanto(商標)II
FACSAria(商標)
FACSArray(商標)
FACSVantage(商標) SE
FACSCalibur(商標)(すべてBD Biosciencesの商品名である)
EPICS ALTRA HyPerSort
Cytomics FC 500
EPICS XL-MCL ADC EPICS XL ADC
Cell Lab Quanta/Cell Lab Quanta SC(すべてBeckman Coulterの商品名である)。
候補競合抗原結合分子が、競合抗原結合分子の非存在下で実施される対照実験における結合活性と比較して少なくとも20%、好ましくは少なくとも20〜50%、およびより好ましくは少なくとも50%、抗原結合ドメインを含む試験抗原結合分子の結合をブロックすることができる場合、試験抗原結合分子は、競合抗原結合分子が結合する同じエピトープに実質的に結合するか、または同じエピトープへの結合について競合すると判定される。
(a)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、重鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸26位のA、D、E、I、G、K、L、M、N、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27位のD、F、G、I、M、もしくはL;
アミノ酸28位のD、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸29位のFもしくはW;
アミノ酸30位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のF、I、N、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のA、H、I、K、L、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸33位のW;
アミノ酸34位のF、I、L、M、もしくはV;
アミノ酸35位のF、H、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸50位のE、F、H、I、K、L、M、N、Q、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸51位のI、K、もしくはV;
アミノ酸52位のK、M、R、もしくはT;
アミノ酸52b位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸52c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のE、F、G、H、L、M、N、Q、W、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸57位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸58位のA、F、H、K、N、P、R、もしくはY;
アミノ酸59位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸60位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸61位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸62位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸63位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸64位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸65位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸93位のHもしくはR;
アミノ酸94位のF、G、H、L、M、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸95位のIもしくはV;
アミノ酸96位のF、H、I、K、L、M、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸97位のF、Y、もしくはW;
アミノ酸98位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸99位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100b位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100d位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100f位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100g位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100h位のA、D、E、G、H、I、L、M、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸100i位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸101位のA、D、F、I、L、M、N、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸102位のA、D、E、F、G、H、I K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
ならびに/または
(b)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、軽鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸24位のA、D、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸25位のA、G、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸26位のA、D、E、F、G、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸27位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27b位のA、I、L、M、P、T、もしくはV;
アミノ酸27c位のA、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27d位のA、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸28位のG、N、S、もしくはT;
アミノ酸29位のA、F、G、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸30位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のI、L、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のF、W、もしくはY;
アミノ酸33位のA、F、H、L、M、Q、もしくはV;
アミノ酸34位のA、H、もしくはS;
アミノ酸50位のI、K、L、M、もしくはR;
アミノ酸51位のA、E、I、K、L、M、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸52位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、G、H、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸89位のA、G、K、S、もしくはY;
アミノ酸90位のQ;
アミノ酸91位のG;
アミノ酸92位のA、D、H、K、N、Q、R、S、もしくはT;
アミノ酸93位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸94位のA、D、H、I、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸95位のP;
アミノ酸96位のFもしくはY;および
アミノ酸97位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV
を含む。
(1)哺乳類細胞、例えばCHO(チャイニーズハムスター卵巣細胞株)、COS(サル腎臓細胞株)、骨髄腫細胞(Sp2/O、NS0など)、BHK(ベビーハムスター腎臓細胞株)、HEK293(剪断されたアデノウイルス(Ad)5 DNAを伴うヒト胎児腎臓細胞株)、PER.C6細胞(アデノウイルス5型(Ad5) E1AおよびE1B遺伝子で形質転換されたヒト胎児網膜細胞株)、Hela、およびVero(Current Protocols in Protein Science (May, 2001, Unit 5.9, Table 5.9.1));
(2)両生類細胞、例えばアフリカツメガエル(Xenopus)卵母細胞;ならびに
(3)昆虫細胞、例えばsf9、sf21、およびTn5。
抗体はまた、大腸菌(mAbs 2012 Mar-Apr; 4(2): 217-225)または酵母(WO2000023579)を用いて調製することもできる。大腸菌を用いて調製された抗体は、糖鎖が付加されていない。他方、酵母を用いて調製された抗体は、糖鎖が付加されている。
アミノ酸改変は、置換に限定されず、欠失、付加、挿入、もしくは修飾、またはそれらの組み合わせであってもよい。
(i)各々がCD3またはCD137に結合するその抗体可変領域において少なくとも1個のアミノ酸が改変された抗原結合分子のライブラリーを調製する工程であって、該改変された可変領域の少なくとも1個のアミノ酸が互いに異なる、工程;
(ii)調製されたライブラリーから、CD3およびCD137に対する結合活性を有するが、CD3とCD137に同時には結合しない可変領域を含む抗原結合分子を選択する工程;
(iii)工程(ii)において選択された抗原結合分子の可変領域をコードする核酸と、第3の抗原に結合する抗原結合分子の可変領域をコードする核酸とを含む宿主細胞を培養して、CD3およびCD137に結合することができるが、CD3とCD137に同時には結合しない抗体可変領域と、第3の抗原に結合する可変領域とを含む抗原結合分子を発現させる工程;ならびに
(iv)宿主細胞培養物から抗原結合分子を回収する工程。
(v)調製されたライブラリーから、CD3およびCD137に対する結合活性を有するが、各々が異なる細胞上で発現しているCD3とCD137に同時には結合しない可変領域を含む抗原結合分子を選択する工程。
複数のアミノ酸改変を組み合わせて用いる場合、組み合わせる改変の数は、特に限定されず、例えば、2個以上30個以下、好ましくは2個以上25個以下、2個以上22個以下、2個以上20個以下、2個以上15個以下、2個以上10個以下、2個以上5個以下、または2個以上3個以下である。
組み合わされる複数のアミノ酸改変は、抗体の重鎖可変ドメインもしくは軽鎖可変ドメインのみに加えられてもよく、または重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインの両方に適宜分配されてもよい。
1.1.親和性成熟バリアントの配列
親Dual-Fab H183L072(重鎖:配列番号:1;軽鎖:配列番号:57)の結合親和性を増加させるために、H183L072を鋳型として用いて、可変領域に単一のまたは複数の変異を導入することにより、1,000個よりも多いDual-Fabバリアントを生成した。抗体を、Expi293(Invitrogen)で発現させ、プロテインA精製、続いて、ゲル濾過が必要な場合にはゲル濾過によって精製した。複数の変異を有する15個の示されたバリアントの配列を、表1.1および1.2に列記し、結合動態を、実施例1.2.2において、下記のBiacore T200機器(GE Healthcare)を用いて25℃ および/または37℃で評価する。可変領域上の単一の変異による、ヒトCD137およびヒトCD3に対する親和性の変化の倍率を、表1.3に列記する。
1.2.1.ヒトCD3およびCD137の発現および精製
ヒトCD3複合体(ヒトCD3egリンカー)のγサブユニットおよびεサブユニットを29-merリンカーによって連結し、Flag-タグをγサブユニットのC末端に融合させた(配列番号:84、表1.1aおよび1.2a)。この構築物を、FreeStyle293F細胞株(Thermo Fisher)を用いて一過性に発現させた。ヒトCD3egリンカーを発現する馴化培地を、Q HP樹脂(GE healthcare)を充填したカラムを用いて濃縮し、次いで、FLAG-タグ親和性クロマトグラフィーに適用した。ヒトCD3egリンカーを含有する画分を収集し、続いて、1×D-PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラム(GE healthcare)に供した。次いで、ヒトCD3egリンカーを含有する画分をプールし、-80℃で保管した。
ヒトCD3に対するDual-Fab抗体(Dual-Ig)の結合親和性を、Biacore T200機器(GE Healthcare)を用いて25℃で評価した。抗ヒトFc(GE Healthcare)を、アミンカップリングキット(GE Healthcare)を用いてCM4センサーチップのすべてのフローセルの上に固定化した。抗体を抗Fcセンサー表面の上に捕捉し、次いで、組換えヒトCD3またはCD137をフローセルの上にインジェクトした。すべての抗体およびアナライトを、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3を含有するACES pH 7.4において調製した。センサー表面は、3M MgCl2でサイクル毎に再生させた。結合親和性は、Biacore T200 Evaluation software、version 2.0(GE Healthcare)を用いて、データをプロセシングし、1:1結合モデルにフィットさせることによって決定させた。CD137結合親和性アッセイを、アッセイ温度を37℃に設定したことを除いて、同じ条件で行った。組換えヒトCD3およびCD137に対するDual-Fab抗体の結合親和性を表1.4に示す。
Dual-Igバリアントの有効性を評価するために、腫瘍抗原を認識する1つのアームと、エフェクター細胞、主にT細胞を認識する別のアームとを有する、二重特異性抗体または三重特異性抗体を生成した。腫瘍抗原グリピカン-3(GPC3)を標的とする抗GPC3(重鎖:配列番号:206;軽鎖:配列番号:207)、または陰性対照であるキーホールリンペットヘモシアニン(KLH)(本明細書においてCtrlと名づけられる)抗体を、抗標的結合アームとして用い、実施例1.1および1.2に記載される抗体を、(Proc Natl Acad Sci USA. 2013 Mar 26; 110(13): 5145-5150)に記載されている方法によるFab-アーム交換(FAE)を用いて生成した。二重特異性抗体または三重特異性抗体の分子形式は、従来のIgGと同じ形式である。例えば、GPC3/H1643L581は、GPC3、CD3、およびCD137に結合することができる三重特異性抗体である。実施例1.1に記載されるどのDual-Ig三重特異性バリアントが、CD137活性に起因する細胞傷害活性の向上に寄与するかを特定するために、GPC3およびCD3に結合することができるGPC3/CD3ε二重特異性抗体(表1.1)を、対照として含めた。生成したすべての抗体は、Fcγ受容体に対する親和性が減弱したサイレントFcを含む。
2.1.インビトロでの親和性成熟バリアントのCD3アゴニスト活性の評価
親和性成熟の結果としてCD3アゴニスト活性を評価するために、NFAT-luc2 Jurkatルシフェラーゼアッセイを実施する。簡潔に述べると、細胞膜上にヒトGPC3を発現する4×103細胞/ウェルのSK-pca60細胞(参考実施例13)を、標的細胞として用い、0.02、0.2、および2 nMの三重特異性抗体の存在下で24時間、2.0×104細胞/ウェルのNFAT-luc2 Jurkat細胞(E:T比 5)と共培養した。バリアントを、図1.1の上のパネルのプレート1および図1.1の下のパネルのプレート2に分けた。24時間後に、ルシフェラーゼ活性を、Bio-Gloルシフェラーゼアッセイシステム(Promega、G7940)で、製造業者の説明書に従って検出した。GloMax(登録商標)Explorer System(Promega #GM3500)を用いて、発光(単位)を検出し、Graphpad Prism 7を用いて、捕捉値をプロットした。親三重特異性抗体GPC3/H183L072および二重特異性抗体GPC3/CD3εを、2 nMの濃度で含めた。図1.1は、大部分のバリアントが類似したCD3アゴニスト活性を有することを示した。特に2 nMで、バリアントは、親H183L072と類似した活性を有する。図1.1の上のパネルは、プレート1におけるすべてのバリアントが類似したCD3アゴニスト活性を有することを示した。図1.1の下のパネルは、プレート2におけるバリアントのうち、H1610L939がわずかにより弱いCD3アゴニスト活性を有し、他方、H2591L581が最も強いCD3アゴニスト活性を有することを示した。
どの抗体バリアントが親和性成熟の結果として強いCD137アゴニスト活性をもたらし得たかを評価するために、エフェクター細胞としてGloResponse(商標)NF-κB-Luc2/CD137 Jurkat細胞株(Promega #CS196004)を用い、上記と同様に、SK-pca60細胞株(参考実施例13)を標的細胞として用いた。4.0×103細胞/ウェルのSK-pca60細胞(標的細胞)および2.0×104細胞/ウェルのNF-κB-Luc2/CD137 Jurkat(エフェクター細胞)の両方を、白底96ウェルアッセイプレート(Costar、3917)の各ウェルにE:T比5で加えた。抗体を0.5 nM、2.5nM、および5 nMの濃度で各ウェルに加え、37℃、5% CO2で37℃にて5時間インキュベートした。表れたルシフェラーゼを、Bio-Gloルシフェラーゼアッセイシステム(Promega、G7940)で、製造業者の説明書にしたがって検出した。GloMax(登録商標)Explorer System(Promega #GM3500)用いて、発光(単位)を検出し、Graphpad Prism 7を用いて、捕捉値をプロットした。
CD3、CD137活性化についての知見をインビトロ細胞傷害活性に拡大適用するために、前述の親和性成熟バリアントを、ヒト末梢血単核細胞を用いたSK-pca60細胞に対するT細胞依存性細胞傷害活性(TDCC)の活性の評価に供した。
商業的に購入したPBMCを含有するクライオバイアル(STEMCELL Technologies.)を、37℃の水浴中に置き、細胞を解凍した。次いで、細胞を、9 mLの培地(標的細胞を培養するために用いられる培地)を含有する15 mLファルコンチューブ中に分注した。次いで、細胞懸濁液を、1,200 rpmで5分間、室温での遠心分離に供した。上清を静かに吸引し、新鮮な温めた培地を再懸濁のために添加して、ヒトPBMC溶液として用いた。
細胞傷害活性を、PBMCの存在下でxCELLigence Real-Time Cell Analyzer(Roche Diagnostics)を用いて腫瘍細胞増殖抑制率を観察することによって評価した。図1.3は、抗GPC3親和性成熟Dual-Fab三重特異性抗体のTDCC活性を示す。SK-pca60細胞株を、標的細胞として用いた。標的細胞をディッシュから剥離し、細胞を3.5×103細胞/ウェルに調整することによって100μL/ウェルの分割量で、細胞をE-plate 96(Roche Diagnostics)にプレーティングし、xCELLigence Real-Time Cell Analyzerを用いて、細胞増殖の測定を開始した。24時間後に、プレートを取り出して、各濃度(5 nMから開始した3倍系列希釈、すなわち、0.19、0.56、1.67、および5 nM)に調製したそれぞれの抗体50μLを、プレートに加えた。室温で15分間の反応後に、(実施例2.3.1)において調製された50μLの新鮮なヒトPBMC溶液を、0.5のエフェクター:標的比(すなわち、1.75×103細胞/ウェル)で加え、細胞増殖の測定を、xCELLigence Real-Time Cell Analyzerを用いて再開した。反応は、5%二酸化炭素ガスの条件下、37℃で実施した。CD137シグナル伝達は、T細胞生存を増強し、かつ活性化誘導細胞死を阻止するため、TDCCアッセイを低いE:T比で実施した。CD137活性化が寄与する優れた細胞傷害活性を観察するために、期間の延長が必要とされる場合がある。よって、PBMCの添加のおよそ120時間後に、下記の式を用いて、細胞増殖抑制(CGI)率(%)を決定した。計算において用いたxCELLigence Real-Time Cell Analyzerから得られたセルインデックス値は、抗体添加の直前の時点のセルインデックス値を1として定義した正規化値であった。
細胞増殖抑制率(%)=(A−B)×100/(A−1)
Aは、抗体を添加していないウェル(標的細胞およびヒトPBMCのみを含有する)におけるセルインデックス値の平均値を表し、Bは、標的ウェルのセルインデックス値の平均値を表す。試験は三連で実施した。
抗体のインビトロ効力をさらに確認するために、それらをまた、サイトカイン放出についても評価した。実施例2.3.2において同様に実施したTDCCアッセイ由来の48時間での上清を採取して、サイトカインの存在について評価した。大部分の抗体は、図1.1におけるGPC3/CD3εと同様のCD3アゴニスト活性を示すため、GPC3/CD3εをこのアッセイに加えて、CD137との相乗活性の結果としてのサイトカイン放出を評価した。同様に、GPC3/H1643L581を、内部プレート対照として用いた。総サイトカイン放出を、cytometric bead array(CBA) Human Th1/T2 Cytokine kit II(BD Biosciences #551809)を用いて評価した。IFNγ(図1.3c)、IL-2(図1.3d)、およびIL-6(図1.3e)を評価した。
3.1.抗GPC3/CD137xCD3(2+1)三重特異性抗体の調製
標的非依存性の細胞傷害活性およびサイトカイン放出を調べるために、CrossMabおよびFAEテクノロジーを利用することによって、三重特異性抗体を生成した(図2.1および2.2)。各アームが2つの結合ドメインを有し、その結果、1つの分子中に4つの結合ドメインを有する四価IgG様分子である抗体A(mAb A)を、上述のようなCrossMabで生成した。二価IgGである抗体B(mAb B)は、従来のIgGと同じ形式である。mAb AおよびmAb Bの両方のFc領域は、Fcγ受容体に対する親和性が減弱したサイレントなFcγRであり、脱グリコシル化され、かつFAEに適用可能である。6つの三重特異性抗体を構築した。6つの三重特異性抗体における各Fv領域の標的抗原を、表2.1に示す。mAb A、mAb B、およびmAb ABの結合ドメインの各々の命名規則を、図2.2に示す。それぞれの三重特異性抗体であるmAb ABを生成するためのmAb AとmAb Bのペア、およびその配列番号を、表2.2および表2.2に示す。WO2005/035584A1に記載された抗体CD3D(2)_i121(AN121と省略される)を、抗CD3抗体として用いた。表2に記載された三重特異性抗体を、上記の方法によって発現させ、精製した。
三重特異性抗体のヒトCD3およびCD137に対する結合親和性を、Biacore T200機器(GE Healthcare)を用いて37℃で評価した。抗ヒトFc抗体(GE Healthcare)を、アミンカップリングキット(GE Healthcare)を用いてCM4センサーチップのすべてのフローセル上に固定化した。抗Fcセンサー表面上に抗体を捕捉し、次いで、組換えヒトCD3またはCD137を、フローセル上にインジェクトした。すべての抗体およびアナライトは、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3を含有するACES pH 7.4において調製した。センサー表面は、サイクル毎に3M MgCl2で再生させた。結合親和性は、Biacore T200 Evaluation software, version 2.0(GE Healthcare)を用いて、データをプロセシングし、1:1結合モデルにフィットさせることによって決定した。
2+1形式の三重特異性抗体GPC3/CD137xCD3、GPC3/CtrlxCD3、または親Dual-Fab H183L072に由来する1+1形式のGPC3/H183L072は、標的細胞であるGPC3を発現するSK-pca60の存在下でJurkat細胞の用量依存的活性化をもたらした(参考実施例15−5;図28)。2+1形式の三重特異性形式のみが、hCD137を発現するCHOの存在下でJurkat細胞活性化をもたらしたが、GPC3/H183L072を用いた1+1形式の三重特異性形式はもたらさなかったこともまた、示された(参考実施例15−6;図29)。これは、2+1形式が、T細胞の腫瘍抗原非依存性活性化を潜在的にもたらし得ることを示唆した。
オフターゲット毒性についての三重特異性形式の比較をまた、ヒトPBMC溶液を用いて評価した。簡潔に述べると、実施例2.3.1に記載されるように調製された2.0×105個のPBMCを、標的細胞の非存在下で、80、16、および3.2 nMの三重特異性抗体と48時間インキュベートした。IL-2はいずれの抗体によっても検出されなかったため、上清におけるIL-6、IFNγ、およびTNFαのレベルを、図2.4a〜2.4cに示す。サイトカイン放出の測定を、実施例2.3.3に記載されるものと同様に実施した。実施例2と同様に、親和性成熟バリアントを2プレートに分けた。図2.4に示すように、GPC3/CD137xCD3は、PBMCからのIFNγ(図2.4a)、TNFα(図2.4b)、およびIL-6(図2.4c)の放出をもたらしたが、抗GPC3/Dual-Fabはもたらさなかった。これらの結果は、GPC3/CD137xCD3三重特異性形式が、標的細胞の非存在下でPBMCの非特異的活性化をもたらしたことを示唆する。最後に、データは、Dual-Fab三重特異性1+1形式が、オフターゲット毒性を伴わずに標的特異的エフェクター細胞活性化を付与できることを示した。
4.1.抗GPC3/Dual-Fab、GPC3/CD3ε、およびGPC3/CD137二重特異性抗体の調製
インビボ有効性研究のための抗体を、実施例1.3に記載されるように生成した。実施例1において用いた抗GPC3/Dual-FabおよびGPC3/CD3εに加えて、抗CD137抗体を、実施例1.3においてFAEが実施される前に実施例1.1において生成された抗体(表1.1)でのように、二価形態として生成して、GPC3/CD137を取得した。ヒト化huNOGマウス研究について言うと、抗体は、Fcγ受容体に対する親和性が減弱したヒトFcを含む。これに対して、CD137/CD3ダブルヒト化マウス研究のためには、抗体は、Fcγ受容体に対する親和性が減弱したマウスFcを含む。
ヒトCD137ノックイン(KI)マウス株を、マウス胚性幹細胞を用いてマウス内在性Cd137ゲノム領域をヒトCD137ゲノム配列で置き換えることによって生成した。ヒトCD3 EDG置換マウスは、CD3複合体の3つの成分CD3e、CD3d、およびCD3gがすべて、そのヒトカウンターパートCD3E、CD3D、およびCD3Gで置き換えられている株として確立された(Scientific Rep. 2018; 8: 46960)。CD137/CD3ダブルヒト化マウス株を、ヒトCD137 KIマウスをヒトCD3 EDG置換マウスと交配することによって確立した。
マウスがん細胞株LL/2(LLC1)(ATCC)に、pCXND3-hGPC3をトランスフェクトし、500μg/ml G418での単一細胞クローン単離を行った。選択されたクローン(LLC1/hGPC3)の、hGPC3の発現を確認した。
実施例4.1において調製された抗体を、そのインビボ有効性について担腫瘍モデルを用いて評価した。
インビボ有効性評価のために、以下「hCD3/hCD137マウス」と呼ばれる、実施例4.2において確立されたCD3/CD137ダブルヒト化マウスを用いた。
ヒトGPC3の安定な発現を有するLLC1/hGPC3細胞を、hCD3/hCD137マウス中に移植して、腫瘍形成が確認されたhCD3/hCD137マウスを、GPC3/H1643L0581、GPC3/CD137、またはGPC3/CD3ε抗体の投与によって処置した。
別のインビボ有効性評価において、LLC/hGPC3細胞を、hCD3/hCD137マウスの右側腹部中に移植した。9日目に、マウスを、その腫瘍体積および体重に基づいてランダム化して群に分け、ビヒクルまたは実施例4.1において調製された抗体をi.v.注射した。腫瘍体積を、週2回測定した。IL-6解析のために、処置の2時間後にマウスから採血した。血漿サンプルを、Bio-Plex Pro Mouse Cytokine Th1 Panelにより製造業者のプロトコールに従って解析した。図3.1bおよび3.1cに示すように、GPC3/Dual群は、GPC3/CD3ε群と比較してより強い抗腫瘍活性、およびより少ないIL-6産生を示した。
実施例4.1において調製された抗GPC3/Dual-Fab抗体、GPC3/CD3ε二重特異性抗体、およびGPC3/CD137二重特異性抗体の抗腫瘍活性を、sk-pca-13aヒト肝がんモデルにおいて試験した。GPC3/CD3ε二重特異性抗体をまた、GPC3/CD137二重特異性抗体との組み合わせでも試験した。sk-pca-13a細胞を、NOGヒト化マウスの皮下に移植した。
sk-pca-13a細胞株を取得するためには、ヒトGPC3遺伝子を、当業者によく知られている方法によってヒト肝臓腺がん細胞株SK-HEP-1(ATCC No. HTB-52)の染色体中に組み込んだ。
5.1.共結晶解析のための抗体の調製
H0868L581を、hCD137タンパク質との共結晶解析のために選択した。二価抗体を、Expi293 Expression system(Thermo Fisher Scientific)を用いて一過性にトランスフェクトし、発現させた。培養上清を採取し、MabSelect SuRe親和性クロマトグラフィー(GE Healthcare)およびその後のSuperdex200(GE Healthcare)を用いたゲル濾過クロマトグラフィーを用いて、抗体を上清から精製した。
第Xa因子切断可能リンカーを介してFcに融合したヒトCD137の細胞外ドメイン(CD137-FFc、配列番号:81)を、キフネンシンの存在下でHEK293細胞において発現させた。培養培地由来のCD137-FFcを、親和性クロマトグラフィー(HiTrap MabSelect SuRe column, GE Healthcare)およびサイズ排除クロマトグラフィー(HiLoad 16/600 Superdex 200 pg column, GE healthcare)によって精製した。Fcを第Xa因子で切断して、結果として生じたCD137細胞外ドメインを、タンデムに接続されたゲル濾過カラム(HiLoad 16/600 Superdex 200 pg, GE healthcare)およびプロテインAカラム(HiTrap MabSelect SuRe 1ml, GE Healthcare)でさらに精製し、その後、Benzamidine Sepharose樹脂(GE Healthcare)を用いて精製した。CD137細胞外ドメインを含有する画分をプールして、-80℃で保管した。
結晶構造解析のための抗体を、Expi293 Expression system(Thermo Fisher Scientific)を用いて一過性にトランスフェクトし、発現させた。培養上清を採取し、MabSelect SuRe親和性クロマトグラフィー(GE Healthcare)およびその後のSuperdex200(GE Healthcare)を用いたゲル濾過クロマトグラフィーを用いて、抗体を上清から精製した。H0868L0581および公知の抗CD137対照抗体(以下137Ctrlと呼ばれる、重鎖は配列番号:82、軽鎖は配列番号:83)のFab断片を、Lys-C(Roche)での制限消化と、それに続く、Fc断片を除去するためのプロテインAカラム(MabSlect SuRe, GE Healthcare)、カチオン交換カラム(HiTrap SP HP, GE Healthcare)、およびゲル濾過カラム(Superdex200 16/60, GE Healthcare)上へのローディングを用いた、従来の方法によって調製した。Fab断片を含有する画分をプールして、-80℃で保管した。
精製されたCD137を、脱グリコシル化のためにGST-タグ融合エンドグリコシダーゼF1(社内)と混合し、続いて、ゲル濾過カラム(HiLoad 16/600 Superdex 200 pg, GE healthcare)およびプロテインAカラム(HiTrap MabSelect SuRe 1ml, GE Healthcare)を用いたCD137の精製を行った。精製されたCD137を、H0868L0581 Fabと混合した。複合体を、ゲル濾過カラム(Superdex 200 Increase 10/300 GL, GE healthcare)によって精製し、その後、精製されたH0868L0581 FabおよびCD137複合体を、137Ctrlと混合した。三成分複合体を、25 mM HEPES pH7.3、100 mM NaClで平衡化されたカラムを用いたゲル濾過クロマトグラフィー(Superdex200 10/300 increase, GE Healthcare)によって精製した。
精製された複合体を、約10 mg/mLまで濃縮し、21℃でのシッティングドロップ蒸気拡散法によって結晶化を実施した。リザーバー溶液は、0.1Mトリス塩酸塩 pH8.5、25.0% v/vポリエチレングリコールモノメチルエーテル550からなった。
X線回折データを、SLSでのX06SAによって測定した。測定の最中には、結晶を、-178℃の窒素流に常に置いて凍結状態に維持し、結晶を一回に0.25度回転させながら、ビームラインに付属したEiger X16M(DECTRIS)を用いて合計で1440枚のX線回折画像を収集した。セルパラメータの決定、 回折スポットの指数付け、および回折画像から得られた回折データのプロセシングは、autoPROC program(Acta. Cryst. 2011, D67: 293-302)、XDS Package(Acta. Cryst. 2010, D66: 125-132)、およびAIMLESS(Acta. Cryst. 2013, D69: 1204-1214)を用いて行い、最終的に、最大で3.705オングストローム解像度の回折強度データが得られた。結晶学データの統計を、表2.5に示す。
構造を、プログラムPhaserでの分子置換によって決定した(J. Appl. Cryst. 2007, 40: 658-674)。検索モデルは、公開された結晶構造(PDBコード:4NKIおよび6MI2)に由来した。モデルは、Cootプログラム(Acta Cryst. 2010, D66: 486-501)で作り、プログラムRefmac5(Acta Cryst. 2011, D67: 355-367)およびPHENIX(Acta Cryst. 2010, D66: 213-221)で精密化した。77.585〜3.705オングストロームの回折強度データについての結晶学的信頼度因子(R)は、22.33%であり、フリーR値は27.50%であった。構造精密化の統計を、表2.5に示す。
H0868L0581 Fab、137Ctrl、およびCD137の三成分複合体の結晶構造を、3.705オングストローム解像度で決定した。図3.3aおよび3.3bでは、H0868L0581 Fab接触領域のエピトープを、それぞれCD137アミノ酸配列においておよび結晶構造においてマッピングしている。エピトープは、結晶構造においてH0868L0581 Fabの任意の部分から4.5オングストロームの距離内に位置する1個または複数個の原子を含有するCD137のアミノ酸残基を含む。加えて、3.0オングストローム内のエピトープを、図3.3aおよび3.3bにおいて強調表示している。
1.1. GLS3000軽鎖を伴う重鎖ファージディスプレイライブラリーの構築
参考実施例12において合成された抗体ライブラリー断片を用いて、ファージディスプレイのためのdual Fabライブラリーを構築した。dualライブラリーは、H鎖は参考実施例12に示すように多様化しているが、L鎖は元の配列GLS3000(配列番号:85)に固定したライブラリーとして調製した。FR(フレームワーク)にV11L/L78I変異を加えること、および(参考実施例12中の)表27に示すようにCDRをさらに多様化させることによってCE115HA000から生じたH鎖ライブラリー配列を、DNA合成会社であるDNA2.0, Inc.に委託して、抗体ライブラリー断片(DNA断片)を取得した。得られた抗体ライブラリー断片を、PCRによって増幅されたファージディスプレイ用ファージミドに挿入した。GLS3000を、L鎖としては選択した。構築されたファージディスプレイ用ファージミドを、エレクトロポレーションによって大腸菌へ移入して、抗体ライブラリー断片を保有する大腸菌を調製した。
CD3εおよびヒトCD137に結合するFabドメインを、参考実施例1.1において構築されたdual Fabライブラリーから同定した。ビオチン標識されたCD3εペプチド抗原(アミノ酸配列:配列番号:86)、ジスルフィド結合リンカーを通してビオチン標識されたCD3εペプチド抗原(図4、C3NP1-27と呼ばれる;アミノ酸配列:配列番号:194、Genscriptが合成)、ビオチン標識されたヒトIgG1 Fc断片に融合したヒトCD137(ヒトCD137-Fcと名づける)、およびSS-ビオチン化されたヒトIgG1 Fc断片に融合したヒトCD137(ss-ヒトCD137-Fcと名づける)を、抗原として用いた。ss-ヒトCD137-Fcは、ヒトIgG1 Fc断片に融合したヒトCD137に対してEZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotinylation Kit(PIERCE, カタログ番号21445)を用いることによって調製した。ビオチン化は、取扱説明書に従って実施した。
パニングの第3ラウンドおよび第6ラウンドにおいては、62.5 pmolのC3NP1-27を、ビオチン標識された抗原として用い、洗浄は、TBSTで3回、次いでTBSで2回実施した。溶出は、25 mM DTTで、室温で15分間実施し、次いでトリプシンによって消化した。
パニングの第4、第5、および第7ラウンドにおいては、62.5 pmolのss-ヒトCD137-Fcを、ビオチン標識された抗原として用い、洗浄は、TBSTで3回、次いでTBSで2回実施した。溶出は、25 mM DTTで、室温で15分間実施し、次いでトリプシンによって消化した。
ファージを含有する培養上清を、上記の方法によって得られた大腸菌の各96シングルコロニーから、一般的な方法(Methods Mol. Biol. (2002) 178, 133-145)に従って回収した。ファージを含有する培養上清を、以下の手順によってELISAに供した:ストレプトアビジンコーティングマイクロプレート(384ウェル, Greiner, カタログ番号781990)を、ビオチン標識された抗原(ビオチン標識されたCD3εペプチドまたはビオチン標識されたヒトCD137-Fc)を含有する10μLのTBSで、4℃で一晩または室温で1時間コーティングした。プレートの各ウェルをTBSTで洗浄して、結合していない抗原を除去した。次いで、ウェルを、80μLのTBS/2%スキムミルクで1時間以上ブロッキングした。TBS/2%スキムミルクの除去後に、調製された培養上清を各ウェルに添加し、ファージに提示された抗体が各ウェルに含有される抗原に結合するように、室温で1時間、プレートを放置した。各ウェルをTBSTで洗浄し、次いで、HRP/Anti M13(GE Healthcare 27-9421-01)を各ウェルに添加した。プレートを1時間インキュベートした。TBSTで洗浄した後、TMB single solution(ZYMED Laboratories, Inc.)をウェルに添加した。各ウェルにおける溶液の発色反応を、硫酸の添加によって終了させた。次いで、発色を、450 nmでの吸光度に基づいてアッセイした。結果を図5に示す。
図5に示すように、クローンはすべて、ヒトCD3εに対する結合を示したが、ヒトCD137に対するパニング手順を5回実施したにもかかわらず、ヒトCD137に対する結合を示さなかった。これは、ストレプトアビジンコーティングマイクロプレートでのこのファージELISA解析の感受性がより低いことに依存している可能性があり、したがって、ストレプトアビジンコーティングビーズでのファージELISAもまた実施した。
最初に、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気ビーズであるMyOne-T1ビーズを、0.5x block Ace、0.02% Tween、および0.05% ProClin 300を含むブロッキング緩衝液で3回洗浄し、次いで、このブロッキング緩衝液で、室温で60分間以上ブロッキングした。TBSTで1回洗浄した後、0.625 pmolのss-ヒトCD137-Fcを磁気ビーズに添加して、室温で10分間以上インキュベートし、次いで、磁気ビーズを、96ウェルプレート(Corning, 3792黒色丸底PSプレート)の各ウェルにアプライした。各々12.5μLのFabを提示するファージ溶液を、12.5μLのTBSとともにウェルに添加し、各Fabを各ウェル中のビオチン標識された抗原に結合させるように、室温で30分間、プレートを静置した。その後、各ウェルをTBSTで洗浄した。0.5x block Ace、0.02% Tween、および0.05% ProClin 300を含むブロッキング緩衝液で希釈した抗M13(p8) Fab-HRPを、各ウェルに添加した。プレートを10分間インキュベートした。TBSTで3回洗浄した後、LumiPhos-HRP(Lumigen)を各ウェルに添加した。2分後に、各ウェルの蛍光を検出した。測定結果を図6に示す。
2.1. GLS3000軽鎖を伴う重鎖ファージディスプレイライブラリーの構築
Fabドメインを提示するファージライブラリーを、構築されたファージミドを保有する大腸菌から、FkpAシャペロン(配列番号:91)をコードするヘルパーファージM13KO7TC/FkpAの感染によって産生させ、次いで、0.002%アラビノースの存在下、25℃で(このファージライブラリーをDAライブラリーと名づける)、または0.02%アラビノースの存在下、20℃で(このファージライブラリーをDXライブラリーと名づける)一晩インキュベートした。M13KO7TCは、ヘルパーファージ上のpIIIタンパク質のN2ドメインとCTドメインとの間にトリプシン切断配列のインサートを有するヘルパーファージである(日本特許出願公表番号2002-514413参照)。M13KO7TC遺伝子中へのインサート遺伝子の導入は、既に他所で開示されている(WO2015/046554参照)。
CD3εおよびヒトCD137に結合するFabドメインを、参考実施例2.1.において構築されたdual Fabライブラリーから同定した。ビオチン標識されたCD3εペプチド抗原(アミノ酸配列:配列番号:86)、ジスルフィド結合リンカーを通してビオチン標識されたCD3εペプチド抗原(C3NP1-27:配列番号:194)、およびビオチン標識されたヒトIgG1 Fc断片に融合したヒトCD137(ヒトCD137-Fcと名づける)を、抗原として用いた。
構築されたファージディスプレイ用ファージミドを保有する大腸菌から、ファージを産生させた。2.5 M NaCl/10% PEGを、ファージを産生した大腸菌の培養液に添加し、沈殿したファージのプールをTBSで希釈して、ファージライブラリー溶液を取得した。次に、BSA(最終濃度:4%)を、ファージライブラリー溶液に添加した。パニング法は、磁気ビーズ上に固定化された抗原を用いた一般的なパニング法を参照して行った(J. Immunol. Methods. (2008) 332 (1-2), 2-9;J. Immunol. Methods. (2001) 247 (1-2), 191-203;Biotechnol. Prog. (2002) 18 (2) 212-20;およびMol. Cell Proteomics (2003) 2 (2), 61-9)。用いた磁気ビーズは、NeutrAvidinコーティングビーズ(Sera-Mag SpeedBeads NeutrAvidin-coated)またはストレプトアビジンコーティングビーズ(Dynabeads M-280 Streptavidin)であった。磁気ビーズ自体またはヒトIgG1 Fc領域に結合する抗体を提示するファージを排除するために、磁気ビーズおよびビオチン標識されたヒトFcについてのサブトラクションを実施した。
ラウンド3およびラウンド4でのDAおよびDXライブラリーの各パニングアウトプットプールから、96クローンを採集し、そのVH遺伝子配列を解析した。29のVH配列が取得されたため、そのすべてをIgG形式に変換した。各クローンのVH断片を、ファージミドベクターに特異的に結合するプライマー(配列番号:196および197)を用いたPCRによって増幅した。増幅されたVH断片を、既にヒトIgG1 CH1-Fc領域を有する動物発現プラスミド中に組み込んだ。調製されたプラスミドを、参考実施例9の方法による動物細胞における発現に用いた。GLS3000を軽鎖として用い、その発現プラスミドは、参考実施例12.2.に示すように調製した。
各抗体をまた、ELISAに供して、CD3εに対するその結合能力も評価した。
最初に、MyOne-T1ストレプトアビジンビーズを、0.625 pmolのビオチン標識されたCD3εと混合して、室温で10分間インキュベートし、次いで、0.5x block Ace、0.02% Tween、および0.05% ProClin 300/TBSを含むブロッキング緩衝液を添加して、磁気ビーズをブロッキングした。混合溶液を、96ウェルプレート(Corning, 3792黒色丸底PSプレート)の各ウェルに分注して、室温で60分間以上インキュベートした。その磁気ビーズをTBSによって1回洗浄した後、100 ngの精製されたIgGを各ウェル中の磁気ビーズに添加し、各IgGを各ウェル中のビオチン標識された抗原に結合させるように、室温で1時間、プレートを静置した。
6つの抗体(DXDU01_3#094(#094)、DADU01_3#018(#018)、DADU01_3#002(#002)、DXDU01_3#019(#019)、DXDU01_3#051(#051)、およびDADU01_3#001(#001 またはdBBDu_126))を、さらに評価するために選択した。WO2005/035584A1に記載されている抗ヒトCD137抗体(重鎖が配列番号:93、軽鎖が配列番号:94)(Bと省略される)を、対照抗体として用いた。精製された抗体を、ELISAに供して、CD3εおよびヒトCD137に対するその同時の結合能力を評価した。
最初に、MyOne-T1ストレプトアビジンビーズを、0.625 pmolのビオチン標識されたヒトCD137-Fcまたはビオチン標識されたヒトFcと混合して、室温で10分間インキュベートし、次いで、2%スキムミルク/TBSを添加して、磁気ビーズをブロッキングした。混合溶液を、96ウェルプレート(Corning, 3792黒色丸底PSプレート)の各ウェルに分注して、室温で60分間以上インキュベートした。その後、磁気ビーズを、TBSによって1回洗浄した。100 ngの精製されたIgGを、62.5、6.25、もしくは0.625 pmolのフリーのヒトCD3εペプチドまたは62.5 pmolのフリーのヒトFcまたはTBSと混合し、次いで、各ウェル中の磁気ビーズに添加し、各IgGを各ウェル中のビオチン標識された抗原に結合させるように、室温で1時間、プレートを静置した。その後、各ウェルをTBSTで洗浄した。TBSで希釈したヤギ抗ヒトκ軽鎖アルカリホスファターゼコンジュゲート(BETHYL, A80-115AP)を、各ウェルに添加した。プレートを1時間インキュベートした。TBSTで洗浄した後、APS-5(Lumigen)を各ウェルに添加した。2分後に、各ウェルの蛍光を検出した。測定結果を、図10および表5に示す。
3.1. カニクイザルCD137に結合するFabドメインを取得する効率を改善するためのパニング戦略
参考実施例2において、CD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に結合するFabドメインを取得することに成功したが、カニクイザルCD137に対する結合は、ヒトCD137に対するよりも弱かった。それを改善するための考慮すべき戦略の1つは、異なる抗原を異なるパニングラウンドで用いることになる、ダブルラウンド選択を伴う代替的パニングである。この方法によって、CD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137のいずれにも対する選択圧を、好ましい抗原の組み合わせであるCD3εとヒトCD137、CD3εとカニクイザルCD137、またはヒトCD137とカニクイザルCD137で、各ラウンドにおいてdual Fabライブラリーにかけることができた。それを改善するためのもう1つの戦略は、1つのパニングラウンドにおいてすべての必要な抗原を用いることができる、トリプルまたはクアドラプルラウンド選択である。
キャンペーンDU05と名づけたパニング条件を、ダブルラウンド選択および代替的パニングで、CD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に結合するFabドメインを取得するために、表6に示すように実施した。
ヒトCD137-Fcを偶数のラウンドにおいて用い、カニクイザルCD137-Fcを奇数のラウンドにおいて用いた。ダブルラウンド選択の詳細なパニング手順は、参考実施例2に示すものと同じであった。DU05キャンペーンにおいては、ダブルラウンド選択をパニングの第1ラウンドから実施した。
参考実施例2に示す異なる抗原での以前のダブルラウンド選択においては、IdeSまたはDTTが、抗体とビオチンとの間のリンカー領域を切断したため、抗体を提示するファージは、その第1の抗原との複合体として溶出され、したがって第1の抗原もまた、ダブルラウンド選択の第2サイクルに持ってこられ、第2の抗原と競合する。第1の抗原の持ち込みを抑制するために、結合抗体の抗原からの解離を誘導し、かつ従来のファージディスプレイパニングにおいて非常に普及している方法である、塩基緩衝液での溶出もまた実施した(キャンペーンDS01と名づける)。
パニングラウンド1の詳細なパニング手順は、参考実施例2に示すものと同じであった。ラウンド1においては、ビオチン標識されたヒトCD137-Fcでの従来のパニングを実施した。
パニングラウンド1において、ヒトCD137に結合するFabを提示するファージが蓄積されたため、パニングラウンド2からは、CD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に結合するFabドメインを取得するために、塩基溶出ダブルラウンド選択を実施した。
以前のダブルラウンド選択においては、パニングの1ラウンドにおいて2つの異なる抗原しか用いることができなかった。この限界を突破するために、クアドラプルラウンド選択をまた実施した(表6に示す、キャンペーンMP09およびMP11との名称)。
MP09およびMP11両方のパニングラウンド1、ならびにMP09のパニングラウンド2において、ダブルラウンド選択を実施した。
Fabを提示するファージ溶液を、参考実施例3.2、3.3、および3.4におけるパニング手順を通して調製した。最初に、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気ビーズであるMyOne-T1ビーズの20μgを、0.4% block Ace、1% BSA、0.02% Tween、および0.05% ProClin 300を含むブロッキング緩衝液で3回洗浄し、次いで、このブロッキング緩衝液で、室温で60分間以上ブロッキングした。
各パニングアウトプットプールから、96クローンを採集し、そのVH遺伝子配列を解析した。32クローンを、そのVH配列がすべての解析されたプールの中で2回よりも多く出現したため、選択した。そのVH遺伝子を、PCRによって増幅し、IgG形式に変換した。各クローンのVH断片を、ライブラリー中のH鎖に特異的に結合するプライマー(配列番号:196および197)を用いたPCRによって増幅した。増幅されたVH断片を、既にヒトIgG1 CH1-Fc領域を有する動物発現プラスミド中に組み込んだ。調製されたプラスミドを、参考実施例9の方法による動物細胞における発現に用いた。これらのサンプルをクローン変換IgGと呼んだ。GLS3000を軽鎖として用いた。
調製されたバルク変換IgG抗体を、ELISAに供して、CD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に対するその結合能力を評価した。
精製されたIgG抗体の結合能力を評価した。参考実施例3.5における32のクローン変換IgG、および参考実施例3.6において選択された54のバルク変換IgGを用いた。
参考実施例3.7においてCD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137のいずれにも対して明らかな結合を示した37の抗体を、さらに評価するために選択した。参考実施例2.3において取得された7つの抗体もまた、評価した(これら7つのクローンを、表7におけるように改名した)。精製された抗体を、ELISAに供して、CD3εおよびヒトCD137に対するその同時の結合能力を評価した。参考実施例2.5に記載されるBと名づけた抗ヒトCD137抗体を、対照抗体として用いた。
参考実施例3.8における21の抗体を、さらに評価するために選択した(表10)。精製された抗体を、ELISAに供して、ヒトCD137のその結合エピトープを評価した。
エピトープを解析するために、WO2015/156268に記載されているように、断片化ヒトCD137と抗体のFc領域との融合タンパク質を作製し、そのドメインは、Cys-Cysによって形成される構造によって隔てられ、CRDと呼ばれる(表9参照)。断片化ヒトCD137-Fc融合タンパク質は、表9に示すアミノ酸配列を含み、それぞれの遺伝子断片は、完全長ヒトCD137-Fc融合タンパク質(配列番号:90)をコードするポリヌクレオチドからPCRによって取得し、当業者に知られている方法によって動物細胞における発現用のプラスミドベクターに組み込んだ。断片化ヒトCD137-Fc融合タンパク質を、WO2015/156268に記載されている方法によって抗体として精製した。
4.1. 取得された重鎖を伴う軽鎖ライブラリーの構築
CD3εおよびヒトCD137の両方に結合する多くの抗体が、参考実施例3において取得されたが、ヒトCD137に対するその親和性はまだ低かったため、その親和性を改善する親和性成熟を実施した。
CD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に結合するFabドメインを、参考実施例4.1において構築されたdual Fabライブラリーから同定した。ジスルフィド結合リンカーを通してビオチン標識されたCD3εペプチド抗原(C3NP1-27)、ビオチン標識されたヒトIgG1 Fc断片に融合したヒトCD137(ヒトCD137-Fcと名づける)、およびビオチン標識されたヒトIgG1 Fc断片に融合したカニクイザルCD137(カニクイザルCD137-Fcと名づける)を、抗原として用いた。
各パニングアウトプットプールのFab遺伝子を、IgG形式に変換した。調製された哺乳動物発現プラスミドを大腸菌中に導入し、各パニングアウトプットプールから、96コロニーを採集して、そのVHおよびVL配列を解析した。それぞれ、ライブラリー2におけるVH配列の大部分は、dBBDu_183に集中しており、ライブラリー6におけるVH配列の大部分は、dBBDu_193に集中していた。各大腸菌コロニーから調製されたプラスミドを、参考実施例9の方法による動物細胞における発現に用いた。
参考実施例4.3においてCD3ε、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137のいずれにも対して明らかな結合を示した96の抗体を、さらに評価するために選択した。精製された抗体を、ELISAに供して、CD3εおよびヒトCD137に対するその同時の結合能力を評価した。
参考実施例4.4において取得された各IgGの、ヒトCD3ed、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に対する結合を、Biacore T200を用いて確認した。参考実施例4.4における結果により、16の抗体を選択した。センサーチップCM3(GE Healthcare)に、アミンカップリングによって適切な量のsure protein A(GE Healthcare)を固定化した。選択された抗体をチップにより捕捉して、抗原としてのヒトCD3ed、ヒトCD137、およびカニクイザルCD137に対する相互作用を可能にした。用いたランニング緩衝液は、20 mmol/l ACES、150 mmol/l NaCl、0.05%(w/v) Tween20、pH 7.4であった。すべての測定を25℃で実施した。抗原は、ランニング緩衝液を用いて希釈した。
5.1. 抗ヒトGPC3/抗ヒトCD137二重特異性抗体および抗ヒトGPC3/Dual-Fab三重特異性抗体の調製
ヒトIgG1定常領域を有する、抗ヒトGPC3/抗ヒトCD137二重特異性抗体および抗ヒトGPC3/Dual-Fab三重特異性抗体を、以下の手順によって作製した。WO2005/035584A1に記載されている抗ヒトCD137抗体(H鎖が配列番号:93、L鎖が配列番号:94)(Bと省略される)コードする遺伝子を、対照抗体として用いた。抗体の抗ヒトGPC3側は、重鎖可変領域H0000(配列番号:139)および軽鎖可変領域GL4(配列番号:140)を共有した。
ヒトCD137についてのアゴニスト活性を、ELISAキット(R&D systems, DY206)を用いたサイトカイン産生に基づいて評価した。抗ヒトGPC3/Dual-Fab抗体のCD3ε結合ドメインの作用を避けるために、CD3εもGPC3も発現しないが、CD137を構成的に発現するB細胞株HDLM-2を用いた。HDLM-2を、20% FBSを含有するRPMI-1640培地に8×105細胞/mlの密度で懸濁した。GPC3を発現するマウスがん細胞株CT26-GPC3(参考実施例13)を、同じ培地に4×105細胞/mlの密度で懸濁した。同じ体積の各細胞懸濁液を混合し、混合された細胞懸濁液を、96ウェルプレート中に200 μl/ウェルの体積で播種した。抗GPC3/Ctrl抗体、抗GPC3/抗CD137抗体、および参考実施例5.1において調製された8つの抗GPC3/Dual-Fab抗体を、各々30μg/ml、6μg/ml、1.2μg/ml、0.24μg/mlで添加した。細胞を、37℃および5% CO2の条件下で3日間培養した。培養上清を収集し、上清中に含有されるヒトIL-6の濃度をHuman IL-6 DuoSet ELISA(R&D systems, DY206)で測定して、HDLM-2の活性化を評価した。ELISAは、キットの製造業者(R&D systems)により提供される説明書に従うことによって行った。
6.1. 抗ヒトGPC3/抗ヒトCD3ε二重特異性抗体および抗ヒトGPC3/Dual-Fab三重特異性抗体の調製
ヒトIgG1定常領域を有する、抗ヒトGPC3/Ctrl二重特異性抗体および抗ヒトGPC3/Dual-Fab三重特異性抗体を、参考実施例5.1において作製し、抗ヒトGPC3/抗ヒトCD3ε二重特異性抗体もまた、同じ構築物として調製した。参考実施10において作製されたCE115 VH(配列番号:145)およびCE115 VL(配列番号:146)を、抗ヒトCD3ε抗体の重鎖および軽鎖に用いた。組み合わせを有する抗体を表15に示す。これらの抗体を、FreeStyle293細胞(Invitrogen)における一過性発現によって発現させ、「参考実施例9」に従って精製した。
ヒトCD3に対するアゴニスト活性を、GloResponse(商標) NFAT-luc2 Jurkat Cell Line(Promega, CS#176401)をエフェクター細胞として用いることによって評価した。Jurkat細胞は、ヒト急性T細胞白血病に由来するヒトTリンパ球細胞の不死化された細胞株であり、それ自体上でヒトCD3を発現する。NFAT luc2_jurkat細胞においては、CD3活性化からのシグナルによって、ルシフェラーゼの発現が誘導された。細胞膜上にヒトGPC3を発現するSK-pca60細胞株(参考実施例13)を、標的細胞として用いた。
7.1. 抗体調製
WO2005/035584A1に記載されている抗CD137抗体(Bと省略される)、参考実施例5.1に記載されるCtrl抗体、および参考実施例7に記載される抗CD3εCE115抗体を、単一抗原特異的な対照として用いた。表13に記載されるDual-FabであるH183L072(重鎖:配列番号:104、軽鎖:配列番号:124)を、さらなる評価のために選択し、 FreeStyle293細胞(Invitrogen)における一過性発現によって発現させて、「参考実施例9」に従って精製した。
CD3εおよびCD137の活性化に対するDual-Fab抗体の相乗効果を調べるために、cytometric bead array(CBA) Human Th1/T2 Cytokine kit II(BD Biosciences #551809)を用いて、総サイトカイン放出を評価した。CD137の活性化に関連して、IL-2(インターロイキン-2)、IFNγ(インターフェロンγ)、およびTNFα(腫瘍壊死因子-α)を、凍結状態で購入した凍結ヒト末梢血単核細胞(PBMC)(STEMCELL)より単離されたT細胞から、評価した。
PBMCを含有するクライオバイアルを、37℃の水浴に置いて、細胞を解凍した。次いで、細胞を、9 mLの培地(標的細胞を培養するために用いられる培地)を含有する15 mL falconチューブ中に分注した。次いで、細胞懸濁液を、1,200 rpmで5分間、室温での遠心分離に供した。上清を静かに吸引し、再懸濁のために新鮮な温めた培地を添加して、ヒトPBMC溶液として用いた。T細胞を、Dynabeads Untouched Human T cell kit(Invitrogen #11344D)を用いて製造業者の説明書に従って単離した。
30μg/mLおよび10μg/mLの、参考実施例7.1において調製された抗体を、maxisorp 96ウェルプレート(Thermofisher #442404)上に一晩コーティングした。1.00E+05個のT細胞を、抗体を含有する各ウェルに添加して、37℃で72時間インキュベートした。プレートを、1,200 rpmで5分間遠心分離して、上清を収集した。製造業者の説明書に従ってCBAを行い、結果を図20に示す。
8.1. 抗GPC3/dual-Fabおよび抗GPC3/CD137二重特異性抗体の調製
参考実施例6に記載される抗GPC3またはCtrl抗体、およびDual-Fab(H183L072)または抗CD137抗体を使用し、Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Mar 26; 110(13): 5145-5150に記載されている方法に従うFabアーム交換(FAE)を用いて、抗GPC3/dual-Fab、抗GPC3/CD137、Ctrl/H183L072、およびCtrl/CD137抗体の4つの抗体を生成した。4つの抗体すべての分子形式は、従来のIgGと同じ形式である。抗GPC3/ H183L072は、GPC3、CD3、およびCD137に結合することができる三重特異性抗体であり、抗GPC3/CD137は、GPC3およびCD137に結合することができる二重特異性抗体であり、Ctrl/H183L072およびCtrl/CD137 は、対照として用いた。生成した4つの抗体はすべて、Fcγ受容体に対して減弱した親和性を有するサイレントFcからなる。
細胞傷害活性を、参考実施例10.5.2に記載されるようにxCELLigence Real-Time Cell Analyzer(Roche Diagnostics)を用いた細胞増殖抑制の比率によって評価した。両方ともGPC3を発現するトランスフェクタント細胞株である1.00E+04個のSK-pca60またはSK-pca13aを、標的(Tと省略される)細胞として用い(それぞれ、参考実施例13および10)、参考実施例7.2.1に記載されるように調製された5.00E+04個の凍結ヒトPBMCエフェクター(Eと省略される)細胞と共培養した。これは、腫瘍細胞に対して5倍量のエフェクター細胞を加えたことを意味し、そのためここではET 5と記載する。抗GPC3/H183L072抗体およびGPC3/CD137抗体を、0.4、5、および10 nMで添加した一方、Ctrl/H183L072抗体およびCtrl/CD137抗体は、各ウェル10 nMで添加した。細胞傷害活性の測定は、参考実施例10.5.2に記載されるのと同様に実施した。反応は、5%二酸化炭素ガスの条件下、37℃で実施した。PBMCの添加の72時間後に、細胞増殖抑制(CGI)率(%)を、参考実施例10.5.2に記載される式を用いて決定し、図21に示すようにグラフにプロットした。参考実施例6.2においてJurkat細胞に対してCD3活性化を示した抗GPC3/H183L072 dual-Fab抗体は、GPC3発現細胞の強い細胞傷害活性を、すべての濃度で両方の標的細胞株においてもたらしたが、CD3活性化を示さなかった対照/H183L072 dual-Fab抗体および抗GPC3/CD137抗体はもたらさず、Dual-Fab三重特異性抗体が細胞傷害活性をもたらし得ることが示唆された。
アミノ酸置換またはIgG変換を、QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit(Stratagene Corp.)、PCR、またはIn fusion Advantage PCRクローニングキット(Takara Bio Inc.)等を用いて当業者に一般に公知の方法で行い、発現ベクターを構築した。得られた発現ベクターを当業者に一般に公知の方法によって配列決定した。作製したプラスミドをヒト胎児腎がん細胞由来HEK293H株(Invitrogen Corp.)またはFreeStyle293細胞(Invitrogen Corp.)に一過性に導入し、抗体を発現させた。rProtein A Sepharose(商標)Fast Flow(GE Healthcare Japan Corp.)を用いて当業者に一般に公知の方法によって、各抗体を得られた培養上清から精製した。精製抗体の濃度について、分光光度計を用いて280 nmで吸光度を測定し、得られた値からPACE法により算出された吸光係数を用いて抗体濃度を算出した(Protein Science 1995 ; 4 : 2411-2423)。
10.1. ヒトCD3を発現する細胞およびカニクイザルCD3を発現する細胞で免疫したラットを用いたハイブリドーマの作製
各SDラット(雌、免疫開始時6週齢、Charles River Laboratories Japan, Inc.)を、ヒトCD3εγまたはカニクイザルCD3εγを発現するBa/F3細胞で以下の通り免疫した:0日目(初回免疫日を0日目と定義した)に、フロイント完全アジュバント(Difco Laboratories, Inc.)とともに、ヒトCD3εγを発現する5×107個のBa/F3細胞をラットに腹腔内投与した。14日目に、フロイント不完全アジュバント(Difco Laboratories, Inc.)とともに、カニクイザルCD3εγを発現する5×107個のBa/F3細胞をラットに腹腔内投与した。その後、1週間おきに合計4回、ヒトCD3εγを発現するBa/F3細胞またはカニクイザルCD3εγを発現するBa/F3細胞を5×107個、交互にラットに腹腔内投与した。CD3εγの最終投与1週間後(49日目)に、ブースターとしてヒトCD3εγを発現するBa/F3細胞をラットに静脈内投与した。その3日後に、ラットの脾臓細胞とマウスミエローマ細胞SP2/0とを、PEG1500(Roche Diagnostics K.K.)を用いた常法に従い融合した。融合細胞、すなわちハイブリドーマを、10%FBSを含むRPMI1640培地(以下、10% FBS/RPMI1640と称す)中で培養した。
各ハイブリドーマ細胞から、RNeasy Mini Kits(Qiagen N.V.)を用いてトータルRNAを抽出し、SMART RACE cDNA Amplification Kit(BD Biosciences)を用いてcDNAを合成した。作製したcDNAをPCRで用いて、抗体の可変領域遺伝子をクローニングベクターに挿入した。各DNA断片のヌクレオチド配列は、BigDye Terminator Cycle Sequencing Kit(Applied Biosystems, Inc.)およびDNAシーケンサーABI PRISM 3700 DNA Sequencer(Applied Biosystems, Inc.)を用いて、それに含まれる添付説明書に記載の方法に従い決定された。CE115 H鎖可変ドメイン(配列番号:162)およびCE115 L鎖可変ドメイン(配列番号:163)のCDRおよびFRは、Kabatナンバリングに従って決定された。
次に、がん抗原(EGFR)に対するIgGを基本骨格として用いて、一方のFabをCD3ε結合ドメインに置き換えた形の分子を作製した。この操作において、基本骨格とするIgGのFcとして、上述した場合と同様に、FcgR(Fcγ受容体)に対する結合活性が減弱されたサイレント型Fcを用いた。EGFR結合ドメインとして、セツキシマブの可変領域を構成するセツキシマブ-VH(配列番号:164)およびセツキシマブ-VL(配列番号:165)を用いた。抗体H鎖定常ドメインとして、C末端のGlyおよびLysを除去したIgG1に由来するG1d、D356KおよびH435Rの変異を導入したG1dに由来するA5、およびK439Eの変異を導入したG1dに由来するB3を用い、それぞれセツキシマブ-VHと組み合わせ、セツキシマブ-VH-G1d(配列番号:166)、セツキシマブ-VH-A5(配列番号:167)、およびセツキシマブ-VH-B3(配列番号:168)を参考実施例9の方法に従って作製した。抗体H鎖定常ドメインをH1と名づけた場合、可変ドメインとしてセツキシマブ-VHを持つ抗体のH鎖に対応する配列はセツキシマブ-VH-H1で表した。
目的分子:EGFR_ERY22_CE115
発現ベクターに挿入されたポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド:EGFR ERY22_Hk、EGFR ERY22_L、CE115_ERY22_Hh、およびCE115_ERY22_L。
得られた培養上清をAnti FLAG M2カラム(Sigma-Aldrich Corp.)に添加し、該カラムを洗浄し、続いて、0.1 mg/mL FLAGペプチド(Sigma-Aldrich Corp.)で溶出した。目的分子を含む画分をHisTrap HPカラム(GE Healthcare Japan Corp.)に添加し、該カラムを洗浄し、続いて、イミダゾールの濃度勾配で溶出した。目的分子を含む画分を限外濾過によって濃縮した。その後、この画分をSuperdex 200カラム(GE Healthcare Japan Corp.)に添加した。単量体画分のみを溶出液から回収し、各精製目的分子を得た。
10.5.1. ヒト末梢血単核球(PBMC)溶液の作製
1,000単位/mLのヘパリン溶液(ノボ・ヘパリン注5,000単位、Novo Nordisk A/S)を予め100μL充填した注射器を用いて、各健常人ボランティア(成人)から50 mLの末梢血を採取した。末梢血をPBS(-)で2倍希釈し、次いで4等分し、そして15 mLのFicoll-Paque PLUSを予め充填しかつ予め遠心操作を行ったLeucosepリンパ球分離管(Cat. No. 227290、Greiner Bio-One GmbH)に加えた。該分離管の遠心分離(2,150 rpm、10分、室温)の後、単核球画分層が分取された。10%FBSを含むダルベッコ変法イーグル培地(Sigma-Aldrich Corp.;以下10%FBS/D-MEMと呼ぶ)で単核球画分中の細胞を1回洗浄した。その後、該細胞を10%FBS/D-MEMで4×106細胞/mLの細胞密度に調整した。このように調製した細胞溶液を、ヒトPBMC溶液として以後の試験に用いた。
細胞傷害活性は、xCELLigenceリアルタイムセルアナライザー(Roche Diagnostics)を用いて、細胞増殖抑制率に基づいて評価された。標的細胞には、SK-HEP-1細胞株にヒトEGFRを強制発現させて樹立したSK-pca13a細胞株を用いた。SK-pca13aをディッシュから剥離し、100μL/ウェル(1×104細胞/ウェル)でE-Plate 96プレート(Roche Diagnostics)に播種し、xCELLigenceリアルタイムセルアナライザーを用いて生細胞のアッセイを開始した。翌日、xCELLigenceリアルタイムセルアナライザーからプレートを取り出し、各濃度(0.004、0.04、0.4、および4 nM)に調整した各抗体50μLを該プレートに添加した。室温にて15分間反応させた後、前述の10.5.1で調製したヒトPBMC溶液50μL(2×105細胞/ウェル)をそれに加えた。このプレートをxCELLigenceリアルタイムセルアナライザーに再セットし、生細胞のアッセイを開始した。反応は、5%CO2および37℃の条件下でヒトPBMCの添加の72時間後に行われた。細胞増殖抑制率(%)を下式によりセルインデックス値から決定した。抗体の添加直前のセルインデックス値を1として、それに対して正規化した後の数値を、この算出でセルインデックス値として用いた。
細胞増殖抑制率(%)=(A−B)×100/(A−1)
式中、Aは、抗体を追加していないウェル(標的細胞およびヒトPBMCのみ)の平均セルインデックス値を表し、Bは、各抗体を追加したウェルの平均セルインデックス値を表す。試験は三連で実施した。
11.1. 第2の抗原に結合できるペプチドの挿入部位および長さの試験
一方の可変領域(Fab)を通じてがん抗原に結合することができかつもう一方の可変領域を通じて第1の抗原CD3および第2の抗原に結合することができるが、CD3および第2の抗原に同時に結合することができない、Dual binding Fab分子を取得するための試験を実施した。CD3ε結合抗体CE115の重鎖のループにGGSペプチドを挿入し、一方のFabにEGFR結合ドメインを持ちかつもう一方のFabにCD3結合ドメインを持つ各ヘテロ二量化抗体を参考実施例9に従って作製した。
作製した各抗体のCD3εへの結合活性をBiacore T100を用いて確認した。ビオチン化CD3εエピトープペプチドをストレプトアビジンによってCM5チップに固定化し、作製した抗体をそれにアナライトとして注入し、その結合親和性を解析した。
この文脈において、挿入または置換で使用するためのペプチドのアミノ酸配列を、部位特異的変異誘発法(Kunkel et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.(1985)82, 488-492)またはオーバーラップ伸長PCR法などの当技術分野において公知の方法に従ってランダムに改変し、上述の方法に従って各改変体の結合活性等を比較して、アミノ酸配列の改変後であっても目的の活性を示すことのできる挿入または置換部位、ならびにこの部位のアミノ酸の種類および長さを決定することによって、ライブラリーを作製することができる。
12.1. CD3および第2の抗原に結合する抗体の取得のための抗体ライブラリー(Dual Fab Libraryとも呼ぶ)
第1の抗原としてCD3(CD3ε)を選択する場合、CD3(CD3ε)および任意の第2の抗原に結合する抗体を取得する方法の例として、以下の6つの方法が挙げられる:
1.第1の抗原に結合するFabドメインに第2の抗原に結合するペプチドまたはポリペプチドを挿入する工程を伴う方法(この方法には、WO2016076345A1の実施例3または4に示されたペプチド挿入、あるいはAngew Chem Int Ed Engl. 2013 Aug 5; 52(32): 8295-8に例示されるG-CSF挿入方法もまた含まれる)、ここで、結合するペプチドまたはポリペプチドは、ペプチドまたはポリペプチドを提示するライブラリーから取得されてもよく、または天然に存在するタンパク質の全体またはその一部を使用してもよい;
2.WO2016076345A1の実施例5で示されたような、Fabループをより長い長さに改変する(延長)ことを可能にする位置に種々のアミノ酸が出現するような抗体ライブラリーを作製する工程、および任意の第2の抗原に対する結合活性を指標として用いることによって、抗体ライブラリーから該抗原に対する結合活性を有するFabを取得する工程を伴う方法;
3.CD3に結合することが既知のFabドメインから部位特異的変異誘発法によって作製した抗体の使用によってCD3に対する結合活性を維持するアミノ酸を同定する工程、および任意の第2の抗原に対する結合活性を指標として用いることによって、同定されたアミノ酸が出現する抗体ライブラリーから該抗原に対する結合活性を有するFabを取得する工程を伴う方法;
4.Fabループをより長い長さに改変する(延長)ことを可能にする位置に種々のアミノ酸が出現するような抗体ライブラリーを作製する工程、および指標として抗原に対する結合活性を用いることによって、抗体ライブラリーから任意の第2の抗原に対する結合活性を有するFabを取得する工程をさらに伴う3の方法;
5.糖鎖付加配列(例えば、NxSおよびNxT、式中、xはP以外のアミノ酸である)が出現するように抗体を改変し、糖鎖受容体が認識する糖鎖をそれに付加する(例えば、ハイマンノース型糖鎖をそれに付加することによって、ハイマンノース受容体によって認識される;ハイマンノース型糖鎖は抗体発現時にキフネンシンの添加によって得られることが公知である(mAbs. 2012 Jul-Aug; 4(4): 475-87))工程をさらに伴う、1、2、3、または 4の方法;および
6.種々のアミノ酸に改変可能であると認められるループまたは部位にCys、Lys、または非天然アミノ酸を挿入することまたはこれらの部位をCys、Lys、または非天然アミノ酸と置換することによって、共有結合によりそれぞれが第2の抗原に結合するドメイン(ポリペプチド、糖鎖、またはTLRアゴニストに代表される核酸)をそれに付加する工程をさらに伴う1、2、3、または4の方法(この方法は、抗体薬物コンジュゲートに代表され、共有結合によるCys、Lys、または非天然アミノ酸への結合のための方法である(mAbs 6: 1, 34-45; January/February 2014; WO2009/134891 A2;およびBioconjug Chem. 2014 Feb 19; 25(2): 351-61に記載されている))。
第1の抗原および第2の抗原に結合するが、これらの抗原に同時には結合しないDual binding Fabが、これらの方法のいずれかの使用によって得られ、当業者に一般に公知の方法、例えば、共通L鎖、CrossMab、またはFabアーム交換法によって、任意の第3の抗原に結合するドメインと組み合わせることができる。
CD3(CD3ε)結合抗体のテンプレート配列としてVHドメインCE115HA000(配列番号:184)およびVLドメインGLS3000(配列番号:185)を選択した。各ドメインを、参考実施例9により抗原結合に関与すると推定される部位でのアミノ酸改変に供した。また、pE22Hh(L234A、L235A、N297A、D356C、T366S、L368A、およびY407Vの改変、C末端のGK配列の欠失、ならびにDYKDDDDK配列(配列番号:200)の付加による天然IgG1 CH1およびそれ以降の配列に由来する配列;配列番号:186)をH鎖定常ドメインとして用い、カッパ鎖(配列番号:187)をL鎖定常ドメインとして用いた。改変部位を表17に示す。CD3(CD3ε)結合活性評価のために、各1アミノ酸改変抗体をワンアーム抗体(Fabドメインの1つを欠く天然に存在するIgG抗体)として取得した。具体的には、H鎖改変の場合、定常ドメインpE22Hhに連結させた改変H鎖、およびKn010G3(C220S、Y349C、T366W、およびH435Rの改変を有する216位からC末端までの天然に存在するIgG1アミノ酸配列;配列番号:188)をH鎖として用い、カッパ鎖に3'側で連結させたGLS3000をL鎖として用いた。L鎖改変の場合、カッパ鎖に3'側で連結させた改変L鎖をL鎖として用い、pE22Hhに3'側で連結させたCE115HA000、およびKn010G3をH鎖として用いた。これらの配列をFreeStyle 293細胞で発現させかつ精製した(参考実施例9の方法を利用した)。
項12.2で構築、発現および精製した各1アミノ酸改変体をBiacore T200(GE Healthcare Japan Corp.)を用いて評価した。アミンカップリング法によって、適切な量のCD3εホモ二量体タンパク質をセンサーチップCM4(GE Healthcare Japan Corp.)の上に固定化した。次いで、適切な濃度を有する抗体をアナライトとしてそれにインジェクトし、センサーチップ上でCD3εホモ二量体タンパク質と相互作用させた。次いで、10 mmol/Lグリシン-HCl(pH 1.5)のインジェクトによって、センサーチップを再生した。アッセイを25℃で行い、HBS-EP+(GE Healthcare Japan Corp.)をランニングバッファーとして用いた。アッセイ結果から、アッセイにおいて得られた結合量およびセンサーグラムについてシングルサイクルカイネティックモデル(1:1 binding RI=0)を用いて解離定数KD(M)を算出した。各パラメータをBiacore T200 Evaluation Software(GE Healthcare Japan Corp.)を用いて算出した。
表18は、対応する未改変の抗体であるCE115HA000の結合量に対する各H鎖改変体の結合量の比の結果を示す。具体的には、CE115HA000を含む抗体の結合量をXと定義し、H鎖1アミノ酸改変体の結合量をYと定義した時の、Z(結合量の比)=Y/Xの値を用いた。図25に示すように、0.8未満のZではセンサーグラムにおいて非常に少量の結合量が観察され、解離定数KD(M)が正確に算出できない可能性が示唆された。表19は、CE115HA000に対する各H鎖改変体の解離定数 KD(M)の比(=CE115HA000のKD値/改変体のKD値)を示す。
表18に示されたZが0.8以上の場合には、改変体は、対応する未改変の抗体であるCE115HA000と比べて結合を維持していると考えられる。したがって、これらのアミノ酸が出現するように設計された抗体ライブラリーは、Dual Fab Libraryとして機能することができる。
表20は、対応する未改変の抗体であるGLS3000の結合量に対する各L鎖改変体の結合量の比の結果を示す。具体的には、GLS3000を含む抗体の結合量をXと定義し、L鎖1アミノ酸改変体の結合量をYと定義した時の、Z(結合量の比)=Y/Xの値を用いた。図25に示すように、0.8未満のZではセンサーグラムにおいて非常に少量の結合量が観察され、解離定数KD(M)が正確に算出できない可能性が示唆された。表21は、GLS3000に対する各L鎖改変体の解離定数KD(M)の比を示す。
表20において示されるZが0.8以上の場合には、改変体は、対応する未改変抗体であるGLS3000と比べて結合を維持していると考えられる。したがって、これらのアミノ酸が出現するように設計された抗体ライブラリーは、Dual Fab Libraryとして機能することができる。
ECM(細胞外マトリックス)は、細胞外構成成分であり、インビボで様々な部位に存在する。そのため、ECMに強く結合する抗体は、血中動態が悪くなる(半減期が短くなる)ことが知られている(WO2012093704 A1)。よって、ECM結合が増強されていないアミノ酸が、抗体ライブラリー中に出現するアミノ酸として選択されることが好ましい。
表22(H鎖)および23(L鎖)に示す値のうち、複数の改変によるECM結合増強の作用を考慮し、10倍までを有効値としてDual Fab Libraryに採用した。
参考実施例11は、CD3(CD3ε)への結合を失うことなく、GGS配列を用いてペプチドを各部位に挿入できることを示した。Dual Fab Libraryでループ延長が可能となれば、その結果生じるライブラリーはより多種類の分子を含み(またはより広範な多様性を有し)、多様な第2の抗原に結合するFabドメインの取得が可能になる可能性がある。したがって、ペプチド挿入を原因とする結合活性の低下が推定されることを踏まえ、CD3εに対する結合活性を増強するV11L/D72A/L78I/D101Q改変をCE115HA000配列に加えて、pE22Hhにさらに連結させた。参考実施例11と同様に、この配列へのGGSリンカーの挿入によって分子を作製し、そのCD3結合を評価した。Kabatナンバリングで99位と100位との間にGGS配列を挿入した。抗体分子をワンアーム抗体として発現させた。具体的には、上述のGGSリンカーを含むH鎖およびKn010G3(配列番号:188)をH鎖として用い、カッパ配列(配列番号:187)に連結させたGLS3000(配列番号:185)をL鎖として採用した。これらの配列は、参考実施例9に従って発現および精製を行った。
GGSペプチドを挿入した改変抗体のCD3εに対する結合を、参考実施例11に記載の方法によりBiacoreを用いて確認した。表24に示すように、結果は、ループにGGSリンカーを挿入できることが明らかにした。特に、GGSリンカーは、抗原結合に重要であるH鎖CDR3領域に挿入することができ、CD3εへの結合は、3、6、および9アミノ酸挿入のいずれの結果でも維持された。この試験はGGSリンカーを用いて実施されたが、GGS以外の種々のアミノ酸が出現する抗体ライブラリーも許容され得る。
参考実施例12.6は、GGSリンカーを用いて3、6、または9アミノ酸を挿入できることを示し、3、6、または9アミノ酸の挿入を有するライブラリーを作製して、ファージディスプレイ法によって代表される通常の抗体取得法の使用によって第2の抗原に結合する抗体を取得できると推論した。よって、NNSヌクレオチド配列(全種類のアミノ酸の出現を可能にする)を用いて6アミノ酸挿入部位に種々のアミノ酸が出現する場合にも、CDR3への6アミノ酸の挿入がCD3への結合を維持できるかどうかについて試験を実施した。結合活性の低下が推定されることを踏まえ、CE115HA000のものより高いCD3ε結合活性を有するCE115HA340配列(配列番号:193)のCDR3中の99位と100位(Kabatナンバリング)との間に6アミノ酸が挿入されるようにNNSヌクレオチド配列を用いて、プライマーを設計した。抗体分子をワンアーム抗体として発現させた。
参考実施例12に記載の試験に基づき、CD3および第2の抗原に結合する抗体を取得するための抗体ライブラリー(Dual Fab Library)を以下のように設計した:
ステップ1:CD3(CD3ε)への結合能を維持するアミノ酸を選択する(CD3への結合量がCE115HA000の80%以上を確保する);
ステップ2:改変前と比較してMRAの10倍以内のECM結合を保持するアミノ酸を選択する;
ステップ3:H鎖CDR3内の99位と100位(Kabatナンバリング)との間に6アミノ酸を挿入する。
Fabの抗原結合部位は、ステップ1のみを実施することによっても多様化することができる。そのため、その結果生じるライブラリーは、第2の抗原に結合する抗原結合分子を同定するために用いることができる。Fabの抗原結合部位は、ステップ1および3のみを実施することによっても多様化することができる。そのため、その結果生じるライブラリーは、第2の抗原に結合する抗原結合分子を同定するために用いることができる。ステップ2を行わないライブラリー設計であっても、取得された分子をECM結合についてアッセイおよび評価することが可能である。
表28に基づき、発明者らは、表29に示すようにGLS3000について新たな多様化ライブラリーを設計した。L鎖ライブラリー配列は、GLS3000に由来し、表29に示すように多様化した(DNAライブラリー)。DNAライブラリーはDNA合成会社によって構築された。次いで、種々のGLS3000由来配列を含むL鎖ライブラリーおよび種々のCE115HA000由来配列を含むH鎖ライブラリーをファージミドに挿入し、ファージディスプレイライブラリーを構築した。
当業者に周知の方法によって、ヒトGPC3遺伝子をマウス結腸がん細胞株CT-26(ATCC No. CRL-2638)の染色体に組み込み、高発現CT26-GPC3細胞株を取得した。製造者推奨の方法によってQIFIキット(Dako)を用いて、ヒトGPC3(2.3×105/細胞)の発現レベルを決定した。ヒトGPC3遺伝子を維持するために、これらの組換え細胞株を、CT26-GPC3用に200μg/mlでジェネティシン(GIBCO)を加えることによるATCC推奨培地中で培養した。培養後、2.5 g/Lトリプシン-1 mM EDTA(ナカライテスク)を用いて、これらの細胞を剥離し、次いで、各実験に用いた。ここでは、形質転換細胞株をSKpca60aと呼ぶ。
当業者に周知の方法によって、ヒトCD137遺伝子をチャイニーズハムスター卵巣細胞株CHO-DG44の染色体に組み込み、高発現CHO-hCD137細胞株を取得した。製造者の指示書によってPE抗ヒトCD137(4-1BB)抗体(BioLegend, Cat. No. 309803)を用いて、ヒトCD137の発現レベルをFACS解析により決定した。NCI-H446 細胞株およびHuh7細胞株はそれぞれ、RPMI1640(Gibco)中およびDMEM(低グルコース)中で維持した。培地は両方とも、10%ウシ胎児血清(Bovogen Biologicals)、100ユニット/mLのペニシリン、および100μg/mLのストレプトマイシンを補充し、細胞を、37℃および5% CO2の条件下で培養した。
ECM(細胞外マトリックス)に対する各抗体の結合を、WO2012093704 A1を参照して以下の手法により評価した:ECMフェノールレッドフリー(BD Matrigel #356237)をTBSで2 mg/mLに希釈し、氷上で冷却したECLアッセイ用のプレート(L15XB-3、MSD K.K.、高結合)の各ウェルの中心に5μL/ウェルで液滴添加した。次いで、プレートをプレートシールで覆い、4℃で一晩静置した。ECM固定化プレートを室温に戻した。ECLブロッキングバッファー(0.5%BSAおよび0.05%Tween 20を追加したPBS)を150μL/ウェルでプレートに加え、プレートを室温で2時間以上または4℃で一晩静置した。次いで、各抗体サンプルをPBS-T(0.05%Tween 20を追加したPBS)で9μg/mLに希釈した。二次抗体をECLDB(0.1%BSAおよび0.01%Tween 20を追加したPBS)で2μg/mLに希釈した。20μLの抗体溶液および30μLの二次抗体溶液を、10μL/ウェルで分注したECLDBを含む丸底プレートの各ウェルに添加し、遮光しながら室温で1時間撹拌した。ECLブロッキングバッファーを、ECLブロッキングバッファーを含むECMプレートを反転させることによって除去した。このプレートに対して、前述の抗体および二次抗体の混合溶液を50μL/ウェルで添加した。次いで、プレートを、遮光しながら、室温で1時間静置した。プレートを反転させることによってサンプルを除去し、次いで、READバッファー(MSD K.K.)を150μL/ウェルでプレートに添加し、続いて、Sector Imager 2400(MSD K.K.)を用いてsulfo-tagの発光シグナルを検出した。
[参考実施例15]抗GPC3/CD3/ヒトCD137三重特異性抗体および抗GPC3/Dual-Fab抗体のオフターゲット細胞傷害活性の評価
(15−1)抗GPC3/CD3/ヒトCD137三重特異性抗体の調製
標的非依存性細胞傷害活性およびサイトカイン放出を調べるために、CrossMabおよびFAEテクノロジーを利用することによって、三重特異性抗体を生成した(図2.1)。各アームが2つの結合ドメインを有し、その結果、1つの分子中に4つの結合ドメインを有する四価IgG様分子である抗体A(mAb A)を、上述のようなCrossMabにより生成した。二価IgGである抗体B(mAb B)は、従来のIgGと同じ形式である。mAb AおよびmAb Bの両方のFc領域は、Fcγ受容体に対する親和性が減弱したサイレントなFcγRであり、脱グリコシル化され、かつFAEに適用可能であった。6つの三重特異性抗体を構築した。6つの三重特異性抗体における各Fv領域の標的抗原を、表30に示した。mAb A、mAb B、およびmAb ABの結合ドメインの各々の命名規則を、図2.2に示す。6つの三重特異性抗体であるmAb ABの各々を生成するためのmAb AおよびmAb Bのペア、ならびにその配列番号を、それぞれ表31および表32に示した。WO2005/035584A1に記載された抗体CD3D(2)_i121(AN121と省略される)を、抗CD3ε抗体として用いた。6つの三重特異性抗体をすべて、上記の方法によって発現させ、精製した。
三重特異性抗体のヒトCD3およびCD137に対する結合親和性を、用いて37℃で評価した。三重特異性抗体のヒトCD3およびCD137に対する結合親和性を、Biacore T200機器(GE Healthcare)を用いて37℃で評価した。抗ヒトFc抗体(GE Healthcare)を、アミンカップリングキット(GE Healthcare)を用いてCM4センサーチップのすべてのフローセル上に固定化した。抗Fcセンサー表面上に抗体を捕捉し、次いで、組換えヒトCD3またはCD137を、フローセル上にインジェクトした。すべての抗体およびアナライトは、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3を含有するACES pH 7.4において調製した。センサー表面は、サイクル毎に3M MgCl2で再生させた。結合親和性は、Biacore T200 Evaluation software, version 2.0(GE Healthcare)を用いて、データをプロセシングし、1:1結合モデルにフィットさせることによって決定した。
三重特異性抗体の組換えヒトCD3およびCD137に対する結合親和性を、表33に示す。
Biacoreタンデムブロッキングアッセイ(Biacore in-tandem blocking assay)を行って、三重特異性抗体またはDual-Fab抗体のCD3およびCD137の両方に対する同時結合を特徴決定した。アッセイは、Biacore T200機器(GE Healthcare)上で、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3を含有するACES pH 7.4において25℃で行った。抗ヒトFc抗体(GE Healthcare)を、アミンカップリングキット(GE Healthcare)を用いてCM4センサーチップのすべてのフローセル上に固定化した。抗Fcセンサー表面上に抗体を捕捉し、次いで、8μM CD3をフローセル上にインジェクトし、その後、8μM CD3の存在下での8μM CD137の同一のインジェクションを行った。第2のインジェクションに対する結合レスポンスの増加は、異なるパラトープに対する結合を示し、したがって、同時の結合相互作用を示した。一方、第2のインジェクションに対する結合レスポンスの増強がないか減少したことは、同じまたはオーバーラップするまたは隣接するパラトープに対する結合を示し、したがって、同時ではない結合相互作用を示した。
図27は、FACS解析によって判定された、三重特異性抗体およびDual-Fab抗体の、参考実施例13において生成されたhCD137トランスフェクタント、親CHO細胞、またはJurkat細胞上に発現しているhCD3(参考実施例6−2)に対する結合を示す。簡潔に述べると、三重特異性抗体およびDual-Fab抗体を、各細胞株と2時間、室温でインキュベートして、FACS緩衝液(PBS中、2% FBS、2mM EDTA)で洗浄した。次いで、Goat F(ab')2 anti-Human IgG, Mouse ads-PE(Southern Biotech, カタログ2043-09)を添加し、30分間4℃でインキュベートして、FACS緩衝液で洗浄した。データの獲得を、FACS Verse(Becton Dickinson)で行い、その後、FlowJo software(Tree Star)を用いた解析を行った。
三重特異性抗体および抗GPC3/Dual-Fab抗体の両方の形式が、標的依存的様式でエフェクター細胞を活性化することができるかどうかを調べるために、参考実施例6−2に記載されるようにNFAT-luc2 Jurkatルシフェラーゼアッセイを実施した。5.00E+03個のSK-pca60細胞(参考実施例13)を標的細胞として用いて、0.1、1、および10 nMの三重特異性抗体またはDual-Fab抗体の存在下で24時間、2.50E+04個のNFAT-luc2 Jurkat細胞と共培養した。24時間後に、ルシフェラーゼ活性を、Bio-Glo luciferase assay system(Promega, G7940)により、製造業者の説明書に従って検出した。発光(単位)は、GloMax(登録商標) Explorer System(Promega #GM3500)を用いて検出し、捕捉された値を、Graphpad Prism 7を用いてプロットした。図28に示すように、GPC3/CD137xCD3、GPC3/CtrlxCD3、または抗GPC3/H183L072などの抗GPC3結合および抗CD3結合の両方から構成される三重特異性抗体のみが、標的細胞の存在下で、Jurkat細胞の用量依存的な活性化をもたらした。注目すべきことに、参考実施例(15−4)におけるFACS解析によるJurkat細胞に対する抗GPC3/H183L072抗体の結合はより弱いにもかかわらず、抗GPC3/H183L072抗体は、GPC3/CD137xCD3またはGPC3/CtrlxCD3抗体と同様の程度のJurkat活性化を惹起することができた。全体的に、三重特異性抗体および抗GPC3/Dual-Fab抗体は両方とも、エフェクター細胞の標的依存性活性化をもたらすことができる。
三重特異性抗体形式および抗GPC3/Dual-Fab抗体が両方とも、hCD137発現細胞とhCD3発現エフェクター細胞との架橋をもたらすことができるかどうかを調べるために、参考実施例(15−5)に記載されるように、5.00E+03個のhCD137発現CHOを、0.1、1、および10 nMの三重特異性抗体の存在下で24時間、2.50E+04個のNFAT-luc2 Jurkat細胞と共培養した。図29は、親CHO細胞と共培養した時に、すべての三重特異性抗体によるJurkat細胞の非特異的な活性化がないことを示した。しかし、GPC3/CD137xCD3およびCtrl/CD137xCD3三重特異性抗体は両方とも、hCD137発現CHO細胞の存在下でJurkat細胞を活性化できることが観察された。抗GPC3/H183L072抗体は、hCD137発現CHO細胞と共培養した時に、Jurkat細胞の活性化をもたらさなかった。10 nMの抗GPC3/H183L072抗体は、10 nMのGPC3/CD137xCD3三重特異性抗体のものの約0.96%の発光を示し、1 nMの抗GPC3/H183L072抗体は、1 nMのGPC3/CD137xCD3三重特異性抗体のものの約1.93%の発光を示した。参考実施例15−5において評価されたGPC3陽性細胞に対するCD3活性化と比較した場合、10 nMまたは1 nMの抗GPC3/H183L072抗体を用いた時には、約1.36%または1.89%の発光が、CD137陽性細胞に対して検出されたが、10 nMおよび1 nMのGPC3/CD137xCD3三重特異性抗体は、それぞれ、GPC3陽性細胞に対するものと比較して約127.77%および107.22%の発光を、CD137陽性細胞に対して示した。
まとめると、これは、CD3とCD137に同時に結合する三重特異性形式GPC3/CD137xCD3は、CD3とCD137に同時には結合しない抗GPC3/Dual-Fab形式とは異なり、標的または腫瘍抗原の結合とは独立して、hCD137発現細胞に対するJurkat細胞活性化をもたらし、オフターゲット細胞傷害活性を生じ得ることを示唆する。参考実施例8、15−5、および15−6に示すそれらの結果から、CD3とCD137に同時には結合しない抗体のみが、標的抗原発現細胞を特異的に死滅させ得ることがわかる。
オフターゲット毒性についての三重特異性抗体形式とDual-Fab抗体との比較をまた、ヒトPBMC溶液を用いて評価した。簡潔に述べると、参考実施例(7−2−1)に記載されるように調製された2.00E+05個のPBMCを、80、16、および3.2 nMの三重特異性抗体またはDual-Fab抗体と、標的細胞の非存在下で48時間インキュベートした。上清におけるIL-2、IFNγ、およびTNFαを、参考実施例(7−2−2)に記載されるようなサイトカイン放出アッセイを用いて測定した。図30に示すように、Ctrl/CD137xCD3三重特異性抗体は、PBMCからのIL-2、IFNγ、およびTNFαの放出をもたらし得るが、Ctrl/Dual-Fab抗体はもたらさない。80 nM Ctrl/Dual-Fab抗体は、80 nM Ctrl/CD137xCD3三重特異性抗体のものの約50%のIL-2濃度を示し、16 nMの抗体を用いた時には、10%未満のIL-2濃度が観察された。IFNγおよびTNFαについて言うと、Ctrl/Dual-Fab抗体は、各抗体濃度において、Ctrl/CD137xCD3三重特異性抗体でのものの10%未満のIL-2濃度を示した。
これらの結果は、Ctrl/CD137xCD3三重特異性形式が、標的細胞の非存在下でPBMCの非特異的活性化をもたらしたことを示唆する。最後に、データは、Dual-Fab形式が、オフターゲット毒性を伴わずに標的特異的エフェクター細胞活性化を付与できることを示した。
Claims (15)
- CD3およびCD137に結合することができるがCD3とCD137に同時には結合しない抗体可変領域を含む、抗原結合分子であって、
好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、5×10-6 M未満の平衡解離定数(KD)でCD137に結合する、前記抗原結合分子。 - (a)配列番号:159のアミノ酸配列を含むCD3ε(CD3イプシロン)の細胞外ドメインの、少なくとも1個、2個、3個、もしくはそれよりも多いアミノ酸残基;ならびに/または
(b)ヒトCD137のLQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAEC(配列番号:152)、好ましくはLQDPCSN、NNRNQI、および/もしくはGQRTCDIのアミノ酸配列を含むCD137のN末端領域の、少なくとも1個、2個、3個、もしくはそれよりも多いアミノ酸残基
に結合する、請求項1に記載の抗原結合分子。 - 前記抗体可変領域が、以下のうちのいずれか1つを含む、請求項1または2に記載の抗原結合分子:
(a1)配列番号:16に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:30に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:44に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a2)配列番号:17に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:31に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:45に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:64に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:69に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:74に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a3)配列番号:18に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:32に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:46に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a4)配列番号:19に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:33に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:47に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a5)配列番号:19に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:33に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:47に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:65に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:70に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:75に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a6)配列番号:20に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:34に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:48に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a7)配列番号:22に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:36に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:50に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a8)配列番号:23に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:37に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:51に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a9)配列番号:23に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:37に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:51に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a10)配列番号:24に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:38に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:52に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a11)配列番号:25に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:39に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:53に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a12)配列番号:26に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:40に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:54に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:66に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:71に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:76に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a13)配列番号:26に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:40に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:54に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a14)配列番号:27に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:41に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:55に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(a15)配列番号:28に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域1(HCDR1)、配列番号:42に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域2(HCDR2)、配列番号:56に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域3(HCDR3)、配列番号:63に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域1(LCDR1)、配列番号:68に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域2(LCDR2)、および配列番号:73に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域3(LCDR3);
(b1)配列番号:16のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:30のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:44のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b2)配列番号:17のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:31のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:45のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:64のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:69のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:74のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b3)配列番号:18のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:32のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:46のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b4)配列番号:19のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:33のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:47のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b5)配列番号:19のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:33のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:47のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:65のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:70のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:75のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b6)配列番号:20のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:34のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:48のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b7)配列番号:22のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:36のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:50のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b8)配列番号:23のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:37のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:51のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b9)配列番号:23のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:37のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:51のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b10)配列番号:24のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:38のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:52のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b11)配列番号:25のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:39のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:53のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b12)配列番号:26のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:40のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:54のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:66のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:71のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:76のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b13)配列番号:26のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:40のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:54のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b14)配列番号:27のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:41のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:55のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(b15)配列番号:28のアミノ酸配列を含むHCDR1、配列番号:42のアミノ酸配列を含むHCDR2、配列番号:56のアミノ酸配列を含むHCDR3、配列番号:63のアミノ酸配列を含むLCDR1、配列番号:68のアミノ酸配列を含むLCDR2、および配列番号:73のアミノ酸配列を含むLCDR3;
(c1)配列番号:2に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c2)配列番号:3に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:59に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c3)配列番号:4に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c4)配列番号:5に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c5)配列番号:5に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:60に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c6)配列番号:6に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c7)配列番号:8に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c8)配列番号:9に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c9)配列番号:9に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c10)配列番号:10に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c11)配列番号:11に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c12)配列番号:12に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c13)配列番号:12に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c14)配列番号:13に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(c15)配列番号:14に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58に対して少なくとも70%、80%、または90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン(VL);
(d1)配列番号:2の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d2)配列番号:3の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:59の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d3)配列番号:4の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d4)配列番号:5の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d5)配列番号:5の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:60の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d6)配列番号:6の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d7)配列番号:8の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d8)配列番号:9の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d9)配列番号:9の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d10)配列番号:10の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d11)配列番号:11の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d12)配列番号:12の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:61の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d13)配列番号:12の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d14)配列番号:13の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(d15)配列番号:14の重鎖可変ドメイン(VH)、および配列番号:58の軽鎖可変ドメイン(VL);
(e)CD3に対する結合について、(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと競合する、抗体可変領域;
(f)CD137に対する結合について、(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと競合する、抗体可変領域;
(g)(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと同じCD3上のエピトープに結合する、抗体可変領域;
(h)(a1)〜(d15)の抗体可変領域のいずれか1つと同じCD137上のエピトープに結合する、抗体可変領域。 - (a)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、重鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸26位のA、D、E、I、G、K、L、M、N、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27位のD、F、G、I、M、もしくはL;
アミノ酸28位のD、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸29位のFもしくはW;
アミノ酸30位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のF、I、N、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のA、H、I、K、L、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸33位のW;
アミノ酸34位のF、I、L、M、もしくはV;
アミノ酸35位のF、H、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸50位のE、F、H、I、K、L、M、N、Q、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸51位のI、K、もしくはV;
アミノ酸52位のK、M、R、もしくはT;
アミノ酸52b位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸52c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のE、F、G、H、L、M、N、Q、W、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸57位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸58位のA、F、H、K、N、P、R、もしくはY;
アミノ酸59位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸60位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸61位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸62位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸63位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸64位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸65位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸93位のHもしくはR;
アミノ酸94位のF、G、H、L、M、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸95位のIもしくはV;
アミノ酸96位のF、H、I、K、L、M、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸97位のF、Y、もしくはW;
アミノ酸98位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸99位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100b位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100c位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100d位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100f位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100g位のA、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸100h位のA、D、E、G、H、I、L、M、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸100i位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸101位のA、D、F、I、L、M、N、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸102位のA、D、E、F、G、H、I K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
ならびに/または
(b)以下の位置(すべてKabatナンバリングによる)の各々に、その位置について示される以下のアミノ酸残基のうちの1個または複数個を含む、軽鎖可変ドメインアミノ酸配列:
アミノ酸24位のA、D、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸25位のA、G、N、P、S、T、もしくはV;
アミノ酸26位のA、D、E、F、G、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸27位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27a位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27b位のA、I、L、M、P、T、もしくはV;
アミノ酸27c位のA、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、T、W、もしくはY;
アミノ酸27d位のA、E、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸27e位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸28位のG、N、S、もしくはT;
アミノ酸29位のA、F、G、H、K、L、M、N、Q、R、S、T、W、もしくはY;
アミノ酸30位のA、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、V、W、もしくはY;
アミノ酸31位のI、L、Q、S、T、もしくはV;
アミノ酸32位のF、W、もしくはY;
アミノ酸33位のA、F、H、L、M、Q、もしくはV;
アミノ酸34位のA、H、もしくはS;
アミノ酸50位のI、K、L、M、もしくはR;
アミノ酸51位のA、E、I、K、L、M、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸52位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸53位のA、E、F、G、H、K、L、M、N、P、Q、R、S、V、W、もしくはY;
アミノ酸54位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸55位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、もしくはY;
アミノ酸56位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸89位のA、G、K、S、もしくはY;
アミノ酸90位のQ;
アミノ酸91位のG;
アミノ酸92位のA、D、H、K、N、Q、R、S、もしくはT;
アミノ酸93位のA、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、もしくはY;
アミノ酸94位のA、D、H、I、M、N、P、Q、R、S、T、もしくはV;
アミノ酸95位のP;
アミノ酸96位のFもしくはY;および
アミノ酸97位のA、D、E、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、もしくはV
を含む、請求項3の(a1)〜(a15)または(c1)〜(c15)のいずれか1つに記載の抗原結合分子。 - 以下の(1)〜(3)からなる群より選択される少なくとも1つの特徴を有する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の抗原結合分子:
(1)抗原結合分子が、各々が異なる細胞上で発現しているCD3とCD137に同時には結合しない;
(2)抗原結合分子が、CD137に対するアゴニスト活性を有する;ならびに
(3)抗原結合分子が、配列番号:1のVH配列および配列番号:57のVL配列を含む参照抗体と比較して、同等のまたは10倍、20倍、50倍、100倍低い、ヒトCD137に対する結合についてのKD値を有し、ここで、該KD値は、好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定される。 - CD3およびCD137とは異なる第3の抗原に結合することができる抗体可変領域をさらに含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- 第3の抗原が、がん組織において特異的に発現している分子である、請求項6に記載の抗原結合分子。
- 抗体Fc領域をさらに含む、請求項1〜7のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- 前記Fc領域が、天然型ヒトIgG1抗体のFc領域と比較してFcγRに対する結合活性が低下しているFc領域である、請求項8に記載の抗原結合分子。
- 請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗原結合分子と、薬学的に許容し得る担体とを含む、医薬組成物。
- 請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗原結合分子をコードするヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
- 請求項11に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
- 請求項11に記載のポリヌクレオチドまたは請求項12に記載の発現ベクターで形質転換されたかまたはそれをトランスフェクトされた、宿主細胞。
- 請求項13に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、多重特異性抗原結合分子または多重特異性抗体を作製する方法。
- 以下の工程を含む、CD3およびCD137に結合することができるが、CD3とCD137に同時には結合しない抗体可変領域を取得するかまたはスクリーニングする方法:
(a)複数の抗体可変領域を含むライブラリーを提供する工程、
(b)工程(a)において提供されたライブラリーを、第1の抗原としてのCD3またはCD137のいずれかと接触させ、第1の抗原に結合した抗体可変領域を収集する工程、
(c)工程(b)において収集された抗体可変領域を、CD3およびCD137のうちの第2の抗原と接触させ、第2の抗原に結合した抗体可変領域を収集する工程、ならびに
(d)以下の抗体可変領域:
(1)好ましくはSPRによって以下の条件:
37℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、約5×10-6 M未満もしくは5×10-6 M〜3×10-8 Mの平衡解離定数(KD)でCD137に結合する、抗体可変領域;および/または
(2)好ましくはSPRによって以下の条件:
25℃、pH 7.4、20 mM ACES、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、0.005% NaN3;抗原結合分子がCM4センサーチップ上に固定化され、抗原がアナライトとなる
で測定した場合に、2×10-6 M〜1×10-8 Mの平衡解離定数(KD)でCD3に結合する、抗体可変領域
を選択する工程。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018185120 | 2018-09-28 | ||
JP2018185120 | 2018-09-28 | ||
JP2019104308 | 2019-06-04 | ||
JP2019104308 | 2019-06-04 | ||
PCT/JP2019/038138 WO2020067419A1 (en) | 2018-09-28 | 2019-09-27 | Antigen-binding molecules capable of binding cd3 and cd137 but not simultaneously |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2022502010A true JP2022502010A (ja) | 2022-01-11 |
JPWO2020067419A5 JPWO2020067419A5 (ja) | 2022-09-13 |
Family
ID=69950671
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021512587A Pending JP2022502010A (ja) | 2018-09-28 | 2019-09-27 | Cd3およびcd137に結合することができるが、同時には結合しない、抗原結合分子 |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210388087A1 (ja) |
EP (1) | EP3856785A4 (ja) |
JP (1) | JP2022502010A (ja) |
KR (1) | KR20210068079A (ja) |
CN (1) | CN113166247A (ja) |
AU (1) | AU2019347412A1 (ja) |
BR (1) | BR112021005722A2 (ja) |
CA (1) | CA3114154A1 (ja) |
CL (1) | CL2021000739A1 (ja) |
CO (1) | CO2021005528A2 (ja) |
CR (1) | CR20210199A (ja) |
IL (1) | IL281787A (ja) |
MA (1) | MA53742A (ja) |
MX (1) | MX2021003608A (ja) |
PE (1) | PE20211072A1 (ja) |
PH (1) | PH12021550662A1 (ja) |
SG (1) | SG11202101912UA (ja) |
TW (1) | TW202028238A (ja) |
WO (1) | WO2020067419A1 (ja) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6628966B2 (ja) | 2012-06-14 | 2020-01-15 | 中外製薬株式会社 | 改変されたFc領域を含む抗原結合分子 |
EP3070168A4 (en) | 2013-11-11 | 2017-06-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule containing modified antibody variable region |
US11154615B2 (en) | 2014-11-11 | 2021-10-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Library of antigen-binding molecules including modified antibody variable region |
EP3720963A4 (en) | 2017-12-05 | 2021-12-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | ANTIGEN BINDING MOLECULE INCLUDING A VARIABLE REGION OF MODIFIED ANTIBODIES BINDING TO CD3 AND CD137 |
US11667713B2 (en) | 2017-12-28 | 2023-06-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cytotoxicity-inducing therapeutic agent |
KR20220161156A (ko) * | 2020-03-31 | 2022-12-06 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 면역 활성화 다중 특이성 항원 결합 분자 및 그의 사용 |
US11274151B2 (en) | 2020-03-31 | 2022-03-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | CD3-targeting and DLL3-targeting multispecific antigen-binding molecules and uses thereof |
JP2023519776A (ja) * | 2020-03-31 | 2023-05-15 | 中外製薬株式会社 | 多重特異性抗原結合分子を製造するための方法 |
CN115960242B (zh) * | 2021-09-09 | 2023-10-17 | 广东东阳光药业股份有限公司 | 抗癌结合分子及其应用 |
JPWO2023053282A1 (ja) * | 2021-09-29 | 2023-04-06 | ||
WO2023053272A1 (en) * | 2021-09-29 | 2023-04-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Uses of dll3-targeting multispecific antigen-binding molecules |
JP7470760B2 (ja) * | 2021-09-29 | 2024-04-18 | 中外製薬株式会社 | がんの治療に用いるための細胞傷害誘導治療剤 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2694002T3 (es) | 1999-01-15 | 2018-12-17 | Genentech, Inc. | Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante |
WO2006019447A1 (en) | 2004-07-15 | 2006-02-23 | Xencor, Inc. | Optimized fc variants |
US20140242077A1 (en) * | 2013-01-23 | 2014-08-28 | Abbvie, Inc. | Methods and compositions for modulating an immune response |
EP3070168A4 (en) * | 2013-11-11 | 2017-06-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule containing modified antibody variable region |
NZ724710A (en) * | 2014-04-07 | 2024-02-23 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Immunoactivating antigen-binding molecule |
US11154615B2 (en) * | 2014-11-11 | 2021-10-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Library of antigen-binding molecules including modified antibody variable region |
AU2017384126A1 (en) * | 2016-12-20 | 2019-05-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of anti-CD20/anti-CD3 bispecific antibodies and 4-1BB (CD137) agonists |
EP3720963A4 (en) * | 2017-12-05 | 2021-12-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | ANTIGEN BINDING MOLECULE INCLUDING A VARIABLE REGION OF MODIFIED ANTIBODIES BINDING TO CD3 AND CD137 |
-
2019
- 2019-09-27 US US17/272,972 patent/US20210388087A1/en active Pending
- 2019-09-27 PE PE2021000378A patent/PE20211072A1/es unknown
- 2019-09-27 SG SG11202101912UA patent/SG11202101912UA/en unknown
- 2019-09-27 WO PCT/JP2019/038138 patent/WO2020067419A1/en active Application Filing
- 2019-09-27 TW TW108135110A patent/TW202028238A/zh unknown
- 2019-09-27 CR CR20210199A patent/CR20210199A/es unknown
- 2019-09-27 JP JP2021512587A patent/JP2022502010A/ja active Pending
- 2019-09-27 CN CN201980076578.6A patent/CN113166247A/zh active Pending
- 2019-09-27 KR KR1020217012569A patent/KR20210068079A/ko active Search and Examination
- 2019-09-27 AU AU2019347412A patent/AU2019347412A1/en not_active Withdrawn
- 2019-09-27 CA CA3114154A patent/CA3114154A1/en active Pending
- 2019-09-27 MX MX2021003608A patent/MX2021003608A/es unknown
- 2019-09-27 BR BR112021005722A patent/BR112021005722A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2019-09-27 MA MA053742A patent/MA53742A/fr unknown
- 2019-09-27 EP EP19866533.3A patent/EP3856785A4/en active Pending
-
2021
- 2021-03-24 PH PH12021550662A patent/PH12021550662A1/en unknown
- 2021-03-24 IL IL281787A patent/IL281787A/en unknown
- 2021-03-25 CL CL2021000739A patent/CL2021000739A1/es unknown
- 2021-04-28 CO CONC2021/0005528A patent/CO2021005528A2/es unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SG11202101912UA (en) | 2021-04-29 |
PH12021550662A1 (en) | 2021-12-13 |
PE20211072A1 (es) | 2021-06-09 |
CA3114154A1 (en) | 2020-04-02 |
TW202028238A (zh) | 2020-08-01 |
US20210388087A1 (en) | 2021-12-16 |
WO2020067419A1 (en) | 2020-04-02 |
CR20210199A (es) | 2021-06-11 |
KR20210068079A (ko) | 2021-06-08 |
MA53742A (fr) | 2022-01-05 |
CN113166247A (zh) | 2021-07-23 |
EP3856785A4 (en) | 2022-07-06 |
CO2021005528A2 (es) | 2021-07-30 |
CL2021000739A1 (es) | 2021-09-24 |
BR112021005722A2 (pt) | 2021-07-06 |
AU2019347412A1 (en) | 2021-05-27 |
EP3856785A1 (en) | 2021-08-04 |
IL281787A (en) | 2021-05-31 |
MX2021003608A (es) | 2021-05-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7357616B2 (ja) | Cd3およびcd137に結合する改変された抗体可変領域を含む抗原結合分子 | |
US20240026000A1 (en) | Antigen-binding molecule containing modified antibody variable region | |
WO2020067419A1 (en) | Antigen-binding molecules capable of binding cd3 and cd137 but not simultaneously | |
US20220112296A1 (en) | Antigen-binding molecule comprising altered antibody variable region | |
US20220040297A1 (en) | Library of antigen-binding molecules including modified antibody variable region | |
EA042507B1 (ru) | Антигенсвязывающая молекула, содержащая вариабельную область антитела |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220902 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220902 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230926 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20231121 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231208 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20240304 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240523 |