JP2022184857A

JP2022184857A - Ｉｌ－２５に対する中和モノクローナル抗体及びその使用

Info

Publication number: JP2022184857A
Application number: JP2022139134A
Authority: JP
Inventors: シムケッツ，リチャード，エー．; A Shimkets Richard; ジャクソン，クリスタル，ライルズ; Lyles Jackson Crystal; バートレット，ネイサン; BARTLETT Nathan; ヴィンセント，トーマス; Vincent Thomas; ルオ，ヨンホワ; Yonghua Luo
Original assignee: Abeome Corp
Current assignee: Abeome Corp
Priority date: 2016-03-16
Filing date: 2022-09-01
Publication date: 2022-12-13
Also published as: IL261802A; IL261802B2; CN109563162A; EP3430046A1; EP3430046A4; CN115010808A; AU2017234528A8; IL261802B1; BR112018068671A2; CN109563162B; AU2017234528A1; CA3018058A1; MX2018011244A; AU2017234528B2; US20200291105A1; KR20190039469A; JP2019521132A; EA201892096A1; US11492397B2; KR102477922B1

Abstract

【課題】ＩＬ－２５結合分子、及び該ＩＬ－２５結合分子の使用方法を提供する。【解決手段】一態様において、特定の配列よりなる重鎖可変ドメイン相補性決定領域のうちから選択される１つ、２つ又は３つと、特定の配列よりなる軽鎖可変ドメイン相補性決定領域のうちから選択される１つ、２つ又は３つと、を含む、単離されたＩＬ－２５結合分子を提供する。前記ＩＬ－２５結合分子のうちの任意を投与することを含む、ライノウイルス感染、気道炎症、関節リウマチ、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症、嚢胞性線維症並びに多発性硬化症を治療する方法も提供する。【選択図】なし

Description

１．ＩＬ－１７Ｅとしてもまた既知のインターロイキン－２５（ＩＬ－２５）は、ＩＬ
－１７サイトカインファミリーに属し、タイプ２ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ２）及びマスト細
胞によって分泌されるサイトカインである。ＩＬ－２５は、ＩＬ－４、ＩＬ－５及びＩＬ
－１３を含む他のサイトカインの産生を複数の組織において誘発し、好酸球の増多を促進
する。

２．ＩＬ－２５は、消化管に関連付けられる慢性炎症に関与し、ＩＬ－２５遺伝子は、
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）などの腸管の自己免疫疾患に関連付けられる染色体領域において
同定されている。ＩＢＤの治療のための従来療法は、抗生物質又はステロイド由来薬物の
いずれか一方を伴うが、これらは、患者における臨床的寛解の誘発又は維持に現時点で成
功していない。

３．ＩＬ－２５はまた、世界中で３億人を超える人々を侵していると推定される症状で
ある喘息を有する患者由来の試料において、亢進されていることが示されており、このサ
イトカインの過剰発現が喘息及び関連症状の病理の一因であることが示唆されている。

４．したがって、喘息及び炎症性腸疾患を含むＩＬ－２５過剰発現を特徴とする疾患及
び症状の治療に有用な、ＩＬ－２５の有効なアンタゴニストに対するニーズが存在してい
る。

５．本明細書において、一態様では、ＩＬ－２５介在性疾患及び障害の治療に使用する
ために好適な、ＩＬ－２５を対象とする結合分子が開示されている。

６．一態様では、本明細書において、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号
７、配列番号８及び配列番号９に記載のような１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含
む重鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子が開示されている、

７．重鎖可変ドメインを含むＩＬ－２５結合分子もまた開示され、その重鎖可変ドメイ
ンは、配列番号１３及び配列番号１５を含む

８．一態様では、本明細書において、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号
１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載のような１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ド
メインが開示されている。

９．本明細書において、軽鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子もまた
開示され、その軽鎖可変ドメインは、配列番号１４、配列番号１６を含む。

１０．一態様では、開示されたＩＬ－２５結合分子は、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変
ドメインの両方又は任意の上記態様の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むことができる。

１１．その結果、本明細書において、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号
７、配列番号８及び配列番号９からなる群から選択される重鎖可変ドメインＣＤＲのうち
の１つ、２つ又は３つと、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号１０、配列番
号１１及び配列番号１２からなる群から選択される軽鎖可変ドメインＣＤＲのうちの１つ
、２つ又は３つと、を含む、ＩＬ－２５結合分子が開示されている。

１２．本明細書において、重鎖可変ドメインが配列番号１３又は配列番号１５を含む重
鎖可変ドメインと、軽鎖可変ドメインが配列番号１４又は配列番号１６を含む軽鎖可変ド
メインと、を含む、ＩＬ－２５結合分子もまた開示されている。

１３．本明細書において、重鎖可変ドメインが配列番号１７を含む重鎖可変ドメインと
、軽鎖可変ドメインが配列番号１８を含む軽鎖可変ドメインと、を含む、ヒト化ＩＬ－２
５結合分子が更に開示されている。

１４．一態様では、本明細書において、任意の上記態様のＩＬ－２５結合分子のうちの
任意の治療量を投与することを含む、ライノウイルス感染気道炎症、関節リウマチ、変形
性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患、同種移植片拒絶反応、乾癬、特
定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症、嚢胞性線維症並びに多発性硬化症を
治療、抑制又は予防する方法が開示されている。

１５．本明細書に組み込まれ、また本明細書の一部を構成する添付の図面は、いくつか
の実施形態を例証し、以下の説明と共に、開示された組成物及び方法を例証する。
１６．
ＩＬ－２５により免疫化されたマウスから摘出されたＢ細胞の概要及びＩＬ－２５に結合するＢ細胞の蛍光ソートプロットを示す図である。１７．抗体の変性ゲル電気泳動を示す図であり、レーン１：ヒトＩｇＧ４陽性対照、レーン２：カレイドスコープ前染色標準タンパク質マーカー、レーン３：ＡＢＭ１０９、レーン４：ＡＢＭ１２５、レーン５：ＡＢＭ１０９．２である。１８．ＩＬ－２５に対するモノクローナル抗体のＨＴ－２９細胞力価アッセイを示す図である。１９．ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４アイソタイプにおけるヒト化モノクローナル抗体ＡＢＭ１０９．２のＨＴ－２９細胞力価アッセイを示す図である。２０．抗ＩＬ２５モノクローナル抗体の表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）及び抗体の計算された親和性を示す図である。２１．マウスでのアレルギー性喘息のライノウイルス感染のモデルにおける全肺浸潤細胞、好酸球及びマクロファージに対するＡＢＭ１２５又は対照抗体（ＩｇＧ）投与の効果を示す図である。２２．対照抗体（ＩｇＧ）又はＡＢＭ１２５で処置されたマウスの肺における、検出可能なライノウイルスＲＮＡの量を示す図である。２３．対照抗体（ＩｇＧ）又はＡＢＭ１２５で処置されたマウスの肺における、検出可能なＩＬ－５ＲＮＡの量を示す図である。２４．ＡＢＭ１２５．１０及びＡＢＭ１２５．９と称するＡＢＭ１２５のヒト化（ＣＤＲグラフト化）バージョンの力価及び結合親和性を、全マウス可変領域を有するキメラＡＢＭ１２５と比較して示す図である。

２５．本発明の化合物、組成物、物品、デバイス及び／又は方法を開示及び説明する前
に、特に指定されない限り、これらが特定の合成法又は特定の組換えバイオテクノロジー
方法に限定されないこと、又は、特に指定されない限り、特定の試薬に限定されず、当然
ながらそれ自体が変化してもよいことを理解されたい。本明細書で使用される専門用語は
、特定の実施形態を説明するための目的のものにすぎず、限定することを意図しないこと
も理解するべきである。

Ａ．定義
２６．本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「ａ」、「
ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、その内容について別段の明確な指示がない限り、複数の指示
対象を包含する。したがって、例えば、「薬学的担体」への言及は、２つ以上のこのよう
な担体の混合物などを含む。

２７．範囲は、「約」１つの特定の値から、かつ／又は「約」別の特定の値までとして
表され得る。このような範囲が表されるとき、別の実施形態は、１つの特定の値から、か
つ／又は他の特定の値までを含む。同様に、値が、先行詞「約」の使用によって近似とし
て表されるとき、特定の値は別の実施形態を形成することが理解されるであろう。範囲の
各々の端点は、他の端点に関しても、他の端点とは独立しても、この両方において、有意
であると更に理解されるであろう。本明細書でいくつかの値数が開示され、各値がその値
自体に加えて「約」その特定の値として本明細書でもまた開示されることもまた理解され
たい。例えば、値「１０」が開示されている場合、「約１０」もまた開示されている。当
業者によって適切に理解されるように、ある値が開示される場合、その値「以下」、「そ
の値以上」及び値間の可能な範囲もまた開示されていることもまた理解されたい。例えば
、値「１０」が開示されている場合、「１０以下」と同様に「１０以上」もまた開示され
ている。本願全体にわたってデータが多数の異なるフォーマットで提供され、このデータ
が、端点及び開始点並びにデータ点の任意の組み合わせに対する範囲を表すこともまた理
解されたい。例えば、特定のデータポイント「１０」及び特定のデータポイント１５が開
示されている場合、１０と１５との間と同様に、１０及び１５よりも大きい、１０及び１
５以上、１０及び１５未満、１０及び１５以下、並びに１０及び１５に等しいデータポイ
ントが開示されていると見なされることを理解されたい。特定の２つの単位間のそれぞれ
の単位もまた開示されていることもまた理解されたい。例えば、１０及び１５が開示され
ている場合、１１、１２、１３及び１４もまた開示されている。

２８．本明細書及び以下の「特許請求の範囲」において、多数の用語に言及し、それら
は以下の意味を有すると定義されるものとする。

２９．「任意選択的な」又は「任意選択的に」は、引き続いて記載された事象又は状況
が起こってもよくあるいは起こらなくてもよいこと、及び説明が、当該事象又は状況が起
こる場合の例及びそれが起こらない場合の例を含むことを意味する。

３０．本明細書全体において、様々な出版物が参照される。これらの出版物の開示全体
が、開示内容が関連する技術分野の状態をより十分に説明するためにここに参照により本
出願に組み込まれる。開示される参照文献も、その参照文献が依拠される文において考察
されるそれらに含まれる資料について、参照により本明細書に個々に、かつ具体的に組み
込まれる。

Ｂ．組成物
３１．開示された組成物を調製するために使用される組成物と同様に、本明細書で開示
される方法の範囲内で使用される組成物それ自体が開示される。これら及び他の物質が本
明細書で開示されており、これらの物質の組み合わせ、サブセット、相互作用、群などが
開示されている場合、これらの化合物のそれぞれの様々な個々及び集合的な組み合わせ及
び順列の具体的な言及は、明示的に開示されていない場合があるが、それぞれが具体的に
企図され、本明細書に記載されることを理解されたい。例えば、特定の抗ＩＬ－２５抗体
が開示かつ論じられ、また抗ＩＬ－２５抗体を含む多数の分子に対して行うことができる
多数の修飾が論じられている場合、それとは反対の具体的な指示がない限り、抗ＩＬ－２
５抗体と可能な修飾とのあらゆる組み合わせ及び置換が具体的に企図される。したがって
、分子Ａ、Ｂ及びＣの種類が開示されており、同様に分子Ｄ、Ｅ及びＦの種類及び分子Ａ
～Ｄの組み合わせの例が開示されている場合、それぞれが個々に列挙されていない場合で
あっても、それぞれが個々にかつ集合的に企図され、組み合わせＡ－Ｅ、Ａ－Ｆ、Ｂ－Ｄ
、Ｂ－Ｅ、Ｂ－Ｆ、Ｃ－Ｄ、Ｃ－Ｅ及びＣ－Ｆが開示されると見なされる。同様に、これ
らの任意のサブセット又は組み合わせもまた開示される。したがって、例えば、Ａ－Ｅ、
Ｂ－Ｆ及びＣ－Ｅのサブグループが開示されていると見なされるであろう。この概念は、
本出願のすべての態様に適用され、開示された組成物の作製及び使用方法における工程を
含むが、これに限定されない。このように、実施することができる多様な更なる工程が存
在する場合、これらの更なる工程のそれぞれは、任意の特定の実施形態又は開示された方
法の実施形態の組み合わせにより実施することができることを理解されたい。

３２．上述のように、ＩＬ－２５の増加したレベルは、気道炎症、関節リウマチ（「Ｒ
Ａ」）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、嚢
胞性線維症、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈
硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」）を含むいくつかの状態、疾病又は疾患に関連付け
られている。

３３．サイトカインのＩＬ－１７ファミリーは、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｂ、ＩＬ－
１７Ｃ、ＩＬ－１７Ｄ、ＩＬ－１７Ｅ（ＩＬ－２５）及びＩＬ－１７Ｆを現時点で含む。
すべてのＩＬ－１７ファミリーメンバーは、鎖内ジスルフィド結合の形成に関与し、鎖間
ジスルフィド結合に関与してもよい２つ以上のシステイン残基を有する、４つの高度に保
存されたシステイン残基を有する。ＩＬ－１７ファミリーのメンバーは、任意の他の既知
のサイトカインに対して配列類似性を有さない。

３４．タイプ２サイトカインの寄生蠕虫感染に対して防御免疫を仲介することと、Ｂ細
胞増殖及びＩｇＥ分泌などのエフェクター機能を調節することと、杯細胞過形成並びに関
連した粘液産生、肥満細胞症及び線維症を誘導することと、において重要な役割を果たす
。これは、サイトカインを喘息における主要な治療標的にしたこれらのエフェクター機能
の調節において、これらのサイトカインによって果たされる中心的役割である。実際に、
これらのサイトカインが過発現されるマウスモデルは、喘息の顕著な特性を示す。意外に
も、特定のタイプ２サイトカインを遮断することによって実験的喘息を改善するための試
みは、ＩＬ－１３を阻害することを除いて、不成功であることが判明した。

３５．ＩＬ－１３の阻害は、ＡＨＲ及び気道炎症の両方を抑制するが、そのメカニズム
は不明のままである。しかしながら、喘息の複雑な病態生理学及びほとんど解明されてい
ない病因論を前提とすると、個々の経路を標的化することが治療的に成功を収めると最終
的に証明することとなるかどうかは不明である。

３６．近年、ＩＬ－２５／ＩＬ－１７Ｅの過発現は、インビボでタイプ２応答を誘発し
、気道アゴニストに対する応答性を増大させていることが示されている。ＩＬ－２５^-/-
マウスは、蠕虫性寄生虫の駆除に失敗し、これは無効なタイプ２応答の重要な指標である
。

３７．本発明者らは、ＩＬ－２５に対する抗体を作製し、ＩＬ－２５に対する超高親和
性及び特異性を有して結合する抗体分子を同定した。スクリーニングされた２３種のうち
の２種の遮断抗体は、極めて遅い解離速度を有する抗体と同定された。

結合分子
３８．本明細書で使用するとき、用語「結合分子」は、モノクローナル抗体、ポリクロ
ーナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト抗体を含む無傷免疫グロブリンを指し、同
様に、免疫グロブリンの結合相手、例えば、ＩＬ－２５に特異的に結合するための無傷免
疫グロブリンと拮抗する免疫グロブリンのフラグメントを含む抗原結合ドメイン及び／又
は可変ドメインを含む抗体フラグメント及び機能性変異体を指す。

３９．一態様では、開示されたＩＬ－２５結合分子は、抗ＩＬ－２５抗体（例えば、抗
ＩＬ－２５抗体）を含むことができる。用語「抗体」は、広義で本明細書で使用され、ポ
リクローナル抗体及びモノクローナル抗体の両方を含む。本明細書で使用するとき、用語
「抗体」は、任意の種類の免疫グロブリン全体（すなわち、無傷抗体）を包含し、これら
に限定されない。無傷免疫グロブリン分子に加えて、用語「抗体」にはまた、これらの免
疫グロブリン分子のフラグメント又はポリマー、及びヒト型若しくはヒト化型の免疫グロ
ブリン分子又はこれらのフラグメントが含まれるが、これらがＩＬ－２５と相互作用する
能力について選択され、ＩＬ－２５がＩＬ－１７ＲＡ及び／又はＩＬ－１７ＲＢと相互作
用しないように阻害される場合に限る。ＩＬ－２５とＩＬ－１７ＲＡ及び／又はＩＬ－１
７ＲＢとの間の相互作用に関与するＩＬ－２５の開示された領域に結合する抗体もまた開
示される。

４０．天然抗体は、通常、同一の２つの軽（Ｌ）鎖及び同一の２つの重（Ｈ）鎖からな
るヘテロ四量体糖タンパク質である。開示されたＩＬ－２５結合分子は、モノクローナル
抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト抗体、並びに抗体フラグメ
ント及び機能性変異体であるかにかかわらず、軽鎖及び重鎖のすべて又は一部を含むこと
ができる。

４１．完全抗体では、一般的に、それぞれの軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によ
って重鎖に連結されているが、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタ
イプの重鎖間で変化する。それぞれの重鎖及び軽鎖はまた、規則的に間隔をあけた鎖内ジ
スルフィド架橋を有する。それぞれの重鎖は、一端に可変ドメイン（Ｖ（Ｈ））に続いて
多数の定常（Ｃ（Ｈ））のドメインを有する。それぞれの軽鎖は、一端に可変ドメイン（
Ｖ（Ｌ））を、他方の端に定常（Ｃ（Ｌ））ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重
鎖の第１の定常ドメインと整列化され、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列
化される。特定のアミノ酸残基は、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間の界面を
形成すると考えられる。任意の脊椎動物由来の抗体の軽鎖は、それらの定常ドメインのア
ミノ酸配列に基づいて、カッパ（ｋ）及びラムダ（ｌ）と呼ばれる、明確に異なる２つの
種類のうちの１つに割り当てることができる。これらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配
列に応じて、免疫グロブリンを、異なるクラスに割り当てることができる。ヒト免疫グロ
ブリンには５つの主要なクラスＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これ
らのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ－１、ＩｇＧ－２、Ｉｇ
Ｇ－３及びＩｇＧ－４、ＩｇＡ－１及びＩｇＡ－２に更に分類してもよい。当業者は、マ
ウスに対して同等なクラスを理解すると考えられる。免疫グロブリンの異なるクラスに対
応する重鎖定常ドメインは、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ及びミュー
と呼ばれる。

４２．用語「可変」は、抗体間で配列が異なる重鎖及び軽鎖のある特定のドメインを記
載するために本明細書で用いられ、特定の抗原に対するそれぞれの特定の抗体の結合及び
特異性において使用される。しかし、この可変性は、抗体の可変ドメインを通して通常均
一に分布していない。これらの可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワ
ーク（ＦＲ）と呼ばれる。天然型の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、主にβシート立体配
置をとる４つのＦＲ領域をそれぞれ含み、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）によって接続
され、その相補性決定領域は、βシート構造と接続する、いくつかの場合にはβシート構
造の一部を形成するループを形成する。可変性は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメイ
ンの両方においてＣＤＲ又は超可変領域に一般的に集中している。

４３．それぞれの鎖内のＣＤＲは、ＦＲ領域によって近接して一緒に結び付けられ、他
方の鎖由来のＣＤＲにより、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（ＫａｂａｔＥ．Ａ
．ｅｔａｌ．，「ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏ
ｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，」ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆ
Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９８７）を参照されたい）。用語「相補
性決定領域」は、本明細書で使用するとき、抗原上で認識されるエピトープに対して形状
及び電荷分布において相補的である抗原結合部位を生成する、免疫グロブリンなどの結合
分子の可変領域内の配列を意味する。ＣＤＲ領域は、タンパク質上にその天然型立体配座
で存在するか、又は、例えば、ＳＤＳでの可溶化によって変性されてタンパク質上に存在
するかのいずれかの場合に、タンパク質又はタンパク質フラグメントの直鎖エピトープ、
不連続エピトープ若しくは立体配座エピトープに対して特異的であり得る。エピトープは
また、タンパク質の翻訳後修飾からなる場合もある。

４４．１つ以上のＣＤＲ残基の置換又は１つ以上のＣＤＲの削除もまた可能である。１
つ又は２つのＣＤＲを結合のために削除することができる抗体が、科学文献に記載されて
いる。Ｐａｄｌａｎｅｔａｌ．（１９９５ＦＡＳＥＢＪ．９：１３３～１３９）
は、公開された結晶構造に基づいて、抗体とこれらの抗原との間の接触領域を分析し、Ｃ
ＤＲ残基のうちの約５分の１～３分の１のみが実際に抗原に接触していると結論付けた。
Ｐａｄｌａｎはまた、１つ又は２つのＣＤＲが抗原と接触しているアミノ酸を有さない多
数の抗体を発見した（Ｖａｊｄｏｓｅｔａｌ．，２００２ＪＭｏｌＢｉｏｌ
３２０：４１５～４２８もまた参照されたい）。

４５．抗原と接触しないＣＤＲ残基は、分子モデリングによってかつ／又は経験的に、
ＣｈｏｔｈｉａＣＤＲの外側にあるＫａｂａｔＣＤＲの領域から、過去の研究（例え
ば、ＣＤＲＨ２中の残基Ｈ６０～Ｈ６５が多くの場合不要である）に基づいて同定するこ
とができる。ＣＤＲ又はその残基（複数可）が削除されている場合、通常、別のヒト抗体
配列又はそのような配列のコンセンサスにおける対応する位置を占めるアミノ酸により置
換されている。ＣＤＲ内の置換用の位置及び置換するためのアミノ酸はまた、経験的に選
択することもできる。

４６．定常ドメインは、抗体を抗原に結合する際に直接関与しないが、抗体依存性細胞
毒性における抗体の関与などの様々なエフェクター機能を示す。

４７．一態様では、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号７、配列番号８及
び／又は配列番号９に記載の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む重鎖可変ドメイ
ンを含む単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示される。例えば、配列番号１
及び配列番号２、配列番号１及び配列番号３、配列番号２及び配列番号３、配列番号１、
配列番号２及び配列番号３、配列番号７及び配列番号８、配列番号７及び配列番号９、配
列番号８及び配列番号９、並びに配列番号７、配列番号８及び配列番号９に記載のＣＤＲ
を含む重鎖可変ドメインを含むＩＬ－２５結合分子が本明細書で開示される。重鎖可変ド
メインを含むＩＬ－２５結合分子もまた開示され、その重鎖可変ドメインは、配列番号１
３又は配列番号１５を含む。

４８．開示されたＩＬ－２５結合分子内の重鎖可変ドメインの開示された相補性決定領
域は、連続することができるか又は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、
１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２
５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８
、３９若しくは４０個のアミノ酸によって隔てることができることが理解され、本明細書
で企図される。したがって、少なくとも２つのＣＤＲを含む重鎖可変ドメインを含むＩＬ
－２５結合分子が、本明細書で開示され、第１のＣＤＲは、第２のＣＤＲから１０、１１
、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔て
られている。例えば、少なくとも２つのＣＤＲを含むＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、第１のＣＤＲは、配列番号１又は配列番号７を含み、第２のＣＤＲは、配列番
号２又は配列番号８を含み、第１のＣＤＲ及び第２のＣＤＲは、１０、１１、１２、１３
、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。
３つＣＤＲを含むＩＬ－２５結合分子もまた本明細書で開示され、第１のＣＤＲは、配列
番号１又は配列番号７を含み、第２のＣＤＲは、配列番号２又は配列番号８を含み、第３
のＣＤＲは、配列番号３又は配列番号９を含み、第２のＣＤＲ及び第３のＣＤＲは、２５
、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、
３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている。

４９．ＩＬ－２５結合分子が重鎖可変ドメインの代わりに又はこれに加えて軽鎖可変ド
メインを含むことができることが理解され、本明細書で企図される。したがって、一態様
では、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号１０、配列番号１１及び／又は配
列番号１２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを含むＩＬ－２５結合分子
が、本明細書で開示されている。例えば、配列番号４及び配列番号５、配列番号４及び配
列番号６、配列番号５及び配列番号６、配列番号４、配列番号５及び配列番号６、配列番
号１０及び配列番号１１、配列番号１０及び配列番号１２、配列番号１１及び配列番号１
２、並びに配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載のＣＤＲを含む軽鎖可変
ドメインを含むＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示される。軽鎖可変ドメインを含む
単離されたＩＬ－２５結合分子もまた本明細書で開示され、その軽鎖可変ドメインは、配
列番号１４又は配列番号１６を含む。

５０．開示されたＩＬ－２５結合分子内の軽鎖可変ドメインの開示された相補性決定領
域が、連続することができるか、又は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１
、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、
２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３
８、３９若しくは４０個のアミノ酸によって隔てることができることが理解され、本明細
書で企図される。したがって、軽鎖可変ドメインを含む軽鎖可変ドメインを含むＩＬ－２
５結合分子が、本明細書で開示され、その軽鎖可変ドメインは、少なくとも２つのＣＤＲ
を含み、第１のＣＤＲは、第２のＣＤＲから１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６
、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。例えば、少なくとも
２つのＣＤＲを含むＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示され、第１のＣＤＲは、配列
番号４、配列番号１０、配列番号１６又は配列番号２２を含み、第２のＣＤＲは、配列番
号５、配列番号１１、配列番号１７又は配列番号２３を含み、第１のＣＤＲ及び第２のＣ
ＤＲは、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のア
ミノ酸によって隔てられている。軽鎖可変ドメインを含むＩＬ－２５結合分子もまた本明
細書で開示され、その軽鎖可変ドメインは、３つのＣＤＲを含み、第１のＣＤＲは、配列
番号４又は配列番号１０を含み、第２のＣＤＲは、配列番号５又は配列番号１１を含み、
第３のＣＤＲは、配列番号６又は配列番号１２を含み、第２のＣＤＲ及び第３のＣＤＲは
、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、
３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている。

５１．一態様では、開示されたＩＬ－２５結合分子は、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変
ドメインの両方を含むことができることが理解され、本明細書で企図される。当該ＩＬ－
２５結合分子は、重鎖可変ドメインＣＤＲの任意の１つ、２つ又は３つを本明細書で開示
された軽鎖可変ドメインＣＤＲの任意の１つ、２つ又は３つと組み合わせて含むことがで
きることを更に理解されたい。その結果、ＩＬ－２５結合分子は、配列番号１、配列番号
２、配列番号３、配列番号７、配列番号８及び／又は配列番号９からなる群から選択され
る重鎖可変ドメインＣＤＲのうちの１つ、２つ又は３つと、配列番号４、配列番号５、配
列番号６、配列番号１０、配列番号１１及び／又は配列番号１２からなる群から選択され
る軽鎖可変ドメインＣＤＲのうちの１つ、２つ又は３つと、を含むことができる。例えば
、重鎖可変ドメインが配列番号１３又は配列番号１５を含む重鎖可変ドメインと、軽鎖可
変ドメインが配列番号１４又は配列番号１６を含む軽鎖可変ドメインと、を含む、ＩＬ－
２５結合分子が、本明細書で開示される。

５２．その結果、一実施形態では、ＩＬ－２５結合分子は、配列に超可変領域ＣＤＲ１
、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（Ｖ_H
）を含む抗原結合部位を含み、当該ＣＤＲ１は、アミノ酸配列の配列番号１（ＳＹＷＩＥ
）を有し、当該ＣＤＲ２は、アミノ酸配列の配列番号２（ＱＩＬＰＧＩＧＳＴＮＹＮＥＫ
ＦＫＧ）を有し、当該ＣＤＲ３は、アミノ酸配列の配列番号３（ＧＹＧＮＹＧＤＹ）を有
するか、又はそれらの直接ＣＤＲ当量体である、ＡＢＭ１０９と表記される。一態様では
、ＩＬ－２５結合分子（例えば、ＡＢＭ１０９など）はまた、配列に超可変領域ＣＤＲ１
’、ＣＤＲ２’及びＣＤＲ３’を含む少なくとも１つの免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン
（Ｖ_L）を含むこともでき、当該ＣＤＲ１’は、アミノ酸配列の配列番号４（ＲＡＳＥＳ
ＶＤＳＹＧＮＳＦＭ）を有し、当該ＣＤＲ２’は、アミノ酸配列の配列番号５（ＲＡＳＮ
ＬＥＳ）を有し、当該ＣＤＲ３’は、アミノ酸配列の配列番号６（ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ）
を有するか、又はこれらの直接ＣＤＲ’当量体である。

５３．一態様では、ＡＢＭ１２５と表記されるＩＬ－２５結合分子もまた開示され、そ
のＩＬ－２５結合分子は、配列に超可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む少な
くとも１つの免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（Ｖ_H）を含む抗原結合部位を含み、当該
ＣＤＲ１は、アミノ酸配列の配列番号７（ＴＳＧＭＧＶＧ）を有し、当該ＣＤＲ２は、ア
ミノ酸配列の配列番号８（ＨＩＷＷＤＤＶＫＲＹＵＮＰＡＬＫＳ）を有し、当該ＣＤＲ３
は、アミノ酸配列の配列番号９（ＴＬＰＨＦＦＤＹ）を有するか、又はこれらの直接ＣＤ
Ｒ当量体である。一態様では、ＩＬ－２５結合分子（例えば、ＡＢＭ１２５など）はまた
、配列に超可変領域ＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’及びＣＤＲ３’を含む少なくとも１つの免疫
グロブリン軽鎖可変ドメイン（Ｖ_L）を含むこともでき、当該ＣＤＲ１’は、アミノ酸配
列の配列番号１０（ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ）を有し、当該ＣＤＲ２’は、アミノ酸配列の
配列番号１１（ＲＴＳＮＬＡＳ）を有し、当該ＣＤＲ３’は、アミノ酸配列の配列番号１
２（ＫＱＹＨＳＹＰＰＴＷＴ）を有するか、又はこれらの直接ＣＤＲ’当量体である。

５４．上述のように、開示されたＩＬ－２５結合分子はまた、抗体のフラグメントでも
あり得る。本明細書で用いるとき、用語「抗体又は抗体のフラグメント」は、二重又は多
重の抗原特異性又はエピトープ特異性を有するキメラ抗体及びハイブリッド抗体、並びに
、ハイブリッドフラグメントを含む、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓＦｖ
、ｄＡｂ、相補性決定領域（ＣＤＲ）フラグメント、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、二価単鎖抗
体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、（ポリ）ペプチドに結合する特
定の抗原をもたらすために十分な免疫グロブリンのフラグメントを少なくとも含む（ポリ
）ペプチドなどのフラグメントを包含する。したがって、抗体の特定の抗原に結合する能
力を保持する抗体のフラグメントが提供される。例えば、ＩＬ－２５結合活性を維持する
抗体のフラグメントは、用語「抗体又はそのフラグメント」の意味の中に含まれる。この
ような抗体及びフラグメントは、技術分野で既知の技術によって製造することができ、「
実施例」に記載した方法に従って、かつ、全般的には、抗体を生成し、特異性及び活性に
ついて抗体をスクリーニングする方法に従って、特異性及び活性についてスクリーニング
することができる（ＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＡＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ．ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｓＨａｒｂｏｒＰｕｂｌｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８８）を参照されたい）。

５５．抗体フラグメントと抗原結合タンパク質（単鎖抗体）との結合体もまた「抗体又
は抗体のフラグメント」の意味の中に含まれる。結合抗体又はフラグメントは、例えば、
その内容が本明細書において参照により援用される米国特許第４，７０４，６９２号に記
載されたような、とりわけ、毒性物質、放射性物質、蛍光物質、リポソーム又は酵素など
のエフェクター部位又はタグに、作動的に連結されるか、又は物理的若しくは機能的に関
連付けられた抗体又はフラグメントを指す。

５６．構造にかかわらず、本明細書で開示された抗原結合フラグメントは、無傷免疫グ
ロブリンによって認識される同一の抗原と結合することができる。抗原結合フラグメント
は、結合分子のアミノ酸配列の少なくとも２個連続するアミノ酸残基、少なくとも５個の
連続するアミノ酸残基、少なくとも１０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１５個の
連続するアミノ酸残基、少なくとも２０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも２５個の
連続するアミノ酸残基、少なくとも３０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも３５個の
連続するアミノ酸残基、少なくとも４０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも５０個の
連続するアミノ酸残基、少なくとも６０個の連続するアミノ残基、少なくとも７０個の連
続するアミノ酸残基、少なくとも８０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも９０個の連
続するアミノ酸残基、少なくとも１００個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１２５個
の連続するアミノ酸残基、少なくとも１５０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１７
５個の連続するアミノ酸残基、少なくとも２００個の連続するアミノ酸残基又は少なくと
も２５０個の連続するアミノ酸残基を含むペプチド又はポリペプチドを含むことができる
。

５７．フラグメントはまた、他の配列に付随しているかどうかにかかわらず、抗体又は
抗体フラグメントの活性が非修飾の抗体又は抗体フラグメントと比較して、顕著に変化し
ていないか又は弱められていない限り、特定の領域又は特定のアミノ酸残基の挿入、欠失
、置換又は他の選択された修飾もまた含むことができる。これらの修飾は、ジスルフィド
結合が可能なアミノ酸を除去／付加するため、その生体寿命（bio-longevity）を増大さ
せるため、その分泌特性を変化させるためなどの、いくつかの付加的性質をもたらすこと
ができる。いかなる場合でも、抗体又は抗体フラグメントは、その同種抗原に対する特異
的結合などの生物活性特性を保有する必要がある。抗体又は抗体フラグメントの機能性領
域又は活性領域は、タンパク質の特定の領域の変異誘発、それに続く発現及び発現された
ポリペプチドの試験により特定することができる。このような方法は、当業者に対して容
易に明らかであり、抗体又は抗体フラグメントをコードする核酸の部位特異的変異誘発を
含むことができる。（ＺｏｌｌｅｒＭ．Ｊ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏ
ｌ．３：３４８～３５４，１９９２）。

５８．用語「機能性変異体」は、本明細書で使用するとき、親結合分子のヌクレオチド
配列及び／又はアミノ酸配列と比較して１つ以上のヌクレオチド及び／又はアミノ酸が変
化したヌクレオチド配列及び／又はアミノ酸配列を含み、親結合分子との結合相手、例え
ば、ＩＬ－２５（ＩＬ－２５を含む）に対して結合に関して依然として拮抗することがで
きる、結合分子を指す。換言すれば、親結合分子のアミノ酸配列及び／又はヌクレオチド
配列におけるこの修飾は、ヌクレオチド配列によりコードされるか又はそのアミノ酸配列
を含む結合分子の結合特性に顕著に影響しないか又は変化させない、すなわち、結合分子
は、その標的を依然として認識し、結合することができる。機能性変異体は、ヌクレオチ
ド及びアミノ酸の置換、付加及び欠失を含む保守的配列修飾を有してもよい。これらの修
飾は、部位特定変異誘発及びランダムＰＣＲ介在性変異誘発などの当該技術分野において
既知の標準的な技術によって導入することができ、天然型及び非天然型のヌクレオチド及
びアミノ酸を含んでもよい。

５９．本明細書で開示したように、結合分子、抗体、フラグメント及び変異体は、例え
ば、ＩＬ－２５などの抗原性標的に特異的に結合することが可能である。用語「特異的に
結合する」は、本明細書で使用するとき、結合分子、例えば、抗体とその結合相手、例え
ば、抗原との相互作用に関連して、相互作用が、結合相手上に特定の構造、例えば、抗原
決定基又はエピトープの存在に依存することを意味する。換言すれば、抗体は、結合相手
が他の分子の混合物中に存在する場合であっても、結合相手と優先的に結合するか又は結
合相手を認識する。結合は、共有的若しくは非共有的相互作用又は両者の組み合わせが介
在していてもよい。更に換言すれば、用語「特異的に結合する」は、ある抗原又はそのフ
ラグメントと免疫特異的に結合することを意味し、他の抗原と免疫特異的に結合しないこ
とを意味する。抗原に免疫特異的に結合する結合分子は、例えば、ラジオイムノアッセイ
（ＲＩＡ）、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ＢＩＡｃｏｒｅ又は当該技術分
野において既知の他のアッセイによって決定されたような、より低い親和性を有する他の
ペプチド又はポリペプチドに結合してもよい。抗原に免疫特異的に結合する結合分子又は
そのフラグメントは、関連抗原と交差反応性であってもよい。好ましくは、抗原に免疫特
異的に結合する結合分子又はそのフラグメントは、他の抗原と交差反応しない。

６０．一態様では、開示された抗体又は本明細書で開示された結合分子は、ヒト抗体又
はヒト結合分子であり得る。用語「ヒト」は、本明細書で定義されたような結合分子に適
用するとき、ヒトから直接誘導されるか又はヒト配列に基づいているかのいずれか一方で
ある分子を指す。結合分子がヒト配列に由来するか又はヒト配列に基づき、その後修飾さ
れるとき、結合分子は、本明細書を通して使用されるとき、依然としてヒト性であると見
なされることとなる。換言すれば、用語ヒト性は、結合分子に適用するとき、可変領域又
は定常領域がヒト若しくはヒトリンパ球において又は修飾された形態で生じるか否かに基
づいて、ヒト生殖線免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する結合分
子を含むことを意図する。したがって、ヒト結合分子は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配
列によりコードされていないアミノ酸残基を含んでもよく、置換及び／又は欠失（例えば
、インビトロでのランダム若しくは部位特異的変異誘発によって、又はインビボでの体細
胞変異によって導入された、例えば、突然変異体）を含んでもよい。「に基づく」は、本
明細書で使用するとき、核酸配列がテンプレートから正確に、若しくはエラーを起こしや
すいＰＣＲ法などによるわずかな変異を伴ってコピーされてもよいか、又は合成的にテン
プレートに正確に一致させるか若しくはわずかな修飾を伴ってもよいという状況を指す。
ヒト配列に基づく半合成分子もまた、本明細書で使用されるとき、ヒト性であると見なさ
れる。

６１．任意選択的に、抗体は、他の種において生成され、かつヒトに投与するために「
ヒト化」される。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化形態は、非ヒト免疫グロブリン
に由来する最小限の配列を含有する、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はこれ
らのフラグメント（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２又は抗体の他の抗原結合配
列など）である。ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）を含み、その
ヒト免疫グロブリンでは、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）由来の残基は、所望
の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット又はウサギなどの非ヒト種のＣＤＲ由
来の残基（ドナー抗体）によって置換されている。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリ
ンのＦｖフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基によって置換されている。ヒト化抗
体はまた、レシピエント抗体にも、インポートされたＣＤＲ又はフレームワーク配列にも
見出されない残基を含んでもよい。全般的に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、一般的に
は２つの可変ドメインの実質的にすべてを含むこととなり、その可変ドメインでは、ＣＤ
Ｒ領域のすべて又は実質的にすべては、非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲ領域に対応し、Ｆ
Ｒ領域のすべて又は実質的にすべては、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のＦＲ領域
に対応する。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、一般的にはヒト免疫
グロブリンの定常領域の少なくとも一部分を任意選択的に含むこととなる（Ｊｏｎｅｓ
ｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２～５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎ
ｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３～３２７（１９８８）；及びＰｒｅｓ
ｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３～５９６（１９９２））。

６２．非ヒト抗体をヒト化するための方法は、当該技術分野で周知である。一般に、ヒ
ト化抗体は、非ヒト源からヒト化抗体に導入された１つ以上のアミノ酸残基を有する。こ
れらの非ヒトアミノ酸残基は、多くの場合、「インポート」可変ドメインから一般的に取
り込まれる「インポート」残基と称する。ヒト化は、Ｗｉｎｔｅｒと共同研究者の方法（
Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２～５２５（１９８６）；Ｒｉ
ｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３～３２７（１９８８）；
Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４～１５３６（１
９８８））に従って、げっ歯類のＣＤＲ又はＣＤＲ配列をヒト抗体の対応する配列と置換
することによって、本質的に行うことができる。その結果、このような「ヒト化」された
抗体は、キメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号）であり、無傷ヒト可変ドメイン
よりも実質的に少ない部分が非ヒト種由来の対応する配列によって置換されている。実際
には、ヒト化抗体は、一般的には、いくつかのＣＤＲ残基及び場合によりいくつかのＦＲ
残基が、げっ歯類抗体における類似部位由来の残基によって置換されたヒト抗体である。

６３．ヒト化抗体の作製に使用される、ヒト可変ドメインを、軽鎖及び重鎖の両方選択
することは、抗原性を低減するために極めて重要である。「最良適合」法に従って、げっ
歯類抗体の可変ドメインの配列は、既知のヒト可変ドメイン配列のライブラリ全体に対し
てスクリーニングされる。次いで、げっ歯類の配列に最も近いヒト配列は、ヒト化抗体用
のヒトフレームワーク（ＦＲ）として受容される（Ｓｉｍｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．，１５１：２２９６（１９９３）及びＣｈｏｔｈｉａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍ
ｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７））。別の方法は、軽鎖又は重鎖の特定の
サブグループのすべてのヒト抗体のコンセンサス配列に由来する特定のフレームワークを
使用する。同一のフレームワークは、いくつかの異なるヒト化抗体用に用いてもよい（Ｃ
ａｒｔｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４
２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２
６２３（１９９３））。

６４．いくつかの態様では、抗体は、抗原に対する高い親和性及び他の良好な生物学的
特性を保持したままヒト化されることが重要であり得る。この目的を達成するために、好
ましい方法に従って、ヒト化抗体は、親配列及びヒト化配列の三次元モデルを用いる、親
配列及び様々な概念的ヒト化製品の分析の過程によって調製される。三次元免疫グロブリ
ンモデルは、一般的に利用可能であり、当業者によく知られている。選択された候補免疫
グロブリン配列の三次元立体配座構造を図示かつ表示するコンピュータプログラムが利用
可能である。これらの表示の検査は、候補免疫グロブリン配列の機能化における残基の可
能性のある役割の解析、すなわち、その抗原に結合する候補免疫グロブリンの能力に影響
を及ぼす残基の解析を可能にする。このようにして、ＦＲ残基は、コンセンサス配列及び
インポート配列から選択かつ結合することができるため、標的抗原（複数可）に対する親
和性が増大するなど所望の抗体特性が達成される。全般的には、ＣＤＲ残基は、抗原結合
に影響を与えることにおいて直接かつ最も大きく関与する（１９９４年３月３日に公開さ
れた国際公開第９４／０４６７９号を参照されたい）。

６５．具体的な一態様では、ＡＢＭ１０９．２と表示されるＡＢＭ１０９のヒト化バー
ジョンは、ＡＢＭ１０９の重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含み、ヒト、マウス及び類人猿の
ＩＬ－２５の特異的結合及び中和を保持する。重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、それぞ
れ配列番号１７及び配列番号１８に列挙されている。

６６．モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞が開示される。用語「モノク
ローナル抗体」は、本明細書で使用するとき、実質的に均一な集団の抗体から得られる抗
体を指し、すなわち、集団を含む個々の抗体は、わずかに存在する場合がある天然に生じ
得る変異を除いて同一である。本明細書におけるモノクローナル抗体は、具体的には、「
キメラ」抗体を含み、そのキメラ抗体では、抗体が所望の活性を発揮する限り、重鎖及び
／又は軽鎖の一部分は、特定の種に由来する抗体の対応する配列と同一若しくは相同であ
るか、又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属するが、鎖（複数可）の残部は、他
の種に由来する抗体の対応する配列と同一若しくは相同であるか、又は別の抗体クラス若
しくはサブクラス並びにこのような抗体のフラグメントに属する（米国特許第４，８１６
，５６７号及びＭｏｒｒｉｓｏｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ
ｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１～６８５５（１９８４）を参照されたい）。

６７．モノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒａｎｄＭｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒ
ｅ，２５６：４９５（１９７５）又はＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅ．Ａｎｔｉｂｏｄ
ｉｅｓ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ．ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂ
ｏｒＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８８）などに記載されたハ
イブリドーマ法を用いて調製してもよい。ハイブリドーマ法では、マウス又は他の適切な
宿主動物は、免疫剤に特異的に結合することとなる抗体を産生するか又は産生する能力が
あるリンパ球を誘発する免疫剤により、一般的には免疫化される。あるいは、リンパ球は
、インビトロで免疫化されてもよい。好ましくは、免疫剤は、ＩＬ－２５を含む。従来、
モノクローナル抗体の生成は、免疫原として使用するために精製されたタンパク質又はペ
プチドの利用可能性に依存していた。ごく最近、ＤＮＡに基づく免疫化は、強い免疫応答
を誘発し、かつモノクローナル抗体を生成する方法としての可能性を示していた。このア
プローチでは、ＤＮＡに基づく免疫化を用いることができ、ヒトＩｇＧ１との融合タンパ
ク質として発現されるＩＬ－２５の一部をコードするＤＮＡは、当該技術分野で公知の方
法（例えば、抗体産生の方法に関して全体が参照により本明細書に援用されているＫｉｌ
ｐａｔｒｉｃｋＫＥ，ｅｔａｌ．ＧｅｎｅｇｕｎｄｅｌｉｖｅｒｅｄＤＮＡ－
ｂａｓｅｄｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎｓｍｅｄｉａｔｅｒａｐｉｄｐｒｏｄｕｃ
ｔｉｏｎｏｆｍｕｒｉｎｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｔｏ
ｔｈｅＦｌｔ－３ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ．１９９８Ｄｅｃ．；１
７（６）；５６９～７６；ＫｉｌｐａｔｒｉｃｋＫＥ，ｅｔａｌ．Ｈｉｇｈ－ａｆｆ
ｉｎｉｔｙｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｔｏＰＥＤ／ＰＥＡ－１
５ｇｅｎｅｒａｔｅｄｕｓｉｎｇ５μｇｏｆＤＮＡ．Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ．２
０００Ａｕｇ；１９（４）：２９７～３０２）に従って、かつ実施例に記載されている
ように、宿主動物に注入される。

６８．精製されたタンパク質又はＤＮＡのうちのいずれか一方と免疫化する代替アプロ
ーチは、バキュロウイルスで発現される抗原を使用することである。このシステムの利点
には、発生が容易であること、高レベルな発現及び哺乳動物系に見られるものと類似性の
高い翻訳後修飾が挙げられる。この系の使用は、融合タンパク質としての抗ＩＬ－２５抗
体のドメインの発現に関与する。抗原は、抗ＩＬ－２５抗体ヌクレオチド配列のシグナル
配列と成熟タンパク質ドメインとの間に遺伝子フラグメントをインフレームで挿入するこ
とによって作製される。これにより、ビリオンの表面に外来タンパク質が表示される。こ
の方法は、標的抗原の精製を不要として、ウイルス全体の免疫化を可能にする。

６９．一般的に、ヒト起源の細胞を所望される場合、末梢血リンパ球（「ＰＢＬ」）が
モノクローナル抗体を作製する方法において使用されるか、又は非ヒト哺乳類源が所望さ
れる場合、脾臓細胞若しくはリンパ節細胞が使用されるかのいずれか一方である。次いで
、リンパ球は、ポリエチレングリコールなどの好適な融合剤を用いて不死化細胞株と融合
されて、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，「ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ」Ａｃａｄｅｍｉ
ｃＰｒｅｓｓ，（１９８６）ｐｐ．５９～１０３）。不死化細胞株は、通常、げっ歯類
、ウシ、ウマ、ヒト起源の骨髄腫細胞を含む形質転換された哺乳動物細胞である。通常、
ラット又はマウスの骨髄腫細胞株を用いる。ハイブリドーマ細胞は、未融合の不死化細胞
の増殖又は生存を阻害する１種以上の物質を好ましくは含む、好適な培地で使用されても
よい。例えば、親細胞が、酵素のヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラ
ーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を欠損している場合、ハイブリドーマ用の培地は、ＨＧ
ＰＲＴ欠損細胞の増殖を防止する物質であるヒポキサンチン、アミノプテリン及びチミジ
ンを一般的に含む（「ＨＡＴ培地」）。好ましい不死化細胞株は、効率的に融合し、選択
された抗体産生細胞による抗体の安定な高レベル発現を補助し、ＨＡＴ培地などの培地に
対して感受性である不死化細胞株である。より好ましい不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌ
ｋＩｎｓｔｉｔｕｔｅＣｅｌｌＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ
Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．及びＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌ
ｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ．から入手することができるマウス骨髄腫株
である。ヒト骨髄腫細胞株及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクロー
ナル抗体の産生用に記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３
００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒｅｔａｌ．，「ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔ
ｉｂｏｄｙＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔ
ｉｏｎｓ」ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８７）ｐｐ
．５１～６３）。次いで、ハイブリドーマ細胞が培養された培地は、ＩＬ～２５に対する
モノクローナル抗体の存在について測定することができる。好ましくは、ハイブリドーマ
細胞によって産生されたモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、又はラ
ジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）若しくは酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などの
インビトロ結合アッセイによって決定される。このような技術及びアッセイは、従来技術
において既知であり、以下の「実施例」又はＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅＡｎｔｉ
ｂｏｄｉｅｓ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨ
ａｒｂｏｒＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８８）に更に記載さ
れている。

７０．所望のハイブリドーマ細胞が識別された後、クローンは、限界希釈法又はＦＡＣ
Ｓ分別手順によってサブクローン化され、標準法によって増殖されてもよい。この目的の
ための好適な培地には、例えば、ダルベッコ変法イーグル培地及びＲＰＭＩ－１６４０培
地が挙げられる。あるいは、ハイブリドーマ細胞は、哺乳動物において腹水としてインビ
ボで増殖させてもよい。

７１．サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、例えば、タンパク質Ａ
－セファロース、タンパク質Ｇ、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気
泳動、透析又はアフィニティクロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順に
よって、培地又は腹水液から単離又は精製されてもよい。

７２．用語「単離された」は、本明細書で定義されるように結合分子に適用するとき、
他のタンパク質又はポリペプチドを実質的に含まない、特に、異なる抗原特異性を有する
他の結合分子を含まず、また、他の細胞若しくは組織材料及び／又は化学前駆体若しくは
他の化学物質を実質的に含まない結合分子を指す。例えば、結合分子を組換え的に作製す
るとき、結合分子は、好ましくは培地を実質的に含まず、結合分子を化学合成によって作
製するとき、結合分子は、好ましくは化学前駆体又は化学薬品を実質的に含まない、すな
わち、結合分子は、タンパク質の合成に関与する化学前駆体又は他の化学薬品から分離さ
れている。好ましくは、実質的に含まないは、結合分子が試料の約５０％、６０％、７０
％、８０％又は９０％Ｗ／Ｗ、より通常では約９５％を一般的に含むこととなること、好
ましくは９９％純度を超えることとなること、を意味する。

７３．モノクローナル抗体はまた、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されたもの
などの組換えＤＮＡ法によって作製されてもよい。モノクローナル抗体をコードするＤＮ
Ａは、従来の手法を用いて（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に対
して特異的に結合することが可能なオリゴヌクレオチドプローブを用いることによって）
容易に単離され、配列決定することができる。ハイブリドーマ細胞は、このようなＤＮＡ
の好ましい源として役立つ。単離されると、ＤＮＡは、発現ベクター内に配置されてもよ
く、次いで、その発現ベクターは、トランスフェクションしない場合には免疫グロブリン
タンパク質を産生しない、類人猿ＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細
胞、形質細胞腫細胞又は骨髄腫細胞などの宿主細胞内にトランスフェクションされて、組
換え宿主細胞におけるモノクローナル抗体の合成をもたらしてもよい。ＤＮＡはまた、例
えば、コード配列を相同マウス配列の代わりにヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインに置換する
ことによって（米国特許第４，８１６，５６７号）、又は免疫グロブリンコード配列を非
免疫グロブリンポリペプチドのコード配列のすべて若しくは一部と共有的に接合すること
によって修飾してもよい。任意選択的に、このような非免疫グロブリンポリペプチドは、
抗体の定常ドメインに置換されるか又は抗体の一方の抗原結合部位の可変ドメインに置換
されて、（ＩＬ－２５を含む）ＩＬ－２５に対する特異性を有する一方の抗原結合部位及
び異なる抗原に対する特異性を有する別の抗原結合部位を含むキメラ二価抗体を生成する
。

７４．インビトロ法はまた、一価抗体を調製するために好適である。抗体を消化してそ
のフラグメント、特に、Ｆａｂフラグメントを作製することは、当該技術分野で既知の所
定の技術を使用して達成することができる。例えば、消化は、パパインを用いて行うこと
ができる。パパイン消化の例は、１９９４年１２月２２日に公開された国際公開第９４／
２９３８４号、米国特許第４，３４２，５６６号及びＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅ，
Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＣｏｌｄＳｐｒｉ
ｎｇＨａｒｂｏｒＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８８）に記
載されている。抗体のパパイン消化は、それぞれ単一の抗原結合部位を有する、Ｆａｂフ
ラグメントと呼ばれる同一の２つの抗原結合フラグメント及び残存Ｆｃフラグメントを一
般的に産生する。ペプシン処理は、２つの抗原結合部位を有し、依然として抗原と交差す
ることができる、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントと呼ばれるフラグメントをもたらす。

７５．抗体消化において産生されるＦａｂフラグメントはまた、軽鎖の定常ドメイン及
び重鎖の第１の定常ドメインを含む。Ｆａｂ’フラグメントは、抗体ヒンジ領域由来の１
つ以上のシステインを含む重鎖ドメインのカルボキシ末端にいくつかの残基を付加するこ
とにより、Ｆａｂフラグメントとは異なる。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、ヒンジ領域
においてジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ’フラグメントを含む二価フ
ラグメントである。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離
チオール基を有するＦａｂ’に対する本明細書での表示である。抗体フラグメントは、こ
れらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’フラグメントの対として、本来産生された
。抗体フラグメントの他の化学結合もまた既知である。

７６．あるいは、開示された抗体は、使用することができる内因性免疫グロブリン産生
が存在しない場合に、免疫化すると、ヒト抗体の完全レパートリーを産生することができ
るトランスジェニック動物（例えば、マウス）を利用して作製することができる。例えば
、キメラかつ生殖細胞変異マウスにおける抗体重鎖接合領域（Ｊ（Ｈ））遺伝子のホモ接
合体欠失は、内因性抗体産生の完全な阻害をもたらすことが、記載されている。そのよう
な生殖細胞変異マウスにおけるヒト生殖細胞免疫グロブリン遺伝子アレイの転写は、抗原
投与時にヒト抗体の産生をもたらすこととなる（例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓｅｔ
ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１～２５５（１
９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５～２５
８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎｅｔａｌ．，ＹｅａｒｉｎＩｍｍｕｎｏ
．，７：３３（１９９３）を参照されたい）。ヒト抗体はまた、ファージディスプレイラ
イブラリにおいて作製することもできる（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍ
ｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏ
ｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１））。Ｃｏｔｅら及びＢｏｅｒｎｅｒらの技
術もまた、ヒトモノクローナル抗体の調製のために利用可能である（Ｃｏｌｅｅｔａ
ｌ．，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄＣａｎｃｅｒＴｈｅｒ
ａｐｙ，ＡｌａｎＲ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒｅｔａｌ
．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１）：８６～９５（１９９１））。

７７．単離された免疫学的に特異的なパラトープ又は抗体のフラグメントもまた提供さ
れる。抗体の特異的免疫原性エピトープは、分子の化学的又は機械的破壊によって抗体全
体から単離することができる。このようにして得られた精製フラグメントを、これらの免
疫原性及び特異性を決定するために、具体的には、本明細書で教示された方法により試験
した。抗体の免疫原性パラトープは、任意選択的に、直接合成される。免疫反応性フラグ
メントは、抗体アミノ酸配列に由来する少なくとも約２～５個の連続するアミノ酸のアミ
ノ酸配列として定義される。

７８．抗体を含むタンパク質を作製する１つの方法は、タンパク質化学手法によって２
つ以上のペプチド又はポリペプチドを一緒に連結することである。例えば、ペプチド又は
ポリペプチドは、Ｆｍｏｃ（９－フルオレニルメチルオキシカルボニル）又はＢｏｃ（ｔ
ｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル）化学のいずれか一方を用いて、現在利用可能な実験装
置を用いて化学的に合成することができる。（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，
Ｉｎｃ．，ＦｏｓｔｅｒＣｉｔｙ，ＣＡ）。当業者は、抗体に相当するペプチド又はポ
リペプチドが、例えば、標準的な化学反応により合成することができることを、容易に理
解することができる。例えば、ペプチド又はポリペプチドは、合成することができ、その
合成樹脂から開裂させることができないが、その一方で、抗体の他のフラグメントは、合
成して、それに続いて樹脂から開裂させることができ、それによって、他のフラグメント
上で官能基的に遮断されている末端基を暴露させる。ペプチドの縮合反応によって、これ
らの２つのフラグメントは、それらのカルボキシ末端及びアミノ末端でのペプチド結合を
介してそれぞれ共有結合的に接合して、抗体又はそのフラグメントを形成することができ
る。（ＧｒａｎｔＧＡ（１９９２）ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅｓ：ＡＵｓ
ｅｒＧｕｉｄｅ．Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎａｎｄＣｏ．，Ｎ．Ｙ．（１９９２）；
ＢｏｄａｎｓｋｙＭａｎｄＴｒｏｓｔＢ．，Ｅｄ．（１９９３）Ｐｒｉｎｃｉｐ
ｌｅｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ
Ｉｎｃ．，ＮＹ。あるいは、ペプチド又はポリペプチドは、上記のようにインビボで別
個に合成される。単離されると、これらの別個のペプチド又はポリペプチドは、同様のペ
プチド縮合反応を介して抗体又はそのフラグメントを形成するように連結されてもよい。

７９．例えば、クローニングされた又は合成されたペプチドセグメントの酵素的ライゲ
ーションは、比較的短いペプチドフラグメントが接合することを可能にし、より大きなペ
プチドフラグメント、ポリペプチド又はタンパク質ドメイン全体を産生する（Ａｂｒａｈ
ｍｓｅｎＬｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：４１５１（１９９１）
）。あるいは、合成ペプチドの天然型化学的ライゲーションは、大きなペプチド又はポリ
ペプチドをより短いペプチドフラグメントから合成的に構築するために利用することがで
きる。この方法は、二工程化学反応からなる（Ｄａｗｓｏｎｅｔａｌ．Ｓｙｎｔｈｅ
ｓｉｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｂｙＮａｔｉｖｅＣｈｅｍｉｃａｌＬｉｇａｔ
ｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６６：７７６～７７９（１９９４））。第１の工程は、非保
護の合成ペプチド－α－チオエステルの、アミノ末端のＣｙｓ残基を含む他の非保護ペプ
チドとの化学選択的反応であり、最初の共有結合生成物としてチオエステル連結中間体を
与える。反応条件を変更することなく、この中間体は、自発的な迅速な分子内反応を受け
て、ライゲーション部位で天然型ペプチド結合を形成する。この天然型化学ライゲーショ
ン法をタンパク質分子の全合成へ適用することは、ヒトインターロイキン８（ＩＬ－８）
の調製により例示されている（ＢａｇｇｉｏｌｉｎｉＭｅｔａｌ．（１９９２）Ｆ
ＥＢＳＬｅｔｔ．３０７：９７～１０１；Ｃｌａｒｋ－ＬｅｗｉｓＩｅｔａｌ．
，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９：１６０７５（１９９４）；Ｃｌａｒｋ－Ｌｅｗｉ
ｓＩｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：３１２８（１９９１）；Ｒａ
ｊａｒａｔｈｎａｍＫｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ３３：６６２３～
３０（１９９４））。

８０．あるいは、無保護ペプチドセグメントは、化学的ライゲーションの結果としてペ
プチドセグメント間に形成される結合が非天然型（非ペプチド）結合である位置で化学的
に連結される（Ｓｃｈｎｏｌｚｅｒ，Ｍｅｔａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５６：２２１
（１９９２））。この技術は、タンパク質ドメインの類似体及び完全な生物活性を有する
比較的純粋な大量のタンパク質を合成するために使用されている（ｄｅＬｉｓｌｅＭｉ
ｌｔｏｎＲＣｅｔａｌ．，ＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓｉｎＰｒｏｔｅｉｎＣｈｅ
ｍｉｓｔｒｙＩＶ．ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ｐｐ．２５７
～２６７（１９９２））。

８１．生物活性を有する抗体のフラグメントもまた開示されている。ポリペプチドフラ
グメントは、アデノウイルス発現系又はバキュロウイルス発現系などの、そのポリペプチ
ドを産生することができる発現系においてポリペプチドをコードする核酸をクローニング
により得られた組換えタンパク質であり得る。例えば、抗体のＩＬ－２５との相互作用に
関連付けられた生物学的作用を引き起こすことができる特定のハイブリドーマから抗体の
活性ドメインを決定することができる。例えば、抗体の活性又は結合特異性又は親和性の
いずれにも寄与しないことが見出されたアミノ酸は、対応する活性を失うことなく、削除
することができる。例えば、様々な実施形態では、アミノ末端又はカルボキシ末端アミノ
酸は、天然型若しくは非修飾の非免疫グロブリン分子又は免疫グロブリン分子のいずれか
一方から順次除去され、対応する活性は、利用可能な多数のアッセイのうちの１つで測定
された。別の例では、抗体のフラグメントは、修飾抗体を含み、少なくとも１つのアミノ
酸は、特定の位置で天然型アミノ酸に置換され、アミノ末端若しくはカルボキシ末端アミ
ノ酸のいずれか一方の一部、又は抗体の内部領域でさえも、修飾抗体の精製を容易にする
ことができる、ビオチンなどのポリペプチドフラグメント又は他の部位と置換されている
。例えば、修飾抗体は、ペプチド化学又は２つのポリペプチドフラグメントをコードする
対応する核酸を発現ベクターにクローニングすることのいずれか一方を介して、マルトー
ス結合タンパク質と融合することができるため、コード領域の発現は、ハイブリッドポリ
ペプチドをもたらす。ハイブリッドポリペプチドは、アミロースアフィニティカラムを通
過させることによって親和性で精製することができ、次いで、修飾抗体受容体は、特異的
プロテアーゼ因子Ｘａを用いてハイブリッドポリペプチドを開裂させることによって、マ
ルトース結合領域から分離することができる（例えば、ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＢｉｏ
ｌａｂｓＰｒｏｄｕｃｔＣａｔａｌｏｇ，１９９６，ｐｇ．１６４を参照されたい。
）。類似の精製手順は、ハイブリッドタンパク質を真核細胞から単離するためにも同様に
利用可能である。

８２．フラグメントは、他の配列に付随しているかどうかにかかわらず、フラグメント
の活性が非修飾の抗体又は抗体フラグメントと比較して、顕著に変化していないか又は弱
められていない限り、特定の領域又は特定のアミノ酸残基の挿入、欠失、置換又は他の選
択された修飾を含む。これらの修飾は、ジスルフィド結合が可能なアミノ酸を除去又は付
加するため、その生体寿命を増大させるため、その分泌特性を変化させるためなどの、い
くつかの付加的性質をもたらすことができる。いかなる場合でも、フラグメントは、結合
活性、結合ドメインにおける結合の規制などの生物活性特性を保有する必要がある。抗体
の機能性領域又は活性領域は、タンパク質の特定の領域の変異誘発、それに続く発現及び
発現されたポリペプチドの試験により特定することができる。このような方法は、当業者
には容易に明らかであり、抗原をコードする核酸の部位特異的変異誘発を含むことができ
る（ＺｏｌｌｅｒＭＪｅｔａｌ．Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．１０：６４８７
～５００（１９８２）。

８３．様々なイムノアッセイ様式は、特定のタンパク質、変異体又はフラグメントに選
択的に結合する抗体を選択するために使用されてもよい。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノ
アッセイは、タンパク質、タンパク質変異体又はそのフラグメントと選択的に免疫反応す
る抗体を選択するために通常使用される。ＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅ．Ａｎｔｉｂ
ｏｄｉｅｓ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ．選択的結合を決定するために使
用することが考えられるイムノアッセイ様式及び条件の説明に関して、ＣｏｌｄＳｐｒ
ｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８８）を
参照されたい。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎｅｔａｌ
．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）のスキャッチャード解析
によって決定することができる。

８４．また、モノクローナル抗体又はそのフラグメントと、ＩＬ－２５分子に対する抗
ＩＬ－２５抗体又はそのフラグメントの結合を検出するための１種以上の試薬と、を含む
抗体試薬キットも提供される。試薬は、例えば、蛍光タグ、酵素タグ又は他のタグを含む
ことができる。試薬はまた、二次抗体若しくは三次抗体又は酵素反応用の試薬を含むこと
ができ、酵素反応は、視覚化することができる生成物を生成する。

８５．全体を通して記述したように、一態様では、配列番号１、配列番号２及び／又は
配列番号３に記載の１つ以上のＣＤＲを含む重鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２
５結合分子が、本明細書で開示されている。

８６．任意の上記態様のＩＬ－２５結合分子もまた開示され、ＣＤＲは、配列番号１、
配列番号２及び／又は配列番号３である。

８７．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が本明細書で開示
され、重鎖可変ドメインは、配列番号１及び配列番号２、配列番号１及び配列番号３、配
列番号２及び配列番号３、並びに／又は配列番号１、配列番号２及び配列番号３を含む。

８８．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、配列番号１及び配列番号２は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１
７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。

８９．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、配列番号２及び配列番号３は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３
２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられ
ている。

９０．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、重鎖可変ドメインは、配列番号１３を含む。

９１．一態様では、配列番号４、配列番号５及び配列番号６に記載の１つ以上のＣＤＲ
を含む軽鎖可変ドメインを更に含む、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が
本明細書で開示されている。

９２．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号５、配列番号４及び配列番号６、
配列番号５及び配列番号６、並びに／又は配列番号４、配列番号５及び配列番号６を含む
。

９３．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、配列番号４及び配列番号５は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１
７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。

９４．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、配列番号５及び配列番号６は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３
２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられ
ている。

９５．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む。

９６．一態様では、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含む、任意の上記態様の
単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示され、重鎖可変ドメインは、配列番号
１３を含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む。

９７．一態様では、配列番号４、配列番号５及び配列番号６に記載の１つ以上のＣＤＲ
を含む軽鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示されて
いる。

９８．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号５、配列番号４及び配列番号６、
配列番号５及び配列番号６、並びに／又は配列番号４、配列番号５及び配列番号６を含む
。

９９．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示され、配列番号４及び配列番号５は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１
７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。

１００．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号５及び配列番号６は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、
３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てら
れている。

１０１．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む。

１０２．一態様では、配列番号７、配列番号８及び配列番号９に記載の１つ以上のＣＤ
Ｒを含む重鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示され
ている。

１０３．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、重鎖可変ドメインは、配列番号７及び配列番号８、配列番号７及び配列番号９
、配列番号８及び配列番号９、並びに／又は配列番号７、配列番号８及び配列番号９を含
む。

１０４．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号７及び配列番号８は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、
１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。

１０５．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号８及び配列番号９は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、
３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てら
れている。

１０６．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、重鎖可変ドメインは、配列番号１５を含む。

１０７．一態様では、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上
のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを更に含む、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結
合分子が、本明細書で開示されている。

１０８．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１１、配列番号１０及び配列
番号１２、配列番号１１及び配列番号１２、並びに／又は配列番号１０、配列番号１１及
び配列番号１２を含む。

１０９．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号１０及び配列番号１１は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１
６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。

１１０．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号１１及び配列番号１２は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３
１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔
てられている。

１１１．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む。

１１２．一態様では、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含む、任意の上記態様
の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開示され、重鎖可変ドメインは、配列番
号１５を含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む。

１１３．一態様では、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上
のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で開
示される。

１１４．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１１、配列番号１０及び配列
番号１２、配列番号１１及び配列番号１２、並びに／又は配列番号１０、配列番号１１及
び配列番号１２を含む。

１１５．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号１０及び配列番号１１は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１
６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている。

１１６．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、配列番号１１及び配列番号１２は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３
１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔
てられている。

１１７．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む。

１１８．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、重鎖可変ドメインは、配列番号１７を含む。

１１９．一態様では、任意の上記態様の単離されたＩＬ－２５結合分子が、本明細書で
開示され、軽鎖可変ドメインは、配列番号１８を含む。

１２０．一態様では、任意の上記態様の治療量のＩＬ－２５結合分子のうちの任意を投
与することを含む、ライノウイルス感染、気道炎症、関節リウマチ、変形性関節症、骨侵
食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、
血管新生、アテローム性動脈硬化症、嚢胞性線維症並びに多発性硬化症を治療、抑制及び
／又は予防する方法が本明細書で開示されている。

１．相同性／同一性
１２１．本明細書で開示された遺伝子及びタンパク質のうちの任意の既知の変異体及び
誘導体又は起こり得るものを決定するための１つの方法は、特定の既知の配列に対する相
同性に関して変異体及び誘導体を定義することによるものであることを理解されたい。例
えば、配列番号１３は、ＩＬ－２５重鎖可変ドメインの特定の配列を明示する。具体的に
は、記載された配列に対して少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７
７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０
、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９パーセントの相同性を有する
、本明細書で開示されるこれら及び他の遺伝子及びタンパク質の変異体が開示される。当
業者は、２つのタンパク質又は遺伝子などの２つの核酸の相同性を決定する方法を容易に
理解する。例えば、相同性は、相同性が最も高いレベルになるように２つの配列を整列化
させた後に算出することができる。

１２２．相同性を算出する他の方法は、公開されたアルゴリズムによって行うことがで
きる。比較のための配列の最適なアライメントは、ＳｍｉｔｈａｎｄＷａｔｅｒｍａ
ｎＡｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）の局所相同性アルゴリズムに
よって、ＮｅｅｄｌｅｍａｎａｎｄＷｕｎｓｃｈ，Ｊ．ＭｏＬＢｉｏｌ．４８：４
４３（１９７０）の相同性アライメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎａｎｄ
Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２４４４
（１９８８）の類似性に関する検索法によって、これらのアルゴリズム（Ｗｉｓｃｏｎｓ
ｉｎＧｅｎｅｔｉｃｓＳｏｆｔｗａｒｅＰａｃｋａｇｅ，ＧｅｎｅｔｉｃｓＣｏ
ｍｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ，５７５ＳｃｉｅｎｃｅＤｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩの
ＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ）のコンピュータ化された実施に
よって、又はインスペクションによって行われてもよい。

１２３．方法のうちの任意を一般的に使用することができること、特定の場合には、こ
れらの様々な方法の結果が異なってもよいことが理解されるが、当業者は、同一性がこれ
らの方法のうちの少なくとも１つにより見出される場合、配列が記載された同一性を有す
ると言えるであろうこと、及び本明細書で開示されているであろうことを理解されたい。

１２４．例えば、本明細書で使用するとき、他の配列と特定のパーセントの相同性を有
していると記載された配列は、上述の計算法のうちの任意の１つ以上によって計算された
として記載された相同性を有する配列を指す。例えば、第１の配列がＺｕｋｅｒ計算法を
用いて第２の配列と８０パーセントの相同性を有するように計算される場合、第１の配列
が他の計算法の任意によって計算されたように第２の配列と８０パーセントの相同性を有
さない場合であっても、第１の配列は、本明細書で定義されたように、第２の配列と８０
パーセントの相同性を有する。別の例として、第１の配列がＺｕｋｅｒ計算法及びＰｅａ
ｒｓｏｎ－Ｌｉｐｍａｎ計算法の両方を用いて第２の配列と８０パーセントの相同性を有
するように計算される場合、第１の配列がＳｍｉｔｈ－Ｗａｔｅｒｍａｎ計算法、Ｎｅｅ
ｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈ計算法、Ｊａｅｇｅｒ計算法又は他の計算法のうちの任意に
よって計算されたように第２の配列と８０パーセントの相同性を有さない場合であっても
、第１の配列は、本明細書で定義されたように、第２の配列と８０パーセントの相同性を
有する。更に別の例として、第１の配列が計算法のそれぞれを用いて第２の配列と８０パ
ーセントの相同性を有するように計算される場合、第１の配列は、本明細書で定義された
ように、第２の配列と８０パーセントの相同性を有する（ただし、実際には、異なる計算
法は、多くの場合、異なる計算相同性百分率をもたらすこととなる）。

２．ペプチド
ａ）タンパク質変異体
１２５．本明細書で論じたように、既知であり本明細書で企図された、ＩＬ－２５結合
分子及びＩＬ－２５結合ＣＤＲの多くの変異体並びに本明細書で開示された重鎖可変領域
及び軽鎖可変領域が存在する。加えて、既知の機能性株変異体には、ＩＬ－２５結合分子
及びＩＬ－２５結合ＣＤＲの誘導体、並びに開示された方法及び組成物においてもまた機
能する重鎖可変領域及び軽鎖可変領域が存在する。タンパク質変異体及び誘導体は、当業
者により十分に理解され、アミノ酸配列修飾を含むことができる（in can）。例えば、ア
ミノ酸配列修飾は、一般的に、３種類の分類、置換変異体、挿入変異体又は欠失変異体の
うちの１つ以上に該当する。本明細書で使用するとき、「挿入」は、多くの場合、天然型
である親分子と比較したとき、それぞれ１つ以上のアミノ酸残基又はヌクレオチド残基を
付加することをもたらす、アミノ酸配列又はヌクレオチド配列における変化を指す。挿入
は、アミノ末端及び／又はカルボキシル末端融合並びに単一又は複数のアミノ酸残基の配
列内挿入を含む。挿入は、通常、アミノ末端又はカルボキシル末端融合よりも少ない挿入
、例えば、１～４残基程度となる。実施例に記載されたものなどの免疫原性融合タンパク
質誘導体は、インビトロでの架橋によって標的配列に免疫原性を付与するほど十分に大き
いポリペプチドを融合することによって、又は融合をコードするＤＮＡによって形質転換
された組換え細胞培養によって作製される。欠失は、１つ以上のアミノ酸残基をタンパク
質配列から除去することを特徴とする。一般的に、わずか約２～６個の残基のみが、タン
パク質分子内の任意の１つの部位で欠失される。これらの変異体は、通常、タンパク質を
コードするＤＮＡにおけるヌクレオチドの部位特異的変異誘発によって調製され、それに
より、変異体をコードするＤＮＡを作製し、その後、組換え細胞培養においてＤＮＡを発
現させる。既知の配列を有するＤＮＡの所定の部位で置換変異を行う技術は周知であり、
例えば、Ｍ１３プライマー変異誘発及びＰＣＲ変異誘発がある。アミノ酸置換は、一般的
には単一の残基についてであるが、一度に多数の異なる位置で起こることができ、挿入は
、通常、約１～１０個のアミノ酸残基の程度となり、欠失は、約１～３０個の残基の範囲
となる。欠失又は挿入は、好ましくは、隣接する対において行われ、すなわち、２個の残
基の欠失又は２個の残基の挿入である。置換、欠失、挿入又はこれらの任意の組合せは、
最終構築物に到達するように組み合わせてもよい。突然変異は、配列を読み枠の外に配置
する必要がなく、好ましくは、二次ｍＲＮＡ構造を産生することができると考えられる相
補領域を生成しないこととなる。置換変異体は、少なくとも１つの残基が除去され、異な
る残基がその場所に挿入された変異体である。そのような置換は、一般的に、以下の表２
に従って行われ、保守的置換と称される。

１２６．機能又は免疫的同一性における実質的な変化は、表２の置換よりも保守的では
ない置換を選択すること、すなわち、（ａ）例えば、シート又はヘリカル立体配座として
の、置換の領域におけるポリペプチド骨格の構造、（ｂ）標的部位での分子の電荷若しく
は疎水性、又は（ｃ）側鎖のかさ高さを維持するその効果において顕著に異なる残基を選
択することによって行われる。保守的アミノ酸置換は、アミノ酸残基を同様の構造的又は
化学的特性を有するアミノ酸残基で置き換えられた置換を含む。同様の側鎖を有するアミ
ノ酸残基のファミリーは、当該技術分野で定義されている。これらのファミリーには、塩
基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有
するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、未帯電の極性側鎖を有するア
ミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン
、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バ
リン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分岐側
鎖を有するアミノ酸（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖を有
するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が
挙げられる。

１２７．タンパク質特性において最大変化を生じることが概ね期待される置換は、（ａ
）親水性残基、例えば、セリル若しくはトレオニルが、疎水性残基、例えば、ロイシル、
イソロイシル、フェニルアラニル、バリル若しくはアラニルに（又はこれらによって）置
換されるか、（ｂ）システイン若しくはプロリンが、任意の他の残基に（又はこれらによ
って）置換されるか、（ｃ）正電荷側鎖を有する残基、例えば、リシル、アルギニル若し
くはヒスチジルが、負電荷残基、例えば、グルタミル若しくはアスパルチルに（又はこれ
らによって）置換されるか、又は、（ｄ）かさ高い側鎖を有する残基、例えば、フェニル
アラニンが、側鎖を有さないアミノ酸、例えば、グリシンに（又はこれによって）置換さ
れ、この場合は、（ｅ）硫酸化及び／又はグリコシル化のための部位の数を増加させるこ
とによる置換となる。

１２８．１つのアミノ酸残基を生物学的かつ／又は化学的に類似する他のアミノ酸残基
と置換することは、保守的置換として当業者に既知である。例えば、保守的置換は、１つ
の疎水性残基を別の疎水性残基に、又は１つの極性残基を別の極性残基に置換することで
あると考えられる。置換には、例えば、Ｇｌｙ，Ａｌａ；Ｖａｌ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕ；Ａｓ
ｐ，Ｇｌｕ；Ａｓｎ，Ｇｌｎ；Ｓｅｒ，Ｔｈｒ；Ｌｙｓ，Ａｒｇ及びＰｈｅ，Ｔｙｒなど
の組み合わせが挙げられる。それぞれ明示的に開示された配列のそのような保守的に置換
された変異体は、本明細書で提供されるモザイクポリペプチドの範囲内に含まれる。

１２９．置換又は欠失の変異誘発は、Ｎ－グリコシル化（Ａｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ／Ｓｅｒ
）又はＯ－グリコシル化（Ｓｅｒ又はＴｈｒ）のための挿入部位に対して使用することが
できる。システイン又は他の不安定な残基の欠失もまた、望ましい場合がある。潜在的な
タンパク質分解部位、例えば、Ａｒｇの欠失又は置換は、例えば、塩基性残基の１つを欠
失させるか、又はグルタミニル残基若しくはヒスチジン残基により塩基性残基を置換する
ことによって達成される。

１３０．特定の翻訳後誘導体化は、発現されたポリペプチドへの組換え宿主細胞の作用
の結果である。グルタミニル残基及びアスパラギニル残基は、対応するグルタミル残基及
びアスパリル残基に頻繁に翻訳後脱アミド化される。あるいは、これらの残基は、温和な
酸性条件下で脱アミド化される。他の翻訳後修飾には、プロリン及びリシンのヒドロキシ
ル化、セリル残基又はトレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リシン、アルギニン
及びヒスチジンの側鎖のｏ－アミノ基のメチル化（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏ
ｔｅｉｎｓ：ＳｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ
，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏｐｐ７９～８
６［１９８３］）、Ｎ－末端アミンのアセチル化並びに、いくつかの例では、Ｃ末端カル
ボキシルのアミド化が挙げられる。

１３１．本明細書で開示されるタンパク質の変異体及び誘導体を定義する１つの方法は
、特定の既知配列と相同性／同一性の点で変異体及び誘導体を定義することによることを
理解されたい。例えば、配列番号１３、１４、１５及び１６。本明細書で開示されるこれ
らのタンパク質及び他のタンパク質が、記載された配列に対して少なくとも７０％又は７
５％又は８０％又は８５％又は９０％又は９５％の相同性を有することが、具体的に開示
されている。当業者は、２つのタンパク質の相同性を判定する方法を容易に理解する。例
えば、相同性は、相同性が最も高いレベルになるように２つの配列を整列化した後に算出
することができる。

１３２．相同性を算出する他の方法は、公開されたアルゴリズムによって行うことがで
きる。比較のための配列の最適なアライメントは、ＳｍｉｔｈａｎｄＷａｔｅｒｍａ
ｎＡｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）のローカル相同性アルゴリズ
ムによって、ＮｅｅｄｌｅｍａｎａｎｄＷｕｎｓｃｈ，Ｊ．ＭｏＬＢｉｏｌ．４８
：４４３（１９７０）の相同性アライメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎａ
ｎｄＬｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２４
４４（１９８８）の類似性に関する検索法によって、これらのアルゴリズム（Ｗｉｓｃｏ
ｎｓｉｎＧｅｎｅｔｉｃｓＳｏｆｔｗａｒｅＰａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ
ＣｏｍｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ，５７５ＳｃｉｅｎｃｅＤｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗ
ＩのＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ）のコンピュータ化された実
施によって、又はインスペクションによって行われてもよい。

１３３．同じ種類の相同性は、例えば、Ｚｕｋｅｒ，Ｍ．Ｓｃｉｅｎｃｅ２４４：４
８～５２，１９８９，Ｊａｅｇｅｒｅｔａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ
ｉ．ＵＳＡ８６：７７０６～７７１０，１９８９，Ｊａｅｇｅｒｅｔａｌ．Ｍｅｔ
ｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌ．１８３：２８１～３０６，１９８９に開示されたアルゴリズ
ムにより核酸について得ることができる。

１３４．保守的変異及び相同性の記述が、特定の配列と少なくとも７０％の相同性を有
し、変異体が保守的変異体である実施形態などの、任意の組み合わせで一緒に組み合わせ
ることができることを理解されたい。

１３５．本明細書が様々なタンパク質及びタンパク質配列を論じるとき、それらのタン
パク質配列をコードすることができる核酸もまた開示されることを理解されたい。この核
酸は、特定のタンパク質配列に関連する全変性配列、すなわち、１つの特定のタンパク質
配列をコードする配列を有するすべての核酸、並びに、開示されたタンパク質配列の変異
体及び誘導体をコードする変性核酸を含むすべての核酸を含むと考えられる。したがって
、それぞれの特定の核酸配列が本明細書に完全に記載されなくてもよい一方で、あらゆる
配列が、開示されたタンパク質配列を介して実際に開示され、本明細書に記載されている
ことを理解されたい。加えて、例えば、イソロイシン（Ｉ）のバリン（Ｖ）との置換など
の、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１
５、１６、１７又は１８の開示された保守的誘導体。この変異に対して、配列番号１、２
、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７又は
１８のこの特定の誘導体をコードする核酸配列のすべてもまた開示されることを理解され
たい。

１３６．開示される組成物に組み込むことができるアミノ酸及びペプチド類似体が多数
あることを理解されたい。例えば、異なる機能的置換基、ひいては、表１及び表２に示さ
れるアミノ酸を有するＤアミノ酸又はアミノ酸が多数ある。天然型ペプチドの反対の立体
異性体及びペプチド類似体の立体異性体もまた開示される。これらのアミノ酸は、例えば
、最適なアミノ酸を伴うｔＲＮＡ分子を投入することによって、またアンバーコドンを利
用して類似体アミノ酸を部位特異的な方法でペプチド鎖に挿入する遺伝子構築物を操作す
ることによって、ポリペプチド鎖に容易に組み込むことができる。

１３７．ペプチドに類似しているが、天然型ペプチド結合を介して接続されていない分
子を作製することができる。例えば、アミノ酸又はアミノ酸類似体の結合には、ＣＨ₂Ｎ
Ｈ－、－ＣＨ₂Ｓ－、－ＣＨ₂－ＣＨ₂－、－ＣＨ＝ＣＨ－（ｃｉｓ及びｔｒａｎｓ）、－
ＣＯＣＨ₂－、－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ₂－及び－ＣＨＨ₂ＳＯ－を挙げることができる（これ
らの結合及び他の結合は、Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．ｉｎＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄ
ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＡｍｉｎｏＡｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｎ
ｄＰｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，ｅｄｓ．，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅ
ｒ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ｐ．２６７（１９８３）；Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．，Ｖｅｇａ
Ｄａｔａ（Ｍａｒｃｈ１９８３），Ｖｏｌ．１，Ｉｓｓｕｅ３，Ｐｅｐｔｉｄｅ
ＢａｃｋｂｏｎｅＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ（一般的レビュー）；Ｍｏｒｌｅｙ，Ｔ
ｒｅｎｄｓＰｈａｒｍ．Ｓｃｉ（１９８０）ｐｐ．４６３～４６８；Ｈｕｄｓｏｎ，Ｄ
．ｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＰｅｐｔＰｒｏｔＲｅｓ１４：１７７～１８５（１
９７９）（－ＣＨ₂ＮＨ－，－ＣＨ₂ＣＨ₂－）；Ｓｐａｔｏｌａｅｔａｌ．Ｌｉｆｅ
Ｓｃｉ３８：１２４３～１２４９（１９８６）（－ＣＨＨ₂－Ｓ）；ＨａｎｎＪ
．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰｅｒｋｉｎＴｒａｎｓ．Ｉ３０７～３１４（１９８２）（－
ＣＨ－ＣＨ－，ｃｉｓ及びｔｒａｎｓ）；Ａｌｍｑｕｉｓｔｅｔａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．
Ｃｈｅｍ．２３：１３９２～１３９８（１９８０）（－ＣＯＣＨ₂－）；Ｊｅｎｎｉｎｇ
ｓ－Ｗｈｉｔｅｅｔａｌ．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ２３：２５３３（１
９８２）（－ＣＯＣＨ₂－）；Ｓｚｅｌｋｅｅｔａｌ．ＥｕｒｏｐｅａｎＡｐｐｌ
ｎ，ＥＰ４５６６５ＣＡ（１９８２）：９７：３９４０５（１９８２）（－ＣＨ（Ｏ
Ｈ）ＣＨ₂－）；Ｈｏｌｌａｄａｙｅｔａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．Ｌｅｔｔ
２４：４４０１～４４０４（１９８３）（－Ｃ（ＯＨ）ＣＨ₂－）；及びＨｒｕｂｙＬ
ｉｆｅＳｃｉ３１：１８９～１９９（１９８２）（－ＣＨ₂－Ｓ－）に見出すことが
でき、これらのそれぞれは、参照により本明細書に組み込まれる。特に好ましい非ペプチ
ド結合は、－ＣＨ₂ＮＨ－である。ペプチド類似体は、β－アラニン、γ－アミノ酪酸な
どの、結合原子間に２個以上の原子を有することできることを理解されたい。

１３８．アミノ酸類似体及び類似体及びペプチド類似体は、より経済的な生産、より高
い化学的安定性、向上した薬理学的性質（半減期、吸収、力価、有効性など）、変化した
特異性（例えば、生物活性の広域スペクトル）、低減した抗原性などの、増強された又は
所望の特性を多くの場合有する。

１３９．Ｄ－アミノ酸は、ペプチダーゼなどにより認識されないため、Ｄ－アミノ酸は
、より安定なペプチドを生成するために使用することができる。コンセンサス配列の１つ
以上のアミノ酸の同じ種類のＤ－アミノ酸（例えば、Ｌ－リシンの代わりにＤ－リシン）
による系統的置換は、より安定なペプチドを生成するために使用することができる。シス
テイン残基は、環化するため又は２つ以上のペプチドを一緒に接続するために使用するこ
とができる。これは、ペプチドを特定の立体配座に拘束するために有益であり得る。

１４０．一態様では、開示されたＩＬ－２５結合分子は、標識を更に含んでもよい。本
明細書で使用するとき、標識には、蛍光色素、ビオチン／ストレプトアビチンなどの結合
対の部材、金属（例えば、金）、放射性置換基、又は着色された基質若しくは蛍光を生成
することによって検出可能な分子と特異的に相互作用することができるエピトープタグを
挙げることができる。タンパク質を検出可能に標識するために好適な物質は、（フルオロ
クローム及びフルオロフォアとして本明細書でも既知の）蛍光染料及び発色基質（coloro
metric substrate）と反応する酵素（例えば、西洋わさびペルオキシダーゼ）が挙げられ
る。蛍光染料の使用は、蛍光色素を非常に低量で検出することができるため、本発明の実
施において一般的に好ましい。

１４１．フルオロフォアは、発光する化合物又は分子である。一般的には、フルオロフ
ォアは、ある波長で電磁エネルギーを吸収し、第２の波長で電磁エネルギー放出する。代
表的なフルオロフォアには、１，５ＩＡＥＤＡＮＳ、１，８－ＡＮＳ、４－メチルウン
ベリフェロン、５－カルボキシ－２，７－ジクロロフルオレセイン、５－カルボキシフル
オレセイン（５－ＦＡＭ）、５－カルボキシナフトフルオレセイン、５－カルボキシテト
ラメチルローダミン（５－ＴＡＭＲＡ）、５－ヒドロキシトリプタミン（５－ＨＡＴ）、
５－ＲＯＸ（カルボキシ－Ｘ－ローダミン）、６－カルボキシローダミン６Ｇ、６－ＣＲ
６Ｇ、６－ＪＯＥ、７－アミノ－４－メチルクマリン、７－アミノアクチノマイシンＤ
（７－ＡＡＤ）、７－ヒドロキシ－４－Ｉメチルクマリン、９－アミノ－６－クロロ－２
－メトキシアクリジン（ＡＣＭＡ）、ＡＢＱ、酸性フクシン、アクリジンオレンジ、アク
リジンレッド、アクリジンイエロー、アクリフラビン、アクリフラビンフォイルゲンＳＩ
ＴＳＡ、エクリオン（発光タンパク質）、ＡＦＰ－自家蛍光タンパク質－（Ｑｕａｎｔｕ
ｍＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ｓｇＧＦＰ、ｓｇＢＦＰを参照されたい）、アレ
クサフルオロ３５０（商標）、アレクサフルオロ４３０（商標）、アレクサフルオロ４８
８（商標）、アレクサフルオロ５３２（商標）、アレクサフルオロ５４６（商標）、アレ
クサフルオロ５６８（商標）、アレクサフルオロ５９４（商標）、アレクサフルオロ６３
３（商標）、アレクサフルオロ６４７（商標）、アレクサフルオロ６６０（商標）、アレ
クサフルオロ６８０（商標）、アリザリンコンプレクソン、アリザリンレッド、アロフィ
コシアニン（ＡＰＣ）、ＡＭＣ、ＡＭＣＡ－Ｓ、アミノメチルクマリン（ＡＭＣＡ）、Ａ
ＭＣＡ－Ｘ、アミノアクチノマイシンＤ、アミノクマリン、アニリンブルー、ステアリン
酸アントロシル、ＡＰＣ－Ｃｙ７、ＡＰＴＲＡ－ＢＴＣ、ＡＰＴＳ、アストラゾンブリリ
アントレッド４Ｇ、アストラゾンオレンジＲ、アストラゾンレッド６Ｂ、アストラゾンイ
エロー７ＧＬＬ、アタブリン、ＡＴＴＯ－ＴＡＧ（商標）ＣＢＱＣＡ、ＡＴＴＯ－ＴＡＧ
（商標）ＦＱ、オーラミン、オーロホスフィンＧ、オーロホスフィン、ＢＡＯ９（ビスア
ミノフェニルオキサジアゾール）、ＢＣＥＣＦ（高ｐＨ）、ＢＣＥＣＦ（低ｐＨ）、硫酸
ベルベリン、β－ラクタマーゼ、ＢＦＰブルーシフトＧＦＰ（Ｙ６６Ｈ）、青色蛍光タン
パク質、ＢＦＰ／ＧＦＰＦＲＥＴ、ビマン、ビスベンゼミド（Bisbenzemide）、ビスベ
ンズイミド（Ｈｏｅｃｈｓｔ）、ビス－ＢＴＣ、ブランコフォアＦＦＧ、ブランコフォア
ＳＶ、ＢＯＢＯ（商標）－１、ＢＯＢＯ（商標）－３、Ｂｏｄｉｐｙ４９２／５１５、Ｂ
ｏｄｉｐｙ４９３／５０３、Ｂｏｄｉｐｙ５００／５１０、Ｂｏｄｉｐｙ、５０５／５１
５、Ｂｏｄｉｐｙ５３０／５５０、Ｂｏｄｉｐｙ５４２／５６３、Ｂｏｄｉｐｙ５５８／
５６８、Ｂｏｄｉｐｙ５６４／５７０、Ｂｏｄｉｐｙ５７６／５８９、Ｂｏｄｉｐｙ５８
１／５９１、Ｂｏｄｉｐｙ６３０／６５０－Ｘ、Ｂｏｄｉｐｙ６５０／６６５－Ｘ、Ｂｏ
ｄｉｐｙ６６５／６７６、ＢｏｄｉｐｙＦｌ、ＢｏｄｉｐｙＦＬＡＴＰ、Ｂｏｄｉ
ｐｙＦｌ－セラミド、ＢｏｄｉｐｙＲ６ＧＳＥ、ＢｏｄｉｐｙＴＭＲ、Ｂｏｄｉ
ｐｙＴＭＲ－Ｘ共役体、ＢｏｄｉｐｙＴＭＲ－Ｘ，ＳＥ、ＢｏｄｉｐｙＴＲ、Ｂｏ
ｄｉｐｙＴＲＡＴＰ、ＢｏｄｉｐｙＴＲ－ＸＳＥ、ＢＯ－ＰＲＯ（商標）－１、
ＢＯ－ＰＲＯ（商標）－３、ブリリアントスルホフラビンＦＦ、ＢＴＣ、ＢＴＣ－５Ｎ、
カルセイン、カルセインブルー、カルシウムクリムゾン－、カルシウムグリーン、カルシ
ウムグリーン－１Ｃａ²⁺色素、カルシウムグリーン－２Ｃａ²⁺、カルシウムグリーン
－５ＮＣａ²⁺、カルシウムグリーン－Ｃ１８Ｃａ²⁺、カルシウムオレンジ、カルコフ
ロールホワイト、カルボキシ－Ｘ－ローダミン（５－ＲＯＸ）、カスケードブルー（商標
）、カスケードイエロー、カテコールアミン、ＣＣＦ２（ＧｅｎｅＢｌａｚｅｒ）、ＣＦ
ＤＡ、ＣＦＰ（シアン蛍光タンパク質）、ＣＦＰ／ＹＦＰＦＲＥＴ、クロロフィル、ク
ロモマイシンＡ、クロモマイシンＡ、ＣＬ－ＮＥＲＦ、ＣＭＦＤＡ、セレンテラジン、セ
レンテラジンｃｐ、セレンテラジンｆ、セレンテラジンｆｃｐ、セレンテラジンｈ、セレ
ンテラジンｈｃｐ、セレンテラジンｉｐ、セレンテラジンｎ、セレンテラジンＯ、クマリ
ンファロイジン、Ｃ－フィコシアニン、ＣＰＭＩメチルクマリン、ＣＴＣ、ＣＴＣホル
マザン、Ｃｙ２（商標）、Ｃｙ３．１８、Ｃｙ３．５（商標）、Ｃｙ３（商標）、Ｃｙ
５．１８、Ｃｙ５．５（商標）、Ｃｙ５（商標）、Ｃｙ７（商標）、ＣｙａｎＧＦＰ
、サイクリックＡＭＰ蛍光センサ（ＦｉＣＲｈＲ）、ダブシル、ダンシル、ダンシルアミ
ン、ダンシルカダベリン、塩化ダンシル、ダンシルＤＨＰＥ、フッ化ダンシル、ＤＡＰＩ
、ダポキシル、ダポキシル２、ダポキシル３’ＤＣＦＤＡ、ＤＣＦＨ（二酢酸ジクロロジ
ヒドロフルオレセイン）、ＤＤＡＯ、ＤＨＲ（ジヒドローダミン（Dihydorhodamine）１
２３）、Ｄｉ－４－ＡＮＥＰＰＳ、Ｄｉ－８－ＡＮＥＰＰＳ（ノンレシオ）、ＤｉＡ（４
－Ｄｉ１６－ＡＳＰ）、二酢酸ジクロロジヒドロフルオレセイン（ＤＣＦＨ）、ＤｉＤ
－親油性トレーサ、ＤｉＤ（ＤｉｌＣ１８（５））、ＤＩＤＳ、ジヒドローダミン１２３
（ＤＨＲ）、Ｄｉｌ（ＤｉｌＣ１８（３））、Ｉジニトロフェノール、ＤｉＯ（ＤｉＯＣ
１８（３））、ＤｉＲ、ＤｉＲ（ＤｉｌＣ１８（７））、ＤＭ－ＮＥＲＦ（高ｐＨ）、Ｄ
ＮＰ、ドーパミン、ＤｓＲｅｄ、ＤＴＡＦ、ＤＹ－６３０－ＮＨＳ、ＤＹ－６３５－ＮＨ
Ｓ、ＥＢＦＰ、ＥＣＦＰ、ＥＧＦＰ、ＥＬＦ９７、エオシン、エリスロシン、エリスロシ
ンＩＴＣ、臭化エチジウム、エチジウムホモダイマー－１（ＥｔｈＤ－１）、オイクリシ
ン、オイコライト、塩化ユウロピウム（１１１）、ＥＹＦＰ、ファーストブルー、ＦＤＡ
、フォイルゲン（パラローズアニリン）、ＦＩＦ（ホルムアルデヒド誘発蛍光）、ＦＩＴ
Ｃ、フラゾオレンジ、フルオ－３、フルオ－４、フルオレセイン（ＦＩＴＣ）、二酢酸フ
ルオレセイン、フルオロエメラルド、フルオロゴールド（ヒドロキシスチルバミジン）、
フルオロルビー、フルオロＸ、ＦＭ１－４３（商標）、ＦＭ４－４６、フラレッド（
商標）（高ｐＨ）、フラレッド（商標）／フルオ－３、フラ－２、フラ－２／ＢＣＥＣＦ
、ゲナクリルブリリアントレッドＢ、ゲナクリルブリリアントイエロー１０ＧＦ、ゲナク
リルピンク３Ｇ、ゲナクリルイエロー５ＧＦ、ＧｅｎｅＢｌａｚｅｒ、（ＣＣＦ２）、Ｇ
ＦＰ（Ｓ６５Ｔ）、ＧＦＰレッドシフト（ｒｓＧＦＰ）ＧＦＰ野生型、非ＵＶ励起（ｗｔ
ＧＦＰ）ＧＦＰ野生型、ＵＶ励起（ｗｔＧＦＰ）ＧＦＰｕｖ、グロキサン酸、グラニュラ
ーブルー、ヘマトポルフィリン、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２
、Ｈｏｅｃｈｓｔ３４５８０、ＨＰＴＳ、ヒドロキシクマリン、ヒドロキシスチルバミジ
ン（フルオロゴールド）、ヒドロキシトリプタミン、インド－１、高カルシウム、インド
－１、低カルシウム、インドジカルボシアニン（ＤｉＤ）、インドトリカルボシアニン（
ＤｉＲ）、イントラホワイトＣｆ、ＪＣ－１、ＪＯＪＯ－１、ＪＯ－ＰＲＯ－１、レー
ザープロ、ローロダン、ＬＤＳ７５１（ＤＮＡ）、ＬＤＳ７５１（ＲＮＡ）、Ｌｅｕｃｏ
ｐｈｏｒＰＡＦ、ＬｅｕｃｏｐｈｏｒＳＦ、ＬｅｕｃｏｐｈｏｒＷＳ、リサミンロ
ーダミン、リサミンローダミンＢ、カルセイン／エチジウムホモダイマー、ＬＯＬＯ－１
、ＬＯ－ＰＲＯ－１、ルシファーイエロー、リソトラッカーブルー、リソトラッカーブル
ーホワイト、リソトラッカーグリーン、リソトラッカーレッド、リソトラッカーイエロー
、リソセンサーブルー、リソセンサーグリーン、リソセンサーイエロー／ブルー、マググ
リーン、マグダラレッド（フロキシンＢ）、マグ－フラレッド、マグ－フラ－２、マグ－
フラ－５、マグ－インド－１、マグネシウムグリーン、マグネシウムオレンジ、マラカイ
トグリーン、マリーナブルー、Ｉマキシロンブリリアントフラビン１０ＧＦＦ、マキシ
ロンブリリアントフラビン８ＧＦＦ、メロシアニン、メトキシクマリン、ミトトラッカ
ーグリーンＦＭ、ミトトラッカーオレンジ、ミトトラッカーレッド、ミトラマイシン、モ
ノブロモビマン、モノブロモビマン（ｍＢＢｒ－ＧＳＨ）、モノクロロビマン、ＭＰＳ（
メチルグリーンピロニンスチルベン）、ＮＢＤ、ＮＢＤアミン、ナイルレッド、ニトロベ
ンゾオキセジドール（Nitrobenzoxedidole）、ノルアドレナリン、ヌクレアファストレッ
ド、ｉヌクレアイエロー、ナイロサンブリリアントラビンＥ８Ｇ、オレゴングリーン（商
標）、オレゴングリーン（商標）４８８、オレゴングリーン（商標）５００、オレゴング
リーン（商標）５１４、パシフィックブルー、パラローズアニリン（フォイルゲン）、Ｐ
ＢＦＩ、ＰＥ－Ｃｙ５、ＰＥ－Ｃｙ７、ＰｅｒＣＰ、ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ５．５、ＰＥ－テ
キサスレッド（Ｒｅｄ６１３）、フロキシンＢ（マグダラレッド）、ホルワイトＡＲ、ホ
ルワイトＢＫＬ、ホルワイトＲｅｖ、ホルワイトＲＰＡ、ホスフィン３Ｒ、フォトレジス
ト、フィコエリスリンＢ［ＰＥ］、フィコエリスリンＲ［ＰＥ］、ＰＫＨ２６（Ｓｉｇｍ
ａ）、ＰＫＨ６７、ＰＭＩＡ、ポントクロームブルーブラック、ＰＯＰＯ－１、ＰＯＰＯ
－３、ＰＯ－ＰＲＯ－１、ＰＯ－ＩＰＲＯ－３、プリムリン、プロシオンイエロー、プ
ロピジウムロージド（Propidium lodid）（Ｐｌ）、ＰｙＭＰＯ、ピレン、ピロニン、ピ
ロニンＢ、ピロザールブリリアントフラビン７ＧＦ、ＱＳＹ７、キナクリンマスタード、
レソルフィン、ＲＨ４１４、Ｒｈｏｄ－２、ローダミン、ローダミン１１０、ローダミ
ン１２３、ローダミン５ＧＬＤ、ローダミン６Ｇ、ローダミンＢ、ローダミンＢ２００、
ローダミンＢエクストラ、ローダミンＢＢ、ローダミンＢＧ、ローダミングリーン、ロー
ダミンファリシジン、ローダミンファロイジン、ローダミンレッド、ローダミンＷＴ、ロ
ーズベンガル、Ｒ－フィコシアニン、Ｒ－フィコエリトリン（ＰＥ）、ｒｓＧＦＰ、Ｓ６
５Ａ、Ｓ６５Ｃ、Ｓ６５Ｌ、Ｓ６５Ｔ、サファイアＧＦＰ、ＳＢＦＩ、セロトニン、セブ
ロンブリリアントレッド２Ｂ、セブロンブリリアントレッド４Ｇ、セブロンＩブリリアン
トレッドＢ、セブロンオレンジ、セブロンイエローＬ、ｓｇＢＦＰ（商標）（スーパーグ
ローＢＦＰ）、ｓｇＧＦＰ（商標）（スーパーグローＧＦＰ）、ＳＩＴＳ（プリムリン、
スチルベンイソチオスルホン酸）、ＳＮＡＦＬカルセイン、ＳＮＡＦＬ－１、ＳＮＡＦＬ
－２、ＳＮＡＲＦカルセイン、ＳＮＡＲＦ１、ナトリウムグリーン、スペクトラムアクア
、スペクトラムグリーン、スペクトラムオレンジ、スペクトラムレッド、ＳＰＱ（６－メ
トキシ－Ｎ－（３スルホプロピル）キノリニウム）、スチルベン、スルホローダミンＢ及
びＣ、スルホローダミンエクストラ、ＳＹＴＯ１１、ＳＹＴＯ１２、ＳＹＴＯ１３、ＳＹ
ＴＯ１４、ＳＹＴＯ１５、ＳＹＴＯ１６、ＳＹＴＯ１７、ＳＹＴＯ１８、ＳＹＴＯ２０、
ＳＹＴＯ２１、ＳＹＴＯ２２、ＳＹＴＯ２３、ＳＹＴＯ２４、ＳＹＴＯ２５、ＳＹＴＯ４
０、ＳＹＴＯ４１、ＳＹＴＯ４２、ＳＹＴＯ４３、ＳＹＴＯ４４、ＳＹＴＯ４５、ＳＹＴ
Ｏ５９、ＳＹＴＯ６０、ＳＹＴＯ６１、ＳＹＴＯ６２、ＳＹＴＯ６３、ＳＹＴＯ６４、Ｓ
ＹＴＯ８０、ＳＹＴＯ８１、ＳＹＴＯ８２、ＳＹＴＯ８３、ＳＹＴＯ８４、ＳＹＴＯ８５
、ＳＹＴＯＸブルー、ＳＹＴＯＸグリーン、ＳＹＴＯＸオレンジ、テトラサイクリン、テ
トラメチルローダミン（ＴＲＩＴＣ）、テキサスレッド（商標）、テキサスレッド－Ｘ（
商標）共役体、チアジカルボシアニン（ＤｉＳＣ３）、チアジンレッドＲ、チアゾールオ
レンジ、チオフラビン５、チオフラビンＳ、チオフラビンＴＯＮ、チオライト、チアゾー
ルオレンジ、チノポールＣＢＳ（カルコフロールホワイト）、ＴＩＥＲ、ＴＯ－ＰＲＯ－
１、ＴＯ－ＰＲＯ－３、ＴＯ－ＰＲＯ－５、ＴＯＴＯ－１、ＴＯＴＯ－３、トリカラー（
ＰＥ－Ｃｙ５）、ＴＲＩＴＣテトラメチルロ
ーダミンルソチオシアナート（TetramethylRodaminelsoThioCyanate）、トルーブルー、
トルーレッド、ウルトラライト、ウラニンＢ、ユビテックスＳＦＣ、ｗｔＧＦＰ、ＷＷ７
８１、Ｘ－ローダミン、ＸＲＩＴＣ、キシレンオレンジ、Ｙ６６Ｆ、Ｙ６６Ｈ、Ｙ６６Ｗ
、イエローＧＦＰ、ＹＦＰ、ＹＯ－ＰＲＯ－１、ＹＯ－ＰＲＯ－３、ＹＯＹＯ－１、ＹＯ
ＹＯ－３、サイバーグリーン、チアゾールオレンジ（インターキレーション色素（interc
helating dy es）
）、量子ドットなどの半導体ナノ粒子、若しくは（光又は他の電磁エネルギー源により活
性化することができる）ケージドフルオロフォア、又はこれらの組み合わせが挙げられる
が、これらに限定されない。

１４２．放射性核種などの修飾ユニットを、ハロゲン化により本明細書に記載される化
合物のうちの任意に直接組み込むか又は付着させることができる。本実施形態において有
用な放射性核種の例には、トリチウム、ヨウ素１２５、ヨウ素１３１、ヨウ素１２３、ヨ
ウ素１２４、アスタチン２１０、炭素１１、炭素１４、窒素１３、フッ素１８が挙げられ
るが、これらに限定されない。別の態様では、放射性核種は、連結基に接続されるか又は
キレート基で結合され、その後、直接又はリンカーによって化合物に接続することができ
る。その態様で有用な放射性核種には、Ｔｃ－９９ｍ、Ｒｅ－１８６、Ｇａ－６８、Ｒｅ
－１８８、Ｙ－９０、Ｓｍ－１５３、Ｂｉ－２１２、Ｃｕ－６７、Ｃｕ－６４及びＣｕ－
６２が挙げられるが、これらに限定されない。これらのような放射性標識技術は、放射性
薬剤産業において日常的に使用されている。

１４３．放射性標識化合物は、神経学的疾患（例えば、神経変性疾患）若しくは精神状
態を診断するため、又は哺乳動物（例えば、ヒト）におけるそのような疾患若しくは状態
の進行若しくは治療を追跡するための造影剤として有用である。本明細書に記載された放
射性標識化合物は、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣ
Ｔ）などの撮像技術と併用して好都合に使用することができる。

１４４．標識は、直接的に又は間接的に行うことができる。直接標識において、検出抗
体（対象分子に対する抗体）又は検出分子（対象分子に対する抗体によって結合すること
ができる分子）は、標識を含む。標識の検出は、検出抗体又は検出分子の存在を示し、す
なわち、対象分子の存在又は対象分子に対する抗体の存在をそれぞれ示す。間接標識では
、付加分子又は付加部分は、免疫複合体と接触しているか、又は免疫複合体の部位で生成
される。例えば、酵素などのシグナル生成分子又はシグナル生成部分は、検出抗体又は検
出分子に取り付けることができるか又は関連付けることができる。次いで、シグナル生成
分子は、免疫複合体の部位において検出可能なシグナルを生成することができる。例えば
、好適な基質が供給されるとき、酵素は、免疫複合体の部位において可視又は検出可能な
生成物を生成することができる。ＥＬＩＳＡは、この種類の間接標識を使用する。

１４５．間接標識の別の例として、対象分子又は対象分子に対する抗体（一次抗体）の
いずれか一方に結合することができる、一次抗体に対する二次抗体などの（結合剤と称す
ることができる）付加分子は、免疫複合体に接触することができる。付加分子は、標識又
はシグナル生成分子若しくは部分を有することができる。付加分子は、抗体であってもよ
く、それ故に、抗体は、二次抗体と称することができる。二次抗体の一次抗体との結合は
、第１の（又は一次）抗体及び対象分子といわゆるサンドイッチを形成することができる
。免疫複合体は、二次免疫複合体の形成を可能にするために十分な時間にわたって、効果
的な条件下で、標識された二次抗体と接触することができる。次いで、二次免疫複合体は
、任意の非特異的に結合した標識二次抗体を除去するために一般に洗浄することができ、
次いで、二次免疫複合体内の残留標識を検出することができる。付加分子はまた、ビオチ
ン／アバジンペアなどの、互いに結合することができる一対の分子若しくは部分のうちの
一方であってもよく、又はこれを含んでもよい。この様式では、検出抗体又は検出分子は
、対の他のメンバーを含まなければならない。

１４６．間接標識の他の様式は、二段階アプローチによる一次免疫複合体の検出を含む
。例えば、上述のように、対象分子に対する結合親和性を有する抗体などの（第１の結合
剤と称することができる）分子又は対応する抗体は、二次免疫複合体を形成するために使
用することができる。洗浄後、二次免疫複合体は、免疫複合体の形成（それ故に、三次免
疫複合体の形成）を可能にするために十分な時間にわたって、効果的な条件下で再び、第
１の結合剤に対する結合親和性を有する（第２の結合剤と称することができる）別の分子
と接触することができる。第２の結合剤は、このようにして形成された三次免疫複合体の
検出を可能にする、検出可能な標識又はシグナル生成分子若しくは部分に連結することが
できる。このシステムは、シグナル増幅をもたらすことができる。

３．医薬担体／医薬品の送達
１４７．上述のように、組成物はまた、（本明細書では薬学的に許容される賦形剤とも
称される）薬学的に許容される担体中でインビボで投与することができる。「薬学的に許
容される」とは、生物学的に又はその他の点で不活性ではない物質を意味し、すなわち、
物質は、不要な生物学的効果を一切引き起こすことなく、又は物質が含まれる医薬組成物
の他の成分の任意と有害な様式で相互作用することなく、核酸又はベクターと共に被験体
に投与されてもよい。担体は、当業者に周知であるように、活性成分の分解を最小限にす
るため、及び被験体における任意の有害な副作用を最小限にするため、当然選択される。
したがって、一態様では、本明細書で開示されるＩＬ－２５結合分子のうちの任意を含む
医薬組成物が、本明細書で開示される。

１４８．組成物は、局所鼻腔内投与又は吸入による投与を含んで、経口的に、非経口的
に（例えば、静脈内に）、筋肉内注射によって、腹腔内注射によって、経皮的に、体外に
、局所的になどで投与されてもよい。本明細書で使用するとき、「局所鼻腔内投与」は、
鼻孔の一方又は両方を通る鼻及び鼻腔への組成物の送達を意味し、噴霧機構若しくは液滴
機構による送達又は核酸若しくはベクターのエアロゾル化を介した送達を含むことができ
る。吸入による組成物の投与は、噴霧機構又は液滴機構による送達を介して鼻又は口を通
して行うことができる。送達はまた、挿管を介して呼吸器系（例えば、肺）の任意の領域
に対して直接行うことができる。必要とされる組成物の正確な量は、被験体の人種、年齢
、体重及び全身状態、治療されるアレルギー性疾患の重症度、使用される特定の核酸又は
ベクター、組成物の投与様式などに依存して、被験体によって異なるであろう。したがっ
て、すべての組成物の正確な量を指定することは不可能である。しかしながら、適量は、
本明細書の教示に鑑みて、通常の実験のみを使用して、当業者によって決定され得る。

１４９．組成物の非経口投与は、使用される場合、一般に注射を特徴とする。注射剤は
、溶液若しくは懸濁液、注射前に液体で懸濁する溶液に好適な固形、又は乳剤のいずれか
として、従来の形態で調製されてよい。非経口投与についてごく最近改良された方法は、
一定用量が維持されるように徐放系又は持続放出系の使用を伴う。例えば、参照により本
明細書に組み込まれる米国特許第３，６１０，７９５号を参照されたい。

１５０．材料は、溶液、（例えば、微小粒子、リポソーム又は細胞に組み込まれた）懸
濁液であってもよい。これらは、抗体、受容体又は受容体リガンドを介して特定の細胞型
を標的としてもよい。以下の参照文献は、特定のタンパク質を腫瘍組織へ標的化するため
に本技術を使用する例である（Ｓｅｎｔｅｒ，ｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ
Ｃｈｅｍ．，２：４４７～４５１，（１９９１）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｋ．Ｄ．，Ｂｒ
．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６０：２７５～２８１，（１９８９）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，ｅｔ
ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，５８：７００～７０３，（１９８８）；Ｓｅｎｔｅｒ
，ｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．，４：３～９，（１９９３）；
Ｂａｔｔｅｌｌｉ，ｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＩｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅ
ｒ．，３５：４２１～４２５，（１９９２）；ＰｉｅｔｅｒｓｚａｎｄＭｃＫｅｎｚ
ｉｅ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ．Ｒｅｖｉｅｗｓ，１２９：５７～８０，（１９９２）；及び
Ｒｏｆｆｌｅｒ，ｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，４２：２０６２
～２０６５，（１９９１））。「ステルス」などのビヒクル及び（結腸癌を標的とする脂
質介在性薬物を含む）他の抗体共役リポソーム、細胞特異的リガンドを介するＤＮＡの受
容体介在性標的化、リンパ球指向性腫瘍標的化、並びにインビボでのマウスグリオーマ細
胞の高特異的治療的レトロウイルス標的化。以下の参照文献は、特定のタンパク質を腫瘍
組織へ標的化するために本技術を使用する例である（Ｈｕｇｈｅｓｅｔａｌ．，Ｃａ
ｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ，４９：６２１４～６２２０，（１９８９）；及びＬｉｔｚ
ｉｎｇｅｒａｎｄＨｕａｎｇ，ＢｉｏｃｈｉｍｉｃａｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａ
Ａｃｔａ，１１０４：１７９～１８７，（１９９２））。全般的に、受容体は、構成的
誘発性又はリガンド誘発性のいずれかで、エンドサイトーシスの経路に関与する。クラス
リン被覆ピット中のこれらの受容体クラスターは、クラスリン被覆小胞を介して細胞に入
り、受容体が分別される酸性化エンドソームを通過し、次いで、細胞表面へ再循環するか
、細胞内に保存されるか又はリポソーム内で分解されるかのいずれかである。内在化経路
は、栄養取り込み、活性化タンパク質の除去、巨大分子のクリアランス、ウイルス及び毒
素の日和見侵入、リガンドの解離及び分解、並びに受容体レベル調節などの多様な機能を
果たす。多数の受容体は、細胞型、受容体濃度、リガンドの種類、リガンドの価数及びリ
ガンド濃度に応じて、２つ以上の細胞内経路に従う。受容体介在性エンドサイトーシスの
分子機構及び細胞機構がレビューされている（ＢｒｏｗｎａｎｄＧｒｅｅｎｅ，ＤＮ
ＡａｎｄＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ１０：６，３９９～４０９（１９９１））。

ａ）薬学的に許容される担体
１５１．抗体を含む組成物は、薬学的に許容される担体と組み合わせて治療する上で使
用することができる。

１５２．好適な担体及びこれらの製剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ＴｈｅＳｃ
ｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈｅｄ．）
ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，Ｅ
ａｓｔｏｎ，ＰＡ１９９５に記載されている。一般的には、適量の薬学的に許容される
塩を製剤に使用して、製剤等張性（formulation isotonic）を与える。薬学的に許容され
る担体の例には、生理食塩水、リンゲル溶液及びデキストロース溶液が挙げられ、これら
に限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは、約５～約８、より好ましくは、約７～約７
．５である。更に、担体は、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの
徐放性製剤を含み、マトリックスは、成形品の形態、例えば、フィルム、リポソーム又は
微粒子である。例えば、投与経路及び投与される組成物の濃度に応じて、特定の担体が更
に好ましい場合があることは、当業者には明白であろう。

１５３．医薬担体は、当業者に既知である。これらは、最も典型的には、滅菌水、生理
食塩水及び生理的ｐＨの緩衝液などの溶液を含む、ヒトへの薬剤投与のための標準的な担
体であると考えられる。組成物は、筋肉内又は皮下に投与することができる。他の化合物
は、当業者によって使用される標準的な手順に従って投与されることとなる。

１５４．医薬組成物は、選択した分子に加えて、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝剤、防腐
剤、界面活性剤などを含んでもよい。医薬組成物はまた、抗菌剤、抗炎症剤、麻酔薬など
の、１種以上の有効成分を含んでもよい。

１５５．医薬組成物は、局所治療又は全身治療が望まれているかどうか、及び治療すべ
き領域に応じて、多数の方法で投与されてもよい。投与は、（眼科的、経腟的、経直腸的
、鼻腔内を含んで）局所的に、経口的に、吸入により又は、例えば、静脈内点滴、皮下注
射、腹腔内注射若しくは筋肉内注射による非経口的にでもよい。開示された抗体は、静脈
内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内又は経皮的に投与することができる。

１５６．非経口的投与の製剤には、滅菌した水溶液又は非水溶液、懸濁液及びエマルシ
ョンが挙げられる。非水溶液の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、
オリーブオイルなどの植物油及びオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルである。水
性担体には、生理食塩水及び緩衝媒体を含む、水、アルコール性／水性溶液、エマルショ
ン又は懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキス
トロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル又は不揮発性油が挙げら
れる。静脈内ビヒクルには、流体及び栄養補充剤、電解質補充剤（例えば、リンゲルデキ
ストロースに基づく電解質補充剤）などが挙げられる。防腐剤及び他の添加剤はまた、例
えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤及び不活性ガスなどとして存在してもよい。

１５７．局所投与のための製剤は、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、液滴、坐剤、
スプレー、液体及び粉末を含んでもよい。従来の医薬担体、水性基剤、粉末基剤又は油性
基剤、増粘剤などが、必要となるか又は望ましい場合がある。

１５８．経口投与のための組成物には、粉末若しくは顆粒、水又は非水性媒体中の懸濁
液若しくは溶液、カプセル、小袋又はタブレットが挙げられる。増粘剤、香味料、希釈剤
、乳化剤、分散助剤又は結合剤が望ましい場合がある。

１５９．組成物のうちのいくつかは、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン
酸、硫酸及びリン酸などの無機酸並びにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸
、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸及びフマル酸などの有機酸と
の反応によって、又は、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウムなどの
無機塩基並びにモノ、ジ、トリアルキルアミン及びアリールアミン及び置換エタノールア
ミンなどの有機塩基類との反応によって形成される、薬学的に許容される酸付加塩又は塩
基付加塩として、投与される可能性がある場合がある。

４．治療上の使用及び方法
１６０．組成物を投与するための有効量及びスケジュールは、経験的に決定されてもよ
く、そのような決定を行うことは、当業者の技能の範囲内である。組成物の投与の用量範
囲は、疾患の症状に影響する所望の効果を生じるほど大きい用量である。用量は、望まし
くない交差反応、アナフィラキシー反応などの有害な副作用を引き起こすほど大きくある
べきではない。一般に、用量は、年齢、状態、性別及び患者の疾患の程度、投与経路又は
他の薬物がレジメンに含まれているかどうかにより変動することとなり、当業者によって
決定することができる。用量は、いずれかの禁忌がある場合には、個々の医師によって調
整することができる。用量は、変更することができ、毎日、１日又は数日間、１つ以上の
容量の投与において投与することができる。指針は、所与のクラスの医薬製品に対する適
切な用量に関する文献において見出すことができる。例えば、抗体について適切な用量を
選択する際の指針は、抗体の治療用途に関する文献、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋｏｆ
ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｆｅｒｒｏｎｅｅｔａｌ．，ｅｄｓ
．，ＮｏｇｅｓＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ＰａｒｋＲｉｄｇｅ，Ｎ．Ｊ．，（１９
８５）ｃｈ．２２ａｎｄｐｐ．３０３～３５７；Ｓｍｉｔｈｅｔａｌ．，Ａｎｔ
ｉｂｏｄｉｅｓｉｎＨｕｍａｎＤｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄＴｈｅｒａｐｙ，Ｈ
ａｂｅｒｅｔａｌ．，ｅｄｓ．，ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９
７７）ｐｐ．３６５～３８９に見出すことができる。単独使用の抗体の一般的な１日用量
は、上記の因子に基づいて、１日につき体重１ｋｇ当たり約１μｇ～最大１００ｍｇ又は
それ以上の範囲である場合がある。

１６１．一態様では、開示されたＩＬ－２５結合分子が、例えば、ライノウイルス感染
、気道炎症、関節リウマチ（「ＲＡ」）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、
炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、
アテローム性動脈硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」）などの炎症状態又は疾患を治療
、予防又は抑制するために使用することができることが理解され、本明細書で企図される
。したがって、一態様では、本明細書に開示されたＩＬ－２５結合分子の任意を投与する
ことを含む、ライノウイルス感染、気道炎症、関節リウマチ（「ＲＡ」）、変形性関節症
、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移植片拒絶反応、乾
癬、特定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」
）を治療、予防又は抑制する方法が、本明細書で開示される。例えば、ライノウイルス感
染、気道炎症、喘息、嚢胞性線維症、関節リウマチ（「ＲＡ」）、変形性関節症、骨侵食
、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定
の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」）を治療
、予防又は抑制する方法が、本明細書に開示され、方法は、配列番号１、配列番号２、配
列番号３、配列番号７、配列番号８及び配列番号９に記載の１つ以上の相補性決定領域（
ＣＤＲ）を含む重鎖可変ドメインを含む、１種、２種又は３種以上のＩＬ－２５結合分子
を被験体に投与することを含む。例えば、ライノウイルス感染、気道炎症、喘息、嚢胞性
線維症、関節リウマチ（「ＲＡ」）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症
性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、アテ
ローム性動脈硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」）を治療、抑制又は予防する方法が、
本明細書に開示され、方法は、配列番号１及び配列番号２、配列番号１及び配列番号３、
配列番号２及び配列番号３、配列番号１、配列番号２及び配列番号３、配列番号７及び配
列番号８、配列番号７及び配列番号９、配列番号８及び配列番号９、並びに／又は配列番
号７、配列番号８及び配列番号９に記載のＣＤＲを含む重鎖可変ドメインを含む、１種以
上のＩＬ－２５結合分子を被験体に投与することを含む。一態様では、開示された治療、
予防又は抑制の方法は、重鎖可変ドメインを含むＩＬ－２５結合分子を被験体に投与する
ことを含むことができ、その重鎖可変ドメインは、配列番号１３又は配列番号２７を含む
。

１６２．ライノウイルス感染、気道炎症、喘息、嚢胞性線維症、関節リウマチ（「ＲＡ
」）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種
移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症並びに多発
性硬化症（「ＭＳ」）を治療、予防又は抑制する開示された方法が、重鎖可変ドメインの
代わりに又は重鎖可変ドメインに加えて軽鎖可変ドメインを含むＩＬ－２５結合分子を、
当該状態又は疾患を有する被験体に投与することを含むことができることもまた理解され
、本明細書で企図される。一態様では、被験体においてライノウイルス感染、気道炎症、
喘息、嚢胞性線維症、関節リウマチ（「ＲＡ」）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及
び癒着、炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血
管新生、アテローム性動脈硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」）を治療、予防又は抑制
する方法が、本明細書に開示され、方法は、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列
番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメ
インを含む、１種、２種又は３種以上のＩＬ－２５結合分子を被験体に投与することを含
む。例えば、配列番号４及び配列番号５、配列番号４及び配列番号６、配列番号５及び配
列番号６、配列番号４、配列番号５及び配列番号６、配列番号１０及び配列番号１１、配
列番号１０及び配列番号１２、配列番号１１及び配列番号１２、並びに／又は配列番号１
０、配列番号１１及び配列番号１２に記載のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを含むＩＬ－
２５結合分子のうちの１種以上を被験体に投与することを含む治療、予防又は抑制の方法
が、本明細書で開示されている。ＩＬ－２５結合分子が軽鎖可変ドメインを含む方法もま
た本明細書で開示され、その軽鎖可変ドメインは、配列番号１４又は配列番号１６を含む
。

１６３．一態様では、開示された治療、予防及び／又は抑制の方法において使用するた
めの開示されたＩＬ－２５結合分子が、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインの両方を
含むことができることが理解され、本明細書で企図される。治療、予防及び／又は抑制の
当該方法において使用される当該ＩＬ－２５結合分子が、重鎖可変ドメインＣＤＲのうち
の任意の１つ、２つ又は３つを、本明細書で開示される軽鎖可変ドメインＣＤＲのうちの
任意の１つ、２つ又は３つと組み合わせて含むことができることを更に理解されたい。そ
の結果、ライノウイルス感染、気道炎症、喘息、嚢胞性線維症、関節リウマチ（「ＲＡ」
）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移
植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症並びに多発性
硬化症（「ＭＳ」）を治療、予防又は抑制する開示された方法において使用するためのＩ
Ｌ－２５結合分子は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号７、配列番号８及
び／又は配列番号９からなる群から選択される重鎖可変ドメインＣＤＲのうちの１つ、２
つ又は３つと、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号１０、配列番号１１及び
／又は配列番号１２からなる群から選択される軽鎖可変ドメインＣＤＲのうちの１つ、２
つ又は３つと、を含むことができる。例えば、ライノウイルス感染、気道炎症、喘息、嚢
胞性線維症、関節リウマチ（「ＲＡ」）、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、
炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、
アテローム性動脈硬化症並びに多発性硬化症（「ＭＳ」）を有する被験体を治療する方法
が、本明細書で開示され、方法は、重鎖可変ドメインが配列番号１３、配列番号１５及び
／又は配列番号１７を含む重鎖可変ドメインと、軽鎖可変ドメインが配列番号１４、配列
番号１６及び／又は配列番号１８を含む軽鎖可変ドメインと、を含む、ＩＬ－２５結合分
子を被験体に投与することを含む。

１６４．本明細書で使用するとき、用語「治療（treatment）」、「治療する（treat）
」又は「治療している（treating）」は、被験体における（例えば、炎症状態又は癌など
の）疾患又は状態の影響のうちの１つ以上を低減する方法を指す。したがって、開示され
る方法では、治療は、確立された感染の重症度又は感染の症状の１０％、２０％、３０％
、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％の低減を指すことがで
きる。例えば、炎症状態又は癌を治療するための方法は、対照と比較して被験体における
状態又は癌の１つ以上の症状の１０％の低減が存在する場合、治療であると見なされる。
したがって、低減は、未感作又は対照レベルと比較して、１０％、２０％、３０％、４０
％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％又は１０％～１００％の任意の
割合の低減であり得る。治療が、状態若しくは疾患又は状態若しくは疾患の症状の治癒又
は完全切除を必ずしも指すわけではないことを理解されたい。本明細書で論じられたよう
な治療が予防的又は治療的であり得ることが理解され、本明細書で企図される。その結果
、一態様では、被験体における炎症性疾患又は状態の重症度を治療又は低減する方法は、
被験体にＩＬ－２５結合分子を投与することを含む。また、被験体における炎症性疾患又
は状態の発症を予防又は低減する方法は、被験体にＩＬ－２５結合分子を投与することを
含む。

１６５．本明細書で使用するとき、感染を予防する（prevent）、予防している（preve
nting）及び予防（prevention）という用語は、被験体が感染の１つ以上の症状を示し始
める前又はほぼ同時に行われる行為、例えば、治療薬（例えば、本明細書に開示された組
成物）の投与を指し、これは、感染の１つ以上の症状の発症若しくは増悪を抑制若しくは
遅延させるか、又は再発を遅延させる。本明細書で使用するとき、減少、低減又は抑制へ
の言及は、対照レベルと比較して、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、
７０％、８０％、９０％又はそれ以上の変化を含む。例えば、開示された方法は、炎症状
態又は疾患を減少させるためにＩＬ－２５結合分子を受容しなかった対照被験体と比較し
たとき、被験体における炎症状態又は疾患の発症、憎悪又は再発の約１０％減少がある場
合、予防であると見なされる。

本明細書に開示された治療、予防及び抑制方法が、開示されたＩＬ－２５結合分子の治
療用途及び予防用途の両方を企図していることが理解され、本明細書で企図される。

Ｃ．実施例
１６６．以下の実施例は、本明細書において特許請求の範囲に記載された化合物、組成
物、物品、デバイス及び／又は方法をどのように製造及び評価するかの完全な開示及び記
載を当業者に提供するために示され、純粋に例示的であることが意図され、開示を制限す
ることを意図しない。数字（例えば、量、温度など）に関して精度を保証する努力がなさ
れたが、ある程度の誤差及び偏差を考慮するものとする。特に記載のない限り、部分は、
重量部であり、温度は、℃単位又は周囲温度であり、圧力は、大気圧又はほぼ大気圧であ
る。

（実施例１）
１６７．マウスＩｇ－α、マウスＩｇ－β及びヒトインターロイキン６を過剰発現する
トランスジェニックマウスに、組換えヒトＩＬ－２５（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）を２週
間間隔で腹腔内注射した。血清ＥＬＩＳＡによって測定され場合、有意な免疫応答が上昇
した後、リンパ節、脾臓及び骨髄細胞を採取し、抗体アイソタイプＩｇＭを表面発現する
Ｂ細胞を磁気ビーズにより除去し、ＭｏＦｌｏ蛍光活性化細胞分別機（MoFlo Fluorescen
ce -Activated Cell Sorter）を用いて残りの細胞をＩＬ－２５と結合するその能力に関
して分別した（図１）。

１６８．ＩＬ－２５結合に関して陽性の細胞を９６ウェルプレート内に分別し、単細胞
ＲＴ－ＰＣＲに付して可変領域を増幅し、その可変領域を重鎖ヒトＩｇＧ４定常領域又は
軽鎖ヒトＩｇＫ定常領域のいずれか一方を含む発現ベクター内にクローニングした。得ら
れた重鎖クローン及び軽鎖クローン対をＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクションし、得
られた抗体タンパク質をタンパク質Ａ樹脂により精製し（図２）、ＨＴ－２９細胞におい
て組換えヒトＩＬ－２５を中和するための能力についてアッセイした（図３）。（ＡＢＭ
１０９．２と表示された）ＡＢＭ１０９のヒト化バージョンはまた、ＨＴ－２９アッセイ
における力価についても試験された（図４）。

１６９．ＩＬ－２５に対する抗体の親和性をＢｉａｃｏｒｅＴ－１００（ＧＥＨｅ
ａｌｔｈｃａｒｅ）を用いる表面プラズマ共鳴（ＳＰＲ）を用いて測定した。（図５、図
９）抗体を、ＣＭ５チップ上のフローセル２～４上のカルボキシメチル化デキストランに
固定化した（フローセル１を基準として使用した）。ＨＢＳ－Ｐ緩衝液中のｒｈＩＬ２５
又はｒｍＩＬ１５を濃度を増加させて（２．５、５．０、１０、２０及び４０ｎＭ）、そ
れぞれの濃度について１２０秒の注入時間でチップ上を流した。第５回目の注入後、ＨＢ
Ｓ－Ｐ緩衝液をそれぞれのフローセルに通し、ＩＬ－２５を２０分間解離させた。表面は
、１０ｍＭグリシン－ＨＣＬｐＨ１．５の３０秒曝露で再生された。シングルサイクル
速度論的解析は、それぞれの抗体について基準セルを減算して行われた。

１７０．ＡＢＭ１２５を精製し、アレルギー性喘息のライノウイルス感染モデルのマウ
スに投与した。マウスを低ＬＰＳ鶏卵オボアルブミン（２ｍｇミョウバン中ＯＶＡ５０
μｇ）で感作した。次いで、マウスに５０μｇのオボアルブミン（ＯＶＡ）を鼻腔内に（
ｉ．ｎ）連続３日間抗原投与した。最後のＯＶＡ抗原投与の直後、マウスに腹腔内に（ｉ
．ｐ．）ＡＢＭ１２５又はアイソタイプ対照（ＩｇＧ）を投与した。ｍＡｂ投与から４時
間後、マウスをｉ．ｎ．で２．５×１０⁶ ＴＣＩＤ₅₀ ＲＶ１Ｂに感染させた。炎症性
応答を注射後３日目に評価した。次いで、細胞動員を気管支肺胞洗浄流体中で評価し、Ｉ
Ｌ－５の肺ｍＲＮＡの発現をＳＹＢＲ緑色化学によるｑＰＣＲにより評価し、注射後３日
目の塩水／ＰＢＳ対照に関してＬｏｇ２（倍率変化）で表現した。

１７１．後にＲＮＡに格納されるマウス先端肺葉から全ＲＮＡを抽出し（Ｑｉａｇｅｎ
）、その後、ｃＤＮＡ合成（ＯＭＮＩＳＣＲＩＰＴ（登録商標）ＲＴキット、Ｑｉａｇｅ
ｎ）を行った。ＲＶ－１ＢゲノムＲＮＡプライマー及びプローブ配列、センス５’－ＧＴ
ＧＡＡＧＡＧＣＣＳＣＲＴＧＴＧＣＴ－３’（配列番号１９）５０ｎｍ、アンチセンス５
’－ＧＣＴＳＣＡＧＧＧＴＴＡＡＧＧＴＴＡＧＣＣ－３’（配列番号２０）３００ｎｍ、
プローブ－５’－ＦＡＭ－ＴＧＡＧＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＣＣＴＧＡＡＴＧ－ＴＡＭＲＡ
－３’（配列番号２１）１００ｎｍ。ＡＢＩ７５００Ｔａｑｍａｎ（ＡＢＩ）を使用して
、ＰＣＲ反応を分析した。ＲＮＡは、プラスミドＤＮＡの増幅により生成された標準曲線
を用いて定量化した。ＲＮＡは、ｃＤＮＡ反応の１μＬ当たりのコピー数として表現され
る。

Ｄ．配列
配列番号１
ＳＹＷＩＥ
配列番号２
ＱＩＬＰＧＩＧＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ
配列番号３
ＧＹＧＮＹＧＤＹ
配列番号４
ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭ
配列番号５
ＲＡＳＮＬＥＳ
配列番号６
ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ
配列番号７
ＴＳＧＭＧＶＧ
配列番号８
ＨＩＷＷＤＤＶＫＲＹＮＰＡＬＫＳ
配列番号９
ＴＬＰＨＦＦＤＹ
配列番号１０
ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ
配列番号１１
ＲＴＳＮＬＡＳ
配列番号１２
ＫＱＹＨＳＹＰＰＴＷＴ
配列番号１３
ＥＶＫＶＶＥＳＧＡＤＬＭＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＳＹＷＩＥＷＶＫＱ
ＲＰＧＨＧＬＥＷＩＧＱＩＬＰＧＩＧＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＳＮＴＡ
ＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＧＹＧＮＹＧＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
配列番号１４
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨＷ
ＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩ
ＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫＲ
配列番号１５
ＱＶＴＬＫＶＳＧＰＧＩＬＱＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＮＴＳＧＭＧＶＧＷＩ
ＲＱＰＳＧＫＧＬＥＷＬＡＨＩＷＷＤＤＶＫＲＹＮＰＡＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＧＳＱ
ＶＦＬＫＩＡＳＶＤＴＡＤＴＡＴＹＹＣＡＲＴＬＰＨＦＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ
配列番号１６
ＤＩＱＭＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＩＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹＷＹＱＱＫＳ
ＧＳＳＰＫＰＷＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡ
ＥＤＡＡＴＹＹＣＫＱＹＨＳＹＰＰＴＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ
配列番号１７
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＹＷＩＥＷＶＲＱ
ＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＬＰＧＩＧＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＶ
ＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＹＧＮＹＧＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
配列番号１８
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＰＧＱＲＡＴＩＴＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨＷ
ＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩ
ＮＰＶＥＡＱＤＴＡＮＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫＲ
配列番号１９
ＧＴＧＡＡＧＡＧＣＣＳＣＲＴＧＴＧＣＴ
配列番号２０
ＧＣＴＳＣＡＧＧＧＴＴＡＡＧＧＴＴＡＧＣＣ
配列番号２１
ＴＧＡＧＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＣＣＴＧＡＡＴＧ

１７１．後にＲＮＡに格納されるマウス先端肺葉から全ＲＮＡを抽出し（Ｑｉａｇｅｎ）、その後、ｃＤＮＡ合成（ＯＭＮＩＳＣＲＩＰＴ（登録商標）ＲＴキット、Ｑｉａｇｅｎ）を行った。ＲＶ－１ＢゲノムＲＮＡプライマー及びプローブ配列、センス５'－ＧＴＧＡＡＧＡＧＣＣＳＣＲＴＧＴＧＣＴ－３'（配列番号１９）５０ｎｍ、アンチセンス５'－ＧＣＴＳＣＡＧＧＧＴＴＡＡＧＧＴＴＡＧＣＣ－３'（配列番号２０）３００ｎｍ、プローブ－５'－ＦＡＭ－ＴＧＡＧＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＣＣＴＧＡＡＴＧ－ＴＡＭＲＡ－３'（配列番号２１）１００ｎｍ。ＡＢＩ７５００Ｔａｑｍａｎ（ＡＢＩ）を使用して、ＰＣＲ反応を分析した。ＲＮＡは、プラスミドＤＮＡの増幅により生成された標準曲線を用いて定量化した。ＲＮＡは、ｃＤＮＡ反応の１μＬ当たりのコピー数として表現される。

本発明の様々な実施形態を以下に示す。
１．配列番号１、配列番号２及び配列番号３に記載の１つ以上のＣＤＲを含む重鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
２．前記ＣＤＲは、配列番号１である、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３．前記ＣＤＲは、配列番号２である、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４．前記ＣＤＲは、配列番号３である、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１及び配列番号２を含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６．配列番号１及び配列番号２は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、上記５に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７．配列番号１及び配列番号２は、１４個のアミノ酸によって隔てられている、上記６に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
８．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１及び配列番号３を含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
９．前記重鎖可変ドメインは、配列番号２及び配列番号３を含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１０．配列番号２及び配列番号３は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている、上記９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１１．配列番号２及び配列番号３は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、上記１０に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
１２．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１、配列番号２及び配列番号３を含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１３．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３を含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１４．配列番号４、配列番号５及び配列番号６に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを更に含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１５．前記ＣＤＲは、配列番号４である、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１６．前記ＣＤＲは、配列番号５である、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１７．前記ＣＤＲは、配列番号６である、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１８．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号５を含む、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
１９．配列番号４及び配列番号５は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、上記１８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２０．配列番号４及び配列番号５は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、上記１９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２１．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号６を含む、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２２．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号５及び配列番号６を含む、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２３．配列番号５及び配列番号６は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている、上記２２に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２４．配列番号５及び配列番号６は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、上記２３に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
２５．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４、配列番号５及び配列番号６を含む、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２６．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む、上記１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２７．重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む、上記１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
２８．配列番号４、配列番号５及び配列番号６に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
２９．前記ＣＤＲは、配列番号４である、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３０．前記ＣＤＲは、配列番号５である、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３１．前記ＣＤＲは、配列番号６である、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３２．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号５を含む、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３３．配列番号４及び配列番号５は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、上記３２に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３４．配列番号４及び配列番号５は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、上記３３に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３５．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号６を含む、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３６．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号５及び配列番号６を含む、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３７．配列番号５及び配列番号６は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている、上記３６に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
３８．配列番号５及び配列番号６は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、上記３７に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
３９．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４、配列番号５及び配列番号６を含む、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４０．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む、上記２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４１．配列番号７、配列番号８及び配列番号９に記載の１つ以上のＣＤＲを含む重鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
４２．前記ＣＤＲは、配列番号７である、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４３．前記ＣＤＲは、配列番号８である、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４４．前記ＣＤＲは、配列番号９である、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４５．前記重鎖可変ドメインは、配列番号７及び配列番号８を含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４６．配列番号７及び配列番号８は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、上記４５に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４７．配列番号７及び配列番号８は、１４個のアミノ酸によって隔てられている、上記４６に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４８．前記重鎖可変ドメインは、配列番号７及び配列番号９を含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
４９．前記重鎖可変ドメインは、配列番号８及び配列番号９を含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５０．配列番号８及び配列番号９は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている、上記４９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５１．配列番号８及び配列番号９は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、上記５０に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
５２．前記重鎖可変ドメインは、配列番号７、配列番号８及び配列番号９を含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５３．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５を含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５４．配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを更に含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５５．前記ＣＤＲは、配列番号１０である、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５６．前記ＣＤＲは、配列番号１１である、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５７．前記ＣＤＲは、配列番号１２である、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５８．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１１を含む、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
５９．配列番号１０及び配列番号１１は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、上記５８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６０．配列番号１０及び配列番号１１は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、上記５９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６１．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１２を含む、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６２．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１及び配列番号１２を含む、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６３．配列番号１１及び配列番号１２は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている、上記６２に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６４．配列番号１１及び配列番号１２は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、上記６３に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
６５．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２を含む、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６６．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む、上記５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６７．重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む、上記４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
６８．配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
６９．前記ＣＤＲは、配列番号１０である、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７０．前記ＣＤＲは、配列番号１１である、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７１．前記ＣＤＲは、配列番号１２である、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７２．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１１を含む、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７３．配列番号１０及び配列番号１１は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、上記７２に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７４．配列番号１０及び配列番号１１は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、上記７３に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７５．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１２を含む、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７６．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１及び配列番号１２を含む、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７７．配列番号１１及び配列番号１２は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている、上記７６に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
７８．配列番号１１及び配列番号１２は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、上記７７に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
７９．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２を含む、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
８０．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む、上記６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
８１．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７を含む、単離されたＩＬ－２５結合分子。
８２．前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１８を含む、単離されたＩＬ－２５結合分子。
８３．治療量の、上記１、２８、４１、６８、８１及び８２に記載のＩＬ－２５結合分子のうちの任意を投与することを含む、ライノウイルス感染、気道炎症、関節リウマチ、変形性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患、同種移植片拒絶反応、乾癬、特定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症、嚢胞性線維症並びに多発性硬化症を治療する方法。

Claims

配列番号１、配列番号２及び配列番号３に記載の１つ以上のＣＤＲを含む重鎖可変ドメ
インを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号１である、請求項１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号２である、請求項１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号３である、請求項１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号１及び配列番号２を含む、請求項１に記載の単離さ
れたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１及び配列番号２は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項５に記載の単離されたＩ
Ｌ－２５結合分子。
配列番号１及び配列番号２は、１４個のアミノ酸によって隔てられている、請求項６に
記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号１及び配列番号３を含む、請求項１に記載の単離さ
れたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号２及び配列番号３を含む、請求項１に記載の単離さ
れたＩＬ－２５結合分子。
配列番号２及び配列番号３は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３
３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている
、請求項９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号２及び配列番号３は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１０
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
前記重鎖可変ドメインは、配列番号１、配列番号２及び配列番号３を含む、請求項１に
記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３を含む、請求項１に記載の単離されたＩＬ－２
５結合分子。
配列番号４、配列番号５及び配列番号６に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメ
インを更に含む、請求項１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号４である、請求項１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記ＣＤＲは、配列番号５である、請求項１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記ＣＤＲは、配列番号６である、請求項１４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号５を含む、請求項１４に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号４及び配列番号５は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１８に記載の単離された
ＩＬ－２５結合分子。
配列番号４及び配列番号５は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１９
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号６を含む、請求項１４に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号５及び配列番号６を含む、請求項１４に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号５及び配列番号６は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３
３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている
、請求項２２に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号５及び配列番号６は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、請求項２３
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４、配列番号５及び配列番号６を含む、請求項１４
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む、請求項１４に記載の単離されたＩＬ－
２５結合分子。
重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインは、配列番号１
３を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む、請求項１に記載の単離された
ＩＬ－２５結合分子。
配列番号４、配列番号５及び配列番号６に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可変ドメ
インを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号４である、請求項２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記ＣＤＲは、配列番号５である、請求項２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記ＣＤＲは、配列番号６である、請求項２８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号５を含む、請求項２８に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号４及び配列番号５は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項３２に記載の単離された
ＩＬ－２５結合分子。
配列番号４及び配列番号５は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項３３
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び配列番号６を含む、請求項２８に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号５及び配列番号６を含む、請求項２８に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号５及び配列番号６は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３
３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている
、請求項３６に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号５及び配列番号６は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、請求項３７
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４、配列番号５及び配列番号６を含む、請求項２８
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４を含む、請求項２８に記載の単離されたＩＬ－
２５結合分子。
配列番号７、配列番号８及び配列番号９に記載の１つ以上のＣＤＲを含む重鎖可変ドメ
インを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号７である、請求項４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記ＣＤＲは、配列番号８である、請求項４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記ＣＤＲは、配列番号９である、請求項４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子
。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号７及び配列番号８を含む、請求項４１に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号７及び配列番号８は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項４５に記載の単離された
ＩＬ－２５結合分子。
配列番号７及び配列番号８は、１４個のアミノ酸によって隔てられている、請求項４６
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号７及び配列番号９を含む、請求項４１に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号８及び配列番号９を含む、請求項４１に記載の単離
されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号８及び配列番号９は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３
３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられている
、請求項４９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号８及び配列番号９は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、請求項５０
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
前記重鎖可変ドメインは、配列番号７、配列番号８及び配列番号９を含む、請求項４１
に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５を含む、請求項４１に記載の単離されたＩＬ－
２５結合分子。
配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可
変ドメインを更に含む、請求項４１に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号１０である、請求項５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分
子。
前記ＣＤＲは、配列番号１１である、請求項５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分
子。
前記ＣＤＲは、配列番号１２である、請求項５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分
子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１１を含む、請求項５４に記載の
単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１０及び配列番号１１は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７
、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項５８に記載の単離さ
れたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１０及び配列番号１１は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項
５９に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１２を含む、請求項５４に記載の
単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１及び配列番号１２を含む、請求項５４に記載の
単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１１及び配列番号１２は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２
、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられて
いる、請求項６２に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１１及び配列番号１２は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、請求項
６３に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２を含む、請求
項５４に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む、請求項５４に記載の単離されたＩＬ－
２５結合分子。
重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインは、配列番号１
５を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む、請求項４１に記載の単離され
たＩＬ－２５結合分子。
配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む軽鎖可
変ドメインを含む単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記ＣＤＲは、配列番号１０である、請求項６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分
子。
前記ＣＤＲは、配列番号１１である、請求項６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分
子。
前記ＣＤＲは、配列番号１２である、請求項６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分
子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１１を含む、請求項６８に記載の
単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１０及び配列番号１１は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７
、１８、１９又は２０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項７２に記載の単離さ
れたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１０及び配列番号１１は、１５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項
７３に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０及び配列番号１２を含む、請求項６８に記載の
単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１及び配列番号１２を含む、請求項６８に記載の
単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１１及び配列番号１２は、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２
、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０個のアミノ酸によって隔てられて
いる、請求項７６に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
配列番号１１及び配列番号１２は、３２個のアミノ酸によって隔てられている、請求項
７７に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子、
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２を含む、請求
項６８に記載の単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６を含む、請求項６８に記載の単離されたＩＬ－
２５結合分子。
前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７を含む、単離されたＩＬ－２５結合分子。
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１８を含む、単離されたＩＬ－２５結合分子。
治療量の、請求項１、２８、４１、６８、８１及び８２に記載のＩＬ－２５結合分子の
うちの任意を投与することを含む、ライノウイルス感染、気道炎症、関節リウマチ、変形
性関節症、骨侵食、腹腔内膿瘍及び癒着、炎症性腸疾患、同種移植片拒絶反応、乾癬、特
定の種類の癌、血管新生、アテローム性動脈硬化症、嚢胞性線維症並びに多発性硬化症を
治療する方法。