JP2022177126A - 個別または複数の細胞培養ウェルを支持するためのトレイ - Google Patents

個別または複数の細胞培養ウェルを支持するためのトレイ Download PDF

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Abstract

【課題】個別又は複数の細胞培養培地を収容するためのトレイを提供する。【解決手段】細胞培養培地を収容するためのリザーバープレートと、当該リザーバープレート35の上部に適合するように構成され、上面11とデッキを形成する反対側の底面と当該デッキにおける複数のウェルアパーチャとを有する、脱着可能なトレイ10と、当該ウェルアパーチャを通って適合し当該トレイのデッキの底面の下方へと延在するように構成された少なくとも1つの脱着可能なウェル22であって、各ウェルが、細胞培養物質を収容するウェルエンクロージャ19及びハンガー40を有する、少なくとも1つの脱着可能なウェルと、を有する細胞培養ウェルトレイアセンブリであって、当該脱着可能なウェルがウェルアパーチャ内に挿入された場合、当該トレイのデッキと当該ウェルのハンガーとの間に空間が存在する、細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。【選択図】図6

Description

関連出願の相互参照
本出願は、2016年11月30日に出願された米国特許仮出願第62/428,144号に対する優先権の恩典を主張するものであり、なお、本出願は当該仮出願の内容に依拠し、ならびに当該仮出願の全体が参照により本明細書に組み入れられる。
本開示は、概して、ランダマイズされたスクリーニングのための細胞増殖にとって有用な細胞培養容器に関する。本開示は、細胞培養培地を収容するリザーバーに、脱着可能な細胞培養ウェルを収容し支持するように構成されたトレイを提供する。当該トレイは、細胞培養ウェルを個別に当該トレイ内に導入または当該トレイから取り出すことができるようにするために、当該トレイのデッキと当該脱着可能なウェルとの間に空間を提供するための特徴部、例えば、隆起したウェル壁またはカラー(collar)または傾斜したウェル開口部またはウェル壁など、を有する。当該トレイはさらに、収容され支持された細胞培養ウェルを細胞培養培地のリザーバーの上に吊り下げて部分的に浸漬させること、またはトレイをお互いに積み重ねること、または表面上に当該トレイを支持すること、を可能にする足部を有し得る。
培養された細胞は、多くの目的のために使用される。培養された細胞は、新規の化学物質が細胞における生理反応にどのように影響を及ぼすかを試験することによって新規の化学物質の有効性を試験するために使用される。多くの場合、これらの試験は、薬物の開発の早期において実施される。細胞集団に対する多数の薬物または潜在的薬物の試験を可能にするために、ハイスループットスクリーニングを用いることができる。多くの場合、これらのスクリーニングは、マルチウェルプレートにおいて実施される。プレートは、例えば、6、12、24、96、384、または1526のウェルを有し得、各ウェルは、細胞集団を収容する。これらの細胞は、数例を挙げると、細胞が細胞培養器の表面に付着する2D(細胞は単層として増殖する)において、または細胞が懸濁液において増殖する3D(細胞は球状体として増殖する)において、または複数の細胞タイプが培養液中で一緒に増殖される共生培養条件において、分離された細胞集団を含む、多くの構成において増殖させることができる。細胞培養器は、使用者の特定のニーズに応じて、特定の細胞培養ニーズを支援するように構成することができる。従来のマルチウェルプレートは、一体式のウェルを有するプレートである。一体式のウェルの内側に位置することができる脱着可能なウェルが知られている。例えば、細胞培養インサートが、Corning Incorporated社から(Transwell(登録商標)およびNetwell(登録商標))、Millipore社から(Millicell(登録商標))、Greiner社から(ThinCert(商標))、およびNunc社から(複数の皿およびキャリアプレートにおけるポリカーボネート膜インサート)、入手可能である。これらの製品は、個別のウェルインサートとして、あるいは標準的6、12、24、または96ウェルプレートまたは共有されたリザーバー内に挿入するように設計された複数の一体式のウェルを収容するマルチウェルインサートとして、入手可能である。Netwell(登録商標)キャリアは、Corning Incorporated社から入手可能であり、個別のウェルをキャリア内またはキャリア外へと手作業で交換するためならびに標準的マルチウェルプレートに対して複数の個別のウェルを提供するために使用することができるハンドルによる支援を提供する。
しかしながら、個別のウェルを支持、輸送、操作、交換、およびランダマイズするため、これらのウェルをリザーバーに導入するため、リザーバーが共有リザーバーまたはマルチウェルプレートリザーバーであるかどうかに関係なく当該トレイおよびリザーバーからウェルを取り出すため、ならびにこれらの個々のウェルの内容物に対して研究を行うために使用することができる、改良されたキャリアまたはトレイが必要とされている。
実施形態において、マルチウェル細胞培養器の個々のウェルを、取り外して交換すること、細胞培養培地または他の流体を収容するリザーバー内に導入すること、当該リザーバーから取り外すこと、ならびに表面上に位置することを可能にする、細胞培養トレイが提供される。本開示は、脱着可能な細胞培養ウェルを収容し支持するためのトレイであって、収容し支持する細胞培養ウェルを細胞培養培地のリザーバーの上に吊り下げて部分的に浸漬させることを可能にする足部を有する、トレイを提供する。当該トレイは、表面上に位置することもできる。当該トレイは、細胞培養ウェルが細胞培養培地のリザーバーに導入されるかまたは当該リザーバーから取り外されるとき、当該ウェルを個別にまたはグループとして操作することを可能にする。態様(1)において、本開示は、細胞培養培地を収容するためのリザーバープレートと、当該プレートの上部に適合するように構成され、上面およびデッキを形成する反対側の底面、ならびに当該デッキにおける複数のウェルアパーチャを有する、脱着可能なトレイと、当該ウェルアパーチャを通って適合し当該トレイのデッキの底面の下方へと延在するように構成された少なくとも1つの脱着可能なウェルであって、各ウェルが、細胞培養物質を収容するウェルエンクロージャおよびハンガーを有する、少なくとも1つの脱着可能なウェルと、を有する細胞培養ウェルトレイアセンブリであって、当該脱着可能なウェルがウェルアパーチャ内に挿入された場合、当該トレイのデッキと当該ウェルのハンガーとの間に空間が存在する、細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。実施形態において、各ウェルアパーチャが、デッキの上面から上方に延在する隆起したリムを含む、態様1に記載の当該細胞培養ウェルトレイアセンブリ。態様(2)において、本開示は、各ウェルアパーチャが、デッキの上面から上方に延在する隆起したリムを含む、態様1に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(3)において、本開示は、上記脱着可能なウェルが、当該ウェルの上記ハンガーと上記トレイの上記デッキとの間に空間を作り出すようにウェルアパーチャと嵌合する傾斜した側壁を含む、態様1または2に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(4)において、本開示は、各アパーチャがさらに座部を含み、上記脱着可能なウェルが、高さが上記座部の上部から上記デッキの上記上面までの深さより大きい、高い側壁を含む、態様1から3のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(5)において、本開示は、上記隆起したリムまたは上記ウェルまたはその両方が、上記アパーチャの適所において当該ウェルを解除可能にロックするロック特徴部を含む、態様2に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(6)において、本開示は、上記トレイがさらに、上記デッキにおける反対側の底面から延在する複数の足部を含み、当該足部は、マルチウェルプレートのウェルの間に挿入されるように構成される、態様1から5のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(7)において、本開示は、さらに、上記デッキに少なくとも1つのフィルアパーチャ(fill aperture)を含む、態様1から6のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(8)において、本開示は、上記ハンガーが、ロック特徴部を含む、態様7に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(9)において、本開示は、上記リザーバープレートが、当該トレイのデッキの底面の下方に延在する少なくとも1つのウェルの少なくとも一部を受け入れるように構成される、態様1から8のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(10)において、本開示は、上記リザーバープレートが、単一のリザーバーを含む、態様9に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(11)において、本開示は、上記リザーバープレートがマルチウェルプレートであり、当該マルチウェルプレートの各ウェルが、培地および細胞培養ウェルを個別に含むように構成される、態様9に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(12)において、本開示は、さらに、上記トレイに適合するように構成された蓋を含む、態様1から11のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(13)において、本開示は、上記トレイがさらに、上記デッキの周囲の周りに隆起したベゼルを含む、態様1から12のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(14)において、本開示は、上記脱着可能なウェルが、処理を含むウェル底部内側表面を含む、態様1から13のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。態様(15)において、本開示は、上記処理が、ガス浸透性膜、多孔性膜、細胞付着処理、細胞非結合性処理、マイクロキャビティ、または組み合わせを含む、態様14に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリを提供する。
本開示の主題のさらなる特徴および利点について、以下の詳細な説明において述べ、ある程度、その説明から当業者には容易に明らかとなるか、または以下の詳細な説明、特許請求の範囲、ならびに添付の図面を含め、本明細書において説明されるような本開示の主題を実践することによって認識されるであろう。
上述の全般的な説明および以下の詳細な説明は両方とも、本開示の主題の実施形態を提示し、権利請求される本開示の主題の性質および特徴を理解するための概説または枠組みを提供することを意図することは理解されるべきである。添付の図面は、本開示の主題のさらなる理解を提供するために含まれており、本明細書に組み込まれ、本明細書の一部をなすものである。図面は、本開示の主題の様々な実施形態を例示しており、説明と共に本開示の主題の原理および作用を説明する役割を果たす。さらに、図面および説明は、単に説明目的であることが意図され、いずれにおいても特許請求の範囲を限定することを意図しない。
本開示の特定の実施形態についての以下の詳細な説明は、以下の図面と併せて読むことにより最も良く理解することができ、なお、当該図面において、同じ構造は同じ参照番号によって示される。
トレイの実施形態の斜視図。 トレイおよびウェルの実施形態の側面斜視図。 ウェルの実施形態を示す。 トレイのウェルアパーチャに嵌合されたウェルの実施形態の横断面図。 トレイのウェルアパーチャに嵌合されたウェルの実施形態の横断面図。 トレイのウェルアパーチャに嵌合されたウェルの実施形態の横断面図。 トレイのウェルアパーチャに嵌合されたウェルの実施形態の横断面図。 トレイのウェルアパーチャに嵌合されたウェルの実施形態の横断面図。 実施形態における、ウェルアパーチャおよびウェル側壁におけるロック特徴部を示す斜視図。 脱着可能なウェルを収容するトレイの実施形態の斜視図。 実施形態による、蓋、脱着可能なウェル、トレイ、およびリザーバーの分解立体図。 実施形態による、2つの積み重ねられたトレイの側面図。 実施形態による、マルチウェルプレートリザーバーに挿入されたトレイの側面図。 実施形態による、蓋、ウェル、トレイ、およびマルチウェルプレートリザーバーの分解立体図における切断側面図。
ここで、いくつかの実施形態が添付の図面に示されている、本開示の主題の様々な実施形態についてより詳細に言及する。図面全体を通じて、同じまたは同様の部分を示すために、同じ参照番号が使用される。
実施形態において、本開示は、細胞培養リザーバーに脱着可能に挿入することができるトレイであって、個々の脱着可能なウェルを保持するトレイを提供する。トレイの存在は、重要な利点を提供する。例えば、個々のウェルは、トレイから取り外して再配置することができ、それにより、使用者は、個々のウェルに見出される試料を編成またはランダマイズすることができる。例えば、6ウェルのマルチウェルプレートリザーバーに嵌合された6ウェルのトレイ(ウェルが、行AおよびBならびに列1、2、および3において編成される)では、使用者は、さらなる試験のために試料を編成または再編成するために、ウェルA1の試料とウェルB3の試料を交換したいかもしれない。各ウェルは脱着可能なため、使用者は、同じトレイ内またはトレイ間において、試料を再編成することができる。さらに、トレイ自体がリザーバーから脱着可能であるため、使用者は、6つの試料を収容する6ウェルのトレイを取り外すことができ、6つ全ての試料を、異なる培地または異なる実験条件を含み得る別のリザーバーに位置することができる。当然のことながら、当該トレイは、単一のウェルまたは複数のウェルを収容することができる。例えば、当該トレイは、1、2、3、4、5、6、12、24、96、384、または1536のウェルを収容することができ、各ウェルは、個別に、当該トレイに挿入または当該トレイから取り外すことができる。実施形態において、当該脱着可能なトレイおよび当該脱着可能なウェルは、以下において説明されるような、トレイへのウェルの容易な取り外しおよび挿入を可能にする特徴部を有する。実施形態において、当該トレイおよび当該ウェルは、鉗子などの道具を使用してウェルを把持する能力を使用者に提供するために、上面またはトレイのデッキとウェルのリムまたはフランジまたはハンガーとの間に空間を提供する特徴部を有する。
図1は、上面11と、デッキ13を形成する反対側の底面12(図1には示されないが、例えば、図6を参照されたい)と、デッキ13の周囲において上面11から延在する隆起したベゼル15とを有するトレイ10の実施形態の斜視図である。実施形態において、当該隆起したベゼル15は、トレイに剛性および構造を提供し、さらに、デッキの周囲に、ロボットプレートハンドラーがトレイ10を把持し操作することを可能にするための表面積を提供する。実施形態において、当該隆起したベゼル15は、デッキを完全に包囲してもよく(図1に示されるように)、または実施形態において、当該隆起したベゼル15は、デッキ13の2つの側面のみに存在してもよく、またはデッキ13の周囲の周りにおいて不連続であってもよい。隆起したベゼル15は、ノッチ50を有し得る。図1には、複数のウェルアパーチャ20も示されている。実施形態において、トレイ10は、1つまたは複数のウェルアパーチャ20を有し得る。実施形態において、当該トレイ10は、標準的な1、2、3、6、12、24、96、384、または1536ウェルのマルチウェルプレートと嵌合する、1、2、3、6、12、24、96、384、または1536のウェルアパーチャ20を有し得る。当該ウェルアパーチャ20は、ウェル22を収容または保持するように構成される(例えば、図2または図3Aから3Eを参照されたい)。実施形態において、各ウェル22は、細胞培養物質106を収容するためのウェルエンクロージャ19およびハンガー40を有する。ウェル22は、ウェルアパーチャ20内に位置することができる。実施形態において、ウェル22は、トレイ10から脱着可能である。実施形態において、当該ウェル22は、ウェルアパーチャ20と嵌合し、当該ウェルアパーチャ20によってトレイ10における適所に保持され、吊り下げられ、細胞培養培地リザーバー35に収容される細胞培養培地中へと下げられるかまたは細胞培養培地中に位置される(例えば、図6および図8を参照されたい)。実施形態において、細胞培養培地リザーバー35は、複数のリザーバーを有するマルチウェルプレート、または単一のリザーバーを有する単一リザーバープレートであり得る。実施形態において、当該脱着可能なトレイおよび当該脱着可能なウェルは、以下において説明されるような、トレイへのウェルの容易な取り外しおよび挿入を可能にする特徴部を有する。
図1には、隆起したベゼル15におけるノッチ50も示されている。ノッチ50は、実施形態において、存在し得るかまたは存在し得ない。ノッチ50は、蓋の内側表面上または表面内に存在し得る小さなリブまたはガセットに対応し、トレイ10に対する当該蓋の側方の動きを減じるように、当該蓋がトレイ10の適所へと適合することを可能にする。さらに、ノッチ50は、ウェル22がトレイ10の適所にあるときに、蓋をウェル22の上部により近くに位置することを可能にし得る。これは、ウェル22からの蒸発を減じるように作用し得、ならびにウェル22の内容物の汚染の機会が生じるのを減らし得る。
ここで図2Aを参照すると、トレイ10の実施形態の側面斜視図が提供されている。図2Aは、トレイ10の1つのウェルアパーチャ20内に挿入された、ハンガー40を有するウェル22と、トレイ10に挿入される準備のできている第二の別個のウェル22とを伴うトレイ10を示している。当該別個のウェル22は、図2Aに示されるように、ハンガー40と、ウェル外側表面24とを有する。当該第二の別個のウェル22は、閉じたウェル底端部23が下方向を向くように方向付けすることができ、次いで、ウェルアパーチャ20内に位置することができる。図2Aには、トレイ10の足部25と、隆起したリム21を有するウェルアパーチャ20も示されている。ウェルアパーチャ20も示されている。
図2Bには、上部開口部26、閉じた底端部23、およびウェルエンクロージャ19を形成する少なくとも1つの側壁28、を有するウェル22が示されている。図2Bのウェル22は、外側表面24および内側表面27を有する。実施形態において、ウェルは、ハンガー40を有する。ウェル22は、任意の形状を有してもよい。例えば、ウェル22は、正方形、逆ピラミッド形、円錐形、正方形、台形、六角形、八角形、または任意の形状であってもよい。ウェル22は、例えば、Corning Incorporated社から入手可能なTranswell(登録商標)インサートであり得る。内側表面27は、面取りされていてもよく、あるいは丸みを帯びたまたは先細りの上部開口部26を有していてもよい。ウェル22は、ウェル22の上部開口部からの滑らかな連続した内側表面27を有し得るか、または当該ウェル内壁27は、不連続な形状を有し得る。ウェル22は、ウェル側面開口部29を有し得る。実施形態において、ウェル側面開口部29は、リザーバー(リザーバーが、マルチウェルプレートのウェルであるか、単一リザーバーであるかにかかわりなく)または脱着可能なウェル22の下方のマルチウェルプレートのウェルへのアクセスを可能にするために提供される。例えば、ウェル側面開口部29を通ってウェル内に挿入されたピペットの先端は、リザーバー35に液体を加えるためまたは液体を除去するために、ウェル22を収容するリザーバー35まで延び得る。
ウェルは、底部内側表面46を有する底部23を有する。底部表面46は、平坦であってもよく、または形状化されていてもよい。例えば、底部表面46は、丸み状、円錐形、逆ピラミッド形、先細り、または培養された細胞を支持するのに好適な任意の他の形状であってもよい。ウェルの側壁24は、真っ直ぐであっても傾斜していてもよい。ウェル底部内側表面46は、処理を有し得る。例えば、ウェル底部内側表面46は、ガス浸透性材料、液体不浸透性材料、ガス浸透性および液体浸透性材料、トラックエッチド材料、または多孔質材料から形成され得る。底部内側表面46は、特定の細胞の成長を促進する構造を有していてもよい。例えば、ウェル底部内側表面46は、付着細胞がウェル底部46に結合するように処理され得る(細胞付着処理または細胞結合処理)。細胞付着処理の例としては、プラズマ処理、細胞外マトリックス材料などの細胞結合材料によるコーティング、Corning Incorporated社から入手可能なSynthemax(登録商標)などの合成材料によるコーティング、または他の処理が挙げられる。または、ウェル底部23は、細胞がウェル底部の表面に付かないように非結合性コーティングで処理してもよい(細胞非結合処理)。細胞非結合処理の例としては、Corning Incorporated社から入手可能な超低接着材料ULAによるウェル底部の表面のコーティングが挙げられる。または、ウェル底部内側表面46は、スフェロイドまたは組織または組織様多細胞群または細胞塊を形成するために、クラスターまたは細胞としての細胞の増殖を促進するためのマイクロキャビティを有していてもよい。マイクロキャビティは、例えば、米国特許出願公開第2014/0322806号において、凹型の弓形表面として記載されており、なお、当該米国特許出願公開は、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。または、ウェル底部表面46は、これらの処理の任意の組み合わせを有していてもよい。実施形態において、ウェル底部表面46は、ガス透過性膜、多孔性膜、細胞付着処理、細胞非結合処理、マイクロキャビティ、または組み合わせを有し得る。
実施形態において、ウェル22は、ハンガー40を有する(例えば、図2を参照されたい)。ハンガー40は、例えば、ウェル22の外側表面24から延びるフランジまたは環状リングなどの構造体である。ハンガー40は、ウェル開口部26を完全に囲むように連続していてもよく、またはハンガー40は、不連続であってもよく、ウェルの上部からの突起部を形成する構造を有するが、完全なリングまたは環状構造体ではない。実施形態において、当該脱着可能なウェル22が、ウェルアパーチャ20に挿入される場合、使用者がトレイ10のデッキ13とハンガー40との間に道具、例えば、鉗子など、を挿入できるように、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101が存在し、それにより、ハンガー40は、使用者によって容易に把持され、ならびにハンガー40は、容易にウェルアパーチャ20に挿入、除去、調節、または操作することができる。トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間のこの空間101は、図3Aから3Eにおいて説明されるように、いくつかの方法において達成することができる。
図3Aから3Eは、トレイ10のデッキ13と脱着可能なウェル22のハンガー40との間に空間を提供する特徴部の様々な実施形態を示している。実施形態において、図3Aに示されるように、各ウェルアパーチャ20の細胞培養ウェルトレイアセンブリは、デッキ13の上面11から上方に延びる隆起したリム21を有する。この実施形態において、ウェル22のハンガー40は、ウェル22がウェルアパーチャ20内に位置されたときにウェル22のハンガー40がウェルアパーチャの当該隆起したリム21の上に載るように、ウェルアパーチャ20の当該隆起したリム21の上面16と係合するように構造化される。ウェルアパーチャ20の当該隆起したリム21(例えば、図2にも示される)は、脱着可能なウェル22とトレイ10のデッキ13との間に空間101を提供するための位置決め要素としての役割を果たす。この空間101は、使用者が鉗子またはピンセットをトレイ10のデッキ13と脱着可能なウェル22との間、または脱着可能なウェル22のハンガー40との間に挿入して、鉗子またはピンセットでハンガー40を把持し、個別のウェル22を取り出すことを可能にする。実施形態において、ウェル22のハンガー40が、ウェルアパーチャ20の当該隆起したリム21の上に載る場合、ハンガー40の底部とトレイ10のデッキ13との間に十分な空間が存在し、それにより、使用者は、鉗子、ピンセット、または手の指をウェル22のハンガー40の下に挿入することができ、ウェルを操作またはトレイ10から取り外すことができる。別の言い方をすると、ハンガー40は、トレイ10のデッキ13に対して同一平面上に載っておらず、トレイ10のデッキ13から持ち上がっているか、または当該ハンガー40は、使用者がハンガー40によってウェル22にアクセスまたは把持することを可能にする空間101を有するため、使用者は、ウェル22のハンガー40を把持することができる。次いで、ウェル22を、別のウェルアパーチャ20へと移動させることができ、またはトレイ10から取り出すことができ、さもなければ操作することができる。ウェルアパーチャ20の隆起したリム21を有するトレイ10は、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために単独で存在し得るか、あるいはトレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために、図3Bに示されるようなウェル22における傾斜した側壁31、図3Cに示されるようなカラー45、図3Bに示されるような傾斜した側壁31、または図3Dおよび3Eに示されるようなウェルアパーチャ20における座部105、あるいはこれらの特徴部の組み合わせと併用して使用され得る。
追加の実施形態において、図3Bに示されるように、トレイ10のウェルアパーチャ20は、傾斜した側壁31を有する。ウェルアパーチャ20の当該傾斜した側壁31は、ウェル22の側壁28と嵌合し、それにより、ウェル上部開口部26は、デッキ13の上面11の上方へと延び、ウェル22のハンガー40とトレイ10のデッキ13との間に空間を作り出す。図3Bに示されるように、ウェル22は、面取りされたまたは傾斜した側壁28も有し得る。傾斜したまたは面取りされた側壁28を有するウェル22が、ウェルアパーチャ20の傾斜した側壁31内に位置される場合、当該面取りされたウェル壁部28の直径が、傾斜したウェル22がウェルアパーチャ20内へとさらに入り込むのを防ぐまで、ウェル22は、ウェルアパーチャ20内へと入り込む。この実施形態において、ウェル22の当該面取りされたまたは傾斜した側壁28は、ハンガー40がトレイ10のデッキ13に対して同一平面上に載るのを妨げ、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供する。実施形態において、ウェル22の側壁28は、傾斜していてもよくまたは傾斜していなくてもよい。どちらの実施形態においても、空間101は、脱着可能なウェル22がウェルアパーチャ20内に挿入されるときに、デッキ13の上面11とウェル22のハンガー40との間に提供される。実施形態において、ウェル22の傾斜した側壁28は、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間を提供するために、単独において使用され得る。追加の実施形態において、傾斜した側壁31を有するウェルアパーチャ20は、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために、ウェルアパーチャ20の隆起したリム21を有するトレイ10と組み合わせられ得るか、または図3Cに示されるようなカラー45、図3Bに示されるような傾斜した側壁31、または図3Dおよび3Eに示されるようなウェルアパーチャ20における座部105、またはこれらの特徴部の組み合わせと併用して使用され得る。
追加の実施形態において、図3Cに示されるように、ウェルは、ハンガー40の下にカラー45または空間を有し得る。この実施形態において、脱着可能なウェル22がウェルアパーチャ20内に挿入される場合、カラー45は、当該ウェルアパーチャに対して同一平面上に載り、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供する。図3Cに示されるようなカラー45を有するウェルは、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために、単独において使用され得る。または、実施形態において、カラー45は、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために、図3Aに示されるような隆起したリム21を有するウェルアパーチャ20、図3Bに示されるような傾斜したウェルアパーチャ、図3Bに示されるような傾斜した側壁31、または図3Dおよび3Eに示されるようなウェルアパーチャ20における座部105、またはこれらの特徴部との組み合わせと併用して用いられ得る。
追加の実施形態において、図3Dに示されるように、ウェルアパーチャ20は、座部105を有し、これは、アパーチャ20の壁部において当該アパーチャに存在する凹部またはリッジまたは棚部であり、脱着可能なウェル22を収容するように構成される。この実施形態において、各ウェルアパーチャ20は座部105を含み、脱着可能なウェル22は、高さが座部105の深さ110より大きいカラー45を有する。座部105の深さ110は、座部105の上部からデッキ13の上面11までにおいて測定することができる。または、図3Eに示されるように、座部105は、ウェルアパーチャ20における減じられた直径の開口部を提供し得、これは、ウェル22の傾斜した側壁28が座部105に載るのを可能にし、トレイ10のデッキ13の上面11の上方にウェルのハンガー40を提示し、それにより空間101を形成する。座部105は、脱着可能なウェル22に対して障壁を提供し、それにより、脱着可能なウェル22の側壁28は、座部105と嵌合し、脱着可能なウェル22が適切で許容可能な方式においてウェルアパーチャ20内に位置され収容されることを確保する。例えば、座部105は、脱着可能なウェル22が載るリムを提供し得、カラー45(カラー45は、ウェル22の深さより大きい高さを有する)がトレイ10のデッキ13の上面11の上方に延びるのを可能にし、トレイ10のデッキ13の上面11の上方にウェル22のハンガー40を提示し、それにより、空間101を提供する。または、座部105は、ウェルアパーチャ20における減じられた直径の開口部を提供し得、これは、ウェルの傾斜したまたは面取りされた側壁28が座部105に載るのを可能にし、トレイ10のデッキ13の上面11の上方にウェルのハンガー40を提示し、それにより、空間101を提供する。トレイ10のデッキ13の上面11の上方にウェルのハンガー40を提示することによって、デッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101が提供され、それにより、使用者がデッキ13とウェル22のハンガー40との間に鉗子またはピンセットを挿入し、ハンガー40を把持し、ならびに当該脱着可能なウェル22を取り外すことが可能となる。この実施形態において、各アパーチャは、座部105を有し、ならびに脱着可能なウェル22は、高さが座部105の深さより大きいカラー45、または脱着可能なウェル22がトレイ10のウェルアパーチャ20内に位置されるように当該座部45と嵌合する傾斜した側壁104を有する。この実施形態において、座部105は、説明したように、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために使用され得る。追加の実施形態において、座部105は、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101を提供するために、図3Cに示されるようなカラー45を有するウェル22と組み合わせて、図3Aに示されるような隆起したリム21を有するウェルアパーチャ20と組み合わせて、図3Bに示されるようなウェル22の傾斜した側壁31と組み合わせて、または図3Bに示されるような傾斜したウェル側壁28と組み合わせて、またはこれらの特徴部の2つ以上と組み合わせて提供され得る。
実施形態において、ウェルアパーチャ20内に位置されたウェル22は、依然として、ウェルアパーチャ20に対して動かすことができる。例えば、実施形態において、ウェルアパーチャ20内に位置されたウェル22は、ウェルアパーチャ20(およびトレイ10)に対して自由に回転することができ、ならびに、ウェルアパーチャ20(またはトレイ10)に対して上下に動かすことができる。例えば、ウェル22がウェルアパーチャ20内に位置され、トレイ10が細胞培養培地リザーバー35に載せられた場合(例えば、図6および図7を参照されたい)、ウェル22はウェルアパーチャ20内に位置されたまま、ウェルは当該細胞培養培地リザーバー35中に沈むため、ウェル22はゆっくりと培地で満たされ得る。これは、ウェル22の内容物と細胞培養培地リザーバー35の内容物との平衡を保つことを可能にする。ウェル22は、トレイ10内に位置されるとき、既に細胞および/または細胞培養培地を収容し得る。場合により、既に細胞および/または細胞培養培地を収容しているウェル22は、トレイ10のアパーチャ20内に導入されるときに、各ウェルに異なる量の液体を有し得るかもしれない。ウェル22がウェルアパーチャ20内において移動するのを可能にすることによって、異なる量の液体を収容するそれぞれのウェルは、ウェルアパーチャ20を通して位置することができ、細胞培養培地を収容するリザーバー35内に位置され得、それぞれのウェルは、当該リザーバー35内の培地のレベルと平衡を保つことができる。このように、各ウェル22は、トレイ10に収容され得、各ウェルアパーチャ20内に存在し得るが、各ウェルは、当該トレイのデッキ13に対して異なる高さを有し得る。図3Aから3Eに示されるウェル22は、側面開口部29を有し得る(図示されないが、例えば、図5、図2B、または図6を参照されたい)。
図4に示されるように、追加の実施形態において、ウェルアパーチャ20あるいはデッキ13およびウェルアパーチャ20は、ウェル22がトレイ10に対して動かないように、ウェル22がトレイ10のウェルアパーチャ20における適所に脱着可能にロックされることを可能にするための、相補的ロック特徴部121、122を有し得る。図4に示されるように、傾斜したウェルアパーチャ20におけるロック特徴部121は、ウェル22の傾斜した側壁28におけるロック特徴部122と係合するように構成され得る(図3Bを参照されたい)。相補的ロック特徴部(121、122)は、図3Aから3Eに示される実施形態のいずれにおいても提供され得る。ウェル22を適所にロックすることにより、ウェル側面開口部29が全て同じ場所にあるように、ウェル側面開口部29を有するウェル22がウェルアパーチャ20内において方向付けされることを確保することが可能である。ウェル22が、ロックされる位置を向いている場合、使用者は、全てが同じ方向に揃えられているウェル側面開口部29を通してリザーバーにアクセスすることができる。実施形態において、ロック機構の使用によるウェル22のこの方向付けは、使用者が、単一のピペットの先端または複数の先端のピペッターを使用して手作業によって、またはロボットハンドリングを使用して、より予想通りにならびに迅速にリザーバーの内容物にアクセスし操作することを可能にし得る。当業者によって理解されるであろうように、ロック特徴部(121、122)は、隆起したリム21上、座部105上、または傾斜した壁部31上、またはウェルアパーチャ20付近に存し得る。さらに、雄型ロック特徴部121は、ウェルアパーチャにおいて図4に示されており、雌型ロック特徴部122は、ウェルの側壁に示されているが、当該相補的ロック特徴部(121、122)は、どちらの場所にも位置され得る。実施形態において、ハンガーは、ウェルアパーチャまたはウェルの側壁の相補的ロック特徴部に対してロックし得るロック特徴部(121、122)を含んでいてもよい。
図5は、脱着可能なウェル22を収容するトレイ10の実施形態の斜視図である。図5には、当該リザーバープレート35の上部に適合するように構成され、上面11と、デッキ13を形成する反対側の底面と、当該デッキ13における複数のウェルアパーチャ20とを有し、ウェルアパーチャ20を通って適合しトレイ10のデッキ13の底面の下方へと延びるように構成された複数の脱着可能なウェル22であって、各ウェルが、細胞培養物質を収容するウェルエンクロージャ19およびハンガー40を有する、複数の脱着可能なウェル22を収容する、細胞培養ウェルトレイ10が示されており、この場合、脱着可能なウェル22がウェルアパーチャ20内に挿入される場合、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101が存在する。
図5はさらに、脱着可能なウェル22を同じ方向付けにおいてトレイ10内に位置することができることも示している。すなわち、側面開口部29を有するウェル22は、側面開口部29が同じ方向を向いて揃えられるように、トレイ10内に位置することができる。当該リザーバーが、各ウェル22がマルチウェルプレートの単一のウェル内に挿入されるような、マルチウェルプレートの形態の場合、当該マルチウェルプレートの単一のウェルのリザーバーは、ウェル側面開口部29を通してアクセスされる。側面開口部29が同じ方向を向くようにウェル22が揃えられる場合、ウェル22の間において良好な整列を必要とするロボットピペッティングが可能である。ウェル22がトレイ10の適所にロックされ、それにより、側面開口部29が、全て同じ方向を向けられ、適所にロックされるように、ロック特徴部(121、122)は、各アパーチャ20内および各ウェル22上の同じ場所に位置され得る。
図5には、フィルアパーチャ(fill aperture)30も示されている。フィルアパーチャ30は、トレイ10のデッキ13を貫通するアパーチャであり、リザーバーが単一のリザーバーである場合、ウェルの下方のリザーバーの内容物にアクセスするために当該フィルアパーチャ30を通ってピペットを挿入することを可能にする。実施形態において、当該細胞培養ウェルトレイは、デッキに少なくとも1つのフィルアパーチャを有する。
図6は、実施形態による、ウェルを収容するトレイおよびリザーバーの分解立体図である。図6は、細胞培養培地を収容するためのマルチウェルプレート35、上面11とデッキ13を形成する反対側の底面とデッキ13における複数のウェルアパーチャ20とを有し、プレート35の上部に適合するように構成された脱着可能なトレイ10、ならびにウェルアパーチャ20を通って適合し、トレイ10のデッキ13の底面の下方へと延びるように構成された少なくとも1つの脱着可能なウェル22であって、各ウェルが、細胞培養物質を収容するウェルエンクロージャ19およびハンガー40を有する、少なくとも1つの脱着可能なウェル22、を有する細胞培養ウェルトレイアセンブリを示しており、この場合、脱着可能なウェル22がウェルアパーチャ20内に挿入される場合、トレイ10のデッキ13とウェル22のハンガー40との間に空間101が存在する。図6には、各脱着可能なウェル22を収容するための別々のウェルを有するリザーバープレート35を提供するマルチウェルプレートを伴うアセンブリが示されているが、当該リザーバーは、ウェルのために単一の共有されたリザーバーを有する単一リザーバープレート35であってもよい。この実施形態において、当該リザーバープレートは、マルチウェルプレートであり、当該マルチウェルプレートの各ウェルは、個別に培地および細胞培養ウェルを収容するように構成される。リザーバープレート35は、トレイ10のデッキ13の底面の下方に延びる少なくとも1つのウェル22の少なくとも一部を受け入れるように構成される。図6には、トレイ上に適合するように構成された蓋200も示されている。トレイ10は、マルチウェルリザーバー35のウェルの間に適合してリザーバー35においてトレイを支持するように構成された足部25を有する。図7Bを参照されたい。
図7Aに示されるように、実施形態において、トレイ10は、デッキ13における反対側の底面12から延在する複数の足部25を有し、この場合、当該足部25は、保管および出荷のために別のトレイの足部25の内側に積み重なるように(図7Aに示されるように)、またはマルチウェルプレートリザーバーのウェルの間に挿入するように(図7Bに示されるように)、または図8に示されるように、トレイが単一のリザーバー内に位置される場合にトレイを支持するように、構成される。図8は、単一のリザーバー35における、脱着可能なウェル22を収容するトレイ10の実施形態の切断側面図である。図8には、蓋200も示されている。足部25は、ウェルの底部がリザーバー35の底部に接触することなく、ウェル22を収容するトレイ10を、細胞培養培地のリザーバー35内に位置することを可能にする。これは、ウェル底部23の底面46を細胞培養培地に浸漬することを可能にする。足部25はさらに、トレイ10をリザーバー35、例えば、単一のリザーバーなど、から取り外し(図8に示されるように)、ウェル22の底部と表面との間の接触なしに当該表面に載ることを可能にする。これは、汚染のリスクを減らす。
本開示のさらなる態様において、本明細書において開示される任意の2つ以上の態様、実施形態、または特徴は、さらなる利点のために組み合わせてもよいことは特に想到される。
本明細書において使用される場合、単数形「a」、「an」および「the」は、文脈上明らかにそうでないことが示されていない限り、複数の指示対象を包含する。したがって、例えば、「ノッチ」に対する言及は、そうでないことが明確に示されていない限り、1つまたは複数のそのような「ノッチ」を含む例を包含する。
用語「含む(include)」は、包含するがそれらに限定されないこと、すなわち、包括的であって排他的ではないことを意味する。
「任意選択の」または「任意選択により」は、その後に説明される事象、状況、または構成要素が、起こり得るかまたは起こり得ないこと、ならびに当該説明が、当該事象、状況、または構成要素が生じる場合と生じない場合とを含むことを意味する。
範囲は、本明細書において、「約」1つの特定の値から、および/または、「約」別の特定値まで、と表現することができる。そのような範囲を表現する場合、いくつかの例は、一方の特定の値から、および/または、他方の特定の値までを含む。同様に、値が、先行詞「約」を用いることによって概算値として表現される場合、当該特定の値は別の態様を形成することは理解されるであろう。範囲の各々の終点は、他方の終点と関連して、および他方の終点とは独立して、の両方において重要であることがさらに理解されるであろう。
特に明記されない限り、本明細書において説明されるいずれの方法も、そのステップを特定の順序で実施することを必要とすると解釈されることを全く意図していない。したがって、方法のクレームが、そのステップが従うべき順序を実際には列挙していない場合、あるいは、ステップが特定の順序に限定されるべきであると特許請求の範囲または説明において特に明記されていない場合、任意の特定の順序も推察されることは意図されない。いずれか1つの請求項において列挙された任意の単一のまたは複数の特徴または態様は、任意の他の請求項において列挙された任意の他の特徴または態様と組み合わせるかまたは順序を変えることができる。
本明細書における列挙は、特定の方式において機能するように「構成される」もしくは「適合される」構成要素を意味することも留意されたい。これに関して、そのような構成要素は、特定の特性を体現するように、または特定の方式において機能するように、「構成され」もしくは「適合され」、その場合、そのような列挙は、意図される使用の列挙とは対照的に、構造的な列挙である。より詳細には、構成要素が「構成される」もしくは「適合される」様式に対する本明細書における言及は、当該構成要素の既存の物理条件を意味し、そのため、当該要素の構造的特徴の明確な列挙として解釈すべきである。
特定の実施形態の様々な特徴、要素、またはステップが、移行句「を含む(comprising)」を使用して開示され得る場合、同時に、移行句「からなる(consisting)」または「から実質的になる(consisting essentially of)」を使用して記述され得る実施形態を含めた代替の実施形態が含蓄されることは理解されるべきである。例えば、ポリプロピレンを含むマイクロプレートに含蓄される代替の実施形態は、マイクロプレートがポリプロピレンからなる実施形態と、マイクロプレートがポリプロピレンから実質的になる実施形態とを包含する。
本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく、本発明の技術に様々な変更および変形を行うことができることは、当業者に明らかであろう。本発明の技術の趣旨および本質が組み込まれた、開示された実施形態の変更、組み合わせ、部分的組み合わせ、および変形は、当業者が気付き得るものであるので、本発明の技術は、添付の特許請求の範囲の範囲内の全てとその同等物を包含すると解釈されるべきである。
以下、本発明の好ましい実施形態を項分け記載する。
実施形態1
リザーバープレートと、
当該リザーバープレートの上部に適合するように構成され、上面とデッキを形成する反対側の底面と当該デッキにおける複数のウェルアパーチャとを有する、脱着可能なトレイと、
当該ウェルアパーチャに適合し当該トレイのデッキの底面の下方へと延在するように構成された少なくとも1つの脱着可能なウェルであって、各ウェルが、細胞培養物質を収容するウェルエンクロージャおよびハンガーを有する、少なくとも1つの脱着可能なウェルと、
を含み、
当該脱着可能なウェルがウェルアパーチャ内に挿入された場合、当該トレイの当該デッキと当該ウェルのハンガーとの間に空間が存在する、
細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態2
各ウェルアパーチャが、上記デッキの上記上面から上方に延びる隆起したリムを含む、実施形態1に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態3
上記脱着可能なウェルが、当該ウェルの上記ハンガーと上記トレイの上記デッキとの間に空間を作り出すようにウェルアパーチャと嵌合する傾斜した側壁を含む、実施形態1または2に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態4
各アパーチャがさらに座部を含み、上記脱着可能なウェルが、高さが当該座部の上部から上記デッキの上記上面までの深さより大きい、高い側壁を含む、実施形態1から3のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態5
上記隆起したリムおよび上記ウェルの少なくとも一方が、上記ウェルアパーチャにおいて適所に当該ウェルを解除可能にロックするためのロック特徴部を含む、実施形態2に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態6
上記トレイがさらに、上記デッキの上記底面から延在する複数の足部であってマルチウェルプレートのウェルの間に挿入されるように構成される足部を含む、実施形態1から5のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態7
さらに、上記デッキに少なくとも1つのフィルアパーチャを含む、実施形態1から6のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態8
上記ハンガーが、ロック特徴部を含む、実施形態7に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態9
上記リザーバープレートが、当該トレイのデッキの底面の下方に延在する少なくとも1つのウェルの少なくとも一部を受け入れるように構成される、実施形態1から8のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態10
上記リザーバープレートが、単一のリザーバーを含む、実施形態9に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態11
上記リザーバープレートがマルチウェルプレートであり、当該マルチウェルプレートの各ウェルが、培地および細胞培養ウェルを個別に含むように構成される、実施形態9に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態12
さらに、上記トレイに適合するように構成された蓋を含む、実施形態1から11のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態13
上記トレイがさらに、上記デッキの周囲の周りに隆起したベゼルを含む、実施形態1から12のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態14
上記脱着可能なウェルが、処理を含むウェル底部内側表面を含む、実施形態1から13のいずれか1つに記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
実施形態15
上記処理が、ガス浸透性膜、多孔性膜、細胞付着処理、細胞非結合性処理、マイクロキャビティ、または組み合わせを含む、実施形態14に記載の細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
10 トレイ
11 上面
12 底面
13 デッキ
15 ベゼル
19 ウェルエンクロージャ
20 ウェルアパーチャ
21 リム
22 ウェル
23 底部
24 外側表面
25 足部
26 上部開口部
27 内側表面
28、31、104 側壁
29 側面開口部
30 フィルアパーチャ
35 リザーバー
40 ハンガー
45 カラー
46 底部内側表面
50 ノッチ
101 空間
105 座部
106 細胞培養物質
110 深さ
121 雄型ロック特徴部
122 雌型ロック特徴部
200 蓋

Claims (1)

  1. 細胞培養培地を収容するためのリザーバープレートであって、単一のリザーバーである、リザーバープレーと、
    該プレートの上部に適合するように構成され、上面とデッキを形成する反対側の底面と、該デッキにおける複数のウェルアパーチャとを有する、脱着可能なトレイと、
    該ウェルアパーチャを通って適合し該トレイのデッキの底面の下方へと延在するように構成された少なくとも1つの脱着可能なウェルであって、各ウェルが、細胞培養物質を収容するウェルエンクロージャおよびハンガーを有する、少なくとも1つの脱着可能なウェルと、
    を含み、
    該ハンガーが、上面および底面を有し、
    該脱着可能なウェルがウェルアパーチャ内に挿入された場合、該ハンガーの該底面が、該トレイの該デッキの該上面の上方に持ち上げられるように、該トレイの該デッキの該上面と該ウェルの該ハンガーの該底面との間において該トレイの該デッキの上方に空間が存在する、
    細胞培養ウェルトレイアセンブリ。
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