JP2022053321A - Culture solution of yeast, external skin preparation containing the culture solution, skin cosmetics containing the external skin preparation, and method for producing the culture solution - Google Patents

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Abstract

To maintain or improve skin conditions, e.g. by improving the texture of skin or moisturizing the skin.SOLUTION: A culture solution, in which yeast has been grown in a medium containing white birch sap, is used to maintain or improve skin conditions.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、皮膚外用剤や皮膚化粧料として使用できる酵母菌の培養液、当該培養液を含む皮膚外用剤、当該培養液を含む皮膚化粧料及び上記培養液の製造方法に関する。 The present invention relates to a culture solution of yeast that can be used as an external preparation for skin or a skin cosmetic, an external preparation for skin containing the culture solution, a skin cosmetic containing the culture solution, and a method for producing the above culture solution.

加齢(エイジング)ケアや加齢防止は、女性、男性を問わず関心が高い事項であり、化粧料や食料品等、それ専用の様々な商品が流通している。加齢とともに皮膚における皮脂や水分の量が減少すると、皮膚表面の角質層の保湿力が失われ、乾燥などによる小ジワや肌のかさつきが生じやすくなるといわれている。また、冷暖房の影響により、肌は一年中乾燥に晒されており、保湿効果やエイジングケア効果の高い皮膚外用剤や皮膚化粧料への関心が高まっている。 Aging care and anti-aging are matters of great interest to both women and men, and various products dedicated to them such as cosmetics and foodstuffs are on the market. It is said that when the amount of sebum and water in the skin decreases with aging, the moisturizing power of the stratum corneum on the skin surface is lost, and fine wrinkles and dry skin are likely to occur. In addition, due to the influence of air conditioning, the skin is exposed to dryness all year round, and there is increasing interest in skin external preparations and skin cosmetics that have high moisturizing and aging care effects.

従来、皮膚化粧料では、グリセリン等の多価アルコール類、ヒアルロン酸、セラミド、多糖類、酵母エキス、酵母培養液、ワセリン、ホホバオイルなどの保湿剤や油成分を配合することにより肌の保湿効果を高め、艶やかな肌にすることが多く試みられてきた。また皮膚外用剤においても、主薬以外の基剤として白色ワセリン、流動パラフィン、ミリスチン酸イソプロピル、ミツロウ、ラノリン、ステアリン酸等の油性成分が含まれている。皮膚外用剤における基剤は、主剤の薬効を高めるためだけではなく、皮膚の保護効果、保湿効果にも寄与している。 Conventionally, skin cosmetics have a moisturizing effect on the skin by blending polyhydric alcohols such as glycerin, hyaluronic acid, ceramide, polysaccharides, yeast extract, yeast culture solution, moisturizers such as jojoba oil, and oil components. Many attempts have been made to improve the skin's appearance and make the skin glossy. The external skin preparation also contains oily components such as white petrolatum, liquid paraffin, isopropyl myristate, beeswax, lanolin, and stearic acid as a base other than the main ingredient. The base for external skin preparations not only enhances the medicinal effect of the main agent, but also contributes to the protective effect and moisturizing effect of the skin.

具体的に、皮膚化粧料のなかでもエイジングケア化粧品については、加齢にともなう劣化した皮膚状態のシワ、くすみ、弛みなどの改善について、多方面の角度からアンチエイジング用の組成物が多数提案されている(特許文献1~6参照)。 Specifically, among skin cosmetics, for aging care cosmetics, many anti-aging compositions have been proposed from various angles for improving wrinkles, dullness, slack, etc. of the skin condition deteriorated with aging. (See Patent Documents 1 to 6).

ところで、シラカンバ(白樺)は、東アジアの温帯北部が原産とされ、主として北海道などの冷涼で自然豊かな地域に多く生育しており、以下に記載の通り、これまでにも樹皮の抽出物や樹液の濾過物などが化粧品用の原料として提案されている。例えば特許文献7及び特許文献8には、白樺の樹皮を用いてエタノールなどの親水性溶媒で抽出された白樺エキスについて、老化に起因する動脈硬化や白内障の改善効果や美白効果を発揮する美白組成物が示されている。また特許文献9では、白樺樹液成分を含有するジェル微粒子を含む調合化粧料類が、特許文献10には白樺樹液を成分として含む入浴剤、足浴剤がそれぞれ提案されている。 By the way, white birch is native to the temperate northern part of East Asia, and grows mainly in cool and natural areas such as Hokkaido. Filters of sap and the like have been proposed as raw materials for cosmetics. For example, in Patent Document 7 and Patent Document 8, a whitening composition that exhibits an effect of improving arteriosclerosis and cataract caused by aging and a whitening effect on a birch extract extracted from a birch bark with a hydrophilic solvent such as ethanol. The thing is shown. Further, Patent Document 9 proposes a blended cosmetic containing gel fine particles containing a birch sap component, and Patent Document 10 proposes a bath agent and a foot bath agent containing birch sap as a component.

一方、酵母の培養液や培養した酵母から抽出したエキスを皮膚外用剤や皮膚化粧料に用いる事例については 、数多くの先行技術があり、一般消費者向けに数多くの配合製品が販売されている。例えば、特許文献11には、化粧料用の酵母抽出物であって、酵母をグルタミン酸、システイン及びグリシンの含有量の多い培地で培養し、菌体中の酵素或いはプロテアーゼで消化を行わずに多価アルコールで抽出した酵母抽出物が開示されている。特許文献12には、菌体内に亜鉛化合物を高濃度に蓄積した酵母菌体抽出液を利用することによるヒートショックプロテイン70産生誘導効果を有する組成物が開示されている。特許文献13には、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸誘導体およびそれらの塩からなる群より選択されるヒアルロン酸類を含有する培地で酵母を培養した培養物及びそれを含む化粧料並びに皮膚外用物が開示されている。特許文献14には、保湿効果やキメ改善効果に優れ、しかも刺激感も少ない、ニコチンアミドモノヌクレオチド及び酵母菌を用いた発酵液が開示されている。 On the other hand, there are many advanced technologies for using yeast culture solutions and extracts extracted from cultured yeast for external skin preparations and skin cosmetics, and many compounded products are sold to general consumers. For example, Patent Document 11 describes a yeast extract for cosmetics, which is obtained by culturing yeast in a medium having a high content of glutamic acid, cysteine and glycine, without digesting with enzymes or proteases in the cells. Yeast extracts extracted with glutamic acid are disclosed. Patent Document 12 discloses a composition having a heat shock protein 70 production-inducing effect by using a yeast cell extract in which a zinc compound is accumulated in a cell at a high concentration. Patent Document 13 discloses a culture in which yeast is cultured in a medium containing hyaluronic acid selected from the group consisting of hyaluronic acid, hyaluronic acid derivatives and salts thereof, cosmetics containing the same, and external skin products. There is. Patent Document 14 discloses a fermentation broth using nicotinamide mononucleotide and yeast, which has an excellent moisturizing effect and texture improving effect and is less irritating.

酵母を培養する培養液には、基質としてグルコース又はその他の糖などの炭素源、酵母エキス、ペプトン、コーンスティープリカーなどの窒素源、カリウム、カルシウムなどのミネラルが含まれている。特許文献15及び16には、グルコース、スキムミルク及び酵母エキスを基質成分とした培地で酵母菌を培養した培養液の濃縮液又は乾燥物を皮膚用医薬剤又は化粧品として使用することが開示されている。また、特許文献17には、豆乳を基質成分として酵母で発酵させた豆乳発酵物を芽細胞増殖剤、表皮角化細胞増殖剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤及び化粧料として使用することが開示されている。 The culture medium for culturing yeast contains carbon sources such as glucose or other sugars, nitrogen sources such as yeast extract, peptone and corn steep liquor, and minerals such as potassium and calcium as substrates. Patent Documents 15 and 16 disclose that a concentrated solution or a dried product of a culture solution in which yeast is cultured in a medium containing glucose, skim milk and yeast extract as substrate components is used as a skin pharmaceutical agent or cosmetic. .. Further, in Patent Document 17, a soymilk fermented product fermented with yeast using soymilk as a substrate component is used as a blast cell proliferation agent, an epidermal keratinocyte proliferation agent, a collagen production promoter, a hyaluronic acid production promoter, and a cosmetic. Is disclosed.

特開2019-203033号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2019-203033 特開2007-291102号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2007-291102 特開2008-169196号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2008-169196 特開2008-255020号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2008-255020 特開2008-260721号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2008-260721 特開2009-040690号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2009-040690 特開平10-15244号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 10-15244 特開2001-335498号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2001-335798 特開2003-321323号公報Japanese Patent Application Laid-Open No. 2003-321323 特開2006-131546号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2006-131546 特開2006-347988号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2006-347988 特開2014-108945号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2014-108945 特開2015-221756号公報JP-A-2015-221756 特開2018-145167号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2018-145167 特公昭61-43033号公報Special Publication No. 61-43033 特公平3-48166号公報Special Fair 3-48166 Gazette 特開2017-155029号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2017-155029

しかしながら、白樺樹液については皮膚外用剤や皮膚化粧料としての利用形態について保湿やキメ改善効果が十分とは言えなかった。また、白樺樹液を基質として含む培地にて酵母菌を培養するといった技術は知られておらず、酵母菌を培養した培養液について如何なる作用効果を奏するか全く不明であった。そこで、本発明は、当該実情に鑑み、白樺樹液を用いた酵母菌の培養液について如何に優れた効果を有するか明らかにすることで、当該優れた効果を有する酵母菌の培養液、当該培養液を含む皮膚外用剤、当該培養液を含む皮膚化粧料、当該培養液の製造方法を提供することを目的とする。 However, it cannot be said that the birch sap has a sufficient moisturizing and texture-improving effect in terms of its use as an external skin preparation or skin cosmetic. Further, the technique of culturing yeast in a medium containing birch sap as a substrate has not been known, and it has been completely unclear what kind of action and effect will be exerted on the culture medium in which yeast is cultured. Therefore, in view of the actual situation, the present invention clarifies how an excellent effect is obtained on a yeast culture solution using birch sap, whereby the yeast culture solution having the excellent effect and the culture thereof. It is an object of the present invention to provide a skin external preparation containing a liquid, a skin cosmetic containing the culture liquid, and a method for producing the culture liquid.

本発明者らが鋭意検討した結果、白樺樹液を含む培地で酵母菌を培養したところ、得られた培養液にはキメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善する作用効果があることを見いだし、本発明を完成するに至った。本発明は以下を包含する。 As a result of diligent studies by the present inventors, when yeast was cultured in a medium containing birch sap, the obtained culture solution had an action effect of maintaining and improving the skin condition such as a texture improving effect and a moisturizing effect. We found it and came to complete the present invention. The present invention includes the following.

(1)白樺樹液を含む培地にて酵母菌を生育させた培養液。
(2)上記白樺樹液がBetula platyphyllaから得られた樹液であることを特徴とする(1)記載の培養液。
(3)酵母菌がガラクトミセス属に属する酵母、サッカロミコプシス属に属する酵母及びサッカロマイセス属に属する酵母からなる群から選ばれる1つの酵母又は当該群から選ばれる複数の酵母であることを特徴とする(1)又は(2)記載の培養液。
(4)上記(1)乃至(3)いずれか記載の培養液を含む皮膚外用剤。
(5)上記(1)乃至(3)いずれか記載の培養液を含む皮膚化粧料。
(6)保湿性向上効果、キメ改善効果及びくすみ改善効果からなる群から選ばれる少なくとも1つの効果を示す(5)記載の皮膚化粧料。
(7)白樺樹液を含む培地にて酵母菌を培養する工程中に白樺樹液中の低分子糖が酵母の栄養源として消費され、培養開始前と比較して白樺樹液中の低分子糖が低濃度となることを特徴とする培養液の製造方法。
(1) A culture medium in which yeast is grown in a medium containing birch sap.
(2) The culture solution according to (1), wherein the birch sap is a sap obtained from Betula platyphylla.
(3) The yeast is characterized by being one yeast selected from the group consisting of yeast belonging to the genus Saccharomyces, yeast belonging to the genus Saccharomyces and yeast belonging to the genus Saccharomyces, or a plurality of yeasts selected from the group. The culture solution according to (1) or (2).
(4) An external skin preparation containing the culture solution according to any one of (1) to (3) above.
(5) A skin cosmetic containing the culture solution according to any one of (1) to (3) above.
(6) The skin cosmetic according to (5), which exhibits at least one effect selected from the group consisting of a moisturizing effect, a texture improving effect, and a dullness improving effect.
(7) During the process of culturing yeast in a medium containing birch sap, the small molecule sugar in the birch sap is consumed as a nutrient source for yeast, and the small molecule sugar in the birch sap is lower than before the start of culturing. A method for producing a culture medium, which is characterized by having a concentration.

本発明に係る培養液は、皮膚に対するキメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善することができる。特に、本発明に係る培養液は、酵母菌を培養していない白樺樹液と比較して、皮膚の状態を維持・改善する効果が極め優れている。 The culture solution according to the present invention can maintain and improve the condition of the skin such as the texture improving effect and the moisturizing effect on the skin. In particular, the culture broth according to the present invention is extremely excellent in the effect of maintaining and improving the condition of the skin as compared with the birch sap in which yeast is not cultivated.

本発明に係る皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、当該培養液を含むため、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善することができる。さらに、本発明に係る培養液の製造方法は、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善できる培養液であって低分子糖が低濃度となった培養液を製造することができる。 Since the external skin preparation and the skin cosmetic according to the present invention contain the culture solution, it is possible to maintain and improve the condition of the skin such as the texture improving effect and the moisturizing effect. Further, the method for producing a culture solution according to the present invention can produce a culture solution having a low concentration of low molecular weight sugar, which is a culture solution capable of maintaining / improving the skin condition such as a texture improving effect and a moisturizing effect. ..

実施例1で作製した製造例1~4についてグルコース濃度を測定した結果を示す特性図である。It is a characteristic figure which shows the result of having measured the glucose concentration with respect to Production Examples 1 to 4 produced in Example 1. FIG.

以下、本発明を詳細に説明する。 Hereinafter, the present invention will be described in detail.

本発明を適用した培養液は、白樺樹液を含む培地で酵母菌を培養した培養液である。ここで、白樺樹液とは、白樺から採取した樹液を意味する。白樺とは、広義のシラカンバ(学名:Betula platyphylla、シノニム:Betula pendula var. platyphylla)、アメリカシラカンバ(学名:Betula papyrifera)、オウシュウシラカンバ(学名:Betula pendula、別名:シダレカンバ)、ヨーロッパシラカンバ(学名:Betula pubescens、別名:ヨーロッパダケカンバ)、シセンシラカンバ(学名:Betula szechuanica、シノニム:Betula pendula var. szechuanica)を挙げることができる。中でも、シラカンバ樹液としては、広義のシラカンバ(学名:Betula platyphylla)に分類されるシラカンバから採取された樹液が好ましい。広義のシラカンバ(学名:Betula platyphylla)に分類されるシラカンバとしては、コウアンシラカンバ(学名:Betula platyphylla var. platyphylla)、狭義のシラカンバ(学名:Betula platyphylla var. japonica)、キレハシラカンバ(学名:Betula platyphylla var. japonica f. laciniata)、エゾノシラカンバ(学名:Betula platyphylla var. kamtschatica)及びカラフトシラカンバ(学名:Betula platyphylla var. mandshurica)を挙げることができる。 The culture medium to which the present invention is applied is a culture medium in which yeast is cultured in a medium containing birch sap. Here, the birch sap means the sap collected from the birch. Birch is a broadly defined birch (scientific name: Betula platyphylla, synonim: Betula pendula var. Platyphylla), American birch (scientific name: Betula papyrifera), Oshuushira kamba (scientific name: Betula pendula, alias: Sidarekamba), European name. Betula pubescens, also known as European birch (also known as European birch), and birch (scientific name: Betula szechuanica, synonim: Betula pendula var. Szechuanica) can be mentioned. Among them, as the birch sap, the sap collected from the birch classified into the broadly defined birch (scientific name: Betula platyphylla) is preferable. Birch classified into broadly defined birch (scientific name: Betula platyphylla) includes Kouan birch (scientific name: Betula platyphylla var. Platyphylla), narrowly defined birch (scientific name: Betula platyphylla var. . japonica f. Laciniata), Ezonoshirakamba (scientific name: Betula platyphylla var. Kamtschatica) and Karafuto birch (scientific name: Betula platyphylla var. Mandshurica) can be mentioned.

なお白樺樹液は、上述した白樺のうち一種類から採取した樹液でも良いし、複数種の白樺から採取した樹液を混合したものであってもよい。白樺樹液は、例えば、白樺樹木の幹に穴を穿けるか又は線状の切込みをいれて採取される。採取する樹液は、樹木の生息地や季節によって成分が異なる場合もある。例えば、採取する樹液は、約99%が水分であり、残りの固形分としてグルコース、フルクトース等の単糖類、ミネラル分としてカリウム、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、鉄、亜鉛、リン、バリウム、ケイ素、ホウ素、ランタン、ストロンチウム、トリウム、アルミニウム、クロム等を含んでいる。また、白樺樹液は、その他の成分としてグルタミン酸、アスパラギン酸、バリン、イソロイシン、メチオニン、ロイシン、リジン、フェニルアラニン、グリシン、アラニン、スレオニン、アルギニン、シスチン・システイン、プロリン、セリン、チロシン、ヒスチジンなどのアミノ酸成分や、リンゴ酸、コハク酸などの有機酸、蛋白質、多糖類等を含んでいてもよい。 The birch sap may be sap collected from one of the above-mentioned birch types, or may be a mixture of sap collected from a plurality of types of birch. The birch sap is collected, for example, by making a hole in the trunk of the birch tree or making a linear notch. The sap to be collected may have different components depending on the habitat and season of the tree. For example, the sap to be collected is about 99% water, and the remaining solid content is monosaccharides such as glucose and fructose, and the mineral content is potassium, sodium, calcium, magnesium, manganese, iron, zinc, phosphorus, barium, and silicon. , Boron, lanthanum, strontium, barium, aluminum, chromium, etc. In addition, birch sap has other amino acid components such as glutamic acid, aspartic acid, valine, isoleucine, methionine, leucine, lysine, phenylalanine, glycine, alanine, threonine, arginine, cystine cysteine, proline, serine, tyrosine, and histidine. , Organic acids such as aspartic acid and succinic acid, proteins, polysaccharides and the like may be contained.

白樺樹液を含む培地で培養する酵母菌は、特に限定されず、The Yeasts, Fifth Edition: A Taxonomic Study等に開示されえている酵母菌を使用することができる。一例として酵母菌としては、カンジダ(Candida)属、ガラクトミセス(Galactomyces)属、サッカロミコプシス (Saccharomycopsis)属、サッカロマイセス(Saccharomyces)属、ピキア(Pichia)属の酵母を挙げることができる。特に、白樺樹液を含む培地に対して1種類の酵母菌を培養しても良いが、複数の酵母菌を同時又は異時に使用して培養しても良い。 The yeast to be cultured in a medium containing birch sap is not particularly limited, and yeast disclosed in The Yeasts, Fifth Edition: A Taxonomic Study and the like can be used. Examples of yeasts include yeasts of the genera Candida, Galactomyces, Saccharomycopsis, Saccharomyces, and Pichia. In particular, one type of yeast may be cultivated in a medium containing birch sap, but a plurality of yeasts may be used simultaneously or at different times for culturing.

特に、酵母菌のうちガラクトミセス属酵母としては、例えば、ガラクトミセス・レースシィ(Galactomyces reessii)、ガラクトミセス・ゲオトリクム(Galactomyces geotrichum)、ガラクトミセス・カンディダス(Galactomyces candidus)、ガラクトミセス・シュードカンディダス(Galactomyces pseudocandidus)等を使用することが好ましい。また、酵母菌のうちサッカロミコプシス属酵母としては、例えば、サッカロミコプシス・カプサラリス(Saccharomycopsis capsularis)サッカロミコプシス・クラテジンシス(Saccharomycopsis crataegensis)、サッカロミコプシス・マランガ(Saccharomycopsis malanga)等を使用することが好ましい。さらに、酵母菌のうちサッカロマイセス属酵母としては、例えばサッカロマイセス・セルビジエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロマイセス・バシラリス(Saccharomyces bacillaris)等を使用することが好ましい。また、サッカロマイセス属酵母は、一般的に使用されているビール酵母や、清酒酵母、ワイン酵母、パン酵母等を使用してもよい。これら例示列挙した酵母菌についても、1種を単独で使用してもよいし、2種以上の異なる酵母菌を組み合わせて使用してもよい。 In particular, among yeasts, the yeasts of the genus Galactomyces include, for example, Galactomyces reessii, Galactomyces geotrichum, Galactomyces candidus, and Galactomyces pseudocandidas. It is preferable to use pseudocandidus) or the like. Among yeasts, examples of yeasts belonging to the genus Saccharomycopsis include Saccharomycopsis capsularis, Saccharomycopsis crataegensis, Saccharomycopsis malanga, and the like. It is preferable to use it. Further, among the yeasts, as the Saccharomyces genus yeast, for example, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces bacillaris and the like are preferably used. Further, as the yeast of the genus Saccharomyces, commonly used brewer's yeast, sake yeast, wine yeast, baker's yeast and the like may be used. As for the yeasts listed as examples, one kind may be used alone, or two or more kinds of different yeasts may be used in combination.

酵母菌の培地に含まれる白樺樹液は、任意の形態であってよく、例えば、搾液した原液を使用しても良いし、当該原液の粗濾過物でも良い。使用する白樺樹液としては、濾過によって混和物や不純物、非溶解性の固形分を除いたものであることが好ましい。さらに、白樺樹液としては、原液を水等の溶媒によって所定の倍率に希釈したものであっても良いし、所定の倍率に濃縮したものであっても良い。ただし、白樺樹液としては、希釈や濃縮を行わず採取された成分濃度のまま使用することが最も好ましい。 The birch sap contained in the yeast medium may be in any form, and for example, a squeezed undiluted solution may be used, or a coarsely filtered product of the undiluted solution may be used. The birch sap to be used is preferably one obtained by filtering to remove contaminants, impurities and insoluble solids. Further, the birch sap may be a stock solution diluted to a predetermined magnification with a solvent such as water, or may be concentrated to a predetermined magnification. However, as the birch sap, it is most preferable to use the collected component concentration without diluting or concentrating it.

また、白樺樹液は、酵母菌の培養の前に殺菌処理されることが好ましい。すなわち、白樺樹液を通常の酵母菌用培地に添加して使用する場合、当該培地に白樺樹液を添加する前に当該白樺樹液を殺菌処理しても良いし、白樺樹液を添加した培地自体を滅菌処理しても良い。白樺樹液又は白樺樹液を含む培地の殺菌処理は、加熱殺菌、フィルター除菌、紫外線殺菌、放射線殺菌、オゾン殺菌等の任意の方法で行うことができる。例えば、白樺樹液又は白樺樹液を含む培地は、65℃以上、例えば110~130℃又は120~130℃で加熱殺菌してもよく、一例では121℃で20分間処理することにより殺菌することができる。なお、加熱殺菌後は、少なくとも、酵母菌の培養に適した温度まで冷却した後に酵母培養に用いることが好ましい。 Further, it is preferable that the birch sap is sterilized before culturing the yeast. That is, when birch sap is added to a normal yeast medium and used, the birch sap may be sterilized before the birch sap is added to the medium, or the medium itself to which the birch sap is added may be sterilized. May be processed. The sterilization treatment of the birch sap or the medium containing the birch sap can be performed by any method such as heat sterilization, filter sterilization, ultraviolet sterilization, radiation sterilization, ozone sterilization and the like. For example, the birch sap or the medium containing the birch sap may be sterilized by heating at 65 ° C. or higher, for example, 110 to 130 ° C. or 120 to 130 ° C., and in one example, it can be sterilized by treating at 121 ° C. for 20 minutes. .. After heat sterilization, it is preferable to cool the yeast to a temperature suitable for culturing yeast and then use it for yeast culturing.

白樺樹液を含む培地による酵母菌の培養は、当該培地に酵母菌を接種して培養することにより行うことができる。ここで、培地とは、白樺樹液のみの単独組成であっても良いし、通常の酵母用培地と白樺樹液とを含む混合組成であっても良い。通常の酵母用培地とは、酵母の培養に必要な成分(炭素源、窒素源等)を含む培地である。通常の酵母用培地には、培養に必要な窒素源として酵母エキス、ペプトン、カゼイン、大豆分解物、麦芽エキス、アミノ酸等から選ばれる成分が含まれている。また、通常の酵母用培地には、炭素源としてグルコース等及びナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩並びにマグネシウム塩等のミネラル成分が含まれている。なお、白樺樹液に酵母の培養に十分量の炭素源及び/又はミネラル成分が含まれる場合、白樺樹液と組み合わせて使用する酵母用培地は、通常の組成から炭素源及び/又はミネラル成分を除いた組成としても良い。特に、酵母菌の培養に適した培地としては、白樺樹液、酵母エキス、ペプトンを含有する。 Culturing of yeast in a medium containing birch sap can be performed by inoculating the medium with yeast and culturing. Here, the medium may be a single composition of birch sap alone, or may be a mixed composition containing a normal yeast medium and birch sap. A normal yeast medium is a medium containing components (carbon source, nitrogen source, etc.) necessary for yeast culture. A normal yeast medium contains a component selected from yeast extract, peptone, casein, soybean decomposition products, malt extract, amino acids and the like as a nitrogen source required for culturing. In addition, a normal yeast medium contains mineral components such as glucose and the like and sodium salts, potassium salts, calcium salts and magnesium salts as carbon sources. When the birch sap contains a sufficient amount of carbon source and / or mineral component for yeast culture, the yeast medium used in combination with the birch sap has the carbon source and / or mineral component removed from the usual composition. It may be a composition. In particular, the medium suitable for culturing yeast contains birch sap, yeast extract, and peptone.

白樺樹液を含む培地による酵母菌の培養においては、培地に含まれる炭素源としての糖の量は、グルコース換算で0.05~5g/100ml、より好ましくはグルコース換算0.1~2g/100mlとすることが好ましい。ここで、白樺樹液にはグルコース、キシロースなどの糖成分が約1重量%程度含まれている。したがって、白樺樹液を希釈、濃縮することなくそのまま使用することができる。白樺樹液をそのまま使用することで、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善する効果を十分に発揮することができる。 In culturing yeast in a medium containing birch sap, the amount of sugar as a carbon source contained in the medium is preferably 0.05 to 5 g / 100 ml in terms of glucose, and more preferably 0.1 to 2 g / 100 ml in terms of glucose. .. Here, the birch sap contains about 1% by weight of sugar components such as glucose and xylose. Therefore, the birch sap can be used as it is without diluting and concentrating it. By using the birch sap as it is, it is possible to fully exert the effects of maintaining and improving the skin condition such as the texture improving effect and the moisturizing effect.

なお、白樺樹液は、所定の倍率に希釈や濃縮して使用してもよい。希釈や濃縮によって白樺樹液に含まれる炭素源やミネラル成分の濃度を所望の範囲に調節することができる。また、白樺樹液には、炭素源が所望の範囲となるようにグルコース等の糖を添加することも可能である。さらに、白樺樹液には、ミネラル成分についても同様に、所望の濃度となるように添加することができる。 The birch sap may be diluted or concentrated to a predetermined magnification before use. By diluting or concentrating, the concentration of carbon source and mineral components contained in the birch sap can be adjusted to a desired range. It is also possible to add sugar such as glucose to the birch sap so that the carbon source is in a desired range. Further, the mineral component can be similarly added to the birch sap so as to have a desired concentration.

白樺樹液を含む培地にて酵母菌を培養する際、当該培地に対して酵母菌を直接添加(接種)してもよいが、酵母菌を前培養した前培養培地を添加することが好ましい。前培養培地を添加することで、本培養の培養時間を短縮することができ、且つ、コンタミネーションのリスクを低減することができる。なお、前培養に使用する培地は、本培養に使用する培地と同組成としても良いし、白樺樹液を含まない通常の酵母菌用培地を使用してもよい。特に、この前培養において、白樺樹液を含む培地を使用することで、酵母培養に必要な炭素源及びミネラル成分を賄うことが最も好ましい。 When yeast is cultured in a medium containing birch sap, yeast may be directly added (inoculated) to the medium, but it is preferable to add a preculture medium in which yeast is precultured. By adding the preculture medium, the culture time of the main culture can be shortened and the risk of contamination can be reduced. The medium used for the pre-culture may have the same composition as the medium used for the main culture, or a normal medium for yeast that does not contain birch sap may be used. In particular, in this preculture, it is most preferable to use a medium containing birch sap to cover the carbon source and mineral components required for yeast culture.

前培養を行うことで、対数増殖期の酵母菌を保ちながら本培養に移行できるため、酵母菌の大量培養における製造効率を大幅に向上させることができる。酵母菌の培養条件は、酵母菌が増殖できる条件であれば特に限定されない。培養温度は、酵母菌が増殖できる温度であればよく、特に限定されないが、典型的には15~45℃、好ましくは25~40℃、例えば28~37℃とすることができる。培養時のpHは、酵母菌が増殖できるpHであればよく、特に限定されないが、3.0~8.0、好ましくは4.0~7.0、例えば5.0~7.0とすることができる。 By performing the pre-culture, it is possible to shift to the main culture while maintaining the yeast in the logarithmic growth phase, so that the production efficiency in the large-scale culture of the yeast can be significantly improved. The culture conditions for yeast are not particularly limited as long as the yeast can grow. The culture temperature may be any temperature as long as the yeast can grow, and is not particularly limited, but is typically 15 to 45 ° C, preferably 25 to 40 ° C, for example 28 to 37 ° C. The pH at the time of culturing may be any pH as long as it can grow yeast, and is not particularly limited, but may be 3.0 to 8.0, preferably 4.0 to 7.0, for example 5.0 to 7.0.

酵母菌は、好気的条件では糖を二酸化炭素に変換してエネルギー源とすることができ、この条件で良く生育、増殖することが知られている。一方で酸素の乏しい条件下では、増殖が緩やかとなりホモまたはヘテロ発酵によりアルコールと二酸化炭素又は有機酸などを生じる。特に、白樺樹液を含む培地において酵母菌を培養する際には好気的条件で培養することが好ましい。好気的条件で培養することによって、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善する効果を有する培養液を製造することができる。白樺樹液を含む培地において酵母菌を好気的に培養するには、通常の微生物培養にしようされる通気攪拌型の発酵槽を使用することができる。このとき通気量としては特に限定されないが、例えば0.01~5vvm、好ましくは0.1~2vvm、より好ましくは0.3~1.5vvmとすることができる。また、培地の攪拌速度は、特に限定されず、酵母菌の生育に適した条件を任意に設定することができる。 Yeast can convert sugar into carbon dioxide and use it as an energy source under aerobic conditions, and it is known that yeast grows and proliferates well under these conditions. On the other hand, under oxygen-poor conditions, the growth slows down and homo or heterofermentation produces alcohol and carbon dioxide or organic acids. In particular, when culturing yeast in a medium containing birch sap, it is preferable to culture the yeast under aerobic conditions. By culturing under aerobic conditions, it is possible to produce a culture solution having an effect of maintaining / improving the skin condition such as a texture improving effect and a moisturizing effect. In order to aerobically cultivate yeast in a medium containing birch sap, an aeration-stirring fermenter used for ordinary microbial culture can be used. At this time, the aeration amount is not particularly limited, but may be, for example, 0.01 to 5vvm, preferably 0.1 to 2vvm, and more preferably 0.3 to 1.5vvm. Further, the stirring speed of the medium is not particularly limited, and conditions suitable for the growth of yeast can be arbitrarily set.

また、酵母菌の培養に伴って有機酸などのpHを変動させる物質が産生される場合があり、pHの変動により酵母の増殖が阻害されることがある。例えば、酵母菌の培養に伴って有機酸が蓄積される場合、培地のpHが低下していくことから、pHを上記範囲内、好ましくはpH4.0~7.0、例えば5.0~7.0の範囲内に調整するようpH調整剤を添加するなどの方法により培養を継続することが好ましい。 In addition, substances that change the pH, such as organic acids, may be produced along with the culture of yeast, and the change in pH may inhibit the growth of yeast. For example, when organic acids are accumulated with the cultivation of yeast, the pH of the medium decreases, so the pH should be within the above range, preferably within the pH range of 4.0 to 7.0, for example, 5.0 to 7.0. It is preferable to continue the culture by a method such as adding a pH adjuster to adjust the pH.

さらに、白樺樹液を含む培地において酵母菌を培養する時間は、特に限定されないが、例えば、5時間~1ヶ月、例えば1日~10日間又は1日~5日間、好ましくは1日~3日間とすることができる。 Further, the time for culturing yeast in a medium containing birch sap is not particularly limited, but is, for example, 5 hours to 1 month, for example, 1 to 10 days or 1 to 5 days, preferably 1 to 3 days. can do.

以上のようにして、白樺樹液を含む培地にて酵母菌を培養し、培養液を製造することができる。得られた培養液は、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善するといった優れた特徴を有する。特に、得られた培養液は、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善する程度について、白樺樹液を単独で使用した場合と比較して極めて優れている。したがって、得られた培養液は、皮膚外用剤や皮膚化粧料として使用することができる。 As described above, yeast can be cultivated in a medium containing birch sap to produce a culture broth. The obtained culture solution has excellent characteristics such as maintaining and improving the skin condition such as texture improving effect and moisturizing effect. In particular, the obtained culture solution is extremely excellent in the degree of maintaining and improving the skin condition such as the texture improving effect and the moisturizing effect, as compared with the case where the birch sap is used alone. Therefore, the obtained culture solution can be used as a skin external preparation or a skin cosmetic.

また、白樺樹液を含む培地にて酵母菌を培養して得られた培養液は、白樺樹液と比較してべたつき感が低減されている。したがって、この培養液を含む皮膚外用剤や皮膚化粧料は、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善でき、更にさっぱりとした使い心地に優れたものとなる。 In addition, the culture broth obtained by culturing yeast in a medium containing birch sap has a reduced stickiness as compared with birch sap. Therefore, the skin external preparation and the skin cosmetic containing this culture solution can maintain and improve the skin condition such as the texture improving effect and the moisturizing effect, and are more refreshing and comfortable to use.

さらに、得られた培養液は、そのまま皮膚外用剤や皮膚化粧料として使用しても良いが、例えば濾過などの工程を経た後に皮膚外用剤や皮膚化粧料として使用しても良い。また、得られた培養液は、濾過工程に限定されず、例えば、濾過工程の前に菌体成分や菌体内に蓄積された成分を滲出させる工程を行うことが好ましい。この工程としては、特に限定されないが、例えば、プロテアーゼ、リパーゼ、アミラーゼ等の消化酵素を作用させることにより溶菌しても良いし、菌体を分離した後に酸により分解しても良いし、高速回転破砕、超音波破砕、凍結乾燥破砕など手段により酵母を物理的に破砕しても良いし、殺菌を兼ねて加熱しても良い。これらの工程により、酵母菌に含まれる有用成分を合理的に培養液中に抽出することができる。 Further, the obtained culture solution may be used as it is as a skin external preparation or a skin cosmetic, or may be used as a skin external preparation or a skin cosmetic after undergoing a process such as filtration. Further, the obtained culture solution is not limited to the filtration step, and for example, it is preferable to perform a step of exuding the bacterial cell component or the component accumulated in the bacterial cell before the filtration step. This step is not particularly limited, but may be lysed by the action of a digestive enzyme such as protease, lipase, or amylase, or may be decomposed by an acid after separating the bacterial cells, or may be rotated at high speed. Yeast may be physically crushed by means such as crushing, ultrasonic crushing, and freeze-drying crushing, or may be heated for sterilization. By these steps, useful components contained in yeast can be rationally extracted into the culture broth.

なお、上述したように、白樺樹液を含む培地にて酵母を培養して得られた培養液は、皮膚外用剤や皮膚化粧料としてそのまま使用できるが、上述した各種の工程を経た培養液もまた皮膚外用剤や皮膚化粧料として使用できる。したがって、本明細書において、「培養液」という用語には、白樺樹液を含む培地にて酵母を培養して得られた培養液の他に、当該培養液を濾過した後の溶液や、上述した各種工程を経た後の溶液、当該溶液を濾過した溶液、その他、遠心分離、活性炭や珪藻土などの濾過助剤による脱臭・脱色、又はこれらの組み合わせにより1つ以上の処理を行った溶液も含まれる。また、本明細書において、「培養液」には、これらの溶液に対して濃縮、希釈、乾燥、又は精密濾過したもの、或いは遠心分離等により精製したものも含まれる。精製方法は特に限定されないが、例えば、遠心濾過やメンブレンフィルター等のフィルターを使用して濾過する方法が挙げられる。 As described above, the culture broth obtained by culturing yeast in a medium containing birch sap can be used as it is as an external preparation for skin or skin cosmetics, but the culture broth that has undergone the various steps described above can also be used as it is. It can be used as an external skin preparation or skin cosmetic. Therefore, in the present specification, the term "culture solution" refers to a solution obtained by culturing yeast in a medium containing birch sap, a solution after filtering the culture solution, and the above-mentioned. It also includes solutions after various steps, filtered solutions of the solutions, and other solutions that have been subjected to one or more treatments by centrifugation, deodorization / decolorization with a filtration aid such as activated charcoal or diatomaceous soil, or a combination thereof. .. Further, in the present specification, the "culture solution" includes those which are concentrated, diluted, dried, or microfiltered with respect to these solutions, or those which have been purified by centrifugation or the like. The purification method is not particularly limited, and examples thereof include a method of filtering using a filter such as centrifugal filtration or a membrane filter.

特に、上述のように、白樺樹液を含む培地にて酵母を培養して得られた培養液を高温条件で加熱し、酵母菌体内から有用成分を培養液中に滲出させることが好ましい。より具体的には、得られた培養液を121℃の条件で20分以上加熱処理した上で、得られた抽出物を遠心分離や濾過(例えば、精密濾過)またはその両方を行うことにより、夾雑物、菌体及び不溶物等を除去された濾過液を得ることができる。有用成分の滲出は、加熱菌体分解の他に、高圧ホモジナイザー、超音波ホモジナイザー、高速回転型ホモジナイザーなどによる細胞破砕によっても良く、これらの複数の方式を組み合わせても良い。また、菌体細胞壁などの固形分は、濾過、例えばフィルターで濾過することにより、夾雑物及び不溶物等と共に除去してもよい。 In particular, as described above, it is preferable to heat the culture broth obtained by culturing yeast in a medium containing birch sap under high temperature conditions to exudate useful components from the yeast cells into the culture broth. More specifically, the obtained culture broth is heat-treated at 121 ° C. for 20 minutes or more, and then the obtained extract is centrifuged, filtered (for example, microfiltration), or both. It is possible to obtain a filtrate from which contaminants, bacterial cells, insoluble matter and the like have been removed. Exudation of useful components may be performed by cell disruption using a high-pressure homogenizer, an ultrasonic homogenizer, a high-speed rotary homogenizer, or the like, in addition to the decomposition of heated cells, and a combination of these multiple methods may be used. Further, the solid content such as the cell wall of the bacterial cell may be removed together with impurities and insoluble matter by filtering, for example, filtering with a filter.

得られた培養液の濾過は、任意の方法により行うことができる。例えば、濾過は、夾雑物、菌体及び/又は不溶物等の除去に適したフィルター又は他の濾過デバイスを用いて行うことができる。フィルター又は他の濾過デバイスを用いた濾過としては、例えば遠心濾過、加圧濾過、吸引濾過等を挙げることができる。培養液を濾過するために用いるフィルターは、特に限定されないが、例えばメンブレンフィルター、グラスファイバーフィルター、セルロースフィルター、焼結フィルター等を挙げることができる。これらのうち1種類のフィルターを用いて濾過しても良いが、2種以上のフィルターを組み合わせて濾過することもできる。より具体的に、精密濾過フィルターを使用する場合、典型的には1μm未満、好ましくは0.5μm以下、より好ましくは0.1μm~0.5μm又は0.2μm~0.5μm、例えば0.45μm、0.22μm、又は0.1μmの孔径を有するフィルターを使用することができる。また、珪藻土濾過やプレフィルターによる濾過後に、精密濾過フィルターによる濾過を行ってもよい。 The obtained culture solution can be filtered by any method. For example, filtration can be performed using a filter or other filtration device suitable for removing contaminants, cells and / or insoluble matter and the like. Filtration using a filter or other filtration device may include, for example, centrifugal filtration, pressure filtration, suction filtration and the like. The filter used for filtering the culture solution is not particularly limited, and examples thereof include a membrane filter, a glass fiber filter, a cellulose filter, and a sintered filter. One of these filters may be used for filtration, but two or more types of filters may be combined for filtration. More specifically, when a microfiltration filter is used, it is typically less than 1 μm, preferably 0.5 μm or less, more preferably 0.1 μm to 0.5 μm or 0.2 μm to 0.5 μm, such as 0.45 μm, 0.22 μm, or 0.1. A filter having a pore size of μm can be used. Further, after filtering with diatomaceous earth or a pre-filter, filtration with a microfiltration filter may be performed.

得られた培養液の希釈や濃縮は、任意の希釈法、濃縮法により行うことができる。希釈する場合、例えば水又は他の任意の溶媒を用いることができる。培養液の濃縮法としては、例えば、加熱蒸発濃縮法、凍結濃縮法、限外濾過法、透析法、クロマトグラフィー法等により行うことができる。 The obtained culture solution can be diluted or concentrated by any dilution method or concentration method. When diluting, for example water or any other solvent can be used. As a method for concentrating the culture solution, for example, a heat evaporation concentration method, a freeze concentration method, an ultrafiltration method, a dialysis method, a chromatography method or the like can be used.

得られた培養液の殺菌・除菌方法は、任意の殺菌又は除菌方法を適用することができる。殺菌除菌方法としては、例えば、加熱殺菌、フィルター除菌、紫外線殺菌、放射線殺菌、オゾン殺菌等の方法を挙げることができる。 Any sterilization or sterilization method can be applied to the sterilization / sterilization method of the obtained culture solution. Examples of the sterilization sterilization method include heat sterilization, filter sterilization, ultraviolet sterilization, radiation sterilization, ozone sterilization and the like.

得られた培養液を乾燥して乾燥物とする場合は、任意の乾燥法を適用することができる。培養液の乾燥方法としては、例えば、真空凍結乾燥物などの凍結乾燥法、スプレードライ法などの熱乾燥法を挙げることができる
得られた培養液の脱臭・脱色は、任意の脱臭処理及び/又は脱色処理方法により行うことができる。脱臭処理及び/又は脱色処理方法としては、例えば、培養液を活性炭に通過させ、臭気成分や着促成分を活性炭に吸着させる方法を挙げることができる。
When the obtained culture solution is dried to obtain a dried product, any drying method can be applied. Examples of the method for drying the culture solution include a freeze-drying method for vacuum freeze-dried products and a heat-drying method such as a spray-drying method. Alternatively, it can be carried out by a decolorization treatment method. Examples of the deodorizing treatment and / or the decolorizing treatment method include a method in which the culture solution is passed through the activated carbon and the odorous component and the adsorbing component are adsorbed on the activated carbon.

なお、得られた培養液に対してウィンタリング(脱ろう)処理を実施してもよい。すなわち、得られた培養液を冷却し、低温で固まる成分(ろう分)を析出させ、濾過等の手段により固液分離することでろう分を除去することができる。 The obtained culture broth may be subjected to wintering (dewaxing) treatment. That is, the wax can be removed by cooling the obtained culture solution, precipitating a component (wax) that hardens at a low temperature, and separating the solid and liquid by means such as filtration.

ここで、皮膚外用剤とは、人又は動物の疾病の診断、治療又は予防に有効な成分(主薬)を含む医薬品又は当該医薬品に使用される基剤を意味する。皮膚外用剤は、例えば、日本における「医薬品、医療機器等の品質、有効性及び安全性の確保等に関する法律」に規定される医薬品及び医薬部外品を含む意味である。一方、皮膚化粧料とは、医薬品や医薬部外品に分類されない、人の皮膚に使用される化粧品を意味する。皮膚外用剤は、日本における「医薬品、医療機器等の品質、有効性及び安全性の確保等に関する法律」に規定されるヒトの皮膚に使用される化粧品を含む意味である。 Here, the external skin preparation means a drug containing an ingredient (main drug) effective for diagnosis, treatment or prevention of a human or animal disease, or a base used for the drug. The term "external skin preparation" means, for example, including pharmaceuticals and quasi-drugs specified in the "Act on Securing Quality, Effectiveness, Safety, etc. of Pharmaceuticals, Medical Devices, etc." in Japan. On the other hand, skin cosmetics mean cosmetics used on human skin that are not classified as pharmaceuticals or quasi-drugs. The term "external skin preparation" is meant to include cosmetics used on human skin as stipulated in the "Act on Securing Quality, Effectiveness and Safety of Pharmaceuticals, Medical Devices, etc." in Japan.

皮膚外用剤は、任意の剤型であってよく、例えば、軟膏剤、貼付剤、パップ剤、リニメント剤、ローション剤、クリーム剤、エキス剤、流エキス剤、チンキ剤、エリキシル剤、シロップ剤、リモナーデ剤、芳香水剤、液剤、懸濁化剤、乳剤、薬用入浴剤、薬用シャンプー、エアゾール剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等が挙げられる。 The external skin preparation may be of any dosage form, and may be, for example, an ointment, a patch, a pap, a liniment, a lotion, a cream, an extract, a flow extract, a tincture, an elixir, a syrup, etc. Examples thereof include limonade agents, aromatic water agents, liquid agents, suspending agents, emulsions, medicated bathing agents, medicated shampoos, aerosol agents, powders, granules, tablets, capsules and the like.

また、皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、溶液状、懸濁液状、乳化状、粉末状、ペースト状、ムース状、又はジェル状などの任意の形態の組成物であってよい。特に、皮膚化粧料は、好ましくは、皮膚に接触して使用され得る任意の形態であってよく、具体的には、例えば、化粧水、乳液、美容液、一般クリーム(フェイスクリーム、ハンドクリーム、ボディクリーム等)、洗顔料(クレンジングクリーム等)、パック、髭剃り用クリーム、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、日焼け止めローション、日焼けローション、化粧石鹸、ファンデーション、おしろい、パウダー、口紅、リップクリーム、アイライナー、アイクリーム、アイシャドウ、マスカラ、入浴剤(浴用剤)、シャンプー、ヘアリンス、ヘアトリートメント、ヘアパック、スカルプケア剤、ボディリンス、ボディジェル、染毛料、頭髪用化粧品等が挙げられる。化粧水、乳液、美容液、フェイスクリーム、洗顔料等が特に好ましい。 Further, the skin external preparation and the skin cosmetic may be a composition in any form such as a solution, a suspension, an emulsified, a powder, a paste, a mousse, or a gel. In particular, the skin cosmetic may preferably be in any form that can be used in contact with the skin, specifically, for example, a cleanser, a milky lotion, a beauty liquid, a general cream (face cream, hand cream, etc.). Body cream etc.), wash pigment (cleansing cream etc.), pack, shaving cream, sun cream, sunscreen cream, sunscreen lotion, sunscreen lotion, makeup soap, foundation, grate, powder, lipstick, lip cream, eyeliner , Eye cream, eye shadow, mascara, bathing agent (bath agent), shampoo, hair rinse, hair treatment, hair pack, scalp care agent, body rinse, body gel, hair dye, cosmetics for hair and the like. Toners, milky lotions, beauty essences, face creams, facial cleansers and the like are particularly preferable.

さらに皮膚外用剤及び皮膚化粧料において、上述した培養液は、任意の形態で配合することができ、例えば、そのままの状態で他の成分と単に混合してもよいし、ゲル状、粉末状、顆粒状、又はカプセル封入体等の形態で配合することができる。 Further, in skin external preparations and skin cosmetics, the above-mentioned culture solution can be blended in any form, for example, it may be simply mixed with other components as it is, or it may be in the form of a gel or powder. It can be blended in the form of granules or capsule inclusion bodies.

皮膚化粧料は、上述した培養液に加えて、化粧料において許容される添加剤、及び必要に応じて他の活性成分等を含むことができる。そのような添加剤や他の活性成分等は、用途及び形態に適したものを任意に選択して用いることができる。皮膚化粧料は、任意の化粧料製造方法に従って、例えば、原料を混合、攪拌、成形、充填等することにより、製造することができる。 In addition to the above-mentioned culture solution, the skin cosmetic may contain additives permitted in the cosmetic, and if necessary, other active ingredients and the like. As such additives and other active ingredients, those suitable for the intended use and form can be arbitrarily selected and used. The skin cosmetic can be produced according to any cosmetic production method, for example, by mixing, stirring, molding, filling or the like of raw materials.

皮膚外用剤は、上述した培養液をキメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善する主剤として含む組成物とすることができる。或いは、皮膚外用剤は、所定の薬効成分(主剤)を含むとともに、上述した培養液をキメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善する基剤として含む組成物とすることもできる。皮膚外用剤は、上述した培養液、製薬上許容される添加剤及び必要に応じて他の活性成分等を含むことができる。そのような添加剤や他の活性成分等は、医薬の用途及び形態に適したものを任意に選択して用いることができる。本発明に係る医薬は、任意の医薬製造方法に従って、原料を混合、攪拌、成形、充填等することにより、製造することができる。 The external skin preparation can be a composition containing the above-mentioned culture solution as a main agent for maintaining and improving the skin condition such as texture improving effect and moisturizing effect. Alternatively, the external skin preparation may be a composition containing a predetermined medicinal ingredient (main agent) and containing the above-mentioned culture solution as a base for maintaining and improving the skin condition such as a texture improving effect and a moisturizing effect. The external skin preparation can contain the above-mentioned culture solution, pharmaceutically acceptable additives, and if necessary, other active ingredients. As such additives and other active ingredients, those suitable for the intended use and form of the pharmaceutical can be arbitrarily selected and used. The pharmaceutical product according to the present invention can be produced by mixing, stirring, molding, filling and the like of raw materials according to any pharmaceutical production method.

皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、担体(固体又は液体担体)、賦形剤、界面活性剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤、pH調整剤、着色料、香料、矯味剤、清涼剤、安定化剤、増泡剤、保存剤、緩衝剤等の製剤用の添加剤を1つ以上含んでもよい。 External skin preparations and cosmetics include carriers (solid or liquid carriers), excipients, surfactants, binders, disintegrants, lubricants, odorants, solubilizers, suspensions, coatings, pH. It may contain one or more pharmaceutical additives such as regulators, colorants, fragrances, flavoring agents, cooling agents, stabilizers, foaming agents, preservatives and buffers.

皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、例えば以下の任意の群から任意に選択される1つ又は2つ以上の成分を含んでもよい。コラーゲン、コラーゲン加水分解物、ゼラチン、ゼラチン加水分解物、エラスチン、エラスチン加水分解物、ラクトフェリン、ケラチン、ケラチン加水分解物、カゼイン、アルブミン、ローヤルゼリー由来タンパク加水分解物、ハチミツ由来タンパク加水分解物等のタンパク質及びタンパク質の加水分解物から選ばれる任意の成分を含むことができる。ヒアルロン酸ナトリウム及びヒアルロン酸誘導体、キサンタンガム、カラギーナン、グアーガム、アルギン酸及びその塩、ペクチン、コンドロイチン硫酸及びその塩、水溶性キチン、キトサン誘導体及びその塩、プルラン、デオキシリボ核酸、アラビアゴム、トラガントゴム等の天然高分子及びそれらの誘導体から選ばれる任意の成分を含むことができる。ホオズキ、ラカンカ、ナツメ、ハト麦、甘草、杜仲、ショウガ、ウドなどの生薬から選ばれる任意の成分を含むことができる。海藻末、海藻エキス、及び海藻由来の多糖類から選ばれる任意の成分を含むことができる。プラセンタエキス等の動物由来物から選ばれる任意の成分を含むことができる。炭酸水や温泉水、マイクロナノバブル水、精製水、蒸留水等の水から選ばれる任意の成分を含むことができる。カルボキシビニルポリマー及びその塩、ポリアクリル酸及びその塩、カルボキシメチルセルロース及びその塩等の酸性ポリマー、ポリビニルアルコール、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ニトロセルロースポリビニルメチルエーテル等の中性ポリマーから選ばれる任意の成分を含むことができる。カチオン化セルロース、ポリエチレンイミン、カチオン化グアーガム等のカチオン性ポリマーから選ばれる任意の成分を含むことができる。エタノール、イソプロピルアルコール等の低級アルコール類から選ばれる任意の成分を含むことができる。パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、アントラニエール酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤等の紫外線吸収剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。グリチルリチン酸及びその塩類、グアイアズレン及びその誘導体、アラントイン等の抗炎症剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。ステアリン酸エステル、ノルジヒドログアセレテン酸、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、パラヒドロキシアニソール、没食子プロピル、セサモール、セサモリン、ゴシポール等の抗酸化剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。パラ安息香酸メチル、パラ安息香酸エチル、パラ安息香酸プロピル、パラ安息香酸ブチル等のパラ安息香酸エステル類、ソルビン酸、デヒドロ酢酸、フェノキシエタノール、安息香酸等の防腐剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。エデト酸、エデト酸二ナトリウム等のエデト酸及びその塩類、フィチン酸、ヒドロキシエタンジスルホン酸等の金属イオン封鎖剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。グリセリン、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール等の多価アルコール類から選ばれる任意の成分を含むことができる。L-アスパラギン酸、DL-アラニン、L-アルギニン、L-システイン、L-グルタミン酸、グリシン等のアミノ酸類及びその塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。マルチトール、ソルビトール、キシロビオース、N-アセチル-D-グルコサミン、蜂蜜等の糖類から選ばれる任意の成分を含むことができる。アンモニア水、モノエタノールアミン、トリエタノールアミン、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの塩基類から選ばれる任意の成分を含むことができる。流動パラフィン、スクワラン、ワセリン等の炭化水素類から選ばれる任意の成分を含むことができる。ヤシ油、月見草油、ホホバ油、ヒマシ油、硬化ヒマシ油等の油脂類から選ばれる任意の成分を含むことができる。ラウリン酸、ミリスチル酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸等の脂肪酸類から選ばれる任意の成分を含むことができる。ミリスチルアルコール、セタノール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール等の高級アルコール類から選ばれる任意の成分を含むことができる。ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、トリオクタン酸グリセリン、ミリスチン酸オクチルドデシル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸ステアリル等のエステル類から選ばれる任意の成分を含むことができる。レシチン及びその誘導体等のリン脂質類から選ばれる任意の成分を含むことができる。ウシ骨髄脂やウシ脳脂質などの動植物由来脂質から選ばれる任意の成分を含むことができる。ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリル硫酸エタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸トリエタノールアミンなどのアルキル硫酸塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。ポリオキシエチレン(2EO)ラウリルエーテル硫酸トリエタノールアミン(なお、EOはエチレンオキサイド、EOの前の数値はエチレンオキサイドの付加モル数を示す;以下同様)、ポリオキシエチレン(3EO)アルキル(炭素数11~15のいずれか又は2種以上の混合物)エーテル硫酸ナトリウムなどのポリオキシエチレンアルキル硫酸塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。ラウリルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ラウリルベンゼンスルホン酸トリエタノールアミンなどのアルキルベンゼンスルホン酸塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。ポリオキシエチレン(3EO)トリデシルエーテル酢酸ナトリウムなどのポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。ヤシ油脂肪酸サルコシンナトリウム、ラウロイルサルコシントリエタノールアミン、ラウロイルメチル-L-グルタミン酸ナトリウム、ヤシ油脂肪酸-L-グルタミン酸ナトリウム、ヤシ油脂肪酸-L-グルタミン酸トリエタノールアミン、ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム、ラウロイルメチルタウリンナトリウムなどのN-アシルアミノ酸塩、エーテル硫酸アルカンスルホン酸ナトリウム、硬化ヤシ油脂肪酸グリセリン硫酸ナトリウム、硬化ヤシ油脂肪酸グリセリン硫酸ナトリウム、ウンデシノイルアミドエチルスルホコハク酸二ナトリウム、オクチルフェノキシジエントキシエチルスルホン酸ナトリウム、オレイン酸アミノスルホコハク酸二ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、スルホコハク酸ラウリル二ナトリウム、ポリオキシエチレンアルキル(炭素鎖12~15)エーテルリン酸(8~10EO)、ポリオキシエチレンオレイルエーテルリン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンセチルエーテルリン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンスルホコハク酸ラウリル二ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテルリン酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、テトラデセンスルホン酸ナトリウムなどのアニオン性界面活性剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。塩化ステアリルジメチルアンモニウム、塩化ジ(ポリオキシエチレン)オレイルメチルアンモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化トリ(ポリオキシエチレン)ステアリルアンモニウム、塩化ポリオキシプロピレンメチルジエチルアンモニウム、塩化ミリスチルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ラウリルトリメチルアンモニウムなどのカチオン性界面活性剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。2-アルキル-N-カルボキシメチル-N-ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン、ウンデシルヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタインナトリウム、ウンデシル-N-ヒドロキシエチル-N-カルボキシメチルイミダゾリニウムベタイン、ステアリルジヒドロキシエチルベタイン、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン、ヤシ油アルキル-N-カルボキシエチル-N-ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタインナトリウム、ヤシ油アルキル-N-カルボキシメトキシエチル-N-カルボキシメチルイミダゾリニウムジナトリウムラウリル硫酸、N-ヤシ油脂肪酸アシル-L-アルギニンエチル-DL-ピロリドンカルボン酸塩などの両性界面活性剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。ポリオキシエチレンアルキル(炭素数12~14)エーテル(7EO)、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンオレイルエーテル、ポリオキシエチレンオレイン酸グリセリン、ポリオキシエチレンステアリルエーテル、ポリオキシエチレンセチルエーテル、ポリオキシエチレンセチルステアリルジエーテル、ポリオキシエチレンソルビトール・ラノリン(40EO)、ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンセチルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル、ポリオキシエチレンラノリン、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシプロピレンステアリルエーテル等のノニオン性界面活性剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。イソステアリン酸ジエタノールアミド、ウンデシレン酸モノエタノールアミド、オレイン酸ジエタノールアミド、牛脂脂肪酸モノエタノールアミド、硬化牛脂脂肪酸ジエタノールアミド、ステアリン酸ジエタノールアミド、ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド、ステアリン酸モノエタノールアミド、ミリスチン酸ジエタノールアミド、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド、ヤシ油脂肪酸エタノールアミド、ラウリン酸イソプロパノールアミド、ラウリン酸エタノールアミド、ラウリン酸ジエタノールアミド、ラノリン脂肪酸ジエタノールアミドなどの増粘剤から選ばれる任意の成分を含むことができる。鎖状又は環状メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジメチルポリシロキサンポリエチレングリコール共重合体、ジメチルポリシロキサンポリプロピレン共重合体、アミノ変性シリコンオイル、第四級アンモニウム変性シリコンオイルなどのシリコンオイルから選ばれる任意の成分を含むことができる。チオグリコール酸及びその塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。システアミン及びその塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。過酸化水素、過硫酸塩、過ほう酸塩、過酸化尿素などの過酸化物から選ばれる任意の成分を含むことができる。臭素酸ナトリウム、臭素酸カリウムなどの臭素酸塩から選ばれる任意の成分を含むことができる。角質溶解剤、収斂剤、創傷治療剤、消臭・脱臭剤、抗アレルギー剤、血流促進剤、細胞賦活剤等の他の有効成分から選ばれる任意の成分を含むことができる。 The external skin preparation and the skin cosmetic may contain, for example, one or two or more components arbitrarily selected from any of the following groups. Proteins such as collagen, collagen hydrolyzate, gelatin, gelatin hydrolyzate, elastin, elastin hydrolyzate, lactoferrin, keratin, keratin hydrolyzate, casein, albumin, royal jelly-derived protein hydrolyzate, honey-derived protein hydrolyzate, etc. And any component selected from protein hydrolysates. Natural highs of sodium hyaluronate and hyaluronic acid derivatives, xanthan gum, carrageenan, guar gum, alginic acid and its salts, pectin, chondroitin sulfate and its salts, water-soluble chitin, chitosan derivatives and their salts, purulan, deoxyribonucleic acid, arabic rubber, tragant rubber and the like. It can contain any component selected from molecules and derivatives thereof. It can contain any ingredient selected from crude drugs such as physalis, luo han guo, jujube, adlay, licorice, eucommia, ginger, and udo. It can contain any component selected from seaweed powder, seaweed extract, and seaweed-derived polysaccharides. It can contain any ingredient selected from animal-derived products such as placenta extract. It can contain any component selected from water such as carbonated water, hot spring water, micro-nanobubble water, purified water, and distilled water. Among carboxyvinyl polymers and salts thereof, polyacrylic acid and salts thereof, acidic polymers such as carboxymethyl cellulose and salts thereof, polyvinyl alcohol, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, methyl cellulose, polyethylene glycol, polyvinylpyrrolidone, nitrocellulose polyvinylmethyl ether and the like. It can contain any component selected from sex polymers. It can contain any component selected from cationic polymers such as cationized cellulose, polyethyleneimine, cationized guar gum and the like. It can contain any component selected from lower alcohols such as ethanol and isopropyl alcohol. It can contain any component selected from UV absorbers such as paraaminobenzoic acid-based UV absorbers, salicylic acid-based UV absorbers, cinnamic acid-based UV absorbers, anthraniere acid-based UV absorbers, and benzophenone-based UV absorbers. .. It can contain any component selected from anti-inflammatory agents such as glycyrrhizic acid and its salts, guaiazulene and its derivatives, and allantoin. It can contain any component selected from antioxidants such as stearic acid ester, nordihydroguaselethenic acid, dibutylhydroxytoluene, butylhydroxyanisole, parahydroxyanisole, propyl gallate, sesamol, sesamolin, gossypol and the like. Contains any ingredient selected from parabenzoic acid esters such as methyl parabenzoate, ethyl parabenzoate, propyl parabenzoate, butyl parabenzoate, and preservatives such as sorbic acid, dehydroacetic acid, phenoxyethanol, and benzoic acid. Can be done. It can contain any component selected from edetic acids such as edetic acid and disodium edetate and salts thereof, and sequestrants such as phytic acid and hydroxyethandisulfonic acid. It can contain any component selected from polyhydric alcohols such as glycerin, 1,3-butylene glycol and propylene glycol. It can contain any component selected from amino acids such as L-aspartic acid, DL-alanine, L-arginine, L-cysteine, L-glutamic acid, glycine and salts thereof. It can contain any component selected from sugars such as maltitol, sorbitol, xylobiose, N-acetyl-D-glucosamine, honey and the like. It can contain any component selected from bases such as aqueous ammonia, monoethanolamine, triethanolamine, sodium hydroxide, potassium hydroxide and the like. It can contain any component selected from hydrocarbons such as liquid paraffin, squalane and petrolatum. It can contain any component selected from fats and oils such as coconut oil, evening primrose oil, jojoba oil, castor oil, and hardened castor oil. It can contain any component selected from fatty acids such as lauric acid, myristyl acid, palmitic acid, stearic acid and behenic acid. It can contain any component selected from higher alcohols such as myristyl alcohol, cetanol, cetostearyl alcohol, stearyl alcohol and behenyl alcohol. It can contain any component selected from esters such as isopropyl myristate, isopropyl palmitate, cetyl octanate, glycerin trioctate, octyldodecyl myristate, octyl stearate, stearyl stearate and the like. It can contain any component selected from phospholipids such as lecithin and its derivatives. It can contain any component selected from animal and plant-derived lipids such as bovine bone marrow fat and bovine brain lipids. It can contain any component selected from alkyl sulphates such as ammonium lauryl sulphate, ethanolamine lauryl sulphate, sodium lauryl sulphate, triethanolamine lauryl sulphate. Polyoxyethylene (2EO) lauryl ether sulphate triethanolamine (EO is ethylene oxide, the value before EO indicates the number of moles of ethylene oxide added; the same applies hereinafter), polyoxyethylene (3EO) alkyl (11 carbon atoms). Any of ~ 15 or a mixture of two or more) can contain any component selected from polyoxyethylene alkyl sulfates such as ether sodium sulfate. It can contain any component selected from alkylbenzene sulfonates such as sodium laurylbenzene sulfonate, triethanolamine laurylbenzene sulfonate. It can contain any component selected from polyoxyethylene alkyl ether sulfates such as polyoxyethylene (3EO) tridecyl ether sodium acetate. Palm oil fatty acid sarcosin sodium, lauroyl sarcosin triethanolamine, lauroylmethyl-L-sodium glutamate, coconut oil fatty acid-L-sodium glutamate, coconut oil fatty acid-L-glutamate triethanolamine, coconut oil fatty acid methyl taurine sodium, lauroylmethyl taurine N-acylamino acid salts such as sodium, sodium ether sulfate alkane sulfonate, hardened coconut oil fatty acid sodium glycerin sulfate, hardened coconut oil fatty acid sodium glycerin sulfate, undesinoylamide ethyl sulfostubate disodium, octylphenoxydientoxyethyl sulfonate sodium , Amino sulfosuccinate disodium oleate, dioctyl sulfosuccinate, dioctyl sulfosuccinate, lauryl disodium sulfosuccinate, polyoxyethylene alkyl (carbon chain 12-15) ether phosphate (8-10EO), polyoxyethylene oleyl ether Select from anionic surfactants such as sodium phosphate, sodium polyoxyethylene cetyl ether phosphate, disodium lauryl lauryl polyoxyethylene sulfosuccinate, sodium polyoxyethylene lauryl ether phosphate, sodium lauryl sulfoacetate, and sodium tetradecene sulfonate. Can contain any of the ingredients that are used. Stearyldimethylammonium chloride, di (polyoxyethylene) oleylmethylammonium, stearyldimethylbenzylammonium chloride, stearyltrimethylammonium chloride, tri (polyoxyethylene) stearylammonium chloride, polyoxypropylenemethyldiethylammonium chloride, myristyldimethylbenzylammonium chloride , Lauryl trimethylammonium chloride can contain any component selected from cationic surfactants such as ammonium chloride. 2-alkyl-N-carboxymethyl-N-hydroxyethyl imidazolinium betaine, undecyl hydroxyethyl imidazolinium betaine sodium, undecyl-N-hydroxyethyl-N-carboxymethyl imidazolinium betaine, stearyldihydroxyethyl betaine, palm Oil fatty acid amide propyl betaine, coconut oil alkyl-N-carboxyethyl-N-hydroxyethyl imidazolinium betaine sodium, coconut oil alkyl-N-carboxymethoxyethyl-N-carboxymethyl imidazolinium disodium lauryl sulfate, N-palm It can contain any component selected from amphoteric surfactants such as the oil fatty acid acyl-L-arginine ethyl-DL-pyrrolidone carboxylate. Polyoxyethylene alkyl (12-14 carbon atoms) ether (7EO), polyoxyethylene octylphenyl ether, polyoxyethylene oleyl ether, glycerin polyoxyethylene oleate, polyoxyethylene stearyl ether, polyoxyethylene cetyl ether, polyoxy Ethylenecetylstearyldiether, polyoxyethylene sorbitol lanolin (40EO), polyoxyethylene nonylphenyl ether, polyoxyethylene polyoxypropylene cetyl ether, polyoxyethylene polyoxypropylene decyltetradecyl ether, polyoxyethylene lanolin, polyoxy It can contain any component selected from nonionic surfactants such as ethylenelanolin alcohol and polyoxypropylene stearyl ether. Isostearic acid diethanolamide, undecylenic acid monoethanolamide, oleic acid diethanolamide, beef fatty acid monoethanolamide, hardened beef fatty acid diethanolamide, stearic acid diethanolamide, stearic acid diethylaminoethylamide, stearic acid monoethanolamide, myristic acid diethanolamide, It can contain any component selected from thickeners such as coconut oil fatty acid diethanolamide, coconut oil fatty acid ethanolamide, lauric acid isopropanolamide, lauric acid ethanolamide, lauric acid diethanolamide, lanolin fatty acid diethanolamide. Optional selected from silicon oils such as chain or cyclic methylpolysiloxane, methylphenylpolysiloxane, dimethylpolysiloxane polyethylene glycol copolymer, dimethylpolysiloxanepolypolypolymer, amino-modified silicon oil, quaternary ammonium-modified silicon oil. Can contain the components of. It can contain any component selected from thioglycolic acid and salts thereof. It can contain any component selected from cysteamine and salts thereof. It can contain any component selected from peroxides such as hydrogen peroxide, persulfates, peroxides, urea peroxides and the like. It can contain any component selected from bromate such as sodium bromate and potassium bromate. It can contain any ingredient selected from other active ingredients such as keratolytic agents, astringents, wound healing agents, deodorant / deodorants, antiallergic agents, blood flow promoters, cell activators and the like.

ところで、皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、上述した培養液を含むため、キメ改善効果や保湿効果といった皮膚の状態を維持・改善することができる。ここで、皮膚の状態を維持・改善するとは、皮膚の保湿性を維持及び/又は改善すること、皮膚のキメを維持及び/又は改善すること、皮膚のくすみを防止及び/又は改善することを含む意味である。具体的に、キメ改善効果とは肌をキメ細やかな状態、すなわち肌表面の皮溝が浅く、皮丘の一つ一つが鮮明で小さく綺麗な三角形を示す状態に改善する効果である。また、くすみ防止効果とは、くすみ肌と称される周囲に比べ明度が低くなっている肌部分に作用し、くすみ肌の面積を狭くし、かつ明度の低下の度合いを軽減することである。 By the way, since the external skin preparation and the skin cosmetic contain the above-mentioned culture solution, it is possible to maintain and improve the condition of the skin such as the texture improving effect and the moisturizing effect. Here, to maintain / improve the condition of the skin means to maintain and / or improve the moisturizing property of the skin, to maintain and / or improve the texture of the skin, and to prevent and / or improve the dullness of the skin. It means to include. Specifically, the texture improving effect is an effect of improving the skin to a fine texture, that is, a state in which the skin groove on the skin surface is shallow and each skin hill shows a clear, small and beautiful triangle. Further, the dullness preventing effect is to act on a skin portion called dull skin whose lightness is lower than that of the surroundings, narrow the area of the dull skin, and reduce the degree of decrease in lightness.

皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、乾燥肌、くすみ肌及びキメ荒れ肌の少なくとも一つの症状を有する対象への投与又は適用が特に有用である。このような対象とは、例えば、乾燥肌、くすみ肌及びキメ荒れ肌の少なくとも一つを生じやすい因子を有する対象を挙げることができる。乾燥肌、くすみ肌及びキメ荒れ肌の少なくとも一つを生じやすい因子としては、例えば、環境、生活習慣、食事習慣、遺伝的要因、体質、疾患、精神的・身体的ストレス、加齢等の対象を挙げることができる。これらの因子を有する対象に皮膚外用剤及び皮膚化粧料を適用することで、乾燥肌、くすみ肌及びキメ荒れ肌の少なくとも一つを改善し、健康上又は美容上の利益が期待できる。 External skin preparations and skin cosmetics are particularly useful for administration or application to subjects having at least one symptom of dry skin, dull skin and rough skin. Such an object may be, for example, an object having a factor that tends to cause at least one of dry skin, dull skin and rough skin. Factors that are likely to cause at least one of dry skin, dull skin, and rough skin include, for example, environmental factors, lifestyle-related habits, dietary habits, genetic factors, constitution, diseases, mental / physical stress, and aging. Can be mentioned. By applying an external skin preparation and a skin cosmetic to a subject having these factors, at least one of dry skin, dull skin and rough skin can be improved, and health or cosmetic benefits can be expected.

皮膚外用剤及び皮膚化粧料の投与量及び適用量は、対象の年齢、体重、適用/投与経路、剤型、投与回数等により異なり、当業者の裁量によって広範囲に変更することができる。具体的には、その適用量又は投与量は、特に限定されないが、有効成分である培養液の乾燥重量に換算して、例えば、0.001mg/回~10g/回とすることができる。皮膚外用剤及び皮膚化粧料は、限定するものではないが、例えば6~24時間間隔で繰り返し投与又は適用投与してもよい。 The dosage and application amount of the external skin preparation and the skin cosmetics vary depending on the age, body weight, application / administration route, dosage form, number of administrations, etc. of the subject, and can be widely changed at the discretion of those skilled in the art. Specifically, the applied amount or dose thereof is not particularly limited, but can be, for example, 0.001 mg / time to 10 g / time in terms of the dry weight of the culture solution as the active ingredient. External skin preparations and skin cosmetics may be repeatedly administered or applied and administered at intervals of, for example, 6 to 24 hours, without limitation.

以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は以下の実施例に限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of examples, but the technical scope of the present invention is not limited to the following examples.

[実施例1]樹液酵母培養液及び対照品の調製
本実施例で使用する白樺樹液は全て北海道産で濃縮、希釈などの処理を行っていない原液を濾過したものを用いた。
[Example 1] Preparation of sap yeast culture sap and control product The birch sap used in this example was all produced in Hokkaido and filtered from a stock solution that had not been concentrated or diluted.

<製造例1>ガラクトミセス・レースシィ(Galactomyces reessii)
前培養の基質として北海道産の白樺樹液を用い、補助栄養成分として酵母エキス、ペプトンを加えた前培養培地を調製した(表1参照)。前培養培地をバッフル付きフラスコに入れシリコセンで蓋をして121℃で20分間殺菌を行った。殺菌後、前培養培地を30℃まで冷却し、ガラクトミセス・レースシィ(Galactomyces reessii)を1白金耳植菌した。本製造例1では、前培養培地を用いて30℃で48時間振とう前培養を行った。
<Manufacturing Example 1> Galactomyces reessii
A preculture medium was prepared by using birch sap from Hokkaido as a substrate for preculture and adding yeast extract and peptone as supplementary nutritional components (see Table 1). The preculture medium was placed in a flask with a baffle, covered with silicosen, and sterilized at 121 ° C. for 20 minutes. After sterilization, the preculture medium was cooled to 30 ° C. and 1 platinum loop was inoculated with Galactomyces reessii. In this Production Example 1, preculture was performed by shaking at 30 ° C. for 48 hours using a preculture medium.

本培養に際して、目開き20μmのカートリッジフィルターを用いて粗濾過した白樺樹液(2000g)を微生物培養用の小型ジャーファーメンターに仕込み、121℃で20分間殺菌を行った。白樺樹液を30℃まで冷却した後、前培養培地50gを添加し、水酸化ナトリウム水溶液でpH6.0のpH調整を継続して行いながら、ガラクトミセス・レースシィを30℃で培養した。培養期間中、適宜サンプリングを行い、培養液中のグルコース濃度を酵素法(Fキットグルコース:(株)JKインターナショナル)を用いて測定した。培養液中のグルコース含量を図1に示した。図1に示すように、菌の増殖につれてグルコースが消費されて減少し、当初1200ppm存在したグルコースが培養終了時には20ppm以下となった。 At the time of main culture, birch sap (2000 g) roughly filtered using a cartridge filter with an opening of 20 μm was placed in a small jar fermenter for microbial culture and sterilized at 121 ° C. for 20 minutes. After cooling the birch sap to 30 ° C, 50 g of preculture medium was added, and galactomyces racesy was cultured at 30 ° C while continuously adjusting the pH to 6.0 with an aqueous sodium hydroxide solution. During the culture period, sampling was appropriately performed, and the glucose concentration in the culture solution was measured by an enzymatic method (F kit glucose: JK International Co., Ltd.). The glucose content in the culture medium is shown in FIG. As shown in FIG. 1, glucose was consumed and decreased as the bacteria grew, and the glucose initially present at 1200 ppm became 20 ppm or less at the end of the culture.

得られた培養液を121℃で30分間、加熱処理し菌体成分を抽出した後、室温まで冷却した。得られた酵母細胞壁などの固形分を含む溶液を、プレフィルター、続いて0.45μmメンブランスフィルターにて濾過して固形物を除去し、白樺樹液ガラクトミセス培養液を得た。 The obtained culture broth was heat-treated at 121 ° C. for 30 minutes to extract bacterial cell components, and then cooled to room temperature. The obtained solution containing solids such as yeast cell wall was filtered with a pre-filter and then with a 0.45 μm membrane filter to remove solids, and a birch sap galactomyces culture solution was obtained.

<製造例2>サッカロミコプシス・カプサラリス(Saccharomycopsis capsularis)
本製造例2では、サッカロミコプシス・カプサラリス(Saccharomycopsis capsularis)を使用した以外は製造例1と同様にして、白樺樹液サッカロミコプシス培養液を得た。培養期間中のグルコースの消長についても実施例1と同様に測定した(図1参照)。
<Production Example 2> Saccharomycopsis capsularis
In this Production Example 2, a birch sap Saccharomycopsis culture solution was obtained in the same manner as in Production Example 1 except that Saccharomycopsis capsularis was used. The fate of glucose during the culture period was also measured in the same manner as in Example 1 (see FIG. 1).

<製造例3>サッカロミセス・セレビジア(Saccharomyces cerevisiae)
本製造例3では、サッカロミセス・セレビジア(Saccharomyces cerevisiae)を使用した以外は製造例1と同様にして、白樺樹液サッカロミセス培養液を得た。培養期間中のグルコースの消長についても実施例1と同様に測定した(図1参照)。
<Production Example 3> Saccharomyces cerevisiae
In this Production Example 3, a birch sap Saccharomyces culture solution was obtained in the same manner as in Production Example 1 except that Saccharomyces cerevisiae was used. The fate of glucose during the culture period was also measured in the same manner as in Example 1 (see FIG. 1).

<製造例4>複数の菌による培養
本製造例4では、ガラクトミセス・レースシィ(Galactomyces reessii)及びサッカロミセス・セレビジア(Saccharomyces cerevisiae)を使用した以外は製造例1と同様にして、白樺樹液液ガラクトミセス-サッカロミセス培養液を得た。培養期間中のグルコースの消長についても実施例1と同様に測定した(図1参照)。また、製造例4では、得られた白樺樹液ガラクトミセス-サッカロミセス培養液を真空凍結乾燥して、白樺樹液ガラクトミセス-サッカロミセス培養液凍結乾燥粉末を得た。
<Production Example 4> Culturing with a plurality of bacteria In this Production Example 4, birch sap galactomyces was used in the same manner as in Production Example 1 except that Galactomyces reessii and Saccharomyces cerevisiae were used. -Saccharomyces culture medium was obtained. The fate of glucose during the culture period was also measured in the same manner as in Example 1 (see FIG. 1). Further, in Production Example 4, the obtained birch sap galactomyces-saccharomyces culture solution was vacuum freeze-dried to obtain a birch sap galactomyces-saccharomyces culture solution freeze-dried powder.

<比較例1>無培養白樺樹液
比較例1では、目開き20μmのカートリッジフィルターを用いて粗濾過した白樺樹液(2000g)を121℃で20分間殺菌を行った。殺菌した白樺樹液を室温まで冷却しプレフィルター、続いて0.45μmメンブランスフィルターにて濾過し白樺樹液滅菌濾過物を調製した。なお、同様に、この液のグルコース濃度を酵素法(Fキットグルコース:(株)JKインターナショナル)を用いて測定した。
<Comparative Example 1> Uncultured birch sap In Comparative Example 1, birch sap (2000 g) roughly filtered using a cartridge filter with an opening of 20 μm was sterilized at 121 ° C. for 20 minutes. The sterilized birch sap was cooled to room temperature and filtered through a pre-filter and then with a 0.45 μm membrane filter to prepare a sterilized birch sap filter. Similarly, the glucose concentration of this solution was measured by an enzymatic method (F kit glucose: JK International Co., Ltd.).

<比較例2>スキムミルク培地による酵母培養
比較例2では、前培養の基質としてスキムミルク培地を調製した(表1参照)。調製した前培養培地をバッフル付きフラスコに入れ、シリコセンで蓋をして121℃で20分間殺菌を行った。殺菌後、前培養培地を30℃まで冷却し、ガラクトミセス・レースシィ(Galactomyces reessii)を1白金耳植菌した。本比較例2では、この前培養培地を用いて30℃で48時間振とう培養を行った。
<Comparative Example 2> Yeast culture with skim milk medium In Comparative Example 2, a skim milk medium was prepared as a substrate for preculture (see Table 1). The prepared preculture medium was placed in a flask with a baffle, covered with silicosen, and sterilized at 121 ° C. for 20 minutes. After sterilization, the preculture medium was cooled to 30 ° C. and 1 platinum loop was inoculated with Galactomyces reessii. In this Comparative Example 2, shaking culture was performed at 30 ° C. for 48 hours using this preculture medium.

本培養に際して、スキムミルク20gとグルコース及び酵母エキス各10gを精製水1960gに溶かした本培養培地を、微生物培養用の小型ジャーファーメンターに仕込み121℃で20分間殺菌を行った。本培養培地を30℃まで冷却した後、前培養培地50gを添加し、水酸化ナトリウム水溶液でpH6.0のpH調整を継続して行いながら、ガラクトミセス・レースシィを30℃で48時間培養した。得られたスキムミルクガラクトミセス培養液を121℃で30分間、加熱処理し菌体成分を抽出した後、室温まで冷却した。得られた酵母細胞壁などの固形分を含む溶液を、プレフィルター、続いて0.45μmメンブランスフィルターにて濾過し、固形物が除去されたスキムミルクガラクトミセス培養液を得た。 In the main culture, 20 g of skim milk and 10 g each of glucose and yeast extract were dissolved in 1960 g of purified water, and the main culture medium was placed in a small jar fermenter for microbial culture and sterilized at 121 ° C. for 20 minutes. After cooling the main culture medium to 30 ° C., 50 g of the preculture medium was added, and galactomyces racesy was cultured at 30 ° C. for 48 hours while continuously adjusting the pH to 6.0 with an aqueous sodium hydroxide solution. The obtained skim milk galactomyces culture solution was heat-treated at 121 ° C. for 30 minutes to extract bacterial cell components, and then cooled to room temperature. The obtained solution containing solids such as yeast cell walls was filtered through a pre-filter and then a 0.45 μm membrane filter to obtain a skim milk galactomyces culture medium from which solids had been removed.

<比較例3>豆乳培地による酵母培養
比較例3では、前培養の基質として豆乳培地を調製した(表1参照)。調製した前培養培地をバッフル付きフラスコに入れ、シリコセンで蓋をして121℃で20分間殺菌を行った。殺菌後、前培養培地を30℃まで冷却し、ガラクトミセス・レースシィ(Galactomyces reessii)を1白金耳植菌した。本比較例3では、この前培養培地を用いて30℃で48時間振とう培養を行った。
<Comparative Example 3> Yeast culture using soymilk medium In Comparative Example 3, soymilk medium was prepared as a substrate for preculture (see Table 1). The prepared preculture medium was placed in a flask with a baffle, covered with silicosen, and sterilized at 121 ° C. for 20 minutes. After sterilization, the preculture medium was cooled to 30 ° C. and 1 platinum loop was inoculated with Galactomyces reessii. In Comparative Example 3, the preculture medium was used for shaking culture at 30 ° C. for 48 hours.

本培養に際して、豆乳2000gを微生物培養用の小型ジャーファーメンターに仕込み121℃で20分間殺菌を行った。本培養培地を30℃まで冷却した後、前培養50gを添加し、水酸化ナトリウム水溶液でpH6.0のpH調整を継続して行いながら、ガラクトミセス・レースシィを30℃で48時間培養した。得られた豆乳ガラクトミセス培養液を121℃で30分間、加熱処理し菌体成分を抽出した後、室温まで冷却し、得られた酵母細胞壁などの固形分を含む溶液を、プレフィルター、続いて0.45μmメンブランスフィルターにて濾過し、固形物が除去された豆乳ガラクトミセス培養液を得た。 For the main culture, 2000 g of soymilk was placed in a small jar fermenter for microbial culture and sterilized at 121 ° C for 20 minutes. After cooling the main culture medium to 30 ° C., 50 g of preculture was added, and galactomyces racesy was cultured at 30 ° C. for 48 hours while continuously adjusting the pH to 6.0 with an aqueous sodium hydroxide solution. The obtained soymilk galactomyces culture solution was heat-treated at 121 ° C. for 30 minutes to extract bacterial cell components, then cooled to room temperature, and the obtained solution containing solids such as yeast cell walls was prefiltered and subsequently. The mixture was filtered through a 0.45 μm membrane filter to obtain a soymilk galactomyces culture solution from which solid matter had been removed.

Figure 2022053321000001
Figure 2022053321000001

実施例2以下に実施例1で製造した各種培養液及び比較例の培養液を用いた評価試験方法および結果を示す。評価に供した試料の一覧を表2に示した。 Examples 2 and below show evaluation test methods and results using the various culture solutions produced in Example 1 and the culture solutions of Comparative Examples. A list of samples used for evaluation is shown in Table 2.

Figure 2022053321000002
Figure 2022053321000002

[実施例2]角質水分量及び水分蒸散量による保湿性評価
表2に示した試料を用いて表3の組成のローションを作製し、40~50才代女性の被験者(10名)の前腕内側部に1日2回、4週間継続して塗布した。塗布前と塗布後2、4週間目の角質水分量をCorneometer(Courage+Khazaka社製)を用い、経皮水分蒸散量をTewameter (Courage + Khazaka electronic GmbH製)を用いてそれぞれ測定した結果を表4及び表5に示す。
[Example 2] Moisturizing evaluation based on keratin water content and water evaporation amount A lotion having the composition shown in Table 3 was prepared using the samples shown in Table 2, and the inside of the forearm of female subjects (10 persons) in their 40s and 50s. It was applied to the part twice a day for 4 consecutive weeks. The table shows the results of measuring the keratin water content before and 2 to 4 weeks after application using a Corneometer (Courage + Khazaka) and the transdermal water evaporation using a Tewameter (Courage + Khazaka electronic GmbH). 4 and Table 5 show.

Figure 2022053321000003
Figure 2022053321000003

Figure 2022053321000004
Figure 2022053321000004

表4に示したように、角質水分量については、精製水を用いた比較例4に対し、試験区1~4及び対照区1~3において水分保持量の上昇がみられた。特に、基質成分として白樺樹液を使用して酵母菌を培養した試験区1~4のすべてにおいて、角質水分量保持効果が極めて優れており、酵母培養を伴わない白樺樹液(対照区1)、スキムミルクを基質とした培養液(対照区2)及び豆乳を基質とした培養液(対照区3)においても多少の保湿効果がみられたものの試験区1~4よりは劣る結果となった。また、酵母の種類で比較すると、ガラクトミセス・レースシィ菌の培養液(試験区1)及びサッカロミコプシスの培養液(試験区2)の2試験区で角質水分保持効果が高いことが確認された。 As shown in Table 4, regarding the keratin water content, an increase in the water retention amount was observed in the test groups 1 to 4 and the control groups 1 to 3 as compared with the comparative example 4 using purified water. In particular, in all of Test Groups 1 to 4 in which yeast was cultivated using birch sap as a substrate component, the effect of retaining keratin water content was extremely excellent, and birch sap (control group 1) and skim milk without yeast culture were obtained. The culture solution using yeast as a substrate (control group 2) and the culture solution using soymilk as a substrate (control group 3) also showed some moisturizing effect, but the results were inferior to those of the test groups 1 to 4. In addition, when comparing the types of yeast, it was confirmed that the keratin water retention effect was high in the two test groups, the culture solution of galactomyces lasci (test group 1) and the culture solution of saccharomycopsis (test group 2). rice field.

Figure 2022053321000005
Figure 2022053321000005

また、表5に示すように、水分蒸散量については、対照区2(精製水)において試験期間中に環境からの影響などにより水分蒸散量の増加が認められたが、その他の試験区および対照区では経皮水分蒸散抑制作用が確認された。特に、基質成分として白樺樹液を使用して酵母菌を培養した試験区1~4のすべてにおいて水分蒸散防止持効果が極めて優れていた。酵母培養を伴わない白樺樹液(対照区1)、スキムミルクを基質とした培養液(対照区2)及び豆乳を基質とした培養液(対照区3)においても多少の水分蒸散防止効果がみられたものの、試験区1~4よりは劣る結果となった。また、酵母の種類で比較すると、ガラクトミセス・レースシィ菌を選択した白樺樹液酵母培養液(試験区1)及びサッカロミコプシスを選択した白樺樹液酵母培養液(試験区2)の2試験区で水分保持蒸散防止効果が高いことが確認された。 In addition, as shown in Table 5, regarding the amount of water evaporation, an increase in the amount of water evaporation was observed in the control group 2 (purified water) due to the influence from the environment during the test period, but other test groups and controls. In the plot, the effect of suppressing transepidermal water loss was confirmed. In particular, the effect of preventing water transpiration was extremely excellent in all of the test groups 1 to 4 in which yeast was cultivated using birch sap as a substrate component. The birch sap without yeast culture (control group 1), the culture solution using skim milk as a substrate (control group 2), and the culture solution using soymilk as a substrate (control group 3) also showed some effect of preventing water evaporation. However, the result was inferior to that of the test groups 1 to 4. In addition, when comparing the types of yeast, there were two test groups, a birch sap yeast culture sap (test group 1) in which galactomyces racesi was selected and a birch sap yeast culture sap (test group 2) in which saccharomycopsis was selected. It was confirmed that the water retention and transpiration prevention effect was high.

[実施例3]キメ改善試験1
表3に示す試料を40~50才代女性の被験者(10名)の前腕内側部に各試験区15mm×15mmの範囲をマーキングし、1日2回、4週間継続して塗布した。塗布前と塗布後のキメの状態をマイクロスコープ((株)キーエンス製)により撮影し比較を行った。画像を以下の3項目(皮溝の深浅、皮丘の形状、皮丘の大きさ)について下記の5段階の評点で評価を実施し、被験者10名の評点を平均した値を表6~8に示した。
[Example 3] Texture improvement test 1
The samples shown in Table 3 were marked on the medial forearm of female subjects (10 subjects) in their 40s and 50s in a range of 15 mm × 15 mm in each test group, and were applied twice a day for 4 consecutive weeks. The texture before and after application was photographed with a microscope (manufactured by KEYENCE CORPORATION) and compared. The images were evaluated for the following 3 items (depth of skin groove, shape of skin hill, size of skin hill) with the following 5 grades, and the average values of the scores of 10 subjects are shown in Tables 6-8. It was shown to.

(1)皮溝の深浅
5 皮溝が大変浅い
4 皮溝がやや浅い
3 皮溝が通常程度
2 皮溝がやや深い
1 皮溝が大変深い
(2)皮丘の形状
5 すべてきれいな三角形である
4 ほぼ三角形である。
3 三角形以外の皮丘がやや目立つ
2 三角形以外の皮丘が目立つ
1 三角形以外の皮丘が大変目立つ
(3)皮丘の大きさ
5 とても小さく整っている
4 やや小さい
3 中程度の大きさである
2 やや大きい
1 大変大きい
(1) Deep and shallow skin groove 5 Very shallow skin groove 4 Slightly shallow skin groove 3 Normal degree of skin groove 2 Slightly deep skin groove 1 Very deep skin groove (2) Shape of skin hill 5 All are beautiful triangles 4 It is almost a triangle.
3 Skin hills other than triangles are slightly conspicuous 2 Skin hills other than triangles are conspicuous 1 Skin hills other than triangles are very conspicuous (3) Skin hill size 5 Very small and well-organized 4 Slightly small 3 Medium size Yes 2 Slightly large 1 Very large

Figure 2022053321000006
Figure 2022053321000006

Figure 2022053321000007
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Figure 2022053321000008
Figure 2022053321000008

表6~8に示すように、精製水を用いた比較例4に対し、試験区1~4及び対照区1~3においてキメ肌改善効果が確認された。特に、基質成分として白樺樹液を使用して酵母菌を培養した試験区1~4のすべてにおいて、キメ肌改善効果が極めて優れていた。酵母培養を伴わない白樺樹液(対照区1)、スキムミルクを基質とした培養液(対照区2)及び豆乳を基質とした培養液(対照区3)においても多少のキメ肌改善効果がみられたものの、試験区1~4よりは劣る結果となった。酵母の種類で比較すると、ガラクトミセス・レースシィ菌を選択した白樺樹液酵母培養液(試験区1)でキメ肌改善効果が高いことが確認された。 As shown in Tables 6 to 8, the effect of improving textured skin was confirmed in Test Groups 1 to 4 and Control Groups 1 to 3 with respect to Comparative Example 4 using purified water. In particular, in all of Test Groups 1 to 4 in which yeast was cultivated using birch sap as a substrate component, the effect of improving textured skin was extremely excellent. Birch sap without yeast culture (control group 1), a culture solution using skim milk as a substrate (control group 2), and a culture solution using soymilk as a substrate (control group 3) also showed some effect of improving textured skin. However, the result was inferior to that of the test groups 1 to 4. Comparing the types of yeast, it was confirmed that the birch sap yeast culture broth (Test Group 1) in which galactomyces lasci was selected had a high effect of improving textured skin.

[実施例4]べたつき評価試験1
本実施例4では、実施例2における連続塗布試験期間の2週目において、各試験区についてローション塗布前及び塗布後15分間乾燥した後の塗布部位のべたつきについて、皮膚摩擦力評価装置Frictiometer FR700(Courage+Khazaka社製)により測定し比較を行った。塗布前の摩擦力値を100とした時の塗布後の値を求め、被験者10名の平均値をとり表9に示した。
[Example 4] Stickiness evaluation test 1
In Example 4, in the second week of the continuous application test period in Example 2, the skin friction force evaluation device Frictiometer FR700 (Frictiometer FR700) was used for the stickiness of the application site before applying lotion and after drying for 15 minutes after application of each test group. It was measured by Courage + Khazaka) and compared. The value after application was obtained when the frictional force value before application was 100, and the average value of 10 subjects was taken and shown in Table 9.

Figure 2022053321000009
Figure 2022053321000009

表9に示すように、対照区1においては、含まれる糖分に起因するべたつきがあり、摩擦力も非常に高い値を示した。すなわち、白樺樹液そのものはべたつき感を与えることが明らかとなった。また、対照区2~3のスキムミルク、豆乳を基質とした酵母培養液も対照区1程ではないが高い摩擦力を示しべたつき性を示した。これらと比較して、基質成分として白樺樹液を使用して酵母菌を培養した試験区1~4では、対照区4の精製水に近い値となっており、べたつき感を与えることなく優れた使用感であることが示された。 As shown in Table 9, in the control group 1, there was stickiness due to the sugar contained, and the frictional force also showed a very high value. That is, it was clarified that the birch sap itself gives a sticky feeling. In addition, the yeast culture broths using skim milk and soymilk as substrates in the control groups 2 and 3 also showed high frictional force and stickiness, though not as much as in the control group 1. Compared with these, in the test groups 1 to 4 in which yeast was cultivated using birch sap as a substrate component, the values were close to those of the purified water in the control group 4, and the values were excellent without giving a sticky feeling. It was shown to be a feeling.

[実施例5]キメ改善試験2
本実施例5では、表10に示す試料を40~50才代女性の被験者(10名)の左右の頬に1日2回、4週間継続して塗布した。右頬を試験区、左頬を対照区として、塗布前と塗布後のキメの状態を皮膚画像解析装置(VISIA TM Evolution, Canfield社製)を用いて測定し、キメ評価を数値化した結果を表11に示した。
[Example 5] Texture improvement test 2
In Example 5, the samples shown in Table 10 were applied to the left and right cheeks of female subjects (10 subjects) in their 40s and 50s twice a day for 4 consecutive weeks. With the right cheek as the test plot and the left cheek as the control plot, the texture condition before and after application was measured using a skin image analyzer (VISIA TM Evolution, manufactured by Canfield), and the results of quantifying the texture evaluation were obtained. It is shown in Table 11.

Figure 2022053321000010
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Figure 2022053321000011
Figure 2022053321000011

表11に示すように、本実施例における検討でも、基質成分として白樺樹液を使用してガラクトミセスを培養した試験区1は、白樺樹液そのものを使用した対照区よりもキメ改善効果が高いことが確認された。 As shown in Table 11, in the study in this example, the test group 1 in which the galactomyces were cultured using the birch sap as the substrate component had a higher texture improving effect than the control group using the birch sap itself. confirmed.

[実施例6]くすみ改善試験
本実施例6では、実施例5の試験と並行して、試験区と対照区でのくすみ改善効果を測定した。くすみの評価は測色装置である色彩色差計(コニカミノルタ製)を用い、L*a*b*表色系における明度指数L*値を求め解析した。塗布前と4週間連続塗布後の結果を表12に示した(表中、L*値は被験者(10名)平均値である)。
[Example 6] Dullness improvement test In this Example 6, the dullness improvement effect in the test group and the control group was measured in parallel with the test of Example 5. The dullness was evaluated by using a colorimeter (manufactured by Konica Minolta), which is a colorimeter, to obtain and analyze the brightness index L * value in the L * a * b * color system. The results before and after 4 consecutive weeks of application are shown in Table 12 (in the table, the L * values are the average values of the subjects (10 subjects)).

Figure 2022053321000012
Figure 2022053321000012

表12に示すように、基質成分として白樺樹液を使用してガラクトミセスを培養した試験区1は、白樺樹液そのものを使用した対照区よりもくすみ改善効果が高いことが確認された。 As shown in Table 12, it was confirmed that the test group 1 in which the galactomyces were cultured using the birch sap as the substrate component had a higher dullness improving effect than the control group using the birch sap itself.

[実施例7]べたつき評価試験2(官能試験)
本実施例7では、実施例5及び6の試験中にべたつき感について官能試験を行った。具体的には、試験の開始後1週間から4週間まで毎週下記5段階の評点で評価を実施した。被験者10名の評点を平均した結果を表13に示した。
肌のべたつき評価
5:さっぱり
4:ややさっぱり
3:普通
2:ややべたつく
1:べたつく
[Example 7] Stickiness evaluation test 2 (sensory test)
In Example 7, a sensory test was performed on the stickiness during the tests of Examples 5 and 6. Specifically, the evaluation was carried out every week from 1 week to 4 weeks after the start of the test on the following 5 grades. Table 13 shows the results of averaging the scores of 10 subjects.
Evaluation of skin stickiness 5: Refreshing 4: Slightly refreshing 3: Normal 2: Slightly sticky 1: Sticky

Figure 2022053321000013
Figure 2022053321000013

表13に示すように、基質成分として白樺樹液を使用してガラクトミセスを培養した試験区は、全期間を通じてさっぱりとした感触を与える結果となり、白樺樹液そのものを使用した対照区は樹液中の糖分の影響でべたついた感触を与える結果となった。 As shown in Table 13, the test plots in which galactomyces were cultured using birch sap as a substrate component gave a refreshing feel throughout the entire period, and the control plot using birch sap itself had sugar content in the sap. The result was that it gave a sticky feel due to the influence of.

[実施例8]化粧水の製造例
本実施例8では、表14の処方に従い、成分(1)~(11)を80℃で攪拌し、溶解後に室温まで冷却することにより、化粧水(白樺樹液酵母培養液配合化粧水)を製造した。また、製造例1で調製した酵母培養白樺樹液を添加しないこと以外は全く同様にして対照化粧水を比較例1の通り製造した。得られた化粧水はいずれも清澄であり、40℃、相対湿度(RH)75%の条件下において3ヶ月間白濁を生じることもなく安定であった。
[Example 8] Production example of cosmetic water In this Example 8, the components (1) to (11) are stirred at 80 ° C. and cooled to room temperature after being dissolved according to the formulation shown in Table 14, so that the cosmetic water (white birch) is cooled. A lotion containing sap yeast culture solution) was produced. Further, the control lotion was produced as in Comparative Example 1 in exactly the same manner except that the yeast-cultured birch sap prepared in Production Example 1 was not added. All of the obtained lotions were clear and stable under the conditions of 40 ° C. and 75% relative humidity (RH) for 3 months without causing cloudiness.

Figure 2022053321000014
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これらの化粧水について、40~50才代女性の被験者(10名)による官能試験を行った。4項目(肌のしっとりさ、肌の滑らかさ、肌のべたつき、感覚刺激)について下記5段階の評点で評価を実施した。被験者(10名)の評点の平均値を表15に示した。 These lotions were subjected to a sensory test by female subjects (10 people) in their 40s and 50s. The four items (skin moistness, skin smoothness, skin stickiness, and sensory stimulation) were evaluated on the following five grades. Table 15 shows the average scores of the subjects (10 subjects).

(1) 肌のしっとりさ
5:しっとりする
4:ややしっとりする
3:普通
2:ややかさつく
1:かさつく
(2) 肌の滑らかさ
5:滑らか
4:やや滑らか
3:普通
2:ややざらつく
1:ざらつく
(3) 肌のべたつき
5:さっぱり
4:ややさっぱり
3:普通
2:ややべたつく
1:べたつく
(4) 感覚刺激
5:特に刺激を感じない。
4:やや刺激を感じるが気にならない。
3:ピリピリ感、ホテリ感、チクチク感、カユミ等の刺激をやや感じるが許容可。
2:ピリピリ感、ホテリ感、チクチク感、カユミ等の刺激が強い。
1:ピリピリ感、ホテリ感、チクチク感、カユミ等の刺激が非常に強い。
0:刺激が強く、試験継続は不可
(1) Moisturizing skin 5: Moisturizing 4: Slightly moisturizing 3: Normal 2: Slightly dry 1: Dry
(2) Skin smoothness 5: Smooth 4: Slightly smooth 3: Normal 2: Slightly rough 1: Rough
(3) Skin stickiness 5: Refreshing 4: Slightly refreshing 3: Normal 2: Slightly sticky 1: Sticky
(4) Sensory stimulation 5: No particular stimulation is felt.
4: I feel a little stimulus, but I don't mind.
3: Slight stimuli such as tingling, hotness, tingling, and swelling are acceptable.
2: Strong irritation such as tingling sensation, hot feeling, tingling sensation, and swelling.
1: Stimulation such as tingling sensation, hot feeling, tingling sensation, and swelling is very strong.
0: The stimulus is strong and the test cannot be continued.

Figure 2022053321000015
Figure 2022053321000015

表15に示すように、から明らかなように、基質成分として白樺樹液を使用してガラクトミセスを培養した培養液を配合した化粧水は、対照化粧水1及び2より優れた保湿性を示し、べたつきが抑えられる効果を示した。 As is shown in Table 15, as is clear from the above, the lotion containing the culture medium obtained by culturing galactomyces using birch sap as a substrate component showed better moisturizing properties than the control lotions 1 and 2. It showed the effect of suppressing stickiness.

[実施例9]クリーム剤の製造
本実施例9では、表16に示す処方に従い、成分(1)~(7)を80℃で混合攪拌して得られた混合物に、別途、成分(8)~(11)を80℃で混合攪拌して得られた混合物を加え、ホモジナイズし、攪拌しながら室温まで冷却し、クリーム剤を製造した。
[Example 9] Production of cream agent In this example 9, the components (1) to (7) were mixed and stirred at 80 ° C. according to the formulation shown in Table 16, and the component (8) was separately added to the mixture obtained. The mixture obtained by mixing and stirring ~ (11) at 80 ° C. was added, homogenized, and cooled to room temperature while stirring to produce a cream.

得られたクリーム剤は使用中にべたつかず、肌をしっとりとさせるものであった。 The obtained cream was not sticky during use and moisturized the skin.

Figure 2022053321000016
Figure 2022053321000016

[実施例10]ボディジェル剤の製造
実施例10では、表17の処方に従い、成分(1)~(7)を攪拌し、溶解してボディジェル剤を製造した。得られたボディジェル剤は肌をしっとりとさせ、刺激の無い製剤であった。
[Example 10] Production of body gel agent In Example 10, components (1) to (7) were stirred and dissolved according to the formulation shown in Table 17 to produce a body gel agent. The obtained body gel agent moisturized the skin and was a non-irritating preparation.

Figure 2022053321000017
Figure 2022053321000017

[実施例11]シャンプーの製造
実施例11では、表18の処方に従い、成分(1)と(2)を加熱溶解し、60℃に加温した成分(3)、(4)を添加して攪拌した。ここに成分(5)~(8)を添加して攪拌した。ここに成分(9)をpH5.5~6.0となるように添加し、さらに、成分(11)及び(12)を成分(10)に溶解したものを添加した。全量(100%)となるまで成分(13)を添加し、シャンプーを製造した。
[Example 11] Production of shampoo In Example 11, components (1) and (2) were heated and dissolved, and components (3) and (4) heated to 60 ° C. were added according to the formulation shown in Table 18. Stirred. Ingredients (5) to (8) were added thereto and stirred. The component (9) was added here so as to have a pH of 5.5 to 6.0, and further, the components (11) and (12) dissolved in the component (10) were added. Ingredient (13) was added until the total amount (100%) was reached to produce a shampoo.

得られたシャンプーを用いて洗髪したところ髪の感触が滑らかとなり、髪に潤いを与えることができた。 When the hair was washed with the obtained shampoo, the feel of the hair became smooth and the hair could be moisturized.

Figure 2022053321000018
Figure 2022053321000018

[実施例12]クレンジングクリームの製造
実施例12では、表19の処方に従い、攪拌して全成分を均一に混合することにより、クレンジング組成物を得た。得られたクレンジングクリームは洗浄性が良好でさっぱりとした使用後感を与えるものであった。
[Example 12] Production of cleansing cream In Example 12, a cleansing composition was obtained by stirring and uniformly mixing all the components according to the formulation shown in Table 19. The obtained cleansing cream had good detergency and gave a refreshing after-use feeling.

Figure 2022053321000019
Figure 2022053321000019

[実施例13]リンス剤の製造
実施例13では、表20の処方に従い、攪拌して全成分を均一に混合することにより、リンス組成物を得た。得られたリンスは、髪や地肌にしっとりとした使用後感を与えるものであった。
[Example 13] Production of rinsing agent In Example 13, a rinsing composition was obtained by stirring and uniformly mixing all the components according to the formulation shown in Table 20. The obtained rinse gave a moist feeling after use to the hair and the scalp.

Figure 2022053321000020
Figure 2022053321000020

[実施例14]乳液の製造
実施例14では、表21の処方に従い、攪拌して全成分を均一に混合することにより、乳液組成物を得た。得られた乳液は、肌にしっとりとした潤い感を与えるものであった。
[Example 14] Production of emulsion In Example 14, an emulsion composition was obtained by stirring and uniformly mixing all the components according to the formulation shown in Table 21. The obtained milky lotion gave the skin a moist and moisturized feeling.

Figure 2022053321000021
Figure 2022053321000021

[実施例15]マスクの製造
実施例15では、表22に示す組成からなる皮膚外用料を不織布に含浸させたマスクを作製した。作製したマスクで15分間顔面を覆い、使用後に適度な潤いと張り感を与えるものであった。
[Example 15] Production of mask In Example 15, a mask was prepared by impregnating a non-woven fabric with a skin external preparation having the composition shown in Table 22. The face was covered with the prepared mask for 15 minutes to give an appropriate moisturizing and tense feeling after use.

Figure 2022053321000022
Figure 2022053321000022

Claims (7)

白樺樹液を含む培地にて酵母菌を生育させた培養液。 A culture medium in which yeast is grown in a medium containing birch sap. 上記白樺樹液がBetula platyphyllaから得られた樹液であることを特徴とする請求項1記載の培養液。 The culture solution according to claim 1, wherein the birch sap is a sap obtained from Betula platyphylla. 酵母菌がガラクトミセス属に属する酵母、サッカロミコプシス属に属する酵母及びサッカロマイセス属に属する酵母からなる群から選ばれる1つの酵母又は当該群から選ばれる複数の酵母であることを特徴とする請求項1又は2記載の培養液。 A claim characterized in that the yeast is one yeast selected from the group consisting of yeast belonging to the genus Saccharomyces, yeast belonging to the genus Saccharomyces and yeast belonging to the genus Saccharomyces, or a plurality of yeasts selected from the group. Item 3. The culture solution according to Item 1 or 2. 請求項1乃至3いずれか一項記載の培養液を含む皮膚外用剤。 An external skin preparation containing the culture solution according to any one of claims 1 to 3. 請求項1乃至3いずれか一項記載の培養液を含む皮膚化粧料。 A skin cosmetic containing the culture solution according to any one of claims 1 to 3. 保湿性向上効果、キメ改善効果及びくすみ改善効果からなる群から選ばれる少なくとも1つの効果を示す請求項5記載の皮膚化粧料。 The skin cosmetic according to claim 5, which exhibits at least one effect selected from the group consisting of a moisturizing effect, a texture improving effect, and a dullness improving effect. 白樺樹液を含む培地にて酵母菌を培養する工程中に白樺樹液中の低分子糖が酵母の栄養源として消費され、培養開始前と比較して白樺樹液中の低分子糖が低濃度となることを特徴とする培養液の製造方法。

During the process of culturing yeast in a medium containing birch sap, the small molecule sugar in the birch sap is consumed as a nutrient source for yeast, and the concentration of the small molecule sugar in the birch sap becomes lower than before the start of culturing. A method for producing a culture medium, which is characterized by the above.

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