JP2021535130A - Ｍｄｍ２阻害剤を調製する方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、２−（（３Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−１−（（Ｓ）−１−（イソプロピルスルホニル）−３−メチルブタン−２−イル）−３−メチル−２−オキソピペリジン−３−イル）酢酸を調製する商用の方法の他に、その中間体を提供する。

Description

本発明は、２−（（３Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−１−（（Ｓ）−１−（イソプロピルスルホニル）−３−メチルブタン−２−イル）−３−メチル−２−オキソピペリジン−３−イル）酢酸（「化合物Ａ」）を調製する方法及びその中間体を提供する。

ｐ５３は、細胞周期停止、アポトーシス、老化、及びＤＮＡ修復に関与する多数の遺伝子の転写を活性化させることにより細胞ストレスに応答する腫瘍抑制因子及び転写因子である。ｐ５３活性化の原因を有することが頻繁でない正常細胞とは異なり、腫瘍細胞は、低酸素及びアポトーシス促進性がん遺伝子活性化を含む様々な傷害からの定常的な細胞ストレス下にある。そのため、腫瘍におけるｐ５３経路の不活性化についての強い選択的な利点があり、ｐ５３機能の排除は腫瘍生存のための必要条件であり得ることが提唱されている。この概念のサポートとして、３つのグループの研究者らは、マウスモデルを使用して、ｐ５３機能の非存在は確立された腫瘍の維持のための連続的な要求であることを実証している。研究者らが不活性化されたｐ５３を有する腫瘍に対してｐ５３機能を回復させた場合、腫瘍は退縮した。

ｐ５３は、固形腫瘍の５０％及び液性腫瘍の１０％において突然変異及び／又は喪失により不活性化される。ｐ５３経路の他の鍵となるメンバーもまた、がんにおいて遺伝子的に又はエピジェネティックに変更される。がんタンパク質であるＭＤＭ２は、ｐ５３機能を阻害し、１０％もの高さであると報告されている発生率において遺伝子増幅により活性化される。そしてＭＤＭ２は、別の腫瘍抑制因子、ｐ１４ＡＲＦにより阻害される。ｐ５３の下流の変更は、ｐ５３^ＷＴ腫瘍においてｐ５３経路を少なくとも部分的に不活性化させる原因となり得ることが示唆されている。この概念のサポートとして、一部のｐ５３^ＷＴ腫瘍は、細胞周期停止を起こす能力はインタクトなままであるが、低減したアポトーシス能力を呈するようである。１つのがん処置手順は、ＭＤＭ２に結合してｐ５３とのその相互作用を中和する小分子の使用を伴う。ＭＤＭ２は、３つの機構：１）Ｅ３ユビキチンリガーゼとして作用してｐ５３分解を促進すること、２）ｐ５３転写活性化ドメインに結合してそれを遮断すること、及び３）ｐ５３を核から細胞質へとエクスポートすることによりｐ５３活性を阻害する。これらの３つ全ての機構は、ＭＤＭ２−ｐ５３相互作用を中和することにより遮断される。特に、この治療手順は、ｐ５３^ＷＴである腫瘍に応用できる可能性があり、小分子ＭＤＭ２阻害剤を用いた研究は、インビトロ及びインビボの両方で腫瘍成長における有望な低減をもたらした。さらに、ｐ５３不活性化腫瘍を有する患者において、ＭＤＭ２阻害による正常組織中の野生型ｐ５３の安定化は、有糸分裂毒からの正常組織の選択的な保護を可能とする可能性がある。

本発明は、ｐ５３とＭＤＭ２との相互作用を阻害してｐ５３下流エフェクター遺伝子を活性化させることができる化合物に関する。そのため、本発明の化合物は、がん、細菌感染症、ウイルス感染症、潰瘍及び炎症の処置において有用である。特に、本発明の化合物は、乳房、結腸、肺及び前立腺腫瘍などの固形腫瘍、並びにリンパ腫及び白血病などの液性腫瘍を処置するために有用である。本明細書において使用される場合、ＭＤＭ２はヒトＭＤＭ２タンパク質を指し、ｐ５３はヒトｐ５３タンパク質を指す。ヒトＭＤＭ２はまた、ＨＤＭ２又はｈＭＤＭ２と称され得る。

化合物、２−（（３Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−１−（（Ｓ）−１−（イソプロピルスルホニル）−３−メチルブタン−２−イル）−３−メチル−２−オキソピペリジン−３−イル）酢酸（本明細書において化合物Ａと称されることもある）はＭＤＭ２阻害剤であり、以下の化学構造を有する。化合物Ａは、ＰＣＴ出願公開第

ＷＯ２０１１／１５３５０９（実施例３６２）に開示されており、様々ながんの処置についてヒト臨床試験において研究されている。本発明は、化合物Ａを調製する向上した方法の他に、その中間体化合物を提供する。

一実施形態では、本発明は、以下の化合物（ＤＨＯ）

を調製する方法であって、化合物（ＡＢＡ）

をメトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェートと反応させることを含む、方法を提供する。一実施形態では、この反応は塩基の存在下で実行される。特定の実施形態では、塩基は、アルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩、例えば、ＫＯＡｃ、ＮａＯＡｃ、ＬｉＯＡｃ、ＣａＣＯ_３及びＫ_２ＣＯ_３などである。一実施形態では、反応は溶媒中で実行される。特定の実施形態では、溶媒は、ベンゼン、トルエン、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、ヘキサン、テトラヒドロフラン、エチルアセテート、ＨＭＰＡ、ＨＭＰＴ、ＤＭＳＯ、エチレングリコール、ＤＭＥ、ＤＭＦ、ジエチルエーテル、アセトニトリル、メタノール、エタノール、アセトン又はこれらの混合物である。

一実施形態では、本発明は、化合物（ＳＵＬ）

を調製する方法であって、化合物

をイソプロピル化剤、例えば、以下に限定されないが、イソプロピルスルフィネート亜鉛クロリドと反応させることを含む、方法を提供する。一実施形態では、反応は、アルカリ土類金属塩の存在下で実行される。特定の実施形態では、アルカリ土類金属塩はマグネシウム塩、例えば、以下に限定されないが、ＭｇＢｒ_２又はＭｇＣｌ_２である。特定の実施形態では、イソプロピル化剤は、イソプロピルマグネシウムクロリドからインサイチューで生成される。一実施形態では、反応は、１００℃〜２００℃、例えば、１００℃〜１５０℃、例えば、１２０℃、又は１５０℃〜２００℃、例えば、１８０℃の温度において実行される。

一実施形態では、本発明は、７．３°±０．２°の２θ、１４．５°±０．２°の２θ、１５．８°±０．２°の２θ、１５．９°±０．２°の２θ、及び２３．１°±０．２°の２θにおけるピークを含む反射型Ｘ線粉末回折パターンにより特徴付けられる（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−４−（（Ｓ）−４−イソプロピル−４，５−ジヒドロオキサゾール−２−イル）−４−メチルヘプタ−６−エン−１−オール（ＤＨＯ）の結晶形態を提供する。一実施形態では、ＤＨＯ結晶（ＤＨＯ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ）の反射型Ｘ線粉末回折パターンは、８．５°±０．２°の２θ、１０．０°±０．２°の２θ、１１．０°±０．２°の２θ、１３．４°±０．２°の２θ、１８．８°±０．２°の２θ、及び２２．０°±０．２°の２θにおけるピークをさらに含む。一実施形態では、ＤＨＯ結晶の反射型Ｘ線粉末回折パターンは、６．３°±０．２°の２θ、１０．５°±０．２°の２θ、１１．５°±０．２°の２θ、１２．８°±０．２°の２θ、１４．８°±０．２°の２θ、１５．２°±０．２°の２θ、１７．０°±０．２°の２θ、１７．５°±０．２°の２θ、１７．８°±０．２°の２θ、１８．４°±０．２°の２θ、１９．０°±０．２°の２θ、１９．７°±０．２°の２θ、１９．９°±０．２°の２θ、２０．７°±０．２°の２θ、２１．２°±０．２°の２θ、２１．３°±０．２°の２θ、２２．４°±０．２°の２θ、２３．６°±０．２°の２θ、２４．２°±０．２°の２θ、２４．９°±０．２°の２θ、２５．７°±０．２°の２θ、２６．３°±０．２°の２θ、２７．０°±０．２°の２θ、２８．３°±０．２°の２θ、２８．７°±０．２°の２θ、２９．３°±０．２°の２θ、２９．７°±０．２°の２θ、３０．８°±０．２°の２θ、３１．４°±０．２°の２θ、３１．８°±０．２°の２θ、３３．０°±０．２°の２θ、３４．２°±０．２°の２θ、３５．８°±０．２°の２θ、３７．０°±０．２°の２θ、及び３７．５°±０．２°の２θにおける１つ以上のピークをさらに含む。一実施形態では、ＤＨＯの結晶形態は結晶性無水物である。一実施形態では、結晶性ＤＨＯの反射型Ｘ線粉末回折は、Ｃｕ−Ｋα放射線を使用して実行される。

以下の図は、記載される発明の特有の実施形態を表し、本発明を他に限定することは意図されない。

６０℃での経時的な（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン（ＤＬＡＣ）の（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル）−２−メチルペンタ−４−エンアミド（ＡＢＡ）への変換速度を示す。 １１５℃での経時的なＤＬＡＣのＡＢＡへの変換速度を示す。 ２５℃での結晶化処理の間の（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−４−（（Ｓ）−４−イソプロピル−４，５−ジヒドロオキサゾール−２−イル）−４−メチルヘプタ−６−エン−１−オール（ＤＨＯ）の溶解度を示す。 １２０℃でイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドを使用した経時的な（３Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−１−（（Ｓ）−１−（イソプロピルスルホニル）−３−メチルブタン−２−イル）−３−メチルピペリジン−２−オン（ＳＵＬ）の収率を示す（反応混合物中、１４ｍｏｌ％の水（対（３Ｓ，５Ｓ，６Ｒ，８Ｓ）−８−アリル−６−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−３−イソプロピル−８−メチル−２，３，５，６，７，８−ヘキサヒドロオキサゾロ［３，２−ａ］ピリジン−４−イウムナフタレン−１−スルホネート、ヘミトルエン溶媒和物（ＯＸＯＳ）））。 １８０℃でイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドを使用した経時的なＳＵＬの収率を示す（反応混合物中、（１１ｍｏｌ％の水（対ＯＸＯＳ））。 ＴＨＦ−ｄ_８中の異なるイソプロピルスルフィネート種の^１Ｈ ＮＭＲ解析を示す。 １２０℃でＭｇスルフィネート−ＺｎＣｌ_２を使用した経時的なＳＵＬの収率を示す（反応混合物中、１７ｍｏｌ％の水（ｖｓ ＯＸＯＳ））。 １８０℃でＭｇスルフィネート−ＺｎＣｌ_２を使用した経時的なＳＵＬの収率を示す（反応混合物中、１７ｍｏｌ％の水（対ＯＸＯＳ））。 ２０℃での反応混合物中の水の重量％と比べた（３Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−（（１，２，４−トリオキソラン−３−イル）メチル）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−１−（（Ｓ）−１−（イソプロピルスルホニル）−３−メチルブタン−２−イル）−３−メチルピペリジン−２−オン（ＯＺＯ）のＬＣ面積％を示す。 連続モードオゾン分解及びピニック酸化用の装置の図式を示す。 連続オゾン分解処理装置の写真を示す。 半バッチモードオゾン分解及びピニック酸化用の装置の図式を示す。 半バッチモードオゾン分解についてのＳＵＬの消費速度を示す。 オゾン分解製造開発用のスパージャーの進化を示す。 結晶化処理の間の２３２−ＤＡＢの溶解度を示す。 結晶化処理の間の化合物Ａの溶解度を示す。 反射モードにおいて測定された結晶性ＤＨＯの粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。 ピーク位置を指し示すスティックにより、反射モードにおいて測定された結晶性ＤＨＯの粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。 結晶性ＤＨＯの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析からのサーモグラムを示す。

本発明は、２−（（３Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−１−（（Ｓ）−１−（イソプロピルスルホニル）−３−メチルブタン−２−イル）−３−メチル−２−オキソピペリジン−３−イル）酢酸（「化合物Ａ」）を調製する方法の他に、その中間体、及びこれらの中間体を調製する方法を提供する。

一態様では、本発明は、高純度の化合物Ａの製造方法を提供する。

別の態様では、本発明は、化合物Ａの調製において第一級アルコール中間体の選択的なインサイチュー活性化を達成するためにベンチ安定なビルスマイヤー試薬、メトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェート（Ｃｏｒｂｅｔｔ，Ｍ．Ｔ．；Ｃａｉｌｌｅ，Ｓ．，Ｓｙｎｌｅｔｔ ２００７，２８，２８４５）を用いる。

別の態様では、本開示は、化合物Ａの調製においてスルホン中間体の高収率調製を達成するためにベンチ安定な結晶性イソプロピル化剤、イソプロピルカルシウムスルフィネートを用いる。

別の態様では、本開示は、化合物Ａを調製する方法においてバッチ製造モード又は連続製造モードのいずれかにおいて水性溶媒混合物中で実行される安全なオゾン分解反応を用いる。

別の態様では、本発明は、７．３°±０．２°の２θ、１４．５°±０．２°の２θ、１５．８°±０．２°の２θ、１５．９°±０．２°の２θ、及び２３．１°±０．２°の２θにおけるピークを含む反射型Ｘ線粉末回折パターンにより特徴付けられる（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−４−（（Ｓ）−４−イソプロピル−４，５−ジヒドロオキサゾール−２−イル）−４−メチルヘプタ−６−エン−１−オール（ＤＨＯ）の結晶形態を提供する。一実施形態では、ＤＨＯ結晶（ＤＨＯ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ）の反射型Ｘ線粉末回折パターンは、８．５°±０．２°の２θ、１０．０°±０．２°の２θ、１１．０°±０．２°の２θ、１３．４°±０．２°の２θ、１８．８°±０．２°の２θ、及び２２．０°±０．２°の２θにおけるピークをさらに含む。一実施形態では、ＤＨＯ結晶の反射型Ｘ線粉末回折パターンは、６．３°±０．２°の２θ、１０．５°±０．２°の２θ、１１．５°±０．２°の２θ、１２．８°±０．２°の２θ、１４．８°±０．２°の２θ、１５．２°±０．２°の２θ、１７．０°±０．２°の２θ、１７．５°±０．２°の２θ、１７．８°±０．２°の２θ、１８．４°±０．２°の２θ、１９．０°±０．２°の２θ、１９．７°±０．２°の２θ、１９．９°±０．２°の２θ、２０．７°±０．２°の２θ、２１．２°±０．２°の２θ、２１．３°±０．２°の２θ、２２．４°±０．２°の２θ、２３．６°±０．２°の２θ、２４．２°±０．２°の２θ、２４．９°±０．２°の２θ、２５．７°±０．２°の２θ、２６．３°±０．２°の２θ、２７．０°±０．２°の２θ、２８．３°±０．２°の２θ、２８．７°±０．２°の２θ、２９．３°±０．２°の２θ、２９．７°±０．２°の２θ、３０．８°±０．２°の２θ、３１．４°±０．２°の２θ、３１．８°±０．２°の２θ、３３．０°±０．２°の２θ、３４．２°±０．２°の２θ、３５．８°±０．２°の２θ、３７．０°±０．２°の２θ、及び３７．５°±０．２°の２θにおける１つ以上のピークをさらに含む。一実施形態では、ＤＨＯの結晶形態は結晶性無水物である。一実施形態では、結晶性ＤＨＯの反射型Ｘ線粉末回折は、Ｃｕ−Ｋα放射線を使用して実行される。

別の態様では、本開示は、有効に精製され得る、化合物Ａの１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）塩の結晶化による化合物Ａの純度の制御を提供する。

一実施形態では、本発明は、出発材料ＤＬＡＣから４９．８％の全体収率で化合物Ａ（９９．９ＬＣ面積％）を調製するスケールアップのために好適な方法を提供する。

「含む」という用語は、オープンエンドであることが意図され、指し示される成分を含むが、他の要素を除外しない。

「治療有効量」という用語は、特定の疾患若しくは状態の１つ以上の症状を寛解させ、減弱し若しくは排除する、又は特定の疾患若しくは状態のより多くの症状のうちの１つの発症を予防し、若しくは遅延させる、化合物又は治療的に活性な化合物の組合せの量を指す。

「患者」及び「対象」という用語は、交換可能に使用されることがあり、動物、例えば、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ及びヒトを指す。特定の患者は哺乳動物である。患者という用語は、男性（雄）及び女性（雌）を含む。

「薬学的に許容される」という用語は、参照される物質、例えば、本発明の化合物、又は該化合物の塩、又は該化合物を含有する製剤、又は特定の賦形剤が、患者への投与に好適であることを意味する。

「処置する」（ｔｒｅａｔｉｎｇ）、「処置する」（ｔｒｅａｔ）又は「処置」などの用語は、予防的（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）（例えば、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ））及び姑息的処置を含む。

「賦形剤」という用語は、典型的には製剤及び／又は患者への投与のために含まれる、活性の薬学的原料成分（ＡＰＩ）以外の、任意の薬学的に許容される添加剤、担体、希釈剤、佐剤、又は他の原料成分を指す。

本発明の化合物は、治療有効量で患者に投与され得る。化合物は、単独で又は薬学的に許容される組成物若しくは製剤の部分として投与され得る。追加的に、化合物又は組成物は、例えばボーラス注射により、全て一度に、一連の錠剤などにより、複数回で投与され、又は、例えば経皮送達を使用して、時間的期間にわたり実質的に均一に送達され得る。化合物の用量は経時的に変更され得ることもまた留意される。

本発明の化合物、又はその薬学的に許容される塩はまた、１つ以上の追加の薬学的に活性の化合物／剤と組み合わせて投与されてもよい。追加の薬学的に活性の化合物／剤は、伝統的な小さい有機化学的分子であってもよく、又は高分子、例えば、タンパク質、抗体、ペプチボディ、ＤＮＡ、ＲＮＡ若しくはそのような高分子の断片であり得ることが留意される。

患者が複数の薬学的に活性の化合物を与えられる又は与えられている場合、化合物は、同時に、又は逐次的に投与され得る。例えば、錠剤の場合、活性化合物は、１つの錠剤中又は別々の錠剤中に見出されてもよく、別々の錠剤は、一度に又は任意の順序で逐次的に投与され得る。追加的に、組成物は異なる形態であってもよいことが認識されるべきである。例えば、１つ以上の化合物は錠剤を介して送達されてもよく、別のものは注射を介して、又はシロップとして経口的に投与されてもよい。全ての組合せ、送達方法及び投与順序が想定される。

「がん」という用語は、制御されない細胞増殖により特徴付けられる哺乳動物における生理学的状態を指す。がんの一般的クラスとしては、癌腫、リンパ腫、肉腫、及び芽細胞腫が挙げられる。

本発明の化合物は、がんを処置するために使用され得る。がんを処置する方法は、それを必要とする患者に治療有効量の化合物、又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。

本発明の化合物は、腫瘍を処置するために使用され得る。腫瘍を処置する方法は、それを必要とする患者に治療有効量の化合物、又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。

本発明はまた、がんなどの状態の処置用の医薬の製造における本発明の化合物の使用に関する。

本発明の化合物を用いて処置され得るがんとしては、癌腫、例えば、膀胱、乳房、結腸、直腸、腎臓、肝臓、肺（小細胞肺がん、及び非小細胞肺がん）、食道、胆嚢、卵巣、膵臓、胃、頸部（ｃｅｒｖｉｘ）、甲状腺、前立腺、及び皮膚（扁平細胞癌を含む）のがん；リンパ系列の造血腫瘍（白血病、急性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞リンパ腫及びバーケットリンパ腫を含む）；骨髄系列の造血腫瘍（急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群及び前骨髄球性白血病を含む）；間葉起源の腫瘍（線維肉腫及び横紋筋肉腫、及び他の肉腫、例えば、軟組織及び骨を含む）；中枢及び末梢神経系の腫瘍（星状細胞腫、神経芽腫、神経膠腫及び神経鞘腫を含む）；並びに他の腫瘍（黒色腫、精上皮腫、奇形癌腫、骨肉腫、色素性乾皮症（ｘｅｎｏｄｅｒｏｍａ ｐｉｇｍｅｎｔｏｓｕｍ）、ケラトアカントーマ（ｋｅｒａｔｏｃｔａｎｔｈｏｍａ）、甲状腺濾胞がん及びカポジ肉腫を含む）が挙げられるがそれに限定されない。本発明の化合物を用いて処置され得る他のがんとしては、子宮内膜がん、頭頸部がん、膠芽腫、悪性腹水、及び造血がんが挙げられる。

本発明の化合物により処置され得る特定のがんとしては、軟組織肉腫、骨がん、例えば骨肉腫、乳房腫瘍、膀胱がん、リ−フラウメニ症候群、脳腫瘍、横紋筋肉腫、副腎皮質癌、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）が挙げられる。

がんの処置に関する本発明の特定の実施形態では、がんはｐ５３野生型（ｐ５３^ＷＴ）として同定される。別の特定の実施形態では、がんはｐ５３^ＷＴ及びＣＤＫＮ２Ａ突然変異体として同定される。別の態様では、本発明は、いずれの患者が本発明の化合物を投与されるべきかを決定するための診断を提供する。例えば、患者のがん細胞の試料が採取され、ｐ５３及び／又はＣＤＫＮ２Ａに関してがん細胞の状態を決定するために分析されてもよい。一態様では、ｐ５３^ＷＴであるがんを有する患者は、ｐ５３に関して突然変異したがんを有する患者よりも処置のために選択される。別の態様では、ｐ５３^ＷＴであり、及び突然変異体ＣＤＮＫ２Ａタンパク質を有するがんを有する患者は、これらの特徴を有しない患者よりも選択される。分析用のがん細胞の採取は当業者に周知である。「ｐ５３^ＷＴ」という用語は、ゲノムＤＮＡ配列番号ＮＣ＿００００１７バージョン９（７５１２４４５．．７５３１６４２）（ＧｅｎＢａｎｋ）によりコードされるタンパク質；ｃＤＮＡ配列番号ＮＭ＿０００５４６（ＧｅｎＢａｎｋ）によりコードされるタンパク質；又はＧｅｎＢａｎｋ配列番号ＮＰ＿０００５３７．３を有するタンパク質を指す。「ＣＤＮＫ２Ａ突然変異体」という用語は、野生型ではないＣＤＮＫ２Ａタンパク質を意味する。「ＣＤＫＮ２Ａ野生型」という用語は、ゲノムＤＮＡ配列番号９：２１９５７７５１〜２１９８４４９０（Ｅｎｓｅｍｂｌ ＩＤ）によりコードされるタンパク質；ｃＤＮＡ配列番号ＮＭ＿００００７７（ＧｅｎＢａｎｋ）若しくはＮＭ＿０５８１９５ ９ＧｅｎＢａｎｋ）によりコードされるタンパク質；又はＧｅｎＢａｎｋ配列番号ＮＰ＿００００６８若しくはＮＰ＿４７８１０２を有するタンパク質を指す。

別の態様では、本発明は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）経路中のタンパク質の阻害剤である１つ以上の医薬剤と組み合わせた本発明の化合物の使用に関する。ＰＩ３Ｋ経路中のタンパク質の阻害剤との本発明の化合物の組合せは、アポトーシス及び細胞殺傷の増進を含む、がん細胞増殖アッセイにおける相乗作用を示した。ＰＩ３Ｋ経路中のタンパク質の例としては、ＰＩ３Ｋ、ｍＴＯＲ及びＰＫＢ（Ａｋｔとしても公知）が挙げられる。ＰＩ３Ｋタンパク質は、α、β、δ、又はγを含むいくつかのアイソフォームにおいて存在する。本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＰＩ３Ｋ阻害剤は、１つ以上のアイソフォームについて選択的であり得ることが想定される。選択的とは、化合物が、他のアイソフォームよりも１つ以上のアイソフォームを阻害することを意味する。選択性は当業者に周知の概念であり、インビトロ又は細胞ベースのアッセイにおいて周知の活性を用いて測定され得る。好ましい選択性としては、他のアイソフォームに対して１つ以上のアイソフォームについて２倍より高い、好ましくは１０倍より高い、又はより好ましくは１００倍より高い選択性が挙げられる。一態様では、本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＰＩ３Ｋα選択的阻害剤である。別の態様では、化合物はＰＩ３Ｋδ選択的阻害剤である。

本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＰＩ３Ｋ阻害剤の例としては、例えば、ＷＯ２０１０／１５１７９１、ＷＯ２０１０／１５１７３７、ＷＯ２０１０／１５１７３５、ＷＯ２０１０／１５１７４０、ＷＯ２００８／１１８４５５、ＷＯ２００８／１１８４５４、ＷＯ２００８／１１８４６８、ＵＳ２０１００３３１２９３、ＵＳ２０１００３３１３０６、ＵＳ２００９００２３７６１、ＵＳ２００９００３０００２、ＵＳ２００９０１３７５８１、ＵＳ２００９００５４４０５、ＵＳ２００９０１６３４８９、ＵＳ２０１００２７３７６４、ＵＳ２０１１００９２５０４、又はＷＯ２０１０／１０８０７４に開示されるものが挙げられる。

ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの両方を阻害する化合物（二重阻害剤）が公知である。さらに別の態様では、本発明は、本発明の化合物と組み合わせて使用するための二重ＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲ阻害剤の使用を提供する。

ｍＴＯＲはＰＩ３Ｋ経路中のタンパク質である。本発明の化合物と組み合わせてｍＴＯＲ阻害剤を使用することは本発明の別の態様である。本発明の化合物と組み合わせて使用され得る好適なｍＴＯＲ阻害剤としては、例えば、ＷＯ２０１０／１３２５９８及びＷＯ２０１０／０９６３１４に開示されるものが挙げられる。

ＰＫＢ（Ａｋｔ）もまたＰＩ３Ｋ経路中のタンパク質である。本発明の化合物と組み合わせてｍＴＯＲ阻害剤を使用することは本発明の別の態様である。本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＰＫＢ阻害剤としては、例えば、ＵＳ７，３５４，９４４、ＵＳ７，７００，６３６、ＵＳ７，９１９，５１４、ＵＳ７，５１４，５６６、ＵＳ２００９０２７０４４５Ａ１、ＵＳ７，９１９，５０４、ＵＳ７，８９７，６１９、及びＷＯ２０１０／０８３２４６に開示されるものが挙げられる。

本発明の組合せはまた、放射線療法、ホルモン療法、手術及び免疫療法と組み合わせて使用されてもよく、これらの療法は当業者に周知である。

本発明の１つの態様は、別々に投与されてもよい薬学的に活性の化合物の組合せを用いる疾患／状態の処置を想定するので、本発明はさらに、別々の医薬組成物をキットの形態に組み合わせることに関する。キットは、２つの別々の医薬組成物：本発明の化合物、及び第２の薬学的化合物を含む。キットは、別々の組成物を含有するための容器、例えば、分割されたボトル又は分割されたホイルパケットを含む。容器の追加の例としては、シリンジ、ボックス及びバッグが挙げられる。典型的には、キットは、別々の成分の使用のための指示書を含む。別々の成分が、好ましくは、異なる投薬形態（例えば、経口及び非経口）において投与され、異なる投薬間隔で投与され、又は組合せの個々の成分の滴定が処方を行う医師若しくは獣医により所望される場合に、キットの形態は特に有利である。

そのようなキットの例はいわゆるブリスターパックである。ブリスターパックは包装産業において周知であり、薬学的単位投薬形態（錠剤、及びカプセルなど）の包装のために広く使用されている。ブリスターパックは、一般に、好ましくは透明のプラスチック材料のホイルで覆われた比較的堅い材料のシートからなる。包装加工の間に、凹部がプラスチックホイル中に形成される。凹部は、包装される錠剤又はカプセルのサイズ及び形状を有する。次に、錠剤又はカプセルは凹部に置かれ、比較的堅い材料のシートは、凹部が形成された方向とは反対のホイルの面においてプラスチックホイルに対してシールされる。結果として、錠剤又はカプセルは、プラスチックホイルとシートとの間の凹部にシールされる。好ましくは、シートの強さは、凹部に手動で圧力を掛けることにより錠剤又はカプセルをブリスターパックから除去することができ、それにより凹部の場所においてシート中に開口部が形成されるようなものである。錠剤又はカプセルは次に、前記開口部を介して除去され得る。

キット上に記憶補助を提供することが望ましいことがあり、記憶補助は、例えば、錠剤又はカプセルの隣の番号の形態であり、それにより、番号は、そのように指定された錠剤又はカプセルを摂取するべきレジメンの日と対応する。そのような記憶補助の別の例は、カード上に印刷されたカレンダーであり、これは例えば、「第１週、月曜日、火曜日、．．．など、第２週、月曜日、火曜日、．．．」などといったものである。記憶補助の他のバリエーションは容易に明らかであろう。「１日当たりの用量」は、所与の日に取るべき単一の錠剤若しくはカプセル又はいくつかの丸剤若しくはカプセルであり得る。また、本発明の化合物の１日当たりの用量は、１つの錠剤又はカプセルからなるものであり得、一方で、第２の化合物の１日当たりの用量は、いくつかの錠剤又はカプセルからなるものであり得、またその逆もあり得る。記憶補助は、これを反映し、活性剤の正しい投与を補助するべきである。

本発明の別の特有の実施形態では、１日当たりの用量をそれらの意図される使用の順序で１つずつ分注するように設計されたディスペンサーが提供される。好ましくは、ディスペンサーは、レジメンの遵守をさらに促すように記憶補助を備えている。そのような記憶補助の例は、分注された１日当たりの用量の数を指し示す機械的カウンターである。そのような記憶補助の別の例は、液晶読出し、又は可聴式リマインダーシグナルと連結されたバッテリー駆動マイクロチップメモリーであり、該シグナルは、例えば、最後の１日当たりの用量が摂取された日時を読み出し、及び／又は次の用量を摂取するべき日時をリマインドする。

本発明の化合物及び所望の場合には他の薬学的に活性の化合物は、経口的に、直腸内に、非経口的に（例えば、静脈内に、筋肉内に、若しくは皮下に）嚢内に、膣内に、腹腔内に、膀胱内に、局所的に（例えば、粉末、軟膏若しくは液滴）、又は頬側若しくは経鼻スプレーとして患者に投与され得る。薬学的に活性の剤を投与するために当業者により使用される全ての方法が想定される。

非経口注射のために好適な組成物は、生理学的に許容される無菌の水性又は非水性の溶液、分散体、懸濁液、又はエマルション、及び無菌の注射可能な溶液又は分散体への再構成用の無菌粉末を含んでもよい。好適な水性及び非水性の担体、希釈剤、溶媒、又は媒体の例としては、水、エタノール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、及びグリセロールなど）、これらの好適な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）並びに注射可能な有機エステル、例えばエチルオレエートが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用により、分散体の場合には要求される粒子サイズの維持により、及び界面活性剤の使用により維持され得る。

これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤などの佐剤を含有してもよい。微生物夾雑は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、及びソルビン酸などを加えることにより予防され得る。等張剤、例えば、糖、及び塩化ナトリウムなどを含めることもまた望ましいことがある。注射可能な医薬組成物の持続吸収は、吸収を遅延させる剤、例えば、アルミニウムモノステアレート及びゼラチンの使用によりもたらされ得る。

経口投与用の固体投薬形態としては、カプセル、錠剤、粉末、及び顆粒が挙げられる。そのような固体投薬形態において、活性化合物は、少なくとも１つの不活性の慣習的な賦形剤（又は担体）、例えば、ナトリウムシトレート若しくは二カルシウムホスフェート又は（ａ）充填剤又は増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、マンニトール、及びケイ酸；（ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアカシア；（ｃ）湿潤剤、例えば、グリセロール；（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、カルシウムカーボネート、ジャガイモ又はタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定の複合シリケート、及びナトリウムカーボネート；（ａ）溶解制止剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｒｅｔａｒｄｅｒｓ）、例えば、パラフィン；（ｆ）吸収促進剤、例えば、第四級アンモニウム化合物；（ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコール及びグリセロールモノステアレート；（ｈ）吸着剤、例えば、カオリン及びベントナイト；並びに（ｉ）潤滑剤、例えば、タルク、カルシウムステアレート、マグネシウムステアレート、固体ポリエチレングリコール、ナトリウムラウリルスルフェート、又はこれらの混合物と混合される。カプセル、及び錠剤の場合、投薬形態はまた、緩衝化剤を含んでもよい。類似した種類の固体組成物はまた、ラクトース又は乳糖などの賦形剤の他に、高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して、軟質及び硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として使用されてもよい。

錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤、及び顆粒などの固体投薬形態は、コーティング及びシェル、例えば、腸溶性コーティング及び当該技術分野において周知の他のものを用いて調製され得る。それらはまた、乳白剤を含有してもよく、また、遅延された方式で腸管のある特定の部分において１つ以上の活性化合物を放出するような組成物であり得る。使用され得る包埋組成物の例は、ポリマー物質及びワックスである。活性化合物はまた、適切な場合、上記の賦形剤のうちの１つ以上とのマイクロカプセル化形態であり得る。

経口投与用の液体投薬形態としては、薬学的に許容されるエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、及びエリキシルが挙げられる。活性化合物に加えて、液体投薬形態は、当該技術分野において一般的に使用される不活性希釈剤、例えば、水又は他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボネート、エチルアセテート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油、特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、及びゴマ種子油、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル、又はこれらの物質の混合物などを含有してもよい。

そのような不活性希釈剤の他に、組成物はまた、佐剤、例えば、湿潤剤、乳化及び懸濁化剤、甘味剤、香味剤、並びに芳香剤を含み得る。懸濁液は、活性化合物に加えて、懸濁化剤、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、及びトラガカント、又はこれらの物質の混合物などを含有してもよい。

直腸投与用の組成物は、好ましい坐剤であり、これは、通常の室温で固体であるが、体温で液体であり、したがって、直腸又は膣腔中で融解して活性成分を放出する、好適な非刺激性の賦形剤又は担体、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール又は坐剤ワックスと本発明の化合物を混合することにより調製され得る。

本発明の化合物の外用投与用の投薬形態としては、軟膏、粉末、スプレー及び吸入剤が挙げられる。１つ以上の活性化合物は、生理学的に許容される担体、及び要求され得る任意の防腐剤、緩衝剤、又は噴射剤と無菌条件下で混合される。眼科用製剤、眼軟膏、粉末、及び溶液もまた本発明の範囲内にあるものとして想定される。

本発明の化合物は、約０．１〜約３，０００ｍｇ／日の範囲内の投薬レベルで患者に投与され得る。約７０ｋｇの体重を有する通常のヒト成人について、体重１キログラム当たり約０．０１〜約１００ｍｇの範囲内の投薬量が典型的には十分である。使用され得る特有の投薬量及び投薬量範囲は多数の因子に依存し、該因子としては、患者の要求、処置されている状態又は疾患の重症度、及び投与されている化合物の薬理活性が挙げられる。特定の患者のための投薬量範囲及び最適な投薬量の決定は、当業者の技術的範囲内である。

本発明の化合物は、薬学的に許容される塩、エステル、アミド又はプロドラッグとして投与され得る。「塩」という用語は、本発明の化合物の無機及び有機塩を指す。塩は、化合物の最終の単離及び精製の間にインサイチューで、又はその遊離塩基若しくは酸形態の精製された化合物を好適な有機若しくは無機塩基若しくは酸と反応させ、そのように形成された塩を単離することにより調製され得る。

本発明の化合物の薬学的に許容されるエステルの例としては、Ｃ_１−Ｃ_８アルキルエステルが挙げられる。許容されるエステルとしてはまた、Ｃ_５−Ｃ_７シクロアルキルエステルの他に、アリールアルキルエステル、例えばベンジルが挙げられる。Ｃ_１−Ｃ_４アルキルエステルが一般的に使用される。本発明の化合物のエステルは、当該技術分野において周知の方法にしたがって調製されてもよい。

本発明の化合物の薬学的に許容されるアミドの例としては、アンモニア、第一級Ｃ_１−Ｃ_８アルキルアミン、及び第二級Ｃ_１−Ｃ_８ジアルキルアミンに由来するアミドが挙げられる。第二級アミンの場合、アミンはまた、少なくとも１つの窒素原子を含有する５又は６員のヘテロシクロアルキル基の形態であってもよい。アンモニア、Ｃ_１−Ｃ_３第一級アルキルアミン及びＣ_１−Ｃ_２ジアルキル第二級アミンに由来するアミドが一般的に使用される。本発明の化合物のアミドは、当業者に周知の方法にしたがって調製されてもよい。

「プロドラッグ」という用語は、インビボで変換されて本発明の化合物をもたらす化合物を指す。変換は、血液中の加水分解を通じてなど、様々な機構により起こってもよい。プロドラッグの使用の議論は、Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ ａｎｄ Ｗ．Ｓｔｅｌｌａ，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，” Ｖｏｌ．１４ ｏｆ ｔｈｅ Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ、及びＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，ｅｄ．Ｅｄｗａｒｄ Ｂ．Ｒｏｃｈｅ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９８７において提供されている。

実例を挙げると、本発明の化合物はカルボン酸官能基を含有するので、プロドラッグは、カルボン酸基の水素原子の、Ｃ_１−Ｃ_８アルキル、（Ｃ_２−Ｃ_１２）アルカノイルオキシメチル、４〜９個の炭素原子を有する１−（アルカノイルオキシ）エチル、５〜１０個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルカノイルオキシ）エチル、３〜６個の炭素原子を有するアルコキシカルボニルオキシメチル、４〜７個の炭素原子を有する１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、５〜８個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、３〜９個の炭素原子を有するＮ−（アルコキシカルボニル）アミノメチル、４〜１０個の炭素原子を有する１−（Ｎ−（アルコキシカルボニル）アミノメチル、３−フタリジル、４−クロトノラクトニル、ガンマ−ブチロラクトン−４−イル、ジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキルアミノ（Ｃ_２−Ｃ_３）アルキル（例えば、β−ジメチルアミノエチル）、カルバモイル−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキルカルバモイル−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキル及びピペリジノ、ピロリジノ又はモルホリノ（Ｃ_２−_３）アルキルなどの基による置換により形成されるエステルを含み得る。

本発明の化合物は、不斉又はキラル中心を含有してもよく、したがって、異なる立体異性体形態で存在してもよい。化合物の全ての立体異性体形態の他に、ラセミ混合物を含むこれらの混合物が本発明の部分を形成することが想定される。追加的に、本発明は、全ての幾何及び位置異性体を想定する。例えば、化合物が二重結合を含有する場合、シス型及びトランス型の両方（それぞれＺ及びＥと指定される）の他に、これらの混合物が想定される。

ジアステレオマー混合物などの立体異性体の混合物は、クロマトグラフィー及び／又は分別結晶化などの公知の方法によりそれらの物理化学的な差異に基づいて個々の立体化学成分に分離され得る。エナンチオマーはまた、適切な光学活性化合物（例えば、アルコール）との反応によりエナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換すること、結果としてもたらされたジアステレオマーを分離すること、及び次に個々のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーに変換（例えば、加水分解）することにより分離され得る。

本発明の化合物は、非溶媒和形態の他に、水（水和物）、及びエタノールなどの薬学的に許容される溶媒との溶媒和形態で存在してもよい。本発明は、本明細書に記載されるような溶媒和形態及び非溶媒和形態の両方を想定し、包含する。

本発明の化合物は異なる互変異性体形態で存在し得ることも可能である。本発明の化合物の全ての互変異性体が想定される。例えば、テトラゾール部分の互変異性体形態の全てが本発明に含まれる。また、例えば、化合物の全てのケト−エノール又はイミン−エナミン形態は本発明に含まれる。

本明細書に含有される化合物の名称及び構造は、化合物の特定の互変異性体に基づき得ることを当業者は理解されよう。特定の互変異性体のみのための名称又は構造が使用され得るが、他に記載されなければ、全ての互変異性体が本発明により包含されることが意図される。

本発明は、合成化学者に周知のものなどの実験室技術を使用してインビトロで合成された化合物、又は代謝、発酵、及び消化などを通じて、インビボ技術を使用して合成された化合物を包含することもまた意図される。本発明の化合物は、インビトロ及びインビボ技術の組合せを使用して合成されてもよいこともまた想定される。

本発明はまた、１つ以上の原子が、天然に通常見出される原子質量又は質量数とは異なる原子質量又は質量数を有する原子により置き換えられているという事実を除いて本明細書に記載の化合物と同一である、同位体標識化合物を含む。本発明の化合物に組み込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体、例えば、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１６Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、及び^３６Ｃｌが挙げられる。一態様では、本発明は、１つ以上の水素原子が重水素（^２Ｈ）原子で置き換えられた化合物に関する。

上述の同位体及び／又は他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物は本発明の範囲内である。本発明のある特定の同位体標識化合物、例えば、^３Ｈ及び^１４Ｃなどの放射活性同位体が組み込まれたものは、薬物及び／又は基質組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム化、すなわち、^３Ｈ、及び炭素−１４、すなわち、^１４Ｃ、同位体は、調製及び検出の容易さのために特に好ましい。さらに、重水素、すなわち、^２Ｈなどのより重い同位体での置換は、より高い代謝安定性の結果としてもたらされるある特定の治療的な利点、例えば、インビボ半減期の増加又は投薬量要求の低減をもたらすことができ、それゆえ一部の状況において好ましいことがある。本発明の同位体標識化合物は、一般に、容易に利用可能な同位体標識試薬で非同位体標識試薬を置換することにより調製され得る。

本発明の化合物は、結晶状態及び非結晶状態を含む様々な固体状態で存在してもよい。本発明の化合物の異なる結晶状態（多形体とも呼ばれる）及び非結晶状態は、本明細書に記載されるような本発明の部分として想定される。

本発明の化合物の合成において、ある特定の脱離基を用いることが望ましいことがある。「脱離基」（「ＬＧ」）という用語は、一般に、求核剤により置換可能な基を指す。そのような脱離基は当該技術分野において公知である。脱離基の例としては、ハライド（例えば、Ｉ、Ｂｒ、Ｆ、Ｃｌ）、スルホネート（例えば、メシレート、トシレート）、スルフィド（例えば、ＳＣＨ_３）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールなどが挙げられるが、それに限定されない。求核剤の例としては、アミン、チオール、アルコール、グリニャール試薬、及びアニオン種（例えば、アルコキシド、アミド、カルボアニオン）などが挙げられるがそれに限定されない。

本明細書において参照される全ての特許、特許出願公開及び他の刊行物は、参照により本明細書に組み込まれる。

本出願に提示される特有の実験例は、本発明の特有の実施形態を示す。これらの例は代表的であることが意図され、いかなるようにも請求項の範囲を限定することは意図されない。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、典型的には、ｚ軸勾配を有するＢｒｕｋｅｒ ５ｍｍ ＰＡＢＢＩプローブを備えた、５００．１３ＭＨｚの^１Ｈ周波数で作動するＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩＩ ５００分光計システム（Ｂｒｕｋｅｒ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）、又はｚ軸勾配を有するＢｒｕｋｅｒ ５ｍｍ ＰＡＢＢＯプローブを備えた、４００．２３ＭＨｚの^１Ｈ周波数で作動するＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩ若しくはＡｖａｎｃｅ ＩＩＩ ４００分光計において獲得した。試料は、典型的には、ＮＭＲ解析のために５００μＬのＤＭＳＯ−ｄ_６又はＣＤ_３ＯＤに溶解させた。^１Ｈ化学シフトは、δ ２．５０におけるＤＭＳＯ−ｄ_６及びδ ３．３０におけるＣＤ_３ＯＤからの残留溶媒シグナルを参照している。

著しいピークを一覧にしており、これは、典型的には、プロトンの数、多重度（ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；ｄｄ、ダブレットのダブレット；ｔ、トリプレット；ｑ、カルテット；ｍ、マルチプレット；ｂｒ ｓ、ブロードシングレット）並びにヘルツ（Ｈｚ）でのカップリング定数を含む。電子イオン化（ＥＩ）質量スペクトルは、典型的には、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ６１４０ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ＬＣ／ＭＳ質量分光計（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ、ＣＯ）において記録した。質量分析結果は、電荷に対する質量の比、場合によりこれに続いて、各イオンの相対量（括弧内）として報告される。以下の実施例における出発材料は、典型的には、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯなどの商用の供給元から、又は刊行された文献の手順を介して入手可能なものである。

Ｘ線粉末回折データ（ＸＲＰＤ）は、ブラウン検出器及びブラッグ−ブレンターノ反射幾何形状において作動するＣｕ−Ｋα放射線供給源を備えたＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ Ｄｉｓｃｏｖｅｒ Ｘ線回折システム（Ｂｒｕｋｅｒ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）を使用して得られた。２θ値は、一般に、±０．２°の誤差内まで正確である。試料は、一般に、平らな表面を得るためのわずかな圧力の適用以外のいかなる特殊な処理をすることなく調製された。試料は、他に記載されなければ、覆うことなく測定された。作動条件は、４０ｋＶのチューブ電圧及び４０ｍＡの電流を含んだ。可変発散スリットを３°ウィンドウと共に使用した。ステップサイズは、３５．２秒のステップ時間と共に０．０１９°の２θであり、走査範囲は３〜４０．４°である。

示差走査熱量測定（ＤＳＣ）は、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＤＳＣ−７又はＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｑ２０００機器を用いて実行した。試料は、２０℃から約３５０℃まで５℃／分の温度勾配速度において閉じた金サンプルパン中で調製した。結晶性ＤＨＯのＤＳＣサーモグラムは、７３．８６°における融点と共に図１９に示される。

［実施例１］
選択された中間体を調製する方法

＜ステップＡ．２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）エタノン＞

ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（１１７ｍＬのテトラヒドロフラン中１Ｍ）をテトラヒドロフラン（５８ｍＬ）中の２−（３−クロロフェニル）酢酸（１０ｇ、５８．６ｍｍｏｌ）の−７８℃の溶液に１時間にわたり緩徐に加えた。−７８℃で４０分間撹拌した後に、テトラヒドロフラン（３５ｍＬ）中のメチル４−クロロベンゾエート（１０ｇ、５８．６ｍｍｏｌ）の溶液を１０分の期間にわたり加えた。反応液を−７８℃で３時間撹拌し、次に２５℃に温めた。２５℃で２時間の後に、飽和水性塩化アンモニウム溶液を用いて反応液をクエンチし、テトラヒドロフランのほとんどを減圧下で除去した。エチルアセテート（２×１００ｍＬ）を用いて残留物を抽出した。合わせた有機層を、飽和塩化ナトリウム溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮した。生成物をエーテル／ペンタンから再結晶化させて２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）エタノンを白色固体として得た。

＜２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）エタノンを調製するための代替的な手順＞
０℃のクロロベンゼン（１７０Ｌ、１６８４ｍｏｌ）、３−クロロフェニル酢酸（５０Ｋｇ、２９３ｍｏｌ）、及びジメチルホルムアミド（０．７Ｌ、９ｍｏｌ）の混合物にチオニルクロリド（３９．１Ｋｇ、３２９ｍｏｌ）を３０分の経過にわたり加えた。混合物を１５℃に温め、６ｈ撹拌した。混合物を０℃に冷却し、塩化アルミニウム（４３Ｋｇ、３２２ｍｏｌ）を１．５ｈの経過にわたり加えた。混合物を２０℃に温め、１５ｈ撹拌した。水（２００Ｌ）及びエタノール（２００Ｌ）を混合物に加え、二相混合物を２ｈ撹拌した。相を分離させ、有機相を、水性エチレンジアミンテトラ酢酸四ナトリウム塩（３重量％、２００Ｌ）を用いて２回、及び水（２００Ｌ）を用いて１回洗浄した。ヘプタン（１６００Ｌ）を有機相に１５分の経過にわたり加えた。懸濁液を３０分間撹拌し、−５℃に冷却し、濾過した。濾過された材料を４０℃で２０ｈ乾燥させた。２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）エタノンが８３．６％の収率（６７．４Ｋｇ）で単離された。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６，δ ｐｐｍ）：８．０５（ｍ，２Ｈ），７．６２（ｍ，２Ｈ），７．３３（ｍ，３Ｈ），７．２１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｓ，２Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）＝２６５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．
＜ステップＢ：メチル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエート＞

メチルメタクリレート（１２．６５ｍＬ、１１９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２８３ｍＬ）中の２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）エタノン（３０ｇ、１１３ｍｍｏｌ）（ステップＡから）の溶液に加えた。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．２７ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を次に加え、反応液を室温で２日間撹拌した。溶媒を次に真空下で除去し、３００ｍＬのエチルアセテートで置き換えた。有機相をブライン（５０ｍＬ）、水（３×５０ｍＬ）、及びブライン（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。有機相をマグネシウムスルフェート上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮してメチル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエートをジアステレオマーの約１：１の混合物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ ｐｐｍ）：７．８７（ｍ，２Ｈ）、７．３８（ｍ，２Ｈ）、７．２７−７．１４（ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｍ，４Ｈ）、４．６１（ｍ，１Ｈ）、３．６９（ｓ，１．５Ｈ）、３．６０（ｓ，１．５Ｈ）、２．４５（ｍ，１Ｈ）、２．３４（ｍ，１Ｈ）、２．１０（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．９，９．４，５．５Ｈｚ，０．５Ｈ）、１．９６（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．７，９．０，４．３Ｈｚ，０．５Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１．５Ｈ）、１．１６（ｄ，Ｊ＝７．０，１．５Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）＝３８７．０［Ｍ＋２３］^＋．
＜ステップＣ：（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン及び（３Ｒ、５Ｒ，６Ｒ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン＞

メチル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエート（４０ｇ、１０４．０ｍｍｏｌ）（ステップＢから）を２００ｍＬの無水トルエンに溶解し、真空下で濃縮した。使用前に残留物を高真空下に２時間置いた。化合物を２×２０ｇのバッチに分け、以下のように処理した：無水２−プロパノール（１０４ｍＬ）中のメチル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエート（２０ｇ、５２．０ｍｍｏｌ）を２５０ｍＬのガラス水素化容器中でカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２．３３ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）を用いて処理した。３．８ｍＬのトルエン中のＲｕＣｌ_２（Ｓ−ｘｙｌｂｉｎａｐ）（Ｓ−ＤＡＩＰＥＮ）（０．１９１ｇ、０．１５６ｍｍｏｌ、Ｓｔｒｅｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗｂｕｒｙｐｏｒｔ、ＭＡ）を加えた。１．５時間後に、容器を５０ｐｓｉ（３４４．７ｋＰａ）に加圧し、水素を用いて５回パージし、室温で撹拌した。必要に応じて反応液に追加の水素を再補給した。３日後に、反応液を合わせ、５０％の飽和塩化アンモニウム溶液及びエチルアセテートの間で分配した。水性層を、エチルアセテートを用いて抽出した。合わせた有機相を、ブラインを用いて洗浄し、マグネシウムスルフェート上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。

粗生成物（主に、（４Ｒ，５Ｒ）−イソプロピル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−２−メチルペンタノエート）をテトラヒドロフラン（４５０ｍＬ）及びメタノール（１５０ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム（１．４Ｍ、１４９ｍＬ、２０８ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で２４時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、残留物をエチルアセテートに再溶解した。水性層が約１のｐＨを有するまで水性１Ｎ塩酸を撹拌と共に加えた。層を分離させ、有機相を、ブラインを用いて洗浄し、マグネシウムスルフェート上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。材料を次に２００ｍＬの無水トルエンに溶解し、ピリジニウムｐ−トルエンスルホネート（ＰＰＴＳ、０．７８４ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）を用いて処理した。セコ酸が消費されるまで（約２時間）反応液を加熱してディーン−スターク条件下で還流させた。反応液を室温に冷却し、飽和ナトリウムビカーボネート（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。溶液をナトリウムスルフェート上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗材料をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇカラム；１００％のジクロロメタンを用いて溶出）により精製した。（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン及び（３Ｒ、５Ｒ，６Ｒ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オンが約９４：６のエナンチオマー比及びメチルジアステレオマーの７：３混合物と共に白色固体として得られた。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ ｐｐｍ）：７．２２−６．９８（ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｍ，５Ｈ）、６．９１（ｄｔ，Ｊ＝７．４，１．２Ｈｚ，０．３Ｈ）、６．８１（ｍ，２Ｈ）、６．７３（ｄｔ，Ｊ＝７．６，１．４Ｈｚ，０．７Ｈ）、５．７６（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，０．３Ｈ）、５．６９（ｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，０．７Ｈ）、３．６７（ｄｔ，Ｊ＝６．６，４．３Ｈｚ，０．３Ｈ）、３．５５（ｔｄ，Ｊ＝７．８，４．７Ｈｚ，０．７Ｈ）、２．９６（ｄ ｏｆ ｑｕｉｎｔｅｔｓ，Ｊ＝１３．５，６．７Ｈｚ，０．７Ｈ）、２．８１（ｍ，０．３Ｈ）、２．５６（ｄｔ，Ｊ＝１４．３，８．０Ｈｚ，０．７Ｈ）、２．３２（ｄｔ，Ｊ＝１３．６９，７．０Ｈｚ，０．３Ｈ）、２．０６（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．７，８．４，４．１，０．３Ｈ）、１．８５（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．１，１２．５，７．４，０．７Ｈ）、１．４２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，０．９Ｈ）、１．４１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２．１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）＝３５７．０［Ｍ＋２３］^＋．［α］_Ｄ（２２℃，ｃ＝１．０，ＣＨ_２Ｃｌ_２）＝−３１．９°；ｍ．ｐ．９８−９９℃．
＜ステップＤ。（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン＞

−３５℃（アセトニトリル／ドライアイス浴）のテトラヒドロフラン（２２ｍＬ）中の（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン及び（３Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン（４．５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）（ステップＣから）及び臭化アリル（３．４８ｍＬ、４０．３ｍｍｏｌ）の溶液をテトラヒドロフラン中のリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（１．０Ｍ、１７．４５ｍＬ、１７．４５ｍｍｏｌ）の溶液を用いて処理した。反応液を−５℃に１時間にわたり温め、次に５０％の飽和塩化アンモニウムを用いてクエンチした。反応液を１００ｍＬのエチルアセテートを用いて希釈し、層を分離させた。有機相を、ブラインを用いて洗浄し、マグネシウムスルフェート上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮することにより、真空下の静置で白色固体として表題化合物を得た。Ｃｈｉｒａｌ ＳＦＣ（９２％のＣＯ_２、８％のメタノール（２０ｍＭのアンモニア）、５ｍＬ／分、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｘ−２カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）、１００バール（１０，０００ｋＰａ）、４０℃、５分の方法）を使用して、化合物は９６：４のエナンチオマー比を有することを決定した。（メジャーエナンチオマー：表題化合物、保持時間＝２．４５分、９６％；マイナーエナンチオマー（構造は示さず、保持時間＝２．１２分、４％）。（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オンを還流でのヘプタン（４０ｍＬ中４．７ｇのスラリー）への添加により再結晶化させ、続いて滴下での１．５ｍＬのトルエンの添加により可溶化した。溶液を０℃に冷却した。結果としてもたらされた白色固体を濾過し、２０ｍＬの冷ヘプタンを用いてすすいで白色粉末を得た。Ｃｈｉｒａｌ ＳＦＣ（９２％のＣＯ_２、８％のメタノール、ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｘ−２カラム、上記と同じ方法）は９９．２：０．８のエナンチオマー比を指し示した。（メジャーエナンチオマー、２．４５分、９９．２％；マイナーエナンチオマー：２．１２分、０．８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ ｐｐｍ）：７．２４（ｄｄｄ，Ｊ＝８．０，２．０，１．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．２０−７．１５（ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｍ，３Ｈ）、６．９１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．７８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．６０（ｍ，２Ｈ）、５．８４（ｄｄｔ，Ｊ＝１７．６，１０．２，７．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．７０（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．２１−５．１３（ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｍ，２Ｈ）、３．８２（ｄｔ，Ｊ＝１１．７，４．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．６２（ＡＢＸＪ_ＡＢ＝１３．７Ｈｚ，Ｊ_ＡＸ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．５３（ＡＢＸ，Ｊ_ＡＢ＝１３．９Ｈｚ，Ｊ_ＢＸ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）．１．９９（ｄｄ，Ｊ＝１４．１，１１．９Ｈｚ，１Ｈ），１．９２（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．９，３．９，１．２Ｈｚ，１Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、１００ＭＨｚ、δ ｐｐｍ）：１７５．９、１４０．２、１３４．５、１３４．３、１３４．０、１３２．２、１２９．８、１２８．６、１２８．０、１２７．９、１２７．８、１２６．４、１１９．９、８３．９、４４．５、４２．４、４０．７、３１．８、２６．１．ＭＳ（ＥＳＩ）＝３７５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＩＲ＝１７３０ｃｍ^−１．［α］_Ｄ（２４℃，ｃ＝１．０，ＣＨ_２Ｃｌ_２）＝−１９１°．ｍ．ｐ．１１１−１１４℃．
＜（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オンを調製するための代替的な手順＞

＜ステップ１：イソプロピル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエート＞

ＴＨＦ（３２５Ｌ）中の２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）エタノン（ステップＡ）（６７．４Ｋｇ、２５５ｍｏｌ）の溶液を共沸的に乾燥させて、０．０５重量％のカールフィッシャー（Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ）による水含有量を達成した。メチルメタクリレート（２５．８Ｋｇ、２５７ｍｏｌ）を溶液に加え、混合物を４５℃に加熱した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの溶液（ＴＨＦ中２０重量％、１４．３Ｋｇ、２５ｍｏｌ）を３０分の経過にわたり加え、混合物を６ｈ撹拌した。混合物を次に１０℃に冷却し、クエン酸一水和物の水性溶液（２０重量％、３５Ｌ）を５分未満で加えた。イソプロピルアセテート（４００Ｌ）及び水性塩化ナトリウム溶液（２０重量％、３００Ｌ）を加えた。混合物を１５分間撹拌し、相を分離させた。有機相を減圧下で蒸留して５６０Ｌの蒸留物体積を生成すると同時に、イソプロパノール（３５０Ｌ）を加えてイソプロパノール中のメチル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエートの溶液（５４重量％、１４０ｋｇの総溶液質量）を製造した。溶液は、カールフィッシャーによる０．０１重量％の水含有量を有していた。追加のイソプロパノール（４２０Ｌ）及び硫酸（５３Ｋｇ、５３５ｍｏｌ）を溶液に加えた。混合物を温めて還流させ、１２ｈ撹拌し、その間に２００Ｌの溶媒が蒸留され、２００Ｌの新鮮なイソプロパノールを混合物に加えた。混合物を次に２０℃に冷却し、水（１８０Ｌ）を３０分の経過にわたり加えた。イソプロピルアセテート（２７０Ｌ）を加え、混合物を３０分間撹拌した。相を分離させ、水性相を、イソプロピルアセテート（１００Ｌ）を使用して抽出した。合わせた有機相を、水（２００Ｌ）を用いて４回洗浄した。有機相を減圧下で蒸留して５００Ｌの蒸留物体積を生成すると同時に、イソプロパノール（５０Ｌ）を加えてイソプロパノール中のイソプロピル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエートの溶液（６０重量％、１３４ｋｇの総溶液質量）を得た。溶液は、カールフィッシャーによる０．０２重量％の水含有量を有していた。イソプロピル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエートが８１％の全体収率でジアステレオ異性体のおおよそ１：１の混合物として得られた。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ ｐｐｍ）：７．７０−７．８０（ｍ，２Ｈ）、７．２２−７．２８（ｍ，２Ｈ）、７．００−７．１８（ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｍ，４Ｈ）、４．７８−４．９６（ｍ，１Ｈ）、４．４２−４．５０（ｍ，１Ｈ）、２．０２−２．３０（ｍ，２Ｈ）、１．８０−１．９５（ｍ，１Ｈ）、０．９９−１．１９（ｍ，１５Ｈ）．
＜ステップ２。（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン＞

イソプロパノール中のイソプロピル４−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−オキソペンタノエート（ステップ１から）の脱気した溶液（６０重量％、２５２ｋｇの総溶液質量、１５１Ｋｇのイソプロピルエステル出発材料、３８５ｍｏｌ）に脱気したイソプロパノール（９００Ｌ）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１３Ｋｇ、１１６ｍｏｌ）を加えた。イソプロパノール（２５Ｌ）中の（Ｓ）−ＲＵＣＹ（Ｒ）−ＸｙｌＢＩＮＡＰ（ＲｕＣｌ［（Ｓ）−ｄｉａｐｅｎａ］［（Ｓ）−ｘｙｌｂｉｎａｐ］としても公知（２３０ｇ、０．２ｍｏｌ、触媒、Ｔａｋａｓａｇｏ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｒｏｃｋｌｅｉｇｈ、ＮＪ）の別々に調製した脱気した溶液。混合物を５バール（５００ｋＰａ）で水素を用いて４回パージし、２０℃で５．５ｈ撹拌した。水素加圧を中止し、混合物を、窒素を用いて脱気した。テトラヒドロフラン（４６０Ｌ）を混合物に加えた。水（３０５Ｌ）中の水酸化リチウム（２４Ｋｇ、５７６ｍｏｌ）の溶液を４０分の経過にわたり反応混合物に加え、結果としてもたらされた混合物を２０℃で２４ｈ撹拌した。水（６９０Ｌ）中の濃塩酸（７９．３Ｋｇ、１１．４Ｍ、７４０ｍｏｌ）の溶液を２ｈの経過にわたり混合物に加えた。トルエン（５８０Ｌ）を加え、混合物を次に３０分間撹拌し、相を分離させた。水性相を、トルエン（７００Ｌ）を使用して抽出した。合わせた有機層を塩化ナトリウムの水性溶液（２５重量％、７００Ｋｇ）を用いて洗浄した。同時にトルエン（８００Ｌ）を加えながら、有機相を大気圧及び１００℃で蒸留して２７００Ｌの蒸留物体積を生成した。この溶媒交換後に０．０５重量％未満のイソプロパノール又は水（カールフィッシャーによる）が混合物中に残留した。カルボニルジイミダゾール（５９Ｋｇ、３６５ｍｏｌ）を２ｈの経過にわたりトルエン溶液に加え、混合物を２０℃でさらに２時間撹拌した。混合物を次に１０℃に冷却し、２０℃より低い混合物の温度を維持しながら水（４００Ｌ）中のオルトリン酸（７２Ｋｇ、５４５ｍｏｌ）の溶液を１ｈの経過にわたり加えた。混合物を３０分間撹拌し、相を分離させ、有機層を塩化ナトリウム（２５重量％、４８４Ｋｇ）の水性溶液を用いて洗浄した。トルエン（４００Ｌ）を大気圧及び１１０℃で蒸留した。２０℃への溶液の冷却後に、テトラヒドロフラン（５００Ｌ）を加え、カールフィッシャーによる水含有量を測定したところ０．０３重量％であった。生成物溶液を−１０℃に冷却し、テトラヒドロフラン（５０Ｌ）中の溶液臭化アリル（６６．８Ｋｇ、５５２ｍｏｌ）を加えた。トルエン中のリチウムヘキサメチルジシラジド溶液（２５５Ｋｇ、２６重量％、４９２ｍｏｌ）を６ｈの経過にわたり加え、混合物を−１０℃で１ｈ撹拌した。混合物を０℃に温め、オルトリン酸（４０重量％、４００ｍｏｌ）の水性溶液を３ｈの経過にわたり加えた。混合物を２０℃に温めた。水（２００Ｌ）及びジクロロメタン（４００Ｌ）を加えた。混合物を１５分間撹拌し、相を分離させた。溶液を大気圧及び１００℃で蒸留して１３５０Ｌの蒸留物体積を生成させ、混合物中の残留トルエンは９．８重量％であると測定された。混合物を７０℃に冷却した。ジイソプロピルエーテル（８５Ｌ）、水（２６Ｌ）、及びイソプロパノール（６５Ｌ）を加えた。混合物を３５℃に冷却し、９ｈ撹拌し、３０℃に冷却し、濾過した。濾過された材料を、ヘプタン（８０Ｌ）を用いて３回洗浄した。固体を５５℃で４８時間乾燥させて、６３％の全体収率で９０．１Ｋｇの（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オンを得た。キラルＨＰＬＣは、９９．９５：０．０５のエナンチオマー比を指し示した。

［実施例２］
＜化合物Ａを作るファースト・イン・ヒューマンの方法及び商用の方法の間の差異＞
ＤＬＡＣのグラムスケール合成が以前に報告されている。Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１４，５７，１４５４を参照。この研究に基づいて、化合物Ａをスキーム１に示されるファースト・イン・ヒューマン（ＦＩＨ）合成方法により調製した。中間体ＯＸＯＳをこの方法のための規制的な出発材料として使用した。高温で過剰なＬ−バリノール（３当量）を使用するＤＬＡＣの開環はアミドＡＢＡをもたらし、これをジクロロメタンに抽出した。過剰なＬ−バリノールを、水性塩酸洗浄を使用して除去し、生成物溶液を精製無しでその後のステップに用いた。この変換において使用されたＬ−バリノールの量の低減をこの原材料の高いコストを考慮して将来的な開発目的として同定した。顕著なことに、化合物Ａのカルボン酸と同じ酸化状態の基を含有する側鎖を持つ対応するＤＬＡＣアナログＤＬＡＣ１又はＤＬＡＣ２からのＡＢＡアナログＡＢＡ１又はＡＢＡ２の調製は、望ましくないスクシンイミドＳＵＣ１又はＳＵＣ２の形成に起因して成功しなかった。所望の生成物ＡＢＡ１−ＡＢＡ２の形成及び副生成物ＳＵＣ１−ＳＵＣ２へのそれらの変換について観察された類似した速度を考慮して、許容される収率でアミドＡＢＡ１−ＡＢＡ２を単離することはできなかった。

スキーム１。化合物Ａを製造するためのファースト・イン・ヒューマンの方法

スキーム２。ＡＢＡのアナログの調製の試み（ｋ１≒ｋ２）

オキソイミニウム塩ＯＸＯＳを高温で２当量のトルエンスルホン酸無水物及び２，６−ルチジンを用いた二重活性化によりＡＢＡから調製した。そのように調製された陽イオンを２−ナフチルスルホン酸塩として単離し、これは満足のいく不純物除去特性を与えた。トルエンスルホン酸無水物（ＴｓＯ_２）に対する代替的な試薬を同定することが複数の理由から想定され、これには、高温（１２０℃）においてＯＸＯＳへの遅い変換を起こす長期持続性トシレート中間体ＤＨＯ−ＯＴｓを排除する必要性が含まれた。この中間体（ＤＨＯ−ＯＴｓ）はアルキル化剤であり、そのため、潜在的に突然変異誘発性の不純物である。考えられる１つの可能なオプションは、結晶性中間体ＤＨＯを単離（スキーム３）して、製造シークエンスのための不純物の有効な除去に対する制御を増加させることであった。しかしながら、これは、第二級ベンジルアルコールの存在下でＡＢＡの第一級アルコールの選択的な化学選択的活性化を可能とする試薬の使用を必要とした。スルホン酸無水物試薬はこの利点を与えなかった。

スキーム３。Ｔｓ_２Ｏを使用するＡＢＡからのＯＸＯＳの調製における中間体

ＯＸＯＳからのＳＵＬの調製をナトリウムｔ−ブトキシドの存在下でのイソプロピルスルフィン酸を用いるＯＸＯＳの処理により実行した。この変換は、スルフィネート中間体（ＳＵＬＦＩ）のジアステレオマー対の可逆的な形成及び熱力学的生成物ＳＵＬへのその後の転位を介して進行し、ＳＵＬはアセトニトリル及び水から結晶化される（スキーム４）。ＡＬＣ副生成物は、水の存在下でこれらの条件下で非可逆的に形成された。２０℃で油のイソプロピルスルフィン酸をイソプロピルマグネシウムクロリドから調製し、水性ワークアップ後に単離した。望ましくないＡＬＣ副生成物の大量の生成を回避するためにこの試薬の共沸乾燥がＳＵＬの形成における使用の前に必要であった。しかしながら、イソプロピルスルフィネートは、乾燥時に不均化を介して分解することが観察されたため、このユニット操作を回避した。結果として、乾燥条件下で安定であり、商用の規制的な出発材料として指定され得るイソプロピルスルフィン酸の安定な結晶性塩の発見を探索した。又は、水性ワークアップ及びＯＸＯＳとのさらなる反応無しのイソプロピルマグネシウムクロリドからのスルフィン酸塩のインサイチュー調製の方法を検討した。

スキーム４。ＯＸＯＳからのＳＵＬの調製において生成される中間体及び副生成物

ＳＵＬのアルケン基の酸化を触媒性塩化ルテニウム（２ｍｏｌ％）及び過剰なナトリウムペリオデート（５当量）を用いる処理を介して実行した。粗生成物を結晶性のエタノール溶媒和物として単離した。このステップのいくつかの特徴は望ましくないことが観察された。第１に、このステップにおいて使用された重金属は除去される必要があり、これはファースト・イン・ヒューマン送達のためにＤＡＲＣＯ−Ｇ樹脂を使用して達成された。追加的に、この処理を実行するために複数当量のナトリウムペリオデートが必要であり、不純物形成を最小化するために試薬を反応容器に小分けで補給する必要があった。変換のために利用された大量の塩を除去するために複雑な下流の処理プロトコール（抽出及び濾過）が要求された。さらに、複数の二量体不純物がこの変換ステップにおいて生成され、それにより薬物物質の純度を制御することが課題となった。結晶性制御点としての化合物Ａのエタノール溶媒和物の使用は問題があり、混合物中に存在する不純物の除去においてやや有効であるに過ぎなかった。追加的に、結晶化処理は、濾過の間の高い母液損失を軽減するために必要な低いエタノール濃度（５％ｖ／ｖ）に起因して蒸発性の処理として実行される必要があった。結晶化処理におけるエタノールの使用はまた、３０℃より高い温度における対応するエチルエステルの望ましくない形成及び所望のエタノール溶媒和物からのエチルエステルの除去において経験される困難に起因して処理の堅牢性を低減することが観察された。同様に、メタノールが化合物Ａの結晶化において使用された場合、これもまた薬物物質からの単離除去が困難である高温での対応するメチルエステルの形成は、殊にマルチグラムスケールでの作業の場合に、結晶化のためのこの経路の実行可能性を著しく低減した。そのため、ＳＵＬからの化合物Ａの調製のためのより一貫した環境に優しい酸化処理の開発の他に、不可欠な属性の有効な制御を呈する薬物物質を単離するための堅牢な手順の生成が商業的に実行可能な処理の部分として求められた。

［実施例３］
＜中間体ＯＸＯＳを調製する商用の方法の開発＞
Ｌ−バリノールを用いたＤＬＡＣのＡＢＡへの熱アミド化は、中間体エステルＥＳＴを介する複数ステップの機構を通じて進行した（スキーム５）。ＤＬＡＣのＥＳＴへの初期エステル交換反応は、アミド生成物ＡＢＡへの転位の前のＥＳＴの蓄積に繋がる可逆的な過程（２当量のＬ−バリノールを用いてｋ_１＞ｋ_−１）であることが決定された。６０℃で反応を行うと、ＤＬＡＣのＥＳＴへの急速な変換が反応の開始において観察され、続いて数日の経過にわたるＥＳＴのＡＢＡへの遅い変換が起こる（ｋ_１＞ｋ_２）（図１）。高温（１１５℃）において（図２）、ＥＳＴのより安定なＡＢＡへの転位はより速く、ＥＳＴの濃度を増加させることにより反応の全体的な速度における増加を結果としてもたらす。

スキーム５。ＤＬＡＣのＡＢＡへの熱アミド化の速度論

ＦＩＨ方法は、１１０℃でのＤＬＡＣのＡＢＡへの急速な変換を確実にするために３当量のＬ−バリノールを用いる熱融解を利用した。この変換の我々の機構的な理解と合致して、ＤＬＡＣのＥＳＴへの変換（ｋ_１）はＥＳＴの相対濃度に直接的に影響するので、Ｌ−バリノールローディングの減少（３当量から２当量へ）は反応の全体的な速度低下を結果としてもたらした。２当量のＬ−バリノールを使用した場合、反応は、反応の均質性を確実にするためにトルエン（１体積）を用いながら１１５℃での変換に達するために７２時間を要求することが観察された。このより長い処理時間は、しかしながら、著しいコストの低減に基づいて正当化可能であると考えられ得る。過剰なＬ−バリノールの排除は、トルエン（４体積）の添加及び水性塩酸溶液を用いる有機混合物のその後の洗浄により達成された。結果としてもたらされた有機溶液を共沸的に乾燥させ、ポリッシング濾過して、ＡＢＡを９１％のアッセイ収率で２．７ＬＣ面積％のＤＨＯ、１．０ＬＣ面積％の出発材料ＤＬＡＣ、及び１．０ＬＣ面積％のＥＳＴを含有するトルエン中の２８重量％の溶液として得た。より高い温度でＤＨＯを直接的に調製するためのＡＢＡの熱分解は、生成物の複雑な混合物に繋がった。

中間体ＤＨＯの単離は、処理ストリームから不純物を除去し、市場応用のために薬物物質を送り込むための全体的な制御手順を強化するための追加の機会を提供した。この手順にとって最も重要な点は、結晶形態のＤＨＯの単離を可能にするＡＢＡの第一級アルコールの化学選択的活性化（条件Ａ）の開発を通じてＡＢＡのＯＸＯＳへの脱水的な二重環化を連結解除して２つの別個の単環化反応とする条件の同定であった（スキーム６）。

スキーム６。ＡＢＡのＯＸＯＳへの逐次的な脱水

スルホニルクロリド及びスルホン酸無水物試薬は、ＡＢＡの第一級及び第二級アルコールの間の識別において非選択的であることが見出され、無水試薬として調達することが困難であった。さらには、酸触媒の使用もまた、生成物の複雑な混合物をもたらした。しかしながら、ビルスマイヤー塩試薬、メトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェートは、所望の選択性の達成に成功した。この試薬は、水分を除外するために採られる特殊な注意無しで容易に調製され、力価の低下させることなく数か月間２０℃で貯蔵することができる。追加的に、それは、一般的なハライド由来のビルスマイヤー塩クロロメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムクロリドと比較してより穏やかな反応性を呈し、化学選択性を向上させ、また、アルキルハライド副生成物の形成を回避した。トルエン中でメトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェートを使用するＡＢＡからのＤＨＯの形成を２５℃で様々な穏やかな無機塩基の存在下で評価し、ＤＨＯへの変換を記録した（スキーム７）。反応は、ＫＯＡｃを用いて最良に行われることが観察されたが、その低い吸湿性及びコストを考慮してＮａＯＡｃが好ましかった。

スキーム７。ＡＢＡのＤＨＯへの単環化における様々な塩基の評価

この変換の所望の化学選択性は、不安定なイミデート中間体の生成を通じてアルコールとの動的なエステル交換反応を起こすメトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェートの独特の能力を通じて達成される。この可逆性について、イミデートＩＭＩを生成する重水素化試薬ＤＥＵとの４−クロロベンジルアルコール（ＣＨＡ）の活性化において調べ、２．５／１のＣＨＡ／ＩＭＩの比で平衡化することが見出された（スキーム８）。この観察に基づいて、ＩＭＡＢＡは反応の間に低濃度で存在し、ペンダントアミドとの急速な分子内置換を起こしてオキサゾリンＤＨＯを生成することが提唱される（スキーム８）。ＡＢＡ基の第二級アルコール基の誘導体化により形成されるいかなるイミデートも、稼働反応温度（３０℃）においてＯＸＯＳへのさらなる環化を起こさない。

スキーム８。ビルスマイヤー試薬を用いたアルコールの可逆的な活性化

平衡溶解度測定を様々な溶媒中でＤＨＯについて集めた。そのため貧溶媒選択された水（＜０．１ｍｇ／ｍＬ）を除いて、得られた全ての値は２０℃で２０ｍｇ／ｍＬより高い（ヘプタンを含む）ことが観察された。アセトニトリルは、水と組み合わせた場合に不純物の簡易な除去を結果としてもたらすので、それを結晶化用の溶媒として選択した。結晶化処理における異なる時点の溶解度値を示す曲線を図３に提示する。このプロトコールを使用して、結晶性ＤＨＯを８８％の収率でＤＬＡＣから＞９８ＬＣ面積％で単離した（スキーム９）。

結晶性ＤＨＯの反射ＰＸＲＤパターン（図１７）を獲得するためにＢｒｕｋｅｒ Ｄ８粉末Ｘ線回折計を使用し、これはＢｒａｕｎ検出器及びブラッグ−ブレンターノ反射幾何形状において作動するＣｕ−Ｋα放射線供給源を備えていた。得られた２シータ（２θ）値は、一般に、±０．２°の誤差内まで正確であった。試料は、一般に、平らな表面を達成するためのわずかな圧力の適用以外のいかなる特殊な処理無しで調製された。試料は、他に記載されなければ、覆うことなく測定された。作動条件は、４０ｋＶのチューブ電圧及び４０ｍＡの電流を含んだ。可変発散スリットを３°ウィンドウと共に使用した。ステップサイズは、３５．２秒のステップ時間と共に０．０１９°の２θであった。試料は測定の間に静的であった。

表２に列記されるピークは、結晶性ＤＨＯのＰＸＲＤパターンにおいて同定された。

スキーム９。ＤＬＡＣからＤＨＯを調製するための商用の方法

ＡＢＡのＯＸＯＳへの二重の脱水環化が連結解除されたが、ＤＨＯをＯＸＯＳに変換する方法の開発が必要であった。潜在的に突然変異誘発性のメシレート中間体ＤＨＯ−ＯＭｓは７５℃で１０時間のうちに完全に消費されるので、メタンスルホン酸無水物（Ｍｓ_２Ｏ）はＴｓ_２Ｏと比較してＯＸＯＳへのより速い変換を提供することが見出された。この向上は、ＤＨＯ−ＯＴｓのＯＸＯＳへの環化に関与するものと比較してＤＨＯ−ＯＭｓからＯＸＯＳに繋がる転移状態において経験される低減した立体障害に起因する可能性がある。変換は、トルエン中で塩基として２，６−ルチジンを用いて良好に進行することが見出された。求核性の有機塩基及び無機塩基は、生成物の望ましくない複雑な混合物をもたらした。変換の間に生成されるＯＸＯＳのメシル酸塩は、トルエン中で可溶性に乏しく、反応が進むにつれて別々の液層を形成する。さらなる処理を可能にするために、水性硫酸洗浄を使用するメシル酸塩の除去の前にジクロロメタン（８Ｖ）を用いて反応混合物を希釈することが必要である。水性ナトリウム１−ナフタレンスルホネートを用いる塩メタセシスに続いてジクロロメタンの蒸留を行ったところ、ＤＨＯから９０％の収率、９９．５ＬＣ面積％、及び９９．７重量％での１−ナフタレンスルホネートトルエンヘミ溶媒和物ＯＸＯＳ塩の結晶化に繋がった（スキーム１０）。

スキーム１０。ＤＨＯからＯＸＯＳを調製するための商用の方法

以下の実験手順はＯＸＯＳの調製を示す。

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルスルフェート付加体：還流コンデンサー及びオーバーヘッド撹拌シャフトを取り付けた５００ｍＬ Ａｔｌａｓ反応器に窒素雰囲気下でジメチルスルフェート（２００．０ｍＬ、２．１１ｍｏｌ、１．０当量）を入れた。反応器の内容物を６０℃に温めた。ＤＭＦ（２００．０ｍＬ、２．５６ｍｏｌ、１．２当量）を滴下で６０分（３．３ｍＬ／分）にわたり加えた。添加が完了したら、反応液を６０℃で２時間撹拌した。反応が完了したら、反応液を室温に冷却して、残留ＤＭＦ中の溶液としてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルスルフェート付加体を得た（４０２．６ｇ、２．０２ｍｏｌ、９５．８％のアッセイ収率、ＤＭＦ中８２．８重量％）。

（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル）−２−メチルペンタ−４−エンアミド（ＡＢＡ）：還流コンデンサー及びオーバーヘッド撹拌シャフトを取り付けた５Ｌ ＣｈｅｍＧｌａｓｓ反応器に窒素雰囲気下で（３Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アリル−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン（ＤＬＡＣ）（２０１．８ｇ、０．５３ｍｏｌ、９８．６重量％、１．０当量）、Ｌ−バリノール（１１０．８ｇ、１．０６ｍｏｌ、２．０当量）、及びトルエン（２０５ｍＬ、１ｍＬ／ｇ）を入れた。反応器の内容物を、撹拌を続けながら還流（１１５℃）下で７２時間加熱した。反応が完了したら、反応液を室温に冷却し、トルエン（８００ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）を用いて希釈した。１Ｎ ＨＣｌ（１０００ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）の小分けの添加により反応をクエンチした。相を分け、その後にブラインを用いて２回（２×４００ｍＬ、２ｍＬ／ｇ）有機層を洗浄した。有機相をマグネシウムスルフェート上で乾燥させ、トルエンを用いてすすぎながらポリッシングフィルター（粗多孔性）を通して濾過し、約８００ｍＬの体積まで濃縮してＡＢＡをトルエン中の溶液として得た（２２９．４ｇ、０．４８ｍｏｌ、９０．５％のアッセイ収率、トルエン中２７．９重量％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：７．０５−７．１９（ｍ，５Ｈ）、６．９５（ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ，２Ｈ）、６．８４（ｄ，Ｊ＝７．６７Ｈｚ，１Ｈ）、５．８５（ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ，１Ｈ）、５．５７（ｄｄｔ，Ｊ＝１７．１３，９．９８，７．２８，７．２８Ｈｚ，１Ｈ）、４．９１−５．０３（ｍ，２Ｈ）、４．７１（ｄ，Ｊ＝４．７７Ｈｚ，１Ｈ）、３．６６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、３．５７−３．６３（ｍ，１Ｈ）、３．５１−３．５３（ｍ，１Ｈ）、３．４２−３．４６（ｍ，１Ｈ）、３．１９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、２．９７（ｄｔ，Ｊ＝７．９３，４．９５Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６（ｄｄ，Ｊ＝１３．８９，７．０５Ｈｚ，１Ｈ）、２．１３（ｄｄ，Ｊ＝１４．６２，４．８７Ｈｚ，１Ｈ）、１．９６−２．０１（ｍ，１Ｈ）、１．８７−１．９２（ｍ，１Ｈ）、１．７１−１．８２（ｍ，１Ｈ）、１．１０（ｓ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝７．０５Ｈｚ，３Ｈ）、０．８６（ｄ，Ｊ＝７．０５Ｈｚ，３Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：１７７．４７、１４２．８３、１４０．４６、１３３．７９、１３３．６７、１３３．００、１２９．４９、１２９．１２、１２７．９６、１２７．９３、１２７．６８、１２６．８８、１１８．６４、７５．９１、６３．４４、５６．９４、４９．５１、４５．１７、４２．１３、３９．５９、２９．０６、２４．０７、１９．４０、１８．７２．

（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−４−（（Ｓ）−４−イソプロピル−４，５−ジヒドロオキサゾール−２−イル）−４−メチルヘプタ−６−エン−１−オール（ＤＨＯ）：還流コンデンサー及びオーバーヘッド撹拌シャフトを取り付けた５Ｌ ＣｈｅｍＧｌａｓｓ反応器に窒素雰囲気下で（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル）−２−メチルペンタ−４−エンアミド（ＡＢＡ）（２２９．４ｇ、０．４８ｍｏｌ、トルエン中２７．９重量％、１．０当量）及びトルエン（１１４５ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）を入れた。（注記：ＡＢＡは６８５ｍＬの残留トルエンを含有するトルエン中のストック溶液として得られるので、必要とされる追加のトルエンの量は４６０ｍＬである）。反応器の内容物を３０℃に温めた。ＮａＯＡｃ（４８．３ｇ、０．５９ｍｏｌ、１．２当量）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルスルフェート付加体（１７４．１ｇ、０．７２ｍｏｌ、８２．８重量％、１．５当量）を反応液に逐次的に加えた。３０℃で２時間撹拌した後に、反応液を室温に冷却した。反応を飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（７５０ｍＬ、３ｍＬ／ｇ）及びＨ_２Ｏ（５００ｍＬ、２ｍＬ／ｇ）を用いてクエンチした。相を分け、その後にブラインを用いて２回（２×７５０ｍＬ、３ｍＬ／ｇ）有機層を洗浄した。有機相をマグネシウムスルフェート上で乾燥させ、トルエンを用いてすすぎながらポリッシングフィルター（粗多孔性）を通して濾過し、真空中で濃縮した。粗残留物をＭｅＣＮ：Ｈ_２Ｏ（５０：５０）から再結晶化させてＤＨＯを白色結晶性固体として得た（２０６．５ｇ、０．４５ｍｏｌ、重量％により補正して２ステップで８７．７％の収率）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：７．０７−７．２１（ｍ，５Ｈ）、６．９９（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）、６．８８（ｄ，Ｊ＝７．１０Ｈｚ，１Ｈ）、５．４４−５．５５（ｍ，１Ｈ）、４．８３−４．９７（ｍ，２Ｈ）、４．７３（ｄ，Ｊ＝５．６０Ｈｚ，１Ｈ）、４．４２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、４．０３（ｄｄ，Ｊ＝８．９１，７．６７Ｈｚ，１Ｈ）、３．６３−３．７６（ｍ，２Ｈ）、３．１５−３．２１（ｍ，１Ｈ）、２．３５（ｄｄ，Ｊ＝１３．８９，７．２６Ｈｚ，１Ｈ）、２．１３−２．１８（ｍ，１Ｈ）、２．０７−２．１２（ｍ，１Ｈ）、１．８４（ｄｄ，Ｊ＝１４．７２，８．０９Ｈｚ，１Ｈ）、１．４８−１．６０（ｍ，１Ｈ）、１．０９（ｓ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．６３Ｈｚ，３Ｈ）、０．８２（ｄ，Ｊ＝６．６３Ｈｚ，３Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：１７１．９９、１４３．４８、１４０．４１、１３３．７４、１３３．３５、１３２．９２、１２９．５５、１２９．０９、１２８．２４、１２７．８４、１２７．７５、１２６．７５、１１８．３３、７６．６３、７１．８０、６９．８４、４９．３６、４２．１３、３９．７２、３８．６１、３２．４８、２４．２０、１９．１０、１８．２６．

（３Ｓ，５Ｓ，６Ｒ，８Ｓ）−８−アリル−６−（３−クロロフェニル）−５−（４−クロロフェニル）−３−イソプロピル−８−メチル−２，３，５，６，７，８−ヘキサヒドロオキサゾロ［３，２−ａ］ピリジン−４−イウムナフタレン−１−スルホネートトルエンヘミ溶媒和物（ＯＸＯＳ）：還流コンデンサー及びオーバーヘッド撹拌シャフトを取り付けた５Ｌ ＣｈｅｍＧｌａｓｓ反応器に窒素雰囲気下で（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−４−（（Ｓ）−４−イソプロピル−４，５−ジヒドロオキサゾール−２−イル）−４−メチルヘプタ−６−エン−１−オール（ＤＨＯ）（１９９．３ｇ、０．４０ｍｏｌ、９３．５重量％、１．０当量）及びトルエン（１０００ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）を入れた。メタンスルホン酸無水物（８８．２ｇ、０．４９ｍｏｌ、１．２当量）及び２，６−ルチジン（９５．０ｍＬ、０．８２ｍｏｌ、２．０当量）を反応液に逐次的に加えた。反応器の内容物を、撹拌を続けながら７５℃に１６時間加熱した。反応が完了したら、反応液を室温に冷却し、ジクロロメタン（１６００ｍＬ、８ｍＬ／ｇ）を用いて希釈した。Ｈ_２Ｏ（９５５ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）中の濃Ｈ_２ＳＯ_４（４５．０ｍＬ、０．８２ｍｏｌ、２．０当量）の溶液を用いて、反応をクエンチした。相を分け、その後、Ｈ_２Ｏ（２×８００ｍＬ、４ｍＬ／ｇ）中のナトリウム１−ナフタレンスルホネート（２×７２．５ｇ、０．３１ｍｏｌ、０．７５当量）の水性溶液を用いて、有機層を２回洗浄した。有機相をナトリウム１−ナフタレンスルホネート（１０．０ｇ、０．０４ｍｏｌ、０．１当量）上で乾燥させ、ジクロロメタンを用いてすすぎながらポリッシングフィルター（粗多孔性）を通して濾過し、真空中で濃縮した。粗残留物をトルエンから再結晶化さてＯＸＯＳをオフホワイトの結晶性固体として得た（２６０．１ｇ、０．３７ｍｏｌ、重量％により補正された９０．０％の収率）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：９．１４（ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ，１Ｈ）、８．３５（ｄｄ，Ｊ＝７．２６，１．２４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８６（ｔ，Ｊ＝８．７１Ｈｚ，２Ｈ）、７．５７（ｔ，Ｊ＝７．７０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３−７．５０（ｍ，２Ｈ）、７．１３−７．３９（ｍ，７．５Ｈ）、７．０３−７．１０（ｍ，３Ｈ）、６．０７（ｄ，Ｊ＝１１．２０Ｈｚ，１Ｈ）、５．８０（ｄｄｔ，Ｊ＝１７．００，９．９０，７．３９，７．３９Ｈｚ，１Ｈ）、５．５１（ｔ，Ｊ＝９．７４Ｈｚ，１Ｈ）、５．２６−５．３４（ｍ，２Ｈ）、４．７６（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．３７，４．６６，２．１８Ｈｚ，１Ｈ）、４．６２（ｄｄ，Ｊ＝９．１２，４．７７Ｈｚ，１Ｈ）、３．５１−３．６０（ｍ，１Ｈ）、２．８６（ｔ，Ｊ＝１３．６８Ｈｚ，１Ｈ）、２．６５−２．７１（ｍ，１Ｈ）、２．５５−２．６０（ｍ，１Ｈ）、２．３５（ｓ，１．５Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝１３．８９，３．５２Ｈｚ，１Ｈ）、１．５２（ｓ，３Ｈ）、０．５４−０．６７（ｍ，７Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：１８３．２８、１４２．１６、１４０．０１、１３７．７１、１３５．８９、１３４．１５、１３４．１２、１３３．２８、１３２．１５、１３０．３８、１３０．３０、１２９．９５、１２９．６２、１２９．４３、１２９．０６、１２８．９０、１２８．３４、１２８．０９、１２７．９２、１２７．６６、１２７．４１、１２７．１８、１２６．４４、１２５．８８、１２５．６３、１２５．４８、１２５．１６、１２４．２８、１２１．２０、７３．１４、６７．２７、６７．０６、４３．６４、４３．０１、３８．６７、３８．５６、２６．６４、２２．１３、２１．３２、１８．０８、１３．７４．
又は、中間体ＤＨＯ−ＯＭｓをＯＸＯＳへの変換前に分離及び精製することができる。

ＤＨＯ−ＯＭｓ
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：７．３１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、７．２４−７．１８（ｍ，２Ｈ）、７．１６（ｓ，１Ｈ）、７．０８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．０７−７．０１（ｍ，１Ｈ）、５．５９−５．４３（ｍ，２Ｈ）、５．０１−４．８３（ｍ，２Ｈ）、３．８４（ｄｄ，Ｊ＝８．１，９．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．５５−３．４５（ｍ，１Ｈ）、３．４２−３．３４（ｍ，１Ｈ）、３．２４−３．１３（ｍ，１Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）、２．３９−２．２８（ｍ，１Ｈ）、２．２８−２．１４（ｍ，１Ｈ）、１．９８（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝７．８，１３．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．７２（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１４．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．２６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１．０６（ｓ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）、０．７１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δ ｐｐｍ：１６９．６９、１４１．５４、１３５．６１、１３４．９８、１３３．９２、１３３．４３、１２９．８２、１２９．３０、１２８．８１、１２８．４７、１２７．８２、１２７．３４、１１８．２１、８７．０２、７７．２２、６９．７８、４７．９９、４４．５７、３９．９６、３９．３１、３８．４６、３２．８０、２１．８５、１９．４０、１８．２６．

［実施例４］
＜最後から２番目の中間体ＳＵＬを調製するための商用の方法の開発＞
高温でのイソプロピルスルフィン酸塩を用いるＯＸＯＳの処理は、熱力学的により安定な生成物ＳＵＬに転位するスルフィネートエステルＳＵＬＦＩのジアステレオマー対の形成に繋がる（スキーム４）。この種類のスルフィネート−スルホン転位は、ベンズヒドリルスルフィネートエステルのイオン対形成及び転位機構を介して起こることが従来の方法において記載されている。しかしながら、本方法において、スキーム１１に示されるクロスオーバー実験の結果は、転位は解離したイオンを伴うことを明らかにする。ＯＸＯＳは７０℃より高い温度で水と定量的に反応することを考慮すると、アルコールＡＬＣが生成される十分な機会がある。ＯＸＯＳがＡＬＣから再生成され得ない場合、水は反応混合物から厳密に除外されなければならない。この目的を達成するための１つの経路は、共沸乾燥条件に対して安定であり、高純度で単離することができ、ＯＸＯＳと効率的に反応してＳＵＬを生成するイソプロピルスルフィン酸の塩を調製することである。

スキーム１１。ＯＸＯＳからのＳＵＬの調製において生成される中間体及び副生成物

リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム及びアンモニウム塩を含む、この目的を達成するためのいくつかのイソプロピルスルフィン酸塩候補の評価の後に、カルシウムスルフィネート二水和物塩は安定な結晶性の種として優れていた。この塩は、二酸化硫黄とのイソプロピルマグネシウムクロリドの反応から調製され（スキーム１２）、水性塩酸クエンチ後のイソプロピルスルフィン酸の形成に繋がった。この材料を、カルシウムアセテートを用いて処理したところ、反応性結晶化を介するカルシウムイソプロピルスルフィネート二水和物（ＣＡＬＩＤ）の単離が可能となった。上記の処理の水感受性を考慮すると、水和物はＳＵＬの調製において使用するための理想的な種ではないが、カルシウム塩は高温（１１０℃まで）でのトルエン中での共沸乾燥において化学的に安定であった（すなわち、４８時間以内に不均化生成物は観察されなかった）。そのため、試薬懸濁液の乾燥をＯＸＯＳの添加及びＳＵＬの調製の前に方法の部分として含めることができる。オーブン脱水試料のＸ線粉末回折分析を用いることにより、ＣＡＬＩＤは＜１５％ ＲＨでの完全な乾燥（＜１００ｐｐｍの水）で多形変化を起こすことが観察された。しかしながら、ＣＡＬＩＤは脱水材料として安定であり、＞２０％の相対湿度での水再吸収で元々の二水和物形態に戻るように変換される。ＳＵＬを製造する方法は、減圧下での共沸蒸留によりＣＡＬＩＤ及びＯＸＯＳトルエン懸濁液を乾燥させて、１００ｐｐｍ未満の水を含有する混合物を調製することを含む。次に、乾燥懸濁液を合わせ、ジメチルアセトアミドへの溶媒交換を実行する（スキーム１３）。結果としてもたらされる溶液を１２０℃に加熱し、２０時間まで撹拌する。この時間の間に、１２０℃で最初の１時間以内に生成されるスルフィネートエステルは転位してＳＵＬを形成する。これらの条件下で形成されるＡＬＣ不純物の典型的なレベルは３ＬＣ面積％である。水性ワークアップ並びにアセトニトリル及び水からの結晶化（２３．３ｋｇのスケールまで）後にＳＵＬは８２％の収率及び＞９９．５ＬＣ面積％で単離される。

スキーム１２。カルシウムイソプロピルスルフィネート二水和物（ＣＡＬＩＤ）の調製

スキーム１３。ＣＡＬＩＤを使用するＳＵＬの調製

イソプロピルマグネシウムクロリドを乾燥試薬としてインサイチューで調製し、ＳＵＬの製造において直接的に用いたが、これはＯＸＯＳからのＳＵＬの製造のための代替的な手順を与えた。スキーム１４に示されるように、イソプロピルマグネシウムクロリドのテトラヒドロフラン溶液を、二酸化硫黄を用いて処理してイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドを調製した。インサイチューＦＴＩＲ（１３２５ｃｍ^−１においてピークを有する）を使用して二酸化硫黄の完全な消費を検証した。フェナントロリン試験を用いて、その後の処理の前にアルキルグリニャールの非存在を確認した。Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）への溶媒交換に続いてＯＸＯＳを添加して１２０℃又は１８０℃でＳＵＬを得た（スキーム１４）。そのように調製される反応混合物からの望ましくない水分及び／又は塩化水酸化マグネシウムの排除は課題となる。例えば、ＯＸＯＳと比べて３当量のイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドが用いられる場合、（ＯＸＯＳに対して）約５ｍｏｌ％の塩化水酸化マグネシウムが出発グリニャール溶液中に存在する。ＮＭＰ（５体積）及びＯＸＯＳは（ＯＸＯＳに対して）５〜１０ｍｏｌ％の水を組み込む。そのため、この試薬を使用して１５ｍｏｌ％のＡＬＣの最小の形成を回避することは困難である。興味深いことに、これらの条件下でのＳＵＬの形成の間に観察されるＡＬＣのレベルは、操作温度に依存する限度で反応混合物中に含有される水又は水酸化物の測定される量を上回る。水又は水酸化物塩を用いるＯＸＯＳの直接的な開環（スキーム４）に加えて、ＡＬＣの形成を与えるために第２の機構が誘起されなければならない。この推定される機構は、ＡＬＣを得るためのイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドとのＳＵＬＦＩの反応を伴う（スキーム１５）。

高温（例えば、１８０℃）でのＡＬＣのＳＵＬへの変換を説明する作動的な機構があるが、それは１２０℃で商業的に好適な速度で起こらない（図４）。１８０℃でのＮＭＰ（５体積）中のイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリド（３当量）を用いるＯＸＯＳの処理は、６分後にそれぞれ７７％及び１８％のアッセイ収率でＳＵＬ及びＡＬＣの形成を可能とする。８０分後に、ＳＵＬ及びＡＬＣのアッセイ収率はそれぞれ９０％及び５％である（図５）。マグネシウム塩はルイス酸として作用してＡＬＣからのＯＸＯＳの形成を促すことが提唱される（スキーム１５）。イソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドは、高温での安定性に欠き、ＮＭＰ中の１Ｍの溶液として２００℃において１時間で８５％の分解を経験することが^１Ｈ ＮＭＲにより観察された。結果として、３当量のイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドを利用して変換を実行した。

スキーム１４。イソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドを使用するＯＸＯＳからのＳＵＬの調製

スキーム１５。ＡＬＣの生成及びＡＬＣのＳＵＬへの変換のための可能な機構

反応性を改変するため及びイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドの安定性を増加させるための代替的なイソプロピルスルフィン酸塩の使用を評価した。１当量の塩化亜鉛を用いた１当量のインサイチューで調製された試薬の処理は有望な結果をもたらした。商業的に入手可能な塩化亜鉛テトラヒドロフラン溶液（０．５Ｍ）を、以前に記載（スキーム１２）されたように調製されたイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドの溶液に加えた。形成された新たな種は、^１Ｈ ＮＭＲによりイソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリド及び亜鉛イソプロピルスルフィネートとは別個であることが観察され（図６）、その構造は、副生成物として生成される塩化マグネシウムと共に、イソプロピルスルフィネート亜鉛クロリドのものであると推定された。ＮＭＰ（５体積）への溶媒交換を行い、ＯＸＯＳを反応混合物に加えた（スキーム１６）。この混合試薬を使用して、ＡＬＣのＳＵＬへの変換は、１２０℃において生産的速度で有効であった。そのため、試薬及び反応中間体の分解を回避しながら（図７）１２０℃並びに非常に厳密な無水分条件で変換を行うことができる。さらに、この混合マグネシウム−亜鉛試薬を用いて水の関与無しでＡＬＣをもたらす代替的な機構の証拠は無く、処理の間に生成される全てのＡＬＣは、入ってくる試薬又は溶媒から与えられ得る。これは、この混合塩を１８０℃で使用できないということではなく（図８）、処理を実行するために１４０℃の温度を選択して、限られた当量（１．５当量）のマグネシウム−亜鉛種を使用しながら良好な反応速度及び７時間で７％のＡＬＣと共にＳＵＬの９０％の収率をもたらすことを可能とした。マグネシウム−亜鉛混合種は、^１Ｈ ＮＭＲ実験により１５０℃で１６時間安定であることが示された。

スキーム１６。イソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリド−塩化亜鉛を使用するＯＸＯＳからのＳＵＬの調製

イソプロピルスルフィネートマグネシウムクロリドの形成の間に２０％過剰の二酸化硫黄を使用し、２０℃での混合塩の２４時間の撹拌後のＮＭＰへの溶媒交換を行ってこの処理の堅牢性を評価した。スルフィネート試薬の４０％のみ（^１Ｈ ＮＭＲによる）が残留したこと及び６０％の材料はスルホンＳＳＯを形成する（スキーム１５）ためには不釣合いであったことが観察された。１．５当量の試薬を用いてＯＸＯＳをＳＵＬに変換するためにこの混合物を使用したところ、６２ＬＣ面積％のみのＳＵＬの形成が結果としてもたらされ、３３ＬＣ面積％のＯＸＯＳは未反応であったため、この処理についての堅牢性の欠如が実証され、何故ならば、プラント稼働の間に二酸化硫黄投与を制御することは問題となり得るからである。したがって、ＳＵＬを調製するためのＣＡＬＩＤの使用は、化合物Ａを製造するための商用の方法の有利な態様を表す。

［実施例５］
＜化合物Ａを調製するための商用の方法の開発＞
ＳＵＬのアルケン基のオゾン分解、続いて結果としてもたらされるアルデヒドの、亜塩素酸ナトリウムを用いる化合物Ａの対応するカルボン酸基への酸化は、化合物Ａの初期製造のために使用される酸化ルテニウム／ナトリウムペリオデート法に対するより環境に優しい代替を示す。追加的に、オゾン分解経路は、結晶化を介して除去することが困難ないくつかの望ましくない二量体不純物の形成を排除する可能性があるため、生成物の単離を単純化する。

オゾン分解のための安全な反応条件の開発において、水性混合物を利用した（スキーム１７）。これらの条件下で、高エネルギーオゾニド中間体（ＯＺＯ）は加水分解されるため、その蓄積が回避され、処理が安全なものとなる。蓄積されたＯＺＯのＬＣ面積％を、アセトニトリル／水反応混合物において使用された水の容積測定パーセンテージに対して測定し、結果を図９に報告した。１０％の水を用いて、オゾン分解混合物（２０体積の溶媒）についての総エネルギー放出は、２４０℃の分解温度と共に９２Ｊ／ｇであり、安全性の懸念を表さない。オゾン分解の間の安全性を確実にするために制御を要求する別のパラメーターは、反応の間の容器中の酸素の気相濃度である。混合物の燃焼のための限界酸素濃度（ＬＯＣ）を１０．７５体積％で測定し、ＬＯＣの半分（約５体積％の酸素）でオゾン分解処理を実行して、起こり得る燃焼を回避するために余裕を持った安全性を確実にした。

スキーム１７。オゾン分解−ピニックタンデム処理を使用するＳＵＬからの化合物Ａの調製

この変換のためにＧＭＰ状況において２つの異なるモードの処理を実施した：（ｉ）バッチ容器中でオゾンスパージングを使用する半バッチオゾン分解、及び（ｉｉ）連続撹拌タンク反応器処理。最初に、連続的な処理は、商用の方法においてオゾン分解反応を用いることと関連する一般的な安全性の懸念を軽減するために魅力的であると思われる。一実施形態において利用される連続オゾン分解装置の図式及び写真をそれぞれ図１０及び図１１に提示する。Ｏｚｏｎｉａにより市販されているＣＦＳ−３オゾン生成装置モデルを利用して、１時間当たり約０．９ｍｏｌのオゾンを製造しながら４．８ｋｇのＳＵＬを処理した。オゾンは、空気供給から生成され、図１０に示されるように連続撹拌タンク反応器（ＣＳＴＲ）の底部に位置するバルブを介して導入される。出発材料溶液は、容器（０．９Ｌの容量）の底部に位置するガラスフリットの上にある出口と共にディップチューブを使用して６０ｍＬ／分の流速で導入される。混合物の激しい撹拌は適切な気体分散のために重要であり、例を図１１に見ることができる。底部において導入される空気流れの３Ｘの流速を有する窒素ヘッドスペースパージが維持されるため、５体積％未満の酸素／オゾンが気相中に存在することが確実になる。反応混合物は、ジャケット制御を使用して２０℃に維持される。残留ＳＵＬのレベルを測定するためにＣＳＴＲ出口においてラマンプローブが使用される。

連続オゾン分解の使用においてリスクを最小化するために、蓄積した反応混合物部分をサンプリングし、反応の完了をＨＰＬＣにより検証した。部分を亜塩素酸ナトリウム（４当量）の２Ｍ水性溶液に入れ、結果としてもたらされた混合物を２０℃で１６時間撹拌した。水性溶液中の処理中間体（ＡＬＤ、ＰＡＣ）の低い溶解性に起因して、オゾン分解反応ストリームへの亜塩素酸ナトリウムの水性溶液の添加は、それらの中間体の初期沈殿を回避するために使用されるオプションにとって好ましく、以下に記載の半バッチオゾン分解処理のために使用される添加のモードを表す。

ＳＵＬのオゾン分解を行うための半バッチアプローチは、変換のほとんどのために過剰なアルケン出発材料を用いて処理すること及びより単純な製造フットプリントを用いることという利点を有する。最大で０．４ＬＣ面積％の不純物ＤＨＣＡがこの処理モードを使用して形成されることが観察されたが、反応完了及び安全な処理条件をモニターするために信頼できるアプローチが要求される。上記のように、この反応マニホールドのための安全な処理条件は、水性媒体を用いること及び５体積％より低い酸素濃度を維持することにより提供される。空気／オゾンガスストリームは、図１２に見られるように、オゾン生成装置の下流であるが、反応容器中のディップチューブを通じた反応気体の導入の上流の窒素を用いて希釈される。窒素の気体流れは、空気流れと比較して４倍使用されて、容器に入る気体が５体積％以下の酸素／オゾンを含有することが確実になる。ヘッドスペースオゾン検出器を利用して、出口気体濃度における増加を検出することによりオゾン分解についての反応完了をモニターすることができる。しかしながら、出口オゾン濃度における測定される変化は微妙であり得ることを考慮して、この技術は実行が困難であることが見出された。他方、出発材料の消費はこの変換について線形であることが見出され（図１３）、そのため、反応完了のための時間を正確に予測するためにオゾン生成装置出力の知識と合わせることにより変換の間の少数の試料のＨＰＬＣ分析が可能になる。約５４０ｇのオゾン／時間の最大出力を可能とするＯｚｏｎｉａにより市販されているＣＦＳ−１４オゾン生成装置モデルを利用してＳＵＬの２３ｋｇバッチを処理した。しかしながら、安定なオゾン出力を維持することは、最大能力未満で機械を用いてより容易であるため、製造のために２８５ｇのオゾン／時間の出力を利用し、６０８０Ｗのパワー（能力の８０％）及び３．１ＳＣＦＭ（最大空気流れの３０％）を達成した。生成装置出力気体中のオゾンの濃度は、これらの設定を使用して約４．３重量％であり、処理容器に入る前にこの気体ストリームを窒素（１２．５ＳＣＦＭ）と混合した。オゾンガス出力を使用して予測された反応完了までの時間（７．４時間）を１０％上回った（実際には８．２時間）。オゾンは、水と反応してヒドロキシ基を生成することが公知であり、オゾンの部分はこの方式で消費され、これは、過剰なオゾンが利用されなければならないことを説明する。

この半バッチ処理のために、ディップチューブを介して反応容器の底部の近くでオゾンを導入する。気体を反応システムに送達するために評価された第１のデバイスは、１００μｍの細孔径及び０．３２平方フィートの総表面を有する標準的なオゾンスパージングユニットであった。１５．６ＳＣＦＭの合わさった気体流れ（空気、オゾン、及び窒素）を送達するためにこのスパージャーを使用したところ、スパージャー表面の冷却を引き起こす圧力降下が起こった。この温度の低下には、出発材料ＳＵＬ及び生成物ＡＬＤの結晶化、続いて結晶化した材料によるスパージャー細孔の閉塞が付随した。アセトニトリル／水（９／１の体積比）中１０℃でのＳＵＬ及びＡＬＤの溶解度はそれぞれ２５ｍｇ／ｍＬ及び２１ｍｇ／ｍＬであるため、いずれの材料の約５０％のみが、使用される２０体積の溶媒混合物中でその温度において可溶化され得る。スパージャーが出発材料又は生成物結晶により閉塞されると、気体移動のために利用可能な表面が減少し、状況は悪化して、処理の中断及びスパージャーの修復が要求される。異なるオゾンスパージャーは、この問題に対処するように設計された。代替的なスパージャーは、Ｃ２２ハステロイチューブ中に貫通した１／８インチ直径のホール（３７ホール）を組み込んだ。両方のスパージャーを図１４に示す。典型的な気体流れ（１５ＳＦＣＭ）での反応混合物及びスパージャー表面温度に対するいずれかのスパージャーの使用の影響力を測定し、結果を表３に示す。表に詳述されるように、１００μｍ細孔のスパージャーについてスパージャー表面温度及び反応混合物温度の間に有意差があり（例えば３０℃対１１℃）、上記に詳述される問題を引き起こした。代替的なスパージャーはこれらの懸念を軽減する。オゾン分解処理の間のＳＵＬ及びＡＬＤのいかなる沈殿も回避するために、変換を３０℃で実行した。

オゾン分解処理の完了後に、２Ｍの水性亜塩素酸ナトリウム溶液の添加は、化合物Ａの形成を可能にすることが観察された。混合物を２Ｍの水性重亜硫酸ナトリウムを用いて処理してさらなる処理のために全ての酸化剤を排除する。相分離がイソプロピルアセテートの添加に続いて起こり、２Ｍの水性ナトリウムホスフェート（ｐＨ６）を用いた有機層の２回の洗浄を実行した。最後に、有機相を１．１Ｍの水性塩化ナトリウムを用いて洗浄して＞９５％のアッセイ収率及び＞９８ＬＣ面積％の純度で化合物Ａの溶液を調製した。

［実施例６］
＜ＤＡＢＣＯ塩としての化合物Ａの単離＞
不純物の堅牢な除去を可能にする薬物物質制御点は遊離酸のために利用可能でなかったことを考慮して、化合物Ａのいくつかの塩を調製し、不純物の簡易な除去を可能とするために有効な候補を発見するための試験を行った。化合物Ａの３０を超える有機塩及び５を超える無機塩をその目的のために評価したところ、有望な競争者としてのヘミＤＡＢＣＯ塩及びヘミカルシウム塩の同定が促された。しかしながら、ヘミカルシウム塩は、出発材料ＳＵＬ又は不純物ＨＡＣの中等度の除去のみを表し示した一方、ヘミＤＡＢＣＯイソプロピル酢酸塩（２３２−ＤＡＢ）の使用は、両方の種の効率的な除去を可能とした（ＩＰＡＣ＝イソプロピルアセテート）。

２３２−ＤＡＢ
５ＬＣ面積％のＳＵＬ及び１ＬＣ面積％のＨＡＣは、典型的なオゾン分解−ピニック酸化反応混合物において観察されるよりも有意に高いレベルで、後者の塩の単離の間に完全に除去されることができた。２３２−ＤＡＢは、ＴＧＡ及び^１Ｈ ＮＭＲにより安定な結晶性の一溶媒和物（イソプロピルアセテート）ヘミＤＡＢＣＯ塩であることが観察された。材料の単一の多形体が同定された。材料の多型形態及びイソプロピルアセテートレベルは、０〜９０％の相対湿度で実行された動的蒸気収着実験により変化しなかった。追加的に、温度及び貧溶媒の使用に基づく堅牢な結晶化プロトコールを、イソプロピルアセテート及びヘプタンを使用してヘミＤＡＢＣＯイソプロピル酢酸塩について設計することができた。

結晶化処理中の異なる時間間隔での値を表し示す溶解度曲線を図１５に示す。５５℃で４体積のイソプロピルアセテート中の化合物Ａの溶液へのＤＡＢＣＯ（０．５当量）の添加で、溶液に２３２−ＤＡＢを播種して、材料の約２０％の過飽和放出及び結晶化を可能とする。２時間のうちの２０℃への冷却は、材料の別の６０％の結晶化を促す。４体積のヘプタンをその後に加えて、バッチ濾過用の調製において上清濃度を約５ｍｇ／ｍＬに下げる。この結晶化手順の使用は、８３％の収率及び＞９９．９ＬＣ面積％の純度（２３．２ｋｇまでのスケール）での２３２−ＤＡＢの単離を可能とする。

［実施例７］
＜化合物Ａの単離＞
結晶化２３２−ＤＡＢは有機溶媒中で行われたことを考慮して、直交精製処理を介して化合物Ａを単離するために水性結晶化プロトコールが望まれた。フィッシャーエステル化及び結晶化を介するエステル不純物の除去ができないことに起因して、２０〜３０℃より高い温度でのアルコール溶媒中の化合物Ａの一般的な不安定性を考慮すれば、アルコール−水溶媒混合物は結晶化のために利用できなかった。水混和性溶媒を有する他の水性混合物は、結晶化設計の助けにならない急な溶解度曲線を示した。対照的に、酢酸及び水は、上記に詳述される欠点を有さずに良好な成長特徴を有して、材料を結晶化させるために好適であった。堅牢な温度及び貧溶媒ベースの結晶化をこの溶媒混合物を使用して設計し、それを水性塩酸（２当量）／イソプロピルアセテート混合物中での塩切断、２Ｍの水性ナトリウムホスフェート（ｐＨ６）を用いた有機層の２回のその後の洗浄、１．１Ｍの水性塩化ナトリウムを用いた洗浄、及びイソプロピルアセテートから酢酸への溶媒交換後に稼働した。

結晶化処理における異なる時点の溶解度値を示す曲線を図１６に表す。化合物Ａの酢酸溶液（６．６体積の酢酸）を５５〜６０℃に温め、４．４体積の水を加える。溶液に化合物Ａを播種して、化合物Ａの約３０％の過飽和放出及び結晶化を可能とする。結晶化を１０時間のうちに２０℃に冷却して、材料の別の５５％の結晶化を結果としてもたらす。１体積の水をその後に加えて、迅速なバッチ濾過のための調製において上清濃度を約５ｍｇ／ｍＬに下げる。３回の水洗浄（３×１０体積）を実行して、単離された材料中の残留酢酸の存在を最小化した。化合物Ａ（１８．０ｋｇまで）をこのプロトコールを使用して＞９２％の単離収率（１００重量％）及び＞９９．９ＬＣ面積％の純度で＜２００ｐｐｍの残留水及び＜２００ｐｐｍの残留酢酸と共に単離した。

材料をＰａｌｌｍａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍｉｌｌ（ウイングビーター、１６ｋｇまでのスケール）を使用して製粉し、結果を表４に要約する。化合物Ａの標的ｄ５０は、１．３の空腹胃ｐＨで完全な吸収を提供するために評価された用量の範囲（６０〜４８０ｍｇ）についての経口吸収モデリング（ＧａｓｔｒｏＰｌｕｓ ｖ ９．０）に基づいて＜３５μｍに設定した。

高純度での薬物物質（化合物Ａ）の商用の製造のために好適な堅牢及び効率的な方法が開発された。方法の著しい態様は、（ｉ）第一級アルコール中間体の選択的なインサイチュー活性化のためのベンチ安定なビルスマイヤー試薬、メトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェートの使用、（ｉｉ）不純物を除去する処理能力の能力を増進する結晶形態の中間体ＤＨＯの単離、（ｉｉｉ）スルホン中間体の堅牢な調製を確実にするための結晶形態の新たな安定なイソプロピルカルシウムスルフィネート試薬の使用、（ｉｖ）バッチ製造モード又は連続製造モードのいずれかのために好適な水性溶媒混合物中で実行される安全なオゾン分解プロトコールの開発、（ｖ）不純物の有効な除去を可能とする化合物Ａの塩の形成による化合物Ａの増進した純度制御を含む。新たな方法を実証したところ、ＤＬＡＣから４９．８％の全体収率での１８ｋｇの純粋な化合物Ａ（９９．９ＬＣ面積％）が提供され、３２％の全体収率を結果としてもたらしたに過ぎない、記載のＦＩＨ方法に対して著しい向上を表した。

Claims (17)

1. 化合物
   

   

   を調製する方法であって、
   

   

   をメトキシメチレン−Ｎ，Ｎ−ジメチルイミニウムメチルスルフェートと反応させることを含む、方法。
2. 反応が塩基の存在下で実行される、請求項１に記載の方法。
3. 塩基が、ＫＯＡｃ、ＮａＯＡｃ、ＬｉＯＡｃ、又はＫ_２ＣＯ_３である、請求項２に記載の方法。
4. 塩基がＮａＯＡｃである、請求項２に記載の方法。
5. 反応が溶媒中で実行される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
6. 溶媒がトルエンである、請求項５に記載の方法。
7. 化合物
   

   

   を調製する方法であって、
   

   

   をイソプロピルスルフィネート亜鉛クロリドと反応させることを含む、方法。
8. 反応がマグネシウム塩の存在下で実行される、請求項７に記載の方法。
9. マグネシウム塩がＭｇＣｌ_２である、請求項８に記載の方法。
10. イソプロピルスルフィネート亜鉛クロリドが、イソプロピルマグネシウムクロリドからインサイチューで生成される、請求項７に記載の方法。
11. 反応が、１００℃〜１５０℃の範囲において実行される、請求項７に記載の方法。
12. 反応が、１５０℃〜２００℃の範囲において実行される、請求項７に記載の方法。
13. ７．３°±０．２°の２θ、１４．５°±０．２°の２θ、１５．８°±０．２°の２θ、１５．９°±０．２°の２θ、及び２３．１°±０．２°の２θにおけるピークを含む反射型Ｘ線粉末回折パターンにより特徴付けられる、（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−４−（（Ｓ）−４−イソプロピル−４，５−ジヒドロオキサゾール−２−イル）−４−メチルヘプタ−６−エン−１−オール（ＤＨＯ）の結晶形態。
14. 反射型Ｘ線粉末回折パターンが、８．５°±０．２°の２θ、１０．０°±０．２°の２θ、１１．０°±０．２°の２θ、１３．４°±０．２°の２θ、１８．８°±０．２°の２θ、及び２２．０°±０．２°の２θにおけるピークをさらに含む、請求項１３に記載の結晶形態。
15. 反射型Ｘ線粉末回折パターンが、６．３°±０．２°の２θ、１０．５°±０．２°の２θ、１１．５°±０．２°の２θ、１２．８°±０．２°の２θ、１４．８°±０．２°の２θ、１５．２°±０．２°の２θ、１７．０°±０．２°の２θ、１７．５°±０．２°の２θ、１７．８°±０．２°の２θ、１８．４°±０．２°の２θ、１９．０°±０．２°の２θ、１９．７°±０．２°の２θ、１９．９°±０．２°の２θ、２０．７°±０．２°の２θ、２１．２°±０．２°の２θ、２１．３°±０．２°の２θ、２２．４°±０．２°の２θ、２３．６°±０．２°の２θ、２４．２°±０．２°の２θ、２４．９°±０．２°の２θ、２５．７°±０．２°の２θ、２６．３°±０．２°の２θ、２７．０°±０．２°の２θ、２８．３°±０．２°の２θ、２８．７°±０．２°の２θ、２９．３°±０．２°の２θ、２９．７°±０．２°の２θ、３０．８°±０．２°の２θ、３１．４°±０．２°の２θ、３１．８°±０．２°の２θ、３３．０°±０．２°の２θ、３４．２°±０．２°の２θ、３５．８°±０．２°の２θ、３７．０°±０．２°の２θ、及び３７．５°±０．２°の２θにおける１つ以上のピークをさらに含む、請求項１４に記載の結晶形態。
16. 結晶形態が結晶性無水物である、請求項１３に記載の結晶形態。
17. ピークが、反射型Ｘ線粉末回折がＣｕ−Ｋα放射線を使用して実行された場合に存在する、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の結晶形態。

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