JP2021534122A

JP2021534122A - 脱ユビキチン化酵素ｕｓｐ２５及びｕｓｐ２８の阻害

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Publication number: JP2021534122A
Application number: JP2021506756A
Authority: JP
Inventors: デイビッドジェイ．ゲーリン，; ジャスティンエー．カラベラ，; ホンビンリー，; スティーブンミシュケ，; デイビッドジェイ．リチャード，; ショーンイー．アール．シラー，; タチアナシェレキン，
Original assignee: ヴァロアーリーディスカバリー，インコーポレイテッド
Priority date: 2018-08-09
Filing date: 2019-08-08
Publication date: 2021-12-09
Also published as: CN112823037A; US20210179628A1; WO2020033709A1; CN112823037B; EP3833441A1

Abstract

本開示は、ＵＳＰ２８及びＵＳＰ２５から選択される少なくとも１つの経路の、阻害物質などの調節物質、阻害物質を含む医薬組成物、及び阻害物質の使用方法に関する。ＵＳＰ２８及びＵＳＰ２５から選択される少なくとも１つの経路の、阻害物質などの調節物質は、他の病気の中で、がんの治療に有用であり得る。本開示は式（１）の化合物を提供する。【選択図】なし

Description

関連出願への相互参照
本出願は、２０１８年８月９日に出願された米国仮出願第６２／７１６，７３８の優先権及び利益を主張し、その内容全体は、参照することにより本明細書に組み込まれる。

本開示は、新規の化学化合物を用いた、ユビキチン特異的プロテアーゼ２８（ＵＳＰ２８）及び／またはユビキチン特異的プロテアーゼ２５（ＵＳＰ２５）の阻害に関する。

ＵＳＰ２８及びＵＳＰ２５は、他の細胞因子の中で特に、ヒトにおける免疫反応及び腫瘍の発生及び増殖に関する、多様な腫瘍性タンパク質及びエピジェネティックドライバー及び免疫調節タンパク質の脱ユビキチン化及び安定化に役割を果たす。したがって、小分子阻害物質によるＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の阻害は、医療用途、例えば、肺癌などのがんの治療のために開発することができる。このような理由のため、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の新規かつ強力な小分子阻害物質に対してかなりの必要性が残っている。

本開示は、式（Ｉ）の化合物：

及びその薬学的に許容され得る形態を提供し、
式中：

Ｘは、ＮまたはＣ（Ｒ’）から選択され；

Ｒ’は、水素、重水素、及びＣＨ_３から選択され；

Ｙは、Ｃ（Ｒ）であり；

Ｒは、水素、ＮＨ_２、及びＣ１−Ｃ４アルキル基から選択され；

Ｒ_１は、Ｒｘ、水素、Ｃ１−Ｃ５直鎖及びＣ３−Ｃ５分枝アルキル基から選択され、式中、アルキル基は、１つ以上のＲｘで任意選択で置換され；

Ｒｘは、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５生化学分析において活性を呈する小親油性及び／または電子求引性基から選択され、

Ｒ_２は、水素及びハロゲンから選択され；

Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_４’は各々独立して、水素、及びＣ１−Ｃ４アルキル基から選択され；

Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；

Ｒ_６は、水素、重水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、及び−ＣＮから選択され；及び

ｎが、０、１、または２である。

追加の目的及び利点は、以下の説明に部分的に記載されており、部分的にその説明から明らかになる、または実施することによって知ることができる。目的及び利点は、添付の特許請求の範囲に具体的に記載されている要素及び組み合わせによって実現かつ達成されるであろう。

上述の一般的な説明及び以下に述べる詳細な説明の両方は、実施例示かつ説明のためだけのものであり、特許請求の範囲を制限するものではないことを理解すべきである。

ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の阻害に有用な化合物を本明細書に開示し、例えば、本明細書で定義される、ＵＳＰ２５阻害物質化合物、ＵＳＰ２８阻害物質化合物、及びＵＳＰ２８／２５阻害物質化合物である。ＵＳＰ２８／２５阻害物質、ＵＳＰ２８阻害物質、及び／またはＵＳＰ２５阻害物質化合物は、本明細書に開示される化合物であってよく、例えば、式（Ｉ）の化合物である。

「ＵＳＰ２８阻害物質」という用語は、本明細書で使用する場合、本明細書の実施例Ａ−１（ａ）及び／またはＡ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、１０マイクロモル以下のＩＣ_５０を有する本明細書に開示される化合物（例えば、式（Ｉ）の化合物）を指す。例えば、ＵＳＰ２８阻害物質は、実施例Ａ−１（ａ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイを用いて、最大で１０マイクロモルのＩＣ_５０値、例えば、０．００１〜１０マイクロモルの範囲、例えば、０．００１〜２マイクロモル、好ましくは、０．００１〜０．２マイクロモル、より好ましくは、０．００１〜０．０５マイクロモルの範囲のＩＣ_５０値を有する、本明細書に開示される式の化合物であり得る。ＵＳＰ２８阻害物質は、実施例Ａ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイを用いて、最大で１０マイクロモルのＩＣ_５０値、例えば、０．００１〜１０マイクロモルの範囲、例えば、０．００１〜２マイクロモル、好ましくは、０．００１〜０．２マイクロモル、より好ましくは、０．００１〜０．０５マイクロモルの範囲のＩＣ_５０値を有する、本明細書に開示される式の化合物であり得る。ＵＳＰ２８阻害物質は、実施例Ａ−１（ａ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイ、及び実施例Ａ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイの両方を用いて、最大で１０マイクロモルのＩＣ_５０値、例えば、０．００１〜１０マイクロモルの範囲、例えば、両方のアッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモル、好ましくは、０．００１〜０．２マイクロモル、より好ましくは、０．００１〜０．０５マイクロモルの範囲のＩＣ_５０値を有する、本明細書に開示される式の化合物であり得る。

「ＵＳＰ２５阻害物質」という用語は、本明細書で使用する場合、本明細書の実施例Ａ−２に記載されるＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、１０マイクロモル以下のＩＣ_５０を有する本明細書に開示される化合物（例えば、式（Ｉ）の化合物）を指す。例えば、ＵＳＰ２５阻害物質は、実施例Ａ−２に記載されるＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイを用いて、最大で１０マイクロモルのＩＣ_５０値、例えば、０．００１〜１０マイクロモルの範囲、例えば、０．００１〜２マイクロモル、好ましくは、０．００１〜０．２マイクロモル、より好ましくは、０．００１〜０．０５マイクロモルの範囲のＩＣ_５０値を有する、本明細書に開示される式の化合物であり得る。

「ＵＳＰ２８／２５阻害物質」という用語は、本明細書で使用する場合、本明細書で定義される、ＵＳＰ２８阻害物質またはＵＳＰ２５阻害物質、またはＵＳＰ２８阻害物質及びＵＳＰ２５阻害物質の両方である、本明細書に開示される化合物（例えば、式（Ｉ）の化合物）を指す。

任意選択で、式（Ｉ）の化合物における任意の１つ以上の水素原子は、重水素または他の水素同位体で独立して置換することができる。
上と下に述べたように、本開示は、式（Ｉ）の化合物：

及びその薬学的に許容され得る形態に関し、
式中：

Ｘ、Ｙ、Ｒ、Ｒ’、Ｒｘ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５、Ｒ_６及びｎは全て、上で定義した通りである。

少なくとも１つの実施形態では、Ｘは、Ｎである。少なくとも１つの実施形態では、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり、式中、Ｒは、水素である。少なくとも１つの実施形態では、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり、式中、Ｒは、ＣＨ_３である。好ましい実施形態では、Ｘは、ＣＨである。

少なくとも１つの実施形態では、Ｙは、ＣＨである。少なくとも１つの実施形態では、Ｙは、Ｃ−ＮＨ_２である。

少なくとも１つの実施形態では、Ｒｘは、ハロゲン、重水素、−ＯＨから選択される。

少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_１は、水素から選択される。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_１は、１つ以上のＲｘで、任意選択で置換される直鎖または分枝アルキル基から選択される。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_１は、Ｒｘで置換された分枝アルキル基から選択され、式中、Ｒｘは、ハロゲン及び−ＯＨ基から選択される。

少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_２は、水素から選択される。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_２は、ハロゲンから選択される。

少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_４’は各々、水素である。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_３は、水素であり、Ｒ_４及びＲ_４’の一方が、水素である一方、他方は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基から選択される。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_３は、水素であり、Ｒ_４及びＲ_４’の一方が、水素である一方、他方は、ＣＨ_３である。

少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_５は、６員の複素環から選択される。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_５は、７員の複素環から選択される。好ましい実施形態では、複素環は、２つの窒素を有する。

少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_６は、水素から選択される。少なくとも１つの実施形態では、Ｒ_６は、ハロゲンから選択される。好ましい実施形態では、ハロゲンは、Ｆ及びＣｌから選択される。

少なくとも１つの実施形態では、ｎは、０である。少なくとも１つの実施形態では、ｎは、１である。少なくとも１つの実施形態では、ｎは、２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素及び重水素から選択され；Ｒは、ＮＨ_２であり；Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素であり；Ｒ_５は、６員の複素環から選択され、及びｎは、０である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素及び重水素から選択され；Ｒは、水素であり；Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；Ｒ_２及びＲ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素及びＣＨ_３から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素、重水素、及びハロゲンから選択され；及びｎは、０、１、または２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素から選択され；Ｒは、水素であり；Ｒ_１は、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたメチル及びエチル基から選択され；Ｒｘは、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；Ｒ_２及びＲ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素及びＣＨ_３から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素及びハロゲンから選択され；及びｎが、０、１、または２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素及び重水素から選択され；Ｒは、水素であり；Ｒ_１は、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ３−Ｃ４分枝アルキル基から選択され；Ｒｘは、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；Ｒ_２及びＲ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素及びＣＨ_３から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素、重水素、及びハロゲンから選択され；及びｎは、０、１、または２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素から選択され；Ｒは、水素であり；Ｒ_１は、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ３−Ｃ４分枝アルキル基から選択され；Ｒｘは、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；Ｒ_２及びＲ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素、及びハロゲンから選択され；及びｎは、０、１、または２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素から選択され；Ｒは、水素であり；Ｒ_１は、水素であり；Ｒ_２が、ハロゲンであり；Ｒ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素、及びハロゲンから選択され；及びｎは、０、１、または２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｃ（Ｒ’）であり；Ｒ’は、水素から選択され；Ｒは、水素であり；Ｒ_１は、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換された水素、及びＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；Ｒｘは、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；Ｒ_２が、ハロゲンであり；Ｒ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素、及びハロゲンから選択され；及びｎは、０、１、または２である。

少なくとも１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物から選択され、式中、Ｘは、Ｎであり；Ｒは、水素であり；Ｒ_１は、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換された水素、及びＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；Ｒｘは、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；Ｒ_２は、水素であり；Ｒ_３は、水素であり；Ｒ_４、及びＲ_４’は、水素及びＣＨ_３から選択され；Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；Ｒ_６は、水素、及びハロゲンから選択され；及びｎは、０、１、または２である。

好ましくは、化合物は、本明細書で定義されるＵＳＰ２８阻害物質、ＵＳＰ２５阻害物質、及び／またはＵＳＰ２８／２５阻害物質である、式（Ｉ）の化合物である。

本明細書で使用する場合、ヘテロシクロアルキルは、単環式または多環式環を意味すると理解される。基は、縮合されてもよいし（例えば、デカリン）または架橋（例えば、ノルボルナン）されてもよい。さらに、全環炭素またはヘテロ原子の間で共有されている非局在化π電子（芳香族性）がない。

本明細書に開示される化合物の医薬品形態には、薬学的に許容され得る塩、溶媒和などが含まれ得る。特に明記しない限り、全ての医薬品形態、例えば、全ての互変異性型及び立体異性体は、本開示の一部として本明細書で考えられる。アスタリスク（＊）で示されていない限り、本明細書に示す立体化学は、各分子内の相対的な（任意に割り当てられた）立体化学的配向を指し、絶対立体化学と同じである必要はない。

本明細書で提供されるＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５を阻害する化合物は、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の阻害、並びに、ヒト疾患、または、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の活性に症状が関連する疾患の治療のための医薬組成物の開発に有用である。本明細書に開示されるＵＳＰ２８阻害物質は、がん（例えば、肺癌）などの疾患の治療のための医薬組成物の開発に使用することができる。本明細書に開示されるＵＳＰ２５阻害物質は、がん（例えば、肺癌）などの疾患の治療のための医薬組成物の開発に使用することができる。式（Ｉ）の化合物は、がん（例えば、肺癌）などの疾患の治療のための医薬組成物の開発に使用される、本明細書に開示されるＵＳＰ２８阻害物質及びＵＳＰ２５阻害物質の両方であり得る。

ＵＳＰ２８阻害物質及び／またはＵＳＰ２５阻害物質である式（Ｉ）の化合物は、細胞、組織、系、動物、個人またはヒトにおいて所望及び／または治療の生物学的または医学的な応答または作用を惹起するように選択された治療上有効な方法で、対象（動物またはヒト）または試料（例えば、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５を含有する１つ以上の細胞を含む）に投与するための医薬組成物で製剤化することができ、治療上有効な方法は、以下のいずれか１つ以上を含む：（１）疾患を予防すること（例えば、疾患、容態、または障害に罹患しやすいが、疾患の病理または症状をまだ経験または表していない個人における、疾患、容態、または障害を予防すること）、（２）疾患の進行を阻害すること（例えば、疾患、容態、または障害の病理または症状を経験または表している個人における、疾患、容態、または障害の病理または症状の進行を遅らせるまたは阻止すること、例えば、病理及び／または症状のさらなる発症を阻止すること）、または（３）その疾患または症状を改善すること（例えば、疾患、容態、または障害の病理または症状を経験または表している個人における、疾患、容態、または障害と関連する症状の頻度または強度を低下させること、例えば、病理及び／または症状を逆転させること）。本明細書に開示される化合物ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５阻害物質は、意図した効果を提供するのに有効な量で使用することができる。

特定の理論に束縛されるものではないが、出願人らは、式（Ｉ）の化合物及びその医薬品形態が、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の阻害に有用であると考える。この阻害は、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５が阻害を必要とする疾患または容態の症状及び／または根本的な原因の有用な治療をもたらすことができる。例えば、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５の阻害物質は、肺癌などのがんの治療に使用することができる。

本開示の別の態様は、式（Ｉ）の化合物から選択される化合物を含む医薬組成物、及び薬学的に許容され得る担体を有するその医薬品形態に関する。医薬的に許容され得る担体は、賦形剤、希釈剤、または界面活性剤をさらに含み得る。ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５阻害のための本明細書に開示される化合物は、ヒトまたは動物への意図した投与経路に適した薬学的に許容され得る賦形剤と組み合わせることができる。賦形剤は、経口または非経口投与剤形を含む、意図した投与経路に適した医薬剤形を提供するように選択することができる。

したがって、本開示は、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５に関連する疾患または障害の治療方法であって、前記疾患または障害のうちの少なくとも１つに罹患している患者に、式（Ｉ）の化合物及び／またはその医薬品形態を、任意選択で、医薬組成物で投与することを含む方法に関する。開示の化合物は、障害を治療または予防、及び／または対象におけるその発症の予防に有効な量で投与することができる。本明細書の実施例Ａ−１（ａ）、Ａ−１（ｂ）、及びＡ−２に記載されるＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、約１マイクロモル以下のＩＣ５０でＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５を阻害することが知られる化合物による疾患または障害の治療方法は、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物の治療上有効な量を、それを必要とする患者に投与することを含むことができる。好ましくは、医薬組成物は、式（Ｉ）のＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５阻害物質化合物、及び／または、本明細書の実施例Ａ−１（ａ）、Ａ−１（ｂ）、及びＡ−２に記載されるＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、約１マイクロモル以下のＩＣ５０を有するＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５阻害物質化合物を含む。

本開示の式（Ｉ）による化合物の非限定例としては、以下の表１、２、３、及び４のものが挙げられる。

化合物の合成方法
本開示の化合物は、有機合成の当業者に公知の多くの方法で調製することができる。本開示の化合物は、標準化学を含む種々の方法によって作製することができる。適当な合成経路は、本明細書で提供されるスキームで示される。本明細書に開示される化合物は、以下の合成スキームによって一部が記載されるように、有機合成の当業者に公知の方法によって調製することができる。本明細書に記載のスキームでは、一般的な原理または化学に従って、必要に応じて、感受性基または反応性基の保護基を用いることが十分に理解されている。保護基は、有機合成の標準的な方法に従って操作される（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ及びＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、「ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｔｈｉｒｄｅｄｉｔｉｏｎ、Ｗｉｌｅｙ、ＮｅｗＹｏｒｋ１９９９）。これらの基は、当業者に容易に明らかな方法を用いて、化合物合成の都合の良い段階で除去される。選択プロセス並びに反応条件及びそれらの実行順序は、式（Ｉ）の化合物の調製と一致しなければならない。

本明細書に記載の化合物は、市販の出発物質から製造してもよいし、または公知の有機、無機及び／または酵素プロセスを用いて合成してもよい。当業者は、立体中心が本明細書に開示される化合物に存在するかどうかを認識するであろう。したがって、本開示は、可能な立体異性体の両方を含み（合成において特定されない限り）、ラセミ化合物だけでなく個々の鏡像異性体及び／またはジアステレオマーも含む。化合物が単一の鏡像異性体またはジアステレオマーとして所望される場合、立体特異的合成によって、または最終生成物もしくは任意の好都合な中間体の分割によって得られ得る。最終生成物、中間体、または出発材料の分割は、当技術分野において公知の任意の適当な方法によって影響され得る。例えば、Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ，Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ及びＬ．Ｎ．Ｍａｎｄｅｒ（Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４）による「ＳｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＯｒｇａｎｉｃＣｏｍｐｏｕｎｄｓ」を参照されたい。

例として、本開示の化合物は、合成有機化学の当該技術分野で公知の合成方法またはそれに基づく当業者によって理解される変形と一緒に、以下に記載される方法を使用して合成することができる。本発明の化合物を調製する一般的な手順は、一般的なスキーム１に記載される。適当に置換され、保護された二環式中間体１は、適切な温度（例えば、１００℃）で、トルエンなどの適切な溶媒中の適当なパラジウム錯体、リガンド、及び塩基（例えば、限定されないが：ＲｕＰｈｏｓ第３世代パラジウムプレ触媒及び炭酸セシウム）を用いて、パラジウム触媒炭素−窒素カップリングプロトコル下で、適当に置換され保護されたアミン中間体２と反応させて、中間体３を得ることができる。保護基１（ＰＧ_１；一般的には、Ｃｂｚ基）は、適切な脱保護条件（例えば、限定されないが：メタノール、エタノール、または酢酸エチルなどの適切な溶媒中のパラジウム炭素を有する水素（気体））下で除去し、アミン中間体４を得ることができる。適切に置換されたアミン中間体４は、アミドカップリング条件（例えば、限定されないが：ＤＭＦまたはＤＭＡなどの溶媒中でＥｔ_３ＮまたはＤＩＥＡなどの適切な塩基を有するカップリング試薬ＥＤＣ及びＨＯＢｔ）下で、適切に置換されたカルボン酸と反応させて、最後から２番目のアミド中間体５を得ることができる。保護基２（ＰＧ２；典型的には、Ｂｏｃ基）は、適切な条件（ＭｅＯＨまたはジオキサンなどの溶媒中のＤＣＭまたはＨＣｌなどの溶媒中のＴＦＡ）下で除去し、最終化合物６を得ることができる。最終化合物は、典型的には、分取ＨＰＬＣによって精製し、遊離塩基として単離することができる。エナンチオマー及び／またはジアステレオマーの混合物が形成される場合には、個々の立体異性体は、キラルＨＰＬＣによる多くの場合に、適切な段階で精製することができる。

適当に置換されたハロゲン化アリール１（Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩから選択する２つのハロゲンを含有する）は、パラジウム触媒炭素−窒素カップリング条件（例えば、高温で、トルエンなどの溶媒中のＰｄ_２（ｄｂａ）_３、ＸａｎｔＰｈｏｓ、ｔ−ブトキシドナトリウム）下で、適当に置換された保護されたアミン２と反応させて、カップリングしたハロゲン化アリール生成物３を得ることができる。ハロゲン化アリール３は、パラジウム触媒カップリング条件（例えば、高温で、トルエン／水などの溶媒系中のＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２、ＲｕＰｈｏｓ、Ｃｓ_２ＣＯ_３）下で、カリウムＢＦ３塩４と反応させて、カップリングした生成物を得ることができる。Ｃｂｚ保護基は、水素化分解条件（例えば、ＥｔＯＡｃなどの溶媒中の１０％Ｐｄ／Ｃを有する水素雰囲気下）下で除去し、アミン５を得ることができる。アミン５は、アミドカップリング条件（例えば、ＤＣＭなどの溶媒中の塩基としてＤＩＥＡを有するＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ）下で、適当に置換されたカルボン酸６と反応させて、ＢＯＣ脱保護条件（例えば、ＴＦＡ／ＤＣＭ）下でさらに脱保護することができるアミド生成物を得て、生成物７を得ることができる。

本開示は、以下の実施例及び合成スキームによってさらに説明され、それらは、本開示の範囲または真の趣旨を本明細書に記載される特定の手順に限定するものとして解釈されるべきではない。実施例は、特定の実施形態を例示するために提供されており、それによって本開示の範囲に対する限定が意図されていないことを理解されたい。さらに、本開示の真の趣旨及び／または添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、当業者に示唆され得るさまざまな他の実施態様、変更、及びそれらの等価物に頼り得ることを理解されたい。

分析方法、材料、及び器具の使用
特に明記しない限り、試薬及び溶媒は、商業供給業者から受け取ったまま使用した。特に明記しない限り、反応は、窒素の不活性雰囲気下で行った。プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、３００または４００ＭＨｚにて、ＢｒｕｋｅｒまたはＶａｒｉａｎ分光計のいずれかで取得した。スペクトルは、ｐｐｍ（δ）で与えられ、結合定数、Ｊ、はヘルツで報告される。テトラメチルシラン（ＴＭＳ）は、内部標準として使用した。質量スペクトルは、水ＺＱＳｉｎｇｌｅＱｕａｄ質量分析計（イオントラップエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ））を使用して収集した。純度と低解像度の質量スペクトルデータは、Ａｃｑｕｉｔｙフォトダイオードアレイ検出器、Ａｃｑｕｉｔｙ蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、及び水ＺＱ質量分析計を備えたＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙｉ−ｃｌａｓｓ超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）システムを使用して測定した。データは、ＷａｔｅｒｓＭａｓｓＬｙｎｘ４．１ソフトウェアを使用して取得し、純度は、ＵＶ波長２２０ｎｍ、蒸発光散乱検出（ＥＬＳＤ）及びエレクトロスプレーポジティブイオン（ＥＳＩ）によって特徴付けた。（カラム：ＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＢＥＨＣ１８１．７μｍ２．１×５０ｍｍ；流速０．６ｍＬ／分；溶媒Ａ（９５／５／０．１％：１０ｍＭギ酸アンモニウム／アセトニトリル／ギ酸）、溶媒Ｂ（９５／５／０．０９％：アセトニトリル／水／ギ酸）；勾配：５−１００％Ｂ０〜２分、ホールド１００％Ｂ２．２分まで、及び５％Ｂ２．２１分にて。以下に示すように、分取ＨＰＬＣによる精製を行った。本明細書に記載される実施例の化合物の分離されたエナンチオマーの絶対配置は、時々決定した。他の全ての場合では、分離されたエナンチオマーの絶対配置は検出されず、それらの場合、分割された物質配置は、それぞれＲまたはＳとして任意に割り当てた。

実施例Ａ−１（ａ）：生化学アッセイ：ＵＳＰ２８活性のユビキチン−ローダミン１１０アッセイ
アッセイは、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０，（１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０溶液；Ｃｏｒｎｉｎｇ４６−０３１−ＣＭ））、３ｍＭＢＭＥ（２−メルカプトエタノール；Ｓｉｇｍａ６３６８９−２５ＭＬ−Ｆ）、０．０３％ＢＧＧ（０．２２μＭ濾過済み、Ｓｉｇｍａ、Ｇ７５１６−２５Ｇ）、及び０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（Ｓｉｇｍａ、Ｔ９２８４−１０Ｌ）を含有するアッセイ緩衝液中で、９μＬの最終体積で実施した。ＤＭＳＯ中の１０段階の３倍連続希釈物のナノリットル量で、最終試験濃度がそれぞれ２５μＭ〜１．３ｎＭの最高用量から最低用量になるように、１５３６アッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、＃３７２４ＢＣ）に事前に分注した。酵素ＵＳＰ２８、構築物Ｈｉｓ標識ＵＳＰ２８−ＦＬ−哺乳類（以下に記載するタンパク質発現及び精製手順）。濃度及びインキュベーション時間を、最大のシグナル対バックグラウンドに最適化した一方、固定基質濃度で開始速度条件を維持した。アッセイにおける酵素の最終濃度は、７５ｐＭであった。最終基質（Ｕｂ−Ｒｈ１１０；ユビキチン−ローダミン１１０、ＵｂｉＱ−１２６）濃度は、２５ｎＭであり、［Ｕｂ−Ｒｈ１１０］＜＜Ｋｍであった。３μＬの２×酵素をアッセイプレート（化合物を事前にスタンプしたもの）に添加し、ＵＳＰ２５とともに３０分間プレインキュベートし、次いで、３μＬの２×Ｕｂ−Ｒｈ１１０をアッセイプレートに加えた。プレートを室温で４５分間インキュベートした後、３μＬの反応停止液（最終濃度１０ｍＭクエン酸（Ｓｉｇｍａ、２５１２７５−５００Ｇ））を加えた。蛍光をＥｎｖｉｓｉｏｎ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）またはＰｈｅｒａＳＴＡＲ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＢＭＧＬａｂｔｅｃｈ）で読み取った。

タンパク質発現、及び構築物Ｈｉｓ標識ＵＳＰ２８−ＦＬ−哺乳類の精製の手順
ＵＳＰ２８（１−１０７７）−ＴＥＶ−６＊Ｈｉｓ（ｐＴＴ５ベクター）の発現は、Ｅｘｐｉ２９３ｆ細胞（ｕｎｉｐｒｏｔＩＤ：Ｑ９６ＲＵ２−１由来の配列）で実施した。細胞を溶解緩衝液Ｂ（５０ｍＭビシン、ｐＨ８．０、２０ｍＭＮａＣｌ、５％グリセロール、０．１％ＣＨＡＰＳ、５ｍＭ β−ＭＥ、１ｍＭＰＭＳＦ、１ｕｇ／ｍｌロイペプチン、１ｕｇ／ｍｌペプスタチン）中で再懸濁し、超音波処理で溶解した。不溶性物質を遠心分離によって除去し、Ｎｉ緩衝液Ａ（５０ｍＭビシン、ｐＨ８．０、２０ｍＭＮａＣｌ、５％グリセロール、０．１％ＣＨＡＰＳ、５ｍＭ β−ＭＥ）で平衡化したＮｉ−ＮＴＡカラム（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）上に上清を充填し、Ａ_２８０がベースラインに到達するまで、Ｎｉ緩衝液Ａ＋２０ｍＭイミダゾールで洗浄した。タンパク質をＮｉ緩衝液Ｂ（５０ｍＭビシン、ｐＨ８．０、２０ｍＭＮａＣｌ、５％グリセロール、０．１％ＣＨＡＰＳ、５ｍＭ β−ＭＥ、３００ｍＭイミダゾール）で溶出した。５０ｍＭビシン、ｐＨ８．０、２０ｍＭＮａＣｌ、５％グリセロール、０．１％ＣＨＡＰＳ、５ｍＭ β−ＭＥで平衡化したＳｕｐｅｒｄｅｘ^ＴＭ２００１０／３００ＧＬカラム（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて、タンパク質をさらに精製した。タンパク質を２．５ｍｇｍｌ^−１に濃縮し、液体窒素中で瞬間冷凍し、−８０℃で保存した。

実施例Ａ−１（ｂ）：生化学アッセイ：ＵＳＰ２８活性のユビキチン−ローダミン１１０アッセイ
各アッセイは、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０，（１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０溶液；Ｃｏｒｎｉｎｇ４６−０３１−ＣＭ））、２ｍＭＣａＣｌ_２（１Ｍ塩化カルシウム溶液；Ｓｉｇｍａ＃２１１１４）２ｍＭＢＭＥ（２−メルカプトエタノール；Ｓｉｇｍａ６３６８９−２５ＭＬ−Ｆ）、０．０１％Ｐｒｉｏｎｅｘ（０．２２μＭ濾過済み、Ｓｉｇｍａ＃Ｇ−０４１１）、及び０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含有するアッセイ緩衝液中で、２０μＬの最終体積で実施した。ストック化合物溶液を、ＤＭＳＯ中で１０ｍＭとして、−２０℃で保存した。アッセイの最大で１ヵ月前に、２ｍＭの試験化合物をアッセイプレート（黒色、低体積；Ｃｏｒｎｉｎｇ＃３８２０）に事前に分注し、−２０℃で凍結した。プレスタンプしたアッセイプレートを、アッセイの日に室温にした。スクリーニング用に、１００ｎＬの２ｍＭを、１０μＭ（ＤＭＳＯ_（ｆｃ）＝０．５％）の最終スクリーニング濃度に事前分配した。酵素（ＵＳＰ２８、構築物ＵＳＰ２８（ＵＳＰ２８−５（１−１０７７）−ＴＥＶ−６＊Ｈｉｓ；ＬｉｆｅＳｅｎｓｏｒｓ）濃度及びインキュベーション時間を、最大のシグナル対バックグラウンドに最適化した一方、固定基質濃度で開始速度条件を維持した。アッセイにおける酵素の最終濃度は、４００ｐＭであった。最終基質（Ｕｂ−Ｒｈ１１０；ユビキチン−ローダミン１１０、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ＃Ｕ−５５５）濃度は、２５ｎＭであり、［Ｕｂ−Ｒｈ１１０］＜＜Ｋｍであった。１０μＬの２×酵素をアッセイプレート（化合物を事前にスタンプしたもの）、２×Ｕｂ−Ｒｈ１１０と同時に添加し、または、ＵＳＰ２８で４０分間プレインキュベートし、次いで、１０μＬの２×Ｕｂ−Ｒｈ１１０を化合物プレートに加えた。プレートを室温で９０分間重ねてインキュベートした後、蛍光をＥｎｖｉｓｉｏｎ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）またはＰｈｅｒａＳＴＡＲ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＢＭＧＬａｂｔｅｃｈ）で読み取った。

追跡調査では、各アッセイは、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０，（１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０溶液；Ｃｏｒｎｉｎｇ４６−０３１−ＣＭ））、３ｍＭＢＭＥ（２−メルカプトエタノール；Ｓｉｇｍａ６３６８９−２５ＭＬ−Ｆ）、０．０３％ＢＧＧ（０．２２μＭ濾過済み、Ｓｉｇｍａ、Ｇ７５１６−２５Ｇ）、及び０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（Ｓｉｇｍａ、Ｔ９２８４−１０Ｌ）を含有するアッセイ緩衝液中で、１５μＬの最終体積で実施した。ＤＭＳＯ中の８段階または１０段階のいずれかの３倍連続希釈物のナノリットル量で、最終試験濃度がそれぞれ２５μＭ〜１１ｎＭまたは２５μＭ〜１．３ｎＭのいずれかになるように、アッセイプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＰｒｏｘｉＰｌａｔｅ−３８４ＦＰｌｕｓ、＃）に事前に分注した。酵素ＵＳＰ２８、構築物ＵＳＰ２８（ＵＳＰ２８−５（１−１０７７）−ＴＥＶ−６＊Ｈｉｓ；ＬｉｆｅＳｅｎｓｏｒｓ）濃度及びインキュベーション時間を、最大のシグナル対バックグラウンドに最適化した一方、固定基質濃度で開始速度条件を維持した。アッセイにおける酵素の最終濃度は、７５ｐＭであった。最終基質（Ｕｂ−Ｒｈ１１０；ユビキチン−ローダミン１１０、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ＃Ｕ−５５５）濃度は、２５ｎＭであり、［Ｕｂ−Ｒｈ１１０］＜＜Ｋｍであった。５μＬの２×酵素をアッセイプレート（化合物を事前にスタンプしたもの）に添加し、ＵＳＰ２８とともに３０分間プレインキュベートし、次いで、５μＬの２×Ｕｂ−Ｒｈ１１０をアッセイプレートに加えた。プレートを室温で２０分間重ねてインキュベートした後、５μＬの反応停止液（最終濃度の１０ｍＭクエン酸（Ｓｉｇｍａ、２５１２７５−５００Ｇ））を加えた。蛍光をＥｎｖｉｓｉｏｎ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）またはＰｈｅｒａＳＴＡＲ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＢＭＧＬａｂｔｅｃｈ）で読み取った。

実施例Ａ−２：生化学アッセイ：ＵＳＰ２５活性のユビキチン−ローダミン１１０アッセイ
アッセイは、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０，（１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０溶液；Ｃｏｒｎｉｎｇ４６−０３１−ＣＭ））、３ｍＭＢＭＥ（２−メルカプトエタノール；Ｓｉｇｍａ６３６８９−２５ＭＬ−Ｆ）、０．０３％ＢＧＧ（０．２２μＭ濾過済み、Ｓｉｇｍａ、Ｇ７５１６−２５Ｇ）、及び０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（Ｓｉｇｍａ、Ｔ９２８４−１０Ｌ）を含有するアッセイ緩衝液中で、９μＬの最終体積で実施した。ＤＭＳＯ中の１０段階の３倍連続希釈物のナノリットル量で、最終試験濃度がそれぞれ２５μＭ〜１．３ｎＭの最高用量から最低用量になるように、１５３６アッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、＃３７２４ＢＣ）に事前に分注した。酵素ＵＳＰ２５、構築物ＵＳＰ２５−Ｈｉｓ６（ＢｏｓｔｏｎＢｉｏｃｈｅｍＥ−５４６）。濃度及びインキュベーション時間を、最大のシグナル対バックグラウンドに最適化した一方、固定基質濃度で開始速度条件を維持した。アッセイにおける酵素の最終濃度は、７５ｐＭであった。最終基質（Ｕｂ−Ｒｈ１１０；ユビキチン−ローダミン１１０、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ＃Ｕ−５５５）濃度は、２５ｎＭであり、［Ｕｂ−Ｒｈ１１０］＜＜Ｋｍであった。３μＬの２×酵素をアッセイプレート（化合物を事前にスタンプしたもの）に添加し、ＵＳＰ２５とともに３０分間プレインキュベートし、次いで、３μＬの２×Ｕｂ−Ｒｈ１１０をアッセイプレートに加えた。プレートを室温で４５分間インキュベートした後、３μＬの反応停止液（最終濃度１０ｍＭクエン酸（Ｓｉｇｍａ、２５１２７５−５００Ｇ））を加えた。蛍光をＥｎｖｉｓｉｏｎ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）またはＰｈｅｒａＳＴＡＲ（励起４８５ｎｍ及び蛍光５３５ｎｍ；ＢＭＧＬａｂｔｅｃｈ）で読み取った。

実施例Ａ−１ａ、Ａ−１ｂ、及びＡ−２のアッセイ形式については、データは、以下の式に基づいてコントロールウェルと比較した阻害％として報告した：％ｉｎｈ＝１−（（ＦＬＵ−Ａｖｅ_Ｌｏｗ）／（Ａｖｅ_Ｈｉｇｈ−Ａｖｅ_Ｌｏｗ））式中、ＦＬＵ＝測定された蛍光、Ａｖｅ_Ｌｏｗ＝酵素コントロールなしの平均蛍光（ｎ＝１６）、Ａｖｅ_Ｈｉｇｈ＝ＤＭＳＯコントロールの平均蛍光（ｎ＝１６）である。ＩＣ_５０値は、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅソフトウェアパッケージ：ＩＤＢＳＸＥＤｅｓｉｇｎｅｒＭｏｄｅｌ２０５に含まれる、標準的な４パラメーターロジスティックフィッティングアルゴリズムのカーブフィッティングによって決定した。データは、ＬｅｖｅｎｂｕｒｇＭａｒｑｕａｒｄｔアルゴリズムを用いて、フィッティングする。

本開示による生化学ＩＣ_５０アッセイ（ＩＣ_５０範囲）における化合物の活性は、以下に従って、以下の表１〜４に報告する：
「−」：＞１０μＭ；「＋」：２〜１０μＭ；「＋＋」：０．２〜２μＭ；「＋＋＋」：０．０５〜０．２μＭ；「＋＋＋＋」：０．００１〜０．０５μＭ。

実施例１−１．Ｎ−［２−（４−［３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−２，５−ジフルオロフェニル）エチル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド

ステップ１．１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中の１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（３．００ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）の０℃の攪拌溶液に、水素化ナトリウム（２．０４ｇ、５１．１ｍｍｏｌ、６０％分散）を加えた。得られた溶液を０℃で１時間攪拌した。ヨードエタン（２．７３ｍＬ、３４．１ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。得られた溶液を室温（２５℃）で１０時間攪拌した。反応物を１０ｍＬの水で急冷した。０．５時間攪拌後、溶液のｐＨ値を、塩酸（３Ｎ）で７〜８に調整した。得られた混合物を酢酸エチル（６×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮し、１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸を黄色固体として得、さらに精製せずに続けた。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：１９１［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ２．ホルミル（ビニル）カルバミン酸ベンジル
テトラヒドロフラン（２Ｌ）中のＮ−ビニルホルムアミド（１００ｇ、１．４１ｍｏｌ）の０℃の攪拌溶液に、クロロギ酸ベンジル（２２０ｍＬ、１．５４ｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を、氷／塩浴中で、０℃で３０分間攪拌した。得られた溶液を、温度を２５℃に維持しながらさらに２時間攪拌した後、ＮＨ_４Ｃｌ（飽和；５００ｍＬ）を加えて急冷した。得られた混合物を酢酸エチル（４×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮し、ホルミル（ビニル）カルバミン酸ベンジルを淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：２０６［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ３．ビニルカルバミン酸ベンジル
水（１Ｌ）中の水酸化ナトリウム（８００ｇ、２０．０ｍｏｌ）の溶液を、テトラヒドロフラン（１Ｌ）中のホルミル（ビニル）カルバミン酸ベンジル（１６６ｇ、８０８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。得られた溶液を２５℃で３時間攪拌した後、溶媒を真空下で除去した。得られた残渣を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１０の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、ビニルカルバミン酸ベンジルを淡黄色固体として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：１７８［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ４．（２−（トリフルオロ−λ４−ボラネイル）エチル）カルバミン酸、カリウム塩ベンジル
テトラヒドロフラン（５００ｍＬ、６．１７ｍｏｌ）中の２，５−ジメチルヘキサ−２，４−ジエン（８８．５ｍＬ、０．６２２ｍｏｌ）の窒素下の溶液に、ＢＨ_３（３１３ｍＬ、ＴＨＦ中で１Ｍ）の溶液を０℃で加えた。得られた溶液を、水／氷浴中で、０℃で３．５時間攪拌した。その後、ビニルカルバミン酸ベンジル（２０．０ｇ、１１３ｍｍｏｌ）を、温度を０℃に維持しながら混合物に加えた。得られた溶液を２５℃に温めて、２時間攪拌し、氷浴中で冷却した後、Ｈ_２Ｏ（３５ｍＬ）を慎重に加えた。２５℃でさらに２時間後、水中のホルムアルデヒド（１５ｍＬ、３７％）の溶液を加えた。その後、得られた混合物を２５℃で一晩攪拌した。反応物をブラインで急冷し、得られた混合物を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮した。残渣に、アセトン（５００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）及びＫＨＦ_２（２２０ｇ、２．８２ｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃でさらに４時間攪拌した。溶媒を真空下で除去した。その後、残渣を熱アセトン（５００ｍＬ）で抽出した。不溶性塩を濾過し、濾液を真空下で濃縮した。粗の化合物を、熱アセトンに溶解し、Ｅｔ_２Ｏ（３５０ｍＬ）中に沈殿することによって精製し、（２−（トリフルオロ−λ４−ボラネイル）エチル）カルバミン酸ベンジル、カリウム塩を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−、ｍ／ｚ）：２１２［Ｍ−Ｋ^＋］

ステップ５．３−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
トルエン（５００ｍＬ）中の１，４−ジブロモ−２，５−ジフルオロベンゼン（１５．０ｇ、５５．０ｍｍｏｌ）、３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．６ｇ、４９．９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３．ＣＨＣｌ_３（２．５９ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、ＸａｎｔＰｈｏｓ（２．８９ｇ、５．００ｍｍｏｌ）、及びｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（９．６０ｇ、９９．９ｍｍｏｌ）の窒素下の混合物を７０℃で４５分間攪拌した。２５℃に冷却後、得られた混合物を真空下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１０の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、３−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：４０３、４０５［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ６．３−［４−（２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］エチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
３−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４．０ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）、（２−（トリフルオロ−λ４−ボラネイル）エチル）カルバミン酸ベンジル、カリウム塩（１０．９ｇ、３８．２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（２．５５ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（３．２５ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（２２．７ｇ、６９．７ｍｍｏｌ）、トルエン（５００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）の窒素下の混合物を１００℃で３時間攪拌した。２５℃に冷却後、得られた混合物を真空下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：５の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、３−［４−（２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］エチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黄色油として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：５０２［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ７．３−［４−（２−アミノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
３−［４−（２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］エチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１２．０ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（１２．０ｇ、１０％）、及び酢酸エチル（５００ｍＬ）の混合物を、水素雰囲気（バルーン）下で、２０℃で１時間攪拌した。水素雰囲気を窒素でパージし、固体を、セライト上で濾過して除去した。濾液を真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ジクロロメタン／メタノールで溶出）で精製し、３−［４−（２−アミノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３６８［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ８．３−［４−［２−（［１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］ホルムアミド）エチル］−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ジクロロメタン（８ｍＬ）中の１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸（６０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、３−［４−（２−アミノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１１６ｍｇ、０．３２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５１ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（８６ｍｇ、０．４５０ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（０．１００ｍＬ、０．６３０ｍｍｏｌ）の溶液を、油浴中で、４０℃で２時間攪拌した。得られた混合物を真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製した。収集した分画を組み合わせて、真空下で濃縮し、３−［４−［２−（［１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］ホルムアミド）エチル］−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを白色固体として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：５４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ９．Ｎ−［２−（４−［３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−２，５−ジフルオロフェニル）エチル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の３−［４−［２−（［１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］ホルムアミド）エチル］−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５０ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）の溶液を２５℃で３０分間攪拌した。得られた混合物を真空下で濃縮し、残渣を得、これをＮＨ_３の溶液（２ｍＬ、ＭｅＯＨ中で７Ｍ）で処理した。得られた溶液を０．５時間攪拌した後、真空下で濃縮し、残渣を得、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５μｍ、１９ｍｍ×１５０ｍｍ；移動相、Ａ：水（１０ｍｍｏｌＮＨ_４ＨＣＯ_３を含有する）及びＢ：ＭｅＣＮ（７分間にわたって、１８％から最大で３８％）；流量：３０ｍＬ／分；検出器：２５４＆２２０ｎｍ）で精製し、Ｎ−［２−（４−［３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−２，５−ジフルオロフェニル）エチル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミドを白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．６６（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０１−６．９６（ｍ，１Ｈ），６．６６（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．５９（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．６３−３．５６（ｍ，４Ｈ），３．２３-３．２０（ｍ，２Ｈ），２．９１-２．８７（ｍ，４Ｈ），２．０２−１．９７（ｍ，２Ｈ），１．９３−１．８４（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（ＥＳ、ｍ／ｚ）：４４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

表１の化合物は、実施例１−１に記載の方法を用いて調製することができる。

実施例２−１及び２−２．Ｎ−［（２Ｓ）−２−［２，５−ジフルオロ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］プロピル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド及びＮ−［（２Ｒ）−２−［２，５−ジフルオロ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］プロピル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド

ステップ１．４−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
トルエン（１００ｍＬ）中の１，４−ジブロモ−２，５−ジフルオロベンゼン（２．９７ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．８６ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３．ＣＨＣｌ_３（０．５１８ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）、ＸａｎｔＰｈｏｓ（０．５７９ｇ、１．００ｍｍｏｌ）、及びｔ−ＢｕＯＮａ（１．９２ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素下で、７０℃で１時間攪拌した。室温（２５℃）に冷却後、得られた混合物をＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１００〜１／６の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを淡黄色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３７７［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ２．４−（４−アセチル−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
トルエン（１００ｍＬ）中の４−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．３０ｇ、６．１０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（１．２３ｇ、１．６８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（３．７１ｍＬ、２２．４ｍｍｏｌ）、及びトリブチル（１−エトキシエテニル）スタンナン（１．２３ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で、８０℃で１８時間攪拌した。室温（２５℃）に冷却後、得られた混合物をＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１００〜１／２の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−（４−アセチル−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黄色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３４１［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ３．４−［４−（１−シアノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ｔｅｒｔ−ブタノール（２０ｍＬ）及びエチレングリコールジメチルエーテル（２０ｍＬ）中の４−（４−アセチル−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．７０ｇ、４．９９ｍｍｏｌ）、ｔ−ＢｕＯＫ（１．４０ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）及びＴＯＳＭＩＣ（１．４６ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）の溶液を９０℃で１８時間攪拌した。室温（２５℃）に冷却後、得られた混合物をＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１００〜１／５の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−［４−（１−シアノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黄色油として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３５２［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ４．４−［４−（１−アミノプロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
メタノール（２０ｍＬ）中のＮＨ_３（７Ｍ）の溶液を、メタノール（２０ｍＬ）中の４−［４−（１−シアノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８００ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この溶液を窒素下に置き、これに、ラニーニッケル（湿）（８００ｍｇ）を加えた。得られた混合物を、水素雰囲気（バルーン）下で、２５℃で２時間攪拌した。固体をセライト上で濾過によって除去し、濾液を真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０／１ジクロロメタン／メタノールで溶出）で精製し、４−［４−（１−アミノプロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黄色油として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３５６［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ５．（Ｓ）−４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル、及び（Ｒ）−４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の４−［４−（１−アミノプロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１５０ｇ、０．４２０ｍｍｏｌ）、１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸（上で記載した合成；０．０８０ｇ、０．４２０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（０．０９７ｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．０６８ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（０．２１０ｍＬ、１．２６ｍＭｏｌ）の溶液を２５℃で１８時間攪拌した。得られた混合物をＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルのラセミ混合物を得た。ラセミ生成物を、キラル分取ＨＰＬＣ（カラム、キラルＡＲＴセルロース−ＳＢ、２×２５ｃｍ、５ｕｍ；移動相、Ａ：ヘキサン、及びＢ：ＥｔＯＨ（３０分間で３０％保持）；流量：２０ｍＬ／分；検出器：２２０／２５４ｎｍ；ＲＴ１：１０．２８分間；ＲＴ２：１２．２６分間）によって、その個々のエナンチオマーに分離した。第１の溶出異性体による分画（ＲＴ_１：１０．２８分）を収集し、真空下で濃縮し、（Ｓ）−４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを白色油として得た。第２の溶出異性体による分画（ＲＴ_１：１２．２６分）を収集し、真空下で濃縮し、（Ｒ）−４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを白色油として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：５２８［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ６．Ｎ−［（２Ｓ）−２−［２，５−ジフルオロ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］プロピル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド
ジクロロメタン（４ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０５０ｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）の溶液を２５℃で３０分間攪拌した。得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、ＤＣＭ（５ｍＬ）中に取り込んだ。ｐＨ値を、ＭｅＯＨ中のＮＨ_３（７Ｍ）の溶液で８に調整し、得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５μｍ、１９ｍｍ×１５０ｍｍ；移動相、Ａ：水（１０ｍｍｏｌＮＨ_４ＨＣＯ_３を含有する）及びＢ：ＭｅＣＮ（７分間にわたって、３０％から最大で４７％）；流量：２０ｍＬ／分；検出器：２５４＆２２０ｎｍ）で精製し、Ｎ−［（２Ｓ）−２−［２，５−ジフルオロ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］プロピル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミドを黄色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．６０（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，６．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．５２（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），６．０７（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３８−４．３３（ｍ，２Ｈ），３．８４-３．７７（ｍ，１Ｈ），３．５４−３．４７（ｍ，１Ｈ），３．４０−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．０７−３．０５（ｍ，８Ｈ），１．４８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：４２８［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ７．Ｎ−［（２Ｒ）−２−［２，５−ジフルオロ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］プロピル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド
ジクロロメタン（４ｍＬ）中の（Ｒ）−４−（４−（１−（１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）プロパン−２−イル）−２，５−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０５０ｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）の溶液を２５℃で３０分間攪拌した。得られた混合物を真空下で溶液に濃縮し、これをＤＣＭ（５ｍＬ）で希釈した。溶液のｐＨ値を、ＭｅＯＨ中のＮＨ_３（７Ｍ）の溶液で８に調整した。得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５μｍ、１９ｍｍ×１５０ｍｍ；移動相、Ａ：水（１０ｍｍｏｌＮＨ_４ＨＣＯ_３を含有する）及びＢ：ＭｅＣＮ（７分間にわたって、３０％から最大で４７％）；流量：２０ｍＬ／分；検出器：２５４＆２２０ｎｍ）で精製し、Ｎ−［（２Ｒ）−２−［２，５−ジフルオロ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］プロピル］−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミドを黄色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．６０（ｓ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄｄ，Ｊ＝１３．２、６．８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．５７（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ），３．６３-３．６０（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．４３（ｍ，２Ｈ），３．０４−３．０２（ｍ，８Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．３０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：４２８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

表２の化合物は、実施例２−１及び２−２に記載の方法を用いて調製することができる。

実施例３−１．３−クロロ−１−エチル−Ｎ−［２−［４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］エチル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド

ステップ１．１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中の１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（３．００ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）の０℃の攪拌溶液に、水素化ナトリウム（２．０４ｇ、５１．１ｍｍｏｌ、６０％分散）を加えた。得られた溶液を０℃で１時間攪拌した。その後、ヨードエタン（２．７３ｍＬ、３４．１ｍｍｏｌ）を０℃で加え、得られた溶液を室温（２５℃）で１０時間攪拌した。反応物を水（１０ｍＬ）で慎重に急冷した。０．５時間攪拌後、溶液のｐＨ値を塩酸（３Ｎ）で７〜８に調整した。得られた混合物を酢酸エチル（６×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮し、１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：１９１［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ２．３−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸（１９０ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）及びＮＣＳ（１４７ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）の溶液を２０℃で１８時間攪拌した。得られた溶液を３０ｍＬのＨ_２Ｏで希釈した後、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、３−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸を淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：２２５、２２７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ステップ３．４−［４−（シアノメチル）フェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
２−（４−ブロモフェニル）アセトニトリル（５．００ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７．１６ｇ、３８．５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（１．１５ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）、ＸＰｈｏｓ（４．８９ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（２５．１ｇ、７６．９ｍｍｏｌ）及びトルエン（１００ｍＬ）を窒素雰囲気下で組み合わせた。得られた溶液を１００℃で１８時間攪拌した。２０℃に冷却後、固体を濾過によって除去し、得られた濾液を真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／２の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−［４−（シアノメチル）フェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黄色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３０２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ステップ４．４−［４−（２−アミノエチル）フェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ＢＨ_３（２０ｍＬ、ＴＨＦ中で１Ｍ）の溶液を、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の４−［４−（シアノメチル）フェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．８０ｇ、５．９８ｍｍｏｌ）の窒素下の攪拌溶液に加えた。得られた溶液を２０℃で２時間攪拌した後、メタノールを加えて急冷した。得られた溶液を８０℃で２時間攪拌した。２０℃に冷却後、反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−［４−（２−アミノエチル）フェニル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黒色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３０６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ステップ５．４−（４−（２−（３−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）エチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
３−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸（１００ｍｇ、０．４４４ｍｍｏｌ）、４−（４−（２−アミノエチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１６３ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１１０ｍｇ、０．５７０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７３．０ｍｇ、０．５４０ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（０．１５０ｍＬ、０．８９０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に組み合わせて、２０℃で１８時間攪拌した。得られた溶液をＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮し、残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、４−（４−（２−（３−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）エチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：５１２、５１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ステップ６．３−クロロ−１−エチル−Ｎ−［２−［４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］エチル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド
ジクロロメタン（４ｍＬ）中の４−（４−（２−（３−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミド）エチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８０．０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）、及びトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）の溶液を２０℃で３０分間攪拌した。得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これを分取ＨＰＬＣ（カラム名：ＸＢｒｉｄｇｅ分取Ｃ１８ＯＢＤカラム、１５０ｍｍ＊１９ｍｍ、５ｕｍ；移動相、Ａ：水（１０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ_４ＨＣＯ_３を含有する）及びＢ：ＭｅＣＮ（８分間にわたって、２１％から最大で４６％）；検出器：ＵＶ２２０＆２５４ｎｍ）で精製し、３−クロロ−１−エチル−Ｎ−［２−［４−（ピペラジン−１−イル）フェニル］エチル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボキサミドを白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，３００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．７７（ｓ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．１３−３．１１（ｍ，４Ｈ），３．０３−３．００（ｍ，４Ｈ），２．８９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：４１２、４１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

表３の化合物は、実施例３−１に記載の方法を用いて調製することができる。

実施例４−１：Ｎ−［２−（４−［３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−２，５−ジフルオロフェニル）エチル］−７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボキサミド

ステップ１．３−クロロ−７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中の３−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン（０．３００ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、水素化ナトリウム（０．１９７ｇ、４．９２ｍｍｏｌ；６０％分散）を０℃で加えた。反応混合物を０℃で３０分間攪拌した。これに、ヨードエタン（１．８８ｍＬ、２．３５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を２５℃で２時間攪拌した。その後、反応物を、ＮＨ_４Ｃｌ（飽和；２０ｍＬ）を加えて急冷した後、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、３−クロロ−７−７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジンを黄色油として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：１８２，１８４［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ２．７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボン酸メチル
５０ｍＬの圧力反応器に、３−クロロ−７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン（０．１１０ｇ、０．６０４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（０．０４４ｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１ｍＬ）、及びメタノール（２０ｍＬ）の混合物を加えた。得られた溶液を、ＣＯ雰囲気（５０ａｔｍ）下で、油浴で、１２０℃で１４時間攪拌した。２５℃に冷却後、得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／２０−１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボン酸メチルを黄色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：２０６［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ３．７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボン酸
水（５ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（０．０９８ｇ、２．４５ｍｍｏｌ）の溶液を、メタノール（５ｍＬ）中の７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボン酸メチル（０．１００ｇ、０．４８８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。得られた溶液を２５℃で１８時間攪拌した。溶液のｐＨ値を塩酸（１Ｎ）で６に調整した後、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０／１のジクロロメタン／メタノールで溶出）で精製し、７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボン酸を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：１９２［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ４．３−［４−（２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］エチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
３−（４−ブロモ−２，５−ジフルオロフェニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４．０ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）、ベンジル（２−（トリフルオロ−λ４−ボラネイル）エチル）カルバミン酸、カリウム塩（１０．９ｇ、３８．２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（２．５５ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（３．２５ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（２２．７ｇ、６９．７ｍｍｏｌ）、トルエン（５００ｍＬ）、及び水（１００ｍＬ）の窒素下の混合物を１００℃で３時間攪拌した。２５℃に冷却後、得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：５の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、３−［４−（２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］エチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを黄色油として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：５０２［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ５．３−［４−（２−アミノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
酢酸エチル（５００ｍＬ）中の３−［４−（２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］エチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１２．０ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）及びパラジウム炭素（１２．０ｇ、１０％）の混合物を、水素雰囲気（バルーン）下で、２０℃で１時間攪拌した。固体をセライト上で濾過によって除去し、濾液を真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出）で精製し、３−［４−（２−アミノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：３６８［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ６．３−［４−［２−（［７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−イル］ホルムアミド）エチル］−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボン酸（０．３０ｇ、０．１５９ｍｍｏｌ）、３−［４−（２−アミノエチル）−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０７０ｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（０．０３９ｇ、０．２００ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（０．０２６ｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（０．１３０ｍＬ、０．３２０ｍｍｏｌ）の溶液を２５℃で１８時間攪拌した。得られた混合物をＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濾過し、真空下で残渣に濃縮し、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１／１０〜１／１の酢酸エチル／石油エーテルで溶出）で精製し、３−［４−［２−（［７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−イル］ホルムアミド）エチル］−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを白色固体として得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：５４１［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ７．Ｎ−［２−（４−［３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−２，５−ジフルオロフェニル）エチル］−７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボキサミド
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の３−［４−［２−（［７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−イル］ホルムアミド）エチル］−２，５−ジフルオロフェニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０２２ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）の溶液を２０℃で３０分間攪拌した。得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に取り込んだ。ｐＨ値をＭｅＯＨ中のＮＨ_３（７Ｍ）の溶液で８に調整し、得られた混合物を真空下で残渣に濃縮し、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５μｍ、１９ｍｍ×１５０ｍｍ；移動相、Ａ：水（０．０５％ＮＨ_３Ｈ_２Ｏを含有する）及びＢ：ＭｅＣＮ（８分間にわたって、３０％から最大で４５％）；流量：２０ｍＬ／分；検出器：２５４＆２２０ｎｍ）で精製し、Ｎ−［２−（４−［３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−２，５−ジフルオロフェニル）エチル］−７−エチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリダジン−３−カルボキサミドを白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，３００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．４３（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０１−６．９４（ｍ，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），６．６６−６．５９（ｍ，１Ｈ），４．５４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．７０−３．６４（ｍ，２Ｈ），３．５６−３．５３（ｍ，２Ｈ），３．２９− ３．１７（ｍ，２Ｈ），２．９３−２．８４（ｍ，４Ｈ），２．０４−１．９６（ｍ，２Ｈ），１．８７−１．７８（ｍ，２Ｈ），１．５８−１．４６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（ＥＳ，ｍ／ｚ）：４４１［Ｍ＋Ｈ］^＋

表４の化合物は、実施例２−１、２−２、及び４−１に記載の方法を用いて調製することができる。

本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
式（Ｉ）の化合物：

または、その薬学的に許容され得る形態であって、
式中：
Ｘは、ＮまたはＣ（Ｒ’）から選択され；
Ｒ’は、水素、重水素、及びＣＨ _３から選択され；
Ｙは、Ｃ（Ｒ）であり；
Ｒは、水素、ＮＨ _２、及びＣ１−Ｃ４アルキル基から選択され；
Ｒ _１は、Ｒｘ、水素、Ｃ１−Ｃ５直鎖及びＣ３−Ｃ５分枝アルキル基から選択され、式中、前記アルキル基は、１つ以上のＲｘで、任意選択で置換され；
Ｒｘは、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５生化学分析において活性を呈する小親油性及び／または電子求引性基から選択され、
Ｒ _２は、水素及びハロゲンから選択され；
Ｒ _３、Ｒ _４、及びＲ _４’ は各々独立して、水素、及びＣ１−Ｃ４アルキル基から選択され；
Ｒ _５は、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６は、水素、重水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、及び−ＣＮから選択され；かつ
ｎは、０、１、または２である、前記化合物またはその薬学的に許容され得る前記形態。
（項目２）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素及び重水素から選択され；
Ｒが、ＮＨ _２であり；
Ｒ _１、Ｒ _２、Ｒ _３、Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素であり；
Ｒ _５が、６員の複素環から選択され、
ｎが、０である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素及び重水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ _２及びＲ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素及びＣＨ _３から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６が、水素、重水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたメチル及びエチル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ _２及びＲ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素及びＣＨ _３から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６は、水素及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目５）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素及び重水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ３−Ｃ４分枝アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ _２及びＲ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素及びＣＨ _３から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６が、水素、重水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目６）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ３−Ｃ４分枝アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ _２及びＲ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目７）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、水素であり；
Ｒ _２が、ハロゲンであり；
Ｒ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目８）
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換された水素、及びＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ _２が、ハロゲンであり；
Ｒ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目９）
Ｘが、Ｎであり；
Ｒが、水素であり；
Ｒ _１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換された水素、及びＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ _２が、水素であり；
Ｒ _３が、水素であり；
Ｒ _４、及びＲ _４’ が、水素及びＣＨ _３から選択され；
Ｒ _５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ _６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、項目１に記載の化合物。
（項目１０）
Ｒ _５が、２つの窒素を有する６〜８員の複素環から選択される、項目１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
（項目１１）
前記ハロゲンが、Ｆ及びＣｌから選択される、項目１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
（項目１２）
前記化合物が、
ａ．本明細書の実施例Ａ−１（ａ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜１０マイクロモルのＩＣ _５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物；及び／または
ｂ．本明細書の実施例Ａ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜１０マイクロモルのＩＣ _５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物；及び／または
ｃ．本明細書の実施例Ａ−２に記載されるＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜１０マイクロモルのＩＣ _５０を有するＵＳＰ２５阻害物質化合物
である、項目１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
（項目１３）
前記化合物が、
ａ．本明細書の実施例Ａ−１（ａ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモルのＩＣ _５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物である；及び／または
ｂ．本明細書の実施例Ａ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモルのＩＣ _５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物である；及び／または
項目１２のいずれか１項に記載の化合物。
（項目１４）
本明細書の実施例Ａ−２に記載されるＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモルのＩＣ _５０を有するＵＳＰ２５阻害物質化合物。
（項目１５）
以下から選択される、項目１に記載の化合物：

（項目１６）
項目１〜１５のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物、及び生物学的に許容され得る担体を含む、組成物。

Claims

式（Ｉ）の化合物：

または、その薬学的に許容され得る形態であって、
式中：
Ｘは、ＮまたはＣ（Ｒ’）から選択され；
Ｒ’は、水素、重水素、及びＣＨ_３から選択され；
Ｙは、Ｃ（Ｒ）であり；
Ｒは、水素、ＮＨ_２、及びＣ１−Ｃ４アルキル基から選択され；
Ｒ_１は、Ｒｘ、水素、Ｃ１−Ｃ５直鎖及びＣ３−Ｃ５分枝アルキル基から選択され、式中、前記アルキル基は、１つ以上のＲｘで、任意選択で置換され；
Ｒｘは、ＵＳＰ２８及び／またはＵＳＰ２５生化学分析において活性を呈する小親油性及び／または電子求引性基から選択され、
Ｒ_２は、水素及びハロゲンから選択され；
Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_４’は各々独立して、水素、及びＣ１−Ｃ４アルキル基から選択され；
Ｒ_５は、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６は、水素、重水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、及び−ＣＮから選択され；かつ
ｎは、０、１、または２である、前記化合物またはその薬学的に許容され得る前記形態。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素及び重水素から選択され；
Ｒが、ＮＨ_２であり；
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素であり；
Ｒ_５が、６員の複素環から選択され、
ｎが、０である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素及び重水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ_２及びＲ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素及びＣＨ_３から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６が、水素、重水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたメチル及びエチル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ_２及びＲ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素及びＣＨ_３から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６は、水素及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素及び重水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ３−Ｃ４分枝アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ_２及びＲ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素及びＣＨ_３から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６が、水素、重水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換されたＣ３−Ｃ４分枝アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ_２及びＲ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、水素であり；
Ｒ_２が、ハロゲンであり；
Ｒ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｃ（Ｒ’）であり；
Ｒ’が、水素から選択され；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換された水素、及びＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ_２が、ハロゲンであり；
Ｒ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘが、Ｎであり；
Ｒが、水素であり；
Ｒ_１が、１つから３つのＲｘで、任意選択で置換された水素、及びＣ１−Ｃ３直鎖アルキル基から選択され；
Ｒｘが、ハロゲン、及び−ＯＨから選択され；
Ｒ_２が、水素であり；
Ｒ_３が、水素であり；
Ｒ_４、及びＲ_４’が、水素及びＣＨ_３から選択され；
Ｒ_５が、６〜８員の複素環から選択され；
Ｒ_６が、水素、及びハロゲンから選択され；
ｎが、０、１、または２である、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_５が、２つの窒素を有する６〜８員の複素環から選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
前記ハロゲンが、Ｆ及びＣｌから選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
前記化合物が、
ａ．本明細書の実施例Ａ−１（ａ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜１０マイクロモルのＩＣ_５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物；及び／または
ｂ．本明細書の実施例Ａ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜１０マイクロモルのＩＣ_５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物；及び／または
ｃ．本明細書の実施例Ａ−２に記載されるＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜１０マイクロモルのＩＣ_５０を有するＵＳＰ２５阻害物質化合物
である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
前記化合物が、
ａ．本明細書の実施例Ａ−１（ａ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモルのＩＣ_５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物である；及び／または
ｂ．本明細書の実施例Ａ−１（ｂ）に記載されるＵＳＰ２８のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモルのＩＣ_５０を有するＵＳＰ２８阻害物質化合物である；及び／または
請求項１２のいずれか１項に記載の化合物。
本明細書の実施例Ａ−２に記載されるＵＳＰ２５のユビキチン−ローダミン１１０アッセイにおいて、０．００１〜２マイクロモルのＩＣ_５０を有するＵＳＰ２５阻害物質化合物。
以下から選択される、請求項１に記載の化合物：
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物、及び生物学的に許容され得る担体を含む、組成物。